BRPI0409166B1 - Processo para preparação de ferutinina a partir de plantas do gênero ferula e uso de p-pivaloilóxi-ferutina - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "PROCESSO PARA PREPARAÇÃO DE FERUTININA A PARTIR DE PLANTAS DO GÊ- NERO FERULA E USO DE P-PIVALOILÓXI-FERUTININA".

Campo da Invenção A presente invenção refere-se aos extratos vegetais de Ferula spp e a um processo para isolamento da ferutinina dos referidos extratos.

Antecedentes da Invenção Numerosas plantas do gênero Ferula contêm terpenos com ati- vidade estrogênica, também conhecidos como fitoestrogênios, isto é, subs- tâncias que regulam as funções hormonais e que se constituem em uma al- ternativa aparentemente válida para o uso de hormônios sintéticos no trata- mento de síndrome pré-menstrual e distúrbios correlacionados à menopausa e ao envelhecimento. Alguns tipos de extratos de Ferula foram usados anti- gamente como anticoncepcionais e também no tratamento da impotência e distúrbios da menopausa. Recentemente, extratos alcoólicos de Ferula asa- foetida L. foram divulgados (documento de patente WO 0230438) como dro- gas anticâncer.

Os compostos mais abundantes nas plantas do gênero Ferula são os derivados de jaeschkenadiol, representados pela fórmula (II): em particular, os ésteres de daucano tendo a fórmula geral (I): Os ésteres de daucano são compostos conhecidos e são divul- gados, por exemplo, na publicação Phytochemistry, volume 37, n°. 3, pági- nas 597-623, 1994. Na fórmula (I), R é um resíduo de acila alifático, de ca- deia reta ou ramificada, saturado ou insaturado ou então um resíduo de acila aromático, opcionalmente substituído. Exemplos de grupos R incluem iso- valeroíla, angeloíla, benzoíla, p-hidróxi-benzila, veratroíla ou cinamoíla.

Os ésteres de daucano de Ferula spp são moduladores de es- trogênio similares aos SERMs (moduladores seletivos do receptor de estro- gênio); dentre estes, a ferutinina, de fórmula (Ia), abaixo, apresenta acentu- ada atividade estrogênica, enquanto os outros apresentam uma atividade mais branda.

Em particular, a ferutinina é um alfa-agonista de receptor de es- trogênio (ERa) e um beta-agonista/antagonista de receptor de estrogênio (ERp). Foi também demonstrado que a ferutinina possui uma maior ligação aos receptores de estrogênio do que o tamoxifeno.

Portanto, existe a necessidade de se obter extratos enriquecidos de ferutinina ou se otimizar a extração de ferutinina na forma pura, a partir de materiais de plantas contendo seus precursores.

Um processo que compreende a hidrólise de todo extrato de ésteres de daucano, proporcionando o derivado de jaeschkenadiol puro e a subseqüente reesterificação do jaeschkenadiol com ácido p-hidróxi-benzóico adequadamente protegido, por exemplo, com ácido p-acetóxi-benzóico, é conhecido da literatura (J. Org. Chem., USSR (Tradução Inglesa); EN; 28; 10; 1992; 1666-1673). Entretanto, esse processo proporciona rendimentos bastante fracos (cerca de 45%), principalmente devido às reações de tran- sesterificação concorrentes.

Descrição Detalhada da Invenção Foi agora descoberto que o uso de ácido p-pivaloilóxi-benzóico como agente de esterificação permite evitar as reações concorrentes res- ponsáveis por rendimentos de baixa conversão.

Portanto, o objetivo da presente invenção é proporcionar um processo para a preparação de ferutinina, de fórmula (Ia): compreendendo as seguintes etapas: a) extração dos ésteres de daucano de Ferula spp\ b) hidrólise básica dos ésteres de daucano proporcionando o derivado de jaeschkenadiol de fórmula (II): c) esterificação do derivado de jaeschkenadiol de fórmula (II) com o ácido p-pivaloilóxi-benzóico de fórmula (III): proporcionando o derivado de p-pivaloilferutinina de fórmula (IV): d) hidrólise do derivado de p-pivaloilferutinina de fórmula (IV), proporcionando a ferutinina.

