CN107266435A

CN107266435A - 细胞凋亡诱导剂的盐和晶形

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Publication number: CN107266435A
Application number: CN201710418588.6A
Authority: CN
Inventors: N.D.卡特伦; 陈爽; 龚豫川; G.G.张
Original assignee: AbbVie Inc
Current assignee: AbbVie Inc
Priority date: 2010-11-23
Filing date: 2011-11-21
Publication date: 2017-10-20
Also published as: US8722657B2; WO2012071336A1; IL226489A0; HRP20171754T1; NO2643322T3; SI2643322T1; CY1119648T1; LT2643322T; RU2013128612A; CN103328474A; TWI526443B; BR112013012740A2; JP2013543894A; US20230312566A1; HUE034804T2; KR20140009265A; US20190194196A1; KR101923364B1; CA2817629A1; AU2011332043A1

Abstract

本发明涉及细胞凋亡诱导剂的盐和晶形。4‑(4‑{[2‑(4‑氯苯基)‑4,4‑二甲基环己‑1‑烯‑1‑基]甲基}哌嗪‑1‑基)‑N‑({3‑硝基‑4‑[(四氢‑2H‑吡喃‑4‑基甲基)氨基]苯基}‑磺酰基)‑2‑(1H‑吡咯并[2,3‑b]吡啶‑5‑基氧基)苯甲酰胺的盐和晶形是药物组合物的合适活性药物成分，该药物组合物可用于治疗特征在于一种或多种抗细胞凋亡Bcl‑2家族蛋白过度表达的疾病，例如癌症。

Description

细胞凋亡诱导剂的盐和晶形

本申请是申请日为2011年11月21日、申请号为201180065742.7、发明名称为“细胞凋亡诱导剂的盐和晶形”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求2010年11月23日提交的临时申请序列号61/416,656的权益，其以引用的方式并入本文中，如同以全文阐述一样。

在不要求优先权的权益或对现有技术状态认可的情况下，还交叉引用以下包括与本申请相关的主题的未决美国申请：序列号12/787,682(公开为U.S. 2010/0305122)，标题为“用于治疗癌症以及免疫和自身免疫疾病的细胞凋亡诱导剂(Apoptosis-inducingAgents for the Treatment of Cancer and Immune and Autoimmune Diseases)，”其全部公开内容以引用的方式并入本文中。

发明领域

本发明涉及细胞凋亡诱导剂的盐和晶形、包含这种盐和晶形的药物剂型、制备盐和晶形的方法、和其用于治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白过度表达的疾病的使用方法。

发明背景

Bcl-2蛋白的过度表达与多种癌症和免疫系统病症的化疗耐受、临床结果、疾病进展、总体预后或其组合相关。

细胞凋亡的逃避是癌症的特点(Hanahan & Weinberg (2000) Cell 100:57–70)。癌细胞必须克服由细胞应激所造成的连续冲击，例如，会导致正常细胞经历细胞凋亡的DNA损伤、癌基因活化、异常细胞周期进程和苛刻的微环境。癌细胞通过其逃避细胞凋亡的一种主要方法是通过上调Bcl-2家族的抗细胞凋亡蛋白。

需要改进治疗的肿瘤疾病的具体类型是非霍奇金淋巴瘤(NHL)。NHL是美国第六流行的新癌症类型，并且主要发生在60-70岁的患者中。NHL不是单一疾病，而是相关疾病的家族，基于包括临床特征和组织学的几个特征对其进行分类。

一种分类方法基于疾病的自然史将不同的组织亚型归为两种主要类型，即，疾病是否是惰性的(indolent)或攻击性的(aggressive)。通常，惰性亚型生长迟缓，并且通常不能治愈，而攻击性的亚型生长快速，并且可能治愈。滤泡性淋巴瘤是最常见的惰性亚型，并且扩散的大细胞淋巴瘤构成最常见的攻击性亚型。最初在非霍奇金B细胞淋巴瘤中描述了癌蛋白Bcl-2。

滤泡性淋巴瘤的治疗通常由基于生物学的化疗或组合化疗构成。通常使用利妥昔单抗(rituximab)、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松(R-CHOP)的联合治疗，如同利妥昔单抗、环磷酰胺、长春新碱和泼尼松(RCVP)的联合治疗一样。也使用利用利妥昔单抗(靶向CD20，在B细胞的表面上均匀表达的磷蛋白)或氟达拉滨的单一药剂治疗。化疗方案中加入利妥昔单抗可以提供改善的应答率和增加无进展存活率。

放射免疫治疗剂、高剂量化疗和干细胞移植可用于治疗顽固性或复发性NHL。目前，可治愈该病的治疗方案尚未获得批准，并且现行指导方针建议患者在临床试验背景下、甚至在一线情况下进行治疗。

患有攻击性大B细胞淋巴瘤的患者的一线治疗典型由利妥昔单抗、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松(R-CHOP)，或剂量调节的依托泊苷、泼尼松、长春新碱、环磷酰胺、多柔比星和利妥昔单抗(DA-EPOCH-R)构成。

大部分淋巴瘤最初对这些治疗中的任何一种都有应答，但肿瘤通常会复发并且最终变得顽固。由于患者接受的方案数量提高，所以，疾病变得更具有化疗耐受性。对一线治疗的平均应答为约75%，对二线治疗为60%，对三线治疗为50%，并且对四线治疗为约35-40%。在多次复发情况下，认为对于单一药剂接近20%的应答率是积极的并且保证进一步研究。

其他需要改进治疗的肿瘤疾病包括白血病，例如慢性淋巴细胞性白血病(如NHL、B细胞淋巴瘤)和急性淋巴细胞性白血病。

慢性淋巴样白血病(CLL)是最常见的白血病类型。CLL主要是成人疾病，大于75%的新诊断出的人超过50岁，但在极少数情况下它也见于儿童。联合化疗是普遍的治疗，例如氟达拉滨与环磷酰胺和/或利妥昔单抗，或更复杂的联合如CHOP或R-CHOP。

急性淋巴细胞性白血病，也称为急性成淋巴细胞性白血病(ALL)，主要是幼年期疾病，曾经具有基本上为零的存活率，但现在由于类似于上述提到的那些的联合化疗，具有高达75%的存活率。仍需要新的治疗来提供生存率方面的进一步改进。

现行的化疗剂通过由多种机理诱导细胞凋亡而引起它们的抗肿瘤应答。然而，许多肿瘤最终变得对这些药剂具有抗性。在体外和最近在体内短期存活试验中，Bcl-2和Bcl-X_L已经显示可赋予化疗抗性。这表明，如果可以开发针对抑制Bcl-2和Bcl-X_L的功能的改进治疗，则可以成功地克服这种化疗抗性。

国际专利公开号WO 2005/024636和WO 2005/049593中描述Bcl-2蛋白与膀胱癌、脑癌、乳腺癌、骨髓癌、宫颈癌、CLL、结直肠癌、食道癌、肝细胞癌、成淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑色素瘤、髓细胞性白血病、骨髓瘤、口腔癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、脾癌等相关。

例如Puck & Zhu (2003) Current Allergy and Asthma Reports 3:378–384；Shimazaki等人(2000) British Journal of Haematology 110(3):584–590；Rengan等人(2000) Blood 95(4):1283–1292；和Holzelova等人(2004) New England Journal of Medicine 351(14):1409–1418描述Bcl-2蛋白与免疫和自身免疫性疾病相关。美国专利申请公开号US 2008/0182845中公开Bcl-2蛋白与骨髓移植排斥相关。

占据Bcl-2蛋白上结合位点的化合物是已知的。为了在医疗上用于口服给予，这种化合物需要对Bcl-2家族蛋白，具体而言Bcl-2、Bcl-X_L和Bcl-w具有高结合亲和力，显示例如K_i <1 nM，优选<0.1 nM，更优选<0.01 nM。进一步期望以口服给予后提供高度全身暴露的方式调配。口服给予化合物后全身暴露的典型量度为以化合物的血浆浓度对从口服给予的时间作图所产生的曲线下面积(AUC)。

靶向Bcl-2家族蛋白(例如Bcl-2和Bcl-X_L)的细胞凋亡诱导药物最好根据提供连续(例如每日)补充血浆浓度的方案给予以维持该浓度在治疗有效范围内。这可通过每日肠胃外(例如静脉内(i.v.)或腹膜内(i.p.))给予来实现。然而，在临床情况下，尤其对于门诊患者而言，每日肠胃外给予通常是不实际的。为提高细胞凋亡诱导剂的临床应用性，例如作为癌症患者的化疗剂，将极其需要具有可接受的口服生物利用度的剂型。这种剂型及其口服给予方案将在许多类型癌症(包括NHL、CLL和ALL)的治疗中呈现重要优势，并将更容易地实现与其他化疗剂的联合治疗。

除物理和机械性质以外，细胞凋亡诱导剂的不同晶形可提供关于稳定性、溶解度、溶解速率、硬度、压缩性和熔点的不同性质。由于易于制造，所以细胞凋亡诱导剂的调配、储存和运输取决于这些形式中的至少一些，化学和治疗领域需要识别细胞凋亡诱导剂的新的盐和晶形以及再现地产生这种盐和晶形的方式。

发明概述

本公开涉及细胞凋亡诱导剂(本文称为“化合物1”)的盐和晶形，其具有系统名4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺，且其可由下式描绘：

。

在如本文所述合成化合物1后，产物可以无定形态粉末形式回收。化合物1的无定形形式可能并不十分适合用作各种类型下游制剂的活性药物组分(API)。更具体而言，化合物1的无定形形式可能难以纯化并因此纯化起来昂贵并且可能存在过程控制问题。

本公开提供一系列新颖的适于用作多种制剂类型中的API的化合物1的盐和晶形，包括API与赋形剂一起以微粒形式存在的那些，例如在可口服递送的片剂或胶囊剂中。如果在调配时晶形转化为非晶形(例如，溶液或无定形形式)，则化合物1的盐和晶形也可能是有用的。还包括制备化合物1的盐和晶形的方式。可使用化合物1的盐和晶形以调节和/或改良API的物理化学性质，包括固态性质(例如，结晶度、吸湿性、熔点、水合潜力、多形性等)、药物性质(例如，溶解度/溶解速率、稳定性、相容性等)和结晶特性(例如，纯度、产率、形态等)作为非限制性实例。

在一些实施方案中，化合物1的盐或晶形包括下列那些：具有PXRD图A的化合物1游离碱无水物、具有PXRD图B的化合物1游离碱无水物、具有PXRD图C的化合物1游离碱水合物、具有PXRD图D的化合物1游离碱水合物、具有图E的化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物、具有PXRD图F的化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物、具有PXRD图G的化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物、具有PXRD图H的化合物1游离碱乙腈溶剂合物、具有PXRD图I的化合物1游离碱乙腈溶剂合物、具有PXRD图J的化合物1游离碱丙酮溶剂合物、具有PXRD图K的化合物1盐酸盐、具有PXRD图L的化合物1盐酸盐水合物、具有PXRD图M的化合物1硫酸盐和具有PXRD图N的化合物1游离碱四氢呋喃(THF)溶剂合物，各自具有如本文所述的相应粉末X-射线衍射图。

在一些实施方案中，化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物、化合物1游离碱乙腈溶剂合物、化合物1盐酸盐和化合物1游离碱四氢呋喃溶剂合物的晶形具有如本文所述的相应晶格参数。

在另一实施方案中，提供化合物1盐酸盐。

在另一实施方案中，提供化合物1硫酸盐。

在一些实施方案中，提供包含化合物1作为API的API组合物，其中该组合物中至少一部分(例如至少约10%)化合物1呈盐或晶形形式。在一些实施方案中，所述组合物中大于95%或基本上100%的API是化合物1的盐或晶形。

在一些实施方案中，提供药物组合物，其包含如本文所述的化合物1的盐或晶形和一种或多种药学上可接受的赋形剂。

在一些实施方案中，提供制备化合物1的药物溶液组合物的方法，其中该方法包括溶解如本文所述的化合物1的盐或晶形与药学上可接受的溶剂或溶剂混合物。

在一些实施方案中，提供治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白的细胞凋亡功能障碍和/或过度表达的疾病的方法，其中该方法包括向患有该疾病的个体给予治疗有效量的(a)如本文所述的化合物1的盐或晶形或(b)包含如本文所述的化合物1的盐或晶形和一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

在一些实施方案中，提供治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白的细胞凋亡功能障碍和/或过度表达的疾病的方法，其中该方法包括制备本文所述的化合物1的盐或晶形在药学上可接受的溶剂或溶剂混合物中的溶液或分散体，和将所得的溶液或分散体以治疗有效量给予患有该疾病的受试者。

