BRPI0816814B1 - Composto, composição farmacêutica e uso de um composto - Google Patents

Abstract

COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, MÉTODO PARA TRATAR, PREVENIR OU MELHORAR UMA DOENÇA MEDIANA POR GSK-3, USO DE UM COMPOSTO, E, ARTIGO DE FABRICAÇÃO São aqui fornecidas aminoquinolonas espirocíclicas da fórmula I e composições contendo os compostos. Os compostos e composições são aqui fornecidos úteis na prevenção, melhora ou tratamento de doenças mediadas pelos inibidores de GSK-3. Na Fórmula (I): (I) X1 é O ou NR8; A é ligação ou alquileno C1-C2 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; onde Q2 é alquila ou haloalquila; p é 0 ou 1; e q é um número inteiro de 0 a 2.

Description

REIVINDICAÇÃO DE PRIORIDADE

[001] Este pedido reivindica prioridade para o pedido provisório U.S. serial no. 60/993.545 depositado em 12 de setembro de 2007 concedido a Cociorva ET AL. A divulgação do pedido aludido acima é incorporada por referência em sua totalidade.

CAMPO

[002] Compostos, composições e métodos para tratar doenças mediadas por GSK-3 são fornecidos. Os compostos são aqui fornecidos aminoquinolonas espirocíclicas que são inibidores de GSK-3. FUNDAMENTOS

[003] A glicogênio sintase quinase-3 (GSK-3) é uma quinase de proteína de serina/treonina tendo as isoformas α e β que são cada uma codificadas por genes distintos[Coghlan ET AL., Chemistry & Biology, 7, 793-803 (2000); e Kim e Kimmel, Curr. Opinion Genetics Dev., 10, 508-514 (2000)]. GSK-3 foi implicado em várias doenças incluindo diabete, mal de Alzheimer, distúrbios do CNS tais como distúrbio maníaco depressivo e doenças neurodegenerativas, e hipertrofia de cardiomiócito[ver, por exemplo, a WO 99/65897; WO 00/38675; e Haq ET AL., J. Cell Biol. (2000) 151, 117]. Estas doenças podem ser causadas pela, ou podem resultar na, operação anormal de certos caminhos de sinalização celular em que GSK-3 desempenha um papel.

[004] GSK-3 foi descoberto fosforilar e modular a atividade várias proteínas reguladoras. Estas incluem a glicogênio sintase, que é a enzima limitadora de taxa requerida para a síntese de glicogênio, a proteína associada a microtúbulo Tau, o fator de transcrição de gene β- catenina, o fator de início de tradução e 1F-2B, assim como a ATP citrato liase, axina, fator-1 de choque térmico, c-Jun, c-myc, c-myb, CREB, e CEPB α. Estes alvos diversos implicam GSK-3 em muitos aspectos do metabolismo, proliferação, diferenciação e desenvolvimento celulares.

[005] Os inibidores de molécula pequena de GSK-3 foi recentemente relatado[WO 99/65897 (Chiron) e WO 00/38675 (SmithKline Beecham)], entretanto, existe uma necessidade contínua para descobrir agentes terapêuticos mais eficazes para tratar doenças mediadas por GSK-3. SUMÁRIO

[006] São aqui fornecidos compostos representados pela Fórmula (1):

ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é hidrogênio ou alquila inferior; R3 é hidrogênio, CN, C(O)R3a, C(NH)NHOH ou 5-tetra-zolila; R3a é OH, alcóxi ou NHR3b; R1b é hidrogênio, NH2, OH ou alquila inferior; R5a e R5b são cada um independentemente hidrogênio, alquila inferior ou aralquila que é opcionalmente substituído com um a três substituintes, cada um independentemente selecionado dos grupos Q0; em que Q0 é halo, ciano, nitro, NH2, alquila ou alcóxi; R6 é halo; em cada exemplo, independentemente, Ra e X3 são selecionados de (i) ou (ii) como segue: (i) Ra é hidrogênio ou alquila inferior; e X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, cicloalquileno substituído ou não substituído de 3 a 6 membros ou heterociclileno substituído ou não substituído de 3 a 6 membros, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; ou (ii) Ra e X3 juntos com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, podem formar um anel saturado ou não saturado de 5 a 7 membros opcionalmente contendo um ou mais átomos O ou S, ou um ou mais átomos N adicionais, no anel; R b 7a 7 7b 7 7 7 7b 1 7 é -(CHR )nR , -NR R , -OR , -S(O), R , -NR COY R ou -Y2CONR7bR7; Y1 é ligação, O ou NR7b; Y2 é ligação ou O; n é 0 ou 1; r é um número inteiro de 0 a 2; R7 é alquila, arila, cicloalquila, heterociclila, heteroarila, heterociclilarila fundida, ou arileterociclila fundida, onde R7 é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7a é hidrogênio, alquila, arila, cicloalquila, heterociclila, heteroarila, heterociclilarila fundida, ou arileterociclila fundida, onde R7a é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7b é hidrogênio, alquila, arila, heteroarila, aralquila, heteroaralquila, ou heterociclilarila fundida, onde R7b é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; onde Q1 é halo, hidróxi, oxo, tioxo, ciano, nitro, azido, mercapto, formila, hidroxicarbonila, hidroxicarbonilalquila, alquila, halo - alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, heterociclila, arila, hetero-arila, aralquila, heteroaralquila, alcóxi, haloalcóxi, cicloalcóxi, heterociclilóxi, arilóxi, heteroarilóxi, aralquilóxi, heretoaralquilóxi, alquil-carbonila, arilcarbonila, heteroarilcarbonila, alcoxicarbonila, arilóxi-carbonila, aralquiloxicarbonila, aminocarbonila não substituído ou substituído, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, aralquilcarbonilóxi, alcóxi -carbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, aralquiloxicarbonilóxi, não substituído ou substituído aminocarbonilóxi, amino não substituído ou substituído, alquiltio, cicloalquiltio, ariltio, heteroariltio, aralquiltio, heteroaralquiltio, alquilsulfinila, cicloalquilsulfinila, arilsulfinila, heteroarilsulfinila, aralquilsulfinila, heteroaralquilsulfinila, alquilsulfonila, cicloalquil-sulfonila, arilsulfonila, heteroarilsulfonila, aralquilsulfonila, hetero-aralquilsulfonila, alcoxissulfonila, ariloxissulfonila, aminossulfonila ou hidroxissulfonila substituídos ; X1 é O ou NR8; R8 é hidrogênio ou alquila inferior; X2 é CH2, O, NR1 ou S; R1 é hidrogênio ou alquila inferior; A é ligação ou alquileno C1-C2 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; em que Q2 é alquila ou haloalquila; p é O ou 1; q é um número inteiro de 0 a 2.

[007] Também são aqui fornecidas composições farmacêuticas contendo um composto da Fórmula (1) e um carreador farmaceuticamente aceitável.

[008] Também são aqui fornecidos métodos para tratar, prevenir, ou melhorar um ou mais sintomas de doenças mediadas por GSK-3 pela administração dos compostos e composições aqui fornecidas. DESCRIÇÃO DETALHADA DAS FORMAS DE ADMINISTRAÇÃO A. Definições

[009] A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos aqui usados têm o mesmo significado como é habitualmente entendido por uma pessoa de habilidade comum na técnica. Todas as patentes, pedidos, pedidos publicados e outras publicações são incorporadas por referência em sua totalidade. No evento em que exista uma pluralidade definições para um termo aqui, aqueles desta seção prevalecem a menos que de outro modo estabelecido.

[010] Como aqui usado, a nomenclatura alquila, alcóxi, carbonila, etc. é usada como é geralmente entendida por aqueles de habilidade nesta técnica.

[011] Como aqui usado, às cadeias carbônicas de alquila, se não especificadas, contêm de 1 a 20 carbonos, de 1 a 16 carbonos ou de 1 a 6 carbonos e são retas ou ramificadas. Em certas formas de realização, às cadeias carbônicas de alquila contêm de 1 a 6 carbonos. Os grupos alquila exemplares aqui incluem, mas não são limitados a, metila, etila, propila, isopropila, isobutila, n-butila, sec-butila, terc-butila, isopentila, neopentila, terc-pentila, isoexila. Como aqui usado, alquila inferior refere-se a cadeias carbônicas tendo de cerca de 1 carbono até cerca de 6 carbonos.

[012] Como aqui usado, às cadeias carbônicas de alquenila, se não especificadas, contêm de 2 a 20 carbonos, de 2 a 16 carbonos ou de 2 a 6 carbonos e são retas ou ramificadas. Em certas formas de realização, às cadeias carbônicas de alquenila contêm de 2 a 6 carbonos. Às cadeias carbônicas de alquenila de 2 a 20 carbonos, em certas formas de realização, contêm de 1 a 8 ligações duplas, e às cadeias carbônicas de alquenila de 2 a 16 carbonos, em certas formas de realização, contêm de 1 a 5 ligações duplas. Às cadeias carbônicas de alquenila de 2 a 6 carbonos, em certas formas de realização, contêm de 1 a 2 ligações duplas. Os grupos alquenila exemplares incluem aqui, mas não são limitados a, vinila, 1- propenila, 2-propenila, isopropenila, 1-butenila, 2-butenila, 3-butenila, 1,3- butadienila. Como aqui usado, alquila inferior refere-se às cadeias carbônicas tendo de cerca de 2 carbonos até cerca de 6 carbonos.

[013] Como aqui usado, às cadeias carbônicas de alquila, se não especificadas, contêm de 2 a 20 carbonos, de 2 a 16 carbonos ou 2 a 6 carbonos e são retas ou ramificadas. Em certas formas de realização, às cadeias carbônicas de alquila contêm de 2 a 6 carbonos. Às cadeias carbônicas de alquinila de 2 a 20 carbonos, em certas formas de realização, contêm de 1 a 8 ligações triplas, e às cadeias carbônicas de alquila de 2 a 16 carbonos, em certas formas de realização, contêm de 1 a 5 ligações triplas. Às cadeias carbônicas de alquinila de 2 a 6 carbonos, em certas formas de realização, contêm de 1 a 2 ligações triplas. Os grupos alquinila exemplares incluem aqui, mas não são limitados a, etinila, 1-propinila e 2-propinila. Como aqui usado, alquinila inferior refere-se às cadeias carbônicas tendo de cerca de 2 carbonos até cerca de 6 carbonos.

[014] Como aqui usado, “alcóxi” contém de 1 a 20 carbonos, de 1 a 16 carbonos ou de 1 a 6 carbonos e são retos ou ramificados. Em certas formas de realização, as cadeias carbônicas de alcóxi contêm de 1 a 6 carbonos. Os grupos alcóxi exemplares incluem aqui, mas não são limitados a, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, isobutóxi, n-butóxi, sec-butóxi, terc- butóxi, isopentóxi, neopentóxi, terc-pentóxi e isoexilóxi.

[015] Como aqui usado, “aralquila” refere-se a um grupo alquila em que um dos átomos de hidrogênio do alquila é substituído por um arila.

[016] Como aqui usado, “halo”, “halogênio” ou “haleto” referem-se a F, Cl, Br ou I.

[017] Como aqui usado, “arila” refere-se a grupos aromáticos monocíclicos ou multicíclicos contendo de 6 a 19 átomos de carbono. Os grupos arila incluem, mas não são limitados a grupos tais como fluorenila, fluorenila substituído, fenila, fenila substituído, naftila e substituído naftila.

[018] Como aqui usado, “cicloalquila” refere-se a um sistema de anel saturado mono ou multicíclico, em certas formas de realização de 3 a 10 átomos de carbono, em outras formas de realização de 3 a 6 átomos de carbono; cicloalquenila e cicloalquinila referem-se aos sistemas do anel mono ou multicíclicos que respectivamente incluem pelo menos uma ligação dupla e pelo menos uma ligação tripla. Os grupos cicloalquinila podem, em certas formas de realização, conter de 3 a 10 átomos de carbono, com os grupos cicloalquenila, em outras formas de realização, contendo de 4 a 7 átomos de carbono e grupos cicloalquinila, em outras formas de realização, contendo de 8 a 10 átomos de carbono. Os sistemas do anel do cicloalquila, os grupos cicloalquinila podem ser compostos de um anel ou dois ou mais anéis que podem ser unidos juntos em uma maneira fundida, ligada em ponte ou conectada em espiro.

[019] Como aqui usado, “heterociclila” refere-se a um sistema de anel monocíclico ou multicíclico não aromático, em uma forma de realização de 3 a 10 membros, em uma outra forma de realização de 4 a 7 membros, em uma outra forma de realização de 5 a 6 membros, onde uma ou mais, em certas formas de realização, de 1 a 3, dos átomos no sistema do anel é um heteroátomo, que é, um elemento outro que não carbono, incluindo mas não limitado a, nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em formas de realização onde o(s) heteroátomo(s) é(são) nitrogênio, o nitrogênio é opcionalmente substituído com alquila, alquenila, alquinila, arila, heteroarila, aralquila, heteroaralquila, cicloalquila, heterociclila, cicloalquilalquila, heterociclilalquila, acila, aminocarbonila, alcóxi-carbonila, guanidino, ou o nitrogênio podem ser quaternizados para formar um grupo amônio onde os substituintes são selecionados como acima.

[020] Como aqui usado, “heteroarila” refere-se a um sistema de anel aromático monocíclico ou multicíclico, em certas formas de realização, de cerca de 5 a cerca de 15 membros onde uma ou mais, em uma forma de realização 1 a 3, dos átomos no sistema do anel é um heteroátomo, que é, um elemento outro que não carbono, incluindo mas não limitado a, nitrogênio, oxigênio ou enxofre. O grupo heteroarila pode ser opcionalmente fundido a um anel benzeno. Os grupos heteroarila incluem, mas não são limitados a, furila, imidazolila, pirimidinila, tetrazolila, tienila, piridila, pirrolila, N-metilpirrolila, quinolinila e isoquinolinila.

[021] Como aqui usado, “heterociclilarila fundida” refere- se a arila que foi fundida com um grupo heterociclila. Em uma forma de realização, as heterociclilarilas são aquelas em que heterociclila contém cerca de 5 a cerca de 6 átomos no anel e o seu arila é fenila. Um heterociclilarila fundido podem ser ligada através de qualquer átomo do sistema de anel. Os grupos heterociclilarila fundidos representativos incluem 1,3-benzodioxolan- 4-ila, 1,3-benzodioxolan-5-ila, 1,3-benzo-dioxolan-6-ila, 1,3-benzodioxolan- 7-ila, 4-indolinila, 5-indolinila, 6-indolinila e 7-indolinila.

[022] Como aqui usado, “arileterociclila fundido” refere- se a heteroarila fundido que foi fundido a um grupo arila. Em uma forma de realização, arileterociclilas fundidas são aquelas em que e o seu arila é fenila e o heterociclila contém cerca de 5 a cerca de 6 átomos no anel. Um arileterociclila fundido podem ser ligado através de qualquer átomo do sistema de anel. Os grupos arileterociclila fundidos representativos incluem 1- indolinila, 2-indolinila, 3-indolinila, 1,2,3,4-tetraidroqunolin-1-ila, 1,2,3,4- tetraidroqunolin-2-ila, 1,2,3,4-tetraidroqunolin-3-ila e 1,2,3,4- tetraidroqunolin-4-ila.

[023] Como aqui usado, “haloalquila” refere-se a um grupo alquila em que um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por halogênio. “Haloalquila inferior” refere-se a um grupo alquila inferior em que um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por halogênio. Tais grupos incluem, mas não são limitados a, clorometila, trifluorometila e 1- cloro-2-fluoroetila.

[024] Como aqui usado, “heteroaralquila” refere-se a um grupo alquila em que um dos átomos de hidrogênio são substituídos por heteroarila.

[025] Como aqui usado, “haloalcóxi” refere-se a RO- em que R é um grupo haloalquila.

[026] Como aqui usado, “cicloalcóxi” refere-se a RO- em que o R é um grupo cicloalquila.

[027] Como aqui usado, “arilóxi” refere-se a RO- em que o R é um arila.

[028] Como aqui usado, “heteroarilóxi” refere-se a ROem que o R é um heteroarila.

[029] Como aqui usado, “heterociclilóxi” refere-se a ROem que o R é um heterociclila.

[030] Como aqui usado, “aralquilóxi” refere-se a RO- em que o R é um aralquila.

[031] Como aqui usado, “heteroaralquilóxi” refere-se a RO- em que o R é um heteroaralquila.

[032] Como aqui usado, “alquilcarbonila” refere-se a RCO- em que o R é um grupo alquila.

[033] Como aqui usado, “arilcarbonila” refere-se a RCO- em que o R é um arila.

[034] Como aqui usado, “ heteroarilcarbonila “ refere-se a RCO- em que o R é um heteroarila .

[035] Como aqui usado, “alcoxicarbonila” refere-se a RCO- em que o R é um grupo alcóxi.

[036] Como aqui usado, “ariloxicarbonila” refere-se a RCO- em que o R é um arilóxi.

[037] Como aqui usado, “aralquiloxicarbonila” refere-se a RCO- em que o R é um aralquilóxi.

[038] Como aqui usado, “aminocarbonila não substituído ou substituído” refere-se a -C(O)N R’ R em que o R’ e R são independentemente hidrogênio, alquila arila, heteroarila, aralquila ou heteroaralquila.

[039] Como aqui usado, “ alquilcarbonilóxi” refere-se a - OC(O) R em que o R é alquila.

[040] Como aqui usado, “ arilcarbonilóxi” refere-se a - OC(O) R em que o R é arila.

[041] Como aqui usado, “ aralquilcarbonilóxi” refere-se a -OC(O) R em que o R é aralquila.

[042] Como aqui usado, “ alcoxicarbonilóxi” refere-se a - OC(O)O R em que o R é alquila.

[043] Como aqui usado, “ ariloxicarbonilóxi” refere-se a - OC(O)O R em que o R é arila.

[044] Como aqui usado, “ aralquiloxicarbonilóxi” refere- se a -OC(O)O R em que o R é aralquila.

[045] Como aqui usado, “ aminocarbonilóxi não substituído ou substituído” refere-se a -OC(O)NR’R em que o R’ e R são independentemente hidrogênio, alquila arila, heteroarila, aralquila ou heteroaralquila.

[046] Como aqui usado, “amino não substituído ou substituído” refere-se a -NR’R em que o R’ e R são independentemente hidrogênio, alquila, arila, heteroarila, aralquila, heteroaralquila, alquilcarbonila, arilcarbonila, heteroarilcarbonila, alcoxicarbonila, ariloxicarbonila, aralquil-oxicarbonila, aminocarbonila não substituído ou substituído, alquilsulfonila, cicloalquilsulfonila, arilsulfonila, heteroarilsulfonila, aralquilsulfonila, ou heteroaralquilsulfonila.

[047] Como aqui usado, “alquiltio” refere-se a - SR em que o R é alquila.

[048] Como aqui usado, “cicloalquiltio” refere-se a - SR em que o R é cicloalquila.

[049] Como aqui usado, “ariltio” refere-se a - SR em que o R é arila.

[050] Como aqui usado, “heteroariltio” refere-se a - SR em que o R é heteroarila.

[051] Como aqui usado, “aralquiltio” refere-se a - SR em que o R é aralquila.

[052] Como aqui usado, “heteroaralquiltio” refere-se a - SR em que o R é heteroaralquila.

[053] Como aqui usado, “alquilsulfinila” refere-se a - S(O)R em que o R é alquila.

[054] Como aqui usado, “cicloalquilsulfinila” refere-se a - S(-O)R em que o R é cicloalquila.

[055] Como aqui usado, “arilsulfinila” refere-se a - S(O)R em que o R é arila.

[056] Como aqui usado, “heteroarilsulfinila” refere-se a - S(O)R em que o R é heteroarila.

[057] Como aqui usado, “aralquilsulfinila” refere-se a - S(O)R em que o R é aralquila.

[058] Como aqui usado, “heteroaralquilsulfinila” refere-se a - S(O)R em que o R é heteroaralquila.

[059] Como aqui usado, “alquilsulfonila” refere-se a - SO2R em que o R é alquila..

[060] Como aqui usado, “ cicloalquilsulfonila” refere-se a - S(O)2R em que o R é cicloalquila.

[061] Como aqui usado, “arilsulfonila” refere-se a - S(O)2R em que o R é arila.

[062] Como aqui usado, “heteroarilsulfonila” refere-se a - S(O)2R em que o R é heteroarila.

[063] Como aqui usado, “aralquilsulfonila” refere-se a - S(O)2R em que o R é aralquila.

[064] Como aqui usado, “heteroaralquilsulfonila” refere- se a - S(O)2R em que o R é heteroaralquila.

[065] Como aqui usado, “alcoxissulfonila” refere-se a - S(O)2R em que o R é alcóxi.

[066] Como aqui usado, “amino não substituído ou sulfonila substituído” refere-se a -S(O)2N R’ R em que o R’ e R são independentemente hidrogênio, alquila arila, heteroarila, aralquila ou heteroaralquila.

[067] Como aqui usado, os derivados farmaceuticamente aceitáveis de um composto incluem sais, ésteres, éteres enólicos, ésteres enólicos, acetais, cetais, outros ésteres, hemiacetais, hemicetais, ácidos, bases, solvatos, hidratos ou pró medicamentos destes. Tais derivados podem ser facilmente preparados por aqueles de habilidade nesta técnica usando métodos conhecidos para tal derivação. Os compostos produzidos podem ser administrados aos animais ou seres humanos sem efeitos tóxico substanciais e são farmaceuticamente ativos ou são pró medicamentos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, sais de amina, tais como mas não limitados a N,N’-dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, colina, amônia, dietanolamina e outras hidroxialquilaminas, etilenodiamina, N-metilglucamina, procaína N-benzilfenetilamina, 1-para- clorobenzil-2-pirrolidin-1’-ilmetil-benzimidazol, dietilamina e outras alquilaminas, piperazina e tris-(hidroximetil)aminometano; sais de metal alcalino, tais como mas não limitados a lítio, potássio e sódio; sais de metal alcalino terroso, tais como mas não limitados a bário, cálcio e magnésio; sais de metal de transição, tais como mas não limitados a zinco; e sais inorgânicos, tais como mas não limitados a, hidrogeno fosfato de sódio e fosfato de dissódio; e também incluídos, mas não limitados a, sais de ácidos minerais, tais como mas não limitados a cloridretos e sulfatos; e sais de ácidos orgânicos, tais como mas não limitados a acetatos, lactatos, malatos, tartaratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos, mesilatos, e fumaratos. Os ésteres farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, ésteres de alquila, alquenila, alquinila, arila, aralquila e cicloalquila dos grupos ácidos, incluindo, mas não limitados a, ácidos carboxílicos, ácidos fosfóricos, ácidos fosfônicos, ácidos sulfônicos, ácidos sulfínicos e ácidos borônicos. Ésteres enólicos farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, derivados da fórmula C=C(OR) onde R é hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, aralquila e cicloalquila. Os ésteres enólicos farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, derivados da fórmula C=C(OC(O)R) onde R é hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, arila, aralquila e cicloalquila. Os solvatos e hidratos farmaceuticamente aceitáveis são complexos de um composto com um ou mais solventes ou moléculas de água, ou 1 a cerca de 100, ou 1 a cerca de 10, ou um a cerca de 2, 3 ou 4, solventes ou moléculas de água.

[068] Deve ser entendido que os compostos aqui fornecidos podem conter cadeias quirais. Tais centros quirais podem ser da configuração (R) ou (S), ou podem ser uma mistura destes. Assim, os compostos aqui fornecidos podem ser enanciomericamente puros, ou ser misturas estereoisoméricas ou diastereoméricas.

[069] Como aqui usado, substancialmente puros significa suficientemente homólogos para mostrar-se livre das impurezas facilmente detectáveis como determinado pelos métodos padrão da análise, tal como cromatografia de camada livre fina (TLC), eletroforese em gel, cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC), ressonância magnética nuclear (RMN), e espectroscopia de massa (MS), usados por aqueles de habilidade na técnica para avaliar a tal pureza, ou suficientemente puro tal que a outra purificação não alteraria detectavelmente as propriedades físicas e químicas, tais como atividades enzimáticas e biológicas, da substância. Os métodos para a purificação dos compostos para produzir compostos de modo substancial quimicamente puros são conhecidos por aqueles de habilidade na técnica. Um composto de modo substancial quimicamente puro pode, entretanto, ser uma mistura de estereoisômeros. Em tais casos, a purificação adicional aumentaria a atividade específica do composto. A presente divulgação é intencionada a incluir todos os tais isômeros possíveis, assim como, suas formas racêmicas e opticamente puras. Os isômeros opticamente ativos (+) e (-), (R)- e (S)-, ou (D)- e (L) podem ser preparados usando sintons quirais ou reagentes quirais, ou resolvidos usando técnicas convencionais, tais como HPLC de fase reversa. Quando os compostos aqui descritos contêm ligações duplas olefínicas ou outros centros de assimetria geométrica, e a menos que de outro modo especificado, é intencionado que os compostos incluem os isômeros geométricos tanto Z quanto E. Do mesmo modo, todas as formas tautoméricas são também intencionadas a serem incluídas.

[070] Como aqui usado, o IC50 refere-se a uma quantidade, concentração ou dosagem de um composto de teste particular que alcança uma inibição de 50 % de uma resposta máxima em um ensaio que mede a tal resposta.

[071] Como aqui usado, EC50 refere-se a uma dosagem, concentração ou quantidade de um composto de teste particular que evoca uma resposta dependente da dose a 50 % da expressão máxima de uma resposta particular que é induzida, provocada ou potenciada pelo composto de teste particular.

[072] Como aqui usado, o tratamento significa qualquer maneira em que um ou mais dos sintomas de uma doença ou distúrbio são melhorados ou de outra maneira beneficamente alterados. O tratamento também abrange qualquer uso farmacêutico da composições aqui, tal como o uso para o tratamento de diabete.

[073] Como aqui usado, a melhora dos sintomas de um distúrbio particular pela administração de um composto particular ou composição farmacêutica refere-se a qualquer diminuição, seja permanente ou temporária, duradoura ou transitória que pode ser atribuída a ou associada com administração da composição.

[074] Como aqui usado, o termo “prevenir” significa proteger contra a recaída da doença ou distúrbio específicos em um paciente que já tem sofrido da doença ou distúrbio, e/ou prolongar o tempo que um paciente que tem sofrido da doença ou distúrbio permanecem em remissão.

[075] Os termos “doença mediada por GSK-3 ou “condição mediada por GSK-3”, como aqui usado, significa cada doença ou outro condição ou estado deletérios em que o GSK-3 é conhecido desempenhar um papel. Tais doenças ou condições incluem, sem limitação, condições de diabete associados com diabete, condições neurodegenerativas crônicas incluindo demências tais como mal de Alzheimer, mal de Parkinson, paralisia supranuclear progressiva, parquinsonismo panencefálico esclerosante subcutâneo, parquinsonismo pós-encefalítico, encefalite pugilística, complexo de parquinsonismo-demência de guam, doença de Pick, degeneração corticobasal, demência frontotemporal, doença de Huntington, demência associada com ADS, esclerose lateral amiotrófica, esclerose múltipla, doenças neurotraumáticas tais como acidente vascular cerebral agudo, epilepsia, distúrbios de ânimo tais como depressão, esquizofrenia e distúrbios bipolares, artrite reumatóide, doença do intestino inflamatório, colite ulcerativa, doença de Crohn, septicemia, câncer pancreático, câncer ovariano e osteoporose. B. Compostos

[076] São aqui fornecidas compostos da Fórmula (I):

ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é hidrogênio ou alquila inferior; R3 é hidrogênio, CN, C(O)R3a ,C(NH)NHOH ou 5-tetra-zolila; R3a é OH, alcóxi ou NHR3b; R1b é hidrogênio, NH2, OH ou alquila inferior; R5a e R5b são cada um independentemente hidrogênio, alquila inferior ou aralquila que é opcionalmente substituído com um a três substituintes, cada um independentemente selecionado dos grupos Q0; em que Q0 é halo, ciano, nitro, NH2, alquila ou alcóxi; R6 é halo; em cada exemplo, independentemente, Ra e X3 são selecionados de (i) ou (ii) como segue: (i) Ra é hidrogênio ou alquila inferior; e X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, cicloalquileno substituído ou não substituído de 3 a 6 membros ou heterociclileno substituído ou não substituído de 3 a 6 membros, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; ou (ii) Ra e X3 juntos com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, podem formar um anel saturado ou não saturado de 5 a 7 membros opcionalmente contendo um ou mais átomos O ou S, ou um ou mais átomos N adicionais, no anel; R b 7a 7 7b 7 7 7b 1 7 é -(CHR )nR , -NR R , -OR, -S(O)l R , -NR COY R ou -Y2CONR7bR7; Y1 é ligação, O ou NR7b; Y2 é ligação ou O; n é 0 ou 1; 1 é um número inteiro de 0 a 2; R7 é alquila, arila, cicloalquila, heterociclila, heteroarila, heterociclilarila fundida, ou arileterociclila fundida, onde R7 é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7a é hidrogênio, alquila, arila, cicloalquila, heterociclila, heteroarila, heterociclilarila fundida, ou arileterociclila fundida, onde R7a é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R1b é hidrogênio, alquila, arila, heteroarila, aralquila, heteroaralquila, ou heterociclilarila fundida, onde R7b é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q 1; em que Q1 é halo, hidróxi, oxo, tioxo, ciano, nitro, azido, mercapto, formila, hidroxicarbonila, hidroxicarbonilalquila, alquila, haloalquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, heterociclila, arila, hetero-arila, aralquila, heteroaralquila, alcóxi, haloalcóxi, cicloalcóxi, heterociclilóxi, arilóxi, heteroarilóxi, aralquilóxi, heretoaralquilóxi, alquil-carbonila, arilcarbonila, heteroarilcarbonila, alcoxicarbonila, arilóxi-carbonila, aralquiloxicarbonila, aminocarbonila não substituído ou substituído, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, aralquilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, aralquiloxicarbonilóxi, amino-carbonilóxi não substituído ou substituído, amino não substituído ou substituído, alquiltio, cicloalquiltio, ariltio, heteroariltio, aralquiltio, heteroaralquiltio, alquilsulfinila, cicloalquilsulfinila, arilsulfinila, heteroarilsulfinila, aralquilsulfinila, heteroaralquilsulfinila, alquil-sulfonila, cicloalquilsulfonila, arilsulfonila, heteroarilsulfonila, aralquil-sulfonila, heteroaralquilsulfonila, alcoxissulfonila, ariloxissulfonila, aminossulfonila ou hidroxissulfonila substituídos ; X1 é O ou NR8; R8 é hidrogênio ou alquila inferior; X2 é CH2, O, NR1 ou S; R1 é hidrogênio ou alquila inferior; A é ligação ou alquileno C1-C2 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; em que Q2 é alquila ou haloalquila; p é 0 ou 1; e q é um número inteiro de 0 a 2.

[077] Em uma forma de realização, R5a e R5b são cada um hidrogênio.

[078] Em uma forma de realização, R2 é hidrogênio.

[079] Em uma outra forma de realização, X1 é 0.

[080] Em uma outra forma de realização, Y1 é ligação.

[081] Em uma outra forma de realização, R3 é CN.

[082] Em uma outra forma de realização, R3 é C(O)R3a.

[083] Em uma outra forma de realização, R3 é C(NH)NHOH.

[084] Em uma outra forma de realização, R3 é 5- tetrazolila.

[085] Em uma forma de realização, R3aé OH.

[086] Em uma forma de realização, X1 é 0 e R2 é hidrogênio.

[087] Em uma outra forma de realização, Raé hidrogênio.

[088] Em uma forma de realização, X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2, onde Q2 é alquila ou haloalquila.

[089] Em uma outra forma de realização, A é alquileno C1-C2 substituído ou não substituído.

[090] Em uma outra forma de realização, A é substituído com um a quatro grupos Q2, em que Q2 é alquila ou haloalquila; e p é 0.

[091] Em uma forma de realização, X2 é CH2.

[092] Em uma outra forma de realização, X2 é O.

[093] Em uma outra forma de realização, A é CH2; p é O e q é 2.

[094] Em uma outra forma de realização, X1 é O.

[095] Em certas formas de realização, R6 é F.

[096] Em certas formas de realização, os compostos são da Fórmula (Ia):

ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R3 é hidrogênio, CN, C(O)R3a ,C(NH)NHOH ou 5-tetra-zolila; R3a é OH, alcóxi ou NHR3b; R1b é hidrogênio, NH2, OH ou alquila inferior; R5a e R5b são cada um independentemente hidrogênio ou alquila inferior; R6 é halo; em cada exemplo, independentemente, Ra e X3 são selecionados de (i) ou (ii) como segue: (i) Ra é hidrogênio ou alquila inferior; e X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, cicloalquileno substituído ou não substituído de 3 a 6 membros ou substituído ou não substituído de 3 a 6 membros heterociclileno, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; ou (ii) Ra e X3 juntos com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, podem formar um anel saturado ou não saturado de 5 a 7 membros opcionalmente contendo um ou mais átomos O ou S, ou um ou mais átomos N adicionais, no anel; R b 7a 7 7b 7 7 7 7b 1 7 é -(CHR )nR , -NR R , -OR , -S(O)r R , -NR COY R ou -Y2CONR7bR7; Y1 é ligação, O ou NR7b; Y2 é ligação ou O; n é 0 ou 1; r é um número inteiro de 0 a 2; R7 é alquila, arila, cicloalquila, heterociclila, heteroarila, heterociclilarila fundida, ou arileterociclila fundida, onde R7 é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7a é hidrogênio, alquila, arila, cicloalquila, heterociclila, heteroarila, heterociclilarila fundida, ou arileterociclila fundida, onde R7a é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7b é hidrogênio, alquila, arila, heteroarila, aralquila, heteroaralquila, ou heterociclilarila fundida, onde R7b é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; em que Q1 é halo, hidróxi, oxo, tioxo, ciano, nitro, azido, mercapto, formila, hidroxicarbonila, hidroxicarbonilalquila, alquila, halo - alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, aralquila, heteroaralquila, alcóxi, haloalcóxi, cicloalcóxi, heterociclilóxi, arilóxi, heteroarilóxi, aralquilóxi, heretoaralquilóxi, alquilcarbonila, arilcarbonila, heteroarilcarbonila, alcoxicarbonila, ariloxicarbonila, aralquil- oxicarbonila, aminocarbonila não substituído ou substituído, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, aralquilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, aralquiloxicarbonilóxi, aminocarbonilóxi não substituído ou substituído, amino não substituído ou substituído, alquiltio, cicloalquiltio, ariltio, heteroariltio, aralquiltio, heteroaralquiltio, alquilsulfinila, cicloalquilsulfinila, arilsulfinila, heteroarilsulfinila, aralquilsulfinila, heteroaralquilsulfinila, alquilsulfonila, cicloalquilsulfonila, arilsulfonila, heteroarilsulfonila, aralquilsulfonila, heteroaralquilsulfonila, alcoxissulfonila, ariloxissulfonila, aminossulfonila ou hidroxissulfonila substituídos ; e Q2 é alquila ou haloalquila.

[097] Em uma forma de realização, os compostos são da Fórmula (Ia), em que R5ae R5b são hidrogênio.

