CN107496186A

CN107496186A - 一种山奈酚纳米组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN107496186A
Application number: CN201710949630.7A
Authority: CN
Inventors: 刘卫; 陈家铃; 许琦; 闻庆; 石丛姣; 杨达峰
Original assignee: Wuhan Hundred Si Kairui Nanosecond Science And Technology Co Limiteies
Current assignee: Wuhan Hundred Si Kairui Nanosecond Science And Technology Co Limiteies
Priority date: 2017-10-13
Filing date: 2017-10-13
Publication date: 2017-12-22

Abstract

本发明提供了一种山奈酚纳米组合物，属于化妆品领域，包括以下质量百分比的组分：山奈酚0.1％～10.0％，乳化剂8.0％～70.0％，助乳化剂10.0％～30.0％，液体脂质1.0％～15.0％，多元醇5.0％～45.0％。本发明中，乳化剂、助乳化剂、液体脂质、多元醇形成热力学稳定的均相分散体系，稳定性良好，皮肤吸收快、渗透性好，生物相容性好；乳化剂与助乳化剂协同作用，起到稳定活性物质山奈酚的作用，提供的山奈酚纳米组合物载药量大，能包载更多的活性物质山奈酚的浓度可达10.0％，山奈酚纳米组合物作为透皮储库，可持续释放山奈酚，长时间维持在有效浓度，更好地抑制5α‑还原酶活性，发挥抗菌抗氧化功效。

Description

一种山奈酚纳米组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，尤其涉及一种山奈酚纳米组合物及其制备方法和应用。

背景技术

山奈酚属于黄酮醇类，来源于姜科植物山奈根茎、小檗科植物窝儿七根茎、檀香科植物白瑞草全草、大戟科植物猫眼草地上部分、豆科植物槐树的干燥成熟果实。研究表明山奈酚具有抑制5α-还原酶、抗菌等活性，对黄色葡萄球菌及绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌均有抑制作用，可与其他抗菌剂复配用于化妆品防腐，山奈酚具有一定抗氧化作用，可同时抗菌抗氧化功效。此外还可用于抗癌、抗癫痫、保护神经细胞、解痉、抗溃疡、利胆利尿剂、止咳。

山奈酚具有广阔的临床药用和食品保健应用前景。但是，山奈酚自身存在一定的缺陷，制约其研究和应用。山奈酚在应用中存在以下两方面的缺陷：一是山奈酚脂水分配系数(logP)为1.9，脂溶性和水溶性均较差，现有技术制备的水溶性山奈酚组合物其山奈酚的载药量仅为0.01～1.0％，低含量使山奈酚难以达到药效；二是山奈酚容易氧化，稳定性差。这些缺陷严重限制了山奈酚在临床上的广泛应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种山奈酚纳米组合物，提高山奈酚纳米组合物的稳定性和载药量。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种山奈酚纳米组合物，包括以下质量百分比的组分：

山奈酚0.1％～10.0％，乳化剂8.0％～70.0％，助乳化剂10.0％～30.0％，液体脂质1.0％～15.0％，多元醇5.0％～45.0％，所述各组分质量百分比之和为100％。

优选地，包括以下质量百分比的组分：

山奈酚0.5％～6.0％，乳化剂10.0％～65.0％，助乳化剂10.0％～25.0％，液体脂质5.0％～12.0％，多元醇8.0％～40.0％。

优选地，所述山奈酚纳米组合物的粒径为15～100nm。

优选地，所述乳化剂包括吐温80、吐温60、吐温40、吐温20、聚氧乙烯蓖麻油-20醚、聚氧乙烯蓖麻油-30醚、聚氧乙烯蓖麻油-35醚、聚氧乙烯蓖麻油-40醚、PEG40氢化蓖麻油、PEG30氢化蓖麻油、PEG20氢化蓖麻油、PEG10氢化蓖麻油、PEG5氢化蓖麻油、聚乙二醇400单甘油酯、聚乙二醇400双甘油酯、聚乙二醇600单甘油酯、聚乙二醇600双甘油酯、椰油基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇聚醚-25、丁醇聚醚-26和卵磷脂中的一种或几种的混合物。

