CN101405006A - 治疗萎缩性阴道炎的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于治疗应答激素替代治疗的病症的方法和药物组合物。具体地，本发明涉及与萎缩性阴道炎相关症状的长期治疗。组合物含有有效量的雌激素、孕酮化合物和药物学上可接受的介质、载体和/或稀释剂。

Description

治疗萎缩性阴道炎的方法

相关申请的交叉参考

依据35U.S.C.§119，本申请享有基于2006年1月20日申请的U.S.临时申请系列No.60/760,440的优先权，在此将其公开内容全部引入作为参考。

发明领域

本申请涉及药物组合物，其使用雌激素和孕酮的组合物作为阴道疗法，用于治疗与萎缩性阴道炎相关的症状。

发明背景

萎缩性阴道炎是涉及生殖道和下尿路的激素依赖性疾病。通常，在绝经期过程中或之后，萎缩性阴道炎变得明显，并且症状随着年龄而加剧。与泌尿生殖系统老化相关的症状是由于绝经期卵巢中滤泡损耗引起的雌激素下降所引起的。这种雌激素下降说明了阴道和下尿路中发生的大部分解剖学、细胞学、细菌学、生理学改变。

随着雌激素下降，阴道变短、变窄，并且阴道壁变薄、弹性变小并且颜色变浅。伴随这些改变产生了许多症状。总而言之，将这些阴道综合症称为萎缩性阴道炎。与血管舒缩综合症不同，萎缩相关的问题如性交困难、灼烧和慢性阴道炎不会随着时间而消失。疼痛和灼烧通常是由阴道穹窿的pH升高和细菌学改变引起的持续排放的结果。瘙痒，通常影响宁静的睡眠，是由外阴阴道上皮层的变薄和炎症引起。阴道压力可能是由于骨盆托韧带的萎缩引起的，这种萎缩是由于组织胶原蛋白减少引起的。产生阴道干燥是因为萎缩的阴道产生较少的分泌物。阴道表面因此变成脆的，通常在最小创伤后伴有淤斑、溃疡和出血。

已经表明约50％其他方面健康的超过60岁的女性患有与阴道萎缩相关的症状(Iosif等，Acta Obstericia et GynaecologicaScandinnavica 1984；63：257-60)。Dennerstein和同事在超过7年的跟踪期中检测了438名女性中的阴道干燥发生率，并发现在围绝经期前开始出现阴道干燥，在围绝经期过程中加剧，并在绝经后2至3年内明显加剧(Dennerstein等，Obstet Gynecol 2000；96：351-358)。大体上，在约45％绝经女性中，阴道萎缩在临床上呈现为阴道干燥、瘙痒、疼痛和性交困难的症状(Bygdeman等，Maturitas1996；23：259-63)。阴道综合症的严重程度从有点烦恼到虚衰。在美国，没有接受雌激素治疗的2千万女性将患有与泌尿生殖系萎缩相关的丧失社会能力的症状(Samsioe，Am J Obstet Gynecol 1998；178：S245-S249)。

膀胱中的上皮变化与阴道中发生的那些相似，并形成薄、浅色、易碎的组织。具体地，下尿路症状包括排尿困难、尿频、尿急和尿失禁(Simunic等，Int J Gynaecol Obset 2003；83：187-197)。在40％的绝经女性中报道过至少一种症状(Barlow等，Maturitas 1997；27：239-247)。膀胱活动过度症，是称为“尿急”或“尿频”的临床症状，伴有或没有欲望性尿失禁，通常伴有频繁的夜尿症(Abrams等，Neurourol Urodyn 2002；21：167-178)。

膀胱活动过度症已经显示出对生活质量具有负面影响。性功能障碍，其包括性欲、性活动频率和性满意度的降低，在患有膀胱活动过度症的女性中比那些没有的更常见(Yip等，Am J Obstet Gynecol.2003；188：1244-1248)。经常经历膀胱活动过度症的夜尿症降低了睡眠质量(Stewart等，World J Urol.2003；20：327-336)。因此，在老年骨质疏松女性中，晚上增加的排尿需要已经显示出增加了跌倒和髋部骨折的风险(Brown等，J Am Geriatr Soc.2000；48：721-725)。在总体上，膀胱活动过度症对于健康护理机构也具有沉重的经济负担。在U.S.，每年与膀胱活动过度症相关的全部费用超过90亿美元(Hu等，BJU Int.2005；96(增补1)：43-45)。

目前对于膀胱活动过度症的治疗选择包括观察/什么也不做、衬垫/尿布、医疗、骶神经刺激和外科手术重建。膀胱活动过度症最常见的控制包括给药平滑肌松弛剂，如抗毒蕈碱药，其直接作用于平滑肌。已知现有的治疗具有多种副作用，因此，由于药剂的不连续限制了其用途。所有抗毒蕈碱药的潜在副作用包括抑制唾液分泌(口干)、肠道运动性(便秘)，虹膜的括约肌和晶状体的睫状肌的阻塞(视力模糊不清)，倦睡，认知障碍和抑制汗腺活动。通常，在狭角型青光眼患者中使用抗毒蕈碱药应当带有警示：患者患有严重的膀胱出口梗塞和胃动力紊乱性疾病。对于不利情况的概述请参见表1。

表1.抗毒蕈碱药与安慰剂相比较的不利情况

药物和剂量	任何的AE*	视力模糊	便秘	头晕	口干	消化不良	尿潴留
								托特罗定IR2mg	X	X	X	X	2.4(1.5，4.0)	X	X
托特罗定IR4mg	X	X	X	X	3.6(2.9，4.4)	X	X
								托特罗定ER4mg	X	X	X	X	2.9(2.3，3.7)	X	X
奥昔布宁IR5-7.5mg		X	X		X
								奥昔布宁IR8.8-15mg	1.4(1.1，1.7)	1.7(1.1，2.6)	X	X	3.3(2.3，4.7)	3.3(1.5，7.1)	5.6(1.9，17.0)
奥昔布宁TDS3.9mg	X	X	X	X	X
								达非那辛7.5mg	1.2(1.1，1.5)		2.2(1.1，4.1)		2.2(1.3，3.9)	X
达非那辛15mg	1.4(1.1，1.6)		2.4(1.5，3.9)		2.9(1.7，1.8)	3.2(1.0，10.2)
								索非那辛5mg	X	X	2.9(1.5，5.7)		3.0(1.9，4.6)	X
索非那辛10mg	X	2.4(1.3，4.2)	4.4(2.4，8.3)		5.3(3.6，9.3)	X
								曲司氯铵40mg	1.5(1.0，2.1)		2.1(1.4，3.2)	X	3.2(2.4，4.2)

所有带有数据的单元格报道了对于安慰剂的统计学显著的相对风险比例。

空白单元格＝不适于meta-分析的数据

X＝对于与安慰剂比较的干预没有统计学显著差异

*试验定义

来自：Chapple C.Eur.Urol.2005，48：5-26

已经显示出使用激素雌三醇明显降低尿路感染和欲望性尿失禁，因此显著提高了老年患者的生活质量(Molander等，Maturitas 1990；12：113-120；Samsioe等，Maturitas 1985；7：335-342；和Luisi等，Maturitas 1980；2：311-9)。雌三醇治疗恢复了患有复发性尿路感染女性的绝经前阴道菌群，降低了对抗生素的需求，与那些未补充的相比较，降低高达16倍(Brandberg等，Acta Obstet GynecolScand 1984；140：33)。

除了尿路感染，认为绝经过程中看到的雌激素缺乏通过降低尿道闭合压力和提高膀胱充满的感觉影响了泌尿控制，因此引起欲望性尿失禁或膀胱活动过度症(Cardoza等，Gynecol Endocrinol 1995；9：75-84)。绝经期女性受益于雌激素治疗，因为这改善了膀胱颈的脉管系统和尿道的粘膜。之前的研究已经表明了膀胱三角和近端尿道中存在雌激素受体(Cardoza等，Gynecol Endocrinol 1995；9：75-84；Versi E.Clin Obstet Gynecol 1990；33：392-7)。这些发现提供了雌激素直接作用于下尿路的证据，随后认为这在绝经期女性的泌尿控制的发病机理和控制中是重要的。