[098] Em uma forma de realização, os compostos são da Fórmula (Ia), em que R3 é CN.

[099] Em uma forma de realização, os compostos são da Fórmula (Ia),em que R3 é C(O)R3a.

[0100] Em uma forma de realização, os compostos são da Fórmula (Ia), em que R3 é C(NH)NHOH.

[0101] Em uma forma de realização, os compostos são da Fórmula (Ia), em que R3 é 5-tetrazolila.

[0102] Em uma forma de realização, os compostos são da Fórmula (Ia), em que R3aé OH.

[0103] Em uma forma de realização, os compostos são da Fórmula (Ia), em que Ra é hidrogênio.

[0104] Em certas formas de realização, os compostos são da Fórmula (Ib):

[0105] ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R6 é halo; n é 1-3; X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; Q2 é alquila ou haloalquila; e outros variáveis são como debatidos aqui em outro lugar. Em certas formas de realização, os compostos são da Fórmula (Ic):

ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que n é 1-3; X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; Q2 é alquila ou haloalquila; e outros variáveis são como debatidos aqui em outro lugar.

[0106] Em certas formas de realização, os compostos são da Fórmula (Id):

ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; Q2 é alquila ou haloalquila; R3 é CN, C(O)OH, C(O)NH2, C(NH) NHOH ou 5- tetrazolila; e outros variáveis são como debatidos aqui em outro lugar.

[0107] Em certas formas de realização, os compostos aqui fornecidos exibem um IC50 com respeito a GSK3 de não mais do que cerca de 20 μM, em uma forma de realização, não mais do que cerca de 10 μM, não mais do que cerca de 5 μM, ou não mais do que 1 μM, como medido no ensaio de GSK3 quinase isento de célula. Em certas formas de realização, os compostos aqui fornecidos exibem a atividade inibidora que é seletiva com respeito a GSK3, quando comparada a pelo menos um outro tipo de quinase.

[0108] Em certas formas de realização, inibidores de GSK3 são aqui fornecidos substancialmente livres de atividade anti-bacteriana ou tendo atividade anti-bacteriana muito baixa. A atividade anti-bacteriana pode ser medida pelos métodos conhecidos na técnica estimando-se uma concentração mínima inibidora (MIC) para testar os compostos (por exemplo E. COLI e/ou S. AUREUS, Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Sexta Edição Padrão Aprovada: CLSI documento M7-A4. CLSI , Wayne, PA.(2003)) C. Preparação dos Compostos

[0109] Os compostos aqui fornecidos podem ser preparados pelos métodos conhecidos por uma pessoa de habilidade na técnica como mostrado abaixo e seguindo procedimentos similares àqueles descritos na seção de Exemplos aqui e modificações de rotina destes. Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd., Publicação de Patente Japonesa Não Examinada S62-252772, Ube Industries, Ltd., Publicação de Patente Japonesa Não Examinada S63-264439, Bayer AG Publicação de Patente Japonesa Não Examinada H1-268679, Ihara Chemical Industry Co., Ltd., Publicação de Patente Japonesa Não Examinada H10-70584, Daiichi Seiyaku Co., Ltd., Publicação de Patente Japonesa Não Examinada S59-1489, Tokyo Tanabe Co., Ltd., Publicação de Patente Japonesa Não Examinada S62-53987, F. Hoffmann-La Roche Ltd., Publicação de Patente Japonesa Não Examinada S63-132891, H. Koga ET AL., Med. Chem., 1980, 23, 1358, Y. Yoshida ET AL., Synlett, 2003, 2139, I. Hayakawa ET AL., Chem. Pharm. Bull., 1984, 32, 4907, 5. Atarashi ET AL., Chem. Pharm. Bull., 1987, 35, 1986, S. Atarashi ET AL., Heterociclic Chem., 1991, 28, 329, H. Egawa ET AL., Chem. Pharm. Bull., 1986, 34, 4098, L. A. Mitscher ET AL., Med. Chem., 1987, 30, 2283, G. B. Mullen ET AL., J. Med. Chem., 1988, 31, 1694, J. S. Kiely ET AL., Med. Chem., 1988, 31, 2004, K. Ishikawa ET AL., Chem. Pharm. Bull., 1989, 37, 2103, V. D. Parikh ET AL., Heterociclic Chem., 1988, 25, 1567, H. Ishikawa ET AL., Chem. Pharm. Bull., 1990, 38, 2459, P. Remuzon ET AL., Med. Chem., 1991, 34, 29, D. J. Augeri ET AL., Heterocíclica Chem., 1990, 27, 1509, T. Okada ET AL., Heterociclic Chem., 1991, 28, 1067, D. T. W. Chu ET AL., Heterociclic Chem., 1987, 24, 453, e S. L. Dax ET AL., Org. Chem., 1992, 57, 744. J. S. Kiely ET AL., Heterociclic Chem., 1989, 26, 1675. M. Fujita ET AL., Chem. Pharm. Bull., 1996, 44, 987.

[0110] Os compostos representados pela fórmula geral (1) de acordo com a presente invenção podem ser produzidos pela síntese 1 ou uma combinação do método convencional.

em que X1a é X1 ou N-PG1 (PG1 é um grupo de proteção), e A, R2 3 5a 5b 6 a b 1 2 3 ,R , R , R ,R ,R ,R , X , X , X , p e q são como descritos acima.

[0111] O grupo de proteção PG1 representa grupos acila (tais como grupo acetila), grupos alcóxi inferiores carbonila (tal como grupo terc-carboxicarbonila), grupos ariloxicarbonila (tais como grupos benzilóxi- carbonila opcionalmente com substituintes), grupos aralquila (tais como grupo benzila e grupo p-metoxibenzila) ou grupos silila (tais como grupo trimetilsilila e grupo terc-butildimetilsilila).

[0112] Quando X1a na fórmula geral (2) representa X1, a conversão da fórmula geral (2) e a fórmula geral (3) para a fórmula geral (1) (isto é, Processo 1-A) é realizado na temperatura ambiente até 180°C por 1 a 48 horas usando-se uma base (tal como trietilamina, piridina, isopropiletilamina, e 1,8- diazabicicloundecino) em um solvente adequado (tal como N,N- dimetilformamida, sulfóxido de dimetila, N-metilpirrolidona, tolueno, acetonitrila, tetraidrofurano, metanol, etanol ou uma mistura destes) ou isento de solventes.

[0113] Quando X1a na fórmula geral (2) representa N-PG1, a conversão da fórmula geral (2) e a fórmula geral (3) para a fórmula geral (1) (isto é, Processo 1-A) pode ser realizado pelo uso de um método de desproteção geral (tal como o método descrito no Protecting Groups in Organic Synthesis (John Wiley and Sons (1999)) depois do processo mencionado acima.

[0114] Entre os compostos representados pela fórmula geral (1) de acordo com a presente invenção, os compostos representados pela fórmula geral (1 b) ou (1 c) também podem ser produzidos pela síntese 2 como.

em que A, R , R , R , R , R , R , R , X , X , X , p e q são como descrito acima.

[0115] A conversão da fórmula geral (1a) para a fórmula geral (1 b) (isto é, Processo 2-A) pode ser realizado na temperatura ambiente até 180°C por 1 a 72 horas usando-se um sal de cianeto (tal como cianeto de potássio e cianeto de sódio) em um solvente adequado (tal como N,N- dimetilformamida e sulfóxido de dimetila).

[0116] Alternativamente, a conversão pode ser realizada na temperatura ambiente até 250°C por 1 a 72 horas em um solvente adequado (tal como éter difenílico, mesitileno, N,N-dimetilformamida, sulfóxido de dimetila, tolueno, acetonitrila, tetraidrofurano, metanol, etanol, ácido acético ou uma mistura destes). A reação pode ser realizada na ausência ou presença de ácido (tal como ácido clorídrico) ou sal de cobre (tal como cloreto de cobre).

[0117] A conversão da fórmula geral (1a) para a fórmula geral (1c) (isto é, Processo 2-B) pode ser realizada como segue: a fórmula geral (1a) é primeiro reagida com cloreto de tienila, brometo de tienila, anidrido acético, clorocarbonato de etila, clorocarbonato de metila, ou semelhante ) em um solvente adequado (tal como N,N-dimetilformamida, diclorometano, clorofórmio, tetraidrofurano ou uma mistura destes) a -15°C até a temperatura ambiente por 5 minutos a 3 horas. Isto converte o grupo carboxila a um grupo de derivação reativa. A reação pode ser realizada na ausência ou na presença de base (tal como piridina e trietilamina). Subsequentemente, o produto de reação é reagido com a fórmula geral (4) na presença de base (tal como piridina e trietilamina) em um solvente adequado (tal como N,N-dimetilformamida, diclorometano, clorofórmio, tetraidrofurano ou uma mistura destes) a uma temperatura de 0°C a 100°C por 30 minutos a 24 horas.

[0118] Alternativamente, a conversão pode ser realizada como segue: a fórmula geral (1a) é regida com a fórmula geral (4) usando-se reagente de condensação (tal como dicicloexilcarbodiimida, cloreto de 3-(3- dimetilaminopropil)-1-etilcarbodiimida, cianofosfonato de dietila, difenilfosforil azida e carbonildiimidazol) em um solvente adequado (tal como N,N-dimetilformamida, diclorometano, clorofórmio, tetraidrofurano ou uma mistura destes) a 0°C a 50°C por 1 a 24 horas. A reação pode ser realizada na ausência ou na presença de base (tal como piridina, trietilamina, N-metilmorfolina) .

[0119] Entre os compostos representados pela fórmula geral (1) de acordo com a presente invenção, os compostos representados pela fórmula geral (1d), (1e) ou (1f) também podem ser produzidos pela síntese 3. Síntese 3

em que A, R , Rb, R , R , R , R , X , X , X , p e q são como descritos acima.

[0120] A conversão da fórmula geral (1 ca) para a fórmula geral (1d) (isto é, Processo 3-A) pode ser realizada como segue: a fórmula geral (1ca) é realizada com um reagente de desidroxilação (tal como anidrido trifluoroacético e oxicloreto de fósforo) na presença de base (piridina e trietilamina) em um solvente adequado (tal como diclorometano, clorofórmio, tetraidrofurano ou uma mistura destes) a 0°C a 50°C por 1 a 24 horas. Depois da reação, o produto de reação pode ser tratado com base (tal como carbonato de potássio, hidróxido de sódio e NH gel de sílica) como necessário.

[0121] A conversão da fórmula geral (1d) para a fórmula geral (I e) (isto é, Processo 3-B) pode ser realizada na temperatura ambiente até 50°C por 1 a 24 horas usando-se um composto de azida (tal como azida de sódio e azida de trimetilsilila) em um solvente adequado (tal como 2- propanol, água ou uma mistura destes) na presença de sais de zinco (tais como cloreto zinco e brometo de zinco).

[0122] A conversão da fórmula geral (1d) para a fórmula geral (10 (isto é, Processo 3-C) pode ser realizada a 0°C até temperatura de refluxo por 1 a 24 horas usando-se hidroxilamina em um solvente adequado (tal como etanol, metanol, N,N-dimetilformamida, tetraidrofurano ou uma mistura destes). A reação pode ser realizada na ausência ou na presença de base (tal como bicarbonato de potássio, carbonato de sódio, piridina e trietilamina).

[0123] Na síntese 1, os compostos representados pela fórmula geral (2) podem ser produzidos pela síntese 4.

em que A, R , R , R , R , R , X , X , p e q são como descritos acima.

[0124] As conversões da fórmula geral (5) e a fórmula geral (6) para a fórmula geral (7) (isto é, Processo 4-A) pode ser preparada como segue: a fórmula geral (5) é reagida com uma mistura de anidrido acético e éster de orto-ácido (tal como éster etílico do ácido orto-fórmico e éster orto-acético etílico) a 100°C a 150°C por 1 a 8 horas, e depois o produto de reação é reagido com a fórmula geral (6) em um solvente adequado (tal como tolueno, tetraidrofurano, metanol, etanol, t-butanol, ou uma mistura destes) na temperatura ambiente por 1 a 24 horas. A reação pode ser realizada na ausência ou na presença de um base (carbonato de potássio, carbonato de sódio, t-BuOK, t-BuONa, trietilamina e piridina).

[0125] A conversão da fórmula geral (7) para a fórmula geral (8) (isto é, Processo 4-B) pode ser realizada a 0°C a 150°C por 1 a 24 horas usando- se uma base (tal como hidreto de potássio, hidreto de sódio, carbonato de potássio, carbonato de sódio, t-BuOK e t-BuONa) ou sal de fluoreto (tal como fluoreto de potássio e fluoreto de sódio) em um solvente adequado (tal como N,N- dimetilformamida, sulfóxido de dimetila, tetraidrofurano, ou uma mistura destes).

[0126] A conversão da fórmula geral (8) para a fórmula geral (2) (isto é, Processo 4-C) pode ser realizada na temperatura ambiente até 180°C por 1 a 24 horas na presença de uma base (tal como trietilamina, piridina, isopropiletilamina, e 1,8-diazabicicloundecino) em um solvente adequado (tal como N,N-dimetilformamida, sulfóxido de dimetila, tolueno, acetonitrila, tetraidrofurano, metanol, etanol ou uma mistura destes) na presença de base (tal como trietilamina, piridina, isopropiletilamina, e 1,8- diazabicicloundecino) ou isento de solventes.

[0127] Entre os compostos representados pela fórmula geral (2), os compostos representados pela fórmula geral (2a) também podem ser produzidos pela síntese 5.

em que A, R2, R3, R6, X1a, X2, pe q são como descritos acima.

[0128] A conversão da fórmula geral (10) e a fórmula geral (6) para a fórmula geral (11) (isto é, Processo 5-A) pode ser conduzida por um método similar ao Processo 4-A.

[0129] A conversão da fórmula geral (11) para a fórmula geral (12) (isto é, Processo 5-B) pode ser preparada por um método similar ao Processo 4-B.

[0130] A conversão da fórmula geral (12) para a fórmula geral (13) (isto é, Processo 5-C) pode ser conduzida por nitração geral, por exemplo, uma reação ácido sulfúrico concentrado usando um reagente de nitração (tal como nitrato de potássio, nitrato de sódio e ácido nítrico). A reação pode ser realizada a 0°C a 50°C por 1 a 8 horas.

[0131] A conversão da fórmula geral (13) para a fórmula geral (2a) (isto é, Processo 5-D) pode ser realizada na temperatura ambiente até 120°C por 1 a 48 horas usando-se um metal (tal como ferro reduzido, estanho e zinco) na presença de ácido (tal como ácido clorídrico e ácido acético) em um solvente adequado (tal como tetraidrofurano, metanol, etanol, água ou uma mistura destes) ou isento de solventes.

[0132] Alternativamente, a conversão pode ser realizada pela hidrogenação usando catalisador metálico (tal como paládio em carbono ativado, platina em carbono ativado, platina oxidadas e níquel de Raney) em um solvente adequado (tal como metanol, etanol, acetato de etila, tetraidrofurano, N,N-dimetilformamida, ácido acético ou uma mistura destes) na temperatura ambiente até 80°C por 1 a 24 horas. A reação pode ser realizada a uma pressão da pressão normal até 0,5 MPa em atmosfera de hidrogênio.

[0133] Além disso, a conversão pode ser realizada pela redução usando hidrossulfito de sódio em um solvente adequado (tal como água, metanol, etanol, tetraidrofurano ou uma mistura destes) na temperatura ambiente até 100°C por 1 a 24 horas.

[0134] Na Síntese 4 ou Síntese 5, um composto da fórmula geral (15), (16), (17) e (18) pode ser produzido também pela síntese 6. Síntese 6

em que R5 é hidrogênio, NO2 ou R5aR5N- , e A, Ra, Rb, R2, R6, , , ,,,,, X1a, X2, p e q são como descritos acima.

[0135] A conversão da fórmula geral (14) para a fórmula geral (15) (isto é, Processo 6-A) pode ser preparada por um método similar ao Processo 2-B.

[0136] A conversão da fórmula geral (15) para a fórmula geral (16) (isto é, Processo 6-B) pode ser preparada por um método similar ao Processo 3-UM.

[0137] A conversão da fórmula geral (16) para a fórmula geral (17) (isto é, Processo 6-C) pode ser preparada por um método similar ao Processo 3-B.

[0138] A conversão da fórmula geral (16) para a fórmula geral (18) (isto é, Processo 6-D) pode ser preparada por um método similar ao Processo 3-C.

[0139] Entre os compostos representados pela fórmula geral (13) na síntese 5, o composto representados pela fórmula geral (13b) pode ser produzido também pela síntese 7. Síntese 7

em que R3’ é alcóxi, X é halogênio, e A, R2, R5, R6, X1a, X2, p e q são como descritos acima.

[0140] A conversão da fórmula geral (13a) e da fórmula geral (19) para a fórmula geral (20) (isto é, Processo 7-A) pode ser realizada a uma temperatura de -78°C a 0°C por 1 a 24 horas em um solvente adequado (tal como tetraidrofurano, éter dietílico ou uma mistura destes). A conversão pode ser realizada na ausência ou na presença de um sal de cobre (tal como iodeto de cobre e cloreto de cobre).

[0141] A conversão da fórmula geral (20) para a fórmula geral (13b) (isto é, Processo 7-B) pode ser conduzida na temperatura ambiente até 130°C por 1 a 120 horas usando-se dióxido de manganês em um solvente adequado (tal como diclorometano, clorofórmio, tolueno, etanol ou uma mistura destes).

[0142] Alternativamente, a conversão pode ser realizada na temperatura ambiente até 130°C por 1 a 24 horas usando-se um composto de quinona (tal como diclorodiciano-p-benzoquinona e cloranila).

[0143] Entre os compostos representados pela fórmula geral (13) na síntese 5, o composto representado pela fórmula geral (13d) pode ser produzido pela síntese 8. Síntese 8

em que A, R2, R3, X1a, X2, p, e q são como descritos acima.

[0144] A conversão da fórmula geral (13c) para a fórmula geral (21) (isto é, Processo 8-A) pode ser realizada na temperatura ambiente até -78°C por 1 a 72 horas usando-se carbonato de amônio em um solvente adequado (tal como N,N-dimetilformamida, sulfóxido de dimetila, etanol, metanol, água ou uma mistura destes).

[0145] A conversão da fórmula geral (21) para a fórmula geral (13d) (isto é, Processo 8-B) pode ser realizada a 0°C a 100°C por 1 a 48 horas usando-se um éster de nitrito (tal como nitrito de t-butila, nitrito de amila, nitrito de iso-amila) na presença de um sal de cobre (tal como cloreto de cobre e brometo de cobre) em um solvente adequado tal como acetonitrila).

[0146] Alternativamente, a conversão pode ser realizada como segue: a fórmula geral (21) é reagida com um sal de nitrito (tal como nitrito de potássio e nitrito de sódio) na presença de um ácido (tal como ácido clorídrico, ácido sulfúrico, e ácido acético) em um solvente adequado (por exemplo, tetraidrofurano, 1,4-dioxano, H2O ou uma mistura destes) a uma temperatura de 0°C até a temperatura ambiente por 5 minutos, em 1 hora, e depois, o produto de reação é tratado com um sal de cobre (tal como cloreto de cobre e brometo de cobre) em um solvente adequado (por exemplo, tetraidrofurano, 1,4-dioxano, H2O ou uma mistura destes) de 0°C a 100°C por 1 a 48 horas.

[0147] Na síntese 1-8, os compostos com substituinte X1a representando N-PG’ podem ser convertidos aos compostos com X1a representando NH por um método convencional tal como o método descrito em Protecting Groups in Organic Synthesis (John Wiley and Sons (1999)).

[0148] Na síntese 1-8, os compostos com substituintes R5a e/ou R5b representando grupo aralquila que opcionalmente com substituintes pode ser convertido nos compostos com substituinte R5a e/ou R5b representando H por um método convencional, por exemplo, pela redução catalítica usando ácido (tal como ácido clorídrico e ácido trifluoroacético), base inorgânica (tal como carbonato de potássio e hidróxido de sódio), base orgânica (tal como hidrazina), sal de amônio quaternário (tal como fluoreto de tetrabutilamônio) e metal (tal como paládio em carbono).

[0149] Na síntese 1-8, os compostos com substituinte R3 representando o grupo alcoxicarbonila podem ser convertidos aos compostos com substituinte R3 é COOH por um método convencional, por exemplo, uma reação isenta de solventes ou uma reação em um solvente adequado (tal como metanol, etanol, tetraidrofurano, água ou uma mistura destes) na presença de base (tal como hidróxido de potássio, hidróxido de sódio, carbonato de potássio e carbonato de sódio) ou ácido (tal como ácido sulfúrico, ácido clorídrico e ácido acético) a uma temperatura da temperatura ambiente a 120°C por 1 a 48 horas.

[0150] Os isômeros ópticos dos compostos representados pela fórmula geral (1) podem ser produzidos usando-se a Síntese 1-8 supracitada ou uma combinação dos métodos convencionais, usando materiais de partida opticamente ativos.

[0151] Alternativamente, estes isômeros ópticos podem ser preparados a partir de racematos representados pela fórmula geral (1) pela cristalização fracionária usando ácido ou base opticamente ativos, ou cromatografia usando suporte quiral.

[0152] Certos esquemas de reação exemplares para a preparação de compostos são mostrados abaixo:

[0153] Em uma forma de realização, o produto de Síntese 9 é ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(2-(piridin-2-ilamino)etilamino)-2,7- diidroespiro-[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico (8), como ilustrado na síntese 11.

D. Composições Farmacêuticas

[0154] As composições farmacêuticas aqui fornecidas contêm quantidades terapeuticamente eficazes de um ou mais dos compostos aqui fornecidos que são úteis na prevenção, tratamento, ou melhora de um ou mais dos sintomas de doenças mediadas por GSK-3.

[0155] As composições farmacêuticas dos compostos aqui fornecidos podem ser administrados sistêmica ou localmente, ou oralmente ou parenteralmente tal como retal, subcutânea, intramuscular, intravenosa ou percutaneamente.

[0156] As composições contêm um ou mais dos compostos aqui fornecidos. Os compostos podem ser formulados em preparações farmacêuticas adequadas tais como soluções, suspensões, tabletes, tabletes dispersáveis, pílulas, cápsulas, grânulos, pós, pós finos, injeções, formulações de liberação prolongada ou elixires, para a administração oral ou em soluções ou suspensões estéreis para a administração parenteral, assim como preparação de emplastro transdérmico e inaladores de pó seco. Em certas formas de realização, as composições aqui fornecidas podem ser produzidas adicionando-se excipientes, cargas, aglutinantes, desintegradores, agentes de revestimento, agentes de revestimento de açúcar, moduladores de pH, agentes de solubilização, ou solventes aquosos ou não aquosos convenientes de acordo com as técnicas de preparação farmacêutica convencional. Tipicamente, os compostos descritos acima são formulados em composições farmacêuticas usando técnicas e procedimentos bem conhecidos na técnica (ver, por exemplo, Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, Décima Sétima Edição 1999).

[0157] Nas composições, concentrações eficazes de um ou mais compostos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis é (são) misturados com um carreador ou veículo farmacêutico adequado. Os compostos podem ser derivados como os sais, ésteres, éteres enólicos ou ésteres, ácidos, bases, solvatos, hidratos ou pró medicamentos correspondentes antes da formulação, como descrito acima. As concentrações dos compostos nas composições são eficazes para a liberação de uma quantidade, na administração, que trata, previne, ou melhora um ou mais dos sintomas de doenças mediadas por GSK-3.

[0158] Tipicamente, as composições são formuladas para a administração de dosagem única. Para formular uma composição, a fração em peso de composto é dissolvida, colocada em suspensão, dispersada ou de outra maneira misturada em um veículo selecionado em uma concentração eficaz tal que a condição tratada é aliviada ou melhorada. Os carreadores ou veículos farmacêuticos adequados para a administração dos compostos aqui fornecidos incluem quaisquer de tais carreadores conhecidos por aqueles habilitados na técnica como sendo adequados para o modo particular de administração.

[0159] Além disso, os compostos podem ser formulados como o único ingrediente farmaceuticamente ativo na composição ou podem ser combinados com outros ingredientes ativos. As suspensões lipossômicas, incluindo lipossomas alvejados a tecido, tais como lipossomas alvejados a tumor, também podem ser adequados como carreadores farmaceuticamente aceitáveis. Estes podem ser preparados de acordo com métodos conhecidos por aqueles habilitados na técnica. Por exemplo, formulações de lipossoma podem ser preparados como conhecido na técnica. Em resumo, lipossomas tais como vesículas multilamelares (MLV’s) podem ser formadas secando-se a fosfatidil colina do ovo e a fosfatidil serina cerebral (razão molar 7:3) dentro de um frasco. Uma solução de um composto aqui fornecido em solução salina tamponada com fosfato que carece de cátions bivalentes (PBS) é adicionado e o frasco agitado até que a película lipídica seja dispersa. As vesículas resultantes são lavadas para remover o composto não encapsulado, as pelotas pela centrifugação, e depois recolocado em suspensão em PBS.

[0160] O composto ativo é incluído no carreador farmaceuticamente aceitável em uma quantidade suficiente para exercer um efeito terapeuticamente útil na ausência de efeitos colaterais indesejáveis no paciente tratado. A concentração terapeuticamente eficaz pode ser determinada empiricamente testando-se os compostos em sistemas IN VITRO e IN VIVO aqui descritos e depois extrapolado daí para dosagens para seres humanos.

[0161] A concentração de composto ativo na composição farmacêutica dependerá das taxas de absorção, inativação e excreção do composto ativo, das características físico-químicas do composto, do programa de dosagem, e quantidade administrada assim como outros fatores conhecidos por aqueles de habilidade na técnica. Por exemplo, a quantidade que é liberada é suficiente para melhorar um ou mais dos sintomas de doenças mediadas por GSK-3.

[0162] Em certas formas de realização, uma dosagem terapeuticamente eficaz deve produzir uma concentração sérica de ingrediente ativo de cerca de 0,1 ng/ml a cerca de 50 a 100 μg/ml. Em uma forma de realização, as composições farmacêuticas fornecem uma dosagem de cerca de 0,001 mg a cerca de 2000 mg de composto por quilograma de peso corporal por dia. As formas unitárias de dosagem farmacêutica são preparadas para fornecer de cerca de 1 mg a cerca de 1000 mg e em certas formas de realização, de cerca de 10 a cerca de 500 mg do ingrediente ativo essencial ou uma combinação de ingredientes essenciais por forma unitária de dosagem.

[0163] O ingrediente ativo pode ser administrado de uma vez, ou pode ser dividido em várias doses menores a serem administradas em intervalos de tempo. É entendido que a dosagem e duração precisas de tratamento é uma função da doença que é tratada e pode ser determinada empiricamente usando protocolos de teste conhecidos ou pela extrapolação a partir de dados de teste IN VIVO ou IN VITRO. Deve ser mencionado que as concentrações e valores de dosagem também podem variar com a severidade da condição a ser aliviada. Deve ser entendido ainda que para qualquer paciente particular, os regimes de dosagem específica deve ser ajustada com o tempo de acordo com a necessidade individual e o julgamento profissional da pessoa que administra ou supervisiona a administração das composições, e que as faixas de concentração aqui apresentadas são apenas exemplares e não são intencionadas a limitar o escopo ou prática das composições reivindicadas.

[0164] Os derivados farmaceuticamente aceitáveis incluem ácidos, bases, éteres enólicos e ésteres, sais, ésteres, hidratos, solvatos e formas de pró medicamento. O derivado é selecionado tal que as suas propriedades farmacocinéticas são superiores ao composto neutro correspondente.

[0165] Assim, as concentrações ou quantidades eficazes de um ou mais dos compostos aqui descritos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis destes são misturados com um carreador ou veículo farmaceuticamente adequados para a administração sistêmica, tópica ou local para formar composições farmacêuticas. Os compostos são incluídos em uma quantidade eficaz para melhorar um ou mais sintomas de, ou para tratar ou prevenir doenças mediadas pela quinase, incluindo, mas não limitadas a, doenças mediadas por GSK-3. A concentração de composto ativo na composição dependerá das taxas de absorção, inativação, excreção do composto ativo, do programa de dosagem, quantidade administrada, formulação particular assim como outros fatores conhecidos por aqueles de habilidade na técnica.

[0166] As composições são intencionadas a serem administradas por uma via adequada, incluindo oral, parenteral, retal, tópica e localmente. Para a administração oral, cápsulas e tabletes podem ser formulados. As composições estão na forma líquida, semi-líquida ou sólida e são formulados de uma maneira adequada para cada via de administração.

[0167] As soluções ou suspensões usadas para a aplicação parenteral, intradérmica, subcutânea, ou tópica podem incluir qualquer um dos seguintes componentes: um diluente estéril, tal como água para injeção, solução salina, óleo fixo, polietileno glicol, glicerina, propileno glicol, dimetil acetamida ou outros solventes sintéticos; agentes antimicrobianos, tais como álcool benzílico e metil parabenos; antioxidantes, tais como ácido ascórbico e bissulfito de sódio; agentes queladores, tais como ácido etilenodiaminotetra- acético (EDTA); tampões, tais como acetatos, citratos e fosfatos; e agentes para o ajuste de tonicidade tais como cloreto de sódio ou dextrose. As preparações parenterais podem ser incluídos em ampolas, seringas descartáveis ou frascos de dose única ou múltipla fabricados de vidro, plástico ou outro material adequado.

[0168] Em casos em que os compostos exibem solubilidade insuficiente, métodos para solubilizar compostos podem ser usados. Tais métodos são conhecidos por aqueles de habilidade nesta técnica, e incluem, mas não são limitados ao uso de co-solventes, tais como sulfóxido de dimetila (DMSO), usando tensoativos, tais como TWEEN®, ou dissolução em bicarbonato de sódio aquoso.

[0169] Na mistura ou adição do(s) composto(s), a mistura resultante pode ser uma solução, suspensão, emulsão ou semelhante. A forma da mistura resultante depende de vários fatores, incluindo o modo pretendido de administração e a solubilidade do composto no carreador ou veículo selecionados. A concentração eficaz é suficiente para melhorar os sintomas da doença, distúrbio ou condição tratados e pode ser empiricamente determinada.

[0170] As composições farmacêuticas são fornecidas para a administração aos seres humanos e animais em formas de dosagem unitária, tais como tabletes, cápsulas, pílulas, pós, grânulos, soluções ou suspensões parenterais estéreis, e soluções ou suspensões orais, e emulsões de óleo em água contendo quantidades adequadas dos compostos ou derivados destes farmaceuticamente aceitáveis. Os composto farmacêutica e terapeuticamente ativos e seus derivados são formulados e administrados em formas de dosagem unitária ou formas de dosagem múltiplas. As formas de dose unitárias como aqui usadas referem-se a unidades fisicamente separadas adequadas para pacientes humanos e animal e acondicionados individualmente como é conhecido na técnica. Cada dose unitária contém uma quantidade pré determinada do composto terapeuticamente ativo suficiente para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação com o carreador, veículo ou diluente farmacêuticos requeridos. Os exemplos de formas de dose unitária incluem ampolas e seringas e tabletes ou cápsulas individualmente acondicionadas. As formas de dose unitária podem ser administradas em frações ou múltiplos destes. Uma forma de dose múltipla é uma pluralidade de formas de dosagem unitárias idênticas acondicionadas em um recipiente único para serem administradas na forma de dose unitária segregada. Os exemplos de formas de dose múltipla incluem frascos, garrafas de tabletes ou cápsulas ou garrafas de pintas ou galões. Consequentemente, a forma de dose múltipla é um múltiplo de doses unitárias que não são segregadas no acondicionamento.

[0171] As preparações de liberação prolongada também podem ser preparadas. Os exemplos adequados de preparações de liberação prolongada incluem matrizes semipermeáveis de polímeros hidrofóbicos sólidos contendo o composto aqui fornecido, matrizes estas que estão na forma de artigos formados, por exemplo, películas, ou microcápsulas. Os exemplos de matrizes de liberação prolongada incluem poliésteres, hidrogéis (por exemplo, poli(2-hidroxietil-metacrilato), ou poli(álcool vinílico)), polilactídeos, copolímeros de ácido L-glutâmico e etil-1-glutamato, etileno- acetato de vinila não degradável, copolímeros de ácido láctico-ácido glicólico degradáveis tais como o LUPRON DEPOT® (microesferas injetáveis compostas de copolímero de ácido láctico-ácido glicólico e acetato de leuprolida), e ácido poli-D-(-)-3-hidroxibutírico. Enquanto que os polímeros tais como etileno-acetato de vinila e ácido láctico-ácido glicólico possibilitam a liberação de moléculas por mais de 100 dias, certos hidrogéis liberam proteínas por períodos de tempo mais curtos. Quando o composto encapsulado permanece no corpo por um tempo longo, eles podem desnaturar ou agregar como um resultado da exposição à umidade a 37°C, resultando em uma perda de atividade biológica e possíveis mudanças na sua estrutura. As estratégias racionais podem ser imaginadas para a estabilização dependendo do mecanismo de ação envolvido. Por exemplo, se o mecanismo de agregação é descoberto ser a formação da ligação intermolecular S--S através da intermudança tio-dissulfeto, a estabilização pode ser alcançada modificando- se resíduos de sulfidrila, liofilização a partir de soluções ácidas, controlando o teor de umidade, usando aditivos apropriados, e desenvolvendo composições de matriz polimérica específicas.

[0172] As formas de dosagem ou composições contendo ingrediente ativo na faixa de 0,005 % a 100 % com o equilíbrio completado com carreador não tóxico podem ser preparadas. Para a administração oral, uma composição não tóxica farmaceuticamente aceitável é formada pela incorporação de qualquer um dos excipientes normalmente utilizados, tais como, por exemplo graus farmacêuticos de manitol, lactose, amido, estearato de magnésio, pó de silicato de magnésio ou talco, derivados de celulose, gelatina, ágar, pectina, goma arábica, óleo de oliva, óleo de gergelim, manteiga de cacau, etileno glicol, croscarmelose sódica, glicose, sacarose, carbonato de magnésio ou sacarina sódica. Tais composições incluem soluções, suspensões, tabletes, cápsulas, pós e formulações de liberação prolongada, tais como, mas não limitados a, implantes e sistemas de liberação microencapsulada, e polímeros biodegradáveis, biocompatíveis, tais como colágeno, etileno acetato de vinila, polianidridos, ácido poliglicólico, outros poliésteres, ácido poliláctico e outros. Métodos para a preparação destas composições são conhecidos por aqueles habilitados na técnica. As composições consideradas podem conter cerca de 0,001 a 100 % de ingrediente ativo, em certas formas de realização, cerca de 0,1 a 85 % ou de cerca de 75 a 95 %.

[0173] Os compostos ativos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados com carreadores que protegem o composto contra a eliminação rápida do corpo, tais como formulações ou revestimentos de liberação com o tempo.

