CN116211764A - 组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用 - Google Patents
组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116211764A CN116211764A CN202211730116.1A CN202211730116A CN116211764A CN 116211764 A CN116211764 A CN 116211764A CN 202211730116 A CN202211730116 A CN 202211730116A CN 116211764 A CN116211764 A CN 116211764A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- product
- liquid
- lactobacillus
- fermentation product
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 143
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 142
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 51
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 claims abstract description 34
- 235000003717 Boswellia sacra Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 240000007551 Boswellia serrata Species 0.000 claims abstract description 34
- 235000012035 Boswellia serrata Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 240000007311 Commiphora myrrha Species 0.000 claims abstract description 34
- 235000006965 Commiphora myrrha Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 239000004863 Frankincense Substances 0.000 claims abstract description 34
- 235000007265 Myrrhis odorata Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 235000001287 Guettarda speciosa Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract description 15
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 83
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 48
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 48
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 41
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 40
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 235000006484 Paeonia officinalis Nutrition 0.000 claims description 31
- 241000125175 Angelica Species 0.000 claims description 29
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 13
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 12
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims description 11
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 9
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- 230000003255 anti-acne Effects 0.000 claims description 7
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 4
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 2
- 241000382455 Angelica sinensis Species 0.000 claims 4
- 244000170916 Paeonia officinalis Species 0.000 claims 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 55
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- 241000186427 Cutibacterium acnes Species 0.000 abstract description 14
- 229940055019 propionibacterium acne Drugs 0.000 abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 244000061520 Angelica archangelica Species 0.000 abstract 1
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 60
- 241000736199 Paeonia Species 0.000 description 28
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 21
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 17
