Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Reaktionsprodukten von Riboflavin und/oder Ribose und Formaldehyd mit normalisierender Wirkung auf den abnormalen Zellstoffwechsel.
Das erfindungsgemässe Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, dass man Riboflavin und/oder Ribose in einer Formaldehyd enthaltenden wässrigen Lösung bis zum Sieden der Lösung so lange erhitzt, bis sich das Riboflavin und/oder die Ribose vollständig löst. Die Umsetzung wird zweckmässig bei einem Überschuss an Formaldehyd durchgeführt. Das Reaktionsgemisch kann in diesem Falle durch wiederholtes Aufnehmen von Wasser und Verdampfen desselben von überschüssigem Formaldehyd befreit werden.
Die Kondensation wird zweckmässig in wässriger Lösung durchgeführt.
Es können bei der Kondensation zusätzlich Metallverbindungen und/oder Adenin zugegeben werden. Als Metallverbindungen kommen z. B. in Frage Magnesiumsulfat, Calciumlactat, Eisen-II-sulfat, Kaliumpermanganat und Mangandioxyd einzeln oder in Mischung.
Auch Zitronensäure kann mitverwendet werden.
Es können Aktivatoren zur Beschleunigung der Kondensation verwendet werden, so kann man bei kurzwelliger Strahlung arbeiten.
Die so gewonnenen Kondensationsprodukte können verdünnt als solche appliziert werden, sie können aber auch zur Trockne eingedampft, vorzugsweise durch Gefriertrocknen konzentriert und als solche oder konfektioniert verabreicht werden. Die Applikation kann vorzugsweise oral oder parenteral erfolgen. Die neuen Produkte sind sehr beständig, vertragen eine lange Lagerzeit, sie sind von geringer Toxizität und gut verträglich, ohne irgendwelche unerwünschten Nebenerscheinungen aufzuweisen.
Ausführungsbeispiele
1. 1 g Riboflavin wird mit 10 ml einer 40%igen Formaldehydlösung bei Siedehitze kondensiert. Es bildet sich eine durchsichtige, orangenfarbene Lösung. Diese Lösung wird mit Wasser auf das Doppelte ihres Volumens verdünnt. Um den Überschuss an Formaldehyd zu entfernen, wird die Hälfte der so entstehenden Lösung verdampft. Falls der Geruch des Formaldehyds hierbei nicht verschwindet, wird das Konzentrat mit Wasser nunmehr auf das Doppelte seines Volumens mehrmals verdünnt und jeweils die Hälfte der so entstehenden Lösung verdampft, bis der Geruch des Formaldehyds völlig verschwunden ist.
Der pH-Wert dieses flüssigen Präparates ist ungefähr 3,0.
Durch die freie Löslichkeit des Kondensationsproduktes wird nachgewiesen, dass ein neues Kondensationsprodukt von Riboflavin mit Formaldehyd gebildet worden ist; während für 1 g Riboflavin wenigstens 300 ml Wasser erforderlich sind, um eine wässrige Lösung zu bilden, löst sich 1 g des neuen Kondensationsproduktes leicht in 10 ccml Wasser bei Raumtemperatur.
2. 1 g Riboflavin wird in 10 ml einer 40%igen Formaldehydlösung, bis es gelöst ist, auf Siedetemperatur erhitzt.
Die Lösung wird hierauf durch Verdampfen auf 1/3 ihres Volumens konzentriert. Beim Abkühlen des so gewonnenen Konzentrats auf Raumtemperatur bildet sich ein Gel, das sich beim Erhitzen wieder verflüssigt.
Um den Überschuss an Formaldehyd davon zu entfernen, wird dem Gel Wasser zugesetzt, bis das anfängliche Volumen erreicht ist. Diese Lösung wird wiederum durch Verdampfen auf 1/3 ihres Volumens konzentriert. Die Zugabe von Wasser und das Konzentrieren wird wiederholt, bis der Geruch des Formaldehyds vollständig verschwunden ist.
3. 1 g Riboflavin wird in 10 ml einer 40%igen Formaldehydlösung, bis es gelöst wird, zum Sieden erhitzt. Die Lösung wird hierauf zur Trockne eingedampft.
Beim Abkühlen auf Raumtemperatur bilden sich mit dem blossen Auge sichtbare Kristalle.
Die nach Ausführungsbeispiel 1 in flüssiger Form, nach Beispiel 2 in Gelform, und nach Beispiel 3 in kristalliner Form erhaltenen Kondensationsprodukte enthalten 1 g Riboflavin in Form eines Kondensationsproduktes.
4. Es wird ein Kondensationsprodukt von Formaldehyd mit Formosen und Metallsalzen, die in dem Reaktionswasser gelöst und aktiv gegen Krebswucherungen wirksam sind, hergestellt.
95 % Formaldehyd enthaltendes Paraformaldehyd wird mit den folgennden anorganischen Salzen, die als Polymerisationskatalysatoren dienen, wie sie für die Bildung von Formosen erforderlich sind, vermischt. In diesem und in den folgenden Ausführungsbeispielen werden solche anorganischen Salze und Verbindungen, die Aminogruppen enthalten, die Metallformiate in Vivo bilden können und die Ribonucleoproteinsynthese beeinflussen. zugesetzt.
750 g Paraformaldehyd werden gemischt mit:
8 g Magnesiumsulfat (die Mg-Ionen sind erforderlich für die Aktivität der interzellulären Enzyme - ausser denen der Phosphatase. Sie verkleinern das Zusammenziehvermögen der Nervenenden, wodurch der Schmerz des Krebses gelindert wird.
10 g Kalziumlactat (Ca-Ionen werden übermässig von den Krebszellen entfernt, wodurch das Zusammenziehen der Nervenenden und der Schmerz hervorgerufen wird. Sie sind unerlässlich für die Bildung von Thrombin, einem Heilenzym).
1 g Magnesiumdioxyd (ein oxydierender und antianämischer Faktor),
1 g Ferrosulfat (um dem Hamoglobin Ionen und den S Aminosäuren Schwefelionen zu liefern),
0,5 g Kaliumpermanganat (die genannten Ionen erhöhen die intrazelluläre Oxydation und erleichtern das Eindringen des Kondensationsproduktes in die Krebszellen),
9 g Adenin (ein Katalysator der Formaldehydpolymerisation. Es verbindet sich mit Ribose in vivo, wobei es coenzymeaktive Prinzipien in der Synthese von Ribonucleoproteinen bildet) und
50 g Zitronensäure (ein Katalysator der Formaldehydpolymerisation. Sie verringert den pH-Wert des Präparates, wodurch die Affinität zum Verbinden des alkalischen Stoffwechselproduktes und seine Löslichkeit erhöht werden.
