BRPI0708146A2 - bactérias de ácido lático que fornecem textura melhorada a produtos lácteos fermentados - Google Patents
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Abstract
BACTéRIAS DE áCIDO LáTICO QUE FORNECEM TEXTURA MELHORADA A PRODUTOS LáCTEOS FERMENTADOS. A presente invenção refere-se a uma nova bactéria Streptococcus thermophllus (ST) que dá textura melhorada a, por exemplo, um produto lácteo de leite fermentado.
Description
Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "BACTÉRIASDE ÁCIDO LÁTICO QUE FORNECEM TEXTURA MELHORADA A PRODUTOS LÁCTEOS FERMENTADOS".
Campo da Invenção
A presente invenção refere-se a uma nova bactéria Streptococ-cus thermophilus (ST) que dá textura melhorada, por exemplo, a um produtolácteo de leite fermentado.
Antecedentes da Técnica
Várias cepas de Streptococcus thermophilus sintetizam polissa-carídeos extracelulares (EPS). Essas moléculas podem ser produzidas comocápsulas que são intimamente associadas com a célula, ou elas podem serliberadas no meio como um limo livre (isto é, polissacarídeo "filamentoso"(ropy)). Embora a presença de exopolissacarídeo não confira nenhuma van-tagem óbvia ao crescimento ou sobrevivência de S. thermophilus no leite, aprodução in situ por essa espécie ou outras bactérias de ácido láctico delaticínios confere tipicamente uma textura "filamentosa" ou viscosa a produ-tos de leite fermentado. Um trabalho mostrou que S. thermophilus produto-res de exopolissacarídeo podem aumentar as propriedades funcionais dequeijo mozarela. Para mais detalhes vide o artigo de revisão de Broadbent etal. (J. dairy Sei. 86:407-423).
W02004/085607A2 (Rhodia Chimie) descreve uma cepa de S-treptococcus thermophilus (ST) que compreende alguns genes concretosespecíficos (chamados genes "eps") envolvidos na síntese de EPS.
Hassan et al. (2003; J. dairy Sei. 86:1632-1638) descreve 2 ce-pas "filamentosas" de Streptococcus thermophilus, CHCC3534 eCHCC3541. Ambas as cepas são sensíveis a fagos.Sumário da Invenção
O problema a ser solucionado pela presente invenção é forneceruma nova cepa de Streptoeoceus thermophilus com propriedades melhora-das em relação a ser capaz de dar textura melhorada a produtos lácteosfermentados, tal como, por exemplo, iogurte e que é útil na produção de lati-cínios altamente industrializada dos dias atuais onde ataques de fagos sãoproblemáticos.
Como pode ser visto nos exemplos práticos abaixo, a nova cepaaqui descrita de Streptococcus thermophilus (ST) com o número de registroDSM 17876 (também chamada aqui de CHCC8833) dá textura melhorada(medida como tensão de cisalhamento) quando comparada a cepas de STrelevantes disponíveis comercialmente consideradas como cepas altamentetexturizantes e usadas atualmente da indústria de laticínios. A nova cepaDSM 17876 de ST aqui descrita não compreende os genes de eps concretosespecíficos descritos em W02004/085607A2 (Rhodia Chimie) (determinadopor uma análise por PCR - dados não mostrados). Além disso, como ilustra-do no exemplo 2, a cepa CHCC8833 de Streptococcus thermophilus tem avantagem de ser resistente a um grande número de fagos que ocorrem emfábricas de laticínios.
Conseqüentemente, um primeiro aspecto da invenção refere-sea uma bactéria Streptoeoeeus thermophilus (ST) de ácido lático com o núme-ro de registro DSM 17876 ou um mutante dessa, em que a cepa mutante éobtida pelo uso da cepa depositada como material de partida, e em que omutante tem as propriedades texturizantes de DSM 17876 mantidas ou me-lhoradas.
Um segundo aspecto da invenção refere-se a uma composiçãode cultura inicial que compreende a bactéria do primeiro aspecto.
Um terceiro aspecto da invenção refere-se a um método de ma-nufaturar um produto alimentício ou ração que compreende adicionar umacomposição de cultura inicial de acordo com o segundo aspecto ao materialde partida do produto alimentício ou ração e manter o material de partidaassim inoculado sob condições onde a bactéria é metabolicamente ativa.