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 17
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 16
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 11
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 11
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 9
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 description 8
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 8
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 8
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 8
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 6
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 239000000686 essence Substances 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- -1 makeup removers Substances 0.000 description 5
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 5
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 5
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 5
- 239000007222 ypd medium Substances 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 3
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 3
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 3
- 241000186869 Lactobacillus salivarius Species 0.000 description 3
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 3
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 2
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 2
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 2
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 2
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 2
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 2
- VOZKAJLKRJDJLL-UHFFFAOYSA-N 2,4-diaminotoluene Chemical compound CC1=CC=C(N)C=C1N VOZKAJLKRJDJLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 208000035985 Body Odor Diseases 0.000 description 1
- 229910001369 Brass Inorganic materials 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 206010040904 Skin odour abnormal Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 239000010951 brass Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/10—Anti-acne agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
- A61Q17/005—Antimicrobial preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/008—Preparations for oily skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
- A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
本发明涉及化妆品技术领域，尤其涉及组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用。本发明将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药和菌种制成组合物，并对不同联合发酵方法对中药组合物进行发酵后的效果进行了研究，结果表明，植物乳杆菌和酵母菌的发酵，显著促进了中药组合物中护肤功效物质的释放，显著提升了其在护肤方面的功效，其所得的复合发酵液具有抑油、抑炎、抑制痤疮丙酸杆菌和抗氧化的功效。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，尤其涉及组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用。
背景技术
我国中药资源丰富，中药中富含氨基酸、微量元素等营养成分，还含有多糖、黄铜、皂苷、挥发油、有机酸和生物碱等有效活性成分。传统中药的使用方法，一般通过简单的煎煮后服用，而剩下的药渣则丢弃，这不仅造成浪费而且还无法充分提取出中药的有效成分，导致无法充分发挥其药用价值。一般中药有效成分的提取方法主要有3种，一种是溶剂提取法，主要以有机溶剂作为提取剂；一种是水蒸气蒸馏法，利用100℃以上的蒸汽，达到提取的目的；第二种则是升华法，固体中药直接加热后，其有效成分气化后冷凝收集获得，但这2种提取方法的操作步骤较为繁琐，且无形中又增加了许多工艺步骤及成本，所以寻找一种高效的中药提取及能有效。中药发酵是炮制中药的另一种重要方法，其利用益生菌的生长代谢过程中产生的酶类与有机酸等，对中药进行炮制。微生物在代谢过程中会产生多种胞外酶,如纤维素酶、蛋白酶、果胶酶等，能够将中草药植物细胞的细胞壁分解,使细胞破裂,生物活性成分大量溶出,并能将许多人体不能吸收利用的大分子有效活性物质会被分解成小分子活性物质,且益生菌转化中药对中药活性成分的提取作用温和,能够最大程度保留中药天然活性成分,而且还会产生新的有效活性成分,提高中药有效成分的提取率，提高中药疗效，同时微生物也能分解中药中的某些有毒成分，从而降低其毒副作用，使用更安全。