Os "ésteres de daucano" significam compostos de fórmula geral (I), conforme definido acima; os ditos ésteres podem ser obtidos mediante extração dos rizomas ou partes aéreas da Ferula spp, preferencialmente, Ferula communis e Ferula hermonis, através de métodos convencionais, por exemplo, mediante extração com álcoois inferiores. Partindo de rizomas de Ferula hermonis contendo ferutinina e éster jaeschkenadiol benzóico (não facilmente separável por cromatografia) em uma proporção de 1:1, a feruti- nina pura pode ser isolada mediante extração das raízes com metanol, tra- tando o extrato com KOH a 5% e voltando a extrair o extrato saponificado com hidrocarbonetos alifáticos, éteres, ésteres ou solventes clorados.

Alternativamente, os ésteres de daucano podem ser obtidos me- diante extração com C02 supercrítico, em temperaturas que variam de 35 a 65°C, preferencialmente, à temperatura de 45°C e sob pressões variando de 200 a 260 bar, preferencialmente, 245 bar. No separador (ou nos separado- res), a temperatura varia de 25 a 45°C e a pressão é de cerca de 50 bar.

Nessas condições experimentais, aos materiais gomosos, que tornam difícil a recuperação dos compostos desejados, não são extraídos. O resíduo pode ser diretamente submetido à saponificação de acordo com o relatado nos exemplos. O derivado de jaeschkenadiol é esterificado com o ácido p-piva- loilóxi-benzóico e tratado no mesmo solvente reacional com uma base, pre- ferencialmente, uma amina primária, mais preferencialmente, etilenodiamina, para proporcionar a ferutinina. De acordo com uma modalidade preferida da invenção, as etapas (c) e (d) são convenientemente realizadas em sequên- cia, sem a recuperação do intermediário de p-pivaloilferutinina.

Um objeto adicional da presente invenção é o uso cosmético e dermatológico da ferutinina, p-pivaloilferutinina e extratos de Ferula spp, preferencialmente, extratos de Ferula communis e Ferula hermonis.

Quando aplicados sobre a pele, a ferutinina e os extratos de Fe- rula spp surpreendentemente provaram ser capazes de aumentar a biossín- tese do colágeno e exercer uma ação tônica, trófica e umidificante, proporci- onando, dessa forma, firmeza e elasticidade. Além disso, tais produtos redu- zem a secreção de sebo e desempenham um acentuado papel no controle do hirsutismo e virilização da face. Portanto, as composições contendo feru- tinina ou extratos de Ferula spp podem ser usadas no campo cosmético ou dermatológico para o tratamento de rugas superficiais ou profundas ou ou- tros aspectos não-estéticos, assim como, no tratamento de diversas formas de acne e seborréia. A ferutinina e os extratos de Ferula spp podem ser formulados na forma de cremes, géis e loções, em mistura com excipientes convencio- nais, por exemplo, aqueles descritos na publicação Remington's Pharma- ceutical Sciences Handbook, XVII Ed., Mack Pub., N.Y., USA, preferencial- mente, na presença de lecitina de soja ou fosfolipídeos, tais como, lau- roilfosfatidil-colina e miristoilfosfatidil-colina, que podem ser incorporados em emulsões de água/óleo e óleo/água ou em emplastros transdermais.

Os exemplos seguintes ilustram a invenção em maiores deta- lhes.

