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CN1099289C - 改善肠道生态平衡的微生物制剂及其工艺 - Google Patents

改善肠道生态平衡的微生物制剂及其工艺 Download PDF

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CN1099289C
CN1099289C CN97115093A CN97115093A CN1099289C CN 1099289 C CN1099289 C CN 1099289C CN 97115093 A CN97115093 A CN 97115093A CN 97115093 A CN97115093 A CN 97115093A CN 1099289 C CN1099289 C CN 1099289C
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崔云龙
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Beijing Puerkang Medical High Technology Co., Ltd.
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DONGFANGHAIXIN BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co LTDD BEIJING
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Abstract

本发明涉及一种改善肠道生态平衡的微生物制剂,该制剂是用一种或一种以上的双歧杆菌发酵后,配合一种或一种以上的双歧因子所制成的制剂,所述双歧杆菌选自婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、CGMCC、保存编号0313-2,长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、CGMCC、保存编号0313-5,短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、CGMCC、保存编号0313-6,两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、CGMCC、保存编号0313-7。该制剂具有适宜人群广、迅速改善肠道生态平衡的优点。并对痢疾、便秘的治疗效果明显。

Description

改善肠道生态平衡的微生物制剂及其工艺
本发明涉及一种微生物制剂。
健康人的肠道菌群主要是由双歧杆菌、乳杆菌、粪肠球菌等厌氧菌和少量的大肠杆菌等组成。正常情况下,厌氧菌与好气菌的比例约为400∶1,双歧杆菌等厌氧菌占绝对优势。这些有益菌与肠粘膜上皮细胞紧密结合在肠道表面构成一道生物屏障,抑制致病菌的定植生长,并产生乳酸、醋酸,胞外苷酶,起到降低肠道PH值,分解复杂多糖、降解毒素的作用。相反,如果由于环境、饮食、药物或微生物的因素,导致肠道菌群平衡被破坏,致病菌大量繁殖,有益菌数量减少,则将导致肠道功能紊乱,发生肠炎、腹泻、呕吐等疾病。此时,若服用抗生素类药物,尽管能控制致病菌的繁殖,但将有益菌也同时杀死了,往往会发生这种情况,痢疾治好了,严重的便秘又发生了,且症状久久难以缓解。为了补充肠道有益菌,科研人研在这方面作了大量的工作。近几年,以双歧杆菌为主的肠道微生物制剂得到迅速发展,开发了一些产品,申报了一些这方面的专利,但目前这些产品和专利均有不足之处,一是多为单一的双歧杆菌制剂;二是有联菌制剂,但不含双歧因子;三是单用双歧因子。目前,市场上的单一双歧杆菌制剂或联菌制剂产品,虽然能起到补充肠道有益菌的作用,但由于不含双歧因子,增殖速度太慢。单一的双歧因子制剂尽管能促进肠道内有益菌的增殖,但临床检验结果表明,相当一部分非健康状态的人群肠道内检验不出双歧杆菌等有益厌氧菌。特别是中、老年患者更为严重,对这样的患者,即使服用双歧因子制剂也没多少效果。
本发明的目的是提供一种改善肠道生态平衡的微生物制剂及其工艺,该产品具有适宜人群广、迅速改善肠道生态平衡的优点。该产品对痢疾的治疗效果明显,痢疾患者若服用该改善肠道生态平衡的微生物制剂进行治疗,则能控制致病菌的繁殖,同时补充、促进了有益菌的生长、增殖,使肠道菌群生态迅速恢复平衡,患者恢复健康。