Das Gemisch ist fast geruchlos. Wasser von Siedetemperatur wird dem Gemisch sodann zugesetzt, bis ein Volumen von 1500 ml erreicht ist. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Lösung 12 Stunden lang auf die Temperatur der grössten Dichte, 4" C, gebracht, um fast vollständige Polymerisation des Formaldehyds zu bewirken. Die Lösung wird dann ultravioletten oder Sonnenstrahlen unterworfen, um Formose zu bilden. Die Lösung wird sodann über einer freien Flamme bis zur fast vollständigen Verdampfung erhitzt.
Dem Rückstand wird Wasser zugesetzt, bis das anfängliche Volumen erreicht ist, und die Lösung wird wiederum verdampft. Man erhält 50 g eines Produktes von bräunlicher Farbe. Der pH-Wert der Wasserlösung liegt bei ungefähr 3,0.
5. Das gegenwärtige Wissen über Riboflavin, d. h. Dimethylribitylisoalloxazin, ist fast nur auf die biologischen Aktivitäten von Isoalloxazin, auch Flavin genannt, beschränkt. Flavin ist als gelbes Enzym an Proteine gebunden, wodurch Flavoproteine gebildet werden, die in allen lebenden Zellen vorliegen und die an der Oxydation von Zukker und der Gewebeatmung beteiligt sind.
Dieses Ausführungsbeispiel beschreibt die Herstellung eines sauren Kondensationsproduktes, das gegen Neoplas men aktiv ist und durch direkte Umsetzung von Formaldehyd mit Zuckerribityl, das sich aus der Zersetzung von Riboflavin herleitet, erhalten wird. Das Flavinsystem nimmt an der Umsetzung nicht teil, ist aber im Endkondensationsprodukt mit den oben beschriebenen Eigenschaften vorhanden und kann durch den Fluoreszenzindex gemessen werden.
750 g Paraformaldehyd, das 95 % Formaldehyd enthält, werden mit 250 g Riboflavin vermischt. Die Löslichkeit von Riboflavin erhöht sich mit dem höheren Formaldehydgehalt.
Der Suspension wird bis zu einem Volumen von 1500 ml heisses Wasser zugesetzt, wodurch eine homogene pastenartige Substanz, die ungefähr 50% Formaldehyd enthält, anfällt. Das Gemisch wird auf den Siedepunkt von ungefähr 110 C erhitzt. Während des Siedens bildet sich eine durchsichtige orangenfarbene Lösung. Die Lösung wird durch Verdampfen konzentriert und wiederum mit Wasser verdünnt, bis der Geruch des Formaldehyds verschwindet. Das Endkondensationsprodukt wird auf das gewünschte Volumen von 1250 ml verdünnt. Es ist hell orangenfarben, frei in Wasser löslich und hat einen pH-Wert von ungefähr 3,0.
6. 750 g Paraformaldehyd, das 95 % Formaldehyd enthält, werden mit 250 g Riboflavin vermischt. Dem Gemisch wird heisses Wasser bis zu einem Gesamtvolumen von 1500 ml zugesetzt. Die pastenartige Suspension wird zum Sieden gebracht und auf ein Fünftel ihres Volumens verdampft. Sie wird dann zweimal auf das anfängliche Volumen verdünnt und wiederum auf ein Fünftel ihres Volumens konzentriert.
Beim Abkühlen des Konzentrates auf Raumtemperatur bildet sich ein dunkles, hartes Gel.
7. 750 g Paraformaldehyd, das 95 % Formaldehyd enthält, werden mit 250 g Riboflavin vermischt. Dem Gemisch wird heisses Wasser bis zu einem Volumen von 1500 ml zugesetzt.
Das pastenartige Gemisch, das bei Siedetemperatur flüssig wird, wird zweimal auf ein Fünftel seines anfänglichen Volumens eingedampft. Das entstehende Gel wird wiederum in Wasser gelöst, und die Lösung wird fast zur Trockne eingedampft. Beim Abkühlen auf Raumtemperatur bilden sich mit dem blossen Auge sichtbare Kristalle. Sie dispergieren Licht in ein Spektrum, das durch ein Vergrösserungsglas gesehen werden kann und sind leicht in Wasser löslich. Die wässrige Lösung der Kristalle zerstreut Licht und reflektiert verschiedene Farben, je nach dem Winkel, aus dem man sie betrachtet.
8. 750 g Paraformaldehyd, das 95 % Formaldehyd enthält, werden mit 100 g Ribose vermischt und wie in Beispiel 7 beschrieben behandelt.
9. 750 g Paraformaldehyd, das 95% Formaldehyd enthält, werden vermischt mit:
8 g Magnesiumsulfat, 1 g Ferrosulfat, 10 g Kalziumlactat, 0,5 g Kaliumpermanganat, 1 g Mangandioxyd, 50 g Zitronensäure.
Der starke Geruch des Paraformaldehyds des Gemisches verschwindet fast vollständig. 250 g Riboflavin und 9 g Adenin werden diesem Gemisch zugesetzt und das Ganze sorgfältig vermischt. Das Gemischt wird aktiviert, indem es etwa 6 Stunden lang ultraviolettem Licht ausgesetzt wird. Nun wird heisses Wasser bis zu einem Gesamtvolumen von 1500 ml zugesetzt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur bildet sich ein pastenartiges Produkt, das 12 Stunden lang auf einer Temperatur von ungefähr-4 C gehalten wird, um die Polymerisation von Formaldehyd zu erhöhen. Das Gemisch wird weitere 24 Stunden ultraviolettem Licht ausgesetzt. Das bestrahlte Produkt wird dann über einer freien Flamme erhitzt und siedet bei einer Temperatur von ungefähr 110 C.