微生物种类繁多，且产生的酶体系各不相同，微生物代谢利用的物质也不相同，并非所有的菌种都适合发酵，并非所有中药都适合发酵，大部分中药的药效在发酵后没有明显改变，而少数中药经发酵后其药效却显著下降，所以根据不同中药选择合适的发酵菌种，使发酵后中药药效增强、有效成分析出率提高、毒副作用降低、产生新的活性成分，使药物利用率达到最大，需要大量的试验研究论证。同时，由于单一的中药含有的有效活性成分不足以满足皮肤对各种营养成分的需求，而采用多种中药复配对发酵菌种要求也更高，如何将复配的中药能协同发挥更好的功效具有广阔的应用前景和开发价值。如金银花、乳香、没药、当归、赤芍药等作为传统的药材及食品已有悠久的使用传统，其中的一种成分单独发酵或与其他组配进行发酵均有少量研究，同时这些中药的组配后的发酵产品在护肤方面的功效，仍未得到有效的开发，哪些特定益生菌或哪些特定中药组合物能够发挥更好的美肤效果是不明确的。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用。
本发明提供的组合物，包括金银花、乳香、没药、当归、赤芍药和菌种；其中，所述菌种包括酿酒酵母菌和乳杆菌，其中所述乳杆菌能够产生纤维素酶。
本发明提供的组合物由中药和菌种两部分组成，其中各部分可以混合存在，也可以各自独立存在。其中各部分的存在形式可以是液体或固体，例如，可以为溶液、提取液或粉末，本发明对此亦不做限定。
前期实验表明，采用金银花、乳香、没药、当归和赤芍药进行配伍，各药味相互配合，相互协调，共同发挥良好的抑油、抗痤疮、抗氧化和/或抗炎的效果，各组分缺一不可，且在特定的配比下，能够发挥更显著的效果。本发明所述组合物中，所述金银花、乳香、没药、当归和赤芍药的质量比为(1～5):(0.5～2):(0.5～2):(1～3):(1～3)。一些实施例中，所述金银花、乳香、没药、当归和赤芍药的质量比为5:1:1:3:3，或为1:2:2:3:3，或为4:2:1:2:2，或为5:1:2:2:3，或为0.5:3:2:2:3。其中，当所述金银花、乳香、没药、当归和赤芍药的质量比为5:1:1:3:3或为1:2:2:3:3时，所得发酵产物的功效最佳，显著优于其他比例下所得效果。
本发明所述的菌种中，两个菌种可以作为复合菌种存在，也可以相互独立存在。其可以为菌粉、菌悬液或者冻存菌种，本发明对此不做限定。本发明中，所述酿酒酵母为BNCC337309；本发明中，所述乳杆菌为植物乳杆菌5b4m2。
进一步的，本发明还提供了一种发酵产物，其由如前所述的组合物经发酵制得。
本发明所述发酵产物的制备方法包括，将中药组分经过提取获得提取物后，再以菌种进行发酵。
其中，中药组分中金银花、乳香、没药、当归、赤芍药可分别进行提取后分别进行乳杆菌和酵母菌的的发酵，然后合并获得发酵产物；也可以将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药中至少两者合并提取，再分别进行乳杆菌和酵母菌的发酵；或者将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药合并提取后再分别进行乳杆菌和酵母菌的发酵。或者中药组分中金银花、乳香、没药、当归、赤芍药可分别进行提取后，以乳杆菌和酵母菌共发酵，或者将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药中至少两者合并提取，然后以乳杆菌和酵母菌共发酵或者将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药合并提取后再以乳杆菌和酵母菌共发酵。本发明中对具体的发酵的顺序不做限定。作为优选，发酵产物的制备包括如下三种方法：
一些实施例中，所述发酵产物的制备方法包括：
将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药粉碎后，以水溶解，调节pH值为5.0～6.0，经灭菌制得待发酵液；
将所述酿酒酵母的活化种子液与待发酵液混合，密闭条件下32～37℃熟化3～5h制得第一产物；
将所述乳杆菌的活化种子液与待发酵液混合，密闭条件下32～37℃熟化3～5h制得第二产物；
将第一产物与第二产物混合，密闭条件下32～37℃熟化3～5h制得发酵产物。
在此实施例中，所述酿酒酵母活化种子液的制备包括将酿酒酵母接种至YPD培养基进行活化至菌含量为107～108cfu/ml。所述乳杆菌种子液的制备包括将乳杆菌接种至MRS培养基进行活化至菌含量为菌含量为109～1010cfu/ml。所述乳杆菌活化种子液与待发酵液的体积比为1：(1～10)；所述酿酒酵母活化种子液与待发酵液的体积比为1：(1～10)。所述第一产物与第二产物为等体积混合。
另一些实施例中，所述发酵产物的制备方法包括：
将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药粉碎后，以水溶解，调节pH值为5.0～6.0，经灭菌制得待发酵液；
在所述待发酵液中加入碳源A和氮源A后，接种乳杆菌，35～37℃发酵24～32h，制得产物A；
在所述待发酵液中加入碳源B和氮源B后，接种酿酒酵母，25～28℃发酵18～24h，制得产物B；
将产物A与产物B混合制得发酵产物。
在此实施例中，接种乳杆菌的接种量为5％，接种酵母菌的接种量为8％，产物A与产物B为等体积混合。
另一些实施例中，所述发酵产物的制备方法包括：
将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药粉碎后，以水溶解，调节pH值为5.0～6.0，经灭菌制得待发酵液；
在所述待发酵液中加入碳源C和氮源C后，接种乳杆菌，35～37℃发酵24～32h，灭活后加入碳源D和氮源D，再接种酿酒酵母，25～28℃发酵18～24h，制得发酵产物。
在此实施例中，接种乳杆菌的接种量为5％，接种酵母菌的接种量为8％。
本发明中，将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药粉碎值粒度为100～200目作为中药粉末。每7.8～13g中药粉末以100mL水制备发酵液。所述制备的方法包括浸提、回流萃取、煎煮或蒸馏。在本发明中，中药经超微粉碎后，以水溶解制备待发酵液。所述调节pH值采用柠檬酸，调节pH之后，还包括巴氏灭菌的步骤。所述巴氏灭菌的条件包括：65℃恒温水浴30min。
本发明中，所述氮源A、B、C、D独立地选自硫酸铵、酵母提取物、氯化铵；所述碳源A、B、C、D独立地选自葡萄糖、果糖或麦芽糖。其中，碳源的添加量为5wt％～20wt％，氮源的添加量为5wt％～20wt％。各步骤中氮源、碳源的添加量可以相同也可以不同。