优选地，所述助乳化剂包括二丙二醇、聚乙二醇、1,2-丙二醇、1,2-己二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇、辛基十二烷醇、油酸、二乙二醇单乙基醚和泊洛沙姆中的一种或几种的混合物。

优选地，所述液体脂质包括肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、辛酸癸酸甘油三酯、维生素E、二甲基硅油、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、聚乙二醇硬脂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、丙二醇单辛酸酯、二辛癸酸丙二醇酯、癸二酸二乙酯、异壬酸异壬酯、三乙酸甘油酯、角鲨烯和大豆油中的一种或几种的混合物。

优选地，所述多元醇包括聚乙二醇、1,2-丙二醇、二丙二醇、辛基十二烷醇、甘油、1,2-己二醇、1,3-丁二醇和1,2-戊二醇中的一种或几种的混合物。

本发明还提供了上述技术方案所述山奈酚纳米组合物的制备方法，包括：将山奈酚、乳化剂、助乳化剂、液体脂质与多元醇混合，得到山奈酚纳米组合物。

优选地，所述混合的温度为35～80℃。

本发明还提供了上述技术方案所述山奈酚纳米组合物或上述技术方案任意一项所述制备方法得到的山奈酚纳米组合物在化妆品中的应用。

本发明提供了一种山奈酚纳米组合物，包括以下质量百分比的组分：山奈酚0.1％～10.0％，乳化剂8.0％～70.0％，助乳化剂10.0％～30.0％，液体脂质1.0％～15.0％，多元醇5.0％～45.0％。本发明中，所述乳化剂、助乳化剂、液体脂质、多元醇形成热力学稳定的均相分散体系，稳定性良好，山奈酚纳米组合物皮肤吸收快、渗透性好、生物相容性好，乳化剂与助乳化剂相互协同作用，起到稳定活性物质山奈酚的作用，使山奈酚纳米组合物载药量大，能包载更多的活性物质山奈酚，组合物中活性成分山奈酚的浓度可达10.0％，山奈酚纳米组合物作为透皮储库，可持续释放山奈酚，能够长时间维持在有效浓度，抑制5α还原酶活性，发挥抗菌、抗氧化功效，对黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌及痢疾杆菌均有抑制作用；同时具有抗氧化的功能，山奈酚纳米组合物的抗氧化途径主要有：清除自由基(ROS)，通过调节NOS(一氧化氮合酶)/NO(一氧化氮)水平来抑制ROS的产生；抑制脂质过氧化(丙二醛MDA)，增强抗氧化酶活性(超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px)；抑制低密度脂蛋白的氧化损伤；抑制线粒体膜电位降低和细胞色素C的释放，影响核转录因子κB(NF-κB)信号通路等。实验结果表明，本发明提供的山奈酚纳米组合物放置30天后，性状及粒径未发生显著性变化，稳定性好，载药量大，经高效液相色谱检测，载药量与投药量基本一致，皮肤透过性好，可以广泛的应用于化妆品中。

并且，本发明提供的山奈酚纳米组合物的制备方法简单，工艺易于控制，适宜工业化、规模化生产，且整个过程中未使用有机溶剂，对皮肤刺激小，安全性高。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

图1为本发明实施例4～7得到的山奈酚纳米组合物以及对比例1～2体外皮肤累积透过曲线。

具体实施方式

本发明提供的山奈酚纳米组合物包括0.1％～10.0％质量百分比的山奈酚，优选为0.5％～6％，更优选为2.0％～5.0％。本发明中，所述山奈酚可抗菌，对黄色葡萄球菌及绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌均有抑制作用；止咳，治疗支气管炎；抑酶，抑制眼醛糖还原酶，有利于糖尿病白内障的治疗，主要用于抗菌、抗氧化、抗癌、抑制生育、抗癫痫、保护神经细胞、解痉、抗溃疡、利胆利尿剂、止咳。