Bei der Siedepunkttemperatur ist das pastenartige Gemisch eine durchsichtige, orangenfarbene Flüssigkeit. Nachdem die Flüssigkeit zu einem dunklen Gel verdampft wurde, werden dem Gemisch 100 ml Wasser zugesetzt, und es wird wiederum verdampft. Dieses Vorgehen des Konzentrierens und Verdünnens wird noch einmal wiederholt, indem 500 ml Wasser zugesetzt werden und das Gemisch fast zur Trockne verdampft wird. Das entstehende Kondensationsprodukt ist ein schwarzes und hartes Material, aus dem durch Spalten Kristalle erhalten werden können. Das Kondensationsprodukt kann auch in flüssiger oder Gelform hergestellt werden, je nach dem Grad der Verdampfung, und es kann weiterhin zu festen oder flüssigen pharmazeutischen Präparaten verarbeitet werden.
10. Paraformaldehyd, das 95% Formaldehyd enthält, wird in folgenden Mengen mit anorganischen Salzen vermischt:
750 g Paraformaldehyd werden vermischt mit:
8 g Magnesiumsulfat, 10 g Kalziumlactat, 1 g Mangandioxyd, 1 g Ferrosulfat, 0,5 g Kaliumpermanganat, 50 g Zitronensäure.
Das Gemisch wird fast geruchlos. Man setzt 1500 ml siedendes Wasser zu. Nach dem Abkühlen des Gemisches auf Raumtemperatur wird die Lösung weiterhin bis zu einer Temperatur von 4" C abgekühlt und 12 Stunden lang auf der genannten Temperatur bis zur völligen Polymerisation des Formaldehyds gehalten. Die Lösung wird dann ultravioletten oder Sonnenstrahlen ausgesetzt, um Formose zu bilden. Die Lösung wird über einer freien Flamme zum Sieden erhitzt, bis sie fast völlig verdampft ist. Dem Rückstand werden nun 1500 ml Wasser zugesetzt, und das Gemisch wird wiederum verdampft. Man erhält 50 g eines Produktes von bräunlicher Farbe, das in 4000 ml Wasser gelöst werden kann. Der pH Wert der Lösung beträgt ungefähr 3,0.
Es wurde festgestellt, dass die Zusammensetzungen nach den Beispielen 1 bis 9, die durch Kondensation von Ribo flavin, Ribose oder Metallsalzen mit Formaldehyd oder Paraformaldehyd bei erhöhter Temperatur hergestellt werden, besonders heilsam sind für die Wiederherstellung des normalen Zellenstoffwechsels bei neoplastischen Verfahren. Die Kondensationsprodukte treten in das Protoplasma der Zellen. Sie haben eine besondere Affinität zu abnormalen Zellen und nehmen an ihren Stoffwechselprozessen teil. Sie besitzen die Eigenschaften eines Antistoffwechselproduktes und haben sich bei der Behandlung von tierischem und menschlichem Krebs, einschliesslich Leukämie, als wertvoll erwiesen.
Es wurden akute und chronische Toxizitätsversuche mit den genannten Präparaten an verschiedenen Arten von Tieren und Menschen durchgeführt. Es wurden weder Toxizität, noch Nebenerscheinungen oder Gegenanzeigen beobachtet.
Folgende pharmakologische Versuche wurden mit den neuen Präparaten nach der Erfindung durchgeführt:
Versuche mit Tieren
Vorbereitende Versuche wurden hauptsächlich mit plötzlich vom Krebs befallenen Tieren durchgeführt, um eine etwaige Wirksamkeit festzustellen. Die Kriterien der Wirk samkeit beruhten auf den drei kennzeichnenden Eigenschaf ten der Krebswucherung: Gewicht, Überlebenszeit und Rück bildung der Tumore.
Hühnchen-myelocytomatosis, eine Form von Vögelleukämiekomplex, verbunden mit Tumorbildung, wurde an
210 Hühnchen mit dem Präparat nach Beispiel 5 behandelt.
Zwei intermuskuläre Injektionen von 20 bis 50 Einheiten wurden in Zwischenräumen von 24 Stunden verabreicht. Nach einer Woche wurde eine vollständige Rückbildung der Tumore bei 156 Hühnchen, d. h. bei 75 % der behandelten Tiere, beobachtet.
Neoplasmen bei Hunden: 68 von verschiedenen Arten von Krebswucherungen befallene Hunde wurden mit dem Präparat nach Beispiel 5 behandelt. Gewebsuntersuchungen wurden bei 32 Hunden vorgenommen. Bei den anderen Hunden wurde die Diagnose aufgrund klinischer Symptome gestellt.
24 Tiere trugen einen primären Tumor, 44 wurden mit versprengtem Krebs erkannt. Alle Tiere wurden mit 200 bis 500 Einheiten des Präparates behandelt. Als Ergebnis dieser Behandlung zeigten 22 Hunde mit primärem Tumor eine Gewichtszunahme und der Tumor wurde zurückgebildet. Nach einem Jahr hatten ungefähr 50% der behandelten Tiere überlebt, waren normal und ohne Krebssymptome. 46 Hunde mit fortgeschrittenem Krebs zeigten auch eine Verbesserung durch teilweise Rückbildung der Tumore, erhöhtem Appetit und Gewichtszunahme und eine Verlängerung des Lebens, sie starben aber alle innerhalb von 6 Monaten.
Spontanadenokarzinom (Drüsenkrebs): 64 Mäuse C3H, bei denen gelegentlich Krebswucherungen festgestellt werden, wurden mit einer Dosis von 0,2 Einheiten in Zwischenräumen von 24 Stunden behandelt. 26 Mäuse dieser Gruppe mit einem einzigen primären Tumor mit einem Durchmesser von 5 mm oder weniger gingen auf die Behandlung ein. Innerhalb von 3 Monaten wurde eine vollständige und beständige Rückbildung der Tumore beobachtet. Die anderen 38 Mäuse mit fortgeschrittenem Krebs reagierten nicht voll auf diese Dosis.
Es wurden jedoch eine Verlängerung des Lebens um 2 bis 4 Wochen, teilweise Rückbildung der Tumore und zeitweise Gewichtszunahme beobachtet.
Versuche bei Rous-Sarkom wurden mit einer Gruppe von 20 jungen Hühnchen, die durch Virus und Krebs erzeugende Materialien des Rous Sarkom angesteckt waren, durchgeführt, wobei die Gruppe in 4 Gruppen mit jeweils 5 Hühnchen geteilt wurde. Drei Gruppen wurden mit 25 Einheiten des Präparates nach der Erfindung behandelt, die 4. Gruppe wurde als Vergleichsgruppe nicht behandelt. Die behandelten Hühnchen überlebten die Vergleichsgruppe um zwei bis drei Wochen. Der Tod der behandelten Gruppen wurde durch hämorrhagische Tumore, die sich durch die Virusinfektion entwickelten, verursacht. Ein weiteres charakteristisches Merkmal des Rous-Sarkom, die Aszites (Bauchwassersucht), trat bei den behandelten Tieren nicht auf.