以如前所述方法制得发酵产物后，还包括离心、过滤除菌，分离获得上清液的步骤。进一步的，所述上清液还经过稀释和/或冻干。
本发明中，在发酵过程中主要利用的是菌株经自身发酵后形成的丰富的酶系代谢物，对中药组合物进行熟化酶解，酶解过程中保证适宜温度和密闭环境即可，在其酶解过程中，并不需要活菌起作用，不需要保证菌的生长繁殖。前期实验表明，以活菌对中药活性成分进行代谢制备发酵产物也能够获得一定的控油、抗痤疮、抗氧化或抗炎的效果。但效果并不及仅熟化酶解的工艺。并且，联合发酵期间需要选择合适的发酵条件和较长的发酵时间，以保证菌种正常的生长繁殖代谢，条件需要严格控制。而本发明中以种子液进行密闭熟化的方法不仅可简化工艺，还提高了产物的生理活性。
研究发现，两次熟化更有利于发酵产物生理活性的产生，并且发现熟化的时间同，功效具有较大差异，通过调整熟化时间以及熟化条件，本发明获得了具有更优秀的生理活性的发酵产物。
更进一步的，本发明还提供了如前所述的组合物、发酵产物、所述制备方法制得的发酵产物，在制备化妆品中的应用。
以本发明所述组合物、发酵产物制得的化妆品具有抑油、抗痤疮、抗氧化和/或抗炎的功效。本发明中，所述抗痤疮包括抑制痤疮丙酸杆菌。所述抗氧化包括抗ROS和清除DPPH。所述抗炎包括抑制炎症因子的水平。所述炎症因子为白介素。具体为IL-1β和IL-8。
本发明还提供了一种抑油、抗痤疮、抗氧化和/或抗炎的化妆品，其包括如前所述的组合物、发酵产物、所述制备方法制得的发酵产物。
本发明所述化妆品是指以涂抹、喷洒或者其他类似方法，散布于人体表面的任何部位，如皮肤、毛发、指趾甲、唇齿等，以达到清洁、保养、美容、修饰和改变外观，或者修正人体气味，保持良好状态为目的的化学工业品或精细化工产品。其包括洗面乳、浴液、洗发液、化妆水、香水、洁肤水、卸妆液、精华液、原液、蜜类、奶类、护发乳、精华乳、润面霜、粉底霜、洗发膏、遮瑕膏、焗发膏、精华霜、妆前霜、香粉、爽身粉、散粉、洁肤粉、蜜粉、粉饼、腮红粉、口红、发蜡或卸妆油、润肤油、润发油、精华油、面膜、眼膜、唇膜或手膜。
本发明还同了一种抑油、抗痤疮、抗氧化和/或抗炎的方法，其包括给予本发明所述的化妆品。所述给予的方式包括但不限于涂抹、喷洒、贴敷。
本发明将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药和菌种制成组合物，并对不同联合发酵方法对中药组合物进行发酵后的效果进行了研究，结果表明，植物乳杆菌和酵母菌的发酵，显著促进了中药组合物中护肤功效物质的释放，显著提升了其在护肤方面的功效，其所得的复合发酵液具有抑油、抑炎、抑制痤疮丙酸杆菌和抗氧化的功效。
附图说明
图1示各组油脂相对分泌率；
图2示各组对痤疮丙酸杆菌的抑制率；
图3示各组ROS水平；
图4示各组DPPH抑制率；
图5示各组IL-1β相对抑制率；
图6示各组IL-8相对抑制率。
具体实施方式
本发明提供了组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明中，中药组合物的原料包括金银花、乳香、没药、当归、赤芍药，原料之间搭配组合后功效可以协同增效，同时其含有的蛋白、淀粉、微量元素等，也可以为微生物的发酵提供原料。通过利用本实验室自身的植物乳杆菌和外购的酿酒酵母对其中药组合物进行联合发酵，利用微生物在生长过程中产生的多种类的功效物质以及各种活性酶，达到促进中药组合物不同功效成分的含量增加，从而提升其整体的护肤功效。其中，植物乳杆菌和酿酒酵母均可通过购买获得，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)5b4m2于2022年6月14日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M2022885，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。其他乳杆菌，如乳酸乳球菌cb18m1、嗜酸乳杆菌5B5Y5、植物乳杆菌cb41m2、唾液乳杆菌cb13m2皆来自广东粤港澳大湾区国家纳米科技创新研究院。
酿酒酵母可通过商业途径获得，酿酒酵母的菌种编号为BNCC337309，购自北京北纳创联生物技术研究院。
本发明提供的中药组合物的复合发酵滤液的制备方法包括，以金银花、乳香、没药、当归、赤芍药为中药组合物配制待发酵液。
所述中药待发酵液的制备包括：中药组合物的配比为金银花：乳香：没药：当归；赤芍药＝1～5:0.5～2:0.5～2:1～3:1～3，将其粉碎后过100-200目筛，用去离子水制备中药待发酵液，按重量计算，在100份去离子水中，加入5-15份中药组合物，用柠檬酸将待发酵液的pH调节至5.0-6.0，待发酵液采用65℃恒温水浴30min进行巴氏灭菌，发酵菌株选自植物乳杆菌5b4m2和酿酒酵母，经过优化的发酵步骤如下：
1)乳杆菌初培养物：将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至MRS培养基中进行发酵培养，25℃-37℃培养24-32h，得到乳杆菌初培养物，菌含量为109～1010cfu/ml。
2)酿酒酵母初培养物：制备酿酒酵母的种子液，将种子液以8％的接种量接种至YPD培养基中进行发酵培养，28℃培养18-24h，得到酿酒酵母初培养物，菌含量为107～108cfu/ml。
3)熟化：发酵完成后，进行熟化处理，将乳杆菌初培养物与中药待发酵液1：1～10混合在密闭状态下32℃-37℃温度熟化3-5h，得到第一产物，将酿酒酵母初培养物与中药待发酵液1：1～10在密闭状态下32℃-37℃温度熟化3-5h，得到第二产物，将第一发酵产物与第二发酵产物等体积混合后继续密闭状态下32℃-37℃温度熟化3-5h。
4)过滤：经离心、过滤除菌得到复合发酵的上清液。
复合发酵滤液可应用于制备皮肤外用制剂，用作抑菌、抑油、抗氧化、抑炎等活性成分，其用量为1％-10％。可添加进洁面霜、乳液、霜膏、精华液、化妆水(如柔肤水、爽肤水)、面膜等类型的日化品中。
本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
一、乳酸菌的筛选
用纤维素培养基筛选平板筛选产纤维素酶活性高的菌株，进用接种针将分离到的菌株活化后点种于纤维素筛选培养基平板上，30℃恒温倒置培养2d。用0.1％刚果红染色液浸染再用1mol/L NaC1溶液脱色5min。若菌株产纤维素酶，则会在菌落周围出现清晰的透明圈。
表1：产纤维素酶结果
| 菌株编号 | 菌株名 | 纤维素酶 |
| 5B5Y5 | 嗜酸乳杆菌 | + |
| cb41m2 | 植物乳杆菌 | + |
| cb13m2 | 唾液乳杆菌 | + |
| 5b4m2 | 植物乳杆菌 | + |
| cb18m1 | 乳酸乳球菌 | - |
对菌株进行产纤维素酶的筛选，结果如表1，显示嗜酸乳杆菌5B5Y5、植物乳杆菌cb41m2、唾液乳杆菌cb13m2和植物乳杆菌5b4m2均可产纤维素酶。
