CN106137896A - 一种利用刺参制备功能性原料的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种包括下列步骤的利用刺参制备功能性原料的方法：步骤(a)，准备刺参粉碎物；及步骤(b)，对该刺参粉碎物进行丝氨酸蛋白酶处理并予以反应。本发明的功能性原料呈现出优于现有刺参萃取物的抗炎活性、美白活性及改善皱纹活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用刺参制备功能性原料的方法，具体地说，该功能性原料的制备方法是对刺参进行丝氨酸蛋白酶处理。
背景技术
刺参(Stichopus japonicus)属于棘皮动物，在全世界分布着1,500多种，在韩国则有4科14种栖息。刺参广泛地分布于韩国的整体沿岸，其中主要作为食用用途的仿刺参根据其颜色被称为绿刺参、红刺参、黑刺参。自古以来，刺参号称“海上人参”并被视为最好的中药材，近来由于全世界兴起健康幸福热而使得含有滋养壮阳效果、抗癌效果、预防肥胖、预防高血压等成分的刺参的消费量在中国、日本及韩国急剧增加。为此，韩国的海洋水产部业已把刺参指定为韩国8大健康水产物之一，而且其重要性日益获得重视。
刺参由粘结性较强的糖蛋白构成并且水分含量高达90％，因此在流通过程中容易变性。因此，刺参一直是以生刺参状态冷藏保管后数日内食用或者以干燥或罐头之类的形态加工后流通。但如前所述，干燥保管时较难维持其独特风味并且由于其肉质较厚常因为脱水等原因而加速腐败，热式干燥时则出现破坏营养素之类的问题。加工成罐头时由于长时间保管在罐头内的溶液里而使得刺参内水分含量过高并影响其咀嚼感而无法呈现出新鲜感，而且还容易变性。
因此，迫切需要开发出一种能够便利地使用具备高营养效能或生理效能价值的刺参的加工方法。
发明内容
【解决的技术课题】
本发明的目的是提供一种利用刺参制备功能性原料的方法。
前文没有提到的本发明其它目的或具体目的可以从后述说明中得到明确阐释。
【解决课题的技术方案】
在本发明的一实施例中，本发明揭示一种利用刺参制备功能性原料的方法。
如从下列实施例及实验例中所得知的，本发明人确认了下列事项后完成了本发明：对清除了内脏的刺参粉碎物进行作为蛋白质分解酶的丝氨酸蛋白酶处理后得到的刺参的丝氨酸蛋白酶处理物的抗炎活性、美白活性及改善皱纹活性等显著地优于刺参的70％乙醇萃取物。
如前所述，刺参的丝氨酸蛋白酶处理物的美白活性之类的生理活性优于一般刺参萃取物，据推测，这是因为通过丝氨酸蛋白酶处理的方式让各种功能性物质新生成或者让现存的功能性物增加。
本发明的利用刺参制备功能性原料的方法包括下列步骤：步骤(a)，准备刺参粉碎物；及步骤(b)，对该刺参粉碎物进行丝氨酸蛋白酶处理并予以反应。
在本说明书中，“功能性”指的是下列实验例中得到确认的抗炎活性、美白活性、改善皱纹活性中的一个以上。
刺参(Stichopus japonicus)通常根据其外皮颜色而分为红刺参(Stichopusjaponicus Red)、绿刺参(Stichopus japonicus Blue)及黑刺参(Stichopus japonicusBlack)，上述刺参全部能够适用于本发明的方法。
在本发明的方法中，刺参粉碎物指的是洗涤刺参后为了进行丝氨酸蛋白酶处理而粉碎成适当的尺寸。刺参粉碎物虽然可以从没有清除内脏的刺参本身获取，但如下列实施例所示地从清除了内脏的刺参获取较佳。一般来说，由于内脏存在着包括酶在内的很多蛋白质而在进行丝氨酸蛋白酶处理时会抑制其活性或发生意料之外的反应，在丝氨酸蛋白酶处理后加工时也有可能污染。
在本说明书中，“丝氨酸蛋白酶(serine proteases)”是一种另外称为丝氨酸内肽酶(serine endopeptidases)的酶(Hedstrom L.Chem Rev.2002Dec；102(12):4501-24)，它表示一种具有能够识别氨基酸丝氨酸部位并且把肽键予以分解的活性蛋白酶。该丝氨酸蛋白酶通常根据其结构而分为subtilisin系列的蛋白酶与chymotrypsin系列的蛋白酶(Ottesen Mm AND Svendsen I.Methods Enzymol.1970.19：199-215；Philipp MAND Bender ML.Mol.Cell.Biochem.198351(1)：5-32)，优选地，其表示下列实施例中所使用的subtilisin系列的丝氨酸蛋白酶。