[0174] As composições podem incluir outros compostos ativos para se obter as combinações desejadas de propriedades. Os compostos aqui fornecidos, ou seus derivados farmaceuticamente aceitáveis como aqui descritos, também podem ser vantajosamente administrados com propósitos terapêuticos ou profiláticos juntos com um outro agente farmacológico conhecido na técnica geral para ser de valor no tratamento de uma ou mais das doenças ou condições médicas aludidas acima, tais como doenças mediadas por GSK-3. Deve ser entendido que tal terapia de combinação constitui um outro aspecto das composições e métodos de tratamento aqui fornecidos.

[0175] As composições isentas de lactose aqui fornecidas podem conter excipientes que são bem conhecidos na técnica e são listados, por exemplo, na U.S. Pharmacopeia (USP) SP (XXI)/NF (XVI). No geral, as composições isentas de lactose contêm um ingrediente ativo, um aglutinante/carga, e um lubrificante em quantidades farmaceuticamente compatíveis e farmaceuticamente aceitáveis. As formas de dosagem isentas de lactose exemplares contêm um ingrediente ativo, celulose microcristalina, amido pré-gelatinizado e estearato de magnésio.

[0176] São ainda abrangidos composições farmacêuticas e formas de dosagem anidras contendo um composto aqui fornecido. Por exemplo, a adição de água (por exemplo, 5 %) é amplamente aceita nas técnicas farmacêuticas como um meio de simular a armazenagem de longa duração de modo a determinar características tais como vida de prateleira ou a estabilidade das formulações com o tempo. Ver, por exemplo, Jens T. Carstensen, Drug Stability: Principles & Practice, 2a Ed., Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pp. 379-80. De fato, água e calor aceleram a decomposição de alguns compostos. Assim, o efeito de água sobre uma formulação pode ser de enorme significância visto que umidade é habitualmente encontrada durante a fabricação, manuseio, acondicionamento, armazenagem, remessa e uso das formulações.

[0177] As composições farmacêuticas e as formas de dosagem anidras como aqui descritas podem ser preparadas usando ingredientes anidros ou contendo umidade baixa e condições de baixa umidade. As composições farmacêuticas e as formas de dosagem que compreendem lactose e pelo menos um ingrediente ativo que compreende uma amina primária ou secundária podem ser, em certas formas de realização, anidras se contato substancial com umidade durante a fabricação, acondicionamento, e/ou armazenagem é esperada.

[0178] Uma composição farmacêutica anidra deve ser preparada e armazenada tal que a sua natureza anidra seja mantida. Consequentemente, as composições anidras são, em certas formas de realização, acondicionadas usando materiais conhecidos para prevenir a exposição à água tal que elas possam ser incluídas em kits de fórmulas. Os exemplos de acondicionamento adequados incluem, mas não são limitados a, folhas metálicas hermeticamente seladas, plásticos, recipientes de dose unitária (por exemplo, frascos), embalagens bolha e embalagens de tira. Formas de Dosagem Oral

[0179] As formas de dosagem farmacêutica oral são sólidas, em gel ou líquidas. As formas de dosagem sólida são tabletes, cápsulas, grânulos, e pós volumosos. Os tipos de tabletes orais incluem comprimido, pastilhas mastigáveis e tabletes que podem ser revestidos entéricos, revestidos com açúcar ou revestidos com película. As cápsulas podem ser cápsulas de gelatina duras ou moles, enquanto que os grânulos e pós podem ser fornecidos nas formas não efervescentes ou efervescentes com a combinação de outros ingredientes conhecidos por aqueles habilitados na técnica.

[0180] Em certas formas de realização, as formulações são formas de dosagem sólidas, tais como cápsulas ou tabletes. Os tabletes, pílulas, cápsulas, pastilhas e outros podem conter qualquer um dos seguintes ingredientes, ou compostos de uma natureza similar: um aglutinante; um diluente; um agente desintegrante; um lubrificante; um agente de deslizamento; um agente adoçante; e um agente flavorizante.

[0181] Os exemplos de aglutinantes incluem celulose microcristalina, goma tragacanto, solução de glicose, mucilagem de acácia, solução de gelatina, sacarose e pasta de amido. Lubrificantes incluem talco, amido, estearato de magnésio ou cálcio, licopódio e ácido esteárico. Os diluentes incluem, por exemplo, lactose, sacarose, amido, caulim, sal, manitol e fosfato de dicálcio. Agente de deslizamentos incluem, mas não são limitados a, dióxido de silício coloidal. Agentes desintegrantes incluem croscarmelose sódica, amido glicolato de sódio, ácido algínico, amido de milho, amido de batata, bentonita, metilcelulose, ágar e carboximetilcelulose. Os agentes de coloração incluem, por exemplo, qualquer um dos corantes FD e C aprovados, certificados, solúveis em água, misturas destes; e corantes FD e C insolúveis em água colocados em suspensão em hidrato de alumina. Os agentes adoçantes incluem sacarose, lactose, manitol e agentes adoçantes artificiais tais como sacarina, e qualquer número de sabores secados por pulverização. Os agentes flavorizantes incluem sabores naturais extraídos de plantas tais como frutas e misturas sintéticas de compostos que produzem uma sensação agradável, tais como, mas não limitados a hortelã e salicilato de metila. Os agentes de umectação incluem monoestearato de propileno glicol, monooleato de sorbitano, monolaurato de dietileno glicol e éter LAURAL de polioxietileno. Os revestimentos eméticos incluem ácidos graxos, gorduras, ceras, goma laca, goma laca amoniacal e acetato ftalatos de celulose. Os revestimentos de película incluem hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose sódica, polietileno glicol 4000 e acetato ftalato de celulose.

[0182] Se a administração oral é desejada, o composto pode ser fornecido em uma composição que o proteja do ambiente ácido do estômago. Por exemplo, a composição pode ser formulada em um revestimento entérico que mantenha a sua integridade no estômago e libere o composto ativo no intestino. A composição também pode ser formulada em combinação com um antiácido ou outro tal ingrediente.

[0183] Quando a forma unitária de dosagem é uma cápsula, a mesma pode conter, além do material do tipo acima, um carreador líquido tal como um óleo graxo. Além disso, as formas unitárias de dosagem podem conter vários outros materiais que modificam a forma física da unidade de dosagem, por exemplo, revestimentos de açúcar e outros agentes entéricos. Os compostos também podem ser administrados como um componente de um elixir, suspensão, xarope, lâmina, borrifo, goma de mascar ou semelhante. Um xarope pode conter, além dos compostos ativos, sacarose como um agente adoçante e certos conservantes, pigmentos e corantes e sabores.

[0184] Os materiais ativos também podem ser misturados com outros materiais ativos que não comunicam a ação desejada, ou com materiais que suplementam a ação desejada, tal como antiácidos, bloqueadores de H2, e diuréticos. O ingrediente ativo é um composto ou derivado deste farmaceuticamente aceitável como aqui descritos. Concentrações mais altas, até cerca de 98 % em peso do ingrediente ativo podem ser incluídas.

[0185] Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis incluídos em tabletes são aglutinantes, lubrificantes, diluentes, agentes desintegrantes, agentes de cor, agentes flavorizantes, e agentes umectantes. Os tabletes revestidos entéricos, por causa do revestimento entérico, resistem à ação do ácido estomacal e dissolvem ou desintegram nos intestinos neutros ou alcalinos. Os tabletes revestidos com açúcar são tabletes comprimidos aos quais camadas diferentes de substâncias farmaceuticamente aceitáveis são aplicadas. Os tabletes revestidos com película são tabletes comprimidos que foram revestidos com um polímero ou outro revestimento adequado. Os tabletes comprimidos múltiplos são tabletes comprimidos fabricados por mais do que um ciclo de compressão utilizando as substâncias farmaceuticamente aceitáveis anteriormente mencionadas. Os agentes de cor também podem ser usados nas formas de dosagem acima. Agentes flavorizantes e adoçantes são usados em tabletes comprimidos, revestidos com açúcar, comprimidos múltiplos e tabletes mastigáveis. Os agentes flavorizantes e adoçantes são especialmente úteis na formação de tabletes mastigáveis e pílulas.

[0186] As formas de dosagem oral líquidas incluem soluções aquosas, emulsões, suspensões, soluções e/ou suspensões reconstituídas a partir de grânulos não efervescentes e preparações efervescentes reconstituídas a partir de grânulos efervescentes. As soluções aquosas incluem, por exemplo, elixires e xaropes. As emulsões são óleo em água ou água em óleo.

[0187] Os elixires são preparações claras, adoçadas, hidroalcoólicas. Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis usados em elixires incluem solventes. Os xaropes são soluções aquosas concentradas de um açúcar, por exemplo, sacarose, e podem conter um conservante. Uma emulsão é um sistema de duas fases em que um líquido é disperso na forma de pequenos glóbulos por todo um outro líquido. Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis usados nas emulsões são líquidos não aquosos, agentes emulsificantes e conservantes. As suspensões usam agentes de suspensão e conservantes farmaceuticamente aceitáveis. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis usadas em grânulos não efervescentes, para serem reconstituídos em uma forma de dosagem oral líquida, incluem diluentes, adoçantes e agentes de umectação. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis usadas em grânulos efervescentes, a serem reconstituídos em uma forma de dosagem oral líquida, incluem ácidos orgânicos e uma fonte de dióxido de carbono. Agentes de cor e flavorizantes são usados em todas as formas de dosagem acima.

[0188] Os solventes incluem glicerina, sorbitol, álcool etílico e xarope. Os exemplos de conservantes incluem glicerina, metil e propilparabeno, ácido benzóico, benzoato de sódio e álcool. Os exemplos de líquidos não aquosos utilizados em emulsões incluem óleo mineral e óleo de semente de algodão. Os exemplos de agentes de emulsificação incluem gelatina, acácia, tragacanto, bentonita, e tensoativos tais como monooleato de polioxietileno sorbitano. Os agentes de suspensão incluem carboximetilcelulose sódica, pectina, tragacanto, Veegum e acácia. Os diluentes incluem lactose e sacarose. Os agentes adoçantes incluem sacarose, xaropes, glicerina e agentes adoçantes artificiais tais como sacarina. Os agentes de umectação incluem monoestearato de propileno glicol, monooleato de sorbitano, monolaurato de dietileno glicol e éter laurílico de polioxietileno. Os ácidos orgânicos incluem ácido cítrico e tartárico. As fontes de dióxido de carbono incluem bicarbonato de sódio e carbonato de sódio. Os agentes de cor incluem qualquer um dos corantes FD e C aprovados, certificados, solúveis em água, e misturas destes. Os agentes flavorizantes incluem sabores naturais extraídos de plantas tais como frutas, e misturas sintéticas de compostos que produzem uma sensação de sabor agradável.

[0189] Para uma forma de dosagem sólida, a solução ou suspensão, por exemplo em carbonato de propileno, óleos vegetais ou triglicérides, são encapsuladas em uma cápsula de gelatina. Tais soluções, e a sua preparação e encapsulação, são divulgadas nas Patentes U.S. 4.328.245; 4.409.239; e 4.410.545. Para uma forma de dosagem líquida, a solução, por exemplo, em um polietileno glicol, pode ser diluída com uma quantidade suficiente de um carreador líquido farmaceuticamente aceitável, por exemplo, água, a ser facilmente medida para a administração.

[0190] Alternativamente, as formulações orais líquidas ou semi sólidas podem ser preparadas dissolvendo-se ou dispersando-se o composto ativo ou sal em óleos vegetais, glicóis, triglicerídeos, ésteres de propileno glicol (por exemplo, carbonato de propileno) e outros de tais carreadores, e encapsulando estas soluções ou suspensões em cascas de cápsula de gelatina duras ou moles. Outras formulações úteis incluem, mas não são limitadas àquelas contendo um composto aqui fornecido, um monoou poli-alquileno glicol dialquilado, incluindo, mas não limitado a, 1,2- dimetoximetano, diglime, triglime, tetraglime, polietileno glicol-350-éter dimetílico, polietileno glicol-550-éter dimetílico, polietileno glicol-750-éter dimetílico em que 350, 550 e 750 referem-se ao peso molecular médio aproximado do polietileno glicol, e um ou mais antioxidantes, tais como hidroxitolueno butilado (BHT), hidroxianisol butilado (BHA), galato de propila, vitamina E, hidroquinona, hidroxicoumarinas, etanolamina, lecitina, cefalina, ácido ascórbico, ácido málico, sorbitol, ácido fosfórico, ácido tiodipropiônico e seus ésteres, e ditiocarbamatos.

[0191] Outras formulações incluem, mas não são limitadas a, soluções alcoólicas aquosas incluindo um acetal farmaceuticamente aceitável. Os álcoois usados nestas formulações são qualquer um dos solventes miscíveis em água farmaceuticamente aceitáveis tendo um ou mais grupos hidroxila, incluindo, mas não limitados a, propileno glicol e etanol. Acetais incluem, mas não são limitados a, di(alquila inferior) acetais de aldeídos de alquila inferior tais como acetaldeído dietil acetal.

[0192] Em todas as formas de realização, as formulações em tabletes e cápsulas podem ser revestidas como conhecido por aqueles de habilidade na técnica de modo a modificar ou manter a dissolução do ingrediente ativo. Assim, por exemplo, estes podem ser revestidos com um revestimento entericamente digerível convencional, tal como salicilato de fenila, ceras e acetato ftalato de celulose. Injetáveis, soluções e emulsões

[0193] A administração parenteral, no geral caracterizada pela injeção, subcutânea, intramuscular ou intravenosamente também é aqui considerada. Os injetáveis podem ser preparados em formas convencionais, como soluções ou suspensões líquidas, as formas sólidas adequadas para a solução ou suspensão em líquido antes da injeção, ou como emulsões. Os excipientes adequados são, por exemplo, água, solução salina, dextrose, glicerol ou etanol. Além disso, se desejado, as composições farmacêuticas a serem administradas também podem conter quantidades menores de substâncias auxiliares não tóxicas tais como agentes de umectação ou emulsificação, agentes de tamponamento de pH, estabilizantes, realçadores de solubilidade, e outros de tais agentes, tais como por exemplo, acetato de sódio, monolaurato de sorbitano, oleato de trietanolamina e ciclodextrinas. A implantação de um sistema de liberação lenta ou liberação prolongada, tal que um nível constante de dosagem seja mantido também é aqui considerado. Em resumo, um composto aqui fornecido é disperso em uma matriz interna sólida, por exemplo, metacrilato de polimetila, metacrilato de polibutila, cloreto de polivinila plastificado ou não plastificado, náilon plastificado, tereftalato de polietileno plastificado, borracha natural, poliisopreno, poliisobutileno, polibutadieno, polietileno, copolímeros de etileno-acetato de vinila, borrachas de silicona, polidimetilsiloxanos, copolímeros de carbonato de silicona, polímeros hidrofílicos tais como hidrogéis de ésteres de ácido acrílico e metacrílico, colágeno, álcool polivinílico reticulado e acetato de polivinila reticulado parcialmente hidrolisado, que é circundado por uma membrana polimérica externa, por exemplo, polietileno, polipropileno, copolímeros de etileno/propileno, copolímeros de etileno/acrilato de etila, copolímeros de etileno/acetato de vinila, borrachas de silicona, polidimetil siloxanos, borracha de neoprene, polietileno clorado, cloreto de polivinila, copolímeros de cloreto de vinila com acetato de vinila, cloreto de vinilideno, etileno e propileno, tereftalato de polietileno ionomérico, borracha butilada, borrachas de epicloroidrina, copolímero de etileno/álcool vinílico, terpolímero de etileno/ acetato de vinila/álcool vinílico, e copolímero de etileno/viniloxietanol, que é insolúvel em fluidos corporais. O composto difunde através da membrana polimérica externa em uma etapa que controla a taxa de liberação. A porcentagem de composto ativo contida em tais composições parenterais é altamente dependente da sua natureza específica, assim como da atividade do composto e das necessidades do paciente.

[0194] A administração parenteral das composições inclui as administrações intravenosa, subcutânea e intramuscular. As preparações para a administração parenteral incluem soluções estéreis prontas para injeção, produtos solúveis secos estéreis, tais como pós liofilizados, prontos para serem combinados com um solvente exatamente antes do uso, incluindo tabletes hipodérmicos, suspensões estéreis prontas para a injeção, produtos insolúveis secos estéreis prontos para serem combinados com um veículo exatamente antes do uso e emulsões estéreis. As soluções podem ser aquosas ou não aquosas.

[0195] Se intravenosamente administradas, carreadores adequados incluem solução salina fisiológica ou solução salina tamponada com fosfato (PBS), e soluções contendo agentes espessantes e solubilizantes, tais como glicose, polietileno glicol, e polipropileno glicol e misturas destes.

[0196] Os carreadores farmaceuticamente aceitáveis usados em preparações parenterais incluem veículos aquosos, veículos não aquosos, agentes antimicrobianos, agentes isotônicos, tampões, antioxidantes, anestésicos locais, agentes de suspensão e dispersão, agentes emulsificantes, agentes sequestrantes ou quelantes e outras substâncias farmaceuticamente aceitáveis.

[0197] Os exemplos de veículos aquosos incluem Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringer, Injeção de Dextrose Isotônica, Injeção de Água Estéril, Injeção de Dextrose e Ringer Lactado. Os veículos parenterais não aquosos incluem óleos fixos de origem vegetal, óleo de algodão, óleo de milho, óleo de gergelim e óleo de amendoim. Agentes antimicrobianos em concentrações bacteriostáticas ou fungistáticas devem ser adicionados às preparações parenterais acondicionadas em recipientes de dose múltipla que incluem fenóis ou cresóis, mercuriais, álcool benzílico, clorobutanol, ésteres do ácido metil e propil hidroxibenzóico, timerosal, cloreto de benzalcônio e cloreto de benzetônio. Agentes isotônicos incluem cloreto de sódio e dextrose. Tampões incluem fosfato e citrato. Antioxidantes incluem bissulfato de sódio. Os anestésicos locais incluem cloridreto de procaína. Os agentes de suspensão e dispersão incluem carboximetilcelulose sódica, hidroxipropil metilcelulose e polivinilpirrolidona. Os agentes de emulsificação incluem Polissorbato 80 (TWEEN® 80). Uma agente sequestrante ou quelante de íons metálicos incluem EDTA. Os carreadores farmacêuticos também incluem álcool etílico, polietileno glicol e propileno glicol para veículos miscíveis em água e hidróxido de sódio, ácido clorídrico, ácido cítrico ou ácido láctico para o ajuste de pH.

[0198] A concentração do composto farmaceuticamente ativo é ajustado de modo que uma injeção fornece uma quantidade eficaz para produzir o efeito farmacológico desejado. A dose exata depende da idade, peso e condição do paciente ou animal como é conhecido na técnica.

[0199] As preparações parenterais de dose unitária são acondicionadas em uma ampola, um frasco ou uma seringa com uma agulha. Todas as preparações para a administração parenteral devem ser estéreis, como é conhecido e praticado na técnica.

[0200] Ilustrativamente, a infusão intravenosa ou intraarterial de uma solução aquosa estéril contendo um composto ativo é um modo eficaz de administração. Uma outra forma de realização é uma solução ou suspensão aquosa ou oleosa estéril contendo um material ativo injetado como necessário para produzir o efeito farmacológico desejado.

[0201] Os injetáveis são planejados para a administração local e sistêmica. Tipicamente uma dosagem terapeuticamente eficaz é formulada para conter uma concentração de pelo menos cerca de 0,1 % p/p até cerca de 90 % p/p ou mais, tal como mais do que 1 % p/p do composto ativo ao(s) tecido(s) tratado(s). O ingrediente ativo pode ser administrado de uma vez, ou pode ser dividido em várias doses menores a serem administrados em intervalos de tempo. É entendido que a dosagem precisa e duração de tratamento é uma função do tecido que é tratado e podem ser determinadas empiricamente usando protocolos de teste conhecidos ou pela extrapolação de dados de teste IN VIVO ou IN VITRO. Deve ser mencionado que concentrações e valores de dosagem também podem variar com a idade do indivíduo tratado. Deve ser entendido ainda que para qualquer paciente particular, os regimes de dosagem específicos devem ser ajustados com o tempo de acordo com a necessidade individual e o julgamento profissional da pessoa que administra ou supervisiona a administração das formulações, e que as faixas de concentração aqui apresentadas são apenas exemplares e não são intencionadas a limitar o escopo ou prática das formulações reivindicadas.

[0202] O composto pode ser colocado em suspensão na forma micronizada ou outra adequada ou pode ser derivado para produzir um produto ativo mais solúvel ou para produzir um pró-medicamento. A forma da mistura resultante depende de vários fatores, incluindo o modo pretendido de administração e a solubilidade do composto no carreador ou veículo selecionado. A concentração eficaz é suficiente para melhorar os sintomas da condição e pode ser empiricamente determinada. Pós liofilizados

[0203] De interesse aqui são também os pós liofilizados, que podem ser reconstituídos para a administração como soluções, emulsões e outras misturas. Estes também podem ser reconstituídos e formulados como sólidos ou géis.

[0204] O pó estéril, liofilizado é preparado pela dissolução de um composto aqui fornecido, ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em um solvente adequado. Os solventes podem conter um excipiente que melhore a estabilidade ou outro componente farmacológico do pó ou solução reconstituída, preparado a partir do pó. Os excipientes que podem ser usados incluem, mas não são limitados a, dextrose, sorbitol, frutose, xarope de milho, xilitol, glicerina, glicose, sacarose ou outro agente adequado. Os solventes também podem conter um tampão, tal como citrato, fosfato de sódio ou potássio ou outro tal tampão conhecido por aqueles de habilidade na técnica, em uma forma de realização, em torno do pH neutro. A filtração estéril subsequente da solução seguida pela liofilização sob condições padrão conhecidas por aqueles de habilidade na técnica fornece a formulação desejada. No geral, a solução resultante será distribuída em frascos para a liofilização. Cada frasco conterá uma dosagem única (isto é, de 10 a 1000 mg ou 100 a 500 mg) ou dosagens múltiplas do composto. O pó liofilizado pode ser armazenado sob condições apropriadas, tais como a cerca de 4°C até a temperatura ambiente.

[0205] A reconstituição deste pó liofilizado com água para injeção fornece uma formulação para o uso na administração parenteral. Para a reconstituição, cerca de 1 a 50 mg, cerca de 5 a 35 mg, ou cerca de 9 a 30 mg de pó liofilizado, são adicionados por ml de água estéril ou outro carreador adequado. A quantidade precisa depende do composto selecionado. Tal quantidade pode ser empiricamente determinada. Administração Tópica

[0206] As misturas tópicas são preparadas como descrito para a administração local e sistêmica. A mistura resultante pode ser uma solução, suspensão, emulsões ou semelhantes e são formulados como cremes, géis, unguentos, emulsões, soluções, elixires, loções, suspensões, tinturas, pastas, espumas, aerossóis, irrigações, pulverizações, supositórios, bandagens, emplastros dérmicos ou quaisquer outras formulações adequadas para a administração tópica.

[0207] Os compostos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis destes podem ser formulados como aerossóis para a aplicação tópica, tal como pela inalação (ver, por exemplo, as Patentes U.S. 4.044.126, 4.414.209 e 4.364.923 que descrevem aerossóis para a liberação de um esteróide útil para o tratamento de doenças inflamatórias, particularmente asma). Estas formulações para a administração ao trato respiratório podem estar na forma de um aerossol ou solução para um nebulizador, ou como um pó microfino para insuflação, sozinho ou em combinação com um carreador inerte tal como lactose. Em um tal caso, as partículas da formulação terão diâmetros de menos do que 50 mícrons ou menos do que 10 mícrons.

[0208] Os compostos podem ser formulados para a aplicação local ou tópica, tal como para a aplicação tópica à pele e membranas mucósicas, tal como nos olhos, na forma de géis, cremes, e loções e para a aplicação aos olhos ou para a aplicação intracisternal ou intraespinhal. A administração tópica é considerada para a liberação transdérmica e também para a administração aos olhos ou mucosa, ou para terapias de inalação. As soluções nasais do composto ativo sozinhas ou em combinação com outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis também podem ser administradas.

[0209] Estas soluções, particularmente aquelas intencionadas para o uso oftálmico, podem ser formuladas como soluções isotônicas de 0,01 % a 10 %, pH de cerca de 5 a 7, com sais apropriados. Composições para outras vias de administração

[0210] Outras vias de administração, tais como aplicação tópica, emplastros transdérmicos, e administração retal também são aqui consideradas.

[0211] Por exemplo, as formas de dosagem farmacêutica para a administração retal são supositórios retais, cápsulas e tabletes para efeito sistêmico. Os supositórios retais são aqui usados significam corpos sólidos para a inserção no reto que fundem ou amolecem na temperatura corporal liberando um ou mais ingredientes farmacológica ou terapeuticamente ativos. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis utilizadas em supositórios retais são bases ou veículos e agentes para elevar o ponto de fusão. Os exemplos de bases incluem manteiga de cacau (óleo de teobroma), glicerina, gelatina, carbocera (polioxietileno glicol) e misturas apropriadas de mono, di e triglicerídeos de ácidos graxos. As combinações das várias bases podem ser usadas. Agentes para elevar o ponto de fusão de supositórios incluem espermacete e cera. Os supositórios retais podem ser preparados pelo método comprimido ou pela moldagem. Um peso exemplar de um supositório retal é de cerca de 2 a 3 g.

[0212] Tabletes e cápsulas para a administração retal são fabricados usando a mesma substância farmaceuticamente aceitável e pelos mesmos métodos como para as formulações para a administração oral. Composições de Liberação Prolongada

[0213] Os ingredientes ativos aqui fornecidos podem ser administrados pelos meios de liberação controlada ou pelos dispositivos de liberação que são bem conhecidos por aqueles de habilidade comum na técnica. Os exemplos incluem, mas não são limitados àqueles descritos nas Patentes U.S.: 3.845.770, 3.916.899, 3.536.809, 3.598.123, e 4.008.719, 5.674.533, 5.059.595, 5.591.767, 5.120.548, 5.073.543, 5.639.476, 5.354.556, 5.639.480, 5.733.566, 5.739.108, 5.891.474, 5.922.356, 5.972.891, 5.980.945, 5.993.855, 6.045.830, 6.087.324, 6.113.943, 6.197.350, 6.248.363, 6.264.970, 6.267.981, 6.376.461, 6.419.961, 6.589.548, 6.613.358, 6.699.500 e 6.740.634, cada uma das quais é aqui incorporada por referência. Tais formas de dosagem podem ser usadas para fornecer liberação lenta ou controlada de um ou mais ingredientes ativos usando, por exemplo, hidropropilmetil celulose, outras matrizes poliméricas, géis, membranas permeáveis, sistemas osmóticos, revestimentos de camada múltipla, micropartículas, lipossomas, microesferas, ou uma combinação destes para fornecer o perfil de liberação desejado em proporções variáveis. As formulações de liberação controlada adequadas conhecidas por aqueles de habilidade comum na técnica, incluindo aquelas aqui descritas, podem ser facilmente selecionadas para o uso com os ingrediente ativos aqui fornecidos.

[0214] Todos os produtos farmacêuticos de liberação controlada têm uma meta comum de melhorar a terapia medicamentosa em relação àquela alcançada pelas suas contra partes não controladas. Em uma forma de realização, o uso de uma preparação de liberação controlada otimamente planejada em tratamento médico é caracterizada por um mínimo de substância medicamentosa que é utilizada para curar ou controlar a condição em uma quantidade mínima de tempo. Em certas formas de realização, as vantagens de formulações de liberação controlada incluem atividade prolongada do medicamento, frequência de dosagem reduzida, e aceitação do paciente aumentada. Além disso, as formulações de liberação controlada podem ser usadas para afetar o tempo de início de ação ou outras características, tais como níveis sanguíneos do medicamento, e podem assim afetar a ocorrência de efeitos colaterais (por exemplo, adversos).

[0215] A maior parte das formulações de liberação controlada são planejadas para liberar inicialmente uma quantidade de medicamento (ingrediente ativo) que prontamente produza o efeito terapêutico desejado, e a liberação gradual e continuamente de outras quantidades de medicamento para manter este nível de efeito terapêutico ou profilático em um período prolongado de tempo. DE modo a manter este nível constante de medicamento no corpo, o medicamento deve ser liberado da forma de dosagem a uma razão que substituirá a quantidade de medicamento que é metabolizada e excretada do corpo. A liberação controlada de um ingrediente ativo pode ser estimulada pelas várias condições incluindo, mas não limitados a, pH, temperatura, enzimas, água, ou outras condições fisiológicas ou compostos.

[0216] Em certas formas de realização, o agente pode ser administrado usando infusão intravenosa, uma bomba osmótica implantável, um emplastros transdérmico, lipossomas, ou outros modos de administração. Em uma forma de realização, uma bomba pode ser usada (ver, Sefton, CRC Crit. Ref Biomed. Eng. 14:201 (1987); Buchwald ET AL., Surgery 88: 507 (1980); Saudek ET AL., N. Engl. J. Med. 321: 574 (1989). Em uma outra forma de realização, materiais poliméricos podem ser usados. Já em outra forma de realização, um sistema de liberação controlada pode ser colocado em proximidade do alvo terapêutico, isto é, requerendo assim apenas uma fração da dose sistêmica (ver, por exemplo, Goodson, Medical Applications of Controlled Release, vol. 2, pp. 115-138 (1984).

[0217] Em algumas formas de realização, um dispositivo de liberação controlada é introduzido em um paciente em proximidade do sítio de ativação imune inadequada ou um tumor. Outros sistemas de liberação controlada são debatidos na revisão por Langer (Science 249: 15271533 (1990). O ingrediente ativo pode ser disperso em uma matriz interna sólida, por exemplo, metacrilato de polimetila, metacrilato de polibutila, cloreto de polivinila plastificado ou não plastificado, náilon plastificado, tereftalato de polietileno plastificado, borracha natural, poliisopreno, poliisobutileno, polibutadieno, polietileno, copolímeros de etileno-acetato de vinila, borrachas de silicona, polidimetilsiloxanos, copolímeros de carbonato de silicona, polímeros hidrofílicos tais como hidrogéis de ésteres de ácido acrílico e metacrílico, colágeno, álcool polivinílico reticulado e acetato de polivinila reticulado parcialmente hidrolisado, que é circundado por uma membrana polimérica externa, por exemplo, polietileno, polipropileno, copolímeros de etileno/propileno, copolímeros de etileno/acrilato de etila, copolímeros de etileno/acetato de vinila, borrachas de silicona, polidimetil siloxanos, borracha de neopreno, polietileno clorado, cloreto de polivinila, copolímeros de cloreto de vinila com acetato de vinila, cloreto de vinilideno, etileno e propileno, ionômero de tereftalato de polietileno, borracha butílica, borrachas de epicloroidrina, copolímero de etileno/álcool vinílico, terpolímero de etileno/ acetato de vinila/álcool vinílico, e copolímero de etileno/viniloxietanol, que são insolúveis em fluidos corporais. O ingrediente ativo depois difunde através da membrana polimérica externa em uma etapa de controlar a taxa de liberação. A porcentagem de ingrediente ativo contida em tais composições parenterais é altamente dependente da sua natureza específica, assim como as necessidades do paciente. Formulações Alvejadas

[0218] Os compostos aqui fornecidos, ou derivados farmaceuticamente aceitáveis destes, também podem ser formulados para serem alvejados a um tecido, receptor, ou outra área particulares do corpo do paciente a ser tratado. Muitos de tais métodos de alvejamento são bem conhecidos por aqueles de habilidade na técnica. Todos de tais métodos de alvejamento são aqui considerados para o uso nas presentes composições. Para exemplos não limitantes de métodos de alvejamento, ver, por exemplo, as Patentes U.S. 6.316.652, 6.274.552, 6.271.359, 6.253.872, 6.139.865, 6.131.570, 6.120.751, 6.071.495, 6.060.082, 6.048.736, 6.039.975, 6.004.534, 5.985.307, 5.972.366, 5.900.252, 5.840.674, 5.759.542 e 5.709.874.

[0219] Em uma forma de realização, as suspensões lipossômicas, incluindo lipossomas alvejado a tecido, tais como lipossomas alvejados a tumor, também podem ser adequados como carreadores farmaceuticamente aceitáveis. Estes podem ser preparados de acordo com métodos conhecidos por aqueles habilitados na técnica. Por exemplo, as formulações de lipossoma podem ser preparadas como descrito na Patente U.S. 4.522.811. Em resumo, lipossomas tais como vesículas multilamelares (MLV’s) podem ser formados pela secagem de fosfatidil colina do ovo e fosfatidil serina cerebral (razão molar 7:3) no lado de dentro de um frasco. Uma solução de um composto aqui fornecido em solução salina tamponada com fosfato que carece de cátions divalentes (PBS) é adicionado e o frasco agitado até que a película de lipídeo é dispersa. As vesículas resultante são lavadas para remover composto não encapsulado, pelota pela centrifugação, e depois recolocada em suspensão em PBS. Artigos de fabricar

[0220] Os compostos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis podem ser acondicionados como artigos de fabricação contendo o material de acondicionamento, um composto ou derivado deste farmaceuticamente aceitável aqui fornecidos, que é usado para o tratamento, prevenção ou melhora de um ou mais sintomas associados com a atividade de quinase, incluindo, mas não limitados a, atividade de GSK-3, e um rótulo que indica que o composto ou derivado deste farmaceuticamente aceitável é usado para o tratamento, prevenção ou melhora de um ou mais sintomas mediados pela quinase, incluindo, mas não limitados a, doenças mediadas por GSK-3.

[0221] Os artigos de fabricação aqui fornecidos contêm material de acondicionamento. Os materiais de acondicionamento para o uso em produtos farmacêuticos acondicionados são bem conhecidos por aqueles de habilidade na técnica. Ver, por exemplo, as Patentes U.S. 5.323.907, 5.052.558 e 5.033.252. Os exemplos de material farmacêutico acondicionado incluem, mas não são limitados a, embalagens bolha, garrafas, tubos, inaladores, bombas, sacos, frascos, recipientes, seringas, garrafas, e qualquer material de acondicionamento adequado para uma formulação selecionada e modo intencionado de administração e tratamento. Uma ampla série de formulações dos compostos e composições aqui fornecidas são consideradas. E. Métodos de Tratamento

[0222] Métodos de uso dos compostos e composições também são fornecidos. Os métodos envolvem usos tanto IN VITRO quanto IN VIVO dos compostos e composições.

[0223] Em certas formas de realização, são aqui fornecidos métodos para inibir a ação de GSK-3 pela administração dos compostos e composições aqui fornecidas. Em uma forma de realização, os métodos envolvem contatar GSK-3 com um composto aqui fornecido. F. Avaliação da Atividade do Composto

[0224] A atividade inibidora de GSK3 dos compostos aqui fornecidos podem ser facilmente detectados usando os ensaios aqui descritos, assim como ensaios no geral conhecidos por aqueles de habilidade comum na técnica.