本发明提供的山奈酚纳米组合物包括8.0％～70.0％质量百分比的乳化剂，优选为10.0％～65％，更优选为15.0％～63.0％。在本发明中，所述乳化剂优选包括吐温80、吐温60、吐温40、吐温20、聚氧乙烯蓖麻油-20醚、聚氧乙烯蓖麻油-30醚、聚氧乙烯蓖麻油-35醚、聚氧乙烯蓖麻油-40醚、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-30氢化蓖麻油、PEG-20氢化蓖麻油、PEG-10氢化蓖麻油、PEG-5氢化蓖麻油、聚乙二醇400单甘油酯、聚乙二醇400双甘油酯、聚乙二醇600单甘油酯、聚乙二醇600双甘油酯、椰油基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇聚醚-25、丁醇聚醚-26和卵磷脂中的一种或几种的混合物，更优选为3～6种的混合物，最优选为吐温80、聚氧乙烯蓖麻油-20醚、PEG-40氢化蓖麻油、丁醇聚醚-26与聚乙二醇400单甘油酯的混合物或吐温60、聚氧乙烯蓖麻油-35醚、聚乙二醇400双甘油酯、椰油基葡糖苷与鲸蜡硬脂醇聚醚-20的混合物或聚氧乙烯蓖麻油-40醚、PEG-5氢化蓖麻油、聚乙二醇600双甘油酯、鲸蜡硬脂醇聚醚-25、丁醇聚醚-26和卵磷脂的混合物。本发明对所述混合物中各乳化剂的质量比没有特殊的限制，本领域技术人员可以根据实际需要采用任意质量比的乳化剂的混合物。

本发明提供的山奈酚纳米组合物包括10.0％～30.0％质量百分比的助乳化剂，优选为20.0％～25.0％。在本发明中，所述助乳化剂优选包括二丙二醇、聚乙二醇、1,2-丙二醇、1,2-己二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇、辛基十二烷醇、油酸、二乙二醇单乙基醚和泊洛沙姆中的一种或几种的混合物，更优选为2～4种助乳化剂的混合物，最优选为丙二醇、1,3-丁二醇、二乙二醇单乙基醚与辛基十二烷醇的混合物。本发明对所述混合物中各助乳化剂的质量比没有特殊的限制，本领域技术人员可以根据实际需要采用任意质量比助乳化剂的混合物。在本发明中，所述乳化剂与助乳化剂相互协同作用，起到稳定活性物质山奈酚的作用，使提供的山奈酚纳米组合物载药量大，能包载更多的活性物质山奈酚，组合物中活性成分山奈酚的浓度可达10.0％，山奈酚纳米组合物作为透皮储库，可持续释放山奈酚，能够长时间维持在有效浓度，抑制5α还原酶活性，发挥抗菌、抗氧化功效。

本发明提供的山奈酚纳米组合物包括1.0％～15.0％质量百分比的液体脂质，优选为5.0％～12.0％。在本发明中，所述液体脂质优选包括肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、辛酸癸酸甘油三酯、维生素E、二甲基硅油、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、聚乙二醇硬脂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、丙二醇单辛酸酯、二辛癸酸丙二醇酯、癸二酸二乙酯、异壬酸异壬酯、三乙酸甘油酯、角鲨烯和大豆油中的一种或几种的混合物，更优选为3～6种液体脂质的混合物，最优选为肉豆蔻酸异丙酯、辛酸癸酸甘油三酯、维生素E、癸二酸二乙酯与聚乙二醇月桂酸甘油酯的混合物或棕榈酸异丙酯、二甲基硅油、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、丙二醇单辛酸酯与角鲨烯的混合物或二甲基硅油、聚乙二醇硬脂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、丙二醇单辛酸酯、癸二酸二乙酯与大豆油的混合物。本发明对所述混合物中各液体脂质的质量比没有特殊的限制，本领域技术人员可以根据实际需要采用任意质量比的液体脂质的混合物。本发明中，所述乳化剂、助乳化剂、液体脂质、多元醇形成热力学稳定的均相分散体系，起到稳定山奈酚纳米组合物的作用。