被称为碱性蛋白酶(alcalase)等名称的该Subtilisin系列的丝氨酸蛋白酶虽然可以直接从生物体分离出来后使用，但是已经有很多生技工程公司将其予以商品化后销售，因此向这些公司采购后使用较佳。商品化的Subtilisin系列丝氨酸蛋白酶，例如Sigma公司的Proteinase from Bacilluslicheniformis Type VIII(P5380)、Alcalase(P4860)、Proteinase bacterial TypeXXIV(P8038)产品；milipore公司的Subtilisin Carlsberg、Bacilluslicheniformis(572909)；novozyme公司的Alcalase 2.4L产品等。
影响丝氨酸蛋白酶的反应的因素可以包括酶处理浓度、反应温度及反应时间等。一般来说，酶处理浓度较高时反应时间会缩短但费用增加。该酶处理浓度可以由本领域技术人员任意选择，但需要对反应时间、费用等因素进行综合考虑，考虑了上述因素时，以0.01％(v/v)～5％(v/v)的浓度范围较佳，0.1％(v/v)～1％(v/v)的浓度范围则更佳。反应温度可以在不妨碍丝氨酸蛋白酶活性的任何范围内实现。通常在20℃～80℃的温度范围实现。优选地，为了迅速充分地反应而在55℃～70℃温度范围实现。反应时间则可以在与酶处理浓度、反应温度的相关关系下决定。反应时间太短时酶无法充分反应，时间太长时可能会生成意料之外的反应生成物。鉴于前述观点，反应时间以30分钟到12小时较佳，1小时到3小时则更佳。酶处理后为了终止反应而适用本技术领域中公知的任何方法，例如可以适用高温处理,表面活性剂处理等方法。本发明的实施例在90℃维持20分钟并终止了反应。
在本发明的方法中，可以在上述反应步骤后为了清除反应残渣而进行过滤步骤。该步骤可以使用过滤体、过滤纸、过滤袋、自动吸入过滤器、压接过滤器等进行，也可以为了容易过滤而添加一种以上收录在食品添加剂法典(Korean FoodAdditives Codex)的二氧化硅、硅酸钙、硅藻土、膨润土、活性炭之类的过滤辅助剂。
在本发明的另一实施例中，本发明揭示了一种以根据前述方法得到的刺参的酶处理物为有效成分的抗炎症组合物、美白组合物及改善皱纹组合物(以下统称为“本发明组合物”)。
在本说明书中，上述“有效成分”指的是独立呈现出所需要的活性或者与本身不具备活性的载体一起呈现出活性的成分。
优选地，在本发明组合物中，上述有效成分是根据前述方法得到的红刺参的丝氨酸蛋白酶处理物。这是因为，下列实施例及实验例显示出红刺参的丝氨酸蛋白酶处理物在抗炎活性、美白活性及改善皱纹活性方面显著地高于绿刺参或黑刺参的丝氨酸蛋白酶处理物。
在本发明组合物中，只要能够呈现出抗炎活性、美白活性或改善皱纹活性，就能根据其用途、剂型、配方目的等因素而包含任意量(有效量)的该有效成分，以组合物整体重量为基准，一般有效量可以在0.001重量％到99.990重量％范围内决定其值。在此，“有效量”指的是能够诱导抗炎效果、美白效果或改善皱纹效果的有效成分的量。该有效量可以由本领域技术人员在通常能力范围内通过实验方式决定。
在具体实施例中，本发明组合物可以视为食品组合物。
本发明组合物为食品组合物时，食品的形态可以是茶、汁、碳酸饮料、离子饮料之类的饮料类；牛奶、酸奶之类的加工奶类；口香糖、糕、韩国传统糕点、面包、饼干、面之类的食品类；散剂、片剂、胶囊剂之类的健康食品制剂类等。
本发明的食品组合物除了其有效成分以外，还能包含甜味剂、风味剂、生理活性成分、矿物质等。
上述甜味剂可以举例玉米浆(Syrup)固形物、蜂蜜、蔗糖、果糖、乳糖等；上述风味剂可以举例取自柠檬、葡萄、草莓、桃子等的果汁、取自绿茶叶、玉竹、竹叶等者(例如水萃取物)；生理活性物质可以举例儿茶素(Catechin)、视黄醇、抗坏血酸、生育酚等。矿物质可以举例钙、镁、铬、钴等。而且，本发明的食品组合物除了包含上述甜味剂等物以外，还可以根据需要而包含保存剂、乳化剂、酸味料,增粘剂等。该保存剂等可以使用收录在各国(尤其是大韩民国)食品法典或食品添加剂法典者。
在另一个具体实施例中，本发明组合物可以视为药物组合物。
本发明的药物组合物除了其有效成分以外，还包括药剂学上允许的载体、赋型剂等，可以制成局部剂型，例如乳霜、乳液、软膏(半固形外敷药)、微乳剂、凝胶、糊剂(paste)、经皮给药制剂(TTS)(例如膏剂、绷带等)等。