[0225] Os métodos exemplares para identificar inibidores específicos de GSK3 incluem tanto ensaios de GSK3 quinase isentos de célula e com base em célula. Um ensaio de GSK3 quinase isento de célula detecta inibidores que atuam pela interação direta com o polipeptídeo GSK3, enquanto que um ensaio de GSK3 quinase com base em célula pode identificar inibidores que funcionam pela interação direta com o próprio GSK3, ou pela interferência com a expressão de GSK3 ou com o processamento pós-traducional requerido para produzir GSK3 ativo maduro. O Pedido U.S. No 20050054663 descreve exemplar isento de célula e ensaios de GSK3 quinase com base em célula. Os ensaios exemplares aqui usados são ligeiramente debatidos abaixo: 10 a 25 ng de GSK3β humano de tamanho natural recombinante (Upstate) é incubado na presença ou ausência de composto em concentrações variáveis por 1 hora a 30 graus Celsius em 20 mM de MOPS, pH 7,0, 10 mM de acetato de magnésio, 0,2 mM de EDTA, 2 mM de EGTA, 30 mM de cloreto de magnésio, 62,5 μM de fosfo-glicogênio sintase peptídeo-2, 5 μM de ATP, 10 mM de fosfato de β-glicerol, 1 mM de ortovanadato de sódio e 1 mM de ditiotreitol. Processado para a reação de luciferase KinaseGlo.

[0226] A seguir da conclusão da reação de quinase um volume igual de reagente de luciferase KinaseGlo (Promega) é adicionado e a luminescência lida usando uma leitora de placa de luminescência dentro de 5 a 10 minutos. A atividade de composto é expressa como % de inibição relativa à inibição máxima observada na dose máxima e os valores IC50 depois calculados usando o software de ajuste de curva (GraphPad Prizm). EXEMPLOS

[0227] Exemplo 1: Ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’- [2-(2-piridilamino)-etilamino]espiro [ciclopentano-1,3’(2’H)- [7H]pirido[1,2,3-de][1,4]-benzoxazina]-6’-carboxílico 1A) Preparação de 3-[1-(hidroximetil)ciclopentilamino]-2-(2,3,4,5- tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0228] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluorofenil)-pentanoato de etila (3,17 g, 12 mmol), anidrido acético (3,34 ml, 3,6 g, 30 mmol) e ortoformiato de trietila (3,00 ml, 2,6 g, 18 mmol) foi aquecida a 130°C por 1,5 hora. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo por 3 horas. O produto bruto foi dissolvido em EtOH (15 ml) e esfriado até 0°C e depois 1-amino-1-ciclopentano-metanol (1,01 g, 8,8 mmol) foi adicionado muito lentamente. Depois de 1,5 hora, o solvente foi removido pela evaporação para produzir o composto do título como óleo amarelo (3,1 g bruto) que foi usado na etapa seguinte sem a purificação adicional.

[0229] 1B) Preparação de 9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[ciclo-pentano1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila.

[0230] A uma solução de acrilato de 3-[1- (hidroximetil)ciclo-pentilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil) (570 mg, 1,46 mmol) em THF (10 ml), as pelotas moídas de KOH (164 mg, 2,93 mmol) foram adicionadas sob esfriamento com gelo. Depois de 1,5 hora mais KOH foi adicionado (80 mg, 1,42 mmol) e a mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura de reação foi acidificada com HCl 0,5 N até o pH 2. O precipitado branco foi coletado pela filtração para dar o composto do título que foi usado bruto na etapa seguinte (454 mg, 1,3 mmol, 89 %).

[0231] 1C) Preparação de ácido 9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[ciclo-pentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico.

[0232] Uma solução de 9’,10’-difluoro-7’-oxoespiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]-benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (13,2 g, 38 mmol) em uma mistura de ácido acético/água/H2SO4 (8:6:1 v/v, 75 ml) foi aquecida sob refluxo por 2 horas. A mistura de reação foi vertida em água. Um precipitado formou-se e foi coletado pela filtração, lavado com água e depois secado para dar o composto do título (10,5 g, 32,7 mmol, 86 %) como um sólido amarelo claro.

[0233] 1D) Preparação de ácido 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’- oxo espiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6- carboxílico.

[0234] Uma solução do ácido 9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[ciclo-pentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico (1,8 g, 5,6 mmol) em H2SO4 concentrado (10 ml) foi tratada às porções a 0°C com KNO3 sólido (736 mg, 7,29 mmol). Depois de agitar a 0°C por 1 hora, a mistura de reação foi vertida em 500 ml de água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração e lavado com água gelada. O sólido resultante foi secado para produzir o composto do título como um sólido amarelo claro (1,8 g, 88 %).

[0235] 1E) Preparação de ácido 8’-amino-9’,10’-difluoro- 7’-oxo-espiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]- benzoxazina]-6’-carboxílico.

[0236] Uma solução de ácido 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’- oxo-espiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico (3,9 g, 0,01 mmol) em etanol/ácido acético (1:1, v/v, 100 ml) foi hidrogenada sob pressão atmosférica em 10 % de Pd/C (390 mg) a 80°C por 18 horas. Depois 200 ml de DMF foram adicionados e a mistura de reação foi aquecida até que se tornasse clara. O catalisador foi removido pela filtração em celite, que foi lavado duas vezes com DMF quente e os filtrados combinados foram concentrado a vácuo até a secura para produzir o composto do título (2,85 g, 73 %) que foi usado bruto na etapa seguinte.

[0237] 1F) Preparação de ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo- 10’-[2- (2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido- [1,2,3-de][1,4] benzoxazina]-6’-carboxílico.

[0238] Uma solução de ácido 8’-amino-9’10’-difluoro-7’- oxo-espiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico (500 mg, 1,37 mmol) e N-(2-piridil)-1,2-etanodiamina ( 226 mg, 1,64 mmol) e 19 μl trietilamina em DMSO (5 ml) foi agitada a 90°C por 24 horas. A mistura de reação foi vertida em água e o precipitado que se formou foi coletado pela filtração. O produto bruto foi passado através de uma coluna de gel de sílica (CH2Cl2/CH3OH 10:1 v/v) e depois recristalizado a partir do éter dietílico para produzir o composto do título (284 mg, 42 %) como um sólido amarelo. MS (EP) m/z: 454 (M+ + 1). (Calculado para C23H24FN5O4, 453,18).

[0239] Exemplo 2: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(4- metilquinolin-2-ilamino)-etilamino)-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0240] Uma solução de ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo- 2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico (13 mg, 0,04 mmol) e N1-(4-metilquinolin-2-il)etano-1,2-diamina (10 mg, 0,05 mmol) e 11 μl trietilamina em DMSO (0,3 ml) foi agitada a 90°C por 72 horas. A mistura de reação foi esfriada e secada por congelamento durante a noite. O produto bruto foi recolhido em CH2Cl2 e purificado pela TLC preparativa para produzir ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2- (4-metilquinolin-2-ilamino)etilamino)-7-oxo-2,7-diidro- espiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico (0,8 mg, 4 %) como um sólido amarelo. MS (EP) m/z: 518 (M+ + 1). (Calculado para C28H28FN5O4, 517,21).

[0241] Exemplo 3: ácido 10-(3-(1H-1,2,4-triazol-1- il)propilamino)-8-amino-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina -3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0242] Uma solução de ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo- 2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico (13 mg, 0,04 mmol) e 3-(1H-1,2,4-triazol-1-il)propan-1-amina (5 mg, 0,04 mmol) e 5,5 μl de trietilamina em DMSO (0,3 ml) foi agitada a 90°C por 24 horas. A mistura de reação foi esfriada e secada por congelamento durante a noite. O produto bruto foi recolhido em ACN e preparado pela HPLC preparativa para produzir ácido 10-(3-(1H-1,2,4-triazol- 1-il)propilamino)-8-amino-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro- [[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico (3,2 mg, 18 %) como um sólido amarelo. MS (EP) m/z: 443 (M+ + 1). (Calculado para C21H23FN6O4, 442,18).

[0243] Exemplo 4: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(4- fluorofenil)-propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0244] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(4- fluorofenil)propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado partir ácido de 8- amino-9,10-di-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclo-pentano-]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similar àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 470 (M+ + 1). (Calculado para C25H25F2N3O4,469,18).

[0245] Exemplo 5: ácido 8-amino-10-(3-(3,4- diidroquinolin-1(2H)-il)-propilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’- ciclopentano]-6- carboxílico.

[0246] Ácido 8-amino-10-(3-(3,4-diidroquinolin-1(2H)- il)propil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro-[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 507 (M+ + 1). (Calculado para C28H31FN4O4, 506,23). Exemplo 6: ácido 8-amino-10-(4-(4-clorofenil)butan-2-il-amino)-9-fluoro-7- oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]6- carboxílico.

[0247] Ácido 8-amino-10-(4-(4-clorofenil)butan-2- ilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclo-pentano-]-6-carboxílico foi preparado a partir ácido do 8-amino- 9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similar àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 500 (M+ + 1). (Calculado para C26H27ClFN304, 499,17). Exemplo 7: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(furano-2-carboxamido)- propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico.

[0248] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(furano-2- carboxamido)-propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’ -ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 485 (M+ + 1). (Calculado para C24H25FN4O6,484,18).

[0249] Exemplo 8: ácido 8-amino-10-(3- (adamantanocarboxamido)- propilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino-[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano-]-6- carboxílico.

[0250] Ácido 8-amino-10-(3- (adamantanocarboxamido)propil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino -9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 553 (M+ + 1). (Calculado para C30H37FN4O5,552,27).

[0251] Exemplo 9: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(4- fluorofenóxi)-etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0252] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(4- fluorofenóxi)etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 472 (M+ + 1). (Calculado para C24H23F2N3O5, 471,16).

[0253] Exemplo 10: ácido 8-amino-10-(2-(4-cloro-3- metilfenóxi)-etilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]- 6-carboxílico.

[0254] Ácido 8-amino-10-(2-(4-cloro-3- metilfenóxi)etilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano-]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 502 (M+ + 1). (Calculado para C25H25ClFN3O5, 501,15).

[0255] Exemplo 11: Ácido 10-(2-(1H-indo1-3- iltio)etilamino)-8-amino-9-fluoro7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0256] Ácido 10-(2-(1H-indo1-3-iltio)etilamino)-8-amino- 9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclo- pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro- 7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 509 (M+ + 1). (Calculado para C26H25FN4O4S, 508,16).

[0257] Exemplo 12: ácido 8-amino-10-(2-(4- clorofenóxi)etil-amino)-9-fluoro7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0258] Ácido 8-amino-10-(2-(4-clorofenóxi)etilamino)-9- fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10- difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 487,9 (M+ + 1). (Calculado para C24H23ClFN3O5, 487,13).

[0259] Exemplo 13: ácido 8-amino-10-(2-(2,4- diclorofenóxi)etil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0260] Ácido 8-amino-10-(2-(2,4-diclorofenóxi)etilamino)- 9-fluoro -7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclo- pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro- 7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 521,9 (M+ + 1). (Calculado para C24H22Cl2FN3O5, 521,09).

[0261] Exemplo 14: ácido 8-amino-10-(3-(3,4- dimetoxifenil)propil-amino)-9-fluoro-oxo-2,7-diidroespiro[2,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0262] Ácido 8-amino-10-(3-(3,4- dimetoxifenil)propilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 512 (M+ + 1). (Calculado para C27H30FN3O6, 511,21).

[0263] Exemplo 15: ácido 8-amino-10-(2-(2,6- dimetilquinolin-4-ilamino)-etilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0264] Ácido 8-amino-10-(2-(2,6-dimetilquinolin-4- ilamino)etil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 532 (M+ + 1). (Calculado para C29H30FN5O4,531,23).

[0265] Exemplo 16: Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(3- metil-1H-1,2,4-triazol-5-iltio)etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino- [2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0266] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(3-metil-1H-1,2,4- triazol-5-iltio)etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 474,9 (M+ + 1). (Calculado para C21H23FN6O4S, 474,15).

[0267] Exemplo 17: ácido 8-amino-10-(2-(4- cicloexilfenóxi)etil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino- [2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0268] Ácido 8-amino-10-(2-(4-cicloexilfenóxi)etilamino)- 9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclo- pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro- 7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 536 (M+ + 1). (Calculado para C30H34FN3O5, 535,25).

[0269] Exemplo 18: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(1- metil-1H-imidazol-2-iltio)-etilamino)-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0270] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(1-metil-1H- imidazol-2-iltio) -etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 474 (M+ + 1). (Calculado para C22H24FN5O4S, 473,15).

[0271] Exemplo 19: ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(2- (piperidin -1-ilsulfonil)-etilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0272] Ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(2-(piperidin-1- ilsulfonil) -etilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10- difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 509 (M+ + 1). (Calculado para C23H29FN4O6S, 508,18).

[0273] Exemplo 20: ácido 8-amino-10-(2-(1,1-dioxo-1H- 1X-6-benzo[d]isotiazol-3-ilamino)etilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro- [[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0274] Ácido 8-amino-10—(2-(1,1-dioxo-1H-1X-6- benzo[d]iso-tiazol-3-ilamino)etilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro- [[1,4]-oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]-oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 541,9 (M+ + 1). (Calculado para C25H24FN5O6S, 541,14).

[0275] Exemplo 21: ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(2- (1-fenil-1H-tetrazol-5-iltio)etilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0276] Ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(2-(1-fenil-1H- tetrazol-5-iltio)etilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino- 9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 538 (M+ + 1). (Calculado para C25H24FN7O4S, 537,16).

[0277] Exemplo 22: Ácido 10-(3-(1H-benzo[d]imidazol-1- il)-2- hidroxipropilamino)-8-amino-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]- oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0278] Ácido 10-(3-(1H-benzo[d]imidazol-1-il)-2- hidroxipropil-amino)-8-amino-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro- [[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 508,0 (M+ + 1). (Calculado para C26H26FN5O5, 507,19).

[0279] Exemplo 23: Ácido 8-amino-10-(3- (etil(fenil)amino)propil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0280] Ácido 8-amino-10-(3- (etil(fenil)amino)propilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 495 (M+ + 1). (Calculado para C27H31FN4O4, 494,23). Exemplo 24: Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(indolin-1-il)-etilamino)-7-oxo- 2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-.

[0281] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(indolin-1- il)etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10- difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 479 (M+ + 1). (Calculado para C26H27FN4O4,478,20).

[0282] Exemplo 25: ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(2- (p-tolilóxi)etilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-3,1’-ciclo- pentano]-6-carboxílico.

[0283] Ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(2-(p- tolilóxi)etilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10- difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 468 (M+ + 1). (Calculado para C25H26FN3O5,467,19).

[0284] Exemplo 26: Ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(3- (piridin-2-il)propilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopentano]-6‘-carboxílico.

[0285] Ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(3-(piridin-2- il)propil-amino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclo- pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro- 7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 453 (M+ + 1). (Calculado para C24H25FN4O4, 452,19).

[0286] Exemplo 27: Ácido 8-amino-10-(3-(2- clorofenil)propil-amino)-9-fluoro7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0287] Ácido 8-amino-10-(3-(2-clorofenil)propilamino)-9- fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10- difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 486 (M+ + 1). (Calculado para C25H25ClFN3O4, 485,15).

[0288] Exemplo 28: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(4- metoxifenil)-propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’ -ciclopentano]-6-carboxílico.

[0289] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(4- metoxifenil)propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 482 (M+ + 1). (Calculado para C26H28FN3O5,481,20).

[0290] Exemplo 29: Ácido 8-amino-10-(3-(3,4- dietoxifenil)propil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino- [2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0291] Ácido 8-amino-10-(3-(3,4- dietoxifenil)propilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 540 (M+ + 1). (Calculado para C29H34FN3O6,539,24).

[0292] Exemplo 30: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(2- metilquinolin -4-ilamino)-etilamino)-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0293] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(2-metilquinolin-4- ilamino)-etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina- 3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino- 9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 518 (M+ + 1). (Calculado para C28H28FN5O4,517,21).

[0294] Exemplo 31: ácido 8-amino-10-(4-(2- clorofenil)butan-2-il-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0295] Ácido 8-amino-10-(4-(2-clorofenil)butan-2- ilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino- 9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 500 (M+ + 1). (Calculado para C26H27ClFN3O4, 499,17).

[0296] Exemplo 32: ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(3- (1,3,5-tri-meti1-1H-pirazol-4-il)propilamino)-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0297] Ácido 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(3-(1,3,5- trimeti1-1H-pirazol-4-il)propilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8- amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 484 (M+ + 1). (Calculado para C25H30FN5O4,483,23).

[0298] Exemplo 33: Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(3- metoxifenil)-propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico.

[0299] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(3- metoxifenil)propilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 482 (M+ + 1). (Calculado para C26H28FN3O5, 481,20).

[0300] Exemplo 34: Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(4- metóxi-fenóxi)etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[2,4]oxazino[2,3,4-ij]il- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0301] Ácido 8-amino-9-fluoro-10-(2-(4- metoxifenóxi)etilamino)-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclo-pentano]-6-carboxílico foi preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. MS (EP) m/z: 484 (M+ + 1). (Calculado para C25H26FN3O6,483,18). Exemplo 35:

[0302] Cloridreto de 8-amino-9-fluoro-10-(3-(piridin-2- il)propil-amino)-6-1H-tetrazol-5-il-espiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopentan]-7(2H)-ona

[0303] 35A) Preparação de 9,10-difluoro-8-nitro-7-oxo- 2,7-diidro-espiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxamida.

[0304] Ácido 9,10-difluoro-8-nitro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]-oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico (3g, 8,2 mmol) foi colocado em suspensão em SOCl2 (25 ml) e refluxado por 3 horas até que uma solução fosse obtida. Na conclusão da reação, SOCl2 foi removido sob vácuo. O sólido remanescente foi diluído com dioxano e esfriado em banho de gelo. Uma solução do NH4OH concentrado foi adicionada cuidadosamente sob agitação vigorosa. Um precipitado formou-se que foi coletado pela filtração e lavado com água. O sólido foi secado sob vácuo para dar 2,2 g (75 % de rendimento) do composto do título. Este composto foi usado na etapa seguinte sem a purificação adicional

[0305] 35B) Preparação de 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo- 2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxamida.

[0306] A uma suspensão de 9,10-difluoro-8-nitro-7-oxo- 2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxamida(1g, 2,7 mmol) em uma mistura de água/metanol (1:1 v/v, 30 ml) foi adicionado hidrossulfito de sólido (Na2S2O4, 3,75 g, 22 mmol). A suspensão foi refluxado por 5 horas até que todo o material de partida tivesse desaparecido. Na conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e 50 ml de água foram adicionados. Depois de 20 minutos, um sólido amarelo claro foi coletado pela filtração e lavado com água. O sólido foi secado sob vácuo para dar 660 mg (73 % de rendimento) do composto que foi usado sem a purificação adicional na etapa seguinte.

[0307] 35C) Preparação de 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo- 2,7-diidroespiro[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carbonitrila.

[0308] A uma solução fria de 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo- 2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxamida (1 g, 2,9 mmol) e trietilamina (2 ml, 10 mmol.) em DCM (20 ml) foi adicionado POCI3 (780 μl, 8,7 mmol.) às gotas e agitada a 0°C por um adicional de 5 horas. Uma mistura de cor escura formou-se. Na conclusão da reação, DCM foi removido sob vácuo e o resíduo foi lavado várias vezes com água. O sólido foi secado sob vácuo para dar 540 mg (58,7 % de rendimento) do composto do título. Este produto não é muito solúvel exceto em DMF ou DMSO e é usado na etapa seguinte sem a purificação adicional.

[0309] 35D) Preparação de 8-amino-9,10-difluoro-6-(1H- tetrazol-5-il)espiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentan] -7(2H)- ona.

[0310] A uma mistura de nitrila 8-amino-9,10-difluoro-7- oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carbonitrila (180 mg, 0,56 mmol) em isopropanol e água (1:1 v/v, 15 ml) foram adicionados 80 mg of azida de sódio (1,14 mmol) e 170 mg de cloreto zinco (1,14 mmol). A mistura foi aquecida a 110°C por 18 horas.

[0311] Os precipitados foram coletado pela filtração e lavados com água. O sólido foi secado sob vácuo para dar 135 mg (67 % de rendimento) do composto do título. Este composto foi usado sem a purificação adicional na etapa seguinte.

[0312] 35E) Preparação de cloridreto de 8-amino-9-fluoro- 10-(3-(piridin-2-il)-propilamino)-6-1H-tetrazol-5-il)espiro[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentan]-7(2H)-ona.

[0313] MS (EP) m/z: 477,5 (M + 1). (Calculado para C24H25FN8O2, 476,51).

[0314] Os compostos 36 a 42 serão preparados a partir de 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopentano]-6-carbonitrila ou ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-il]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima.

[0315] Exemplo 36: cloridreto de 8-amino-9-fluoro-7-oxo- 10-(3-(piridin-2-il)propilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano-l -6-carbonitrila.

MS (EP) m/z: 434,4 (M + 1). (Calculado para C24H24FN5O2, 433,48).

[0316] Exemplo 37: Preparação de cloridreto de 10-(3-(1H- imidazol-1-il)propilamino)-8-amino-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro- [[1,4]oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carbonitrila.

[0317] MS (EP) m/z: 423,4 (M + 1). (Calculado para C22H23FN6O2, 422,46).

[0318] Exemplo 38: cloridreto de 8-amino-9-fluoro-7-oxo- 10-(3-(1,3,5-trimetil-1Hpirazol-4-il)propilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]- oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano-]-6-carbonitrila.

[0319] MS (EP) m/z: 465,5 (M + 1). (Calculado para C25H29FN6O2, 464,54).

[0320] Exemplo 39: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(4- fluorofenil)-3-(4-metoxifenil)propilamino)-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0321] MS (EP) m/z: 576,6 (M + 1). (Calculado para C32H31F2N3O5, 575,6).

[0322] Exemplo 40: ácido 8-amino-10-(3-(4- clorofenil)propil-amino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0323] MS (EP) m/z: 486,9 (M + 1). (Calculado para C25H25ClFN3O4, 485,94).

[0324] Exemplo 41: ácido 8-amino-10-(3-(3,5-dimetil-1H- pirazol-1-il)propilamino)-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]-quinolina-3,1’- ciclopentano]-6-carboxílico.

[0325] MS (EP) m/z: 470,5 (M + 1). (Calculado para C24H28FN5O4, 469,51).

[0326] Exemplo 42: ácido 8-amino-9-fluoro-10-(3-(5- metil-1H-pirazol-4-il)propilamino)-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopentano]-6- carboxílico.

[0327] MS (EP) m/z: 456 (M + 1). (Calculado para C23H26FN504, 455,48).

[0328] Exemplo 43: 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[3-(1- imidazolil)propil]-espiro[ciclopentano-1,3’-(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de][1,4]benzoxazinal-6’-carboximidamida

[0329] 43A) Preparação de 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboximidamida.

[0330] A uma solução de 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidro-espiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carbonitrila (400 mg, 1,26 mmol) em 5 ml de etanol/dimetilformamida (50:50, v:v) foram adicionados hidróxido de amônio (260 mg, 3,78 mmol) e carbonato de potássio (521 mg, 3,78 mmol). A mistura de reação foi aquecida ao refluxo por 3 horas e depois esfriada até a temperatura ambiente. O material inorgânico não dissolvido foi separado por filtração e o filtrado foi concentrado sob vácuo para produzir um sólido material que foi recolocado em suspensão em metanol (50 ml), filtrado, lavado com metanol e secado sob vácuo para dar o composto do título como um sólido amarelo (200 mg, 45 % de rendimento). MS (EP) m/z: 351 (M + 1). (Calculado para C16F16F2N4O3, 350,12).

[0331] 43B) Preparação de 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’- [3-(1-imidazolil)-propil]espiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de][1,4]benzoxazina]-6’-carboximidamida.

[0332] O composto do título foi preparado a partir do 8’- amino-9’,10’-difluoro-7’-oxoespiro[ciclopentano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de][1,4]benzoxazina]-carboximidamida de acordo com os procedimentos acima. MS (EP) m/z: 426,4 (M + 1). (Calculado para C19H20FN9O2,425,42). Exemplo 44: ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[2-(piridin-2-ilamino)etil- amino]espiro[ciclobutano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de]-[1,4]benzoxazina]- 6’-carboxílico

[0333] 44A) Preparação de 3-[1- (hidroximetil)ciclobutilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0334] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluorofenil)-pentanoato de etila (2,00 g, 7,57 mmol), Ac2O (4,29 ml, 45,4 mmol) e ortoformiato de trietila (2,51 ml, 15,1 mmol) foi aquecida a 120°C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. O produto bruto foi dissolvido em tolueno (30 ml) e um suspensão de (1- aminociclobutil)metanol (1,04 g, 7,57 mmol) em tolueno (5 ml), trietilamina (1,06 ml, 7,57 mmol) foram adicionadas sob esfriamento com gelo. A mistura foi agitada por 18 horas na temperatura ambiente e concentrado a vácuo para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano: EtOAc 10 : 1 ^ 1 : 1) para produzir o composto do título (1,57 g, 55 %) como um sólido branco. 1H RMN (400 M Hz, CDC13) δ 0,95-1,11 (3H, m), 1,85-1,90 (1 H, m), 1,91-2,07 (2H, m), 2,17-2,26 (2H, m), 2,27-2,36 (2H, m), 3,80-3,83 (2H, m), 4,00-4,10 (2H, m), 6,95-7,13 (1 H, m), 8,17-8,22 (1 H, m), 9,87-11,36 (1 H, m). ESIMS (+): 376[M + H]+.

[0335] 44B) Preparação de 9’,10’-difluoro-7’-oxoespiro- [ciclobutano-1,3’(2H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxilato de etila.

[0336] Uma solução de 3-[1- (hidroximetil)ciclobutilamino]-2-(2,3,4,5- tetrafluorobenzoil]acrilato de etila (1,52 g, 4,05 mmol) in DMF (10 ml) foi adicionado a uma suspensão esfriada com gelo de NaH a 60 % em óleo (356 mg, 8,91 mmol) em DMF (10 ml), sob atmosfera de argônio. A mistura de reação foi agitada por 4 horas e vertida em água gelada. O produto foi extraído com AcOEt, secado em MgSO4 e o produto bruto foi purificado pela cromatografia de coluna (Hexano: EtOAc 2 : 1 AcOEt) para produzir o composto do título (604 mg, 44 %) como um sólido branco. Pf 255 a 256°C. 1H RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,29 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,91-2,07 (2H, m), 2,16-2,22 (2H, m), 2,65-2,76 (2H, m), 4,24 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,62 (2H, s), 7,62 (1 H, dd, J = 10,4, 7,9 Hz), 8,80 (1 H, s). ESIMS (+): 336[M + H]+.

[0337] 44C) Preparação de 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’- oxoespiroCiclobutano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila.

[0338] Uma solução de 9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[ciclobutano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (580 mg, 1,73 mmol) em H2SO4 concentrado (7 ml) foi tratado às porções a 0°C com KNO3 sólido (245 mg, 2,42 mmol). A mistura de reação foi agitada por 1 hora a 0°C e vertida em água gelada. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (600 mg, 91 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,30 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,93-2,09 (2H, m), 2,162,25 (2H, m), 2,73-2,80 (2H, m), 4,26 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,69 (2H, s), 8,87 (1H, s). ESIMS (+): 381 [M + H]+.

[0339] 44D) Preparação de 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro-[ciclobutano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila.

[0340] Uma solução de 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’- oxoespiro-[ciclobutano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (580 mg, 1,53 mmol) em DMF (30 ml) foi tratada com hidrogênio sob pressão atmosférica em 10 % de Pd/C (60 mg) a 50°C por 3 horas. O catalisador foi removido pela filtração com Celite e o filtrado foi vertido em água gelada. O precipitado resultante foi agitado por 1 hora e coletado pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (468 mg, 88 %) como um sólido amarelo claro. ‘H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,29 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,92-2,02 (2H, m), 2,10-2,19 (2H, m), 2,61-2,69 (2H, m), 4,23 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,39 (2H, s), 7,38 (2H, brs), 8,65 (1H, brs). ESIMS (+): 351 [M + H]+.

[0341] 44E) Preparação d ácido 8’-amino-9’,10’-difluoro- 7’-oxoespiro[ciclobutano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]- 6’-carboxílico.

[0342] Uma solução de 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro-[ciclobutano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (440 mg, 1,26 mmol) em uma mistura de AcOH-H2O- H2SO4 (2:1:0,3 v/v, 9,9 ml) foi aquecida a 100°C por 3 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada e agitada. Depois de 30 minutos, o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (384 mg, 94 %) como um sólido amarelo 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,94-2,03 (2H, m), 2,14-2,20 (2H, m), 2,69-2,77 (2H, m), 4,44 (2H, s), 7,32 (2H, brs), 8,91 (1H, s), 14,67 (1H, s). ESIMS (+): 323 [M + H]+.

[0343] 44F) Preparação de ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’- oxo-10’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,3’(2’H)- [7H]pirido-[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxílico.

[0344] Uma solução do ácido de 8’-amino-9’,10’-difluoro- 7’-oxo-espiro[ciclobutano-1,3’(2H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]- 6’-carboxílico (360 mg, 1,12 mmol), N-2-piridinil-1,2-etanodiamina (230 mg, 1,68 mmol) e trietilamina (0,234 ml, 1,68 mmol) em DMSO (5 ml) foi agitada por 3 horas a 100°C. A mistura de reação foi vertida em água gelada e agitada por 30 minutos. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água, colocado em suspensão em EtOH (10 ml) e agitado no refluxo por 1 hora. A suspensão foi esfriada até a temperatura ambiente e o precipitado resultante foi coletado pela filtração e secado para produzir o composto do título (459 mg, 93 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,91-2,03 (2H, m), 2,08-2,17 (2H, m), 2,61-2,69 (2H, m), 3,44-3,48 (2H, m), 3,58-3,66 (2H, m), 6,35-6,40 (1H, m), 6,45-6,49 (2H, m), 6,71 (1H, t, J = 5,5 Hz), 6,88 (2H, brs), 7,35 (1H, td, J = 6,7, 1,8 Hz), 7,97 (1H, dd, J = 4,9, 1,2 Hz), 8,71 (1H, s), 15,30 (1H, s). HRESIMS (+): 440,17267 (-0,74 mmu). Exemplo 45: Ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[2-(2-piridilamino)- etilamino)espiro[ciclobutano-1,2’(3‘H)-[7H]pirido[1,2,3-de] benzoxa- zepina]-6’carboxílico

[0345] 45A) Preparação de 3-[[1-(hidroximetil)ciclopentil]- metil-amino-2-(3,4,5,6-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0346] Uma solução de 3-oxo-3-(2,3,4,5-tetrafluorofenil)- pentanoato de etila (7,93 g, 30,0 mmol), Ac2O (17,0 ml, 180 mmol) e ortoformiato de trietila (10,0 ml, 60,1 mmol) foi aquecida a 120°C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. O produto bruto foi dissolvido em tolueno anidro (120 ml) e [1-(aminometil- ciclopropil]] metanol (3,04 g, 30,1 mmol) foi adicionado muito lentamente a 0°C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 3 horas e o solvente foi removido pela evaporação. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano : EtOAc 1:1) para produzir o composto do título (10,5 g, 94 %) como um sólido amarelo claro. 1H RMN (400 M Hz, CDC13) δ 0,50-0,70 (4H, m), 0,97, 1,10 (cada t, J = 7,3 Hz, total 3H), 1,66 (1H, t, J = 4,9 Hz), 3,47 (2H, d, J = 6,1 Hz), 3,56 (2H, d, J = 4,9 Hz), 4,01-4,09 (2H m), 6,96-7,13 (1H, m), 8,06-8,12 (1H, m), 9,71, 11,1 (cada br, total 1H). ESIMS (+): 375 [M + H].

[0347] 45B) Preparação de 10’,11’-difluoro-8’-oxoespiro- [ciclo-propano-1,3’(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila.

[0348] Uma solução de NaH (2,29 g, 57,3 mmol, 60 %; em óleo) em DMF (110 ml) foi esfriada até 0°C e tratado às gotas com 3-[[1- (hidroximetil)ciclopentil]metilamino2-(3,4,5,6-tetrafluorobenzoil) amino- acrilato de etila (9,76 g, 26,0 mmol) em DMF (15 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora e depois agitada por 85°C por 1 hora. A mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração e lavado com água. O sólido resultante foi dissolvido em 100 ml de EtOH-CH2Cl2 (2:1) e filtrado. O filtrado foi concentrado a 70 ml e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título (6,73 g, 77 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz CDCl3) δ 0,65 (2H, t, J = 6,1 Hz), 0,82 (2H, t, J = 6,1 Hz), 1,41 (3H, t, J = 7,3 Hz), 4,21 (2H, s), 4,35 (2H, s), 4,39 (2H, q, J = 7,3 Hz), 8,05 (1H, dd, J = 10,4, 8,6 Hz), 8,25 (1H, s). ESIMS (+): 335 [M + H]+.

[0349] 45C) Preparação de 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’- oxoespiro[ciclobutano-1,2’(3’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’ carboxilato de etila.

[0350] 10’,11’-difluoro-8’-oxoespiro[ciclobutano- 1,2’(3’H)-[7H]-pirido[l,2,3,-ef]-benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila foi preparado pela modificação de rotina dos procedimentos mostrados em outro lugar nestes. Uma solução de 10’,11’-difluoro-8’-oxoespiro[ciclobutano- 1,2’(3’H)-[7H]pirido[1,2,3,-ej]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (1,50 g, 4,47 mmol) em H2SO4 concentrado (15 ml) foi tratada às porções a 0°C com o KNO3 sólido (633 mg, 6,26 mmol). Depois de agitar a 0°C por 2 horas, a mistura de reação foi vertida em 100 ml de água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração. O sólido resultante foi recristalizado pela DMF e lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título como um sólido amarelo claro (651 mg, 38 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,76-2,00 (2H, m), 2,15-2,25 (2H, m), 2,27-2,40 (2H, m), 4,23 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,53 (2H, s), 8,69 (1H, s). ESIMS (+): 381 [M + H] +.

[0351] 45D) Preparação de 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[ciclobutano-1,2’(3’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila.

[0352] Uma solução de 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’-oxo- espiro-[ciclobutano-1,2’(3’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (450 mg, 1,15 mmol) e 10 % de Pd/C (40,5 mg) em DMF (20 ml) foi agitada sob atmosfera de hidrogênio (0,3 MPa) a 50°C por 3 horas. O catalisador foi removido pela filtração em celite e o filtrado foi concentrado a vácuo. O sólido resultante foi dissolvido em EtOH-CH2Cl2 (1:5) e filtrado. O CH2Cl2 foi removido e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título (270 mg, 67 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,74-1,96 (2H, m), 2,02-2,13 (2H, m), 2,14-2,25 (2H, m), 4,20 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,33 (2H, s), 7,33 (2H, brs), 8,43 (1H, s). ESIMS (+): 350[M + H]+.

[0353] 45E) Preparação do ácido 8’-amino-9’,10’-difluoro- 7’-oxoespiro[ciclobutano-1,2’(3’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]- 6’-carboxílico.

[0354] Uma solução de 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro-[ciclobutano-1,2’(3’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (247 mg, 0,705 mmol) e NaOH 1 M aq. (3,5 ml) em EtOH (3,5 ml) foi agitada no ambiente a 50°C por 1,5 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em água. A solução foi acidificada até o pH 7 com HCl 2 M e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (216 mg, 95 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,73-1,97 (2H, m), 2,04-2,27 (4H, m), 4,50 (2H, s), 7,25 (2H, brs), 8,76 (1H, s), 14,67 (1H, s). ESIMS (+): 322 [M + H]+.

