BRPI0609866A2

BRPI0609866A2 - derivados de benzotriazol como antagonistas de receptor canabinóide

Info

Publication number: BRPI0609866A2
Application number: BRPI0609866-5A
Authority: BR
Inventors: Monique Jenny Marie Berwaer; Joannes Theodorus Maria Linders; Hecke Geert Maria Robert Van; Peter John King
Original assignee: Janssen Pharmaceutica Nv
Priority date: 2005-04-29
Filing date: 2006-04-24
Publication date: 2010-05-11
Also published as: CA2600052A1; JP5137816B2; WO2006117307A3; WO2006117307A2; EP1874304B1; DE602006007832D1; CN101166529B; WO2006117307B1; EP1874304A2; AU2006243246A1; JP2008539197A; CN101166529A; EA200702377A1; ES2329614T3; US20080194656A1; MX2007013454A; KR20080000584A

Abstract

DERIVADOS DE BENZOTRIAZOL COMO ANTAGONISTAS DE RECEPTOR CANABINOIDE. A presente invenção refere-se a um grupo de derivados de benzotriazol, abaixo, que são potentes moduladores de CB^ 1^ canabinóides (conhecidos como antagonistas ou agonistas inversos), úteis no tratamento de obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim como de outras doenças envolvendo a neurotransmissáo de CB^ 1^ canabinóide (Current Opinion in Drug Discovery & Development 2004 7(4):498-506), os sais de adição de ácido farmaceuti- camente aceitáveis e suas formas estereoisoméricas, em que R^ 1^ é hidrogênio, halo, trifluorometila, C~ 1-4~alquiIa, C~ 1-4~alquilóxi- ou C~ 1-4~alquilóxi-carbonila; R^ 2^ é hidrogênio, fenila, C~ 3-7~cicloalquila ou C~ 1-6~aIquila opcionalmente substituida com Ar^ 1^; R^ 3^ é hidrogênio, hidroxila ou C~ 1-6~alquiIa; Ar^ 1^ é fenila ou fenila substituida com até três substituintes de halo; e Het representa um heterocicIo, parcialmente saturado ou aromático, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de furanila, tienila, pirrolila, oxazolila, tiazolila, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, oxadiazolila, triazolila, tiadiazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, triazinila, piridazinila, 2H-piranila ou 4H-piranila, sendo que o heterociclo está opcionalmente substituído com C16aIquila.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOSDE BENZOTRIAZOL COMO ANTAGONISTAS DE RECEPTOR CANABI-NÓIDE".

Antecedentes da Invenção5 A presente invenção refere-se a um grupo de derivados de ben-

zotriazol, a processos para a preparação destes compostos e a composiçõesfarmacêuticas contendo um ou mais destes compostos como ingredienteativo.

Derivados de benzotriazol substituídos com (1H-azol-1-il-metila)

10 foram descritos no documento EP 293 978; Venet M. et al., Actualités dechimie thérapeutique (1997) vol.23 p.239-246 e Lidstróm P. et al., NuclearMedicine & Biology (1998) vol.25 p.497-501, como inibidores de aromatase,úteis para o tratamento de doença dependente de estrogênio. Recentemen-te, derivados de pirazol tricíclicos ou tetracíclicos fundidos foram descritos

15 como antagonistas de CBi potenciais (Current Opinion in Drug Discovery &Development 2004 7(4):498-506).

De maneira surpreendente, foi agora constatado que novos econhecidos derivados de benzotriazol da fórmula (I), assim como os seussais de adição farmaceuticamente aceitáveis e as suas formas estereoiso-

20 méricas, são potentes moduladores de CBi canabinóide (conhecidos comoantagonistas ou agonistas inversos), e, conseqüentemente, úteis no trata-mento de obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim comooutras doenças envolvendo a neurotransmissão CBi canabinóide (CurrentOpinion in Drug Discovery & Development 2004 7(4):498-506).

25 Descrição da invenção

A presente invenção refere-se a derivados de benzotriazol de

fórmulaos seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis e as suasformas estereoisoméricas, em que

R1 é hidrogênio, halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, d-6alquila, Ci.6alquilóxi-, d-ealquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(d-6alquil) amina ou nitro;

R2 é hidrogênio; Ci-i0alquila opcionalmente substituída com Ar1,C3-7Cicloalquila, hidroxila ou Ci-6alquilóxi; Ar1; C2.6alquenila; C2.6alquinila; C3-rcicloalquila; biciclo [2.2.1] heptan-2-ila; 2,3-dihidro-1H-indenila; 1,2,3,4-tetrahidronaftalenila; hidroxila; C2.6alquenóxi opcionalmente substituído comAr2; C2-6alquinilóxi; pirimidinilóxi; di (Ar2) metóxi; (1-d-4alquil-4-piperidinil)óxi; ou R2 é Ci-ioalquilóxi opcionalmente substituído com halo; hidroxila; d-6alquilóxi; amina; mono- e di (Ci-6alquil) amina; trifluorometila; carboxila; d-6alquilóxi-carbonila; Ar1; Ai^-O-; Ai^-S-; C3-7Cicloalquila; 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila; 1 H-benzimidazolila; Ci-4alquila substituída 1H-benzimidazolila; (1,1'-bifenil)-4-ila ou com 2,3-dihidro-2-oxo-1H-benzimidazolila;

R3é hidrogênio, hidroxila ou Ci-6alquila;

Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, aminopiridinila, imidazolila, tria-zolila, tienila, halotienila, furanila, Ci-6alquilfuranila, halofuranila, tiazolila oufenila substituída com até 3 substituintes cada um independentemente sele-cionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci.6alquila,d-ealquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila,ciano, amina, nitro ou mono-e di-(Ci-6alquil) amina;

Ar2 é fenila, piridinila ou fenila substituída com até 3 substituintescada um independentemente selecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, d-ealquilóxi-, d.6alquilóxi-carbonil-, carbo-xila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(d.6alquil) ami-na ou nitro; e

Het representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aromá-tico, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de furanila, tienila,pirrolila, oxazolila, tiazolila, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, o-xadiazolila, triazolila, tiadiazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, triazinila,piridazinila, 2H-piranila ou 4H-piranila, sendo que o heterociclo está opcio-nalmente substituído com até 3 substituintes cada um independentementeselecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci.6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(Ci-6alquil) amina ou nitro; em umaconcretização particular o Het está opcionalmente substituído com Ci-6alquila.

Em particular, para o uso dos compostos de fórmula (I) comomoduladores de receptor de CB-i, úteis na preparação de um medicamentopara o tratamento de obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, as-sim como outras doenças envolvendo a neurotransmissão de CB^ canabi-nóide. Antagonistas de receptor de CBi têm potencial no tratamento de inú-meras doenças, tais como distúrbios neuro-inflamatórios, distúrbios cogniti-vos e de memória, obesidade, psicose, distúrbios gastrointestinais e vício(por exemplo, como um auxílio para sé parar de fumar). Foi também sugeri-do que antagonistas de receptor de CB<\ poderiam ser úteis no tratamento deasma, seguindo a constatação dos efeitos mediados por receptor de CBtpré-sinápticos sobre a inibição de liberação de noradrenalina em pulmões deporquinhos-da-índia.

Outra doença, na qual tais compostos poderiam ter potencialterapêutico, é a cirrose hepática. Isso segue à observação de uma reversãode baixa pressão sangüínea em ratos tendo cirrose hepática induzida porCCI4, em conjunto com uma diminuição de fluxo sangüíneo mesentérico e depressão de veia porta. Conseqüentemente, é um objeto da presente inven-ção fornecer o uso de compostos de fórmula (I) como moduladores de re-ceptor de CBl úteis na preparação de um medicamento para o tratamentode obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim como outrasdoenças envolvendo a neurotransmissão de CB-\ canabinóide, em particularno tratamento de distúrbios neuro-inflamatórios, tais como, por exemplo, Do-ença de Alzheimer, Doença de Parkinson, esclerose múltipla, demência dotipo 1 por HIV, demência do lobo frontotemporal, e várias doenças por príon;distúrbios cognitivos e de memória, tais como, por exemplo, demência e es-quizofrenia; obesidade; psicose, vício, tal como um auxílio para se parar defumar; e distúrbios gastrointestinais, tais como, por exemplo, náusea e vômi-to, úlceras gástricas, síndrome de intestino irritável, Doença de Chron, diar-réia secretória, íleo paralítico e refluxo gastroesofageano.

Conforme usado nas definições anteriores, o termo halo é geralcom relação a flúor, cloro, bromo e iodo; o termo "d-4alquila" pretende incluirradicais de hidrocarboneto saturados de cadeia linear e ramificada tendodesde 1 a 4 átomos de carbono, tais como, por exemplo, metila, etila, 1-metil-etila, 1,1-dimetil-etila, propila e os similares; "Ci-6alquila" pretende in-cluir radicais Ci-4alquila, conforme definidos anteriormente, e os seus homó-logos superiores tendo desde 5 a 6 átomos de carbono, tais como, por e-xemplo, 2-metil-propila, butila, pentila, hexila e os similares; "Ci-ioalquila"pretende incluir radicais Ci-6alquila, conforme definidos anteriormente, e osseus homólogos superiores tendo desde 7 a 10 átomos de carbono; o termo"C3-7Cicloalquila" é geral com relação a ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila,ciclohexila e cicloheptila; "C2-6alquenila" define radicais de hidrocarboneto decadeia linear ou ramificada contendo uma ligação dupla e tendo desde 2 a 6átomos de carbono, tais como, por exemplo, etenila, 2-propenila, 3-butenila,2-butenila, 2-pentenila, 3-pentenila, 3-metil-2-butenila e os similares; "C2.6alquinila" define radicais de hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificadacontendo uma ligação tripla e tendo desde 2 a 6 átomos de carbono, taiscomo, por exemplo, 2-propinila, 2-butinila, 3-butinila, 2-pentinila, 3-pentinila,4-pentinila e os similares; e quando uma C2-6alquenila ou C2-6alquinjla estiversubstituída para formar um heteroátomo, então o átomo de carbono da C2.6alquenila ou da C2.6alquinila conectado ao heteroátomo, de preferência, se-rá saturado.

Os heterociclos, conforme mencionados nas definições acima enas partes que se seguem, pretendem incluir todas as suas formas isoméri-cas possíveis, por exemplo, triazolila também inclui 1,2,4-triazolila e 1,3,4-triazolila; oxadiazolila inclui 1,2,3-oxadiazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,5-oxadiazolila e 1,3,4-oxadiazolila; tiadiazolila inclui 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,4-tiadiazolila, 1,2,5-tiadiazolila e 1,3,4-tiadiazolila.Além disso, os heterociclos, conforme mencionados nas defini-ções acima e nas partes que se seguem, pode estar ligado ao restante damolécula de fórmula (I) por meio de qualquer carbono em anel ou heteroá-tomo, conforme apropriado. Portanto, por exemplo, quando o heterociclo forimidazolila, ele poderá ser uma 1-imidazolila, 2-imidazolila, 3-imidazolila, 4-imidazolila e 5-imidazolila; quando ele for tiazolila, ele poderá ser 2-tiazolila,4-tiazolila e 5-tiazolila.