Uma modalidade da presente invenção é descrita abaixo, ape-nas como exemplos.
Desenhos
Figura 1: resultado mostrando textura melhorada (tensão de cisalhamento)de leite fermentado com a nova cepa de ST em comparação a cepas de STcomercialmente disponíveis consideradas como cepas altamente texturizan-tes. As cepas são descritas no exemplo 2. A textura é quantificada por avali-ar a tensão de cisalhamento medida em Pascais [Pa] pelo uso de um reôme-tro conforme descrito no exemplo 1. A barra indica 1 χ S.E.
Descrição Detalhada da Invenção
Nova cepa de Streptococcus thermophilus
Uma amostra da nova cepa CHCC8833 de Streptococcus ther-mophilus (ST) foi depositada em DSMZ (Deutsche Sammlung von Mikroor-ganismen und Zellkulturen GmbH) sob o número de acesso DSM 17876 comuma data de depósito de 11 de janeiro de 2006. O depósito foi feito sob ascondições do Tratado de Budapeste sobre o Reconhecimento Internacionaldo Depósito de Microorganismos para Fins de Procedimento em Matéria de Patente.
O primeiro aspecto da invenção refere-se a nova cepa aqui des-crita ou "um mutante dessa".
É claro para a pessoa versada que pelo uso da cepa depositadacomo material de partida, o leitor versado pode por técnicas de mutagêneseconvencional ou reisolamento obter rotineiramente mais mutantes ou deriva-dos dessa que retêm as características e vantagens relevantes aqui descri-tas. Conseqüentemente, o termo "um mutante dessa" do primeiro aspectorefere-se a cepas mutantes obtidas pelo uso da cepa depositada como ma-terial de partida.
Já que o leite e as condições em fábricas de laticínios geralmen-te não são estéreis, bacteriófagos constituem uma séria ameaça na produ-ção de produtos lácteos. Os fagos infectam as bactérias de ácido lático e sepropagam muito rapidamente, levando à morte celular e como uma conse-qüência, uma acidificação defeituosa e falha na produção. Especialmenteem indústrias de laticínios modernas que adotam barris de tamanho muitogrande, ataques de fagos estão associados com perdas monetárias muitosignificativas. Conseqüentemente a indústria faz esforços constantes paradesenvolver novas culturas resistentes a fagos. Como ilustrado no exemplo1 e 2 a cepa CHCC8833 de Streptococcus thermophilus (DSM 17876) nãoapenas fornece uma textura surpreendentemente alta, mas inesperadamen-te, CHCC8833 foi, ao contrário de outras cepas altamente texturizantes, re-sistente a todos os fagos testados.
Uma cultura inicial que compreende uma LAB descrita aqui
A bactéria de ácido lático (LAB) descrita aqui é útil como culturainicial na produção de produtos alimentícios ou rações.
Tipicamente, tãl composição de cultura inicial compreende abactéria de uma forma concentrada incluindo concentrados congelados, se-cos ou Iiofilizados tendo tipicamente uma concentração de células viáveisque está na faixa de 104 a 1012 cfu (unidades formadoras de colônia) porgrama da composição incluindo pelo menos 104 cfu por grama da composi-ção, tal como pelo menos 105 cfu/g, por exemplo, pelo menos 106 cfu/g, talcomo pelo menos 107 cfu/g, por exemplo, pelo menos 108 cfu/g, tal comopelo menos 109 cfu/g, por exemplo, pelo menos 1010 cfu/g, tal como pelomenos 1011 cfu/g.
A composição pode conter como componentes adicionais crio-protetores e/ou aditivos convencionais incluindo nutrientes, tais como, extra-tos de levedura, açúcares e vitaminas.
Como é normal na produção de processos de fermentação bac-teriana de ácido lático aplicar culturas mistas de bactérias de ácido lático, acomposição compreenderá em certas modalidades uma multiplicidade decepas pertencendo tanto a mesma espécie, como pertencendo a espéciesdiferentes. Um exemplo típico de tal combinação útil de bactérias de ácidolático em uma composição de cultura inicial é uma mistura de uma Leuco-nostoc sp. e uma ou mais Lactococcus subsp. tal como Lactococcus Iaetissubsp. laetis, Lactoeoceus Iaetis subsp. eremoris ou Lactoeoceus Iaetissubsp. Iaetis biovar. diaeetylaetis.