[0355] 45F) Preparação do ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’- oxo-10’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,2’(3’H)- [7H]pirido- [1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxílico.

[0356] Uma solução de ácido 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxo-espiro[ciclobutano-1,2’(3’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico (200 mg, 0,621 mmol), trietilamina (0,130 ml, 0,933 mmol) e N- 2-piridil-1,2-etanodiamina (128 mg, 0,933 mmol) em DMSO (4 ml) foi agitada a 100°C por 3 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com etanol e depois secado para produzir o composto do título (223 mg, 82 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,30-1,50 (2H, m), 1,53-1,73 (1H, m), 3,01-3,12 (2H, m), 3,19-3,30 (2H, m), 3,94 (2H, s), 5,65 (1H, brs), 6,01-6,12 (2H, m), 6,29 (1H, t, J = 5,5 Hz), 6,43 (2H, brs), 6,90-7,01 (1H, m), 7,52-7,60 (1H, m), 8,13 (1H, s), 14,90 (1H, s). HRESIMS (+) :440,17258 (Calculado para C22H23FN5O4,440,17341).

[0357] Exemplo 46: Ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-8’-oxo-11’-12-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclopropano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-ef]-[1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0358] 46A) Preparação de 3-[1-(2- hidroxietil)ciclopropilamino]-2-(2,3,4,5,-tetrafluorobenzoil) acrilato de etila.

[0359] Uma solução de 3-oxo-3-(2,3,4,5-tetrafluorofenil)- pentanoato de etila (3,09 g, 11,7 mmol), Ac2O (6,7 ml, 70,9 mmol) e ortoformiato de trietila (3,90 ml, 23,5 mmol) foi aquecida a 120°C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. O produto bruto foi dissolvido em tolueno anidro (40 ml) e (1-amino-ciclopropil)-etanol (1,82 g, 11,7 mmol) foi adicionado muito lentamente a 0°C. A mistura de reação diluída com tolueno. A camada orgânica foi lavada com água, salmoura e depois secado. O solvente foi removido pela evaporação e o produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano : EtOAc 2 : ^ 1:1) para produzir o composto do título (2,99 g, 68 %) como um óleo amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,85-0,92 (2H, m), 0,94-1,11 (5H, m), 1,85-1,91 (2H, m), 3,85-3,89 (2H, m), 3,99-4,09 (2H, m), 6,95-7,13 (1H, m), 8,19 (1H, d, J = 14,1 Hz), 9,84, 11,2 (cada d, J = 13,4 Hz, total 1H). EIMS (+) 375 [M]+.

[0360] 46B) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’- oxoespiro-[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-d][1,4]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila.

[0361] Uma solução de NaH (617 mg, 15,4 mmol, 60 % em óleo) em DMF (30 ml) foi esfriada até 0°C e tratada às gotas com 3-[1-(2- hidroxietil)ciclopropilamino]-2-(2,3,4,5,-tetrafluorobenzoil)propilamino- acrilato de etila (2,63g, 7,01 mmol) em DMF (4 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora e uma hora adicional a 80°C. A mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração e lavado com água. O sólido resultante foi dissolvido em 100 ml de EtOH e filtrado. O filtrado foi concentrado a 50 ml e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com EtOH e depois secado para produzir o composto do título (1,43 g, 61 %) como um sólido marrom claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,03 (2H, br), 1,18 (2H, br), 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 2,03-2,73 (2H, br), 4,21 (2H , q, J = 7,3 Hz), 7,66 (1H, dd, J = 10,4, 7,9 Hz), 8,51 (1H, s). EIMS (+) 335 [M] +.

[0362] 46C) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0363] Uma solução de 10’,11’-trifluoro-2’,3’-diidro-8’- oxoespiro-[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila (1,2 g, 3,58 mmol) em concentrado H2SO4 (15 ml) foi tratada às porções a 0°C com KNO3 sólido (510 mg, 5,04 mmol). Depois de agitar a 0°C por 2 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração. O sólido resultante foi lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título (554 mg, 41 %) como um sólido marrom. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,02 (2H, br), 1,10-1,27 (5H, m), 1,91-2,86 (2H, br), 4,21 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,61 (2H, br), 4,52 (2H, br), 8,58 (1H, s). EIMS (+) 380 [M] +. HREIMS (+) 380,0856 (Calculado para C17H14F2N206,380,0820).

[0364] 46D) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0365] Uma solução de 10’,11’-difluoro2’,3’-diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (500 mg, 1,31 mmol) e 10 % de Pd/C (100 mg) em DMF (30 ml) foi agitada sob atmosfera de hidrogênio a 50°C por 1,5 hora. O catalisador foi removido pela filtração em celite e o filtrado foi concentrado a vácuo. O sólido resultante foi dissolvido em CH2Cl2 e EtOH (3:1, 65 ml) e filtrado. Depois da remoção de CH2Cl2 o precipitado resultante foi isolado pela filtração, lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título (355 mg, 77 %) como um sólido marrom. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 0,99 (2H, br), 1,13 (2H, br), 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,64-2,91 (2H, br), 4,18 (2H , q, J = 7,3 Hz), 4,35 (2H, br), 7,46 (2H, br), 8,35 (1H, s). EIMS (+) 350 [M] +.

[0366] 46E) Preparação do ácido 9’-amino-10’,11’- difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4-benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0367] Uma solução de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’- diidro-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (320 mg, 0,913 mmol) em mistura de AcOH-H2O-H2SO4 (6:4:1 v/v, 5,3 ml) foi aquecida no refluxo por uma hora. A mistura de reação foi vertida em água gelada e um precipitado foi coletado pela filtração, lavado com água e depois para dar o composto do título 1H -RMN (400 M Hz DMSO,) δ 0,63-1,55 (4H, br), 1,90-3,11 (2H, br), 3,78-4,96 (2H, br), 7,40 (2H, s), 8,64 (1H, s), 14,5 (1H, s). EIMS (+) 322 [M] + .

[0368] 46F) Preparação de ácido 9’-amino-10’-fluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclopropano- 1,4’-[4H, 8H]-pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0369] Uma solução de ácido de 9’-Amino-10’,11’- difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxo-espiro[ciclopropano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3,- ef][1,4]-benzoxazepina]-7’-carboxílico (150 mg, 0,465 mmol), trietilamina (0,100 ml, 0,717 mmol) e N-2-(piridinil)-1,2-etanodiamina (95,5 mg, 0,696 mmol) em DMSO (2 ml) foi agitada a 100°C por 3 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração e lavado com etanol. O sólido resultante foi dissolvido em DMF e filtrado. O filtrado foi vertido em água e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (95,6 mg, 47 %) como um sólido amarelo escuro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO,) δ 0,81-1,50 (4H, m), 3,40-3,51 (2H, m), 3,55-3,66 (2H, m), 3,80-4,60 (4H, m), 6,32 (1H, brs), 6,40-6,50 (2H, m), 6,70 (1H, t, J = 5,5 Hz), 9,97 (2H, brs), 7,30-7,40 (1H, m), 7,90-8,00 (1H, m), 15,14 (1H, s). HRESIMS (+): 440,17315 (Calculado para C22H22FN5O4,440,17340).

[0370] Exemplo 47: Ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-d]-[1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0371] 47A) Preparação de (1-hidroxiciclobutil)-acetato de etila.

[0372] Trimetilclorossilano (1,14 ml, 8,92 mmol) foi adicionado por seringa a uma suspensão de pó de zinco (7,97 g, 0,122 mol) em Et2O absoluto (200 ml). A mistura foi agitada por 15 minutos na temperatura ambiente. A mistura foi depois aquecida ao refluxo, a fonte de calor foi removida e bromoacetato de etila (10,3 ml, 92,9 mmol) foi adicionado em uma taxa tal que a solução de éter ferveu suavemente. A mistura foi refluxada em uma hora depois agitada por uma hora adicional na temperatura ambiente. Uma solução de ciclopentanona (6,00 g, 75,9 mmol) em éter (30 ml) foi adicionado enquanto a temperatura da mistura foi mantida de 19 a 20°C pelo esfriamento intermitente. Depois de uma hora de agitação na temperatura ambiente, a mistura foi vertida em amônia gelada a 25 % (400 ml). A fase aquosa foi extraída com éter e as fases combinadas foram secadas em K2CO3. A filtração e evaporação dos solventes produziram o composto do título como um óleo incolor (6,50 g, 54 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,29 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,47-1,64 (1H, m), 1,76-1,87 (1H, m), 1,93-2,06 (2H, m), 2,12-2,22 (2H, m), 2,67 (2H, s), 3,70 (1H, s), 4,19 (2H, q, J = 7,3 Hz). 47B) Preparação de [1-(benzoilamino)ciclobutil]acetato de etila.

[0373] H2SO4 (2,20 ml, 41,3 mmol) foi lentamente adicionado a uma mistura de 1-hidroxiciclobutilacetato de etila (6,45 g, 40,8 mmol) e benzonitrila (40 ml, 0,392 mol) na temperatura ambiente. A mistura foi agitada por 1 hora na temperatura ambiente, depois por um adicional de uma hora a 80°C. A mistura foi esfriada em um banho de água gelada e solução 2 N de NaOH foi adicionada até que a mistura atingiu o pH = 7. A mistura foi extraída com acetato de etila e extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 5:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (5,40 g, 51 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,22 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,84-2,07 (2H, m), 2,22-2,32 (2H, m), 2,44-2,55 (2H, m), 3,05 (2H, s), 4,11 (2H, q, J = 7,3 Hz), 6,73 (1H, s), 7,39-7,52 (3H, m), 7,72-7,79 (2H, m).

[0374] 47C) Preparação de 2-[1- (benzilamino)ciclobutil]etanol.

[0375] LiAlH4 (3,88 g, 0,102 mol) foi adicionado a uma solução de 1-(benzoilamino)-ciclobutilacetato de etila (5,30 g, 20,3 mmol) em THF (100 ml) na temperatura ambiente. A mistura foi agitada por 1 hora, depois refluxada por uma hora adicional. A mistura foi esfriada em um banho de água gelada, umas poucas gotas de água foram adicionadas e a mistura foi deixada repousar durante a noite. A mistura foi diluída com acetato de etila, secada em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada a vácuo. A destilação do resíduo deu o composto do título como um óleo incolor (2,53 g, 61 %). 1H- RMN (400 M Hz, CDCl3) 6 1,69-1,86 (2H, m), 1,88 (2H, t, J = 5,5 Hz), 1,922,09 (4H, m), 3,73 (2H, s), 3,87 (2H, t, J = 5,5 Hz), 7,22-7,35 (5H, m). 47D) Preparação de 2-[1-aminociclobutil[etanol.

[0376] 10 % de Pd-C (500 mg) foi adicionado a uma solução de 2-[1-(benzilamino)ciclobutil]etanol (4,00 g, 19,5 mmol) em EtOH (100 ml) e a mistura foi agitada sob gás de H2 0,5 MPa na temperatura ambiente por 6 horas. A mistura foi filtrado e o filtrado foi concentrado a vácuo. A destilação do resíduo deu o composto do título como um óleo incolor (1,65 g, 73 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,60-1,72 (2H, m), 1,75 (2H, t, J = 5,5 Hz), 1,77-1,87 (2H, m), 2,03-2,13 (2H, m), 3,81 (2H, q, J = 5,5 Hz).

[0377] 47E) Preparação de 3-[1-(2- hidroxietil)ciclobutilamino-1-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0378] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluorofenil)-pentanoato de (3,67 g, 13,9 mmol), Ac2O (7,89 ml, 83,5 mmol) e ortoformiato de trietila (4,63 ml, 27,8 mmol) foi aquecida a 120°C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. 1- amino-1-(2-hidroxietil)ciclobutano (1,60 g, 13,9 mmol) em tolueno anidro (20 ml) foi lentamente adicionado a 0°C a uma solução da mistura em tolueno anidro (50 ml). A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente por 2 horas e o solvente foi removido pela evaporação. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 1:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo claro (3,30 g, 61 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,96 (0,6H, t, J = 7,3 Hz), 1,09 (2,4H, t, J = 7,3 Hz), 1,85-2,03 (12H, m), 2,06-2,13 (2H, m), 2,20-2,30 (2H, m), 2,32-2,43 (2H, m), 3,82-3,88 (2H, m), 4,02 (0,4H, q, J = 7,3 Hz), 4,07 (1,6H, q, J = 7,3 Hz), 6,94-7,03 (0,2H, m), 7,05-7,13 (0,8H, m), 8,23-8,30 (1H, m), 10,05-10,17 (0,2H, m), 11,36-11,50 (0,8H, m).

[0379] 47F) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’- oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila.

[0380] NaH foi adicionado (350 mg, 8,75 mmol) a uma solução de 3-[1-(2-hidroxietil)ciclobutilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)- acrilato de etila (2,80 g, 7,19 mmol) em DMF (30 ml) a 0°C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos, depois aquecida a 80°C por um adicional de 30 minutos. A água foi adicionada à mistura às porções a 0°C e o precipitado resultante foi isolado pela filtração, lavado sucessivamente com água e secado para dar o composto do título (655 mg, 26 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,67-1,79 (1H, m), 1,91-2,04 (1H, m), 2,42-2,53 (4H, m), 2,67 (2H, t, J = 6,7 Hz), 4,24 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,55 (2H, t, J = 6,7 Hz), 7,72 (1H, dd, J= 10,4 e 7,9 Hz), 8,41 (1H, s).

[0381] 47G) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro- 9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0382] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’- oxo-espiro-[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila (925 mg, 2,65 mmol) em concentrado H2SO4 (11 ml) foi tratada às porções com KNO3 sólido (363 mg, 3,59 mmol) a 0°C. Depois de agitar a 0°C por 2 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi combinado pela filtração e lavado com água. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2-MeOH = 10:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo (822 mg, 79 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,68-1,78 (1H, m), 1,902,03 (1H, m), 2,40-2,58 (4H, m), 2,69 (2H, t, J = 6,7 Hz), 4,24 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,63 (2H, t, J = 6,7 Hz), 8,44 (1H, s).

[0383] 47H) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0384] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-9’- nitro-8’-oxo-espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (770 mg, 1,95 mmol) em DMF (70 ml) foi tratada com hidrogênio sob pressão atmosférica em 10 % de Pd/C (200 mg) a 50°C por 1 hora. O catalisador foi removido pela filtração em celite e o filtrado foi concentrado a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2-MeOH = 10:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (559 mg, 79 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,65-1,77 (1H, m), 1,87-2,01 (1H, m), 2,35-2,62 (6H, m), 4,21 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,31-4,42 (2H, brt), 7,40-7,60 (2H, brs), 8,23 (1H, s).

[0385] 47I) Preparação do ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-d][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0386] NaOH 2 N (7,0 ml, 14,0 mmol) foi adicionado a uma mistura de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclo- butano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (513 mg, 1,41 mmol) em EtOH (14 ml) na temperatura ambiente e a mistura foi aquecida a 50°C por 3 horas. HCl 2N (7,0 ml) e água foram adicionados à mistura de reação. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado sucessivamente com água e secado para dar o composto do título (427 mg, 90 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,64-1,77 (1H, m), 1,89-2,02 (1H, m), 2,56-2,70 (2H, br), 4,30-4,50 (2H, br), 7,35-7,52 (2H, brs), 8,47 (1H, s), 14,60 (1H, s).

[0387] 47J) Preparação do ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]-pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0388] Uma solução do ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxílico (186 mg, 0,553 mmol), N-(2-piridinil)-1,2- etanodiamina (115 mg, 0,838 mmol) e trietilamina (117 μl) em DMSO (2,5 ml) foi agitada a 120°C por 4 horas. A mistura de reação foi adicionada às porções a 0°C à água gelada e HCl 2 N (3 gotas) foram adicionados à mistura. O precipitado resultante foi isolado pela filtração, lavado com EtOH e secado para dar o composto do título (165 mg, 66 %) como um sólido amarelo. 1H- RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,61-1,74 (1H, m), 1,84-2,00 (1H, m), 2,302,65 (6H, m), 3,40-3,50 (2H, m), 3,52-3,62 (2H, m), 4,10-4,33 (2H, br), 6,206,30 (1H, m), 6,42-6,51 (2H, m), 6,69 (1H, t, J = 5,5 Hz), 6,90-7,08 (2H, br), 7,32-7,40 (1H, m), 7,97 (1H, dd, J = 4,3 e 1,2 Hz), 8,26 (1H, s), 15,23 (1H, s). HRESIMS (+) 454,18677 (Calculado para C23H25FN5O4,454,18906). Exemplo 48: Ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2- piridilamino)etilamino]espiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0389] 48A) Preparação de 3-[1-(2- hidroxietil)ciclopentilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0390] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluorofenil)-pentanoato de etila (20,3 g, 76,8 mmol), Ac2O (44,0 ml, 0,465 mol) e ortoformiato de trietila (25,6 ml, 0,154 mol) foi aquecida a 120°C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. 1-amino-1-(2-hidroxietil)ciclopentano (9,94 g, 76,9 mmol) em tolueno anidro (50 ml) foi lentamente adicionado a uma solução da mistura em tolueno anidro (200 ml) a 0°C. A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente por 2 horas. O solvente foi removido pela evaporação. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (23,2 g, 75 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,96 (0,6H, t, J = 7,3 Hz), 1,09 (2,4H, t, J = 7,3 Hz), 1,48-1,54 (1H, m), 1,74-1,90 (6H, m), 1,97-2,06 (4H, m), 3,78-3,85 (2H, m), 3,98-4,10 (2H, m), 6,95-7,12 (1H, m), 8,17-8,24 (1H, m), 9,81-9,94 (0,3H, m), 11,20-11,35 (0,7H, m).

[0391] 48B) Preparação de 6,7,8-trifluoro-1,4-diidro-1-[1- (2-hidroxietil)ciclopentil]-4-oxo-3-quinolinacarboxilato de etila.

[0392] A uma solução gelada de 3-[1-(2-hidroxietil)- ciclopentil-amino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila (22,7 g, 56,3 mmol) em THF (200 ml) foi adicionado NaH (3,60 g, 90,0 mmol) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora. A água foi adicionada à mistura às porções a 0°C. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila e os extratos orgânicos combinados foram concentrados a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (14,1 g, 65 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,53-1,75 (4H, m), 2,102,26 (4H, m), 2,31-2,44 (2H, m), 4,23 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,55-4,60 (1H, m), 7,99-8,07 (1H, m), 8,80 (1H, s).

[0393] 48C) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’- oxo-espiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila.

[0394] A uma solução de 6,7,8-trifluoro-1,4-diidro-1-[1-(2- hidroxieti)ciclopentil]-4-oxo-3-quinolinacarboxilato de etila (3,84 g, 10,0 mmol) em DMF (40 ml) foi adicionado NaH (480 mg, 12,0 mmol) e a mistura foi aquecida a 80°C por 30 minutos. A mistura foi tratada às porções com água a 0°C. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila e os extratos combinados foram concentrados a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (1,12 g, 31 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,42 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,52-1,64 (2H, m), 1,75-1,88 (2H, m), 2,11-2,21 (2H, m), 2,27-2,37 (2H, m), 2,47 (2H, t, J = 6,7 Hz), 4,39 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,47 (2H, t, J = 6,7 Hz), 7,98 (1H, dd, J = 9,8 e 7,9 Hz), 8,67 (1H, s).

[0395] 48D) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro- 9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0396] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’- oxoespiro-[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila (50,0 g, 0,138 mmol) em H2SO4 concentrado (1 ml) foi tratada às porções a 0°C com KNO3 sólido (20,0 mg, 0,199 mmol). Depois de agitar a 0°C por 1 hora, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi combinado pela filtração, lavado com água e dissolvidos em CH2Cl2-MeOH (5:1 v/v). Os extratos combinados foram concentrado a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2- MeOH = 10:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo (26,0 mg, 46 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,37 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,52-1,66 (2H, m), 1,78-1,90 (2H, m), 2,15-2,30 (4H, m), 2,50 (2H, t, J = 6,7 Hz), 4,36 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,55 (2H, t, J = 6,7 Hz), 8,69 (1H, s).

[0397] 48E) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro8’-oxoespiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0398] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (2,00 g, 4,90 mmol) em DMF (120 ml) foi tratada com hidrogênio sob pressão atmosférica em 10 % de Pd/C (400 mg) a 50°C por 1,5 hora. O catalisador foi removido pela filtração em celite e o filtrado foi concentrado a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2-MeOH = 10:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo (527 mg, 28 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,37-1,50 (2H, m), 1,65-1,77 (2H, m), 2,06-2,25 (4H, m), 2,36 (2H, t, J = 6,7 Hz), 4,20 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,30 (2H, t, J = 6,7 Hz), 7,53 (2H, brs), 8,47 (1H, s).

[0399] 48F) Preparação de ácido 9’amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0400] A uma mistura de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’- diidro-8’-oxoespiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (482 mg, 1,27 mmol) em EtOH (13 ml) foi adicionado NaOH 2 N (6,5 ml, 13,0 mmol) na temperatura ambiente e a mistura foi aquecida a 50°C por 3 horas. HCl 2 N (6,5 ml) e água foram adicionados à mistura de reação. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado sucessivamente com água e secado para dar o composto do título (425 mg, 96 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,35-1,52 (2H, m), 1,65-1,75 (2H, m), 2,10-2,30 (4H, m), 2,43 (2H, t, J = 6,7 Hz), 4,34 (2H, t, J = 6,7 Hz), 7,50 (2H, brs), 8,67 (1H, s), 14,5 (1H, brs).

[0401] 48G) Preparação de ácido 9’ -amino-10’-fluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclopentano- 1,4’-[4H, 8H]pirido[1,2,3-d][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0402] Uma solução de ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclopentano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxílico (200 mg, 0,571 mmol) e N-(2-piridinil)-1,2- etanodiamina (118 mg, 0,860 mmol) em DMSO (2,5 ml) foi agitada a 100°C por 4 horas. À mistura de reação foi adicionada água gelada às porções a 0°C e o precipitado resultante foi isolado pela filtração e lavado sucessivamente com água, iPr2O e EtOH. O precipitado resultante foi secado para dar o composto do título (185 mg, 69 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,34-1,49 (2H, m), 1,60-1,75 (2H, m), 2,03-2,23 (4H, m), 2,34 (2H, t, J = 6,7 Hz), 3,40-3,55 (2H, m), 3,55-3,64 (2H, m), 4,17 (2H, t, J = 6,7 Hz), 6,25-6,33 (1H, br), 6,43-6,51 (2H, m), 6,69 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,06 (2H, br), 7,35 (1H, ddd, J = 6,7, 6,7 e 1,8 Hz), 8,86 (1H, dd, J = 4,9 e 1,2 Hz), 8,49 (1H, s), 15,1 (1H, brs). HRESIMS (+) 4678,20118 (Calculado para C24H27FN5O4, 468,20471). Exemplo 49:

[0403] Ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-3’-metil-8’- oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]-espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido- [1,2,3-ef][1,4]-benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0404] 49A) Preparação de 2-(1- hidroxiciclobutil)pentanoato de etila.

[0405] Trimetilclorossilano (950 μl, 7,43 mmol) foi adicionado por seringa a uma suspensão de pó de zinco (6,65 g, 0,102 mol) em Et2O absoluto (170 ml). A mistura foi agitada por 15 minutos na temperatura ambiente, aquecida ao refluxo, a fonte de calor removida e 2- bromopentanoato de etila (10,1 ml, 77,8 mmol) foi adicionado em uma taxa tal que o éter ferveu suavemente. Depois sendo aquecido ao refluxo por 1 hora, a mistura foi agitada por 1 hora na temperatura ambiente. Uma solução de ciclobutanona (5,00 g, 63,2 mmol) em Et2O (10 ml) foi adicionada enquanto a temperatura da mistura foi mantida de 19 a 20°C pelo esfriamento intermitente. Depois de agitar por 1 hora na temperatura ambiente, a mistura foi vertida em amônia gelada a 25 % (400 ml). A fase aquosa foi extraída com éter, as fases orgânicas combinadas foram secadas em K2CO3 e concentradas. O composto do título foi dado como um óleo incolor (12,9 g, 100 %). 1H- RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,21 (3H, d, J = 6,8 Hz), 1,29 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,51-1,64 (1H, m), 1,80-1,90 (1H, m), 1,96-2,17 (4H, m), 2,70 (1H, q, J = 7,3 Hz), 3,44 (1H, s), 4,18 (2H, qd, J = 7,3 e 1,2 Hz).

[0406] 49B) Preparação de 2-[1-(benzoilamino)ciclobutil]- pentanoato de etila.

[0407] H2SO4 (3,90 ml, 73,2 mmol) foi lentamente adicionado a uma mistura de 2-(1-hidroxiciclobutil)pentanoato de etila (12,5 g, 72,6 mmol) e benzonitrila (75 ml) na temperatura ambiente. A mistura foi agitada por 1 hora na temperatura ambiente depois 80°C por 1 hora. A mistura foi esfriada em um banho de água gelada e solução 2 N de NaOH foi adicionada até que a mistura atingiu o pH = 7. A mistura foi extraída com acetato de etila, os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4 anidros, filtrados e concentrados a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 5:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo claro (9,24 g, 46 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,30 (3H, d, H = 7,3 Hz), 1,73-1,87 (1H, m), 1,982,09 (2H, m), 2,21-2,32 (1H, m), 2,53-2,63 (1H, m), 2,84-2,94 (1H, m), 3,11 (1H, q, J = 7,3 Hz), 4,08-4,20 (2H, m), 6,88 (1H, brs), 7,40-7,52 (3H, m), 7,75-7,80 (2H, m).

[0408] 49C) Preparação de 2-[1- (benzilamino)ciclobutil]propanol

[0409] LiAlH4 (6,30 g, 0,166 mol) foi adicionado a uma solução de 2-[1-(benzoilamino)-ciclobutil]pentanoato de etila (9,07 g, 32,9 mmol) em THF (160 ml) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora, depois refluxada 1 hora. A mistura foi esfriada em um banho de água gelada e umas poucas gotas de água foram adicionadas. A mistura foi diluída com acetato de etila, secada em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada a vácuo. A destilação do resíduo deu o composto do título como um óleo amarelo claro (6,92 g, 96 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,00 (3H, d, J = 6,7 Hz), 1,66-1,77 (1H, m), 1,81-1,97 (2H, m), 2,02-2,10 (1H, m), 2,10-2,24 (3J, m), 3,59 (1H, dd, J= 11,0 e 7,9 Hz), 3,71 (1H, d, J = 11,6 Hz), 3,74 (1H, dd, J = 11,0 e 3,7 Hz), 3,89 (1H, d, J = 11,6 Hz), 7,23-7,36 (5H, m). 49D) Preparação de 2-(1-aminociclobutil)propanol.

[0410] 10 % de Pd-C (700 mg) foram adicionados a uma solução de 2-[1-(benzilamino)ciclobutil]propanol (6,81 g, 31,1 mmol) em EtOH (150 ml) e a mistura foi agitada sob gás de H2 5 kgf/cm2 na temperatura ambiente por 6 horas. A mistura foi filtrado e o filtrado foi concentrado a vácuo. A destilação do resíduo deu o composto do título como um óleo incolor (2,96 g, 74 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,03 (3H, d, J = 7,3 Hz), 1,63-1,74 (3H, m), 1,78-1,94 (2H, m), 2,10-2,28 (2H, m), 3,50 (1H, dd, J = 11,0 e 4,3 Hz), 3,91 (1H, dd, J = 11,0 e 3,1 Hz).

[0411] 49E) Preparação de 3-[1-(1-hidróxi-2-propil)- ciclobutil-amino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0412] Uma solução de 3-oxo-3-(2,3,4,5-tetrafluorofenil)- pentanoato (6,13 g, 23,2 mmol), Ac2O (13,2 ml, 0,140 mol) e ortoformiato de trietila (7,80 ml, 46,8 mmol) foi agitada a 120°C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. À mistura do resíduo em tolueno anidro (100 ml) foi lentamente adicionado 2-(1- aminociclobutil)propanol (3,00 g, 23,2 mmol) em tolueno anidro (40 ml) a 0°C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 2 horas e o solvente foi removido pela evaporação. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 1:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (6,23 g, 67 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,95 (0,6H, t, J = 7,3 Hz), 0,97 (3H, d, J = 7,3 Hz), 1,09 (2,4H, t, J = 7,3 Hz), 1,54 (1H, t, J = 4,9 Hz), 1,85-2,15 (3H, m), 2,19-2,50 (4H, m), 3,62-3,75 (2H, m), 4,02 (0,2H, q, J = 7,3 Hz), 4,07 (0,8H, q, J = 7,3 Hz), 6,97-7,13 (1H, m), 8,24 (0,8H, d, J = 15,3 Hz), 8,25 (0,2H, d, J = 15,3 Hz), 10,03 (0,2H, d, J = 14,1 Hz), 11,40 (0,8H, d, J = 14,1 Hz).

[0413] 49F) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-3’- metil- 8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0414] NaH (40 mg) foi adicionado a uma solução de 3-[1- (1-hidróxi-2-propil)-ciclobutilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila (404 mg, 1,00 mmol) em DMF (4 ml) a 0°C. NaH adicional (40 mg) foi adicionado à mistura depois de uma hora de agitação a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C por uma adicional de uma hora, na temperatura ambiente por 1 hora e a 70°C por 1 hora. A água foi adicionada às porções à mistura a 0°C e o precipitado resultante foi isolado pela filtração, lavado sucessivamente com água e acetato de etila e secado para dar o composto do título (289 mg, 80 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 0,93 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,66-1,77 (1H, m), 1,85-2,00 (1H, m), 2,35 (1H, q, J = 10,4 Hz), 2,53-2,69 (3H, m), 2,96-3,05 (1H, m), 3,82 (1H, t, J = 11,6 Hz), 4,24 (2H, qd, J = 7,3 e 2,4 Hz), 4,77 (1H, dd, J = 12,9 e 8,9 Hz), 7,73 (1H, dd, J = 10,4 e 8,6 Hz), 8,25 (1H, s).

[0415] 49G) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro- 3’-metil-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]- 7’-carboxilato de etila.

[0416] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-3’- metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (1,00 g, 2,75 mmol) em H2SO4 concentrado (12 ml) foi tratada às porções a 0°C com o KNO3 sólido (377 mg, 3,73 mmol). Depois de agitar a 0°C por 2 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi combinado pela filtração e lavado com água. A recristalização do sólido resultante a partir do DMF (20 ml) deu o composto do título como um sólido amarelo (923 mg, 82 %). 1H- RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 0,94 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,67-1,78 (1H, m), 1,83-1,98 (1H, m), 2,40-2,64 (4H, m), 2,92-3,05 (1H, m), 3,98 (1H, t, J = 11,6 Hz), 4,24 (2H, t, J = 7,3 Hz), 4,80 (1H, dd, J = 11,6 e 7,9 Hz), 8,25 (1H, s).

[0417] 49H) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-3’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]-benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0418] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-3’- metil-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (900 mg, 2,20 mmol) em DMF (55 ml) foi tratada com hidrogênio sob pressão atmosférica em 10 % de Pd/C (180 mg) a 50°C por 3 horas. O catalisador foi removido pela filtração em celite e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi lavado com EtOH, coletado pela filtração e secado para dar o composto do título (756 mg, 91 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 0,89 (3H, brs), 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,65-1,77 (1H, m), 1,80-1,95 (1H, m), 2,30-2,67 (4H, m), 2,82-2,94 (1H, m), 3,52-3,66 (1H, m), 4,15-4,28 (2H, m), 4,58-4,70 (1H, m), 7,40-7,65 (2H, br), 8,05 (1H, s).

[0419] 49I) Preparação do ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-3’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef]- [1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0420] A uma mistura de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’- diidro-3’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (720 mg, 1,90 mmol) em EtOH (20 ml) foi adicionado NaOH 2 N (10,0 ml) na temperatura ambiente e a mistura foi aquecida a 50°C por 3 horas. HCl 2 N (10,0 ml) e água foram adicionados à mistura de reação. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para dar o composto do título (654 mg, 98 %) como um sólido amarelo. ‘H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 0,90 (3H, d, J = 5,5 Hz), 1,64-1,76 (1H, m), 1,81-1,96 (1H, m), 2,35-2,72 (4H, m), 2,88-3,02 (1H, m), 3,64 (1H, t, J = 11,6 Hz), 4,60-4,75 (1H, m), 7,46 (2H, brs), 8,26 (1H, s), 14,60 (1H, brs).

[0421] 49J) Preparação do ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-3’-metil-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilaminol-espiro[ciclobutano- 1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0422] Uma solução de ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-3’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]-benzoxazepina]-7’-carboxílico (300 mg, 0,856 mmol), N-2- (piridinil)-1,2-etanodiamina (177 mg, 1,29 mmol) e trietilamina (180 μl) em DMSO (4 ml) foi agitada a 120°C por 5 horas. Água gelada foi adicionada às porções à mistura de reação a 0° C e a mistura foi extraída com CH2Cl2. Os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2 : MeOH = 10:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amorfo amarelo (177 mg, 44 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 0,86 (3H, d, J = 5,5 Hz), 1,62-1,73 (1H, m), 1,79-1,93 (1H, m), 2,25-2,38 (1H, m), 2,38-2,64 (3H, m), 2,80-2,93 (1H, m), 3,27-3,50 (3H, m), 3,52-3,14 (2H, m), 4,50-4,60 (1H, m), 6,28 (1H, brs), 6,42-6,52 (2H, m), 6,69 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,01 (2H, brs), 7,32-7,40 (1H, m), 7,96 (1H, dd, J = 4,9 e 1,2 Hz), 8,07 (1H, s), 15,24 (1H, s). HRESIMS (+) 468,20923 (Calculado para C24H27FN5O4, 468,20471).

[0423] Exemplo 50: Ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-2’-metil-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano- 1,4’-[4H,8H]pirido-[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carbocílico

[0424] 50A) Preparação de 1-[(benzoilamino)ciclobutil]- acetaldeído.

[0425] DIBAL (40,0 ml, solução 1 M em tolueno) foi adicionado às gotas a -78° C a uma solução agitada de [1- (benzoilamino)ciclobutil]acetato de etila (6,86 g, 26,3 mmol) em THF (130 ml) no curso de 30 minutos. Depois de agitar a -78° C por 6 horas, MeOH (10 ml) foi adicionado às gotas à mistura a -78° C no curso de 30 minutos. NH4Cl saturado aquoso (20 ml) foi depois adicionado à mistura e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi extraída com Et2O, secado em Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (Hexano : AcOEt = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (1,82 g, 32 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,87-2,07 (2H, m), 2,25-2,34 (2H, m), 2,36-2,45 (2H, m), 3,28 (2H, s), 6,57 (1H, brs), 7,39-7,45 (2H, m), 7,46-7,53 (1H, m), 7,70-7,76 (2H, m), 9,79 (1H, s).

[0426] 50B) Preparação de 1-[1-(benzoilamino)ciclobutil]- 2-propanol.

