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CN115701984A - 治疗 - Google Patents

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CN115701984A
CN115701984A CN202180036954.6A CN202180036954A CN115701984A CN 115701984 A CN115701984 A CN 115701984A CN 202180036954 A CN202180036954 A CN 202180036954A CN 115701984 A CN115701984 A CN 115701984A
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CN
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niclosamide
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weight
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Application number
CN202180036954.6A
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English (en)
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莫滕·佐默
拉斯穆斯·托夫特凯勒
安妮·卡特琳·托夫特凯勒
马斯·杰林索
菲利普·安德烈斯
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Union Therapeutics AS
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Priority claimed from GBGB2016274.9A external-priority patent/GB202016274D0/en
Priority claimed from GBGB2016289.7A external-priority patent/GB202016289D0/en
Priority claimed from GBGB2103957.3A external-priority patent/GB202103957D0/en
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Abstract

包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和聚乙二醇的可吸入组合物；这些组合物的气雾剂；以及在治疗病毒感染例如呼吸道病毒感染中使用的肺部施用。

Description

治疗
技术领域
本发明涉及包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物，以及它们在治疗病毒感染、特别是肺部病毒感染中的用途。
背景技术
冠状病毒是一组有包膜和非分段的正义RNA病毒，其基因组大小非常大，在大约27至34kb的范围内。感染人类的菌株HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63和HCoV-HKU1通常会引起轻微的自限性呼吸道感染，诸如普通感冒(Fehr等人Coronaviruses:Methods andProtocols[冠状病毒：方法与实验操作],Maier,H.J.；Bickerton,E.；Britton,P.编辑Springer New York:New York,NY[纽约施普林格：纽约州纽约],2015；第1-23页2015；以及Corman等人,Adv.Virus Res.[病毒研究进展],J.编辑Academic Press[学术出版社]:2018；第100卷,第163-188页2018)。然而，已经出现某些高致病性冠状病毒。SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-CoV-2已经引起与高发病率和死亡率相关的严重人类疾病大流行。
缺乏对冠状病毒感染的有效治疗给临床管理带来了巨大挑战，并且凸显了发现对病毒感染(诸如冠状病毒感染)的新治疗的迫切需要。
Wang等人(Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recentlyemerged novel coronavirus(2019-nCoV)in vitro.[瑞德西韦和氯喹在体外有效抑制最近出现的新型冠状病毒(2019-nCoV)]Cell Res[细胞研究].2020,https://doi.org/10.1038/s41422-020-0282-0)筛选了抗病毒药物并且确定硝唑尼特、瑞德西韦和氯喹分别以2.12μm、0.77μm和1.13μm的EC50值在Vero E6细胞中在低微摩尔浓度下抑制SARS-CoV-2。
Wu等人(Inhibition of severe acute respiratory syndrome coronavirusreplication by niclosamide[氯硝柳胺对严重急性呼吸综合征冠状病毒复制的抑制],Antimicrob.Agents Chemother[抗微生物剂化疗].2004,48,2693-2696)发现氯硝柳胺在1.56μm的浓度下抑制SARS-CoV复制并完全消除病毒抗原合成。氯硝柳胺在低至1μm的浓度下抑制SARS-CoV的细胞病变效应(CPE)并在Vero E6细胞中以小于0.1μm的EC50值抑制SARS-CoV复制(Wen等人,J.Med.Chem[药物化学杂志].2007,50,4087-4095)。后来发现氯硝柳胺是一种非常有效的SARS-CoV2抑制剂，IC50为280nM(Joun等人.Clinical features ofpatients infected with 2019novel coronavirus in Wuhan,China[中国武汉市2019新型冠状病毒感染患者的临床特征],The Lancet[柳叶刀],https://www.thelancet.com/journals/lancet/article/PIIS0140-6736(20)30183-5/fulltext)。
Xu等人(ACS Infect.Dis[ACS传染病].2020,线上发布于2020年3月3日https://doi.org/10.1021/acsinfecdis.0c00052)披露了氯硝柳胺对某些病毒感染有效。然而，该出版物的结论是水溶性低、吸收差和口服生物利用度低将限制其作为抗病毒剂的临床开发。
Cabitra等人,JCI Insight[临床研究杂志子刊机理解析].2019；4(15):e128414披露了使用溶解在玉米油中并通过I.P.注射施用的氯硝柳胺来治疗小鼠，结果表明氯硝柳胺减少了粘液的产生和分泌以及支气管收缩，并且在哮喘小鼠中显示出额外的抗炎作用。
氯硝柳胺(商品名是例如
Figure BDA0003955013250000021
)目前被批准和销售用于在成人和儿童(>2岁)中通过施用单次2g方案或每天2g施用7天来口服治疗绦虫感染。PK分析揭示，在口服施用后，在尿液中检测到施用剂量的2％-25％，这可以被认为是最低吸收水平。当用2,000mg氯硝柳胺的单次口服剂量治疗人类志愿者时，氯硝柳胺的最大血清浓度等于0.25-6.0μg/mL(0.76-18.3μM)。较宽的浓度范围是由个体内吸收差异引起的。氯硝柳胺仅部分地从肠道吸收，并且所吸收的部分迅速被肾脏排出。氯硝柳胺具有几种其他弱点，诸如吸收和口服生物利用度低(F＝10％)，这可能会阻碍其作为全身药剂的广泛临床开发。
WO 2017/157997披露了某些用于局部治疗病症诸如特应性皮炎的包含氯硝柳胺的组合物。
仍然需要确定对病毒感染的有效治疗。
发明内容
根据本发明，本文提供了一种在预防或治疗受试者的病毒感染中使用的可吸入药物组合物，该可吸入药物组合物包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，其中氯硝柳胺或其药学上可接受的盐通过吸入施用于受试者。
还提供了一种在预防或治疗受试者的病毒感染中使用的可吸入药物组合物，该可吸入药物组合物包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，其中氯硝柳胺或其药学上可接受的盐鼻内施用于受试者。
包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物是适于肺部施用的形式。例如，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物可以是粉末、悬浮液、悬浮液的气雾剂、溶液或溶液的气雾剂的形式。
该药物组合物可以是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的悬浮液或溶液的形式，其中该组合物作为溶液或悬浮液的气雾剂施用于受试者。优选地，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液的气雾剂的形式施用于受试者。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液和悬浮液可以是本文所述的溶液中的任一种。
在某些实施例中，该药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液。因此，该药物组合物可以是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的悬浮液。优选地，该药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液。
溶液或悬浮液可包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和聚乙二醇(PEG)，其中溶液或悬浮液通过吸入施用于受试者(例如，其中组合物作为溶液或悬浮液的气雾剂施用)。PEG可具有小于约600的平均分子量。PEG可具有约150至约600的平均分子量，例如约200或约400的平均分子量。在优选的实施例中，PEG具有约400的分子量。
PEG可以按溶液或悬浮液的重量计至少25％的量存在于包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液中，例如，其中PEG以按溶液或悬浮液的重量计至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的量存在。例如，PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约40％至约99％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约50％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约55％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约60％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约65％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约70％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约75％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约80％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约85％至约98％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约75％至约96％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约80％至约96％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约85％至约96％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约90％至约96％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约93％至约96％的量存在。PEG可以按溶液或悬浮液的重量计约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％或约98％的量存在。
在优选的实施例中，溶液包含氯硝柳胺乙醇胺在PEG中的溶液。例如，溶液包含氯硝柳胺乙醇胺在PEG中的溶液，其中PEG具有约150至约600的平均分子量，更优选地PEG具有约200至约400的平均分子量。在某些优选的实施例中，溶液包含PEG 200中的氯硝柳胺乙醇胺。在某些优选的实施例中，溶液包含PEG 400中的氯硝柳胺乙醇胺。
优选地，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液和悬浮液是液体溶液或液体悬浮液。
合适地，当可吸入药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液时，组合物作为溶液或悬浮液的气雾剂通过吸入施用于受试者。
因此，在另一个方面，提供了一种在预防或治疗受试者的病毒感染中使用的溶液的气雾剂，该溶液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，其中气雾剂通过吸入施用于受试者。
在另一个方面，提供了一种在预防或治疗受试者的病毒感染中使用的溶液的气雾剂，该溶液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，其中气雾剂鼻内施用于受试者。
在另一个方面，提供了一种在预防或治疗受试者的病毒感染中使用的悬浮液的气雾剂，该悬浮液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，其中气雾剂通过吸入施用于受试者。
在另一个方面，提供了一种在预防或治疗受试者的病毒感染中使用的悬浮液的气雾剂，该悬浮液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，其中气雾剂鼻内施用于受试者。
上述方面的溶液或悬浮液可以是本文披露的溶液或悬浮液中的任一种。优选地，其中溶液或悬浮液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG。
在某些实施例中，可吸入药物组合物(例如溶液、悬浮液、溶液或悬浮液的气雾剂或粉末)包含游离酸形式的氯硝柳胺。
在某些实施例中，可吸入药物组合物(例如溶液、悬浮液、溶液或悬浮液的气雾剂或粉末)包含氯硝柳胺的药学上可接受的盐，例如氯硝柳胺乙醇胺。
在某些实施例中，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按可吸入药物组合物的重量计约0.01％至约10％的量存在。例如，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按可吸入药物组合物的重量计0.05％至10％、0.1％至9％、0.2％至8.5％、0.05％至8％、0.5％至8％、1％至8％、1.5％至8％、2％至8％、2.5％至8％、3％至8％、3.5％至8％、4％至8％、4.5％至8％、5％至8％、5.5％至8％、6％至8％、3％至7％、3.5％至7.5％、3.5％至7％、3.5％至6.5％、3.5％至6％、3.5％至5.5％、4％至7％、4％至7％、4％至6.5％、4％至6％、4％至5.5％、4.5％至7％、4.5％至6.5％、4.5％至6.5％或4.5％至5.5％的量存在。在一个优选的实施例中，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按组合物的重量计约4.5％至5.5％的量存在于可吸入药物组合物中。因此，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐可以按可吸入药物组合物的重量计约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％或约8％的量存在于可吸入药物组合物中。在一个优选的实施例中，可吸入组合物包含按重量计约5％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐。存在于可吸入组合物中的氯硝柳胺的量适用于本文所述的任何包含氯硝柳胺的组合物，例如包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液；包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的悬浮液；包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液的气雾剂；包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的悬浮液的气雾剂；或者包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末。
在某些实施例中，可吸入组合物是包含按重量计约1％至约10％的氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液或悬浮液(优选溶液)，其中PEG具有小于600的平均分子量。
在某些实施例中，可吸入组合物是包含按重量计约4.5％至约6.5％的氯硝柳胺乙醇胺和按重量计约93.5％至约95.5％的PEG 400的溶液。
氯硝柳胺在水中的溶解度非常低，当在含水的组合物中配制时可能易于沉淀。因此，在某些实施例中，施用于受试者的组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的非水性可吸入组合物。在某些实施例中，施用于受试者的组合物可以是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的非水性可吸入溶液或悬浮液。在某些实施例中，施用于受试者的氯硝柳胺是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入非水性溶液的形式。在某些实施例中，施用于受试者的氯硝柳胺是包含氯硝柳胺的非水性可吸入溶液的形式。在某些实施例中，施用于受试者的氯硝柳胺是包含氯硝柳胺的药学上可接受的盐的非水性可吸入溶液的形式。在某些实施例中，施用于受试者的氯硝柳胺是包含氯硝柳胺乙醇胺的非水性可吸入溶液的形式。优选地，施用于受试者的氯硝柳胺是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的非水性溶液。合适地，本文所述的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的非水性溶液或分散体包含按重量计少于2％的水，优选按重量计少于0.1％、更优选少于0.01％的水。在特定的实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或分散体是无水的。
因此，在实施例中，施用于受试者的组合物可以是包含按重量计约2％至约8％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和按重量计约92％至约98％的PEG的非水性溶液，其中PEG具有150至600的平均分子量。溶液可以是包含按重量计约4％至约8％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和按重量计约92％至约96％的PEG的非水性溶液，其中PEG具有约400的平均分子量。溶液可以是包含按重量计约4％至8％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和按重量计约92％至约96％的PEG的非水性溶液，其中PEG具有约200的平均分子量。溶液可以是包含按重量计约4％至约8％的氯硝柳胺乙醇胺和按重量计约92％至约96％的PEG的非水性溶液，其中PEG具有约400的平均分子量。溶液可以是包含按重量计约4％至8％的氯硝柳胺乙醇胺和按重量计约92％至约96％的PEG的非水性溶液，其中PEG具有约200的平均分子量。
在某些优选的实施例中，可吸入药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或分散体，并且以溶液或分散体的气雾剂形式施用于受试者。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液可使用合适的喷雾器、吸入装置或鼻内递送装置施用于受试者。例如，喷雾器或吸入装置可选自振动网喷雾器、压电喷雾器、喷射喷雾器和加压计量吸入器(pMDI)。
在某些实施例中，当可吸入药物组合物是液体(例如包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的液体溶液或悬浮液)时，该组合物作为组合物的气雾剂施用，该气雾剂具有小于约5μm的质量中值直径。MMD可小于约2μm。气雾剂的MMD可为约0.5μm至约5.5μm。优选地，气雾剂的MMD为约1μm至约5μm。
合适地，组合物的气雾剂(例如包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的气雾剂)具有窄的颗粒尺寸分布，例如小于约2.2例如小于2.0或小于1.8的几何标准偏差(GSD)。优选地，气雾剂的GSD小于1.6。
在某些实施例中，可吸入药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末可使用干粉吸入器施用于受试者。在某些实施例中，施用于受试者的粉末(例如氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的颗粒)具有小于约5μm的MMD。例如，粉末颗粒的MMD为约1μm至约5μm。合适地，施用于受试者的颗粒(例如作为粉末的气雾剂)具有小于约2.2例如小于2.0或小于1.8的GSD。
还提供了一种用于预防或治疗受试者的病毒感染的方法，该方法包括通过吸入向该受试者施用有效量的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物。可吸入药物组合物可以是本文披露的可吸入组合物中的任一种。例如，在某些实施例，可吸入药物组合物是以下形式：包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液；包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的悬浮液；包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液的气雾剂；包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的悬浮液的气雾剂；或者包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末。
还提供了一种用于预防或治疗受试者的病毒感染的方法，该方法包括通过吸入向该受试者施用有效量的包含氯硝柳胺的溶液。
还提供了一种用于预防或治疗受试者的病毒感染的方法，该方法包括通过吸入向该受试者施用有效量的包含氯硝柳胺的溶液的气雾剂。
还提供了一种用于预防或治疗受试者的病毒感染的方法，该方法包括向该受试者鼻内施用有效量的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物。
还提供了一种用于预防或治疗受试者的病毒感染的方法，该方法包括向该受试者鼻内施用有效量的包含氯硝柳胺的溶液。
还提供了一种用于预防或治疗受试者的病毒感染的方法，该方法包括向该受试者鼻内施用有效量的包含氯硝柳胺的溶液的气雾剂。
用于治疗的方法中的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液、悬浮液、气雾剂和粉末可以是本文所述的那些中的任一种。例如，在某些实施例中，治疗的方法施用包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液。优选地，治疗的方法施用包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液的气雾剂。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或溶液的气雾剂可以是本文所述的基于PEG的溶液中的任一种。例如，本文披露的包含氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液中的任一种的气雾剂。
在某些实施例中，基于氯硝柳胺的重量，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以约1mg至约3000mg(例如，基于氯硝柳胺的重量，约10mg至约3000mg)的日剂量施用于受试者。因此，基于氯硝柳胺的重量，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以约400mg至约2000mg的日剂量施用于受试者。因此，基于氯硝柳胺的重量，日剂量可为5mg、10mg、25mg、50mg、75mg、100mg、150mg、250mg、500mg、750mg、1000mg、1500mg或2000mg。总日剂量可作为单剂量施用。总日剂量可作为一个或多个分剂量例如2、3、4或5个分剂量施用。总日剂量可均匀地或不均匀地分配。优选地，当总日剂量作为分剂量施用时，总日剂量被分成相等剂量。
在某些实施例中，基于氯硝柳胺的重量，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以约1mg至约1000mg(例如，基于氯硝柳胺的重量，约10mg至约1000mg)的单位剂量施用于受试者。因此，基于氯硝柳胺的重量，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以约100mg至约600mg的单位剂量施用于受试者。优选地，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以约150mg至约500mg的单位剂量施用于受试者。
在某些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物通过口内或鼻内吸入施用于受试者。优选地，组合物通过口内吸入施用于受试者。因此，组合物可以如本文所述的形式(例如作为如本文所述的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末、溶液、悬浮液、溶液的气雾剂或悬浮液的气雾剂)通过口内或鼻内吸入施用于受试者。
在一些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物鼻内施用。应当理解，“鼻内”施用意指施用到鼻腔中，即通过鼻子。鼻内施用包括将组合物施用于鼻粘膜和上呼吸道以及将组合物施用于下呼吸道(例如经由吸入)两种情况。