本发明的其他实施方案，包括上面所提供那些的具体方面，可以在随后的详细说明中得到，或可以通过随后的详细说明而变得显而易见。

附图简述

图1是化合物1无水物指定图A的PXRD扫描。

图2是化合物1无水物指定图B的PXRD扫描。

图3 是化合物1水合物指定图C的PXRD扫描。

图4是化合物1水合物指定图D的PXRD扫描。

图5是化合物1二氯甲烷溶剂合物指定图E的经计算PXRD图。

图6是化合物1乙酸乙酯溶剂合物指定图F的PXRD扫描。

图7化合物1乙酸乙酯溶剂合物指定图G的PXRD扫描。

图8是化合物1乙腈溶剂合物指定图H的经计算PXRD图。

图9是化合物1乙腈溶剂合物指定图I的PXRD扫描。

图10是化合物1丙酮溶剂合物指定图J的PXRD扫描。

图11是化合物1盐酸盐指定图K的经计算PXRD图。

图12是化合物1盐酸盐水合物指定图L的PXRD扫描。

图13是化合物1硫酸盐指定图M的PXRD扫描。

图14是化合物1四氢呋喃溶剂合物指定图N的PXRD扫描。

详细说明

为方便起见，本文所用术语“游离碱”是指不同于其任一盐的化合物1母体化合物，同时应认识到，严格来说，在中性条件下该母体化合物是两性离子，并因此不总是表现为真正碱。

细胞凋亡诱导剂(本文称为化合物1)具有系统名4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺，且可由下式描绘：

。

在各实施方案中，提供化合物1的盐和晶形。晶形包括化合物1的溶剂合物、水合物、无水物和盐。

与化合物1游离碱的无定形形式和化合物1盐的无定形形式相比，晶形的特征在于对晶形测量的粉末x-射线衍射(PXRD)图上存在可观测峰。对于经制备以得到合适大小单晶的晶形，可通过以实验方式测定单位晶胞参数，识别单晶所属结晶空间群或这二者来进一步表征晶形。在已知单位晶胞参数后，可计算衍射峰的定位并且具体而言PXRD图中峰的2θ值以进一步表征晶形。当然，还可以实验方式测量这种晶形的PXRD图。如果不仅已知晶胞参数而且已知三维单晶结构，则在晶形的进一步表征中不仅可计算衍射图中峰的位置而且可计算强度。

对于本文所报告的盐和晶形所测量或计算的PXRD图代表指纹图谱，其可与其他以实验方式测定的图进行比较以发现匹配。通过以实验方式测定的PXRD图与本文所报告晶形的PXRD图的重叠或匹配来建立相应晶形的一致性。在各实施方案中，盐和晶形的特征在于展示此处所报告的PXRD峰中的至少一种。因此，在各实施方案中，盐或晶形的特征在于各PXRD图的2个或更多个峰匹配、3个或更多个峰匹配、4个或更多个峰匹配、或5个或更多个峰匹配等。

下文给出化合物1(游离碱)和代表性中间体化合物的合成的实施方案。使用下列来命名示例性化合物：ACD/ChemSketch 5.06版(2001年6月05日，Advanced ChemistryDevelopment Inc.，Toronto，Ontario)、ACD/ChemSketch 12.01版(2009年5月13日)，Advanced Chemistry Development Inc.，Toronto，Ontario)或ChemDraw® 9.0.5版(CambridgeSoft，Cambridge，MA)。使用ChemDraw® 9.0.5版(CambridgeSoft，Cambridge，MA)来命名中间体。

化合物1的合成

4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺

化合物A

3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基)苯磺酰胺

将4-氟-3-硝基苯磺酰胺(2.18 g)、1-(四氢吡喃-4-基)甲胺(1.14 g)和三乙胺(1 g)在四氢呋喃(30 mL)中的混合物搅拌过夜，用浓HCl中和并浓缩。将残余物悬浮于乙酸乙酯中并收集沉淀，用水洗涤并干燥以提供标题化合物。

化合物B

4,4-二甲基-2-(三氟甲基磺酰基氧基)环己-1-烯甲酸甲酯

在0℃下向经己烷洗涤的NaH(17 g)的二氯甲烷(700 mL)悬浮液逐滴加入5,5-二甲基-2-甲氧基羰基环己酮(38.5 g)。搅拌30分钟后，将混合物冷却至–78℃并加入三氟乙酸酐(40 mL)。将反应混合物升至室温并搅拌24小时。用盐水洗涤有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，并浓缩以得到产物。

化合物C

2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯甲酸甲酯

将化合物B(62.15g)、4-氯苯基硼酸(32.24 g)、CsF(64 g)和四(三苯基膦)钯(0)(2g)的2:1二甲氧基乙烷/甲醇(600 mL)溶液加热至70℃，保持24小时。浓缩混合物。加入乙醚(4x200 mL)并过滤混合物。浓缩合并的乙醚溶液以得到产物。

化合物D

(2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯基)甲醇

通过注射器向LiBH₄(13g)、化合物C(53.8 g)和乙醚(400 mL)的混合物中缓慢加入甲醇(25 mL)。在室温下将混合物搅拌24小时。用1N HCl淬灭反应，同时用冰冷却。用水稀释混合物并用乙醚(3x 100 mL)萃取。干燥(Na₂SO₄)萃取物，过滤并浓缩。在硅胶上使用0-30%乙酸乙酯/己烷层析粗产物。

化合物E

4-((2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

在0℃下通过注射器将甲磺酰氯(7.5 mL)加入到化合物D (29.3 g)和三乙胺(30 mL)的CH₂Cl₂(500 mL)溶液中，并将混合物搅拌1分钟。加入N-叔丁氧基羰基哌嗪(25 g)并在室温下将混合物搅拌24小时。用盐水洗涤悬浮液，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。在硅胶上使用10-20%乙酸乙酯/己烷层析粗产物。

化合物F

1-((2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯基)甲基)哌嗪

在二氯甲烷(15 mL)和三氟乙酸(15 mL)中将化合物E(200 mg)和三乙基硅烷(1 mL)搅拌1小时。浓缩混合物，吸收于乙酸乙酯中，用NaH₂PO₄和盐水洗涤两次，并干燥(Na₂SO₄)，过滤和浓缩。

化合物G

5-溴-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶

向5-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(15.4 g)在四氢呋喃(250 mL)中的混合物加入1M 六甲基二硅烷胺化锂的四氢呋喃(86 mL)溶液，并在10分钟后加入TIPS-Cl (三异丙基氯硅烷) (18.2 mL)。在室温下将混合物搅拌24小时。用乙醚稀释反应，并将所得溶液用水洗涤两次。干燥(Na₂SO₄)萃取物，过滤并浓缩。在硅胶上使用10%乙酸乙酯/己烷层析粗产物。

化合物H

1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-醇

在-78℃下向化合物G(24.3 g)在四氢呋喃 (500 mL)中的混合物加入2.5M BuLi(30.3 mL)。2分钟后，加入硼酸三甲酯(11.5 mL)，并经1小时使混合物升至室温。将反应物倒入水中，用乙酸乙酯萃取三次，并用盐水洗涤合并的萃取物并浓缩。在0℃下将粗产物吸收于四氢呋喃(200 mL)中，并加入1M NaOH (69 mL)，随后加入 30% H₂O₂ (8.43 mL)，并将溶液搅拌1小时。加入Na₂S₂O₃ (10 g)，并用浓HCl和固体NaH₂PO₄将pH调节至4-5。将溶液用乙酸乙酯萃取两次，并用盐水洗涤合并的萃取物，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。在硅胶上使用5-25%乙酸乙酯/己烷层析粗产物。

化合物I

2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)-4-氟苯甲酸甲酯

在115℃下将化合物H(8.5 g)、2,4-二氟苯甲酸甲酯 (7.05 g)和K₃PO₄ (9.32 g在二乙二醇二甲醚(40 mL)中的混合物搅拌24小时。冷却反应，用乙醚(600 mL)稀释，并用水和盐水洗涤两次，并浓缩。在硅胶上使用2-50%乙酸乙酯/己烷层析粗产物。

化合物J

2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)-4-(4-((2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸甲酯

在135℃下将化合物I (1.55 g)、化合物F (2.42 g)和HK₂PO₄ (1.42 g)在二甲亚砜(20 mL)中的混合物搅拌24小时。冷却反应，用乙醚(400 mL)稀释，并用3x 1M NaOH和盐水洗涤，并浓缩。在硅胶上使用10-50%乙酸乙酯/己烷层析粗产物。

化合物K

2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)-4-(4-((2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸

在50℃下将化合物J (200 mg)的二噁烷(10 mL)和1M NaOH (6 mL)溶液搅拌24小时。冷却反应，加入到NaH₂PO₄溶液中，并用乙酸乙酯萃取三次。用盐水洗涤合并的萃取物，并浓缩以得到纯净产物。

化合物L (化合物1游离碱)

将化合物K (3.39 g)、化合物A (1.87 g)、1-乙基-3-[3-(二甲基氨基)丙基]-碳二亚胺盐酸盐 (2.39 g)和4-二甲基氨基吡啶 (1.09 g)在CH₂Cl₂ (40 mL)中搅拌24小时。冷却反应并在硅胶上使用25-100%乙酸乙酯/己烷、然后使用具有1%乙酸的10%甲醇/乙酸乙酯层析，得到呈固体形式的产物 (1.62 g，32%)。

化合物1游离碱的制备也描述于标题为“用于治疗癌症以及免疫和自身免疫疾病的细胞凋亡诱导剂(Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer andimmune and autoimmune diseases)”的美国申请序列号12/787,682 (公开为U.S. 2010/0305122)的实施例5中，其全部公开内容以引用的方式并入本文中。可自层析洗脱液制备固体；例如，通过使用冷冻干燥、沉淀或旋转蒸发技术。该过程的产物可为具有无定形特征的固体。

已如以下实施例中所述制备化合物1的盐和晶体形式。

化合物1游离碱无水物 (PXRD 图A)

以下两种途径可制备该晶形，其中在环境条件下干燥涉及在室温下留下固体材料和暴露于空气过夜。例如，可使溶剂蒸发。

实施例1：在环境条件下干燥化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物，其具有图E(参见下文)。

实施例2：在环境条件下干燥化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物，其具有图F(参见下文)。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图1和表1中。

表1：化合物1游离碱无水物图A的峰列表

化合物1游离碱无水物 (PXRD 图B)

实施例3：在环境条件下干燥化合物1游离碱乙腈溶剂合物图H。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图2和表2中。

表2：化合物1游离碱无水物图B的峰列表

化合物1游离碱水合物(PXRD图C)

可以三种方式制备特征在于图C的游离碱水合物。

实施例4：在环境条件下干燥化合物1游离碱甲醇溶剂合物。

实施例5：在环境条件下干燥化合物1游离碱乙醇溶剂合物。

实施例6：在环境条件下干燥化合物1游离碱2-丙醇溶剂合物。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图3和表3中。

表3：化合物1游离碱水合物图C的峰列表

化合物1游离碱水合物(PXRD图D)

实施例7：在环境条件下干燥化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物图G。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图4和表4中。

表4：化合物1游离碱水合物图D的峰列表

化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物(PXRD图E)

实施例8：在环境温度下将化合物1游离碱固体悬浮于二氯甲烷中以达到其溶解度。平衡后，在环境温度下分离出固体。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图5和表5A中。结晶信息列于表5B中。

表5A：化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物图E的经计算PXRD峰列表

表5B：化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物单晶的结构信息

晶体形式	化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物
		晶格类型	单斜
空间群	P21/n
		a (Å)	13.873
b (Å)	12.349
		c (Å)	29.996
α (°)	90.00
		β (°)	92.259
γ (°)	90.00
		体积(Å³)	5134.85
Z	4

化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物(PXRD图F)

实施例9：在环境温度下将化合物1游离碱固体悬浮于乙酸乙酯中以达到其溶解度。平衡后，在环境温度下分离出固体。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图6和表6中。

表6：化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物图F的PXRD峰列表

化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物(PXRD图G)

实施例10：在环境温度下将化合物1游离碱固体悬浮于经水饱和的乙酸乙酯中以达到其溶解度。平衡后，在环境温度下分离出固体。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图7和表7中。

表7：化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物图G的PXRD峰列表

化合物1游离碱乙腈溶剂合物(PXRD图H)

实施例11：在环境温度下将化合物1游离碱固体悬浮于乙腈中以达到其溶解度。平衡后，在环境温度下分离出固体。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图8和表8A中。结晶信息列于表8B中。

表8A：化合物1游离碱乙腈溶剂合物图H的经计算PXRD峰列表

表8B：化合物1游离碱乙腈溶剂合物H单晶的结构信息

晶体形式	化合物1游离碱乙腈溶剂合物A
		晶格类型	三斜
空间群	P1
		a (Å)	12.836
b (Å)	13.144
		c (Å)	15.411
α (°)	92.746
		β (°)	95.941
γ (°)	113.833
		体积(Å³)	2354.06
Z	2