Bei der Vergleichsgruppe entwickelten sich sowohl hämorrhagische Tumore als auch Aszites. Die Aszites entsteht durch das krebserzeugende Material. Der Versuch zeigt also, dass das neue Präparat das Auftreten von Krebs erzeugendem Aszites in den behandelten Hühnchen verhindert.
Nach der Erfindung hergestellte Präparate wurden auch menschlichen Patienten erfolgreich verabreicht. Ein Fall von Melanom, der nach der üblichen Methode unheilbar ist, zum Beispiel reagierte auf die Behandlung mit dem Präparat, wobei die Dosen von 200 bis 10 000 Einheiten variiert wurden, mit einer völligen und langanhaltenden Rückbildung der melanotischen Lymphgefässe und mit einem Schutz des Patienten gegen einen weiteren Anfall, mit dem Verschwinden des Schmerzes vom Tumor, mit dem guten allgemeinen Zustand des Patienten. Der Patient lebt noch 5 Jahre nach Beginn der Behandlung.
Ein anderer Patient mit sekundärem Andenokarzinom des Uterus mit Metastasen des Uterus wurde mit einer Serie von Dosen von 500 bis 25 Einheiten des erfindungsgemäss hergestellten Präparates behandelt. Der Patient zeigte einen guten Appetit, eine Gewichtszunahme und ist frei von vorhergehenden Krebssymptomen.
Eine dritte Patientin litt an primärem papillarem Adenokarzinom der Schilddrüse. Sie wurde in Zwischenräumen von einer Woche mit Dosen von 400 Einheiten bis 25 Einheiten behandelt. Eine Prüfung nach drei Monaten nach der Behandlung zeigte keine Abnormalität im Hals oder der Schilddrüsengegend. Die Zahl der roten Blutkörperchen war in normalen Grenzen. Die Patientin fühlt sich wohl, hat einen guten Appetit, behält ihr Gewicht bei und kann zwei Jahre nach der Behandlung bei bester Gesundheit arbeiten, wie vor dem Krankheitsanfall.
Bei einer Patientin mit fortgeschrittenem Brustkrebs mit Metastasen in Lungen und Gehirn wurden ebenfalls gute Ergebnisse erzielt. Die Patientin erhielt in Zwischenräumen von einer Woche Dosen von 25 bis 900 Einheiten. Nach mehr als drei Monaten wurde eine beträchtliche Verbesserung im Allgemeinzustand der Patientin, einschliesslich guten Appetit, normales Gewicht, Verschwinden des Schmerzes in Brust und Kopf und teilweise Rückbildung des Tumors der Brust und der Achsellymphdrüsen, beobachtet. Die Behandlung wird fortgesetzt.
Nach der Erfindung können auch antivirale Präparate hergestellt werden. Das folgende Beispiel veranschaulicht deren
Herstellung.
11. Ein besonders wirksames Antiviruspräparat wird wie folgt hergestellt: 0,5 g Ascorbinsäure werden mit 0,5 g einer 40 %igen Formaldehydlösung vermischt, und das Gemisch wird mit Wasser zu einem Volumen von 2 ml verdünnt. Die Lö sung wird zum Sieden erhitzt und auf die Hälfte, d. h. 1 ml, ihres Volumens verdampft. Die entstehende Lösung enthält das Kondensationsprodukt. Vollständiges Verdampfen der genannten Lösung zur Trockne ergibt ein festes Produkt, das leicht wieder in Wasser gelöst werden kann. Die wässrige Lösung des Kondensationsproduktes weist einen pH-Wert von ungefähr 2,3 auf. Beim Schütteln der wässrigen Lösung an der Luft findet eine Emulgierung statt, und die gesamte Lösung wird in einen Schaum umgewandelt. Wenn dieser Schaum stehengelassen wird, bildet sich erneut die Flüssigkeit.
Es wird eine wässrige Lösung des Kondensationsproduktes hergestellt, indem eine Menge von 1 zu 1 ml Wasser zugesetzt wird. Die entstehende durchsichtige Lösung ist orangenfarben. Um ihren Säuregehalt bei therapeutischer Verwendung zu neutralisieren, wird die Lösung weiterhin verdünnt, indem sie zu 100 ml Milch oder zu einem anderen schmackhaften Getränk zugesetzt wird, und die entstehende Verdünnung wird dann für orale Eingabe verwendet.
Für parenterale Verwendung wird 1 ml des Kondensationsproduktes mit keimfreiem Wasser bis zu 10 ml Volumen verdünnt.
Sowohl das orale als auch das parenterale Präparat werden für die heilende und vorbeugende Behandlung von Virusinfektionen bei Tieren, wie Newcastle-Krankheit, Hühnerpocken, Hundestaupe, Influenza beim Menschen, gewöhnliche Erkältung und andere, und auch für die Behandlung von Pflanzenviruskrankheiten verwendet.
Die Aktivität des Präparates wird durch die Inaktivierungswirkung auf extrazelluläre Bakteriophagen bestimmt.
Es wurden auf folgende Weise Versuche durchgeführt:
Zu 5 g des Präparates nach Beispiel 4 werden 500 ml destilliertes Wasser zugesetzt. Das Gemisch wird bei einem Druck von 15 lbs. 20 Minuten lang sterilisiert. Das steriliserte Gemisch wird zu einer Bakteriophagesuspension ph. 3,17 im Verhältnis 1:1, d. h. 2 ml Phage zu 2 ml Gemisch, zugesetzt.
Das entstehende Gemisch wird bei 25 C 24 Stunden lang gehalten.
Vergleichsversuche werden mit 2 ml Phage und 2ml destilliertes Wasser, die gemischt und bei 25" C gehalten werden, durchgeführt.
Nach 24 Stunden Inkubation wird die Konzentration der Phage an den beiden Röhren bestimmt, wodurch die Menge der Phagekolonien in einer Verdünnung von 10 bestimmt wird.
Die Wirksamkeit der antiviralen Zusammensetzungen des Beispiels 11 wurde an mehr als 60 000 Tieren, die spontan mit verschiedenen Viren beimpft wurden, gezeigt.
