CN101160118A

CN101160118A - 多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒制剂

Info

Publication number: CN101160118A
Application number: CNA2006800126709A
Authority: CN
Inventors: G·利沃赛德; S·詹金斯; E·利沃赛德
Original assignee: Elan Pharma International Ltd
Current assignee: Perrigo Pharma International DAC
Priority date: 2005-02-24
Filing date: 2006-02-24
Publication date: 2008-04-09
Also published as: US20060188566A1; IL185292A0; BRPI0608173A2; ZA200706783B; WO2006091780A2; MX2007010394A; EA015987B1; NO20074859L; WO2006091780A3; EA200701793A1; AU2006216640A1; CA2598441A1; JP2008531591A; EP1855659A2; KR20080003322A

Abstract

本发明描述了纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物的组合物。该组合物包含纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物和至少一种表面稳定剂，可以用于癌症治疗。

Description

多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒制剂

技术领域

本发明涉及多西紫杉醇(docetaxel)及其类似物的纳米微粒(nanoparticulate)组合物、该组合物的制备方法、以及该纳米微粒组合物在治疗癌症，尤其是治疗乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和肺癌中的用途。

背景技术

A.关于多西紫杉醇及其类似物的背景

二萜紫杉烷(taxoids)或紫杉烷(taxanes)为通过阻止细胞分裂而抑制细胞生长的化合物，其包括多西紫杉醇和紫杉醇。它们也称为抗有丝分裂剂或抗微管剂(Antimicrotubule agents)或有丝分裂抑制剂。

美国专利5,438,072中描述了具有抗肿瘤和抗白血病活性的基于二萜紫杉烷的组合物及其用途。美国专利6,624,317涉及用于癌症治疗的二萜紫杉烷结合物的制备。Magnus的美国专利5,508,447(简称“Magnus专利”)的图1A中显示了紫杉烷环系的结构和编号。Magnus专利涉及用于癌症治疗的紫杉酚的合成。美国专利5,698,582和5,714,512涉及紫杉烷衍生物，其以适合注射的药物组合物用于肿瘤和白血病的治疗。美国专利6,028,206和5,614,645涉及有用于癌症治疗的紫杉酚类似物的制备。美国专利4,814,470和5,411,984均涉及用于癌症治疗的一些紫杉酚衍生物的制备。

美国专利5,494,683和5,399,363中描述了紫杉醇的纳米微粒组合物。这些专利没有描述纳米微粒的多西紫杉醇制剂。

紫杉醇的化学结构如下所示：

多西紫杉醇为半合成的属于二萜紫杉烷家族的抗肿瘤剂。多西紫杉醇为白色至近似白色的粉末，其实验式为C₄₃H₅₃NO₁₄·3H₂O，分子量为861.9。它是高度亲脂的和几乎不溶于水的。多西紫杉醇的化学名为(2R，3S)-N-羧基-3-苯基丝氨酸，N-叔丁酯，13-5β-20-环氧-1，2α，4，7β，10β，13 α-六羟基紫杉烷-11-烯-9-酮酯，4-乙酸酯，2-苯甲酸酯的三水合物。多西紫杉醇是从紫杉植物的可更新针叶生物中提取的前体(二萜紫杉烷10-脱乙酰基浆果赤霉素III)开始半合成制得的。多西紫杉醇的结构(如下所示)与紫杉醇的结构显著不一样：

多西紫杉醇具有独一无二的化学结构，相对于紫杉醇有2个改变：(1)在紫杉酚B环的C-10位置上用羟基代替乙酰基；和(2)C-13例链的变化(例如在紫杉酚的侧链上用N-叔丁氧基羰基代替N-苯甲酰基)。这些显著的结构差别导致紫杉醇和多西紫杉醇具有不同的活性。例如，多西紫杉醇比紫杉醇更有效。Angelo等，“Docetaxel versuspaclitaxel for antiangiogenesis，”J.Hematother.Stem.CellRes.，11(1)：103-18(2002)。另外，在比较由紫杉醇和多西紫杉醇诱导COX-2表达的研究中，发现了紫杉醇在人和鼠细胞中诱导的COX-2表达具有相似的动力学和浓度响应曲线，相反地，多西紫杉醇只在人单核细胞中诱导COX-2表达，而在鼠细胞中不能诱导COX-2的表达。Cassidy等，Clin.Can.Res.，8：846-8 55(2002)。

而且，多西紫杉醇的作用机理不同于紫杉醇的作用机理。多西紫杉醇使发生有丝分裂所必需的细胞微管网状构造(microtubularnetwork)分裂，以及影响正常微管所调节的细胞活动。这种作用机理导致它与紫杉醇相比具有较少的严重的副反应。

多西紫杉醇由Aventis Pharmaceuticals(Bridgewater，NewJersey)以TAXOTERE^_Injection Concentrate市售。TAXOTERE^_为无菌无热原的，并且可用的为含有20mg(0.5mL)或80mg(2.0mL)的多西紫杉醇(无水的)单次剂量小瓶。每mL含有40mg的多西紫杉醇(无水的)和1040mg的聚山梨醇酯80。TAXOTERE^__InjectionConcentrate要求使用前稀释。为了此目的，需提供无菌无热原的单次剂量稀释液。用于TAXOTERE^_的稀释液含有13％乙醇的注射用水，并在小瓶中提供。

聚山梨醇酯80和乙醇(应用它们增加多西紫杉醇的溶解度)的存在可引起不良反应。因为与TAXOTERE^_有关的不良超敏性，在化疗开始24小时前建议口服地塞米松三天的前驱给药。聚山梨醇酯80与严重的过敏性反应有关，该反应的特征为低血压和/或支气管痉挛或全身性疹/红斑，在接受推荐的三天地塞米松前驱给药法的患者中2.2％(2/92)发生了这类反应。另外，多西紫杉醇注射液要求使用前稀释。为此，必须提供无菌无热原的单次剂量稀释液。如上所述，用于TAXOTERE^_注射制剂的稀释液含有13％乙醇的注射用水，必须随同药物一起提供该稀释液。

多西紫杉醇可引起患者骨髓中的血细胞数减少，该药物也可引起肝损害。另外，已经观察到TAXOTERE^_给药的过敏病例。症状包括低血压和/或支气管痉挛、和全身性疹/红斑。也已观察了一些超剂量的病例(150-200mg/m²的剂量)。与此有关的一些并发症包括骨髓抑制、周围神经毒性、和粘膜炎。

溶剂聚山梨醇酯80和乙醇对于TAXOTERE^_给药所观察到的过敏性反应应负至少一部分责任。给予类固醇和其它的组胺阻断药物作为前驱给药法可减少这些反应的发生率和严重度，但是关于前驱给药法也涉及不良事件(例如库欣(Cushing′s)综合征、传染性并发症、高血糖症、高血压、和精神病的效应(包括类固醇诱导的精神病))，尤其是在长期给药时。溶剂也促成增塑剂从聚氯乙烯(PVC)袋和管中溶出，并可能产生与这些试剂有关的其它不良反应(例如，神经病和肿瘤细胞耐药性)。

应用于紫杉醇的一种具有较高水溶性的替代药物制剂为白蛋白结合的紫杉醇(ABRAXANE^_)。然而，这种药物制剂要求紫杉醇共价结合到白蛋白上，因此可改变紫杉醇的性质。例如，在白蛋白结合的紫杉醇的临床I和II期临床试验中，没有看到溶剂介导的毒性，不要求前驱给药法，和可在仅仅30分钟内输入药物。然而，在I期试验中这种药物的药动学曲线似乎为线性，这不同于显示非线性药动学性质的传统紫杉醇“Abraxane(paclitaxel protein-bound particles forinjectable suspension [albumin-bound])product information，”Abraxis Oncology(Schamburg，IL)，January 2005。

在临床药理学意义上，多西紫杉醇为抗肿瘤剂，其通过使发生有丝分裂和分裂间期细胞功能所必需的细胞微管网状构造破裂起作用。多西紫杉醇结合到游离的微管蛋白并促进微管蛋白装配进入稳定的微管中，同时抑制它们的拆散。这导致没有正常功能的微管束的生成和微管的稳定，结果是抑制细胞的有丝分裂。多西紫杉醇结合到微管不会改变结合的微管中的原丝数目，这是不同于当前临床使用的大多数纺锤体毒剂的特征。Physicians′Desk Reference，58^th Ed.，pp.3，307，771-78(Thompson PDR，Montvale，New Jersey，2004)。

TAXOTERE^_(多西紫杉醇)在1996年首先获得美国食品与药品管理局的批准，用于先前蒽环类化疗失败后的局部晚期的或转移性乳腺癌。该药物然后在1999年被批准用于局部晚期的或转移性非小细胞肺癌(NSCLC)的二线应用。在2002年11月，美国食品与药品管理局批准TAXOTERE^_(多西紫杉醇)与顺铂组合使用，用于不能切除的、局部晚期的或转移性非小细胞肺癌(NSCLC)患者的治疗，对于这种情况患者先前并没有受到化疗。在2004年，与泼尼松组合的TAXOTERE^_被批准用于非雄激素依赖的(耐激素的)转移性前列腺癌患者的治疗。另外，与多柔比星和环磷酰胺联用的TAXOTERE^_已经被美国FDA批准用于可手术的、结节阳性(node-positive)乳腺癌患者的辅助治疗。在临床试验中继续将TAXOTERE^_试用于许多类型癌症的各期治疗。

在I期试验中，给予从20mg/m²至115mg/m²范围的剂量后评价癌症患者中的多西紫杉醇(TAXOTERE^_)药动学。在静脉注射70mg/m²至115mg/m²的剂量后，多西紫杉醇的药动学是剂量不依赖的并符合3室模型，其α、β、γ半衰期的总体均数分别为4分钟、36分钟、和11.1小时。TAXOTERE^_批准的剂量范围为60mg/m²至100mg/m²。IV给予100mg/m²的剂量后，平均峰值血浆水平为3.7μg/mL(SD＝0.8)，相应的AUC为4.6μg/mL·h(SD＝0.8)。据发现，虽然药物清除率不依赖于剂量或者给药方案，多西紫杉醇(TAXOTERE^_)的血浆浓度和AUC与剂量是直接成比例的，这符合线性的药代动力学类型。总体清除率和稳态分布容积的平均值分别为21L/h/m²和113L。多西紫杉醇(TAXOTERE^_)在静脉内(IV)给药后迅速地和广泛地分布。体外研究表明约有94％多西紫杉醇与血浆蛋白(主要与白蛋白、α₁-酸性糖蛋白和脂蛋白)结合。

TAXOTERE^_(多西紫杉醇)剂量方案依治疗的癌症类型而不同。至于乳腺癌，推荐剂量为每三周于1小时内静脉内给予60-100mg/m²。在非小细胞肺癌情形下，TAXOTERE^_只应用于先前基于铂的化疗失败后。推荐剂量为每三周于1小时内静脉内给予75mg/m²。

与多西紫杉醇使用相关的重要的限制为不可预知的个体间的效果和毒性的差异性。自其临床应用以来，改善多西紫杉醇治疗的尝试已经遍及多方面：减少个体间的药动学(PK)和药效学(PD)的差异性，优化给药方案、途径和药物制剂，以及逆转耐药性。

已经描述的多西紫杉醇的类似物，包括3′-脱苯基-3′-环己基多西紫杉醇、2-(六氢)多西紫杉醇、和3′-脱苯基-3′-环己基-2-(六氢)多西紫杉醇。这些多西紫杉醇类似物在C-3′和/或C-2苯甲酸酯位置上含有环己基而不是苯基。Ojima等“Synthesis andStructure-Activity Relationships of New Antitumor Taxoids：Effects of Cyclohexyl Substitution at the C-3′and/or C-2TAXOTERE^_(Docetaxel)，”J.Med.Chem.，37：2602-08(1994)。据报道，3′-脱苯基-3′-环己基多西紫杉醇和2-(六氢)多西紫杉醇对微管拆散(microtubule disassembly)具有等同于多西紫杉醇的强抑制活性。这证明C-3′或C-2位置的苯基或芳基对于与微管的强结合来说不是必要的。

其它先前描述的多西紫杉醇类似物包括各种2-酰氨基多西紫杉醇类似物(包括间甲氧基和间氯苯甲酰氨基类似物)(Fang等，“Synthesis and Cytotoxicity of 2alpha-amido DocetaxelAnalogues，”Bioorg.Med.Chem.Lett.，12：1543-6(2002))；缺少环氧丙烷D环但具有对生物活性重要的4α-乙酰氧基的多西紫杉醇类似物(Deka等，“Deletion of the oxetane ring in docetaxelanalogues：synthesis and biological evaluation，”Org.Lett.，5：5031-4(2003))；5(20)去氧多西紫杉醇(Dubois等，“Synthesisof5(20)deoxydocetaxel，a new active docetaxel analogue，”Tetrahedfon Lett.，41：3331-3334(2000))；10-脱氧-10-C-吗啉代乙基多西紫杉醇类似物(Iimura等，“Orally active docetaxelanalogue-synthesis of 10-deoxy-10-C-morpholinoethyl docetaxelanalogues，”Bioorganic and Medicinal Chem.Lett，11：407-410(2001))；Cassidy等在Clin.Can.Res.，8：846-855(2002)中描述的多西紫杉醇类似物，例如具有叔丁基氨基甲酸酯作为异丝氨酸N-酰基的取代基但又不同于多西紫杉醇的C-10(乙酰基对羟基)和C-13异丝氨酸键连(烯醇酯对酯)的类似物；和C3位具有肽支链的多西紫杉醇类似物，参见Larroque等“Novel C2-C3″N-peptide linkedmacrocyclic taxoids.Part 1 ：Synthesis and biologicalactivities of docetaxel analogues with a peptide side chainatC3”，Bioorg.Med.Chem.Lett.15(21)：4722-4726(2005)。另外临床试验中有多种多西紫杉醇衍生物，包括XRP 9881(也是指RPR 109881A)(10-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)(AventisPharma)、XRP6528(10-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)(Aventis Pharma)、Ortataxel(14-β羟基-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)(Bayer/Indena)、MAC-321(10-脱乙酰基-7-丙酰基(propanoyl)浆果赤霉素多西紫杉醇类似物)(Wyeth-Ayerst)和DJ-927(7-脱氧-9-β-二氢-9，10，O-乙缩醛紫杉烷多西紫杉醇类似物)(Daiichi Pharmaceuticals)，全部描述在Engels等的“Potential forImprovement Docetaxel-Based Chemotherapy：A PharmacologicalReview，”British J.of Can.，93：173-177(2005)中。另外的多西紫杉醇衍生物描述在Querolle等的“Novel C2-C3′N-linkedMacrocyclic Taxoids：Novel Docetaxel Analogues with HighTubulin Activity，”J.Med.Chem.，(Nov.2004)。

B.关于纳米微粒活性物质组合物的背景

纳米微粒活性物质组合物是美国专利5,145,684(简称“′684专利”)首先描述的粒子，它由吸附或结合于非交联的表面稳定剂表面的溶解性差的治疗或诊断剂组成。′684专利没有描述多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒组合物。

下列文献描述了制备纳米微粒活性物质组合物的方法，例如美国专利5,518,187和5,862,999，两者均为“碾磨药用物质的方法”；美国专利5,718,388为“碾磨药用物质的后续方法”；以及美国专利5,510,118为“包含纳米粒的治疗组合物的制备方法”。