化合物1游离碱乙腈溶剂合物(PXRD图I)

实施例12：向2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)-4-(4-((2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酸(16g，28mmol)和3-硝基-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基氨基)苯磺酰胺(8.83g，28mmol)的DCM(300mL)溶液中加入EDCI(10.74g，56mmol)和DMAP(6.85g，56mmol)。在室温下将混合物搅拌过夜。LC/MS显示预期产物为单峰。用DCM(500ml)稀释混合物并用NaHCO3水溶液、水、盐水洗涤并经Na2SO4干燥。蒸发掉溶剂后，将残留物溶解于DCM中并负载于柱上并用30%乙酸乙酯的DCM溶液、随后用1至2% MeOH的DCM溶液洗脱，得到24.5g纯净产物(纯度95%)，将其溶解于DMSO和MeOH(1:1)以及TFA(2eq)中并负载于330g C18柱上(每次6g)以得到13.5g纯净(纯度>99.7%)产物(产率55%)。使用二氯甲烷萃取API并且然后使用旋转蒸发仪去除溶剂。在环境温度下将所得固体悬浮于乙腈中以达到其溶解度。平衡后，在环境温度下分离出固体。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图9和表9中。

表9：化合物1游离碱乙腈溶剂合物图I的PXRD峰列表

化合物1游离碱丙酮溶剂合物(PXRD图J)

实施例13：在环境温度下将化合物1游离碱固体悬浮于丙酮中以达到其溶解度。平衡后，在环境温度下分离出固体。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图10和表10中。

表10：化合物1游离碱丙酮溶剂合物图J的PXRD峰列表

化合物1盐酸盐(PXRD图K)

实施例14：将化合物1游离碱固体(16 mg，0.018 mmol)悬浮于0.5 mL乙腈中。将盐酸(1M，25 µL)加入到悬浮液中，同时搅拌(化合物1:酸的摩尔比 = 1:1.4)。化合物1迅速与盐酸反应并形成透明溶液。经证实，淡黄色固体(随后从溶液中结晶)是以1:1的游离碱比HCl的化学计量比的化合物1盐酸盐。

粉末X-射线衍射图和峰列表可分别示于图11和表11A中。结晶信息列于表11B中。

表11A：化合物1盐酸盐图K的经计算PXRD峰列表

表11B：化合物1盐酸盐的结构信息

晶体形式	化合物1盐酸盐
		晶格类型	三斜
空间群	P1
		a (Å)	10.804
b (Å)	12.372
		c (Å)	19.333
α (°)	76.540
		β (°)	87.159
γ (°)	70.074
		体积(Å³)	2361.5
Z	2

化合物1盐酸盐水合物(PXRD图L)

实施例15：在环境条件下将化合物1盐酸盐固体(具有图K)暴露于空气，并且经证实其是化合物1盐酸盐水合物。

粉末X-射线衍射图和峰列表可分别见于图12和表12中。

表12：化合物1盐酸盐水合物图L的PXRD峰列表

化合物1硫酸盐(PXRD图M)

实施例16：在70℃下将化合物1游离碱固体(16 mg，0.018 mmol)悬浮于 0.5 mL的2-丙醇中。将硫酸 (1M，25 µL)加入到悬浮液中，同时搅拌 (化合物1:酸的摩尔比= 1:1.4)。化合物1通过与硫酸反应而迅速溶解。淡黄色固体在发生溶解后立即从溶液中结晶。使用离子层析证实结晶固体是化合物1硫酸盐，其中化学计量学为1:1。

粉末X-射线衍射图和峰列表可分别见于图13和表13中。

表13：化合物1硫酸盐图M的PXRD峰列表

化合物1游离碱THF溶剂合物(PXRD图N)

实施例17：在环境温度下将化合物1游离碱固体悬浮于四氢呋喃(THF)中以达到其溶解度。平衡后，在环境温度下分离出固体。

粉末X-射线衍射图和峰列表分别示于图14和表14中。

表14：化合物1游离碱THF溶剂合物图N的PXRD峰列表

使用配备有弯曲位置敏感检测器和平行光束光学仪器的G3000衍射仪(InelCorp.，Artenay，France)来收集PXRD数据。利用铜阳极管(1.5 kW细焦点)以40 kV和30 mA操作衍射仪。入射光束锗单色器提供单色辐射Cu–K_α辐射，其波长为1.54178 Å。使用衰减直射光束以1度间隔校正衍射仪。使用硅粉直线位置参考标准(NIST 640c)检查校正。使用Symphonix软件(Inel Corp.，Artenay，France)经电脑控制该仪器并使用Jade软件(6.5版，Materials Data Inc.，Livermore，CA)分析数据。将样品负载于铝样品架上并用载玻片弄平。PXRD峰位置测量值通常±0.2度2-θ(° 2θ)。

在一些实施方案中，本文所述化合物1的盐或晶形中任一种的结晶度百分数可相对于化合物1的总量有所不同。具体而言，某些实施方案提供具有以下结晶度百分数的化合物1的盐或晶形：至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至少99%。在一些实施方案中，结晶度百分比可为实质上100%，其中实质上100%表示整个数量的化合物1似乎均结晶，如最好可使用本领域已知的方法测定。因此，药物组合物和治疗有效量的化合物1可包括结晶度不同的量。这些包括化合物1用作各种制剂和固体形式中的API的情况，包括使一定量呈固体形式的化合物1随后溶解、部分溶解、或悬浮或分散于液体中的情况。

应注意，在一些实施方案中，提供包含化合物1的API组合物，其中该API组合物中的至少一部分化合物1呈盐或晶形之一。例如，含有化合物1的API组合物在该组合物中具有至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至少99%的化合物呈盐或晶形之一。在一些实施方案中，API制剂中基本上100%的化合物1呈如本文所述的盐或晶形形式。

化合物1的任一晶形(包括盐和溶剂合物形式)均可用作制备药物组合物的活性药物成分(API)。然而，对于该目的，无溶剂形式通常是优选的。对于该目的，将水合物视为无溶剂。如上文所指示，溶剂化形式可用作制备无溶剂形式的过程中间体。化合物1盐和晶形可用于制备适于以各种途径(包括口服)给予需要其的受试者的药物组合物。因此，在一些实施方案中，提供包含化合物1的晶形和一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。可使用各种已知的药学方法来制备这种组合物。

根据任一这些实施方案，组合物可通过例如口服途径递送。其他给予途径包括但不限于肠胃外、舌下、口腔、鼻内、肺部、局部、透皮、皮内、眼睛、耳部、直肠、阴道、胃内、颅内、滑膜内和关节内途径。

若需要提供呈溶液形式的化合物1游离碱或盐，例如呈用于口服或肠胃外给予的液体制剂时，则化合物1游离碱或盐当然不可呈晶形存在于该制剂中；实际上，通常不期望在这种制剂中存在晶体。然而，尽管如此，化合物1游离碱的晶形在制备这种制剂的方法中仍具有作为API的重要性。因此，本公开进一步提供制备化合物1的药物溶液组合物的方法，其包括将化合物1游离碱的结晶盐或晶形溶解于药学上可接受的溶剂或溶剂混合物中。即使如果所需的制剂是含无定形形式化合物1游离碱的制剂(例如，固体熔融制剂)时，化合物1游离碱的晶形仍可在制备这种制剂的方法中用作API。

作为API时，化合物1游离碱的晶形或其混合物可具有优于无定形形式的优点。例如，将API纯化至大多数法规机构所要求的高纯度时，可能更有效，并且因此成本更低，其中API呈晶形而不是无定形形式。API固体的结晶的物理和化学稳定性和因此半衰期也优于无定形形式。操作便利性经改良可优于具有油性或粘性的无定形形式。结晶材料(其具有充分界定的干燥或去溶剂化温度)的干燥比无定形形式材料(其对有机溶剂具有较大亲和力并且没有可充分界定的干燥温度)更简单且更易于控制。使用结晶API的下游处理可进一步允许加强过程控制。在制备液体制剂(例如，在脂质载体中的溶液)期间，结晶化合物1可更快溶解并且在溶解期间可降低形成凝胶的倾向。这些优点是说明性的而非限制性的。

包含结晶化合物1游离碱或使用化合物1的结晶化合物1游离碱或盐作为API制备的药物组合物所含化合物1的量在根据适当方案将该组合物给予需要其的受试者时可以是治疗有效的。除非上下文另外要求，否则在本文中，以游离碱等效量表示剂量。通常，可以适当频率(例如，每日两次至每周一次)给予的单位剂量(单一时间给予的量)是约10至约1,000 mg。若给予频率是每日一次(q.d.)，则单位剂量与每日剂量相同。举例说明地，化合物1在本发明组合物中的单位计量可为约25至约1,000 mg、更通常约50至约500 mg，例如约50、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450或约500 mg。若组合物制备为离散剂型(例如片剂或胶囊剂)，则单位剂量可以单一剂型或少数几个剂型，最通常1个至约10个剂型递送。

单位剂量越高，则更需要选择可允许在制剂中相对较高的API(在该情况下为化合物1游离碱或盐)负载量的赋形剂。通常，化合物1游离碱在根据本公开制备的制剂中的浓度是至少约1重量%，例如约1重量%至约25重量%，但在特定情形下更低和更高浓度可能是可接受的或可达到的。举例说明地，在各实施方案中，化合物1游离碱等效浓度是制剂重量的至少约2重量%，例如约2重量%至约20重量%，例如约5重量%、约10重量%或约15重量%。

根据本发明制备的组合物除API外还包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。如果组合物以用于口服给予的固体形式(例如，作为片剂或胶囊剂)制备，则其通常包括至少一种或多种固体稀释剂和一种或多种固体崩解剂。任选地，赋形剂进一步包括一种或多种粘合剂、润湿剂和/或抗摩擦剂(润滑剂、防粘剂和/或助流剂)。许多赋形剂在药物组合物中具有两种或更多种功能。具有某一功能的特定赋形剂(例如，稀释剂、崩解剂、粘合剂等)在本文中的表征不应理解为对该功能具有限制性。关于赋形剂的其他信息可见于标准参考著作，例如Handbook of Pharmaceutical Excipients，第3版(Kibbe编辑，(2000)，Washington：American Pharmaceutical Association)。

举例说明地，合适稀释剂单独或联合地包括：乳糖，包括无水乳糖和乳糖一水合物；乳糖醇；麦芽糖醇；甘露糖醇；山梨糖醇；木糖醇；葡萄糖和葡萄糖一水合物；果糖；蔗糖和蔗糖基稀释剂，例如可压缩糖、糖果店的糖和糖球；麦芽糖；肌醇；水解谷物固体；淀粉(例如，玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉等)，淀粉组分，例如直链淀粉和葡萄糖结合剂(dextrate)，和改性或加工的淀粉，例如预胶凝淀粉；糊精；纤维素，包括粉末纤维素、微晶纤维素、硅化微晶纤维素、α-和无定形纤维素和粉末纤维素的食品级来源，和醋酸纤维素；钙盐，包括碳酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙二水合物、一碱式硫酸钙一水合物、硫酸钙和颗粒状乳酸钙三水合物；碳酸镁；氧化镁；膨润土；高岭土；氯化钠；等等。这种稀释剂如果存在的话通常总计占组合物重量的约5%至约95%，例如约20%至约90%或约50%至约85%。优选地，所选择的一种或多种稀释剂显示出合适的流动特性，并且如果在期望片剂的情况下显示出可压缩性。

微晶纤维素和硅化微晶纤维素是特别有用的稀释剂，并且任选与水溶性的稀释剂(例如甘露糖醇)组合使用。举例说明地，微晶纤维素或硅化微晶纤维素与甘露糖醇的合适重量比为约10:1至约1:1，但在特定情况下可使用该范围外的比例。

合适的崩解剂单独或联合地包括：淀粉，包括预胶凝淀粉和羟乙酸淀粉钠；粘土；硅酸镁铝；纤维素基崩解剂，例如粉末纤维素、微晶纤维素、甲基纤维素、低取代的羟丙基纤维素、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、羧甲纤维素钠和交联羧甲纤维素钠；海藻酸盐；聚维酮；交联聚维酮；聚克利林钾(polacrilin potassium)；树胶，例如琼脂、瓜尔胶、槐豆、刺梧桐树胶、果胶和黄蓍胶；胶体二氧化硅；等等。一种或多种崩解剂如果存在的话通常总计占组合物重量的约0.2%至约30%，例如约0.5%至约20%，或约1%至约10%。