Exemplos Exemplo 1 - Isolamento de iaeschkenadiol de raízes de Ferula hermonis 250 g de raízes de Ferula hermonis finamente moída (distribui- ção do tamanho de partículas: 2 mm) são extraídas mediante percolação com 1 litro de MeOH. Após maceração durante dois dias e percolação do solvente, a operação é repetida (4 x 1L), de modo a se obter 112,2 g de ex- trato de metanol (45%). A descarga da droga é monitorada por meio de TLC (éter de petróleo/EtOAc, 8/2, ferutinina, Rf:0,14). 0 extrato de metanol é submetido a refluxo com 513 ml de uma solução a 10% de KOH/metanol. Depois de 1 hora, a análise através de TLC (éter de petróleo-EtOAc, 8/2, ferutinina, Rf:0,14; Rf: jaeschkenadiol: 0,31) mostra que a reação se completa. Após resfriamento, a mistura reacional é diluída com água (500 ml) e extraída com éter de petróleo (4 x 500 ml). As fases de éter de petróleo misturadas são lavadas com salmoura, secas e evaporadas. O resíduo semicristalino resultante é lavado com éter de petró- leo frio (temperatura de um refrigerador), para se obter 7,5 g de derivado de jaeschkenadiol cristalino. Os licores-mãe são purificados por meio de cro- matografia (50 g de sílica-gel, éter de petróleo-EtOAc, 95:5), para se obter a- bisabolol (870 mg), uma mistura de α-bisabolol e jaeschkenadiol, e jaes- chkenadiol puro (3,4 g após a cristalização). A mistura de jaeschkenadiol e α-bisabolol é juntada com o licor-mãe e cromatografada (50 g de sílica-gel, éter de petróleo-EtOAc, 95:5), para se obter 1,95 g de jaeschkenadiol crista- lino (produção global: 12,85 g, 5,1%). O composto apresenta as seguintes propriedades físico-quími- cas e espectroscópicas: Espectro de IV: (KBr, cm’1): 3339,2965, 2905,2875,1470,1375, 1047, 968, 858.

Espectro de Massa: (C.I.): M+ + 1 - H20 = 221; M+ + 1 - 2H20 = 203;

Espectro de 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ: (9H, 5,43 m); (2H, 3,9 m); (14H, 1,78 s); (15H, 1,0 s); (12H, 0,95 d, J=4,98); (13H, 0,91 d, J=5,13).

Exemplo 2 - Isolamento de jaeschkenadiol de raízes de Ferula communis 250 g de raízes de Ferula communis finamente moída (distribui- ção do tamanho de partículas: 2 mm) são extraídas mediante percolação usando 1 litro de MeOH. Após maceração durante dois dias e percolação do solvente, a operação é repetida (4 x 1L); os extratos de metanol são con- centrados a um volume igual ao peso das raízes moídas e o extrato recebe a adição de KOH a 10% (10 ml). A solução alcalina é submetida a refluxo por 2 horas, depois resfriada e novamente extraída três vezes com 200 ml de n- hexano. A descarga da droga é monitorada por meio de TLC (éter de petró- leo/EtOAc, 8/2).

As fases de hexano misturadas são lavadas com salmoura, se- cas e evaporadas. O resíduo semicristalino resultante é lavado com éter de petróleo frio (temperatura de um refrigerador), para se obter 3,5 g de jaes- chkenadiol cristalino. O licor-mãe é purificado de acordo com o Exemplo 1.

Rendimento: 0,8 g de jaeschkenadiol tendo as mesmas propriedades físico- químicas daquelas apresentadas no Exemplo 1.

Exemplo 3 - Isolamento de jaeschkenadiol de partes aéreas de Ferula communis 1 kg de partes aéreas de Ferula communis finamente molda é extraído com dióxido de carbono a temperatura de 45°C e pressão de 245 bar em um aparelho para extração com gases supercríticos. No separador (ou nos separadores), a temperatura varia de 25 a 45°C e a pressão é de cerca de 50 bar. Nessas condições, os materiais gomosos que tornam difícil a recuperação dos compostos desejados não são extraídos. O resíduo, que contém apenas compostos lipofílicos e água, é tomado com metanol e trata- do com bases para hidrolisar os ésteres de jaeschkenadiol, conforme relata- do nos Exemplos 1 e 2. Após a purificação, são obtidos 5,1 g do composto puro, tendo as mesmas características do produto do Exemplo 1.