下列文献也描述了制备纳米微粒活性物质组合物的方法，例如美国专利5,298,262为“应用离子浊点改性剂防止消毒过程中粒子聚集”；5,302,401“减少冷冻干燥过程中粒径生长的方法”；5,318,767“用于医学成像的X射线造影组合物”；5,326,552“应用高分子量非离子型表面活性剂的纳米微粒X射线血池造影剂的新制剂”；5,328,404“应用碘化芳族丙二酸酯的X射线成像的方法”；5,336,507“减少纳米粒聚集的带电荷磷脂的应用”；5,340,564“的防止粒子聚集并增加稳定性的包含Olin 10-G制剂”；5,346,702“应用非离子浊点改性剂使消毒过程中纳米微粒聚集最小化”；5,349,957“极小磁性-右旋糖酐粒子的制备及磁性性质”；5,352,459“应用纯化表面改性剂防止消毒过程中粒子聚集”；5,399,363和5,494,683，两者均为“表面修饰的抗癌纳米粒”；5,401,492“不溶于水的非磁性锰颗粒用作磁共振增强剂”；5,429,824“四丁酚醛用作纳米微粒稳定剂”；5,447,710“应用高分子量非离子型表面活性剂制备纳米微粒X射线血池造影剂的方法”；5,451,393“用于医学成像的X射线造影组合物”；5,466,440“口服胃肠诊断的X射线造影剂与药学上可接受的粘土组合的制剂”；5,470,583“减少聚集的包含带电荷磷脂的纳米粒组合物的制备方法”；5,472,683“纳米微粒诊断性混合氨基甲酸酐用作血池和淋巴系统成像的X射线造影剂”；5,500,204“纳米微粒诊断性二聚物用作血池和淋巴系统成像的X射线造影剂”；5,518,738“纳米微粒NSAID制剂”；5,521,218“纳米微粒碘代二帕胺(Iododipamide)衍生物用作X射线造影剂”；5,525,328“用于血池和淋巴系统成像的纳米微粒诊断性Diatrizoxy Ester X射线造影剂”；5,543,133“包含纳米粒的X射线造影组合物的制备方法”；5,552,160“表面修饰的NSAID纳米粒”；5,560,931“作为可消化油或脂肪酸中的纳米微粒分散体化合物的制剂”；5,565,188“聚亚烷基嵌段共聚物用作纳米粒的表面改性剂”；5,569,448“硫酸化非离子的嵌段共聚物表面活性剂用作纳米粒组合物的稳定剂包衣”；5,571,536“作为可消化油或脂肪酸中的纳米微粒分散体化合物的制剂”；5,573,749“纳米微粒诊断性混合羧酸酐用作血池和淋巴系统成像的X射线造影剂”；5,573,750“诊断性成像的X射线造影剂”；5,573,783“具有保护性外层的可再分散的纳米微粒膜基质”；5,580,579“使用由高分子量线性聚(环氧乙烷)聚合物稳定的纳米粒在胃肠道内特定位点的粘附”；5,585,108“口服胃肠治疗剂与药学上可接受的粘土组合的制剂”；5,587,143“环氧丁烷-环氧乙烷嵌段共聚物表面活性剂用作纳米粒组合物的稳定剂包衣”；5,591,456“与羟丙基纤维素一起碾磨的萘普生用作分散体稳定剂”；5,593,657“由非离子和阴离子稳定剂稳定的钡盐新制剂”；5,622,938“用于纳米晶体的糖基表面活性剂”；5,628,981“口服胃肠诊断的X射线造影剂和口服胃肠治疗剂的改良制剂”；5,643,552“纳米微粒诊断性混合碳酸酐用作血池和淋巴系统成像的X射线造影剂”；5,718,388“碾磨药用物质的连续方法”；5,718,919“包含布洛芬R(-)对映体的纳米粒”；5,747,001“包含倍氯米松纳米粒分散体的气溶胶”；5,834,025“静脉内给予纳米微粒制剂引起不良生理反应的减少”；6,045,829“使用纤维素(Cellulosic)表面稳定剂的人免疫缺陷性病毒(HIV)蛋白酶抑制剂的纳米晶体制剂”；6,068,858“使用纤维素表面稳定剂制备人免疫缺陷性病毒(HIV)蛋白酶抑制剂的纳米晶体制剂的方法”；6,153,225“纳米微粒萘普生的注射剂”；6,165,506“纳米微粒萘普生的新固体剂型”；6,221,400“应用人免疫缺陷性病毒(HIV)蛋白酶抑制剂的纳米晶体制剂治疗哺乳动物的方法”；6,264,922“含有纳米粒分散体的喷雾气溶胶”；6,267,989“防止纳米粒组合物中晶体生长和粒子聚集的方法”；6,270,806“PEG衍生的类脂用作纳米微粒组合物的表面稳定剂的用途”；6,316,029“快速崩解的固体口服剂型”；6,375,986“包含协同组合的聚合的表面稳定剂和磺基琥珀酸二辛酯钠的固体剂型纳米微粒组合物”；6,428,814“具有阳离子的表面稳定剂的生物粘附纳米微粒组合物”；6,431,478“小型碾磨”；6,432,381“靶向药物递送至上和/或下部胃肠道的方法”；6,592,903“包含协同组合的聚合的表面稳定剂和磺基琥珀酸二辛酯钠的纳米微粒分散体”；6,582,285“用于卫生的湿磨仪器”；6,656,504“包含无定形的环孢霉素A的纳米微粒组合物”；6,742,734“用于碾磨材料的系统和方法”；6,745,962“小型磨及其方法”；6,811,767“纳米微粒药物的液滴气溶胶”；6,908,626“具有立即释放和控制释放特性组合的组合物”；6,969,529“包含乙烯基吡咯烷酮和乙酸乙烯酯的共聚物作为表面稳定剂的纳米微粒组合物”；6,976,647“用于碾磨材料的系统和方法”；特别地，在此引入所有这些作为参考文献。另外，2002年1月31日公开的美国专利申请20020012675 A1“控释纳米微粒组合物”描述了纳米微粒组合物，特别地，在此将其引入作为参考。这些专利都没有描述多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒制剂。

下列文献描述了无定形小粒子组合物，例如美国专利4,783,484“作为抗微生物剂的微粒组合物及其用途”；4,826,689“由不溶于水的有机化合物制备大小均匀的粒子的方法”；4,997,454“由不溶性化合物制备大小均匀的粒子的方法”；5,741,522“内部夹带气泡的大小均匀的超小非聚集多孔颗粒及方法”；5,776,496，“用于增强超声反向散射的超小多孔颗粒”。

当前需要具有提高溶解性特性(该特性又对给药患者提供提高的生物利用度和降低的毒性)的多西紫杉醇制剂。本发明通过提供包含多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒制剂的组合物及方法满足这些需要。这些制剂包括但不限于注射纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物的制剂。

发明内容

本发明涉及包含多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒的多西紫杉醇组合物，其中多西紫杉醇或其类似物的粒子(particle)具有小于约2000nm的有效平均粒径。该组合物还包含至少一种表面稳定剂，其被吸附于或结合于多西紫杉醇或多西紫杉醇类似物粒子的表面。虽然可应用任何药学上可接受的剂型，本发明优选的剂型为注射剂型。

本发明另一个方面涉及药物组合物，其包含纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物、至少一种表面稳定剂和药学上可接受的载体、以及任何需要的辅料。

在本发明的一个实施方案中，提供多西紫杉醇或其类似物的注射制剂。在另一个实施方案中，制剂不含有聚山梨醇酯(包括聚山梨醇酯80)或乙醇的水溶液。

本发明的一个方面涉及令人惊讶和料想不到发现的多西紫杉醇或其类似物(统称为“活性成分”)的新注射制剂，其通过给药实现了下列目的：(1)注射制剂无需聚山梨醇酯或乙醇水溶液的存在，和(2)纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的有效平均粒径小于约2微米。在一个实施方案中，该注射制剂包含纳米微粒多西紫杉醇或其类似物和吸附或结合于多西紫杉醇或其类似物表面的作为表面稳定剂的聚维酮聚合物。

本发明提供组合物，其包含低注射容量的多西紫杉醇或其类似物的浓缩物，不含聚山梨醇酯和/或乙醇，并在给药时具有快速的药物溶出度。

本发明另一个方面涉及包含多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒组合物，其与常规多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)相比具有改善药动学性质。

本发明的另一个实施方案涉及纳米微粒组合物，其包含多西紫杉醇或其类似物并且还包含本领域已知的用于治疗癌症的或通常与二萜紫杉烷联合使用的一种或多种非多西紫杉醇或非多西紫杉醇类似物的活性剂。

本发明还公开了制备含多西紫杉醇或其类似物的本发明纳米微粒组合物的方法。该方法包括在一定的时间和条件下将纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物粒子与至少一种表面稳定剂接触，以提供具有小于约2000nm的有效平均粒径的多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒组合物。一种或多种表面稳定剂可以在多西紫杉醇尺寸减少之前、期间或之后与多西紫杉醇或其类似物接触。

本发明也涉及使用本文公开的新纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物治疗癌症的方法。该方法包含给受试者施用治疗有效量的本发明的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物。使用本发明纳米微粒组合物的其它治疗方法对本领域技术人员来说是已知的。

上面的一般性描述和以下的附图简述以及详细描述都是示例和解释性的，旨在对权利要求的本发明提供进一步解释。根据以下本发明的详细描述，本领域技术人员将容易明白其它的目的、优点、和新特征。

附图说明

图1.未碾磨的多西紫杉醇(无水的)(Camida Ltd.)在100X下应用相位光学(phase optics)的光显微照片。

图2.5％(w/w)多西紫杉醇(Camidta Ltd.)与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K17和0.25％(w/w)去氧胆酸钠结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图3.5％(w/w)的无水多西紫杉醇(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)Tween^_80和0.1％(w/w)卵磷脂结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图4.5％(w/w)的无水多西紫杉醇(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K12、0.25％(w/w)去氧胆酸钠和20％(w/w)葡萄糖结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图5.1％(w/w)的无水多西紫杉醇(Camida Ltd.)与0.25％(w/w)Plasdone^_S630和0.01％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图6.1％(w/w)的无水多西紫杉醇(Camida Ltd.)与0.25％(w/w)羟丙基甲基纤维素(HPMC)和0.01％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图7.1％(w/w)的无水多西紫杉醇(Camida Ltd.)与0.25％(w/w)Pluronic^_F127结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图8.未碾磨的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)在100X下应用相位光学的光显微照片。

图9.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K12和0.25％(w/w)去氧胆酸钠(NaDeoxycholate)结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图10.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K17、0.25％(w/w)去氧胆酸钠和20％(w/w)葡萄糖结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图11.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K17、0.25％(w/w)去氧胆酸钠和20％(w/w)葡萄糖结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图12.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)Tween^_80、0.1％(w/w)卵磷脂和20％(w/w)葡萄糖结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图13.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)Tween^_80、0.1％(w/w)卵磷脂和20％(w/w)葡萄糖结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图14.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)TPGS(PEG化的维生素E)和0.1％(w/w)去氧胆酸钠结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图15.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)与1.25％(w/w)Pluronic^_F 108、0.1％(w/w)去氧胆酸钠和10％(w/w)葡萄糖(w/w)结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图16.5％(w/w)的多西紫杉醇与1.25％(w/w)Plasdone^_S630和0.05％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图17.5％(w/w)的多西紫杉醇与1.25％(w/w)HPMC和0.05％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图18.5％(w/w)的无水多西紫杉醇与1％(w/w)白蛋白和0.5％(w/w)去氧胆酸钠结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

图19.5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物与1％(w/w)白蛋白和0.5％(w/w)去氧胆酸钠结合的纳米微粒水分散系在100X下应用相位光学的光显微照片。

发明详述

A.概况

本发明涉及包含纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物及其制备和应用的方法。与多西紫杉醇的常规制剂(TAXOTERE^_)相比，纳米微粒组合物令人惊讶地和出乎意料地不需要包括用以增加药物溶解度的聚山梨醇酯或乙醇。

能制得多西紫杉醇或其类似物的纳米微粒组合物是令人惊讶的。虽然先前已制得紫杉醇的纳米微粒组合物，但多西紫杉醇具有显著不同于紫杉醇的结构。这种不同的结构导致多西紫杉醇具有比紫杉醇显著更强的活性。而且，多西紫杉醇经由不同于紫杉醇的机理发挥作用。根据所给出的这两种化合物的不同结构，料想不到的是，吸附或结合于多西紫杉醇或其类似物表面的表面稳定剂能够成功地使化合物稳定在纳米微粒的大小。

含多西紫杉醇或其类似物的组合物具有小于约2000nm的有效平均粒径和至少一种表面稳定剂。在一个实施方案中，描述了可注射的组合物，其包含纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物以及作为表面稳定剂的具有分子量小于约40,000道尔顿的聚维酮聚合物。在另一个实施方案中，纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物的药物制剂具有约6至约7之间的pH值。

在人类治疗中，提供体内释放所需治疗量的活性成分并以快速和恒定的方式使活性成分成为生物可利用的剂型是重要的。因此，本文描述了多种纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物制剂，以满足这种需要。纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物剂型的两个实例为注射纳米微粒剂型和包衣纳米微粒剂型(例如固体分散体或液体填充胶囊)，当然也可使用任何药学上可接受的剂型。

可以以在患者上施用时显示多种释放性质的制剂来提供本发明的剂型，包括例如立即释放(IR)制剂、允许每日给药一次(或其它适当的时间期限，例如每周/月给药一次/两次/三次)的控制释放(CR)制剂、和IR和CR组合的制剂。因为本发明组合物的CR形式可要求每日只给药一次剂量(或如每周或每月的适当时间期限给药一次剂量)，这样的剂型有益于提高患者便利性和依从性。可以以多种途径实现CR形式中所用的控制释放的机制，包括但不限于使用可侵蚀的制剂、控制扩散的制剂、和渗透控制的制剂。

本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物制剂优于多西紫杉醇常规形式(例如，非纳米微粒或增溶的剂型，例如TAXOTERE^_)的优点包括但不限于：(1)增加水溶性；(2)增加生物利用度；(3)更小的剂型规格由于提高生物利用度；(4)更低的治疗剂量由于提高生物利用度；(5)减少不期望的副作用的风险；(6)提高患者的便利性和依从性；(7)更高的剂量而可能没有不良副作用；和(8)更有效的癌症治疗。本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物的注射制剂超过多西紫杉醇注射常规形式(例如TAXOTERE^_)的进一步优点是无需使用聚山梨醇酯或乙醇来增加药物溶解度。

本发明也包括纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物，其包含一种或多种无毒的生理学上可接受的载体、辅助剂、或赋形剂(统称为载体)。组合物可配制用于胃肠外注射(例如静脉内、肌内、或皮下注射)，以固体、液体或气溶胶形式口服给药，经阴道、鼻、直肠、眼、局部(粉末、软膏或滴剂)、颊、脑池内、腹膜内、或表面(topical)等等给药的制剂。

B.定义

本文使用如下面和整个申请所述的若干定义来描述本发明。

本文所用的术语“有效平均粒径小于约2000nm”表示当通过例如沉积场流分级分离法(sedimentation field flow fractionation)、光子相关光谱法(photon correlation spectroscopy)、光散射、碟式离心法(disk centrifugation)、和本领域技术人员已知的其它技术测量时，按重量计至少50％的多西紫杉醇或其类似物的粒子具有小于约2000nm的大小。

本文所用的“约”应是本领域普通技术人员所理解的，并且在应用它的上下文中会有在某种程度上变化。如果在所给出的应用它的上下文中具有本领域普通技术人员不清楚的术语使用时，“约”将表示该特定术语的至多加或减10％。

本文所用的“稳定的”多西紫杉醇或其类似物粒子包括但不限于具有一种或多种以下参数的多西紫杉醇或其类似物：(1)多西紫杉醇或其类似物粒子不会由于粒子间的吸引力或别的随着时间显著增加粒径的因素出现可看到的絮凝或凝聚；(2)多西紫杉醇或其类似物粒子的物理结构不会随着时间而改变，例如从无定形相转化为晶形相；(3)多西紫杉醇或其类似物粒子是化学稳定的；和/或(4)在制备本发明纳米粒中，多西紫杉醇或其类似物没有受到在多西紫杉醇或其类似物的熔点或以上温度下的加热步骤。

术语“常规的”或“非纳米微粒”活性剂或多西紫杉醇或其类似物应是指增溶的或具有大于约2000nm的有效平均粒径的活性剂，例如多西紫杉醇或其类似物。如本文所定义的纳米微粒活性剂具有小于约2000nm的有效平均粒径。

本文所用的短语“水溶性差的药物”是指在水中的溶解度小于约30mg/ml、小于约20mg/ml、小于约10mg/ml、或小于约1mg/m的药物。

本文所用的短语“治疗有效量”表示在需要此治疗的众多患者给予该药物时提供的特定药理学反应的药物剂量。应强调的是，在特定情况下给特定患者施用的治疗有效量的药物在治疗本文所述的病症/疾病中不总是有效的，即使领域技术人员认定该剂量为治疗有效量。

本文所用的术语“微粒”或“粒子”是指物质的状态，其特征为不分大小、形状或形态存在的离散的粒子(particles)、小丸(pellets)、珠(beads)、或颗粒(granules)。本文所用的术语“多微粒”表示不分大小、形状或形态的复数个离散的或聚集的粒子、小丸、珠、或颗粒或者它们的混合物。

本文所用的与根据本发明组合物或与包衣或包衣材料有关的或用于其它任何上下文中的术语“改性释放”表示非立即释放的释放，它包括控制释放、持续释放(sustained release)、延迟释放(delayedrelease)。