在某些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物通过吸入和/或鼻内每天至少一次(例如每天1、2、3、4或5次)施用于受试者。因此，组合物可通过吸入和/或鼻内每天1至4次施用于受试者。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的组合物可通过吸入和/或鼻内每天一次施用于受试者。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的组合物可通过吸入和/或鼻内每天两次施用于受试者。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的组合物可通过吸入和/或鼻内每天三次施用于受试者。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的组合物可通过吸入和/或鼻内每天四次施用于受试者。
在某些实施例中，病毒感染可以是肺部病毒感染。
在某些实施例中，病毒感染可由选自以下的病毒引起或与其相关：呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、人冠状病毒OC43、塞姆利基森林病毒、人鼻病毒(HRV)和人腺病毒(HAdV)。
在某些实施例中，病毒感染由肺病毒科病毒例如人呼吸道合胞病毒(HRSV)(例如HRSV-A2、HRSV-B1或HRSV-S2)引起或与其相关。
在某些实施例中，病毒感染由冠状病毒科病毒引起或与其相关。在某些实施例中，病毒感染由选自以下的病毒引起或与其相关：α冠状病毒、β冠状病毒、γ冠状病毒和δ冠状病毒。优选地，病毒感染是由β冠状病毒引起与其相关。因此，在某些实施例中，病毒感染由选自以下的病毒引起或与其相关：严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、HCoV-229E、HCoV-NL63、HCoV-OC43和HCoV-HKU1。
在一个特定的实施例中，病毒感染由SARS-CoV-2引起或与其相关。因此，病毒感染可以是COVID-19。
在一些实施例中，病毒感染由流感病毒引起或与其相关。
病毒感染可由选自以下的病毒引起或与其相关：黄病毒科(例如寨卡病毒(ZIKV)、登革热(例如DENV 1-4)、西尼罗病毒(WNV)、黄热病病毒(YFV，例如黄热病17D病毒)、日本脑炎病毒(JEV)、丙型肝炎病毒(HCV))、丝状病毒科(例如埃博拉病毒)、披膜病毒科(例如甲病毒，诸如基孔肯亚病毒(CHIKV)、辛德毕斯病毒和罗斯河病毒)、疱疹(例如γ-疱疹病毒、人疱疹病毒8、疱疹病毒1和疱疹病毒2)和腺病毒科(例如人腺病毒(HAdV))。
最近的研究已经从鼻组织(高表达)和远端肺内区域(低表达)中确定了被SARS-CoV-2靶向的人血管紧张素转换酶(ACE)-2的表达水平梯度。发现该表达模式由SARS-CoV-2感染性的梯度反映，该感染性在鼻上皮中较高并且在远端肺(细支气管、肺泡)中明显降低。鉴于这些发现，有人提出鼻表面可能是SARS-CoV-2感染的主要初始部位(Hou等人,“SARS-CoV-2 Reverse Genetics Reveals a Variable Infection Gradient in theRespiratory Tract”[SARS-CoV-2反向遗传学揭示了呼吸道内不同的感染梯度],Cell[细胞],2020)。因此，鼻内施用可能有益于患有轻度COVID-19的受试者或在疾病进展到以肺部炎症为特征的晚期阶段之前处于疾病早期阶段的那些受试者。在一些实施例中，其症状包括味觉和/或嗅觉丧失和/或眼部症状(例如结膜充血、结膜水肿、泪溢或分泌物增加中的一种或多种)的受试者可经由鼻内施用本发明的组合物来治疗。鼻内施用还可有益于治疗无症状受试者、预防性治疗如本文所确定的高风险群体(例如医疗保健专业人员或患有潜在病症的那些)、治疗怀疑已经感染SARS-CoV-2的受试者和/或治疗COVID-19人员的密切接触者。
在一些实施例中，可吸入药物组合物鼻内和口内施用。因此，本发明的第一药物组合物可与第二药物组合物分开、依次或同时通过口内吸入施用(例如作为气雾剂)，其中第二药物组合物鼻内施用(例如作为喷雾剂)。第一药物组合物和第二药物组合物可不同。第一药物组合物和第二药物组合物可相同。
当通过吸入来施用药物时，肺部病毒感染的受试者可能容易咳嗽。这会使药物的施用变得困难和/或可能会减少递送到气道和肺部的药物剂量。在某些实施例中，在吸入氯硝柳胺或其药学上可接受的盐之前或与其同时向受试者施用镇咳剂。因此，可在吸入施用氯硝柳胺或其药学上可接受的盐之前或与其同时用选自以下的镇咳剂治疗受试者：可待因、右美沙芬、氢可酮、美沙酮、布托啡诺、苯佐那酯、乙基吗啡、奥昔拉定、匹哌氮酯、福尔可定、诺司卡品、布他米酯和局部麻醉剂(例如利多卡因)。优选地，在施用氯硝柳胺或其药学上可接受的盐之前用镇咳剂治疗受试者，以减少或消除与吸入施用氯硝柳胺相关的咳嗽。因此，可在吸入施用氯硝柳胺或其药学上可接受的盐之前或与其同时用局部麻醉剂治疗受试者。合适地，施用局部麻醉剂以便在口腔和/或气道中提供局部麻醉效果。因此，局部麻醉剂可通过吸入或作为凝胶或液体施用于口腔和/或鼻腔。合适地，局部麻醉剂是利多卡因。
在一些实施例中，在包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的组合物之前或与其同时用支气管扩张剂治疗受试者。有利地，这可帮助减少副作用，诸如咳嗽。合适的支气管扩张药包括短效β2-肾上腺素能激动剂(例如沙丁胺醇、左沙丁胺醇、吡布特罗、肾上腺素、特布他林或麻黄碱)、长效β2-肾上腺素能激动剂(例如沙美特罗、克仑特罗、班布特罗、茚达特罗或福莫特罗)、抗胆碱能药(例如噻托溴铵或异丙托溴铵)和茶碱。
另一个方面提供了一种包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液的气雾剂。因此，气雾剂可以是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液的气雾剂。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液的气雾剂可以是本文所述的氯硝柳胺的基于PEG的溶液中的任一种。例如，本文披露的包含氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液中的任一种的气雾剂。合适地，溶液是非水性溶液。
还提供了一种可吸入单位剂量，该可吸入单位剂量包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液，其中基于氯硝柳胺的重量，氯硝柳胺以1mg至600mg(例如，基于氯硝柳胺的重量，约100mg至约600mg；例如，基于氯硝柳胺的重量，约150mg至约500mg)的量存在。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液可以是本文所述的氯硝柳胺的基于PEG的溶液中的任一种。例如，本文披露的包含氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液中的任一种。合适地，溶液是非水性溶液。单位剂量合适地存在于容器(例如小瓶、泡罩包装、瓶(例如鼻喷雾剂)、注射器(例如作为鼻内递送装置的一部分)或吸入器装置(例如喷雾器)内的储器)中。施用于受试者的溶液的单位剂量体积可为1至10ml、2至9ml、3至8ml或4至6ml。在一些实施例中，施用于受试者的单位剂量体积为10μl至10ml、20μl至8ml、30μl至6ml、40μl至5ml、50μl至2ml、100μl至1ml、120μl至0.8ml、130μl至0.7ml、140μl至0.6ml、150μl至0.5ml或200μl至400μl。在一些实施例中，施用于受试者的单位剂量体积为100至200μl、110至190μl、120至180μl、130至170μl、140至160μl或150至155μl。应当理解，对于给定体积施用的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的质量将取决于溶液的浓度。在一些实施例中，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按重量计约0.01％至约10％的量存在于溶液中。优选地，溶液包含按重量计约5％的氯硝柳胺乙醇胺。可每天施用该体积一次或多次，例如每天一次、每天两次、每天三次或每天四次。可每天施用该体积一次或两次。可每天施用该体积一次。可每天施用该体积两次。
在其中溶液鼻内施用的一些实施例中，施用于受试者的体积可为50至500μl、100至400μl、150至300μl或200至250μl。应当理解，应向每个鼻孔施用大约一半的体积。在一些实施例中，向每个鼻孔施用约50至约150μl(即总共约100至约300μl)。在一些实施例中，向每个鼻孔施用约130μl-150μl(例如140μl)的体积(即总共约260-300μl，例如280μl)。优选地，鼻内施用的溶液包含按重量计约5％的氯硝柳胺乙醇胺。可每天鼻内施用该体积一次或多次，例如每天一次、每天两次、每天三次或每天四次。可每天鼻内施用该体积一次或两次。可每天鼻内施用该体积一次。可每天鼻内施用该体积两次。还应当理解，在其中溶液口内和鼻内施用的一些实施例中，施用于受试者的总体积将是口内施用的体积和鼻内施用的体积的总和。总体积可为10μl至10ml、20μl至8ml、30μl至6ml、40μl至5ml、50μl至2ml、100μl至1ml、150μl至0.5ml或200μl至400μl。优选地，鼻内施用的溶液包含按重量计约5％的氯硝柳胺乙醇胺。如将理解，当溶液口内和鼻内施用时，口内施用的体积可与鼻内施用的体积相同或不同。类似地，口内和鼻内施用的频率可相同或不同。例如，口内和鼻内剂量可依次施用(例如口内施用后不久(例如在10分钟内)鼻内施用，反之亦然)。在某些实施例中，口内和鼻内剂量可分开施用(例如在口内剂量与鼻内剂量分开超过10分钟(例如超过一小时)的情况下)。还考虑了基本上同时的口内和鼻内施用。鼻内施用的体积可每天施用一次或两次。口内施用的体积可每天施用一次或两次。
还提供了一种系统，该系统包括：包含含有氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物的容器；以及吸入器装置。
还提供了一种套件，该套件包括：包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物的容器；以及吸入器装置。
还提供了一种系统，该系统包括：包含含有氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物的容器；以及鼻内递送装置。
还提供了一种套件，该套件包括：包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物的容器；以及鼻内递送装置。
在某些实施例中，存在于系统或套件中的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物是粉末、溶液、悬浮液的形式，例如本文所述的氯硝柳胺组合物中的任一种。合适地，可吸入药物组合物是非水性组合物。
在某些实施例中，存在于系统或套件中的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液。例如，本文所述的基于PEG的氯硝柳胺溶液中的任一种。例如，本文披露的包含氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液中的任一种。
在某些实施例中，系统或套件的吸入器装置适于雾化包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液。合适地，吸入器装置适于将雾化的溶液或悬浮液鼻内或口内递送给受试者。
在某些实施例中，系统或套件的吸入器装置是选自喷射喷雾器、振动网喷雾器、超声喷雾器或加压计量吸入器(pMDI)的喷雾器。
还提供了一种可吸入溶液，该可吸入溶液包含按重量计约1％至10％的氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液，其中PEG具有小于600的平均分子量；以及任选的掩味剂。因此，可吸入溶液可以是本文所述的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液中的任一种，例如本文披露的包含氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液中的任一种。因此，可吸入溶液可包含按重量计约1％至10％的氯硝柳胺乙醇胺和平均分子量为400的PEG。因此，可吸入溶液可包含按重量计约1％至10％的氯硝柳胺乙醇胺和平均分子量为200的PEG。在某些实施例中，可吸入溶液是包含按重量计约4.5％至约6.5％的氯硝柳胺乙醇胺和按重量计约93.5％至约95.5％的PEG 400的溶液。在某些实施例中，可吸入溶液包含按重量计约4.5％至约6％的氯硝柳胺乙醇胺；按重量计约90％至95.5％的PEG 400以及任选的掩味剂。在某些实施例中，可吸入溶液包含按重量计约4.5％至约6％的氯硝柳胺乙醇胺；按重量计约90％至95.5％的PEG 200以及任选的掩味剂。
附图说明
现在将通过示例并参考附图来描述本发明的实施例，其中：
图1示出了显示与最高人类口服剂量的全身暴露相比，在绵羊中肺部施用后相对于抗SARS-CoV-2的IC90的氯硝柳胺游离碱的上皮衬液(ELF)浓度的图。(A)在肺部施用本发明的组合物后，氯硝柳胺随时间推移的平均ELF浓度(±SEM)；(B)在施用本发明的组合物后ELF中的氯硝柳胺平均Cmax水平与在人体中施用2g/天口服剂量后的全身Cmax的比较(数据来自Andrews等人.1983,Pharmacology&therapeutics[药理学与治疗学],19(2),245-295(健康志愿者)以及Burock等人.2018,BMC Cancer[BMC癌症],18(1):297(结直肠癌患者)，合并在“2000mg单次/qd”列中)；
图2示出了显示在实例8中描述的1期临床试验中每个队列的氯硝柳胺乙醇胺的药代动力学曲线的图；
图3是口服施用的氯硝柳胺(如文献中报道的)相对于吸入根据本发明的组合物在人体中的全身暴露(Cmax；平均值±SEM)的比较。生成的“2000mg，单次”列没有平均值，仅作为文献报道的Cmax范围。500-1000mg的数据获自Schweizer等人,2018,PLoS ONE[美国科学公共图书馆]；13(6):e0198389。2000mg的数据获自Andrews等人.1983和Burock等人.2018(如上)；
图4示出了人相对于绵羊研究的全身暴露(Cmax-，平均值±)的关联图；
图5示出了氯硝柳胺乙醇胺盐对VeroE6细胞(图5A)和Caco-2细胞(图5B)中SARS-CoV-2复制的抑制；
图6是显示氯硝柳胺乙醇胺盐抑制SARS-CoV-2的几种变体的复制的图；
图7示出了氯硝柳胺乙醇胺盐对跨孔感染系统中SARS-CoV-2的顶端病毒感染滴度TCID50(图7A)和细胞内RNA水平(图7B)的影响。N＝2。图7A示出了95％水平的平均值，并且图7B示出了平均值±SD。*p<0.05，带有Dunetts多重比较检验的普通单因素ANOVA；以及
图8示出了感染SARS-COV-2的K18-hACE2转基因小鼠在感染后第6天用根据本发明的组合物治疗与用盐水治疗相比的临床评分。组合物N＝5，盐水N＝6。**＝p<0.01(曼-惠特尼检验)。
具体实施方式
定义
除非另有说明，否则说明书和权利要求书中使用的以下术语具有下文陈述的以下含义。
提及“本发明的组合物(composition of the invention)”、“本发明的组合物(compositions of the invention)”、“本发明的溶液”是指本文所述的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的任何组合物。“本发明的溶液”是指其中氯硝柳胺或其药学上可接受的盐溶解在组合物中的本发明的组合物。术语“组合物”和“配制品”可互换使用。
术语“治疗”是指成功治疗或改善疾病、病状或病症的任何标志，包括任何客观或主观参数，诸如症状的消除、缓解、减轻或者使病状或病症对受试者更可耐受；减慢退化或衰退的速度；使退化终点不那么虚弱；改善受试者的身体或精神健康。例如，关于本文披露的病毒感染的治疗，治疗可包括以下中的一种或多种：减少或消除病毒；防止或减少病毒复制；减少或消除病毒的传播；减少或消除发热；减轻或消除流感样症状、减轻或消除咳嗽、减轻或消除肌肉和/或关节疼痛；改善受试者的呼吸状态(例如增加血氧饱和度；减少或消除对氧疗的需要)；改善NEWS2评分；预防或治疗与病毒感染相关的急性呼吸窘迫综合征；治疗或预防与病毒感染相关的肺炎；治疗或预防病毒性肺炎；治疗或预防与病毒感染相关的细菌性肺炎；减轻或消除肺水肿；减轻或消除肺部炎症；预防或减少肺纤维化(例如预防或减少间质成纤维细胞)；降低与病毒感染相关的一种或多种炎性生物标志物(例如降低CRP、白细胞、IL1B、IL-6、IL-10、IL-2、IFNγ、IP10、MCP1、GCSF、IP10、MCP1、MIP1A和/或TNFα中的一种或多种，特别是降低血清CRP)；预防或减少与病毒感染相关的蛋白质性渗出物；预防或减少与病毒感染相关的纤维蛋白渗出物；以及/或者预防或改善与病毒感染相关的肺部细菌或真菌感染。还考虑了预防性治疗，其中用本发明的吸入组合物治疗受试者以预防受试者感染疾病(例如病毒感染)或降低其风险或者预防疾病或病症变得有症状。
在与疾病(例如病毒感染，诸如SARS-CoV-2)相关的物质或物质活性或功能的上下文中，术语“相关”或“与……相关”意指该疾病是(全部或部分)由该物质或物质活性或功能引起或者该疾病的症状是(全部或部分)由该物质或物质活性或功能引起。
当施用本说明书中描述的化合物或盐(例如氯硝柳胺或其药学上可接受的盐)以治疗障碍时，“治疗有效量”是足以实现以下效果的量：减轻或完全缓和该障碍的症状或其他有害影响；治愈该障碍；逆转、完全停止或减缓该障碍的进展；或者降低该障碍恶化的风险。
术语“药学上可接受的盐”是指保留本文所述的化合物的生物有效性和特性并且在生物学上或其他方面不是不合需要的盐。氯硝柳胺的药学上可接受的盐是本领域技术人员熟知的。具体的氯硝柳胺盐包括乙醇胺或哌嗪盐。因此，本文提及氯硝柳胺的盐可指氯硝柳胺的药学上可接受的盐，特别是氯硝柳胺的乙醇胺盐(例如氯硝柳胺与2-氨基乙醇的1:1盐)。
本文使用术语“溶剂化物”来指溶质诸如化合物或化合物的盐与溶剂的复合物。如果溶剂是水，则溶剂化物可称为水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等，这取决于每分子底物存在的水分子的数量。提及“氯硝柳胺或其药学上可接受的盐或水合物”包括氯硝柳胺的水合物和氯硝柳胺的盐的水合物。合适地，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐是无水形式。
除非另有说明，否则提及“可吸入药物组合物”、“本发明的可吸入药物组合物”、“吸入组合物”、“可吸入组合物”、“包含氯硝柳胺的组合物”或“本发明的组合物”也适用于可鼻内施用的本发明的药物组合物。因此，提及“可吸入药物组合物”、“本发明的可吸入药物组合物”、“吸入组合物”、“可吸入组合物”、“包含氯硝柳胺的组合物”或“本发明的组合物”是指通过吸入施用于受试者的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物，并且还是指鼻内施用于受试者的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物。例如，本文所述的任何可吸入组合物(包括但不限于包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末、溶液、悬浮液、溶液的气雾剂或悬浮液的气雾剂)可另外地或替代性地鼻内施用。为避免疑义，应当理解，上述所有方面和实施例(包括组合物、单位剂量、给药方案、体积、按重量计氯硝柳胺或PEG的百分比量、装置、颗粒尺寸和治疗方法)同样适用于可吸入药物组合物和鼻内施用的药物组合物。
本文提及“PEG x00”意指平均分子量为x00的聚乙二醇。例如，PEG 400是指平均分子量为400的PEG。除非另有说明，否则本文提及聚合物诸如PEG的分子量是指聚合物的数均分子量(Mn)。数均分子量可以使用熟知的方法(例如通过凝胶渗透色谱法或1H NMR端基分析)来测量。此类方法包括如Guadalupe等人(Handbook of Polymer Synthesis,Characterization,and Processing[聚合物合成、表征和加工手册],第一版,2013)中所述的GPC分析和例如Page等人Anal.Chem.[分析化学],1964,36(10),第1981-1985页中所述的端基分析。
提及“气雾剂”意指包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的固体颗粒或液滴在气体(例如空气或合适的推进剂气体)中的悬浮液。包含液滴的气雾剂合适地通过雾化包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液(例如本文所述的任何溶液或悬浮液)来形成。气雾剂的连续气相可选自药学上可接受的任何气体或气体混合物。优选地，气体可简单地是空气或压缩空气。替代性地，可使用其他气体和气体混合物，诸如富含氧气、二氧化碳或氮气和氧气的混合物的空气。可使用合适的吸入装置例如本文所述的喷雾器来实现雾化。
可将气雾剂的颗粒/液滴尺寸测量为气雾剂液滴/颗粒的质量中值直径(MMD)。可使用熟知的方法(例如使用Malvern MasterSizer XTM的激光衍射技术)来测量MMD。合适地，可通过使用合适的喷雾器装置喷雾合适体积的溶液或悬浮液(例如2mL)来测定MMD。通过在23℃(±2℃)的温度和50％(±5％)的相对湿度下使用20L/min的抽吸流量将气雾剂云引导通过MasterSizer XTM仪器的激光束来分析所得气雾剂。
几何标准偏差(GSD)是气雾剂中颗粒或液滴尺寸分布的量度。可使用已知方法(例如使用熟知的激光衍射方法，例如在与上文针对MMD的测量描述的相同的条件下使用MasterSizer XTM)来测定GSD。
本文提及“受试者”意指人类或动物受试者。优选地，受试者是温血哺乳动物。更优选地，受试者是人。
除非另有说明，否则本文提及“按重量计％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐”旨在是指氯硝柳胺的游离酸(即非盐形式)的量。例如，提及包含“按重量计5％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐”的组合物是指包含按重量计5％的氯硝柳胺作为游离酸的组合物。因此，在这种组合物包含氯硝柳胺的药学上可接受的盐的情况下，鉴于组合物中还将存在盐抗衡离子，组合物中盐氯硝柳胺的绝对量将高于按重量计5％。
提及“非水性”组合物意指该组合物是无水的并且因此基本上不含水。例如，本文披露的组合物(例如包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液)含有按重量计小于5％、小于1％或合适地小于0.01％、优选小于0.001％的水。优选的非水性组合物是无水且不含可检测水的那些。
如技术人员将认识到的，提及通过吸入施用包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液需要将溶液或悬浮液以适于吸入的形式递送给受试者。通常，将以喷雾剂的形式或者优选地以由溶液或悬浮液形成的气雾剂的形式递送溶液或悬浮液。用于以可吸入形式递送液体或悬浮液的方法和装置是熟知的并且包括喷雾器和pMDI吸入器。
在本文提及用于治疗病症(例如病毒感染)的本发明的吸入组合物的情况下，应被理解为还包括通过向受试者施用有效量的组合物来治疗受试者的该病症的方法；以及组合物在制备用于治疗该病症的药物中的用途。
在数字的上下文中，提及“约”旨在包括值+/-10％。例如，约20％包括18％至22％的范围。
贯穿本说明书的描述和权利要求，词语“包括”和“包含”以及它们的变型意指“包括但不限于”，并且它们并不旨在(并且并不)排除其他部分、添加剂、组分、整数或步骤。贯穿本说明书的描述和权利要求，除非上下文另有要求，否则单数涵盖复数。特别地，当使用不定冠词时，除非上下文另有要求，否则本说明书应被理解为考虑到复数以及单数。
结合本发明的特定方面、实施例或者实例一起描述的特征、整数、特性、化合物、化学部分或基团应被理解为可适用于本文所描述的任何其他方面、实施例或实例，除非与之不相容。在本说明书中所披露的所有特征(包括任何所附权利要求书、摘要以及附图)和/或如此披露的任何方法或过程的所有步骤可以按任何组合的形式组合，这类特征和/或步骤中的至少一些相互排斥的组合除外。本发明并不限于任何前述实施例的细节。本发明扩展到本说明书(包括任何所附权利要求书、摘要以及附图)中所披露的特征的任何新颖特征或任何新颖组合，或扩展到如此披露的任何方法或过程的步骤的任何新颖步骤或任何新颖组合。
读者的关注点是针对与本说明书同时或在本说明书之前连同本申请一起提交并且与本说明书一起开放以供公众检验的所有论文和文献，并且所有这类论文和文献的内容通过援引并入本文。
氯硝柳胺
本文披露了病毒感染的治疗，该治疗包括吸入包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的药物组合物。
氯硝柳胺的结构如下所示：
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在某些实施例中，氯硝柳胺在组合物中是游离酸形式。在某些实施例中，氯硝柳胺是氯硝柳胺的药学上可接受的盐(或其溶液)(例如乙醇胺盐或哌嗪盐)的形式。可吸入组合物中氯硝柳胺的优选药学上可接受的盐是氯硝柳胺乙醇胺。
在一些实施例中，氯硝柳胺可作为氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的水合物的形式存在于组合物中。然而，通常优选的是氯硝柳胺不是水合物的形式。因此，在某些实施例中，可吸入组合物包含无水氯硝柳胺或其药学上可接受的盐。例如，氯硝柳胺可以是无水氯硝柳胺。氯硝柳胺可以是无水氯硝柳胺乙醇胺。
包含氯硝柳胺的可吸入药物组合物
氯硝柳胺或其药学上可接受的盐可存在于适于通过吸入施用的任何药物组合物中。包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的优选可吸入组合物包括例如如本文更详细描述的溶液、悬浮液、粉末、溶液的气雾剂或悬浮液的气雾剂形式的组合物。
还考虑了包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的其他可吸入组合物，例如：包含溶解或分散在其中的氯硝柳胺的固体脂质颗粒；包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的乳剂(例如水包油乳剂，其中氯硝柳胺或其药学上可接受的盐溶解或分散在乳剂的水相中)；或者包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的脂质体。
包含氯硝柳胺的溶液和悬浮液
在某些实施例中，包含氯硝柳胺的可吸入药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入溶液或悬浮液。优选地，溶液或悬浮液是液体，更优选适于使用例如喷雾器吸入器雾化的液体。因此，本文提及包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的任何溶液或悬浮液优选地是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的液体溶液或液体悬浮液。