羟乙酸淀粉钠是特别有用的崩解剂，并且通常总计占组合物重量的约1%至约20%，例如约2%至约15%，或约5%至约10%。

粘合剂或粘附剂是有用的赋形剂，尤其在组合物是片剂形式的情况下。这种粘合剂和粘附剂应赋予所压片的掺合物足够的粘合性以允许正常加工操作，例如筛分、润滑、压缩和包装，但仍允许片剂崩解并在消化时吸收组合物。合适的粘合剂和粘附剂单独或联合地包括：阿拉伯胶；黄蓍胶；葡萄糖；聚葡萄糖；淀粉，包括预胶凝淀粉；明胶；改性纤维素，包括甲基纤维素、羧甲纤维素钠、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素和乙基纤维素；糊精，包括麦芽糖糊精；玉米蛋白；海藻酸和海藻酸的盐，例如海藻酸钠；硅酸镁铝；膨润土；聚乙二醇(PEG)；聚环氧乙烷；瓜尔胶；多糖酸；聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮或PVP)，例如聚维酮K-15、K-30和K-29/32；聚丙烯酸(卡波姆)；聚甲基丙烯酸酯；等等。一种或多种粘合剂和/或粘附剂(如果存在的话)通常总计占组合物重量的约0.5%至约25%，例如约1%至约15%，或约1.5%至约10%。

单独或联合的聚维酮和羟丙基纤维素是特别有用的片剂制剂的粘合剂，并且如果存在的话，通常占组合物重量的约0.5%至约15%，例如约1%至约10%，或约2%至约8%。

如果存在的话，通常选择润湿剂以保持药物与水紧密结合，这种条件可以提高组合物的生物利用度。可以用作润湿剂的表面活性剂的非限制性实例单独或联合地包括：季铵化合物，例如苯扎氯铵、苄索氯铵和西吡氯铵；琥珀磺酸二辛钠；聚氧乙烯烷基苯基醚，例如壬苯醇醚9(nonoxynol 9)、壬苯醇醚10和辛苯醇醚9；泊洛沙姆(聚氧乙烯和聚氧丙烯嵌段共聚物)；聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和油，例如聚氧乙烯(8)辛酸/癸酸甘油单酯和甘油二酯，聚氧乙烯(35)蓖麻油和聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油；聚氧乙烯烷基醚，例如鲸蜡醇聚醚-10，月桂醚-4，月桂醚-23，油醇聚醚-2，油醇聚醚-10，油醇聚醚-20，硬脂醇聚醚-2，硬脂醇聚醚-10，硬脂醇聚醚-20，硬脂醇聚醚-100和聚氧乙烯(20)鲸蜡醇醚；聚氧乙烯脂肪酸酯，例如聚氧乙烯(20)硬脂酸酯、聚氧乙烯(40)硬脂酸酯和聚氧乙烯(100)硬脂酸酯；脱水山梨糖醇酯，例如脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯和脱水山梨糖醇单硬脂酸酯；聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯，例如聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80；丙二醇脂肪酸酯，例如丙二醇月桂酸酯；月桂基硫酸钠；脂肪酸及其盐，例如油酸、油酸钠和油酸三乙醇胺；甘油基脂肪酸酯，例如单油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯和硬脂酸棕榈酸甘油酯；泰洛沙泊(tyloxapol)；等等。一种或多种润湿剂如果存在的话通常总计占组合物重量的约0.1%至约15%，例如约0.2%至约10%，或约0.5%至约7%。

非离子型表面活性剂，更尤其是泊洛沙姆，是本文可以有用的润湿剂的实例。举例说明地，泊洛沙姆，例如Pluronic^TM F127如果存在的话，通常占组合物重量的约0.1%至约10%，例如约0.2%至约7%，或约0.5%至约5%。

在片剂制剂的压缩期间，润滑剂降低压片混合物和压片设备之间的摩擦。合适的润滑剂单独或联合地包括：山嵛酸甘油酯；硬脂酸和其盐，包括硬脂酸镁、硬脂酸钙和硬脂酸钠；氢化植物油；硬脂酸棕榈酸甘油酯；滑石；蜡；苯甲酸钠；乙酸钠；富马酸钠；硬脂基富马酸钠；PEGs(例如，PEG 4000和PEG 6000)；泊洛沙姆；聚乙烯醇；油酸钠；月桂基硫酸钠；月桂基硫酸镁；等等。一种或多种润滑剂如果存在的话通常总计占组合物重量的约0.05%至约10%，例如约0.1%至约5%，或约0.2%至约2%。硬脂基富马酸钠是特别有用的润滑剂。

防粘剂降低片剂制剂与设备表面的粘附。合适的防粘剂单独或联合地包括：滑石、胶体二氧化硅、淀粉、DL-亮氨酸、月桂基硫酸钠和金属硬脂酸盐。一种或多种防粘剂如果存在的话通常总计占组合物重量的约0.05%至约10%，例如约0.1%至约7%，或约0.2%至约5%。胶体二氧化硅是特别有用的防粘剂。

助流剂提高压片混合物中的流动特性，并且降低其中的静电。合适助流剂单独或联合地包括：胶体二氧化硅、淀粉、粉末纤维素、月桂基硫酸钠、三硅酸镁和金属硬脂酸盐。一种或多种助流剂如果存在的话通常总计占组合物重量的约0.05%至约10%，例如约0.1%至约7%，或约0.2%至约5%。胶体二氧化硅是特别有用的助流剂。

其他赋形剂(例如缓冲剂、稳定剂、抗氧化剂、抗微生物剂、着色剂、矫味剂和甜味剂)在药物领域是已知的，并且可用于本发明的组合物中。片剂可以是无包衣的，或可以包含被包衣的核，例如，用非功能的膜或释放改进包衣或肠溶包衣。胶囊剂可以具有硬或软壳，其包含例如明胶(硬明胶胶囊或软弹性明胶胶囊形式)、淀粉、角叉菜胶和/或HPMC，任选连同一种或多种增塑剂。

本发明的固体口服递送组合物不受其制备所用的任何方法限制。可以使用任何合适的药学方法，包括直接压缩或不直接压缩下干混，和湿法或干法制粒。

如果要以液体(包括包封液体)形式制备组合物，则API(例如，结晶化合物1游离碱或盐)可例如溶于合适的载体(通常是包含用于API的脂质溶剂的载体)中。单位剂量越高，则更需要选择在其溶液中允许较高药物浓度的载体。通常，载体中API的游离碱当量浓度是至少约10 mg/ml，例如约10至约500 mg/ml，但在特定情况下，更低或更高浓度是可接受的或可达到的。举例说明地，在各种实施方案中，药物浓度为至少约10 mg/ml，例如，约10至约250 mg/ml，或至少约20 mg/ml，例如，约20至约200 mg/ml，例如约20、约25、约30、约40、约50、约75、约100或约150 mg/ml。

载体可以是基本上非水性的，即不含水，或具有水的量足够小以实际上对组合物的性能或性质基本上无害。通常，载体包含零至小于约5%重量的水。应理解，本文可用的某些组分可以在其分子或超分子结构之上或之内结合少量水；这种结合水如果存在的话不影响如本文所定义的载体的“基本上非水性”特征。

在一些实施方案中，载体包括一种或多种甘油酯材料。合适的甘油酯材料包括但不限于：中至长链甘油单、二和三酯。本文中的术语“中链”是指单独地具有不少于约6个和少于约12个碳原子的烃基链，包括例如C₈至C₁₀链。由此，包含辛酰基和癸酰基链的甘油酯材料，例如，辛酸/癸酸甘油单、二和/或三酯是本文中的“中链”甘油酯材料的实例。本文中的术语“长链”是指单独具有至少约12个碳原子的烃基链，例如约12至约18个碳原子，包括例如月桂基、肉豆蔻基、鲸蜡基、硬脂基、油基、亚油基和亚麻基链。甘油酯材料中的中至长链烃基可以是饱和的、单-或多不饱和的。

在一个实施方案中，载体包含中链和/或长链甘油三酯材料。中链甘油三酯材料的合适实例是辛酸/癸酸甘油三酯产品，例如，Abitec Corp.的Captex 355 EP^TM和与其基本上等价的产品。长链甘油三酯的合适实例包括任何药学上可接受的植物油，例如芥花油、椰油、玉米油、棉籽油、亚麻籽油、橄榄油、棕榈油、花生油、红花油、芝麻油、大豆油和向日葵油以及这些油的混合物。还可以使用动物、尤其是海洋动物来源的油，包括例如鱼油。

在一些实施方案中，载体包含磷脂和药学上可接受的磷脂增溶剂。应理解，本文中以单数形式提及的磷脂、增溶剂或其他制剂成分包括复数；由此，本文明确地考虑多于一种的磷脂或多于一种的增溶剂的组合，例如混合物。增溶剂或增溶剂和磷脂的组合也增溶药物，尽管在一些情况下任选存在于载体中的其他载体组分，例如表面活性剂或醇如乙醇提供增强的药物增溶作用。

可以使用任何药学上可接受的磷脂或磷脂的混合物。通常，这种磷脂是水解时所产生磷酸、脂肪酸、醇和含氮碱基的磷酸酯。药学上可接受的磷脂可以包括但不限于：磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺。在一个实施方案中，组合物包括从例如天然卵磷脂得到的磷脂酰胆碱。可以使用卵磷脂的任何来源，包括动物来源，例如蛋黄，但通常优选植物来源。大豆是尤其充足的卵磷脂源，其可以提供本发明中使用的磷脂酰胆碱。

举例说明地，磷脂的合适数量为载体重量的约15%至约75%，例如约30%至约60%，但在特定情况下可使用更大和更小量。

对用作增溶剂组分的成分没有特别限制，并且其在某种程度上取决于药物和磷脂的期望浓度。在一个实施方案中，增溶剂包括一种或多种二醇和/或一种或多种甘油酯材料。

合适的二醇包括丙二醇和聚乙二醇(PEGs)，其具有约200至约1,000 g/mol的分子量，例如PEG-400，其具有约400 g/mol的平均分子量。这种二醇可以提供相对高的药物溶解度；然而，在包含这种二醇的载体中的溶液中时，例如，由于二醇倾向于产生超氧化物、过氧化物和/或游离羟基基团，因此可增加药物氧化降解的可能性。载体中二醇含量越高，则化学不稳定药物的降解倾向可能越大。因此，在一个实施方案中，一种或多种二醇以载体重量的至少约1%但少于约50%，例如少于约30%，少于约20%，少于约15%或少于约10%的二醇总量存在。在另一个实施方案中，载体基本上不包含二醇。

与磷脂一起使用的合适甘油酯材料包括但不限于上述那些。在一种或多种甘油酯材料作为增溶剂的主要组分存在的情况下，甘油酯的合适总量是有效增溶磷脂，与载体的其他组分的组合，和有效保持溶液中药物和抗氧化剂的量。例如，甘油酯材料(例如，中链和/或长链甘油三酯)可以以载体重量的约5%至约70%，例如约15%至约60%或约25%至约50%的总甘油酯量存在。

如果需要的话，可以包括除二醇或甘油酯材料以外的其他增溶剂。这种试剂，例如N-取代的酰胺溶剂，如二甲基甲酰胺(DMF)和N,N-二甲基乙酰胺(DMA)，可以在特定情况下有助于提高药物在载体中的溶解度限度，由此允许增加的药物负荷。然而，包括DMF和DMA的N-取代酰胺会出现调控和/或毒理学问题，从而限制可用于制剂中的这种溶剂的量。此外，在无这种其他试剂的情况下，本文可用的载体通常提供本文感兴趣的小分子药物的适当溶解度。

即使当存在足量的二醇或甘油酯材料来增溶磷脂时，所得到的载体溶液和/或药物-载体系统可能相当粘稠，并且难以或不便于操作。在此情况下，发现可能期望的是，在载体中包含粘度降低剂，其数量有效提供可以接受的低粘度。这种试剂的实例是醇，更尤其是乙醇，其优选以基本上无水的形式引入，例如99%乙醇、脱水醇USP或无水乙醇。然而，通常应避免过高浓度的乙醇。这尤其在例如以明胶胶囊形式给予药物-载体系统的情况下是正确的，这是因为高乙醇浓度具有导致胶囊机械破损的倾向。通常，乙醇的合适数量是载体重量的0%至约25%，例如约1%至约20%，或约3%至约15%。

任选地，载体进一步包含药学上可接受的非磷脂表面活性剂。本领域技术人员将能够选择合适的表面活性剂用于本发明组合物。举例说明地，表面活性剂，例如聚山梨醇酯80可以以载体重量的0%至约5%，例如0%至约2%或0%至约1%的量纳入。

方便地，可应用预先混合的产品，其包含合适的磷脂+增溶剂组合用于本发明的组合物。预先混合的磷脂+增溶剂产品在改进本组合物的制备容易性方面可以具有优势。

预先混合的磷脂+增溶剂产品的说明性实例是Phosal 50 PG^TM，可得自Phospholipid GmbH，Germany，其包含不小于50重量%的磷脂酰胆碱、不超过6重量%的溶血磷脂酰胆碱、约35重量%的丙二醇、约3重量%的甘油单酯和甘油二酯(得自于向日葵油)、约2重量%的大豆脂肪酸、约2重量%的乙醇和约0.2重量%的抗坏血酸棕榈酸酯。