本文所用的术语“时间延迟”是指在给予组合物到多西紫杉醇或其类似物从特定组分中释放之间的时间延续期。

本文所用的术语“滞后时间”是指活性成分从一个组分释放到多西紫杉醇或其类似物从另一个组分中继后释放之间的时间。

C.纳米微粒的多西紫杉醇组合物的特征

本发明的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物具有许多提高的药理学性质。

1.提高的生物利用度

在本发明的一个实施方案中，纳米微粒多西紫杉醇或其类似物制剂在相同剂量的相同多西紫杉醇或其类似物下显示出提高的生物利用度，并且与先前的常规多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)相比，只需要更小的剂量。

纳米微粒多西紫杉醇或其类似物剂型获得常规微晶多西紫杉醇剂型(例如TAXOTERE^_)所观察到的相同药理学效果，只需要更少的药物。因此，纳米微粒多西紫杉醇或其类似物剂型与常规微晶多西紫杉醇剂型相比，具有提高的生物利用度。

2.本发明多西紫杉醇组合物药动学曲线不受摄入此组合物的受试者进食或禁食状态的影响

在本发明的另一个实施方案中描述了纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物的组合物，其中本发明多西紫杉醇组合物药动学曲线基本上不受摄入此组合物的受试者进食或禁食状态的影响。这表示当纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物的组合物在进食状态施用与在禁食状态施用对比时，在药物吸收的量或药物吸收的速率上，几乎没有差异或没有可察觉的差异。

基本上消除食物影响的剂型的益处包括增加受试者的便利性，从而增加受试者的依从性，因为受试者不需要确保他们在用药时是否进食。而这是有意义的，因为多西紫杉醇或其类似物的受试者依从性不好，可以观察到所开处方药物用于的医疗疾病加重，即癌症患者(例如乳腺癌或肺癌患者)的预后可变得更糟。

本发明也提供多西紫杉醇或其类似物的组合物，其在给哺乳动物受试者施用时具有预期的药动学性质。优选地，多西紫杉醇或其类似物的组合物预期的药动学性质包括但不限于：(1)当测定哺乳动物受试者用药后的血浆时，多西紫杉醇或其类似物的C_max大于以相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)的C_max；和/或(2)当测定哺乳动物受试者用药后的血浆时，多西紫杉醇或其类似物的AUC大于以相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)的AUC；和/或(3)当测定哺乳动物受试者用药后的血浆时，多西紫杉醇或其类似物的T_max小于以相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)的T_max。本文所用的预期的药动学性质为在多西紫杉醇或其类似物初始剂量后所测量的药动学性质。

在一个实施方案中，在与相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)比较的药动学试验中，优选的多西紫杉醇或其类似物组合物所显示的T_max不大于约90％、不大于约80％、不大于约70％、不大于约60％、不大于约50％、不大于约30％、不大于约25％、不大于约20％、不大于约15％、不大于约10％、或不大于约5％的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)所显示的T_max。

在另一个实施方案中，在与相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)比较的药动学试验中，本发明的多西紫杉醇或其类似物组合物所显示的C_max大于至少约50％、至少约100％、至少约200％、至少约300％、至少约400％、至少约500％、至少约600％、至少约700％、至少约800％、至少约900％、至少约1000％、至少约1100％、至少约1200％、至少约1300％、至少约1400％、至少约1500％、至少约1600％、至少约1700％、至少约1800％、至少约1900％的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)所显示的C_max。

在还一个实施方案中，在与相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)比较的药动学试验中，本发明的多西紫杉醇或其类似物组合物显示出的AUC大于至少约25％、至少约50％、至少约75％、至少约100％、至少约125％、至少约150％、至少约175％、至少约200％、至少约225％、至少约250％、至少约275％、至少约300％、至少约350％、至少约400％、至少约450％、至少约500％、至少约550％、至少约600％、至少约750％、至少约700％、至少约750％、至少约800％、至少约850％、至少约900％、至少约950％、至少约1000％、至少约1050％、至少约1100％、至少约1150％、或至少约1200％的非纳米微粒多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)所显示的AUC。

3.进食状态与禁食状态给药时本发明多西紫杉醇组合物的生物等效性

本发明也包括包含纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物，其中在禁食状态下给受试者施用该组合物与在进食状态下给受试者施用该组合物是生物等效的。

包含纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物在进食状态给药与禁食状态给药相比时，其吸收的差异优选小于约100％、小于约95％、小于约90％、小于约85％、小于约80％、小于约75％、小于约70％、小于约65％、小于约60％、小于约55％、小于约50％、小于约45％、小于约35％、小于约35％、小于约30％、小于约25％、小于约20％、小于约15％、小于约10％、小于约5％、或小于约3％。

在本发明的一个实施方案中，本发明包括包含纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物，其中在禁食状态下给受试者施用该组合物与在进食状态下给受试者施用该组合物是生物等效的，尤其是按照美国食品与药品管理局(USFDA)和相应的欧洲调控机构(EMEA)所给出的C_max和AUC指导方针定义时是生物等效的。在USFDA指导方针下，如果AUC和C_max的90％置信区间(CI)在0.80至1.25(T_max测量与调节目的的生物等效性无关)时，则两种产品或方法是生物等效的。为了表明两种化合物或给药条件之间的生物等效性，按照欧洲EMEA指导方针，AUC的90％CI必须为0.80至1.25且C_max的90％CI必须为0.70至1.43。

4.本发明多西紫杉醇组合物的溶出性质

在本发明的又一个实施方案中，本发明多西紫杉醇或其类似物的组合物出乎意料地具有引人注目的溶出性质。多西紫杉醇或其类似物的快速溶出是优选的，因为溶出越快通常导致起效越快，生物利用度也越高。为了改善多西紫杉醇或其类似物的溶出性质和生物利用度，增加药物的溶出度是有用的，这样可获得接近100％的水平。

本发明多西紫杉醇或其类似物的组合物优选具有以下溶出性质：其中在约5分钟内溶出至少约20％的多西紫杉醇或其类似物的组合物。在本发明的另一个实施方案中，在约5分钟内溶出至少约30％或至少约40％的多西紫杉醇或其类似物的组合物。在本发明另外的又一个实施方案中，优选在约10分钟内溶出至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、或至少约80％的多西紫杉醇或其类似物的组合物。最后，在本发明的再一个实施方案中，优选在约20分钟内溶出至少约70％、至少约80％、至少约90％、或至少约100％的多西紫杉醇或其类似物的组合物。

优选在有区分力的介质中测量溶出度。对于在胃液具有极为不同的溶出性质的两种产品，这样的溶出介质会产生两种极为不同的溶出曲线，即此溶出介质可预测组合物的体内溶出度。示例性溶出介质为含有0.025M月桂基硫酸钠表面活性剂的水性介质。可通过分光光度法进行溶出量的测定。可使用转桨法(欧洲药典)测量溶出度。

5.本发明多西紫杉醇组合物的再分散性性质

在本发明的一个实施方案中，将本发明多西紫杉醇或其类似物的组合物制备成再分散的固体剂型，这样使再分散的多西紫杉醇或其类似物粒子的有效平均粒径小于约2微米。这是重要的，因为如果给予纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物后不能再分散为纳米微粒的粒子大小，那么该剂型就会丧失通过将多西紫杉醇或其类似物制备成纳米微粒的粒子大小所提供的益处。

事实上，本发明的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物组合物的益处来自多西紫杉醇或其类似物的小粒径；如果多西紫杉醇或其类似物在给药后不能再分散为小粒径，那么由于纳米微粒系统非常高的表面自由能和热力学驱动力使自由能全面减少，将形成“成块”或成团的多西紫杉醇或其类似物粒子。随着这种成团粒子的形成，该剂型的生物利用度下降。

此外，本发明纳米微粒的二萜紫杉烷的组合物，包括包含纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物，在给哺乳动物(例如人或动物)施用后表现出纳米微粒多西紫杉醇或其类似物粒子显著的再分散性(这如同在生物相关水性介质中重构/再分散所证明的一样)，这样使再分散的多西紫杉醇或其类似物粒子的有效平均粒径小于约2微米。这种生物相关水性介质可以是具有形成生物相关介质基础所需的离子强度和pH的任何水性介质。所需的离子强度和pH是代表人体内存在的生理条件的那些。这样的生物相关水性介质可以是，例如电解质水溶液或任何盐、酸或碱的水溶液，或它们的组合，它们均具有所需的离子强度和pH。

生物相关的pH是本领域众所周知的。例如，在胃中pH范围为略小于2(但是一般大于1)至4或5。在小肠中pH范围可为4至6，和在结肠中pH范围可为6至8。生物相关的离子强度也是本领域众所周知的。禁食状态胃液具有约0.1M的离子强度，而禁食状态肠液具有约0.14的离子强度。参见例如Lindahl等，“Characterization of Fluidsfrom the Stomach and Proximal Jejunum in Men and Women，”Pharm.Res.，14(4)：497-502(1997)。

据信，试验溶液的pH和离子强度比具体化学内容物更为关键。因此，通过强酸、强碱、盐、强碱、单个或多个共轭酸碱对(即，弱酸和该酸相应的盐)、一元和多元电解质的众多组合，可获得适当的pH和离子强度值。

代表性的电解质溶液可以为但不限于为约0.001至约0.1N浓度的HCl溶液，和约0.001至约0.1M浓度的NaCl溶液，以及它们的混合物。例如，电解质溶液可以为但不限于为约0.1N或更低浓度的HCl、约0.01N或更低浓度的HCl、约0.001N或更低浓度的HCl、约0.1M或更低浓度的NaCl、约0.01M或更低浓度的NaCl、约0.001M或更低浓度的NaCl、以及它们的混合物。这些电解质溶液中，0.01N HCl和/或0.1M NaCl是最有代表性的人禁食生理条件，因为这是近端胃肠道的pH和离子强度的状况。

0.001N HCl、0.01N HCl、和0.1N HCl的电解质浓度分别相当于pH3、pH2、和pH1。因此，0.01N HCl溶液模拟胃中存在的通常酸性条件。0.1M NaCl的溶液提供了合理的近似整个机体(包括胃肠液)内存在的离子强度的条件，尽管高于0.1M的浓度可用于模拟进食时人GI道的条件。

盐、酸、碱或它们组合的具有所需pH和离子强度的示例溶液包括但不限于磷酸/磷酸盐+氯化钠、氯化钾和氯化钙，乙酸/乙酸盐+氯化钠、氯化钾和氯化钙，碳酸/碳酸氢盐+氯化钠、氯化钾和氯化钙，以及柠檬酸/柠檬酸盐+氯化钠、氯化钾和氯化钙。

在本发明的另一个实施方案中，按照光散射法、显微镜检查法、或其它适合的方法测量时，本发明的再分散的多西紫杉醇或其类似物粒子(再分散在水性、生物相关的、或任何其它适用的介质中)具有有效平均粒径小于约2000nm、小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm、小于约50nm。用于测量有效平均粒径这些方法对本领域普通技术人员来说是已知的。

使用本领域已知的任何适用的方法可测试再分散性。参见，例如美国专利6,375,986“包含协同组合的聚合的表面稳定剂和磺基琥珀酸二辛酯钠的固体剂型纳米微粒组合物”的实施例部分。

6.与其它活性剂结合应用的多西紫杉醇组合物

本发明的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物可另外包括用于癌症治疗(尤其为乳腺癌和/或肺癌治疗)的一种或多种化合物。本发明组合物可以与这样的其它活性剂一起共同配制(co-formulated)，或者本发明组合物可以与这样的活性剂结合共同给予或顺序地给予。可以与本发明多西紫杉醇组合物共同给予或共同制备的药物实例，包括但不限于抗癌剂、化学治疗剂、地塞米松、COX-2抑制剂、laniquidar、奥利默森(oblimersen)、顺铂、多柔比星、环磷酰胺、类固醇(例如泼尼松和其它组胺阻断药物)、环磷酰胺、环孢霉素A、易瑞沙(ZD1839)、沙利度胺、米托蒽醌、英利昔单抗(Infliximab)、埃罗替尼(erlotinib)、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、TLK286、MDX-010、ZD1839、表柔比星、他莫昔芬、贝伐单抗(bevacizumab)、非格司亭(filgrastim)、长春瑞滨、西妥昔单抗(cetuximab)、伊立替康、雌莫司汀、依昔舒林(exisulind)、卡铂、ZD6474、吉西他滨、异环磷酰胺、卡培他滨、黄酮吡啶酚(flavopiridol)、塞来考昔、舒林酸、和舒林酸砜(Exisulind)。

D.组合物

本发明提供包含纳米微粒多西紫杉醇或其类似物粒子和至少一种表面稳定剂的组合物。优选地表面稳定剂被吸附在或结合于多西紫杉醇或其类似物粒子的表面。本文所用的表面稳定剂与多西紫杉醇或其类似物粒子或其本身之间不会起化学反应。优选地，表面稳定剂的个体分子基本上没有分子间的交联键合。在另一个实施方案，本发明组合物可包含两种或更多种表面稳定剂。

本发明也包括纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物，其中包含一种或多种无毒的生理学上可接受的载体、辅助剂、或赋形剂(统称为载体)。组合物可制备用于胃肠外注射(例如静脉内、肌内、或皮下注射)，以固体、液体或气溶胶形式口服给药，经阴道、鼻、直肠、眼、局部(粉末、软膏或滴剂)、颊、脑池内、腹膜内、或表面等等给药的制剂。在本发明的一些实施方案中，纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物制剂为注射形式或包衣口服形式。

1.多西紫杉醇

本文所有的术语“多西紫杉醇”包括其类似物和盐，并且可以是晶形相、无定形相、半晶形相、半无定形相(semi-amorphous phase)、或它们的混合物。多西紫杉醇或其类似物可以以一种基本上为光学纯的对映异构体形式或者以对映异构体的混合物、消旋体或别的形式存在。

本发明所述和包含的多西紫杉醇类似物包括但不限于，

(1)在C-3′和/或C-2苯甲酸酯位置上含有环己基基团而不是苯基基团的多西紫杉醇类似物，例如3′-脱苯基-3′-环己基多西紫杉醇、2-(六氢)多西紫杉醇、和3′-脱苯基-3′-环己基-2-(六氢)多西紫杉醇(Ojima等“Synthesis and structure-activity relationships ofnew antitumor taxoids.Effects of cyclohexyl substitution atthe C-3′and/or C-2 taxotere(docetaxel)，″J.Med.Chem.，37(16)：2602-8(1994)；

(2)C-3′或C-2位置缺少苯基或芳基的多西紫杉醇类似物，例如3′-脱苯基-3′-环己基多西紫杉醇和2-(六氢)多西紫杉醇；

(3)2-酰氨基多西紫杉醇类似物，包括间甲氧基和间氯苯甲酰氨基类似物(Fang等，Bioorg.Med.Chem.Lett，12(11)：1543-6(2002)；

(4)缺少环氧丙烷(oxetane)D环但具有对生物活性重要的4α-乙酰氧基的多西紫杉醇类似物，例如5(20)-硫杂多西紫杉醇(thiadocetaxel)类似物，它可由10-脱乙酰基浆果赤霉素III或紫杉碱B和异紫杉碱(isotaxine)B合成，参见Merckle等，“Semisynthesis ofD-ring modified taxoids：novel thia deriva tives of docetaxel，”J.Org.Chem.，66(15)：5058-65(2001)，和Deka等，Org.Lett.，5(26)：5031-4(2003)；

(5)5(20)去氧多西紫杉醇；

(6)10-脱氧-10-C-吗啉代乙基多西紫杉醇类似物，包括其中7-羟基被改性为疏水基(甲氧基、脱氧、6，7-烯、α-F、7-β-8-β-亚甲基、氟代甲氧基)的多西紫杉醇类似物，它描述在Iimura等，“Orallyactive docetaxel analogue：synthesis of 10-deoxy-10-C-morpholinoethyl docetaxel analogues，”Bioorg.Med.Chem.Lett.，11：(3)407-10(2001)；

(7)Cassidy等在Clin.Can.Res.，8：846-855(2002)中描述的多西紫杉醇类似物，例如具有叔丁基氨基甲酸酯作为异丝氨酸N-酰基的取代基但不又同于多西紫杉醇的C-10(乙酰基对羟基)和C-13异丝氨酸键连(烯醇酯对酯)的类似物；

(8)在C3位具有肽支链的多西紫杉醇类似物，参见Larroque等“Novel C2-C3″N-peptide linked macrocyclic taxoids.Part 1：Synthesis and biological activities of docetaxel analogues witha peptide side chain at C3”，Bioorg.Med.Chem.Lett.15(21)：4722-4726(2005)；

