CN106167814A - 一种提高阿卡波糖发酵单位的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种提高阿卡波糖发酵单位的方法，通过对游动放线菌Actinoplanes sp.斜面菌种培养光照条件进行控制来提高发酵单位。根据实验结果可以看出Actinoplanes sp.斜面培养过程中，使用白炽灯为光源，光照时间控制在12‑20h/天、照度120‑180lux时能够提高发酵单位，尤其光照控制时间在12‑16h/天、光照强度为150‑180lux时发酵单位显著提高。
Description
技术领域
本发明涉及一种提高发酵单位的方法，尤其涉及一种提高阿卡波糖发酵单位的方法，属医药技术领域。
背景技术
阿卡波糖是由游动放线菌(Actinoplanessp)发酵生产的假性四糖物质，中文别名:O-4,6-双脱氧-4[[(1S,4R,5S,6S)4,5,6-三羟基-3-(羟基甲基)-2-环己烯]氨基]-(-D-吡喃葡糖基(1→4)-O-)-D-吡喃葡糖基(1→4)-D-吡喃葡萄糖。阿卡波糖能与α-葡萄糖苷酶发生竞争性抑制作用(Wehmeier UF，Piepersberg W.Biotechology and molecularbiology of theα-glucisidase inhibitoracarbose[J].Appl Microbiol Biotechnol，2004，63:613-625)抑制食物的多糖分解，使糖的吸收相应减缓，从而减少餐后高血糖，配合饮食治疗糖尿病。
微生物的代谢途径是由许多关联的代谢途径协同完成的，而且其代谢活动能根据外界环境的变化进行高度调节(参见储炬、李友荣.现代工业发酵调控学[M].北京：化学工业出版社，2002)。菌种的生理特性对于目的产物的生成是关键因素，但是发酵条件，如基质成分及代谢产物及其浓度、温度、pH值、溶解氧的控制不仅关系到微生物的生长，而且还影响代谢产物的产量。发酵过程中，培养基的组成及培养条件对产量影响很大，必须进行最优化控制。(参见罗立新.微生物发酵生理学[M].北京：化学工业出版社，2009)。
现有的发酵工艺使用菌种接入斜面培养基中进行斜面培养。传统斜面培养过程中一般采用全程避光或自然光照，对光照的时长和强度不进行控制，存在发酵单位低等问题。
发明内容
本发明的目的就是克服现有技术之缺陷、提供一种提高阿卡波糖发酵单位的方法，该方法通过控制斜面培养过程中的光照时长、光照强度和光照颜色来提高斜面菌种的质量，从而提高发酵单位。
本发明所述技术问题是由以下技术方案解决的。
一种提高阿卡波糖发酵单位的方法，通过对游动放线菌Actinoplanes sp.斜面菌种培养光照条件进行控制来提高发酵单位的方法。
上述提高阿卡波糖发酵单位的方法，所述光照条件控制是指使用白炽灯为光源，将光照强度调整为30-300lux、光照时间控制在0-24小时/天。
上述提高阿卡波糖发酵单位的方法，光照强度为120-180lux，更优选的，光照强度为150-180lux。
上述提高阿卡波糖发酵单位的方法，光照控制时间在12-20h/天，更优选的，光照控制时间在12-16h/天。
上述提高阿卡波糖发酵单位的方法，所述斜面菌种培养，其斜面培养基的组成为蔗糖30g/L、蛋白胨5g/L、KC10.5g/L、KH2P041.0g/L、L-酪氨酸1g/L、MgS040.5g/L、琼脂20g/L、溶剂为水，初始pH为7.0。
本发明在研发过程中，意外发现光照对游动放线菌Actinoplanes sp.斜面菌种的影响较大，调节斜面培养过程中的光照会对发酵单位产生影响。根据实验结果可以看出Actinoplanes sp.斜面培养过程中，使用白炽灯为光源，光照时间控制在12-20h/天、照度120-180lux时能够提高发酵单位，尤其光照控制时间在12-16h/天、光照强度为150-180lux时发酵单位显著提高。
附图说明