另一个说明性实例是Phosal 53 MCT^TM，也可得自Phospholipid GmbH，其包含不小于53重量%的磷脂酰胆碱、不超过6重量%的溶血磷脂酰胆碱、约29重量%的中链甘油三酯、3-6重量%(通常约5重量%)的乙醇、约3重量%的甘油单酯和甘油二酯(得自于向日葵油)、约2重量%的油酸和约0.2重量%的抗坏血酸棕榈酸酯(参考组合物)。本文中，含有上述或基本上等价组成的产品(无论是否以Phosal 53 MCT^TM商标销售)一般称为“磷脂酰胆碱+中链甘油三酯53/29”。在本上下文中，含有“基本上等价组成”的产品是指在其成分列表和成分的相对量方面含有与参考组合物充分相似的组成，从而在相对于本文产品使用的性能方面不显示出实际差别。

又一个说明性实例是Phosal 50 SA+^TM，也可得自Phospholipid GmbH，其在包含红花油及其他成分的增溶系统中包含不小于50重量%的磷脂酰胆碱和不超过6重量%的溶血磷脂酰胆碱。

这些预先混合产品中每一种的磷脂酰胆碱组分可源自于大豆卵磷脂。基本上等价组成的产品可以从其他供应商获得。

在一些实施方案中，预先混合的产品，例如Phosal 50 PG^TM、Phosal 53 MCT^TM或Phosal 50 SA+^TM可以基本上构成整个载体系统。在其他实施方案中，存在其他成分，例如乙醇(对于可能存在于预先混合产品中的任何来说是额外的)，非磷脂表面活性剂例如聚山梨醇酯80、聚乙二醇和/或其他成分。这种额外的成分如果存在的话通常只以微小数量包含。举例说明地，磷脂酰胆碱+中链甘油三酯53/29可以以载体重量的约50%至100%，例如约80%至100%的量包括在载体中。

不受理论束缚，认为化合物1的治疗效力至少部分是由于其与Bcl-2家族蛋白(例如Bcl-2、Bcl-X_L或Bcl-w)结合的能力，所述结合是以抑制该蛋白的抗细胞凋亡作用的方式，例如，通过占据该蛋白的BH3结合沟。

在本发明的再一些实施方案中，提供治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白的细胞凋亡功能障碍和/或过度表达的疾病的方法，其包括向患有该疾病的受试者给予治疗有效量的结晶化合物1游离碱或包含化合物1游离碱的盐或晶形和一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

在本发明的再一些实施方案中，提供治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白的细胞凋亡功能障碍和/或过度表达的疾病的方法，其中该方法包括制备本文所述化合物1的盐或晶形在药学上可接受的溶剂或溶剂混合物中的溶液或分散体，和将所得溶液或分散体以治疗有效量给予患有该疾病的受试者。

该受试者可以是人类或非人类(例如，农场、动物园、工作或陪伴动物，或用作模型的实验室动物)，但在一个重要的实施方案中，该受试者是需要该药物来例如治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白的细胞凋亡功能障碍和/或过度表达的疾病的人类患者。人类受试者可以是男性或女性，并且可以是任何年龄，但通常是成人。

通常以提供药物的治疗有效每日剂量的数量来给予组合物。本文中，术语“每日剂量”是指每日给予的药物数量，与给予频率无关。例如，如果受试者接受每日两次的150 mg的单位剂量，则每日剂量是300 mg。应理解，术语“每日剂量”的使用并不暗示必须每日给予一次指定剂量数量。然而，在一个具体实施方案中，给予频率是每日一次(q.d.)，并且每日剂量和单位剂量在该实施方案中是相同的事务。

决定治疗有效剂量的因素取决于具体制剂的生物利用度，受试者(包括受试者的物种和体重)，待治疗的疾病(例如，癌症的具体类型)，疾病的阶段和/或严重程度，各个受试者的化合物耐受性，化合物是否是以单一疗法或与一种或多种其他药物(例如，用于治疗癌症的其他化疗药物)组合给予，及其他因素。因此，每日剂量可以在宽的范围内改变，例如，从约10至约1,000 mg。在特定情况下，更大或更小的每日剂量可以是合适的。应理解，如果仅仅给予单个这种剂量，则本文的“治疗有效”剂量在本文中的叙述不必须要求该药物是治疗有效的；通常，治疗效力取决于按照方案(牵涉给予的合适频率和持续时间)反复给予的组合物。极优选地，尽管所选择的每日剂量就治疗癌症而言足以提供益处，但该每日剂量不应该足以引起不利的副作用达到无法接受的或无法忍受的程度。不应用过度实验，基于本文公开的内容和本文引用的技术，考虑例如上述那些因素，可以由常规技术的医生选择合适的治疗有效剂量。医生可以例如用相对低的每日剂量对癌症患者开始治疗过程，并在几天或几周期间内逐渐调高剂量，以减少不利副作用的危险。

举例说明地，化合物1的合适剂量通常是约25至约1,000 mg/天或约50至约1,000mg/天，更通常约50至约500 mg/天或约200至约400 mg/天，例如约50、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约750或约1000 mg/天，以约3小时至约7天的平均剂量间隔给予，例如，约8小时至约3天，或约12小时至约2天。在大多数情况下，每日一次(q.d.)的给予方案是合适的。

本文中“平均剂量间隔”定义为时间跨度(例如一天或一周)除以该时间跨度内所给予的单位剂量次数。例如，如果每日在8 am左右、中午左右和6 pm左右给予药物三次，则平均剂量间隔是8小时(24小时时间跨度除以3)。如果将药物配制为离散剂型，例如片剂或胶囊剂，则为了定义平均剂量间隔，将一次给予的多个(例如，2至约10)剂型视为一单位剂量。

根据本发明制备的组合物适合于在单一疗法或联合治疗中使用，例如，与其他化疗药物或电离辐射一起使用。本发明的一个特别优点是其允许每日一次口服给予，这种方案便于用其他口服给予药物基于每日一次的方案进行治疗的患者。患者本人或由护理者在患者家中容易完成口服给予；口服给予对于在医院或家庭护理环境中的患者来说也是方便的给予途径。

举例说明地，联合治疗包括同时给予包含化合物1的一种或多种晶形(包括结晶盐形式)的(或使用化合物1的一种或多种晶形作为API制备的)组合物与下列中的一种或多种：硼替佐米、卡铂、顺铂、环磷酰胺、达卡巴嗪、地塞米松、多西他赛、多柔比星、依托泊苷、氟达拉滨、羟基多柔比星、依立替康、紫杉醇、雷帕霉素、利妥昔单抗、长春新碱等等，例如，与多药疗法一起给予，例如CHOP(环磷酰胺+羟基多柔比星+长春新碱+泼尼松)、RCVP(利妥昔单抗+环磷酰胺+长春新碱+泼尼松)、R-CHOP(利妥昔单抗+CHOP)或DA-EPOCH-R(剂量调节的依托泊苷、泼尼松、长春新碱、环磷酰胺、多柔比星和利妥昔单抗)。

化合物1组合物可以在联合治疗中与一种或多种治疗剂一起给予，所述治疗剂包括但不限于：血管生成抑制剂、抗增殖药剂、其他细胞凋亡促进剂(例如，Bcl-xL、Bcl-w和Bfl-1抑制剂)、死亡受体途径的活化剂、BiTE(双-特异性T细胞衔接器)抗体、双重可变结构域结合蛋白(DVDs)、细胞凋亡蛋白的抑制剂(IAPs)、微RNAs、丝裂原-活化的胞外信号调节激酶抑制剂、多价结合蛋白、聚ADP(腺苷二磷酸)-核糖聚合酶(PARP)抑制剂、小抑制性核醣核酸(siRNAs)、激酶抑制剂、受体酪氨酸激酶抑制剂、极光激酶抑制剂、polo样激酶抑制剂、bcr-abl激酶抑制剂、生长因子抑制剂、COX-2抑制剂、非甾体抗炎药(NSAIDs)、抗有丝分裂剂、烷化剂、抗代谢物、嵌入性抗生素、含铂的化疗剂、生长因子抑制剂、电离辐射、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、免疫制剂、抗体、激素治疗、类维生素A、deltoids、植物生物碱、蛋白酶体抑制剂、HSP-90抑制剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、嘌呤类似物、嘧啶类似物、MEK抑制剂、CDK抑制剂、ErbB2受体抑制剂、mTOR抑制剂以及其他抗肿瘤剂。

血管生成抑制剂包括但不限于：EGFR抑制剂、PDGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、TIE2抑制剂、IGF1R抑制剂、基质金属蛋白酶2(MMP-2)抑制剂、基质金属蛋白酶9(MMP-9)抑制剂和血小板反应蛋白类似物。

EGFR抑制剂的实例包括但不限于：吉非替尼、埃洛替尼、西妥昔单抗、EMD-7200、ABX-EGF、HR3、IgA抗体、TP-38(IVAX)、EGFR融合蛋白、EGF-疫苗、抗EGFR免疫脂质体和拉帕替尼。

PDGFR抑制剂的实例包括但不限于：CP-673451和CP-868596。

VEGFR抑制剂的实例包括但不限于：贝伐单抗、舒尼替尼、索拉非尼、CP-547632、阿西替尼(axitinib)、凡德他尼(vandetanib)、AEE788、AZD-2171、VEGF trap、瓦他拉尼、哌加他尼(pegaptanib)、IM862、帕唑帕尼、ABT-869和angiozyme。

Bcl-2家族蛋白抑制剂除化合物1外还包括但不限于：ABT-263、AT-101((-)棉子酚)、Genasense^TM Bcl-2-靶向反义寡核苷酸(G3139或奥利默森(oblimersen))、IPI-194、IPI-565、N-(4-(4-((4'-氯(1,1'-联苯)-2-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)-4-(((1R)-3-(二甲基氨基)-1-((苯基硫烷基)甲基)丙基)氨基)-3-硝基苯磺酰胺) (ABT-737)、GX-070(obatoclax)等等。

死亡受体途径的活化剂包括但不限于：TRAIL、靶向死亡受体(例如，DR4和DR5)的抗体或其他药剂，例如apomab、conatumumab、ETR2-ST01、GDC0145(来杀木单抗)、HGS-1029、LBY-135、PRO-1762和曲妥珠单抗。

血小板反应蛋白类似物的实例包括但不限于：TSP-1、ABT-510、ABT-567和ABT-898。

极光激酶抑制剂的实例包括但不限于：VX-680、AZD-1152和MLN-8054。

polo样激酶抑制剂的实例包括但不限于：BI-2536。

bcr-abl激酶抑制剂的实例包括但不限于：伊马替尼和达沙替尼。

包含铂的药剂的实例包括但不限于：顺铂、卡铂、依他铂、乐铂、奈达铂、奥沙利铂和沙铂(satraplatin)。

mTOR抑制剂的实例包括但不限于：CCI-779、雷帕霉素、西罗莫司、依维莫司、RAD001和AP-23573。

HSP-90抑制剂的实例包括但不限于：格尔德霉素、根赤壳菌素、17-AAG、KOS-953、17-DMAG、CNF-101、CNF-1010、17-AAG-nab、NCS-683664、依芬古单抗、CNF-2024、PU3、PU24FCl、VER-49009、IPI-504、SNX-2112和STA-9090。

HDAC抑制剂的实例包括但不限于：辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、MS-275、丙戊酸、TSA、LAQ-824、trapoxin和缩酚酸肽。

MEK抑制剂的实例包括但不限于：PD-325901、ARRY-142886、ARRY-438162和PD-98059。

CDK抑制剂的实例包括但不限于：夫拉平度(flavopyridol)、MCS-5A、CVT-2584、塞利西利(seliciclib)ZK-304709、PHA-690509、BMI-1040、GPC-286199、BMS-387032、PD-332991和AZD-5438。

COX-2抑制剂的实例包括但不限于：塞来考昔、帕瑞考昔、地拉考昔(deracoxib)、ABT-963、依托考昔、鲁米考昔(lumiracoxib)、BMS-347070、RS 57067、NS-398、伐地考昔、罗非考昔、SD-8381、4-甲基-2-(3,4-二甲基苯基)-1-(4-氨磺酰基苯基-1H-吡咯、T-614、JTE-522、S-2474、SVT-2016、CT-3和SC-58125。