Exemplo 4 - Síntese do ácido p-pivaloilóxi-benzóico O ácido 4-hidróxi-benzóico (114,5 g, 829 mmoles) é dissolvido sob agitação em piridina (1,15 L) e resfriado para uma temperatura inferior a 5°C em um banho de gelo. A solução resultante recebe a adição de 4- dimetilamino-piridina (DMAP, 0,3 equivalentes, 248,8 mmoles), 30,4 g) e clo- reto de pivaloíla (3 equivalentes, 2,487 moles, 300 g, 293,6 ml). A solução é deixada aquecer à temperatura ambiente e sob agitação durante 2 horas, depois, adiciona-se água (2,29 L) (reação exotérmica: resfriar a solução em um banho de gelo) e se deixa sob agitação por mais 3 horas. A solução é vertida em um funil separador e extraída com CH2CI2 (3 x 750 ml). As fases misturadas de cloreto de metileno são lavadas com H2SO4 2M (4 x 750 ml) e uma solução saturada de NaCI (1 x 1150 ml), sendo depois secas sobre Na2S04 (60 g). A solução é filtrada através de papel de filtro e o solvente é eva- porado sob vácuo para se obter um resíduo, o qual é triturado com éter de petróleo à temperatura de 30°C-50°C (3 x 400 ml), filtrado mediante sucção e seco a vácuo em um secador estático à temperatura de 45°C durante 15 horas. Assim, são obtidas 130,5 g do produto com as seguintes característi- cas espectroscópicas.

Espectro de IV: (KBr, cm'1): 3680,2978,2361,1753,1686,1603, 1427,1289,1204,1163,1103.

Espectro de Massa: (C.I.): M+ + 1 = 223;

Espectro de 1H RMN (300 MHz, D-DMSO) δ: 7,0 (3H, 8,0 d, J=8,48); 6,0 (4H, 7,23 d, J=8,55); (CH3,1,34s).

Exemplo 5 - Síntese de ferutinina a partir de iaeschkenadiol O derivado de jaeschkenadiol (100 g, 419,5 mmoles) é dissolvi- do sob agitação à temperatura ambiente em CH2CI2 (600 ml). A solução re- sultante recebe a adição de ácido p-pivaloilóxi-benzóico (1,4 equivalente, 587,3 mmoles, 130,5 g) e DMAP (0,3 equivalente, 125,9 mmoles, 15,4 g). A solução é deixada sob agitação durante 10 minutos para completar a disso- lução dos reagentes, depois, é adicionado Ν,Ν'-diciclohexil-carbodiimida (DCC, 1,8 equivalente, 755,1 mmoles, 155,8 g). A reação se completa de- pois de 2 horas. A solução é concentrada para 2 volumes (200 ml) e diluída com 5 volumes de CH3CN (500 ml), após isso, 0 precipitado de diciclohexiluréia é filtrado e lavado com mais 5 volumes de CH3CN (2 x 250 ml). As fases orgâ- nicas misturadas são vertidas em um funil separador, extraídas com Na2C03 a 10% em peso/volume (2 x 250 ml) e com uma solução saturada de NaCI (1 x 250 ml), depois secas sobre Na2SÜ4 (100 g). O Na2S04 é filtrado e 0 sol- vente evaporado sob vácuo, de modo a proporcionar 360 g do composto (IV), 0 qual apresenta as seguintes características espectroscópicas: 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ: 8,09 (d, J=9,0 Hz, H3'-H5'); 7,20 (d, J=8,7 Hz, H2'-H6'); 5,60 (brt, J=4,7 Hz, 9H); 5,35 (td, J=10,4-2,9 Hz, 6H); 2,58 (dd, J=13,1-10,9 Hz, 7bH); 2,34 (dd, J=14,1-2,3 Hz, 7aH); 2,07 (m, 10H); 2,04 (d, J=2,7 Hz, 5H); 1,97 (d, J=9,7 Hz, 2aH); 1,89 (m, 11H); 1,86 (s, 14H); 1,63 (m, 2bH); 1,57 (m, 3aH); 1,41 (s, C(CH3)3; 1,30 (m, 3bH); 1,14 (s, 15H); 0,99 (d, J=6,9 Hz, 12H); 0,89 (d, J=6,7 Hz, 13H). O composto (IV) é dissolvido sob agitação à temperatura ambi- ente em 2 litros de CH2CI2. A solução resultante recebe a adição de etileno- diamina (10 equivalentes, 280 ml). Após 3 horas, a reação se completa. A solução é resfriada à temperatura de 0°C, vertida em um funil separador, depois lavada com H2SO4 3M à temperatura de 0°C (2 x 750 ml, reação exotérmica) e uma solução saturada de NaCI (1 x 500 ml). A fase orgânica é seca sobre Na2S04 (100 g), filtrada e evaporada até a secura. O resíduo (230 g) é introduzido em uma coluna de sílica-gel (2,5 kg) neutralizada com 5,8 L de uma mistura de hexano:AcOEt, 9:1 e eluído com 70 L da mesma mistura. As frações contendo 0 produto são agrupadas, 0 solvente é evapo- rado a vácuo e 0 produto é seco em uma secadora estática à temperatura de 45°C durante 24 horas.