不幸地，只有小百分比(约百分之十)的得益于雌激素治疗的那些患者实际上出于许多原因接受了这种治疗。例如，患有明显阴道症状如性交疼痛的女性对寻求作为医生或健康护理专家的志愿者的帮助感到窘迫(Notelovitz，Intl J Gyn Obstet 1997；59：S35-9)。因为最近的临床试验结果，女性也非常不愿意采用激素替代治疗。基于PEPI的研究结果，激素替代治疗的有害影响总的来说对健康护理机构和对公众变得明显(Writing Group for the PEPI Trial(PEPI试验的写作组)，Effects of hormone replacement therapy onendometrial histology in postmenopausal women.(激素替代治疗对绝经后女性的子宫内膜组织学的影响)The PostmenopausalEstrogen/Progestin Intervention(“PEPI”)Trail，JAMA 1996；275：370-5)。以双盲、安慰剂对照的方式将PEPI试验中的患者随机化，使用了三年跟踪。该试验测定了口服激素替代治疗对各种参数的影响，这些参数包括对子宫内膜的活性。该试验涉及596名女性，将她们特意随机分配成安慰剂、只有雌激素、或三种雌激素/孕酮方案支线之一。组织学数据揭示了百分之十(10％)采用非拮抗雌激素治疗(等于0.625mg共轭马雌激素(“CEE”))的女性将在一年内产生复合的或非典型的增生。联合CEE与周期性或连续孕酮保护了子宫内膜以避免与只用雌激素治疗相关的增生性改变。该研究表示了研发和最佳化使用为安全性和功效而选择的给药方案联合治疗的重要性的第一次明确证明。

尽管显著的血清雌激素水平全身提高，但医疗机构不太接受给予阴道雌激素和孕酮来防止子宫内膜增生的概念(Martin等，JAMA 1979；242：2699-700；Mandel等，J Clin Endocrinol Metab 1983；57：133-9)。Tourgeman和同事报道了相对于口服给药雌二醇，阴道给药雌二醇后，血清雌二醇血清水平要高十倍，而给予相同确切剂量的子宫内膜浓度要高七十倍(Tourgeman等，Am J Obstet Gynecol 1999；180：1480-1483)。

通过阴道传送给药雌三醇和雌二醇的治疗后孕酮受体显著增加的观察结果进一步支持了它对子宫内膜的雌激素效果的观察。认为提高数量的孕酮受体是对雌激素敏感组织延长的雌激素影响的生化信号(Leavitt等，Ann.N.Y Acad.Sci.，286，210-25；Horwitz等，J Biol.Chem.1978，253：2223-8；Clark，J.H.和Peck，E.J.，在：Female Steroids，Receptors and Function 1979(女性类固醇、受体和功能1979)，(Gross等编辑，Berlin：Springer Verlag)p.103-14)。使用阴道避孕环方法看到了对子宫内膜的雌激素效果，该方法用于育龄期女性中(Timmer等，Clin Pharm 2000；39：233-242)。将环置于阴道中时，快速而持续地吸收激素。阴道给药后阴道环中的乙炔雌二醇的生物利用率大约为55.6％，这与口服给药乙炔雌二醇相当。因此，清楚的是通过阴道传送的避孕具有全身吸收，通过阴道传送的激素替代治疗也是如此。

充分证明了阴道雌激素治疗与子宫内膜增殖和增生相关(Luisi等，Maturitas 1980；2：311-9；Widholm等，Ann Chir Gynaecol Fenn1974；63：186-90)。因此，美国妇产科医师学会(ACOG)给接受阴道雌激素的女性推荐伴随孕酮治疗(ACOG，Hormone replacementtherapy 1992，ACOG technical bulletin no.93.，Washington，D.C.)。最近，ACOG建议使用低剂量雌激素(0.3mg)的共轭马雌激素这也称为低功效制剂(ACOG，Genitourinary TractChanges 2004，Vol.104，No.4增补，Washington，D.C.)。目标是传送雌激素，希望该方案与子宫内膜病理学的低发病率相关，但是非常不幸地，这未能获得这种临床益处。

使用通过阴道给予低剂量0.3mg共轭马雌激素(CEE)的数据表明使用更低剂量的非拮抗阴道雌激素的女性可能因为长期使用而处于提高的子宫内膜癌风险中(Handa等，Obstet Gynecol 1994；84：215-8)。使用口服CEE的数据证明了子宫内膜增生的发病率在2年内以剂量相关地从3.17％(口服共轭雌激素0.3mg/d)提高至14.9％(口服共轭雌激素0.45mg/d)至27.27％(口服共轭物雌激素0.625mg/d)。(Utian等，Fertil Steril 2001；75：1065-79)。由于关于

对子宫内膜影响的报道，处方指导中的产品信息继续推荐医师结合雌激素给予孕酮，以保护任何子宫组织，已经将这建立为非拮抗雌激素治疗的结果。

另外清楚的是使用如ACOG推荐的其他低功效非拮抗雌激素制剂不存在较低的子宫内膜病理学发病率。这得到来自子宫切除女性的子宫组织学观察结果的支持。三周阴道给予雌三醇(0.5mg雌三醇)或雌二醇(0.05mg雌二醇)引起使用低功效制剂的子宫内膜的过度刺激(Van Haaften等，Gynecol.Endocrinol 1997；11：175-185)。通过扫描电子显微镜看到的表明阴道施用雌三醇(0.5mg，持续16天)对子宫的雌激素效果的数据支持阴道未拮抗低功效制剂可能具有不利子宫内膜影响的观点(Englund等，Acta Obstet.Gynecol.Scand.1982，106(增补)：23-6)。在对等待子宫切除术的子宫脱垂女性的研究发现，用每天口服雌三醇2mg来处理，在子宫切除术之前持续平均三周时间，出现子宫内膜萎缩，如通过组织学检测所测定的。子宫切除术后子宫的组织学检查时，70.8％女性中存在增生改变(Montoneri等，Clin Exp Obst Gyn 1987，14：178-181)。证据持续显示出使用口服雌三醇的绝经后女性中提高的子宫内膜癌的相对风险。相对风险随着使用的持续时间而提高，并且对于子宫内膜非典型增生存在更高的相对风险提高，对于从未使用过的，机会比为1.0，对于暴露于激素少于5年的那些，机会比为2.2。当治疗超过5年时，存在8.3的机会比。在通过阴道给药低功效制剂的相同研究中，与对于使用至少五年的非典型增生的2.3的机会比相比较，对于从未使用过的，机会比为1.0(Weiderpass等，Lancet 1999；353：1824-8)。更多的证据已经表明阴道使用低功效制剂后提高的子宫内膜增生风险(Barensten等，Eur J Obst&Gyn and Repond Bio 1997；71：73-80；Dugal等，Acta Obststricia et Gynecoogica Scandinavica 2000；79：293-7；Kelsey等，Am J Epidemiol 1982；116：333-42)。因此，由于关于低功效制剂对子宫内膜的影响的报道，给医师推荐结合雌激素治疗开出孕酮的处方，以保护任何子宫组织，已经将这建立为非拮抗雌激素治疗的结果(Head，Alt Med Rev 1998；3(2)：101-113)。

总而言之希望，使用雌激素治疗各种内分泌失调。然而，公知由于首过效应和代谢，这些化合物不适于口服给药。通过门静脉系统将这些激素携带至肝，导致雌激素的代谢和快速消除。由于肝代谢成没有活性的成分，有效的口服给药需要格外高的剂量水平。在过去，已经尝试研发不同的给药途径来提高安全性和功效。通过非肠道、注射、经阴道(霜剂、片剂和硅酮环)、透皮(“贴剂”)和皮下丸剂、鼻内和经皮(凝胶)给药雌激素的各种甾体衍生物的研发导致产品逃避首关代谢。这导致临床上传送有效类固醇的能力。

在过去，惯常使用雌激素和孕酮用于治疗绝经，涉及按序列给药。这种给药方法耐受性差，因为经常导致患者在绝经期间经历类似月经的撤退性出血，因此，没有充分耐受，经常导致不连续的治疗。不幸地，由于治疗的不可接受性，迫使患者遭受痛苦。然而，已经尝试使用联合激素治疗的连续方案来降低撤退性出血的发病率并实现闭经。出血是老年绝经后女性的主要关注问题。这群女性中的连续方案最不可能患有出血，因此维持激素替代治疗的益处。

随着美国人口的老龄化，如通过婴儿潮一代进入更年期扩大了这一情况，因此对安全而有效的激素替代治疗的需要对于解决老龄化女性的健康和保持良好状态是必要而重要的。CDC在2004年报道了，患有AIDS的老年美国人的数量有个跳跃(AIDS Policy LAW 2004年3月26日；19(6)：4)。根据疾病控制预防中心的报道，从1991年开始，那些50岁和更大年龄中的AIDS病例跳跃超过22％。这种跳跃可以次要地解释为进入更年期的诊断为萎缩性阴道炎的女性性活动更多。最近女性中的数据强烈地表明萎缩性阴道和提高的HIV感染率的相关性。Smith和同事证明了与使用单独的基础霜治疗的动物相比较(75％感染率)，雌三醇治疗的动物强烈保护以对抗SIV阴道传播(8.3％感染率)(Smith等，AIDS 2004；18：1637-1643)。在人类数据中，具有抑制的雌激素水平的女性具有两到三倍升高的HIV感染率(Martin等，J Infect Dis 1998，178：1053-1059)。人类数据和恒河猴模型中产生的数据支持了阴道上皮是女性对抗HIV感染的天然重要的屏障和该屏障的激素改变可以提高(雌激素)保护效果的假设。女性中雌三醇安全性的联合记录和关于HIV阴道传播的风险因素的数据支持在具有低雌激素水平的女性中使用阴道雌三醇，来降低异性传播的风险。