Compostos interessantes dentro da presente invenção são a-queles compostos, nos quais a porção da 1-Het-í-il-metila está substituídaou na posição 5 ou na posição 6 do anel heterocíclico de benzotriazol e nosquais Het é um heterociclo, parcialmente saturado ou aromático, de 5 mem-bros, monocíclico, selecionado a partir de furanila, tienila, pirrolila, oxazòlila,tiazolila, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, oxadiazolila, triazolilaou tiadiazolila.

Compostos mais interessantes dentro da invenção são aquelescompostos interessantes de fórmula (I), na qual Het é imidazolila ou 1,2,4-triazolila; R1 é halo, Ci-4alquila, Ci-4alquilóxi ou trifluorometila; e R2 é fenila,C3-7Cicloalquila ou Ci-6alquila opcionalmente substituída com Ar1.

Também de interesse são aqueles compostos, nos quais R2 éhidrogênio; Ci-6alquila opcionalmente substituída com fenila, naftalenila, tie-nila, furanila, C-|.4alquilfuranila, C3-7Cicloalquila, hidroxila oü Ci-4alquilóxi; feni-la; C2-6alquenila; C2-6alquinila; C3-7Cicloalquila; biciclo [2.2.1] heptan-2-ila;2,3-dihidro-1H-indenila; 1,2,3,4-tetrahidronaftalenila; hidroxila; C2-6alquenilóxiopcionalmente substituída com fenila; C2-6alquinilóxi; pirimidinilóxi; di (fenil)metóxi; (1-Ci-4alquil-4-piperidinil) óxi; ou d-6alquilóxi opcionalmente substitu-ída com halo, hidroxila, amina, mono- e di (Ci-4alquil) amina, trifluorometila,carboxila, Ci-6alquilóxi-carbonila, fenila, tienila, furanila, piridinila, fenóxi, fe-niltio, C3-7Cicloalquila, 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila, 1H-benzimidazolila, Ci.4alquila substituída 1 H-benzimidazolila, (1,1-bifenil)-4-ila, ou com 2,3-dihidro-2-oxo-l H-benzimidazolila.

Um grupo particular de compostos são aqueles compostos defórmula (I), na qual se aplica uma ou mais das seguintes restrições;- R1 é hidrogênio, halo, trifluorometila, Ci.4alquila, Ci-4alquilóxi ouCi.4alquilóxi-carbonil-; em particular R1 é halo, Ci-4alquila, Ci-4alquilóxi outrifluorometila;

- R2 é fenila, C3-7Cicloalquila ou Ci-6alquila opcionalmente substi-tuída com Ar1; em particular R2 é fenila, ciclohexila ou Ci-6alquila opcional-mente substituída com Ar1;

- Ar1 é fenila ou fenila substituída com até 3 substituintes halo;mais particularmente Ar1 é fenila ou cloro-fenila, na qual o substituinte decloro está na posição para vis-à-vis a ligação do anel fenila ao restante damolécula;

- Het representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aro-mático, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de tiazolila,imidazolila, triazolila, pirimidinila ou piridinila, sendo que o heterociclo estáopcionalmente substituído com Ci.4alquila; em uma concretização particular,Het representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aromático, de 5membros, monocíclico, selecionado a partir de tiazolila, imidazolila ou triazo-lila; em uma concretização mais particular Het representa imidazolila ou1,2,4-triazolila.

Um grupo adicional de compostos de fórmula (I), a que se referedoravante como os compostos de fórmula (Ia), são aqueles que diferem doscompostos descritos no documento EP 293 978 e em Lidstróm P. et al. su-pra, pelo fato de que Het' não representa imidazolila; 1,2,4-triazolila ou 1,3,4-triazolila. Venet M. et al. supra, revela dois compostos, quais sejam, 6-[(4-cloro-fenil)-piridin-3-il-metil]-1-metil-1H-benzotriazol e 6-[(4-cloro-fenil)-pirimidin-5-il-metil]-1-metil-1H-benzotriazol,em que Het' representa piridinilae pirimidinila, respectivamente, mas, o artigo é completamente silente sobreo potencial uso destes compostos como antagonistas de CB-1.

Conseqüentemente, é um objetivo da presente invenção forne-cer os compostos de fórmula<formula>formula see original document page 8</formula>

os seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis e as suasformas estereoisoméricas, em que

R1 é hidrogênio, halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(Ci-6alquil) amina ou nitro;

R2 é hidrogênio; Ci--ioalquila opcionalmente substituída com Ar1,C3-7Cicloalquila, hidroxila ou Ci-6alquilóxi; Ar1; C2-6alquenila; C2-6alquinila; C3-ycicloalquila; biciclo [2.2.1] heptan-2-ila; 2,3-dihidro-1H-indenila; 1,2,3,4-tetrahidronaftalenila; hidroxila; C2-6alquenóxi opcionalmente substituída comAr2; C2.6alquinilóxi; pirimidinilóxi; di (Ar2) metóxi; (1-Ci-4alquil-4-piperidinil)óxi;ou R2 é Ci-i0alquilóxi opcionalmente substituída com halo; hidroxila; C1-6alquilóxi; amina; mono- e di (Ci-6alquil) amina; trifluorometila; carboxila; C1.6alquilóxi-carbonila; Ar1; Ai^-O-; Ai^-S-; C3-7Cicloalquila; 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila; 1H-benzimidazolila; Ci-4alquila substituída 1H-benzimidazolila; (1,1'-bifenil)-4-ila ou com 2,3-dihidro-2-oxo-1H-benzimidazolila;

R3 é hidrogênio, hidroxila ou d-6alquila;

Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, aminopiridinila, imidazolila, tria-zolila, tienila, halotienila, furanila, Ci-6alquilfuranila, halofuranila, tiazolila oufenila substituída com até 3 substituintes cada um independentemente sele-cionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila,Ci.6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila,ciano, amina, nitro ou mono- e di-(Ci-6alquil) amina;

Ar2 é fenila, piridinila ou fenila substituída com até 3 substituintescada um independentemente selecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci.6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carbo-xila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(C-i-6alquil) ami-na ou nitro; e

Het' representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aromá-tico, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de furanila, tienila,pirrolila, oxazolila, tiazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, oxadiazolila,tiadiazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, triazinila, piridazinila, 2H-piranilaou 4H-piranila, sendo que o heterociclo está opcionalmente substituído comaté 3 substituintes cada um independentemente selecionado a partir de halo,hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidròxi-imino) metila, ciano, amina,mono- e di-(Ci-6alquil) amina ou nitro; em uma concretização particular o Het'está opcionalmente substituído com Ci-6alquila;

contanto que o composto de fórmula (Ia) não represente 6-[(4-cloro-fenil)-piridin-3-il-metil]-1 -metil-1 H-benzotriazol ou 6-[(4-cloro-fenil)-pirimidin-5-il-metil]-1 -metil-1 H-benzotriazol.

Um grupo particular de compostos são aqueles compostos defómula (Ia), na qual nos se aplica uma ou mais das seguintes restrições;

- R1 é hidrogênio, halo, trifluorometila, Ci.4alquila, Ci.4alquilóxi ouCi.4alqui!óxi-carbonil-; em particular R1 é halo, Ci-4alquila, C-i-4alquilóxi outrifluorometila;

- R2 é fenila, C3-7Cicloalquila ou d-ealquila opcionalmente substi-tuída com Ar1; em particular R2 é fenila, ciclohexila ou Ci-6alquila opcional-mente substituída com Ar1;

- Ar1 é fenila ou fenila substituída com até 3 substituintes de ha-lo; mais em particular Ar1 é fenila ou cloro-fenila, na qual o substituinte decloro está na posição para vis-à-vis a ligação do anel fenila ao restante damolécula;

- Het' representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aro-mático, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de tiazolila,pirimidinila ou piridinila, sendo que o heterociclo está opcionalmente substitu-ido com Ci-4alquila; em uma concretização particular, Het' representa tiazoli-la;

Conseqüentemente, a presente invenção se refere aos compôs-tos de fórmula (Ia) para uso como um fármaco, em particular, ao uso doscompostos de fórmula (Ia) na preparação de um medicamento para o trata-mento de obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim comooutras doenças envolvendo a neurotransmissão de CBi canabinóide. Emparticular no tratamento de distúrbios neuro-inflamatórios, tais como, por e-xemplo, Doença de Alzheimer, Doença de Parkinson, esclerose múltipla,demência do tipo 1 por HIV, demência do lobo frontotemporal, e várias do-enças por príon; distúrbios cognitivos e de memória, tais como, por exemplo,demência e esquizofrenia; obesidade; psicose, vício, tal como um auxíliopara se parar de fumar; e distúrbios gastrointestinais, tais como, por exem-plo, náusea e vômito, úlceras gástricas, síndrome de intestino irritável, Do-ença de Chron, diarréia secretória, íleo paralítico e refluxo gastroesofagea-no.

Os compostos de fórmula (I), na qual Het representa um hetero-ciclo compreendendo N, parcialmente saturado ou aromático, monocíclico,de 5 ou 6 membros, em geral, pode ser preparado conforme descrito no do-cumento EP 293 978, isto é, por A/-alquilando-se o heterociclo de fórmula(III) ou um seu sal de metal alcalino com um benzotriazol de fórmula (II).

<formula>formula see original document page 10</formula>

W, conforme usado na reação de (II) com (III), é um grupo desaída apropriado, tal como, por exemplo, halo, por exemplo, cloro, um gruposulfonilóxi, por exemplo, 4-metil-benzenossulfonilóxi.

A A/-alquilação acima descrita é realizada de maneira convenien-temente por agitação dos reagentes na presença de um solvente orgânicoadequado, tal como, por exemplo, um hidrocarboneto aromático, por exem-pio, metil-benzeno; uma cetona, por exemplo, 4-metil-2-pentanona; um éter,por exemplo, tetraidrofurano; um solvente aprótico polar, por exemplo, N,N-dimetilformamida; e misturas de tais solventes. Temperaturas algo elevadaspodem ser apropriadas para intensificar a velocidade de reação.

