CN101406201B - 销毁携带检疫性枯萎病菌的香蕉病株的药物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种销毁携带检疫性枯萎病菌的香蕉病株的药物及其应用。销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的药物，其活性成分为草甘膦和咪鲜胺。本发明还公开了一种销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的方法。该方法是将所述的药物注射到香蕉病株内，销毁携带枯萎病菌的香蕉病株。本发明销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的方法为我国香蕉疫区控制香蕉枯萎病、避免疫情进一步扩散提供了技术支撑，具有广阔的应用前景和潜在的经济和生态效益。
Description
技术领域
本发明涉及销毁携带检疫性枯萎病菌的香蕉病株的药物及其应用。
背景技术
香蕉枯萎病(Banana vascular wilt)是一个毁灭性土传病害，其传染性非常强，目前已成为制约全球香蕉产业生产的一个关键因素。该病又称巴拿马病、黄叶病，是由尖孢镰刀菌侵染引起的典型维管束系统性病害，可导致植株枯萎死亡(图1和2)。其病原菌为古巴尖廉孢菌[Fusarium oxysporum f.sp.Cubense(E.F.Smith)Snyder et Hasen]，属古巴专化型，为一种土壤习居菌，在土壤中可存活多年(图3)。
香蕉枯萎病为外来入侵我国的有害生物，是国际植物检疫对象。近年来在我国南方香蕉产区传播蔓延很快，使香蕉生产面临着巨大的威胁。在我国台湾、海南、广东、福建、广西蕉区都有严重发生。在广东珠江三角洲香蕉产区，病株率严重的可达90％以上，导致成片蕉园丢荒，而无法种植香蕉，据不完全统计，目前华南地区的香蕉受影响面积已超过6000hm2。
至今为止，尚未找到一种有效防治香蕉枯萎病的方法，目前生产中主要采用种植香蕉抗病品种或与其他作物轮作的方式以缓解该病的发生和蔓延。对于病害发生区，必须要销毁香蕉病株之后，才能有效实施种植抗病品种或与其他作物轮作的病害治理方案。通常香蕉病株株高约有2-3m，假茎的直径约有20-40cm，在田间自然枯死需二个月时间，目前，人们多采用挖、砍、烧、毒、埋等手段集中销毁香蕉病株，这些方式尽管有效，但也存在许多问题。首先是病株挖、砍、埋过程中需要销耗大量的人力、物力；其次是烧毁病株或使用大量化学杀菌剂处理土壤，均可引起环境污染和土壤药物残留；再者是病株掩埋过程中病株、病土的迁移不当极易造成人为的病菌传播和扩散。因此，必须采取严格的销毁治理措施以避免或减轻上述问题的产生，阻止病菌进一步扩散，有效地保护农业生态环境。
研究简便、快速、有效、实用的香蕉枯萎病株销毁方法，是香蕉枯萎病菌无公害综合防治体系重要内容之一。
发明内容
本发明的目的是提供一种销毁携带检疫性枯萎病菌的香蕉病株的药物及其应用。
本发明所提供的销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的药物，其活性成分为草甘膦和咪鲜胺。
其中，所述药物可为多种混配剂，可为注射剂。所述草甘膦和咪鲜胺可以混合在一起；也可以是独立包装，使用时分别稀释到使用浓度，然后混合在一起。所述药物中，草甘膦的质量百分含量为0.41-1.37％，咪鲜胺的浓度为0.9-1.5g/L。
本发明的另一个目的是提供一种销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的方法。
本发明所提供的销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的方法，是将所述的药物注射到香蕉病株内，销毁携带枯萎病菌的香蕉病株。