本领域中存在明显的需要来提供有效而安全的阴道给药激素治疗，以治疗绝经期综合症，包括萎缩性阴道炎，并且避免与长期全身吸收局部未拮抗雌激素治疗相关的副作用并减少伴随抗毒蕈碱药的不利情况。治疗与萎缩性阴道炎相关症状的优选给药途径是阴道内，因为它是目标组织并且对下尿路存在直接的局部作用。然而，作为单剂量单位中激素替代治疗的阴道给予孕酮和雌激素的组合物的作用是未知的；还未产生单剂量单位中含有雌激素和孕酮的阴道内活性制剂。本发明基于新的临床观察结果，通过提供在单剂量单位中结合雌激素和孕酮的新药物组合物解决了这种需要。此外，本发明描述了治疗由外科手术绝经、医源性绝经、自然绝经引起的萎缩性阴道炎和导致呈现为绝经的闭经症状(子宫存在)需要的完全且临床有效的制剂。

发明概述

本发明涉及能有效治疗与萎缩性阴道炎相关的泌尿生殖系症状的药物组合物。

该药物组合物含有有效量雌激素化合物，优选微粉化的雌三醇，和孕酮化合物，优选微粉化孕酮。有效量的孕酮能有效降低与长期未拮抗雌激素给药相关的不利子宫影响的伴随状况。组合物还可以含有药物学上可接受的载体、介质和/或稀释剂。

本发明还涉及治疗与萎缩性阴道炎相关的泌尿生殖系症状的方法。该方法包括给药含有有效量的雌激素化合物、孕酮化合物和药物学上可接受的载体、介质和/或稀释剂的药物组合物。治疗萎缩性阴道炎的方法实质性地降低了与未拮抗雌激素给药相关的不利子宫影响的伴随状况。

在特定的实施方案中，组合物的给药持续至少3个月，至少6个月，优选至少12个月，更优选至少18个月，最优选超过24个月。

在特定的实施方案中，作为阴道栓剂来给药组合物。在另一个实施方案中，作为阴道霜来给药组合物。

本发明的这些和其他方面将在详述和实施例中得到更多讨论。

发明详述

本发明有利地提供了用于治疗响应雌激素的激素缺乏失调相关症状如萎缩性阴道炎中的方法和组合物。本发明提供了长期治疗方案，例如，超过三个月的连续治疗，高达超过24个月的连续治疗，而最小化和/或防止与激素替代治疗相关的健康风险。本发明是部分基于在治疗萎缩性阴道炎中使用微粉化孕酮的雌三醇的显著功效和安全性。

本说明书中所用的术语通常具有本领域中常用的含义，在本发明范围内和使用每个术语的特定范围中。以下定义了特定的术语来提供描述本发明的组合物和方法以及怎样制备和使用的其他指导。

定义

术语“约”和“大约”意思是对于本领域普通技术人员测定的特定值在可接受的误差范围内，这部分取决于怎样测量和测定这数值，即，测量系统的限制。例如，“约”可以是3个内或超过3个标准偏差，经由本领域的实践。或者，“约”可以表示给定值高达20％，优选高达10％，更优选高达5％，再更优选高达1％的范围。或者，特别是关于生物系统或方法，术语可以表示在数值的数量级内，优选5倍内，更优选2倍内。

短语“药物学上可接受的”指的是给药于动物时“通常认为安全的”(GRAS)的分子部分和组合物，例如，生理学上耐受的并且通常不产生过敏或相似的不利反应，如胃不适，头晕等。优选，如在此所用的，术语“药物学上可接受的”意思是通过联邦或州政府的管理机构批准的，或U.S.药典或其他通常认可的用于动物的药典中列出的。

术语“载体”指的是化合物与其一起给药的稀释剂、佐剂、赋形剂或介质。这样的药物载体可以是无菌液体，应归于其在水、油中的不溶性，油包括石油、动物、植物或合成来源的那些，如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。载体如胶束或葡聚糖可以用来传送水溶液或悬浮液中的药剂。合适的药物载体描述于E.W.Martin的“Remington’s Pharmaceutical Sciences”中。

如在此所用的术语“含量”指的是与所指物相适应的含量或浓度。在本发明中，有效量的雌激素化合物指的是足以治疗与萎缩性阴道炎相关症状的含量。有效量的孕酮化合物指的是足以抵抗雌激素化合物的不利增殖影响的含量。构成治疗有效量的药物的有效量根据以下的因素而改变，这些因素如特定药物的功效、制剂的给药途径和用于给药制剂的力学系统。本领域普通技术人员根据考虑这些因素来选择特定药物的治疗有效量。

如在此所用的，术语“泌尿生殖系”指的是生殖道和下尿路，这是萎缩性阴道炎综合症的所有部分。

药物制剂

雌激素化合物

“雌激素”或“雌激素”化合物在此定义为来自Steraloids Inc.，Wilton N.H.的第11版“类固醇”中所述的任一种结构，将其并入本文作为参考。该定义中包括的是上述参考文献中所述的非甾体雌激素。该定义中包括的其他雌激素化合物是雌激素衍生物、雌激素代谢物、雌激素前体和选择性雌激素受体调节剂(SERM)。还包括超过一种雌激素或雌激素化合物的混合物。U.S.专利No.5,554,601的表II中提供了这些混合物的实例(参见第6栏)。例如，U.S.专利No.5,554,601中提供了单独或结合其他药剂而具有效用的雌激素实例。β-雌激素是雌激素化合物的β-异构体。α-雌激素是雌激素化合物的α-异构体。术语“雌二醇”是α-或β-雌二醇，除非特意指出。术语“E2”与β-雌二醇、17β-雌二醇和β-E2是同义词。αE2和α-雌二醇是βE2雌二醇的α异构体。

在特定的实施方案中，雌激素化合物是雌三醇，优选微粉化雌三醇。雌三醇是天然产生的甾体性激素。它是内源性雌激素，主要通过卵巢雌激素的外周代谢形成。分泌的卵巢雌二醇可逆地氧化成雌酮，这两者都可以不可逆地转化成雌三醇。大部分雌三醇来自雌酮，尽管数据已经报道了雄烯二酮直接转化成雌三醇，而没有通过雌酮的血液集合。与其他雌激素相似，在扩散穿过细胞/核膜后，雌三醇结合核内受体，随后激活选择性信使RNA合成；通过后一种作用调节的特定细胞激素活性来产生蛋白质/酶。尽管不同于其他雌激素，雌三醇没有结合性激素结合球蛋白(与雌二醇和雌酮不同)，并因此具有短的消除半衰期。此外，因为大部分雌二醇结合性激素结合球蛋白(SHBG)，只有一部分循环雌二醇可以进入细胞中。另一方面，雌三醇对于结合SHBG具有低得多的亲和性；因此，可以利用更大百分比的生物活性。

雌三醇在化学上描述为16-α，17-β，雌-1，3，5(10)三烯3，16，17-三醇。它具有C₁₈H₂₄O₃的分子式和288.38的分子量。结构式为：

雌激素功效看来是组织特异性的。雌激素受体激活的下游效应是配体依赖性的(McKenna等，Endocr Rev 1999；20：321-44；Kuiper等，Endocrinology 1997；138：863-70)。此外，所得到的配体/受体复合物没有以相似的方式得到所有细胞的识别，这部分是由于活性基因的模式和类固醇受体共同调节剂，该调节剂调节基因表达的雌激素受体(ER)。

这些发现解释了不同的ER配体(雌三醇、三苯氧胺和雌二醇)怎样介导相同细胞类型中的不同应答和相同的配体怎样引起不同细胞类型中的不同应答。例如，数据证明了三苯氧胺(在受体位点与天然雌激素竞争的雌激素化合物)保护对抗乳癌，但可以引起子宫癌。数据证明了诱导相同程度的阴道成熟和角质化需要比雌三醇高出大约15倍的共轭雌激素，这引起了子宫内膜增生(Hustin等，Acta Cytologica1977；21：225-228)。在相同的研究中，雌三醇在引起子宫生长中没有共轭雌激素有效(Phillips等，Maturitas 1984，5：147-52)。