在某些实施例中，将氯硝柳胺或其药学上可接受的盐溶解或分散在液体介质中以提供适于吸入的溶液或悬浮液。在某些实施例中，将氯硝柳胺或其药学上可接受的盐溶解或分散在选自以下的介质中：非聚合二醇(例如亚烷基二醇，例如C2-8亚烷基二醇，诸如丙二醇)；聚合二醇(例如聚(亚烷基二醇)，例如聚乙二醇或聚丙二醇)；乙二醇醚(例如2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇(Transcutol))；甘油；油(例如非极性油)；或者烃溶剂。在某些实施例中，将氯硝柳胺或其药学上可接受的盐溶解或悬浮在油中。例如，在某些实施例中，将氯硝柳胺或其药学上可接受的盐溶解或悬浮在矿物油、植物油和长链或中链甘油三酯中。溶液或悬浮液可包含含有氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的水性溶液或悬浮液。然而，优选的是溶液或分散体是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的非水性溶液或悬浮液。
本文所述的溶液或悬浮液可进一步包含一种或多种表面活性剂或乳化剂，特别是当氯硝柳胺作为分散体存在于液体介质中时。溶液或分散体可进一步包含一种或多种离子或非离子表面活性剂或乳化剂。表面活性剂或乳化剂的代表性实例包括本文所述的那些中的任一种，例如聚乙二醇化脂肪酸甘油酯(labrasol)、聚氧乙烯乙二醇脱水山梨糖醇烷基酯(聚山梨醇酯，例如Tween 20或Tween 80)、聚氧乙烯乙二醇烷基醚(Brij)、脂肪醇的聚氧乙烯醚(ceteareth)、甘油的脂肪酸酯(例如硬脂酸甘油酯)、蛋白质乳化剂(例如白蛋白)。表面活性剂或乳化剂可以按组合物的重量计约0.1％至约15％、约0.2％至约10％或约0.2％至约5％的量存在于溶液或分散体中。
在氯硝柳胺或其药学上可接受的盐作为悬浮液存在于液体介质中的实施例中，氯硝柳胺可作为微粒悬浮液或纳米悬浮液存在于液体介质中。可通过研磨氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以提供小于5μm、优选小于2μm的平均颗粒尺寸来制备微粒悬浮液。如果需要，可使用其他方法来减小氯硝柳胺的颗粒尺寸，例如通常在存在合适的表面活性剂或乳化剂(例如本文所述的表面活性剂或乳化剂)的情况下通过高压均化。
可使用熟知的方法来制备在液体介质中包含氯硝柳胺的纳米悬浮液，例如通过纳米沉淀、高压均化或通过喷雾干燥氯硝柳胺溶液。通常，包含氯硝柳胺的纳米悬浮液进一步包含稳定剂(例如表面活性剂或乳化剂)以将纳米颗粒保持在悬浮液中。包含纳米悬浮液的纳米颗粒合适地具有小于约1000nm、更优选小于约400nm、小于约300nm、小于约250nm或小于约200nm的平均颗粒尺寸，如通过光散射方法所测量。
氯硝柳胺可以本文所述的任何量存在于液体介质中的溶液或悬浮液中。当氯硝柳胺或其药学上可接受的盐作为溶液存在时，溶液通常含有按重量计约0.5％至10％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐。当氯硝柳胺作为液体介质中的悬浮液存在时，可存在更高量的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，例如按组合物的重量计高达12％、15％、18％、20％、22％或25％。还考虑了其中将氯硝柳胺或其药学上可接受的盐中的一些溶解在液体介质中而将一些分散在液体介质中的悬浮液。
包含PEG的悬浮液或溶液
在某些实施例中，溶液或悬浮液包含氯硝柳胺或药学上可接受的盐和PEG。因此，可吸入药物组合物可以是包含氯硝柳胺或药学上可接受的盐和PEG的液体悬浮液。优选地，可吸入药物组合物是包含氯硝柳胺或药学上可接受的盐和PEG的溶液。
合适地，PEG在环境温度(例如20至25℃)下是液体，因此溶剂可以是低分子量PEG。特别地，PEG具有小于约600或更小、合适地小于600的平均分子量。例如，PEG可具有约200至约600、约200至约500或约200至约400的平均分子量。具体的PEG选自PEG 200、PEG 300和PEG 400。在某些实施例中，PEG是PEG 200。优选地，PEG是PEG 400。
合适地，PEG以大于60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％或98％的量存在于溶液或分散体中，其中％基于溶液或分散体的重量按重量计。因此，PEG可以60％至99％、60％至约98％、65％至约98％、约70％至约98％、约75％至约98％、约80％至约98％、约85％至约98％、约75％至约96％、约80％至约96％、约85％至约96％、约90％至约96％、约91％至约96％、约92％至约96％或约93％至约96％存在，其中所有％按溶液或分散体的重量计。PEG可以按溶液或分散体的重量计约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％或约98％或约99％的量存在。
当氯硝柳胺或其药学上可接受的盐作为包含PEG的溶液施用于受试者时，溶液合适地包含以按溶液的重量计约0.01％至约10％的量的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐。例如，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按溶液的重量计0.05％至10％、0.05％至8％、0.5％至8％、1％至8％、1.5％至8％、2％至8％、2.5％至8％、3％至8％、3.5％至8％、4％至8％、4.5％至8％、5％至8％、5.5％至8％、6％至8％、3％至7％、3.5％至7.5％、3.5％至7％、3.5％至6.5％、3.5％至6％、3.5％至5.5％、4％至7％、4％至7％、4％至6.5％、4％至6％、4％至5.5％、4.5％至7％、4.5％至6.5％、4.5％至6.5％或4.5％至5.5％的量存在。在一个优选的实施例中，氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按溶液的重量计约4.5％至5.5％的量存在于组合物中。因此，氯硝柳胺或药学上可接受的盐可以按溶液的重量计约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％或约8％的量存在于组合物中。在一个优选的实施例中，组合物包含按重量计约5％的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐。
在一些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液或分散体进一步包含水，例如按重量计高达30％的水。然而，合适地，溶液或分散体是非水性溶液或分散体。
在某些实施例中，溶液是包含按重量计约1％至约10％的氯硝柳胺乙醇胺和PEG的非水性溶液，其中PEG具有小于600的平均分子量。因此，可吸入溶液可以是包含以下的非水性溶液：按重量计约4.5％至约6％的氯硝柳胺乙醇胺；以及约90％至95.5％的PEG 400。在一个特定的实施例中，溶液是包含按重量计约5％的氯硝柳胺乙醇胺和至少90％的PEG 400的非水性溶液。
在某些实施例中，除了液体介质之外，本文所述的包含氯硝柳胺的溶液或悬浮液进一步包含一种或多种溶剂。例如，溶液或分散体可进一步包含有机溶剂，例如极性有机溶剂。因此，溶液或悬浮液可进一步包含选自以下的一种或多种有机溶剂：丙二醇、甘油、2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇(Transcutol)、丙二醇硬脂基醚和丙二醇异硬脂酸酯。另外的有机溶剂任选地以按溶液或悬浮液的重量计高达约30％(例如按溶液或悬浮液的重量计约1％至约25％、约1％至约20％或约1％至约10％)的量存在。在某些实施例中，溶液或分散体不包含除PEG以外的溶剂。
在某些实施例中，可吸入药物组合物(例如可吸入溶液或悬浮液)不包含挥发性有机溶剂。因此，在某些实施例中，本发明的组合物不含挥发性醇，例如甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇。
在某些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液具有约1至约150mPa.s(在20℃下)的动力粘度。
包含氯硝柳胺的溶液和悬浮液的气雾剂
包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液以适于吸入的形式施用于受试者。例如，溶液或悬浮液可作为喷雾剂、优选地作为包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的气雾剂施用。
本文披露的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液和分散体的气雾剂形成本发明的另一个方面。
本发明的可吸入组合物(例如包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或分散体的气雾剂)的吸入将氯硝柳胺或其药学上可接受的盐递送到受试者的气道。在某些实施例中，气雾剂的吸入将氯硝柳胺递送到上呼吸道，例如鼻和鼻道、鼻旁窦、咽、声带上方的喉部分中的一个或多个。优选地，气雾剂的吸入将氯硝柳胺递送到下呼吸道，例如气管、肺、支气管、细支气管、肺泡管或肺泡中的一个或多个。
在某些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的气雾剂具有小于约5μm的质量中值直径。MMD可小于约2μm。气雾剂的MMD可为约0.5μm至约5.5μm。优选地，气雾剂的MMD为约1μm至约5μm。合适地，气雾剂具有小于约2.2例如小于2.0或小于1.8的几何标准偏差(GSD)。优选地，气雾剂的GSD小于1.6。
在一些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的气雾剂具有小于约500μm、小于约300μm、小于约250μm、小于约200μm、小于约150μm、小于约100μm、小于约90μm、小于约80μm、小于约70μm、小于约60μm或小于约50μm的质量中值直径。在一些实施例中，气雾剂的MMD为约5至约150μm、约10μm至约120μm、约20至约100μm、约30μm至约90μm、约40μm至约80μm或约50μm至约70μm，例如约65μm。
如本领域已知的，液滴或颗粒尺寸分布也可通过参考D10和D90值来定义。10％的颗粒或液滴小于D10值。90％的颗粒或液滴小于D90值。在一些实施例中，本发明的配制品的气雾剂具有1至200μm、5至100μm、10至70μm、15至50μm或20至40μm(例如约30μm)的D10。在一些实施例中，本发明的配制品的气雾剂具有50至500μm、80至400μm、100至300μm或150至250μm的D90。可使用熟知的方法(例如使用来自马尔文(Malvern)的SprayTec设备通过激光衍射诸如低角激光散射(LALLS))来测量颗粒尺寸分布。
可使用已知方法(例如经由合适的吸入器装置，特别是如本文所述的喷雾器)来形成包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的气雾剂。
包含氯硝柳胺的粉末
在某些实施例中，可吸入组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末。
合适地，粉末包含具有可呼吸尺寸的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的颗粒。在某些实施例中，粉末具有小于10μm例如小于5μm的颗粒尺寸(MMD)。例如，粉末颗粒的MMD为约1μm至约5μm。合适地，施用于受试者的颗粒(例如作为粉末的气雾剂)具有小于约2.2例如小于2.0或小于1.8的GSD。
可使用熟知的方法来制备适于吸入的粉末，例如通过碾碎或研磨氯硝柳胺或其药学上可接受的盐或者包含该化合物的组合物。也可通过例如微沉淀、冻干或喷雾干燥或喷雾冷冻干燥包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液来形成可呼吸粉末。
在某些实施例中，可通过沉淀、冻干或喷雾干燥或喷雾冷冻干燥包含氯硝柳胺和合适的载体的溶液以提供包含氯硝柳胺和载体的可呼吸粉末颗粒作为复合颗粒来制备包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可呼吸颗粒。合适的载体包括惰性载体诸如淀粉、糖(例如甘露醇、乳糖或海藻糖)。
在某些实施例中，包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可呼吸颗粒的粉末可与载体颗粒一起配制。载体颗粒可大于氯硝柳胺的颗粒，并且载体与可呼吸氯硝柳胺粉末的混合形成“有序混合物”。此类有序混合物可以用于干粉吸入器。氯硝柳胺粉末的细颗粒与较大的载体颗粒(例如，大约100μm)松散缔合，以促进粉末在单位剂量的吸入器储器(例如小瓶、胶囊或泡罩包装)中的填充和储存。在从吸入器施用时，粉末所经历的湍流和/或机械冲击从较大的载体颗粒中释放药物的细颗粒，以提供被吸入到受试者呼吸道中的药物的可呼吸细颗粒级分。适于制备有序混合物的载体包括例如乳糖、甘露醇和微晶纤维素。
可使用合适的干粉吸入器将包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末施用于受试者。
可吸入药物组合物中的其他组分
本文所述的可吸入药物组合物任选地进一步包含一种或多种粘度调节剂、乳化剂、表面活性剂、保湿剂、油、蜡、聚合物、防腐剂、pH调节剂(例如合适的酸或碱，例如有机酸或有机胺碱)、缓冲剂、抗氧化剂(例如丁基羟基茴香醚或丁基羟基甲苯)、结晶抑制剂(例如纤维素衍生物，诸如羟丙基甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮)、着色剂、香料和掩味剂。此类赋形剂是熟知的，例如如在Handbook of Pharmaceutical Excipients[药物赋形剂手册],第7版,Rowe等人中列出。
在某些实施例中，可吸入药物组合物进一步包含掩味剂。掩味剂用于掩盖或调节与组合物和/或氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的一种或多种赋形剂相关的令人不快的味道。掩味剂是熟知的。合适的掩味剂包括例如糖(例如蔗糖、右旋糖或乳糖)、氨基酸或氨基酸衍生物(例如精氨酸、赖氨酸或谷氨酸一钠)、油(例如天然油或植物提取物)、甜味剂(例如阿斯巴甜、乙酰磺胺酸钾、三氯蔗糖或糖精)、有机酸(例如柠檬酸或天冬氨酸)或麦芽糖糊精。在某些实施例中，掩味剂以按组合物的重量计高达10％、高达5％或高达2％的量存在。例如，0.1％至5％或0.5％至2％可按组合物的重量计。
吸入器
可吸入药物组合物通过吸入施用于受试者。使用合适的吸入器以可吸入形式将组合物合适地递送给受试者。吸入器是熟知的并且包括干粉吸入器(DPI)、计量吸入器(MDI)、加压计量吸入器(pMDI)和喷雾器。
喷雾器
喷雾器适于形成可吸入药物组合物的气雾剂。喷雾器特别适于形成包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的气雾剂，例如本文所述的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的液体溶液和悬浮液。合适的喷雾器产生可吸入药物组合物的可呼吸气雾剂。
喷雾器可包含含有可吸入药物组合物(例如溶液或悬浮液)的储器，其中喷雾器的致动递送单剂量的组合物，其作为气雾剂被受试者吸入。替代性地，喷雾器可以是多剂量喷雾器，其中将单位剂量的可吸入药物组合物装载到喷雾器中(例如经由小瓶、注射器、胶囊、泡罩包装或其他合适的容器)并且作为单位剂量的组合物的气雾剂施用于受试者。
在某些实施例中，喷雾器选自喷射喷雾器、振动网喷雾器、超声喷雾器。喷射喷雾器利用空气压力将溶液或悬浮液破碎成气雾剂液滴。超声喷雾器使用压电晶体对溶液或悬浮液的剪切来产生气雾剂。振动网喷雾器包括溶液或悬浮液与振动隔膜网流体接触。网的振动用于产生溶液或悬浮液的气雾剂。
喷雾器是可商购获得的并且包括由爱尔真公司(Aerogen)生产的Respirgard
Figure BDA0003955013250000261
Pro和
Figure BDA0003955013250000262
Go；由阿拉迪姆公司(Aradigm)生产的
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和AERx EssenceTM；由伟康公司(Respironics,Inc.)生产的
Figure BDA0003955013250000264
Freeway FreedomTM、Sidestream、Ventstream和I-neb；以及由帕瑞公司(PARI,GmbH)生产的
Figure BDA0003955013250000265
和e-FlowTm。
优选地，喷雾器是振动网喷雾器，例如e-FlowTm喷雾器。喷雾器进一步披露于WO2001032246、WO 01/34232、WO 2001056639、WO 2001085241、WO 2002013896、WO2002064265、WO 2003035153、WO 2003035152、WO 2004004813、WO 2004014569、WO2004020029、WO 2004028606、WO 2004039442、WO 2004041336、WO 2004041335、WO2004052436、WO 2004098689、WO 2005032630、WO 2005037246、WO 2005042075、WO2006108556、WO 2006084543、WO 2006084546、WO 2006128567、WO 2007020073、WO2007118557、WO 2010097119、WO 2016015889、WO 2008113651、WO 2009135871、WO2010066714、WO 2010094767、WO 2010097119、WO 2010097119、WO 2010139730、WO2011134940、WO 2012069531、WO 2013013852、WO 2012168181、WO 2014040947、WO2014082818、WO 2015091356、WO 2015128375、WO 2015193432、WO 2016026802,WO2016102308、WO 2017021441、WO 2018167278、WO 2019115771和WO 2019202085；将它们通过援引并入本文。
计量吸入器(MDI)
推进剂驱动或加压的计量吸入器(pMDI)在致动吸入器时释放计量的包含氯硝柳胺的溶液或悬浮液的气雾剂。合适地，将包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液配制为包含氯硝柳胺和合适的推进剂(诸如卤化烃)的悬浮液或溶液。
与MDI一起使用的推进剂可以是本领域已知的任何推进剂。推进剂的实例包括氯氟烃(CFC)，诸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷；氢氟烷烃(HFA)；氮气和二氧化碳。合适地，推进剂是HFA，例如氢氟烷烃134a(HFA134a)、HFA-152a或氢氟烷烃227ea(HFA227ea)。
MDI可用触发器致动以释放用于吸入的气雾剂。替代性地，MDI可以是呼吸致动的，其中当使用者吸气时，使用者的吸入触发气雾剂的释放。
干粉吸入器
干粉吸入器(DPI)适于吸入包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末。DPI可以是储器装置，其中药物包含在该装置的贮器中，并且该装置从药物储器递送单位剂量的药物。替代性地，DPI可以是计量装置，其中单位剂量的药物装载到该装置中并作为粉末的气雾剂吸入。DPI的实例包括描述于A.H.de Boer等人,Expert Opinion on Drug Delivery[药物递送专家意见],2017,14:4,499-512中的那些。
DPI是可商购获得的并且包括
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Figure BDA0003955013250000272
Figure BDA0003955013250000273
Taper DPI、
Figure BDA0003955013250000274
和
Figure BDA0003955013250000275
吸入器。
鼻内递送装置
鼻内递送装置可适于将溶液或悬浮液递送到鼻粘膜。鼻内递送装置可以是滴管、计量喷雾泵(例如多剂量或双向多剂量喷雾泵)、挤压瓶、单剂量或双剂量喷雾装置、鼻加压计量吸入器(pMDI)、脉动膜喷雾器、鼻声波/脉动喷射喷雾器、振动网喷雾器、鼻雾化器或气体或电动雾化器。
挤压瓶通常用于递送非处方药，诸如减充血剂。通过手动挤压可变形(例如塑料)充气瓶，溶液在通过喷射出口递送时被雾化。
计量喷雾泵通常用于鼻药物递送。传统的喷雾泵使用防腐剂来防止当射出的液体被空气取代时的污染。然而，最近的装置通过使用可收缩袋、可移动活塞或压缩气体来取代射出的液体或替代性地使用过滤器来净化空气而避免了对防腐剂的需求。可商购获得的鼻喷雾泵由阿普塔集团(Aptar Group)销售。
单剂量或双剂量喷雾装置旨在用于一次性或零星使用和/或准确给药很重要的情况，例如用于昂贵药物和疫苗的施用。可商购获得的装置包括MAD NasalTM鼻内粘膜雾化装置和由贝迪技术公司(Becton Dickinson Technologies)销售的AccusprayTM。
已经开发了使用氢氟烷烃(HFA)作为推进剂的鼻加压计量吸入器(pMDI)。此类装置已被批准用于治疗过敏性鼻炎。
脉动膜喷雾器经由穿孔振动膜产生气雾剂。可商购获得的装置包括帕瑞制药公司(PARI Pharma GmbH)销售的VibrENT装置。其他类型的可商购获得的喷雾器和雾化器包括Atomisor
Figure BDA0003955013250000281
声波喷雾器(鼻声波/脉动喷射喷雾器，法国DTF医疗公司(DTF-medical))、Aeroneb
Figure BDA0003955013250000282
(网喷雾器，爱尔真公司)、包括Bi-DirectionalTM技术的
Figure BDA0003955013250000283
装置、ViaNaseTM电子雾化器(库尔夫技术公司(Kurve Technology Inc.))和氮气驱动的雾化器(例如由英派尔公司(Impel Inc.)销售)。
在一些实施例中，鼻内递送装置适于将粉末递送到鼻粘膜。鼻内递送装置可以是鼻粉末吸入器(例如，其适于鼻递送)、鼻粉末喷雾器或鼻粉末吹入器。可商购获得的装置包括Rhinocort
Figure BDA0003955013250000284
Twin-lizerTM、Fit-lizerTM(SNBL)、UnidoseTM Xtra(贝斯派克公司(Bespak))、Monopowder(阿普塔集团)和由
Figure BDA0003955013250000285
销售的粉末呼气递送系统(EDS)。
病毒感染
合适地，本发明的可吸入组合物用于治疗病毒感染。病毒感染可以是对用氯硝柳胺进行治疗有反应的任何病毒感染。
例如，病毒感染可以由选自以下的病毒引起或与其相关：冠状病毒科(例如α冠状病毒、β冠状病毒、γ冠状病毒和δ冠状病毒)、微小核糖核酸病毒科(例如肠道病毒，诸如鼻病毒、合适的人鼻病毒(HRV))、黄病毒科(例如寨卡病毒(ZIKV)、登革热(例如DENV 1-4)、西尼罗病毒(WNV)、黄热病病毒(YFV，例如黄热病17D病毒)、日本脑炎病毒(JEV)、丙型肝炎病毒(HCV))、丝状病毒科(例如埃博拉病毒)、披膜病毒科(例如甲病毒，诸如基孔肯亚病毒(CHIKV)、辛德毕斯病毒和罗斯河病毒)、疱疹(例如γ-疱疹病毒、人疱疹病毒8、疱疹病毒1和疱疹病毒2)和腺病毒科(例如人腺病毒(HAdV))。
感染或进行其生命周期的至少一个阶段或在呼吸道中致病的病毒在本发明中是最感兴趣的。在一些情况下，此类病毒可以经由呼吸道进入受试者体内(例如，它们能够通过吸入传播，例如经由空气传播或液滴传播)，并且/或者它们可在呼吸道(例如上呼吸道或下呼吸道)中进行复制的初始阶段或另外的阶段。通过空气传播或液滴传播而传播的病毒的一些熟知的实例包括冠状病毒、流感病毒、副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒。不考虑经典的空气传播或液滴传播的病毒，其他病毒在一些情况下可通过空气传播，例如含有病毒的体液被雾化。此外，不通过空气传播的其他病毒可在呼吸道中复制或致病，因此可以使用本发明的可吸入组合物来治疗。
通过空气传播或液滴传播而传播和/或引起病毒性呼吸道疾病的病毒在本发明中是特别感兴趣的。
本发明的可吸入药物组合物通过吸入施用以提供对病毒感染的治疗或预防。在实施例中，病毒感染由呼吸病毒引起或与其相关。因此，病毒感染可以是呼吸道感染。病毒感染可以是上呼吸道感染。病毒感染可以是下呼吸道感染，例如影响肺的病毒感染。
在一些实施例中，病毒感染由选自以下的病毒引起或与其相关：呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、冠状病毒(例如严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV))、埃博拉病毒(EBOV)、黄病毒、人鼻病毒(HRV)、人腺病毒(HAdV)和EB病毒(EBV)。
在一些实施例中，病毒感染是呼吸道感染(RTI)。呼吸道感染(RTI)是涉及呼吸道的感染性疾病。这种类型的感染通常进一步分类为上呼吸道感染(URI或URTI)或下呼吸道感染(LRI或LRTI)。RTI可以是上或下RTI。下呼吸道感染诸如肺炎往往是比上呼吸道感染诸如普通感冒严重得多的病症。上呼吸道通常被认为是声门或声带上方的气道，有时被认为是环状软骨上方的气道。这部分呼吸道包括鼻、鼻窦、咽和喉。URI的症状可以包括咳嗽、喉咙痛、流涕、鼻塞、头痛、低烧、面部压力和打喷嚏。下呼吸道由气管(风管)、支气管、细支气管和肺组成。下呼吸道感染通常比上呼吸道感染更严重。LRI是所有感染性疾病中发生死亡的主要原因。两种最常见的LRI是支气管炎和肺炎。
病毒可以是RNA病毒或DNA病毒。在某些实施例中，病毒感染由RNA病毒引起或与其相关。在某些实施例中，病毒感染由DNA病毒引起或与其相关。在某些实施例中，病毒感染由正义链RNA病毒引起或与其相关。
在某些实施例中，病毒感染由选自以下的病毒引起或与其相关：呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、肺炎病毒(例如人偏肺病毒)、冠状病毒(例如严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV))、人鼻病毒(HRV)、人腺病毒(HAdV)。
在一些实施例中，病毒是引起RTI或与其相关的RNA病毒。
在一些实施例中，病毒感染可以引起急性呼吸综合征(例如严重急性呼吸综合征(SARS))或可与其相关。已知引起严重急性呼吸综合征(SARS)的病毒包括冠状病毒诸如SARS病毒或MERS病毒，例如SARS-CoV、SARS-CoV-2或MERS-CoV。在一个实施例中，病毒感染引起SARS。
肺病毒科的病毒是负义单链RNA病毒。肺病毒科中的两个属是偏肺病毒和正肺病毒。偏肺病毒的具体种类是禽偏肺病毒(AMPV)和人偏肺病毒(HMPV)。正肺病毒的具体种类是牛呼吸道合胞病毒(BRSV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)和鼠肺炎病毒(MPV)。肺病毒科中的病毒通常通过呼吸道分泌物传播，并且通常与呼吸道感染相关。在某些实施例中，病毒感染由人呼吸道合胞病毒(HRSV)引起或与其相关。因此，病毒感染可由选自以下的病毒引起或与其相关：HRSV-A2、HRSV-B1和HRSV-S2。