本发明提供的山奈酚纳米组合物包括5.0％～45.0％质量百分比的多元醇，优选为8.0％～40.0％，更优选为10％～38％。在本发明中，所述多元醇优选包括聚乙二醇、1,2-丙二醇、二丙二醇、辛基十二烷醇、甘油、1,2-己二醇、1,3-丁二醇和1,2-戊二醇中的一种或几种的混合物，更优选为2～4种多元醇的混合物，最优选为1,2-丙二醇、辛基十二烷醇、甘油与1,2-戊二醇的混合物。本发明对所述混合物中各多元醇的质量比没有限制，本领域技术人员可以根据实际需要采用任意质量比的多元醇的混合物。在本发明中，所述多元醇能够增强山奈酚纳米组合物的脂溶性，进一步提高山奈酚纳米组合物稳定性。

本发明提供的山奈酚纳米组合物的粒径优选为15～100nm，更优选为15～80nm，最优选为20～70nm。在本发明中，所述山奈酚纳米组合物粒径优选为15～100nm，渗透性好，更有利于皮肤吸收。

本发明还提供了上述技术方案所述山奈酚纳米组合物的制备方法，包括以下步骤，将山奈酚、乳化剂、助乳化剂、液体脂质与多元醇混合，得到山奈酚纳米组合物。

本发明对所述山奈酚、乳化剂、助乳化剂、液体脂质与多元醇的加料顺序没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的加料顺序即可。本发明优选先将乳化剂、助乳化剂、液体脂质与多元醇溶解得到油相，再将山奈酚与所述油相混合得到山奈酚纳米组合物。在本发明中，所述溶解制备油相的温度优选为40～80℃，更优选为60～70℃；所述溶解的时间优选为10～30min，更优选为20～25min。本发明优选采用夹层锅水浴加热的方式达到所述溶解的温度。

在本发明中，所述山奈酚与油相混合得到山奈酚纳米组合物的温度优选为40～80℃，更优选为60～70℃；所述混合的时间优选为10～40min，更优选为20～30min。在本发明中，优选采用夹层锅水浴加热的方式达到所述混合的温度。本发明对所述混合的方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的混合方式即可，在本发明中，优选的搅拌转速为10～70rpm，更优选为15～55rpm。

混合完成后，将混合产物静置得到山奈酚纳米组合物。本发明对所述静置的温度没有特殊的限定，优选为室温，不需要额外的加热或降温。

在本发明中，所述山奈酚纳米组合物在化妆品中的质量分数优选为0.3～10％，更优选为0.5～5％。在本发明中，所述化妆品优选包括膏霜、精华或面膜。本发明中，所述山奈酚纳米组合物作为透过皮肤的储库，可持续释放山奈酚，能够长时间维持在有效浓度，发挥抑制5α还原酶、抗菌功效，同时具有抗氧化的功能。

本发明提供的山奈酚纳米组合物还具有抑制肿瘤生长、抑制血小板聚集和粘附作用、保护肝细胞等药理作用。

下面结合实施例对本发明提供的山奈酚纳米组合物及其制备方法和应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

将6.0％吐温60、2.0％聚氧乙烯蓖麻油-20、30.0％1,3-丁二醇、5％维生素E、13.9％肉豆蔻酸异丙酯、43.0％甘油在35℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将0.1％山奈酚加至油相中，于35℃水浴条件下搅拌以15rpm的转速搅拌10min，再静置1min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为15.1nm。

实施例2

将2.0％吐温40、6.0％聚氧乙烯蓖麻油-30、5％聚乙二醇400单甘油酯、20.0％二丙二醇、7.0％1,2-己二醇、10.0％棕榈酸异丙酯、5.0％辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、32.0％甘油在50℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将1.0％山奈酚加至油相中，于50℃水浴条件下搅拌以30rpm的转速搅拌10min，再静置2min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为25.0nm。