因为它在降低阴道pH中的高度有效性，雌三醇在与阴道萎缩相关症状的客观改善中是更有效的雌激素。公知雌激素替代治疗诱导阴道上皮的正常化，因此有助于恢复阴道中正常的菌群和生理pH，使得阴道上皮细胞对感染的抵抗力提高。随着绝经期产生的循环雌激素降低导致阴道上皮细胞的糖原含量降低，这抑制通过乳酸菌的乳酸产生。因此，阴道pH是评价阴道上皮和监控阴道萎缩中雌激素治疗效果的有用指标。随着绝经，阴道pH从正常的3.5-4.0(这有利于乳酸菌)提高至6.0-8.0(这有利于致病生物体)。阴道pH在0.3mg共轭雌激素组治疗16周后只降至5.2(Marx等，Maturitas 2004；47：47-54)。用雌二醇释放环治疗绝经期女性24周后，阴道pH降至4.8(Lose等，BJOG 2000年8月；107(8)：1029-34)，然而，用1mg雌三醇胚珠治疗绝经期女性24周后，阴道pH明显降至4.12(Dessole等，Menopause2004；11：49-56)。

雌三醇显著降低pH的能力使其成为降低绝经期女性中复发性尿路感染发病率的理想药剂。尿路感染在绝经后女性中非常常见，15％超过60岁的女性患有经常复发的情况。通过阴道内的局部雌激素替代治疗恢复了萎缩性阴道、尿路和膀胱三角粘膜，刺激了乳酸菌的增殖并降低了pH，并作为这些结果的结果，降低了肠杆菌的定殖并防止了菌尿症。随着雌三醇治疗观察到阴道pH的显著降低和肠杆菌阴道定殖的速率降低；在一个月后在61％给予雌三醇的患者中重新出现了乳酸菌(治疗前不存在)，但是接受安慰剂的患者中没有重新出现(Raz等，N Eng J Med 1993；329：753-6)。此外，阴道雌三醇治疗已经显示出在缓解尿急(56％)、欲望性尿失禁(58％)和夜尿症(54％)中是有效的(Lose等，BJOG 2000；107(8)：1029-34)。

在本发明中，组合物中存在的微粉化雌三醇的含量取决于最终组合物的强度。在一个实施方案中，微粉化雌三醇的存在含量为0.01mg至约10mg/剂，优选约0.25mg至约1mg/剂。微粉化雌三醇优选伴随孕酮化合物来降低与长期未拮抗雌激素给药相关的不利子宫影响的伴随状况，特别是在绝经期过程中。

孕酮

孕酮是天然产生的甾体性激素并且定义为作用于子宫来诱导怀孕特征性的子宫内膜改变和维持动物怀孕的化合物。孕酮受体在雌激素和孕酮的双重控制下，其随后起作用来调节孕酮受体的细胞浓度。通过雌激素介导的孕酮受体信使RNA水平提高和提高的蛋白质合成，通过雌激素提高了子宫内膜孕酮受体。在转录和翻译水平，其受到其自身的配体孕酮的下调。在人子宫中，高浓度的孕酮导致雌激素作用的抑制。雌激素受体合成的降低是由于孕酮介导的雌激素受体信使RNA水平的降低。总而言之，通过降低雌激素的增殖作用，孕酮允许发生分化。此外，孕酮通过下调雌激素受体有效地降低了雌激素作用。因此，必须抑制通过雌激素诱导的生化机制和有丝分裂活性来防止子宫内膜增生。

孕酮具有化学式孕-4-烯-3，20-二酮。它具有314.47的分子量和C₁₂H₃₀O₂的分子式。结构式为：

可以用于本发明中的孕酮化合物，包括但不限于，孕酮(微粉化孕酮)和黄体酮(合成的孕酮)。

研究已经表明微粉化孕酮(孕酮)比合成的孕酮(黄体酮)如醋酸甲羟孕酮(MPA)更安全。表2比较了甲羟孕酮(MPA)与微粉化孕酮(MP)，证明了MP超过MPA的相对安全性。

表2

(The Writing Group for the PEPI Trial(PEPI试验的写作组)，JAMA，1995年1月；273：199-208；Physicians Desk Reference，第44版，1990；Bolaji，EUROBS(1993)，48：61-68；Darj，Gynecol.Endocrinol.(1993)，7：111-114；Rylance，Br Med J(Clin Res编辑)1985，290(6461)：13-4；Sammour，Act Obstet Gynec Scand.1975；54：195-202；Sammour，Clin Exp Hyper-Hyper in Preg.1982；B1：455-78；Minshall等，J of Clin Endocrin and Metabolism 1998，83(2)：649-59；Minshall等，FASEB J 1998；12(13)：1419-1429；Rosano等，J Am Coll Cardiol 2000：36(7)p.2154-9；Estrogen andProgestogens in Clinical Practice(临床实践中的雌激素和孕酮)；Harcourt Brace & Co，1998 ISBN 0443047065；Montplaisir，Menopause 2001；8：10-16；Arafat，Am J Obstet Gynecol 1998；159：1203-09；Fitzpatrick，J Women′s Health & Gender-BasedMedicine 2000；9：381-387)。

在本发明中，微粉化孕酮是优选的孕酮化合物。组合物中存在的孕酮含量取决于最终组合物的强度。在一个实施方案中，孕酮化合物的存在量为约5mg至约500mg/剂，优选范围为25mg至约50mg/剂，更优选约25mg至约30mg/剂，这足以抵抗和抑制雌激素化合物的增殖活性。

孕酮治疗的目的在于防止或限制与雌激素使用相关的子宫内膜增生。为此这，不需要诱导完全分泌型子宫内膜，因为完全分泌型内膜可以产生不利的副作用如撤退性出血。低剂量孕酮，最初设计是使子宫内膜为部分分泌型，可以导致不规则出血或非常轻微的出血。然而，预期和所希望的结果是闭经，这将随着时间而发生。按次序给药的低剂量的各种孕酮，如100mg口服剂量的微粉化孕酮足以抑制子宫内膜雌激素受体水平和有丝分裂活性(King等，Fertil Steril 1986；46：1062-1066)。数据已经比较了口服和阴道给药的孕酮的生物利用率，并且结果显示出两种制剂的峰值血浆孕酮浓度没有显著差异，使得两种生物制剂具有相似的生物利用率(Norman等，Fertil Steril 1991；56：1034-1039)。此外，每日给予两次经皮孕酮(15mg和40mg微粉化孕酮)霜的使用对雌激素刺激的绝经后子宫内膜具有相等的抗增殖作用(Leonetti等，Fertil Steril 2003；79：221-22)。100mg剂量的经阴道的微粉化孕酮更常见地诱导(六个月时p＜0.005，1年后p＜0.001)功能样分泌型子宫内膜，引起周期性的每月循环，使得保护子宫内膜(Ferrero等，Minerva Ginecol 2002；54：519-30)。总而言之，200mg口服剂量的微粉化孕酮的相对功效等于90mg阴道剂量的微粉化孕酮。已知100mg口服剂量的微粉化孕酮提供了充分的子宫内膜保护，大约45mg阴道剂量的微粉化孕酮应当提供充分的子宫内膜保护。此外，作为阴道栓剂给药的25mg和50mg微粉化孕酮的血清浓度在两组之间是相似的(各自为7.27ng/ml和8.84ng/ml)(Von EyeCorleta等，Gynecol Obstet Invest 2004；58(2)：105-8)。

其他成分

可以将本发明的雌激素和孕酮化合物与其他成分和其他本领域已知的药物学上可接受的载体配制成药物组合物，其他成分是用于通过栓剂、霜剂、泡沫、凝胶(包括，但不限于水溶液和悬浮液)、膏剂、片剂、卵剂(ovule)、子宫托和环的阴道给药。

在本发明的一个实施方案中，将雌激素和孕酮与脂基一起配制。基质可以选自，但不限于，JAB基质、JC基质、聚乙二醇基质、滋润霜、雪花膏、vanpen基质、美容HRT基质或其混合物。考虑给药方式为阴道栓剂时，优选基质是JAB基质。JAB基质是含有基质K、基质C和基质M或各自称为基质B、J和F的混合制剂。基质K由PEG-8二硬脂酸酯组成。基质C由氢化植物油组成。基质M由维生素E醋酸酯组成。栓剂中JAB和BJF基质的含量为约1.0gm至约1.40gm，优选约1.28gm。活性和没有活性成分的重量为约300mg或更少。