(9)XRP9881(10-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)；

(10)XRP6528(10-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)；

(11)Ortataxel(14-β羟基-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)；

(12)MAC-321(10-脱乙酰基-7-丙酰基浆果赤霉素多西紫杉醇类似物)；

(13)DJ-927(7-脱氧-9-β-二氢-9，10，O-乙缩醛紫杉烷多西紫杉醇类似物)；

(14)具有C2-C3′N-键合的多西紫杉醇类似物，其中C2位携带芳环并在N3′和C2-芳环的邻、间或对位之间链接。该对位取代的衍生物不能使微管稳定，而邻位和间位取代的化合物在冷诱导的微管拆散测定中显示出显著的活性。Olivier等，“Synthesis of C2-C3′N-LinkedMacrocyclic Taxoids；Novel Docetaxel Analogues with HighTubulin Activity，”J.Med.Chem.，47(24：5937-44(Nov.2004)；

(15)多西紫杉醇类似物，其携带连接C-2 OH和C-3′NH部分的22-元(或更多)环，(对携带连接C-2 OH和C-3′NH部分的18-、20-、21-、和22-元环的多西紫杉醇类似物的生物学评价表明活性依赖于环的大小；只有22-元环的二萜紫杉烷3d显示显著的微管结合力)(Querolle等，“Synthesis of novel macrocyclic docetaxelanalogues.Influence of their macrocyclic ring size on tubulinactivity，”J.Med.Chem.，46(17)：3623-30(2003).)；

(16)7β-O-糖基化的多西紫杉醇类似物(Anastasia等，“Semi-Synthesis of an O-glycosylated docetaxel analogue，”Bioorg.Med.Chem.，11(7)：1551-6(2003))；

(17)10-烷基化多西紫杉醇类似物，例如在烷基部分的末端具有甲氧基羰基的10-烷基化多西紫杉醇类似物(Nakayama等，“Synthesisand cytotoxic activity of novel 10-alky lated docetaxelanalogs，”Bioorg.Med.Chem.Lett.，8(5)：427-32(1998))；

(18)2′，2′-二氟代，3′-(2-呋喃基)，和3′-(2-吡咯基)多西紫杉醇类似物(Uoto等，“Synthesis and structure-activityrelationships of novel 2′，2′-difluoro analogues of docetaxel，”Chem.Pharm.Bull.(Tokyo，45(11)：1793-804(1997))；和

(19)荧光的和生物素化的多西紫杉醇类似物，例如具有(a)在7或3′位置的N-(7-硝基苯-2-氧杂-1，3-二唑-4-基)酰氨基-6-己酰基链，(b)在3′位的N-(7-硝基苯-2-氧杂-1，3-二唑-4-基)酰氨基-3-丙酰基基团，或(c)在7、10或3′位置的5′-生物素基酰氨基-6-己酰基链的多西紫杉醇类似物(Dubois等，“Fluorescent andbiotinylated analogues of docetaxel：synthesis and biologicalevaluation，”Bioorg.Med.Chem.，3(10)：1357-68(1995))。

2.表面稳定剂

在本发明的多西紫杉醇或其类似物制剂中可应用一种以上的表面稳定剂的组合。在本发明的一个实施方案中，多西紫杉醇或其类似物制剂为注射制剂。适用的表面稳定剂包括但不限于已知的有机和无机药用辅料。这些辅料包括各种聚合物、低分子量低聚物、天然产物、和表面活性剂。表面稳定剂包括非离子、离子、阴离子、阳离子、和两性离子表面活性剂。在本发明的一个实施方案中，注射纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物制剂的表面稳定剂为聚维酮聚合物。

表面稳定剂的代表性实例包括羟丙基甲基纤维素(现称为羟丙甲纤维素)、白蛋白、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、月桂基硫酸钠、磺基琥珀酸二辛酯、明胶、酪蛋白、卵磷脂(磷脂)、右旋糖酐、阿拉伯胶、胆固醇、黄芪胶、硬脂酸、苯扎氯铵、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、鲸蜡硬脂醇(cetostearyl alcohol)、聚西托醇乳化蜡(cetomacrogol emulsifying wax)、脱水山梨醇酯、聚氧乙烯烷基醚(例如聚乙二醇醚，如聚乙二醇1000单鲸蜡基醚)、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(例如商业上可得的Tween8^_，如Tween^_20和Tween^_80(ICI Speciality Chemicals))；聚乙二醇(例如Carbowaxes 3550^_和934^_(Union Carbide))、聚氧乙烯硬脂酸酯、胶态二氧化硅、磷酸酯(盐)、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙甲纤维素邻苯二甲酸酯、非晶性纤维素、硅酸镁铝、三乙醇胺、聚乙烯醇(PVA)、含环氧乙烷和甲醛的4-(1，1，3，3-四甲基丁基)-苯酚聚合物(也称为泰洛沙泊(tyloxapol)、四丁酚醛(superione)、和曲拉通(triton))、泊洛沙姆(例如Pluronics^_F68和F108，它们是环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物)；poloxamines(例如Tetronic 908^_，也称为Poloxamine 908^_，它是将环氧丙烷和环氧乙烷顺序与乙二胺加成衍生的四功能嵌段共聚物(BASF Wyandotte Corporation，Parsippany，N.J.))；Tetronic1508^_(T-1508)(BASF Wyandotte Corporation)，Tritons X-200^_，它是烷基芳基聚醚磺酸酯(Rohm and Haas)；Crodestas F-110^_，它是蔗糖硬脂酸酯和蔗糖二硬脂酸酯的混合物(Croda Inc.)；对异壬基苯氧基聚-(缩水甘油)，也称为Olin-10G^_或表面活性剂10-G^_(OlinChemicals，Stamford，CT)；Crodestas SL-40^_(Croda，Inc.)；和SA90HCO，它是C₁₈H₃₇CH₂C(O)N(CH₃)-CH₂(CHOH)₄(CH₂OH)₂(Eastman KodakCo.)；癸酰基-N-甲基葡糖酰胺(glucamide)；正癸基(-D-吡喃葡萄糖苷；正癸基(-D-吡喃麦芽糖苷；正十二烷基(-D-吡喃葡萄糖苷；正十二烷基(-D-麦芽糖苷；庚酰基-N-甲基葡糖酰胺；正庚基-(-D-吡喃葡萄糖苷；正庚基(-D-硫葡糖苷；正己基(-D-吡喃葡萄糖苷；壬酰基-N-甲基葡糖酰胺；正壬基(noyl)(-D-吡喃葡萄糖苷；辛酰基-N-甲基葡糖酰胺；正辛基-(-D-吡喃葡萄糖苷；辛基-(-D-硫代吡喃葡萄糖苷；PEG-磷脂、PEG-胆固醇、PEG-胆固醇衍生物、PEG-维生素A、PEG-维生素E、溶菌酶、乙烯基吡咯烷酮和乙酸乙烯酯的无规共聚物等等。并且，如果需要，可以制备成无磷脂的本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物制剂。

有用的阳离子表面稳定剂的实例包括但不限于聚合物、生物聚合物、多糖、纤维素、海藻酸盐、磷脂、和非聚合化合物，例如两性离子稳定剂、聚-n-甲基吡啶_、氯化蒽基(anthryul)吡啶_、阳离子磷脂、壳聚糖、聚赖氨酸、聚乙烯咪唑、聚凝胺(polybrene)、三甲基聚甲基丙烯酸甲酯溴化铵(PMMTMABr)、三甲基己基二苯乙酮基溴化铵(HDMAB)、和二甲基硫酸聚乙烯吡咯酮-2-二甲基氨基乙基异丁烯酸酯。其它有用的阳离子稳定剂的实例包括但不限于阳离子类脂、锍、磷、和季铵化合物，例如硬脂酰三甲基氯化铵、溴化苄基-二(2-氯乙基)乙基铵、椰子油三甲氯化或溴化铵、椰子油甲基二羟基乙基氯化或溴化铵、癸基三乙基氯化铵、癸基二甲基羟乙基氯化或溴化铵、C12-15二甲基羟乙基氯化或溴化铵、椰子油二甲基羟乙基氯化或溴化铵、肉豆蔻基三甲基铵甲基硫酸酯、月桂基二甲基苄基氯化或溴化铵、月桂基二甲基(乙烯氧基)4氯化或溴化铵、N-烷基(C12-18)二甲基苄基氯化铵、N-烷基(C14-18)二甲基苄基氯化铵、N-十四烷基二甲基苄基氯化铵一水合物、二甲基二癸基氯化铵、N-烷基和(C12-14)二甲基1-萘基甲基氯化铵、三甲基卤化铵、烷基三甲铵盐和二烷基二甲铵盐、月桂基三甲基氯化铵、乙氧基化烷基酰氨基烷基二烷基铵盐和/或乙氧基化三烷基铵盐、二烷基苯二烷基氯化铵、N-二癸基二甲基氯化铵、N-十四烷基二甲基苄基氯化铵一水合物、N-烷基(C12-14)二甲基1-萘基甲基氯化铵和十二烷基二甲基苄基氯化铵、二烷基苯烷基氯化铵、月桂基三甲基氯化铵、烷基苄基甲基氯化铵、烷基苄基二甲基溴化铵、C12、C15、C17三甲基溴化铵、十二烷基苄基三乙基氯化铵、聚二烯丙基二甲基氯化铵(DADMAC)、二甲基氯化铵、烷基二甲基铵卤化物、三鲸蜡基甲基氯化铵、癸基三甲基溴化铵、十二烷基三乙基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、氯化甲基三辛基铵(ALIQUAT 336)、POLYQUAT、溴化四丁基铵、溴化苄基三甲基铵、胆碱酯(例如脂肪酸的胆碱酯)、苯扎氯铵、氯化硬脂酰二甲基苄基铵(stearalkonium chloride)化合物(例如氯化硬脂酰三甲铵(stearyltrimonium chloride)和氯化二硬脂酰二甲铵(distearyldimonium chloride))、溴化或氯化十六烷基吡啶_、季铵化聚氧乙烯烷基胺的卤盐、MIRAPOL和ALKAQUAT(AlkarilChemical Company)、烷基吡啶_盐；胺(例如烷基胺、二烷基胺、烷醇胺、聚乙烯聚胺、N，N-二烷基氨基烷基丙烯酸酯、以及乙烯吡啶)、胺盐(例如醋酸月桂胺、醋酸硬脂基胺、烷基吡啶_盐和烷基咪唑_盐)、以及胺氧化物；咪唑_(imide azolinium)盐；质子化四元(quaternary)丙烯酰胺；甲基化四元聚合物(例如聚[二烯丙基二甲基氯化铵]和聚-[N-氯化甲基乙烯基吡啶_]；和阳离子瓜耳胶。

这些示例性的阳离子表面稳定剂和其它有用的阳离子表面稳定剂描述于J.Cross和E.Singer，Cationic Surfactants：Analyticaland Biological Evaluation(Marcel Dekker，1994)；P.和D.Rubingh(Editor)，Cationic Surfactants：Physical Chemistry(Marcel Dekker，1991)；和J.Richmond，Cationic Surfactants：Organic Chemistry，(Marcel Dekker，1990)。

非聚合表面稳定剂为任何非聚合化合物，例如苯扎氯铵、碳_化合物、磷_化合物、氧_化合物、卤_(halonium)化合物、阳离子有机金属化合物、四价磷(quarternary phosphorous)化合物、吡啶_化合物、苯胺_(anilinium)化合物、铵化合物、羟铵化合物、伯铵化合物、仲铵化合物、叔铵化合物、以及式NR1R2R3R4(+)的季铵化合物。至于式NR1R2R3R4(+)的化合物：

(i)R1-R4中无一为CH3；

(ii)R1-R4中的一个为CH3；

(iii)R1-R4中的三个为CH3；

(iv)所有R1-R4均为CH3；

(v)R1-R4中的两个为CH3，R1-R4中的一个为C6H5CH2，并且R1-R4中的一个为七个或更少个碳原子的烷基链；

(vi)R1-R4中的两个为CH3，R1-R4中的一个为C6H5CH2，并且R1-R4中的一个为十九个或更多个碳原子的烷基链；

(vii)R1-R4中的两个为CH3，并且R1-R4中的一个为C6H5(CH2)n基团，其中n＞1；

(viii)R1-R4中的两个为CH3，R1-R4中的一个为C6H5CH2，并且R1-R4中的一个包含至少一个杂原子；

(ix)R1-R4中的两个为CH3，R1-R4中的一个为C6H5CH2，并且R1-R4中的一个包含至少一个卤素；

(x)R1-R4中的两个为CH3，R1-R4中的一个为C6H5CH2，并且R1-R4中的一个包含至少一个环状片段；

(xi)R1-R4中的两个为CH3，并且R1-R4中的一个为苯环；或

(xii)R1-R4中的两个为CH3，并且R1-R4中的两个为纯脂肪族片段。

这些化合物包括但不限于氯化二十二烷基二甲基苄基铵(behenalkonium chloride)、苄索氯铵、氯化十六烷基吡啶_、氯化二十二烷基三甲基铵(behentrimonium chloride)、劳拉氯铵(lauralkonium chloride)、西他氯铵、西曲溴铵(cetrimoniumbromide)、氯化十六烷基三甲铵、十六烷基胺氢氟化物(cethylaminehydrofluoride)、氯化氯烯丙基六亚甲基四胺(chlorallylmethenamine)(Quaternium-15)、氯化二硬脂基二甲铵(Quaternium-5)、十二烷基二甲基乙基苄基氯化铵(Quaternium-14)、Quaternium-22、Quaternium-26、Quaternium-18锂蒙脱石、氯化二甲基氨乙基盐酸盐、盐酸半胱氨酸、二乙醇铵POE(10)油基(oletyl)醚磷酸盐、二乙醇铵POE(3)油基醚磷酸盐、氯化牛脂二甲基苄基铵(tallow alkonium)、二甲基双十八烷基铵膨润土、氯化硬脂酰二甲基苄基铵、度米芬、苯甲地那铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵、二盐酸乙二胺、盐酸胍、盐酸吡哆醇、盐酸碘非他胺、盐酸葡甲胺、甲苄索氯铵、溴化肉豆蔻基三甲基铵(myrtrimoniumbromide)、氯化油基三甲基铵(oleyltrimonium)、聚季铵盐-1、盐酸普鲁卡因、椰子酰基甜菜碱(cocobetaine)、硬脂烷铵(stearalkonium)膨润土、硬脂烷铵锂蒙脱石(stearalkoniumhectonite)、硬脂基三羟基乙基丙二胺二氢氟酸盐、氯化牛脂三甲铵(tallowtrimonium)、和十六烷基三甲基溴化铵。

这些表面稳定剂大多数是已知的药用辅料，并且美国药物协会和英国药学会联合出版的Handbook of Pharmaceutical Excipients(ThePharmaceutical Press，2000)对它们作了详细描述，在此特别地将其引入作为参考。

聚维酮聚合物

聚维酮聚合物是用于制备纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物注射制剂中使用的示例性表面稳定剂。聚维酮聚合物也称为聚维酮、povidonum、PVP、和聚乙烯吡咯烷酮，其以商标名Kollidon^_(BASFCorp.)和Plasdone^_(ISP Technologies，Inc.)销售。它们为多分散的大分子的分子，化学名为1-次乙基-2-吡咯烷酮聚合物和1-乙烯基-2-吡咯烷酮聚合物。商业上生产的聚维酮聚合物为具有平均分子量从约10,000至约700,000道尔顿的系列产品。为了用作注射纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物的表面稳定剂，优选聚维酮聚合物具有分子量小于约40,000道尔顿，因为对于注射剂而言，分子量大于40,000道尔顿将难于被机体清除。

通过例如Reppe氏方法制备聚维酮聚合物，其包含：(1)通过Reppe丁二烯合成由乙炔和甲醛获得1，4-丁二醇；(2)在200℃下经铜使1，4-丁二醇脱氢，形成γ-丁内酯；和(3)将γ-丁内酯与氨反应，产生吡咯烷酮。继后用乙炔处理得到乙烯基吡咯烷酮单体。在H₂O和NH₃存在下通过加热实现聚合作用。参见The Merck Index，10^th Edition，pp.7581(Merck&Co.，Rahway，NJ，1983)。

聚维酮聚合物的制备方法产生含有不相等链长分子的聚合物，并因此具有不同的分子量。每种特定商业上可得级别的分子分子量的平均值不同。因为难于直接地确定聚合物的分子量，最广泛使用的划分各种分子量级别的方法为基于粘度测量的K值法。各种级别的聚维酮聚合物的K值具有代表平均分子量的函数，它由粘度测量得到并根据Fikentscher氏公式计算。