关于药剂学上允许的妥当载体、赋型剂等、以及制剂化可以参考下列文献[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed.,1995)]。
本发明的药物组合物的一日投入量通常为0.001～150mg/kg体重范围，可以1次投入或分成数次投入。但，本发明的药物组合物的投入量是根据投入路径、患者年龄、性别、体重、患者的患病程度等各种相关因子决定的，因此无论从哪一个观点来说，上述投入量都不能被阐释为限定本发明的范围。
在另外一个具体实施例中，本发明组合物可以视为化妆品组合物。
本发明的化妆品组合物除了其有效成分以外，还包括通常应用于化妆品组合物的成分，例如可以包含稳定化剂、增溶化剂、表面活性剂、维生素、色素及香料之类的一般辅助剂及载体。
本发明的化妆品组合物可以制成本技术领域中通常制作的任何剂型，例如可以剂型化成溶液、悬浮液、乳状液、糊剂、凝胶、乳霜、乳液、粉末、肥皂、含界面活性剂的卸装剂、油、粉末粉底液、乳状粉底液、蜡状粉底液及喷雾剂等，但不限定于此。更具体地说，可以制成柔软化妆水、营养化妆水、营养乳霜、按摩乳霜、精华露、眼乳霜、卸妆霜、洗面奶、洗面水、面膜、喷雾剂或粉末剂型。
本发明的剂型为糊剂、乳霜或凝胶时，载体成分可以使用动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶,纤维素衍生物、聚乙二醇、硅胶、蒙脱土、二氧化硅,滑石或氧化锌等。
本发明的剂型为粉末或喷雾剂时，载体成分可以使用乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末，尤其是，如果是喷雾剂则可以另外包括氟氯烃(chlorofluorohydrocarbon)、丙烷/丁烷或二甲醚之类的推进剂。
本发明的剂型为溶液或乳状液时，载体成分使用溶剂、增溶化剂或乳浊化剂，例如水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙脂、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、甘油脂族酯、聚乙二醇或山梨聚糖的脂肪酸醚。
本发明的剂型为悬浮液时，载体成分可以使用水、乙醇或丙二醇酯类的液相稀释剂、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯(polyoxyethylene sorbitol ester)及聚氧乙烯山梨醇酐酯(polyoxyethylene sorbitan ester)之类的混悬液；微结晶性纤维素、偏氢氧化铝(aluminium meta hydroxide)、蒙脱土、琼脂或黄芪胶等。
本发明的剂型为含界面活性剂的卸装剂(cleansing)时，载体成分可以使用硫酸化脂肪醇、硫酸化脂肪醇醚、磺基琥珀酸单酯、羟乙基磺酸盐、咪唑啉衍生物、甲基牛磺酸盐、肌氨酸盐、脂肪酰胺醚硫酸盐(fatty acid amide ether sulfate)、烷基酰胺甜菜碱(alkyl amido betaine)、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基化甘油脂肪酸醚等。
本发明的化妆品组合物除了包含呈现抗炎活性、美白活性、改善皱纹活性的刺参的丝氨酸蛋白酶处理物以外，其余则可以由本发明技术领域通常进行的化妆品组合物制备方法制造。
【有益效果】
如前所述，本发明能够提供一种利用刺参的功能性原料制造方法。根据本发明的方法得到的功能性原料，亦即，刺参丝氨酸蛋白酶处理物的抗炎活性之类的生理活性优于一般刺参萃取物。
具体实施方式
下面结合实施例及实验例说明本发明。但，不得把本发明的范畴局限于该实施例及实验例。
<实施例>利用刺参的功能性原料的制备例
<实施例1>利用红刺参的功能性原料的制备例
清除刺参的内脏后使用粉碎器获得粉碎物，然后添加1.0倍水后备妥反应液。
之后，以总体积的0.5％(v/v)添加作为丝氨酸蛋白酶(serine proteases)的碱性蛋白酶2.4L(novozymes)并且在温度60±5℃维持2小时-3小时变换成溶液状态。接着，为了让酶失活而在温度90℃下搅拌了20分钟。
反应结束后，为了改善过滤性而添加了0.5％～1.0％(w/v)的过滤辅助剂，并且添加了0.1％(w/v)的具备脱臭与脱色效果的活性炭(A.C)。为了过滤溶液而通过压滤器(压接过滤器)得到滤液。溶液的固形粉含量为5～6％左右，使用真空浓缩器调节浓缩液(固形粉30％左右)后得到。