冠状病毒科病毒是一类有包膜的正链单链球形RNA病毒。冠状病毒科包括两个亚科即冠状病毒和环曲病毒。冠状病毒属具有螺旋状核衣壳，而环曲病毒属具有管状核衣壳。冠状病毒亚科中有以下属：α冠状病毒、β冠状病毒、γ冠状病毒和δ冠状病毒。环曲病毒亚科中的属是鳊鱼病毒和环曲病毒。在某些实施例中，病毒感染由冠状病毒引起或与其相关。因此，病毒感染可由选自以下的病毒引起或与其相关：α冠状病毒、β冠状病毒、γ冠状病毒和δ冠状病毒。在一个优选的实施例中，病毒感染由β冠状病毒引起与其相关。
人冠状病毒通常引起持续很短时间的轻度至中度上呼吸道疾病，如普通感冒(但是一些冠状病毒可能是致命的)。症状可包括流涕、咳嗽、喉咙痛和发热。这些病毒有时可能引起下呼吸道疾病，诸如肺炎。这在患有心肺疾病或免疫系统受损的人或老年人中更为常见。
在一些实施例中，病毒感染是普通感冒。普通感冒可由选自以下的病毒引起或与其相关：呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒、肺炎病毒(例如人偏肺病毒)、冠状病毒、鼻病毒(例如人鼻病毒，HRV)、腺病毒(例如人腺病毒，HAdV)和肠道病毒。
中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)是β冠状病毒属的一个成员，并且引起中东呼吸综合征(MERS)。MERS是一种急性呼吸道疾病。大约一半确认感染MERS的人死亡。目前没有针对MERS的治疗或疫苗。
β冠状病毒属的另一个成员是SARS冠状病毒(SARS-CoV)。SARS-Co-V是引起严重急性呼吸综合征(SARS)的病毒。SARS于2003年2月在亚洲首次报道。SARS是空气传播病毒，并且可以通过吸入被感染的个体释放到空气中的小水滴(例如，通过咳嗽和/或打喷嚏)、接触被污染的表面和/或通过与被感染个体密切接触而传播。
在某些实施例中，病毒感染由严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、HCoV-229E、HCoV-NL63、HCoV-OC43和HKU1引起或与其相关。
在某些实施例中，病毒感染由引起严重急性呼吸综合征(SARS)的冠状病毒(诸如SARS病毒或MERS病毒，例如SARS-CoV、SARS-CoV-2或MERS-CoV)引起或与其相关。优选地，病毒感染由SARS-CoV-2引起或与其相关。
致病性呼吸道病毒感染可能引起与病毒感染相关的疾病和症状。在某些实施例中，可吸入药物组合物用于预防或治疗与呼吸道病毒感染相关的疾病或病症。因此，吸入组合物可用于治疗或预防由呼吸道病毒感染引起或与其相关的呼吸综合征。例如治疗或预防严重急性呼吸综合征(SARS)。因此，本发明的吸入组合物可用于预防或治疗由SARS-CoV、SARS-CoV-2或MERS-CoV引起的严重急性呼吸综合征，优选地用于治疗或预防由SARS-CoV-2引起的严重急性呼吸综合征。在某些实施例中，本发明的吸入组合物用于治疗选自以下的呼吸综合征：肺炎、流感和哮吼。因此，吸入组合物可用于治疗或预防由呼吸道病毒感染引起的肺炎。
在一个优选的实施例中，吸入药物组合物用于治疗COVID-19。
COVID-19可以通过本领域技术人员已知的任何方法来诊断。可以获得来自受试者的样品(例如痰液、粘液、血清、鼻抽吸物、咽拭子、支气管肺泡灌洗液或其他类型的体液)并测试SARS-CoV-2的存在。用于诊断SARS-Cov-2感染的示例性方法包括但不限于检测SARS-CoV-2病毒的核苷酸序列(例如使用PCR)、检测SARS-Cov-2相关冠状病毒抗原以及与SARS-CoV-2相关冠状病毒抗原免疫特异性结合的抗体或其片段。
Wu等人描述了SARS-CoV-2病毒的核苷酸序列的实例(Nature[自然]579,265-269(2020)(Genbank登记号MN908947.3，分离株Wuhan-Hu-1)。受试者可感染具有与MN908947.3至少90％、至少93％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、至少99.9％、至少99.91％、至少99.92％、至少99.93％、至少99.94％、至少99.93％、至少99.95％、至少99.96％、至少99.97％、至少99.98％或至少99.99％相同的基因组序列的SARS-CoV-2病毒。本发明包括治疗或预防SARS-CoV-2的任何变体。尽管已经提出了许多命名法，但目前没有针对SARS-CoV-2菌株的单一一致命名法。在一些实施例中，SARS-CoV-2变体属于进化枝S、O、L、V、G、GH、GR或GV中的一种(如GISAID“Global phylogeny[全球系统发育]，由Nextstrain更新”所定义)。在一些实施例中，SARS-CoV-2变体属于进化枝19A、19B、20A、20B、20C、20D、20E、20F、20G、20H或20I中的一种(clades.nextstrain.org，2021年1月19日在Wayback machine[网站时光机]中存档)。在一些实施例中，SARS-CoV-2变体属于谱系A、B、B.1、B1.1、B1.177或B.1.1.7中的一种(如Rambaut等人,Nature Microbiology[自然微生物学]第5卷,第1403-1407页(2020)提出的)。在一些实施例中，SARS-CoV-2变体选自由以下组成的组：501.V2变体(也称为501.V2,20H/501Y.V2(以前称为20C/501Y.V2)、VOC-202012/02(PHE)；谱系B.1.351或“南非变体”)；簇5(丹麦国家血清研究所(SSI)也将其称为ΔFVI-spike，据信是从貂中传播的)；谱系B.1.1.207；谱系B.1.1.7或“受关注的变体202012/01”或“UK变体”(参见Chand等人,“Investigation of novel SARS-COV-2variant,Variant of Concern 202012/01[调查新的SARS-COV-2变体，受关注的变体202012/01],Public Health England[英国公共卫生部])；谱系B.1.429/CAL.20C；谱系B.1.525(英国公共卫生部(PHE)也将其称为VUI-202102/03，以前称为UK1188)；以及谱系P.1(英国公共卫生部也将其称为Concern 202101/02变体，并且Nextstrain也将其称为20J/501Y.V3)；谱系B.1.1.317；谱系B.1.1.318和谱系P.3。在一些实施例中，SARS-CoV-2变体是携带以下突变中的一个或多个的变体：D614G；E484K；N501Y；S477G/N；P681H。
患有病毒感染的受试者可能出现与病毒感染相关的严重病症。使用本发明的吸入组合物治疗患有呼吸道病毒感染的受试者可预防或治疗选自以下的病症：与呼吸道病毒感染相关的脓毒症、肺炎或器官衰竭。在一些实施例中，吸入组合物用于治疗或预防由呼吸道病毒感染引起或与其相关的脓毒症。在一些实施例中，吸入组合物用于治疗或预防由呼吸道病毒感染引起或与其相关的肺炎。肺炎可以是病毒性肺炎或细菌性肺炎(例如，由受试者的肺中的继发性细菌感染引起或与其相关的细菌性肺炎)。因此，本发明的吸入组合物可用于治疗或预防病毒性肺炎。
在某些实施例中，病毒感染由流感病毒引起或与其相关。流感病毒可以是A型、B型、C型或D型。A型和B型病毒在人类中引起季节性流行病，而A型病毒已经引起几种流行病。C型病毒通常引起轻度疾病，并且通常与流行病不相关。D型病毒主要影响牛。可以基于表面蛋白血凝素(H)和神经氨酸酶(N)将A型病毒分为亚型。有18种不同的血凝素蛋白(命名为H1至H18)和11种不同的神经氨酸酶蛋白(命名为N1至N11)。这给出了198种潜在的A型流感组合，但迄今为止仅检测到131种亚型。病毒感染可由选自H1N1、H1N2、H2N2、H3N2、H5N1、H7N7、H9N2、H7N2、H7N3、H10N7、H7N9和H6N1的A型流感病毒引起或与其相关。B型病毒不分类为亚型，但可以分类为谱系。B型病毒可属于B/Yamagata或B/Victoria谱系。
在某些实施例中，本发明的吸入组合物用于治疗或预防由呼吸道病毒感染引起或与其相关的细菌性肺炎(即治疗继发于病毒感染的细菌性肺炎)。因此，本发明的吸入组合物可用于治疗或预防肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)。在一个特定的实施例中，本发明的吸入组合物用于治疗或预防葡萄球菌(Staphylococcal)肺炎。
氯硝柳胺的抗菌作用可提供特别有效的治疗继发性感染诸如细菌性肺炎。本发明的吸入组合物具有抗病毒和抗菌作用，因此可以用于治疗肺中的病毒和细菌病原体。因此，还提供了本发明的吸入组合物用作抗菌剂以靶向继发于呼吸道病毒感染的细菌感染(例如革兰氏阳性细菌)。因此，本发明的吸入组合物可用于治疗患有呼吸道病毒感染的受试者的继发性细菌感染，其中继发性细菌感染由革兰氏阳性细菌、优选选自以下中的一种或多种的细菌引起或与其相关：金黄色葡萄球菌(例如MRSA)、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌。
某些实施例提供了本发明的吸入组合物用作抗细菌剂以靶向可以引起或导致肺炎的一种或多种细菌。在该实施例中，所靶向的细菌可以是革兰氏阳性细菌，例如金黄色葡萄球菌(例如MRSA)、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌中的一种或多种。因此，吸入组合物根除或减少可以引起或导致肺炎的细菌。
在某些实施例中，本发明的吸入药物组合物用于治疗或预防选自发热(例如38℃以上的发热)、咳嗽、喉咙痛、呼吸短促、呼吸窘迫和肺炎的病毒感染(例如SARS-CoV-2)的症状。合适地，吸入组合物用于治疗严重急性呼吸综合征(SARS)。
在某些实施例中，本发明的吸入药物组合物可用于减少由呼吸道病毒感染引起或与其相关的粘液产生和/或分泌。
在某些实施例中，本发明的吸入药物组合物可用于减少由呼吸道病毒感染引起或与其相关的支气管收缩。
患有病毒感染、特别是呼吸道病毒感染的受试者容易出现肺部真菌感染。已知氯硝柳胺具有抗真菌特性(Garcia等人,Sci Rep.[科学报告]2018；8(1):11559，发布于2018年8月1日，doi:10.1038/s41598-018-29973-8)。因此，本发明的吸入组合物可提供对与病毒感染相关的机会性肺部真菌感染的有效治疗。在某些实施例中，提供了用于治疗由病毒感染(例如呼吸道病毒感染)引起或与其相关的肺部真菌感染的本发明的吸入药物组合物。真菌感染可以是机会性肺部真菌感染。在某些实施例中，肺部真菌感染是念珠菌属(Candida Spp.)感染，例如白色念珠菌(Candida albicans)。在某些实施例中，本发明的吸入组合物用于治疗或预防肺念珠菌病。特别地，本发明的吸入组合物用于治疗或预防患有病毒感染、优选呼吸道病毒感染的受试者的肺念珠菌病。
氯硝柳胺具有抗炎特性，因此本发明的吸入药物组合物可有益于减轻、改善或治疗与呼吸道病毒感染相关的肺部炎症，因为氯硝柳胺具有抗病毒和抗炎特性。
在某些实施例中，提供了用于治疗或预防由呼吸道病毒感染引起或与其相关的肺部炎症的本发明的吸入药物组合物。例如，吸入组合物可减少或消除呼吸道中的组织的炎症。
在某些实施例中，吸入药物组合物用于预防或抑制由病毒感染引起或与其相关的促炎细胞因子。因此，吸入的药物组合物可降低CRP、白细胞、IL1B、IL-6、IL-10、IL-2、IFNγ、IP10、MCP1、GCSF、IP10、MCP1、MIP1A和/或TNFα中的一种或多种，特别是降低血清CRP。在一些实施例中，吸入药物组合物降低患有呼吸道病毒感染的受试者的IL-6水平。
病毒感染(包括但不限于SARS CoV-2)可以诱导细胞因子释放综合征(CRS)(也称为细胞因子风暴综合征(CSS))。CRS是由病毒感染触发的全身炎性反应，并且导致大量促炎细胞因子突然释放，这会损害器官，特别是可能导致呼吸衰竭。最近的出版物表明在一些患有严重形式的COVID-19的患者中观察到细胞因子风暴(Zhang等人,InternationalJournal of Antimicrobial Agents[国际抗微生物剂杂志]https://doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2020.105954，2020年3月29日可在线获得)。在一些实施例中，提供了用于预防、抑制或治疗患有呼吸道病毒感染的受试者(例如感染SARS-CoV2、SARS或MERS的受试者)的细胞因子释放综合征的本发明的吸入组合物。
在某些实施例中，吸入药物组合物对病毒具有抗病毒作用。例如通过防止或抑制病毒复制。不希望受理论束缚，据信吸入组合物可以通过抑制或预防至少患者呼吸道中的病毒复制而充当抗病毒剂。因此，在一些实施例中，本发明的组合物用于预防或抑制患有病毒感染(例如呼吸道病毒感染)的受试者的病毒复制。在一些实施例中，组合物可减少或消除受试者的病毒载量。
应当理解，使用本发明的可吸入组合物联合治疗多种病症提供了优于使用多种疗法的显著优点。
在本发明的一些实施例中，气雾剂或溶液用作抗病毒剂和抗炎剂和/或抗菌剂。因此，在一些实施例中，气雾剂或溶液用作至少双重疗法或三重疗法。因此，在一些实施例中，气雾剂或溶液可以用于靶向病毒感染和炎症和/或细菌感染以治疗例如冠状病毒感染诸如SARS中的RTI。在一些实施例中，气雾剂或溶液用作抗病毒剂、抗炎剂和抗菌剂以治疗例如冠状病毒感染诸如SARS中的RTI。
在本发明的一些实施例中，可吸入组合物作为抗病毒剂用于治疗病毒感染(例如预防病毒复制)并且进一步提供以下另外的治疗效果中的一种或多种：
抗菌；
抗炎；
减少或预防支气管收缩/引起支气管扩张；以及/或者
减少粘液产生和/或分泌。
感染呼吸道病毒感染的受试者在病毒感染的早期阶段可能是无症状的。对无症状受试者的治疗可预防病毒感染变成有症状的和/或发展为与呼吸道病毒感染相关的疾病或医学病症。因此，还提供了用于治疗感染病毒的无症状受试者的本发明的吸入药物组合物。在一些实施例中，病毒是呼吸道病毒(例如SARS病毒，诸如SARS-CoV-2)。
卤化水杨酰苯胺诸如氯硝柳胺可提供特别有效的抗病毒感染诸如SARS-CoV-2的治疗。有证据表明，氯硝柳胺具有广谱抗病毒特性，包括抗SARS-CoV-2(Xu等人,J ACSInfect Dis[ACS传染病杂志]2020；Wu等人,Antimicrob Agents Chemother[抗微生物剂化疗]2004:48:2693-6)。有人提出，氯硝柳胺的作用方式可包括抑制自噬作用、病毒复制和受体介导的SARS-CoV2内吞作用(Pindiprolu等人,Medical Hypotheses[医学假说]140(2020)109765)。
一些病毒感染在感染病毒的受试者出现症状之前就具有传染性，例如SARS-Cov-2就是这种情况。这可导致病毒在群体中的传播率高，因为被感染的宿主不知道他们具有传染性，并且会无意中通过社会接触等传播病毒。在群体中包含初始感染后，无症状受试者传播病毒可能特别危险，因为无症状但具有传染性的受试者可能会引发感染复发和“第二波”病毒感染。使用本发明的吸入组合物来治疗患有病毒感染的无症状受试者可通过例如减少或消除受试者的病毒和/或加速受试者的血清转化(即受试者的免疫系统产生针对病毒的抗体)来减少受试者具有传染性的时间。使用本发明的吸入组合物进行治疗可减少病毒从受试者脱落，从而使受试者的传染性降低。病毒脱落是指以例如由咳嗽或打喷嚏产生的粘液液滴形式离开受试者身体或存在于其他排泄物中的病毒的数量。
因此，在一些实施例中，提供了用于治疗无症状受试者的病毒感染的本发明的吸入组合物，其中该治疗减少或消除受试者的病毒载量。在一些实施例中，提供了用于治疗无症状受试者的病毒感染的本发明的吸入组合物，其中该治疗加速受试者的血清转化。在一些实施例中，提供了用于治疗无症状受试者的病毒感染的本发明的吸入组合物，其中该治疗减少病毒的受试者间传播。在一些实施例中，提供了用于治疗无症状受试者的病毒感染的本发明的吸入组合物，其中该治疗减少病毒脱落。病毒感染可以是SARS-CoV-2。
在一些实施例中，提供了用于治疗无症状或轻度症状受试者的SARS-CoV2的本发明的吸入组合物。受试者的SARS-CoV-2检测结果可能呈阳性(例如经由PCR测试)。治疗可在检测结果呈阳性后0-5天内或1-3天内开始(第0天是受试者接受检测结果的那天)。在一些实施例中，受试者未服用或最近未服用(例如在前30或60天内)免疫抑制药物。受试者可能不出于较高SARS-CoV-2风险。向无症状受试者或轻度症状受试者施用吸入组合物可预防或降低受试者发生轻度、中度或重度COVID-19的症状、特别是中度至重度COVID-19的症状的风险。对无症状或轻度症状受试者的治疗也可减少受试者家庭中感染SARS-CoV-2的人数。在一些实施例中，向无症状或轻度症状受试者施用吸入组合物可减少从基线到第10天的时间加权变化(减少)。换句话说，吸入组合物可降低疾病进展的风险或预防疾病进展。在无症状受试者中，“基线”是指受试者没有症状。
可使用已知的测试方法(例如检测唾液样品中病毒的存在的测试，诸如实时逆转录聚合酶链式反应(rRT-PCR)或PCR方法)来检测无症状受试者的病毒感染。在一些实施例中，提供了用于治疗或预防已经接受病毒感染诸如COVID-19(SARS-CoV-2)的阳性诊断的受试者的本发明的配制品。受试者可能患有轻度、中度或重度COVID-19，或者他们可能是无症状的。还设想了对没有接受SARS-CoV-2感染存在的阳性测试或没有进行测试的受试者的预防性治疗。
COVID-19的症状是非特异性的，并且该疾病表现可以从没有症状(无症状)到严重肺炎和死亡。COVID-19的临床进展显示出双阶段模式。第一阶段以发热、咳嗽、疲劳和其他全身症状如头晕和头痛、呼吸短促、鼻溢、喉咙痛、腹泻和食欲不振为特征。在大多数患者中观察到发热，估计中位持续时间为10天(症状发作后95置信区间)(Chen等人.Clinicalprogression of patients with COVID-19in Shanghai,China.[中国上海COVID-19患者的临床进展]J Infect[感染杂志].2020；80(5):e1-e6.)。
随着疾病进展到第二阶段，大多数患者的症状开始缓解，并且放射学改善并行发生。随着体温降低，患者的上呼吸道样品也变为PCR阴性(病毒清除的平均时间为约11天)。然而，有一小部分患者(约5％)出现呼吸衰竭、感染性休克和多器官功能障碍，从而导致病死率更高。持续发热、肺损伤和疾病进展可以部分地由不受控制的病毒复制来解释。COVID-19的持续存在也可能诱导与细胞因子风暴相关的过度但异常的非有效反应。
如本文所用的患有“轻度”COVID-19的患者是在下述改良WHO量表上评分为2、3或4的受试者。受试者可走动或住院。他们表现出COVID-19症状可以包括发热、咳嗽、喉咙痛、不适、头痛、呼吸短促、肌肉疼痛、味觉和/或嗅觉丧失、眼部症状(例如结膜充血、结膜水肿、泪溢或分泌物增加中的一种或多种)和/或不同强度的胃肠道症状(例如腹泻)，并且他们可能没有病毒性肺炎体征或有轻微的病毒性肺炎体征。他们可表现出日常活动受限。他们不需要氧治疗。
如本文所用的患有“中度”COVID-19的患者是在下述改良WHO量表上评分为5的受试者。受试者因COVID-19住院，需要通过面罩或鼻塞吸氧进行治疗。他们表现出的症状可以包括发热、咳嗽、喉咙痛、不适、头痛、肌肉疼痛和/或不同强度的胃肠道症状。他们患有中度肺炎。
如本文所用的患有“重度”COVID-19的患者是在下述改良WHO量表上评分为6、7或8的受试者。这些受试者需要重症监护和/或机械通气或体外膜氧合。此类患者可能表现出血氧不足、肺外过度炎症、严重肺炎、血管麻痹、呼吸衰竭、心肺溃堤和/或全身器官受累。全身炎症的标志物(例如IL-2、IL-6、IL-7、粒细胞集落刺激因子、巨噬细胞炎性蛋白1-α、肿瘤坏死因子-α、C-反应蛋白、铁蛋白和/或D-二聚体)可能升高。
在本文所述的任何实施例中，受试者可住院。
通过在病毒复制高但尚未导致严重组织损伤的阶段靶向患者，该治疗可减少症状的持续时间、使传染性最小化并且防止严重程度和不良结局的进展。
因此，在一些实施例中，提供了用于治疗患有轻度或中度COVID-19的受试者的病毒感染的本发明的可吸入药物组合物。在一些实施例中，患有轻度或中度COVID-19的受试者住院。在一些实施例中，受试者患有中度COVID-19并住院。在一些实施例中，受试者患有轻度COVID-19，并且鼻内施用组合物。在一些实施例中，受试者患有中度COVID-19，并且鼻内施用组合物。在一些实施例中，受试者患有中度COVID-19，并且通过吸入口内施用组合物。在一些实施例中，受试者患有中度COVID-19，并且通过吸入鼻内和口内施用组合物。在一些实施例中，受试者患有轻度或中度COVID-19并住院，其中通过吸入鼻内和口内施用可吸入组合物。组合物的施用可用于预防疾病例如从轻度进展到中度或从中度进展到重度COVID-19或者降低其可能性。在一些实施例中，将受试者识别为处于疾病进展的风险中。例如，可将受试者识别为处于COVID-19从轻度进展到中度或从中度进展到重度的风险中。在一些实施例中，可将受试者识别为处于受试者在改良WHO量表上的评分增加的风险中，如下所述。熟练的医生或护士将能够识别处于风险中的受试者。例如，可基于一种或多种因素来识别处于疾病进展的风险中的受试者，这些因素可包括临床参数(诸如受试者的呼吸状态、血氧饱和度、温度、流感样症状的严重程度、胸部X射线或其他扫描、炎性生物标志物水平、病毒载量和潜在病症的存在)和任选的非临床参数(诸如受试者的年龄和性别)。
治疗可减少或消除受试者的病毒载量(例如痰液或血液中的病毒载量)，例如，治疗可减少鼻腔中的病毒载量。治疗可减少受试者的肺中的病毒载量。在一些实施例中，相对于未用本发明的配制品治疗的患者，治疗减少了治愈疾病所花的时间。治疗可避免患有轻度COVID-19的患者需要住院治疗，或减少患有中度COVID-19的患者的住院时间。治疗可防止疾病进展。例如，治疗可防止COVID-19从轻度进展到中度或从中度进展到重度。治疗可防止受试者在改良WHO量表上的评分增加，如下所述。治疗可减少或消除对氧疗的需要。治疗可增加血氧水平。治疗可预防呼吸衰竭或降低其风险。治疗可减少从受试者清除病毒的时间。治疗可减少或消除病毒定植。例如，治疗可减少或消除鼻腔中的病毒定植。治疗可减少或消除肺中的病毒定植。
在一些实施例中，提供了用于治疗患有中度COVID-19的受试者的病毒感染的本发明的可吸入药物组合物。
相对于未用本发明的配制品治疗的患者，治疗可减少患者在重症监护中所花的时间。在一些实施例中，治疗改善了共同施用的药物诸如抗炎剂的功效。治疗可减轻症状的严重程度、减少恢复时间和/或疾病的长期影响。
在一些实施例中，提供了用于治疗病毒感染(例如COVID-19)的本发明的可吸入药物组合物，其中所述治疗包括以下中的一种或多种：减轻流感样体征和症状(例如体温)的严重程度；改善受试者的呼吸状态(血氧饱和度)，如通过血氧定量评估的；改善NEWS2评分；改善改良WHO顺序量表、FDA COVID-19问卷(表13)和/或WHO 11分顺序量表(表14)上的评分，如本文所述；减轻或消除肺部炎症和/或水肿；改善呼吸功能；改善呼吸短促；减少病毒清除的时间；减少出院时间；减少病毒载量；降低炎性血清标志物(例如CRP、原降钙素)。在一些实施例中，治疗使得受试者在改良WHO顺序量表上的评分具有1至6级、2至5级或3至4级的改善。在一些实施例中，治疗使得受试者的NEWS2评分具有1至6分、2至5分或3至4分的改善。
还提供了预防性治疗，其中将本发明的吸入组合物施用于受试者以预防感染病毒或降低其风险。在某些实施例中，提供了用于降低受试者感染病毒的风险或预防受试者感染病毒的本发明的吸入组合物。此类预防性治疗可特别有益于可能暴露于高水平病毒的受试者，例如医生、护士、社会工作者和正在照顾病毒感染者或可能更有可能与病毒感染者接触的其他医疗保健工作者；以及例如大量暴露于一般群体的工作者，诸如教师、幼儿园工作人员、运输工作者和营业员。
在一些实施例中，预防性地施用本发明的配制品。在一些实施例中，将配制品预防性地施用于已经或怀疑已经与被诊断为感染SARS-CoV-2的人的密切接触的受试者。例如，被识别为已经处于暴露于病毒的风险中的被感染个体的家人、同事和/或其他密切接触者可施用本发明的配制品作为预防性治疗。被感染个体的密切接触者可经由跟踪和追踪程序(诸如政府运营的程序)来识别。在怀疑暴露于被感染人之后对受试者的预防性治疗可有益于防止病毒的进一步传播。在一些实施例中，受试者在暴露于或怀疑暴露于被感染个体后不超过7天、不超过6天、不超过5天、不超过4天、不超过3天、不超过2天或不超过24小时开始预防性治疗。密切接触者可以是被识别为已经与被感染个体密切接触的受试者，并且包括例如与被感染个体共用家、办公室、学校或交通工具的受试者、已经与被感染个体一起参加运动或其他社交活动的受试者以及可能在公共空间(诸如餐厅、酒吧、咖啡馆、交通枢纽、图书馆、医院或其他医疗设施或商店)与被感染个体密切接触的受试者。优选地，预防性治疗可鼻内施用。预防性治疗可施用于一般公众，例如在流行病的情况下。
本文所述的治疗和预防性治疗还可特别有益于处于较高COVID-19风险的受试者。这些受试者包括：患有现有疾病或病症的受试者，诸如糖尿病(诸如I型或II型糖尿病，特别是控制不良的糖尿病)、癌症、心脏病(诸如心力衰竭、冠状动脉疾病和心肌病)、高血压(特别是控制不良的高血压)、脑血管疾病、血管炎、SCID、镰状细胞病(包括镰状细胞贫血)、地中海贫血、肺纤维化、间质性肺病、慢性肺病(诸如COPD、哮喘(特别是中度至重度哮喘)和囊性纤维化)、肺气肿、支气管炎、肾病(包括慢性肾病、糖尿病性肾病、膜性肾病和肾小球疾病，诸如肾小球性肾炎、微小病变性肾病、局灶性节段性肾小球硬化、IgA肾病、原发性膜性肾病、膜性增生性肾小球性肾炎和狼疮性肾炎)、慢性肝病、肝炎、基因免疫性疾病、自身免疫性疾病(包括系统性红斑狼疮(SLE)、抗GBM、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、结缔组织疾病、脊柱关节炎、风湿性多肌痛)、炎性肠病(包括克罗恩病和溃疡性结肠炎、乳糜泻、再生障碍性贫血、艾迪生氏病、格雷夫斯氏病、桥本甲状腺炎、重症肌无力、自身免疫性血管炎、恶性贫血和舍格伦氏综合征)、肝炎、影响脑或神经的病症(诸如帕金森病、运动神经元病、多发性硬化、痴呆、精神疾病或大脑性麻痹；以及患有中风、肌肉萎缩病症或严重或深度学习障碍的受试者。处于高或中COVID-19风险的受试者还包括例如由于疾病、病症或治疗而具有减弱的免疫系统的受试者。这些受试者包括：接受过组织移植诸如器官移植的受试者(包括肾脏、肝脏、肺和/或心脏移植接受者)；切除了器官(例如他们的脾脏)的受试者；正在接受(或接受过)化学疗法、免疫疗法、抗体疗法或放射疗法的受试者；正在接受蛋白激酶抑制剂或PARP抑制剂的受试者；正在接受(或接受过)癌症治疗的受试者；接受过血液、骨髓或干细胞移植(例如在最近6-12个月内)的受试者；免疫功能受损的受试者，包括服用免疫抑制剂(例如环孢菌素、他克莫司、硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯或麦考酚酸、贝拉西普、甲氨蝶呤、托珠单抗、阿巴西普、来氟米特、泼尼松龙、抗TNF(例如英夫利昔单抗、阿达木单抗、依那西普)、环磷酰胺、利妥昔单抗或阿仑单抗)或类固醇)的受试者；患有HIV或AIDS的受试者；进行透析(包括血液透析和腹膜透析)的受试者；非常肥胖(BMI为至少30、至少40或更高)的受试者；以及怀孕的受试者。还包括吸烟的受试者；疗养院居住者；在疗养院为年龄50、60、65、70、75或80岁以上的成人工作的工作人员；一线医疗保健和/或社会护理工作者；黑人和少数民族(BAME)群体；以及年龄超过50、60或70岁的受试者，特别是年龄超过75、80、85或90岁的受试者。