通过测量个体分子的重量的方法(例如光散射法)确定分子量的平均重量(Mw)。表1提供数种商业上可得聚维酮聚合物(所有这些均是可溶的)的分子量数据。

虽然申请人不希望受理论机制的束缚，但应当相信聚维酮聚合物通过在粒子之间的力学或立体障碍的作用和使接近(凝聚和絮凝必需的粒子间的接近)减至最少，阻碍多西紫杉醇或其类似物粒子的絮凝和/或凝聚。

表1

聚维酮	K值	Mv(道尔顿)^**	Mw(道尔顿)^**	Mn(道尔顿)^**
聚维酮	K值	Mv(道尔顿)^**	Mw(道尔顿)^**	Mn(道尔顿)^**	Plasdone^_C-15	17±1	7,000	10,500	3,000
Plasdone^_C-30	30.5±1.5	38,000	62,500^*	16,500	Plasdone^_C-15	17±1	7,000	10,500	3,000
Plasdone^_C-30	30.5±1.5	38,000	62,500^*	16,500	Kollidon^_12PF	11-14	3,900	2,000-3,000	1,300
Kollidon^_17PF	16-18	9,300	7,000-11,000	2,500	Kollidon^_12PF	11-14	3,900	2,000-3,000	1,300
Kollidon^_17PF	16-18	9,300	7,000-11,000	2,500	Kollidon^_25	24-32	25,700	28,000-34,000	6,000

^*因为分子量大于40,000道尔顿的聚维酮聚合物不用作胃肠外给予(即注射)的药物化合物的表面稳定剂

^**Mv为粘度平均分子量，Mn为数均分子量，Mw为重均分子量。通过光散射和超速离心法测定Mw和Mn，通过粘度测量测定Mv。

基于表1所提供的数据，优选示例性的商业上可得的用于注射组合物的聚维酮聚合物包括但不限于Plasdone^_C-15、Kollidon^_12PF、Kollidon^_17PF、和Kollidon^_25。

3.纳米微粒的多西紫杉醇粒径

基于重量的平均粒径，通过本领域技术人员众所周知的常规粒径测量技术的测量以确定本文所用的粒径。这些技术包括，例如沉积场流分级分离法、光子相关光谱法、光散射、和碟式离心法。

本发明组合物包含具有有效平均粒径小于约2微米的多西紫杉醇或其类似物粒子。在本发明的另一个实施方案中，按照光散射法、显微镜检查法、或其它适用的方法测量时，多西紫杉醇或其类似物粒子具有有效平均粒径小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm或小于约50nm。在本发明的又一个实施方案中，本发明组合物为注射剂型，并且按照光散射法、显微镜检查法、或其它适用的方法测量时，多西紫杉醇或其类似物粒子优选具有有效平均粒径小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100 nm、小于约75nm或小于约50nm。可注射的组合物可包含有效平均粒径大于约1微米，至多约2微米的多西紫杉醇或其类似物。

“有效平均粒径小于约2000nm”表示按重量计至少50％的多西紫杉醇或其类似物的粒子具有粒径小于此有效平均数，即小于约2000nm。如果“有效平均粒径”小于约600nm，那么当按照上述技术测量时，至少约50％的多西紫杉醇或其类似物的粒子具有小于约600nm的尺寸。对于上述的其它粒径也是同样的定义。

在另外的实施方案中，至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％、或至少约99％的多西紫杉醇或其类似物粒子具有粒径小于有效平均数，即小于约1000nm、约900nm、约800nm等。

在本发明中，纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物的D50值为按重量计50％的多西紫杉醇或其类似物粒子落在该粒径的下面，类似地，D90值为按重量计90％的多西紫杉醇或其类似物粒子落在该粒径的下面。

4.纳米微粒的多西紫杉醇和表面稳定剂的浓度

多西紫杉醇或其类似物与一种和多种表面稳定剂的相对含量可宽泛地变化。个体组分的最佳量依赖于例如所选的表面稳定剂和多西紫杉醇或其类似物的物理和化学属性，例如亲水亲脂平衡(HLB)、熔点、和稳定剂水溶液的表面张力等等。

优选地，基于多西紫杉醇或其类似物和至少一种表面稳定剂组合的而不包括其它辅料的总重量，多西紫杉醇或其类似物的浓度按重量计可为约99.5％至约0.001％、约95％至约0.1％、或约90％至约0.5％。根据剂量和成本效益观点，通常优选较高浓度的活性成分。

优选地，基于多西紫杉醇或其类似物和至少一种表面稳定剂组合的而不包括其它辅料的总重量，表面稳定剂的浓度按重量计可为约0.5％至约99.999％、约5.0％至约99.9％、或约10％至约99.5％。

5.其它的药物辅料

本发明的药物组合物也可以依据给药途径和预期的剂型包含一种或多种粘合剂、填充剂、润滑剂、悬浮剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、缓冲剂、湿润剂、崩解剂、泡腾剂、和其它的辅料。这些辅料是本领域众所周知的。

填充剂的实例为乳糖一水合物、无水乳糖、和各种淀粉；粘合剂的实例为各种纤维素和交联聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素(如Avicel^_PH101和Avicel^_PH102)、微晶纤维素、和硅化微晶纤维素(ProSolv SMCC^TM)。

适用的润滑剂(包括对要被压缩的粉末流动性起作用的试剂)为胶态二氧化硅(如Aerosil^_200)、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、和硅胶。

甜味剂的实例为任何天然的或人工的甜味剂，例如蔗糖、木糖醇、糖精钠、环磺酸盐(cyclamate)、阿司帕坦(aspartame)、和安赛蜜(acsulfame)。矫味剂的实例为Magnasweet^_(MAFCO商标)、泡泡糖香料(bubble gum flavor)、和水果香料等等。

防腐剂的实例为山梨酸钾、对羟基苯甲酸甲酯、对羟苯甲酸丙酯、苯甲酸和其盐、其它的对羟基苯甲酸酯(例如对羟基苯甲酸丁酯)、醇类(例如乙醇或苯甲醇)、酚化合物(例如苯酚)、和四价(quarternary)化合物(例如苯扎氯铵)。

适用的稀释剂包括药学上可接受的惰性填充剂，例如微晶纤维素、乳糖、磷酸氢钙、糖、和/或上述的任意混合物。稀释剂的实例包括微晶纤维素(例如Avicel^_PH101和Avicel^_PH102)；乳糖(例如乳糖一水合物、无水乳糖、和Pharmatose^_DCL21)；磷酸氢钙(例如Emcompress^_)；甘露醇；淀粉；山梨醇；蔗糖；和葡萄糖。

适用的崩解剂包括轻度交联的聚乙烯吡咯烷酮、玉米淀粉(cornstarch)、马铃薯淀粉、玉米淀粉(maize stareh)、和改性淀粉、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、淀粉羟乙酸钠、和它们的混合物。

泡腾剂的实例为泡腾剂对(effervescent coupies)，例如有机酸和碳酸盐或碳酸氢盐。适用的有机酸包括，例如枸橼酸、酒石酸、苹果酸、富马酸、己二酸、琥珀酸和海藻酸以及酸酐和酸盐。适用的碳酸盐和碳酸氢盐包括，例如碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、碳酸镁、甘氨酸碳酸钠、L-赖氨酸碳酸盐(L-lysine carbonate)和精氨酸碳酸盐(arginine carbonate)。或者，可以只有泡腾剂对中的碳酸氢钠组分存在。

6.可注射的纳米微粒多西紫杉醇制剂

在本发明的一个实施方案中，提供可注射的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物制剂，它可以在低注射容量中包含高浓度，给药时具有快速溶出度的特点。示例性的组合物以％w/w为计包含：

多西紫杉醇或其类似物 5-50％

表面稳定剂 0.1-50％

防腐剂 0.05-0.25％

pH调节剂 pH约6至约7

注射用水适量

示例性的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯(以％w/w计约0.18％)、对羟基苯甲酸丙酯(以％w/w计约0.02％)、苯酚(以％w/w计约0.5％)、和苯甲醇(最高达2％v/v)。示例性的pH调节剂是氢氧化钠，示例性的液体载体是灭菌注射用水。其它有用的防腐剂、pH调节剂和液体载体是本领域众所周知的。

7.包衣的口服制剂

当与食物一起施用时，多西紫杉醇或其类似物的生物利用度减少。与食物一起施用，多西紫杉醇或其类似物在胃中滞留的时间增加。该增加的滞留时间使多西紫杉醇或其类似物在胃酸条件下溶解。然后，当溶解的药物从胃中排出并进入较为碱性条件的小肠上部时，多西紫杉醇或其类似物从溶液中沉淀析出。析出的多西紫杉醇或其类似物不好被吸收，因为在它被吸收之前它必须再一次溶解，并且溶解过程因为多西紫杉醇或其类似物的弱水溶性而缓慢。药物在胃中溶出，随后沉淀析出，降低了多西紫杉醇或其类似物由于服用纳米微粒剂型(例如纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的固体分散体、或纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的液体填充胶囊)所获得的提高的生物利用度。避免药物在胃的低pH条件会减少或消除对生物利用度的这种下降。

因此，本文描述了包含包衣的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物(例如肠溶包衣的多西紫杉醇或其类似物)的组合物。在一个实施方案中，口服制剂包括例如肠溶包衣的固体剂型的口服制剂。

供口服给药的固体剂型包括但不限于胶囊、片剂、丸剂、粉末、和颗粒。在这些固体剂型中，将多西紫杉醇或其类似物与下列的至少一种混合：(a)一种和多种惰性辅料(或载体)，例如枸橼酸钠或磷酸二钙；(b)填充剂或增充剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和硅酸；(c)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐(alignates)、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、和阿拉伯胶；(d)保湿剂，例如甘油；(e)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(f)溶液阻滞剂，例如石蜡；(g)吸收促进剂，例如季铵类化合物；(h)润湿剂，例如十六醇和单硬脂酸甘油酯；(i)吸附剂，例如白陶土和膨润土；和(j)润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠或它们的混合物。至于胶囊、片剂、和丸剂，这些剂型也可包含缓冲剂。

药物释放曲线

在一个实施方案中，本文所述包衣的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物(例如肠溶包衣的多西紫杉醇或其类似物)的组合物在以口服剂型给患者施用时，显示出脉冲式血浆曲线。与药物化合物施用有关的此血浆曲线可以被描述为“脉冲式曲线”，其中可观察到脉冲式的高浓度多西紫杉醇或其类似物之间有散置的低浓度谷。含有两个峰的脉冲式曲线可以被描述为“双峰”。类似地，施用时产生这种曲线的组合物或剂型可以说是表现出“脉冲释放”的多西紫杉醇或其类似物。

常规的以定期间隔施用立即释放(IR)剂型的频繁给药方案一般会引起脉冲式血浆曲线。在这种情形中，在施用每个IR剂量后可观察到血浆药物浓度峰，并在连续施用的时间点之间形成谷(药物低浓度区域)。这些给药方案(和它们所得的脉冲式血浆曲线)具有与它们有关的特定药理学和治疗学效果。例如，峰间多西紫杉醇或其类似物的血浆浓度下降所提供的间歇期被认为是减轻或防止患者对各种类型药物耐受性的有益因素。

Devane等的美国专利6,228,398、6,730,325和6,793,936中公开并要求保护与本文公开相似的多微粒改性控制释放(CR)组合物，在此特别地将它们全部引入作为参考。可以在那里找到本领域所有有关的现有技术。

本发明的另一个方面为多微粒改性释放组合物，其具有含有第一数量的多西紫杉醇或其类似物的第一种组分和含有第二数量的多西紫杉醇或其类似物的第二种组分。含成分粒子的第二种组分包有改性释放包衣。可替代地或另外地，含第二数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子进一步包含改性释放基质材料。随口腔递送后，服用的此组合物以脉冲方式释放多西紫杉醇或其类似物。

在本发明的多微粒改性释放组合物的优选实施方案中，第一种组分为立即释放组分。

第二数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子所用的改性释放包衣，会引起活性成分从含第一数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子中释放和活性成分从含第二数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子中释放之间的滞后时间。类似地，在含第二数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子中存在的改性释放基质材料，会引起多西紫杉醇或其类似物从含第一数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子中释放和活性成分从含第二数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子中释放之间的滞后时间。通过改变所用成分和/或改性释放包衣量和/或改变成分和/或改性释放基质材料的量，可以改变滞后的期间。此，可设计滞后时间的期间以模拟想要的血浆曲线。

因为施用时多微粒改性释放组合物所产生的血浆曲线基本上相似于连续施用两次或更多次IR剂型所产生的血浆曲线，所以本发明多微粒控制释放组合物优其可对耐受性可能有问题的患者施用多西紫杉醇或其类似物。因此，多微粒改性释放组合物有利于减轻或最大限度地减轻患者对本组合物活性成分耐受性的发展。

本发明还提供治疗癌症，尤其乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和/或肺癌的方法，包括施用治疗有效量的本发明组合物，以提供多西紫杉醇或其类似物脉冲的或双峰的给药。本发明的优点包括减少常规多个IR给药方案所需的给药频率，而仍然维持脉冲式血浆曲线所产生的益处。这种减少的给药频率有利于患者的依从性，可使制剂以减少的频率施用。通过应用本发明组合物可能得到的这种给药频率的减少，应当有助于减少卫生保健工作者用在药物施用上的时间数而减少医疗费用。

每个组分中的活性成分可以是相同的或不同的。例如，其中第一种组分含有多西紫杉醇或其类似物而第二种组分含有第二种活性成分的组合物，可能对于联合治疗是理想的。当然，当活性成分彼此相容时，可以将两种或更多种活性成分合并到同一组分中。在本组合物的一个组分中存在的药物化合物可以，例如在本组合物的另一个组分中伴随存在增强剂化合物或敏化剂化合物，以改变此药物化合物的生物利用度或疗效。

本文所用的术语“增强剂”是指能够通过促进透过动物(例如人)的胃肠道的净转运而增强活性成分吸收和/或生物利用度的化合物。增强剂包括但不限于中链脂肪酸；盐、酯、醚及其衍生物，包括甘油酯和甘油三酯；非离子型表面活性剂例如可由环氧乙烷与脂肪酸、脂肪醇、烷基酚、或脱水山梨醇起反应制得的那些或甘油脂肪酸酯；细胞色素P450抑制剂、P-糖蛋白抑制剂等等；和这些物质的两种或更多种的混合物。

每种组分中存在的多西紫杉醇或其类似物比例可以相同或不同，这取决于预期的给药方案。多西紫杉醇或其类似物以足够引起治疗反应的任何量存在于第一种组分和第二种组分中。当适用时，多西紫杉醇或其类似物可以以一种基本上光学纯的对映异构体，形式或者以对映异构体的混合物、外消旋体或别的形式存在。

通过改变每种组分的成分(包括改变可存在的任何辅料或包衣成分)，可以改变多西紫杉醇或其类似物从每种组分中释放的时间-释放的特性。特别地，通过改变成分和/或粒子上的改性释放包衣量(如果存在包衣)，可以控制多西紫杉醇或其类似物的释放。如果存在多于一种的改性释放组分，这些组分的每个改性释放包衣可以相同或不同。类似地，当凭借含有改性释放基质材料促进改性释放时，通过所用改性释放基质材料的选择和量，可以控制活性成分的释放。改性释放包衣可以以使每个特定组分足够产生预期延迟时间的任何量存在于每个组分中。改性释放包衣可以以足够产生两组分之间预期时滞的任何量存在于各组分中。

通过改变各个组分的成分(包括改变可存在的任何辅料或包衣的成分)，也可以改变多西紫杉醇或其类似物从每个组分中释放的滞后时间或延迟时间。例如，第一种组分可以为立即释放的组分，其中多西紫杉醇或其类似物在给药后基本上立即释放。或者，第一种组分可以为，例如时间-延迟的立即释放组分，其中多西紫杉醇或其类似物在时间延迟后基本上立即释放。第二种组分可以为，例如如刚刚所述的时间-延迟的立即释放组分，或可替代选择地，时间-延迟的持续释放或延长释放(extended release)组分，其中多西紫杉醇或其类似物以控制方式在延长的时间期限内释放。

本领域技术人员将会理解血浆浓度曲线的准确性质会受到刚刚所述的所有这些因素组合的影响。特别地，通过改变各种组分的成分和包衣(如果存在)，可以控制每个组分中的多西紫杉醇或其类似物释放(并因此开始产生作用)之间的滞后时间。因此通过改变各种组分的成分(包括活性成分的量和性质)和通过改变滞后时间，可以获得大量的释放和血浆曲线。取决于多西紫杉醇或其类似物从每个组分中释放之间的滞后时间和从每个组分中释放的性质(即立即释放、持续释放等)，血浆曲线的脉冲可以很好地分离并清楚地确定峰(例如当滞后时间较长时)，或者脉冲可以一定程度地重叠(例如在当滞后时间较短时)。