A adição de uma base apropriada, tal como, por exemplo, umcarbonato, hidrogenocarbonato, hidróxido, amida ou hidreto de um metalalcalino ou de um metal alcalino-terroso, por exemplo, hidróxido de sódio ouhidreto de sódio; ou uma base orgânica, tal como, por exemplo, piridina ouA/,A/-dietiletanamina, pode ser empregada.

Alternativamente, os compostos de fórmula (I), na qual Het re-presenta um heterociclo compreendendo N, parcialmente saturado ou aro-mático, monocíclico, de 5 ou 6 membros, pode ser preparado por,

i) A/-alquilação do heterociclo de fórmula (III) ou um seu sal demetal alcalino com uma arilamina de fórmula (IV);

<formula>formula see original document page 11</formula>

ii) /V-alquilação de uma amina secundária de fórmula (VI) com ocomposto de fórmula (V) para fornecer a nitroarilamina de fórmula (VII);

<formula>formula see original document page 11</formula>

iii) seguida por redução e A/-nitrosação para obter os compostosde fórmula (I).

<formula>formula see original document page 11</formula>

O uso de W nas etapas i) e ii), acima, se refere a um grupo desaída apropriado, tal como, por exemplo, halo, por exemplo, cloro, um gruposulfonilóxi, por exemplo, 4-metil-benzenossulfonilóxi. A A/-alquilação nas eta-pas i) e ii), acima, é realizada de maneira conveniente, conforme descritoanteriormente.

A redução do nitro-composto aromático (VII) é realizada de ma-neira conveniente usando-se agentes redutores conhecidos na técnica, taiscomo, por exemplo, descritos em Advanced Organic Chemistry - Jerry Mar-ch - terceira edição - seção 9-48. Muitos agentes redutores têm sido usadopara reduzir nitro-compostos aromáticos, dentre eles, Zn, Sn ou Fe e ácido;hidrogenação catalítica, tal como Pt/C 5%; AIH3-AICI3; hidrazina e um catali-sador; dodecacarboniltri-ferro [Fe3(CO)i2]-metanol; TiCI3; parafina líquidaquente; ácido fórmico e Pd/C; e sulfetos, tais como NaHS, (NH4)2S ou polis-sulfetos. Conforme descritos nos exemplos mais adiante, a reação de redu-ção preferida é uma hidrogenação catalítica usando-se Pt/C 5%.

A reação de A/-nitrosação é feita usando-se procedimentos co-nhecidos na técnica, tais como, por exemplo, descritos em Advanced Orga-nic Chemistry - Jerry March - terceira edição - seção 2-50. Tipicamente, areação é realizada com ácido nitroso gerado in situ a partir de nitrito de sódioem uma solução de ácido clorídrico aquosa ou em ácido acético.

Os compostos de fórmula (I), na qual o heterociclo (Het) com-preendendo N, parcialmente saturado ou aromático, mohocíclico, de 5 ou 6membros, não está ligado via o átomo de N ao restante, aos quais se refere,doravante, como os compostos de fórmula (Ib), em geral, podem ser prepa-rados por alquilação do benzotriazol de fórmula (VIII) com o heterociclo defórmula (III), como um reagente organometálico, em baixas temperaturas;

<formula>formula see original document page 12</formula>

A alquilação descrita acima é realizada de maneira convenientepor conversão do heterociclo, em uma primeira etapa, ao reagente de alquil-lítio, por adição de butil-lítio ao heterociclo, em uma baixa temperatura, tipi-camente -70°C, na presença de um solvente orgânico adequado, tal comoum éter, por exemplo, tetraidrofurano. Na etapa subseqüente, o reagenteorganometálico assim obtido é agitado com o benzotriazol de fórmula (VIII),em uma baixa temperatura, tipicamente -70°C, no mesmo solvente orgânicoadequado, durante 1 - 6 horas, tipicamente 2 horas.

O triarilcarbonol assim obtido pode ser facilmente reduzido comum agente de hidrogenação, tal como LiAIH4-AICI3; NaBH4 em F3CCOOH;diiodometil-silano (Me2Sil2), Fe(CO)5, P2I4; ou estanho e ácido clorídrico.Conforme fornecido nos exemplos mais adiante, o triarilcarbonol é, tipica-mente, reduzido usando-se SnCI2 e HCI (12N).

O documento EP 293 978 fornece adicionalmente a preparação,formulação e propriedades farmacêuticas de inibidores de aromatase, úteispara tratamento de doença dependente de estrogênio, de fórmula (Ic). Oscompostos de fórmula (Ic) são representados por

<formula>formula see original document page 13</formula>

os seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis ou uma suaforma estereoisomérica, em que A1=A2-A3=A4 é um radical bivalente tendo ãfórmula

-CH=N-CH=CH-(a-1),-CH=N-CH=N- (a2), ou-CH=N-N=CH- (a3);

R é hidrogênio ou Ci-6alquila;

R1 é hidrogênio, C-i-ioalquila, C3-7cicloalquila, Ar1, Ai^-C-i-ealquila,C2-6alquenila ou C2-6alquinila;

R2é hidrogênio; Ci-i0alquila opcionalmente substituída com Ar1,C3-7Cicloalquila, hidroxila ou Ci-6alquilóxi; Ar1; C2.6alquenila; C^ealquinila; C3-ycicloalquila; biciclo [2.2.1] heptan-2-ila; 2,3-dihidro-1H-indenila; 1,2,3,4-tetrahidronaftalenila; hidroxila; C^ealquenóxi opcionalmente substituído comAr2; C2-6alquinilóxi; pirimidinilóxi; di (Ar2) metóxi; (1-Ci-4alquil-4-piperidinil)óxi; ou R2 é Ci-i0alquilóxi opcionalmente substituído com halo; hidroxila; Ci-6alquilóxi; amina; mono- e di (d-6alquil) amina; trifluorometila; carboxila; Ci-ealquilóxi-carbonila; Ar1; Ai^-O-; Ai^-S-; C3.7ciçloalquila; 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila; 1H-benzimidazolila; Ci-4alquila substituída 1H-benzimidazolila; (1,1-bifenil)-4-ila ou com 2,3-dihidro-2-oxo-1H-benzimidazolila;

R3é hidrogênio, nitro, amina, mono- e di (d-ealquil) amina, halo,Ci.6alquila, hidroxila ou Ci.6alquilóxi;

Ar1 é fenila, fenila substituída, naftalenila, piridinila, aminopiridini-la, imidazolila, triazolila, tienila, halotienila, furanila, Ci-6alquilfuranila, halofu-ranila ou tiazolila; e

Ar2 é fenila, piridinila ou fenila substituída com até 3 substituintescada um independentemente selecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, d-ealquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carbo-xila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, nitro ou mono- e di-(d-6alquil) amina;

Inesperadamente, constatou-se que os inibidores de aromataseidentificados acima, aos quais pode-se referir, doravante, como compostosde acordo com a presente invenção, são potentes moduladores de CBi decanabinóide (conhecidos como antagonistas ou agonistas inversos), úteis notratamento de obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim co-mo outras doenças envolvendo a neurotransmissão de CB-\ canabinóide. Emparticular, no tratamento de distúrbios neuro-inflamatórios, tais como, porexemplo, Doença de Alzheimer, Doença de Parkinson, esclerose múltipla,demência do tipo 1 por HIV, demência do lobo frontotemporal, e várias do-enças por príon; distúrbios cognitivos e de memória, tais como, por exemplodemência e esquizofrenia; obesidade; psicose, vício, tal como um auxíliopara se parar de fumar; e distúrbios gastrointestinais, tais como, por exem-plo, náusea e vômito, úlceras gástricas, síndrome de intestino irritável, Do-ença de Chron, diarréia secretória, íleo paralítico e refluxo gastroesofagea-no.

Para um dos compostos descritos no documento EP 293 978,isto é, o racemato de 1 H-benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1H-1,2,4-triazol-1-il-metil]-1-ciclo-hexil-, foi agora constatado de maneira surpreendente que so-mente um dos enantiômeros, isto é, 1 H-benzotriazol, (-)-6-[(4-clorofenil)-1H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -ciclo-hexil-, é ativo como um modulador de CB-i.Conseqüentemente, é um objetivo dessa invenção fornecer um composto deacordo com a fórmula (Ic), na qual o composto consiste no enantiômero 1H-Benzotriazol, (-)-6-[(4-clorofenil)-1H-1,2,4-triazol-1-il-metil]-1-cicloh emparticular o composto para uso como um fármaco, ainda mais particularmen-te para uso na preparação de um medicamento para tratamento de obesida-de, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim como outras doenças en-volvendo a neurotransmissão de CE^ canabinoide. Conseqüentemente, apresente invenção se refere ao uso de compostos de fórmulas (I), (Ia), (Ib),(Ic) na preparação de um medicamento para o tratamento de obesidade,distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim como outras doenças envol-vendo a neurotransmissão de CB, canabinoide, conforme identificado acima.

A invenção inclui adicionalmente um método de tratamento deobesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim como outras doen-ças envolvendo a neurotransmissão de CBi canabinoide, em um mamífero,incluindo um ser humano, por administração de uma quantidade terapeuti-camente eficaz de um composto de acordo com a presente invenção.

Esta invenção inclui adicionalmente um método para a preven-ção de obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim como ou-tras doenças envolvendo a neurotransmissão de CBi canabinoide, em ummamífero, incluindo um ser humano, por administração de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a presente inven-ção.

Em particular, a presente invenção se refere ao uso de um inibi-dor de aromatase para a preparação de uma composição farmacêutica paratratamento de doença inflamatória do intestino, sendo que o inibidor de aro-matase é um derivado de benzotriazol substituído com (1H-azol-1-il-metila)de fórmula (I).

Os compostos de fórmula (I), e alguns dos intermediários nessainvenção, podem ter um átomo de carbono assimétrico em sua estrutura.

Esse centro quiral pode estar presente em uma configuração R e uma confi-guração S.

Formas isoméricas estereoquimicamente puras, dos compostosdesta invenção, podem ser obtidas pela aplicação de procedimentos conhe-cidos na técnica. Diastereoisômeros podem ser separados por métodos deseparação físicos, tais como cristalização seletiva e técnicas cromatográfi-cas, por exemplo, distribuição em contracorrente, e enantiômeros podem serseparados um dos outros pela cristalização seletiva de seis sais diastereo-mérico com ácidos opticamente ativos, Eles também podem ser derivados apartir das formas isoméricas estereoquimicamente puras correspondentesdos materiais de partida apropriados, contanto que a reação ocorra estereo-especificamente.

Os compostos de fórmula (I), os seus sais de adição de ácidofarmaceuticamente aceitáveis e suas formas isoméricas estereoquimicamen-te possíveis, têm propriedades farmacológicas muito interessantes. Elesmodulam a ação do receptor de CBi canabinóide.