将化合物配制成阴道霜时，优选的基质是JC基质。JC基质由滋润霜或雪花膏组成，包括，例如，PCCA Versabase和基质M。

因此，药物组合物可以包括一种或多种添加剂，取决于药物学上可接受的载体、防腐剂、染料、结合剂、悬浮剂、分散剂、着色剂、崩解剂、赋形剂、稀释剂、润滑剂、增塑剂、油或上述任意种物质的任意组合。合适的药物学上可接受的添加剂包括，但不限于，乙醇；水；甘油；芦荟胶；尿囊素；甘油；维生素A和E油；矿物油；PPG2肉豆蔻丙酸酯；植物油和solketal。

合适的粘合剂包括，但不限于，淀粉；明胶；天然糖，如葡萄糖、蔗糖和乳糖；玉米甜味剂；天然和合成的树胶，如阿拉伯树胶、黄蓍胶、植物胶和藻酸钠；羧甲基纤维素；聚乙二醇；蜡等。

合适的崩解剂包括，但不限于，淀粉，如玉米淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。

合适的润滑剂包括，但不限于，油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、醋酸钠等。

组合物还可以包括合适的防腐剂，例如，苯甲酸钠，和其他使组合物更适于施用的添加剂，例如，氯化钠，其可以影响制剂的摩尔渗透压浓度。

合适的分散剂和悬浮剂包括，但不限于，合成的和天然的树胶，如膨润土、植物胶、黄蓍胶、阿拉伯树胶、藻酸盐、葡聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和明胶。

合适的药物稀释剂是，但不限于，水。

其他添加剂的实例包括，但不限于，山梨糖醇；滑石；硬脂酸；和磷酸二钙。

给药方式

许多方法可以用于阴道给药本发明的制剂。这些包括霜剂、栓剂、泡沫、凝胶(包括，但不限于水溶液和悬浮液)、膏剂、片剂、卵剂、子宫托和环的阴道给药。在本发明的特定实施方案中，可以同时或分开配制雌激素和孕酮化合物。

有效剂量可以改变，取决于如患者病症、疾病症状的严重程度和药物组合物给药方式这样的因素。配制组合物，优选按照单位剂量，或标记为可分配含量，使得每个剂量含有约0.01mg至约10mg单位剂量雌激素，和约5mg至约500mg孕酮单位剂量。

药物组合物可以为“单位剂型”，这指的是物理上分开的适于作为人和其他哺乳动物的单一剂量的单位，每个单位含有计算来产生所需治疗效果的预定量活性物质，结合一种或多种上述的合适药物稀释剂、赋形剂或载体。

治疗方法

本发明的药物组合物可以给药于需要的动物，优选人类，来治疗与萎缩性阴道炎相关的症状。本发明描述了治疗由外科手术绝经、医源性绝经、自然绝经引起的阴道症状和导致呈现为绝经的闭经症状(子宫存在)需要的完全且临床有效的制剂(参见表3)。

表3

1.神经性厌食
	2.嫌色细胞腺瘤
3.功能性下丘脑性闭经
	4.性腺衰竭
5.性腺发育不全
	6.促性腺素抵抗卵巢综合征
7.性腺功能低下症
	8.下丘脑机能障碍
9.下丘脑衰竭
	10.孤立性促性腺激素缺乏
11.垂体破坏
	12.多囊性卵巢综合征
13.卵巢破坏
	14.卵巢功能早衰
15.单纯性性腺发育障碍症
	16.脑垂体功能不足
17.下丘脑病原学
	18.卵巢病原学
19.脑垂体病原学
	20.脑垂体功能障碍

药物组合物可以用于治疗阴道、尿道和膀胱的各种病症，包括疼痛、灼烧、刺痛、瘙痒、干燥、压力、尿频和失禁。可以以通过常规测试限定的合适剂量单独给药本发明的化合物、药物组合物或单位剂型，以获得最大的功效而最小化任何潜在的不利副作用。

在本发明的特定方面中，联合治疗可以用来治疗膀胱功能障碍，更具体地治疗膀胱活动过度症。下尿路症状包括排尿困难、尿频、尿急和失禁(Simunic等，Int J T Gynaecol Obstet 2003；83：187-197)。膀胱活动过度或膀胱过度活跃，将其定义为膀胱“尿急”或“尿频”，伴有或没有欲望性尿失禁，通常伴有频繁的夜尿症。

因此，本发明可以进一步包括一种或多种抗胆碱能药，其抑制副交感神经脉冲的传播，因此降低了平滑肌，例如，膀胱中的平滑肌的痉挛。抗胆碱能药化合物包括但不限于蕈毒碱受体拮抗剂、烟碱受体拮抗剂和去极化神经肌肉阻断剂。本发明考虑的抗胆碱能药包括本领域已知的那些，包括例如但不限于，达非那辛、双环胺、奥昔布宁和托特罗定。抗胆碱能药可以与雌激素，或与孕酮，或与雌激素和孕酮的组合物一起使用。

本发明化合物的日剂量可以根据各种因素而改变，这些因素如基础病况、个体条件、体重、年龄和给药方式。对于阴道给药，可以以单位剂型提供药物组合物，含有最优选从约0.5mg:25mg/剂的本发明的雌激素:孕酮，优选至约1mg:25mg/剂，优选1mg:30mg/剂，优选至约1mg:50mg/剂，甚至高达约1mg:100mg，用于待治疗患者的剂量症状调节。

与其他激素替代治疗方案相反，阴道给药可以持续至少3个月，优选至少6个月，更优选至少12个月。在特定的实施方案中，治疗将持续至少18个月，更优选至少24个月。在进一步的实施方案中，治疗持续患者的一生。对于这样的长期使用，优选雌三醇或微粉化孕酮，特别是两者的特定制剂。

具体实施方式

以下实施例只是本发明的说明，并且不应当将它们认为是以任何方式来限制本发明的范围。

实施例1：萎缩性阴道炎患者中的雌激素/孕酮阴道栓剂

该实施例描述了患有萎缩性阴道炎的绝经后患者中雌激素/孕酮阴道栓剂(“JC-001”)安全特征的阶段1-2、开放标记、随机、单盲、安慰剂对照的多剂量试验。

该研究的目的如下：

(1)试验的目的是测定绝经后女性中，安慰剂、未拮抗的雌激素与两个联合雌激素-孕酮方案之间用于治疗萎缩性阴道炎的功效并评价它们的相对安全性。

(2)通过客观和主观测量的阴道萎缩的改善来测量功效时，是为了比较阴道制剂相互之间以及与安慰剂在缓解萎缩性阴道炎症状中的功效。改善的客观测量包括阴道pH的测量和阴道乳酸菌的存在。改善的主观测量将包括研究者对阴道外观的评价，包括阴道粘膜苍白、出血点、易碎性和干燥；以及患者关于干燥和刺痛的症状评价。

(3)为了评价阴道制剂相互之间以及与安慰剂的安全性，特别是对子宫内膜刺激的治疗影响。安全性特征将包括通过子宫内膜活体检查的结果所测量的子宫内膜刺激的评价。该试验将报道随机接受安慰剂、未拮抗的雌激素和两个联合的雌激素-孕酮方案的绝经后女性中的子宫内膜组织学发现。

该研究群包括所有种族的带有子宫的女性，不管之前的激素使用，邀请她们参加该研究。参与者为随机就诊的45至64岁年龄之间，并在参与之前已经停止月经至少一年了。参与者具有高于或等于40mIU/ml的卵泡刺激素(FSH)。每个参与者将被告知研究设计可能的副作用和这些可能的副作用的医学重要性。提供该信息后，从所有参与者获得签名的同意书。

设计该研究来随机化总共20名女性，每个研究分支5名。排除标准包括以下的：

1.最后一次月经期在44岁之前，或在随机化之前少于12个月。

2.血清FSH浓度低于40mIU/ml。

3.身体质量指数高于或等于40kg/m²。

4.使用以下的药物或药剂：coumadin或肝素；随机化3个月内使用绝经期激素；随机化3个月内大量使用非处方植物雌激素。

5.患者没有萎缩性阴道炎的诊断，如通过低于5的阴道pH所测量的。研究者的阴道外观评价与萎缩性阴道炎的诊断不一致(存在正常的粘膜颜色和正常的褶皱)。患者的症状评价与萎缩如干燥或刺痛不相关。