NSAIDs的实例包括但不限于：双水杨酯、二氟尼柳、布洛芬、酮洛芬、萘丁美酮、吡罗昔康、萘普生、双氯芬酸、吲哚美辛、舒林酸、托美汀、依托度酸、酮咯酸和奥沙普秦。

ErbB2受体抑制剂的实例包括但不限于：CP-724714、卡拉替尼(canertinib)、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、TAK-165、ionafamib、GW-282974、EKB-569、PI-166、dHER2、APC-8024、抗HER/2neu双特异性抗体B7.her2IgG3和HER2三功能双特异性抗体mAB AR-209和mAB 2B-1。

烷化剂的实例包括但不限于：氮芥N-氧化物、环磷酰胺、异环磷酰胺、曲磷胺、苯丁酸氮芥、美法仑、白消安、二溴甘露醇、卡波醌、硫替派、雷莫司汀(Ranimustine)、尼莫司汀、Cloretazine^TM(拉莫司汀(laromustine))、AMD-473、六甲蜜胺、AP-5280、阿帕齐醌(apaziquone)、brostallicin、苯达莫司汀、卡莫司汀、雌莫司汀、福莫司汀、葡膦酰胺、KW-2170、马磷酰胺(mafosfamide)、二溴卫矛醇、环己亚硝脲、曲奥舒凡(treosulfan)、达卡巴嗪和替莫唑胺。

抗代谢物的实例包括但不限于：氨甲喋呤、6-巯基嘌呤核糖核苷、巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶(5-FU)(单独或与亚叶酸组合)、替加氟、UFT、去氧氟尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、阿糖胞苷十八烷基磷酸钠(cytarabine ocfosfate)、依诺他滨、S-1、培美曲唑(Pemetrexed)、吉西他滨、氟达拉滨、5-阿扎胞苷、卡培他滨、克拉屈滨、氯法拉滨(clofarabine)、地西他滨、依氟鸟氨酸、乙烯基胞苷(ethenylcytidine)、胞嘧啶阿拉伯胞苷(cytosine arabinoside)、羟基脲、TS-1、美法仑、奈拉滨(nelarabine)、诺拉曲特(nolatrexed)、培美曲唑二钠、喷司他丁、pelitrexol、雷替曲塞(raltitrexed)、triapine、三甲曲沙、阿糖腺苷、霉酚酸、十八烷基磷酸钠、喷司他丁、噻唑呋啉、利巴韦林、EICAR、羟基脲和去铁胺。

抗生素的实例包括但不限于：嵌入性抗生素、阿柔比星、放线菌素D、氨柔比星、annamycin、多柔比星、博来霉素、柔红霉素、多柔比星(包括脂质体多柔比星)、依沙芦星、表柔比星、glarubicin、伊达比星、丝裂霉素C、奈莫柔比星、新制癌菌素、硫酸培洛霉素、吡柔比星、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、stimalamer、链脲霉素、戊柔比星(Valrubicin)、净司他丁及其组合。

拓扑异构酶抑制剂的实例包括但不限于：阿柔比星、氨萘非特、贝洛替康(belotecan)、喜树碱、10-羟基喜树碱、9-氨基-喜树碱、安吖啶、右雷佐生、二氟替康(diflomotecan)、依立替康HCl、伊朵堤卡林(edotecarin)、表柔比星、依托泊苷、依沙替康(exatecan)、becatecarin、吉马替康、勒托替康、orathecin、BN-80915、米托蒽醌、吡柔比星(pirarbucin)、pixantrone、鲁比替康、索布佐生、SN-38、tafluposide和托泊替康。

抗体的实例包括但不限于：利妥昔单抗、西妥昔单抗、贝伐单抗、曲妥珠单抗、CD40-特异性抗体和IGF1R-特异性抗体、chTNT-1/B、denosumab、依决洛单抗、WX G250、zanolimumab、林妥珠单抗和ticilimumab。

激素治疗的实例包括但不限于：碳酸司维拉姆(sevelamer)、rilostane、促黄体素释放激素、modrastane、依西美坦、乙酸亮丙瑞林、布舍瑞林、西曲瑞克、地洛瑞林、组氨瑞林(Histrelin)、阿那曲唑、fosrelin、戈舍瑞林、地盖瑞利(degarelix)、度骨化醇(doxercalciferol)、法屈唑、福美坦、他莫西芬、阿佐昔芬(arzoxifene)、比卡鲁胺、阿倍瑞克(Abarelix)、曲普瑞林、非那雄胺、氟维司群、托瑞米芬、雷诺昔芬、曲洛司坦、拉索昔芬、来曲唑、氟他胺、甲地孕酮、美服培酮、尼鲁米特、地塞米松、泼尼松及其他糖皮质激素。

类维生素A或deltoids的实例包括但不限于：西奥骨化醇(seocalcitol)、来沙骨化醇(lexacalcitol)、芬维A胺、aliretinoin、维甲酸、贝沙罗汀(Bexarotene)和LGD-1550。

植物生物碱的实例包括但不限于：长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨。

蛋白酶体抑制剂的实例包括但不限于：硼替佐米(bortezomib)、MG-132、NPI-0052和PR-171。

免疫制剂的实例包括但不限于：干扰素和许多其他免疫增强剂。干扰素包括干扰素α、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素β、干扰素γ-1a、干扰素γ-1b、干扰素γ-n1及其组合。其他药剂包括非格司亭、蘑菇多糖、裂裥多糖、活BCG、乌苯美司、WF-10(四氯十氧化物(tetrachlorodecaoxide)或TCDO)、阿地白介素、阿仑单抗(Alemtuzumab)、BAM-002、达卡巴嗪、达克珠单抗、地尼白介素(denileukin)、吉妥珠单抗奥唑米星(gemtuzumabozogamicin)、ibritumomab、咪喹莫特、来格司亭、黑色素瘤疫苗、莫拉司亭、sargaramostim、他索纳明(tasonermin)、tecleukin、thymalasin、托西莫单抗(tositumomab)、Lorus Pharmaceuticals的Virulizin^TM免疫治疗剂、Z-100(Maruyama或SSM的特异物质)、Zevalin^TM(90Y-替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan))、依帕珠单抗、米妥莫单抗(mitumomab)、oregovomab、pemtumomab、Provenge^TM (sipuleucel-T)、替西白介素(teceleukin)、Therocys^TM(卡介苗)、细胞毒淋巴细胞抗原4(CTLA4)抗体和能够阻断CTLA4的药剂，例如MDX-010。

生物反应调节剂的实例是调节活生物体的防卫机制或生物反应，例如，组织细胞的存活、生长或分化从而使它们具有抗肿瘤活性的药剂。这种药剂包括但不限于：云芝多糖K(krestin)、蘑菇多糖、西佐喃(sizofuran)、溶链菌制剂(picibanil)、PF-3512676和乌苯美司。

嘧啶类似物的实例包括但不限于：5-氟尿嘧啶、氟尿苷、去氧氟尿苷、雷替曲塞(raltitrexed)、阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷、氟达拉滨、三乙酰尿苷、曲沙他滨(Troxacitabine)和吉西他滨。

嘌呤类似物的实例包括但不限于：巯基嘌呤和硫鸟嘌呤。

抗有丝分裂剂的实例包括但不限于：N-(2-((4-羟基苯基)氨基)吡啶-3-基)-4-甲氧基苯磺酰胺、紫杉醇、多西他赛、larotaxel、埃坡霉素D、PNU-100940、巴他布林(batabulin)、伊沙匹隆、patupilone、XRP-9881、长春氟宁和ZK-EPO(合成的埃坡霉素)。

放射治疗的实例包括但不限于：外束放射治疗(XBRT)、远距离治疗、近距疗法、密封源放射治疗和未密封源放射治疗。

BiTE抗体是引导T细胞攻击癌细胞的双-特异性抗体，其通过同时结合这两个细胞进行。然后T细胞攻击靶癌细胞。BiTE抗体的实例包括但不限于：阿德木单抗(adecatumumab)(Micromet MT201)、blinatumomab(Micromet MT103)等等。不受理论限制，T细胞引起靶癌细胞的细胞凋亡的一个机理是通过溶细胞的颗粒组分(包括穿孔素和粒酶B)的胞吐作用。就此而言，已经显示Bcl-2通过穿孔素和粒酶B来减弱细胞凋亡的诱导。这些数据说明，当靶向癌细胞时，抑制Bcl-2可以增加由T细胞引起的细胞毒效果(Sutton等人(1997)J. Immunol. 158:5783-5790)。

SiRNAs是具有内源RNA碱基或化学修饰的核苷酸的分子。该修饰不消除细胞活性，而是赋予提高的稳定性和/或提高的细胞效力。化学修饰的实例包括硫代磷酸酯基团、2'-脱氧核苷酸、含2'-OCH₃-的核糖核苷酸、2'-F-核糖核苷酸、2'-甲氧基乙基核糖核苷酸、其组合等等。siRNA可以具有变化长度(例如，10-200 bps)和结构(例如，发夹形、单/双链、凸形、切口/缺口、错配)，并且在细胞中被加工，提供活性基因沉默。双链siRNA(dsRNA)在每个链(钝端)上或非对称端(突出端)可以具有相同数目的核苷酸。1-2个核苷酸的突出端可以存在于有义链和/或反义链上，以及存在于给定链的5'-和/或3'-端。例如，靶向Mcl-1的siRNA已经显示出增强细胞凋亡促进剂ABT-263的活性(Tse等人(2008) Cancer Res. 68:3421–3428和其中的参考文献)。

多价结合蛋白是包含两个或更多个抗原结合位点的结合蛋白。设计多价结合蛋白，使其具有三个或更多个抗原结合位点，并且其通常不是天然存在的抗体。术语“多特异性结合蛋白”是指能够结合两个或更多个相关或无关靶向的结合蛋白。双重可变结构域(DVD)结合蛋白是包含两个或多个抗原结合位点的四价或多价结合蛋白结合蛋白。这种DVD可以是单特异性的(即，能够结合一个抗原)或多特异性的(即，能够结合两个或更多个抗原)。包含两个重链DVD多肽和两个轻链DVD多肽的DVD结合蛋白被称为DVD Ig's。DVD Ig的每一半包含重链DVD多肽、轻链DVD多肽和两个抗原结合位点。每个结合位点包含重链可变结构域和轻链可变结构域，每个抗原结合位点具有总共6个涉及抗原结合的CDR。

PARP抑制剂包括但不限于：ABT-888、olaparib、KU-59436、AZD-2281、AG-014699、BSI-201、BGP-15、INO-1001、ONO-2231等等。

另外或可选地，本发明组合物可以在联合治疗中与一种或多种选自下列的抗肿瘤剂一起给予：ABT-100、N-乙酰基秋水仙醇-O-磷酸盐、阿维A、AE-941、糖苷配基原人参萜二醇、arglabin、三氧化二砷、AS04佐剂-吸附的HPV疫苗、L-天冬酰胺酶、阿他美坦、阿曲生坦(atrasentan)、AVE-8062、波生坦、canfosfamide、Canvaxin^TM、catumaxomab、CeaVac^TM、西莫白介素、combrestatin A4P、contusugene ladenovec、Cotara^TM、环丙孕酮、脱氧柯福霉素、右雷佐生、N,N-二乙基-2-(4-(苯基甲基)苯氧基)乙胺、5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸、二十二碳六烯酸/紫杉醇、discodermolide、乙丙昔罗(efaproxiral)、enzastaurin、埃坡霉素B、乙炔尿嘧啶(ethynyluracil)、依昔舒林(exisulind)、falimarev、Gastrimmune^TM、GMK疫苗、GVAX^TM、卤夫酮(halofuginone)、组胺、羟基脲、依班膦酸、替伊莫单抗(ibritumomabtiuxetan)、IL-13-PE38、inalimarev、白介素4、KSB-311、兰瑞肽、来那度胺(lenalidomide)、洛那法尼(lonafarnib)、洛伐他汀、5,10-亚甲基四氢叶酸、米伐木肽(mifamurtide)、米特福辛、莫特沙芬(motexafin)、奥利默森(oblimersen)、OncoVAX^TM、Osidem^TM、紫杉醇白蛋白-稳定化纳米颗粒、聚谷氨酸紫杉醇(paclitaxel poliglumex)、帕米膦酸盐、帕尼单抗(panitumumab)、聚乙二醇化干扰素α、培加帕酶、苯妥帝尔(phenoxodiol)、聚(I)-聚(C12U)、普鲁苄肼、豹蛙酶(ranpirnase)、rebimastat、重组体四价HPV疫苗、角鲨胺(squalamine)、星孢菌素、STn-KLH疫苗、T4内切核酸酶(endonuclase)V、维生素A酸(tazarotene)、6,6',7,12-四甲氧基-2,2'-二甲基-1β-berbaman、沙立度胺、TNFerade^TM、¹³¹I-托西莫单抗(tositumomab)、曲贝替定(trabectedin)、三嗪酮、肿瘤坏死因子、Ukrain^TM、牛痘-MUC-1疫苗、L-缬氨酸-L-boroproline、Vitaxin^TM、维特斯朋(vitespen)、唑来膦酸和佐柔比星。