为实现上述目的,本发明采取以下技术方案:这种改善肠道生态平衡的微生物制剂是用一种或一种以上的双歧杆菌发酵后,配合一种或一种以上的双歧因子所制成的制剂,所述双歧杆菌选自婴儿双歧杆菌(Bifidobacteriuminfantis)、CGMCC、保存编号0313-2,长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)、CGMCC、保存编号0313-5,短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、CGMCC、保存编号0313-6,两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、CGMCC、保存编号0313-7,所述双歧因子是指对双歧杆菌的生长、增殖具有明显促进作用的低聚糖类物质,一般由2-10个单糖通过糖苷键结合而成;或是天然植物提取的物质;或是多糖类物质,所述低聚糖类物质包括大豆低聚糖、低聚果糖、低聚木糖、低聚半乳糖、低聚乳果糖、低聚异麦芽糖、低聚异麦芽酮糖、低聚葡萄糖、棉子糖、水苏糖、壳聚糖中的一种或几种,其配合量为0.5g-30g/一次服用量,所述天然植物提取的物质包括柑桔皮提取物、人参提取物、茶叶提取物、枸杞子提取物、五味子提取物中的一种或几种,其配合量为0.5g-30g/一次服用量;所述双歧杆菌的配合量为活菌数1000万个-4亿个/一次服用量。其中人参提取物,茶叶提取物,枸杞子提取物市场有售,而五味子提取物、柑桔皮提取物采取公知方法制取,采取水提、浓缩、干燥制得。
本发明中,该改善肠道生态平衡的微生物制剂还采用一种或一种以上的其它肠道有益菌发酵后配制而成,并且所述一种或一种以上的双歧杆菌与所述一种或一种以上的其它肠道有益菌可以分别发酵,也可以混合发酵;所述肠道有益菌选自酪酸梭菌(Clostridium butyricum)、CGMCC、保存编号0313-1,嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophibus)、CGMCC、保存编号0313-4,和嗜热链球菌(Streptococcus gthermophilus)、CGMCC、保存编号0313-3,其配合量为活菌数1000万个-4亿个/一次服用量。
本发明的改善肠道生态平衡的微生物制剂,可以作为食品、保健品、药品或食品添加剂。
所述改善肠道生态平衡的微生物制剂可制成胶囊、微囊剂、冲剂、颗粒剂、片剂、口服液。制做上述改善肠道生态平衡的微生物制剂的各种形式的产品,都是采用公知的普通方法制成。
在所述改善肠道生态平衡的微生物制剂中还配合有各种维生素及微量元素。上述各种维生素及微量元素,可根据人体的需要量适当加入。
制做含有一种或一种以上的双歧杆菌的改善肠道生态平衡的的方法。该改善肠道生态平衡的微生物制剂是经过下述方法制成的:
(1)配制发酵培养基,
(2)将培养基在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种一种或一种以上的双歧杆菌,在37℃条件下培养18小时,控制含菌量达2.2×109个/ml时,用连续离心机回收得到湿菌体,
(3)将上述湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得菌粉,控制含活菌数为4.0×1010个/g,
(4)上述冻干菌粉与一种或一种以上双歧因子按下述配合量混合配制,其配合量为:一种或一种以上的双歧杆菌的活菌数为1000万个-4亿个/一次服用量,一种或一种以上的双歧因子为0.5g-30g/一次服用量,最后制成改善肠道生态平衡的微生物制剂。
制做含有一种或一种以上的双歧杆菌、一种或一种以上的肠道杆菌、及一种或一种以上的双歧因子的改善肠道生态平衡的方法,该方法采取双歧杆菌和肠道杆菌混合发酵法。该改善肠道生态平衡的微生物制剂是经过下述方法制成的:
(1)用蒸馏水配制发酵培养基,该发酵培养基含有胰蛋白胨、酵母抽取物、牛肉浸膏中的一种或几种,以及低聚果糖、葡萄糖,该发酵培养基的组成为以重量百分数计:胰蛋白胨0.5%-4%,酵母抽提物0.5%-4%,牛肉浸膏0.5%-4%,低聚果糖0.5%-4%,葡萄糖0.5%-4%,