6.子宫内膜剥离的病史。

7.与之前的雌激素使用相关的血栓性情况的病史。

8.乳癌或阳性的乳房X线照片或怀疑处于开始时期的乳癌或同卵双生中产生了乳癌。

9.基于临床活体检查的子宫内膜癌或子宫内膜增生。

10.最初筛选就诊的6个月内心肌梗死或需要抗心律不齐药或毛地黄的冠心病或充血性心力衰竭。

11.中风或TIA(曾经)。

12.恶性黑素瘤(曾经)。

13.在随机化之前诊断少于5年的任何癌症(除了非黑素瘤皮肤癌)。

14.慢性肝病。

15.任何其他严重的致命疾病。

16.在登记前患者不能证明能正确使用阴道栓剂的能力，不懂英语，不能够配合研究程序以及不愿意在研究区域停留1年。

给予1mg剂量雌三醇，使用负荷剂量后每周维持3次的给药时间表，并以栓剂的形式给予。选择该给药方案是因为(1)临床数据已经表明0.5mg的低剂量不能恢复绝经期患者中的乳酸菌群并且不能降低阴道pH；(2)推荐按照给药时间表来使用低剂量或低功效雌激素，负荷剂量后，一周阴道给药3次作为维持；和(3)对雌激素片剂和阴道环的研究没有提供充分的数据来推荐这些可替换的方案用于治疗萎缩性阴道炎。

还使用了特定的孕酮剂，因为已知孕酮的类型将显著影响脂质水平。出于安全性的原因，选择微粉化孕酮，这是天然产生的孕酮，而不是合成的黄体酮。之前的数据比较了口服和阴道给药孕酮的生物利用率，并且显示出两种制剂的峰值血浆孕酮浓度没有显著差异，并且具有相似的生物利用率。此外，数据已经表明对于诱导子宫内膜安全性能力的相对功效，对于口服治疗的推荐孕酮剂量为200mg；而使用孕酮阴道悬浮液为90mg。研究已经证明了通过阴道给药100mg剂量的微粉化孕酮12天/月将形成功能样分泌型子宫内膜。

因此，在目前的研究中评价阴道激素治疗的子宫内膜影响时，使用合适剂量的50mg微粉化孕酮和25mg微粉化孕酮。对于研究选择的治疗方案具有四个分支：

(1)安慰剂；

(2)雌三醇1mg；

(3)雌三醇1mg和微粉化孕酮25mg；和

(4)雌三醇1mg和微粉化孕酮50mg。

随机分配给治疗组的患者将接受JC-002安慰剂，作为单盲的一部分。

阴道内安慰剂由MKB基质-1.2500gm组成。阴道内安慰剂是配合JC-001雌三醇/孕酮栓剂的栓剂。测试试剂的身份在标签的遮盖部分被封闭。随机分配给安慰剂组的患者将接受JAB基质的栓剂和自己给药的阴道内安慰剂。药物制剂如以下的表4中所示。

表4

强度	1mg/25mg	1mg/50mg	1mg	安慰剂
					雌三醇	0.0010gm/ml	0.0010gm/ml	0.0010gm/ml	0
孕酮	0.0250gm/ml	0.0500gm/ml	0	0
					硅胶	0.0150gm	0.0150gm	0.0150gm	0
JAB基质	1.2431gm	1.2206gm	1.2656gm	1.2800gm
					栓剂体积	1.2841gm至体积	1.2866gm至体积	1.2816gm至体积	1.2800gm至体积
0.1％柠檬酸，0.0013gm	用于pH调节	用于pH调节	用于pH调节	用于pH调节

以相等的数量将参与者随机分配至以下处理之一：每天含有1mg雌三醇和50mg微粉化孕酮的阴道栓剂，持续两周，此后每周三次(n＝5)；每天含有1mg雌三醇和25mg微粉化孕酮的阴道栓剂，持续两周，此后每周三次(n＝5)；每天含有1mg雌三醇的阴道栓剂，持续两周，此后每周三次(n＝5)；或安慰剂(n＝5)。患者在阴道内插入栓剂，每天一次，持续2周。此后，患者插入栓剂每周三次，在治疗之间至少超过2天的间隔，以维持治疗应答。

在3个月、6个月和12个月时，评价对于患者的功效和安全性。在最初负荷剂量后2周时还通过电话联系了患者，以确定任何不利的情况。在最初的筛选就诊中，获得病史并进行全身体检和骨盆检查。每个参与者完成了关于泌尿生殖系萎缩症状的调查问卷。此外，使用pH计测量阴道pH，并通过用棉签穿过阴道口内的侧壁旋转来获得阴道培养物，并迅速接种来分离开始时、3、6和12个月时的乳酸菌，以确定功效。将在开始时、3、6和12个月时进行子宫内膜活体检查，以确定安全性特征(参见子宫内膜组织学程序部分下的更多详细内容)。表5概括了数据集合。

表5.数据和样本收集时间表(0-12个月)

测定的参数	开始时	3个月	6个月	12个月
					妇科学和病史	X
全身检查	X
					阴道pH	X	X	X	X
阴道乳酸菌	X	X	X	X
					阴道萎缩	X	X	X	X
阴道干燥	X	X	X	X
					阴道刺痛	X	X	X	X
子宫内膜活体检查	X	X	X	X
					不利影响		X	X	X
性能评价		X	X	X
					卵泡刺激素(FSH)	X

如果需要，每年就诊的数据集合和程序中包括骨盆检查和子宫颈涂片。按照需要进行计划外的就诊，以应答参与者或研究者提出的问题。此外，在每次计划的就诊时，回顾症状日志、阴道出血的报告、药物使用和暂时的疾病。

使用标准活体检查技术获得子宫内膜组织，不考虑女性月经周期的日子。使用Pipelle套管进行活体检查。将研究者确定进入了子宫但未能获得组织(由于推定的萎缩)的女性的活体检查结果归类为正常。在开始时不能进入子宫(子宫颈狭窄或不能忍受该程序)的女性将不分配给研究分支。如果这发生在继续就诊时，女性将不再继续研究药物。进行计划外的活体检查来评价异常或有问题的阴道出血，或继续作为增生的早期诊断。将样本固定并于4％未缓冲的福尔马林中，并用苏木精和曙红将4μm切片染色。不知道患者实验方案的相同医师将解释活体检查结果。根据统一的标准使用用于诊断子宫内膜增生的标准和用来分类子宫内膜增生的术语。

在开始时、三个月、六个月和十二个月或计划外就诊时通过活体检查、刮除或子宫切除收集子宫内膜的组织学。

实施例2：霜剂形式的药物组合物制剂

该实施例提供了治疗与萎缩性阴道炎相关症状的作为阴道霜剂的药物组合物制剂。表6概括了成分及其含量。

表6

强度	1/25mg/gm	1/50mg/gm	1mg/gm	安慰剂
					雌三醇	0.0010gm	0.0010gm	0.0010gm	0
孕酮	0.0250gm	0.0500gm	0	0
					丙二醇(润湿剂)	0.0250ml	0.0500ml	0.005ml	0
JC基质(基质B和基质M)基质B是滋润霜基质M是维生素E醋酸盐USP液体(1IU/mg)	0.949gm	0.899gm	0.994gm	0gm

对于每个强度，每个剂量的总体积为1gm。

实施例3：霜剂形式的药物组合物制剂

该实施例提供了治疗与萎缩性阴道炎相关症状的作为阴道霜剂的药物组合物制剂。表7概括了成分及其含量。

表7

强度	1mg/25mg	1mg/50mg
			雌三醇	0.0010gm/ml	0.0010gm/ml
孕酮	0.0250gm/ml	0.0500gm/ml
			丙二醇(润湿剂)	0.0250ml	0.0500ml
JC基质(基质B和基质M)基质B是PCCA’s Versabase基质M是维生素E醋酸盐USP液体(1IU/mg)	0.949gm	0.899gm

实施例4：霜剂形式的药物组合物制剂

该实施例提供了治疗与萎缩性阴道炎相关症状的作为阴道栓剂的药物组合物制剂。表8概括了成分及其含量。

表8

强度	1mg/25mg	1mg/50mg
			雌三醇	0.0010gm/ml	0.0010gm/ml
孕酮	0.0250gm/ml	0.0500gm/ml
			硅胶	0.0150gm	0.0150gm
JAB基质	1.2431gm	1.2206gm
			栓剂体积	1.2841gm至体积	1.2866gm至体积
0.1％柠檬酸，0.0013gm	用于pH调节	用于pH调节

实施例5：在用于治疗绝经期患者中萎缩性阴道炎的单个剂量单 位中使用阴道雌三醇和孕酮的功效和安全性研究

研发了通过混合雌三醇和孕酮的雌三醇和孕酮混合物制剂并作为单个剂量单位给药于十一名(11)患者。患者的年龄为(51岁)至(75岁)，平均年龄为(59岁)。所有女性呈现出阴道萎缩症状阴道干燥。使用组合的雌三醇和孕酮阴道栓剂治疗所有女性，每天给予一次，持续两周，接着为每周两次的维持方案。五名女性给予1mg雌三醇和25mg孕酮的剂量。六名女性给予1mg雌三醇和30mg孕酮的剂量。插入栓剂后大约3至5小时收集血样。