其中，所述方法中，携带枯萎病菌的香蕉病株的直径小于20cm，每株注射所述药物30ml。携带枯萎病菌的香蕉病株的直径大于20cm，每株注射所述药物60ml。
本发明针对香蕉枯萎病菌为土传病菌，香蕉为草本植物，体积较大的问题，提供了一种销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的药物，该药物为注射剂，不仅可以达到就地销毁香蕉病株的目的，又可做到无病菌扩散、环境污染少，无药物漂移，还可做到省时省工，对实现香蕉病株快速销毁及病区香蕉品种更换和其他作物品种的轮作具有重要的作用。
本发明的药物中选择低毒、低残留的灭生性除草剂草甘磷为活性成分，能加速已感染枯萎病香蕉的死亡，一般病株在20天内就能死亡干枯。选择咪鲜胺为枯萎病镰刀菌的有效杀菌剂，室内毒力测定结果，其EC50值为0.0384mg/L，其特点是低毒、低残留，通过注射方式将咪鲜胺药物注射进入香蕉植株体内后，能杀灭或抑制植株中病菌的生长和增殖，降低香蕉植株体内的带菌量。咪鲜胺与草甘磷按比例混合，剂型稳定，不影响草甘磷自身的除草功能。
本发明提供了简便、速快、有效、省工、实用的销毁携带枯萎病菌香蕉病株的方法，与土壤药物灌根法相比，进入香蕉体内的药物不受雨淋、光照等环境因素影响，也不存在药物的土壤吸附问题，所以其具有药物用量少，成本低的特点。该方法解决了香蕉病株存在大量枯萎病菌引发的向外传播、造成更大面积危害性的问题，同时解决了砍后留田的香蕉病株生物量大、短时间难以腐烂而影响其它作物生产的问题，也可以避免使用化学农药灌根处理土壤等常规方法造成药物在土壤中的吸附及导致环境污染的问题。该方法为我国香蕉疫区控制香蕉枯萎病、避免疫情进一步扩散提供了技术支撑，具有广阔的应用前景和潜在的经济和生态效益。
附图说明
图1为香蕉枯萎病发病症状。
图2为香蕉枯萎病典型症状——根茎部微管束变褐。
图3为香蕉枯萎病病原菌。
图4为香蕉专用型药液注射器。
图5为田间应用注射器注射香蕉病植株。
图6为应用注射器注射药物后香蕉枯死。
具体实施方式
下述实施例中，如无特殊说明，所述百分数均为质量百分数。
实施例1、销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的药物
一、杀菌剂对香蕉枯萎病菌毒力和其使用浓度
a)供试杀菌剂
25％凯润乳油(巴斯夫贸易有限公司)、25％丙环唑乳油(西安龙灯化工有限公司)、10％世高水分散粒剂、30％爱苗乳油(先正达(中国)投资有限公司)，450g/L咪鲜胺水乳剂和430g/L戊唑醇悬乳剂(拜耳作物科学(中国)有限公司)，15％噁霉灵水剂(河北快枪农药厂)和50％多菌灵可湿性粉剂(中国镇江农药厂有限公司)。
b)供试病菌菌株
香蕉枯萎病菌：古巴尖廉孢菌[Fusarium oxysporum f.sp.Cubense(E.F.Smith)Snyder et Hasen]，(《接种香蕉枯萎病菌香蕉苗病症及其组织病理特征》福建农林大学学报.2006年35(6)：578—581)(福建省农业科学院植物保护研究所)。
c)试验方法
将供试杀菌剂配成表1所示终浓度的含药马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基，测试不同浓度的杀菌剂的抑菌率，计算杀菌剂的有效抑制中浓度EC50，每一个浓度处理均设置5次重复，以不加杀菌剂的PDA培养基作为对照。
表1.供试杀菌剂及浓度
采用生长速率法，即将供试菌株在PDA培养基上25℃培养5d，用直径5mm的打孔器从菌落边缘取下菌饼，接种于预先配置好的上述各浓度处理的含杀菌剂的PDA培养基上，并置于25℃恒温培养箱中培养5d后用十字交叉法测量菌落直径，计算抑制率和EC50。