(2)将培养基在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种一种或一种以上的双歧杆菌,和一种或一种以上的肠道有益菌,在37℃条件下培养18小时,控制含菌量:双歧杆菌肠道有益菌分别为2.2×109个/ml时,用连续离心机回收得到湿菌体,
(3)将上述湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得菌粉,控制含活菌数为4.0×1010个/g,
(4)上述冻干菌粉与一种或一种以上双歧因子按下述配合量混合配制,其配合量为:一种或一种以上的双歧杆菌的活菌数为1000万个-4亿个/一次服用量,一种或一种以上的肠道有益菌为1000万个-4亿/一次服用量,一种或一种以上的双歧因子为0.5g-30g/一次服用量,最后制成改善肠道生态平衡的微生物制剂。
制做含有一种或一种以上的双歧杆菌、一种或一种以上的肠道杆菌、及一种或一种以上的双歧因子的改善肠道生态平衡的方法,该方法采取双歧杆菌和肠道杆菌分别发酵法。该改善肠道生态平衡的微生物制剂是经过下述方法制成的:
(1)用蒸馏水配制发酵培养基,该发酵培养基含有胰蛋白胨、酵母抽取物、牛肉浸膏中的一种或几种,以及低聚果糖、葡萄糖,该发酵培养基的组成为以重量百分数计:胰蛋白胨0.5%-4%,酵母抽提物0.5%-4%,牛肉浸膏0.5%-4%,低聚果糖0.5%-4%,葡萄糖0.5%-4%,
(2)将培养基在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种一种或一种以上的双歧杆菌,在37℃条件下培养18小时,控制含菌量达2.2×109个/ml时,用连续离心机回收得到湿菌体,
(3)将上述湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得菌粉,控制含活菌数为4.0×1010个/g,
(4)将一种或一种以上的肠道有益菌种子液接种PH为4.5、浓度为10%的脱脂奶粉液中,在37℃条件下培养14小时,得到肠道有益菌发酵液,控制含活菌数为2.2×109个/ml。
(5)将肠道有益菌发酵液和双歧杆菌的湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得冻干菌粉,控制含活菌数为4.5×1010个/g,
(6)上述冻干菌粉与一种或一种以上双歧因子按下述配合量混合配制,其配合量为双歧杆菌利肠道有益菌的活菌数分别为1000万个-4亿个/一次服用量,双歧因子为0.5g-30g/一次服用量,最后制成改善肠道生态平衡的微生物制剂。
本发明的最大特点和独创之处在于,依据本发明生产的产品,既含有双歧杆菌等肠道有益菌,又含有促进双歧杆菌生长增殖的双歧因子,与以往的产品相比较,具有适宜人群广、迅速改善肠道生态平衡之功效。用小鼠做的动物实验结果表明,本发明的改善肠道生态平衡的微生物制剂对痢疾的治疗效果相当于氟派酸,且没有氟派酸的副作用。氟派酸在治好痢疾的同时,由于把大量有益菌也杀死,导致肠道微生态平衡破坏,而引起便秘。对6例胃肠功能弱而敏感,外地出差易患水土不服所导致胃肠功能紊乱的患者,在出差前一日开始服用本发明改善肠道生态平衡的微生物制剂,到了外地后仍继续服用2-3天,结果水土不服症消失,说明对水土不服导致的胃肠功能紊乱、腹泻的病症有疗效。对3例习惯性便秘的老年患者,服用本发明的改善肠道生态平衡的微生物制剂2天,便秘症状消失。便秘症状消失是双歧杆菌的补充、大量繁殖和低聚糖的润肠通便双重作用的结果。
双歧因子对双歧杆菌生长、增殖的促进作用见表1。结果表明不同的低聚糖及植物提取物对双歧杆菌生长的促进作用,有一定的差异。两种配合使用优于单用。表1中,普通培养基的组成是含蛋白胨1%,牛肉膏0.5%,NaCl,0.5%在此基础上添加0.5%的双歧因子,上述各含量均为重量百分数,观察促进生长、生殖的作用。
表1  低聚糖等双歧因子对双歧杆菌生长的影响
双歧因子种类 添加量 促进生长状况
对照培养基(不含双歧因子) 0 +
低聚果糖 0.5% ++++
低聚半乳糖 0.5% +++
低聚木糖 0.5% ++++
低聚乳果糖 0.5% +++
低聚异麦芽糖 0.5% ++
大豆低聚糖 0.5% +++
枸杞多糖 0.5% ++
柑枸皮提取物 0.5% ++++
低聚果糖+枸杞多糖 0.25%0.25% ++++
低聚半乳糖+大豆低聚糖 0.25%0.25% ++++