Os receptores canabinóides pertencem aos receptores acopla-dos à proteína de classe G e desencadeia a estimulaçãó funcional de CBi,via ativação de proteínas Gj/0, aqueles eventos de sinalização que estãonormalmente a estes receptores acoplados à proteína G (GPCRs), isto é:

(i) inibição de adenilato ciclase induzida por estímulo e defeitosubseqüente de efeitos de curto e de longo prazos mediados por cAMP /proteína quinase A;

(ii) estímulo de sinalização de proteína quinase ativada por mitó-geno;

(iii) inibição de canais de Ca2+ de tipo P, Q e N, controlados porvoltagem, e estimulaçãó de canais de K+ acoplados à proteína G retificantesde maneira dirigida para dentro e

(iv) estimulaçãó de fosfatidilinositol-3-quinase e de mobilizaçãode Ca intracelular, aparentemente por meio de ativação de PLC-y, pelassubunidades py de proteínas Gj/o.

É com base nesses efeitos de sinalização intracelular que a mo-dulação do receptor de CBi pode ser avaliada in vitro, por exemplo, por me-dição da produção de cAMP em células que expressem o receptor de CBi,tais como, por exemplo, usando-se um ensaio de fluorescencia resolvido notempo, no qual cAMP contido em amostras compete com um sistema conju-gado anti-cAMP criptato / CAMP-XL665. Alternativamente, possíveis modu-ladores de receptor de CB^ podem ser identificados usando-se ensaios deligação a receptor ou em preparação de membrana ou in situ em seções ce-rebrais de animais de laboratório, tais como, por exemplo, fornecidos nosexemplos mais adiante. O efeito in vivo dos moduladores de receptor deCB-i, por exemplo, pode ser demonstrado por medição do efeito dós com-postos em uma doseresposta aguda sobre a assimilação no sangue em ra-tos Sprague Dawley machos. O ensaio com cAMP in vitro e os ensaios deligação a CBi é o experimento de alimentação in vivo fornecido nos exem-plos mais adiante, ilustram a capacidade dos compostos de fórmula (I) paramodulara atividade de receptor de CBi.

Em vista de suas propriedades farmacológicas úteis, os compos-tos em questão podem ser formulados em várias formas farmacêuticas, parafinalidades de administração.

Para preparar as composições farmacêuticas desta invenção,uma quantidade eficaz do composto particular, em forma de sal de adição deácido, como o ingrediente ativo, é combinada em adição sob mistura íntimacom um veículo farmaceuticamente aceitável, veículo este que pode assumiruma ampla variedade de formas, dependendo da forma de preparação dese-jada para administração. Estas composições farmacêuticas estão, deseja-velmente, em forma de dosagem unitária adequada, de preferência, paraadministração oralmente, retalmente, percutaneamente ou por injeção pa-renteral. Por exemplo, na preparação das composições em forma de dosa-gem oral, quaisquer meios farmacêuticos usuais podem ser empregados,tais como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e os similares, no casode preparações líquidas orais, tais como, suspensões, xaropes, elixires esoluções, ou veículos sólidos, tais como amidos, açúcares, caulim, lubrifican-tes, aglutinantes, agentes desintegrantes e os similares, no caso de pós,pílulas, cápsulas e comprimidos. Por causa de sua facilidade de administra-ção, comprimidos e cápsulas representam a forma de unidade de dosagemoral mais vantajosa, em cujo caso veículos farmacêuticos sólidos são obvi-amente empregados. Para composições parenterais, o veículo usualmentecompreenderá água estéril, pelo menos em grande parte, embora outrosingredientes possam estar incluídos, por exemplo, para auxiliar a solubilida-de. Por exemplo, podem ser preparadas soluções injetáveis, nas quais oveículo compreende solução salina, solução de glicose ou uma mistura desoluções salina e de glicose. Também podem ser preparadas suspensõesinjetáveis, em cujo caso podem ser empregados veículos líquidos apropria-dos, agentes de suspensão e os similares.

Os exemplos seguintes pretendem ilustrar e não limitar o escopoda invenção. A menos se afirmado de outra maneira, todas as partes aquisão em peso.

Parte Experimental

Doravante, o termo 'PF' significa ponto de fusão, THF' significatetraidrofurano, 'EtOAc' significa acetato de etila, 'DIPE' significa diisopropiléter, 'MgS04' significa sulfato de magnésio, 'CH2CI2' significa diclorometano,'DMA' significa dimetilacetamida, 'DMSO' significa sulfóxido de dimetila,'NaBH4' significa tetrahidroborato de sódio (-1).

A. Preparação dos intermediários

Exemplo A1

a) Preparação do intermediário 1

<formula>formula see original document page 18</formula>

5-Cloro-/V-ciclohexil-2-nitrobenzenamina (0,244 mol) foi agitadain THF (400 ml_). A seguir, 4-cloro-benzeno-acetonitrila (0,244 mol), umasolução a 10 N de hidróxido de sódio (78,8 ml_) e cloreto de /V,A/,/V-trietil-benzeno-metanamínio (6,4 g) foram adicionados. A mistura de reação foiagitada durante 48 horas, a 50°C. A mistura de reação foi vertida em água,então, ela foi extraída com CH2CI2. A camada orgânica separada foi secada(MgS04), filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna sobre sílica-gel (eluente: CH2CI2). As frações dese-jadas foram coletadas e o solvente foi evaporado, resultando 45 g (49,9%)do intermediário 1.

b) Preparação do intermediário 2

<formula>formula see original document page 19</formula>

O intermediário 3 (0,07 mol) foi agitado em uma solução a 6 Nreto de A/,A/,A/-trietil-benzeno-metanamínio (1,3 g) foi adicionado, seguido porcarbonato de potássio (13 g). Ar comprimido foi deixado borbulhar atravésdurante 48 horas, à temperatura ambiente. A mistura de reação foi vertidaem água. A goma resultante foi removida por filtração, lavada com água,então, recristalizada a partir de metanol. O precipitado foi removido por filtra-ção e secado, resultando 20,5 g (81,3%) do intermediário 2.

c) Preparação do intermediário 3

<formula>formula see original document page 19</formula>

Uma mistura do intermediário 2 (0,07 mol) em metanol (250 ml_)foi hidrogenada, à temperatura ambiente, com Níquel de Raney (25 g) comoum catalisador. Depois de absorção de H2 (3 equivalentes, pressão: 0,3 mPa(3 bar)), o catalisador foi removido por filtração sobre Celite e o filtrado foievaporado, resultando 23 g de intermediário 3.

d) Preparação de intermediário 4

<formula>formula see original document page 19</formula>

O intermediário 1 (0,07 mol) foi agitado em DMA (250 ml_). Clo-de HCI (250 mL) e resfriado para 0°C. Uma solução de nitrito de sódio (0,104mol) em água (20 mL) foi adicionada gota a gota (em 0°C) e a mistura dereação resultante foi agitada durante 2 horas, à 0°C. A mistura foi alcaliniza-da com amônia concentrada, então, extraída com CH2CI2. A camada orgâni-ca separada foi lavada com água, secada (MgS04), filtrada e o solvente éevaporado, resultando 20 g (84%, óleo) do intermediário 4.

e) Preparação do intermediário 5

<formula>formula see original document page 20</formula>

Uma solução do intermediário 4 (0,059 mol) em metanol (200mL) foi agitada, a 0°C. Uma solução de NaBH4 (0,06 mol) em água (20 mL)10 foi adicionada e a mistura de reação resultante foi agitada durante uma hora,a 10°C. A mistura foi vertida em água e extraída com CH2CI2. A camada or-gânica separada foi secada, filtrada e o solvente foi evaporado. O resíduo(13 g de óleo) foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica-gel (e-luente: CH2CI2 / metanol 98/2). As frações de produto foram coletadas e osolvente foi evaporado, resultando 8 g (40%) do intermediário 5.

f) Preparação do intermediário 6

<formula>formula see original document page 20</formula>

Cloreto de tionila (8 mL) foi adicionado ao intermediário 5 (0,023mol) em CH2CH2 (100 mL), agitados a 0°C. A mistura de reação foi agitadadurante 12 horas, em temperatura ambiente. O solvente foi evaporado, re-sultando 8,5 g do intermediário 6.

g) Preparação do intermediário 7

<formula>formula see original document page 20</formula>

Uma mistura do intermediário 6 (0,023 mol), 1H-1,2,4-triazol(0,117 mol) e carbonato de potássio (0,117 mol) em acetonitrila (200 mL) foiagitada e refluxada durante 12 horas. O solvente foi evaporada até a secura.O resíduo foi absorvido em água, então, extraído com CH2CI2. A camadaorgânica separada foi lavada com água, secada (MgS04), filtrada e o solven-te foi evaporado. O resíduo (10 g, óleo) foi purificado por cromatografia líqui-da de alto desempenho sobre sílica-gel (eluente: CH2CI2 / metanol 98/2).Várias frações de produto foram coletadas e o solvente foi evaporado. Umafração resultou em 2,4 g e foi recristalizada a partir de dietil éter, removidapor filtração e secada, resultando em 1,8 g (20%; PF: 154°C) do intermediá-rio 7.

Exemplo A2

a) Preparação do intermediário 8

<formula>formula see original document page 21</formula>

Hidróxido de potássio (300 g) foi agitado em metanol (1.500 ml_)(elevação de temperatura exotérmica para 70°C). A mistura foi deixada res-friar para 55°C: 4-Cloro-benzeno-acetonitrila (1,38 mol) foi adicionada e amistura foi agitada durante 15 min. Uma solução de 1-cloro-2-nitro-benzeno(1,25 mol) em metanol (250 mL) foi adicionada (elevação de temperaturaexotérmica para 50°C). Água (2.000 mL) foi adicionada e a mistura foi agita-da até que ela se tornasse uma suspensão homogênea. A suspensão foivertida em uma mistura de gelo (1.250 g) e ácido acético glacial (545 mL). Amistura foi agitada durante uma noite. O precipitado resultante foi removidopor filtração e cristalizado a partir de 2-propanol. O precipitado foi removidopor filtração e, então, agitado em DIPE, removido por filtração e secado, re-sultando 80,5 g (22,0%, PF: 181,6°C; (E+Z)) do intermediário 8.

b) Preparação do intermediário 9

<formula>formula see original document page 21</formula>

Uma mistura do intermediário 8 (0,172 mol), hidróxido de potás-sio (120 g) e metanol (400 mL) em água (1.200 mL) foi agitada até que fosseformada uma suspensão vermelha homogênea. Uma solução de peróxido dehidrogênio (240 g) a 30% foi adicionada e a mistura de reação foi agitadadurante 4 horas, a 30-35°C. O precipitado amarelo foi removido por filtração,lavado com água, então, cristalizado a partir de etanol. O precipitado foi re-movido por filtração e secado, resultando 22 g (43,2%; PF: 120°C) do inter-mediário 9.