根据各处理生长5d的平均菌落直径净增长值，计算不同浓度杀菌剂对枯萎病菌的抑制率。分别建立以浓度的自然对数值为自变量(x)，抑菌率的机率值为因变量(y)的回归方程，计算各供试杀菌剂的抑制中浓度EC50值。
供试的8种杀菌剂对香蕉枯萎病菌的毒力的测定结果如表2所示，表明咪鲜胺的EC50值最小，为0.0384ug/ml，噁霉灵的EC50值最大为33.3330ug/ml，8种杀菌剂的EC50值顺序为噁霉灵>世高>丙环唑>多菌灵>爱苗>凯润>戊唑醇>咪鲜胺，说明咪鲜胺对香蕉枯萎病菌具有显著的抑菌活性，其抑菌作用优于其他供试药物。
表2.8种供试杀菌剂对香蕉枯萎病菌的毒力
选择无病的台蕉2号组培苗(福建省漳州市农业科学研究所)，生长2个月后，株高约60cm采用4点伤根法接种病原菌，接种浓度为107个/ml的古巴尖廉孢菌分生孢子悬液100ml，接种三天后分别应用450g/L咪鲜胺水乳剂的300倍、500倍、1000倍稀释浓度注射处理接菌的植株各5株。15天后测定不同处理根茎组织的病数，比较防治效果。检测方法采用稀释法。每株取新鲜的根茎部的组织40克，混合后放入高速捣碎机(1000rpm)中，并加入360ml的无菌水(10倍液)，高速捣碎50秒，用双层沙布过滤去渣后的悬浮液备用。取1ml的悬浮液于9ml的无菌水中，稀释成102倍液，然后依次稀释成103倍液和104倍液，然后取0.1ml上述稀释液与10ml的含有30ppm利福平PDA的培养基(45℃)混匀，在25℃恒温中培养5天后观察枯萎病菌的菌落数。以不接菌的处理为对照，5次重复，计算病菌数量时进行校正。
试验结果如表3所示，表明450g/L咪鲜胺水乳剂300倍稀释的药液对香蕉枯萎病菌的抑制作用较强，15天后病菌减少率为99.3％，显著优于500倍稀释的药液和1000倍稀释的药液。
表3.不同浓度的咪鲜胺对香蕉枯萎病菌的抑制作用
| 药物处理(棚温22-36℃) | 300倍稀释的药液 | 500稀释的倍药液 | 1000倍稀释的药液 |
| 平均菌落数/ml | 45.6 | 8×102 | 6.5×103 |
| 病菌减少率(％) | 99.3 | 87.7 | / |
二、草甘膦除草剂对香蕉枯萎病植株的致枯测定
供试香蕉植株：选择已有连续5年种植香蕉历史的试验地，香蕉枯萎病历年均发生较重，试验期间自然发生香蕉枯萎病。台蕉2号种植在试验地，生长期8个月，选择外观发生初期病症的香蕉植株进行试验，试验重复3次，每次处理15株。
供试除草剂：41％草甘膦(农达)水剂(美国孟山都公司生产)，采用41％草甘膦水剂30倍稀释液、50倍稀释液100倍稀释的液注射香蕉地上部高30cm的茎杆，注射药液60ml，注射后观察并计算枯死植株数。
试验结果如表4所示，表明香蕉病株中注射41％草甘膦水剂的30倍稀释液后，13天内可使植株枯死，致枯率达100％，优于其他两个浓度处理。
表4.不同浓度的草甘膦对香蕉病株的致枯作用
| 处理(棚温22-36℃) | 30倍稀释液 | 50倍稀释液 | 100倍稀释液 |
| 供试植株数(株) | 15 | 15 | 15 |
| 枯死株(株) | 15 | 14 | 12 |
| 致枯率(％) | 100 | 93.33％ | 80％ |
| 枯死时间(d) | 13 | 17 | 20 |
三.杀菌剂与草甘膦除草剂混合后的防除效果
1)杀菌剂与草甘膦除草剂混合液
分别取41％草甘膦水剂1ml和450g/L咪鲜胺水乳剂0.1ml于29ml的清洁水中，制得注射剂1，注射剂1中的最终使用药液浓度为41％草甘膦水剂30倍稀释与450g/L咪鲜胺水乳剂300倍稀释。
分别取41％草甘膦水剂1ml和450g/L咪鲜胺水乳剂0.1ml于49ml的清洁水中，制得注射剂2，注射剂2中的最终使用药液浓度为41％草甘膦水剂50倍稀释与450g/L咪鲜胺水乳剂500倍稀释。