Die Versuche mit menschlichen lufluenzaviren bei Hühnchenembryo zeigten, dass die mit dem Präparat behandelten Embryos die Infektion im Gegensatz zu den Vergleichsembryos überlebten.
Klinische Versuche bei Influenza wurden mit mehreren hundert Patienten mit Fieber von fast 400 C durchgeführt.
Bald nach der oralen oder parenteralen Eingabe des Präparates fühlten sich die Patienten gut. Innerhalb von 15 Minuten nach der Eingabe begann die Temperatur zu sinken.
Falls die Temperatur nicht sank, lag auch keine Influenzainfektion vor. So kann das Präparat auch als diagnostisches Mittel für fiebrige Virus-Infektionen dienen. Die Virusphase der Influenza, ohne sekundäre bakterielle Infektion, wird gewöhnlich in einem Tag geheilt. Das Präparat wird in einer einzigen Dosis von 8 ml des oben genannten Präparates oral oder in einer Dosis von 10 ml parenteral eingegeben, was sich gewöhnlich als ausreichend erweist.
Beispiel 12
Dieses Beispiel beschreibt ein Additionspolymerisationsverfahren durch Zugabe von Wasserstoffperoxyd zum Reaktionsgemisch. Andere Oxydantien, z. B. Natriumhydroxyd, können ebenfalls verwendet werden. Die Umsetzung des Wasserstoffperoxyd enthaltenden Reaktionsgemisches bewirkt die vollständige Kettenreaktion des Gemisches. Die Endprodukte sind in Wasser ohne jeden Rückstand vollständig löslich und erhöhen so die therapeutische Wirksamkeit, verglichen mit den Reaktionsprodukten der vorhergehenden Beispiele.
Das Verfahren zur Herstellung von Reaktionsprodukten gemäss diesem Beispiel ist denen der vorhergehenden Beispiele analog. Der Unterschied besteht lediglich in der Zugabe von Wasserstoffperoxyd und der doppelten Gewichtsteile Oxydantien, d. h. Kaliumpermanganat, Mangandioxyd und Ferrosulfat, die durch das Wasserstoffperoxyd reduziert werden.
Das Verfahren wird wie folgt durchgeführt: Das Reaktionsgemisch, hergestellt für die erste Polymerisationsreak tion, setzt sich zusammen aus: 250 g Riboflavin, 10 g Adenin, 2 g Vitamin B6, 16 g Magnesiumperchlorat, 600 g Paraform aldehyd, 95 %ig, 2 g Kaliumpermanganat, 2 g Mangandioxyd, 2 g Ferrosulfat. Zu dieser Mischung werden 1500 ml Wasser zugesetzt. Das Reaktionsgemisch erhält eine sirupöse Kon sistenz und eine Orangefärbung.
Die Mischung wird 12 Stunden einer Ultraviolettbestrahlung ausgesetzt und dann 6 Stunden bei einer Temperatur von -12" C gefroren.
Dann wird das Reaktionsgemisch erhitzt. Nach einem Erhitzen von 45 Minuten siedet es bei 100" C und erreicht nach 80 Minuten eine Temperatur von fast 1200 C. Das Erhitzen wird unterbrochen. Das Reaktionsprodukt ist ein hartes, dunkelbraunes Harz mit saurer Reaktion gegenüber Lackmus.
Zu diesem Harz werden 50 ml Wasserstoffperoxyd, 50%ig, 950 ml Wasser = 1000 ml einer 2,5 %igen Wasserstoffperoxyd Iösung und 10 g Calciumlactat zugesetzt.
Das Reaktionsgemisch entwickelt spontan eine Hitze von etwa 50 C während etwa 8 Stunden. Nach dem Abkühlen auf etwa 20 C wird das Reaktionsgemisch 1Stunden lang ultravioletter Bestrahlung ausgesetzt und etwa 6 Stunden bei einer Temperatur von 12 C gefroren.
Das Reaktionsgemisch wird darauf innerhalb 65 Minuten auf 300 C erhitzt. Es siedet bei einer Temperatur von 99" C.
Nach dem Abkühlen erhält man ein schwarzes, weiches harzartiges Material, das 500 g wiegt. Man nimmt keinen Formaldehydgeruch wahr.
Zu dem erhaltenen Reaktionsgemisch gibt man 25 ml Milchsäure, 475 ml Wasser und 25 g Zitronensäure.
Das Reaktionsgemisch wird in 500 ml einer 5 %igen Milchsäurelösung beinahe gelöst. Die Zitronensäure erleichtert die Bildung von Methylenäthern. Das Reaktionsgemisch wird 6 Stunden bei einer Temperatur von -12" C gehalten und gefriert nicht.
Das Reaktionsgemisch wird darauf auf 260 C während 30 Minuten erhitzt. Der Siedepunkt des Reaktionsgemisches ist 140 C. Es wird beobachtet, dass die 5 %ige Milchsäurelösung sich sofort mit dem Reaktionsgemisch vereinigt. Nach dem Kühlen auf Zimmertemperatur wird ein hartes, dunkelgrünes Reaktionsprodukt erhalten, das keinen Formaldehydgeruch aufweist. Es wiegt 625 g. Das Reaktionsprodukt wird vollständig in 2500 ml destilliertem Wasser gelöst. Die Lösung besitzt eine dunkelgrüne Farbe und reagiert gegenüber Lackmus sauer. Nach dem Schütteln mit Luft steigen Perlen durch die Lösung unter Entwicklung eines Gases, das die Luft abführt.
Die Bildung von aktiven Resten, d. h. eine Üb er- führung neuer Radikale, die sich während der Polymerisation gebildet haben, setzt sich fort und bildet neue Moleküle des Reaktionsprodukts für etwa 6 Monate.
The invention relates to a process for the production of reaction products of riboflavin and / or ribose and formaldehyde with a normalizing effect on the abnormal cell metabolism.
The method according to the invention is characterized in that riboflavin and / or ribose are heated in an aqueous solution containing formaldehyde until the solution boils until the riboflavin and / or ribose dissolves completely. The reaction is expediently carried out with an excess of formaldehyde. In this case, the reaction mixture can be freed from excess formaldehyde by repeatedly taking up water and evaporating it.
The condensation is expediently carried out in an aqueous solution.