二、发酵步骤
1、乳酸菌和酵母菌种活化，制备种子液：在无菌环境中使用接种环从植物乳杆菌的甘油冻存管中挑选菌种，划线接种于MRS固体斜面培养，观察平板上菌落形态，挑取平板上的单菌接种至MRS液体培养基中，摇瓶培养制备种子液，37℃培养24h；无菌环境中使用接种环从酿酒酵母的甘油冻存管中挑选菌种，划线接种于YPD固体斜面培养，观察平板上菌落形态，挑取平板上的单菌接种至YPD液体培养基中，摇瓶培养制备种子液，28℃培养24h。(YPD培养基：葡萄糖2％，胰蛋白胨2％，酵母粉1％，初始pH 6.5。MRS培养基：胰蛋白胨1％，K2HPO4 0.2％，葡萄糖2％，乙酸钠0.5％，柠檬酸三胺0.2％，牛肉膏1％，酵母粉0.5％，MgSO4·7H2O 0.04％，吐温-80 0.1mL，MnSO4·H2O 0.005％，初始pH为6.4。)
2、待发酵液的制备：中药组合物的配比为金银花：乳香：没药：当归；赤芍药＝(1～5):(0.5～2):(0.5～2):(1～3):(1～3)，将其粉碎后过100-200目筛，用去离子水溶解制备中药待发酵液，用柠檬酸将待发酵液的pH调节至5.0-6.0，待发酵液采用65℃恒温水浴30min进行巴氏灭菌。
3、发酵：
发酵方法1：分别发酵后再分别联合中药发酵，将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至MRS培养基中进行发酵培养，35-37℃培养24-32h，得到乳杆菌初培养物，菌含量为109～1010cfu/ml。同时将酿酒酵母种子液以8％的接种量接种至YPD培养基中进行发酵培养，25-28℃培养18-24h，得到酿酒酵母初培养物，菌含量为107～108cfu/ml，将乳杆菌初培养物和酿酒酵母初培养物分别与待发酵液1：(1～10)在密闭状态下32℃-37℃温度熟化3-5h，分别得到第一产物和第二产物，最后将第一产物与第二产物等体积混合后在密闭状态下32℃-37℃温度继续熟化3-5h。
发酵方法2：分别中药发酵，将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至待发酵液(待发酵液中添加了5wt％～20wt％葡萄糖，5wt％～20wt％酵母提取物)，35-37℃培养24-32h。将酿酒酵母种子液以8％的接种量接种至待发酵液(待发酵液中添加了5wt％～20wt％葡萄糖，5wt％～20wt％硫酸铵)，25-28℃培养18-24h。将两次分开发酵的发酵产物等体积混合。
发酵方法3：分步发酵，将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至待发酵液(待发酵液中添加了氮源和碳源，5wt％～20wt％葡萄糖，5wt％～20wt％酵母提取物)，35-37℃培养24-32h，发酵结束后热灭活。再次以8％的接种量接种酿酒酵母种子液，并加入待发酵液中添加了5wt％～20wt％葡萄糖，5wt％～20wt％硫酸铵，25-28℃培养18-24h。
4、经离心、过滤除菌得到复合发酵的上清液。
三、中药组分筛选
按照表2组方，参照上述方法进行发酵，采用发酵方法1，然后对所得产物的油脂抑制情况和抗氧化水平进行检测。
表2
结果表明，金银花：乳香：没药：当归：赤芍药＝3g:0.6g:0.6g:1.8g:1.8g的组合具有最强的抗氧化能力和抑制油脂分泌的效果。
实施例2：
待发酵液中的中药组合物配比为金银花：乳香：没药：当归；赤芍药＝3g:0.6g:0.6g:1.8g:1.8g)/100ml。
采用实施例1中的发酵方法1进行发酵，具体为：将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至100ml的MRS培养基中进行发酵培养，37℃培养24h，得到乳杆菌初培养物，菌含量为2×109cfu/ml，取50ml的乳杆菌初培养物与50ml的待发酵液进行混合后熟化5h，得到第一产物。同时将酿酒酵母种子液以8％的接种量接种至YPD培养基中进行发酵培养，28℃培养18h，得到酿酒酵母初培养物，菌含量为1.0×108cfu/ml，取50ml酿酒酵母初培养物与50ml的待发酵液混合后在密闭状态下37℃熟化5h，得到第二产物。最后将第一产物与第二产物等体积混合在密闭状态下37℃继续第二次熟化3h，经离心、过滤除菌得到复合发酵的上清液，即复合发酵液。
实施例3：
待发酵液中的中药组合物配比为金银花：乳香：没药：当归；赤芍药＝3g:0.6g:0.6g:1.8g:1.8g)/100ml。
采用发酵方法2进行发酵，具体为：将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至100ml的待发酵液液中，并添加氮源和碳源，37℃培养24h。将酿酒酵母种子液以8％的接种量接种至100ml的待发酵液中，并添加氮源和碳源，28℃培养18h，将两次分别发酵的发酵产物各取50ml等体积混合后，经离心、过滤除菌得到复合复合发酵的上清液。
实施例4：
待发酵液中的中药组合物配比为金银花：乳香：没药：当归；赤芍药＝3g:0.6g:0.6g:1.8g:1.8g)/100ml。
采用发酵方法3进行发酵，具体为：将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至100ml的待发酵液(添加氮源和碳源)，37℃培养24h，发酵结束后采用巴氏灭菌进行热灭活，再次向其以8％的接种量接种酿酒酵母种子液，并同时添加氮源和碳源，28℃培养18h，发酵结束后经离心、过滤除菌得到复合发酵的上清液。
实施例5-17
如表3所示，按照与实施例2相同的步骤进行实验，得到各复合发酵液。
表3：
对比例1：
按照实施例1中发酵方法2进行处理，仅添加植物乳杆菌：将植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种至100ml的待发酵液中(金银花：乳香：没药：当归：赤芍药的质量比为3g:0.6g:0.6g:1.8g:1.8g)，并添加氮源和碳源，37℃培养24h。
对比例2：
按照实施例1中发酵方法2进行处理，仅添加酿酒酵母菌：将酿酒酵母种子液以8％的接种量接种至100ml的待发酵液中(金银花：乳香：没药：当归：赤芍药的质量比为3g:0.6g:0.6g:1.8g:1.8g)，并添加氮源和碳源，28℃培养18h。
对比例3：
不添加菌种进行发酵，仅将中药组合物(金银花：乳香：没药：当归：赤芍药的质量比为3g:0.6g:0.6g:1.8g:1.8g)，利用100ml去离子水溶解。
实验测试
通过细胞功效评价
1、抑油细胞试验
方法：SZ95细胞以3×104细胞/孔的密度接种，培养24h后，PBS洗1次，
阴性对照：添加DMEM新鲜培养基；
模型组：添加含0.125％油酸的新鲜培养基；
样本孔：添加含0.125％油酸的新鲜培养基，分别加入各实施例或对比例的发酵上清液至体积分数为10％。；
培养24h，弃上清，进行油红染色液配置与染色处理：
(1)配置油红工作液：1g油红溶于200ml异丙醇中，混匀后搅拌溶解，配成储存液，4度避光保存。油红储存液3：2超纯水配置工作液，静置一会后，滤纸片过滤。