因此，在一些实施例中，提供了用于降低受试者感染病毒(例如COVID-19)的风险或预防受试者感染病毒的本发明的可吸入药物组合物，其中受试者处于较高COVID-19风险，例如其中受试者选自以上定义的组。
在一些实施例中，提供了用于预防处于较高COVID-19风险的未感染受试者(诸如选自以上定义的组的受试者)的配制品。预防可用于降低受试者发生有症状或无症状COVID-19感染的风险。预防可用于降低死亡的风险和/或减轻症状的严重程度(如果受试者感染COVID-19)。预防可用于降低受试者感染中度或重度COVID-19的风险。
在一些实施例中，预防降低了受试者发生继发性感染(例如继发性细菌感染)的风险，其中受试者处于较高COVID-19风险，例如其中受试者选自以上定义的组。预防可降低继发性感染的死亡风险或减轻继发性感染的严重程度。
因此，本发明的组合物特别适合于预防性治疗较高风险组，即处于较高感染诸如COVID-19风险的受试者。“处于较高COVID-19风险的受试者”也称为“较高风险受试者”或“较高风险患者”，包括具有减弱的免疫系统(即他们的免疫功能受损)(这降低了身体对抗感染和其他疾病的能力)的受试者。它还降低了受试者从感染中恢复的能力。较高风险受试者可能具有较高感染COVID-19的风险和/或较高患上更严重和/或更长持续时间感染的风险。较高风险受试者也可能更易遭受不同类型的感染，例如继发性感染。
在一些人中，COVID-19可能会在感染已经消失后引起持续数周或数月的症状。这被称为“长COVID”或“COVID-19后综合征”。患有长COVID的受试者可能在感染已经消失后经历症状至少4、6、8、10、12、16、20或24周或者至少3、4、6、8、10、12个月。受试者可能经历症状至少8周或至少12周。长COVID的症状可包括以下中的一种或多种：极端疲惫(疲劳)；呼吸短促；胸痛或胸闷；记忆力和/或注意力问题(“脑雾”)；入睡困难(失眠)；头晕；手和/或脚有刺痛感(“钉刺和针刺”)；关节疼痛；抑郁；焦虑；耳鸣；耳朵痛；恶心；腹泻；胃痛；没有食欲；温度升高；心悸；胸痛；关节和/或肌肉疼痛；咳嗽；头痛；喉咙痛；味觉和/或嗅觉改变；皮疹；或者脱发。
在一些实施例中，提供了用于治疗、预防或减少长COVID发病率的本发明的配制品。用本发明的配制品治疗可减少长COVID的持续时间和/或减少长COVID的症状的数量和/或减轻其严重程度。
在某些实施例中，提供了用于治疗受试者的病毒感染(例如COVID-19)的本发明的组合物，其中受试者选自以上定义的组。在一些实施例中，组合物鼻内施用。
在一些实施例中，所述治疗包括与另外的治疗剂或预防剂组合施用本发明的可吸入药物组合物。另外的治疗剂或预防剂可以是抗病毒剂(例如瑞德西韦)、抗炎剂(例如类固醇，诸如地塞米松)、免疫抑制剂、中和抗体或抗血栓剂。组合疗法可特别有益于患有严重病毒感染(例如严重COVID-19)的受试者。
细菌感染
在一些实施例中，本文所述的组合物和方法用于治疗细菌感染，例如肺部细菌感染。细菌感染可以是原发性感染(即受试者患有的原发性或唯一疾病)，或者细菌感染可以是与另一种(原发性)感染(例如病毒感染)或炎性疾病相关的继发性感染。
在一些实施例中，本文所述的组合物和方法用于治疗或预防患有慢性肺部病症(诸如囊性纤维化(CF)、非囊性纤维化支气管扩张(非CFBE)、慢性阻塞性肺病(COPD)或非结核分枝杆菌(NTM)肺部感染)的受试者的肺中的细菌感染。
在一些实施例中，细菌感染由革兰氏阳性细菌引起，诸如：白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae)、溃疡棒状杆菌(Corynebacterium ulcerans)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、米勒链球菌(Streptococcus milleri)；链球菌属(G组)；链球菌属(C/F组)；粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)、中间葡萄球菌(Staphylococcusintermedius)、猪葡萄球菌(Staphylococcus hyicus)猪亚种、溶血葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)、人葡萄球菌(Staphylococcus hominis)和解糖葡萄球菌(Staphylococcus saccharolyticus)。在一些实施例中，细菌是革兰氏阳性厌氧细菌，非限制性实例包括艰难梭菌(Clostridium difficile)、产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)、破伤风梭菌(Clostridium tetini)和肉毒梭菌(Clostridium botulinum)。在一些实施例中，细菌感染由耐酸细菌引起，非限制性实例包括结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)、胞内分枝杆菌(Mycobacterium intracellulare)和麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)。在一些实施例中，细菌感染由非典型细菌引起，非限制性实例包括肺炎衣原体(Chlamydiapneumoniae)和肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)。
在一些实施例中，细菌感染由选自以下的细菌引起：金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和化脓性链球菌。
细菌性皮肤感染
还提供了用于治疗(优选地局部治疗)由革兰氏阳性细菌引起或与其相关的皮肤感染的本发明的组合物。
在一些实施例中，本发明的组合物用于治疗脓疱疮、须疮、浅表性毛囊炎、甲沟炎、红癣、痤疮、继发感染的皮肤病、痈、疖、臁疮、蜂窝组织炎、丹毒、伤口的坏死性筋膜炎和继发性细菌性皮肤感染、皮炎、疥疮、糖尿病溃疡、酒渣鼻或银屑病。例如，本发明的组合物可用于局部治疗特应性皮炎损伤，其中所述损伤被革兰氏阳性细菌感染。
在一些实施例中，本发明的组合物用于局部预防或治疗由革兰氏阳性细菌引起或与其相关的外耳感染。
革兰氏阳性细菌可以是葡萄球菌属(Staphylococcus spp.)、链球菌属(Streptococcus spp.)或丙酸杆菌属(Propionibacterium spp.)。革兰氏阳性细菌可以是葡萄球菌属或链球菌属。革兰氏阳性细菌可选自金黄色葡萄球菌或酿脓链球菌。革兰氏阳性细菌可以是丙酸杆菌属，例如痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)。革兰氏阳性细菌可能不是丙酸杆菌，例如它不是痤疮丙酸杆菌。
在一些实施例中，革兰氏阳性细菌群体包括球菌革兰氏阳性细菌。在一些实施例中，革兰氏阳性细菌来自链球菌属或葡萄球菌属。
在一些实施例中，革兰氏阳性细菌来自链球菌属。革兰氏阳性细菌可以是选自肺炎链球菌、酿脓链球菌、猪链球菌(Streptococcus suis)、无乳链球菌或草绿色链球菌(Streptococcus viridans)的链球菌。
在一些实施例中，革兰氏阳性细菌是酿脓链球菌。
在一些实施例中，革兰氏阳性细菌来自葡萄球菌属。革兰氏阳性细菌可以是选自表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌或路邓葡萄球菌(Staphylococcuslugdunensis)的葡萄球菌。在一些实施例中，球菌革兰氏阳性细菌是金黄色葡萄球菌(例如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)。
革兰氏阳性细菌群体可包括耐抗生素革兰氏阳性细菌。革兰氏阳性细菌可以是耐抗生素菌株。例如，本文所述的革兰氏阳性细菌可耐受除卤化水杨酰苯胺以外的抗生素(例如，细菌耐受除氯氰碘柳胺、碘醚柳胺、五氯柳胺或氯硝柳胺或其药学上可接受的盐或溶剂化物以外的药物)。
革兰氏阳性细菌可耐受选自以下的药物：夫西地酸、莫匹罗星、瑞他莫林、红霉素、克林霉素和四环素(例如四环素、米诺环素或多西环素)。
革兰氏阳性细菌可耐受选自以下的药物：红霉素、克林霉素或四环素(例如四环素、米诺环素或多西环素)。
革兰氏阳性细菌可耐受选自以下的药物：夫西地酸、莫匹罗星和瑞他莫林。
细菌可耐受选自以下的药物：夫西地酸、莫匹罗星、瑞他莫林、红霉素和克林霉素。
本发明的组合物可用于使携带革兰氏阳性细菌(包括本文所述的任何革兰氏阳性细菌，例如MRSA)的受试者脱定植。这种脱定植可有效预防或减少感染向其他受试者传播，尤其是在医院环境中。脱定植还可防止由于对患者或在医疗装置诸如导管或IV管线或套管的部位进行的外科或医疗手术而引起的手术部位感染或降低其风险。因此，本发明的配制品可用于在对受试者进行外科手术之前使受试者脱定植，其中将配制品局部应用于受试者。此类外科手术包括例如选择性外科手术，例如髋关节或膝关节置换术。在一个实施例中，本发明的组合物可用于在透析之前使受试者脱定植。透析前脱定植可预防与透析相关的感染(诸如血管线感染或导管相关血流感染(CRBSI)感染)或降低其风险。可通过将包含卤化水杨酰苯胺的凝胶组合物局部施用于受试者身体上被革兰氏阳性细菌定植的部位来实现脱定植。已知细菌定植诸如MRSA的常见部位是鼻子。因此，可将本发明的配制品局部应用到鼻子。特别地，可将本发明的配制品应用到前鼻孔(鼻孔的内表面)。
真菌感染
在另一个方面，本发明的组合物用于治疗肺部真菌感染。合适地，在该实施例中，本发明的配制品通过吸入来施用。
在某些实施例中，本发明的组合物用于治疗肺部真菌皮肤感染。合适地，本发明的配制品局部应用。
真菌肺和/或皮肤感染可由念珠菌属(Candida sp.)、曲霉属(Aspergillus sp.)和/或耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii)引起。在一些实施例中，本文所述的配制品和方法用于治疗由白色念珠菌(Candida albicans)、热带念珠菌(Candida tropicalis)、克鲁斯念珠菌(Candida krusei)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus)、黄曲霉菌(Aspergillus flavus)、黑曲霉菌(Aspergillusniger)和/或耶氏肺孢子菌引起的真菌感染。
炎性疾病
在另一个方面，本发明的组合物用于治疗炎性疾病。在某些实施例中，炎性疾病是肺部炎性疾病。肺部炎性疾病包括但不限于选自以下的肺部炎性疾病：哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺纤维化、肺炎、间质性肺病、结节病、闭塞性细支气管炎、局限性肺炎、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、支气管扩张、囊性纤维化、特发性肺纤维化、辐射诱导的纤维化、硅肺病、石棉诱导的肺或胸膜纤维化、急性肺损伤、寻常型间质性肺炎(UIP)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)相关的纤维化、哈曼-里奇综合征、卡普兰综合征、煤工尘肺、隐原性纤维化肺泡炎、闭塞性细支气管炎、慢性支气管炎、肺气肿、韦格纳氏肉芽肿病、肺硬皮病、硅肺病、石棉诱导的肺和/或胸膜纤维化。
术语“肺纤维化”包括与纤维化相关的所有间质性肺病。在一些实施例中，肺纤维化包括术语“特发性肺纤维化”或“IPF”。在一些实施例中，作为非限制性实例，肺纤维化可由于吸入无机和有机粉尘、气体、烟雾和蒸汽、使用药物、暴露于放射或放射疗法以及出现诸如过敏性肺炎、煤工尘肺、化学疗法、移植排斥、硅肺病、棉屑沉着病和遗传因素等障碍造成。使用本文所述的配制品和方法来治疗或预防的示例性肺部炎性疾病包括但不限于特发性肺纤维化、继发于全身炎性疾病诸如类风湿性关节炎的肺纤维化、硬皮病、狼疮、隐原性纤维化肺泡炎、辐射诱导的纤维化、慢性阻塞性肺病(COPD)、结节病、硬皮病、慢性哮喘、硅肺病、石棉诱导的肺或胸膜纤维化、急性肺损伤和急性呼吸窘迫(包括细菌肺炎诱导的、创伤诱导的、病毒性肺炎诱导的、呼吸机诱导的、非肺脓毒症诱导的和吸入诱导的)。在一些实施例中，本发明的配制品和方法可用于治疗或预防与肺部炎性疾病相关的继发性细菌或病毒感染(例如与COPD相关的继发性细菌感染)。
在一些实施例中，本文所述的组合物和方法用于治疗或减缓哮喘的进展或预防哮喘。哮喘可与环境和遗传因素相关或由其引起。哮喘是一种常见的气道慢性炎性疾病，其以症状多变且反复出现、气流阻塞可逆和支气管痉挛为特征。症状包括喘息、咳嗽、胸闷和呼吸短促。哮喘的非限制性实例包括但不限于过敏性哮喘、非过敏性哮喘、急性重度哮喘、慢性哮喘、临床哮喘、夜间哮喘、过敏原诱导的哮喘、阿司匹林敏感性哮喘、运动诱导的哮喘、儿童发作的哮喘、成人发作的哮喘、咳嗽变异性哮喘、职业性哮喘、类固醇抵抗性哮喘或季节性哮喘。
在一些实施例中，本文所述的组合物和方法可以治疗或减缓肺部炎症的进展或预防肺部炎症。肺部炎症可与支气管炎、哮喘、肺纤维化、慢性阻塞性肺病(COPD)和肺炎的症状相关或导致这些症状。卤化水杨酰苯胺氯硝柳胺已被证明在哮喘小鼠模型中可以减少粘液产生和分泌以及支气管收缩。另外，发现氯硝柳胺是Cl-通道TMEM16A和TMEM16F的有效抑制剂，这有助于粘液和炎性介质的释放。因此，氯硝柳胺可适于治疗炎性气道疾病，诸如囊性纤维化、哮喘和COPD(Cabrita等人,JCI Insight[[临床研究杂志子刊机理解析]]2019；4(15):e128414)。
在一些实施例中，本文所述的组合物和方法用于治疗或预防囊性纤维化的临床体征和症状或与囊性纤维化相关的感染。囊性纤维化(CF)是一种遗传障碍，主要影响肺部并且涉及频繁的细菌感染。大约85％的CF患者患有慢性复发性铜绿假单胞菌感染，这显著导致肺功能下降和死亡。长期问题包括由于这些频繁的肺部感染导致的呼吸困难和咳出粘液。因此，在一些实施例中，这些配制品和方法用于治疗与囊性纤维化相关的细菌感染，诸如铜绿假单胞菌感染。在一些实施例中，这些组合物和方法用于治疗与囊性纤维化相关的细菌感染，其中该细菌感染由革兰氏阳性细菌(例如选自金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和化脓性链球菌的细菌)引起或与其相关。
在优选的实施例中，通过吸入本发明的组合物(例如通过吸入本发明的组合物的气雾剂)来治疗肺部炎性疾病。
剂量和给药方案
本发明的可吸入药物组合物的剂量和给药方案将取决于医师可容易确定的许多因素，例如病毒感染的严重程度、对初始治疗的反应性、施用方式和被治疗的特定感染。合适剂量、给药体积和给药频率的实例在上述披露内容的发明内容中阐述。
当使用吸入器(例如喷雾器)将本发明的吸入组合物施用于受试者时，并非所有装载到吸入器中的剂量都将到达肺，因为例如一些药物将夹带在装置中，一些药物可能不进入受试者的口或鼻，并且一些药物被夹带在口腔或鼻腔中且不渗透到气道(例如肺)中。提及本文所述的可吸入组合物的剂量是指装载到吸入器中或在吸入器被致动之前由吸入器计量的氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的剂量。受治疗者吸入的剂量可比致动前剂量低例如10％、15％、20％或25％。
施用于受试者的氯硝柳胺的总日剂量可包括一个或多个单位剂量。总日剂量可为5至1000mg、6至800mg、8至700mg、10至500mg、15至400mg、30至300mg、50至250mg、100至200mg或120至250mg氯硝柳胺或其药学上可接受的盐。
在一些实施例中，总日剂量为1至50mg、1.5至40mg、2至30mg、2.5至20mg、3至15mg、3.5至12mg、4至10mg、4.5至9mg、5至8.5mg、5.5至8mg、6至7.5mg或6.5至7mg卤化水杨酰苯胺或其盐(例如氯硝柳胺或氯硝柳胺乙醇胺)。在一些实施例中，总日剂量为5.6mg氯硝柳胺乙醇胺，对应于4.7mg氯硝柳胺游离碱。
可经由多种施用方式将剂量递送给受试者。在一些实施例中，可鼻内施用(例如使用鼻喷雾装置)第一剂量，并且可口内施用(例如使用喷雾器)第二剂量。应当理解，可在第二剂量之后施用第一剂量，反之亦然。例如，在其中本发明的药物组合物是溶液的形式的实施例中，可鼻内施用每个鼻孔50至250μl或100至200μl(例如130-150μl)的体积，并且可口内施用1至10ml、2至8ml或3至7ml(例如4-6ml)的体积(例如经由喷雾器)。在一些实施例中，鼻内施用每个鼻孔140μl的体积，并且口内施用3ml的体积(例如经由喷雾器)。两种溶液可每天给药两次。
本发明的药物组合物可每天施用一次或每天施用多次(例如2、3或4次)。在一些实施例中，组合物每天施用两次。
施用于受试者的每日总体积可为200μl至20ml、300μl至19ml、500μl至18ml、1ml至17ml、2ml至16ml、3至15ml、4至14ml、5ml至12ml或8ml至10ml本发明的溶液。在一些实施例中，本发明的药物组合物是含有0.1％至5％、0.5％至5％、1％至4％、1.5％至3％(例如约1％至2％)氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液。
可在连续数天或数周内将本发明的药物组合物施用于受试者。例如，可在3天至6周、7天至4周、10天至3周或14至18天的时段内每天施用组合物一次或多次。在一些实施例中，在1周至1年、2周至9个月、4周至6个月、6周至4个月或2至3个月的时间段内施用配制品。例如，可施用治疗长达6至9个月。在一些实施例中，将配制品每天两次施用于受试者持续长达10、14或28天。应当理解，给药周期将由被治疗的疾病的类型和严重程度或是否预防性施用配制品来确定。例如，对于慢性病症(例如COPD、哮喘和与囊性纤维化相关的感染)或COVID-19的中度或重度病例的治疗，治疗持续时间可更长(例如至少4周、至少6周、至少8周或至少12周)。可继续治疗直到受试者恢复。
在一些实施例中，受试者每个鼻孔鼻内施用100-200μl(例如120-180μl或130-160μl)的1％氯硝柳胺乙醇胺溶液，每天两次。在一个优选的实施例中，受试者每个鼻孔鼻内施用140μl的1％氯硝柳胺乙醇胺溶液，每天两次。另外或替代性地，受试者可施用1至10ml、2至8ml、3至6ml或4至5ml的1％氯硝柳胺乙醇胺的雾化溶液，每天两次。
应当理解，配制品的剂量和/或给药方案可由技术人员根据多种因素来选择，诸如但不限于疾病的严重程度、受试者的年龄和/或任何潜在病症的存在。
在一些实施例中，将配制品施用于受试者用于治疗或预防COVID-19。在其中受试者患有轻度COVID-19、受试者是无症状的或受试者被预防性治疗(例如高风险组中的受试者或被感染个体的密切接触者)的一些实施例中，可每天施用配制品一次或多次，持续不超过21天、不超过18天、不超过16天、不超过14天、不超过12天或不超过10天的时间段。在其中受试者患有中度或重度COVID-19的一些实施例中，可每天施用配制品一次或多次，持续至少7天、至少10天、至少14天、至少21天或至少28天的时间段。
如将理解，本节中列出的剂量和给药方案可与本发明的任何配制品一起使用。在一个优选的实施例中，在本文所述的任何剂量和给药方案中以及在该“剂量和给药方案”中使用的本发明的配制品是液体配制品，该液体配制品包含：
0.5至约5％的氯硝柳胺乙醇胺(w/w)；
95至约99.5％的PEG 400(w/w)。
组合疗法
本发明的配制品可单独使用以提供治疗效果。本发明的配制品也可与一种或多种另外的治疗剂组合使用。
在一些实施例中，另外的治疗剂选自以下中的一种或多种：
·抗病毒剂(例如瑞德西韦、HIV蛋白酶抑制剂(例如洛匹那韦或利托那韦)或3CL蛋白酶抑制剂(例如PF-07304814)；
·疫苗(例如COVID-19疫苗)，疫苗的实例包括减毒或灭活病毒疫苗、复制或非复制病毒载体疫苗、核酸疫苗(RNA或DNA疫苗)、蛋白亚单位疫苗或病毒样颗粒疫苗；
·支气管扩张药，例如短效β激动剂(例如沙丁胺醇、肾上腺素或左沙丁胺醇)或长效β激动剂(例如福莫特罗、沙美特罗或维兰特罗)；
·抗胆碱能药(例如异丙托铵)；
·白三烯调节剂(例如孟鲁司特、扎鲁司特或齐留通)；
·长效支气管扩张药(例如噻托铵)；
·抗炎剂(例如类固醇，其可以是静脉注射、口服或吸入类固醇(例如地塞米松、布地奈德))；非甾体抗炎剂(例如布洛芬、萘普生、酮洛芬或卡洛芬、COX-2抑制剂诸如塞来昔布)、抗炎抗体(例如贝那利珠单抗、度普利尤单抗、美泊利单抗、奥马珠单抗、瑞替珠单抗)；
·抗菌剂，例如革兰氏阳性或革兰氏阴性抗生素；
·抗病毒抗体(例如对冠状病毒诸如SARS-CoV-2的刺突蛋白起作用的抗体(例如LY-CoV555、LY-CoV016、AZD7442、REGN10933或REGN10987))；以及来自之前感染过病毒的受试者的抗体(例如恢复期血浆疗法)；
或者它们中任何两种或更多种的组合。
这样的组合治疗可通过同时、依次或分开给药该治疗的各个组分的方式来实现。此类组合产品采用在上文所述的治疗有效剂量范围内的本发明的配制品以及在其批准剂量范围内的其他药物活性剂。
在本文中，在使用术语“组合”的情况下，应当理解，这是指同时、分开或依次施用。在本发明的一个方面，“组合”是指同时施用。在本发明的另一个方面，“组合”是指分开施用。在本发明的另一个方面，“组合”是指依次施用。在依次或分开施用的情况下，延迟施用第二组分不应导致组合的有益作用丧失。
在其中使用组合治疗的一些实施例中，当组合时，本发明的配制品的量和其他药物活性剂的量在治疗上有效地治疗患者的靶向障碍。在这种背景下，组合量是“治疗有效量”，如果将它们组合，则足以减轻或完全缓和该障碍的症状或其他有害影响；治愈该障碍；逆转、完全停止或减缓该障碍的进展；或者降低该障碍恶化的风险。通常，此类量可由本领域技术人员通过例如从本说明书中针对本发明的配制品中存在的卤化水杨酰苯胺(例如氯硝柳胺或其药学上可接受的盐)描述的剂量范围和其他药物活性剂的批准或以其他方式公开的剂量范围开始来确定。
实例
实例1：非水性氯硝柳胺配制品
制备表1所示的可吸入组合物：
表1
Figure BDA0003955013250000511
如下制备配制品。将氯硝柳胺乙醇胺(配制品A为50mg，配制品B为150mg，配制品C为500mg)、PEG 400(配制品A为9.946g，配制品B为9.838g，配制品C为9.46g)和糖精(配制品A为4mg，配制品B为12mg，配制品C为40mg)称量到蓝盖瓶中。在室温下搅动或搅拌混合物，直到形成澄清溶液。通常，在搅拌几小时(例如1至12小时)后获得溶液。
最终配制品在进一步使用前避光保存。
也可以用类似的方法来制备表2所示的以下可吸入组合物：
表2
Figure BDA0003955013250000512
Figure BDA0003955013250000521
实例2：非水性氯硝柳胺配制品的雾化
本文披露的某些组合物可通过电子喷雾器(例如，
Figure BDA0003955013250000522
电子喷雾器(帕瑞公司(PARI)))雾化，以提供可以经由吸入施用于患者的气雾剂。
实例1的雾化配制品的药物递送效率可通过呼吸模拟来评估，并且液滴尺寸和分布模式可通过激光衍射来确定(如US 2009/0304604 A1中所述)。
实例3：临床试验
可使用本文所述的氯硝柳胺组合物(诸如实例1中定义的5％ NEN配制品)进行以下临床试验。
研究设计
1期(剂量发现)在成人健康志愿者(HV)中进行递增剂量缩放研究以测试具有根据实例1增加NEN配制品的剂量的三种配制品的安全性。
2期(患者评估)在患有中度COVID-19的成人患者中用选定剂量的NEN(在根据实例1的配制品中)进行每天四次(QID)治疗以评估安全性和探索功效的临床研究。安全性监测委员会(SMC)可以基于1期数据来调整最终给药频率。
27名健康志愿者和44名患有COVID-19的受试者可入组五个连续队列：
1期—剂量发现(3个队列)：
·队列1：9名健康志愿者，7名接受单剂量的根据实例1的0.5％ NEN配制品(4mL)，并且2名接受安慰剂。
·队列2：9名健康志愿者，7名接受单剂量的根据实例1的1.5％ NEN配制品(4mL)，并且2名接受安慰剂。
·队列3：9名健康志愿者，7名接受单剂量的根据实例1的5.0％ NEN配制品(4mL)，并且2名接受安慰剂。
2期—最终剂量评估：
·队列4：4名COVID-19患者，用根据实例1的配制品以选定浓度一天两次(BID)(2名受试者)或QID(2名受试者)治疗15天。SMC可以基于1期数据来调整最终给药频率。
·队列5：40名COVID-19患者，20名用根据实例1的配制品以选定浓度治疗，并且20名接受安慰剂，QID持续15天。SMC可以基于1期数据来调整最终给药频率。
队列1至3的筛选和入组将并行开始，而给药将顺序进行。给药将从队列1开始。一旦获得至少8名受试者的数据，安全性监测委员会(SMC)就将在队列2中的受试者开始给药前评估安全性。类似地，SMC将在队列3开始给药前审查队列2中至少8名受试者的数据。基于前三个队列的数据，SMC将选择最合适的剂量。对于所有四个HV队列，一名受试者将在第一天用根据实例1的NEN配制品(开放标签)给药，并在门诊入院时跟踪24小时以确认新剂量的安全性，如果观察到安全性问题，则SMC将参与裁定，如果没有观察到安全性问题或SMC判断继续给药是安全的，则每个队列中的剩余8名受试者可以被随机分组并以至少一小时的间隔给药(双盲)。一旦从所有1期队列获得安全性和PK数据，SMC就将评估安全性并审查PK数据以确认安全性、推荐剂量并在相关情况下确认或调整针对2期提出的QID方案。
如果受试者经历与喷雾研究产品(IP)的吸入相关的咳嗽、不适和/或疼痛(达到研究者评估它对于施用将存在问题的程度)，则研究者可决定可以在吸入IP之前施用吸入利多卡因。队列1中的第一名受试者应在没有利多卡因的情况下给药，如果在队列1或后续队列中观察到问题，则研究者可以决定对当前正在给药的队列中的剩余受试者施用利多卡因，并且SMC应随后决定是否对研究中的所有剩余IP施用实施这一措施。
在1期选择剂量并确认安全性后，2期将开始入组和治疗队列4中的患者。队列4的目的是确认给药在患者中的安全性和耐受性。为此，队列4中的所有四名受试者均将用根据实例1的NEN配制品(开放标记，无安慰剂)进行治疗并入组一个中心，以确保收集经验，并且一名研究者与SMC一起可以评估该队列的安全性。治疗将从BID治疗两名患者开始，他们将被跟踪48小时。如果观察到与IP存在可能、很可能或明确关系的安全性问题，则SMC将参与裁定。如果未观察到安全性问题，或SMC判断继续是安全的，则队列中的最后两名受试者可以开始QID治疗。一旦获得队列4中受试者的4天治疗的安全性数据，SMC就将对其进行评估，以在队列5受试者开始入组之前确认COVID-19患者的安全性。队列5中的受试者将入组随机、双盲、平行组队列中的多个中心，以确保对安全性和功效进行公正评估。
对于HV，在1期中，筛选可在开始研究治疗前进行长达21天(将在给药前1至3天收集鼻咽拭子以确认HV受试者未感染COVID-19)。对于COVID-19患者，筛查可在开始研究治疗前进行长达2天。
对于有资格入组1期的HV，他们不能是吸烟者，一般健康状况应良好并且具有正常的病史(不包括研究者判断的任何慢性疾病)，以及预测肺功能为最低80％(包括1秒用力呼气量(FEV1)、总肺活量(TLC)、一氧化碳扩散容量(DCO)、呼出一氧化氮分数(FeNO)和用脉搏血氧定量的6分钟步行测试(6-MWT))，最后，ECG和胸部X射线必须正常(详见排除标准)。
对于有资格参加2期的受试者，他们必须因SARS-CoV2检测呈阳性(可以根据当地实验室的标准进行分析)而确认的COVID-19住院。有资格的患者将患有中度疾病，其被定义为需要住院但需要不超过5L氧气(O2)/分钟，不需要通气，并且不需要收治到重症监护室(ICU)。最后，有资格的受试者目前不能用其他探索性抗病毒治疗或其他研究产品进行治疗。
在1期中，研究产品(IP)或安慰剂将是由合格的研究人员施用的单一递增剂量，之后受试者将在诊所跟踪24小时并在给药后48小时返回进行最终检查。