Assim, são obtidos 139 g (92,4%) do produto, 0 qual apresenta as seguintes características espectroscópicas: Espectro de IV: (KBr, cm'1): 3410,1686,1655,1608,1593,1560, 1279,1165,1099, 771.

Espectro de Massa: (C.I.): M+ +1 - H2O = 341;

Espectro de 1H RMN (200 MHz, CDCI3) δ: H3'=7' (7,94 d, J=8,4'= 6,0'); (6,88 d, J=8,0, 9H); (5,56 m, 2H); (5,23 dt, J=11, 14H); (1,80 brs, 15H); (1,10 s, 13H); (0,94 d, J=6,5,12H); (0,82 d, J=6,5).

Exemplo 6 - Preparação de extrato de Ferula hermonis O procedimento de extração é realizado por três vezes em 1 kg de planta inteira do gênero Ferula hermonis, com 5 volumes de acetona. Os extratos misturados de acetona são concentrados proporcionalmente para 0,5 parte, comparado com 0 peso da biomassa de partida e diluídos com 2 partes de água. A solução aquosa é ajustada para um pH de 7,8 com KOH diluído, na presença de hexano, sob forte agitação. A fase de hexano é des- cartada, a fase aquosa acidificada para um pH de valor 5,0 e novamente extraída com n-hexano. A fase de hexano que contém ferutinina é concen- trada até a secura, proporcionando 52 g de extrato contendo cerca de 35% de ferutinina.