在一个实施方案中，将包含化合物1的一种或多种晶形(包括结晶盐)的(或使用化合物1的一种或多种晶形作为API制备的)组合物以治疗有效量给予需要其的受试者以治疗发病期间过度表达抗细胞凋亡Bcl-2蛋白、抗细胞凋亡Bcl-X_L蛋白和抗细胞凋亡Bcl-w蛋白中的一种或多种的疾病。

在另一个实施方案中，将包含化合物1的一种或多种晶形(包括结晶盐)的(或使用化合物1的一种或多种晶形作为API制备的)组合物以治疗有效量给予需要其的受试者以治疗异常的细胞生长和/或失调的细胞凋亡的疾病。

这种疾病的实例包括但不限于：癌症、间皮瘤、膀胱癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内的黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、骨癌、结肠癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、胃肠(胃、结直肠和/或十二指肠)癌、慢性淋巴细胞性白血病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、睾丸癌、肝细胞(肝脏和/或胆管)癌、原发性或继发性中枢神经系统肿瘤、原发性或继发性脑肿瘤、霍奇金病、慢性或急性白血病、慢性粒细胞白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、成淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑色素瘤、多发性骨髓瘤、口腔癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、肾和/或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统的瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、脊椎轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、肾上腺皮质癌、胆囊癌、脾癌、胆管上皮癌、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤或其组合。

在一个更具体实施方案中，将包含化合物1的一种或多种晶形(包括结晶盐)的(或使用化合物1的一种或多种晶形作为API制备的)组合物以治疗有效量给予需要其的受试者以治疗膀胱癌、脑癌、乳腺癌、骨髓癌、子宫颈癌、慢性淋巴细胞性白血病、结直肠癌、食道癌、肝细胞癌、成淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑色素瘤、髓细胞性白血病、骨髓瘤、口腔癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌或脾癌。

根据这些实施方案中的任一项，可在联合治疗中与一种或多种额外的治疗剂一起给予该组合物。

例如，治疗受试者中下列疾病的方法包括向该受试者给予治疗有效量的(a)包含结晶化合物1游离碱的(或使用结晶化合物1游离碱作为API制备的)组合物，和(b)依托泊苷、长春新碱、CHOP、利妥昔单抗、雷帕霉素、R-CHOP、RCVP、DA-EPOCH-R或硼替佐米中的一种或多种：间皮瘤、膀胱癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内的黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、骨癌、结肠癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、胃肠(胃、结直肠和/或十二指肠)癌、慢性淋巴细胞性白血病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、睾丸癌、肝细胞(肝脏和/或胆管)癌、原发性或继发性中枢神经系统肿瘤、原发性或继发性脑肿瘤、霍奇金病、慢性或急性白血病、慢性粒细胞白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、成淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑色素瘤、多发性骨髓瘤、口腔癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、肾和/或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、脊椎轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、肾上腺皮质癌、胆囊癌、脾癌、胆管上皮癌、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤或其组合。

在具体实施方案中，在联合治疗中向需要其的受试者给予治疗有效量的包含结晶化合物1游离碱的(或使用结晶化合物1游离碱作为API制备的)组合物与依托泊苷、长春新碱、CHOP、利妥昔单抗、雷帕霉素、R-CHOP、RCVP、DA-EPOCH-R或硼替佐米以治疗淋巴恶性肿瘤，例如B细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。

在另一实施方案中，将本发明的组合物以治疗有效量给予需要其的受试者以治疗免疫性或自身免疫性病症。这种病症包括获得性免疫缺乏综合征(AIDS)、自身免疫性淋巴细胞增生综合征、溶血性贫血、炎症性疾病、血小板减少症、与器官移植相关的急性和慢性免疫疾病、阿狄森氏病、过敏性疾病、脱发、斑秃、动脉粥样硬化疾病/动脉硬化、动脉粥样硬化、关节炎(包括骨关节炎、少年慢性关节炎、脓毒性关节炎、莱姆关节炎、银屑病关节炎、和反应性关节炎)、自身免疫性大疱性疾病、无β脂蛋白血症(abetalipoprotemia)、获得性免疫缺陷相关疾病、与器官移植相关的急性免疫疾病、获得性手足发绀、急性和慢性寄生虫或感染过程、急性胰腺炎、急性肾衰竭、急性风湿热、急性横贯性脊髓炎、腺癌、心房异位搏动、成人(急性)呼吸窘迫综合征、AIDS痴呆复合征、酒精性肝硬化、酒精引起的肝损伤、酒精诱发的肝炎、过敏性结膜炎、过敏性接触性皮炎、过敏性鼻炎、过敏和哮喘、同种异体移植排斥、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症、阿尔茨海默氏病、肌萎缩性侧索硬化症、贫血症、心绞痛、强直性脊柱炎相关性肺部疾病、前角细胞变性、抗体介导的细胞毒作用、抗磷脂综合征、抗受体过敏反应、主动脉及周围动脉瘤、主动脉夹层、动脉高血压、动脉硬化、动静脉瘘、关节病、虚弱、气喘、共济失调、异位性过敏症、房颤(持续性或阵发性)、心房扑动、房室传导阻滞、萎缩性自身免疫性甲状腺功能减退症、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、1型自身免疫性肝炎(典型自身免疫性或类狼疮性肝炎)、自身免疫介导的低血糖、自身免疫嗜中性粒细胞减少症、自身免疫性血小板减少症、自身免疫性甲状腺疾病、B细胞淋巴瘤、骨移植物排斥反应、骨髓移植(BMT)排斥、闭塞性细支气管炎、束支传导阻滞、烧伤、恶病质、心脏心律失常、心源性眩晕综合征、心脏肿瘤、心肌病、凡肺分流术炎症响应、软骨移植排斥反应、小脑皮质变性、小脑病症、紊乱或者多源性房性心动过速、化疗相关的病症、衣原体病、choleosatatis、慢性酒精中毒、慢性活动性肝炎、慢性疲劳综合征、与器官移植相关的慢性免疫疾病、慢性嗜酸细胞性肺炎、慢性炎症病变、慢性皮肤粘膜念珠菌病、慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性水杨酸盐中毒、结肠直肠常见性多样免疫缺陷(常见性可变低丙球蛋白血症)、结膜炎、与间质性肺病相关的结缔组织病、接触性皮炎、库姆斯阳性的溶血性贫血、肺心病、克雅氏病、隐源性自身免疫性肝炎、隐源性纤维化肺泡炎、培养物阴性败血症、囊性纤维化、细胞因子治疗相关性病症、克罗恩氏病、拳击员痴呆症、脱髓鞘疾病、登革出血热、皮炎、硬皮病皮炎、皮肤病学的病症、皮肌炎/多发性肌炎相关性肺病、糖尿病、糖尿病性动脉硬化性疾病、糖尿病、弥漫性Lewy体病、扩张型心肌病、扩张性充血性心肌病、盘状红斑狼疮、基底神经节病症、弥漫性血管内凝血、中年唐氏综合征、药物引起的间质性肺病、药物性肝炎、药物引起的运动病症(通过阻断CNS多巴胺受体的药物引起)、药物过敏、湿疹、脑脊髓炎、心内膜炎、内分泌失调、肠病性滑膜炎、会厌炎、爱泼斯坦-巴尔病毒感染、红斑性肢痛病、锥体外系和小脑病症、家族性嗜血细胞淋巴组织细胞增生症、胎儿胸腺植入物排斥、弗里德赖希共济失调、功能性外周动脉障碍、女性不孕、纤维化、纤维化肺病、真菌性败血症、气性坏疽、胃溃疡、巨细胞动脉炎、肾小球肾炎、肾丝球肾炎、古德帕斯丘综合征、甲状腺肿自身免疫性甲状腺功能减退(桥本氏病)、痛风性关节炎、任何器官或组织的移植排斥、移植物抗宿主病、革兰氏阴性败血症、革兰氏阳性败血症、因胞内有机体所致的肉芽肿、B群链球菌(GBS)感染、格雷夫斯氏病、铁质沉着出血相关的肺病、毛细胞白血病、哈勒沃登-斯帕茨病、桥本氏甲状腺炎、花粉热、心脏移植排斥、血色素沉着症、造血系统恶性肿瘤(白血病和淋巴瘤)、溶血性贫血、溶血性尿毒症综合征/溶栓性血小板减少性紫癜、出血、亨诺赫-舍恩莱因紫癜、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、HIV感染/HIV神经病变、霍奇金病、甲状旁腺功能减退症、亨廷顿舞蹈病、运动过度性运行障碍、过敏反应、过敏性肺炎、甲状腺功能亢进症、运动功能减弱性运动障碍、下丘脑-垂体-肾上腺轴评估、特发性阿狄森氏病、特发性白细胞减少症、特发性肺纤维化、特发性血小板减少症、特应性肝病、小儿脊髓性肌萎缩、传染性疾病、主动脉炎症、炎症性肠病、胰岛素依赖性糖尿病、间质性肺炎、虹膜睫状体炎/葡萄膜炎/视神经炎、缺血再灌注损伤、缺血性中风、幼年型恶性贫血、幼年型类风湿关节炎、幼年型脊柱肌肉萎缩、卡波西氏肉瘤、川崎氏症、肾移植排斥、军团杆菌、利什曼病、麻风病、皮质脊髓系统病损、线性IgA病、脂血症、肝移植排斥、莱姆病、淋巴水肿、淋巴细胞浸润性肺病、疟疾、自发性男性不育症或NOS、恶性组织细胞增生症、恶性黑色素瘤、脑膜炎、脑膜炎球菌血症、显微性肾脏血管炎、偏头痛、线粒体性多系统疾病、混合性结缔组织病、混合性结缔组织病相关性肺病、单克隆丙种球蛋白病、多发性骨髓瘤、多系统变性(Mencel Dejerine-Thomas Shy-Drager和Machado-Joseph)、肌痛脑炎/慢性疲劳综合征(Royal Free Disease)、重症肌无力、显微性肾脏血管炎、鸟胞内分枝杆菌病、结核分枝杆菌病、脊髓发育不良综合征、心肌梗死、心肌缺血疾病、鼻咽癌、新生儿慢性肺病、肾炎、肾病、肾病综合征、神经退行性疾病、神经性I型肌肉萎缩、嗜中性粒细胞减少性发热、非酒精性脂肪性肝炎、腹主动脉及其分支闭塞、闭塞性动脉病症、器官移植排斥、睾丸炎/附睾炎、睾丸炎/输精管复通术程序、器官巨大症、骨关节病、骨质疏松症、卵巢衰竭、胰腺移植排斥、寄生虫病、甲状旁腺移植排斥、帕金森氏病、盆腔炎、寻常型天疱疮、落叶型天疱疮、类天疱疮、常年性鼻炎、心包疾病、外周动脉硬化性疾病、外周血管病症、腹膜炎、恶性贫血、晶状体源性葡萄膜炎、卡氏肺囊虫肺炎、肺炎、POEMS综合征(多发性神经病变、脏器巨大症、内分泌失调、单克隆丙种球蛋白病和皮肤变化综合征)、灌注后综合征、后泵综合征(post-pump syndrome)、MI心切开后综合征、感染后间质性肺病、卵巢早衰、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性肝炎、原发性粘液性水肿、原发性肺性高血压、原发性硬化性胆管炎、原发性血管炎、进行性核上性麻痹、牛皮癣、1型牛皮癣、2型牛皮癣、牛皮癣关节病、结缔组织病继发性肺性高血压、结节性多发性动脉炎的肺性表现、炎症后间质性肺病、放射纤维化、放射治疗、雷诺氏现象和疾病、雷诺氏病、雷弗素姆氏病、经常性窄QRS心动过速、瑞特氏病、肾病性NOS、肾血管性高血压、再灌注损伤、限制性心肌病、类风湿关节炎相关的间质性肺病、类风湿性脊椎炎、结节病、施密特氏综合征、硬皮病、老年舞蹈症、Lewy体型老年痴呆症、败血症综合征、脓毒性休克、血清阴性关节病、休克、镰状细胞性贫血、斯耶格伦氏病相关性肺病、斯耶格伦氏综合征、皮肤同种异体移植排斥、皮肤变化综合征、小肠移植排斥、精子自身免疫性疾病、多发性硬化症(所有亚型)、脊髓共济失调、脊髓小脑变性、脊柱关节病、散发性多腺性缺陷I型、散发性多腺性缺陷II型、斯蒂尔氏病、链球菌性肌炎、中风、小脑结构性病损、亚急性硬化性全脑炎、交感性眼炎、晕厥、心血管系统梅毒、全身性过敏反应、全身性炎症反应综合征、全身性幼年类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、全身性红斑狼疮相关性肺病、全身性硬化症、全身性硬化症相关性间质性肺病、T细胞或FAB ALL、塔卡亚萨氏病/动脉炎、毛细血管扩张、Th2型和Th1型介导的疾病、闭塞性血栓性血管炎、血小板减少症、甲状腺炎、毒性、中毒性休克综合征、移植物、创伤/出血、2型自身免疫性肝炎(抗-LKM抗体肝炎)、具有黑棘皮症的B胰岛素抵抗、III型过敏反应、IV型过敏、溃疡性结肠炎性关节病、溃疡性结肠炎、不稳定性心绞痛、尿毒症、尿脓毒症、荨麻疹、葡萄膜炎、瓣膜性心脏病、静脉曲张、血管炎、血管炎性弥漫性肺病、静脉疾病、静脉血栓形成、心室颤动、白癜风急性肝病、病毒和真菌感染、病毒性脑炎/无菌性脑膜炎、病毒相关性嗜血细胞综合征、韦格纳肉氏芽肿病、韦尼克-科尔萨科夫综合征、威尔森氏症、任何器官或组织的异种移植物排斥、耶尔森氏菌属和沙门氏菌相关性关节病等。