在优选的实施方案中，根据本发明的多微粒改性释放组合物具有立即释放组分和至少一种改性释放组分，此立即释放组分包含含有第一数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子且改性释放组分包含含有第二数量和随后数量的多西紫杉醇或其类似物的粒子。第二种和随后的改性释放组分可以包含控制释放包衣。另外或可选择地，第二种和随后的改性释放组分可以包含改性释放基质材料。实践中，例如具有单一改性释放组分的此多微粒改性释放组合物的给药，导致多西紫杉醇或其类似物特征性的脉冲血浆浓度水平，其中此组合物的立即释放组分在血浆曲线中产生第一峰，而此改性释放组分在血浆曲线中产生第二峰。包含多于一种改性释放组分的本发明实施方案在血浆曲线中产生其它的峰。

当期望释放两个(或更多个)脉冲式的多西紫杉醇或其类似物而又不需要服用两个(或更多个)剂量单位时，单次剂量单位给药所产生这种血浆曲线是有利的。

肠溶包衣

可以使用以预期方式调整多西紫杉醇或其类似物释放的任何包衣材料。特别地，适用于本发明实践的包衣材料包括但不限于：聚合物包衣材料，例如邻苯二甲酸醋酸纤维素、三马来酸(trimaletate)醋酸纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、异丁烯酸铵共聚物(例如以商标Eudragit^_RS和RL销售那些)、聚丙烯酸和聚丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯共聚物(例如以商标Eudragit^_S和L销售的那些)、聚乙烯乙缩醛二乙氨基醋酸酯、琥珀酸醋酸羟丙基甲基纤维素、虫胶；水凝胶和凝胶成型材料，例如羧基乙烯基聚合物、海藻酸钠、羧甲纤维素钠、羧甲纤维素钙、羧甲基淀粉钠、聚乙烯醇、羟乙基纤维素、甲基纤维素、明胶、淀粉、和纤维素基(cellulose based)交联聚合物-其中交联度较低，以有助于吸咐水分和聚合物基质的膨胀、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、交联淀粉、微晶纤维素、壳多糖、氨基丙烯基-甲基丙烯酸酯共聚物(Eudragit^_RS-PM，Rohm&Haas)、支链淀粉(pullulan)、胶原、酪蛋白、琼脂、阿拉伯胶、羧甲基纤维素钠、(可膨胀亲水聚合物)聚(羟烷基甲基丙烯酸酯)(分子量为约5k-5,000k)、聚乙烯吡咯酮(分子量为约10k-360k)、阴离子和阳离子水凝胶、含有低醋酸残基(acetate residual)的聚乙烯醇、琼脂和羧甲基纤维素的可膨胀混合物、马来酸酐和苯乙烯的共聚物、乙烯或丙烯或异丁烯、果胶(分子量为约30k-300k)，多糖例如琼脂、阿拉伯胶、卡拉牙胶、黄芪胶、藻酸铵(algins)和瓜耳胶、聚丙烯酰胺、Polyox聚氧化乙烯(分子量为约100k-5,000k)、AquaKeep丙烯酸酯聚合物、右旋糖酐二酯(diesters of polyglucan)、交联聚乙烯醇和聚N-乙烯基-2-吡咯烷酮、淀粉甘醇酸(glucolate)钠(例如Explotab^_；Edward Mande 11C.Ltd.)；亲水聚合物例如多糖、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或钙、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、硝基纤维素、羧甲基纤维素、纤维素醚、聚氧化乙烯(例如Polyox^_，Union Carbide)、甲基乙基纤维素、乙基羟基乙基纤维素、醋酸纤维素、丁酸纤维素、丙酸纤维素、明胶、胶原、淀粉、麦芽糖糊精、支链淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚醋酸乙烯酯、甘油脂肪酸酯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸、甲基丙烯酸或甲基丙烯酸的共聚物(例如Eudragit^_，Rohm and Haas)、其它丙烯酸衍生物、脱水山梨醇酯、天然树胶、卵磷脂、果胶、海藻酸盐、海藻酸铵、海藻酸钠、海藻酸钙、海藻酸钾、丙二醇海藻酸酯、琼脂、和树胶例如阿拉伯胶、卡拉牙胶、刺槐豆胶、黄芪胶、角叉菜胶、瓜耳胶、黄原胶、硬葡聚糖和它们的混合物以及掺和物。本领域技术人员将会理解包衣中可加入增塑剂、润滑剂、和溶剂等。适用的增塑剂包括例如乙酰化单酸甘油酯；邻苯二甲酸(丁酯)(羟乙酸丁酯)酯(butyl phthalylbutyl glycolate)；酒石酸二丁基酯；邻苯二甲酸二乙酯；邻苯二甲酸二甲酯；邻苯二甲酸(乙酯)(羟乙酸乙酯)酯；甘油；丙二醇；三乙酸甘油酯；柠檬酸酯；三丙酸甘油酯(tripropioin)；二乙酸甘油酯；邻苯二甲酸二丁酯；乙酰基单酸甘油酯；聚乙二醇；蓖麻油；柠檬酸三乙酯；多元醇、甘油、醋酸酯、甘油三醋酸酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、邻苯二甲酸二苄基酯、邻苯二甲酸二己酯、邻苯二甲酸丁基辛基酯、邻苯二甲酸二异壬基酯、邻苯二甲酸丁基辛基酯、壬二酸二辛酯、环氧化树脂酸酯(epoxidised tallate)、偏苯三酸三异辛酯、邻苯二甲酸二乙基己基酯、邻苯二甲酸二正辛酯、邻苯二甲酸二异辛酯、邻苯二甲酸二异癸基酯、邻苯二甲酸二正十一烷基酯、邻苯二甲酸二正十三烷基酯、偏苯三酸三-2-乙基己基酯、己二酸二-2-乙基己基酯、癸二酸二-2-乙基己基酯、壬二酸二-2-乙基己基酯、癸二酸二丁酯。

当改性释放组分含有改性释放基质材料时，可以使用任何适用的改性释放基质材料或改性释放基质材料的适当组合。这些材料是本领域技术人员已知的。本文所用的术语“改性释放基质材料”包括亲水聚合物、疏水聚合物和它们的混合物，它们在体外或体内能够改变分散其中的多西紫杉醇或其类似物的释放。适用于本发明实践的改性释放基质材料包括但不限于微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、羟基烷基纤维素(例如羟丙基甲基纤维素和羟丙基纤维素)、聚氧化乙烯、烷基纤维素(例如甲基纤维素和乙基纤维素)、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、醋酸纤维素、醋酸丁酸纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素、偏苯三酸酸醋酸纤维素、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、聚烷基甲基丙烯酸酯、聚醋乙烯酯和它们的混合物。

本发明的多微粒改性释放组合物可被掺合形成易于活性成分以脉冲方式释放的任何适宜剂型。一般地，剂型可以是不同数量的含多西紫杉醇或其类似物粒子的混和物，其中该粒子被制成立即释放和改性释放的组分，该混合物被装入适当的胶囊中，例如硬或软明胶胶囊。可选择地，可以将不同个体数量的含有活性成分的粒子分别压制成(任选地与另外的辅料一起)小片，随后可以以适当的比例将小片装入胶囊。其它适用的剂型为多层片剂型。在这种情况中，可以将多微粒改性释放组合物的第一种组分压制成一层，接着加入第二种组分压制成该多层片的第二层。制备本发明组合物的一定数量的含多西紫杉醇或其类似物粒子可进一步被包括在快速溶解剂型中，例如泡腾剂剂型或速熔(fast-melt)剂型中。

在另一个实施方案中，本发明的组合物包含体外溶出曲线不同的至少两种数量的含多西紫杉醇或其类似物粒子。

优选地，实践中，本发明组合物和含有本组合物的固体口服剂型以下列方式释放多西紫杉醇或其类似物，即基本上使所有包含在第一种组分中的多西紫杉醇或其类似物在第二种组分中的多西紫杉醇或其类似物释放之前释放。例如当第一种组分含有IR组分时，多西紫杉醇或其类似物从第二种组分中释放优选为延迟的，直到基本上所有的多西紫杉醇或其类似物从IR组分中释放出来。通过使用改性释放包衣和/或改性释放基质材料，可以如上所述延迟多西紫杉醇或其类似物从第二种组分中的释放。

在一个实施方案中，当希望通过提供有助于第一剂量的多西紫杉醇或其类似物从患者系统中清除的给药方案以使患者耐受性降到最低时，多西紫杉醇或其类似物从第二种组分中的释放被延迟直到基本上所有包含在第一种组分中的多西紫杉醇或其类似物被释放出来，并且进一步被延迟直到至少一部分从第一种组分中释放出来的多西紫杉醇或其类似物从患者系统中被清除。在具体的实施方案中，实践中多西紫杉醇或其类似物从组合物第二种组分中的释放基本上(如果不是完全地)被延迟组合物给药后至少约2小时的时间。

实践中药物从组合物第二种组分中的释放基本上(如果不是完全地)被延迟组合物给药后至少约4小时，优选约4小时的时间。

E.制备纳米微粒多西紫杉醇组合物的方法

纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物可使用本领域已知的任何适合的方法(例如碾磨法、匀化法、沉淀法、或超临界液体的粒子产生技术)制得。美国专利5,145,684中描述了制备纳米微粒组合物的示例方法。下列文献也描述了制备纳米微粒组合物的方法：美国专利5,518,187“碾磨药用物质的方法”；美国专利5,718,388“碾磨药用物质的连续方法”；美国专利5,862,999“碾磨药用物质的方法”；美国专利5,665,331“纳米微粒药物与晶体成长调节剂的共微沉淀”；美国专利5,662,883“纳米微粒药物与晶体成长调节剂的共微沉淀”；美国专利5,560,932“纳米微粒药物的微量沉淀”；美国专利5,543,133“制备包含纳米粒的X-射线造影组合物的方法”；美国专利5,534,270“制备稳定药物纳米粒的方法”；美国专利5,510,118“制备包含纳米粒的治疗组合物的方法”；和美国专利5,470,583“制备包含减少聚集带电荷磷脂的纳米粒组合物方法”中，在此特别引入所有这些文献作为参考。

所得纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的组合物或分散体可以应用于固体、半固体、或液体剂型中，例如液体分散体、凝胶剂、气溶胶、软膏、霜剂、控释制剂、快熔制剂、冻干制剂、片剂、胶囊、延迟释放制剂、延长释放制剂、脉冲式释放制剂、立即释放和控制释放的混合制剂等。

示例性的碾磨或匀化方法包括：(1)将多西紫杉醇或其类似物分散在液体分散介质中；和(2)用机械将多西紫杉醇或其类似物的粒径减少到小于约2000nm的有效平均粒径。在粒径减少之前、期间、或之后加入表面稳定剂。在粒径减少过程中，液体分散介质的pH优选维持在约5.0至约7.5的范围。优选地，用于粒径减少过程的分散介质为水性的，虽然也可应用不溶解且分散多西紫杉醇或其类似物的任何介质。非水性分散介质的实例包括但不限于红花油、乙醇、叔丁醇、甘油、聚乙二醇(PEG)、己烷、或乙二醇。

为多西紫杉醇或其类似物粒径减少提供机械力的有效方法包括球磨、介质碾磨和匀化法，例如用Microfluidizer^_机器(MicrofluidicsCorp.)。球磨为使用碾磨介质、药物、稳定剂和液体的低能量碾磨方法。将这些材料放入碾磨容器中，以最佳速度旋转，使介质通过撞击分级并减少粒径。所用介质必须具有高密度，因为需要通过研磨介质的重力和质量提供粒径减少的能量。

介质碾磨为高能量碾磨方法。将多西紫杉醇或其类似物、表面稳定剂和液体放入储存容器中，然后在含有介质和旋转柄/叶轮的腔室内反复循环。旋转的柄搅动介质，这使多西紫杉醇或其类似物和表面稳定剂受到撞击和剪切力(sheer forces)，从而减少它们的粒径。

匀化为不使用碾磨介质的技术。将多西紫杉醇或其类似物、表面稳定剂和液体(或者多西紫杉醇或其类似物和液体，在粒径减少后加入表面稳定剂)流射入处理区域，该区域在Microfluidizer^_机器中称为相互作用室(Interaction Chamber)。将要处理的产物引入泵内，然后压出。Microfluidizer^ò机器的初始阀将空气排出泵内。一旦泵内充满了产物，关闭初始阀，该产物被加压通过相互作用室。几何形状的相互作用室产生强大的剪切、撞击和窝旋力，这些力使多西紫杉醇或其类似物的粒径减少。特别地，在相互作用室里面，加压的产物被分离成两股川流并且被加速到非常高的速度。然后将所形成的射流在相互作用区域彼此相对并碰撞。所得的产物具有极细的和均匀的粒径或液滴尺寸。Microfluidizer^_机器也提供热交换器以冷却产物。Bosch等的美国专利5,510,118涉及施用Microfluidizer^_产生400nm以下粒子的方法，在此将其特别引入作为参考。

Pace等的1997年4月24日出版公布的国际专利申请WO97/144407公开了具有平均100nm至300nm大小的不溶水性生物学活性化合物的粒子，其制备方法包括将化合物溶解在溶液中，然后在适当表面稳定剂存在下将此溶液喷射到压缩气体、液体或超临界液体中。

应用粒径减少的方法，将多西紫杉醇或其类似物的粒径减少到小于约2000nm的有效平均粒径。

可以向液体介质中加入多西紫杉醇或其类似物以形成预混物，多西紫杉醇或其类似物基本上是不溶解。在液体介质中多西紫杉醇或其类似物的浓度可为约5至约60％、约15至约50％(w/v)、或约20至约40％。在预混物中可存在表面稳定剂，或可在粒径减少后接着向多西紫杉醇或其类似物分散体中加入表面稳定剂。表面稳定剂的浓度按重量计可为约0.1至约50％、约0.5至约20％、或约1至约10％。

此预混物可直接应用于机械手段，以使分散体中多西紫杉醇或其类似物的平均粒径减至小于约2000nm。当用球磨机磨擦时，优选直接应用预混物。选择地，可应用适当的搅拌(例如Cowles型混合机)使多西紫杉醇或其类似物和表面稳定剂分散在液体介质中，直至观察到其中没有裸眼可见的大块粒的均质分散体形成。当用反复循环介质碾磨机磨擦时，优选预混物进行预碾磨分散的步骤。

用于减少多西紫杉醇或其类似物粒径的机械方法可方便地采用分散碾磨的形式。适用的分散碾磨包括球碾磨、磨碎机(attritor)碾磨、振动碾磨和介质碾磨(例如沙碾磨和珠碾磨)。由于提供所需粒径减少需要相对较短的碾磨时间，优选介质碾磨。对于介质碾磨，预混物表观粘度优选为约100至约1,000厘泊，对于球磨，预混物表观粘度优选为约1至约100厘泊。这样的范围趋于提供有效粒径减少和介质浸蚀之间的最佳平衡。

磨擦时间可广泛地变化并且主要取决于所选的特定机械方法和处理条件。对于球碾磨，可能需要高达5天或更长的处理时间。替代选择性地，应用高剪切介质碾磨的处理时间可能小于1天(一分钟直至几小时的滞留时间(residence times))。

多西紫杉醇或其类似物的粒子可以在不会使它显著降解的温度下减少其尺寸。通常优选地，处理温度小于约30℃至小于约40℃。如果需要，可使用常规冷却装置冷却处理装置。控制温度(例如，通过在冰水中将碾磨室加外套或将碾磨室浸入冰水中)是需要考虑的。一般地，本发明的方法可方便地在对于碾磨处理是安全有效的环境温度和处理压力的条件下进行。环境处理压力为球磨、磨碎碾磨和振动碾磨的一般压力。

碾磨介质

用于粒径减少步骤的碾磨介质可选自刚性介质，优选为具有平均尺寸小于约3mm、更优选小于约1mm的球形或微粒形式。这样的介质预期能提供对本发明粒子更短的处理时间和对碾磨装置产生更少的磨损。据信碾磨介质材料的选择不是关键性的。氧化锆例如用镁稳定的95％ZrO、硅酸锆、陶瓷、不锈钢、钛、铝、用钇稳定的95％ZrO、和玻璃碾磨介质为示例性的碾磨材料。

碾磨介质可包含基本上由聚合树脂组成的粒子，优选基本上为球形(例如珠)粒子。可选择地，碾磨介质可包含具有聚合树脂涂层粘附其上的核心。在本发明的一个实施方案中，聚合树脂可具有约0.8至约3.0g/cm³的密度。