为了进行冻干过程，在预冻结(-70～-80℃)状态下放置了一个晚上。冻结的刺参萃取粉末液在冻干器(-70～-80℃)进行了48～72小时的干燥工序。
让冻干粉通过粉碎器及网筛(mesh)，使得利用红刺参的功能性原料变成萃取粉末形态。
<实施例2>利用绿刺参的功能性原料的制备例
和上述<实施例1>一样地制作功能性原料，但不使用红刺参而使用绿刺参。
<实施例3>利用黑刺参的功能性原料的制备例
和上述<实施例1>一样地制作功能性原料，但不使用红刺参而使用黑刺参。
<比较例>刺参萃取物的制备方法
在红刺参添加了70％(v/v)乙醇后萃取24小时。让上述萃取物通过压滤器进行过滤，为了进行冻干过程，在预冻结(-70～-80℃)状态下放置了一个晚上。冻结的红刺参萃取物在冻干器(-70～-80℃)进行了48～72小时的干燥工序。让冻干粉通过粉碎器及网筛(mesh)后得到萃取物粉末。
<实验例>确认利用刺参的功能性原料的活性
<实验例1>抗炎活性
<1-1>细胞毒性实验
培养RAW 264.7巨噬细胞株后使用它检查了通过上述各实施例制成的原料的细胞毒性。RAW 264.7巨噬细胞株是一种参与免疫的细胞，通常用来测量有关炎症反应的物质的活性。在添加了10％的胎牛血清(fetal bovine serum)的DMEM(Dulbecco'smodified Eagle medium)琼脂把RAW 264.7细胞4.0X104分株到96孔板，在5％二氧化碳及37℃恒温培养箱中培养了12小时。
细胞稳定化后，以0、10、50、100ug/ml的浓度处理各个试料并培养24小时后，使用WST-1检测试剂盒进行了反应。在450nm测量了吸光度，[表1]以相对于完全没有进行处理的组(0ug/ml)的百分率表示了细胞生存率。
【表1】
| 0ug/ml | 10ug/ml | 50ug/ml | 100ug/ml | |
| 比较例 | 100 | 102.2 | 104.5 | 106.9 |
| 实施例1 | 100 | 97.9 | 106.0 | 121.1 |
| 实施例2 | 100 | 98.6 | 102.1 | 106.4 |
| 实施例3 | 100 | 102.3 | 104.3 | 116.5 |
如上述[表1]所示，上述实施例的所有刺参酶处理物与比较例的刺参萃取物在10～100ug/ml浓度范围内没有呈现出细胞毒性。
<1-2>NO确认抑制生成效果
LPS(lipopolysaccharide)被认为在巨噬细胞引起炎症反应并且进而发挥出生成过氧化氮及TNF-a(Tumor necrosisfactor-a)、IL-6(Interleukin-6)、IL-1β(Interleukin-1β)之类的炎症细胞因子(cytokine)的作用。
为了检查通过上述各实施例制备好的刺参功能性原料的抗炎效果，使用RAW264.7巨噬细胞株进行了NO生成检查实验。把RAW 264.7细胞以1.0X104分株到96孔板并培养24小时后，以0、10、50、100ug/ml的浓度处理了各个试料。与此同时，以1ug/ml的浓度处理LPS后进一步培养了24小时。为了检查培养液游离的NO量，把50ul的培养液与同量Griess试剂(Griess reagent，Sigma公司)加以混合，在常温下反应15分钟后利用ELISA测量了540nm时的吸光度。用NaNO3制作了校正曲线。[表2]以相对于完全没有进行处理的组(0ug/ml)的百分率表示了NO生成率。
【表2】
| 0ug/ml | 10ug/ml | 50ug/ml | 100ug/ml | |
| 比较例 | 100 | 92.1 | 71.5 | 56.7 |
| 实施例1 | 100 | 88.6 | 49.2 | 35.3 |
| 实施例2 | 100 | 91.6 | 67.2 | 52.3 |
| 实施例3 | 100 | 91.4 | 63.5 | 51.7 |
如上述[表2]所示，使用通过上述各实施例制备好的刺参功能性原料时能够减少巨噬细胞的NO生成率，其抑制NO生成的活性优于比较例的萃取物。
<1-3>确认炎症细胞因子(cytokine)分泌抑制效果