Um método para fabricar um produto alimentício ou ração
Como dito acima, um aspecto da invenção refere-se a um méto-do de manufaturar um produto alimentício ou ração que compreende adicio-nar uma composição de cultura inicial descrita aqui a um material de partidade produto alimentício ou ração e manter o material assim inoculado sobcondições onde a bactéria de ácido lático é metabolicamente ativa.Materiais de partidas de produtos alimentícios úteis incluemqualquer material que é convencionalmente submetido a uma etapa de fer-mentação bacteriana de ácido lático tal como leite, materiais vegetais, produ-tos de carne, sucos de fruta, mosto, massas e massas batidas.
Os produtos fermentados, que são obtidos pelo método, incluemcomo exemplos típicos produtos lácteos tais como leite fermentado, iogurte,queijo incluindo produtos de queijo fresco ou mozarela e soro de leite.
Para mais exemplos e detalhes de produtos alimentícios fermen-tados relevantes aqui contidos é feita referência ao artigo de revisão de Bro-adbent et al (J. dairy Sei. 86:407-423), onde produtos alimentícios fermenta-dos relevantes são descritos nas seções com ò título "Aplicação em Iogurtee Leites Fermentados (Application in Yogurt and Fermented Milks)" e "Apli-cação em Queijo Mozarela (Application in Mozzarella Cheese)".
Em modalidades adicionais, o material de substrato é um mate-rial de partida para uma ração animal tal como forragem, por exemplo, gra-ma, material de cereal, ervilhas, alfafa, ou folha de beterraba, onde as cultu-ras bacterianas são inoculadas no cultivo da ração a ser ensilada a fim deobter uma conservação dessa, ou nos produtos de resíduos animais ricosem proteína tais como sobras de abates ou sobras de pescarias, tambémcom os objetivos de conservar essas sobras para propósitos de alimentaçãode animais.
Exemplos
Exemplo 1: CHCC8833 - textura elevada em um leite fermentado
Cepas:
CHCC8833: Nova cepa DSM 17876 de ST descrita aqui.
Cepas de referência: vide exemplo 2.
Todas as cepas são cepas comerciais geralmente consideradascomo sendo cepas altamente texturizantes.
Fermentação de leite
Concentrados congelados das cepas de ST foram usados parainocular 200 ml_ de leite reconstituído com um conteúdo de matéria seca de9,5%, que foi tratado por calor a 99°C por 15 minutos em um processo debatelada. Concentrados congelados de CHCC8833 apresentam tipicamenteuma contagem de células entre 1.109 e 1.1010 cfu/g. A taxa de inoculação foi1 g de concentrado por 10L de leite, portanto, entre 1.105 e 1.106cfu/ml_ deleite. A incubação ocorreu a 37°C até que o pH atingiu 4.55, momento emque a coagulação do leite ocorreu. O leite fermentado foi então resfriado para 5°C.
Análise de textura em um leite fermentado
No dia seguinte à incubação, o leite fermentado foi trazido para13°C e agitado sutilmente por meio de um bastão adaptado com um discoperfurado até homogeneidade da amostra. As propriedades reológicas daamostra foram avaliadas em um reômetro (StressTech, Reologica Instru-ments, Suécia) equipado com um sistema de medição coaxial C25.
O teste de viscometria foi feito com taxas de cisalhamento vari-ando de 0,27 a 300 s"1 em 21 etapas. As taxas de cisalhamento foram au-mentadas e então diminuídas e as curvas ascendentes e descendentes detensão de cisalhamento (Pascal, Pa) e de viscosidade aparente (Pa*s) foramregistradas. Tempos de retardo e de integração foram 5 s e 10 s, respecti-vamente. Para análises adicionais, uma tensão de cisalhamento a 300s"1 foiescolhida.
Resultados e conclusões
Leites fermentados incubados com concentrados de cepas deStreptococcus thermophilus que são usadas atualmente na indústria de lati-cínios (cepas de referência) se mostraram menos viscosas (menor tensão decisalhamento) em comparação às amostras produzidas com CHCC8833 (vi-de a Figura 1 aqui contida).
Exemplo 2: CHCC8833 - perfil de resistência a fagosCepas bacterianas:
CHCC2389: Cepa ST143 de Streptococcus thermophilus, disponível comer-cialmente por Chr. Hansen A/S como F-DVS ST143, material no.: 200144.