c) Preparação do intermediário 10 ;

<formula>formula see original document page 22</formula>

Uma mistura do intermediário 9 (0,1 mol) em metanol (250 mL)foi agitada a 10°C. NaBH4 (0,05 mol) foi adicionado em porções. A misturafoi agitada durante 1 hora, a 10°C, levada à temperatura ambiente e ácidoacético (3 mL) em água (20 mL) foi adicionado gota a gota. A mistura foi e-vaporada, água (50 mL) foi adicionada e o produto foi extraído com Dl PE. Acamada orgânica foi secada (MgS04) e evaporada, resultando : 27 g (90%)do intermediário 10.

d) Preparação do intermediário 11

<formula>formula see original document page 22</formula>

Uma solução de HBr (250 mL) aquosa à 48% foi agitada e o in-termediário 10 (0,1 mol) foi adicionado em porções. A mistura foi refluxadadurante 2 horas e resfriada. O produto foi extraído com tolueno e lavado comágua. A camada orgânica foi secada (MgS04) e evaporada, resultando 24 g(70%) do intermediário 11.

e) Preparação do intermediário 12

<formula>formula see original document page 22</formula>

Uma mistura do intermediário 11 (0,0735 mol) e 1 H-imidazol(0,397 mol) em acetonitrila (250 mL) foi agitada e refluxada durante 8 horas.A mistura foi evaporada, água (200 mL) foi agitada e extraída com CH2CI2. Acamada orgânica foi extraída duas vezes com a HCI 1 N. A camada aquosafoi alcalinizada com hidróxido de amônio, enquanto se resfriava. O produtofoi extraído com CH2CI2. A camada orgânica foi secada (MgS04) e evapora-da. O resíduo de base livre foi convertido no sal de ácido etanodióico (1:1)em 2-propanona. O precipitado foi removido por filtração e secado, resultan-do 15 g (58%; .C2H204 (1:1)) do intermediário 12.

f) Preparação do intermediário 13

<formula>formula see original document page 23</formula>

Uma mistura da base livre (0,047 mol) do intermediário 12 e ci-clohexanamina (0,25 mol) em DMSO (62,5 ml_) foi agitada à 80°C, durante24 horas. Água foi agitada e extraída com CH2CI2. A camada orgânica foisecada (MgS04) e evaporada. O resíduo (28,8 g) foi purificado em um filtrode vidro sobre sílica-gel e por cromatografia em coluna sobre sílica-gel (elu-ente: metanol / triclorometano 2/98). As frações puras foram coletadas e e-vaporadas. O resíduo foi evaporado novamente com tolueno. O resíduo ob-tido (2,0 g) foi convertido no sal de ácido etanodióico (1:1) em 2-propanol. Oproduto foi precipitado com DIPE e removido por decantação. O resíduo foicristalizado a partir de 2-propanona. O precipitado foi removido por filtração,lavado com 2-propanona e secado no vácuo, a 50°C, resultando 0,2 g (PF:114.4°C; C2H204 (1:1)) do intermediário 13.

g) Preparação do intermediário 14

<formula>formula see original document page 23</formula>

Uma mistura da base livre (0,026 mol) do intermediário 13 emuma solução de tiofeno à 4% (2 ml_) e metanol (250 ml_) foi hidrogenada àtemperatura ambiente com Pt/C (5%) (2 g) como um catalisador. Depois daabsorção de H2 (3 equivalentes), o catalisador foi removido por filtração e ofiltrado foi evaporado. O resíduo foi evaporado novamente com tolueno, re-sultando 7,9 g (77%) do intermediário 14.Exemplo A3

a) Preparação do intermediário 15

<formula>formula see original document page 24</formula>

Uma mistura da base livre (0,047 mol) do intermediário 12 e 3'metil-1-butanamina (0,24 mol) em DMSO (62,5 mL) foi agitada à 80°C, du-rante 24 horas. Água foi adicionada e extraída com CH2CI2. A camada orgâ-nica foi secada (MgS04) e evaporada. O resíduo (25,5 g) foi purificado emum filtro de vidro sobre sílica-gel (eluente: triclorometano). As frações purasforam coletadas e evaporadas. O resíduo (15,9 g) foi purificado por cromato-grafia em coluna sobre sílica-gel (eluente: metanol / triclorometano 2/98). Asfrações puras foram coletadas e evaporadas. O resíduo obtido (2,8 g) foiconvertido no sal de ácido nítrico (1:1) em EtOAc (10 mL). O produto foi pre-cipitado com Dl PE e removido por decantação. O resíduo foi cristalizado apartir de EtOAc (15 mL). O precipitado foi removido por filtração, lavado comEtOAc, DIPE e secado no vácuo, a 60°C, resultando 2,1 g (69%; PF:150,5°C; .HNO3 (1:1)) do intermediário 15.

b) Preparação do intermediário 16

<formula>formula see original document page 24</formula>

Uma mistura da base livre (0,015 mol) do intermediário 15 emuma solução de tiofeno à 4% (1 mL), metanol (200 mL) e NHs/metanol (50mL) foi hidrogenado, à temperatura ambiente, com Pt/C (5%) (1 g), como umcatalisador. Depois da absorção de H2 (3 equivalentes), o catalisador foi re-movido por filtração e o filtrado foi evaporado. O resíduo foi evaporado no-vamente com tolueno, resultando 9,6 g (100%) do intermediário 16.

Exemplo A4

a) Preparação do intermediário 17<formula>formula see original document page 25</formula>

Uma mistura da base livre (0,047 mol) do intermediário 12 e 4-cloro-benzeno-metanamina (0,21 mol) em DMSO (62,5 ml_) foi agitada a80°C, durante 24 horas. Água foi adicionada e extraiu-se com CH2CI2. A ca-mada orgânica combinada foi secada (MgS04) e evaporada. O resíduo foipurificado em um filtro de vidro sobre sílica-gel (eluente 1: tricloro-metano)(eluente 2: (metanol/NH3) / triclorometano 2,5 / 97,5). As frações puras foramcoletadas e evaporadas. O resíduo foi evaporado por cromatografia em co-luna sobre sílica-gel (eluente: (metanol/NH3) / triclorometano 1 I 99). As fra-ções puras foram coletadas e evaporadas, resultando 16,5 g (78%) do in-termediário 17.

b) Preparação do intermediário 18

<formula>formula see original document page 25</formula>

Água (250 ml_) em hidrossulfito de sódio (0,18 mol) foi adiciona-da a uma mistura em agitação do intermediário 17 (0,036 mol) em etanol(600 ml_), à temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 2 horas eevaporada. O resíduo foi agitado em água e alcalinizado com carbonato desódio. O produto foi extraído com CH2CI2. A camada orgânica foi secada(MgS04) e evaporada, resultando 7,8 g (50%) do intermediário 18.

Exemplo A5

a) Preparação do intermediário 19

<formula>formula see original document page 25</formula>

4-Cloro-benzeno-acetonitrila (0,562 mol) foi adicionada a 5-cloro-N-metil-2-nitrobenzenamina (0,536 mol) em THF (620 mL). Cloreto deN,N,N-trietil-benzeno-metanamínio (14 g) foi adicionado. Hidróxido de sódio10 N (173,2 ml_) foi adicionado e a mistura de reação resultante foi agitadadurante 48 horas, à 50°C. A mistura foi vertida em água, acidificada com á-cido clorídrico concentrado, então, extraída com EtOAc. A camada orgânicaseparada foi lavada com água, secada (MgS04), filtrada e o solvente foi e-vaporado. O resíduo foi agitado em DIPE, removido por filtração, lavado comDIPE, então, secado, resultando 108 g (66,8%) do intermediário 19.

b) Preparação do intermediário 20

<formula>formula see original document page 26</formula>

O intermediário 19 (0,358 mol) foi agitado em DMA (800 mL).Carbonato de potássio (54 g) e cloreto de /V,/V,/V-trietil-benzeno-metanamínio(5,4 g) foram adicionados. Ar comprimido (02) foi deixado borbulhar atravésda mistura durante 48 horas, à temperatura ambiente. A mistura foi vertidaem água. O conjunto foi filtrado e o resíduo do filtro foi lavado com água,então, absorvido em DIPE (3 x), removido por filtração e secado, resultando100 g (97%) do intermediário 20.

c) Preparação do intermediário 21

<formula>formula see original document page 26</formula>

A mistura do intermediário 20 (0,206 mol) em metanol (500 ml)foi hidrogenado durante 2 horas com Níquel de Raney (50 g), como um cata-lisador. Depois da absorção de H2 (3 equivalentes), o catalisador foi removi-do por filtração e o filtrado foi evaporado, resultando 38 g (70,6%) do inter-mediário21.

d) Preparação do intermediário 22

<formula>formula see original document page 26</formula>

O intermediário 21 (0,146 mol) foi agitado em HCI 6 N (400 mL)e resfriado para 5°C. Uma solução de nitrito de sódio (0,218 mol) em água(q.s.p.) foi adicionado, enquanto a temperatura foi mantida em 5°C. Então, amistura de reação foi agitada durante 6 horas, à temperatura ambiente. Oprecipitado foi removido por filtração e secado, resultando 32 g (80,8%; PF:169,9°C) do intermediário 22.

e) Preparação do intermediário 23

<formula>formula see original document page 27</formula>

n-Butil-lítio (29,3 ml_) foi adicionado gota a gota a uma soluçãode tiazol (0,0375 mol) em THF, à -70°C, sob N2) e a mistura foi agitada à -70°C durante 1 hora. Uma solução do intermediário 22 (0,0312 mol) em THFfoi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada à -70°C, durante 2 horas. Amistura foi submetida a quenching com água e extraída com dietil éter. Acamada orgânica foi secada (MgSC^), removida por filtração e evaporada. Oresíduo (11,3 g) foi cristalizado a partir de CH2CI2, resultado 10,88 g (98%;PF: 162,1 °C) do intermediário 23.

B. Preparação dos compostos

Exemplo B1

Preparação dos compostos 1 e 2

<formula>formula see original document page 27</formula>

composto 1 composto 2

O intermediário 7 (0,350 g, 0,00089 moles) foi separado e purifi-cado por cromatografia em coluna quiral sobre ChiralPak AD (500 g, eluente:100 % etanol; escoamento: 110 mL/min). Dois grupos de fração de produtosforam coletados e seu solvente foi evaporado, resultando 0,120 g ( lmJ365 = r -|20"c+15 (c: 1 mg/mL, metanol)) de composto 1 e 0,120 g (lMJ365 = -17 (C: 1mg/mL, metanol)) de composto 2.