实施例3

将2.0％聚氧乙烯蓖麻油-35、10.0％PEG-30氢化蓖麻油、20.0％鲸蜡硬脂醇聚醚-25、2.0％丁醇聚醚-26、5.0％1,2-戊二醇、13.0％油酸、10.0％二乙二醇单乙基醚、1.0％聚乙二醇月桂酸甘油酯、3.0％亚油酸甘油酯、1.0％丙二醇单辛酸酯、1.0％癸二酸二乙酯、24.0％甘油在60℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将8.0％山奈酚加至油相中，于60℃水浴条件下搅拌以45rpm的转速搅拌20min，再静置1min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为100.3nm。

实施例4

将2.0％吐温20、27.0％聚氧乙烯蓖麻油-40、12.0％聚乙二醇400双甘油酯、10.0％鲸蜡硬脂醇聚醚-20、18.0％1,3-丁二醇、6.0％1,2-己二醇、2.0％聚乙二醇硬脂酸甘油酯、1.0％三乙酸甘油酯、10.0％二甲基硅油、5.0％辛基十二烷醇在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将6.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以35rpm的转速搅拌15min，再静置3min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为45.4nm。

实施例5

将26.0％PEG-40氢化蓖麻油、11.0％丁醇聚醚-26、15.0％二乙二醇单乙基醚、34.5％1,2-丙二醇、10.0％辛酸癸酸甘油三酯在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将3.5％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌15min，再静置1min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为21.5nm。

实施例6

将21.0％聚氧乙烯蓖麻油-40、5.0％PEG-20氢化蓖麻油、2.0％丁醇聚醚-26、20.0％1,2-丙二醇、4.0％二乙二醇单乙基醚、3.0％二辛癸酸丙二醇酯、1.0％维生素E、1.0％角鲨烯，10％异壬酸异壬酯，30.0％甘油在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将2.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置1min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为22.6nm。

实施例7

将34.0％聚氧乙烯蓖麻油-35、1.0％聚乙二醇400单甘油酯、12.0％二丙二醇、5.0％油酸、2.0％肉豆蔻酸异丙酯、1.0％维生素E，41.0％甘油在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将4.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置5min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为29.5nm。

实施例8

将15.0％PEG-5氢化蓖麻油、12.0％PEG-40氢化蓖麻油、13.0％1,3-丁二醇、9.0％二乙二醇单乙基醚、2.0％辛酸癸酸甘油三酯、1.0％角鲨烯，44.0％1,2-丙二醇在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将4.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置4min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为34.9nm。

实施例9

将36.0％聚氧乙烯蓖麻油-35、20.0％1,2-丙二醇、5.0％油酸、2.0％棕榈酸异丙酯、1.0％丙二醇单辛酸酯、1.0％二甲基硅油、5.0％1,2-己二醇、26.0％甘油，在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将4.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置3min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为44.0nm。

实施例10

将22.0％吐温40、14.0％聚氧乙烯蓖麻油-20、1.0％鲸蜡硬脂醇聚醚-20、7.0％1,2-戊二醇、3.0％油酸、1.0％辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、1.0％聚乙二醇硬脂酸甘油酯、1.0％三乙酸甘油酯，3.0％亚油酸甘油酯，42.0％甘油在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将5.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置3min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为36.3nm。

实施例11

将22.0％吐温20、16.0％聚氧乙烯蓖麻油-40、5.0％油酸、10.0％二乙二醇单乙基醚、10.0％聚乙二醇月桂酸甘油酯、1.0％亚油酸甘油酯、2.0％癸二酸二乙酯，28.0％1,2-丙二醇在50℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将6.0％山奈酚加至油相中，于50℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置2min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为72.6nm。

实施例12

将33.0％聚氧乙烯蓖麻油-30、9.0％PEG-30氢化蓖麻油、5.0％二丙二醇、7.0％1,2-己二醇、2.0％二辛癸酸丙二醇酯，5.0％三乙酸甘油酯、20.0％1,2-丙二醇、12.0％辛基十二烷醇在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将7.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置2min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为95.1nm。