为了检查通过上述各实施例制备好的刺参功能性原料对炎症细胞因子分泌的影响，在RAW 264.7细胞检查了IL-6及IL-8的生成量。把RAW 264.7细胞以2.0X105分株到24孔板并且培养24小时后，以0、10、50、100ug/ml的浓度处理了各个试料。与此同时，以1ug/ml的浓度处理LPS后进一步培养了24小时，然后利用ELISA方法(R&D systems)在450nm测量了IL-6及IL-8的浓度。[表3]及[表4]以相对于完全没有进行处理的组(0ug/ml)的百分率表示了其结果。
【表3】
IL-6生成量(％)
| 0ug/ml | 10ug/ml | 50ug/ml | 100ug/ml | |
| 比较例 | 100 | 83.1 | 69.4 | 49.2 |
| 实施例1 | 100 | 82.6 | 48.6 | 32.0 |
| 实施例2 | 100 | 82.8 | 63.4 | 46.4 |
| 实施例3 | 100 | 83.0 | 59.2 | 42.7 |
【表4】
IL-8生成量(％)
| 0ug/ml | 10ug/ml | 50ug/ml | 100ug/ml | |
| 比较例 | 100 | 94.3 | 80.2 | 72.7 |
| 实施例1 | 100 | 92.1 | 74.6 | 63.1 |
| 实施例2 | 100 | 93.7 | 78.2 | 69.4 |
| 实施例3 | 100 | 93.2 | 77.5 | 67.5 |
如上述[表3]及[表4]所示，相比于比较例的刺参萃取物，使用各实施例的刺参功能性原料时IL-6及IL-8炎症细胞因子的分泌显著地减少。
作为结论，可以得知本发明的刺参功能性原料具备了优于一般刺参萃取物的抗炎活性。
<实验例2>皮肤美白活性
利用通过上述各实施例制备好的刺参功能性原料及比较例的刺参萃取物进行了皮肤美白活性检查实验。
皮肤颜色受到血管分布、血色素、角质层厚度及胡萝卜素、黑色素(melanin)等各种因素的影响，黑色素的分布状态及量对皮肤颜色的影响较大。因此为了验证美白效果而证明是否抑制黑色素的生成是非常重要的。
把B16F10小鼠黑素瘤(melanoma)细胞以5.0×104cell/ml分株到6孔板，在添加了10％FBS与1％抗生素的DMEM琼脂中以37℃、5％CO2在5％浓度的CO2培养基以37℃培养了24小时。第二天，清除了现有的琼脂后在新琼脂以各个浓度(0、10、50、100ug/ml)把试料与诱导黑色素生成反应的a-MSH(200nM)一起处理。培养2天后更换新琼脂，然后进一步培养了2天。清除了培养液后，利用磷酸缓冲溶液(PBS)清洗了2次，进行了含有10％二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的1N氢氧化钠(NaOH)处理并且在80℃培养了1小时。然后，利用酶标仪(microplate reader)在475nm测量了吸光度。利用合成的黑色素溶液绘出标准曲线后，代入测量值计算了黑色素生成量，[表5]显示了相对于完全没有进行处理的组(0ug/ml)的百分率平均值。把没有处理a-MSH的组作为对照组使用。
【表5】
| 对照组 | 0ug/ml | 10ug/ml | 50ug/ml | 100ug/ml | |
| 比较例 | 14.2 | 100 | 90.1 | 67.4 | 38.1 |
| 实施例1 | 14.0 | 100 | 89.3 | 43.9 | 21.5 |
| 实施例2 | 14.7 | 100 | 89.5 | 62.4 | 34.6 |
| 实施例3 | 14.3 | 100 | 89.7 | 58.7 | 29.4 |
如上述[表5]的结果所示，相比于比较例的刺参萃取物，使用通过上述各实施例制备好的刺参功能性原料时抑制黑色素生成的效果更好，活性呈浓度依赖性地增加。
<实验例3>改善皱纹活性
<3-1>确认弹性酶(elastase)活性抑制效果
皮肤中的弹性蛋白(elastin)和胶原质(collagen)是主要的弹力纤维组成成分之一。因此凭借着作为弹性蛋白分解酶的弹性酶(elastase)的抑制活性确认了皮肤皱纹改善效果。