Os seguintes compostos foram preparados de maneira corres-pondente,<table>table see original document page 28</column></row><table>

Exemplo B2

Preparação do composto 3

<formula>formula see original document page 28</formula>

O intermediário 14 (0,021 mol) em HCI 5 N (100 ml_) foi agitadoà 0 - 5°C. Nitrito de sódio (0,105 mol) em água (20 ml_) foi adicionado gota agota e a mistura foi agitada à temperatura ambiente, durante 3 horas. A mis-tura foi vertida em gelo e alcalinizada com carbonato de sódio. O produto foiextraído com CH2CI2. A camada orgânica foi secada (MgSC»4) e evaporado.

O resíduo (8,9 g) foi purificado duas vezes em um filtro de vidro sobre sílica-gel (eluente 1: metanol / triclorometano 2/98) (eluente 2: (metanol-NH3) / tri-clorometano 1/99). As frações puras foram coletadas e evaporadas. O resí-duo (7,2 g) foi cristalizado a partir de EtOAc (40 ml_). O precipitado foi remo-vido por filtração, lavado com EtOAc, Dl PE e secado no vácuo à 50°C, resul-tando 4,8 g (59%; PF: 162,0°C) do composto 3.

Os seguintes compostos foram feitos de maneira correspondente,

<table>table see original document page 28</column></row><table><table>table see original document page 29</column></row><table>

Co. N9 13; .HCI (1:1); PF: 188,6 °C Exemplo B3

Preparação do composto 4

O intermediário 16 (0,026 mol) em HCI 5 N (100 mL) foi agitadoà 0 - 5°C. Nitrito de sódio (0,13 mol) em água (20 mL) foi adicionado gota agota e a mistura foi agitada à temperatura ambiente, durante uma noite. Amistura foi vertida em gelo e alcalinizada com carbonato de sódio. O produtofoi extraído com CH2CI2. A camada orgânica foi secada (MgSCU) e evapora-da. O resíduo (8,4 g) foi purificado em um filtro de vidro sobre sílica-gel (elu-ente: metanol / triclorometano 2 / 98). As frações puras foram coletadas eevaporadas. O resíduo (7,4 g) foi convertido no sal de ácido clorídrico (1:1)em EtOAc (20 mL). O produto foi precipitado com DIPE e decantado. O resí-duo foi cristalizado a partir de 2-propanona (15 mL). O precipitado foi remo-vido por filtração, lavado com 2-propanona, DIPE e secado no vácuo à 50°C,para dar 4,5 g (41,5%; PF: 163,8°C; .HCI (1:1)) do composto 4.

Exemplo B4

Preparação do composto 5

<formula>formula see original document page 29</formula>

O intermediário 18 (0,0185 mol) em HCI 5 N (100 mL) e ácidoacético (35 mL) foi agitado à 0 - 5°C. Nitrito de sódio (0,0204 mol) em água(20 mL) foi adicionado gota a gota e a mistura foi agitada à temperatura am-biente, durante 2 horas. A mistura foi vertida em gelo e alcalinizada com car-bonato de sódio. O produto foi extraído com CH2CI2. A camada orgânica foisecada (MgS04) e evaporada. O resíduo (7,2 g) foi purificado duas vezespor cromatografia em coluna sobre sílica-gel (eluente 1: metanol / CH2CI2 5 /95) (eluente 2: (metanol / NH3) / EtOAc 2,5 / 97,5). As frações foram coleta-das e evaporadas. O resíduo (4,5 g) foi purificado em um filtro de vidro sobresílica-gel (eluente: (metanol / NH3) / EtOAc 2,5 / 97,5). As frações puras fo-ram coletadas e evaporadas. O resíduo (4 g) foi convertido no sal de ácidonítrico (1:1) em EtOAc (20 ml_). O produto foi precipitado com DIPE e remo-vido por decantação. O resíduo foi cristalizado a partir de 2-propanona (25mL). O precipitado foi removido por filtração, lavado com DIPE e secado novácuo, à 60°C, resultando 3,5 g (38%; PF: 185,9°C; .HN03 (1:1)) do composto 5.

Exemplo B5

Preparação do composto 6

<formula>formula see original document page 30</formula>

Uma mistura do intermediário 23 (0,0248 mol) e cloreto de esta-nho (28,25 g) em ácido acético (40 mL) e HCI 12 N (40 ml_) foi agitada e re-fluxada durante uma noite. A mistura foi resfriada, vertida em água e basifi-cada com hidróxido de amônio. A mistura foi filtrada através de celite e extra-ída com CH2CI2. A camada orgânica foi lavada com uma solução de carbo-nato de potássio à 10% e água, secada (MgS04), removida por filtração eevaporada. O resíduo (6,45 g) foi purificado por cromatografia em colunasobre sílica-gel (eluente : CH2CI2 / metanol / hidróxido de amônio 99,25 /0,75 / 0,1) (15 - 40 um). As frações puras foram coletadas e evaporadas. Oresíduo (4,21 g) foi convertido no sal de ácido nítrico (1:1) e recristalizado apartir de metanol / dietil éter, resultando: 2,54 g (50%; PF: 113,3°C; .HN03 (1:1)) do composto 6.

C. Exemplos Farmacolóqicos

A capacidade dos compostos da presente invenção de modula-rem a atividade de receptor de CB,, pode ser demonstrada nos seguintesprocedimentos de teste.

ReagentesCP-55,940 [Cadeia lateral 2,3,4(N)-3H]- (168 Ci/mmol) e [3H]-microescalas foram adquiridos a partir de PerkinElmer Life Sciences, Inc.(Boston, MA, EUA) e Amersham Biosciences Europe GmbH (Benelux, Roo-sendaal, Holanda), respectivamente. CP55,940, JWH133, Anandamida fo-ram adquiridos a partir de Tocris Cookson (Bristol, RU). Rimonabant da Sa-nofi e compostos de JNJ foram obtidos 'em-casa' a partir da farmácia cen-tral. Todos os outros reagentes eram de elevada pureza e foram obtidos apartir da Merck (Darmstadt, Alemanha) ou da Sigma-AIdrich NV/SA (Bornem,Bélgica).

Células

Células CHO-K1 transfectadas com Cb-1 humano (Euroscreen;N9 Cat. ES-110-C; hCBrD1; nQ de acesso Swissprot X54937) foram manti-das conforme previamente descrito (Felder et al., 1995 & 1998). Para a pre-paração de membrana, as células foram cultivadas em meio DMEM/Ham'sF12 contendo 10 % (v/v) de FCS inativado por calor, jlOO U/mL de penicilinae 100 ug/mL dé estreptomicina, 100 \xg/mL de piruvato e 292 ng/ml_ de L-glutamina sob 5% de C02, à 37QC, em frascos rolantes, com meio trocado 3vezes por semana. Quando ocorreu 90% de confluência, as células foramcoletadas por tripsinização e reinoculadas em diluições de 1:10 ou de 1:20em frascos rolantes frescos. Para a medição da formação de cAMP, as célu-las foram cultivadas até 90% de confluência em frascos Falcon T175.

Preparação de membrana

Antes da preparação de membrana, células confluentes foramtratadas com butirato 5 mM, durante 24 horas. O meio foi aspirado e as célu-Ias foram raspadas dos frascos em 50 ml_ de tampão de homogenizaçãoconsistindo em Tris-HCI 15 mM, pH 7,4, contendo MgCI2 2 mM, EDTA 0,3mM e EGTA 1 mM. As células foram, então, centrifugadas durante 10 minu-tos à 1 .700 x g, à 49C, e homogenizadas em 20 ml_ do mesmo tampão comum Ultra Turrax. O pélete de membranas bruto foi coletado por duas etapasde centrifugação consecutivas à 20.000 x g, durante 10 min, e durante 20min, à 25.000 x g, respectivamente, separadas por uma etapa de lavagem /homogenização em 10 mL de tampão de homogenização. Os péletes decélulas finais foram resuspensos em um volume de 6 mL/frasco rolante, emtampão de estoque consistindo em Tris-HCI 7,5 mM, pH 7,4, contendo MgCI212,5 mM, EDTA 0,3 mM, EGTA 1 mM e sacarose 250 mM. O teor em proteí-na foi verificado pelo método BioRad (Bradford, 1976).

Animais

Ratos Sprague Dawley; machos (pesando 250 - 300 g no mo-mento do experimento) foram obtidos a partir de Charles River (Sulzfeld,Kisslegg, Alemanha). Camundongos C57BI/6J Rj machos (pesando 25 - 30 gno momento dos experimentos) foram obtidos a partir de Janvier (Le Genest-St-lsle, França). Todos os animais tinham livre acesso à água e foram abri-gados individualmente sob ciclo de claro : escuro de 12 h (luzes ligadas às22:00 h) e em uma temperatura de 19 - 22QC e 35 - 40% de umidade, emgaiolas Techniplast IVC adaptadas para se ajustarem aos alimentadores ex-ternos. Os ratos e os camundongos foram alimentados com uma dieta purifi-cada padrão contendo 10% kcal de gordura (Dyets, Inc. Bethlehem, EUA; oudietas de pesquisa, New Brunswick, NJ, EUA). Todos os experimentos foramrealizados de acordo com as Diretivas do Conselho da Comunidade Euro-péia (86/609/EEC) e foram aprovados pelo comitê ético local.

Exemplo C1: Ligação a receptor por competição por Cb-1 em membranas decélulas

Ensaios de ligação por competição foram realizados em triplicataem um volume final de 0,5 mL contendo tampão de incubação (Tris-HCI 50mM, pH 7,4, contendo EDTA 2,5 mM e 0,5 % (p/v) de BSA), 50 |il de 3H-CP55.940 (0,5 nM final), 0,4 mL de proteínas de membrana de CHO-K1transfectadas (60 |j.g/mL) na presença ou na ausência do composto de teste.A ligação não específica foi determinada usando-se CP55.940 1 |iM. As a-mostras foram incubadas durante 1 hora, à 25 9C, sendo terminada por fil-tração rápida em filtros GF/C pré-embebidos em polietilenimina à 0,1%, u-sando-se um Unifilter-96 Harvester (PerkinElmer N.V./S.A. Bélgica). Os fil-tros foram lavados 6 vezes com tampão de lavagem frio (Tris-HCI 50 mM,pH 7,4, contendo BSA à 0,1%), as placas foram secadas ao ar durante umanoite antes da ligação [3H]CP55,940 foi medida por contagem por cintilaçãolíquida usando-se um contador de cintilação em microplaca TopCount NXT(Packard BioScience/ PerkinElmer N.V./S.A. Bélgica). Valores de Cl50 foramdeterminados por uma equação de ligação a sítio único (GraphPad Prism,San Diego, CA, EUA).