一般而言，适用的聚合树脂为化学和物理惰性的，基本上不含金属、溶剂和单体的，并且有足够硬度和脆性，能使本身在研磨中避免碎裂或压碎。适用的聚合树脂包括交联的聚苯乙烯，例如与二乙烯基苯交联的聚苯乙烯；苯乙烯共聚物；聚碳酸酯；聚缩醛，例如Delrin^ò(E.I.du Pont de Nemours and Co.)；氯乙烯聚合物和共聚物；聚氨基甲酸酯(polyurethanes)；聚酰胺；聚(四氟乙烯)，例如Teflon^ò(E.I.du Pont de Nemours and Co.)，和其它氟聚合物；高密度聚乙烯；聚丙烯；纤维素醚和酯(例如醋酸纤维素)；聚羟基甲基丙烯酸酯；聚羟基乙基丙烯酸酯；和含硅酮聚合物(例如聚硅氧烷)等。聚合物可以是生物可降解的。示例性生物可降解聚合物包括丙交酯和乙交酯的聚(丙交酯)、聚(乙交酯)共聚物，聚酐，聚(羟乙基甲基丙烯酸酯)、聚(亚胺基碳酸酯)，聚(N-酰基羟基脯氨酸)酯，聚(N-棕榈酰羟基脯氨酸)酯，乙烯-醋酸乙烯酯共聚物，聚(原酸酯)，聚(己内酯)和聚(磷腈)。对于生物可降解聚合物，接触的介质本身可在体内有利地代谢为生物学上可接受的产物，此产物可被机体清除。

碾磨介质优选在约0.01至约3mm的尺寸范围内。对于精细碾磨，碾磨介质优选在约0.02至约2mm，更优选在约0.03至约1mm的尺寸。

在优选的研磨方法中，连续地制备多西紫杉醇或其类似物粒子。该方法包括将多西紫杉醇或其类似物连续地引入碾磨室中，使室内的多西紫杉醇或其类似物与碾磨介质接触以减少粒径，和连续地从碾磨室中移出纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的活性形式。

应用常规分离技术在后续方法(例如通过单纯滤过，通过筛过滤器或滤网筛过等等)中，将碾磨介质从碾磨过的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物中分离出去。也可以应用其它的分离技术(例如离心分离法)。

无菌产品的制备

可注射的组合物的研制要求生产无菌产品。本发明的制备方法类似于已知的无菌混悬剂的一般制备方法。无菌混悬剂的一般制备方法流程图如下：

正如括弧中的任选步骤所示，一些处理过程取决于粒径减少的方法和/或灭菌方法。例如，不应用介质的碾磨方法不需要介质调配的步骤。如果由于化学和/或物理不稳定性使终末灭菌不可行的，可应用无菌操作。

F.治疗方法

在人类治疗中，提供体内释放治疗需要量的药物并以恒定方式使药物成为生物可利用的多西紫杉醇或其类似物的剂型是重要的。因此，本发明的另一个方面是提供治疗需要抗癌治疗(包括抗肿瘤和抗白血病治疗)的哺乳动物(包括人)的方法，包括给所述哺乳动物施用本发明的纳米微粒多西紫杉醇或其类似物的制剂。

可用本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物治疗的示例性癌症包括但不限于乳腺癌、肺癌(包括但不限于非小细胞肺癌)、卵巢癌、前列腺、实体瘤(包括但不限于头颈、乳房、肺、胃肠、泌尿生殖器、黑素瘤和肉瘤)、原发性CNS赘生物、多发性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴瘤、间变型星形细胞瘤(anaplastic astrocytoma)、间变性脑膜瘤(anaplastic meningioma)、间变型少枝胶质细胞瘤(anaplasticoligodendroglioma)、脑恶性血管外皮细胞瘤、下咽部鳞状细胞癌、喉鳞状细胞癌、白血病、唇和口腔鳞状细胞癌、鼻咽鳞状细胞癌、口咽鳞状细胞癌、宫颈癌和胰腺癌。

在本发明的一个实施方案中，本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物的有效剂量小于相当的非纳米微粒的多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)所要求的量。TAXOTERE^_(多西紫杉醇)的给药方案可随着它治疗的癌症类型而改变，它可供用的为20mg(0.5mL)和80mg(2.0mL)小瓶。对于乳腺癌，推荐的剂量为每三周经1小时静脉内给予60-100mg/m²。在非小细胞肺癌情形下，TAXOTERE^_只应用于先前基于铂的化疗失败以后。推荐剂量为每三周经1小时静脉内给予75mg/m²。因此，在本发明的一个实施方案中，本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物的剂量小于约100mg/m²、小于约90mg/m²、小于约80mg/m²、小于约70mg/m²、小于约60mg/m²、小于约50mg/m²、小于约40mg/m²、小于约30mg/m²、小于约20mg/m²或小于约10mg/m²。

在本发明的又一个实施方案中，当与相当的非纳米微粒的多西紫杉醇制剂(例如TAXOTERE^_)相比时，本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物可以以显著更高的剂量给予。如下实施例16中所述，示例性纳米微粒的多西紫杉醇制剂在体内显示的最大耐受剂量为500mg/kg，而对照的TAXOTERE^_最大耐受剂量为40mg/kg。因此，在本发明的另一个实施方案中，本发明纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物的剂量大于约50mg/m²、大于约60mg/m²、大于约70mg/m²、大于约80mg/m²、大于约90mg/m²、大于约100mg/m²、大于约110mg/m²、大于约120mg/m²、大于约130mg/m²、大于约140mg/m²、大于约150mg/m²、大于约160mg/m²、大于约170mg/m²、大于约180mg/m²、大于约190mg/m²、大于约200mg/m²、大于约210mg/m²、大于约220mg/m²、大于约230mg/m²、大于约240mg/m²、大于约250mg/m²、大于约260mg/m²、大于约270mg/m²、大于约280mg/m²、大于约290mg/m²、大于约300mg/m²、大于约310mg/m²、大于约320mg/m²、大于约330mg/m²、大于约340mg/m²或大于约350mg/m²。

本发明特别有利的特征包括本发明药物制剂在给药时表现出出乎意料地活性成分的快速吸收。在本发明的一个实施方案中，纳米微粒的多西紫杉醇或其类似物组合物(包括可注射的组合物)不含聚山梨醇酯、乙醇或它们的组合。另外，当制成注射制剂时，本发明组合物可提供用于注射的小容量高浓度制剂。可以以快速浓注(bolusinjection)或经适当的时间缓慢静滴给予本发明的多西紫杉醇或其类似物的注射组合物。

普通技术人员将会理解可以根据经验确定多西紫杉醇或其类似物的有效量，并且可应用其纯净形式，或当存在下述形式时，可应用药学上可接受的盐、酯或前体药物形式。在本发明注射和口服组合物中多西紫杉醇或其类似物的实际剂量水平可以变化，以获得多西紫杉醇或其类似物的量，此量为特定组合物和给药方法能有效获得预期治疗反应的量。因此所选的剂量水平取决于所要的治疗效果、给药途径、所给予的多西紫杉醇或其类似物的效能、所需的治疗持续时间和其它因素。

单元剂量的组合物可含有多个小剂量，以构成日剂量。但是，应当理解到任何特定的患者的具体剂量水平依赖于多种因素：要获得的细胞或生理学的反应的类型和程度；所用特定药物或组合物的活性；所用特定药物或组合物；患者的年龄、体重、总体健康、性别和饮食；给药时间、给药途径和药物的排泄率；治疗持续时间；与该特定药物组合或同时应用的药物；以及医学领域众所周知的类似因素。

* * * * *

下面给出的实施例用于举例说明本发明。然而，应当理解本发明的精神和范围不受这些实施例中所述的具体条件或细节的限制，而只应受到所附权利要求范围的限制。本文所指定的所有参考文献(包括美国专利)均在此明确地引入作为参考。

具体实施方式

实施例1.

本实施例的目的是为了制备纳米微粒的无水的多西紫杉醇制剂。

图1显示未碾磨的多西紫杉醇(无水的)(Camida Ltd.)的光显微照片，显示出常规的非纳米微粒多西紫杉醇(无水的)的平均粒径为212,060nm，D50为175,530nm和D90为435,810nm。

将5％(w/w)的多西紫杉醇(Camida Ltd.)的水分散系与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K17和0.25％(w/w)去氧胆酸钠合并。然后向NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA；参见美国专利6,431,478)中加入该混合物，随同加入220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)。将该混合物在2500转/分的速度碾磨180分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为170nm，D50为145nm和D90为260nm。图2显示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为170nm。

实施例2.

将5％(w/w)的无水多西紫杉醇的水分散系与1.25％(w/w)Tween^_80和0.1％(w/w)卵磷脂合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在5500转/分的速度碾磨60分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为166nm，D50为147nm和D90为242nm。图3显示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为166nm。

实施例3.

将5％(w/w)的无水多西紫杉醇的水分散系与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K12、0.25％(w/w)去氧胆酸钠(w/w)和20％(w/w)葡萄糖合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(DowChemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在5500转/分的速度碾磨60分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为165nm，D50为142nm和D90为248nm。图4显示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为165nm。

实施例4.

将1％(w/w)的无水多西紫杉醇的水分散系与0.25％(w/w)Plasdone^_S630和0.01％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)合并。然后使用低能量滚筒式碾磨机(U.S.Stoneware，Mahwah，NJ)在15mL瓶中，随同0.5mm陶瓷介质(Tosoh，Ceramics Division)(50％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在130转/分的速度碾磨72小时。

碾磨后，接着使用Coulter N4M粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为209nm。图5显示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为209nm。

实施例5.

将1％(w/w)的无水多西紫杉醇的水分散系与0.25％(w/w)羟丙基甲基纤维素(HPMC)和0.01％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)合并。然后使用低能量滚筒式碾磨机(U.S.S toneware，Mahwah，NJ)在15mL玻璃瓶中，随同0.5mm陶瓷介质(Tosoh，Ceramics Division)(50％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在130转/分的速度碾磨72小时。

碾磨后，接着使用Coulter N4M粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为253nm。图6显示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为253nm。

实施例6.

将1％(w/w)的无水多西紫杉醇的水分散系与0.25％(w/w)Pluronic^_F127合并。然后使用低能量滚筒式碾磨机(U.S.Stoneware，Mahwah，NJ)在15mL玻璃瓶中，随同0.5mm陶瓷介质(Tosoh，Ceramics Division)(50％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在130转/分的速度碾磨72小时。

使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为56.42微米，D50为65.55微米，和D90为118.5微米。因为碾磨样品的较大粒径，将样品超声处理30秒以确定是否存在聚集的多西紫杉醇粒子。超声处理30秒后，碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为1.468微米，D50为330nm微米，和D90为5.18微米。图7展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明使用特定浓度的药物和Pluronic^_F127表面稳定剂时，不能成功地使无水的多西紫杉醇稳定。

实施例7.

本实施例的目的是为了制备纳米微粒的多西紫杉醇三水合物制剂。

图8展示未碾磨的多西紫杉醇三水合物的光显微照片。未碾磨的多西紫杉醇三水合物具有平均粒径为61,610nm，D50为51,060nm和D90为119,690nm。

将5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物(Camida Ltd.)的水分散系与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K12和0.25％(w/w)去氧胆酸钠合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King ofPrussia，PA；参见美国专利6,431,478)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2500转/分的速度碾磨60分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为152nm，D50为141nm和D90为202nm。图9展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为152nm。

实施例8.

将5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物的水分散系与1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K17、0.25％(w/w)去氧胆酸钠和20％(w/w)葡萄糖合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，Kingof Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(DowChemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2900转/分的速度碾磨60分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为113nm，D50为109nm和D90为164nm。图10展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为164nm。

实施例9.

本实施例的目的是为了测定实施例8中制备的纳米微粒的多西紫杉醇三水合物制剂的长期稳定性。

实施例8中制备的纳米微粒的多西紫杉醇三水合物制剂含有5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物、1.25％(w/w)聚乙烯吡咯酮(PVP)K17、0.25％(w/w)去氧胆酸钠、和20％(w/w)葡萄糖，将该制剂冷藏(＜15℃)6个月。

6个月的贮藏期后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量多西紫杉醇粒子的粒径。多西紫杉醇粒子的平均粒径为147nm，D50为136nm和D90为205nm。图11展示6个月的冷藏后多西紫杉醇组合物的光显微照片。

此结果表明纳米微粒多西紫杉醇组合物可以在延长的时期内储藏，而没有显著的粒径增长。

实施例10.

将5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物的水分散系与1.25％(w/w)Tween^_80、0.1％(w/w)卵磷脂和20％(w/w)葡萄糖合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2900转/分的速度碾磨75分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为144nm，D50为137nm和D90为193nm。图12展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为144nm。

实施例11.

本实施例的目的是为了测试实施例10中制备的纳米微粒的多西紫杉醇三水合物制剂的长期稳定性。

实施例10中制备的纳米微粒的多西紫杉醇三水合物制剂含有5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物、1.25％(w/w)Tween^_80、0.1％(w/w)卵磷脂和20％(w/w)葡萄糖，将该制剂冷藏(＜15℃)6个月。

6个月的贮藏期后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量多西紫杉醇粒子的粒径。多西紫杉醇粒子的平均粒径为721nm，D50为371nm和D90为1.76微米。图13展示6个月的冷藏后多西紫杉醇组合物的光显微照片。

此结果表明纳米微粒多西紫杉醇组合物可以在延长的时期内储藏，而仍然维持有效平均粒径小于2微米。

实施例12.

将5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物的水分散系与1.25％(w/w)TPGS(PEG化的维生素E)和0.1％(w/w)去氧胆酸钠合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2500转/分的速度碾磨120分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为134nm，D50为129nm和D90为179nm。图14展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为134nm。

实施例13.

将5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物的水分散系与1.25％(w/w)Pluronic^_F 108、0.1％(w/w)去氧胆酸钠和10％(w/w)葡萄糖(w/w)合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，Kingof Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(DowChemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2500转/分的速度碾磨120分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为632nm，D50为172nm和D90为601nm。图15展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为632nm。

实施例14.

本实施例的目的是为了制备纳米微粒的多西紫杉醇制剂。

将5％(w/w)的多西紫杉醇的水分散系与1.25％(w/w)Plasdone^_S630和0.05％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2500转/分的速度碾磨60分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为142nm，D50为97.8nm和D90为142nm。图16展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为142nm。

实施例15.

本实施例的目的是为了制备纳米微粒的多西紫杉醇制剂。

将5％(w/w)的多西紫杉醇的水分散系与1.25％(w/w)HPMC和0.05％(w/w)磺基琥珀酸二辛酯(DOSS)合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2500转/分的速度碾磨60分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为157nm，D50为142nm和D90为207nm。图17展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为157nm。

实施例16.

本实施例的目的是为了测定纳米微粒的多西紫杉醇制剂的最大耐受剂量

为了评价和描述纳米微粒的多西紫杉醇制剂急性毒性，应用了两种纳米微粒分散体。(1)多西紫杉醇纳米微粒分散体，其具有作为表面稳定剂的PVP和去氧胆酸钠(实施例8中所制备的)；和(2)多西紫杉醇纳米微粒分散体，其具有作为表面稳定剂的Tween^_80和卵磷脂(实施例10中所制备的)。

以各种剂量给小鼠静脉内施用这两种纳米微粒的多西紫杉醇制剂。这两种纳米微粒的多西紫杉醇制剂最大耐受剂量(MD)是500mg/kg。

还将市售非纳米微粒的多西紫杉醇产品，TAXOTERE^_与纳米微粒的多西紫杉醇制剂进行评行测试。TAXOTERE^_的MD是40mg/kg。

因此，多西紫杉醇的纳米微粒制剂具有很好耐受性，能够以比常规非纳米微粒多西紫杉醇制剂显著更高的剂量施用。

实施例17.

本实施例的目的是为了制备纳米微粒的多西紫杉醇制剂。

将5％(w/w)的无水多西紫杉醇的水分散系与1％(w/w)白蛋白和0.5％(w/w)去氧胆酸钠合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2500转/分的速度碾磨5.5小时。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为271nm，D90为480nm。图18展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为271nm。

实施例18.

