CN1068228C - 能降低病理性升高的β－受体的药物及其生产工艺 - Google Patents

Abstract

一种降低病理性升高的β一受体的药物知母总皂甙口服制剂及其生产工艺，采用乙醇水混合物浸泡提取，减压回收乙醇至稠膏状，加水溶解，冷藏、过滤、上清液浓缩，放冷，加少量甲醇溶解，加丙酮析出白色沉淀，离心，沉淀用丙酮洗涤，干燥，得知母总皂甙，进一步采常规方法加工口服液，颗粒剂，片剂等口服剂型。本发明的知母总皂甙口服制剂在甲亢病临床治疗中，表明知母皂甙比心得安更快地减慢甲亢病人的心率至正常，并明显改善甲亢病人的阴虚体征和症状。在消除糖皮质激素副作用的临床疗效观察中，知母总皂甙能显著消除糖皮质激素的常见副作用，特别是消除痤疮，满月脸，多汗，失眠多梦等体征。本发明的生产工艺简单，经济，得率高，适合工业化生产。

Description

能降低病理性升高的β-受体的药物及其生产工艺

本发明涉及一种中药提取物制剂及其生产方法，特别是降低病理性升高的β-受体的药物及其生产工艺。

肾上腺素介导着机体多种重要生理功能，资料表明，一些疾病伴随着β受体密度的变化，高血压、甲亢、肾阴虚病等患者的外周的淋巴细胞β受体数目增多，长期应用糖皮质激素也可使机体β受体增多，因此，寻找可使β受体恢复正常的药物对治疗有着重要的意义。目前临床上尚无有效的可使病理性升高的β受体恢复正常的治疗药物。

知母是常用补益药物，知母为百合科植物的干燥根茎，性寒味苦，归肺、胃、肾三经，具滋阳降火润燥滑肠之功效，主治肺热咳嗽、大便燥结，小便不利。临床使用均是用来配伍治疗，如中国专利申请93109189是用知母生石膏等配伍，清热解毒，94103531专利为黄芪、花粉、知母等配伍，治疗糖尿病。未见知母降低病理性升高的β受体的治疗方面的报导，也未见知母总皂甙制剂的报导。

研究表明，采用常规的水提法提取知母，其知母总皂甙提取率低，且水溶性杂质多，文献多采用乙醇提取，浓缩、加水溶解、滤去不溶物，用乙醇乙酯萃取，并去水溶液，再用正丁醇萃取，浓缩，制备知母总皂甙，本方法成本高、得率低、工序长、不适合工业化大生产。

本发明的目的就在于提供一种知母总皂甙提取的方法及知母总皂甙制剂的制备方法：

本明的另一个目的在于提供一种降低病理性升高的β-受体的药物。

本发明还有一个目的就在于提供知母总皂甙口服制剂在治疗甲状腺机能亢进、高血压、肾病病人中的应用。

本发明是这样实现的。

本发明的知母总皂甙的提取采用乙醇水混合物浸泡提取，减压回收乙醇至稠膏状，加水适量溶解，冷藏，离心弃去沉淀，上层清液减压浓缩至干，放冷后加少量甲醇或乙醇溶解，加丙酮析出白色沉淀，离心、沉淀用丙酮洗涤，减压干燥即得。

其中乙醇水混合物为合醇量50％(体积/体积百分比)为佳。

其提取方法以下述条件为佳：

取知母药材，加入6倍药材/体积的50％乙醇，浸泡30分钟，回流提取21小时。倾出提取液，再加5倍体积的50％乙醇，提取一至二次，每次一小时。合并提取液，减压回收乙醇至稠膏状，加水适量使溶解，冷藏，离心弃沉淀，上层清液减压浓缩至干，放冷，加少量甲醇溶解，加丙酮析出白色沉淀，离心，沉淀用丙酮洗涤，减压干燥得知母总皂甙。

知母皂甙口服液生产工艺：

取已知菝葜皂甙元(sarsasapogenin,C27H45O3)含量的知母(总)皂甙提取物适量，加蒸馏水适量使溶解，按本技术领域人员熟知的技术，可加或不加适量的甜味剂和防腐剂，滤过，加蒸馏水至每毫升含菝葜皂甙元3.5毫克，灌封，100℃流通蒸汽灭菌40分钟，即得。

知母皂甙颗粒剂生产工艺：

取已知菝葜皂甙元含量的知母(总)皂甙提取物适量，加辅形剂，如糊精、淀粉、糖粉，混合均匀，加入80％乙醇或其它湿润剂湿润制粒，干燥，铝铂压膜袋包装。

知母皂甙片生产工艺：

取已知菝葜皂甙元含量的知母(总)皂甙提取物适量，加辅形剂(如淀粉、多糖、糊精、纤维素等)，优选加入干燥玉米粉适量，混合均匀，制粒，压片；如采用10％淀粉浆作粘合剂，制粒，45～60℃干燥，压片，铝塑包装。可进一步加工成薄膜片或糖衣片。