(2)脂肪细胞以PBS洗1次，加入4％甲醛固定5min，弃掉，PBS洗1次。再使用60％的异丙醇处理细胞5min，弃掉。
(3)染色：每孔加入120ul油红工作液，避光处理1小时进行染色。
(4)洗液：染色完后，用真空泵吸去染液，每孔加入200ul 60％异丙醇，处理3min，弃掉。每孔加入200ul 100％异丙醇，避光，摇床孵育5min，使与脂肪结合的油红充分洗涤下来。
(5)转移150ul样本到96孔板中，使用酶标仪在OD500nm测量吸光值。
表4：
| 组别 | 油脂相对分泌率 |
| 对照组 | 0 |
| 模型组 | 100％ |
| 实施例2 | 18.32％ |
| 实施例3 | 35.34％ |
| 实施例4 | 44.19％ |
| 实施例5 | 72.32％ |
| 实施例6 | 81.34％ |
| 实施例7 | 61.18％ |
| 实施例8 | 23.87％ |
| 实施例9 | 15.91％ |
| 实施例10 | 19.15％ |
| 实施例11 | 36.97％ |
| 实施例12 | 43.21％ |
| 实施例13 | 27.29％ |
| 实施例14 | 31.23％ |
| 实施例15 | 57.92％ |
| 实施例16 | 19.31％ |
| 实施例17 | 49.91％ |
| 对比例1 | 49.39％ |
| 对比例2 | 54.11％ |
| 对比例3 | 68.60％ |
从表2和图1可以看出，本方案中的复合发酵液对油脂分泌具有很好的抑制作用，抑制率在72.71％以上，且中药组合物之间具有协同增效作用，当配比不在本方案范围内时，如实施例11，油脂分泌抑制率明显降低，其中，与模型组相比，添加了活性物质的各实施例和对比例的油脂相对分泌率均明显降低，实施例2、3、4是采用不同发酵方法制备的复合发酵液，结果显示发酵方法1的相对油脂分泌率最低，实施例2、5、6、7为采用不同乳酸菌的复合发酵液，结果显示采用植物乳杆菌5b4m2的复合发酵液的相对油脂分泌率最低，实施例2、12、13、14、15为不同后熟化时间，显示随着后熟化时间的延长，油脂相对分泌率先降低后增加，后熟化时间优选3-5h，油脂相对分泌率在37.29％～18.32％，即抑制油脂分泌率在62.71％～81.68％。
2、抑制痤疮丙酸杆菌实验
制备对数生长期的痤疮丙酸杆菌，数量约为1×108cfu/ml～1×109cfu/ml，将培养至对数生长期的病原菌按照10％的接种量，接种至空白培养基中。取培养至对数生长期的痤疮丙酸杆菌菌液，用空白BHI培养基进行稀释，获得含P.ances 105CFU/ml的菌悬液。
制备抑菌体系：制备不同样品浓度的抑菌体系进行分组测试。阴性对照：1000ul菌悬液+400ul PBS/空白培养基(与测试样本所用溶剂相同)；10％浓度复合发酵液：1000ul痤疮丙酸杆菌菌悬液+140ul各实施例或对比例制得的发酵上清液+260ul PBS/空白培养基。将制备好各浓度的抑菌体系放置37℃培养箱培养48h,然后检测每个体系的含菌量。根据QB/T 2738-2012“日化产品抗菌抑菌效果的评价方法”中抑菌型日化产品的抑菌效果检验方法(悬液定量法)计算原料的抑菌率。(备注：抑菌率≥50％～90％，产品有抑菌作用，抑菌率≥90％，产品有较强的抑菌作用。)
表5：
| 组别 | 抑菌率(％) |
| 阴性对照 | 0％ |
| 实施例2 | 100％ |
| 实施例3 | 99.30％ |
| 实施例4 | 97％ |
| 实施例5 | 86.70％ |
| 实施例6 | 74.00％ |
| 实施例7 | 91.30％ |
| 实施例8 | 99％ |
| 实施例9 | 99％ |
| 实施例10 | 100％ |
| 实施例11 | 100％ |
| 实施例12 | 93％ |
| 实施例13 | 97.30％ |
| 实施例14 | 99.90％ |
| 实施例15 | 91.40％ |
| 实施例16 | 99.21％ |
| 实施例17 | 100％ |
| 对比例1 | 85.10％ |
| 对比例2 | 94.50％ |
| 对比例3 | 95％ |
由上表和图2可知，本方案制备的复合发酵液和中药混合液均对痤疮丙酸杆菌具有较强的抑制率。
3、HaCaT角质形成细胞ROS清除测定
细胞：原代人角质细胞HaCaT
材料：DCFH-DA、3％过氧化氢(H2O2)溶液。
刺激条件：过氧化氢(H2O2)诱导角质形成细胞内ROS含量升高，过氧化氢使用浓度为120μM，处理时间1hr。
试验方法：活化的细胞以1×104/孔(200ul)(接种后24h融合度达到45％-60％)接种至96孔板中，接种结束后，放置于CO2培养箱中培养24h±2h。弃掉孔板各孔中的培养基，实验组加入制备的含有5vol％各实施例和对比例发酵上清液的DMEM培养基，空白对照孔和模型孔中加入正常培养基。加样完毕后将孔板放置在CO2培养箱中24h±2h。孵育结束后，不弃液，除空白对照外，其余孔均需进行H2O2诱导，H2O2的诱导时间为1hr，诱导剂量为120μM。弃掉孔中的培养基，用PBS清洗3次后，每孔加入100uL DCFH-DA工作液(采样碧云天活性氧检测试剂盒说明进行)，CO2培养箱孵育30min，孵育结束后，无血清的DMEM清洗各孔内细胞3次，将操作结束后的96孔板，置于荧光酶标仪检测台上，设置入射光波长525nm，激发光波长488nm，读数。
表6：
由上表和图3可知，实施例2、实施例9和实施例10的活性氧自由基ROS清除效果最好，同时，当用不同发酵方法制备复合发酵液，发酵方法1较发酵方法2和发酵方法3具有更好的活性氧自由基ROS清除效果，且其复合发酵液的自由基清除能力优于中药组合物混合液，同时，选择何种菌株会影响中药组合物的抗氧化活性成分的释放，其中选择植物乳杆菌5b4m2和酿酒酵母联合发酵的活性氧自有基ROS清除效果最好，并且后熟化时间在3-5h时，具有更好的ROS自由基清除能力，抗氧化能力强。
4、DPPH清除率
DPPH测试液的配置：取DPPH 4mg溶于约10mL溶剂无水乙醇中，充分振摇，使混合均匀，工作浓度为0.1mM。
A0孔中加入100ul空白MRS和100ul无水乙醇，A1孔中加入100ul无水乙醇溶液和100μL 0.2mmol/L DPPH无水乙醇溶液，取100ul的5vol％各实施例或对比例制备的复合发酵液上清液(5％发酵液+95％)于多孔板的A2孔中，然后向A2中加入100μL0.2mmol/L DPPH无水乙醇溶液，混匀，黑暗环境37℃孵育30min，酶标仪517nm处测量吸光值。
自由基清除率计算方法：(A1-A2)/(A1-A0)×100％
(其中A0为添加了空白MRS加无水乙醇醇的OD值，A1为添加了无水乙醇培养0h后的OD值，A2为加了复合发酵上清液后孵育30min后的OD值)
表7：
由上表和图4可知，实施例2、3、9、10较单独的中药混合液及其他实施例相比具有较好的DPPH自由基清除效果，具有更好的抗氧化效果。
5、抑炎试验