CHCC2389 e CHCC3534 (Hassan et al. 2003) são isolados diferentes damesma cepa.
CHCC3021: Cepa ST10255 de Streptoeoeeus thermophilus, disponível co-mercialmente por Chr. Hansen A/S como F-DVS ST-BODY-2, material no.:623155.
CHCC3541: Cepa ST20 de Streptococcus thermophilus, disponível comer-cialmente por Chr. Hansen A/S como F-DVS ST20X, material no.: 501696. CHCC4239: Cepa ST4239 de Streptococcus thermophilus, disponível co-mercialmente por Chr. Hansen A/S em cultura mista F-DVS ABY-4, materialno.: 675175.
CHCC5086: Cepa 5086 de Streptococcus thermophilus, disponível comer-cialmente por Chr. Hansen A/S em cultura mista F-DVS YF-LX701, materialno.: 660656.
CHCC5389: Cepa 5389 de Streptococcus thermophilus, disponível comer-cialmente por Chr. Hansen A/S em cultura mista F-DVS ABY-4, material no.:675175
CHCC5581: Cepa TA40 de Streptococcus thermophilus, disponível comer-cialmente por Danisco A/S
CHCC8833: Cepa DSM 17876 de Streptoeoceus thermophilus.
Teste com fagos
A sensibilidade a fagos das cepas comerciais altamente texturi-zantes mencionadas acima foram comparadas por "spot testing" com umpainel de fagos compreendendo 43 isolados de fago separados.
O "spot test" é um método de sobreposição de ágar para contaro número de bacteriófagos em uma amostra. O método envolve o plaquea-mento da cepa bacteriana a ser testada com a ajuda de um ágar macio su-perior sobre a superfície de uma placa de ágar (ágar inferior). Diferentes di-luições dos isolados de fago livres de células são então inoculados sobre oágar superior. Fagos isolados atacarão uma célula bacteriana e se replicarãoliberando partículas de fagos para atacar e Iisar bactérias na sua proximida-de, resultando em áreas claras (placas) circundadas por crescimento de cul-tura opaca, vide Adams, M.H. (1959). Bacteriophages. Interscience Publi-shers, Inc., Nova Iorque.
Método
Resumidamente, 10 uL de um Iisado de fago (unidades formado-res de placa (PFU) de aproximadamente 109/mL) foram inoculados não dilu-ídos e em uma diluição de 1:100 sobre a cepa bacteriana a ser testada (ce-pa hospedeira) e incubados a 37°C durante a noite.
O ágar usado foi ágar M17 (Oxoid CM785) + 2% de lactose, pre-parado essencialmente como recomendado pelo fabricante (Oxoid Ltd., Ba-singstoke, Hampshire, UK).
Uma zona clara na diluição de 1:100 ou placas isoladas foramconsideradas como sendo causadas por um ataque de fago e serem indica-tivas.
Resultados e conclusões
Os resultados do "spot testing" foram que CHCC2389,CHCC3021, CHCC3534, CHCC3541, CHCC4239 e CHCC5086 eram sensí-veis em relação aos fagos. Foi observado anteriormente que CHCC5381 erasensível aos fagos. De forma interessante, não foi observado ataque deCHCC8833 por nenhum fago.
Organismos Microbianos Depositados [SOLUÇÃO DO ESPECIALISTA]
Com relação à Regra 13bis.6 (PCT) a requerente solicita "solu-ção do especialista" para amostras do organismo microbiano mencionado napresente patente em todos os territórios onde tal solução pode se aplicar.
Em particular é solicitado, que com relação a:
Europa
Com relação aquelas designações nas quais uma Patente Euro-péia é pretendida uma amostra do microorganismo depositado será tornadadisponível até a publicação da menção de concessão da patente Européiaou até a data na qual o pedido tenha sido recusado, retirado ou consideradopara ser retirado, apenas pelo envio de tal amostra a um especialista nome-ado pela pessoa que está solicitando a amostra, e aprovado tanto i) pelarequerente e/ou ii) pelo Departamento Europeu de Patentes, qualquer quese aplique (Regra 28 (4) e 28 (5) EPC).