本发明还提供在人类癌症患者的血流中维持治疗有效血浆浓度的化合物1和/或一种或多种其代谢产物的方法，其包括以等于约50至约500 mg化合物1每日的剂量以约3小时至约7天的平均剂量间隔向该受试者给予如本文所述的药物组合物。

组成治疗有效血浆浓度的因素尤其取决于患者所患的具体癌症，癌症的阶段、严重程度和侵袭性，以及所寻求的结果(例如，稳定、肿瘤生长减小、肿瘤收缩、转移风险减小等)。极优选地，血浆浓度足以在治疗癌症方面提供益处，同时其不应足以引发不可接受或不可耐受程度的不良副作用。

具体而言，对于普通癌症和淋巴恶性肿瘤(例如非霍奇金淋巴瘤)的治疗，在大多数情况下应将化合物1的血浆浓度维持在约0.5至约10 μg/ml。因此，在化合物1治疗过程期间，稳态C_max应一般不超过约10 μg/ml，并且稳态C_min应一般不小于约0.5 μg/ml。将进一步发现，需要在上文所提供的范围内选择可在稳态下有效提供不大于约5，例如不大于约3的C_max/C_min比例的每日剂量和平均剂量间隔。应理解，较长剂量间隔将倾向于产生较大的C_max/C_min比例。举例说明地，在稳态下，通过本发明方法可靶向约3至约8 μg/ml的化合物1 C_max和约1至约5 μg/ml的C_min。

根据本发明实施方案，有效维持治疗有效的化合物1血浆水平的每日剂量是约50至约1000 mg。在大多数情况下，合适的每日剂量是约200至约400 mg。举例说明地，每日剂量可以是例如约50、约100、约150、约200、约250、约300、约350、约400、约450、约500、约750或约1000 mg。

根据本发明实施方案，有效维持治疗有效的化合物1血浆水平的平均剂量间隔是约3小时至约7天。在大多数情况下，合适的平均剂量间隔是约8小时至约3天，或约12小时至约2天。每日一次(q.d.)给予方案通常是合适的。

如在其他实施方案中，根据本发明实施方案给予可有或没有食物(即在非禁食或禁食条件下)。通常优选向非禁食患者给予本发明组合物。

当介绍本公开的要素或其优选实施方案时，冠词“一(a)”、“一(an)”、“该(the)”和“所述(said)”欲指存在一个或多个要素。术语“包含”、“包括”和“具有”意欲为包括性的，并且意味着除所列要素外可存在其他要素。

可在不背离本公开的范围的情况下对上文所述方法和/或组合物作出各种改变，意欲上文描述中所含和附图中所显示的所有物质均应理解为说明性的且不应视为具限制意义。

Claims

1.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱无水物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于6.3、7.1、9.0、9.5、12.5、14.5、14.7、15.9、16.9和18.9度2θ处的峰(图A)，每一峰±0.2度2θ。

2.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱无水物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于5.8、7.7、8.3、9.9、13.0、13.3、14.2、15.3、16.6、17.9、18.3、19.8、20.7、21.2、21.9、22.5、23.6和24.1度2θ处的峰(图B)，每一峰±0.2度2θ。

3.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱水合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于5.8、7.6、7.9、10.7、11.7、14.0、15.3、15.8、17.4、18.3、19.9、20.4、20.7、22.5、24.9、25.8和26.7度2θ处的峰(图C)，每一峰±0.2度2θ。

4.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱水合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于3.3、6.4、7.1、7.3、10.1、11.4、13.2、14.4、14.6、15.1、15.8、16.2、17.2、17.6、18.0、18.6、19.0、19.5、19.8、20.2、20.7、21.0、22.5、23.0、26.0、28.9和29.2度2θ处的峰(图D)，每一峰±0.2度2θ。

5.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于5.9、7.1、9.6、10.0、10.7、11.1、13.2、14.8和18.2度2θ处的峰，每一峰±0.2度2θ(图E)。

6.权利要求5的化合物，其中该晶形是化合物1游离碱二氯甲烷溶剂合物，其特征在于其为单斜晶格类型，且其P21/n空间群中三个轴的单位晶胞长度为(a) 13.873 Å、(b)12.349 Å、(c) 29.996 Å和三个单位晶胞角度为(α) 90.00°、(β) 92.259°和(γ) 90.00°。

7.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于5.8、7.1、9.5、9.9、10.6、11.6、13.1、13.8、14.8、16.0、17.9、20.2、21.2、23.2、24.4和26.4度2θ处的峰(图F)，每一峰±0.2度2θ。

8.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱乙酸乙酯溶剂合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于3.3、6.5、7.0、7.3、9.2、9.7、11.2、11.4、11.9、12.9、14.4、14.9、15.8、16.2、17.2、17.4、17.8、18.5、18.9、19.4、20.1、20.7、20.9、22.0、22.7、23.4、23.8、24.7、25.9、27.0和28.9度2θ处的峰(图G)，每一峰±0.2度2θ。

9.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱乙腈溶剂合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于5.8、7.4、7.6、10.2、13.0、13.6、14.9、16.4、17.0、17.5、18.2、19.4、19.7、20.4、21.0、21.2、21.8、22.4、22.9、24.2、24.3、26.1和29.2度2θ处的峰(图H)，每一峰±0.2度2θ。

10.权利要求9的化合物，其中该晶形是化合物1游离碱乙腈溶剂合物，其特征在于其为三斜晶格类型且其P1空间群中三个轴的单位晶胞长度为(a) 12.836 Å、(b) 13.144 Å、(c)15.411 Å和三个单位晶胞角度为(α) 92.746°、(β) 95.941°和(γ) 113.833°。

11.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱乙腈溶剂合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于6.4、6.9、7.7、8.8、9.4、11.1、12.3、12.8、16.5、17.0、17.4、18.3、18.6、19.0、19.2、20.3、21.6、22.3、22.9和23.7度2θ处的峰(图I)，每一峰±0.2度2θ。

12.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱丙酮溶剂合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于6.0、6.8、8.0、9.0、9.7、11.2、11.9、12.6、14.7、15.0、15.2、15.8、16.4、16.6、17.6、17.8、17.9、18.7、20.2、20.8、21.6、22.2、22.6、23.3、23.8、24.0、24.4、26.8、27.1、28.0和28.2度2θ处的峰(图J)，每一峰±0.2度2θ。

13.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1盐酸盐，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于5.1、5.9、7.7、9.9、10.2、10.8、13.6、14.0、15.4、15.9、16.2、17.6、18.3、18.7、19.7、19.9、20.1、20.4、20.7、20.9、22.9和26.2度2θ处的峰(图K)，每一峰±0.2度2θ。

14.权利要求13的化合物，其中该晶形是化合物1盐酸盐，其特征在于其为三斜晶格类型且其P1空间群中三个轴的单位晶胞长度为(a) 10.804 Å、(b) 12.372 Å、(c) 19.333 Å和三个单位晶胞角度为(α) 76.540°、(β) 87.159°和(γ) 70.074°。

15.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1盐酸盐水合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于4.6、8.7、9.6、9.9、12.3、14.9、15.7、17.6、18.1、18.4、19.3、19.6、21.0、23.3、23.9、24.8、26.5、27.2、27.4、29.0和30.1度2θ处的峰(图L)，每一峰±0.2度2θ。

16.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1硫酸盐，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于4.8、7.7、8.3、9.7、10.2、12.0、12.6、14.5、15.4、17.4、17.9、18.4、19.1、19.5、21.0、22.4、23.3、23.9、25.1和26.8度2θ处的峰(图M)，每一峰±0.2度2θ。

17.化合物4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(化合物1)，其为晶形，其中该晶形是化合物1游离碱四氢呋喃溶剂合物，其特征在于当在25℃下利用1.54178 Å的Cu K_α辐射测量时，粉末X-射线衍射图具有5个或更多个选自位于4.0、4.6、8.0、8.5、9.4、14.6、17.1、17.4、17.8、18.1、19.2、19.5、20.1、20.4、20.5和21.7度2θ处的峰(图N)，每一峰±0.2度2θ。

18.一种药物组合物，其包含呈所述结晶盐形式或所述结晶游离碱形式的权利要求1-17中任一项的化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。

19.呈所述结晶盐形式或所述结晶游离碱形式的权利要求1-17中任一项的化合物或包含呈所述结晶盐形式或所述结晶游离碱形式的权利要求1-17中任一项的化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物在制备用于治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白的细胞凋亡功能障碍和/或过度表达的疾病的药物中的用途。

20.权利要求19的用途，其中所述药物用于通过口服、肠胃外、舌下、口腔、鼻内、肺部、局部、透皮、皮内、眼睛、耳部、直肠、阴道、胃内、颅内、滑膜内或关节内途径给予。

21.权利要求19的用途，其中该疾病是肿瘤疾病、免疫性疾病或自身免疫性疾病。

22.权利要求21的用途，其中该肿瘤疾病选自癌症、间皮瘤、膀胱癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内的黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、骨癌、结肠癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、胃肠癌、胃癌、结直肠癌、十二指肠癌、慢性淋巴细胞性白血病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、睾丸癌、肝细胞癌、肝癌、胆管癌、原发性或继发性中枢神经系统肿瘤、原发性或继发性脑肿瘤、霍奇金病、慢性或急性白血病、慢性粒细胞白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、成淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑色素瘤、多发性骨髓瘤、口腔癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、肾和/或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统的瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、脊椎轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、肾上腺皮质癌、胆囊癌、脾癌、胆管上皮癌、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤及其组合。

23.权利要求21的用途，其中该疾病是淋巴恶性肿瘤。

24.权利要求23的用途，其中该淋巴恶性肿瘤是非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴样白血病或急性淋巴细胞性白血病。

25.权利要求19的用途，其中所述药物用于以50至1000 mg化合物1或其盐每日的剂量以3小时至7天的平均治疗间隔口服给予。

26.权利要求19的用途，其中所述药物用于以200至400 mg化合物1游离碱当量每日的剂量每日一次口服给予。

27.呈所述结晶盐形式或所述结晶游离碱形式的权利要求1-17中任一项的化合物的分散体在制备用于治疗特征在于抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白的细胞凋亡功能障碍和/或过度表达的疾病的药物中的用途。

28.权利要求27的用途，其中所述药物用于通过口服、肠胃外、舌下、口腔、鼻内、肺部、局部、透皮、皮内、眼睛、耳部、直肠、阴道、胃内、颅内、滑膜内或关节内途径给予。

29.权利要求27的用途，其中该疾病是肿瘤疾病、免疫性疾病或自身免疫性疾病。

30.权利要求29的用途，其中该肿瘤疾病选自癌症、间皮瘤、膀胱癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内的黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、骨癌、结肠癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、胃肠癌、胃癌、结直肠癌、十二指肠癌、慢性淋巴细胞性白血病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、睾丸癌、肝细胞癌、肝癌、胆管癌、原发性或继发性中枢神经系统肿瘤、原发性或继发性脑肿瘤、霍奇金病、慢性或急性白血病、慢性粒细胞白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、成淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑色素瘤、多发性骨髓瘤、口腔癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、肾和/或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、中枢神经系统的瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、脊椎轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、肾上腺皮质癌、胆囊癌、脾癌、胆管上皮癌、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤及其组合。

31.权利要求29的用途，其中该疾病是淋巴恶性肿瘤。

32.权利要求31的用途，其中该淋巴恶性肿瘤是非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴样白血病或急性淋巴细胞性白血病。

33.权利要求27的用途，其用于以50至1000 mg化合物1或其盐每日的剂量以3小时至7天的平均治疗间隔口服给予。

34.权利要求27的用途，其是分散体的用途，并且其中该分散体用于以200至400 mg化合物1游离碱当量每日的剂量每日一次口服给予。