图1是光照时长及照度对小试发酵摇瓶单位的影响曲线图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。
实施例1光照条件试验
(1)种子瓶种子培养
每支培养好的新鲜斜面接种于种子培养基装量为20％的500m1三角瓶中，27℃温度条件下，在摇床上以250r/min的转速振荡培养48h，制得摇瓶种子液；
(2)摇瓶发酵
按15％接种量将培养好的母瓶种子液接至发酵培养基装量为10％的500m1三角瓶中，27℃温度条件下以250r/min的转速振荡培养168h；
实验结果见图1，由图1可以看出Actinoplanes sp.斜面培养过程中，使用白炽灯为光源，光照时间控制在12-20h/天、照度120-180lux，更佳为12-16h/天、照度150-180lux。
实施例2对比实验
配制斜面培养基，其培养基组成如下:蔗糖30g/L、蛋白胨5g/L、KC10.5g/L、KH2P041.0g/L、L-酪氨酸1g/L、MgS040.5g/L、琼脂20g/L、溶剂为水，初始pH为7.0。121℃灭菌30分钟。
配制种子瓶培养基，其培养基组成如下：淀粉10g/L、黄豆饼粉10g/L、CaCO32g/L、甘油20g/L、溶剂为水，初始pH为7.0。121℃灭菌30分钟。
配制发酵摇瓶培养基，其培养基组成如下：麦芽糖60g/L、葡萄糖20g/L、黄豆饼粉15g/L、FeCl30.2g/L、CaCL2 2g/L、CaCO3 4g/L、谷氨酸钠2g/L、KH2P04 1g/L、溶剂为水初始pH为7.0。121℃灭菌30分钟。
斜面菌种制备：无菌转移低温甘油管菌株于新鲜、无菌斜面培养基中。一组(对照组1)28℃下遮光培养6天。第二组(对照组2)28℃下室内自然光照(照度80-150lux)培养6天。第三组(实验组1)28℃下使用150lux的白炽灯光照射16h/天，培养6天。第四组(实验组2)28℃下使用180lux的白炽灯光照射12h/天，培养6天。
分别挑取两组斜面菌种接种于种子培养基内，27℃温度条件下，在摇床上以250r/min的转速振荡培养48h，制得摇瓶种子液；按15％接种量将培养好的母瓶种子液接至发酵培养基装量为10％的500m1三角瓶中，27℃温度条件下以250r/min的转速振荡培养168h。测定发酵单位结果见表1。
表1发酵单位测定结果
由表1结果可知，通过调节游动放线菌Actinoplanes sp.斜面培养的光照条件，能对发酵单位产生很大的影响。使用白炽灯为光源，光照时间控制在12-20h/天、照度120-180lux时，与采用室内自然光照条件相比，能够提高发酵单位，尤其光照控制时间在12-16h/天、光照强度为150-180lux时，发酵单位提高更为显著。
Claims (5)
1.一种提高阿卡波糖发酵单位的方法，其特征在于，通过对游动放线菌Actinoplanessp.斜面菌种培养光照条件进行控制来提高发酵单位的方法。
2.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖发酵单位的方法，其特征在于，所述光照条件控制是指使用白炽灯为光源，将光照强度调整为30-300lux、光照时间控制在0-24小时/天。
3.根据权利要求2所述的提高阿卡波糖发酵单位的方法，其特征在于，所述光照强度为120-180lux，光照控制时间在12-20h/天。
4.根据权利要求3所述的提高阿卡波糖发酵单位的方法，其特征在于，所述光照控制时间在12-16h/天，光照强度为150-180lux。。
5.根据权利要求4所述的提高阿卡波糖发酵单位的方法，其特征在于，所述斜面菌种培养，其斜面培养基的组成为蔗糖30g/L、蛋白胨5g/L、KC10.5g/L、KH2P041.0g/L、L-酪氨酸1g/L、MgS040.5g/L、琼脂20g/L、溶剂为水，初始pH为7.0。
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