本实施例的目的是为了制备纳米微粒的多西紫杉醇制剂。

将5％(w/w)的多西紫杉醇三水合物的水分散系与1％(w/w)白蛋白和0.5％(w/w)去氧胆酸钠合并。然后在NanoMill^_0.01的10ml腔室(NanoMill Systems，King of Prussia，PA)中，随同220微米PolyMill^_研磨介质(Dow Chemical)(89％介质负荷率)一起碾磨该混合物。将该混合物在2500转/分的速度碾磨60分钟。

碾磨后，接着使用Horiba LA 910粒径分析器，在去离子蒸馏水中测量碾磨过的多西紫杉醇粒子的粒径。碾磨过的多西紫杉醇粒子的平均粒径为174nm，D90为252nm。图19展示碾磨过的多西紫杉醇的光显微照片。

此结果表明成功制备了稳定的纳米微粒多西紫杉醇制剂，所得平均粒径为174nm。

本领域技术人员将会明白在不违背本发明实质或范围内，可对本发明的方法和组合物进行多种修改和变更。因此，如果对本发明的这些修改和变更落在所附权利要求书及其等同物的范围内，本发明也旨在涵盖这些修改和变更。

Claims

1.组合物，其包含：

(a)具有有效平均粒径小于约2000nm的多西紫杉醇或其类似物的粒子；和

(b)至少一种表面稳定剂。

2.权利要求1的组合物，其中多西紫杉醇或其类似物选自晶形相、无定形相、半晶形相、半无定形相和它们的混合物。

3.权利要求1或权利要求2的组合物，其中多西紫杉醇或其类似物粒子的有效平均粒径选自：小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm和小于约50nm。

4.权利要求1至3的任何一项的组合物，其中配制组合物：

(a)用于选自下列的给药：口、肺、直肠、眼、结肠、胃肠外、脑池内、阴道内、腹膜内、局部、颊、鼻和表面给药；

(b)形成选自下列的剂型：液体分散体、固体分散体、液体填充胶囊、凝胶剂、气溶胶、软膏、霜剂、冻干制剂、片剂、胶囊、多颗粒填充胶囊、多颗粒组成的片剂、压制片剂和包有肠溶衣的多西紫杉醇或其类似物的子珠填充的胶囊，

(c)形成选自下列的剂型：控释制剂、快熔制剂、延迟释放制剂、延长释放制剂、脉冲式释放制剂以及立即释放和控制释放的混合制剂；或

(d)(a)、(b)和(c)的任何组合。

5.权利要求4的组合物，其中组合物为注射制剂。

6.权利要求1至5的任何一项的组合物，其中：

(a)基于多西紫杉醇或其类似物和至少一种表面稳定剂组合的但不包括其它辅料的干燥总重量，表面稳定剂按重量计以约0.5％至约99.999％、约5.0％至约99.9％、和约10％至约99.5％的量存在；

(b)基于多西紫杉醇或其类似物和至少一种表面稳定剂组合的但不包括其它辅料的总重量，多西紫杉醇或其类似物按重量计以约99.5％至约0.001％、约95％至约0.1％、和约90％至约0.5％的量存在；或(c)(a)和(b)的组合。

7.权利要求1至6的任何一项的组合物，其中表面稳定剂选自阴离子表面稳定剂、阳离子表面稳定剂、两性离子表面稳定剂、非离子表面稳定剂和离子表面稳定剂。

8.权利要求1至7的任何一项的组合物，其中至少一种表面稳定剂选自氯化十六烷基吡啶_、白蛋白、明胶、酪蛋白、磷脂、右旋糖酐、甘油、阿拉伯胶、胆固醇、黄芪胶、硬脂酸、苯扎氯铵、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、鲸蜡硬脂醇、聚西托醇乳化蜡、脱水山梨醇酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚乙二醇、溴化十二烷基三甲基铵、聚氧乙烯硬脂酸酯、胶态二氧化硅、磷酸酯或盐、十二烷基硫酸钠、羧甲基纤维素钙、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙甲纤维素邻苯二甲酸酯、非晶性纤维素、硅酸镁铝、三乙醇胺、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、含环氧乙烷和甲醛的4-(1，1，3，3-四甲基丁基)-苯酚聚合物、泊洛沙姆；poloxamines、带电荷的磷脂、磺基琥珀酸二辛酯、磺基琥珀酸钠二烷基酯、月桂基硫酸钠、烷基芳基聚醚磺酸酯、蔗糖硬脂酸酯和蔗糖二硬脂酸酯的混合物、对异壬基苯氧基聚-(缩水甘油)、癸酰基-N-甲基葡糖酰胺；正癸基β-D-吡喃葡萄糖苷；正癸基β-D-吡喃麦芽糖苷；正十二烷基β-D-吡喃葡萄糖苷；正十二烷基β-D-麦芽糖苷；庚酰基-N-甲基葡糖酰胺；正庚基-β-D-吡喃葡萄糖苷；正庚基β-D-硫葡糖苷；正己基β-D-吡喃葡萄糖苷；壬酰基-N-甲基葡糖酰胺；正壬基β-D-吡喃葡萄糖苷；辛酰基-N-甲基葡糖酰胺；正辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷；辛基β-D-硫代吡喃葡萄糖苷；溶菌酶、PEG-磷脂、PEG-胆固醇、PEG-胆固醇衍生物、PEG-维生素A、PEG-维生素E、乙烯基吡咯烷酮和乙酸乙烯酯的无规则共聚物、阳离子聚合物、阳离子生物聚合物、阳离子多糖、阳离子纤维素、阳离子海藻酸盐、阳离子非聚合化合物、阳离子磷脂、阳离子类脂、溴化三甲铵聚甲基丙烯酸甲酯、锍化物、二甲基硫酸聚乙烯吡咯酮-2-二甲基氨基乙基异丁烯酸酯、溴化十六烷基三甲铵、磷_化合物、季铵化合物、溴化苄基-二(2-氯乙基)乙基铵、椰子油三甲氯化铵、椰子油三甲溴化铵、椰子油甲基二羟基乙基氯化铵、椰子油甲基二羟基乙基溴化铵、癸基三乙基氯化铵、癸基二甲基羟乙基氯化铵、癸基二甲基羟乙基氯化溴化铵、C_12-15二甲基羟乙基氯化铵、C_12-15二甲基羟乙基氯化溴化铵、椰子油二甲基羟乙基氯化铵、椰子油二甲基羟乙基溴化铵、肉豆蔻基三甲基铵甲基硫酸酯、月桂基二甲基苄基氯化铵、月桂基二甲基苄基溴化铵、月桂基二甲基(乙烯氧基)₄氯化铵、月桂基二甲基(乙烯氧基)₄溴化铵、N-烷基(C_12-18)二甲基苄基氯化铵、N-烷基(C_14-18)二甲基苄基氯化铵、N-十四烷基二甲基苄基氯化铵一水合物、二甲基二癸基氯化铵、N-烷基和(C_12-14)二甲基1-萘基甲基氯化铵、三甲基卤化铵、烷基三甲铵盐、二烷基二甲铵盐、月桂基三甲基氯化铵、乙氧基化烷基酰氨基烷基二烷基铵盐、乙氧基化三烷基铵盐、二烷基苯二烷基氯化铵、N-二癸基二甲基氯化铵、N-十四烷基二甲基苄基氯化铵一水合物、N-烷基(C_12-14)二甲基1-萘基甲基氯化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、二烷基苯烷基氯化铵、月桂基三甲基氯化铵、烷基苄基甲基氯化铵、烷基苄基二甲基溴化铵、C₁₂三甲基溴化铵、C₁₅三甲基溴化铵、C₁₇三甲基溴化铵、十二烷基苄基三乙基氯化铵、聚二烯丙基二甲基氯化铵(DADMAC)、二甲基氯化铵、烷基二甲基铵卤化物、三鲸蜡基甲基氯化铵、癸基三甲基溴化铵、十二烷基三乙基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、甲基三辛基基氯化铵、POLYQUAT 10^TM、四丁基溴化铵、苄基三甲基溴化铵、胆碱酯、苯扎氯铵、氯化硬脂酰二甲基苄基铵化合物、溴化十六烷基吡啶_、氯化十六烷基吡啶_、季铵化聚氧乙烯烷基胺的卤盐、MIRAPOL^TM、ALKAQUAT^TM、烷基吡啶_盐；胺、胺盐、胺氧化物、咪唑_盐、质子化四元丙烯酰胺、甲基化四元聚合物和阳离子瓜耳胶。

9.权利要求1至8的任何一项的组合物，还包含一种或多种非多西紫杉醇或其类似物的活性剂。

10.权利要求1至9的任何一项的组合物，其中在对哺乳动物施药后多西紫杉醇或其类似物粒子可再分散为具有选自下列有效平均粒径的粒子：小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm和小于约50nm。

11.权利要求1至10的任何一项的组合物，其中该组合物再分散在生物相关的介质中，使得多西紫杉醇或其类似物粒子具有选自下列的有效平均粒径：小于约1900nm、小于约1800nm、小于约1700nm、小于约1600nm、小于约1500nm、小于约1400nm、小于约1300nm、小于约1200nm、小于约1100nm、小于约1000nm、小于约900nm、小于约800nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm、小于约100nm、小于约75nm和小于约50nm。

12.权利要求11的组合物，其中生物相关的介质选自水、电解质的水溶液、盐的水溶液、酸的水溶液、碱的水溶液和它们的组合。

13.权利要求1至12的任何一项的组合物，其中当测定哺乳动物受试者用药后的血浆时，多西紫杉醇或其类似物的T_max小于以相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇或其类似物制剂的T_max。

14.权利要求13的组合物，其中相同剂量给药时，所述T_max为选自不大于约90％、不大于约80％、不大于约70％、不大于约60％、不大于约50％、不大于约30％、不大于约25％、不大于约20％、不大于约15％、不大于约10％和不大于约5％的非纳米微粒多西紫杉醇或其类似物制剂的所显示T_max。

15.权利要求13或权利要求14的组合物，其中给禁食受试者施用后该组合物，显示出小于约6小时、小于约5小时、小于约4小时、小于约3小时、小于约2小时、小于约1小时和小于约30分钟的T_max。

16.权利要求1至15的任何一项的组合物，其中当测定哺乳动物受试者用药后的血浆时，多西紫杉醇或其类似物的C_max大于以相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇或其类似物制剂的C_max。

17.权利要求16的组合物，其中在相同剂量给药时，C_max大于至少约50％、至少约100％、至少约200％、至少约300％、至少约400％、至少约500％、至少约600％、至少约700％、至少约800％、至少约900％、至少约1000％、至少约1100％、至少约1200％、至少约1300％、至少约1400％、至少约1500％、至少约1600％、至少约1700％、至少约1800％或至少约1900％的非纳米微粒多西紫杉醇或其类似物制剂所显示的C_max。

18.权利要求1至17的任何一项的组合物，其中当测定哺乳动物受试者用药后的血浆时，多西紫杉醇或其类似物的AUC大于以相同剂量给药的非纳米微粒多西紫杉醇或其类似物制剂的AUC。

19.权利要求18的组合物，其中在相同剂量给药时，AUC大于至少约25％、至少约50％、至少约75％、至少约100％、至少约125％、至少约150％、至少约175％、至少约200％、至少约225％、至少约250％、至少约275％、至少约300％、至少约350％、至少约400％、至少约450％、至少约500％、至少约550％、至少约600％、至少约750％、至少约700％、至少约750％、至少约800％、至少约850％、至少约900％、至少约950％、至少约1000％、至少约1050％、至少约1100％、至少约1150％或至少约1200％多西紫杉醇或其类似物的非纳米微粒制剂所显示的AUC。

20.权利要求1至19的任何一项的组合物，其在进食状态给药与禁食状态给药相比时不会产生显著差异的吸收水平。

21.权利要求20的组合物，其中在进食状态给药与禁食状态给药相比时，本发明的多西紫杉醇或其类似物组合物的吸收差异小于约100％、小于约90％、小于约80％、小于约70％、小于约60％、小于约50％、小于约40％、小于约30％、小于约25％、小于约20％、小于约15％、小于约10％、小于约5％和小于约3％。

22.权利要求1至21的任何一项的组合物，其中在禁食状态下给人施用该组合物与在进食状态下给受试者施用该组合物是生物等效的。

23.权利要求22的组合物，其中“生物等效”被确定为：

(a)AUC和C_max的90％置信区间均在0.80至1.25之间；或

(b)AUC的90％置信区间在0.80至1.25之间并且C_max的90％区间在0.70至1.43之间。

24.权利要求1至23的任何一项的组合物，其中多西紫杉醇类似物选自：

(a)在C-3′苯甲酸酯位置、C-2苯甲酸酯位置、或此两种位置上含有环己基基团而不是苯基基团的多西紫杉醇类似物；

(b)C-3′或C-2位置缺少苯基或芳基的多西紫杉醇类似物；

(c)2-酰氨基多西紫杉醇类似物；

(d)缺少环氧丙烷D-环但具有4α-乙酰氧基的多西紫杉醇类似物；

(e)5(20)去氧多西紫杉醇；

(f)10-脱氧-10-C-吗啉代乙基多西紫杉醇类似物；

(g)具有叔丁基氨基甲酸酯作为异丝氨酸N-酰基的取代基但又不同于多西紫杉醇的C-10(乙酰基对羟基)和C-13异丝氨酸键连(烯醇酯对酯)的类似物；

(h)在C3位具有肽支链的多西紫杉醇类似物；

(i)XRP9881(10-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)；

(j)XRP6528(10-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)；

(k)Ortataxel(14-β羟基-脱乙酰基浆果赤霉素III多西紫杉醇类似物)；

(1)MAC-321(10-脱乙酰基-7-丙酰基浆果赤霉素多西紫杉醇类似物)；

(m)DJ-927(7-脱氧-9-β-二氢-9，10，0-乙缩醛紫杉烷多西紫杉醇类似物)；

(n)具有C2-C3′N-键合的多西紫杉醇类似物，其中C2位携带芳环并在N3′和C2-芳环的邻位之间链接；

(0)具有C2-C3′N-键合的多西紫杉醇类似物，其中C2位携带芳环并在N3′和C2-芳环的间位之间链接；

(p)多西紫杉醇类似物，其携带连接C-2 OH和C-3′NH部分的22-元(或更多元)环；

(q)7β-O-糖基化的多西紫杉醇类似物；

(r)10-烷基化多西紫杉醇类似物；

(s)2′，2′-二氟代多西紫杉醇类似物；

(t)3′-(2-呋喃基)多西紫杉醇类似物；

(u)3′-(2-吡咯基)多西紫杉醇类似物；和

(v)荧光的和生物素化的多西紫杉醇类似物。

25.权利要求24的组合物，其中多西紫杉醇类似物选自：

(a)3′-脱苯基-3′环己基多西紫杉醇；

(b)2-(六氢)多西紫杉醇；

(c)3′-脱苯基-3′环己基-2-(六氢)多西紫杉醇；

(d)3′-脱苯基-3′-环己基多西紫杉醇；

(e)2-(六氢)多西紫杉醇；

(f)间甲氧基多西紫杉醇类似物；

(g)间氯苯甲酰氨基多西紫杉醇类似物；

(h)5(20)-硫杂多西紫杉醇类似物；

(i)其中7-羟基被修饰为疏水甲氧基的多西紫杉醇类似物；

(j)其中7-羟基被修饰为疏水性脱氧的多西紫杉醇类似物；

(k)其中7-羟基被修饰为疏水性6，7-烯的多西紫杉醇类似物；

(1)其中7-羟基被修饰为疏水性α-F的多西紫杉醇类似物；

(m)其中7-羟基被修饰为疏水性7-β-8-β-亚甲基的多西紫杉醇类似物；

(n)其中7-羟基被修改为疏水氟代甲氧基的多西紫杉醇类似物；

(o)在烷基部分的末端具有甲氧基羰基的10-烷基化多西紫杉醇类似物；

(p)在7或3′位置具有N-(7-硝基苯-2-氧杂-1，3-二唑-4-基)酰氨基-6-己酰基链的多西紫杉醇类似物；

(q)在3′位具有N-(7-硝基苯-2-氧杂-1，3-二唑-4-基)酰氨基-3-丙酰基基团的多西紫杉醇类似物；和

(r)在7、10或3′位置具有5′-生物素基酰氨基-6-己酰基链的多西紫杉醇类似物。

26.权利要求1至25的任何一项组合物用于制备药物的用途。

27.权利要求26的用途，其中该组合物被配制成用于注射给药。

28.权利要求26或权利要求27的用途，其中此药物用于治疗选自乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌和肺癌的癌症。

29.纳米微粒多西紫杉醇或其类似物组合物的制备方法，包括在一定的时间和条件下将多西紫杉醇或其类似物粒子与至少一种表面稳定剂接触，以提供具有有效平均粒径小于约2000nm的多西紫杉醇或其类似物的组合物。

30.权利要求29的方法，其中该接触包含碾磨、匀化、沉淀或超临界液体处理。