诱导THP-1成炎症细胞：将培养好的痤疮丙酸杆菌菌悬液(菌悬液OD490吸光值为1.3-1.5)1000rpm离心5min，弃上清，再用PBS重悬菌体，离心弃上清，重复3次，去除菌体外的杂质，再用菌悬液原体积的1640培养基重悬菌体，制得痤疮丙酸杆菌工作液；THP-1细胞培养至状态良好，收集THP-1细胞，计数后使用痤疮丙酸杆菌工作液将细胞密度调整为106/mL，铺入48孔板后，诱导12-24h。
活性物质添加：加入5％的复合发酵液，置于二氧化碳培养箱中培养24小时；
模型组：完全培养基+细胞+痤疮丙酸杆菌工作液；实验组：完全培养基+细胞+痤疮丙酸杆菌工作液+复合发酵液；
收集细胞培养上清液：用无菌管收集细胞培养上清，离心机离心10min后收集上清；
ELISA试剂盒检测
(1)标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，标0孔加样品稀释液50μL；。
(2)加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、待测样品孔(各实施例或对比例制得的发酵液上清)。在酶标包被板上待测样品孔中加入样品50μL，加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
(3)加酶：每孔加入酶标试剂100μL，空白孔除外。
(4)温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
(5)配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
(6)洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置60秒后弃去，如此重复5次，拍干。
(7)显色：每孔先加入显色剂A 50μL，再加入显色剂B 50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
(8)终止：每孔加终止液50μL，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
(9)测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)，测定应在加终止液后15分钟以内进行。
表8：
根据上表和和图5～6说明，综合抑炎因子IL-1β和IL-8，实施例2、9、10、16、17与其他实施例与对比例相比具有更好的抑炎效果。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.组合物，其特征在于，包括金银花、乳香、没药、当归、赤芍药和菌种；其中，所述菌种包括酿酒酵母菌和乳杆菌，其中所述乳杆菌能够产生纤维素酶。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述金银花、乳香、没药、当归和赤芍药的质量比为(1～5):(0.5～2):(0.5～2):(1～3):(1～3)。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述酿酒酵母为BNCC337309；所述乳杆菌为植物乳杆菌5b4m2。
4.发酵产物，其特征在于，由权利要求1所述的组合物经发酵制得。
5.权利要求4所述发酵产物的制备方法，其特征在于，包括：
将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药粉碎后，以水溶解，调节pH值为5.0～6.0，经灭菌制得待发酵液；
将所述酿酒酵母的活化种子液与待发酵液混合，密闭条件下32～37℃熟化3～5h制得第一产物；
将所述乳杆菌的活化种子液与待发酵液混合，密闭条件下32～37℃熟化3～5h制得第二产物；
将第一产物与第二产物混合，密闭条件下32～37℃熟化3～5h制得发酵产物。
6.权利要求4所述发酵产物的制备方法，其特征在于，包括：
将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药粉碎后，以水溶解，调节pH值为5.0～6.0，经灭菌制得待发酵液；
在所述待发酵液中加入碳源A和氮源A后，接种乳杆菌，35～37℃发酵24～32h，制得产物A；
在所述待发酵液中加入碳源B和氮源B后，接种酿酒酵母，25～28℃发酵18～24h，制得产物B；
将产物A与产物B混合制得发酵产物。
7.权利要求4所述发酵产物的制备方法，其特征在于，包括：
将金银花、乳香、没药、当归、赤芍药粉碎后，以水溶解，调节pH值为5.0～6.0，经灭菌制得待发酵液；
在所述待发酵液中加入碳源C和氮源C后，接种乳杆菌，35～37℃发酵24～32h，灭活后加入碳源D和氮源D，再接种酿酒酵母，25～28℃发酵18～24h，制得发酵产物。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于，
所述氮源A、B、C、D独立地选自硫酸铵、酵母提取物、氯化铵；
所述碳源A、B、C、D独立地选自葡萄糖、果糖或麦芽糖。
9.权利要求1～3任一项所述的组合物、权利要求4所述的发酵产物、权利要求5～8任一项所述制备方法制得的发酵产物，在制备化妆品中的应用；
所述化妆品具有抑油、抗痤疮、抗氧化和/或抗炎的功效。
10.一种抑油、抗痤疮、抗氧化和/或抗炎的化妆品，其包括权利要求1～3任一项所述的组合物、权利要求4所述的发酵产物、权利要求5～8任一项所述制备方法制得的发酵产物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211730116.1A CN116211764B (zh) | 2022-12-30 | 2022-12-30 | 组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211730116.1A CN116211764B (zh) | 2022-12-30 | 2022-12-30 | 组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116211764A true CN116211764A (zh) | 2023-06-06 |
| CN116211764B CN116211764B (zh) | 2025-01-07 |
Family
ID=86590192
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211730116.1A Active CN116211764B (zh) | 2022-12-30 | 2022-12-30 | 组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116211764B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114480167A (zh) * | 2021-12-23 | 2022-05-13 | 美益添生物医药(武汉)有限公司 | 乳酸乳球菌md-622及其应用 |