[0427] Cloreto de metil magnésio (14,0 ml, solução 3 M em THF) foi adicionado a uma solução agitada de [1- (benzoilamino)ciclobutil]-acetaldeído (2,82 g, 13,0 mmol) em THF (30 ml) a -0° C e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 5 horas. NH4Cl saturado aquoso (10 ml) foi adicionado à mistura 0° C e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila. Os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (Hexano : AcOEt = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um óleo incolor (2,65 g, 87 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,25 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,77-2,12 (5H, m), 2,28-2,40 (1H, m), 2,52 (1H, q, J = 10,4 Hz), 2,75-2,85 (1H, m), 3,26 (1H, d, J = 3,7 Hz), 3,974,07 (1H, m), 6,91 (1H, brs), 7,39-7,46 (2H, m), 7,46-7,53 (1H, m), 7,75-7,82 (2H, m).

[0428] 50C) Preparação de 1[1-(benzilamino)ciclobutil]-2- propanol.

[0429] LiAlH4 (1,20 g, 31,6 mmol) foi adicionado a uma solução de 1-[1-(benzoilamino)ciclobutil]propanol (2,64 g, 11,3 mmol) em THF (40 ml) na temperatura ambiente. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora e refluxado por 30 minutos. A mistura foi esfriada em um banho de água gelada e umas poucas gotas de água foram adicionadas. A mistura foi depois diluída com acetato de etila, secada em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt) do resíduo deu o composto do título como um óleo incolor (2,25 g, 91 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,21 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,63 (1H, dd, J = 13,7 e 2,4 Hz), 1,73-1,90 (5H, m), 2,04-2,13 (1H, m), 2,18-2,27 (1H, m), 3,59 (1H, d, J = 11,6 Hz), 3,81 (1H, d, J = 11,6 Hz), 4,07-4,16 (1H, m), 7,227,35 (5H, m).

[0430] 50D) Preparação de 1-(1-aminociclobuti1)-2- propanol.

[0431] 10 % de Pd-C (300 mg) foram adicionados a uma solução de 1-[1-(benzilamino)ciclobutil]-2-propanol (2,24 g, 10,2 mmol) em EtOH (50 ml) e a mistura foi agitada sob gás de H2 (5 kgf/cm2) na temperatura ambiente por 10 horas. A mistura foi filtrado e o filtrado foi concentrado a vácuo. A destilação do resíduo deu o composto do título como um óleo amarelo claro (1,24 g, 94 %).

[0432] 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,17 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,43 (1H, ddd, J = 14,7, 10,4 e 1,2 Hz), 1,61-1,69 (1H, m), 1,72 (1H, dd, J = 14,7 e 1,8 Hz), 1,75-1,90 (3H, m), 1,93-2,03 (1H, m), 2,12-2,20 (1H, m), 4,00-4,08 (1H, m).

[0433] 50F) Preparação de 3-[1-(2- hidroxipropil)ciclobutilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0434] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluorofenil)-pentanoato de etila (2,45 g, 9,27 mmol), Ac2O (5,30 ml, 56,1 mmol) e ortoformiato de trietila (3,10 ml, 18,6 mmol) foi aquecida a 120° C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. Ao 1- [1-aminociclobutil]-2-propanol (1,20 g, 9,29 mmol) em tolueno anidro (10 ml) foi lentamente adicionado uma mistura do resíduo em tolueno anidro (30 ml) a 0° C e agitados na temperatura ambiente por 2 horas. O solvente foi removido pela evaporação. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 1:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo claro (3,10 g, 83 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,95 (0,6H, t, J = 7,3 Hz), 1,09 (2,4H, t, J = 7,3 Hz), 1,29 (3H, d, ,1 = 6,1 Hz), 1,51 (1H, brs), 1,83-2,05 (4H, m), 2,18-2,35 (3H, m), 2,41-2,53 (1H, m), 3,95-4,15 (3H, m), 6,96-7,13 (1H, m), 8,27 (0,8H, d, J = 14,7 Hz), 8,31 (0,2H, d, J = 14,7 Hz), 10,30 (0,2H, d, J = 13,4 Hz), 11,56 (0,8H, d, J = 13,4 Hz).

[0435] 50G) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro- 2’-metil- 8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0436] NaH (40 mg) foi adicionado a uma solução de 3-[1(2- hidroxilpropil)ciclobutilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila (404 mg, 1,00 mmol) em DMF (4 ml) a 0° C. NaH (40 mg) foi adicionado depois de agitar a 0° C por 1 hora. A mistura foi agitada a 0° C por uma adicional de uma hora, depois na temperatura ambiente por 1 hora e a 80° C por uma hora adicional. A água foi adicionada à mistura às porções a 0° C e o precipitado resultante foi isolado pela filtração, lavado sucessivamente com água e iPr2O e secado para dar o composto do título (244 mg, 67 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,43 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,72 (1H, q, J = 10,4 Hz), 1,902,04 (1H, m), 2,24 (1H, q, J = 10,4 Hz), 2,34-2,43 (1H, m), 2,53-2,74 (4H, m), 4,24 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,48-4,58 (1H, m), 7,72 (1H, qd, J = 10,4 e 7,9 Hz), 8,40 (1H, s).

[0437] 50H) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro- 2’-metil9’-nitro-8’oxo-espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]- 7’-carboxilato de etila.

[0438] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-2’- metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (182 mg, 0,501 mmol) em H2SO4 concentrado (2 ml) foi tratada às porções a 0° C com KNO3 sólido (72,0 mg, 0,712 mmol). Depois de agitar a 0° C por 2 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi isolado pela filtração, lavado com água e secado para dar o composto do título (190 mg, 93 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,45 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,61-1,77 (1H, m), 1,90-2,03 (1H, m), 2,29-2,48 (3H, m), 2,57-2,72 (3H, m), 4,24 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,624,73 (1H, m), 8,43 (1H, s).

[0439] 50I) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’- diidro-2’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7 ‘-carboxilato de etila.

[0440] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-2’- metil-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (1,13 g, 2,77 mmol) em DMF (70 ml) foi tratada com hidrogênio sob pressão atmosférica em 10 % de Pd/C (230 mg) a 50° C por 2 horas. O catalisador foi removido pela filtração através de Celite e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi lavado com EtOH, coletado pela filtração e secado para dar o composto do título (824 mg, 79 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,36 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,70 (1H, q, J = 10,4 Hz), 1,86-2,00 (1H, m), 2,25 (1H, q, J = 10,4 Hz), 2,30-2,39 (1H, m), 2,42-2,63 (4H, m), 4,14-4,27 (2H, m), 4,27-4,37 (1H, m),7,49 (2H, brs), 8,22 (1H, s).

[0441] 50J) Preparação de ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-2’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef]- [1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0442] NaOH 2 N (10,0 ml) foi adicionado a uma mistura de etila 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-2’-metil-8’-oxoespiro[ciclo- butano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato (768 mg, 2,03 mmol) em EtOH (20 ml) na temperatura ambiente e a mistura foi aquecida a 50° C por 3 horas. HCl 2 N (10,0 ml) e água foram adicionados à mistura de reação. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado sucessivamente com água e secado para dar o composto do título (703 mg, 99 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,37 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,70 (1H, q, J = 11,0 Hz), 1,88-2,02 (1H, m), 2,31 (1H, q, J = 11,0 Hz), 2,37-2,69 (5H, m), 4,30-4,42 (1H, m), 7,43 (1H, brs), 8,47 (1H, s), 14,61 (1H, brs).

[0443] 50K) Preparação de ácido 9’-amino-10’-fluoro- 2’,3’-diidro-2’-metil-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclo- butano-1,4’-4H,8H]pirido[1,2, 3-ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0444] Uma solução de ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-2’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef]- [1,4] benzoxazepina]-7’-carboxílico (351 mg, 1,00 mmol), N-2-piridinil-1,2- etanodiamina (210 mg, 1,53 mmol) e trietilamina (0,22 ml) em DMSO (5 ml) foi agitada a 120° C por 5 horas. A mistura de reação foi adicionada às porções à água gelada a 0° C e a mistura foi extraída com CH2Cl2. Os extratos combinados foram secados em Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2 : MeOH = 10:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amorfo amarelo (278 mg, 59 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,29 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,67 (1H, q, J = 10,4 Hz), 1,84-1,99 (1H, m), 2,21 (1H, q, J = 10,4 Hz), 2,30-2,40 (1H, m), 2,40-2,62 (4H, m), 3,40-3,50 (2H, m), 3,53-3,67 (2H, m), 4,08-4,20 (1H, m), 5,91 (1H, brs), 6,42-6,50 (2H, m), 6,65 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,00 (2H, brs), 7,32-7,38 (1H, m), 7,94 (1H, dd, J = 4,9 e 1,2 Hz), 8,25 (1H, s), 15,24 (1H, s). HRESIMS (+) 467,20453 (Calculado para C24H27FN5O4,468,20471). Exemplo 51: Ácido 9’-amino-10’-fluoro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,3’(4’H)- [2H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4 ]benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0445] 51A) Preparação de 5-[[1-(hidroximetil)ciclobutil]- metil-amino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0446] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluorofenil)-pentanoato de etila (2,80 g, 10,6 mmol), Ac2O (6,01 ml, 63,6 mmol) e ortoformiato de trietila (3,53 ml, 21,2 mmol) foi aquecida a 120° C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. O produto bruto foi dissolvido em tolueno (30 ml) e uma suspensão de cloridreto de [1-(aminometil)ciclobutil]]metanol (1,60 g, 10,6 mmol) em tolueno (20 ml) e trietilamina (1,48 ml, 10,6 mmol) foram adicionadas sob esfriamento com gelo. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 6 horas e concentrada a vácuo para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano : EtOAc 10 : 1 ^ 2 : 1) para produzir o composto do título (1,88 g, 46 %) como um sólido branco. 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,95-1,12 (3H, m), 1,66-1,69 (1H, m), 1,81-1,91 (4H, m), 1,94-2,03 (2H, m), 3,57 (2H, d, J = 6,7 Hz), 3,72 (2H, d, J = 4,3 Hz), 4,00-4,10 (2H, m), 6,96-7,12 (1H, m), 8,09-8,15 (1H, m), 9,65-11,15 (1H, m).

[0447] 51B) Preparação de 10’,11’-difluoro-8’- oxoespiro[ciclo-butano-1,3’(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0448] Uma solução de 5-[[1- (hidroximetl)ciclobutil]metilamino]2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila (1,88 g, 4,83 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionado a uma suspensão de 60 % de NaH em óleo (424 mg, 10,6 mmol) em DMF (15 ml) sob atmosfera de argônio e esfriamento com gelo. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por uma hora, depois a 90° C por uma adicional de uma hora. A mistura foi depois vertida em água gelada e o precipitado foi coletado pela filtração a vácuo e lavado com hexano e água para produzir o composto do título (1,41 g, 84 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,29 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,80-2,09 (6H, m), 4,24 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,43 (2H, s), 4,61 (2H, s), 7,73 (1H, dd, J = 10,4, 7,9 Hz), 8,74 (1H, s). EIMS (+): 349 [M]+.

[0449] 51C) Preparação de 10’,11’-difluoro-9’-nitro-8’- oxoespiro[ciclobutano-1,3’(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0450] Uma solução de 10,11-difluoro-8- oxoespiro[ciclobutano-1,3’(4’H)-[2H,8H]- pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7-carboxilato de etila (1,29 g, 3,69 mmol) em H2SO4 concentrado (15 ml) foi tratada às porções com KNO3 sólido (523 mg, 5,17 mmol) a 0° C. Depois de agitar a 0° C por 3 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com água e colocado em suspensão em EtOH quente. A mistura de reação foi agitada no refluxo por 1 hora, esfriada até a temperatura ambiente e o precipitado foi coletado pela filtração para produzir o composto do título (1,20 g, 82 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,80-1,88 (1H, m), 1,92-2,00 (2H, m), 2,02-2,09 (3H, m), 4,23 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,51 (2H, s), 4,61 (2H, s), 8,81 (1H, s). ESIMS (+): 395 [M + H]+.

[0451] 51D) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro-8’- oxoespiro -[ciclobutano-1,3’(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0452] Uma solução de 10’,11’-difluoro-9’-nitro-8’-oxo espiro-[ciclobutano-1,3’(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina]- 7’-carboxilato de etila (1,18 g, 2,99 mmol) em DMF (60 ml) foi tratada com hidrogênio sob pressão (0,35 MPa) em 10 % de Pd/C (120 mg) a 50° C por 7 horas. O catalisador foi removido pela filtração através de Celite e gel de sílica (50 g) foi adicionado ao filtrado. A mistura foi agitada por 30 minutos, o gel de sílica foi removido pela filtração e o solvente foi removido a vácuo. O precipitado foi lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título (320 mg, 29 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,76-2,04 (6H, m), 4,17-4,26 (4H, m), 4,51 (2H, s), 7,57 (2H, brs), 8,52 (1H, s). ESIMS (+): 365 [M + H]+.

[0453] 51E) Preparação de ácido 9’-amino-10’,11’- difluoro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,3’(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3- d][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0454] Uma solução de etila 9’-amino-10’,11’-difluoro-8’- oxo-espiro[ciclobutano-1,3’-(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxilato (300 mg, 0,823 mmol) em uma mistura de AcOH-H2O-H2SO4 (2:1:0,3 v/v, 6,6 ml) foi aquecida a 100° C por 2 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (242 mg, 87 %) como um sólido marrom 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,76-2,07 (6H, m), 4,27 (2H, s), 4,69 (2H, s), 7,48 (2H, brs), 8,92 (1H, s), 14,63 (1H, s). ESIMS (+): 337 [M + H]+.

[0455] 51F) Preparação de ácido 9’-amino-10’-fluoro-8’- oxo-11-[2-(piridin-2-ilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,3’(4’H)- [2H,8H]-pirido[1,2,3-ef][1,4]benzoxazepina-7’-carboxílico.

[0456] Uma solução de ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro-8’- oxo-espiro[ciclobutano-1,3’(4R)-[2H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico (220 mg, 0,654 mmol), N-2-piridinil- 1,2-etanodiamina (135 mg, 0,981 mmol) e trietilamina (0,137 ml, 0,981 mmol) em DMSO (5 ml) foi agitada a 100° C por 5 horas. O precipitado foi removido pela filtração através de Celite, a água foi adicionada ao filtrado e o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título (197 mg, 66 %) como um sólido marrom claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,73-1,87 (3H, m), 1,91-2,06 (3H, m), 3,43-3,47 (2H, m), 3,53-3,60 (2H, m), 4,02 (2H, s), 4,55 (2H, s), 6,25-6,32 (1H, m), 6,45-6,49 (2H, m), 6,65-6,73 (1H, m), 7,02 (2H, brs), 7,35 (1H, td, J = 6,7, 1,8 Hz), 7,95 (1H, dd, J = 5,5, 1,2 Hz), 8,65 (1H, s), 15,25 (1H, s). HRESIMS (+): 454, 18998 (+0,93 mmu).

[0457] Exemplo 52: Ácido 9’-amino-10’-fluoro-8’-oxo- 11’-[2-(2-piridilamino)-etilamino]espiro[ciclopropano-1,3’(4’H)- [2H,8H]pirido[1,2,3-ef]-benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0458] 52A) Preparação de 3-[[1- (hidroximetil)ciclopropil]-metil-amino]-2-(pentafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0459] Uma solução de 3-oxo-3- (pentafluorofenil)pentanoato de etila (7,01 g, 24,8 mmol), Ac2O (14,0 ml, 148 mmol) e ortoformiato de trietila (8,25 ml, 49,6 mmol) foi aquecida a 120° C por 2 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. O produto bruto foi dissolvido em tolueno anidro (120 ml) e [1-(aminometil)- ciclopropil]]metanol (2,51 g, 24,8 mmol) foi adicionado muito lentamente a 0° C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 3 horas e o solvente foi removido pela evaporação. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano : EtOAc 2:1) para produzir o composto do título (7,30 g, 75 %) como um sólido amarelo claro. Pf. 74,5-76,0° C. 1H- RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,57-0,63 (4H, m), 1,12 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,62 (2H, t, J = 5,5 Hz), 3,50 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,98-4,17 (2H, m), 8,17 (1H, d, J = 5,5 Hz), 11,22 (1H, brs). EIMS (+) 393 [M]+. Análise calculada para C17H16F5NO4: C, 51,80; H, 3,90; N, 3,56. Encontrado: C, 51,91; H, 4,10; N, 3,56.

[0460] 52B) Preparação de 9’,10’,11’-trifluoro-8’- oxoespiro[ciclopropano-1,3’(4H)-[2H,8H]pirido[1,2,3-ef]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila.

[0461] Uma solução de NaH (920 mg, 23,0 mmol, 60 % em óleo) em DMF (50 ml) foi esfriada até 0° C e tratada às gotas com 3-[[1- (hidroximetil)ciclopropil]metilamino]-2-(pentafluorobenzoil)acrilato de etila (4,10 g, 10,4 mmol) em DMF (10 ml). A mistura de reação foi agitada 4 horas na temperatura ambiente e por uma adicional de uma hora a 80° C. A mistura de reação foi depois vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração e lavado com água. O sólido resultante foi dissolvido em 100 ml de EtOH-CH2Cl2 (2:1) e filtrado. O filtrado foi concentrado a 30 ml e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com EtOH e secado para produzir o composto do título (2,45 g, 67 %) como um sólido amarelo claro. P.f. 209 a 211° C. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO) δ 0,56 ( 2H, t, J = 6,1 Hz), 0,77 (2H, t, J = 6,1 Hz), 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 4,20 (2H, s), 4,21 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,49 (2H, s). EIMS (+) 353 [M] +.

[0462] 52C) Preparação de 10’,11’-difluoro-9’-(2,4- dimetóxi-benzilamino)-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,3’(4’H)- [2H,8H]pirido[1,2,3-ef]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0463] Uma solução de 9’,10’,11’-trifluoro-8’- oxoespiro[ciclo-propano-1,3’(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3-ef]benzoxazepina]- 7’-carboxilato de etila (1,51 g, 4,27 mmol) e trietilamina (0,890 ml, 6,34 mmol) e 2,4-dimetoxibenzilamina (0,635 ml, 4,29 mmol) em tolueno (30 ml) foi agitada a 90° C por 6 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura, secado em Na2SO4 anidro e o solvente foi removido. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano : EtOAc 2:3) para produzir o composto do título (1,48 g, 69 %) como um sólido amarelo.

[0464] P.f. 131-132° C. 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,58 (2H, t, J = 5,5 Hz), 0,75 (2H, t, J = 5,5 Hz), 1,36 (3H, t, J = 7,3 Hz), 3,78 (3H, s), 3,82 (3H, s), 4,03 (2H, s), 4,26 (2H, brs), 4,35 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,59 (2H, dd, J = 6,1, 3,0 Hz), 6,37-6,46 (2H, m), 7,23 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,01 (1H, s), 10,48 (1H, brs). EIMS (+) 500 [M] +.

[0465] 52D) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro-8’- oxo-espiro[ciclopropano-1,3’(4H)-[2H,8H]pirido[1,2,3-ef]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila.

[0466] Uma solução de 10’,11’-difluoro-9’-(2,4- dimetoxibenzil-amino)-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,3’(4’H)- [2H,8H]pirido[1,2,3-ef]-benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (1,42 g, 2,84 mmol) em ácido trifluoroacético (30 ml) foi agitada na temperatura ambiente por 15 minutos. A mistura de reação foi diluída com CH2Cl2 e lavada com NaHCO3 saturado, salmoura e secada em Na2SO4 anidro. O solvente foi removido e o sólido resultante foi dissolvido em DMF e filtrado. O filtrado foi vertido em água e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (835 mg, 84 %) como um sólido amarelo. P.f. 278-279° C. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO) δ 0,50 (2H, dd, J = 6,1, 4,8 Hz), 0,71 (2H, dd, J = 6,1, 4,8 Hz), 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 4,03 (2H, s), 4,17 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,44 (2H, s), 7,68 (2H, brs), 8,32 (1H, s). ESIMS (+): 351 [M + H].

[0467] 52E) Preparação de ácido etil 9’-amino-10’,11’- difluoro-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,3’(4’H)-(2H,8H]pirido[1,2,3- ef]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0468] Uma solução de 9’-amino-10’,11’-difluoro-8’- oxoespiro-[ciclopropano-1,3’-(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3- ef]benzoxazepina]7’-carboxilato de etila (830 mg, 2,37 mmol) e NaOH 1 M aq. em EtOH (20 ml) foi agitada no ambiente 50° C por 3 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em água. A solução foi acidificada até o pH 7 com HCl 2 M e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com água e secado para produzir o composto do título (757 mg, 99 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN 400 M Hz, DMSO) δ 0,51 (2H, dd, J = 6,1, 4,8 Hz), 0,73 (2H, dd, J = 6,1, 4,8 Hz), 4,07 (2H, s), 4,62 (2H, s), 7,58 (2H, brs), 8,67 (1H, s), 14,66 (1H, s). ESIMS (+): 323[M + H].

[0469] 52F) Preparação de ácido 9’-amino-10’-fluoro-8’- oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclopropano-1,3’(4’H)-[2H,8H]- pirido-[1,2,3-ef]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0470] Uma solução de ácido etil 9’-amino-10’,11’- difluoro-8’-oxoespiro[ciclopropano-1,3’-(4’H)-[2H,8H]pirido[1,2,3- ef]benzoxazepina]-7’-carboxílico (505 mg, 1,57 mmol), trietilamina (0,320 ml, 2,30 mmol) e N-2-piridinil-1,2-etanodiamina (322 mg, 2,35 mmol) em DMSO (8 ml) foi agitada a 100° C por 3 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi removido pela filtração, lavado com etanol e secado para produzir o composto do título (595 mg, 86 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO) δ 0,39 (2H, t, J = 6,1 Hz), 0,68 (2H, t, J = 6,1 Hz), 3,40-3,50 (2H, m), 3,52-3,64 (2H, m), 3,86 (2H, s), 4,48 (2H, brs), 6,28 (1H, brs), 6,40-6,50 (2H, m), 6,66 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,09 (2H, brs), 7,34 (1H, td, J = 6,7, 1,8 Hz), 7,90-7,98 (1H, m), 7,908,00 (1H, m), 8,43 (1H, s), 15,26 (1H, s). ESIMS (+): 440[M + H]+.

[0471] Exemplo 53: Ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-ef]-[1,4]benzodiazepino]-7’-carboxílico 53A) Preparação de (1-hidroxiciclobutil)acetato de etila.

[0472] Trimetilclorosilano (1,14 ml, 8,92 mmol) foi adicionado por seringa a uma suspensão de pó de zinco (7,97 g, 0,122 mol) em Et2O absoluto (200 ml). A mistura foi agitada por 15 minutos na temperatura ambiente, aquecida ao refluxo, a fonte de calor foi removida e bromoacetato de etila (10,3 ml, 92,9 mmol) foi adicionado em uma taxa tal que a solução de éter ferveu suavemente. Depois de ser aquecida por uma hora no refluxo, a mistura foi agitada por um adicional de uma hora na temperatura ambiente. Uma solução de ciclopentanona (6,00 g, 75,9 mmol) em éter (30 ml) foi adicionado enquanto a temperatura da mistura foi mantida de 19 a 20° C pelo esfriamento intermitente. A mistura foi agitada por 1 hora na temperatura ambiente e vertida em amônia gelada a 25 % (400 ml). A fase aquosa foi extraída com éter, as fases orgânicas combinadas foram secadas em K2CO3 e o solvente foi evaporado para produzir o composto do título como um óleo incolor (6,50 g, 54 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,29 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,47-1,64 (1H, m), 1,76-1,87 (1H, m), 1,93-2,06 (2H, m), 2,12-2,22 (2H, m), 2,67 (2H, s), 3,70 (1H, s), 4,19 (2H, q, J = 7,3 Hz). 53B) Preparação de [1-(benzoilamino)ciclobutil]acetato de etila.

[0473] H2SO4 (2,20 ml, 41,3 mmol) foi lentamente adicionado a uma mistura de etila (1-hidroxiciclobutil)acetato (6,45 g, 40,8 mmol) e benzonitrila (40 ml, 0,392 mol) na temperatura ambiente. A mistura foi agitada por 1 hora na temperatura ambiente, depois por um adicional de uma hora a 80° C. A mistura foi esfriada em um banho de água gelada e a solução 2 N de NaOH foi adicionada até que a solução atingiu o pH = 7. A mistura foi extraída com acetato de etila e os extratos orgânicos combinados foram secados em Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 5:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (5,40 g, 51 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,22 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,84-2,07 (2H, m), 2,22-2,32 (2H, m), 2,44-2,55 (2H, m), 3,05 (2H, s), 4,11 (2H, q, J = 7,3 Hz), 6,73 (1H, s), 7,39-7,52 (3H, m), 7,72-7,79 (2H, m).

[0474] 53C) Preparação do ácido [1- (benzoilamino)ciclobutil] acético.

[0475] KOH 3 N (10 ml, 30 mmol) foi adicionado a uma solução de 1-(benzoilamino)-ciclobutilacetato de etila (3,87 g, 14,8 mmol) em EtOH (30 ml) na temperatura ambiente e a mistura foi agitada por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada a vácuo e HCl 6 N (5,0 ml) foi adicionado. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado sucessivamente com água e éter diisopropílico e secado para dar o composto do título (3,15 g, 91 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,76-1,89 (2H, m), 2,16-2,26 (2H, m), 2,28-2,40 (2H, m), 2,90 (2H, s), 7,43 (2H, t, J = 6,7 Hz), 7,50 (1H, t, J = 6,7 Hz), 7,83 (2H, d, J = 6,7 Hz), 8,45 (1H, s), 12,00 (1H, brs).

[0476] 53D) Preparação de [1- (benzoilamino)ciclobutil]acetamida.

[0477] Uma mistura de ácido [1-(benzoilamino)ciclobutil]acético (1,00 g, 4,29 mmol) e cloreto de tionila (3,20 ml, 43,9 mmol) foi agitado na temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi concentrada a vácuo. amônia aquosa a 25 % (30 ml) foi adicionada a uma mistura do resíduo em THF (30 ml) esfriada em um banho de água gelada. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi depois diluída com AcOEt-MeOH (3:1 v/v) e lavada com água. A camada orgânica foi secada em Na2SO4 anidro, filtrado e concentrado a vácuo para dar o composto do título (925 mg, 93 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,75-1,87 (2H, m), 2,14-2,23 (2H, m), 2,37-2,47 (2H, m), 2,70 (2H, s), 6,80 (1H, s), 7,29 (1H, s), 7,43 (2H, t, J = 6,7 Hz), 7,50 (1H, t, J = 6,7 Hz), 7,82 (2H, d, J = 6,7 Hz), 8,39 (1H, s).

[0478] 53E) Preparação (benzilamino)ciclobutil]etilamina.

[0479] LiAlH4 (570 mg, 15,0 mmol) foi adicionado às porções a uma solução de [1-(benzoilamino)ciclobutil]acetamida (687 mg, 3,00 mmol) em THF (30 ml) na temperatura ambiente no curso de 30 minutos e a mistura foi aquecida ao refluxo por 5 horas. A mistura foi esfriada em um banho de água gelada, THF aquoso e poucas gotas de água foram adicionados e a mistura foi deixada repousar durante a noite. A mistura foi filtrada através de Celite e a solução foi secada em Na2SO4 anidro. A solução foi concentrado a vácuo para dar o composto do título como um óleo amarelo claro (609 mg, 99 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,65-1,80 (2H, m), 1,82 (2H, t, J = 7,3 Hz), 1,86-2,02 (4H, m), 2,82 (2H, t, J = 7,3 Hz), 3,65 (2H, s), 7,20-7,38 (5H, m).

[0480] 53F) Preparação de 2-[1-(benzilamino)ciclobutil]- N(terc-butoxicarbonil)etilamina.

[0481] Boc2O (230 mg, 1,05 mmol) foi adicionado a uma solução de 2-[1-(benzilamino)ciclobutil]etilamina (205 mg, 1,00 mmol) em THF (1 ml) em um banho de água gelada. A mistura foi agitada por 30 minutos em um banho de água gelada. A mistura foi concentrada a vácuo e a cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (164 mg, 54 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,36 (9H, s), 1,60-1,84 (6H, m), 1,84-1,94 (2H, m), 2,92-3,04 (2H, m), 3,53 (2H, s), 6,83 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,21 (1H, t, J = 7,3 Hz), 7,29 (2H, t, J =7,3 Hz), 7,35 (2H, d J = 7,3 Hz). 53G) Preparação de 2-(1-aminociclobuti1)-N-(terc-butóxi-carbonil)etilamina.

[0482] A uma solução de 2-[1-(benzilamino)ciclobutil]-N- (terc-butoxicarbonil)etilamina (117 mg, 0,384 mmol) em EtOH (5 ml) foram adicionados 10 % de Pd-C (35 mg) e a mistura foi agitada sob gás de H2 5 kgf/cm2 na temperatura ambiente por 5 horas. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo. A destilação do resíduo deu o composto do título como um sólido incolor (76,0 mg, 92 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,37 (9H, s), 1,49-1,58 (2H, m), 1,62-1,77 (4H, m), 1,82-1,91 (2H, m), 2,92-3,01 (2H, m), 6,78 (1H, t, J = 5,5 Hz). 53H) Preparação de 3-[1-[2-(terc-butoxicarbonilamino)etil] ciclobutilamino]- 2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0483] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluorofenil)-pentanoato de etila (5,28 g, 20,0 mmol),

[0484] Ac2O (11,4 ml, 0,121 mol) e ortoformiato de trietila (6,66 ml, 40,0 mmol) foi aquecida a 120° C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. 2-[1-(benzilamino)ciclobutil]- N-(terc-butoxicarbonil)etilamina (4,29 g, 20,0 mmol) em tolueno anidro (30 ml) foi lentamente adicionada a uma mistura de o resíduo em tolueno anidro (70 ml) a 0° C e agitada na temperatura ambiente por 1 hora. O solvente foi removido pela evaporação e a cromatografia por vaporização instantânea (AcOEt : Hexano = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um óleo amarelo claro (9,10 g, 93 %). 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 0,98 (0,7H, t, J = 7,3 Hz), 1,10 (2,3H, t, J = 7,3 Hz), 1,43 (9H, s), 1,90-2,07 (4H, m), 2,17-2,38 (4H, m), 3,12-3,23 (2H, m), 4,00-4,15 (2H, m), 4,53-4,65 (1H, br), 6,957,03 (0,7H, m), 7,05-7,13 (0,3H, m), 8,13 (1H, d, J = 14,1 Hz), 9,88 (0,3H, d, J = 13,5 Hz), 11,29 (0,7H, d, J = 13,5 Hz). HRMS (ESI) para C18H19F4NO4 [M + H]+: calculado, 489,20126; encontrado, 489,20200.

[0485] 53I) Preparação de 1’-(terc-butoxicarbonil)-10’,11’- difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- d][1,4]benzodiazepino]-7’-carboxilato de etila.

[0486] Uma solução de 3-[1-[2-(terc- butoxicarbonilamino)etil]-ciclobutilamino]-2-(2,3,4,5- tetrafluorobenzoil)acrilato de etila (500 mg, 1,02 mmol) em DMF (5 ml) foi esfriada em um banho de água gelada. NaH (82,0 mg, 2,05 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada por 30 minutos, depois na temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi esfriada 0° C e a água foi adicionada às porções à mistura. O precipitado resultante foi combinado pela filtração, lavado sucessivamente com água e éter diisopropílico e secado para dar o composto do título (312 mg, 68 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,28 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,42 (5H, s), 1,54 (4H, s), 1,67-1,80 (1H, m), 1,80-1,95 (1H, m), 2,10-2,22 (1H, m), 2,22-2,37 (2H, m), 2,40-2,56 (1H, m), 2,65-2,80 (2H, m), 4,17-4,37 (3H, m), 7,93-8,01 (1H, m), 8,47 (0,44H, s), 8,51 (0,56H, s).

[0487] 53J) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzodiazepino] -7’-carboxilato de etila.

[0488] Uma solução de l’-(terc-butoxicarbonil)-10’,11’- difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]-benzodiazepino]-7’-carboxilato de etila (5,50 g, 12,3 mmol) em H2SO4 concentrado (60 ml) foi tratada às porções a 0° C com KNO3 sólido (1,37 g, 13,6 mmol). Depois de agitar a 0° C por 1 hora, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi combinado pela filtração e lavado com água. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2-AcOEt = 1:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo (3,28 g, 68 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,63-1,75 (1H, m), 1,85-1,98 (1H, m), 2,35-2,57 (6H, m), 3,47-3,55 (2H, m), 4,22 (2H, q, J = 7,3 Hz), 6,96-7,02 (1H, m), 8,32 (1H, s).

[0489] 53K) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-4][1,4]benzo- diazepino]-7’-carboxilato de etila.

[0490] Uma solução de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzodiazepino] -7’-carboxilato de etila (1,23 g, 3,13 mmol) em DMF (77 ml) foi tratada com hidrogênio sob pressão atmosférica em 10 % de Pd/C (250 mg) a 50° C por 1 hora. O catalisador foi removido pela filtração em celite e o filtrado foi concentrado a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2-MeOH = 2:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo (1,00 g, 88 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,62-1,73 (1H, m), 1,82-1,96 (1H, m), 2,24-2,41 (4H, m), 2,45-2,60 (2H, m), 3,27-3,38 (2H, m), 4,19 (2H, q, J = 7,3 Hz), 5,28-5,34 (1H, m), 7,10 (2H, brs), 8,12 (1H, s).

[0491] 53L) Preparação do ácido 9’-amino-10’,11’- ditluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzo- diazepino]-7’-carboxílico.

[0492] NaOH 2 N (7,0 ml, 14,0 mmol) foi adicionado a uma mistura de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclo- butano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]-benzodiazepino]-7’-carboxilato de etila (515 mg, 1,41 mmol) em EtOH (15 ml) na temperatura ambiente e a mistura foi aquecida por 3 horas a 50° C. HCl 2 N (7,0 ml) e água foram adicionados à mistura de reação. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado sucessivamente com água e secado para dar o composto do título (397 mg, 83 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,61-1,73 (1H, m), 1,82-1,97 (1H, m), 2,30-2,44 (4H, m), 2,55-2,69 (2H, m), 3,25-3,50 (2H, m), 5,53-5,59 (1H, br), 7,03 (2H, brs), 8,35 (1H, s), 14,75 (1H, s).

[0493] 53M) Preparação do ácido 9’-amino-10’-fluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H, 8H]pirido[1,2,3-ef][1,4]benzodiazepino]-7’-carboxílico.

