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CN102971294A - 氨基甲酸乙酯、尿素、脒和因子Xa的相关抑制剂 - Google Patents

氨基甲酸乙酯、尿素、脒和因子Xa的相关抑制剂 Download PDF

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CN102971294A CN2011800119284A CN201180011928A CN102971294A CN 102971294 A CN102971294 A CN 102971294A CN 2011800119284 A CN2011800119284 A CN 2011800119284A CN 201180011928 A CN201180011928 A CN 201180011928A CN 102971294 A CN102971294 A CN 102971294A
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Abstract

本发明涉及一种新型化合物、它们的药用盐和药用组合物，以其分离状态和以与其他蛋白质的复合物中作为因子Xa的选择性抑制剂是有效的。本发明的化合物可以用于治疗和预防疾病，如急性冠状动脉综合症、心肌梗塞、不稳定咽峡炎、顽固性咽峡炎、由溶栓治疗后或冠状动脉成形术后引起的血栓形成、急性局部缺血介导的脑血管综合症、栓塞性中风、血栓形成性中风、和人与其他哺乳动物中与血液凝固问题相关的其他疾病。

Description

氨基甲酸乙酯、尿素、脒和因子Xa的相关抑制剂
技术领域
该发明涉及一种新型化合物，其为因子Xa的有效和高度选择性抑制剂，分离于其他蛋白质并且在复合物中与其他蛋白质一起组装。另一方面，本发明涉及一种新型化合物、它们的药用盐和其药用组合物，其作为人和其他哺乳动物中血液凝固的有效和选择性抑制剂是有用的。在又一方面，本发明涉及使用新型药剂用于治疗与人和其他哺乳动物中的凝固紊乱相关的疾病的新方法。
背景技术
止血（控制出血）是通过手术方法或通过影响血管或凝固的生理学状态完成的。特别地，该发明涉及血液凝固和其在创伤、炎症、疾病、先天性缺陷、机能障碍或其他破裂（破损，disruption）后维持人类生物体的功能中的作用。
凝血酶是负责凝固的关键蛋白质。
由于其催化纤维蛋白原转化为纤维蛋白的能力，因此凝血酶在血栓形成中发挥主要作用。
直至最近，凝血酶的直接和间接抑制剂一直是各种抗凝剂策略的焦点，例如Claeson,G.,"Synthetic Peptides and Peptidomimetics as Substratesand Inhibitors of Thrombin and Other Proteases in the Blood CoagulationSystem",Blood Coag.Fibrinol.5,411-436(1994)。目前用于临床的几种抗凝剂是凝血酶的直接或间接抑制剂（肝素、低分子量肝素、香豆素等）。
包括蛋白质（因子Xa）的凝血酶原酶复合物将酶原凝血酶原转化成活性凝血酶。因子Xa属于丝氨酸蛋白酶类，并且由于其激活而由蛋白质（因子）X形成。与作用在各种蛋白质底物和特定受体上的凝血酶不同，因子Xa明显作用在单一底物，即凝血酶原上。由于因子Xa的一个分子能够产生多达138个凝血酶分子，蛋白质Xa的直接抑制剂作为凝血酶形成的抑制剂可以在抗凝剂策略中用作有效的药剂。因此，很显然选择性抑制蛋白质Xa的药剂作为体外诊断剂或作为针对与凝固有关的疾病的治疗剂可以是有用的。
源于食血为生的生物体的多肽可以是有效的并且是因子Xa的抑制剂。美国专利4,588,587描述了墨西哥水蛭，药用南美水蛭（Haementeriaofficinalis），的唾液的抗凝剂活性。这种唾液的活化剂是多肽因子Xa抑制剂，安逖斯塔辛（antistasin，一种从水蛭衍生的重组蛋白酶抑制剂）（ATS），另一种名为蜱抗凝血肽（壁虱抗凝肽，tick anticoagulant peptide）（TAP）的因子Xa的有效和高特异性抑制剂已经从蜱Ornithidoros moubata的全体（whole body）提取物中分离。
也已经制备了为非多肽的因子Xa抑制化合物，根据：Tidwell,R.R.etal.，"Strategies for Anticoagulation With Synthetic Protease Inhibitors.XaInhibitors Versus Thrombin Inhibitors",Thromb.Res.,19,339-349(1980)；Turner,A.D.et al.，"p-Amidino Esters as Irreversible Inhibitors of Factor IXaand Xa and Thrombin",Biochemistry,25,4929-4935(1986)；Hitomi,Y.et al.,"Inhibitory Effect of New Synthetic Protease Inhibitor(FUT-175)on theCoagulation System",Haemostasis,15,164-168(1985)；Sturzebecher,J.et al.,"Synthetic Inhibitors of Bovine Factor Xa and Thrombin.Comparison of TheirAnticoagulant Efficiency",Thromb.Res.,54,245-252(1989)；Kam,C.M.etal.，"Mechanism Based Isocoumarin Inhibitors for Trypsin and BloodCoagulation Serine Proteases:New Anticoagulants",Biochemistry,27,2547-2557(1988)；Hauptmann,J.et al.,"Conzparisofz of the Anticoagulantand Antithrombotic Effects of Synthetic Thrombin and Factor Xa Inhibitors",Thromb.Haemost,63,220-223(1990)；等等。
其它已经报道了为小分子有机化合物的因子Xa抑制剂，如含氮的杂环化合物，其具有脒基取代基，其中该化合物的两个官能团可以结合至因子Xa的两个活性位点。例如，WO 98/28269描述了具有C端(=NH)-NH2基的吡唑化合物；WO 97/21437描述了由碱性基团取代的苯并咪唑化合物，该碱性基团经由直链或支链烯烃、-C(=O)或-S(=O)2桥连基团连接至萘基；WO 99/10316描述了具有经由羧酰胺亚烷氨基桥连接至3-脒基苯基的4-苯基-N-烷基脒基-哌啶的化合物；并且EP 798295描述了具有经由取代的或未取代的磺酰胺连接至脒基萘基基团的4-苯氧基-N-烷基脒基-哌啶基团的化合物。
仍然存在着对用于止血调控、和用于预防和治疗血栓形成以及其他脉管系统中由诸如再狭窄和炎症的凝血酶引发的病理过程的有效治疗剂的需求。特别地，对选择性抑制蛋白质Xa的化合物有持续的需求。如果它们具有良好的生物可利用率和/或溶解度，特别优选的是比凝血酶具有更高程度结合至蛋白质Xa的化合物。
发明内容
本发明的第一个方面由通式I的化合物表示
其中：
R1选自H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe；
R2选自CH和N；
R3和R4各自独立地选自H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe；
R5选自H或可选地包含羟基、羧基或酯基的C1-C6烷基；
R6选自：
Figure BDA00002087972100041
其中X1、X2、X3和X4各自独立地选自H或可选地包含羟基、羧基或酯基的C1-C6烷基；
R8、R9和R10各自独立地选自H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe；
R7选自H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe或：
Figure BDA00002087972100042
其中Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9和Z10各自独立地是H或可选地包含羟基、羧基或酯基的C1-C6烷基；
或其药用异构体、盐、水合物、溶剂化物以及前药衍生物。
特别优选的是选自由以下化合物构成的组中的化合物：
Figure BDA00002087972100051
Figure BDA00002087972100061
Figure BDA00002087972100071
Figure BDA00002087972100081
Figure BDA00002087972100091
Figure BDA00002087972100111
Figure BDA00002087972100121
Figure BDA00002087972100131
Figure BDA00002087972100141
本发明另外的方面由用于预防或治疗以不期望的血栓形成为特征的哺乳动物中的病症的药物组合物代表，该药物组合物包括治疗有效量的本发明的化合物。
除了为通式（I）的化合物的活性组分之外，药品组合物进一步包括药用载体、溶剂或稀释剂，其可以是在Remington的“The Science andPractice of Pharmacy”，Kirk's Othmer的“Encyclopedia of ChemicalTechnology”和专论“The Pharmacological Basis of Therapeutics,3rd Edition中报道的药剂。
本发明的另一个方面由用于预防或治疗以不期望的血栓形成为特征的哺乳动物中的病症的方法代表，该方法包括给予治疗有效量的化学式（I）的化合物。以不希望的血栓形成为特征的哺乳动物中的症状是已知的，特别是：急性冠状动脉综合症、心肌梗塞、不稳定咽峡炎、顽固性咽峡炎、与溶栓治疗后或冠状动脉成形术后有关的血栓形成、血栓形成介导的脑血管综合症、栓塞性中风、血栓形成性中风、短暂性脑缺血发作、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、肺栓子、凝血病、弥散性血管内凝血、血栓形成性血小板减少性紫癜、闭塞性血栓血管炎、与肝素引发的血小板减少有关的血栓形成疾病、与体外循环有关的血栓形成并发症、与假体设备（义肢，假肢器官装置，prosthetic devices）安装有关的血栓形成并发症。
并且本发明的又一个方面由用于抑制生物样品的凝固的方法代表，该方法包括给予化学式（I）的化合物的步骤。
具体实施方式
化合物的合成
Figure BDA00002087972100151
通过适当的方法可以合成通式（I）的化合物，例如，在适当的偶联剂存在下，通过相应的胺（II）与相应的羧酸衍生物（III）偶联
Figure BDA00002087972100161
该偶联剂如，1,1'-羰基二咪唑（CDI）、二环己基碳二亚胺（DCC）、N-(3-二甲基氨丙基)-N'乙基碳二亚胺盐酸盐（EDCI）或其他适当的偶联剂。酰胺键的形成也可以通过氯代酐（酰氯，chloroanhydrides）（IV）与胺（II）的反应实现。也可以通过用诸如SOCl2或POCl3的适当试剂处理由相应的羧酸（III）获得氯代酐（IV）。
Figure BDA00002087972100162
相应的羧酸氯代酐（羧酸酰氯，IV）容易与胺（II）反应以获得目标化合物（I）。
可以在适当情况下通过相应的硝基化合物（V）的还原获得胺（II）。可以使用例如SnCl2或在兰尼镍上催化水合作为还原剂。
Figure BDA00002087972100171
可以由相应的胺（VI）和硝基取代的羧酸（VII）合成硝基化合物（V）。
通常，通过用如SOCl2或POCl3的适当试剂处理，羧酸（VII）转化成相应的氯代酐（酰氯）（VIII）。然后氯代酐（VIII）平稳地与胺（VI）反应以获得硝基化合物（V）。酰胺键合成的替换方法可以是在诸如DCC、EDCI和CDI的适当偶联剂存在下，羧酸（VII）与胺（VI）的反应。
在多数情况下，上述反应以良好的收率平稳地进行。然而，对于一些基团R5和R6取代的羧酸（III）不与胺（II）反应。在这些情况下，应当使用适当的保护基以使酰胺键平稳形成，并且在酰胺键形成之后应当向分子中引入相应的基团R5和R6。
羧酸的尿素衍生物（IIIa），可以通过用CDI紧接着用胺X2X3NH处理相应的甲基氨基酯或乙基氨基酯（XI）合成。然后在碱性介质中水解乙基酯或甲基酯以给出期望的化合物：
Figure BDA00002087972100181
以可替换的方式，通过在X2=H的情况下与异氰酸盐/酯或氰酸钠反应，氨基酸（IIIb）可以转化成相应的尿素衍生物IIIc。
应当指出，在X2=H的情况下，在DCC、CDI和EDCI存在下，相应的尿素衍生物（IIIc）不与胺（II）反应；因此需要首先合成带有保护基团Y的受保护的胺（Ia）。
Figure BDA00002087972100191
例如，作为保护基，可以使用三氟乙酰基。在适当的偶联试剂存在下，通过与胺（II）偶联可以由相应的受保护的氨基酸（IIId）合成受保护的胺（Ia）。然后应当通过适当的试剂去除保护基；在三氟乙酰基的情况下，NaOH可以用于此目的。然后通过适当的方法胺（Ib）可以转化成相应的尿素衍生物（Ic）。例如，通过用CDI和胺X2X3NH连续处理胺（Ib）或，在X3＝H的情况下，通过用相应的异氰酸酯/盐OCN-Z2处理。
Figure BDA00002087972100201
在干燥的气态HCl存在下，通过与腈NC-CZ2Z3Z4反应，胺（Ib）也可以转化成脒（Id）。通过适当的烷基或芳基卤化物XI-Hal或其他适当的包含离去基团的试剂，脒（aminine）（Id）可以进一步烷基化或芳基化成脒（Ie）。
Figure BDA00002087972100202
Figure BDA00002087972100211
实施例1
反应1
用装配有氯化钙管的回流冷凝器在20ml的SOCl2中将1.9g的2-硝基苯甲酸煮沸4小时；冷却获得的溶液，在旋转蒸发器中蒸发，用无水THF再蒸发两次；在10ml的THF中溶解残余物；在30分钟内将获得的溶液滴加至在20ml THF中的1.5g 2-氨基-5-氯吡啶经搅拌的溶液中。15小时后，蒸发反应混合物；在30ml氯仿中溶解残余物，用NaHCO3的饱和水溶液冲洗；蒸发氯仿萃取液；将残余物施加于填充有30至50μm的硅胶的40x150mm柱中。用氯仿洗脱产物。借助于UV-单元在280nm的波长下进行检测。收集吸收紫外线的流分；用在氯仿中的薄层层析（色谱，chromatography）技术控制产物的纯度。产物的Rf是0.4；起始2-氨基-5-氯吡啶的Rf是0.7。氯仿中的2-硝基苯甲酸残留在起始物中（Rf<0.1）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-硝基苯甲酰胺的收率是2.4g。质谱图（MALDI-VP）：M+H 278，M+Na 300。
反应2
将1.5g的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-硝基苯甲酰胺溶解在20ml的乙酸乙酯中，并且与用0.3ml浓HCl酸化的20ml水中的4g SnCl2溶液混合。激烈搅拌反应混合物1小时，升温至沸腾，并且煮沸另外的3小时。然后过滤反应混合物，并用CHCl3萃取水溶液部分，并且在搅拌下向水溶液部分加入30ml的10%氨水溶液，并且使得静置一夜以沉淀。第二天，过滤沉淀物并用水和氯仿冲洗。用氯仿萃取水溶液部分；将萃取液合并在一起并蒸发。将残余物施加于填充有40至60μm的硅胶的30x150mm柱中。用氯仿洗脱产物。借助于UV-单元在280nm的波长下进行检测；用在氯仿中的薄层层析技术控制产物的纯度。产物的Rf是0.6；2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)苯甲酰胺的收率是650mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 248，M+Na 270。
反应3
在冷却下混合1g的4-甲氨基苯甲酸和3ml的三氟乙酸酐。2小时后，蒸发反应混合物并用氯仿再蒸发。在氯仿中溶解残余物，并施加于填充有40至60μm的硅胶的35x 150mm柱中。用氯仿洗脱副产物，并且用添加有1%乙酸的9:1氯仿/异丙醇混合物洗脱目标产物。4-甲氨基苯甲酸的收率是700mg。Rf是0.2-0.4。负离子的质谱图（MALDI-VP）：M-l 246。
反应4
将3000mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)苯甲酰胺、250mg的4-甲氨基苯甲酸的三氟乙酸盐和250mg的EDCI与1ml的THF混合并搅拌3天。然后，蒸发混合物并施加于填充有40至60μm的硅胶的25x 150mm柱中。用氯仿洗脱产物；Rf=0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)氨基]苯甲酰胺的收率是430mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H477，M+Na 499。
反应5
将400mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)氨基]苯甲酰胺溶解在5ml的异丙醇中，并加入2ml的10%NaOH。搅拌反应混合物3小时；然后用5%的HCl水溶液中和过量的碱；蒸发反应混合物并施加于填充有40至60μm的硅胶的25x150mm柱中。用氯仿洗脱产物；Rf=0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基氨基苯基羰基)氨基]苯甲酰胺的收率是320mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 381，M+Na 403。
反应6
在加热下将300mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基氨基苯基羰基)氨基]苯甲酰胺溶解在5ml的乙腈中。在冰上冷却获得的溶液，然后使干燥的气态HCl通过其中。在30分钟后，将溶液放入冰箱中，并使得在5°C下静置48小时。然后，在激烈搅拌下将NaHCO3加入反应混合物中。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。通常，该过程需要大约0.5g的NaHCO3。用5ml的水稀释用HCl中和过量的（NaHCO3）获得的溶液并用氯仿萃取三次。将氯仿萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶解在水中，并施加于填充有反向C2（RP2）的20x 250mm柱中。用100ml的水冲洗柱；然后以1%的乙酸为背景，用梯度从0%至50%的乙醇进行洗脱。产物的收率是大约每30%的乙醇。用以9:1二氧杂环己烷/氨水体系的TLC技术进行纯度控制；Rf=0.2。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-亚胺代乙酰基-甲基氨基苯基羰基)氨基]苯甲酰胺（N-(5-chloropyridine-2-yl)-2-[(4-ethaneimidoyl-methylaminophenylcarbonyl)amino]benzamide）的收率是200mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 422，M+Na 444。
Figure BDA00002087972100231
实施例2
与实施例1类似，根据在实施例1的反应1中描述的过程，800mg的5-甲基-2-硝基苯甲酸收获650mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基-2-硝基苯甲酰胺。Rf=0.45（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 292，M+Na 314。
根据在实施例1的反应2中描述的过程，600mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基-2-硝基苯甲酰胺收获350mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺。Rf=0.65（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 262，M+Na284。
根据在实施例1的反应4中描述的过程，300mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺和250mg的4-甲氨基苯甲酸的三氟乙酸盐收获430mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)-氨基]-5-甲基-苯甲酰胺。Rf=0.55（氯仿）。带正电荷的离子的质谱图m+H491。
根据在实施例1的反应5中描述的过程进行三氟乙酰基的去除。400mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)-氨基]-5-甲基-苯甲酰胺收获300mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基羰基)氨基]-5-甲基苯甲酰胺。Rf=0.5（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H395，M+Na 417。
根据在实施例1的反应6中描述的过程进行脒的合成。该反应涉及250mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基羰基)-氨基]-5-甲基苯甲酰胺。该反应收获130mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）-甲基-氨基苯基羰基)氨基]-5-甲基苯甲酰胺。以9:1二氧杂环己烷/氨水体系的TLC。Rf=0.2（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H436，M+Na 458。
Figure BDA00002087972100241
实施例3
与实施例1类似，根据在实施例1的反应1中描述的过程，900mg的5-氯-2-硝基苯甲酸收获750mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯-2-硝基苯甲酰胺。Rf=0.3（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 312，M+Na 334。
根据在实施例1的反应2中描述的过程，700mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯-2-硝基苯甲酰胺收获350mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺。Rf=0.6（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 282，M+Na 304。
根据在实施例1的反应4中描述的过程，300mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺和250mg的4-甲氨苯甲酸的三氟乙酸盐收获430mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)氨基]-5-氯-苯甲酰胺。Rf=0.5（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 511，M+Na 533。
根据在实施例1的反应5中描述的过程进行三氟乙酰基的去除。400mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)-氨基]-5-甲基-苯甲酰胺收获300mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基羰基)氨基]-5-氯苯甲酰胺。Rf=0.45（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 415，M+Na 437。
根据在实施例1的反应6中描述的过程进行脒的合成。该反应涉及250mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基羰基)-氨基]-5-氯苯甲酰胺。该反应收获130mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）-甲基-氨基苯基羰基)氨基]-5-氯苯甲酰胺。Rf=0.2（9:1二氧杂环己烷/氨水）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 456，M+Na 478。
Figure BDA00002087972100251
实施例4
与实施例1类似，根据在实施例1的反应1中描述的过程，1.5g的5-甲氧基-2-硝基苯甲酸收获1.1g的N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲氧基-2-硝基苯甲酰胺。Rf=0.5（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 308，M+Na 330。
根据在实施例1的反应2中描述的过程，1g的N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲氧基-2-硝基苯甲酰胺收获300mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺。Rf=0.7（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 278，M+Na 300。
根据在实施例1的反应4中描述的过程，250mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲氧基苯甲酰胺和220mg的4-甲氨基苯甲酸的三氟乙酸盐收获310mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺。Rf=0.6（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 507，M+Na 529。
根据在实施例1的反应5中描述的过程进行三氟乙酰基的去除。280mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(三氟乙酰基)氨基苯基羰基)-氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺收获200mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基羰基)氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺。Rf=0.5（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 411，M+Na 433。
根据在实施例1的反应6中描述的过程进行脒的合成。该反应涉及170mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基羰基)-氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺。该反应收获110mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）-甲基-氨基苯基羰基)氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺。Rf=0.2（9:1二氧杂环己烷/氨水）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 452，M+Na 474。
Figure BDA00002087972100261
实施例5
反应1
将1g氨基水杨酸溶解在20ml的二氧杂环己烷水溶液中。向溶液中加入900mg的二碳酸二叔丁基酯和3ml的10%NaOH水溶液。24小时后，蒸发反应混合物，通过从乙醇中重结晶纯化4-叔丁氧基羰基氨基水杨酸。收率是1.1g。
反应2
将0.5g的4-叔丁氧基羰基氨基水杨酸、0.6g的N-(3-氯丙基)-乙酰胺和0.5g的K2CO3的混合物加热至110°C；1小时后，冷却反应混合物，用水稀释，并且用氯仿萃取；蒸发萃取液并且将其施加于填充有40至60μm的硅胶的30x 150mm柱中；用9:1氯仿/乙醇混合物洗脱该产物。Rf=0.5（9:1氯仿/乙醇）。2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯甲酸的收率是400mg。
反应3
将370mg的2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]苯甲酸溶解在3ml乙醇中，并加入100μl的10%HCl。2小时后，蒸发反应混合物，并通过重结晶从乙醇中纯化该产物。Rf=0.45（9:1氯仿/乙醇）。2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-氨基苯甲酸的收率是300mg。
反应4
将270mg的2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-氨基水杨酸与300μl的40%甲醛、在2ml水中的400mg NaOH溶液和400mg锌粉混合。搅拌反应混合物并使得在60°C下静置4小时；然后过滤，用乙醇水溶液冲洗沉淀物；用HCl水溶液将滤液酸化至达pH 4-5，蒸发，并将残余物施加于填充有40至60μm的硅胶的25x 150mm柱中。以9:1氯仿/乙醇体系洗脱产物。Rf=0.5。2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-甲氨基)苯甲酸的收率是150mg。
反应5
将130mg的2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-甲氨基)苯甲酸溶解在包含500mg NaOH的2ml乙醇水溶液中。将混合物密封在加热至100°C持续10小时的安瓿中。冷却安瓿，打开，用稀HCl将过量的碱中和至pH 8-9；然后，蒸发获得的溶液。将残余物施加于填充有40至60μm的硅胶的20x 150柱中。用氯仿洗脱产物。Rf=0.3。2-[3-氨基丙氧基]-4-(甲氨基)苯甲酸的收率是100mg。
反应6
将90mg的2-[3-氨基丙氧基]-4-(甲氨基)苯甲酸与1ml的三氟乙酸酐混合。1小时后，蒸发反应混合物，将残余物施加于填充有40至60μm的硅胶的20x 150柱中。以9:1氯仿/乙醇体系洗脱产物。2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基-(甲基)氨基]苯甲酸的收率是100mg。
反应7
在1ml的THF中混合80mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)苯甲酰胺、100mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基-(甲基)氨基]苯甲酸和80mg的EDCI，并且搅拌48小时。然后，蒸发反应混合物，将残余物施加于装有硅胶的柱中，并且用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{4-三氟乙酰(甲基)氨基]-2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]苯基-羰基氨基}苯甲酰胺的收率是80mg。
反应8
在100μl的3M NaOH和1ml乙醇的混合物中溶解70mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{4-三氟乙酰基(甲基)氨基]-2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]苯基羰基氨基}苯甲酰胺，并且搅拌1小时；然后中和该溶液，蒸发残余物，用在硅胶上的层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)-苯基羰基氨基]-苯甲酰胺的收率是55mg。
反应9
在加热下在2ml乙腈中溶解50mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)-苯基羰基氨基]苯甲酰胺。在冰上冷却获得的溶液，然后使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后，将溶液置于冰箱中，并使得在5°C下静置48小时。然后，向反应混合物中加入NaHCO3并且彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。用5ml水稀释以过量HCl中和后获得的溶液，并且用氯仿萃取三次。蒸发经氯仿处理的萃取液。将残余物溶于水中，并用1%的NaOH水溶液滴定直至pH 9。使得溶液在25°C下静置3小时；然后中和，蒸发，将残余物施加于填充有反相C2（RP2）的20x 250柱中。用100ml水洗涤柱；然后，以1%乙酸水溶液为背景，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。每大约30%乙醇收获产物。用以8:2异丙醇/氨水体系的TLC技术进行纯度控制。Rf=0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）甲氨基)-2-(3-氨基丙氧基)苯基羰基-氨基]苯甲酰胺的收率是20mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 495，M+Na517。
Figure BDA00002087972100291
实施例6
反应1
将95mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺、120mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基]-4-[三氟乙酰基(甲基)氨基]苯甲酸和80mg的EDCI与1ml的THF混合，并且搅拌48小时。然后，蒸发反应混合物，将残余物施加于装有硅胶的柱中，并且用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基-2-(3-三氟乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是85mg。
反应2
将80mg的N-(氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰氨基(甲基)氨基)2-(3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰溶解在100μl的3M NaOH水溶液和1ml乙醇的混合物中，并且搅拌1小时；然后中和溶液，并蒸发残余物；在硅胶上用TLC技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)苯基羰氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是65mg。
反应3
在加热下将60mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)-苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在2ml乙腈中。在冰上冷却获得的溶液，并且使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后，将溶液置于冰箱中，并使得在50°C下静置48小时。然后向反应混合物中加入NaHCO3并且彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。用5ml水稀释以过量HCl中和所获得的溶液，并且用氯仿萃取三次。将经氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。在水中溶解残余物并且用1%的NaOH滴定至pH=9。使得溶液在25°C下静置3小时，中和，蒸发，将残余物施加于填充有反相C2（RP2）的2x 250柱中。用100ml水洗涤柱，然后以1%乙酸水溶液为背景，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物收率是大约每30%的乙醇。用在8:2异丙醇/氨水体系中的TLC技术控制纯度。Rf=0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）甲氨基)-2-(3-氨基丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基-苯甲酰胺的收率是30mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 509，M+Na 531。
Figure BDA00002087972100301
实施例7
反应1
将95mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺、90mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基(甲氨基)苯甲酸和80mg的EDCI与1ml的THF混合，并且搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，将残余物施加于包含硅胶的柱中，并用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-(3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基)苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是85mg。
反应2
将80mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-(3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基)苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺溶解在100μl的3MNaOH水溶液和1ml乙醇的混合物中，并且搅拌1小时；然后中和溶液，蒸发残余物，并在硅胶上用层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf＝0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-(乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是65mg。
在加热下在2ml乙腈中溶解60mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-(乙酰氨基)丙氧基)苯基-羰基-氨基]-5-氯苯甲酰胺。在冰上冷却获得的溶液，使干燥的气态HCl通过其中。在30分钟内，将溶液置于冰箱中，并使得其在5°C下静置48小时。然后，向反应混合物中加入NaHCO3并且彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。用5ml水稀释以过量HCl中和所获得的溶液，并且用氯仿萃取三次。将经氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶于水中，并且用1%的NaOH水溶液滴定直至pH=9。使溶液在25°C下静置3小时，中和，蒸发，将残余物施加于用反相C2（RP2）填充的20x 250柱中。用100ml水洗涤柱；然后，以1%乙酸水溶液为背景，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物收率是大约每30%的乙醇。用以8:2异丙醇/氨水体系的TLC技术控制纯度。Rf＝0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）甲氨基)-2-(3-氨基丙氧基)苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是30mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 528，M+Na 550。
Figure BDA00002087972100311
实施例8
反应1
将90mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲氧基苯甲酰胺、100mg的2-[3-三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基(甲氨基)]苯甲酸和90mg的EDCI与1ml的THF混合，并且搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，将残余物施加于装有硅胶的柱中，并用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-(3-(三氟乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺的收率是85mg。
反应2
将80mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-(3-(三氟乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺溶解在100μl的3MNaOH水溶液和1ml乙醇的混合物中，并且搅拌1小时；然后中和溶液，蒸发残余物，在硅胶上用层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf＝0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺的收率是65mg。
在加热下将60mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺溶解在2ml乙腈中。用冰冷却获得的溶液，并且使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后，将溶液置于冰箱中，并使得在5°C下静置48小时。然后向反应混合物中加入NaHCO3直至气体停止放出。在5ml水中溶解以过量HCl中和所获得的溶液，并且用氯仿萃取三次。将经氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶于水并且用1%的NaOH水溶液滴定直至pH=9。使溶液在25°C下静置3小时；然后中和溶液，蒸发，并且施加于填充有反相C2（RP2）的20x 250柱中。用100ml水洗涤柱，以1%的乙酸水溶液为背景，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物的收率是大约每30%乙醇。用以8:2异丙醇/氨水体系的TLC技术控制产物的纯度。Rf=0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）甲氨基)-2-(3-氨基丙氧基)苯基羰氨基]-5-甲氧基苯甲酰胺的收率是30mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 525，M+Na 547。
Figure BDA00002087972100321
实施例9
反应1
将1.5g的4-甲氨基-6-氟水杨酸溶解在20ml二氧杂环己烷水溶液中。向溶液中加入2g的二碳酸二叔丁基酯和3ml的10%NaOH水溶液。24小时后，蒸发反应混合物，通过重结晶从乙醇中纯化4-叔丁氧基羰基(甲氨基)-6-氟水杨酸。收率是1.6g。
反应2
将1.5g的4-4-叔丁氧基羰基(甲氨基)-6-氟水杨酸、1.6g的N-(3-氯丙基)-三氟乙酰胺、和1.5g的K2CO3加热至110°C；1小时后，冷却反应混合物，用水稀释，用氯仿萃取，并且将萃取液施加于填充有40至60μm的硅胶的30x 150柱中；用9:1氯仿/乙醇混合物洗脱产物。Rf=0.5（氯仿/乙醇混合物）。2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[(叔丁氧基羰基)甲氨基]-6-氟苯甲酸的收率是390mg。
反应3
在3ml乙醇中溶解370mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[(叔丁氧基羰基)甲氨基]-6-氟苯甲酸，并且加入100μl的10%HCl。2小时后，蒸发反应混合物，通过重结晶从乙醇中纯化产物。Rf=0.45（9:1氯仿/乙醇）。2-[3-三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-甲氨基-6-氟苯甲酸的收率是280mg。
反应4
270mg的2-[3-(三氟氨基)丙氧基]-4-甲氨基-6-氟苯甲酸与1ml的三氟乙酸酐混合。1小时后，蒸发反应混合物，将残余物施加于填充有40至60μm的硅胶的20x 150柱中；用9:1氯仿/乙醇混合物洗脱产物。2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基-(甲基)氨基]-6-氟苯甲酸的收率是280mg。
反应5
将250mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺、280mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基(甲基)氨基]-6-氟苯甲酸和300mg的EDCI与2ml的THF混合，并且搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，将残余物施加于其中装有硅胶的柱中，并用二氯甲烷洗脱产物。Rf＝0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-(3-三氟乙酰氨基)丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是270mg。
反应6
在300μl的3M NaOH水溶液和2ml乙醇的混合物中溶解250mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-3-(三氟乙酰氨基)丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺，并搅拌1小时；然后中和溶液，蒸发残余物，并在硅胶上用层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf＝0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是160mg。
反应7
在加热下将150mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在5ml乙腈中。在冰中冷却获得的溶液；然后使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后，将溶液置于冰箱中，并使在5°C下静置48小时。向反应混合物中加入NaHCO3，并且彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。在10ml水中稀释以过量HCl中和所获得的溶液，并且用氯仿萃取三次。将经氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶于水并且用1%的NaOH水溶液滴定直至pH=9。使溶液在25°C下静置3小时，蒸发，将残余物施加于填充有反相C2（FP2）的20x 250柱中。用100ml水洗涤柱；然后以1%乙酸水溶液为背景，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物收率是大约每30%的乙醇。在3:5:2乙腈/二氧杂环己烷/氨水体系中，用TLC技术控制产物纯度。Rf=0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）甲氨基)-2-(3-氨基丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是70mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 527，M+Na 549。
Figure BDA00002087972100341
实施例10
反应1
将250mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺、290mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基(甲基)氨基]-6-氟苯甲酸和280mg的EDCI与1ml的THF混合，并且搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，将残余物施加于装有硅胶的柱中，用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-三氟乙酰基(甲基)氨基-2-(3-(三氟乙酰氨基)丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是270mg。
反应2
将180mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-三氟乙酰基(甲基)氨基-2-(3-三氟乙酰氨基)丙氧基)6-氟苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺溶解在400μl的3MNaOH和2ml乙醇的混合物中，并且搅拌1小时；然后中和溶液，蒸发残余物，并在硅胶上用层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是160mg。
反应3
在加热下将150mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-氨基-丙氧基)-6-氟苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺溶解在5ml乙腈中。在冰中冷却获得的溶液，并使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后，将溶液置于冰箱中，并使得在5°C下静置48小时。然后向反应混合物中加入NaHCO3并且彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。用10ml水稀释以过量HCl中和后所获得的溶液，并且用氯仿萃取三次。将经氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶于水并且用1%的NaOH水溶液滴定直至pH=9。使溶液在25°C下静置3小时，中和，蒸发，将残余物施加于填充有反相C2（RP2）的20x 250柱中。用100ml水洗涤柱；然后针对1%乙酸水溶液，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物收率是大约每30%的乙醇。在3:5:2的乙腈/二氧杂环己烷/氨水体系中用TLC技术控制产物的纯度。Rf=0.5。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-(3-氨基丙氧基)-6-氟-4-(亚胺代乙酰基（ethaneamidoyl）甲氨基)苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是60mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 547，M+Na 569
Figure BDA00002087972100361
实施例11
反应1
将0.5mg的4-甲氨基-2-氟苯甲酸与1ml三氟乙酸酐混合。1小时后蒸发反应混合物，将残余物施加于填充有40至60μm的硅胶的20x 150柱中。在9:1氯仿/乙醇体系中洗脱产物。2-氟-4-[三氟乙酰基(甲基)氨基]苯甲酸的收率是470mg。
反应2
在3ml的THF中混合450mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺、480mg的2-氟-4-[三氟乙酰基(甲基)氨基]苯甲酸和500mg的EDCI，并且搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，将残余物施加于包含硅胶的柱中，用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-三氟乙酰基(甲基)氨基苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是470mg。
反应3
将450mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-三氟乙酰基(甲基)氨基苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在300μl的3M NaOH水溶液和3ml乙醇的混合物中；然后中和溶液，蒸发残余物，并且在硅胶上用层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.2。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-甲氨基苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是380mg。
反应4
在加热下将350mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-甲氨基苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在5ml乙腈中。用冰冷却获得的溶液，并且使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后，将溶液置于冰箱中，并使得在5°C下静置48小时。然后，向反应混合物中加入NaHCO3并且彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。用10ml水稀释以过量HCl中和后所获得的溶液，并用氯仿萃取三次。将经氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶于水并用1%的NaOH水溶液滴定直至pH=9。使溶液在25°C下静置3小时，中和，蒸发，将残余物施加于填充有反相C2（RP2）的20x 250柱中。用100ml水洗涤柱；然后以1%乙酸水溶液为背景，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物收率是大约每30%的乙醇。在9:1二氧杂环己烷/氨水体系中用TLC技术控制产物纯度。Rf=0.2。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）(甲基)氨基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是160mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 454，M+Na 476。
Figure BDA00002087972100371
实施例12
反应1
在2ml的THF中混合350mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺、370mg的2-氟-4-[三氟-乙酰基(甲氨基)]苯甲酸和390mg的EDCI并搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，将残余物施加于装有硅胶的柱中，用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-三氟乙酰基(甲基)氨基苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是370mg。
反应2
将350mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-三氟乙酰基(甲基)氨基苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺溶解在300μl的NaOH水溶液和3ml乙醇的混合物中，并搅拌1小时；然后中和溶液，蒸发残余物，在硅胶上用层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-甲氨基苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是320mg。
反应3
在加热下将300mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-甲氨基苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺溶解在5ml乙腈中。在冰中冷却获得的溶液，并使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后，将溶液置于冰箱中，并使得在5°C下静置48小时。然后向反应混合物加入NaHCO3并彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体停止放出。用10ml水稀释以过量HCl中和后所获得的溶液并用氯仿萃取三次。将经氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶于水并用1%的NaOH滴定直至pH=9。使溶液在25°C下静置3小时，中和，蒸发，将残余物施加于填充有反相C2（RP2）的2x 250柱中。用100ml水洗涤柱；然后以乙酸水溶液为背景，用从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物收率是大约每30%的乙醇。在9:1二氧杂环己烷/氨水体系中用TLC技术控制产物纯度。Rf=0.2。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-(亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）(甲基)氨基)苯基羰基氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是140mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 474，M+Na 496。
Figure BDA00002087972100381
实施例13
反应1
将90mg的2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-(甲氨基)苯甲酸与1ml三氟乙酸酐混合。1小时后蒸发反应混合物，将残余物施加于填充有40至60μm的硅胶的20x 150柱中。在9:1氯仿/乙醇体系中洗脱产物。2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基(甲基)氨基)]苯甲酸的收率是100mg。
反应2
在1ml的THF中将90mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺、95mg的2-[3-(乙酰氨基)丙氧基]-4-[三氟乙酰基(甲基)氨基]苯甲酸和80mg的EDCI混合，并搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，将残余物施加于包含硅胶的柱中，并用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.5（二氯甲烷）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-(3-(乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是80mg。
反应3
将70mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(三氟乙酰基(甲基)氨基)-2-(3-(乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在100μl的3M NaOH水溶液和1ml乙醇的混合物中，并且搅拌1小时；然后中和溶液，蒸发残余物，并在硅胶上用层析技术纯化产物。用二氯甲烷洗脱产物。Rf=0.4。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-(乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是55mg。
反应4
在加热下将50mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-甲氨基-2-(3-(乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在2ml乙腈中。在冰中冷却获得的溶液，并使干燥的气态HCl通过其中。30分钟后将溶液置于冰箱中，并使得在5°C下静置48小时。然后向反应混合物中加入NaHCO3并彻底搅拌。加入新部分的NaHCO3直至气体放出停止。用5ml水稀释以过量HCl中和后所获得的溶液并用氯仿萃取三次。将用氯仿处理的萃取液合并在一起并蒸发。将残余物溶于水并用1%的NaOH水溶液滴定直至pH=9。使得溶液在25°C下静置3小时，中和，蒸发，将残余物施加于填充有反相C2（RP2）的20x 250柱中。用100ml水洗涤柱，并以1%乙酸水溶液为背景，以从0%至50%的乙醇梯度进行洗脱。产物收率是大约每30%的乙醇。在9:1二氧杂环己烷/氨水溶液体系中用TLC技术控制产物纯度。Rf＝0.3。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[4-(亚胺代乙酰基（ethaneimidoyl）甲氨基)-2-(3-(乙酰氨基)丙氧基)苯基羰基氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是20mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 551，M+Na 573。
Figure BDA00002087972100401
实施例14
反应1
在1ml的THF中将100mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基羰基)氨基]-5-甲基苯甲酰胺和150mg氰酸钠混合，并加入300μm（可能应为μl）乙酸。搅拌反应混合物24小时。然后，蒸发反应混合物，将残余物施加于包含硅胶的柱中，用氯仿洗脱产物。Rf=0.25（氯仿）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-氨基甲酰基(甲基)氨基苯基羰基)氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是70mg。
反应2
将60mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-氨基甲酰基(甲基)氨基苯基羰基)氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在2ml的THF中，并向溶液中加入200μl硫酸二甲酯。搅拌反应混合物24小时，蒸发，并使残余物经历在硅胶上的层析分离。用氯仿洗脱N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-(亚氨基(甲氧基)甲基)(甲基)氨基苯基羰基)氨基]-5-甲基苯甲酰胺。收率是40mg。Rf=0.4（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 452，M+Na 474。
Figure BDA00002087972100402
实施例15
反应1
在乙腈中将250mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基-羰基)氨基]-5-甲基苯甲酰胺、290mg的4-苄基-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐（4-benzyl-3,5-dimethyl-1H pyrazole-1-carboxamidine hydrochloride）和130μl的三乙胺混合，并使得在60°C下静置24小时。然后蒸发反应混合物，并在反相C2上用层析技术分离。以1%乙酸水溶液为背景，用乙醇梯度洗脱产物。2-[4-甲脒基甲氨基]苯基羰基氨基]-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺（2-[4-亚胺代甲酰基甲氨基]苯基羰基氨基]-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺，2-[4-carbamimidoylmethylamino]phenylcarbonylamino]-N-(5-chloropyridine-2-y1)5-methylbenzamide）的收率是150mg。
反应2
将120mg的2-[4-脒基（亚胺代甲酰基，carbamimidoyl）甲氨基]苯基羰基氨基]-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺溶解在2ml的THF中，并加入100μl甲基碘和150mg的K2CO3。将反应混合物加热至50°C并使得静置10小时。然后蒸发反应混合物，并在反相C2上用层析技术分离残余物。2-[4-(甲基(N-甲基甲脒基（亚胺代甲酰基，carbamimidoyl）)-氨基)]苯基羰基氨基]-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺的收率是70mg。Rf=0.3（8:2二氧杂环己烷/氨水溶液）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 451，M+Na 473。
Figure BDA00002087972100411
实施例16
反应1
在乙腈中将250mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲氨基苯基-羰基)氨基]-5-氯苯甲酰胺、290mg的4-苄基-3,5-二甲基-1H-吡唑-1-甲脒（亚胺代甲酰基，carbamimidoyl）盐酸盐和130μl三乙胺混合，并使得在60°C下静置24小时。然后蒸发反应混合物，并在反相C2上用层析技术分离。以1%乙酸水溶液为背景，用乙醇梯度洗脱产物。2-[4-甲脒基（亚胺代甲酰基，carbamimidoyl）甲氨基]苯基羰基氨基]-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺的收率是150mg。
反应2
将120mg的2-[4-甲脒基（亚胺代甲酰基，carbamimidoyl）甲氨基]苯基羰基氨基]-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺溶解在2ml THF中，并加入100μl甲基碘和150mg的K2CO3。将反应混合物加热至50°C并使得静置10小时。然后蒸发反应混合物，在反相C2上用层析技术分离残余物。2-[4-(甲基(N-甲基甲脒基（亚胺代甲酰基，carbamimidoyl）)-氨基)]苯基羰基氨基]-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺的收率是70mg。Rf=0.3（8:2二氧杂环己烷/氨水）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 471，M+Na 493。
Figure BDA00002087972100421
实施例17
反应1
向10ml THF中的750mg的4-甲氨基苯甲酸的溶液中加入700μl异氰酸甲酯。在室温下搅拌反应混合物72小时，蒸发，并且用水再蒸发。从异丙醇中重结晶产物。4-[甲基(甲基氨基甲酰基)氨基]苯甲酸的收率是700mg。
反应2
将在2ml THF中的300mg的4-[甲基(甲基氨基甲酰基)氨基]苯甲酸、250mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺和300mg的EDCI搅拌72小时。然后蒸发反应混合物，在硅胶上用层析技术分离残余物。用氯仿然后用9:1氯仿/乙醇洗涤柱。Rf=0.5（氯仿）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(甲基氨基甲酰基)氨基苯基羰基)氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是280mg。Rf=0.3（8:2二氧杂环己烷/氨水）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 472，M+Na 494。
Figure BDA00002087972100431
实施例18
将2ml THF中的240mg的4-[甲基(甲基氨基甲酰基)氨基]苯甲酸、220mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺和250mg的EDCI搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，用层析技术分离残余物。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-[(4-甲基(甲基氨基甲酰基)氨基苯基-羰基)氨基-5-甲基苯甲酰胺的收率是250mg。Rf=0.55（氯仿）。质谱图（MALDI-VP）：M+H 452，M+Na474。
Figure BDA00002087972100432
反应1
将0.5g的4-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]水杨酸、0.6g的N-(3-氯丙基)-三氟乙酰胺和0.5g K2CO3的混合物加热至110°C。1小时后冷却反应混合物，用水稀释，并用氯仿萃取；蒸发萃取液并施加于填充有40至60μm的硅胶的30x 150柱中；用9:1氯仿/乙醇混合物洗脱产物。Rf=0.5（9:1氯仿/乙醇）。2-[3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基]-4-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]苯甲酸的收率是350mg。
反应2
将320mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基]-4-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]苯甲酸溶解在2ml乙醇中，并加入200μl的10%HCl水溶液，搅拌溶液3小时，然后中和反应混合物，蒸发，在硅胶上用层析技术以9:1氯仿/乙醇混合物分离残余物。2-[3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基]-4-(甲基)氨基苯甲酸的收率是250mg。
反应3
在5ml THF中加入220mg的2-[3-(三氟乙酰氨基)-丙氧基]-4-(甲基)氨基苯甲酸，并且加入300μl异氰酸甲酯。78小时后，蒸发反应混合物，在硅胶上用层析技术以9:1氯仿/乙醇混合物分离残余物。4-[甲基(甲基氨基甲酰基)氨基]-2-[3-(三氟乙酰基-氨基)丙氧基苯甲酸的收率是230mg。
反应4
将2ml THF中的200mg的4-[甲基(甲基氨基甲酰基)氨基]-2-[3-(三氟乙酰氨基)丙氧基苯甲酸（377）、140mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-甲基苯甲酰胺（262）和150mg的EDCI搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，用层析技术分离残余物。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{[4-甲基(甲基氨基甲酰基)-氨基]-2-[3-(三氟乙酰-氨基)丙氧基]苯基羰基}氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是210mg。Rf=0.5（氯仿）。
反应5
将190mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{[4-甲基(甲基氨基甲酰基)-氨基]-2-[3-(三氟乙酰-氨基)丙氧基]苯基羰基}氨基]-5-甲基苯甲酰胺溶解在2ml乙醇中，加入200ml的10%NaOH水溶液。2小时后，蒸发反应混合物并在硅胶上用层析技术分离。Rf=0.45（氯仿）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{[4-甲基(甲基氨基甲酰基)-氨基]-2-[3-氨基丙氧基]苯基羰基}氨基]-5-甲基苯甲酰胺的收率是160mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 525，M+Na 547。
Figure BDA00002087972100451
实施例20
反应1
将2ml THF中的200g的[4-甲基(甲基氨基甲酰基)-氨基-2-[3-(三氟乙酰-氨基)]丙氧基苯甲酸、140mg的2-氨基-N-(5-氯吡啶-2-基)-5-氯苯甲酰胺和150mg的EDCI搅拌48小时。然后蒸发反应混合物，用层析技术分离残余物。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{[4-甲基(甲基氨基甲酰基)-氨基]-2-[3-三氟乙酰-氨基)丙氧基]苯基羰基}氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是210mg。Rf=0.5（氯仿）。
反应2
将190mg的N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{[4-甲基(甲基氨基甲酰基)-氨基]-2-[3-三氟乙酰-氨基)丙氧基]苯基羰基}氨基]-5-氯苯甲酰胺溶解在2ml乙醇中，并加入200ml的10%NaOH水溶液。2小时后，蒸发并在硅胶上用层析技术分离反应混合物。Rf=0.45（氯仿）。N-(5-氯吡啶-2-基)-2-{[4-甲基(甲基氨基甲酰基)-氨基]-2-[3-氨基丙氧基]苯基羰基}氨基]-5-氯苯甲酰胺的收率是160mg。质谱图（MALDI-VP）：M+H 545M+Na 567。
Figure BDA00002087972100452
针对因子Xa的各物质的体外活性
对于在以上实施例中描述的一些化合物，已经测定了这些物质针对因子Xa的体外活性常数—Ki。根据由蛋白质分解底物S-2222的初始速率，进行了动力学测量。在室温下，在2ml的矩形石英比色皿中进行测定。在反应中使用以下溶液：50mM Tris-HCl、150mM NaCl、2.5mM CaCl2和0.1%PEG 6000，pH7.5，因子Xa 0.04-1nm，S-2222164μΜ。标准最小二乘法用于确定特定浓度的蛋白质和底物的Km。反应之前，溶液中的蛋白质和活化剂在恒温控制下持续10分钟；然后加入底物并引发反应。用SpecordM80仪器由在405nm波长下光吸收的变化测定反应速率。由实验获得（的数据）依赖于抑制剂（活化剂）的浓度的初始速率来测定IC50值。由蛋白质、底物和抑制剂的浓度计算Ki值；IC50值，通过在（1）Jordan,S.P.,;Waxman,L.;Smith,D.E.;Vlasik,G.P.Biochemistry 1990,29,11095和（2）Morrison,J.F.Biochim.Biophys.Acta 1969,185,269中描述的方法（测定）。结果在表1中示出。
表1.针对蛋白质Xa的化合物的体外活性常数Ki
  物质   Ki，nΜ
  实施例1   2.0
  实施例2   0.5
  实施例3   0.3
  实施例4   1.0
  实施例5   0.5
  实施例6   0.5
  实施例7   0.5
  实施例8   0.5
  实施例9   0.4
  实施例10   0.4
  实施例11   0.8
  实施例12   1.0
  实施例13   0.5
  实施例14   2.0
  实施例15   0.5
  实施例16   0.5
  实施例17   0.15
  实施例18   0.15
  实施例19   0.2
  实施例20   0.2
人血浆中针对凝血酶原时间的各物质的体外活性
对于在以上实施例中描述的一些化合物，已经测定了人类血浆中这些化合物的浓度，在该浓度下血浆的凝血酶原时间等于两倍—2PT。借助于Diahem P试剂盒（NPO Renam，www.renam.ru），通过在试剂盒的用户说明书中描述的方法进行测定。将活性化合物溶解于试剂盒中提供的血浆中并温育3分钟。用Sysmex CA 50仪器进行测定。对于每一浓度进行3次测量，并将结果平均。结果在表2中示出。
表2针对血浆中蛋白质Xa的化合物的活性常数Ki
  物质   2xPT，μΜ
  实施例1   0.5
  实施例2   0.08
  实施例3   0.12
  实施例4   0.1
  实施例5   0.2
  实施例6   0.2
  实施例7   0.2
  实施例8   0.2
  实施例9   0.15
  实施例10   0.15
  实施例11   0.09
  实施例12   0.09
  实施例13   1.5
  实施例14   5.0
  实施例15   1.5
  实施例16   1.5
  实施例17   2.0
  实施例18   3.0
  实施例19   1.0
  实施例20   1.0

Claims (25)

1.一种化学式I的化合物：
Figure FDA00002087972000011
其中：
R1选自H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe；
R2选自CH和N；
R3和R4各自独立地选自H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe；
R5选自H或可选地由羟基、羧酸或羧酸酯基团取代的C1-C6烷基；
R6选自：
Figure FDA00002087972000021
其中：
X1、X2、X3和X4各自独立地是H或可选地由羟基、羧酸或羧酸酯基团取代的C1-C6烷基；
R8、R9和R10各自独立地选自H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe；
R7选自基团H、-Cl、-F、-Br、-OH、-Me、-OMe或选自：
Figure FDA00002087972000022
其中Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9和Z10各自独立地是
H或可选地用羟基、羧酸或羧酸酯基团取代的C1-C6烷基；
以及其药用异构体、盐、水合物、溶剂化物及前药衍生物。
2.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
3.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000032
4.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000041
5.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000042
6.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000051
7.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000052
8.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000061
9.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000062
10.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
11.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000072
12.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000081
13.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000082
14.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000091
15.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000092
16.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000101
17.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000102
18.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000111
19.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000112
20.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
21.根据权利要求1所述的化合物，具有以下结构：
Figure FDA00002087972000122
22.一种用于预防或治疗以不期望的血栓形成为特征的哺乳动物中的病症的药物组合物，包括治疗有效量的权利要求1-21中任一项所述的化合物。
23.一种用于预防或治疗以不期望的血栓形成为特征的哺乳动物中的病症的方法，包括给予所述哺乳动物治疗有效量的权利要求1-21中任一项所述的化合物。
24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述病症选自由以下构成的组：急性冠状动脉综合症、心肌梗塞、不稳定咽峡炎、顽固性咽峡炎、溶栓治疗后或冠状动脉成形术后发生的闭塞性冠脉血栓、血栓形成介导的脑血管综合症、栓塞性中风、血栓形成性中风、短暂性脑缺血发作、静脉血栓形成、深静脉血栓形成、肺栓子、凝血病、弥散性血管内凝血、血栓形成性血小板减少性紫癜、闭塞性血栓血管炎、与肝素引发的血小板减少有关的血栓形成疾病、与体外循环有关的血栓形成并发症、与假体设备安装有关的血栓形成并发症。
25.一种用于抑制生物样品凝固的方法，包括给予权利要求1-21中任一项所述的化合物的步骤。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014003153A1 (ja) * 2012-06-28 2014-01-03 協和発酵キリン株式会社 置換アミド化合物
RU2698202C2 (ru) * 2016-06-01 2019-08-23 Закрытое акционерное общество "ФАРМА ВАМ" СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЯМОГО ИНГИБИТОРА ФАКТОРА Ха
EA030138B1 (ru) * 2016-06-15 2018-06-29 Общество С Ограниченной Ответственностью "Фармадиол" Фармацевтические композиции, включающие антикоагулянт n-(5-хлорпиридин-2-ил)-2-({4-[этанимидоил(метил)амино]бензоил}амино)-5-метилбензамид
RU2659161C1 (ru) 2017-11-17 2018-06-28 Общество С Ограниченной Ответственностью "Ива Фарм" Фармацевтическая композиция, включающая дисульфид глутатиона и глутатион дисульфид s-оксид
EA201800084A1 (ru) * 2018-01-19 2019-07-31 Общество С Ограниченной Ответственностью "Фармадиол" НОВЫЕ АМИДИНЫ-ИНГИБИТОРЫ ФАКТОРА Ха

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1391555A (zh) * 1999-09-17 2003-01-15 千禧药品公司 苯甲酰胺和相关的因子Xa抑制剂
WO2003048158A1 (en) * 2001-12-04 2003-06-12 Bristol-Myers Squibb Company Glycinamides as factor xa inhibitors
CN1481358A (zh) * 2000-12-16 2004-03-10 Ĭ��ר���ɷ����޹�˾ 酰胺衍生物和它们在治疗血栓栓塞性疾病和肿瘤中的用途

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4588587A (en) 1983-03-01 1986-05-13 Pennsylvania Hospital Method of treatment to inhibit metastasis
TW300888B (zh) 1994-12-02 1997-03-21 Yamanouchi Pharma Co Ltd
US5849759A (en) 1995-12-08 1998-12-15 Berlex Laboratories, Inc. Naphthyl-substituted benzimidazole derivatives as anti-coagulants
KR20000062284A (ko) 1996-12-23 2000-10-25 블레어 큐. 퍼거슨 인자 Ｘａ 억제제로서의 질소 함유 헤테로방향족 화합물
AU8747598A (en) 1997-08-27 1999-03-16 Kissei Pharmaceutical Co. Ltd. 3-amidinoaniline derivatives, activated blood coagulation factor x inhibitors, and intermediates for producing both
EP1242366A1 (en) * 1999-12-15 2002-09-25 Axys Pharmaceuticals, Inc. Salicylamides as serine protease and factor xa inhibitors
DE19962924A1 (de) 1999-12-24 2001-07-05 Bayer Ag Substituierte Oxazolidinone und ihre Verwendung
US6376515B2 (en) 2000-02-29 2002-04-23 Cor Therapeutics, Inc. Benzamides and related inhibitors of factor Xa
TWI331526B (en) 2001-09-21 2010-10-11 Bristol Myers Squibb Pharma Co Lactam-containing compounds and derivatives thereof as factor xa inhibitors
WO2006070878A1 (ja) * 2004-12-28 2006-07-06 Astellas Pharma Inc. カルボン酸誘導体またはその塩
DE102005042583A1 (de) * 2005-09-08 2007-03-15 Bayer Healthcare Ag Iminooxazolidin-Derivate und ihre Verwendung
US7598276B2 (en) * 2005-11-08 2009-10-06 Millenium Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical salts and polymorphs of a factor Xa inhibitor
CA2671502C (en) * 2006-12-08 2017-01-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Unit dose formulations and methods of treating thrombosis with an oral factor xa inhibitor

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1391555A (zh) * 1999-09-17 2003-01-15 千禧药品公司 苯甲酰胺和相关的因子Xa抑制剂
CN1481358A (zh) * 2000-12-16 2004-03-10 Ĭ��ר���ɷ����޹�˾ 酰胺衍生物和它们在治疗血栓栓塞性疾病和肿瘤中的用途
WO2003048158A1 (en) * 2001-12-04 2003-06-12 Bristol-Myers Squibb Company Glycinamides as factor xa inhibitors

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