在2期，IP或安慰剂将由医院的护士或研究者BID或QID施用十五天。
在1期(HV)中，将在筛选时和给药后48小时进行一般身体检查和血清化学(包括炎症参数)及血液学取样。如果第一次筛选访视在给药前超过3天进行，则受试者必须在给药前1至3天来到诊所取鼻咽拭子(以确认没有感染SARS-CoV2)并取样进行血清化学和血液学。在呼吸功能方面，将基于给药前以及给药后1、3、6、12、24和48小时进行的呼吸量测定(肺活量和FEV1)以及脉搏血氧定量来评估安全性。将测量TLC、DCO和FeNO(FeNO仅在给药前测量，作为确认受试者具有正常肺功能的一部分),并将在筛选期(ICF和给药之间)和给药后第2天(给药当天指定为第0天)进行用脉搏血氧定量的6-MWT。将在给药前、给药后3、6和24小时捕获ECG，同时将在给药前、给药后1、3、6、12、24和48小时测量生命体征(全身血压、静息心率(RR)、脉搏和体温)。将在整个研究期间收集AE。最后，将在给药前和给药后48小时采集用于检测病毒和细菌的口咽拭子，用于对微生物组的潜在变化进行事后探索性分析。
在2期(患者)中，将在筛选时、给药前、第8天和第15天进行一般身体检查和血清化学和血液学取样。另外，将基于每日血氧定量测量结果和对临床呼吸状态的每日评估来评估安全性。最后，将在给药前、给药后24和48小时以及第8、15天收集ECG，并且将在整个研究期间收集AE。
将在1期中(HV)给药前、第一剂量后1/2、1、11/2、2、3、6、12和24小时以及在2期中(患者)给药前、24和48小时后以及第8天和第15天收集用于PK分析的血样。最后，将在给药前和第15天采集用于检测病毒和细菌的口咽拭子，用于对微生物组的潜在变化进行事后探索性分析。
在2期中，将基于对临床呼吸状态的每日评估、脉搏血氧定量(也收集用于安全性)和体温及其他流感症状描述来探索功效。在给药前(如果可行)、第8天和第15天，将进行6-MWT和摄氧量测量。另外，将每隔一天(并通过PT-PCR集中分析)以及第8天和第15天(通过
Figure BDA0003955013250000551
分析以检测病毒和细菌)采集鼻咽拭子，将在给药前、给药后48小时以及第8天和第15天收集用于血清炎性生物标志物分析的样品(主要标志物：CRP、白细胞；用于事后分析的探索性标志物：IL1B、IFNγ、IP10、MCP1、GCSF、MIP1A、TNFα(Huang等人,“Clinicalfeatures of patients infected with 2019novel coronavirus in Wuhan,China”,TheLancet[柳叶刀],第395卷,第102223期,第497-506页,2020年2月15日))。最后，如果在住院期间已收集胸部X射线或CT扫描，则应在第15天捕获类似图像。
如果满足以下标准72小时，则认为2期中的患者的COVID-19被治愈：
·临床呼吸状态：正常(无症状，无需氧疗)。
·无发热
·氧饱和度正常。
·连续2次鼻咽拭子的SARS-CoV-2检测呈阴性。
如果患者被治愈，则应停止IP(或安慰剂)治疗(并且如果研究者决定这样做，则受试者可出院)。受试者仍应按照事件时间表中所概述的来医院进行第15天检测(为了避免在复发的情况下传播病毒，受试者必须在第14天进行SARS-CoV2鼻咽拭子检测，并且如果确认呈阴性，才能进行第15天访视)。
当审查来自队列1至4的安全性数据时，SMC将重新评价安全性评估，并且确定该数据是否建议调整采样计划以收集评估所需的数据。
纳入标准
只有满足以下所有纳入标准的受试者才有资格：
1.签署知情同意书(ICF)。
2.在整个研究过程中禁欲或同意使用有效避孕方法的男性或未怀孕且非泌乳的女性。女性在第1天的尿β-人绒毛膜促性腺激素(hCG)妊娠测试必须呈阴性。(绝经后(绝经被定义为连续12个月没有月经期且没有其他生物学或生理学原因可以被鉴定)或输卵管结扎/子宫切除术的妇女不需要进行尿液或血清妊娠测试且不需要同意使用避孕)。可接受的节育方法如下：
·宫内避孕器放置至少3个月。
·在第1天前至少3个月且一直持续到研究完成使用稳定激素避孕药。
3.ECG正常(包括QTcF<450ms)。
另外，对于队列1、2和3(HV)：
4.签署ICF时年龄≥18岁且<65岁。
5.通常活跃，并且根据病史和身体检查来看健康状况良好。
6.给药前酒精呼气测试和药物滥用测试呈阴性。
7.预测肺功能为最低80％，包括FEV1、TLC、DCO、FeNO和用脉搏血氧定量的6-MWT。
8.胸部X射线正常。
另外，对于队列4和5(患者)：
9.签署ICF时年龄≥18岁且<80岁。
10.因SARS-CoV2检测呈阳性而确认的COVID-19住院。
11.患有中度疾病，其被定义为需要不超过5L氧气(O2)/分钟，不需要通气，并且不需要收治到重症监护室(ICU)。
12.在感染SARS-CoV-2之前，通常活跃，并且在其他方面根据病史和身体检查来看健康状况良好，如通过研究者的判断确定的。
排除标准
满足以下任一标准的受试者没有资格参与本研究：
1.在前6个月内入组NEN研究。
2.过敏或者对氯硝柳胺或相关化合物或对所用任何赋形剂或对利多卡因有显著不良反应史
3.可能干扰吸入IP的潜在病症。
4.目前有急性或慢性病症(包括COPD或其他严重呼吸疾病、CV疾病、糖尿病、肥胖症、恶性和自身免疫性疾病)，除非研究者认为临床上不相关且稳定。
5.严重肾损伤(GFR<29mL/min)或肝损伤(白蛋白降低)。
6.存在使受试者“易受伤害”(如由GCP定义)的病症或者研究者认为将干扰提供同意或遵守研究指令的能力或可能混淆对研究结果的解释或使受试者处于不当风险中的病症。
7.已知静脉穿刺困难或静脉通路不良。
另外，对于队列1、2和3(HV)：
8.IP给药前90天内的捐献或损失全血(>400mL)。
9.任何恶性肿瘤史，患有充分治疗的皮肤基底细胞/鳞状细胞癌的受试者除外。
10.在前6个月吸烟或经常使用任何形式的尼古丁产品，包括电子烟、鼻烟、嚼烟、尼古丁胶等。
11.第一剂量前24小时内饮酒。
既往或伴随疗法
12.第一剂量的根据实例1的NEN配制品前5个半衰期的任何全身和吸入疗法(允许绝经后妇女的激素替代疗法和激素避孕)。
13.第一剂量的根据实例1的NEN配制品前5个半衰期或30天(以较长者为准)内暴露于任何IP。
另外，对于队列4和5(COVID-19患者)：
14.鼻区中有活动性或急性病毒感染(除SARS-CoV-2以外)和/或细菌感染。
15.严重COVID-19，其被定义为需要超过5L氧气/分钟、通气和/或收治到ICU。
既往或伴随疗法
16.目前或既往(COVID-19诊断后)暴露于探索性抗病毒治疗或其他IP。
施用
合格的工作人员将在1期每天一次施用4mL 0.5％、1.5％、5.0％根据实例1的NEN配制品或安慰剂，并且在2期BID或QID(队列4)和QID(队列5)施用15天。
待测试的最大剂量是根据实例1的5％ NEN配制品QID。
在吸入IP的受试者经历咳嗽、不适或疼痛的情况下，可在给药IP之前施用吸入利多卡因。
通过使用prEN 13544-1认证的喷雾器进行吸入，并且将采取充分的措施以防止用喷雾器对被感染受试者给药导致SARS-CoV2扩散，例如通过使用具有间隔件或其他装置的喷雾器以确保来自受试者的呼出空气和痰液不能被雾化或通过在气密面罩内给药吸入。
研究持续时间
受试者参与研究(不包括筛选期)大约3天(对于队列1至3(HV))和长达15天(对于队列4和5(患者))(不包括正在进行的SAE或妊娠的潜在随访)。
功效变量
在2期中，功效将基于以下进行评估：
·临床呼吸状态的变化(包括需要氧疗)(每天)。
·SARS-CoV-2的根除(在鼻咽中)(每隔一天)。
·气流和血氧饱和度的变化(每天)。
·体温和其他流感症状的变化(每天)。
·6-MWT的摄氧量(第8天和第15天)。
·胸部X射线或CT扫描(第15天)。
·血清炎性生物标志物(主要标志物：CRP、收集和事后探索的其他标志物：IL1B、IFNγ、IP10、MCP1、GCSF、MIP1A和TNFα(Huang等人))的变化(第2、8和15天)。
评价的终点和标准
主要终点—第15天：
·QID治疗COVID-19患者15天的安全性评估。
次要终点：
·给药一天的HV的安全性评估。
·在每日观察以及第2天和第8天对BID或QID治疗的COVID-19患者的安全性评估。
·治疗结束时临床呼吸状态的变化(在量表上从0即无体征/症状到4即非常严重、需要插管)(每天)。
·临床呼吸状态之间的转换率(每天)。
·呼吸症状缓解的时间(每天)。
·脱离氧疗的时间(每天)。
·静息血氧饱和度的变化(每天)。
·序贯器官衰竭评估(SOFA)评分(从0到24)(每天)。
·收治到ICU的受试者比例(每天)。
·发热或其他流感症状减轻的时间(每天)。
·SARS-Cov-2根除时间(在鼻咽中测量)(每隔一天)。
·SARS-Cov-2病毒载量的变化(在鼻咽中测量)(每隔一天)。
·如通过胸部X射线或CT扫描评估的肺水肿/炎症减轻(第15天)。
·炎性血清生物标志物(CRP、白细胞)正常化(第2、8和15天)。
·6-MWT的摄氧量变化(第8天和第15天)。
探索性终点(以进行事后分析)：
·鼻咽微生物组变化(对于HV为第2天，对于患者为第15天)。
·COVID-19相关炎症的探索性血清生物标志物(IL1B、IFNγ、IP10、MCP1、GCSF、MIP1A和TNFα)。
关键PK参数：
·血液中活性药物分子的最大数量(Cmax)。
·达到最大水平的时间(Tmax)。
·血液中药物浓度随时间变化的曲线下面积(AUC)。
功效分析
探索性功效终点包括临床呼吸状态的变化、出现急性呼吸窘迫综合征的受试者比例、呼吸症状缓解的时间、脱离氧疗的时间、SOFA评分、发热或其他流感症状的减轻、肺水肿/炎症的减轻、SARS-Cov-2根除时间、主要炎性血清生物标志物(CRP、白细胞)的变化、血氧饱和度的变化，这些将呈现在表中以及用末次观察推进法(LOCF)从基线到第10天随时间变化以图形方式呈现。另外，将在基线与分类变量的每个时间点之间提供变迁表。将绘制临床呼吸状态相对于基线的变化的累积分布函数(CDF)，以确定治疗与安慰剂之间发生最佳分离的位置。
将在符合方案(PP)分析集中针对所有上述主要和次要终点仅使用观察到的病例来重复上述相同分析。PP分析集包括来自队列受试者的数据，这些受试者被随机分组并且在整个IP施用期间没有影响功效评估的重要方案偏离(不包括健康志愿者)。
实例4：对引起肺炎的细菌的抗菌作用
微生物
针对与肺部感染诸如肺炎的相关性选择细菌菌株：金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和酿脓链球菌。金黄色葡萄球菌和酿脓链球菌菌株如WO 2016/038035中所定义。
将菌株在-80℃下保存在补充有15％甘油(v/v)的Luria Bertani(LB)肉汤(金黄色葡萄球菌)或脑心浸液(BHI)(酿脓链球菌)中，并且通过在LB(金黄色葡萄球菌)或BHI(酿脓链球菌)琼脂板上分离来重新活化。将菌株在阳离子调节的Mueller Hinton(MH)肉汤(金黄色葡萄球菌)或BHI(酿脓链球菌)中培养。所有菌株均在37℃下有氧培养(对于酿脓链球菌菌株为微需氧)。
进行以下测试以体外评估氯硝柳胺的抗菌活性：
最小抑制浓度(MIC)测定
根据WO 2016/038035中描述的方法测定MIC。
结果
表3—使用上文描述的测定得到的氯硝柳胺的MIC值(以μg/mL计)。
Figure BDA0003955013250000611
氯硝柳胺对所有靶向菌株的MIC均≤0.5μg/mL。
表3中的结果表明，氯硝柳胺对一系列细菌(包括通常与肺部感染相关的细菌)有效。因此，包含氯硝柳胺的可吸入组合物可有效治疗或预防与呼吸道病毒感染相关的继发性细菌性肺部感染。表3中的数据以及显示氯硝柳胺对SARS CoV-2有活性的数据表明，本文所述的可吸入药物组合物可有效治疗或预防呼吸道病毒感染(诸如SARS CoV-2)和与呼吸道病毒感染相关的疾病(诸如COVID-19)。
实例5：2期临床试验
可使用本文所述的氯硝柳胺组合物(诸如实例1中定义的5％ NEN配制品或实例6的表8中所述的配制品)进行以下临床试验。
临床试验方案
本研究将要评估本发明的配制品在患有轻度至中度COVID-19的受试者中的安全性和功效。其主要终点是至临床改善的时间(被定义为改良WHO顺序量表改善至少2级)。本试验具有适应性设计并且包括两个中间分析：1.基于在入组和住院的前20名患者中收集的数据进行安全性分析；2.基于在治疗的前80名受试者中通过病毒载量测量的抗病毒活性进行机制证明。这些分析将由SMC进行，SMC将建议作出以下两个决定：授权在家中治疗患者和决定完成研究。
II期研究将集中于主要作用方式是防止病毒复制的有可能对药物有反应的群体：因中度COVID-19住院的患者以及不需要住院的具有流感样体征和症状的受试者(轻度COVID-19)。
所有入组的受试者将以每天两次的程序接受本发明的配制品或安慰剂，包括在每个鼻孔中喷雾150μL的研究产品，随后喷雾6mL的研究产品。所有受试者的治疗持续时间为14天，即使在临床治愈的情况下也是如此。在表现出COVID-19的体征和症状恶化的患者中，除非满足排除标准，例如需要在重症监护室机械通气或住院，否则治疗应保持不变。
为了证实本发明的配制品的安全性，本研究中包括的前20名受试者将在治疗的第一天住院(由研究者决定并根据呼吸或医学状态可以延长住院)。SMC将分析在这些受试者中生成的所有安全性数据，并就不需要住院的受试者在家中由护士施用治疗的安全性提出建议。
在80名受试者完成研究后(该数量在统计输入后进行修订)，将对这些受试者进行软数据库锁定，并且将进行分析以通过基于病毒清除的时间(经由咽拭子或唾液取样测量，将确认最敏感和最特异的测试)确认对本发明的配制品的抗病毒终点的功效来提供机制证明。DMC将审查该分析的数据，如果没有发现抗病毒作用，则DMC可能会建议停止该研究，因为该研究是徒劳的。虽然机制分析的证明正在进行中，但其余受试者的招募将继续进行。
研究群体
有资格参加本研究的受试者的确认感染SARS-CoV-2的检测必须呈阳性，并且出现COVID-19的体征和症状。他们目前不能用其他抗病毒治疗或其他研究产品进行治疗。允许标准护理治疗，并且应记录为伴随治疗。患有严重且不稳定的伴随病状的患者、需要有创机械通气或体外膜氧合的患者以及在重症监护室住院的患者不能入组。
产品施用
在本研究中，研究产品将由合格的人员在家中或在受试者被隔离收治的中心或在医院进行施用。合格的人员是专门接受过产品及其潜在风险培训的医师、医学生或护士。
功效评估
抗病毒功效将通过SARS-CoV-2滴度来评估，这些滴度通过PT-PCR从在基线处和每天直到D14收集的唾液或鼻咽样品中确定(最敏感和最特异的测试仍有待确认)。
所有受试者的临床功效将基于流感样症状评分(由研究者和患者进行)、血氧定量、NEWS2评分和COVID-19严重程度(基于顺序量表)的评估进行。顺序量表源自WHO委员会定义的用于临床改善的量表，并且用于瑞德西韦研究。然而，该量表必须适于捕获更轻的严重程度。
NEWS2评分基于简单的累积评分系统，其中当患者在医院就诊或被监测时，将评分分配给常规实践中已经记录的生理测量结果。六个简单的生理参数构成了评分系统的基础：呼吸率、氧饱和度、收缩压、脉搏率、意识水平、体温(参见下文)。
另外，将使用FDA指南中定义的指标：
-全因死亡率
-呼吸衰竭(即需要机械通气、ECMO、无创通气或高流量鼻插管氧递送)
-基于明确定义和特定临床标准需要重症监护室(ICU)级护理
-需要住院
-持续临床恢复(例如症状消退)—胸部x射线(或其他成像，例如CT扫描)和血清炎性生物标志物(主要标志物：CRP)将被视为探索性量度。
在病毒感染的活跃期不能进行急性呼吸功能测试。然而，如果患者情况允许，这些测试将在专门的呼吸单元中在病毒清除后、在治疗停止后两周和一个月进行。
受试者的数量
本研究将入选大约350名受试者(确切数量可在统计输入后确定)，以确保能够很好地代表轻度至中度COVID-19的不同水平的疾病严重程度。将通过仔细选择研究中心和参与医院单位来确保招募足够数量的患有轻度或中度COVID-19的受试者。
中期分析所需的样本量基于这样的假设，即与安慰剂相比，临床相关和医学上有意义的益处被定义为病毒清除的平均时间(被定义为连续2次阴性检测的第一天)有至少4天的差异。
纳入标准
只有满足以下所有纳入标准的受试者才有资格：
1.年龄≥18岁且<80岁
2.在整个研究过程中禁欲的男性或未怀孕且非泌乳的女性。女性在第1天的尿β-人绒毛膜促性腺激素(hCG)妊娠测试必须呈阴性。(绝经后或输卵管结扎/子宫切除术的妇女不需要进行尿或血清妊娠测试且不需要同意使用避孕。)
3.能够理解并提供签署的知情同意书。
4.通过鼻咽拭子或唾液测试确认感染了SARS-CoV-2并且表现出COVID-19的轻度至中度体征和症状。
排除标准
满足以下任一标准的受试者没有资格参与本研究：
1.在前6个月内入组氯硝柳胺研究
2.对氯硝柳胺过敏或者对氯硝柳胺或相关化合物或所用任何赋形剂有显著不良反应史。
3.可能干扰吸入IP的潜在病症。
4.目前有急性或慢性不稳定病症(包括呼吸疾病、CV疾病、糖尿病、肥胖症)，除非研究者认为临床上不相关。
5.存在研究者认为将干扰提供同意或遵守研究指令的能力或可能混淆对研究结果的解释或使受试者处于不当风险中的病症。
6.除SARS-CoV-2以外的活动性或急性感染，包括细菌重复感染。
7.重度COVID-19，需要机械通气或收治到重症监护室。
既往或伴随疗法
8.第1天前一个月接受全身抗病毒治疗或其他研究产品。
9.在第1天前三个月接受抗癌或免疫抑制药物。
测试产品、剂量、施用方式和治疗持续时间
护士、专门的医学学生或研究者将在每个鼻孔中施用150μL的本发明的配制品或安慰剂，随后喷雾6mL的本发明的配制品或安慰剂，每天两次，持续最多14天。
研究持续时间
受试者参与研究(不包括筛选期)14天，如果呼吸功能仍异常，则另外14天随访期延长至28天。
功效变量
抗病毒功效将基于以下进行评估：
·SARS-CoV-2的根除(在鼻咽中)
·病毒载量
临床功效将基于以下进行评估：
·改良WHO顺序量表的变化
·流感样体征和症状的严重程度(包括发热)
·通过血氧定量评估的呼吸状态的变化(血氧饱和度)
·NEWS2评分的变化
·胸部x射线(或其他成像，例如CT扫描)异常
·血清炎性生物标志物(主要标志物：CRP)的变化
·随访期结束时的呼吸功能状态
·呼吸短促问卷与圣乔治呼吸问卷
·将进行特定的呼吸测试以评估肺功能的状态。
PK变量
将在第7天和第14天收集血样以测量研究产品施用前的谷浓度。
评价的终点和标准
主要终点
临床改善的时间(改良WHO顺序量表改善至少2级)。
次要终点
·基于经改良WHO顺序量表：
οD7和D14清除的受试者百分比(0分)
οD7、D14和FU访视时出院的活体受试者百分比
οD7、D14和FU访视时评分为≥6的受试者百分比
οD7、D14和FU访视时不同评分内的分布
ο恶化1级、2级、3级或以上的受试者百分比
·基于病毒采样：
ο病毒清除时间，其被定义为连续两次SARS-CoV-2阴性检测中第一次的时间
ο每次访视时实现病毒清除的受试者百分比
ο14天期间的平均病毒载量(病毒颗粒滴度的AUC)
ο14天期间的平均峰值病毒载量
·基于流感样评分：
ο流感样体征和症状的平均和最差严重程度评分
ο流感样体征和症状消失的时间
·基于血氧定量：
οD7和D14需要供氧的受试者百分比
ο平均和最差血氧定量测量
ο脱离氧疗的时间
·基于NEWS2评分：
ο平均和最差NEWS2评分
·基于SGRQ：
ο平均评分和最差评分
·基于呼吸测试(VO2max，DCO)：
οFU访视时具有正常功能的受试者比例
οFU访视时与预测正常功能相比的平均降低
·如通过胸部x射线(或其他成像，例如CT扫描)评估的患有肺水肿/炎症的受试者百分比
·炎性血清生物标志物(CRP、原降钙素)的平均变化
将计算总群体以及2个亚群体(如在基线处评估的轻度和中度COVID-19)的这些终点。
量表和评分
流感样症状量表
医师或护士评估包括14个主要体征和症状，以0分(无)至3分(严重)的4分量表评分，总分范围为0至42：
发冷
发热
肌肉疼痛
疲劳
咳嗽
呼吸短促
打喷嚏
没有食欲
头痛
鼻塞
耳朵痛
恶心、呕吐
嗅觉或味觉丧失
喘息。
使用FLU-PRO(Powers等人,Performance of the inFLUenza Patient-ReportedOutcome(FLU-PRO)diary in patients with influenza-like illness(ILI).[流感患者自述结局(FLU-PRO)日记在流感样疾病(ILI)患者中的表现]PloS One[美国科学公共图书馆].2018；13(3):e0194180)或FLUIIQ(Osborne等人,Development and validation ofthe Influenza Intensity and Impact Questionnaire(FluiiQTM).[流感强度和影响调查问卷(FluiiQTM)的开发和验证]Value Health[健康价值].2011；14(5):687-699)完成患者自我评估。
表4：改良WHO顺序量表
Figure BDA0003955013250000671
Figure BDA0003955013250000681
表5：NEWS2评分
Figure BDA0003955013250000682
Figure BDA0003955013250000691
表6：NEWS阈值和触发
NEW评分 临床风险 响应
累积评分为0-4 低 基于病房的响应
任何单个参数的评分为3 低-中 基于病房的紧急响应
累积评分为5-6 中 紧急响应的关键阈值
累积评分为7或更多 高 紧急或应急响应
实例6氯硝柳胺乙醇胺溶液的制造
包含氯硝柳胺乙醇胺的水性配制品
如下所述制备表7A中所示的配制品：
表7A
Figure BDA0003955013250000692
将氯硝柳胺乙醇胺(100mg)、PVP(K30)(200mg)和羟丙基β-环糊精(1500mg)称量到20mL玻璃小瓶中。向该粉末混合物中添加milliQ水(8.5mL)、2滴5M NaOH和100μL DMSO。混合物的pH为至少8。将小瓶置于65℃的超声浴中并根据以下方案混合：
涡旋1至10分钟；在65℃下超声处理；涡旋1至5分钟；在65℃下超声处理；以及涡旋1分钟；
以提供没有任何可见颗粒的透明红色组合物。
将2滴5M HCl添加到组合物中，然后涡旋1分钟。将所得配制品冷却至室温，并使用1M NaOH/HCl将pH调节至7.80±0.1，得到标题配制品。标题组合物的摩尔渗透压浓度为180mOsm/kg。
使用类似方法制备表7B中所示的配制品B至E。
表7B
Figure BDA0003955013250000701
氯硝柳胺乙醇胺喷雾器溶液的批量制造
如下所述制备表8中所示的配制品：
表8
Figure BDA0003955013250000711
*根据需要提供约7.8的pH
1％的喷雾器溶液是等渗和含水的水性配制品。将溶液填充到10mL透明I型模制玻璃小瓶中，每个小瓶含有7mL溶液。1％的喷雾器溶液含有10mg/mL氯硝柳胺乙醇胺，相当于8.4mg/mL氯硝柳胺游离碱。
10kg 1％的喷雾器溶液的批次配方在表9中示出：
表9
Figure BDA0003955013250000712
*根据需要提供约7.8的最终pH
根据以下方案在C类环境中制备本体溶液：
1.向罐中加入注射用热水(例如65℃-90℃)(总量的80％)并开始搅拌；
2.向罐中加入环糊精和NaOH并搅拌混合物，直至固体组分完全溶解，得到约pH 12的溶液；
3.将固体氯硝柳胺乙醇胺添加到罐中并继续搅拌，直至氯硝柳胺乙醇胺完全溶解，得到大约pH 8-9的溶液；
4.添加总量的75％的2N HCl；
5.添加PVP并继续搅拌，直至PVP完全溶解；
6.将溶液冷却至约室温；
7.通过添加剩余的2N HCl将溶液的pH调节至7.8，并记录pH；
8.添加注射用水至最终重量；
9.将溶液排放到10mL玻璃小瓶中(每个小瓶7mL溶液)；
10.将小瓶用橡胶塞封闭并用铝盖密封。
根据上述方案制造的批次的分析结果在下表10中示出：
表10
Figure BDA0003955013250000731
实例7：非临床研究
研究A：大鼠中的剂量范围发现和2周GLP吸入毒性研究
本研究的目标是确定实例6的表8中所示的配制品(1％氯硝柳胺乙醇胺、2％PVPK30和15％Kleptose HPB)在以下情况下的潜在毒性：通过吸入施用以递增剂量水平给予大鼠以确定最大耐受剂量(MTD阶段)，随后是2周重复剂量阶段(固定剂量阶段)并评价任何发现的潜在可逆性。另外，确定配制品A的毒代动力学特征。
使用15(与人30mg qd剂量相比，高5倍[全身mg/kg]和高18倍[局部mg/g])和50mg/kg(与人30mg qd剂量相比，高15倍[全身mg/kg]和高52倍[局部mg/g])的日剂量水平评估大鼠的关键2周安全性研究(对于主要研究评价，10只大鼠/性别/组)；还包括媒剂和空气对照组。该关键阶段之前是范围发现阶段，该范围发现阶段选择50mg/kg的高剂量水平用于关键2周阶段。每日给药2周后对大鼠鼻腔的显微镜评价揭示，在15和50mg/kg剂量下，鼻中隔/鼻咽中的杯状(粘蛋白分泌)细胞出现非不利的轻微肥大，这与剂量无关；在媒剂或空气对照组中没有观察到这些变化，并且这些变化被认为是对重复施用氯硝柳胺乙醇胺的适应性变化。在肺中，在媒剂以及15和50mg/kg剂量组中给药2周后观察到肺泡巨噬细胞出现最小至轻度增加；这些变化不被认为是不利的，而是对媒剂清除的适应性反应。迄今为止，尚未报告其他值得注意的组织病理学发现。
研究B：比格犬中的剂量范围发现和2周GLP吸入毒性研究
本研究的目标是确定实例6的表8中所示的配制品在以下情况下的潜在毒性：通过吸入施用以递增剂量水平给予狗以确定最大耐受剂量(MTD阶段)，随后是2周重复剂量阶段(固定剂量阶段)并评价任何发现的潜在可逆性。另外，确定配制品的毒代动力学特征。
使用2.5(与人30mg qd剂量相比，高2倍[全身mg/kg]和4倍[局部mg/g])和4.37/4.14mg/kg(与人30mg qd剂量相比，高3倍[全身mg/kg]和高6倍[局部mg/g])的日剂量水平评估狗的关键2周安全性研究(对于主要研究评价，3只/性别/组)；还包括媒剂和空气对照组。在每日给药2周后，在施用媒剂或2.5mg/kg的雄性和雌性狗中以及在给药4.14mg/kg的雌性狗中的显微镜评价揭示，鼻腔没有变化并且肺中仅有最小的变化，包括肺泡巨噬细胞和混合/单核细胞浸润最小增加、最小的支气管渗出物和轻度的中性粒细胞浸润或继发于最小肺部发现的气管支气管淋巴结中的细胞构成最小增加。给药2周后观察到的组织学变化较小并且不被认为是不良的。
研究C：喷雾氯硝柳胺在绵羊中肺部施用后的肺部药代动力学(非GLP)
本研究的目标是确定实例6的表8中所示的配制品在以下情况下的药代动力学曲线：通过肺部施用以类似于临床递增方案的递增剂量水平给予绵羊，并结合使用肺功能测试进行安全性评估。
治疗后绵羊的PK分析证明氯硝柳胺大量暴露于上皮衬液(ELF)。峰值浓度超过氯硝柳胺抗SARS-CoV-2的IC90值的100倍。尽管从ELF中大量清除，但在单次施用配制品A后的8小时取样期内，氯硝柳胺浓度保持在IC90以上(图1A)。这些数据支持每天两次施用配制品。
另外，与氯硝柳胺的口服剂型相比，本研究中氯硝柳胺的ELF浓度大大超过从使用口服氯硝柳胺的研究中公开的血浆药代动力学，并且提供了使用根据本发明的配制品来治疗COVID-19的药理学原理。由于病毒消除最可能是由肺部而不是全身暴露驱动的，因此在肺部施用后配制品A所达到的功效界限在病毒复制的相关区域比口服途径所达到的功效界限大得多(ELF中平均Cmax对IC90的功效界限>100倍)(人口服剂量对IC90的功效界限平均全身暴露仅存在于2g/天剂量，其为8倍)，尽管口服施用氯硝柳胺后的明确肺部水平仍然未知(图1B)。
氯硝柳胺施用后的全身暴露在人体中口服暴露后所报告的数值范围内，其中Cmax为577ng/mL(平均值)[范围：217-803ng/mL]。另外，发现该治疗在绵羊中具有良好的耐受性，如通过给药前和给药后的肺功能分析所确定。