[0494] Uma solução do ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’oxo-espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,4]benzo-diazepino]-7’-carboxílico (300 mg, 0,895 mmol), N-(2- piridinil)-1,2-etanodiamina (185 mg, 1,35 mmol) e trietilamina (0,23 ml) em DMSO (4 ml) foi agitada a 120° C por 5 horas. A mistura de reação foi adicionada às porções à água gelada e a mistura foi extraída com CH2CH2. A camada orgânica foi secado em Na2SO4 anidro e concentrada a vácuo. A cromatografia por vaporização instantânea (CH2Cl2-MeOH = 10:1) do resíduo deu o composto do título como um sólido amarelo (259 mg, 64 %). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,58-1,70 (1H, m), 1,78-1,92 (1H, m), 2,21-2,38 (4H, m), 2,43-2,60 (2H, m), 3,19-3,37 (2H, m), 3,37-3,51 (4H, m), 4,50 (1H, t, J = 5,5 Hz), 5,50-5,58 (1H, br), 6,42-6,51 (2H, m), 6,65 (1H, t, J = 5,5 Hz), 6,82 (2H, brs), 7,36 (1H, td, J = 6,7 e 1,8 Hz), 7,95 (1H, dd, J = 4,9 e 1,2 Hz), 8,18 (1H, s), 15,28 (1H, s). HRESIMS (+) 453,20466 (Calculado para C23H26FN6O, 453,20504).

[0495] Exemplo 54: Acido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo- 10’[2-(2-piridilamino)etil-amino]espiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de]-[1,4]benzoxazina] -6‘-carboxílico.

[0496] 54A) Preparação de [3-(terc- butoxicarbonilamino)oxolan-3- il]metanol.

[0497] A uma solução do ácido 1-(terc- butoxicarbonilamino)ciclo-pentanocarboxílico (6,57 g, 28,4 mmol) em THF (60 ml) foi adicionado LiAlH4 (2,89 g, 61,0 mol) na temperatura ambiente. Depois de agitada por 5 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e agitada por 30 minutos. À mistura foi adicionado AcOEt e agitada por 30 minutos. A mistura foi filtrada e o filtrado foi extraído com AcOEt. A mistura de extração foi lavada com água e salmoura, secada em MgSO4 e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano : AcOEt 1:1) para dar [3-(terc-butoxicarbonilamino)-oxolan-3- il]metanol (2,82 g, 46 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ1,36 (9H, s), 1,84-1,91 (1H, m), 1,93-2,02 (1H, m), 3,46 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,593,62 (1H, d, J = 8,6 Hz), 3,66-3,70 (3H, m), 4,83 (1H, t, J = 5,5 Hz), 6,78 (1H, brs).

[0498] 54B) Preparação de cloridreto de (3-aminooxolan-3-

[0499] Uma solução de [3-(terc- butoxicarbonilamino)oxolan-3-il]metanol (2,50 g, 11,5 mmol) em HCl 4 M- dioxano (30 ml) foi agitada na temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada para dar cloridreto de (3-aminooxolan-3- il)metanol como um óleo amarelo claro (2,17 g, quant.). 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,89-2,01 (2H, m), 3,51-3,58 (2H, m), 3,66 (2H, s), 3,71-3,76 (1H, m), 3,86-3,92 (1H, m), 8,33 (3H, brs).

[0500] 54C) Preparação de 3-[3-[1- (hidroximetil)]oxolanilamino]- -(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etila.

[0501] Uma solução agitada de 2, 3, 4, 5 -tetrafluorobenzoil acetato de etila (3,04 g, 11,5 mmol), Ac2O (6,52 ml, 69,0 mmol) e ortoformiato de trietila (3,83 ml, 23,0 mmol) foi aquecida a 130° C por 3 horas. A mistura foi concentrada a vácuo e secada sob alto vácuo. O produto bruto foi dissolvido em EtOH (50 ml) e cloridreto de (3-aminooxolan-3- il)metanol (2,17 g, 11,5 mmol) , trietilamina (1,92 ml, 13,8 mmol) foram adicionados. Depois agitados na temperatura ambiente por 17 horas, a mistura foi concentrada a vácuo para produzir o produto bruto. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano: EtOAc 4 : 1 ^ 1 : 2) para produzir 3-[3-[1-(hidroximetil)oxolanil-amino]-(2,3,4,5- tetrafluorobenzoil)acrilato (4,18 g, 93 %) como um óleo amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO) δ 0,87 (3H x 1/4, t, J = 7,3 Hz), 0,99 (3H x 3/4, t, J = 7,3 Hz), 2,09-2,14 (2H, m), 3,56-3,74 (3H, m), 3,78-3,97 (5H, m), 5,50 (1H x 1/4, t, J = 5,5 Hz), 5,54 (1H x 3/4, t, J = 5,5 Hz), 7,33-7,46 (1H, m), 8,20-8,27 (1H, m), 9,88 (1H x 1/4, d, J = 14,7 Hz), 11,27 (1H x 3/4, d, J = 14,7 Hz).

[0502] 54D) Preparação de 9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[oxolano-3,3 % 2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila.

[0503] A uma solução de 3-[3-[1- (hidroximetil)oxolanilamino]-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)-acrilato (3,94 g, 10,6 mmol) em DMF (50 ml), 60 % de NaH em óleo (892 mg, 22,3 mmol) foi adicionado sob atmosfera de argônio e esfriamento com gelo. Depois de agitada a 60° C por 5 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e EtOH e secado para produzir 9’,10’-difluoro-7’-oxoespiro-[oxolano-3,3’(2’H)- [7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxilato de etila (2,93 g, 79 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 2,38-2,42 (2H, m), 3,78 (1H, d, J = 10,4 Hz), 3,92-3,98 (1H, m), 4,09-4,14 (1H, m), 4,20-4,25 (3H, m), 4,57 (1H, d, J = 11,6 Hz), 4,65 (1H, d, J = 11,6 Hz), 7,67 (1H, dd, J = 10,4, 8,6 Hz), 8,50 (1H, s).

[0504] 54E) Preparação de-9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’- oxoespiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila.

[0505] Uma solução de 9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[oxolano-3,3’ (2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (2,90 g, 8,26 mmol) em H2SO4 concentrado (40 ml) foi tratada às porções a 0° C com KNO3 sólido (1,17 g, 11,6 mmol). Depois de agitar a 0° C por 2 horas, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para produzir 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’-oxoespiro[oxolano-3,3’ (2’H)- [7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxilato de etila (3,20 g, 98 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,26 (3H, t, J = 7,3 Hz), 2,41-2,46 (2H, m), 3,78 (1H, d, J = 10,4 Hz), 3,92-3,98 (1H, m), 4,09-4,14 (1H, m), 4,21-4,29 (3H, m), 4,62 (1H, d, J = 11,6 Hz), 4,72 (1H, d, J = 11,6 Hz), 8,53 (1H, s).

[0506] 54F) Preparação de 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila

[0507] Uma mistura de 9’,10’-difluoro-8’-nitro-7’- oxoespiro-[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (3,15 g, 7,95 mmol) e ferro (2,66 mg, 47,7 mmol) em AcOH (40 ml) foi agitada a 90° C por 5 horas. Depois a mistura de reação foi concentrada a vácuo, DMF foi adicionado e a mistura foi filtrada através de Celite. O filtrado foi vertido em água e o precipitado resultante foi coletado pela filtração e secado para produzir 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro[oxolano-3,3’(2’,H)-[7H]pirido[1,2,3-de] [1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (1,54 g, 53 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 2,29-2,38 (2H, m), 3,72 (1H, d, J = 11,0 Hz), 3,90-3,96 (1H, m), 4,06-4,11 (1H, m), 4,15 (1H, d, J = 11,0 Hz), 4,19 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,32 (1H, d, J = 11,0 Hz), 4,41 (1H, d, J = 11,0 Hz), 7,42 (2H, brs), 8,34 (1H, s).

[0508] 54G) Preparação do ácido 8’-amino-9’,10’-difluoro- 7’-oxo-espiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico.

[0509] Uma solução de 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxoespiro-[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxilato de etila (1,51 g, 4,12 mmol) em uma mistura de AcOH-H2O- H2SO4 (2:1:0,3 v/v, 26,4 ml) foi aquecida a 100° C por 2 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada e agitada. Depois de 30 minutos, o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para produzir ácido 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’-oxo-espiro[oxolano- 3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxílico (1,32 g, 95 %) como um sólido amarelo claro 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 2,38-2,44 (2H, m), 3,76 (1H, d, J = 11,0 Hz), 3,91-3,97 (1H, m), 4,09-4,14 (1H, m), 4,25 (1H, d, J = 11,0 Hz), 4,38 (1H, d, J = 11,0 Hz), 4,50 (1H, d, J = 11,0 Hz), 7,36 (2H, brs), 8,59 (1H, s), 14,62 (1H, s).

[0510] 54H) Preparação de ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’- oxo-10’-[3-(2-piridil)propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de] [1,4] benzoxazina]-6’-carboxílica.

[0511] Uma solução de ácido 8’-amino-9’,10’-difluoro-7’- oxo-espiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico (300 mg, 0,887 mmol), 3-(2-piridil)propilamina (181 mg, 1,33 mmol) e trietilamina (0,185 ml, 1,33 mmol) em DMSO (4 ml) foi agitada a 100° C por 6 horas. À mistura de reação, água e a solução saturada de NH4Cl foram adicionados até o pH < 4 e agitada por 30 minutos. O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e EtOH e secado para produzir ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[3-(2-piridil)propilamino] espiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxílico (373 mg, 93 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,90-1,98 (2H, m), 2,26-2,39 (2H, m), 2,77 (2H, t, J = 7,3 Hz), 3,42-3,51 (2H, m), 3,73 (1H, d, J = 10,4 Hz), 3,91-3,97 (1H, m), 4,07-4,13 (1H, m), 4,16 (1H, d, J = 10,4 Hz), 4,24 (1H, d, J = 11,0 Hz), 4,35 (1H, d, J = 11,0 Hz), 6,01-6,10 (1H, m), 6,92 (2H, brs), 7,18 (1H, dd, J = 6,7, 5,5 Hz), 7,24 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,67 (1H, td, J = 7,3, 1,8 Hz), 8,42 (1H, s), 8,45 (1H, d, J = 4,3 Hz), 15,27(1H, s). HRESIMS (+) 455,17350 (Calculado para C23H23FN4O5, 455,17307). Exemplos de 55 a 81:

[0512] Usando-se os procedimentos apresentados acima, os compostos dos exemplos 55 a 81 foram preparados:

[0513] Exemplo 82: 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’- oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido- [1,2,3-ef] [1,5] benzoxazepina].

[0514] Uma mistura de ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)-etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]-pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxílico (300 mg, 0,662 mmol) e cianeto de sódio (325 mg, 6,63 mmol) em DMSO anidro (6 ml) foi agitada a 120° C por 3 horas. Depois de esfriar, a mistura de reação foi vertida em água gelada (100 ml) e extraída com EtOAc. A mistura de extração foi lavada com água e salmoura, secada em Na2SO4 e concentrada a vácuo . O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna (Chromatorex NH- DM2035 (Fuji Silysia Chemical Co., Ltd.) EtOAc) para dar o composto do título (197 mg, 72 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,60-1,72 (1H, m), 1,80-1,93 (1H, m), 2,28-2,44 (6H, m), 3,39 (2H, q, J = 5,5 Hz), 3,45-3,53 (2H, m), 4,10-4,19 (2H, m), 5,55 (1H, td, J = 6,1, 2,4 Hz), 5,64 (1H, d, J = 7,9 Hz), 6,42-6,47 (2H, m), 6,61 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,01 (2H, brs), 7,31-7,36 (1H, m), 7,44 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,94 (1H, dd, J = 4,9, 1,2 Hz). HRESIMS (+): 410,19901 (calculado para C22H25FN5O2, 410,19923).

[0515] Exemplos de 83 a 85:

[0516] Os seguintes compostos foram preparados da mesma maneira que 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2- piridilamino) etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]]pirido[1,2,3-ef][1,5] benzoxazepina] foi preparado acima. Os compostos foram preparados de acordo com o procedimento do exemplo 82:

[0517] Exemplo 86: 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’- oxo-11’-[2-(2-piridil-amino)-etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido-[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]- 7’-carboxamida.

[0518] Trietilamina (0,14 ml, 1,00 mmol) e cloroformiato de etila (0,076 ml, 0,795 mmol) foram adicionados a uma solução de ácido 9’- amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)-etilamino]- espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’- carboxílico (300 mg, 0,662 mmol) em DMF (5 ml) a 0° C. Depois de agitar a 0° C por 1,5 hora, NH3 aquoso a 25 % (5 ml) foi adicionado. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 6 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada (200 ml) e extraída com EtOAc. A mistura foi lavada com água e salmoura, secada em Na2SO4 e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna (CH2Cl2 : MeOH 50:1) para dar o composto do título (270 mg, 90 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,62-1,73 (1H, m), 1,90 (1H, q, J = 9,2 Hz), 2,28-2,47 (6H, m), 3,42 (2H, q, J = 5,5 Hz), 3,49-3,57 (2H, m), 4,11-4,25 (2H, m), 5,855,89 (1H, m), 6,42-6,49 (2H, m), 6,64 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,08 (2H, brs), 7,26 (1H, d, J = 4,9 Hz), 7,31-7,37 (1H, m), 7,95 (1H, dd, J = 4,9, 1,2 Hz), 8,26 (1H, s), 9,13 (1H, d, J = 4,9 Hz). HRESIMS (+): 453,20594 (calculado para C23H26FN6O3, 453,20504).

[0519] Exemplo 87: 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[3-(2- piridil)-propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]- benzoxazina]-6’-carboxamida.

[0520] O composto do título foi preparado a partir do composto do exemplo 54 de acordo com a procedimento do exemplo 86. 1H- RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,88-1,96 (2H, m), 2,18-2,25 (1H, m), 2,302,37 (1H, m), 2,76 (2H, t, J = 7,3 Hz), 3,37-3,47 (2H, m), 3,72 (1H, d, J = 10,4 Hz), 3,91-3,96 (1H, m), 4,05-4,12 (2H, m), 4,21 (1H, d, J = 11,6 Hz), 4,29 (1H, d, J = 11,6 Hz), 5,62-5,69 (1H, m), 7,01 (2H, brs), 7,17 (1H, dd, J = 6,7, 5,5 Hz), 7,23 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,33 (1H, d, J = 4,3 Hz), 7,67 (1H, td, J = 7,3, 1,8 Hz), 8,45 (1H, d, J = 4,3 Hz), 8,48 (1H, s), 9,18 (1H, d, J = 4,9 Hz).

[0521] Exemplo 88: 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’- oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2, 3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboidrazida.

[0522] Trietilamina (0,185 ml, 1,33 mmol) e cloroformiato de etila (0,100 ml, 1,04 mmol) foram adicionados a uma solução de ácido 9’- amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridil-amino)etilamino]- espiro [ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’- carboxílico (400 mg, 0,882 mmol) em DMF (6 ml) a 0° C. Depois de agitar a 0° C por 1,5 hora, monoidrato de hidrazina (4 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 6 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada (100 ml) e o sólido foi coletado pela filtração e secado para dar o composto do título (369 mg, 89 %) como um sólido amarelo. 1H- RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,63-1,73 (1H, m), 1,83-1,97 (1H, m), 2,262,55 (6H, m), 3,42 (2H, q, J = 6,1 Hz), 3,49-3,57 (2H, m), 4,12-4,25 (2H, m), 4,47 (2H, d, J = 4,3 Hz), 5,87 (1H, td, J = 6,1, 1,8 Hz), 6,42-6,48 (2H, m), 6,64 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,07 (2H, brs), 7,31-7,37 (1H, m), 7,95 (1H, dd, J = 5,5, 1,2 Hz), 8,23 (1H, s), 10,47 (1H, s). HRESIMS (+): 468,2143 (calculado para C23H27FN7O3, 468,2159).

[0523] Exemplo 89: ácido 9’-amino-10’fluoro-2’,3’-diidro- 8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido-[1,2,3-ei][1,5]benzoxazepina]-7’-carboidroxâmico.

[0524] Trietilamina (0,185 ml, 1,33 mmol) e cloroformiato de etila (0,100 ml, 1,04 mmol) foram adicionados a uma solução de ácido 9’- amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]- espiro [ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’- carboxílico (400 mg, 0,882 mmol) em DMF (6 ml) a 0° C. Depois de agitar a 0° C por 1,5 hora, NH2OH aquoso a 50 % (3 ml) foi adicionado. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 6 horas e vertida em água gelada (60 ml). O sólido resultante foi coletado pela filtração e secado. A recristalização do resíduo a partir do MeOH deu o composto do título (135 mg, 33 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,62-1,73 (1H, m), 1,84-1,97 (1H, m), 2,28-2,56 (6H, m), 3,42 (2H, q, J = 6,1 Hz), 3,50-3,57 (2H, m), 4,12-4,26 (2H, m), 5,87-5,93 (1H, m), 6,42-6,48 (2H, m), 6,64 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,05 (2H, brs), 7,32-7,36 (1H, m), 7,95 (1H, dd, J = 4,9, 1,2 Hz), 8,22 (1H, s), 9,02 (1H, d, J = 1,8 Hz), 11,54 (1H, d, J = 1,8 Hz). . HRESIMS (+): 469,2036 (calculado para C23H26FN6O4,469,2000).

[0525] Exemplo 90: 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-N- metil-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]-pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxamida.

[0526] Trietilamina (0,185 ml, 1,33 mmol) e cloroformiato de etila (0,100 ml, 1,04 mmol) foram adicionados a uma solução de ácido 9’- amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]- espiro [ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’- carboxílico (400 mg, 0,882 mmol) em DMF (6 ml) a 0° C. Depois de agitar a 0° C por 1,5 hora, metilamina 2 M em THF (4 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 6 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada (60 ml) e extraída com EtOAc. A mistura de extração foi lavada com água e salmoura, secada em Na2SO4 e concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna (CH2Cl2 : MeOH 20:1) para dar o composto do título (370 mg, 90 %) como um sólido amarelo. 1H- RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,62-1,73 (1H, m), 1,84-1,97 (1H, m), 2,282,48 (6H, m), 3,41 (3H, d, J = 4,9 Hz), 2,79 (2H, q, J = 5,5 Hz), 3,49-3,56 (2H, m), 4,12-4,24 (2H, m), 5,85 (1H, td, J = 5,5, 2,4 Hz), 6,42-6,48 (2H, m), 6,61-6,66 (1H, m), 7,07 (2H, brs), 7,31-7,36 (1H, m), 7,94 (1H, dd, J = 4,9, 1,8 Hz), 8,25 (1H, s), 9,64 (1H, q, J = 4,9 Hz). HRESIMS (+): 467,2182 (calculado para C23H28FN6O3,467,2207).

[0527] Exemplo 91: 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’- oxo-11’-[2-(2-piridil-amino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carbonitrila.

[0528] 91A) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro-[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxamida.

[0529] Trietilamina (2,50 ml, 17,9 mmol) e cloroformiato de etila (1,36 ml, 14,2 mmol) foram adicionados a uma suspensão de ácido 9’- amino-10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido [1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxílico (4,00 g, 11,9 mmol) em DMF (200 ml). Depois de agitar a 0° C por 2 horas, NH3 aquoso a 25 % (7 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada (1,5 litro) e o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para dar o composto do título(3,23 g, 81 %) como um sólido marrom. 1H- RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,64-1,76 (1H, m), 1,87-2,00 (1H, m), 2,352,48 (4H, m), 2,53-2,64 (2H, m), 4,30-4,42 (2H, m), 7,33-7,68 (3H, m), 8,44 (1H, s), 8,94 (1H, d, J = 4,3 Hz). ESIMS (+): 336 [M + H] +.

[0530] 91B) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro-[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef] [1,5]benzoxazepina]-7’-carbonitrila.

[0531] Trietilamina (4,38 ml, 31,4 mmol) e uma solução de anidrido trifluoroacético (2,68 ml, 19,3 mmol) em CH2Cl2 (30 ml) foram adicionados a uma suspensão de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’- oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]-benzoxazepina]-7’- carboxamida (1,70 g, 5,06 mmol) em CH2Cl2 (120 ml) a 0° C. Depois de agitar a 0° C por 1 hora, a mistura de reação foi lavada com água, NaHCO3 saturada aquosa e salmoura, secada em Na2SO4 e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado pela cromatografia em coluna (Chromatorex NH- DM2035 (Fuji Silysia Chemical Co., Ltd.) Hexano:CH2Cl2 1:1) para dar o composto do título (1,12 g, 70 %) como um sólido incolor. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) 5 1,62-1,73 (1H, m), 1,83-1,96 (1H, m), 2,35-2,57 (6H, m), 4,32-4,42 (2H, m), 7,48 (2H, brs), 8,41 (1H, s). ESIMS (+): 318 [M + H] +.

[0532] 91C) Preparação de 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]-pirido[1,2,3-ef] [1,5]benzoxazepina]-7’-carbonitrila.

[0533] Uma mistura de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’- diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carbonitrila (830 mg, 2,62 mmol), N-(2-piridil)- 1,2-etanodiamina (718 mg, 5,23 mmol) e trietilamina (0,730 ml, 0,330 mmol) em DMSO anidro (16 ml) foi agitada a 60° C por 10 horas. Depois de esfriar, a mistura de reação foi vertida em água gelada (150 ml) .O precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado. O sólido obtido foi purificado pela cromatografia em coluna (Chromatorex NH- DM2035 (Fuji Silysia Chemical Co., Ltd.) Hexano : CH2CI2 1:2 ^ CH2CI2 ^ CH2Cl2:MeOH 100:1) para dar o composto do título (860 mg) como um sólido marrom. O sólido foi purificado mais uma vez pela cromatografia em coluna (CH2Cl2:MeOH 30:1) para dar o composto do título (500 mg, 44 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,58-1,72 (1H, m), 1,80-1,92 (1H, m), 2,30-2,47 (6H, m), 3,41 (2H, q, J = 6,1 Hz), 3,48-3,56 (2H, m), 4,13-4,24 (2H, m), 5,93-6,01 (1H, m), 6,42-6,48 (2H, m), 6,65 (1H, t, J = 6,1 Hz), 7,05 (2H, brs), 7,31-7,37 (1H, m), 7,94 (1H, dd, J = 4,9, 1,2 Hz), 8,16 (1H, s). HRESIMS (+): 435,19403 (calculado para C23H24FN6O2, 435,19443).

[0534] Exemplo 92: 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[3-(2- piridil)-propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]- benzoxazina]-6’- carbonitrila.

[0535] Uma mistura de 8’-amino-9’-difluoro-7’-oxo-10’- [3-(2-piridil)propilamino]-espiro[oxolano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4] benzoxazina]-6’-carboxamida (165 mg, 0,364 mmol), POCl3 (167 mg, 1,09 mmol) e trietilamina (0,254 ml, 1,82 mmol) em CH2Cl2 (2 ml) foi agitada na temperatura ambiente por 10 horas. À mistura de reação, NaHCO3 saturada aquosa foi adicionada até o pH > 7 e extraída com AcOEt. A camada orgânica foi lavada com salmoura e secada em MgSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano:EtOAc 1:1 4 EtOAc 4 EtOAc:MeOH 10:1) para produzir 8’-amino- 9’-fluoro-7’-oxo-10’43-(2-piridil)-propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)- [7H]pirido[1,2,3-de][1,4]-benzoxazina]-6’-carbonitrila (42,4 mg, 27 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,88-1,95 (2H, m), 2,17-2,25 (1H, m), 2,35-2,42 (1H, m), 2,75 (2H, t, J = 7,3 Hz), 3,38-3,46 (2H, m), 3,70 (1H, d, J = 10,4 Hz), 3,89 (1H, td, J = 8,6, 5,5 Hz), 3,97 (1H, d, J = 10,4 Hz), 4,13-4,19 (1H, m), 4,22 (1H, d, J = 11,6 Hz), 4,24 (1H, d, J = 11,6 Hz), 5,73-5,80 (1H, m), 6,99 (2H, brs), 7,18 (1H, dd, J = 6,7, 5,5 Hz), 7,23 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,67 (1H, td, J = 7,3, 1,8 Hz), 8,23 (1H, s), 8,45 (1H, d, J = 4,3 Hz). HRESIMS (+) 436,17877 (Calculado para C23H22FN5O3, 436,17849).

[0536] Exemplo 93: 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’-diidro-8’- oxo-11’-[3-(1-imidazolil)propilamino]espiro-ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido- [1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carbonitrila.

[0537] O composto do título foi preparado a partir do 9’- amino-10’, 11’-difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]- pirido-[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carbonitrila usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. 1H-RMN (400 M Hz, CDCl3) δ 1,80-2,04 (2H, m), 2,06-2,13 (1H, m), 2,38-2,55 (6H, m), 3,44 (2H, dq, J = 2,4, 6,7 Hz), 4,06 (2H, t, J = 6,7 Hz), 4,31-4,40 (2H, m), 4,46 (1H, td, J = 6,7, 1,8 Hz), 6,50 (2H, brs), 6,93 (1H, t, J = 1,2 Hz), 7,09 (1H, t, J = 1,2 Hz), 7,49 (1H, s), 7,65 (1H, s). HRESIMS (+): 423,19445 (calculado para C23H23FN6O2, 423,19448).

[0538] Exemplo 94: ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-6’-metil-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano- 1,4’-[4H,8H]pirido-[1,2,3-ef] [1,5]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0539] 94A) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’,6’,7- tetraidro-6’-metil-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-ef]-[1,51benzoxazepina ]-7’-carboxilato de etila.

[0540] Cloreto de metilmagnésio 3 M em THF (10,8 ml, 32,4 mmol) foi adicionado sob atmosfera de argônio a uma mistura agitada de etila 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H] pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxilato (3,88 g, 9,84 mmol) e iodeto cuproso (562 mg, 2,95 mmol) em THF (200 ml) a -78° C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 24 horas, vertida em água gelada (1 litro). O HCl concentrado (50 ml) foi adicionado ao pH < 1 e a mistura agitada por 30 minutos. O produto bruto foi extraído com AcOEt, lavado com NaHCO3 saturado aquoso e salmoura, secado em MgSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano: EtOAc 20:1 4 5:1) para produzir o composto do título (1,71 g, 42 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,09 (3H, d, J = 6,1 Hz), 1,27 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,60-1,69 (1H, m), 1,72-1,83 (1H, m), 1,94-2,15 (4H, m), 2,24-2,35 (1H, m), 2,51-2,57 (1H, m), 4,28 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,39-4,50 (2H, m), 4,58-4,63 (1H, m), 11,64 (1H, s).

[0541] 94B) Preparação de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-6’- metil-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-d][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0542] Uma mistura de 10’,11’-difluoro-2’,3’,6’,7’- tetraidro-6’-metil-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-ef] [1,5] benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (1,50 g, 3,66 mmol) e dióxido de magnésio (32,0 g, 366 mmol) em CH2Cl2 (40 ml) foi agitada na temperatura ambiente por 40 horas. A mistura foi filtrada através de Celite e o filtrado concentrado a vácuo. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano: EtOAc 2:1 ^ 1:2) para produzir o composto do título (168 mg, 11 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,59-1,67 (1H, m), 1,81- 1,88 (1H, m), 2,08-2,18 (1H, m), 2,27 (3H, s), 2,34-2,54 (4H, m), 2,80-2,92 (1H, m), 4,20-4,27 (2H, m), 4,63-4,83 (2H, m).

[0543] 94C) Preparação de 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-6’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,5]-benzoxazepina]-7 ‘-carboxilato de etila.

[0544] Uma mistura de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-6’- metil-9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (160 mg, 0,392 mmol) e ferro (146 mg, 2,35 mmol) em AcOH (4 ml) foi agitada a 90° C por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada a vácuo e HCl 1 M aquoso foi adicionado. O produto bruto foi extraído com AcOEt, lavado sucessivamente com NaHCO3 saturado aquoso e salmoura, secado em MgSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O resíduo foi secado para produzir o composto do título (146 mg, 98 %) como um sólido amorfo amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,24 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,58-1,65 (1H, m), 1,75-1,87 (1H, m), 1,93-2,05 (1H, m), 2,16 (3H, s), 2,22-2,34 (2H, m), 2,37-2,46 (1H, m), 2,51-2,60 (1H, m), 2,682,80 (1H, m), 4,18-4,24 (2H, m), 4,26-4,36 (1H, m), 4,53-4,64 (1H, m), 7,23 (2H, brs).

[0545] 94D) Preparação de ácido 9’-amino-10’,11’- difluoro-2’,3’-diidro-6’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-ef]-[1,5]-benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0546] Uma mistura de 9’-amino-10’,11’-difluoro-2’,3’- diidro-6’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (136 mg, 0,359 mmol) e NaOH 1M aq. (1,4 ml) em EtOH (1,4 ml) foi agitada ao refluxo por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada a vácuo, o resíduo dissolvido em água e HCl 2 M aq. foi adicionado ao pH < 3. O precipitado resultante foi coletado pela filtração a vácuo, lavado com água e secado para produzir o composto do título (110 mg, 87 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,53-1,61 (1H, m), 1,77-1,85 (1H, m), 1,97-2,05 (1H, m), 2,28-2,40 (3H, m), 2,52-2,58 (1H, m), 2,60 (3H, s), 2,76-2,84 (1H, m), 4,38 (1H, td, J = 12,2, 4,3 Hz), 4,62 (1H, dd, J = 12,2, 6,7 Hz), 7,27 (2H, brs), 15,18 (1H, brs).

[0547] 94E) Preparação de ácido 9’-amino-10’-fluoro- 2’,3’-diidro-6’-metil-8’-oxo-11’-[2-(2- piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2, 3- ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0548] Uma solução de ácido 9’-amino-10’,11’-difluoro- 2’,3’-diidro-6’-metil-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,811]pirido[1,2,3- ef][1,5] benzoxazepina]-7’-carboxílico (100 mg, 0,285 mmol), N-(2-piridil)- 1,2-etanodiamina (58,7 mg, 0,428 mmol) e trietilamina (0,0597 ml, 0,428 mmol) em DMSO (3 ml) foi agitada a 100° C por 5 horas. Depois a mistura de reação foi vertida em. NH4Cl saturado aq, o produto bruto foi extraído com CH2Cl2, lavado com salmoura, secado em MgSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O produto bruto foi purificado cromatografia de camada fina preparativa (EtOAc: MeOH 20:1) para produzir o composto do título (70,3 mg, 53 %) como um sólido amarelo. ‘H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,49- 1,59 (1H, m), 1,72-1,79 (1H, m), 1,85-1,92 (1H, m), 2,23-2,32 (2H, m), 2,372,45 (2H, m), 2,57 (3H, s), 2,66-2,75 (1H, m), 3,40-3,47 (2H, m), 3,51-3,62 (2H, m), 4,19 (1H, td, J = 12,2, 3,7 Hz), 4,49 (1H, dd, J = 12,2, 6,7 Hz), 6,106,16 (1H, m), 6,43-6,49 (2H, m), 6,64-6,70 (1H, m), 6,88 (2H, brs), 7,34 (1H, t, J = 6,7 Hz), 7,95-7,96 (1H, m), 16,08 (1H, brs). HRESIMS (+): 468,20454 (Calculado para C24H26FN5O4, 468,2047). Exemplo 95: Ácido 9’-amino-10’-cloro-2’,3’-diidro-8’-oxo-11’-[2-(2- piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef]- [1,5]benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0549] 95A) Preparação de 10’-amino-11’-fluoro-2’,3’- diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0550] Uma mistura de 10’,11’-difluoro-2’,3’-diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (5,00 g, 12,7 mmol) e (NH4)2CO3 (11,0 g, 114 mmol) em DMF (50 ml) foi agitada a 90° C por 21 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada, o precipitado resultante foi coletado pela filtração a vácuo, lavado sucessivamente com AcOEt quente e EtOH quente e secado para produzir o composto do título (2,51 g, 50 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,24 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,65-1,76 (1H, m), 1,88-2,00 (1H, m), 2,41-2,46 (4H, m), 2,60-2,63 (2H, m), 4,19 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,47-4,50 (2H, m), 6,07 (2H, brs), 8,26 (1H, s).

[0551] 95B) Preparação de 10’-cloro-11’-fluoro-2’3,- diidro-9’- nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila.

[0552] 10’-amino-11’-fluoro-2’,3’-diidro-9’-nitro-8’- oxoespiro-[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’- carboxilato de etila (2,51 g, 6,41 mmol) foi adicionado a uma mistura de nitrato de terc-butila (1,14 ml, 9,62 mmol) e cloreto de cobre (II) (1,81 g, 12,8 mmol) em CH3CN (64 ml) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 20 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada (300 ml), o HCl concentrado (50 ml) foi adicionado ao pH < 1 e precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com EtOH quente e secado para produzir o composto do título (2,17 g, 82 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,67-1,75 (1H, m), 1,921,99 (1H, m), 2,41-2,53 (4H, m), 2,66-2,69 (2H, m), 4,22 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,60-4,63 (2H, m), 8,42 (1H, s).

[0553] 95C) Preparação de 9’-amino-10’-cloro-11’-fluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]- benzoxazepina]- 7’-carboxilato de etila.

[0554] Uma mistura de 10’-cloro-11’-fluoro-2’,3’-diidro- 9’-nitro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (2,17 g, 5,28 mmol) e ferro (1,97 g, 31,7 mmol) em AcOH (50 ml) foi agitada a 90° C por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada a vácuo, o resíduo foi dissolvido em AcOEt e agitado por 30 minutos. O precipitado resultante foi removido pela filtração através de Celite. O filtrado foi lavado sucessivamente com água, NaHCO3 saturado aquoso e salmoura, secado em MgSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O produto bruto foi lavado com EtOH quente para produzir o composto do título (1,03 g, 51 %) como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO- d6) δ 1,25 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,65-1,75 (1H, m), 1,89-1,96 (1H, m), 2,38-2,47 (4H, m), 2,52-2,59 (2H, m), 4,20 (2H, q, J = 7,3 Hz), 4,30-4,41 (2H, m), 7,337,55 (2H, m), 8,23 (1H, s).

[0555] 95D) Preparação de ácido 9’-amino-10’-cloro-11’- fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,5]-benzoxazepina]-7’-carboxílico

[0556] Uma solução de 9’-amino-10’-cloro-11’-fluoro- 2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-d][1,5]- benzoxazepina]-7’-carboxilato de etila (1,03 g, 2,70 mmol) em uma mistura de AcOH-H2O-H2SO4 (2:1:0,3 v/v, 6,6 ml) foi aquecida a 100° C por 2 horas. Água gelada foi adicionada e a mistura agitada por 30 minutos. O precipitado resultante foi coletado pela filtração a vácuo, lavado com água e secado para produzir o composto do título (908 mg, 95 %) como um sólido incolor. 1H- RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,65-1,74 (2H, m), 1,88-1,99 (2H, m), 2,402,69 (4H, m), 4,25-4,51 (2H, m), 7,73 (2H, brs), 8,49 (1H, s), 14,56 (1H, s).

[0557] 95E) Preparação de ácido 9’-amino-10’-cloro-2’,3’- diidro-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano-1,4’- [4H,8H]pirido[1,2,3-ef][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxílico.