实施例13

将25.0％PEG-40氢化蓖麻油、19.0％PEG-20氢化蓖麻油、15.0％1,2-丙二醇、5.0％1,2-戊二醇、3.0％棕榈酸异丙酯、1.0％维生素E，1.0％角鲨烷，24.0％1,3-丁二醇在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将7.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置3min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为66.5nm。

实施例14

将35.0％吐温60、22.0％聚乙二醇400双甘油酯、8.0％椰油基葡糖苷、5.0％卵磷脂、8.0％1,3-丁二醇、1.0％油酸、3.0％二乙二醇单乙基醚、2.0％肉豆蔻酸异丙酯、1.0％角鲨烯，5.0％甘油在45℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将10.0％山奈酚加至油相中，于45℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置3min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为68.9nm。

实施例15

将25.0％聚氧乙烯蓖麻油-20、12.0％鲸蜡硬脂醇聚醚-25、2.0％卵磷脂、15.0％丙二醇、3.0％1,3-丁二醇、8.0％肉豆蔻酸异丙酯、2.0％辛酸癸酸甘油三酯，16.0％甘油、10.0％辛基十二烷醇在55℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将7.0％山奈酚加至油相中，于55℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置2min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为47.4nm。

实施例16

将15.0％吐温-80、10.0％鲸蜡硬脂醇聚醚-25、20.0％PEG-10氢化蓖麻油、5.0％聚乙二醇600双甘油酯、10.0％椰油基葡糖苷、20.0％丙二醇、4.0％大豆油、1.5％辛癸酸聚乙二醇甘油酯、5.5％辛基十二烷醇在50℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将9.0％山奈酚加至油相中，于50℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置2min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为57.3nm。

实施例17

15.0％PEG-40氢化蓖麻油、10.0％PEG-20氢化蓖麻油、5.0％聚乙二醇400单甘油酯、3.5％聚乙二醇、15.0％1,3-丁二醇、6.0％泊洛沙姆、13.0％肉豆蔻酸异丙酯、1.5％二辛癸酸丙二醇酯、11.0％1,2-丙二醇15.0％甘油在50℃水浴条件下溶解，得到油相，备用；

将5.0％山奈酚加至油相中，于50℃水浴条件下搅拌以20rpm的转速搅拌20min，再静置2min，即得山奈酚纳米组合物。

对山奈酚纳米组合物的粒径进行检测，可得该山奈酚纳米组合物粒径为37.8nm。

实施例18

将实施例1～17得到的山奈酚纳米组合物在密闭容器、室温条件下放置30天，检查样品的性状及粒径，实验结果如表1所示。

表1实施例1～17山奈酚纳米组合物稳定性试验结果

稳定性试验结果表明：本发明提供的山奈酚纳米组合物在密闭容器、室温条件下放置30天无团聚、分层现象，且粒径在19～70nm之间，满足实际应用要求，样品在放置30天后也未出现团聚分层现象，样品粒径未发生显著性变化，仍然满足实际应用需求，尤其在药物浓度高的情况下仍然较稳定，未发现山奈酚结晶析出现象，无药物泄漏，因此，本发明提供的山奈酚纳米组合物具有良好的稳定性。

实施例19

将实施例4～7制得的山奈酚纳米组合物离心后取上清液用甲醇稀释，使用高效液相色谱测定经过滤的山奈酚纳米组合物-甲醇稀释液中山奈酚的浓度。实验得到的山奈酚组合物载药量均与投药量一致。

对比例1

按照常规霜剂制备方法制备山奈酚霜剂：将2.0％山奈酚、3.0％硬脂酸、4.7％单硬脂酸甘油酯、5.0％十六十八醇、6.0％聚二甲基硅氧烷于75℃水浴中熔融，得到油相；将10.0％甘油、5.0％丙二醇、0.3％三乙醇胺和65.0％纯化水于75℃水浴中溶解，得到水相；将油相和水相搅拌混合，并乳化，冷却，即得含量为2.0％的山奈酚霜剂。