| KR102714900B1 (ko) * | 2024-04-09 | 2024-10-11 | 주식회사 서울화장품 | 복사나무수지, 몰약수지 및 유향나무수지의 복합발효추출물을 포함하는 보습 및 진정용 화장료 조성물 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1593610A (zh) * | 2004-07-15 | 2005-03-16 | 李洲平 | 清痘嫩肤软膏 |
| CN103169849A (zh) * | 2013-04-10 | 2013-06-26 | 成都中医药大学 | 一种治疗疮痈肿毒的药物组合物及其制备方法和用途 |
| CN108904376A (zh) * | 2018-08-02 | 2018-11-30 | 广东轻工职业技术学院 | 一种具有控油祛痘功效的化妆品用中药复方发酵液及其制备与应用 |
| WO2021221405A1 (ko) * | 2020-04-27 | 2021-11-04 | 주식회사 더가든오브내추럴솔루션 | 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물 및 이의 제조방법 |
| CN113893310A (zh) * | 2020-07-06 | 2022-01-07 | 安琪纽特股份有限公司 | 一种高山植物发酵组合物及其制备方法和应用 |
-
2022
- 2022-12-30 CN CN202211730116.1A patent/CN116211764B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1593610A (zh) * | 2004-07-15 | 2005-03-16 | 李洲平 | 清痘嫩肤软膏 |
| CN103169849A (zh) * | 2013-04-10 | 2013-06-26 | 成都中医药大学 | 一种治疗疮痈肿毒的药物组合物及其制备方法和用途 |
| CN108904376A (zh) * | 2018-08-02 | 2018-11-30 | 广东轻工职业技术学院 | 一种具有控油祛痘功效的化妆品用中药复方发酵液及其制备与应用 |
| WO2021221405A1 (ko) * | 2020-04-27 | 2021-11-04 | 주식회사 더가든오브내추럴솔루션 | 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물 및 이의 제조방법 |
| CN113893310A (zh) * | 2020-07-06 | 2022-01-07 | 安琪纽特股份有限公司 | 一种高山植物发酵组合物及其制备方法和应用 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114480167A (zh) * | 2021-12-23 | 2022-05-13 | 美益添生物医药(武汉)有限公司 | 乳酸乳球菌md-622及其应用 |
| CN114480167B (zh) * | 2021-12-23 | 2024-01-12 | 美益添生物医药(武汉)有限公司 | 乳酸乳球菌md-622及其应用 |
| KR102714900B1 (ko) * | 2024-04-09 | 2024-10-11 | 주식회사 서울화장품 | 복사나무수지, 몰약수지 및 유향나무수지의 복합발효추출물을 포함하는 보습 및 진정용 화장료 조성물 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116211764B (zh) | 2025-01-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN115105452B (zh) | 一种红茶发酵滤液及其制备方法和应用 | |
| CN102112106B (zh) | 包含经发酵和酶处理的绿豆种子提取物、用于皮肤抗老化的化妆品组合物 | |
| CN115554226B (zh) | 一种多重菌株发酵滤液及其制备方法和应用 | |
| CN103690469B (zh) | 一种含有银杏酵素的护肤液及其制备方法和应用 | |
| KR102119825B1 (ko) | 현미, 녹차 및 포공영 발효 추출물을 포함하는 피부 내 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물 및 이의 제조 방법 | |
| CN114209617B (zh) | 一种酵母发酵的灵芝提取物及其制备方法和用途 | |
| CN110934803B (zh) | 一种具有美白淡斑功能的植物发酵组合物 | |
| CN116211764A (zh) | 组合物及其发酵产物与在制备化妆品中的应用 | |
| CN108096146A (zh) | 具有美白、抗衰老、消炎功效的玫瑰酵素及其在化妆品中的应用 | |
| CN113520942A (zh) | 一种抗氧化、抗衰老的五参发酵物及其制备方法和应用 | |
| CN115554220A (zh) | 一种具有护肤作用的微生物发酵原液及其制备方法与应用 | |
| TWI388343B (zh) | 含有經發酵及酵素作用綠豆萃取液之抗皮膚衰老化妝品成分及其使用方法 | |
| CN114262675A (zh) | 复合菌发酵滤液的制备及其美白功效在化妆品中的应用 | |
| CN105420132A (zh) | 一种酿酒酵母及其在制备皮肤外用剂中的应用 | |
| CN114917175B (zh) | 抗衰老的组合物 | |
| CN106916860A (zh) | 一种食药用菌发酵产物的制备方法及其应用 | |
| CN114317617B (zh) | 具有抗皱功效的三重益生菌发酵复合物制备方法及其应用 | |
| CN105250209A (zh) | 一种深层发酵竹荪菌丝体的制备及其在化妆品中的应用 | |
| CN115678917A (zh) | 一种海带发酵物、含其皮肤外用剂及其制备方法和应用 | |
| KR20160113499A (ko) | 천연 발효발모제 | |
| CN211751169U (zh) | 减脂减重、抗老抗皱功效的芸香科植物发酵液微粒结构 | |
| CN111500642A (zh) | 一种蓝莓发酵原料及其制备方法和应用 | |
| CN118743664A (zh) | 含有贯叶连翘花/叶/茎提取物的组合物及其制备方法 | |
| CN113332192B (zh) | 一种日本紫珠果发酵物及其制备方法和应用 | |
| CN111888293B (zh) | 一种含有玫瑰发酵液的保湿爽肤水及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |