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CN102406649A - 人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用 - Google Patents

人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用 Download PDF

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CN102406649A
CN102406649A CN2011103613136A CN201110361313A CN102406649A CN 102406649 A CN102406649 A CN 102406649A CN 2011103613136 A CN2011103613136 A CN 2011103613136A CN 201110361313 A CN201110361313 A CN 201110361313A CN 102406649 A CN102406649 A CN 102406649A
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Abstract

本发明公开了人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，将以上五种碱基应用于肿瘤的治疗领域，制成口服制剂、注射剂、缓释剂或靶向制剂，经过标准品抗肿瘤作用对照证明：参与人体代谢的五种正常碱基，在体内、外达到一定浓度时，具有不同程度的诱导肿瘤细胞凋亡和抗肿瘤血管生成作用；本发明的优点在于：五种碱基与其它抗肿瘤药相比，具有广谱、低毒的抗肿瘤作用，可用于胃癌、肺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌和生殖系统等恶性肿瘤的化学治疗，抗肿瘤作用明显，常规用量无骨髓抑制和重要脏器损害，与正常核苷相比其抗肿瘤作用增强。

Description

人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用
技术领域
本发明涉及一种抗肿瘤药物，具体地说是人体代谢的五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，属于肿瘤药物领域。
背景技术
人正常碱基包括腺嘌呤（Adenine ）CAS：73-24-5，分子式：C5H5N5，分子量：135.13；鸟嘌呤(Guanine )CAS：73-40-5，分子式：C5H5N5O，分子量：151.13；胞嘧啶(Cytosine) CAS：71-30-7，分子式：(C4H5N3O)，分子量：111.11；胸腺嘧啶(Thymin) CAS：65-71-4，分子式：C5H6N2O2，分子量：126.11；尿嘧啶(Uracil) CAS：66-22-8，分子式：C4H4N2O2，分子量：112.09。
碱基在DNA和RNA中多以一磷酸核苷的形式存在，但是其配对关系的形成主要取决于碱基。人正常的碱基在核酸类物质消化吸收过程中可以产生，也是核酸类物质补救合成的重要原料。但是正常的核苷酸代谢可以不经过碱基出现直接形成代谢废物排出体外，如：腺苷→次黄嘌呤核苷→黄嘌呤核苷→尿酸排出体外。
以上五种碱基均可以在体外用不同方法得到，是重要的药物和保健品中间体。其中腺嘌呤，又称维生素B4，在体内参与RNA和DNA合成。当白细胞缺乏时，它能促进白细胞增生，一般用药2～4周，白细胞数目可增加，是肿瘤化疗病人白细胞降低时用于升高白细胞的药物。人体五种碱基之一的腺嘌呤因为能够参入DNA和RNA等核酸的合成，能够在合成ATP等物质中其重要作用，目前腺嘌呤，又称维生素B4，可用于肿瘤病人化疗等所致的白细胞下降的治疗。体外可用于血液的保存。
目前，在学术界中普遍认可的治疗肿瘤理论是：通过在正常碱基上添加不同元素或取代基，形成正常碱基类似物来阻滞细胞DNA或RNA的合成，从而抑制肿瘤的扩散。例如，名称为“协同抗癌组合物”、专利号为“CN200480036362.0”的专利申请，公开了使用抗代谢碱基类似物作为抗肿瘤的成分，抗肿瘤抗代谢碱基类似物通过抑制细胞核酸合成酶，抑制或预防癌症的生长以及干扰细胞核酸合成。
发明内容
本发明的目的在于，提供了人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，这五种碱基分别是腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶；将上述五种碱基制成口服制剂、注射剂、缓释剂或靶向制剂，抗治肿瘤效果明显，且多种碱基组合作为治疗肿瘤的药物成分使用，较单独应用能够达到明显提高抗肿瘤效果，减少毒副作用和延缓耐药性发生的目的。
本发明的技术方案为：
人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，所述的碱基包括：腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶。
优选地，所述的碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶中的一种或多种；
优选地，所述的碱基为鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶或尿嘧啶中的一种或两种与腺嘌呤的组合。
所述的药物为口服片剂、注射剂或缓释剂。
所述的口服片剂的制备方法为：将所述的碱基加入不同辅料如淀粉，碱基和辅料的重量比例为1:1，制成口服片剂，所述的碱基总含量为10-30mg/片，片剂的重量大小例如可以是1g、2g或5g等，对其治疗和使用不会产生影响；
所述的注射剂的制备方法为：将所述的碱基溶解于浓度为5-25mg/mL的磷酸缓冲溶液，制成碱基总浓度为5-25mg/mL的注射剂，每只注射剂体积为2-10mL；
所述的缓释剂的制备方法为：用药物脂质体、微囊或胶束释药系统将所述的碱基制成5-25mg/mL缓释剂，然后将缓释剂做成注射剂。
进一步地，上述各碱基组合的摩尔数相同。
所述的肿瘤包括胃癌、肺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌、白血病、生殖系统肿瘤等多种常见恶性肿瘤。
通过研究发现：鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶抗肿瘤作用低于腺嘌呤，因腺嘌呤的副作用很小可与其它碱基组合作为抗肿瘤药。不同的腺嘌呤组合用药比单一用药血液中的单一药物浓度降低，因而毒副作用下降。同时多种药组合用药可延缓肿瘤耐药性的发生。通过组合用药，能够降低各成分单一用药时的用药量，而每种具体核苷的绝对浓度明显下降，药物对机体的毒副作用就下降；同时，二种或多种化疗药物组合用药可大大降低耐药性的发生。将腺苷与其它人正常碱基组合后，用在制备治疗上述肿瘤的药物中，可加辅料制成口服制剂或者加缓冲盐等增加其溶解度制成注射剂，进行注射使用；注射剂可以是常规注射剂，也可是各种类型的缓释注射剂。
不同肿瘤有不同的核酸代谢与组成特点，对不同肿瘤细胞每种碱基有不同的抑制强度，但腺嘌呤的抗肿瘤作用最强，体外实验当浓度达到0.3mg/mL时，72小时肿瘤抑制率在90%以上。单一腺嘌呤治疗肿瘤瘤体大小的30%完全缓解，有效率在93.0%以上。
使用剂量低，为0.001～0.05mmol/Kg/天，肌注或静脉点滴；口服给药可增加药量0.5-1.5倍。
本发明的优点在于：
1、腺嘌呤与其它人正常碱基组合用于制备治疗胃癌、肺癌、肝癌、结肠癌、乳腺癌、生殖系统肿瘤等多种常见恶性肿瘤的药物，抗肿瘤效果明显，具有高效、广谱、低毒的特点；
2、腺嘌呤与其它人正常碱基组合的抗肿瘤作用明显高于各类核苷及其组合；
3、腺嘌呤与其它人正常碱基组合用药比单一用药血液中的单一药物浓度降低，从而毒副作用降低；
4、腺嘌呤与其它人正常碱基组合用药可延缓肿瘤耐药性的发生。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
不同浓度的腺嘌呤与5-FU体外抑瘤对照实验。
一、试验方法
将人宫颈癌Hela肿瘤细胞（中国科学院上海细胞所提供），用含10%新生牛血清的RPMI 1640培养基培养，取对数生长期的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化后以3×103个/孔接种于96孔板，置于37℃、5%CO2培养箱中培养24小时，每组设8个复孔，试验组分别设复孔药物浓度为0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64mg/mL共8个总浓度，培养液每孔200μL，对照组的5-FU与试验组浓度相同，用无血清培养基稀释，0.22μm的无菌微孔滤膜过滤。在拟定的测量时间48小时，倒置显微镜观察细胞形态并拍照，然后每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，置于37℃、5%CO2培养箱中继续培养4小时，终止培养，吸弃孔内培养的上清液，每孔加入150μL DMSO，震荡10分钟，使结晶物充分溶解后，以自动酶标仪（Thermo，型号MULTISKAN MK3）测量570mn处吸光度。每一板每组设8个复孔，每个实验重复3次，表1中数据为三次实验的平均数。
肿瘤细胞生长抑制率计算公式如下：
肿瘤细胞存活率(%)=加药孔的实际OD值/阴性对照孔的OD值；
肿瘤细胞生长抑制率(%)=100%－细胞存活率。
表1：腺嘌呤对Hela细胞的48小时抑制率（%）                                               
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE001
其中：Adenine为腺嘌呤，5-FU为5-氟尿嘧啶。
二、结果与分析
经计算腺嘌呤与5-FU在0.005至0.64浓度范围内48小时对Hela细胞的抑制率无统计学差异（P>0.5）；腺嘌呤IC50为70ug/mL左右。
实施例2
五种人正常碱基的体外抑瘤实验。
一、试验方法
将人肺癌SPC肿瘤细胞（中国科学院上海细胞所提供），用含10%新生牛血清的RPMI 1640培养基培养，取对数生长期的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化后以3×103个/孔接种于96孔板，置于37℃、5%CO2培养箱中培养24小时，每组设8个复孔，试验组加入五种碱基，五种碱基及对照组5-FU的每个复孔药物浓度为0.5mg/mL，培养液每孔200μL，0.22μm的无菌微孔滤膜过滤。在拟定的测量时间48小时，倒置显微镜观察细胞形态并拍照，然后每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，置于37℃、5%CO2培养箱中继续培养4小时，终止培养，吸弃孔内培养的上清液，每孔加入150μL DMSO，震荡10分钟，使结晶物充分溶解后，以自动酶标仪（Thermo，型号MULTISKAN MK3）测量570mn处吸光度。每一板每组设8个复孔，每个实验重复3次，表2中数据为三次实验的平均数。
肿瘤细胞生长抑制率计算公式如下：
肿瘤细胞存活率(%)=加药孔的实际OD值/阴性对照孔的OD值；
肿瘤细胞生长抑制率(%)=100%－细胞存活率。
表2：人正常五种碱基对人肺癌SPC肿瘤细胞48、72小时抑制率（%）
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE002
其中，A、G、C、T、U分别代表腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶。
二、结果与分析
从上表2中可以分析：
1、鸟嘌呤由于溶解度较低，部分药物不溶解被滤除，实际浓度0.3mg/mL；
2、腺嘌呤的抑制率明显高于其它碱基，而且腺嘌呤就是维生素B4，已经治疗白细胞减少症。
实施例3
腺嘌呤与其它四种碱基中一种的组合的抑瘤实验。
一、试验方法
将人肝癌HepG2肿瘤细胞（中国科学院上海细胞所提供），用含10%新生牛血清的RPMI 1640培养基培养，取对数生长期的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化后以3×103个/孔接种于96孔板，置于37℃、5%CO2培养箱中培养24小时，每组设8个复孔，试验组加入A+G、A+C、A+T、A+U，腺嘌呤与其它4种碱基的组合摩尔比例为1:1，两种碱基的浓度分别为0.25mg/mL。试验组4种组合及对照组5-FU的每个复孔药物总浓度为0.5mg/mL。培养液每孔200μL，0.22μm的无菌微孔滤膜过滤。在拟定的测量时间48小时，倒置显微镜观察细胞形态并拍照，然后每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，置于37℃、5%CO2培养箱中继续培养4小时，终止培养，吸弃孔内培养的上清液，每孔加入150μL DMSO，震荡10分钟，使结晶物充分溶解后，以自动酶标仪（Thermo，型号MULTISKAN MK3）测量570mn处吸光度。每一板每组设8个复孔，每个实验重复3次，表3中数据为三次实验的平均数。
肿瘤细胞生长抑制率计算公式如下：
肿瘤细胞存活率(%)=加药孔的实际OD值/阴性对照孔的OD值；
肿瘤细胞生长抑制率(%)=100%－细胞存活率。
表3：腺嘌呤与其它一种碱基的组合对人肝癌HepG2的抑制率（%）
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE003
其中，A、G、C、T、U分别代表腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶。
二、结果与分析
由表3可见：
1、腺嘌呤与任意一种其它碱基摩尔比1:1组合后，抗肿瘤作用略有下降，但药物的绝对浓度下降1/2；
2、四种组合的体外抑瘤作用A+T最强，A+C最弱。
实施例4
腺嘌呤与其它四种碱基中的任二种组合的抑瘤实验。
一、试验方法
将人胃癌细胞BGC823肿瘤细胞（中国科学院上海细胞所提供），用含10%新生牛血清的RPMI 1640培养基培养，取对数生长期的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化后以3×103个/孔接种于96孔板，置于37℃、5%CO2培养箱中培养24小时，每组设8个复孔，试验组加入A+C+U、A+G+C、A+C+T、A+T+U、A+U+G，腺嘌呤与其它四种碱基的任意两种组合摩尔比为1:1:1，每个复孔药物总浓度为0.5mg/mL，三种碱基的浓度分别为0.167mg/mL。对照组5-FU的浓度为0.5mg/mL。培养液每孔200μL，0.22μm的无菌微孔滤膜过滤。在拟定的测量时间48小时，倒置显微镜观察细胞形态并拍照，然后每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，置于37℃、5%CO2培养箱中继续培养4小时，终止培养，吸弃孔内培养的上清液，每孔加入150μL DMSO，震荡10分钟，使结晶物充分溶解后，以自动酶标仪（Thermo，型号MULTISKAN MK3）测量570mn处吸光度。每一板每组设8个复孔，每个实验重复3次，表3中数据为三次实验的平均数。
肿瘤细胞生长抑制率计算公式如下：
肿瘤细胞存活率(%)=加药孔的实际OD值/阴性对照孔的OD值；
肿瘤细胞生长抑制率(%)=100%－细胞存活率。
表4：腺嘌呤与其它两种碱基组合对人胃癌细胞BGC823抑制率（%）
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE004
其中，A、G、C、T、U分别代表腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶。
二、结果与分析
由表4可见：
1、腺嘌呤与其他两种其它碱基摩尔比1:1:1组合后，抗肿瘤作用有下降，但药物的绝对浓度下降2/3；
2、五种组合的体外抑瘤作用A+T+U最强，A+G+C最弱。
实施例5
口服胶囊剂生产工艺
1、规格与配方
1.1 配方：10mg/粒
腺嘌呤：10g（以无水物计）
微晶纤维素：66g
羧甲基淀粉钠：15g
硬脂酸镁 ：2g
制成：1000粒。
1.2 配方中各组分作用
腺嘌呤：主药；微晶纤维素：稀释剂；羧甲基淀粉钠：崩解剂；硬脂酸镁：润滑剂。
2、工艺
（1）将腺嘌呤干燥后粉碎过60目筛，微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁80℃干燥，过100目筛，备用；
（2）称取配方量的腺嘌呤、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁，混合均匀；
（3）装胶囊；
（4）取样全检，合格后包装得成品。
二、使用方法
用于人的使用方法，60-120mg/天，分3次饭前口服。
实施例6
腺嘌呤荷瘤兔MRI药效学研究
应用背景抑制磁共振弥散成像技术及氢质子磁共振波谱动态监测腺嘌呤对VX2肝移植瘤的治疗后反应；结合相关的病理学改变探讨磁共振分子影像学在腺嘌呤抗肿瘤药效学评价中的作用，初步验证其抗肿瘤作用机制。采用开腹瘤块种植法将瘤块种植到新西兰纯种大白兔的肝左叶。接种后用二维超声监测肿瘤的大小及生长情况，待肿瘤长至0.5-1.5cm大小时，将荷瘤兔随机分为腺嘌呤组（A组）、内皮抑素组（B组）和空白对照组（C组）共三组，每组8只。在荷瘤14天后开始耳缘静脉注射药物，A组给予腺嘌呤4.0mg/kg；B组给予内皮抑素1.0mg/kg；C组给予生理盐水0.3mL/kg，每日用药一次，连续用药10天。三组均于用药前1天及用药后2、7、13天行MR常规序列、STIR-EPI-DWI检查，用药前1天及用药后10天行1H-MRS检查。分别测量各组肿瘤组织在不同时间点表观弥散系数ADC值及治疗前后胆碱化合物(choline, Cho)峰与脂质(lipid, Lip )峰的峰高，同时测量肿瘤体积并评价T1WI、T2WI图像上的信号特征。治疗后第14天处死全部试验动物取出瘤块，无菌取材部分新鲜肿瘤组织做荧光实时定量PCR检测肿瘤VEGF-A mRNA的表达，剩下的肿瘤组织取最大横断面，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，5μm连续切片；分别行HE染色进行病理学检查，免疫组化染色检测肿瘤CD31的表达，TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡。结果表明肿瘤的接种成功率为100%，化学治疗前三组肿瘤大小没有统计学意义(P>0.05)。肿瘤变化情况见下表：表5：各时间点肿瘤体积(cm3)及相对肿瘤体积自然对数值ln(RTV)
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE005
*与对照组比较P<0.01，▲与对照组比较P<0.05
表6：VEGF-A mRNA表达和MVD计数在各组中的分布及相关性
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE006
*与对照组比较P<0.01
表7：治疗13天后肿瘤组织ADC值(×10-3mm2/s)与AI相关性
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE007
*与对照组比较P<0.01，#与内皮抑素组比较P<0.01
结论：1、腺嘌呤有抑制兔VX2肿瘤生长的作用；2、利用DWIBS和1H-MRS技术可以在用药早期动态的评价腺嘌呤对VX2肝移植瘤的疗效；3、腺嘌呤具有诱导细胞凋亡，抑制肿瘤血管生成的抗肿瘤作用机制。
实施例7
一、注射剂生产工艺
1、规格与配方
1.1 配方：5mg/mL
腺嘌呤：50g（以无水物计）
氯化钠：90g
注射用水：10000mL
制成1000支注射剂。
1.2 配方中各组分作用
腺嘌呤：主药
氯化钠：渗透压调节剂
注射用水：溶剂。
2、工艺
（1）玻璃安瓿按注射剂要求先粗洗后用注射用水精洗，烘干备用；
（2）向配料罐中加注射用水6000mL，加入配方量的氯化钠搅拌溶解；
（3）加入0.05%的针用活性炭，60℃搅拌吸附30分钟，粗滤脱炭；加热至80℃以上再加配方量腺嘌呤搅拌溶解，加注射用水至全量；
（4）搅拌均匀，冷却，精滤；
（5）取样化验；
（6）灌装入安瓿中，熔封； 115℃热压灭菌30分钟。
（7）灯检、包装、入库。
二、使用方法：40-100mg/天，加入250mL或500mL生理盐水中缓慢静脉点滴。
三、药效学研究
1. 实验材料与方法
实验动物：BALB/c小鼠30只，雌性♀，体重22±2g，购自山东省实验动物中心。
细胞株：小鼠结肠癌CT-26细胞株，由第二军医大学惠赠。
实验药物：按上述配方山东大学新药评价中心制备。内皮抑素：购自山东烟台麦得津生物工程股份有限公司。
方法：用含10%小牛血清的RPMI-1640培养基常规培养CT-26细胞，于37℃含5%CO2恒温培养箱内培养至细胞对数生长期进行细胞接种，以1.5×106/mL的密度0.2mL接种于小鼠右侧腋部皮下。荷瘤5天后30只小鼠均见米粒大小肿瘤长出，30只荷瘤小鼠随机分成3组，于荷瘤第5天分别在左侧腋部皮下注射生理盐水、内皮抑素（2ug/天/只）、腺嘌呤（2mg/天/只）各0.4mL。连续用药14天后，MR活体观察肿瘤生长状况，评价治疗效果。16天实验结束后，处死小鼠，称取瘤重及测量肿瘤大小并进行病理及免疫组化检测。
2. 实验结果
小鼠接种5天后均见肿瘤生长，荷瘤成功率100%。
表8：不同药物对小鼠肿瘤的抑制作用
Figure 2011103613136100002DEST_PATH_IMAGE008
结论：
1、腺嘌呤对小鼠荷瘤模型肿瘤抑制作用明显；
2、腺嘌呤肿瘤抑制作用优于内皮抑制素。
实施例8
一、缓释注射剂生产工艺
1、规格与配方
1.1 配方：5mg/支
腺嘌呤：50g（以无水物计）
聚乳酸共聚物：50g
二氯甲烷：500mL
羧甲基纤维素钠：15g
0.9%氯化钠溶液：10000mL
制成1000支缓释注射剂。
1.2 配方中各组分作用
腺嘌呤：主药
聚乳酸共聚物：缓释辅料
羧甲基纤维素钠：助溶剂
二氯甲烷：溶媒
0.9%氯化钠溶液：溶剂。
2、生产工艺
（1）西林瓶、瓶塞及铝盖按注射剂要求先粗洗后用注射用水精洗，烘干备用；
（2）将配方量的聚乳酸共聚物加入容器中，加二氯甲烷适量溶解混匀，再加配方量的腺嘌呤混匀，用喷雾干燥法制备注射用微球；
（3）将制得的注射用微球溶于羧甲基纤维素钠生理盐水中，制成混悬液；
（4）将混悬液分别装入西林瓶，-80℃冷冻24小时后，置于冻干机真空干燥48小时；
（5）取样化验；
（6）压塞，压铝盖；
（7）检验、包装、入库。
二、使用方法
用于人的使用方法，40-100mg/天，加入250mL生理盐水中静脉点滴。
实施例9
HT-29大肠癌鸡胚尿囊膜移植模型建立及抗肿瘤血管生成、组织细胞增殖机制研究。
一、建立稳定的大肠癌鸡胚尿囊膜移植模型
观察鸡胚尿囊膜血管发育的动态变化，明确建立大肠癌鸡胚尿囊膜移植模型的最适条件。选择最高成瘤率时接种HT-29细胞的最低数量作为模型建立的理想接种细胞数量；将相同理想数量的HT-29细胞接种于不同日龄鸡胚尿囊膜的相对无血管区，确定最佳接种胚龄；将理想数量的细胞接种到最适日龄鸡胚尿囊膜的相对无血管区，了解大肠癌鸡胚尿囊膜移植模型的瘤体生长和血管生成变化规律。 
二、抗肿瘤机制探讨
设腺嘌呤组、PBS做空白对照组、恩度为阳性对照组、VEGF为阴性对照组共4个组。选择已接种HT-29细胞3天后的成瘤鸡胚，在成瘤处放置预处理的明胶海绵，将实验组药物和对照组PBS各取10μl分别加于各组的明胶海绵上，孵育5天，固定取膜，观察不同实验组血管形成特征，计算所选区域血管面积比，并计算血管生成抑制率。取瘤体组织固定，石蜡包埋、常规石蜡切片，HE染色法观察瘤体的组织学特征，采用免疫组织化学技术检测组织增殖细胞核抗原PCNA的表达。结果表明5μg/鸡胚的腺嘌呤可抑制大肠癌鸡胚尿囊膜移植模型的血管生成，腺嘌呤抗肿瘤的机制并不只是通过直接抑制肿瘤细胞的增殖，而是通过抑制血管内皮细胞的增殖，进而抑制肿瘤组织血管形成，从而进一步抑制肿瘤生长。 
结论：
1、腺嘌呤有明显抑制鸡胚肿瘤血管生长的作用；
2、其抑制鸡胚肿瘤血管生成的作用较内皮抑素强；
3、腺嘌呤能抑制肿瘤各级新生血管生成。

Claims (8)

1.人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，所述的五种碱基包括：腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶。
2.根据权利要求1所述的人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，其中，所述的碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，其中，所述的碱基为鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶或尿嘧啶中的一种或两种与腺嘌呤的组合。
4.根据权利要求1所述的人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，其中，所述的肿瘤为肺癌、结肠癌、胃癌、食管癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、生殖系统肿瘤或胶质瘤。
5.根据权利要求1-4所述的人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，其中所述的药物为口服片剂、注射剂、缓释剂或靶向制剂。
6.根据权利要求5所述的人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，所述口服片剂的制备方法是将所述的碱基加入辅料中，碱基和辅料的重量比例为1:1，制成碱基含量为10-30mg/片口服片剂。
7.根据权利要求5所述的人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，所述注射剂的制备方法为将所述的碱基直接溶解于磷酸缓冲溶液中，制成碱基总浓度为5-25mg/mL的注射剂，每只注射剂体积为2-10mL。
8.根据权利要求5所述的人体五种正常碱基在制备治疗肿瘤药物中的应用，所述缓释剂的制备方法为：用药物脂质体、微囊或胶束释药系统将所述的碱基制成缓释剂，然后将缓释剂做成注射剂。
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