Canadá
A requerente solicita que, até que uma patente Canadense te-nha sido publicada com base no pedido de patente ou que o pedido de pa-tente tenha sido recusado, ou esteja abandonado ou não mais sujeito a res-tabelecimento, ou seja retirado, o Comissário de Patentes apenas autorize ofornecimento de uma amostra do material biológico depositado referido nopedido a um especialista independente nomeado pelo Comissário, a reque-rente deve, por uma declaração escrita, informar à Secretaria Internacionalantes do término das preparações técnicas para publicação do pedido inter-nacional.
Noruega
Por meio disso a requerente solicita que, até que o pedido depatente tenha sido aberto à inspeção pública (pelo Departamento Norueguêsde Patentes), ou tenha sido finalmente julgado pelo Departamento Norue-guês de Patentes sem ter sido exposto para inspeção, o fornecimento deuma amostra deve ser efetuado apenas para um especialista na técnica. Asolicitação para esse efeito deve ser submetida pela requerente ao Depar-tamento Norueguês de Patentes não posteriormente ao momento em que opedido de patente é tornado acessível ao público sob as Seções 22 e 33(3)do Ato Norueguês de Patentes. Se tal solicitação tiver sido submetida pelarequerente, qualquer solicitação feita por um terceiro para o fornecimento deuma amostra deve indicar o 'especialista a ser usado. Este especialista podeser qualquer pessoa presente na lista de especialistas reconhecidos redigidapelo Departamento Norueguês de Patente ou qualquer pessoa aprovadapela requerente no caso individual.
Austrália
Por meio disso a requerente informa que o fornecimento de umaamostra de um microorganismo deve ser efetuado apenas antes da conces-são de uma patente, ou antes da prescrição, recusa ou retirada do pedido depatente, para uma pessoa que é um destinatário versado sem interesse nainvenção (Regulamento 3.25(3) das Regulamentações Australianas de Pa-tente)
Finlândia
Por meio disso a requerente solicita que, até que o pedido depatente tenha sito aberto à inspeção pública (pelo Conselho Nacional de Pa-tentes e Regulamentações), ou tenha sido finalmente julgado pelo ConselhoNacional de Patentes e Registros sem ter sido aberto à inspeção pública, ofornecimento de uma amostra deve ser efetuado apenas para um especialis-ta na técnica.
Reino Unido
Por meio disso, a requerente solicita que o fornecimento de umaamostra de um microorganismo deve ser tornado acessível para um espe-cialista. A solicitação para esse efeito deve ser submetida pela requerente àSecretaria Internacional antes do término dos preparativos técnicos para apublicação internacional do pedido.
Dinamarca
Por meio disso, a requerente solicita que, até que o pedido tenhasido aberto à inspeção pública (pelo Departamento Dinamarquês de Paten-tes), ou tenha sido finalmente julgado pelo Departamento Dinamarquês dePatentes sem ter sido aberto à inspeção pública, o fornecimento de umaamostra deve ser efetuado apenas para um especialista na técnica. A solici-tação para esse efeito deve ser submetida pela requerente ao DepartamentoDinamarquês de Patentes não posteriormente ao momento em que o pedidode patente é tornado acessível ao público sob as Seções 22 e 33(3) do AtoDinamarquês de Patentes. Se tal solicitação tiver sido submetida pela reque-rente, qualquer solicitação feita por um terceiro para o fornecimento de umaamostra deve indicar o especialista a ser usado. Esse especialista pode serqualquer pessoa presente em uma lista de especialistas reconhecidos redi-gida pelo Departamento Dinamarquês de Patentes ou qualquer pessoa pelarequerente no caso individual.
Suécia
Por meio disso, a requerente solicita que, até que o pedido depatente tenha sido aberto à inspeção pública (pelo Departamento Sueco dePatentes), ou tenha sido finalmente julgado pelo Departamento Sueco dePatentes sem ter sido aberto à inspeção pública, o fornecimento de umaamostra deve ser efetuado apenas para um especialista na técnica. A solici-tação para esse efeito deve ser submetida pela requerente à Secretaria In-ternacional antes da expiração de 16 meses da data de prioridade (preferi-velmente no Formulário PCT/RO/134 reproduzido no anexo Z do Volume Ido Guia da requerente do PCT). Se tal solicitação tiver sido submetida pelarequerente qualquer solicitação feita por um terceiro para o fornecimento deuma amostra deve indicar o especialista a ser usado. Esse especialista podeser qualquer pessoa presente em uma lista de especialistas reconhecidosredigida pelo Departamento Sueco de Patentes ou qualquer pessoa pelarequerente no caso individual
Holanda
Por meio disso a requerente solicita que até a data de uma con-cessão de uma patente Holandesa na qual o pedido de patente é recusadoou retirado ou prescrito, o microorganismo deve ser tornado acessível con-forme determinado no 3 IF(1) das Regras de Patente apenas pelo envio deuma amostra a um especialista. A solicitação para esse efeito deve ser for-necida pela requerente ao Departamento Holandês de Propriedade Industrialantes da data na qual o pedido de patente é tornado acessível ao públicosob a Seção 22C ou Seção 25 do Ato de Patentes do Reino dos Países Bai-xos, das duas datas a que ocorrer primeiro.