促进生长状况:目视浊度比较
+生长一般;++生长良好;+++-++++生长显著。
实施例1(两种双歧杆菌混合发酵)
加100L蒸馏水配制发酵培养基。
发酵培养基的组成如下以重量百分数计:胰蛋白胨1%,酵母抽提物0.5%,牛肉浸膏0.5%,葡萄糖1%,低聚果糖1%,乙酸钠0.5%,碳酸钙0.05%。在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种婴儿和短双歧杆菌种子液各1L,在37℃条件下,培养18小时,含菌量达2.2×109个/ml时,用连续离心机,以15000r/分钟,离心回收得到湿菌体0.6kg,将上述湿菌体悬于14L、PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得菌粉3kg,含活菌数为4.0×1010个/g。该菌粉可用于不同配方组成的改善肠道生态平衡的微生物制剂。配方组成举例如下:
1、冻干菌粉2.5g。
   低聚半乳糖2000g
准确称取上述两种组份,用混匀机充分混匀,分装于1000袋,每袋含双歧因子2g,活菌数不少于2亿个。每袋可一次服用。
2、冻干菌粉2.5g。
   低聚乳果糖2000g
   Vc   10g
   VB1  1500mg
   VB6  1500mg
   VB12 1500mg
   Zn   1300mg
   Fe    12g
准确称取上述8种组份,用混匀机充分混匀,分装于1000袋,即可。其中每袋含活菌数不少于2亿个。每袋可一次服用。
实施例2(酪酸菌与双歧杆菌混合发酵)
加100L蒸馏水配制发酵培养基。
发酵培养基的组成如下以重量百分数计:胰蛋白胨1%,酵母抽取物1%,肉胨0.5%,葡萄糖1%,低聚果糖1%,乙酸钠0.5%,碳酸钙0.05%。在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种酪酸梭菌和长双歧杆菌种子液各1L,在37℃条件下,培养18小时,用连续离心机以15000r/分钟,离心回收得到湿菌体0.6kg,悬于14L的PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,允分混匀,冻结干燥得菌粉3kg,含活菌数为4.0×1010个/g。该菌粉可用于不同配方组成的改善肠道生态平衡的微生物制剂,配方组成举例如下:
1、冻干菌粉     5g
   低聚木糖     1200g
   Vc          10g
   VB1         1500mg
   VB6         1500mg
   Zn          1300mg
   Fe           12g
准确称取上述7种组份,充分混匀,分装于1000袋中,即可。每袋含活菌数不少于2亿个。每袋可一次服用。
2、冻干菌粉     5g
   柑枸皮提取物 500g
   低聚乳果糖   1000g
   Vc          10g
   VB1         1500mg
   VB2         1500mg
准确称取上述六种组份,充分混匀,分装于1000袋即可。
每袋含活菌数不少于2亿个。每袋可一次服用。
实施例3(歧杆菌与嗜酸乳杆菌分别发酵,混合冻干)
双歧杆菌的培养基的培养条件及回收条件同实施例1。
嗜酸乳杆菌的发酵条件是将嗜酸乳杆菌种子液0.2L接种于10L的PH为4.5、浓度为10%的脱脂奶粉液中,在37℃条件下培养14小时,将全部发酵液和双歧杆菌的回收菌体(0.6Kg),悬于10L的PH为6.0、浓度为30%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻干得菌粉3kg,含菌量为4.5×1010个/g,该冻干菌粉既含双歧杆菌又含有嗜酸乳杆菌,用于配制不同配方的益菌康制剂,举例如下:
1、冻干菌粉       5g
   低聚木糖       1000g
   枸杞多糖       500g
   Vc            10g
   VB1           1500mg
   VB6           1500mg
准确称取上述六种组份,充分混匀,分装于1000袋中。其中每袋含活菌数不少于2亿个,每袋可一次服用。
2、冻干菌粉        5g
   低聚果糖        1000g
   大豆低聚糖      1000g