知母皂甙制剂还可以加工成其它口服剂型。

成年人使用量为：每次口服含35mg菝葜皂甙元含量的口服制剂，每日2～3次。

知母总皂甙的质量控制方法：

[性状]本品棕红色液体，气微香，味微甘略苦涩。

[鉴别](1)取本品适量置试管中，剧烈振摇，有大量持久性泡沫产生。

(2)取本品数滴置试管中，沿管壁小心加入浓硫酸1毫升，振摇均匀，置紫外灯(365mm)下观察，呈现绿色萤光。

[含量测定]精密吸取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，加盐酸2ml，氯仿10ml，水浴回流3h，放冷，转入分液漏斗，用氯仿洗涤容器，洗液并入漏斗，分出氯仿层，再用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，残渣用氯仿溶解移至5ml量瓶中并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，另取菝葜皂甙元(Sarsasapogeine)对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典95版附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液1μl与6μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正已烷一乙酸乙酯(1∶1)为展开剂，展开10cm，取出，晾干，喷以显色剂[①取水25ml，缓慢加硫酸50ml，放冷后，再加乙醇25ml，摇匀；②8％香草醛无水乙醇溶液，用时将①②两液按5∶1混合，冰箱保存]，在70℃加热7-10分钟，至斑点显色清晰，取出，在薄层上复盖同样大小玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典95版附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长：λs=445nm,λR=600nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。

知母总皂甙对小鼠甲亢模型脑组织β受体的影响结果如下表：

组别    动物数    RT(fmol/mg pro)

对照组    12      13.40±0.29

模型组    12      18.25±4.35

治疗组    12      12.65±2.59

表明，知母总皂甙可使小鼠甲亢模型升高的脑组织β受体恢复正常。知母总皂甙异常毒性试验结果，小鼠口服给药，剂量相当于每千克体重40克/次/日，连续给药一星期，小鼠无死亡，表明知母总皂甙毒性低。

临床实验结果如下：

一、甲亢病治疗中对心率的影响：

(一)、病例选择：

病人应具有心悸、气短、乏力、消瘦、多汗、怕热、性急、易怒、食亢、紧张和失眠等症状，甲状腺呈Ⅰ-Ⅲ肿大或不大，心率达90-100次/分以上，心衰的病人不列入观察。有哮喘、肺气肿等心得安禁忌的病人可列入观察。

(二)、治疗方法：

初发确诊或经用心得安治疗控制不好的病人，用他巴唑或丙基硫氧嘧啶1-2片/次、3次/日，知母溶液0.1ml/次，2-3次/日。同时服V.fB1.B6各30-60mg，住院病人每周观察症状及体征，门诊病人每周一次，测一分钟心率(病人应静坐20分钟以后)，每月查T3、T4值、血常规、肝肾常规、心电图等。

(三)、疗效标准：

参照《新药(西药)临床研究指导原则》有关项目内容。

1．基本控制：症状体征控制、心率下降至80次/分，或比治疗前下降30％以上。

2．部分控制：症状消失、仍有部分体征、心率下降至90次/分，或比治疗前下降20-30％。

3．无效：症状与体征未好转、治疗前后心率无明显改变。

(四)、结果：

治疗组患者34例，住院7例、门诊27例、男5例、女29例、年龄17-54岁，病程0.5-26个月，心率大于90次/分31例，  经配合知母皂甙口服液治疗后，心率下降至80次/分28例，心率下降至90次/分4例，心率在90次/分以上，但比治疗前下降大于20％的1例，治疗后心率减慢仅为11％者1例，总有效率达97％，且病人症状和体征均很好得到控制，经血常规及肝肾常规检查未见任何毒副反应。

有研究表明，符合中医“肾阴虚”的病人植物神经功能紊乱，β受体活性上升，甲亢病人常伴有交感神经功能亢进，病人血液淋巴细胞β受受体比正常人的密度增加，甲亢病人出现的一系列症状和体征亦符合中医肾阴虚症候。而我们研究发现，知母中含有的知母皂甙对“甲亢”模型小鼠心肌细胞β受体蛋白代谢有明显影响，可使增高的β受体密度下降，从而改善“甲亢”的一系列症状。用知母提取液制备的口服制剂能有效地治疗甲亢病人的心率过快及明显改善甲亢病人出现的一系列阴虚症状。

二、知母皂甙溶液消除糖皮质激素副作用的临床疗效如下：

(一)病例选择与分组：

选择有明显“肾阴虚”征候的长期服用糖皮质素的病人，以自身用药前后作对照，治疗组分两组Ⅰ组为已服用糖皮质激素6周以上，已出现面部痤疮，满月脸、汗多、失眠多梦、心率在90％以上的病人。Ⅱ组为开始服用糖皮激素且未出现Ⅰ组征候的病人。