对比例2

按对比例1中的配方及方法制备的空白霜剂与实施例7制备的山奈酚浓度为4％的山奈酚纳米组合物按照质量比1:1进行复配，得到约含2.0％的山奈酚的霜剂，作为霜剂对照。

实施例20

以体重为160～220g雄性SD大鼠腹部皮肤为透皮试验的障碍层进行透皮试验。将完整无破损的皮肤固定于接收池和供给池之间(皮肤内层面向接收池)；扩散池参数为：有效扩散面积2.27cm²，接收池容积约7.0ml，磁力搅拌速度600rpm；在接收池内充满释放介质4.5％吐温-80-20％乙醇-生理盐水，排除气泡，开启搅拌，并恒温至(37.0±0.5)℃，向皮肤表面分别均匀涂布样品约1g，于1h、2h、4h、6h、8h、10h、12h吸取接收液0.35ml，并补充释放介质0.35ml，接收液使用0.22μm有机滤膜过滤，使用高效液相色谱测定经过滤的接收液中山奈酚的浓度，计算不同时间药物累积透皮量。

按以下公式计算山奈酚单位面积累积透皮量：

其中：Q_s为累积透皮量；S为有效扩散面积；V为接收池中生理盐水体积；C_i为第1次至上次取样时接收液中药物浓度；n为第n次取样体积；Cn为该次取样时接收液中药物浓度。

将实施例4～7及对比例1、对比例2制备的样品按照上述方法进行透皮试验，试验结果见图1。

由图1可以看出，实施例4～7山奈酚纳米组合物的皮肤累积透过量都明显高于对比例1样品的皮肤累积透过量。实施例4～7的12h累积透过量分别为3760μg/cm²、2635μg/cm²、2337μg/cm²、2925μg/cm²，对比例1的12h累积透过量仅为532μg/cm²。可以看出，本发明的山奈酚纳米组合物的皮肤透过远远高于对比例1，具有优良的皮肤透过性，有利于皮肤吸收。

实施例21

取实施例4～7制备的山奈酚纳米组合物，分别与对比例1中的空白霜剂按照质量比1:1进行复配，进行皮肤刺激性试验：

取健康家兔18只，体重(2.0±0.2)kg，随机分为6组，每组动物3只，于实验前24h将家兔背部皮肤两侧去毛，去毛后24h检查去毛皮肤是否受伤，受伤皮肤不宜做皮肤刺激性试验。每天涂抹使用实施例4～7得到的山奈酚纳米组合物制备的霜剂3次，连续涂抹7天，同时涂抹空白霜剂(不给予任何药物)进行对照，观察试验结果，将试验结果列于表2中。

根据表2中的试验结果可以看出，使用实施例4～7制备的山奈酚纳米组合物制备的霜剂及空白霜剂涂抹于家兔皮肤后均无充血、红肿现象，说明本发明提供的山奈酚纳米组合物对皮肤没有刺激性。

表2实施例4～7纳米组合物及空白组皮肤刺激性观察结果

“+”家兔皮肤充血、红肿；“++”表示充血、红肿现象仍在，但有增加趋势；“—”表示无充血、红肿现象。

实施例22

取实施例7制备的山奈酚纳米组合物样品适量，加DMSO溶解成所需的浓度(约2mg/mL)备用。

按“平板打孔法测定抗菌活性”项下操作进行抗菌活性测定，使用金黄色葡萄球菌(SA)、枯草芽孢杆菌(BS)、大肠杆菌(EC)、铜绿假单胞菌(PAK)进行测定。测定结果见表3。

根据表3中的试验结果可以看出，使用实施例7制备的山奈酚纳米组合物制备的样品对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有很强的抗菌活性。

表3实施例7山奈酚纳米组合物对SA、BS、EC、PAK的抗菌活性

实施例23

以3只体重为190～220g雄性SD大鼠的肝脏离心提取出的5α-还原酶提取物进行5α-还原酶活性抑制试验。

采用Lowry法测定蛋白含量，以酶提取物中的总蛋白含量表示5α-还原酶提取物的含量。

5α-还原酶抑制药体外模型为：总反应体系为200μl反应体系。120mg/ml肝脏匀浆液、3mg/ml NADPH、0.2mg/ml睾酮、不同浓度样品加入体积分别为120，60，10，10μl。