Metal compounds and / or adenine can also be added during the condensation. As metal compounds, for. B. in question magnesium sulfate, calcium lactate, iron (II) sulfate, potassium permanganate and manganese dioxide individually or as a mixture.
Citric acid can also be used.
Activators can be used to accelerate condensation, so you can work with short-wave radiation.
The condensation products obtained in this way can be applied diluted as such, but they can also be evaporated to dryness, preferably concentrated by freeze-drying and administered as such or in packaged form. The application can preferably take place orally or parenterally. The new products are very stable, can withstand a long storage time, they are of low toxicity and well tolerated without showing any undesirable side effects.
Embodiments
1. 1 g of riboflavin is condensed with 10 ml of a 40% formaldehyde solution at boiling point. A transparent, orange-colored solution forms. This solution is diluted with water to double its volume. In order to remove the excess formaldehyde, half of the resulting solution is evaporated. If the odor of the formaldehyde does not disappear, the concentrate is now diluted several times with water to twice its volume and half of the resulting solution is evaporated until the odor of the formaldehyde has completely disappeared.
The pH of this liquid preparation is around 3.0.
The free solubility of the condensation product shows that a new condensation product of riboflavin with formaldehyde has been formed; While at least 300 ml of water are required for 1 g of riboflavin to form an aqueous solution, 1 g of the new condensation product dissolves easily in 10 cc of water at room temperature.
2. 1 g of riboflavin is heated to boiling temperature in 10 ml of a 40% formaldehyde solution until it is dissolved.
The solution is then concentrated to 1/3 of its volume by evaporation. When the concentrate obtained in this way is cooled to room temperature, a gel forms, which liquefies again when heated.
To remove the excess formaldehyde therefrom, water is added to the gel until the initial volume is reached. This solution is again concentrated to 1/3 of its volume by evaporation. The addition of water and concentration is repeated until the odor of the formaldehyde has completely disappeared.
3. 1 g of riboflavin is heated to the boil in 10 ml of a 40% formaldehyde solution until it is dissolved. The solution is then evaporated to dryness.
When cooling to room temperature, crystals that are visible to the naked eye form.
The condensation products obtained according to embodiment 1 in liquid form, according to example 2 in gel form, and according to example 3 in crystalline form contain 1 g of riboflavin in the form of a condensation product.
4. A condensation product of formaldehyde with formoses and metal salts, which are dissolved in the water of reaction and are active against cancerous growths, is produced.
Paraformaldehyde containing 95% formaldehyde is mixed with the following inorganic salts, which serve as polymerization catalysts, as they are required for the formation of formoses. In this and in the following exemplary embodiments, inorganic salts and compounds containing amino groups that can form metal formates in vivo and influence ribonucleoprotein synthesis are used. added.
750 g paraformaldehyde are mixed with:
8 g magnesium sulphate (the Mg ions are necessary for the activity of the intercellular enzymes - apart from those of phosphatase. They reduce the ability of nerve endings to contract, thereby relieving the pain of cancer.
10 g calcium lactate (calcium ions are excessively removed from cancer cells, causing the nerve endings to contract and causing pain. They are essential for the formation of thrombin, a healing enzyme).
1 g of magnesium dioxide (an oxidizing and anti-anemic factor),
1 g ferrous sulfate (to supply hemoglobin ions and S amino acids sulfur ions),
0.5 g potassium permanganate (the ions mentioned increase intracellular oxidation and facilitate the penetration of the condensation product into the cancer cells),
9 g of adenine (a catalyst for formaldehyde polymerization. It combines with ribose in vivo, forming coenzyme-reactive principles in the synthesis of ribonucleoproteins) and
50 g citric acid (a catalyst of formaldehyde polymerization. It lowers the pH value of the preparation, whereby the affinity for the connection of the alkaline metabolic product and its solubility are increased.
The mixture is almost odorless. Boiling water is then added to the mixture until a volume of 1500 ml is reached. After cooling to room temperature, the solution is brought to the highest density temperature, 4 "C, for 12 hours to effect almost complete polymerization of the formaldehyde. The solution is then subjected to ultraviolet or solar rays to form formose. The solution becomes then heated over a free flame until almost complete evaporation.
Water is added to the residue until the initial volume is reached and the solution is again evaporated. 50 g of a product of brownish color are obtained. The pH of the water solution is around 3.0.
5. Current knowledge of riboflavin, i. H. Dimethylribitylisoalloxazine is almost exclusively restricted to the biological activities of isoalloxazine, also known as flavin. As a yellow enzyme, flavin is bound to proteins, whereby flavoproteins are formed which are present in all living cells and which are involved in the oxidation of sugar and tissue ventilation.
This embodiment describes the production of an acidic condensation product which is active against neoplasms and is obtained by direct reaction of formaldehyde with sugar ribityl, which is derived from the decomposition of riboflavin. The flavin system does not take part in the reaction, but is present in the final condensation product with the properties described above and can be measured by the fluorescence index.
750 g paraformaldehyde, which contains 95% formaldehyde, are mixed with 250 g riboflavin. The solubility of riboflavin increases with the higher formaldehyde content.
The suspension is added to a volume of 1500 ml of hot water, whereby a homogeneous paste-like substance containing about 50% formaldehyde is obtained. The mixture is heated to the boiling point of approximately 110 ° C. A translucent orange solution forms during the boiling process. The solution is concentrated by evaporation and again diluted with water until the odor of the formaldehyde disappears. The final condensation product is diluted to the desired volume of 1250 ml. It is light orange in color, freely soluble in water, and has a pH of around 3.0.
6. 750 g of paraformaldehyde containing 95% formaldehyde are mixed with 250 g of riboflavin. Hot water is added to the mixture up to a total volume of 1500 ml. The paste-like suspension is brought to the boil and evaporated to a fifth of its volume. It is then diluted twice to the initial volume and concentrated again to one fifth of its volume.
When the concentrate is cooled to room temperature, a dark, hard gel forms.
7. 750 g of paraformaldehyde, which contains 95% formaldehyde, are mixed with 250 g of riboflavin. Hot water is added to the mixture up to a volume of 1500 ml.
The paste-like mixture, which becomes liquid at the boiling point, is evaporated twice to one fifth of its initial volume. The resulting gel is again dissolved in water and the solution is evaporated almost to dryness. When cooling to room temperature, crystals that are visible to the naked eye form. They disperse light into a spectrum that can be seen through a magnifying glass and are easily soluble in water. The aqueous solution of the crystals diffuses light and reflects different colors depending on the angle from which you look at them.