(二)治疗方法：

两组病人均在采用系统疗程治疗中加服知母皂甙口服液。根据症状轻重增减剂量为口服溶液[10～30ml/次，3次/日，相当于知母皂甙12～36mg/日]，住院病人每周检查一次，门诊病人两周一次，八周为一疗程。每月检测血常规，肝肾常规一次。

(三)疗效标准：

按目前临床公认的糖皮质激素副作用自订治疗观察项目。

显效：基本无副作用征候，各指标正常。

有效：有个别体征出现但较轻。

无效：各项指标与未服用知母皂甙口服液时相同。

(四)结果：

经14例不完全统计，病人面部痤疮，满月脸，多汗、失眠多梦等征候未出现或很快消除，心率基本可控制在80次/分，有效率为96.5％，且未发现其它毒副作用。

因糖皮质激素的副作用较多，本实验仅以几项主要外部体征为观察指标，科学性有待进一步探讨。但从疗效可知，Ⅰ组病人出现几项副作用体征，加服知母皂甙溶液后可很快消除。Ⅱ组病人则因同时加服知皂甙深夜而未出现副作用体征。临床疗效可重现实验室对升高的β一受体具有调节作用这一结论。说明知母皂甙确有消除糖皮质激素副作用的特殊功效。

采用知母总皂甙口服制剂的动物试验及临床试验结果表明，知母总皂甙毒性低，可降低甲亢模型大鼠β受体，在甲亢病临床治疗中，表明知母皂甙比心得安更快地减慢甲亢病人的心率至正常，并明显改善甲亢病人其它症状，知母总皂甙能显著消除糖皮质激素的常见副作用，特别是消除痤疮，满月脸，多汗，失眠多梦等体征。

本发明的其它口服制剂显示与口服液具有相同的药理作用及临床疗效。

本发明的知母皂甙口服制剂生产工艺简单，得率高，成本低，适合工业化生产。

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1：

取知母药材称重，加入6倍药材体积的50％乙醇，浸泡30分钟，回流提取2小时，倾出提取液，再加5倍体积的50％乙醇提取二次，每次1小时，合并提取液，减压回收乙醇至稠膏状，加水适量使溶解，冷藏，离心弃去沉淀，上层清液减压浓缩至干，放冷；加少量甲醇或乙醇溶解，加丙酮析出白色沉淀，离心，沉淀用丙酮洗涤，减压干燥得总皂甙。含量测定。

制备知母皂甙口服液：

取已知含量的知母皂甙适量，加蒸馏水适量(不超过最终用量)使溶解，加适量蔗糖，溶解，滤过，添加蒸馏水至每毫升含菝葜皂甙元3.5毫克，灌封，100℃流通蒸汽灭菌40分钟，即得。

本实施例的菝葜皂甙元的浓度在其溶解度的范围内可适量变化，相应地每次服用剂量作相应调整，以保证每次服用的剂量为成年人为35毫克菝葜皂甙元。

实施例2

提取方法同实施例1，提取剂乙醇的浓度可改变为70％，按本技术领域普通技术人员熟知的方法制备成颗粒剂；如加可溶性淀粉适量与知母皂甙提取物混匀，加80％乙醇湿润，制粒，流化床于燥，铝铂压膜袋包装，即得。

实施例3

提取方法同实施例1，提取剂乙醇的浓度可为30％。按本技术领域普通技术人员熟知的技术制备成片剂，或进一步采用常规方法制备成薄膜片或糖衣片。如取干燥玉米粉适量与知母皂甙混匀，加10％淀粉浆作粘合剂，制粒，干燥，加适量滑石粉和硬脂酸镁，压片。

实施例4

提取方法同实施例1，制备口服液的方法同实施例1，提取剂乙醇的溶液为75％。

实施例5

提取方法同实施例1，制备成片剂，提取剂乙醇的浓度为70％。

本发明除可采用上述实施例之口服剂型外，还可以采用其它的口服剂型，其它口服剂型的疗效与前述实施例相类似。

本发明不限于上述实施例。

Claims (4)

1．一种降低病理性升高的β受体的药物，为知母总皂甙的口服制剂。

2．一种如权利要求1所述的降低病理性升高的β受体的药物的生产工艺，包括知母总皂甙的提取及常规的口服制剂的制备，其特征在于知母总皂甙的提取方法为：采用乙醇水混合物浸泡提取，减压回收乙醇至稠膏状，加水溶解，冷藏，离心弃去沉淀，上层清液减压浓缩至干，放冷后加少量甲醇或乙醇溶解，加丙酮析出白色沉淀，离心、沉淀用丙酮洗涤，减压干燥。

3．根据权利要求2所述的降低病理性升高的β受体的药物的生产工艺，其特征在于知母总皂甙的提取采用如下条件：

(1)提取剂采用乙醇，其用量以体积百分比计为30％～70％；

(2)加上述醇水混合物提取2～3次。

4．根据权利要求2所述的降低病理性升高的β受体的药物的生产工艺，其特征在于提取剂乙醇的浓度采取50％体积百分比。