   Vc             10g
   VB1            1500mg
   VB6            1500mg
   Zn             1300mg
   Fe              12g
准确称取上述8种组份,充分混匀,分装于1000袋中,即可。每袋含活菌数不少于2亿个。每袋可一次服用。
本发明的益菌康制剂中的双歧杆菌和肠道有益菌的配合量是按一次服用量所含活菌数进行配比的,而双歧因子的配合量是按一次服用量所含的重量进行配比的,凡按本发明提出的配合量配比任何重量的改善肠道生态平衡的微生物制剂都在本发明的权利要求范围内。
本发明所使用的微生物菌种已于97年7月28日放到中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京、中关村,邮编100080)保藏,共七个下述微生物菌种。
(1)分类命名:Clostridium butyricum酪酸梭菌,保存编号0313-1。
(2)分类命名:Bifidobacterium infantis婴儿双歧杆菌,保存编号0313-2。
(3)分类命名:Streptococcus gthermophilus嗜热链球菌,保存编号0313-3。
(4)分类命名:Lactobacillus acidophibus嗜酸乳杆菌,保存编号0313-4。
(5)分类命名:Bifidobacterium longum长双歧杆菌,保存编号0313-5。
(6)分类命名:Bifidobacterium breve短双歧杆菌,保存编号0313-6。
(7)分类命名:Bifidobacterium bifidum两歧双歧杆菌,保存编号0313-7。
上述七个微生物菌种经该微生物中心检测,检测结果均为存活。

Claims (8)

1、一种改善肠道生态平衡的微生物制剂,其特征在于:该改善肠道生态平衡的微生物制剂是用一种或一种以上的双歧杆菌发酵后,配合一种或一种以上的双歧因子所制成的制剂,所述双歧杆菌选自婴儿双歧杆菌(Bifidobacteriuminfantis)、CGMCC、保存编号0313-2,长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)、CGMCC、保存编号0313-5,短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、CGMCC、保存编号0313-6,两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、CGMCC、保存编号0313-7,所述双歧因子是指对双歧杆菌的生长、增殖具有明显促进作用的低聚糖类物质,一般由2-10个单糖通过糖苷键结合而成;或是天然植物提取的物质;或是多糖类物质,所述低聚糖类物质包括大豆低聚糖、低聚果糖、低聚木糖、低聚半乳糖、低聚乳果糖、低聚异麦芽糖、低聚异麦芽酮糖、低聚葡萄糖、棉子糖、水苏糖、壳聚糖中的一种或几种,其配合量为0.5g-30g/一次服用量,所述天然植物提取的物质包括柑桔皮提取物、人参提取物、茶叶提取物、枸杞子提取物、五味子提取物中的一种或几种,其配合量为0.5g-30g/一次服用量;所述双歧杆菌的配合量为活菌数1000万个-4亿个/一次服用量。
2、根据权利要求1所述的改善肠道生态平衡的微生物制剂,其特征在于:该改善肠道生态平衡的微生物制剂还采用一种或一种以上的其它肠道有益菌发酵后配制而成,并且所述一种或一种以上的双歧杆菌与所述一种或一种以上的其它肠道有益菌可以分别发酵,也可以混合发酵;所述肠道有益菌选自酪酸梭菌(Clostridium butyricum)、CGMCC、保存编号0313-1,嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophibus)、CGMCC、保存编号0313-4,和嗜热链球菌(Streptococcus gthermophilus)、CGMCC、保存编号0313-3,其配合量为活菌数1000万个-4亿个/一次服用量。
3、根据权利要求1或2所述的改善肠道生态平衡的微生物制剂,其特征在于:该制剂可以作为食品、保健品、药品或食品添加剂。
4、根据权利要求1或2所述的改善肠道生态平衡的微生物制剂,其特征在于:所述改善肠道生态平衡的微生物制剂可制成胶囊、微囊剂、冲剂、颗粒剂、片剂、口服液。