让弹性酶溶入50mM tris-HCl缓冲液(pH 8.6)制成2.5unit/ml的溶液。让5mgN-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide溶入1ml 50mM tris-HCl缓冲液制成贮备溶液(stock solution)，以N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide(0.5mg/ml)稀释后使用。以各个浓度(0、10、50、100ug/ml)把试料添加到96孔板后，加入弹性酶并且各按照100ul添加了N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide。反应液在37℃培养20分钟后在410nm测量了吸光度，按照下列数学式计算了弹性酶抑制率。其结果则显示在[表6]。
弹性酶抑制率(％)＝(1-各试料浓度的吸光度/非添加组(0ug/ml)的吸光度)×100
【表6】
| 10ug/ml | 50ug/ml | 100ug/ml | |
| 比较例 | 17.2 | 28.7 | 49.1 |
| 实施例1 | 18.4 | 52.6 | 73.3 |
| 实施例2 | 17.6 | 32.5 | 54.6 |
| 实施例3 | 18.2 | 36.4 | 57.5 |
如上述[表6]所示，使用通过上述各实施例制备好的刺参功能性原料时抑制弹性酶(elastase)活性的效果优于比较例的刺参萃取物，并且呈现出浓度依赖性。
<3-2>确认细胞内胶原酶活性抑制效果
通过细胞实验确认了胶原酶(collagenase)的活性抑制效果，该胶原酶能够把给予皮肤弹力时发挥主要角色的胶原质加以分解。
把人正常成纤维细胞(Human normal fibroblast)以2.0x105细胞分株到含有DMEM琼脂的6孔板，在5％浓度的CO2培养基以37℃培养了24小时。在各个孔(well)清除琼脂后以各个浓度(0、10、50、100ug/ml)处理了试料，也一起处理了作为胶原酶活性诱导物质的豆蔻酸-佛波醇-乙酸酯(phorbol myristate acetate)(PMA,Sigma)。进一步培养了24小时后，收集细胞琼脂后制成样本。为了测量作为胶原质分解酶的胶原酶的活性程度，使用对应于胶原酶的抗体进行了实验。根据BiotrakTM MMP-1活性试剂盒(GE healthcare)的实验方案(protocol)进行了实验，以405nm的吸光度进行了测量。对于胶原酶的活性，[表7]以相对于完全没有进行处理的组(0ug/ml)的百分率表示了其结果。
【表7】
| 0ug/ml | 10ug/ml | 50ug/ml | 100ug/ml | |
| 比较例 | 100 | 87.2 | 74.1 | 59.7 |
| 实施例1 | 100 | 86.5 | 63.7 | 37.6 |
| 实施例2 | 100 | 87.0 | 71.4 | 52.5 |
| 实施例3 | 100 | 86.6 | 68.5 | 49.6 |
如上述[表7]的结果所示，和针对一般刺参萃取物进行处理时相比，针对如上述各实施例所示地制作的刺参功能性原料进行处理时显著地降低了胶原酶活性。
因此，使用本发明的刺参功能性原料时能够获得优于刺参一般萃取物的改善皱纹效果。
Claims (6)
1.一种利用刺参制备功能性原料的方法，其包括下列步骤：
步骤(a)，准备刺参粉碎物；
及步骤(b)，对该刺参粉碎物进行丝氨酸蛋白酶处理并予以反应。
2.根据权利要求1所述的利用刺参制备功能性原料的方法，其特征在于，
上述刺参是清除了内脏的刺参，
上述反应在55℃～70℃的温度下进行1小时～3小时。
3.一种抗炎症用食品组合物，其特征在于，
以通过权利要求1或2所述的方法得到的功能性原料作为有效成分。
4.一种抗炎症用化妆品组合物，其特征在于，
以通过权利要求1或2所述的方法得到的功能性原料作为有效成分。
5.一种美白用化妆品组合物，其特征在于，
以通过权利要求1或2所述的方法得到的功能性原料作为有效成分。
6.一种改善皱纹用化妆品组合物，其特征在于，
以通过权利要求1或2所述的方法得到的功能性原料作为有效成分。
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| CN106137896B (zh) | 2019-04-30 |
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Legal Events
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Granted publication date: 20190430 Termination date: 20210415 |