8. 750 g of paraformaldehyde, which contains 95% formaldehyde, are mixed with 100 g of ribose and treated as described in Example 7.
9. 750 g of paraformaldehyde, which contains 95% formaldehyde, are mixed with:
8 g magnesium sulfate, 1 g ferrous sulfate, 10 g calcium lactate, 0.5 g potassium permanganate, 1 g manganese dioxide, 50 g citric acid.
The strong odor of the paraformaldehyde in the mixture almost completely disappears. 250 g of riboflavin and 9 g of adenine are added to this mixture and the whole is mixed carefully. The mixture is activated by exposing it to ultraviolet light for about 6 hours. Now hot water is added up to a total volume of 1500 ml. After cooling to room temperature, a paste-like product forms, which is kept at a temperature of about -4 C for 12 hours in order to increase the polymerization of formaldehyde. The mixture is exposed to ultraviolet light for an additional 24 hours. The irradiated product is then heated over a free flame and boils at a temperature of approximately 110 C.
At the boiling point temperature, the paste-like mixture is a transparent, orange-colored liquid. After the liquid is evaporated to a dark gel, 100 ml of water is added to the mixture and it is evaporated again. This concentration and dilution procedure is repeated once more by adding 500 ml of water and evaporating the mixture almost to dryness. The resulting condensation product is a black and hard material from which crystals can be obtained by splitting. The condensation product can also be produced in liquid or gel form, depending on the degree of evaporation, and it can furthermore be processed into solid or liquid pharmaceutical preparations.
10. Paraformaldehyde, which contains 95% formaldehyde, is mixed with inorganic salts in the following amounts:
750 g paraformaldehyde are mixed with:
8 g magnesium sulfate, 10 g calcium lactate, 1 g manganese dioxide, 1 g ferrous sulfate, 0.5 g potassium permanganate, 50 g citric acid.
The mixture becomes almost odorless. 1500 ml of boiling water are added. After the mixture has cooled to room temperature, the solution is further cooled to a temperature of 4 "C and held at that temperature for 12 hours until the formaldehyde has completely polymerized. The solution is then exposed to ultraviolet or sun rays to form formose. The solution is heated to boiling over a free flame until it has almost completely evaporated, 1500 ml of water are then added to the residue and the mixture is again evaporated to give 50 g of a brownish product which is dissolved in 4000 ml of water The pH of the solution is approximately 3.0.
It has been found that the compositions according to Examples 1 to 9, which are prepared by condensation of riboflavin, ribose or metal salts with formaldehyde or paraformaldehyde at elevated temperature, are particularly beneficial for restoring normal cell metabolism in neoplastic procedures. The condensation products enter the protoplasm of the cells. They have a special affinity for abnormal cells and take part in their metabolic processes. They have the properties of an anti-metabolic product and have been shown to be of value in the treatment of animal and human cancers, including leukemia.
Acute and chronic toxicity tests were carried out with the preparations mentioned on various types of animals and humans. No toxicity, side effects or contraindications were observed.
The following pharmacological tests were carried out with the new preparations according to the invention:
Experiment with animals
Preliminary tests have mainly been carried out on suddenly cancerous animals to determine any effectiveness. The criteria of effectiveness were based on the three characteristic properties of the cancer growth: weight, survival time and regression of the tumors.
Chicken myelocytomatosis, a form of bird leukemia complex associated with tumor formation, has been reported
210 chickens treated with the preparation according to Example 5.
Two intermuscular injections of 20 to 50 units were given with an interval of 24 hours. After one week, complete regression of the tumors was seen in 156 chickens; H. observed in 75% of the treated animals.
Neoplasms in dogs: 68 dogs infected by different types of cancerous growths were treated with the preparation according to Example 5. Tissue examinations were carried out in 32 dogs. In the other dogs, the diagnosis was based on clinical symptoms.
24 animals carried a primary tumor, 44 were recognized as having a disrupted cancer. All animals were treated with 200 to 500 units of the preparation. As a result of this treatment, 22 dogs with primary tumor showed weight gain and the tumor regressed. After one year, approximately 50% of the treated animals had survived, were normal and without cancer symptoms. Forty-six dogs with advanced cancer also showed improvement, with partial tumor regression, increased appetite and weight gain, and increased life, but they all died within 6 months.
Spontaneous adenocarcinoma (gland cancer): 64 C3H mice, occasionally found to have cancerous growths, were treated at a dose of 0.2 units at intervals of 24 hours. Twenty-six mice in this group with a single primary tumor measuring 5 mm or less in diameter received treatment. Complete and consistent regression of the tumors was observed within 3 months. The other 38 mice with advanced cancer did not fully respond to this dose.
However, an increase in life of 2 to 4 weeks, partial regression of the tumors and intermittent weight gain were observed.
Experiments in Rous sarcoma were performed on a group of 20 young chickens infected with virus and cancer-causing materials from Rous sarcoma, the group being divided into 4 groups of 5 chickens each. Three groups were treated with 25 units of the preparation according to the invention, the fourth group was not treated as a comparison group. The treated chickens survived the comparison group by two to three weeks. The death of the treated groups was caused by hemorrhagic tumors that developed from the viral infection. Another characteristic feature of Rous sarcoma, ascites (ascites), did not occur in the treated animals.
Both hemorrhagic tumors and ascites developed in the comparison group. The ascites is caused by the carcinogenic material. The experiment shows that the new preparation prevents the occurrence of cancer-causing ascites in the treated chickens.
Preparations made according to the invention have also been successfully administered to human patients. For example, one case of melanoma which is incurable by the usual method reacted to treatment with the preparation, varying the doses from 200 to 10,000 units, with a complete and long-lasting regression of the melanotic lymphatic vessels and with a protection of the patient against another attack, with the disappearance of the pain from the tumor, with the good general condition of the patient. The patient lives for 5 years after the start of treatment.
Another patient with secondary andenocarcinoma of the uterus with metastases of the uterus was treated with a series of doses of 500 to 25 units of the preparation produced according to the invention. The patient has had a good appetite, gained weight, and is free from previous cancer symptoms.
A third patient suffered from primary papillary adenocarcinoma of the thyroid gland. She was treated with doses ranging from 400 units to 25 units at intervals of one week. An examination three months after treatment showed no abnormality in the throat or thyroid area. The number of red blood cells was within normal limits. The patient feels well, has a good appetite, maintains her weight and can work in the best health two years after the treatment, just as she did before the onset of illness.