在96孔板中加入120mg/ml肝脏匀浆液120μl、3mg/ml NADPH60μl、0.2mg/ml睾酮10μl，充分混合后测定吸光度A₀，37℃恒温反应60min后测定吸光度A₁，得到NADPH变化值△A₀。将实施例4与实施例7制备的山奈酚纳米组合物用无水乙醇稀释成2、5、10、20、40mg/ml，于96孔板中加入上述肝脏匀浆液、NADPH、睾酮和不同浓度待测液。充分混匀后，测定吸光度，37℃恒温反应60min后测定吸光度，测定NADPH变化值△A_n。

以特异性5α-还原酶抑制剂非那雄胺作为阳性对照药，按照上述方法判断酶的活性是否被抑制，且初步计算抑制率的大小。计算公式为：

I％＝(△A_n-△A₀)/△A₀×100％

实验重复3次，每次3个平行样本。样品对5α-还原酶活性抑制结果见表4。

在浓度2～10mg/ml浓度范围内，随着浓度升高，样品对5α-还原酶的抑制作用逐渐增加。

表4实施例4、7山奈酚纳米组合物对5α-还原酶活性抑制

由以上实施例可知，本发明提供的山奈酚纳米组合物稳定性好、载药量大、皮肤透过性好，无刺激性、具有抑制5α还原酶、抗菌、抗氧化等作用，且本发明制备方法简单，易于控制，适宜工业化、规模化生产。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种山奈酚纳米组合物，包括以下质量百分比的组分：

2.根据权利要求1所述的山奈酚纳米组合物，其特征在于，包括以下质量百分比的组分：

3.根据权利要求1或2所述的山奈酚纳米组合物，其特征在于，所述山奈酚纳米组合物的粒径为15～200nm。

4.根据权利要求1或2所述的山奈酚纳米组合物，其特征在于，所述乳化剂包括吐温80、吐温60、吐温40、吐温20、聚氧乙烯蓖麻油-20醚、聚氧乙烯蓖麻油-30醚、聚氧乙烯蓖麻油-35醚、聚氧乙烯蓖麻油-40醚、PEG40氢化蓖麻油、PEG30氢化蓖麻油、PEG20氢化蓖麻油、PEG10氢化蓖麻油、PEG5氢化蓖麻油、聚乙二醇400单甘油酯、聚乙二醇400双甘油酯、聚乙二醇600单甘油酯、聚乙二醇600双甘油酯、椰油基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇聚醚-25、丁醇聚醚-26和卵磷脂中的一种或几种的混合物。

5.根据权利要求1或2所述的山奈酚纳米组合物，其特征在于，所述助乳化剂包括二丙二醇、聚乙二醇、1,2-丙二醇、1,2-己二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇、辛基十二烷醇、油酸、二乙二醇单乙基醚和泊洛沙姆中的一种或几种的混合物。

6.根据权利要求1所述的山奈酚纳米组合物，其特征在于，所述液体脂质包括肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、辛酸癸酸甘油三酯、维生素E、二甲基硅油、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、聚乙二醇硬脂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、丙二醇单辛酸酯、二辛癸酸丙二醇酯、癸二酸二乙酯、异壬酸异壬酯、三乙酸甘油酯、角鲨烯和大豆油中的一种或几种的混合物。

7.根据权利要求1所述的山奈酚纳米组合物，其特征在于，所述多元醇包括聚乙二醇、1,2-丙二醇、二丙二醇、辛基十二烷醇、甘油、1,2-己二醇、1,3-丁二醇和1,2-戊二醇中的一种或几种的混合物。

8.权利要求1～7任意一项所述山奈酚纳米组合物的制备方法，包括：将山奈酚、乳化剂、助乳化剂、液体脂质与多元醇混合，得到山奈酚纳米组合物。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述混合的温度为35～80℃。

10.权利要求1～7任意一项所述山奈酚纳米组合物或权利要求8～9任意一项所述制备方法得到的山奈酚纳米组合物在化妆品中的应用。