如表9中所示的，研究中的患者报道了用组合的雌三醇和孕酮栓剂治疗后，在治疗3个月时，阴道干燥的阴道萎缩症状的改善。与基线值相比较时，1mg雌三醇/25mg孕酮(n＝5)和1mg雌三醇/30mg孕酮(n＝6)治疗导致阴道干燥指数(评定量表)的改善(其中“0”表示没有干燥，而“10”表示极度干燥)。妇科学评价还包括了阴道pH测定。使用试纸条测量阴道pH。在开始时或在3个月随访时，2个剂量组的中值pH和阴道干燥值之间，或这些值的变化之间不存在显著差异(表9)。在每个剂量组内的pH和阴道干燥值中，在开始时和3个月之间的中值改变存在显著差异(表9)。

表9阴道内雌三醇/孕酮治疗诱导的临床改变：阴道pH和阴道干燥

*P-值来自Mann-Whitney测试，用于两个剂量之间的中值差异

-值来自Wilcoxon符号秩次检验，用于每个剂量内的中值变化。

通过阴道粘膜吸收了一些孕酮，如通过血清孕酮水平的证据所证明的，尽管水平没有很大变化，并且仍然落在正常范围内(正常的黄体期水平范围为1.8ng/ml至26ng/ml)。这些数据表明孕酮的全身生物利用率看来产生了精密限于黄体期孕酮水平的水平。该数据与医学文献中报道的足以具有抗随着雌激素刺激的绝经后子宫内膜增殖效果需要的剂量相一致。表10概括了孕酮血清浓度。

表10

患者	孕酮剂量	血清(ng/ml)
			1	25mg	4.8
2	25mg	8.8
			3	25mg	4.2
4	25mg	5.4
			5	25mg	5.7
6	30mg	6.3
			7	30mg	2.0
8	30mg	5.6
			9	30mg	2.9
10	30mg	5.6
			11	30mg	5.2

缺乏雌激素的女性接受了治疗方案(1mg雌三醇/25mg孕酮[n＝5]；1mg雌三醇/30mg孕酮[n＝5])，每周两次，持续大约十二个月，在治疗后一年获得乳房X线照片。所有十张乳房X线照片的结果都是正常的。这些结果表明使用联合的阴道激素替代治疗不存在提高的乳癌风险，这与口服或经皮联合激素替代治疗相反。表11概括了乳房X线照片的结果。

表11

结果	1mg雌三醇/25mg孕酮	1mg雌三醇/30mg孕酮
			正常	5	5
提高的乳房组织密度	0	0
			异常	0	0
总计	5	5

实施例6：在用于治疗绝经期患者中萎缩性阴道炎的单个剂量单 位中使用阴道雌三醇和孕酮的功效和安全性研究

进行了预备试验来研究组合的雌三醇和孕酮阴道栓剂在绝经后女性的萎缩性阴道炎的治疗中是否有效和安全。

测试药物制剂列于表12中。给予参与者以下的治疗：每天含有1mg雌三醇和30mg孕酮的阴道栓剂，持续两周，此后每周三次(n＝19)。表13中概括了数据的收集。

表12：测试药物制剂

激素强度	1mg/30mg(JC-001)
		微粉化雌三醇	0.0010gm
微粉化孕酮	0.0300gm
		硅胶	0.0150gm
		基质JAB：(脂肪基质)	1.2386gm
栓剂体积	1.2846gm
		0.1％的柠檬酸，0.0013gm	用于pH调节

表13：数据收集表(0-6个月)

测定的变量	开始时	2周	12周	24周
					病史	X
阴道pH	X		X	X
					尿液分析	X		X	X
阴道细胞学	X		X	X
					尿频的自我测定	X		X	X
性欲的自我测定	X		X	X
					阴道干燥的自我测定	X		X	X
血清雌三醇和孕酮	X	X	X	X
					子宫内膜活体检查	X			X
血清卵泡刺激素	X
					体检	X		X	X

该研究登记了19名参与者的样品。所有19名患者患有萎缩性阴道炎的症状。所有病历中存在阴道和子宫内膜萎缩。

之前关于患有萎缩性阴道炎的绝经后女性的研究报道了各自为39.5和6.2的平均治疗前阴道成熟指数(VMI)和pH值(Marx等，Maturitas 2004；47：47-54)。基于这些数据，认为差异的标准偏差，对于VMI不超过14，对于阴道pH不超过0.8，18的样本大小将具有超过80％的能力来检测VMI中25％的变化和阴道pH中10％的变化。此外，如果子宫内膜增生的真实比例为1％，18名女性的样本大小将具有98.6％的能力来排除超过25％的比例(即，当真实比例为25％时，只观察0或1事件的概率小于0.05，而真实比例为1％时，概率为0.986％)。

该研究最初的终点包括阴道成熟指数，阴道干燥、尿频和性欲的自我测定和阴道pH的变化，限定为开始时以及3和6个月继续测量之间的差异。第二个终点包括6个月时异常子宫内膜活体检查结果的存在，限定为延长的雌激素作用或子宫内膜增生的组织学证据，以及血清雌三醇和孕酮浓度的变化，限定为开始时与2周、3个月和6个月继续测量之间的差异。

描述性的统计提供了继续研究的终点，包括平均值、中值、标准偏差和95％置信区间。描述性的统计提供了分类终点，包括频率、百分比和95％置信区间。使用最后观察到的参与者的数值推算变量的遗漏值。给描述性的统计提供了遗漏值的推算值或没有提供。该研究中激素方案中的子宫内膜增生的零病例解释为基于等式(1-最大风险)ⁿ＝0.05在95％的置信水平不超过14％的长期风险(Hanely等，JAMA1983，249：1743-45)。

但是，该数值没有反应出长期风险，因为没有长期研究雌激素和孕酮阴道产品。在超过3年的研究中，使用联合的雌激素和孕酮口服治疗看到的长期风险具有低于1％的子宫内膜增生比例。使用联合的雌激素和孕酮阴道产品时，预期的结果将包括相似的子宫内膜增生比例(低于1％)。

在3个月的治疗阶段过程中没有产生不利影响。治疗3个月后，所有患者返回进行评价，并且18名患者报道了阴道干燥症状满意的缓解。一名患者报道了阴道干燥症状的轻微主观缓解，尽管阴道萎缩是客观改善了。在登记和12周就诊之间，治疗使得阴道干燥指数显著改善。在登记和12周就诊之间，看到存在阴道成熟指数的显著改善。在登记和12周就诊之间，pH变化存在显著的改善。登记和12周就诊之间，存在膀胱活动过度症状尿频的显著改善。此外，登记和12周就诊之间，存在活动低下的性欲期失调(性欲)的显著改善。表14和15概括了使用雌三醇和孕酮阴道联合激素治疗的临床变化。

表14-登记和2-和/或12-周就诊之间的中值症状分数、雌三醇和孕酮水平以及配对差异。

*负值表示从登记时的降低，而正值表示从登记时的增加。

-值来自Wilcoxon符号秩次检验，其比较了每个参与者登记时的值与2-和/或12-周时的值。

表15一登记时和12-周就诊时性欲和尿频症状的存在

*P-值来自McNemar’s测试，其比较了每个参与者登记时和12-周就诊之间症状的存在和不存在

此外，接受1mg雌三醇/30mg孕酮治疗方案(每周三次，持续大约12周(3个月))的雌激素缺乏女性具有在栓剂插入后4至5小时时获得的血样。通过阴道粘膜吸收了一些孕酮，如通过血清孕酮水平的证据所证明的，尽管该水平没有很大的改变并且仍然落入正常的范围内(正常的黄体期水平范围为1.8ng/ml至26ng/ml)。这些数据表明孕酮的全身生物利用率看来产生了精密限于黄体期孕酮水平的水平。再者，该数据(平均血清浓度为7.7ng/ml)与医学文献中报道的足以具有抗增殖效果需要的剂量相一致(高于5ng/ml)，所述增殖据报道随着雌激素刺激绝经后子宫内膜而产生。表16概括了给药联合阴道激素治疗后的血清孕酮浓度，每周给予三次。表17和18证明了登记时的孕酮浓度与第2周和第12周时的插入前浓度之间不存在显著差异，因此表明最小的全身吸收。总而言之，这些结果表明孕酮给药的全身效果将实质性地低于口服给予的剂量。

表16-每周给绝经后女性给药雌三醇/孕酮阴道栓剂三次后的血清孕酮浓度

患者	孕酮剂量	血清(ng/ml)
			1	30	8.1
2	30	5.2
			3	30	7.9
4	30	4.1
			5	30	8.1
6	30	15.3
			7	30	8.4
8	30	10.6
			9	30	5.3
10	30	8.2
			11	30	5.7
12	30	10.7
			13	30	6.8
14	30	7.6
			15	30	3.7
平均		7.7