Islândia
Por meio disso, a requerente solicita que até que uma patentetenha sido concedida ou uma decisão final tomada pelo Departamento Islan-dês de Patentes com relação a um pedido que não resultou em solicitaçãopara esse efeito deve ser submetida pela requerente ao Departamento Is-landês de Patentes não posteriormente ao momento em que pedido de pa-tente é tornado acessível ao público sob as Seções 22 e 33(3) do Ato Islan-dês de Patentes. Se tal solicitação tiver sido submetida pela requerente,qualquer solicitação feita por um terceiro para o fornecimento de uma amos-tra deve indicar o especialista a ser usado. Esse especialista pode ser qual-quer pessoa presente em uma lista de especialistas reconhecidos redigidapelo Departamento Islandês de Patentes ou qualquer pessoa pela requeren-te no caso individual.
SingapuraPor meio disso, a requerente solicita que o fornecimento de umaamostra de um microorganismo deve ser tornado acessível apenas para umespecialista.
Eslovênia
Por meio disso, o requente solicita que o fornecimento de amos-tras a um terceiro esteja sujeito à condição desta parte: (a) tenha o direito deexigir que uma amostra do microorganismo seja tornada acessível; (b) tenhase comprometido a assegurar que a requerente não autoriza acesso à amos-tra do microorganismo depositado a um terceiro antes da expiração do perí-odo prescrito de validade da patente.
Suíça
Por meio disso, a requerente solicita que o fornecimento de a-mostras a um terceiro está sujeito às condições de que esta parte indique àinstituição depositária, seu nome e endereço para o propósito de informaçãodo depositante e se compromete a: (a) não tornar a cultura depositada ouuma cultura derivada dela acessível a um terceiro; (b) não usar a cultura foradas disposições da lei; (c) produzir, no caso de um questionamento, evidên-cias de que as obrigações sob os itens (a) e (b) não foram violadas.
Ex-República Iuauslava da Macedônia
Por meio disso, a requerente solicita que o fornecimento de a -mostras a um terceiro está sujeito à condição de que esta parte: (a) tem odireito de exigir que uma amostra do microorganismo seja tornada acessível;(b) tenha se comprometido a assegurar que a requerente não autoriza o a-cesso da amostra do microorganismo depositado a nenhum terceiro antesda expiração do período prescrito de validade da patente.
Claims (5)
1. Bactéria Streptococcus thermophilus (ST) de ácido lático como número de registro DSM 17876 ou uma cepa mutante da mesma, em quea cepa mutanté é obtida pelo uso da cepa depositada como material de par-tida, e em que o mutante tem as propriedades texturizantes de DSM 17876mantidas ou melhoradas.
2. Composição de cultura inicial que compreende a bactéria deácido lático como definida na reivindicação 1, em que, preferivelmente acomposição de cultura inicial tem uma concentração de células viáveis, queestá na faixa de 104 a 1012Cfu por grama da composição.
3. Método para fabricação de manufatura de um produto alimen-tício ou ração que compreende adicionar uma composição de cultura inicialcomo definida na reivindicação 2 a um material de partida de produto alimen-tício ou ração e manter o material de partida assim inoculado sob condiçõesonde a bactéria de ácido lático é metabolicamente ativa.
4. Método da reivindicação 3, em que o produto alimentício fer-mentado é um produto lácteo fermentado.
5. Método de acordo com a reivindicação 4, em que o produtolácteo fermentado é um produto lácteo fermentado selecionado a partir dalista que consiste em um leite fermentado, um iogurte, um queijo incluindoprodutos de queijo fresco, ou mozarela, e soro de leite.
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