Exemplo C2: Acumulação de AMP cíclico

Usando-se o ensaio com cAMP de fluorescência resolvido quan-to ao tempo homogêneo dinâmico, comercialmente disponível, as mediçõesde cAMP foram realizadas em células, CHO-K1 que expressam de maneiraestável o receptor de Cb-1. As células foram descoladas dos frascos usan-do-se 3 ml_ de EDTA (0,04% (p/v) em PBS) e resuspensas em PBS (semCa2+ e Mg2+) e centrifugadas em 500 x g, durante 5 min. O pélete de célulasfoi ressuspenso em tampão de estimulação (meio HBSS contendo IBMX 1mM, Hepes 5 mM, MgCI2 10 mM e 0,1% (p/v) de BSA) e foi colocado emuma placa de 96 cavidades negra, em uma densidade de células de 20.000células por cavidade. Depois de 30 minutos, à 25QC, um volume igual detampão de estimulação, contendo forskolina e CP55940 (agonista) e/ou umantagonista de Cb-1, foi adicionado às células. Depois de incubação por 30minutos, à 25eC, a detecção de cAMP foi realizada por adição de um volumeigual de conjugados de CAMP-XL665 e anti-cAMP-criptato. A placa foi incu-bada durante um adicional de 60 minutos, à 259C, e, então, medidas comDiscovery (PerkinElmer N.V./S.A. Bélgica).

Exemplo C3: Experimentos de alimentação

Foi realizada uma análise de dose-resposta aguda para cadacomposto. Todos os ratos e camundongos foram designados aleatorimentee dosados oralmente com cada veículo (ciclodextrano à 10% contendo sali-na 0,9% (p/v)) ou veículo contendo uma única concentração do composto(0,16, 0,63, 2,50, 10,0, 40,0 mg/Kg à 10 mLAg), de modo que a latência mé-dia a partir do tempo de administração de droga e desligamento de luz foi de45 minutos, com 6 animais por grupo. A ingestão de alimento foi medida 1,2, 4, 6 e 24 horas depois do desligamento da luz.

Exemplo C4: Experimentos de ocupação do receptor

Em experimentos complementares, para determinação da ocu-pância de receptores de Cb-1 por vários compostos em diferentes regiões docérebro, os ratos e os camundongos foram tratados com cinco doses, vari-ando desde 0,6 a 40 mg/Kg, sob as mesmas condições conforme previa-mente descrito. Os animais foram mortos por decapitação 1 ou 2 horas de-pois do desligamento da luz. Os cérebros foram removidos rapidamente econgelados em 2-metil-butano resfriado em gelo seco (entre -30 e -409C).Seções coronais (10 |im de espessura) foram cortadas usando-se um micró-tomo criostático Reichert Jung 2800R (Cambridge Instruments, Cambridge,RU) foram cortadas no nível do striatum / nucleus accumbens, hipotálamoanterior e hipotálamo médio (0,70, -1.80, 3.30mm rostral com relação aBregma, respectivamente) usando-se o atlas estereotáxico (Paxinos & Wat-son, 1998) para referência anatômica, e degelo-montados em lâminas demicroscópio revestidas com poli-lisina (StarFrost, Knittel Glãser, Alemanha).As seções foram armazenadas à -80-C até o uso.

Ligação de receptor in vitro

Esse método foi descrito previamente (Glass et ai, 1997; Adamset al., 1998; Harrold et al., 2002). Experimentos de saturação e de associa-ção foram realizados primeiramente para determinar a Kà de [3H]CP55,940.Seções coronais contendo o nucleus accumbens e o putâmen caudato (0,70a partir de Bregma) foram usados para análise de Scatchard a partir de ani-mais não tratados. Brevemente, as lâminas foram deixadas alcançar a tem-peratura ambiente e foram incubadas com 200 \i\ de tampão de ligação(Tris-HCI 50 mM, 5% (p/v) de BSA, pH 7,4, contendo PMSF 50 (iM) conten-do várias concentrações de [3H]CP55,940 (0,01, 0,1, 1, 10, 100 nM) na au-sência (ligação total) ou 10 uM CP55,940 (ligação não específica) à tempe-ratura ambiente durante 120 minutos. Depois de incubação, o ligante nãoligado foi removido por enxágüe duas vezes em tampão de lavagem (Tris-HCI 50 mM, 1% (p/v) de BSA, pH 7,4) à 4QC, durante 10 minutos por lava-gem, seguido por uma rápida imersão em água deionizada fria (49C), pararemover sais. Seções foram, então, ou raspadas das lâminas com filtrosWhatman GF/C, colocadas em frascos de cintilação com 3 ml_ de coquetelde cintilação (Ultra Gold, PerkinElmer N.V./S.A. Bélgica) e contadas por cinti-lação líquida (analisador de cintilação líquida Tri-Carb 1900CA, Packard/PerkinElmer N.V./S.A. Bélgica). Alternativamente, seções foram processa-das como para [3H]CP55,940 auto-radiografia (ver abaixo). A transformaçãode dados e cálculo dos valores de Ka foram determinados por uma equaçãode ligação a sítio único (GraphPad Prism, San Diego, CA, EUA).

Exemplo C5: Ligação de receptor por competição em seções do cérebro Cb-1

Para experimentos de ligação por competição, tampões de rea-ção em conjunto com os tempos / temperaturas de incubação e de lavagemforam idênticos àqueles do ensaio de ligação in-situ, descritos previamente.Seções coronais contendo o nucleus accumbens e o putâmen cuadato (0,70a partir Bregma) foram usadas a partir de animais não tratados. Sete con-centrações de cada composto variando desde 10 pM a 10 jllM foram testa-das, com ligação não específica determinada usando-se CP55.940 10 (iM, ea ligação total foi determinada usando-se [3H]CP55,940 10 nM. Cada expe-rimento foi repetido três vezes. Valores CI5o foram determinados usando-seprograma de computador GrapgPad Prism (San Diego, CA, EUA).

Ligação a receptor ex-vivo em seções do cérebro

Três seções do cérebro adjacentes, a partir do mesmo animaltratado (ver Experimentos de alimentação e de ocupação do receptor) foramcoletadas por lâmina através de três planos diferentes (0,70, -1.80, 3.30 mmrostral com relação a Bregma). Tampões de reação e temperaturas / temposde lavagem foram idênticos àqueles do ensaio de ligação in-situ, descritospreviamente. A incubação foi restrita a 20 minutos, à temperatura ambiente,para minimizar a dissociação de fármaco a partir do receptor. A marcação dereceptor ex-vivo receptor foi expressa como a percentagem de marcação dereceptor em regiões do cérebro correspondentes de animais tratados comsalina. Como somente receptores não ocupados permanecem disponíveispara o rádio-ligante, a marcação de receptor ex-vivo é inversamente propor-cional à ocupação do receptor pelo fármaco administrado in-vivo. As percen-tagens de ocupancia de receptor pelo fármaco administrado aos animaiscorrespondem a 100% menos a percentagem de marcação de receptor noanimal tratado. A percentagem de ocupação de receptor foi lançada em grá-fico contra a dosagem, e a curva de melhor ajuste de dose-efeito log sigmoi-dal foi calculada usando-se análise de regressão não linear usando-se oprograma de computador GraphPad Prism (San Diego, CA, EUA).

Auto-radiografia com [3H]CP55,940

Depois de lavagem, as seções foram, então, rapidamente seca-das sob uma corrente de ar morno, antes de serem colocadas em cassetesde raios X, com padrões de micro-escala de trítio montados em lâminas(RPA 501 e RPA 505; Amersham) e expostas a trítio-Hyperfilm (RPN 535B)durante 10 semanas. Os filmes foram, então, revelados em Kodak D19 du-rante 3 minutos, à temperatura ambiente, lavados e fixados. Todos os auto-radiogramas foram analisados densitometria por computador (AIS system,Imaging Research Inc., Brock University, St. Catherines, Ontario, Canadá).As densidades ópticas nas regiões anatômicas de interesse foram transfor-madas em níveis de radioatividade ligada (fmol/mg de tecido equivalente)gerados pelas 3H-microescalas.

Valores de pCI50 para ambos os experimentos de ligação a re-ceptor competitivos por CB-\ e o ensaio de cAMP estão fornecido na TabelaI, supra. Os resultados nessa tabela não são dados para a finalidade de limi-tação da invenção a eles, mas, somente, para exemplificar as propriedadesfarmacológicas úteis de todos os compostos dentro do escopo da fórmula (I).

Tabela I

<table>table see original document page 36</column></row><table><table>table see original document page 37</column></row><table>

Claims

1. Uso de um composto de fórmula (I) abaixo, na preparação deum medicamento para o tratamento de obesidade, distúrbios psiquiátricos eneurológicos, assim como de outras doenças envolvendo a neurotransmis-são de CB1 canabinóide,<formula>formula see original document page 38</formula>um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável e sua forma es-tereoquimicamente isomérica, em queR1 é hidrogênio, halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(Ci-6alquil) amina ou nitro;R2 é hidrogênio; Ci-ioalquila opcionalmente substituída com Ar1,C3-7Cicloalquila, hidroxila ou Ci-6alquilóxi; Ar1; C2-6alquenila; C2-6alquinila; C3.7cicloalquila; biciclo [2.2.1] heptan-2-ila; 2,3-dihidro-1H-indenila; 1,2,3,4-tetra-hidronaftalenila; hidroxila; C2-6alquenóxi opcionalmente substituído com Ar2;C2-6alquinilóxi; pirimidinilóxi; di (Ar2) metóxi; (1-Ci-4alquil-4-piperidinil) óxi; ouR2 é Ciooalquilóxi opcionalmente substituído com halo; hidroxila; C1-6alquilóxi; amina; mono- e di (Ci-6alquil) amina; trifluorometila; carboxila; C-i.6alquilóxi-carbonila; Ar1; Ai^-O-; Ai^-S-; C3-7Cicloalquila; 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila; 1H-benzimidazolila; Ci-4alquila substituída 1H-benzimidazolila; (1,1'-bifenil)-4-ila ou com 2,3-dihidro-2-oxo-1H-benzimidazolila;R3é hidrogênio, hidroxila ou Ci-6alquila;Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, aminopiridinila, imidazolila, tria-zolila, tienila, halotienila, furanila, Ci-6alquilfuranila, halofuranila, tiazolila oufenila substituída com até 3 substituintes cada um independentemente sele-cionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila,Ci-6alquilóxi-, d-ealquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila,ciano, amina, nitro ou mono- e di-(Ci-6alquil) amina;Ar2 é fenila, piridinila ou fenila substituída com até 3 substituintescada um independentemente selecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carbo-xila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(d-6alquil) ami-na ou nitro; eHet representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aromá-tico, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de furanila, tienila,pirrolila, oxazolila, tiazolila, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, o-xadiazolila, triazolila, tiadiazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, triazinila,piridazinila, 2H-piranila ou 4H-piranila, sendo que o heterociclo está opcio-nalmente substituído com até 3 substituintes cada um independentementeselecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(Ci-6alquil) amina ou nitro.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, no qual, para o com-posto de fórmula (I),R1 é hidrogênio, halo, trifluorometila, Ci-4alquila, Ci-4alquilóxi- ouCi-4alquilóxi-carbonila-;R2 á fenila, C3-7Cicloalquila ou Ci-6alquila opcionalmente substitu-ída com Ar1;Ar1 é fenila ou fenila substituída com até três substituintes dehalo;Het representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aromá-tico, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de tiazolila, imi-dazolila, triazolila, pirimidinila ou piridinila, sendo que heterociclo está opcio-nalmente substituído com Ci-4alquila.