[0558] Uma solução de ácido 9’-amino-10’-cloro-11’- fluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3- ef][1,5]-benzoxazepina]-7’-carboxílico (900 mg, 2,55 mmol), N-2-piridinil- 1,2-etanodiamina (525 mg, 3,83 mmol) e trietilamina (0,534 ml, 3,83 mmol) em DMSO (10 ml) foi agitada a 100° C por 7 horas. NH4Cl saturado aquoso foi adicionado à mistura de reação até o pH<3 e o precipitado resultante foi coletado pela filtração a vácuo e lavado com água. O produto bruto foi purificado pela cromatografia de camada fina preparativa (CH2Cl2: MeOH 50:1) para produzir o composto do título (565 mg, 47 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,64-1,72 (1H, m), 1,86-1,98 (1H, m), 2,32-2,66 (6H, m), 3,40-3,44 (2H, m), 3,62-3,66 (2H, m), 3,94-4,53 (2H, m), 6,00 (1H, t, J = 5,5 Hz), 6,44-6,47 (2H, m), 6,66 (1H, t, J = 5,5 Hz), 7,07-7,63 (3H, m), 7,94 (1H, dd, J = 5,5, 1,2 Hz), 8,29 (1H, s), 15,15 (1H, s). HRESIMS (+): 470,15831 (Calculado para C23H24ClN5O4, 470,1595). Exemplos 96 a 98:

[0559] Os compostos 96 a 98 podem ser preparado a partir do ácido 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico ou ácido 9’-amino-10’,11’- difluoro-2’,3’-diidro-8’-oxoespiro-[ciclobutano-1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3 -ef] [1,4]benzoxazepina]-7’-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima.

[0560] Exemplo 96: ácido 10-(3-(1H-imidazol-1- il)propilamino)-8-amino-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4- ij]quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carboxílico.

[0561] MS (EP) m/z: 442,0 (M + 1). (Calculado para C22H24FN5O4, 441,18).

[0562] Exemplo 97: ácido 9-amino-10-fluoro-8-oxo-11-(3- (piridin-2-ilamino)-pirrolidin-1-il)-3,8-diidro-2H-espiro[1,4]oxazepino[2,3,4- ij]-quinolina-4,1’-ciclobutano]-7-carboxílico.

[0563] 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,59-1,73 (1H, m), 1,81-1,97 (2H, m), 2,05-2,19 (1H, m), 2,47-2,51 (6H, m), 3,42-3,53 (1H, m), 3,85-3,97 (3H, m), 4,11-4,29 (3H, m), 6,44-6,51 (2H, m), 6,75 (1H, d, J = 6,1 Hz), 6,94 (2H, brs), 7,32-7,39 (1H, m), 7,96 (1H, dd, J = 6,1, 1,2 Hz), 8,26 (1H, s), 15,13 (1H, brs). HRESIMS (+): 480,20547 (Calculado para C25H27FN5O4, 480,20471).

[0564] Exemplo 98: ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’- (3-(piridin-2-ilamino)pirrolidin-1-il)-2’,7’-diidro-1’H-espiro[ciclopentano- 1,3’-pirido [3,2,1-ij]quinolina]-6’-carboxílico.

[0565] 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,72-2,04 (9H, m), 2,08-2,19 (1H, m), 3,50-3,58 (1H, m), 3,71-3,80 (1H, m), 3,81-3,90 (1H, m), 3,95-4,02 (1H, m), 4,08 (2H, s), 4,33-4,42 (1H, m), 6,44-6,51 (2H, m), 6,76 (1H, d, J = 6,1 Hz), 6,88 (2H, brs), 7,32-7,38 (1H, m), 7,97 (2H, dd, J = 4,9, 1,2 Hz), 8,38 (1H, s), 15,19 (1H, s). HRESIMS (+): 480,20378 (Calculado para C25H27FN5O4,480,20471).

[0566] Exemplo 99: 9-amino-10-fluoro-6-metil-11-(2- (piridin-2- ilamino)-etilamino)-2H-espiro[[1,4]oxazepino[2,3,4-ij]quinolina- 4,1’-ciclobutan]- 8(3H)-ona.

[0567] Uma mistura de ácido 9’-amino-10’-fluoro-2’,3’- diidro-6’-metil-8’-oxo-11’-[2-(2-piridilamino)etilamino]espiro[ciclobutano- 1,4’-[4H,8H]pirido[1,2,3-d][1,5]benzoxazepina]-7’-carboxílico (42,7 mg, 0,0913 mmol) e cianeto de sódio (46,1 mg, 0,913 mmol) em DMSO anidro (2 ml) foi agitada a 150° C por 8 horas. Depois de esfriar, a mistura de reação foi vertida em NaHCO3 saturado aquoso e extraída com EtOAc. A mistura de extração foi lavada com salmoura, secada em MgSO4 e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado pela TLC preparativa (Gel de sílica 60 (Merck Co., Ltd.) EtOAc: MeOH 10:1) para dar o composto do título (20,8 mg, 54 %) como um sólido amarelo. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,52-1,60 (1H, m), 1,73-1,79 (1H, m), 2,10 (3H, s), 3,27-3,33 (6H, m), 3,37-3,41 (2H, m), 3,43-3,51 (2H, m), 3,96-4,53 (2H, m), 5,41-5,47 (1H, m), 5,57 (1H, s), 6,426,47 (2H, m), 6,60 (1H, t, J = 5,5 Hz), 6,84 (2H, brs), 7,33 (1H, dd, J = 6,7, 1,8 Hz), 7,93-7,95 (1H, m). HRESIMS (+): 424,21446 (calculado para C23H26FN5O2, 424,21488).

[0568] Exemplo: 100: 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[3- (4,6-bistrifluoropiridin-2-il)propil-amino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)- [7H]pirido[1,2,3-de][1,4]-benzoxazina]-6’-carbonitrila. 100A) Preparação de 3-(4,6-bistrifluorometilpiridin-2-il)propilcarbamato de terc-butila.

[0569] A uma solução agitada de alilcarbamato de terc- butila (1,95 g, 12,4 mmol) em THF (12 ml), 0,5 mol/L de 9- borabiciclo[3,3,1]nonano (29,8 ml, 14,9 mmol) foi adicionado sob atmosfera de argônio na temperatura ambiente. Depois de agitado na temperatura ambiente por 4 horas, uma solução de 2-bromo-4,6-bistrifluorometilpiridina (3,65 g, 12,4 mmol) em DMF (12 ml), Pd(OAc)2 (278 mg, 1,24 mmol), DPPF (859 mg, 1,55 mmol) e K2CO3 (2,92 g, 21,1 mmol) foram adicionados à mistura de reação e agitados na temperatura ambiente por 7 horas. À mistura de reação, a água foi adicionada e o produto bruto foi extraído com EtOAc, lavado com salmoura, secado em NaSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano: EtOAc 10:1 ^ 2:1) para produzir 3-(4,6-bistrifluoro-metilpiridm-2- il)propilcarbamato de terc-butila (3,41 g, 74 %) como um sólido incolor. 1H RMN (CDCl3, 400 M Hz) δ 1,44 (9H, s), 1,96-2,03 (2H, m), 2,98-3,02 (2H, m), 3,20-3,25 (2H, m), 4,71 (1H, brs), 7,59 (1H, s), 7,72 (1H, s).

[0570] CIMS (+) 373 [M + H] +.

[0571] 100B) Preparação de 3-(4,6-bistrifluoropiridin-2- il)propilamina.

[0572] Uma solução de 3-(4,6-bistrifluorometilpiridin-2- il)propil-carbamato de terc-butila (3,10 g, 8,33 mmol) em 4 mol/L de cloreto de hidrogênio em EtOAc (20 ml) foi agitado na temperatura ambiente por 30 minutos. O solvente foi removido a vácuo e ao precipitado, 1 mol/L NaOH aq. foi adicionado para alcalinizar e o produto bruto foi extraído com EtOAc, lavado com salmoura, secado em NaSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O precipitado foi secado para produzir 3-(4,6-bistrifluoropiridin-2- il)propilamina (2,26 g, quant.) como um óleo amarelo.

[0573] 1H RMN (DMSO-d6, 400 M Hz) δ 1,54 (2H, brs), 1,73-1,80 (2H, m), 2,56 (2H, t, J = 6,7 Hz), 2,96 (211, t, J = 7,9 Hz), 8,06 (1H, s), 8,09 (1H, s).

[0574] CIMS (+) 273 [M + H] +.

[0575] 100C) Preparação de 8’-amino-9’,10-difluoro-7’- oxoespiro-[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carboxamida.

[0576] Uma solução de ácido 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo- 10’-[3-(piridin-2-il)propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de]-[1,4]benzoxazina]-6’-carboxílico (1,00 g, 2,96 mmol) cloroformiato de etila (0,312 ml, 3,26 mmol) e trietilamina (0,495 ml, 3,55 mmol) em DMF (15 ml) foi agitada sob atmosfera de argônio e esfriada com gelo por 2 horas. À mistura de reação, NH3 aquoso a 25 % (1 ml) foi adicionado e agitado na temperatura ambiente por 2 horas. À mistura de reação, a água foi adicionada e o produto bruto foi extraído com EtOAc, lavado com salmoura, secado em NaSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O precipitado foi secado para produzir 8’-amino-9’,10-difluoro-7’-oxoespiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido [1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxamida (186 mg, 81 %) como um sólido amarelo claro.

[0577] 1H RMN (DMSO-d6, 400 M Hz) δ 2,25-2,32 (1H, m), 2,35-2,42 (1H, m), 3,74 (1H, d, J = 11,0 Hz), 3,91-3,97 (1H, m), 4,06-4,12 (1H, m), 4,16 (1H, d, J = 11,0 Hz), 4,34 (1H, d, J = 11,6 Hz), 4,45 (1H, d, J = 11,6 Hz), 7,41 (2H, brs), 7,54 (1H, d, J = 4,3 Hz), 8,63 (1H, s), 8,98 (1H, d, J = 4,3 Hz).

[0578] 100D) Preparação de 8’-amino-9’,10-difluoro-7’- oxoespiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carbonitrila.

[0579] A uma solução agitada de 8’-amino-9’,10- difluoro-7’-oxoespiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de][1,4]benzoxazina]-6’-carboxamida (860 mg, 2,55 mmol) e trietilamina (1,78 ml, 12,8 mmol) em CH2Cl2 (26 ml), cloreto de fosforila (1,17 g, 7,65 mmol) foi adicionado sob esfriamento com gelo e agitado na temperatura ambiente por 5 horas. O solvente foi removido a vácuo e ao produto bruto, MeOH-H2O (1:2, 50 ml) foi adicionado. Depois de agitada por 30 minutos, o precipitado resultante foi coletado pela filtração, lavado com água e secado para produzir 8’-amino-9’,10- difluoro-7’-oxoespiro[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de][1,4]benzoxazina]-6’-carbonitrila (683 mg, 84 %) como um sólido amarelo claro.

[0580] 1H RMN (DMSO-d6, 400 M Hz) δ 2,22-2,29 (1H, m), 2,42-2,46 (1H, m), 3,72 (1H, d, J = 10,4 Hz), 3,88 (1H, td, J= 8,6, 6,1 Hz), 4,05 (1H, d, J = 10,4 Hz), 4,16-4,22 (1H, m), 4,37 (1H, d, J = 11,6 Hz), 4,38 (1H, d, J = 11,6 Hz), 7,40 (2H, brs), 8,46 (1H, s).

[0581] 100E) Preparação de 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo- 10’-[3-(4,6-bistrifluoropiridin-2-il)propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)- [7H]-pirido[1, 2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’-carbonitrila.

[0582] Uma solução de 8’-amino-9’,10-difluoro-7’- oxoespiro-[oxolano-3,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazina]-6’- carbonitrila (320 mg, 1,00 mmol), 3-(4,6-bistrifluorometilpiridino-2- il)propilamina (408 mg, 1,50 mmol) e trietilamina (0,210 ml, 1,50 mmol) em DMSO (5 ml) foi agitada a 100° C por 6 horas depois a 120° C por 2 horas. À mistura de reação, NH4Cl saturado aquoso foi adicionado para neutralizar e o produto bruto foi extraído com EtOAc, lavado com salmoura, secado em NaSO4 e o solvente foi removido a vácuo. O produto bruto foi purificado pela cromatografia em coluna (Hexano: EtOAc 5: 1 ^ 1: 1) para produzir 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[3-(4,6- bistrifluoropiridin-2-il)propilamino] espiro[oxolano-1,3’(2’H)-[7H]- pirido[1,2,3-de][1,4] benzoxazina]-6’-carbonitrila (387 mg, 68 %) como um sólido amarelo claro.

[0583] 1H RMN (DMSO-d6, 400 M Hz) δ 1,95-2,02 (2H, m), 2,17-2,24 (1H, m), 2,35-2,42 (1H, m), 2,99 (2H, t, J = 7,6 Hz), 3,403,49 (2H, m), 3,69 (1H, d, J = 10,4 Hz), 3,88 (1H, td, J = 9,2, 5,5 Hz), 3,96 (1H, d, J = 10,4 Hz), 4,14-4,20 (1H, m), 4,21 (1H, d, J = 11,0 Hz), 4,24 (1H, d, J = 11,0 Hz), 5,71-5,81 (1H, m), 6,97 (2H, brs), 8,07 (1H, s), 8,10 (1H, s), 8,24 (1H, s).

[0584] HRESIMS (+) 572,15292 (calculado para C25H21F7N5O3). Exemplos de 101 a108:

[0585] Usando-se os procedimentos apresentados acima, os compostos do exemplos 101 a 108 foram preparados:

[0586] Exemplos 109 e 110: (+)-8’-amino-9’-fluoro-7’- oxo-10’-[3-(piridin-2-il)propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)- [7H]pirido[1,2,3-de]-[1,4]benzoxazina]-6’-carbonitrila e (-)-8’-amino-9’- fluoro-7’-oxo-10’[3-(piridin-2-il)propilamino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)- [7H]pirido[1,2,3-de]-[1,4]benzoxazina]-6’-carbonitrila.

[0587] 8’-amino-9’-fluoro-7’-oxo-10’-[3-(piridin-2- il)propil-amino]espiro[oxolano-1,3’(2’H)-[7H]pirido[1,2,3- de][1,4]benzoxazina]-6’-carbonitrila racêmica (250 mg) foi separada pela HPLC preparativa usando uma coluna Chiralpak IA (020 x 250 mm) e MeCN como o eluente a uma taxa de fluxo de 9 ml/min por 1 hora. O detetor de UV foi ajustado a 254 nm, o volume da alça de injeção foi de 5 ml e a carga de injeção foi de 34 a 36 mg em uma solução de MeCN.

[0588] Exemplo 109; 102 mg, > 99 % de pureza com > 99 % e.e. (coluna Chiralpak IA (04,6 x 250 mm), MeCN, 1 ml/min, Tr = 13,6 min), [α]D25 + 10,2 (c 1,00, CHCl3) Exemplo 110; 107 mg, > 99 % de pureza com > 99 % e.e. (coluna Chiralpak IA (Φ4,6 x 250 mm), MeCN, 1 ml/min, Tr = 34,35 minutos), [α]D25 -7,9 (c 1,00, CHCl3)

[0589] Exemplos 111 a 114:

[0590] a) 3-(1-(hidroximetil)ciclopropilamino)-2-(2,3,4,5- tetrafluoro-benzoil)-acrilato de etila

[0591] Uma solução agitada de 3-oxo-3-(2,3,4,5- tetrafluoro-fenil)pentanoato de etila (10,0 g, 37,8 mmol), anidrido acético (50 ml) e ortoformiato de trietila (10,0 ml, 56,7 mmol) foi aquecida a 130° C por 3 horas. A mistura foi concentrada e secado sob alto vácuo por 5 horas. O produto bruto foi dissolvido em DCM (50 ml) e depois de 1-amino-1- ciclopropilmetanol (3,9 g, 45,3 mmol) foi adicionado às gotas na temperatura ambiente. Depois de 1,5 hora, o solvente foi removido pela evaporação para produzir o composto do título como um sólido amarelo (9 g) que foi usado na etapa seguinte sem a purificação adicional. MS(EP) m/z: 362 (M+ + 1). (Calculado para C16H15F4NO4,361,29)

[0592] b) 9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespirol[1,4]oxazino[2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopropano]-6-carboxilato de etila.

[0593] Uma mistura de 3-(1- (hidroximetil)ciclopropilamino)-2-(2,3,4,5-tetrafluoro-benzoil)acrilato de etila (300 mg, 0,83 mmol), pó de K2CO3 (344 mg, 2,49 mmol) e 3 ml de DMF anidro foram aquecidos em um microonda CEM Discover por 10 minuto a 200° C. depois que a amostra foi rapidamente esfriada até a temperatura ambiente produzindo um líquido marrom escuro. O DMF foi removido pela evaporação para dar um sólido escuro. O sólido foi dissolvido em 50 ml de acetato de etila e lavado duas vezes com 10 ml de água. A camada orgânica foi secada em Na2SO4 para produzir um sólido amarelo claro como o composto do título que foi usado sem a purificação adicional na etapa seguinte (133 mg, 0,415 mmol). MS(EP) m/z: 322 (M+ + 1). (Calculado para C16H13F2NO4, 321,28)

[0594] c) Ácido 9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino [2,3,4-ij]-quinolina-3,1’-ciclopropano]-6- carboxílico

[0595] A uma solução de 9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro-[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopropano]-6-carboxilato de etila (1,3 g, 4 mmol) em EtOH/água (50:50 v/v, 55 ml) foi adicionado pó de K2CO3 (1,65 g, 12 mmol) e a mistura foi aquecida sob refluxo por 2 horas. O solvente foi removido até a secura. O sólido remanescente foi acidificado até o pH 6 usando-se ácido acético 2 N. Um precipitado formou-se e foi coletado pela filtração, lavado com água e depois secado para dar o composto do título (0,656 g, 2,24 mmol como um sólido amarelo claro. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,29 (2H, t), 1,8 (2H, t), 4,56 (2H, s), 7,84 (1H, m), 8,51 (1H, s), 14,3 (1H, b). MS(EP) m/z: 294 (M+ + 1). (Calculado para C14H9F2N04, 293,22)

[0596] d) Ácido 9,10-difluoro-8-nitro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]-oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopropano]-6- carboxílico

[0597] O composto do título foi preparado a partir do ácido 9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopropano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles como descritos nos exemplos acima. MS(EP) m/z: 339 (M+ + 1). (Calculado para C14H8F2N2O6,338,22)

[0598] e) 9,10-difluoro-8-nitro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopropano]-6- carboxamida

[0599] O composto do título foi preparado a partir do ácido 9,10-difluoro-8-nitro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopropano]-6-carboxílico usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,32 (2H, t), 1,7 (2H, t), 4,58 (2H, s), 7,66 (1H, b), 8,46 (1H, s), 8,59 (1H, b). MS(EP) m/z: 338 (M+ + 1). (Calculado para C14H9F2N3O5,337,24).

[0600] f) 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopropano]-6- carboxamida

[0601] O composto do título foi preparado a partir do 9,10- difluoro-8-nitro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclo -propano]-6-carboxamida usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,17 (2H, t), 1,55 (2H, t), 4,26 (2H, s), 7,30 (2H, b), 8,26 (1H, s). MS(EP) m/z: 308 (M+ + 1). (Calculado para C14H11F2N3O3, 307,25).

[0602] g) 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopropano]-6- carbonitrila

[0603] O composto do título foi preparado a partir do 8- amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopropano]-6-carboxamida usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,18 (2H, t), 1,77 (2H, t), 4,31 (2H, s), 7,41 (2H, b), 8,51 (1H, s). MS(EP) m/z: 290 (M+ + 1). (Calculado para C14H9F2N3O2, 289,24).

[0604] Exemplo 111: 10-(3-(1H-pirazol-1-il)propilamino)- 8-amino-9-fluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina-3,1’- ciclopropano]-6-carbonitrila

[0605] O composto do título foi preparado a partir do 8- amino-9, 10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,44j]quinolina- 3,1’-ciclopropano]-6-carbonitrila e pirazolpropilamina usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima. 1H-RMN (400 M Hz, DMSO-d6) δ 1,16 (2H, t), 1,58 (2H, t), 1,99 (2H, m), 3,65 (2H, m), 4,16 (2H, s), 4,26 (2H, m), 6,29 (1H, s), 7,49 (1H, s), 7,63 (1H, s), 8,04 (1H, s). MS(EP) m/z: 395 (M+ + 1). (Calculado para C20H19FN6O2, 394,40).

[0606] Exemplo 112: 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(3- (piridin-3-il)propilamino)-2,7-diidroespiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopropano]-6-carbonitrila.

[0607] Uma solução de 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidroespiro[[1,4]oxazino-[2,3,4-ij]quinolina-3,1’-ciclopropano]-6- carbonitrila (150 mg, 0,52 mmol), 3-(piridino-3-il)propan-1-amina (176 mg, 1,3 mmol) e trietilamina (108 μl, 1,3 mmol) em DMSO (3 ml) foi agitada a 120° C por 15 horas. A mistura de reação foi esfriada e concentrada. O produto bruto foi recolhido em acetonitrila e purificado pela HPLC preparativa para produzir o composto do título como um sólido amarelo (52,9 mg). MS (EP) m/z: 406,2 (M+ + 1). (Calculado para C22H2OFN5O2, 405,42). 1H RMN (400 M Hz, CD3OD) δ 1,20 (2H, t), 1,50 (2H, t), 2,00 (2H, m,), 2,94 (2H, m,), 3,51 (2H, m), 4,14 (2H, s), 7,86 (1H, m), 8,03 (1H, m), 8,41 (1H, m), 8,52 (1H, m), 8,58 (1H, s)

[0608] Exemplo 113: 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(3- (piridin-2-il)propilamino)-2,7-diidroespiro[[1,41oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopropano]-6-carbonitrila

[0609] Uma solução de 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7- diidro-espiro[[1,4]oxazino[2,3,4-ij]lquinolina-3,1’-ciclopropano]-6- carbonitrila (320 mg, 1,1 mmol) e 3-(piridino-2-il)propan-1-amina (270 mg, 2 mmol) e trietilamina (221 μl, 2,7 mmol) em DMSO (8 ml) foi agitada a 120° C por 15 horas. A mistura de reação foi adicionada às porções à água e foi extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi secada em sulfato de sódio e concentrada sob vácuo. O resíduo seco foi purificado pela cromatografia em coluna (acetato de etila, para acetato de etila-MeOH 10:1) para produzir o composto do título (76,9 mg) como um sólido amarelo. MS (EP) m/z: 406,2 (M+ + 1). (Calculado para C22H2OFN5O2, 405,42). 1H RMN (400 M Hz, CD3OD) δ 1,15 (2H, t), 1,59 (2H, t), 2,03 (2H, t), 2,88 (2H, t), 3,54 (2H, m), 4,15 (2H, s), 7,23 (1H, m), 7,33 (1H, m), 7,74 (1H, m), 8,04 (1H, s), 8,42 (1H, m)

[0610] Exemplo 114: 8-amino-9-fluoro-7-oxo-10-(3- (piridin-4-il)propilamino)-2,7-diidro-espiro[[1,4]-oxazino[2,3,4-ij]quinolina- 3,1’-ciclopentano]-6-carbonitrila

[0611] O composto do título podem ser preparado a partir do 8-amino-9,10-difluoro-7-oxo-2,7-diidroespiro[1,4]Oxazino[2,3,4-ij]- quinolina-3,1’-ciclopentano]-6-carbonitrila usando procedimentos sintéticos similares àqueles descritos nos exemplos acima.

[0612] MS (EP) m/z: 434,2 (M + 1). (Calculado para C24H24FN5O2, 433,49).

[0613] 1H RMN (400 M Hz, DMSO) δ 8,69 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 8,35 (s, 1H), 7,74 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 5,74 (s, 1H), 4,03 (s, 2H), 3,42-3,37 (m, 2H), 2,86-2,82 (m, 2H), 1,92-1,90 (m, 2H), 1,88-1,82 (m, 4H), 1,711,65 (m, 4H)

[0614] Atividade da síntese de glicogênio em células de Hep G2.

[0615] As células de Hep G2 foram obtidas da Japanese Collection of Research Bioresources e foram cultivadas em meio de cultura padrão; um meio de Eagle modificado por Dulbecco de glicose baixa (DMEM) contendo 10 % de soro de bezerro fetal suplementado com 100 U/ml de penicilina e 100 μg/ml de estreptomicina, em uma atmosfera umidificada e 5 % de CO2 mantida a 37° C. As células Hep G2 foram colhidas com 0,25 % de solução de tripsina contendo 1 mM de EDTA e foram semeadas em placas de 12 reservatórios a 1 x 105 células por reservatório. Seguindo uma cultura por 3 dias, as células foram lavadas uma vez com solução salina tamponada com fosfato (PBS) e foram incubadas com DMEM de glicose baixa isento de soro suplementado com 100 U/ml de penicilina e 100 μg/ml de estreptomicina. Seguindo uma cultura por 3 horas, os compostos aqui fornecidos em várias concentrações e 2,5 μCi/ml D-[2-3H] glicose (PerkinElmer, Boston, MA, USA) foram adicionados ao DMEM de glicose baixa isento de soro. Um controle de veículo de DMSO (0,3 %, concentração final) também foi usado. O volume total por reservatório do meio de reação foi de 1,0 ml de DMEM de glicose baixa isento de soro. Depois da incubação a 37° C por 3 horas, o meio foi aspirado e as células foram lavadas duas vezes com PBS e 0,25 ml de KOH 1 N contendo 0,4 mg/ml de glicogênio carreador foi adicionado. Depois da incubação a 37° C por 30 minutos, 0,25 ml de 48,8 % (p/v) de KOH foi adicionado a cada reservatório para a lise de célula. Depois incubação a 95° C por 30 minutos, 1,5 ml de 95 % (v/v) de etanol foi adicionado ao lisado de célula. O glicogênio total foi precipitado durante a noite a -20° C. Os precipitados de glicogênio foram recuperados pela centrifugação a 19.000 x g por 30 minutos a 4° C. Os precipitados foram lavados uma vez com 1 ml de etanol a 70 % (v/v) e foram re-colocados em suspensão em 0,5 ml de água. A incorporação de [3H]Glicose em glicogênio foi avaliada usando um contador de cintilação líquida (Packard Instrument Co., Meriden, CT, USA). ESTUDO ANIMAL: TESTE DE TOLERÂNCIA ORAL.

[0616] Camundongos Crlj:CD1 machos (ICR) foram obtidos da Charles River Laboratories Japan (Yokohama, Japão). Todos os camundongos foram administrados com uma dieta padrão (Clea Japan, Tóquio, Japão) e água de torneira AD LIBITUM. Todas as diretrizes institucionais para o cuidado e use de animal foram aplicadas neste estudo. Os compostos de teste foram colocados em suspensão em 0,3 % sal sódico de carboximetil- celulose (CMC-Na; Sigma, St. Louis, MO). Depois de jejuar por 15 a 17 horas, o composto de teste (3, 10, 30, 100 ou 300 mg/kg) ou veículo (0,3 % CMC-Na) foram oralmente administrados a camundongos ICR de 7 semanas de idade. A solução de glicose (5 g/kg) foi oralmente administrada a 30 minutos depois do tratamento com composto de teste. As amostras de sangue foram coletadas da veia da cauda usando tubos capilares contendo EDT/V2K antes do tratamento com composto de teste e a 0, 0,5, 1 e 2 horas depois da carga de glicose. As amostras de sangue foram centrifugadas a 2.500 xg por 5 minutos e o plasma separado foi mantido em gelo e analisado no mesmo dia. Os níveis de glicose plasmática foram determinados usando o teste C II de glicose (Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Japão). A soma dos níveis de glicose plasmática a 0,5 e 1 hora depois da carga de glicose foi comparada com aquela do tratamento com veículo e os resultados foram apresentados como diminuição percentual.

[0617] Nas Tabelas 1 e 2, as IC50 (nM) para GSK3β são representadas como segue: A < 15; B = 16 a 60; C = 61 a 150; D > 150 e ND = nenhum dado.

[0618] Tabela 1. Compostos Exemplares e Suas atividades.

ESTUDO DE ÊMESE CANINA

[0619] Os cães beagle machos foram obtidos da Japan Laboratory Animals Inc. (Tóquio, Japão). Os cães foram alimentados em uma dieta padrão (Oriental Yeast, Tóquio, Japão). Água foi disponível AD LIBITUM. Os compostos de teste foram dissolvidos em sulfóxido de dimetila (100 mg/ml) seguido por uma diluição com 50 % de polietileno glicol 400 para dar uma concentração de 1, 3 e 10 mg/ml. Os cães foram dosados intravenosamente via veia cefálica com os compostos (0,1, 0,3 e 1 mg/kg, 0,1 ml/kg). As amostras de sangue foram coletadas da veia cefálica oposta em tubo evacuados contendo EDTA-2K (VENOJECT II, Terumo, Tóquio, Japão) a 0,17, 0,5, 1, 2 e 4 h após a dose e mantido em ice. As amostras de plasma foram separadas pela centrifugação (2200 xg, 10 min, 4° C) e armazenadas a - 20° C. As amostras de plasma foram misturadas com 2 volumes da mistura de metanol e acetonitrila (1:1, v/v) contendo padrão interno e centrifugada a 13400 xg por 3 min. O sobrenadante foi diluído 20 vezes com 15 % de acetonitrila e uma alíquota de 10 μl foi submetida ao sistema de LC/MS/MS. A separação pela HPLC foi conduzida com um Módulo de Separação Waters Alliance 2795 (Waters Corp., MA). Os espectros de massa foram determinados usando um Micromass Quattro Ultima Pt (Waters Corp.) com uma interface de ionização por eletropulverização no modo MRM usando pares de íon positivo.

[0620] Os seguintes compostos foram testados neste estudo:

[0621] Em certas formas de realização, os compostos de teste mostraram T1/2 na faixa de 0,5 a 1 h. Em certas formas de realização, os compostos de teste mostraram C10min na faixa de 3 a 7 μm. Em certas formas de realização a êmese foi examinada em cães tratados com compostos de teste.

[0622] As formas de realização descritas acima são intencionadas a serem meramente exemplares e aqueles habilitados na técnica reconhecerão, ou serão capazes de averiguar usando não mais do que experimentação de rotina, numerosos equivalentes de compostos, materiais e procedimentos específicos. Todos de tais equivalentes são considerados como estando dentro do escopo da matéria objeto reivindicada e são abrangidos pelas reivindicações anexas.

Claims (15)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que é da Fórmula (I):

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R2 é hidrogênio ou alquila C1-C6; R3 é hidrogênio, CN, C(O)R3a, C(NH)NHOH ou 5-tetrazolila; R3aé OH ou NHR3b; R3bé hidrogênio, NH2, OH ou alquila C1-C6; R5a e R5b hidrogênio; R6 é halo; Ra é hidrogênio; e X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, cicloalquileno não substituído de 3 a 6 membros ou heterociclileno não substituído de 3 a 6 membros contendo nitrogênio, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; ou R b 7a 7 7b 7 7 7 7b 1 7 é -(CHR )nR ,NR R , -OR , S(O)rR ou -NR COY R ; Y1 é ligação, O ou NR7b; n é 0 ou 1; r é um número inteiro de 0 a 2; R7 é C1-C6 alquila, fenila, C3-C10 cicloalquila, heterociclila de 3 a 10 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, ou heteroarila de 5 a 15 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, onde R7 é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7a é hidrogênio, C1-C6 alquila, fenila, C3-C10 cicloalquila, heterociclila de 3 a 10 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, ou heteroarila de 5 a 15 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, onde R7a é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7b é hidrogênio, C1-C6 alquila, fenila, heteroarila de 5 a 15 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, onde R7b é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; em que Q1 é halo, oxo, ciano, nitro, C1-C6 alquila, C1-C6 haloalquila, C3-C10 cicloalquila, fenila, C1-C6 alcóxi ou amino; X1 é O ou NR8; R8 é hidrogênio ou alquila C1-C6; X2 é CH2 ou O; A é alquileno C1-C2 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; onde Q2 é C1-C6 alquila; p é 0 ou 1; e q é um número inteiro de 0 a 2, em que o termo “cicloalquila” se refere a um sistema mono ou multicíclico saturado.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que X1 é O.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que Y1 é ligação.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que X1 é O e R2 é hidrogênio.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2, em que Q2 é C1-C6 alquila.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que A é C1-C2 alquileno substituído com de um a quatro grupos Q2, em que Q2 é C1-C6 alquila, e p é 0.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que X2 é CH2; ou em que X2 é O.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R6 é F.

9. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que tem a Fórmula (Ia):

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R3 é hidrogênio, CN, C(O)R3a , C(NH)NHOH ou 5-tetrazolila; R3aé OH ou NHR3b; R3bé hidrogênio, NH2, OH ou alquila C1-C6; R5a e R5b são hidrogênio; R6 é halo; Ra é hidrogênio; e X3 é alquileno C1-C3 substituído ou não substituído, cicloalquileno não substituído de 3 a 6 membros ou heterociclileno não substituído de 3 a 6 membros contendo nitrogênio, em que os substituintes quando presentes são selecionados de um a quatro grupos Q2; ou R b 7a 7 7b 7 7 7 7b 1 7 é -(CHR )nR , -NR R , -OR , -S(O)l R ou -NR COY R ; Y1 é ligação, O ou NR7b; n é 0 ou 1; l é um número inteiro de 0 a 2; R7 é C1-C6 alquila, fenila, C3-C10 cicloalquila, heterociclila de 3 a 10 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre ou heteroarila de 5 a 15 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, onde R7 é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7a é hidrogênio, C1-C6 alquila, fenila, C3-C10 cicloalquila, heterociclila de 3 a 10 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, ou heteroarila de 5 a 15 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, onde R7a é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; R7b é hidrogênio, C1-C6 alquila, fenila, heteroarila de 5 a 15 membros possuindo 1 a 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, onde R7b é opcionalmente substituído com um a cinco substituintes, cada um independentemente selecionado de grupos Q1; em que Q1 é halo, oxo, ciano, nitro, C1-C6 alquila, C1-C6 halo - alquila, C3-C10 cicloalquila, fenila, C1-C6 alcóxi ou amino; e Q2 é C1-C20 alquila.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 e 9, caracterizado pelo fato de que R3 é CN, ou em que R3 é C(O)R3a.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 e 9, caracterizado pelo fato de que Raé hidrogênio.

12. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado de

13. Composto, caracterizado pelo fato de que possui a seguinte fórmula

14. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13 e um carreador farmaceuticamente aceitável.

15. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado pelo fato de ser na preparação de um medicamento para tratar, prevenir ou melhorar uma doença mediada por GSK-3, opcionalmente me que a doença mediada por GSK-3 é diabete, condições associadas com diabete, mal de Alzheimer, mal de Parkinson, paralisia supranuclear progressiva, parquinsonismo panencefálico esclerosante subcutâneo, parquinsonismo pós-encefálico, encefalite pungilística, complexo de parquinsonismo-demência de guam, doença de Pick, degeneração corticobasal, demência frontotemporal, doença de Huntington, demência associada com ADS, esclerose lateral amiotrófica, esclerose múltipla, doenças neurotraumáticas, depressão, distúrbios bipolares de ânimo, artrite reumatóide, doença do intestino inflamatório, colite ulcerativa, doença de Crohn, septicemia, câncer pancreático, câncer ovariano ou osteoporose.