表17-每名参与者登记时和12-周接诊之间≥5ng/ml的孕酮水平的存在和不存在

*P-值来自McNemar’s测试，其比较了每名参与者在登记时和2-周就诊之间≥5ng/ml的孕酮水平的存在和不存在

表18-每名参与者登记时和2-周接诊之间＞5ng/ml的孕酮水平的存在和不存在

*P-值来自McNemar’s测试，其比较了每名参与者在登记时和12-周就诊之间≥5ng/ml的孕酮水平的存在和不存在

在治疗6个月后，五名患者接受子宫内膜活体检查(EMB)。结果与对子宫的抗增殖作用相一致，这与使用联合口服或经皮激素替代治疗报道的相一致。因此，30mg孕酮的阴道剂量足以对雌激素刺激的绝经后子宫内膜具有抗增殖作用。表19概括了子宫内膜改变。

表19-从开始时的正常至6个月时最极端异常结果的子宫内膜活体检查变化的概括

结果	1mg雌三醇/30mg孕酮
		正常	5
单纯(囊性)增生	0
		复合(腺性)增生	0
异型性	0
		腺癌	0
总计	5

口服途径给药的雌三醇水平的测量已经显示出显著高于口服给药激素的全身水平。表20证明了将阴道细胞学和阴道pH转化成绝经前期值的1mg雌三醇的剂量显示出在插入前2周和12周之间的血清浓度不存在显著差异。总而言之，这些结果表明雌三醇给药的全身作用在统计学上低于口服给药剂量的。

表20-登记时与2-和12-周就诊之间中值雌三醇水平和配对差异

-值来自Wilcoxon符号秩次检验，其比较了每名参与者登记时的值和12周时的值

总之，数据显示出开始时和3个月之间以下参数的提高：阴道成熟指数(n＝19)；pH(n＝19)；阴道干燥等级(n＝19)；性欲(n＝11)；和尿频(n＝12)。六个月时5名患者的EMB证明了抗增殖作用。15名患者的血清孕酮水平表明抗增殖作用。13名患者的雌三醇血清水平显示了最小的全身吸收。值得注意的是，10名服用测试药物一年的患者的乳房X线照片结果没有变化。

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本发明不限于在此所述的特定实施方案的范围中。实际上，除了在此所述的那些，根据之前的描述和附图，本领域技术人员将清楚本发明的各种变化。确定这样的变化落入所附权利要求的范围内。

进一步理解所有的值是近似的，并且是为了描述而提供的。

在整个申请中引用了专利、专利申请、出版物、产品说明和实验方案，在此将其公开内容全部引入作为参考，用于所有目的。

Claims (44)

1.用于阴道给药于有需要的患者的药物组合物，包括治疗有效量的雌激素化合物、治疗有效量的孕酮化合物和治疗有效量的用于阴道给药的药物学上可接受的载体，其中组合物用于治疗与萎缩性阴道炎相关的泌尿生殖系症状。

2.根据权利要求1的药物组合物，其中将组合物制备为阴道栓剂。

3.根据权利要求1的药物组合物，其中雌激素化合物是微粉化雌三醇。

4.根据权利要求1的药物组合物，其中孕酮化合物是微粉化孕酮。

5.根据权利要求1的药物组合物，其中雌激素化合物是微粉化雌三醇，并且其中孕酮化合物是微粉化孕酮。

6.根据权利要求3的药物组合物，其中微粉化雌三醇的存在量为约1mg/剂。

7.根据权利要求3的药物组合物，其中微粉化雌三醇的存在量为约0.01mg至约10mg/剂。

8.根据权利要求7的药物组合物，其中微粉化雌三醇的存在量为约0.25mg至约1.0mg/剂。

9.根据权利要求4的药物组合物，其中微粉化孕酮的存在量为约5mg至约500mg/剂。

10.根据权利要求9的药物组合物，其中微粉化孕酮的存在量为约25mg至50mg/剂。

11.根据权利要求5的药物组合物，其中微粉化雌三醇和微粉化孕酮的存在量各自为约1mg∶25mg/剂。

12.根据权利要求5的药物组合物，其中微粉化雌三醇和微粉化孕酮的存在量各自为约1mg∶30mg/剂。

13.根据权利要求5的药物组合物，其中微粉化雌三醇和微粉化孕酮的存在量各自为约1mg∶50mg/剂。

14.根据权利要求1的药物组合物，进一步包括至少一种选自添加剂、药物学上可接受的载体、脂肪酸基质、防腐剂、染料、粘合剂、悬浮剂、分散剂、着色剂、崩解剂、赋形剂、稀释剂、润滑剂、增塑剂、油及其混合物的成分。

15.根据权利要求4的药物组合物，其中给予治疗有效量的微粉化孕酮来降低与绝经期过程中长期未拮抗雌激素给药相关的不利子宫影响的伴随情况。

16.根据权利要求1的药物组合物，其中组合物进一步包括悬浮剂。

17.根据权利要求16的药物组合物，其中悬浮剂是微粉化硅胶。

18.根据权利要求17的药物组合物，其中微粉化硅胶的含量为0.02gm/单位剂量。

19.权利要求1的药物组合物，其中组合物进一步包括脂肪酸基质。

20.权利要求19的药物组合物，其中每个栓剂的脂肪酸基质由JAB基质组成。

21.治疗萎缩性阴道炎的泌尿生殖系症状的方法，其包括阴道给药药物组合物，该组合物包括治疗有效量的雌激素化合物和孕酮化合物。

22.根据权利要求21的方法，其中雌激素是微粉化雌三醇。

23.根据权利要求21的方法，其中孕酮是微粉化孕酮。

24.根据权利要求21的方法，其中雌激素是微粉化雌三醇，并且其中孕酮是微粉化孕酮。

25.根据权利要求23的方法，其中治疗有效量的孕酮能有效降低与绝经期过程中长期未拮抗雌激素给药相关的不利子宫影响的伴随情况。

26.根据权利要求21的方法，其中降低了与抗毒蕈碱药治疗相关的副作用的发生率。

27.根据权利要求24的方法，其中通过阴道给予0.5mg含量的微粉化雌三醇结合25mg微粉化孕酮引起对子宫内膜的抗增殖作用。

28.根据权利要求24的方法，其中雌激素和孕酮的存在剂量为1mg微粉化雌三醇∶50mg微粉化孕酮，其中阴道给药引起对子宫内膜的抗增殖作用。

29.根据权利要求24的方法，其中通过阴道给予1mg含量的微粉化雌三醇结合25mg微粉化孕酮引起对子宫内膜的抗增殖作用。

30.根据权利要求24的方法，其中雌激素和孕酮的存在剂量为1mg微粉化雌三醇∶30mg微粉化孕酮，其中阴道给药引起对子宫内膜的抗增殖作用。

31.根据权利要求21的方法，其中给药持续至少3个月。

32.根据权利要求31的方法，其中给药持续至少6个月。

33.根据权利要求32的方法，其中给药持续至少12个月。

34.根据权利要求33的方法，其中给药持续至少18个月。

35.根据权利要求34的方法，其中给药持续至少24个月。

36.根据权利要求24的方法，其中雌激素和孕酮的存在剂量为1.0mg微粉化雌三醇∶100mg微粉化孕酮，其中阴道给药诱导了完全分泌型子宫内膜，导致撤退性出血。

37.根据权利要求24的方法，其中雌激素和孕酮的存在剂量为1mg微粉化雌三醇∶50mg微粉化孕酮，其中阴道给药使得子宫内膜部分分泌型，导致非常轻微的不规则出血而且没有撤退性出血。

38.根据权利要求24的方法，其中雌激素和孕酮的存在剂量为1mg微粉化雌三醇∶30mg微粉化孕酮，其中阴道给药使得子宫内膜部分分泌型，导致非常轻微的不规则出血而且没有撤退性出血。

39.权利要求24的方法，其中雌激素和孕酮的存在剂量为1mg微粉化雌三醇∶25mg微粉化孕酮，其中阴道给药使得子宫内膜呈部分分泌型，导致没有不规则出血而且没有撤退性出血。

40.权利要求21的方法，其中作为阴道栓剂或阴道霜剂来给药雌激素化合物和孕酮化合物。

41.根据权利要求21的方法，其中以治疗有效量给药药物组合物来降低膀胱活动过度的症状。

42.根据权利要求41的方法，其中膀胱活动过度的症状包括尿频、尿急、夜尿和欲望性尿失禁。

43.权利要求1的药物组合物，进一步包括抗胆碱能药。

44.权利要求21的方法，其中药物组合物进一步包括抗胆碱能药。