Good results were also obtained in a patient with advanced breast cancer with metastases to the lungs and brain. The patient received doses of 25 to 900 units at weekly intervals. After more than three months, there was significant improvement in the patient's general condition, including good appetite, normal weight, disappearance of chest and head pain, and partial regression of the tumor of the breast and axillary lymph glands. Treatment continues.
Antiviral preparations can also be produced according to the invention. The following example illustrates their
Manufacturing.
11. A particularly effective antiviral preparation is prepared as follows: 0.5 g of ascorbic acid is mixed with 0.5 g of a 40% strength formaldehyde solution and the mixture is diluted with water to a volume of 2 ml. The solution is heated to the boil and reduced to half, d. H. 1 ml, of its volume evaporated. The resulting solution contains the condensation product. Complete evaporation of the above solution to dryness gives a solid product that can easily be redissolved in water. The aqueous solution of the condensation product has a pH of approximately 2.3. When the aqueous solution is shaken in air, emulsification occurs and the entire solution is converted into a foam. If this foam is left to stand, the liquid will form again.
An aqueous solution of the condensation product is prepared by adding an amount of 1 to 1 ml of water. The resulting clear solution is orange in color. In order to neutralize its acidity in therapeutic use, the solution is further diluted by adding it to 100 ml of milk or another tasty beverage, and the resulting dilution is then used for oral administration.
For parenteral use, 1 ml of the condensation product is diluted with sterile water up to a volume of 10 ml.
Both the oral and parenteral preparations are used for the curative and preventive treatment of viral infections in animals such as Newcastle disease, chicken pox, canine distemper, human influenza, common cold and others, and also for the treatment of plant viral diseases.
The activity of the preparation is determined by the inactivating effect on extracellular bacteriophages.
Experiments were carried out in the following way:
500 ml of distilled water are added to 5 g of the preparation according to Example 4. The mixture is at a pressure of 15 lbs. Sterilized for 20 minutes. The sterilized mixture becomes a bacteriophage suspension ph. 3.17 in a ratio of 1: 1, i.e. H. 2 ml of phage to 2 ml of mixture are added.
The resulting mixture is held at 25 ° C. for 24 hours.
Comparative experiments are carried out with 2 ml of phage and 2 ml of distilled water, which are mixed and kept at 25 ° C.
After 24 hours of incubation, the concentration of the phage on the two tubes is determined, whereby the amount of phage colonies in a dilution of 10 is determined.
The effectiveness of the antiviral compositions of Example 11 has been demonstrated in more than 60,000 animals spontaneously inoculated with various viruses.
The experiments with human lufluenzaviruses in chick embryos showed that the embryos treated with the preparation survived the infection in contrast to the control embryos.
Influenza clinical trials have been performed on several hundred patients with fevers close to 400C.
Soon after the oral or parenteral administration of the preparation, the patients felt fine. Within 15 minutes of typing it, the temperature began to drop.
If the temperature did not drop, there was no influenza infection. The preparation can also be used as a diagnostic agent for febrile virus infections. The viral phase of influenza, with no secondary bacterial infection, is usually cured in a day. The preparation is administered orally in a single dose of 8 ml of the above preparation or parenterally in a dose of 10 ml, which usually proves to be sufficient.
Example 12
This example describes an addition polymerization process by adding hydrogen peroxide to the reaction mixture. Other oxidants, e.g. B. sodium hydroxide can also be used. The conversion of the reaction mixture containing hydrogen peroxide causes the complete chain reaction of the mixture. The end products are completely soluble in water without any residue and thus increase the therapeutic effectiveness compared to the reaction products of the previous examples.
The process for the preparation of reaction products according to this example is analogous to that of the preceding examples. The only difference is the addition of hydrogen peroxide and twice the part by weight of oxidants; H. Potassium permanganate, manganese dioxide and ferrous sulfate, which are reduced by the hydrogen peroxide.
The process is carried out as follows: The reaction mixture, prepared for the first polymerization reaction, consists of: 250 g riboflavin, 10 g adenine, 2 g vitamin B6, 16 g magnesium perchlorate, 600 g paraformaldehyde, 95%, 2 g Potassium permanganate, 2 g manganese dioxide, 2 g ferrous sulfate. 1500 ml of water are added to this mixture. The reaction mixture has a syrupy consistency and an orange color.
The mixture is exposed to ultraviolet radiation for 12 hours and then frozen at a temperature of -12 "C for 6 hours.
Then the reaction mixture is heated. After heating for 45 minutes, it boils at 100 ° C. and after 80 minutes reaches a temperature of almost 1200 C. Heating is interrupted. The reaction product is a hard, dark brown resin with an acidic reaction to litmus.
50 ml of hydrogen peroxide, 50% strength, 950 ml of water = 1000 ml of a 2.5% strength hydrogen peroxide solution and 10 g of calcium lactate are added to this resin.
The reaction mixture spontaneously develops a heat of about 50 ° C. over about 8 hours. After cooling to about 20 ° C, the reaction mixture is exposed to ultraviolet radiation for 1 hour and frozen at a temperature of 12 ° C for about 6 hours.
The reaction mixture is then heated to 300 ° C. within 65 minutes. It boils at a temperature of 99 "C.
After cooling, a black, soft, resinous material is obtained which weighs 500 g. There is no smell of formaldehyde.
25 ml of lactic acid, 475 ml of water and 25 g of citric acid are added to the reaction mixture obtained.
The reaction mixture is almost dissolved in 500 ml of a 5% lactic acid solution. Citric acid facilitates the formation of methylene ethers. The reaction mixture is kept at a temperature of -12 ° C. for 6 hours and does not freeze.
The reaction mixture is then heated to 260 ° C. for 30 minutes. The boiling point of the reaction mixture is 140 C. It is observed that the 5% lactic acid solution combines immediately with the reaction mixture. After cooling to room temperature, a hard, dark green reaction product is obtained which has no formaldehyde odor. It weighs 625 g. The reaction product is completely dissolved in 2500 ml of distilled water. The solution is dark green in color and is acidic to litmus. After shaking with air, pearls rise through the solution, evolving a gas which evacuates the air.
The formation of active residues, i.e. H. Carry-over of new radicals formed during the polymerization continues and forms new molecules of the reaction product for about 6 months.