3. Uso, de acordo com as reivindicações 1 ou 2, no qual, para ocomposto de fórmula (I),Het é imidazolila ou 1,2,4-triazolila;R1 é halo, Ci-4alquila, Ci.4alquilóxi- ou trifluorometila; eR2 é fenila, C3.7cicloalquila ou Ci.6alquila opcionalmente substitu-ida com Ar1.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 1, no qual o composto éselecionado a partir do grupo consistindo em;-1 H-Benzotriazol, (-)-6-[(4-clorofenil)-1 H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -ciclo-hexil-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-imidazol-1 -il-metil]-1 -ciclo-hexil-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 HT1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -(1 -metil-etil)-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-1,2,4-triazol-1-il-metil]-1-ciclo-hexil-;-1 H-Benzotriazol, 1 -butil-6-[(4-clorofenil)-1 H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-imidazol-1-il-metil]-1-fenil-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -((4-clorofenil)metil)-;-1 H-Benzotriazol, 6-[fenil-1 H-imidazol-1 -jl-metil]-1 -ciclo-hexil-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-imidazol-1 -il-metil]-1 -(3-metil-butil)-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -(fenil-etil)-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -(fenil-metil)-;-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-1 H-imidazol-1 -il-metil]-1 -(1 -metil-etil)-; e-1 H-Benzotriazol, 6-[(4-clorofenil)-2-tiazolil-metil]-1-metil-; uma sua forma es-tereoisomérica ou uma sua forma estereoisomérica ou seu sal de adição deácido ou de base farmaceuticamente aceitável.

5. Método de tratamento de doenças envolvendo a neurotrans-missão de CBi canabinóide em um mamífero, compreendendo a administra-ção de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um modulador de recep-tor de CBl como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, aomamífero.

6. Método de prevenção de doenças envolvendo a neurotrans-missão de CB-i canabinóide em um mamífero, compreendendo a administra-ção de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um modulador de recep-tor de CBi, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, aomamífero.

7. Composto de fórmula (Ia)<formula>formula see original document page 41</formula>os seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis e as suasformas estereoisoméricas, em queR1 é hidrogênio, halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(C-i.6alquil) amina ou nitro;R2 é hidrogênio; Ci-i0alquila opcionalmente substituída com Ar1,C3-7Cicloalquila, hidroxila ou Ci-6alquilóxi; Ar1; C2-6alquenila; C2-6alquinila; C3-ycicloalquila; biciclo [2.2.1] heptan-2-ila; 2,3-dihidro-1 H-indenila; 1,2,3,4-tetra-hidronaftalenila; hidroxila; C2-6alquenóxi opcionalmente substituída com Ar2;C2-6alquinilóxi; pirimidinilóxi; di (Ar2) metóxi; (1-Ci.4alquil-4-piperidinil) óxi; ouR2 é Ci-i0alquilóxi opcionalmente substituída com halo; hidroxila; Ci.6alquilóxi; amina; mono- e di (Ci-6alquil) amina; trifluorometila; carboxila; Ci-.6alquilóxi-carbonila; Ar1; Ar^-O-; Ai^-S-; C3-7Cicloalquila; 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila; 1H-benzimidazolila; Ci^alquila substituída 1H-benzimidazolila; (1,1'-bifenil)-4-ila ou com 2,3-dihidro-2-oxo-1H-benzimidazolila;R3 é hidrogênio, hidroxila ou C-i-6alquila;Ar1 é fenila, naftalenila, piridinila, aminopiridinila, imidazolila, tria-zolila, tienila, halotienila, furanila, Ci-6alquilfuranila, halofuranila, tiazolila oufenila substituída com até 3 substituintes cada um independentemente sele-cionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila,Ci-6alquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila,ciano, amina, nitro ou mono- e di-(Ci-6alquil) amina;Ar2 é fenila, piridinila ou fenila substituída com até 3 substituintescada um independentemente selecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci.6alquilóxi-, d-ealquilóxi-carbonil-, carbo-xila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, mono- e di-(Ci-6alquil) ami-na ou nitro; eHet' representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aromá-tico, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de furanila, tienila,pirrolila, oxazolila, tiazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, oxadiazolila,tiadiazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, triazinila, piridazinila, 2H-piranilaou 4H-piranila, sendo que o heterociclo está opcionalmente substituído comaté 3 substituintes cada um independentemente selecionado a partir de halo,hidroxila, hidróxi-metila, trifluorometila, Ci-6alquila, Ci-6alquilóxi-, d.-6alquilóxi-carbonil-, carboxila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina,mono- e di-(Ci-6alquil) amina ou nitro;contanto que o composto de fórmula (Ia) não represente 6-[(4-cloro-fenil)-piridin-3-il-metil]-1-metil-1H-benzotriazol ou 6-[(4-cloro-fenil)-pirimidin-5-il-metil]-1 -metil-1 H-benzotriazol.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 7, no qual:R1 é hidrogênio, halo, trifluorometila, Ci-4alquila, Ci-4alquilóxi- ouCi.4alquilóxi-carbonila;R2 é fenila, C3.7cicloalquila ou Ci.6alquila opcionalmente substitu-ída com Ar1;Ar1 é fenila ou fenila substituída com até 3 substituintes de halo;Het' representa um heterociclo, parcialmente saturado ou aromá-tico, de 5 ou 6 membros, monocíclico, selecionado a partir de tiazolila, piri-midinila ou piridinila, sendo que o heterociclo está opcionalmente substituídocom Ci-4alquila.

9. Composto, de acordo com a reivindicações 7 ou 8, no qual:Het é tiazolila;R1 é halo, Ci.4alquila, Ci-4alquilóxi- ou trifluorometila; eR2 é fenila, C3-7Cicloalquila ou C-i-6alquila opcionalmente substitu-ída com Ar1.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações-7 a 9, para uso como um fármaco.

11. Método de tratamento de doenças envolvendo a neuro-transmissão de CBt canabinóide em um mamífero, compreendendo a admi-nistração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um modulador dereceptor de CBi, conforme descrito em qualquer uma das reivindicações 7 a 9, ao mamífero.

12. Método de prevenção de doenças envolvendo a neurotrans-missão de CBi canabinóide em um mamífero, compreendendo a administra-ção de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um modulador de recep-tor de CBi, conforme descrito em qualquer uma das reivindicações 7 a 9, aomamífero.

13.

14. Uso de um composto de fórmula (Ic) abaixo, na preparaçãode um medicamento para o tratamento de obesidade, distúrbios psiquiátricose neurológicos, assim como de outras doenças envolvendo a neurotransmis-são de CB1 canabinóide,<formula>formula see original document page 43</formula>os seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis ou uma suaforma estereoisomérica, em que A1=A2-A3=A4 é um radical bivalente tendo afórmula-CH=N-CH=CH-(a-1),-CH=N-CH=N- (a2), ou-CH=N-N=CH- (a3);R é hidrogênio ou Ci.6alquila;R1 é hidrogênio, ÜMoalquila, C3-7Cicloalquila, Ar1, Ai^-Ci-ealquila,C2-6alquenila ou C2.6alquinila;R2 é hidrogênio; Ci-ioalquila opcionalmente substituída com Ar1,C3-7Cicloalquila, hidroxila ou Ci-6alquilóxi; Ar1; C2-6alquenila; C2.6alquinila; C3-7cicloalquila; biciclo [2.2.1] heptan-2-ila; 2,3-dihidro-1H-indenila; 1,2,3,4-tetra-hidronaftalenila; hidroxila; C2-6alquenóxi opcionalmente substituída com Ar2;C2-6alquinilóxi; pirimidinilóxi; di (Ar2) metóxi; (1-Ci-4alquil-4-piperidinil) óxi; ouR2 é Ci-i0alquilóxi opcionalmente substituído com halo; hidroxila; Ci--6alquilóxi; amina; mono- e di (Ci-6alquil) amina; trifluorometila; carboxila; Ci.-6alquilóxi-carbonila; Ar1; Ai^-O-; Ai^-S-; C3-7Cicloalquila; 2,3-dihidro-1,4-benzodioxinila; 1 H-benzimidazolila; Ci-4alquila substituída 1H-benzimidazolila; (1,1-bifenil)-4-ila ou com 2,3-dihidro-2-oxo-1H-benzimidazolila;R3 é hidrogênio, nitro, amina, mono- e di (Ci-ealquil) amina, halo,Ci-6alquila, hidroxila ou Ci-6alquilóxi;Ar1 é fenila, fenila substituída, naftalenila, piridinila, aminopiridini-la, imidazolila, triazolila, tieniía, halotienila, furanila, Ci-6alquilfuranila, halofu-ranila ou tiazolila; eAr2 é fenila, piridinila ou fenila substituída com até 3 substituintescada um independentemente selecionado a partir de halo, hidroxila, hidróxi--4 metila, trifluorometila, Ci-6alquila, d-ealquilóxi-, Ci-6alquilóxi-carbonil-, carbo-xila, formila, (hidróxi-imino) metila, ciano, amina, nitro ou mono- e di-(Ci-- 6alquil) amina;

15. Composto, de acordo com a fórmula (ic), sendo que o com-posto consiste no enantiômero 1 H-Benzotriazol, (-)-6-[(4-clorofenil)-1H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -ciclo-hexil-

16. 1 H-Benzotriazol, (-)-6-[(4-clorofenil)-1 H-1,2,4-triazol-1 -il-metil]-1 -ciclo-hexil- para uso como um fármaco.

17. Uso de 1 H-Benzotriazol, (-)-6-[(4-clorofehil)-1H-1,2,4-triazol-1-il-metil]-1-ciclo-hexil- na preparação de um medicamento para o tratamentode obesidade, distúrbios psiquiátricos e neurológicos, assim como de outrasdoenças envolvendo a neurotransmissão de CBi canabinóide.