5、根据权利要求1或2所述的改善肠道生态平衡的微生物制剂,其特征在于:在所述改善肠道生态平衡的微生物制剂中还配合有各种维生素及微量元素。
6、制做权利要求1所述改善肠道生态平衡的微生物制剂的一种生产工艺,其特征在于该改善肠道生态平衡的微生物制剂是经过下述方法制成的:
(1)用蒸馏水配制发酵培养基,该发酵培养基含有胰蛋白胨、酵母抽取物、牛肉浸膏中的一种或几种,以及低聚果糖、葡萄糖,该发酵培养基的组成为以重量百分数计:胰蛋白胨0.5%-4%,酵母抽提物0.5%-4%,牛肉浸膏0.5%-4%,低聚果糖0.5%-4%,葡萄糖0.5%-4%,
(2)将培养基在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种一种或一种以上的双歧杆菌,在37℃条件下培养18小时,控制含菌量达2.2×109个/ml时,用连续离心机回收得到湿菌体,
(3)将上述湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得菌粉,控制含活菌数为4.0×1010个/g,
(4)上述冻干菌粉与一种或一种以上双歧因子按下述配合量混合配制,其配合量为:一种或一种以上的双歧杆菌的活菌数为1000万个-4亿个/一次服用量,一种或一种以上的双歧因子为0.5g-30g/一次服用量,最后制成改善肠道生态平衡的微生物制剂。
7、制做权利要求2所述的改善肠道生态平衡的微生物制剂的一种生产工艺,其特征在于该改善肠道生态平衡的微生物制剂是经过下述方法制成的:
(1)用蒸馏水配制发酵培养基,该发酵培养基含有胰蛋白胨、酵母抽取物、牛肉浸膏中的一种或几种,以及低聚果糖、葡萄糖,该发酵培养基的组成为以重量百分数计:胰蛋白胨0.5%-4%,酵母抽提物0.5%-4%,牛肉浸膏0.5%-4%,低聚果糖0.5%-4%,葡萄糖0.5%-4%,
(2)将培养基在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种一种或一种以上的双歧杆菌,和一种或一种以上的肠道有益菌,在37℃条件下培养18小时,控制含菌量:双歧杆菌肠道有益菌分别为2.2×109个/ml时,用连续离心机回收得到湿菌体,
(3)将上述湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得菌粉,控制含活菌数为4.0×1010个/g,
(4)上述冻干菌粉与一种或一种以上双歧因子按下述配合量混合配制,其配合量为:一种或一种以上的双歧杆菌的活菌数为1000万个-4亿个/一次服用量,一种或一种以上的肠道有益菌为1000万个-4亿/一次服用量,一种或一种以上的双歧因子为0.5g-30g/一次服用量,最后制成改善肠道生态平衡的微生物制剂。
8、制做权利要求2所述的改善肠道生态平衡的微生物制剂的一种生产工艺,其特征在于该改善肠道生态平衡的微生物制剂是经过下述方法制成的:
(1)用蒸馏水配制发酵培养基,该发酵培养基含有胰蛋白胨、酵母抽取物、牛肉浸膏中的一种或几种,以及低聚果糖、葡萄糖,该发酵培养基的组成为以重量百分数计:胰蛋白胨0.5%-4%,酵母抽提物0.5%-4%,牛肉浸膏0.5%-4%,低聚果糖0.5%-4%,葡萄糖0.5%-4%,
(2)将培养基在121℃条件下,灭菌30分钟,冷却至37℃时,接种一种或一种以上的双歧杆菌,在37℃条件下培养18小时,控制含菌是达2.2×109个/ml时,用连续离心机回收得到湿菌体,
(3)将上述湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得菌粉,控制含活菌数为4.0×1010个/g,
(4)将一种或一种以上的肠道有益菌种子液接种PH为4.5、浓度为10%的脱脂奶粉液中,在37℃条件下培养14小时,得到肠道有益菌发酵液,控制含活菌数为2.2×109个/ml。
(5)将肠道有益菌发酵液和双歧杆菌的湿菌体悬于PH为5.6、浓度为20%的脱脂奶粉液中,充分混匀,冻结干燥得冻干菌粉,控制含活菌数为4.5×1010个/g,
(6)上述冻干菌粉与一种或一种以上双歧因子按下述配合量混合配制,其配合量为双歧杆菌和肠道有益菌的活菌数分别为1000万个-4亿个/一次服用量,双歧因子为0.5g-30g/一次服用量,最后制成改善肠道生态平衡的微生物制剂。
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