分别取41％草甘膦水剂1ml和450g/L咪鲜胺水乳剂0.06ml于29ml的清洁水中，制得注射剂3，注射剂3中的最终使用药液浓度为41％草甘膦水剂30倍稀释与450g/L咪鲜胺水乳剂500倍稀释。
分别取41％草甘膦水剂1ml和450g/L咪鲜胺水乳剂0.17ml于49ml的清洁水中，制得注射剂4，注射剂4中的最终使用药液浓度为41％草甘膦水剂50倍稀释与450g/L咪鲜胺水乳剂300倍稀释。
分别取41％草甘膦水剂1ml和450g/L咪鲜胺水乳剂0.2ml于99ml的清洁水中，制得注射剂5，注射剂5中的最终使用药液浓度为41％草甘膦水剂100倍稀释与450g/L咪鲜胺水乳剂500倍稀释。
分别取41％草甘膦水剂1ml和450g/L咪鲜胺水乳剂0.33ml于99ml的清洁水中，制得注射剂6，注射剂6中的最终使用药液浓度为41％草甘膦水剂100倍稀释与450g/L咪鲜胺水乳剂300倍稀释。
2)香蕉专用型药液注射器
为了方便田间注射杀菌剂与草甘膦除草剂混合液，采用低压6KPa灌浆注射器(北京冶建工程裂缝处理中心生产产品，6KPa—22)改装而成的香蕉专用型药液注射器，该注射器主要由三个部分组成，一是工程塑料管中装有6KPa弹簧，前端有可伸缩的可装量30ml的塑料瓶和带有医用大号抽液针(长9cm，)与同样口径的胶皮管套在灌浆注射器的螺丝接口上组成注射针头(图4)。
3)注射香蕉植株
分别取注射剂1-630ml装入注射器中的塑料瓶内，将塑料瓶的螺口与前部出水口对接旋紧，然后拉紧弹簧挂住，取直径为2.8mm、长为20cm的不锈钢丝插入离地面约30cm的香蕉茎内，深度约10cm，然后拨出，再将注射器的针头插入上述香蕉茎上的孔洞内(避免针头阻塞)，并用上述不锈钢丝将整个注射器悬挂于香蕉树干上(图5)，最后释弹簧，让弹簧的压力将塑料容器内药液注射入香蕉茎内。直径20cm以上的每株对称两旁各挂一个注射器，直径小于20cm的每株只挂一个注射器。以清水注射作为对照。实验设3次重复，每种混合液每次处理15株已感染枯萎病的香蕉树。
注射注射剂1-6后，香蕉的致枯时间大约需13-22天(图6)。
植株根茎部的病菌数量检测的检测方法采用稀释培养法(同步骤c)中的稀释培养法，在含有30mg/L利福平的PDA培养基上培养，25℃培养5天后观察菌落数。
致枯15天后植株根茎部的病菌数量检测结果表明，以上注射剂1-6的平均菌落数/ml分别为2个/ml、91.2个/ml、75.2个/ml、21.0个/ml、128.4个/ml、37.6个/ml，清水注射的平均菌落数/ml为275.0个/ml，注射剂1-6的病菌减少率分别为99.3％、66.8％、72.7％、92.4％、53.3％、86.3％，其中注射剂1的抑菌效果显著优于其它注射剂。
Claims (4)
1.销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的药物，其活性成分为草甘膦和咪鲜胺，所述药物为注射剂，所述药物中，草甘膦的质量百分含量为0.41-1.37％，咪鲜胺的浓度为0.9-1.5g/L。
2.一种销毁携带枯萎病菌的香蕉病株的方法，是将权利要求1所述的药物注射到香蕉病株内，销毁携带枯萎病菌的香蕉病株。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法中，携带枯萎病菌的香蕉病株的直径小于20cm，每株注射权利要求1所述的注射剂30ml。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法中，携带枯萎病菌的香蕉病株的直径大于20cm，每株注射权利要求1所述的注射剂60ml。
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