实例8：吸入氯硝柳胺的I期试验
进行一项随机、安慰剂对照、双盲、多剂量1期试验以评估实例6的表8中所示的配制品(或包含1％w/w氯硝柳胺的等效配制品，余量为水)在健康志愿者中的安全性。
方法
试验设计和监督
这是一项评估氯硝柳胺乙醇胺在健康志愿者(HV)中的安全性并探索其PK参数的单中心、介入性、双盲(每个队列中第一名前哨受试者为开放标签)、安慰剂对照、1期研究。本研究由五个队列组成，每个队列都在咨询安全性监测委员会(SMC)后一个接一个地开始。只有在先前收集的数据没有引起安全性问题时，每个队列才开始。44名有资格的HV将入组五个连续队列用于剂量发现，每个队列通常要经过筛选，然后在给药前一天或两天进行延长呼吸锻炼。如果满足所有纳入和不排除标准，则完成给药，然后进行24小时监测。48小时后，所有参与者都进行与研究纳入之前相同的延长呼吸锻炼。这44名健康对照中有34名接受研究产品(IP)，10名接受安慰剂。本研究部分以开放标签设计进行(队列1-4中的第一名受试者作为哨点受试者)并且部分以双盲设计进行(队列1-4中的后续受试者和队列5中的所有受试者)。不同队列的剂量在表11中显示。
表11：队列及其剂量和治疗持续时间总结
Figure BDA0003955013250000761
对于队列1-4，一名受试者在第一天(周一)给药IP，并在诊所入院时跟踪24小时以评估新剂量的安全性。接下来的周三至周五，在CFAS进行延长肺功能测量的安全性访视。对于队列5，患者总共接受5次施用并在试验地点停留3天(周一或周二至周四或周五)，包括过夜。在队列5中，由于剂量与队列4相同，因此所有患者均被设盲并随机分组。在接下来的周四至周六，在CFAS进行延长肺功能测量的安全性访视。
在整个研究过程中，两种IP均由合格的研究人员施用。按照随机化编号将每种治疗分配给特定的受试者。一个队列接另一个队列依次进行筛选和入组。根据队列的随机化列表，在第0天为每名有资格的受试者按升序分配随机化编号。队列1、2、3和4中的第一编号始终是活动性的(开放标签)，剩余的由6名活动性和2名安慰剂组成(n＝9)。对于队列5，编号由6名活动性和2名安慰剂组成(n＝8)。
资格
以下受试者有资格参与本研究：签署知情同意书(ICF)，在整个研究过程中禁欲或同意使用有效避孕方法的男性或未怀孕且非泌乳的女性，在给药之前的尿β-人绒毛膜促性腺激素(hCG)妊娠测试呈阴性和不需要同意使用避孕的女性，心电图(ECG)无临床显著异常(包括QTcF<450ms)，签署ICF时年龄为≥18岁且<65岁，通常活跃，并且根据病史来看健康状况良好，当前无慢性疾病且身体检查正常，预测肺功能为最低80％(包括β2-激动剂后呼气量(FEV1)、静态容积(TLC)、扩散容量(DCO)和用脉搏血氧定量的正常心肺运动测试(CPET))，以及ECG的健康评分>20mLO2/kg*min(对于女性)和>25mLO2/kg*min且在运动期间没有临床上重要的心律失常或减饱和，此外胸部X射线无临床显著异常。排除以下受试者：具有临床显著过敏，当前有急性或慢性病症，肾损伤，可能干扰吸入IP的潜在病症，以及在给药前24小时内饮酒。
安全性评估和结局测量
通过以下参数评估安全性：不良事件(AE)报告、一般安全性评估、一般身体检查、生命体征、临床实验室分析(包括尿分析、血液学和血清化学)、ECG、肺活量、TLC、DCO、FEV1、可逆性、呼气一氧化氮分数(FeNO)测试、静息脉搏血氧定量以及用ECG和脉搏血氧定量的CPET。
主要终点被定义为每个队列和治疗组中的AE频率以及测量的所有安全性变量相对于基线的变化和超出范围值的频率。此外，通过测定血液中活性药物分子的最大浓度(Cmax)、达到最大水平的时间(Tmax)、血液中药物水平随时间变化的曲线下面积(AUC)和半衰期(T1/2)来评价施用后的药代动力学。
主要终点
·每个队列和治疗组中的AE频率
·测量的所有安全变量相对于基线的变化和超出范围值的频率
·除了在整个研究期间收集AE/SAE外，还将经由临床检查、生命体征评估、ECG和实验室分析(血清化学、血液学和尿分析)来评估一般安全性。
·通过测量肺活量、呼气量(一秒用力呼气量，FEV1)、静态容积(总肺活量，TLC)、扩散容量(DCO)、呼出一氧化氮(FeNO)和静息脉搏血氧定量监测肺功能。
次要终点—PK
·血液中活性药物分子的最大浓度(Cmax)
·达到最大水平的时间(Tmax)
·血液中药物浓度随时间变化的曲线下面积(AUC)
·半衰期
统计分析
样本量被认为足以满足研究目标和评估治疗安全性，但不是基于统计功效考虑。区分两组用于分析的群体，即安全组和PK组。安全性分析组包括来自接受任何量的IP的所有入组受试者的数据。
报告连续变量和度量值的描述性统计，包括受试者数量、平均值(μ)、标准偏差(SD)、中值、最小值(Min)和最大值(Max)。分类变量报告为频率和百分比。对于度量值，报告自基线的绝对变化，但示出FEV1百分比变化。以探索性方式测试差异的显著性。未对缺失数据进行插补。来自接受安慰剂的患者的数据在各队列中组合。对于所有分析，统计软件
Figure BDA0003955013250000781
(版本16)用于数据库锁定时可用的最新子版本。
PK分析集包括来自被治疗且没有影响PK评估的缺失数据的受试者的数据。具有至少一种可量化药物浓度的受试者包括在PK分析中。未对缺失数据进行插补。所有药代动力学参数均使用非隔室分析(NCA)通过验证安装软件
Figure BDA0003955013250000782
版本8.1来计算。
结果
试验群体
四十四名受试者被随机分组，其中34名被分配为治疗组，10名被分配为安慰剂组。
安全性结局
本研究中未报告严重AE或提前终止。总共有32名受试者在研究期间经历了一起或多起AE。大部分AE属于“呼吸、胸部和纵隔疾病”类别，其中“上呼吸道刺激”是最常见的AE描述(26名受试者中发生45起事件，59％)并且对应于雾化期间和雾化后的喉咙刺激。此外，鼻应用没有得到关于局部耐受性的任何发现。对于雾化程序，在耐受性方面存在剂量依赖性差异。
然而，报告的所有AE均为轻度，并且在没有治疗的情况下在一至两个小时内自发地完全消失。对于大多数受试者，在吸入程序的前5-10分钟期间症状更为明显。值得注意的是，在多次施用组中，大多数受试者报告在重复给药的情况下症状随时间推移减轻。在施用药物期间，一些受试者显示无症状，但FEV1显著降低(>200mL和>12％)，这在用β2激动剂的情况下是可逆的，而没有受试者经历FVC降低，也没有受试者经历DCO降低。
在4名受试者中显示出无症状气道阻塞(FEV1下降)，在最高剂量(6mL)组中4名受试者中有3名发生。这些事件均对吸入β2模拟物治疗有反应。
在队列5中，平均(SD)摄氧量在药物施用前未改变(3401(551)和3359(516)(NS))，并且在两次测量时平均工作载量相似(309(56)和300(54)(NS))。同样，施用β2-激动剂后的FEV1为116(16)药物前值和药物施用后111(17)(NS)，FVC分别为117(14)和114(13)(NS)，并且TLC分别为104(11)和104(10)(NS)。发现DCO显著降低(102(10)和90(6)，p＝0.01)，但都没有显示超过20％的临床显著变化。药物后安全性后肺功能测量显示，1名参与者在施用β2-激动剂后的FEV1测量结果有无症状降低(从124％pred到108％pred)，两名出现显著的可逆性(18％和12％)，并且4名具有气道炎症增加的迹象(被识别为呼气中一氧化氮浓度分数[FENO]的变化)(变化为11ppb、37ppb、37ppb、28ppb)(其中一名在药物施用前具有升高的FeNO)，这些参与者均在队列5中。队列1至5中没有显示出TLC或VO2max的临床显著变化。队列3中的一名(15％)和队列5中的3名(19％、18％、16％)显示出DCO降低，但在所有情况下，KCO在临床可接受的限度内均未变化。
所有(但只有一起)与异常测试值相关的AE均在队列4或队列5中以最高剂量报告，所有这些事件均在活动性组中报告并且研究者认为这些事件可能、很可能或明确与测试产品或程序相关。
药代动力学
药代动力学分析证明了氯硝柳胺乙醇胺的剂量比例特征(图2)。单次剂量应用后的最大血浆浓度(Cmax)和曲线下面积(AUC0-8)水平为238.9ng/mL(平均值)和509.0hr*ng/mL(平均值)。在队列5中重复给药后，报告了Cmax和AUC0-8水平为337.3ng/mL和401.2hr*ng/mL，表明在重复给药后氯硝柳胺乙醇胺没有累积。
原始数据表明在重复吸入剂量后血液中的峰值浓度为337ng/mL(平均值)[范围：29-506ng/mL]。半衰期在队列4中显示为2小时(平均值)，并且在队列5中显示为2.7小时(平均值)。这在口服给药氯硝柳胺后报告的全身暴露范围内(参见图3)。来自人的全身PK数据(包括剂量反应)与来自绵羊PK研究的数据非常一致(参见图4)。
作为初步结论，本发明的配制品似乎在用批准的2g氯硝柳胺口服剂型(Yomessan)观察到的范围内提供全身暴露。另外，给定施用途径和绵羊ELF PK数据，肺中的浓度显著高于口服氯硝柳胺，因此与氯硝柳胺的口服剂型相比，该配制品将代表COVID19的优选治疗。
实例9：3期临床试验
这是一项评估1％氯硝柳胺乙醇胺溶液(经由喷雾器作为鼻喷雾剂施用)在患有轻度和中度COVID-19的住院参与者中的安全性和有效性的随机、平行组、安慰剂对照、设盲、多中心、3期治疗研究。本研究选择的剂量是每天两次吸入3mL 1％氯硝柳胺乙醇胺(相当于27.4mg氯硝柳胺)和150μL 1％鼻喷雾剂(每个鼻孔一次，总计2.6mg氯硝柳胺)。
研究群体
在本研究的背景下，轻度和中度COVID-19感染由FDA指南如下定义：
轻度：
·通过标准RT-PCR测定或等效测试进行的检测呈阳性
·轻度疾病的症状可以包括发热、咳嗽、喉咙痛、不适、头痛、肌肉疼痛、GI症状，没有呼吸短促或呼吸困难
·没有指示中度、重度或危重严重程度的临床体征
中度：
·通过标准RT-PCR测定或等效测试进行的检测呈阳性
·中度疾病的症状可以包括轻度疾病的任何症状或劳累性呼吸短促
·有提示COVID-19中度疾病的临床体征，诸如呼吸率≥20次呼吸/分钟、海平面的室内空气中SpO2>93％、心率≥90次/分钟
·没有指示重度或危重严重程度的临床体征
纳入标准
只有以下所有标准均适用时，参与者才有资格纳入本研究：
1.参与者在签署知情同意书(ICF)时必须≥18岁。
2.满足如由FDA指南定义的COVID-19的轻度至中度体征和症状标准
3.入组前COVID-19的症状或体征不超过4天
4.进行了检测确认感染SARS-CoV-2
5.目前在住院
6.在整个研究过程中禁欲或使用避孕的男性或未怀孕且非泌乳的女性。女性在第1天的尿β-人绒毛膜促性腺激素妊娠测试必须呈阴性。(绝经后或输卵管结扎/子宫切除术的妇女不需要进行妊娠测试且不需要同意使用避孕。)
7.能够签署知情同意书并愿意遵守知情同意书和本方案中列出的要求和限制
排除标准
如果以下任何标准适用，则将参与者从研究中排除：
1.除SARS-CoV-2以外的活动性或急性感染，包括继发性细菌性肺炎
2.存在如研究者判断将危及参与者的安全的急性或慢性病症
3.ALT或AST水平>正常上限的5倍
4.重度或危重COVID-19疾病，即需要无创或有创机械通气、使用高流量氧气装置或ECMO
5.可能干扰吸入IMP的潜在病症
6.对氯硝柳胺过敏或者对氯硝柳胺或相关化合物或所用任何赋形剂有显著不良反应史
7.在第1天前一个月内和在整个研究期间使用其他研究产品
8.在前6个月内入组配制品的另一项研究
9.存在研究者认为将干扰提供同意或遵守研究指令的能力或可能混淆对研究结果的解释的病症。
施用
所有入组的参与者将在住院期间以每天两次的程序接受1％氯硝柳胺乙醇胺喷雾器溶液或安慰剂和1％氯硝柳胺乙醇胺鼻喷雾溶液或安慰剂，持续长达10天。该治疗包括在每个鼻孔中以一次喷射130μL溶液的形式施用1％鼻喷雾溶液或安慰剂，随后雾化3mL 1％溶液或安慰剂。出院时停止治疗。
功效评估
用于临床改善的改良顺序量表将由研究者完成。量表在下表12中提供。将在住院期间每天测定SpO2值，并由诊所工作人员在第28天测定该值。将为在出院当天SpO2异常(<95％)的受试者提供带有说明的脉搏血氧仪。参与者将在家中测量SpO2，并在每天治疗后访视时报告该值。将在住院期间每天收集痰液或鼻咽拭子以检测SARS-CoV-2的滴度，并由诊所工作人员在第28天进行该过程。将在筛选时、第10天(或出院当天)和第28天访视时收集样品以用于炎性生物标志物的实验室分析。
表12：用于临床改善的改良顺序量表
Figure BDA0003955013250000821
Figure BDA0003955013250000831
a可能存在持续疲劳、努力呼吸困难、关节或胸痛、咳嗽或持续嗅觉或味觉功能障碍。
b存在休息时疲劳或呼吸困难，妨碍一些日常活动。如果参与者出院，但仍需要在家中进行密切医学监测或氧疗，则应将他们归类为3分。
c需要住院进行医疗监督；可以包括处于高并发症风险(例如，由于并存病)的参与者或从疾病中恢复但在出院前需要医疗监督的参与者。
d需要以下中的至少一项：气管插管和机械通气、通过高流量鼻插管递送氧气(经由加强型鼻插管以>20L/min的流速递送加热、加湿氧气，递送的氧气分数≥0.5)、无创正压通气、ECMO或临床诊断呼吸衰竭(即，临床需要前述疗法中的一种，但在资源限制的情况下不能施用前述疗法)。
e收缩压<90mmHg或舒张压<60mmHg或者需要血管加压药。
药代动力学和生物标志物
将收集血浆、血清或全血样品以测量氯硝柳胺浓度。
将测试样品的C反应蛋白和原降钙素，以评价它们与观察到的临床反应的关联。
统计考虑
主要功效结局(至临床改善的时间)的无效假设和替代假设如下：
H0：h1(t)＝h2(t)
H1：h1(t)≠h2(t)
其中：
h1(t)是吸入组中的危险函数
h2(t)是安慰剂组中的危险函数
对中度和重度COVID-19受试者的瑞德西韦研究发现，接受瑞德西韦和安慰剂的受试者的中位恢复时间(在顺序量表上被定义为1(未住院，活动不受限)、2(未住院，活动受限，在家中有氧气需要或两者)或3(住院，不需要补充氧并且不再需要正在进行的医疗护理))分别为11天和15天，危害比为1.32。由于本研究将招募患有轻度和中度COVID-19的参与者，结局是改善而不是恢复，并且一些参与者可能正在接受伴随瑞德西韦，因此预计至临床改善的时间将比瑞德西韦研究中的更短。假设中位至临床改善的时间在吸入1％组中为9.7天并且在安慰剂组中为13.55天(危害比为1.40)，功效为80％，双侧α＝0.05，随机化比例为2:1，则总共需要328起事件。假设事件率为90％并且失访率为5％，则需要大约387名受试者入组。
主要终点
主要功效结局是ITT分析集中的至临床改善的时间(改良顺序量表改善至少2级)。对估计目标的描述包括四个属性：群体、要针对每名参与者获得的变量(或终点)、如何解释伴发事件(ICE)的规范以及变量的群体级别总结。至临床改善的时间的估计目标属性将在SAP中详细提供。
卡普兰-梅尔(Kaplan-Meier，KM)分析将用于评估吸入组和安慰剂组中的至临床改善的时间。未改善(包括死亡)或失访的参与者将在最后一次评估当天或死亡当天被删失。接受瑞德西韦抢救疗法的参与者将在开始瑞德西韦治疗当天被删失。将在每个治疗组中确定至临床改善的时间的第25百分位数、中位数和第75百分位数以及95％置信区间(CI)。也将使用具有治疗协变量即COVID-19严重程度(轻度和中度)、国家/地理区域和年龄(<75岁和≥75岁)的Cox回归模型来确定临床改善的危害比和95％ CI。将提供KM生存曲线。
将对COVID-19严重程度(轻度和中度)、国家/地理区域和年龄(<75岁和≥75岁)的随机化因素进行分层对数秩检验，以检验两个治疗组之间的存活曲线差异。如果p值<0.05(即，双侧α水平为0.05)，则无效假设将被拒绝。
还将在由COVID-19严重程度(轻度和中度)、国家/地理区域、年龄(<75岁和≥75岁)和伴随瑞德西韦的接收(是和否)定义的亚组中以及在m-ITT和PP分析集中进行主要功效结局(至临床改善的时间)的分析。其他亚组分析将在SAP中定义。
次要终点
以下关键次要分析将在ITT分析集中完成。为了控制总体I类错误率的膨胀，将使用分层测试程序。如果宣布主要功效结局具统计显著性，则将按以下列出的顺序对关键次要功效结局进行测试。只有宣布正在测试的前一次要结局具有统计显著性(双侧α＝0.05)时，测试才会继续进行到下一个次要结局。
·治疗组将在第14天呈现来自改良顺序量表的评分的频率分布。将使用具有治疗协变量和每个随机分层因素的比例优势逻辑回归来测试治疗组之间的差异的统计显著性。将呈现治疗的比值比和95％ CI。
·治疗组将呈现被定义为需要高流量氧气、机械通气、ECMO或无创通气的呼吸衰竭受试者的数量和百分比。针对随机分层因素进行分层的Cochran-Mantel-Haenzsel检验将用于确定治疗组之间的统计显著性。
·KM方法将用于分析不需要氧疗或恢复到COVID-19疾病之前所需的氧水平的时间，其中未恢复到COVID-19之前的氧水平、死亡或失访的参与者在最后评估的当天或已知活着的最后一天被删失。接受瑞德西韦抢救疗法的参与者将在开始瑞德西韦治疗当天被删失。将提供卡普兰-梅尔曲线。将确定第25、第75百分位数和不需要氧疗或恢复到COVID-19之前所需的氧水平的中位时间以及95％ CI。也将使用具有治疗协变量即COVID-19严重程度(轻度和中度)、国家/地理区域和年龄(<75岁和≥75岁)的Cox回归模型来确定危害比和95％ CI。将提供KM生存曲线。将使用按随机分层因素分层的对数秩检验来检验存活曲线之间的差异的统计显著性。
·卡普兰-梅尔方法将用于分析存活时间，其中仍然活着或失访的参与者在已知活着的最后一天被删失。将提供卡普兰-梅尔生存曲线。治疗组将确定第25、75百分位数和中位存活时间以及在第28天存活的概率。将使用Z统计和标准偏差的Greenwoods公式来确定治疗组之间在第28天存活的概率方面的统计学显著差异。
将对关键次要终点进行额外分析。这些包括在由随机分层因素定义的亚群体中以及在m-ITT和PP分析集中的分析。还将对其他次要终点进行总结，包括：
·将使用KM方法总结病毒清除时间，其被定义为连续2次SARS-CoV-2阴性检测中第一次的时间。没有病毒清除(包括死亡)或失访的参与者将在最后一次病毒检测当天或死亡当天被删失。接受瑞德西韦抢救疗法的参与者将在开始瑞德西韦治疗当天被删失。将在每个治疗组中确定病毒清除时间的第25百分位数、中位数和第75百分位数以及95％ CI。也将使用具有治疗协变量即COVID-19严重程度(轻度和中度)、国家/地理区域和年龄(<75岁和≥75岁)的Cox回归模型来确定病毒清除的危害比和95％ CI。将提供KM生存曲线。
·将由KM分析确定在测量病毒清除的每个时间点具有病毒清除的概率。
·将提供对10天治疗期间平均病毒负荷(病毒颗粒滴度的AUC)的描述性统计。
·将提供对10天治疗期间峰值病毒载量的描述性统计。
三级/探索性终点
将在ITT分析集中对治疗组的如下其他功效结局进行总结，以支持主要和次要功效结局的发现：
·治疗结束/出院时和第28天来自改良顺序量表的评分的频率分布。
·第14天、治疗结束/出院时和第28天清除(改良顺序量表＝0)或几乎清除(改良顺序量表＝1)的参与者的数量和百分比。
·将使用KM方法总结清除/几乎清除时间。没有清除/几乎清除(包括死亡)或失访的参与者将在最后一次评估当天或死亡当天被删失。接受瑞德西韦抢救疗法的参与者将在开始瑞德西韦治疗当天被删失。将在每个治疗组中确定清除/几乎清除时间的第25百分位数、中位数和第75百分位数以及95％ CI。也将使用具有治疗协变量即COVID-19严重程度(轻度和中度)、地理区域(美国和非美国)和年龄(<75岁和≥75岁)的Cox回归模型来确定清除/几乎清除的危害比和95％ CI。将提供KM生存曲线。
·第14天和第28天改良顺序量表改善至少1级(低于基线＝0)的参与者的数量和百分比。
·第14天和第28天恶化(被定义为改良顺序量表评分高于基线)的参与者的数量和百分比。
·住院期间任何时间在ICU住院的参与者的数量和百分比。
·住院期间任何时间需要氧疗的参与者的数量和百分比。
·住院期间任何时间接受机械通气的参与者的数量和百分比。
·改良顺序量表改善至少2级的出院参与者的数量和百分比。
·改良顺序量表改善至少2级的出院时间。未出院(包括死亡)或失访的参与者将在最后一次评估当天或死亡当天被删失。接受瑞德西韦抢救疗法的参与者将在开始瑞德西韦治疗当天被删失。将在每个治疗组中确定出院时间的第25百分位数、中位数和第75百分位数以及95％ CI。也将使用具有治疗协变量即COVID-19严重程度(轻度和中度)、地理区域(美国和非美国)和年龄(<75岁和≥75岁)的Cox回归模型来确定出院的危害比和95％ CI。将提供KM生存曲线。
·对于需要氧疗的参与者，对持续恢复到基础氧气需求的时间的描述性统计。
·对于显示出临床改善的参与者，被定义为到第28天因COVID-19再次住院的复发的数量和百分比。
·第14天、治疗结束/出院时和第28天SpO2值为≤91％、92-93％、94-95％和≥95％的参与者的数量和百分比。
·第14天、治疗结束/出院时和第28天呼吸率(bpm)为≤8、9-11、12-20、21-24个≥25的参与者的数量和百分比。
·在C反应蛋白和原降钙素中测量的从基线到每个时间点的平均变化。
·使用亚基因组RNA测定测量的在每个时间点具有病毒清除的参与者的数量和百分比。
实例10：COVID-19无症状或轻度症状患者的治疗
可使用本文所述的配制品(诸如实例1中所述的配制品A或实例6表8中所述的配制品)进行以下临床试验。
该2期研究的总体目标是证明治疗最近证实感染SARS-CoV-2的无症状或轻度症状患者的益处，针对主要累及上呼吸道的早期疾病患者。
主要目标是评估：
·COVID-19症状的发展和进展
·施用配制品的安全性
·在第5天和第10天通过鼻咽(NP)SARS-CoV-2RT-PCR测试评估病毒脱落
·对长期COVID症状的影响
·施用后谷氯硝柳胺值的测定
主要目标：
·评估预防疾病进展的治疗功效
·评估治疗的安全性
次要目标：
·评估治疗对COVID-19症状的功效
·评估治疗对SARS-CoV-2病毒载量的影响
·评估治疗对COVID-19从索引病例传播的影响
主要终点：
·到第10天症状相对于基线的变化，其被定义为从基线到第10天比较配制品与安慰剂的累积食品和药物管理局(FDA)COVID-19问卷评分。
·如通过不良事件、生命体征、血液学和临床化学评估的配制品鼻喷雾剂的安全性。
次要终点：
·改良FDA COVID-19问卷中症状的最大强度
·如FDA COVID-19问卷所定义的无COVID-19症状的天数
·患者报告的整体印象项目评估a)恢复到平时的健康状况；b)恢复日常活动；以及c)第10天的总体COVID-19相关症状：如FDA COVID-19问卷中所概述的患者报告的整体印象项目的实例
·第10天保持无症状的患者比例
·需要到急救(UC)或急诊科(ED)设施就诊或者因COVID-19的体征或症状住院的患者比例
·收治到重症监护室(ICU)的患者比例
·第10天SARS-CoV-2病毒载量相对于基线的变化，如通过定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)评估的。
·第5天SARS-CoV-2病毒载量相对于基线的变化，如通过qRT-PCR评估的。
·如FDA COVID-19问卷所定义的长期COVID-19症状的存在。
探索性终点：
·在WHO 11分顺序量表中达到评分≥2的时间
·在11分WHO顺序量表中达到评分≥2的患者比例
·直至第30天向家庭接触者传播SARS-CoV-2的患者百分比
·通过阳性或阴性NP SARS-CoV-2逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测试的结果评估的病毒脱落
·10天后症状持续/出现(长COVID-19)
·患者报告的整体印象项目评估a)恢复到平时的健康状况；b)恢复日常活动；以及c)第10天和第30天的总体COVID-19相关症状。
总体研究设计
鉴于鼻用化合物不太可能根除已经到达呼吸树下部或以其他方式已经全身传播的病毒，本研究将集中于患有主要涉及上呼吸道的无症状或轻度症状疾病的SARS-CoV-2阳性患者。患者群体被定义为包括没有症状或具有诸如鼻塞、流涕、结膜炎、喉咙痛、味觉丧失、嗅觉丧失、头痛等症状的患者。具有提示下呼吸道参与或全身参与的症状(诸如咳嗽、感觉发热、发冷、发抖、感觉热、精力不足、疲惫、身体疼痛、疲劳、呼吸短促、没有食欲、恶心、呕吐或腹泻)的个体被排除。最多50％的参与者将患有轻度症状的COVID-19疾病，其余参与者将没有症状。
将在FDA COVID-19问卷上收集一组复合症状的发生，由患者每天在同一时间(±1小时)填写。时间应方便患者，但不能在醒来后2小时内完成。应在每天服用研究药品(IMP)之前完成问卷。在治疗期间，将由HCP每隔一天通过电话直接收集反应。将对所有患者进行随访，直至第30天。在第30天，HCP将询问患者以评价他们在过去一周内的症状，并记录该周内的最高严重程度以评价长期COVID-19的存在。
在第10天和第30天，通过以下问题评价患者报告的整体印象项目，该患者报告的整体印象项目评估a)恢复到平时的健康状况；b)恢复日常活动；以及c)总体COVID-19相关症状(如FDA COVID-19问卷中概述的患者报告的整体印象项目的实例)：
·您是否已恢复到平时的健康状况(在您感染COVID-19之前)？是或否
·您是否已恢复日常活动(在您感染COVID-19之前)？是或否
·在过去24小时里，总体COVID-19相关症状在最严重时的严重程度如何？无、轻度、中度或重度。
将由HCP在筛选时、第1天和每隔一天直到第10天和第30天使用WHO顺序11分量表进行临床状态的评估。
将通过使用HCP询问的一组问题来评估防止向家庭接触者传播SARS-CoV-2的治疗的能力。在治疗和随访期间(第1、3、5、7、9、10和30天)，将每隔一天通过电话从HCP收集反应。在第30天进行随访电话访视时，将收集关于向家庭接触者传播的AE和信息。在显示COVID-19的体征和症状恶化的参与者中，治疗应持续至第10天，除非研究者出于安全原因决定停止治疗。由于参与者的呼吸状态，研究者还可决定继续治疗是不可行的。
在第1-10天期间，将通过以下问题每天评估施用治疗后不适的存在和持续时间：服用鼻喷雾剂后，您是否有任何不适？如果有，症状是什么？持续多久？反应可能是AE报告的原因。
个体患者的研究持续时间将如下：
·筛选期：长达2天
·治疗期：连续10天(即第1天至第10天)
·随访期：患者首次接受研究药物治疗后30天(即第30天)
纳入标准
1.患者为≥45岁的男性或女性。
2.患者能够理解并提供签署的知情同意书。
3.通过对在随机分组前3天内采集的样品进行侧流抗原检测或RT-PCR对患者进行检测，以确认感染SARS-CoV-2。
4.患者没有症状或具有以下症状中的一种或多种：鼻塞或流涕、结膜炎、喉咙痛、味觉丧失、嗅觉丧失或头痛(在FDA COVID-19问卷中输入)。流涕和结膜炎也是可接受的。
5.性伴侣为有生育能力的妇女(WOCBP)的男性必须同意从第一剂量的筛选时间开始到最后剂量的研究药物后至少30天遵守以下避孕要求中的一项：
a.输精管结扎并记录有无精子症。
b.性禁欲(被定义为从筛选时间至最后剂量的剂研究药物后至少30天不与异性性交)
c.男性使用避孕套加上伴侣使用以下避孕选项中的一种：避孕皮下植入物；宫内避孕器或宫内节育器；口服避孕药、联合或单独使用孕激素；注射孕激素；阴道避孕环；经皮避孕贴片。
以上是满足以下高效定义的那些方法的全部列表：当始终正确地使用时并且在适当的时候根据产品标签使用时，失败率低于每年1％。对于非产品方法(例如，男性不育)，研究者将确定什么是始终正确使用。研究者负责确保患者理解如何正确使用这些避孕方法。
6.WOCBP必须同意从筛选时间开始到最后剂量的研究药物后至少30天遵守以下避孕要求中的一项：
a.性禁欲(被定义为从筛选时间至最后剂量的剂研究药物后至少30天不与异性性交)
b.使用以下避孕选项中的一种加上男性伴侣使用避孕套：避孕皮下植入物；宫内避孕器或宫内节育器；口服避孕药、联合或单独使用孕激素；注射孕激素；阴道避孕环；经皮避孕贴片。
c.男性伴侣的输精管结扎并记录有无精子症。
以上是满足以下高效定义的那些方法的全部列表：当始终正确地使用时并且在适当的时候根据产品标签使用时，失败率低于每年1％。研究者负责确保患者理解如何正确使用这些避孕方法。
7.没有生殖潜能的妇女被定义为：a)具有以下情况中的一种的绝经前女性：记录有输卵管结扎；记录有宫腔镜下输卵管阻塞手术，随访确认双侧输卵管阻塞；子宫切除术；记录有双侧卵巢切除术；b)被定义为自发闭经12个月的绝经后妇女(在有问题的情况下，将需要血液样品在当地同时检测促卵泡激素和雌二醇水平并与绝经期一致[请参考当地实验室参考范围的确认水平])。如果接受激素替代疗法(HRT)且绝经后状态存在疑问的妇女希望在研究期间继续HRT，则要求她们使用上面列出的高效避孕方法中的一种。
排除标准
1.患者在前6个月内入组氯硝柳胺研究。
2.患者对氯硝柳胺过敏或者对氯硝柳胺或相关化合物或所用任何赋形剂有显著不良反应史。
3.患者患有可能干扰鼻内施用IMP的潜在病症，例如鼻内慢性溃疡。
4.患者患有如研究者判断将危及参与者的安全的急性或慢性病症。
5.患者患有研究者认为将干扰提供同意或遵守研究指令的能力或可能混淆对研究结果的解释的病症。
6.患者具有提示下呼吸道参与或全身参与的症状(诸如咳嗽、感觉发热、发冷、发抖、感觉热、精力不足、疲惫、身体疼痛、疲劳、呼吸短促、没有食欲、恶心、呕吐或腹泻(将输入FDA COVID-19问卷))或未在纳入标准5中提及的其他症状。
7.患者患有除SARS-CoV-2以外的活动性或急性感染。
8.患者在第1天前一个月使用过其他研究产品。
9.抗病毒药物和靶向COVID-19的批准或实验药物。
10.同一家庭的另一成员被招募到该研究。
治疗
治疗是具有包括抗病毒、抗菌和抗炎特性在内的新型三重作用机制的鼻喷雾剂。将在安装有鼻喷雾泵的20mL琥珀色玻璃小瓶中提供治疗和匹配的安慰剂，这些小瓶含有8.5mL相应溶液，每次喷射递送140μL。两者都是黄色/红色的等渗和含水的水性溶液。IMP和匹配的安慰剂将由独立于试验的制造商提供，并将储存在2℃-8℃之间，然后在分配给患者后储存在15℃-25℃之间。
所有随机化患者将从第1天(至少间隔6小时服用2个剂量)到第10天的最后一次剂量在每个鼻孔中接受BID施用的140μL的1％配制品或安慰剂(2.4mg氯硝柳胺)，其中根据他们的指定治疗和根据随机化方案在第10天早晨仅服用一个剂量。该研究是双盲的。
功效评估
将使用如表13所示的FDA COVID-19问卷对患者进行评估，在第1-9天回答问题1-16；在第10天回答问题1-19；并且在第30天回答问题1-18(评估过去7天)。将在第10天(评估过去10天)和在第30天(评估过去20天)回答问题20-22。在第10天和第30天，患者报告的总体印象项目(问题17-19)评估a)恢复到平时的健康状况；b)恢复日常活动；以及c)总体COVID-19相关症状也将作为上述COVID-19症状问卷的一部分收集。
将用WHO 11分顺序量表(表14)来评估医疗保健利用率。
将使用医疗保健专业人员(HCP)询问的一组问题(表15)来评估防止向家庭接触者传播SARS-CoV-2的治疗的能力。在治疗和随访期间，将每隔一天通过电话从HCP收集反应。在第30天进行随访电话访视时，将收集关于向家庭接触者传播的信息。
将使用HCP在远程访视/电话中询问的FDA COVID-19问卷中表13的问题1-18来评估第30天剩余症状的存在。将在第30天询问患者以评价他们在过去一周内的症状并在FDACOVID-19问卷上记录该周内的最高严重程度。
在第1-10天，将通过以下问题每天评估施用配制品后不适的存在和持续时间：
·服用鼻喷雾剂后，您是否有任何不适？如果有，症状是什么？持续多久？
表13：FDA COVID-19问卷
Figure BDA0003955013250000931
Figure BDA0003955013250000941
表14：WHO 11分顺序量表
Figure BDA0003955013250000942
Figure BDA0003955013250000951
表15：防止向家庭接触者传播
Figure BDA0003955013250000952
Figure BDA0003955013250000961
实例11：氯硝柳胺乙醇胺盐对几种SARS-CoV-2变体(包括谱系B.1.1.7(UK)和B.1.351(南非)的相关变体)有效
方法
氯硝柳胺乙醇胺盐(NEN)对SARS-CoV-2的几种变体的复制的影响如先前所述那样确定，具有以下概述的偏差(Touret等人,2020,Preclinical evaluation of Imatinibdoes not support its use as an antiviral drug against SARS-CoV-2.[伊马替尼的临床前评估并不支持其作为针对SARS-CoV-2的抗病毒药物使用]bioRxiv)。
类似于VeroE6细胞培养Caco-2细胞，如Touret等人,2020所述。VeroE6TMPRSS2细胞(ID 100978)从CFAR获得并使其在添加G-418(生命技术公司(Life Technologies))的相同培养基中生长。SARS-CoV-2菌株BavPat1通过EVAGLOBAL从Pr.C.Drosten获得(https://www.european-virus-archive.com/)。从18岁的患者分离SARS-CoV-2 201/501YV.1。全基因组序列已保藏在GISAID：EPI_ISL_918165。该菌株可通过EVA GLOBAL：UVE/SARS-CoV-2/2021/FR/7b(谱系B1.1.7，购自UK)在https://www.european-virus-archive.com/virus/sars-cov-2-uvesars-cov-22021fr7b-lineage-b-1-1-7-ex-uk获得。SARS-CoV-2WuhanD614菌株通过ISA方法生成。它含有刺突蛋白上的原始D614残基。该菌株可通过EVAGLOBALUVE/SARS-CoV2/2020/FR/ISA_D614在https://www.european-virus-archive.com/virus/sars-cov-2-virus-strain-uvesars-cov22020frisad614获得。SARS CoV-2SA(谱系B1.351)于2021年在法国分离。该菌株可通过EVA GLOBAL：UVE/SARS-CoV-2/2021/FR/1299-ex SA(谱系B1.351)在https://www.european-virus-archive.com/virus/sars-cov-2-uvesars-cov-22021fr1299-ex-sa-lineage-b-1351获得。在VeroE6细胞中使用浓度从10μM到0.078μM的半对数稀释方案用于氯硝柳胺乙醇胺盐(溶解在DMSO中)，并且在VeroE6TMPRSS2细胞中使用浓度从5μM到0.039μM的半对数稀释方案用于氯硝柳胺乙醇胺盐。如Touret等人,2020中所述进行EC50和CC50测定。
结果
发现NEN以0.1μM的EC50和>10μM的CC50抑制SARS-CoV-2(D614G菌株)在VeroE6细胞中的复制，从而产生100的选择性指数(图5A)。NEN的强效抗病毒功效Caco-2细胞中得到证实，EC50为0.08μM且CC50>10μM(图5B)。
为了确保SARS-CoV-2变体的适当复制，使用了细胞系VeroE6 TMPRSS2。用NEN处理以相似的效力阻断所有四种SARS-CoV-2变体的复制(图6)。更准确地说，针对D614G、D614、B.1.1.7和B1.351菌株的EC50分别为0.06μM、0.13μM、0.08μM和0.07μM。
实例12：氯硝柳胺在使用人支气管上皮细胞的跨孔感染模型中阻断SARS-CoV-2的复制
方法
在使用人支气管上皮细胞的跨孔感染模型中评价氯硝柳胺乙醇胺盐(NEN)对SARS-CoV-2复制的影响，如前所述(Touret等人,2020)。
简言之，用SARS-CoV-2的欧洲D614G菌株(BavPat1/2020；从EVA GLOBAL获得)以0.1的MOI顶端感染人支气管上皮细胞，并将它们在含有不同浓度的溶解在DMSO中的NEN(一式两份)或不含药物(病毒对照)的基底外侧培养基中培养长达4天。每天更换含有新鲜NEN的培养基。在顶侧收集样品并用于进行TCID50测定。在第4天，裂解细胞以使用qRT-PCR量化细胞内病毒RNA。通过对反应进行归一化来计算病毒抑制，最低值为100％，最高值为0％。在GraphPad Prims 7中使用对数插值法(Y＝100/(1+10^(LogEC50-X)*HillSlope))来测定EC50。使用带有Dunnett校正的普通单因素ANOVA进行统计检验以进行多重比较。
结果
当通过人支气管上皮细胞中的感染滴度和细胞内RNA水平测量时，发现NEN表现出强抗SARS-CoV-2作用。
用1.25-10μM NEN处理使得SARS-CoV-2的感染滴度在第4天显著下降到低于检测限的水平，产生0.96μM的EC50(图7A)。此外，与未处理的对照相比，用1μM NEN处理使得细胞内病毒RNA水平在第4天显著降低3倍(图7B)。
实例13：鼻内应用本发明的配制品使得感染SARS-CoV-2的hACE2小鼠模型的临床评分改善
方法
根据本发明的液体氯硝柳胺乙醇胺组合物(如实例6的表8所示)在鼻内(IN)SARS-CoV-2病毒攻击之前鼻内(IN)给予一次，并且在研究过程中在接种后每天给予一次。本研究使用在Sujan Shresta实验室的拉霍亚免疫学研究所建立的hACE2转基因SARS-CoV-2小鼠感染模型(Oladunni等人,2020,Nature communications[自然通讯],11(1),第1-17页)，其中用SARS-CoV-2接种导致严重的SARS-CoV-2相关疾病并且到第5-8天发生早期死亡。在异氟烷镇静后，用1.0x 105PFU剂量的SARS-CoV-2WT(BEI Resources，在PBS+10％ FCS中稀释)以30μL的最终体积鼻内进行病毒感染。以30μL的体积施用组合物和盐水。病毒感染后，每天监测小鼠的发病率(体重)、临床评分和死亡率(存活)。显示其初始体重减轻>20％和/或临床评分≥5的小鼠被定义为达到实验终点并进行人道终结。
结果
与盐水处理的SARS-COV-2感染的K18hACE2转基因小鼠相比，用本发明的组合物鼻内处理导致临床评分在感染后第6天显著更低(图8)。下表16描述了与临床评分相关的症状。
表16：临床评分和症状
Figure BDA0003955013250000991

Claims (91)

1.一种用于在预防或治疗受试者的病毒感染中使用的可吸入药物组合物，该可吸入药物组合物包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐，其中该氯硝柳胺或其药学上可接受的盐通过吸入施用于该受试者。
2.如权利要求1所述使用的组合物，其中该药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的粉末、悬浮液或溶液的形式。
3.如权利要求1所述使用的组合物，其中该药物组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的形式，优选液体溶液或液体悬浮液。
4.如权利要求3所述使用的组合物，其中该溶液或悬浮液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和聚乙二醇(PEG)。
5.如权利要求4所述使用的组合物，其中该PEG具有小于约600的平均分子量。
6.如权利要求4或权利要求5所述使用的组合物，其中该PEG具有约150至约600的平均分子量，例如约200或约400的平均分子量。
7.如权利要求4至6中任一项所述使用的组合物，其中该PEG以按该组合物的重量计至少25％的量存在，例如，其中该PEG以按该组合物的重量计至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的量存在。
8.如权利要求4至6中任一项所述使用的组合物，其中该PEG以按该组合物的重量计约40％至约98％例如按该组合物的重量计约70％至约96％的量存在。
9.如权利要求3至8中任一项所述使用的组合物，其中该溶液或悬浮液进一步包含溶剂(例如二醇，诸如丙二醇)。
10.如权利要求3至9中任一项所述的组合物，其中该组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的悬浮液的形式。
11.如权利要求3至9中任一项所述使用的组合物，其中该组合物是包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液的形式。
12.如权利要求3至11中任一项所述使用的组合物，其中该组合物以包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的溶液或悬浮液的气雾剂的形式施用于该受试者。
13.如权利要求1至12中任一项所述使用的组合物，其中该组合物包含游离酸形式的氯硝柳胺。
14.如权利要求1至12中任一项所述使用的组合物，其中该组合物包含氯硝柳胺的药学上可接受的盐。
15.如权利要求1至12中任一项所述使用的组合物，其中该组合物包含氯硝柳胺乙醇胺。
16.如权利要求1至15中任一项所述使用的组合物，其中该氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按该组合物的重量计约0.1％至约10％例如按该组合物的重量计约5％的量存在于该组合物中。
17.如权利要求1所述使用的组合物，其中该组合物是包含按重量计约1％至约10％的氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液，其中该PEG具有小于600的平均分子量。
18.如权利要求1所述使用的组合物，其中该组合物是包含按重量计约4.5％至约6.5％的氯硝柳胺乙醇胺和按重量计约93.5％至约95.5％的PEG 400的溶液。
19.如权利要求17或权利要求18所述使用的组合物，其中该溶液以该溶液的气雾剂形式施用于该受试者。
20.如权利要求1至19中任一项所述使用的组合物，其中该组合物进一步包含掩味剂。
21.如权利要求20所述使用的组合物，其中该掩味剂选自糖(例如蔗糖、右旋糖或乳糖)、氨基酸或氨基酸衍生物(例如精氨酸、赖氨酸或谷氨酸一钠)、油(例如天然油或植物提取物)、甜味剂(例如蔗糖、右旋糖、阿斯巴甜、乙酰磺胺酸钾、三氯蔗糖或糖精)、有机酸(例如柠檬酸或天冬氨酸)和麦芽糖糊精。
22.如权利要求1至21中任一项所述使用的组合物，其中该组合物是非水性组合物，例如含有按重量计少于2％的水、优选按重量计少于0.1％的水的组合物，更优选地其中该组合物是无水的。
23.一种用于预防或治疗受试者的病毒感染的方法，该方法包括通过吸入向该受试者施用有效量的包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐的可吸入药物组合物。
24.如权利要求23所述的方法，其中该组合物如权利要求2至22中任一项所定义。
25.如权利要求1至24中任一项所述使用的组合物或方法，其中该氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以基于氯硝柳胺的重量约1mg至约3000mg(例如基于氯硝柳胺的重量约400mg至约2000mg)的日剂量施用于该受试者。
26.如权利要求1至25中任一项所述使用的组合物或方法，其中该氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以基于氯硝柳胺的重量约10mg至约1000mg(例如基于氯硝柳胺的重量约100mg至约600mg、优选约150mg至约500mg)的单位剂量施用于该受试者。
27.如权利要求1至26中任一项所述使用的组合物或方法，其中该组合物通过口内和/或鼻内吸入施用，优选地其中该氯硝柳胺或溶液通过口内吸入施用。
28.如权利要求1至26中任一项所述使用的组合物或方法，其中该组合物鼻内施用。
29.如权利要求1至28中任一项所述使用的组合物或方法，其中该组合物每天一至五次例如每天1至4次施用于该受试者。
30.如权利要求1至29中任一项所述使用的组合物或方法，其中在吸入氯硝柳胺或其药学上可接受的盐之前或与其同时用镇咳剂治疗该受试者。
31.如权利要求30所述使用的组合物或方法，其中该镇咳剂选自可待因、右美沙芬、氢可酮、美沙酮、布托啡诺、苯佐那酯、乙基吗啡、奥昔拉定、匹哌氮酯、福尔可定、诺司卡品、布他米酯和局部麻醉剂。
32.如权利要求30所述使用的组合物或方法，其中该镇咳剂是局部麻醉剂，优选利多卡因。
33.如权利要求30至32中任一项所述使用的组合物或方法，其中在吸入氯硝柳胺之前向该受试者施用镇咳剂。
34.如权利要求1至33中任一项所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染是肺部病毒感染。
35.如权利要求1至34中任一项所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染由选自以下的病毒引起或与其相关：呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、人鼻病毒(HRV)和人腺病毒(HAdV)。
36.如权利要求1至34中任一项所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染由肺病毒科病毒例如人呼吸道合胞病毒(HRSV)(例如HRSV-A2、HRSV-B1或HRSV-S2)引起或与其相关。
37.如权利要求1至34中任一项所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染由冠状病毒科病毒引起或与其相关。
38.如权利要求35所述使用的组合物或方法，其中该病毒选自α冠状病毒、β冠状病毒、γ冠状病毒和δ冠状病毒。
39.如权利要求36所述使用的组合物或方法，其中该病毒是β冠状病毒。
40.如权利要求37所述使用的组合物或方法，其中该病毒选自严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、HCoV-229E、HCoV-NL63、HCoV-OC43和HKU1。
41.如权利要求1至33中任一项所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染由SARS-CoV-2引起或与其相关。
42.如权利要求1至33中任一项所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染是COVID-19，任选地其中该病毒感染是中度或轻度COVID-19。
43.如权利要求1至33中任一项所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染由流感病毒引起或与其相关。
44.一种溶液的气雾剂，该溶液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐。
45.如权利要求44所述的气雾剂，其中该溶液包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和聚乙二醇(PEG)。
46.如权利要求44或权利要求45所述的气雾剂，其中该PEG具有小于约600的平均分子量。
47.如权利要求45或权利要求46中任一项所述的气雾剂，其中该PEG具有约150至约600的平均分子量，例如约200或约400的平均分子量。
48.如权利要求45至47中任一项所述的气雾剂，其中该PEG以按该溶液的重量计至少25％的量存在，例如，其中该PEG以按该溶液的重量计至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的量存在。
49.如权利要求45至48中任一项所述的气雾剂，其中该PEG以按该溶液的重量计约40％至约98％的量存在。
50.如权利要求44至49中任一项所述的气雾剂，其中该溶液包含游离酸形式的氯硝柳胺的溶液。
51.如权利要求44至49中任一项所述的气雾剂，其中该溶液包含氯硝柳胺的药学上可接受的盐的溶液。
52.如权利要求44至49中任一项所述的气雾剂，其中该溶液包含氯硝柳胺乙醇胺的溶液。
53.如权利要求44至52中任一项所述的气雾剂，其中该氯硝柳胺或其药学上可接受的盐以按该溶液的重量计0.1％至10％例如按该溶液的重量计约5％的量存在于该溶液中。
54.如权利要求44所述的气雾剂，其中该组合物是包含按重量计约4.5％至约6.5％的氯硝柳胺乙醇胺和按重量计约93.5％至约95.5％的PEG 400的溶液。
55.如权利要求44至54中任一项所述的气雾剂，其中该溶液进一步包含掩味剂。
56.如权利要求55所述的气雾剂，其中该掩味剂选自糖(例如蔗糖、右旋糖或乳糖)、氨基酸或氨基酸衍生物(例如精氨酸、赖氨酸或谷氨酸一钠)、油(例如天然油或植物提取物)、甜味剂(例如阿斯巴甜、乙酰磺胺酸钾、三氯蔗糖或糖精)、有机酸(例如柠檬酸或天冬氨酸)和麦芽糖糊精。
57.如权利要求44至56中任一项所述的气雾剂，其中该溶液进一步包含溶剂(例如二醇，诸如丙二醇)。
58.如权利要求44至56中任一项所述的气雾剂，其中该溶液是非水性溶液，例如含有按重量计少于2％的水、优选按重量计少于0.1％的水的溶液，更优选地其中该溶液是无水的。
59.如权利要求44至58中任一项所述的气雾剂，其中该气雾剂的质量中值直径(MMD)小于约5μm。
60.如权利要求44至58中任一项所述的气雾剂，其中该气雾剂的质量中值直径(MMD)小于约2μm。
61.如权利要求44至58中任一项所述的气雾剂，其中该气雾剂的质量中值直径(MMD)为约0.5μm至约5.5μm，优选约1μm至约5μm。
62.如权利要求44至58中任一项所述的气雾剂，其中该气雾剂的质量中值直径(MMD)小于约500μm，优选小于约200μm。
63.如权利要求44至58中任一项所述的气雾剂，其中该气雾剂的质量中值直径(MMD)为约5至约150μm，优选约20至约100μm。
64.如权利要求44至63中任一项所述的气雾剂，其用于在预防或治疗受试者的病毒感染中使用，其中该气雾剂通过吸入施用于该受试者。
65.如权利要求44至63中任一项所述的气雾剂，其用于在预防或治疗受试者的病毒感染中使用，其中该气雾剂鼻内施用于该受试者。
66.一种可吸入单位剂量，该可吸入单位剂量包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和PEG的溶液，其中氯硝柳胺以基于氯硝柳胺的重量1mg至600mg例如基于氯硝柳胺的重量约150mg至约500mg的量存在。
67.一种可吸入单位剂量，该可吸入单位剂量包含氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液，其中氯硝柳胺乙醇胺以2mg至600mg例如约150mg至约500mg的量存在。
68.如权利要求66或67所述的可吸入单位剂量，其中单位剂型存在于容器中，例如小瓶、泡罩包装、瓶、注射器或吸入器装置(例如喷雾器)内的药物储器中。
69.如权利要求66至68中任一项所述的可吸入单位剂量，其中该溶液是非水性溶液，例如含有按重量计少于2％的水、优选按重量计少于0.1％的水的溶液，更优选地其中该溶液是无水的。
70.一种系统，该系统包括：包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和聚乙二醇(PEG)的溶液的容器；以及吸入器装置和/或鼻内递送装置。
71.一种套件，该套件包括：包含氯硝柳胺或其药学上可接受的盐和聚乙二醇(PEG)的溶液的容器；以及吸入器装置和/或鼻内递送装置。
72.如权利要求70或权利要求71所述的系统或套件，其中该吸入器装置或该鼻内递送装置适于雾化该溶液。
73.如权利要求72所述的系统或套件，其中该吸入器装置或该鼻内递送装置适于将雾化的溶液鼻内或口内递送给受试者。
74.如权利要求70至73中任一项所述的系统或套件，其中该吸入器装置选自喷射喷雾器、振动网喷雾器、超声喷雾器或加压计量吸入器(pMDI)。
75.一种可吸入溶液，该可吸入溶液包含按重量计约1％至10％的氯硝柳胺乙醇胺和PEG的溶液，其中该PEG具有小于600的平均分子量；以及任选的掩味剂。
76.如权利要求75所述的可吸入溶液，包含按重量计约4.5％至约6％的氯硝柳胺乙醇胺；约90％至95.5％的PEG 400以及任选的掩味剂。
77.如权利要求75所述的可吸入溶液，包含按重量计约4.5％至约6％的氯硝柳胺乙醇胺；约90％至95.5％的PEG 200以及任选的掩味剂。
78.如权利要求75至77中任一项所述的可吸入溶液，其中该溶液是非水性溶液，例如含有按重量计少于2％的水、优选按重量计少于0.1％的水的溶液，更优选地其中该溶液是无水的。
79.如权利要求1至78中任一项所述使用的组合物或方法，其中该受试者在住院。
80.如权利要求1至79中任一项所述使用的组合物或方法，其中该组合物用于预防疾病例如从轻度进展到中度或从中度进展到重度COVID-19或者降低其可能性。
81.如权利要求1至80中任一项所述使用的组合物或方法，其中该组合物预防性施用。
82.如权利要求81所述使用的组合物或方法，其中该组合物预防性施用于已经或怀疑已经暴露于被诊断为感染了病毒的人的受试者。
83.如权利要求82所述使用的组合物或方法，其中该病毒感染是SARS-CoV-2。
84.如权利要求81所述使用的组合物或方法，其中该组合物预防性施用于处于较高COVID-19风险的未感染受试者。
85.如权利要求81至84中任一项所述使用的组合物或方法，其中该预防性施用用于：
-降低该受试者发生有症状或无症状COVID-19感染的风险；
-降低因COVID-19死亡的风险；
-减轻COVID-19的症状严重程度；以及/或者
-降低该受试者感染中度或重度COVID-19的风险。
86.如权利要求81至84中任一项所述使用的组合物或方法，其中该预防性施用用于：
-降低该受试者发生继发性感染(例如继发性细菌感染)的风险；
-降低因继发性感染死亡的风险；以及/或者
-减轻继发性感染的严重程度。
87.如权利要求84所述使用的组合物或方法，其中该受试者具有现有病症或疾病，诸如：诸如糖尿病、癌症、心脏病、高血压、脑血管疾病、SCID、镰状细胞病、地中海贫血、肺纤维化、间质性肺病、慢性肺病诸如COPD、哮喘和囊性纤维化、肺气肿、支气管炎、慢性肾病、慢性肝病、肝炎、自身免疫性疾病、影响脑或神经的病症、肌肉萎缩病症或者严重或深度学习障碍。
88.如权利要求84所述使用的组合物或方法，其中该受试者选自：接受过身体组织(例如器官)移植的受试者；切除了器官(例如脾脏)的受试者；正在接受(或接受过)化学疗法、免疫疗法、抗体疗法或放射疗法的受试者；正在接受(或接受过)癌症治疗的受试者；正在接受(或接受过)蛋白激酶抑制剂或PARP抑制剂的受试者；接受过血液、骨髓或干细胞移植的受试者；正在服用免疫抑制剂的受试者；患有HIV或AIDS的受试者；以及进行血液透析的受试者。
89.如任一前述权利要求所述使用的组合物或方法，其中该组合物用于治疗无症状受试者的病毒感染，任选地其中该病毒感染是SARS-CoV-2。
90.如任一前述权利要求所述使用的组合物或方法，其中该治疗用于：
-减少或消除该受试者的病毒载量；
-加速该受试者的血清转化；
-减少受试者间的病毒传播；
-减少病毒脱落；
-预防该受试者出现症状或降低其风险；以及/或者
-预防疾病进展或降低其风险。
91.如任一前述权利要求所述使用的组合物或方法，其中该组合物鼻内施用。
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