Exemplo 7 - Formulações contendo ferutinina para o tratamento de rugas superficiais A ferutinina é incorporada em um creme que apresenta a se- guinte composição: Ferutinina 0,20 g Carbômero 934 (Carbopol 934 P - Goodrich) 0,60 g Propilenoglicol 3,00 g Imidazolinil-uréia 0,30 g Kathon CG 0,05 g EDTA dissódico 0,10 g Esteróis de soja PEG-5 (Generol 122 E5- Henkel) 2,00 g Octildodecanol (Eutanol G - Henkel) 4,00 g Óleo de germe de trigo 4,00 g Óleo de silicone, 350 centipoises 0,50 g Estearato de glicerila (Cutine GMS - Henkel) 7,00 g Polissorbato 60 (Tween 60 - ICI) 5,00 g Tocoferol 0,20 g Palmitato de ascorbila 0,10 g Solução de NaOH 10% 2,00 g Perfume (186909-Dragoco) 0,20 g Água purificada Até 100,00 g Exemplo 8 - Formulação contendo um extrato puro de Ferula hermonis com um teor de ferutinina de 30% e um teor de éster de iaeschkenadiol-benzóico de 20% Extrato de Ferula hermonis 0,50 g Carbômero 934 (Carbopol 934 P - Goodrich) 0,60 g Propilenoglicol 3,00 g Imidazolinil-uréia 0,30 g Kathon CG 0,05 g EDTA dissódico 0,10 g Esteróis de soja PEG-5 (Generol 122 E5- Henkel) 2,00 g Octildodecanol (Eutanol G - Henkel) 4,00 g Óleo de germe de trigo 4,00 g Óleo de silicone, 350 centipoises 0,50 g Estearato de glicerila (Cutine GMS - Henkel) 7,00 g Polissorbato 60 (Tween 60 - ICI) 5,00 g Tocoferol 0,20 g Palmitato de ascorbila 0,10 g Solução de NaOH a 10% 2,00 g Perfume (186909 - Dragoco) 0,20 g Água purificada Até 100,00 g Exemplo 9 - Gel contendo ferutinina Ferutinina 0,30 g Imidazolinil-uréia 0,30 g Metilparabeno 0,20 g Hidroxietilcelulose (natrosol 250 HHX - Aqualon) 2,00 g Água purificada Até 100 ml Exemplo 10 - Formulação cosmética contendo extrato de Ferula spp Extrato de Ferula hermonis 0,50 g Imidazolinil-uréia 0,30 g Metilparabeno 0,20 g Hidroxietilcelulose (natrosol 250 HHX - Aqualon) 2,00 g Água purificada Até 100 ml Experimentação Eficácia do Produto A eficácia do creme do Exemplo 7 foi determinada em um estu- do do tipo duplo cego, com 40 mulheres voluntárias, de idade variando de 39 a 56 anos, para se avaliar os efeitos sobre a elasticidade e firmeza da pele e com relação à avaliação de rugas. O estudo foi precedido por um período de condicionamento de 7 dias, em que a pessoa tinha de se abster do uso de produtos umidificantes, cremes de proteção solar e produtos de maquiagem líquidos e evitar tratamentos de bronzeamento e excessiva exposição aos raios ultravioleta.

As pessoas foram permitidas de usar produtos de proteção aos olhos e lábios convencionais, pós faciais e sabonetes não-umidificantes.

As pessoas foram divididas aleatoriamente em dois grupos, um tratado com um creme na forma de placebo e o outro tratado com um creme do tipo indicado no Exemplo 7. Os cremes foram aplicados sobre a face em uma quantidade padronizada (0,5 g, isto é, 0,5 cm de creme saindo do tubo) duas vezes ao dia, pela manhã e à noite. Antes e depois de cinco semanas de tratamento, as seguintes medições foram realizadas.

Antes de cada sessão de medição, todas as pessoas permane- ceram por trinta minutos em uma câmara climática à temperatura de 23°C e com 50% de umidade relativa. Cada sessão compreendeu três medições com um corneômetro, três medições com cutômetro e com uma impressão da área periorbital sobre as áreas da pele, conforme exposto a seguir.

Todas as 40 pessoas completaram o estudo.

Avaliação de corte O cutômetro é um dispositivo comercialmente disponível (Cuto- meter SEM 575, Courage & Khazaka, Alemanha) para medição das proprie- dades mecânicas da pele de uma maneira não-invasiva. Em maiores deta- lhes, tal dispositivo mede a deformação vertical da superfície da pele, quan- do esta se submete a uma pressão negativa de 500 mm de Hg, através de uma abertura de 2 mm com uma sonda. A extensão da penetração da pele na sonda é opticamente medida com uma precisão de 0,01 mm. A sonda é conectada a um computador que registra a deformação da pele no decorrer do tempo. Da curva resultante, podem ser extrapoladas numerosas variáveis para a avaliação do comportamento elástico, viscoelástico e viscoso da pele.

Os seguintes parâmetros foram registrados: - distensão imediata (Ue), medida em 0,1 segundo; - distensão retardada (Uv); - distensão final (Uf), medida em 10 segundos; e - retração imediata (Ur). O teste foi realizado usando o cutômetro em ambas as faces.

Variações significativas não foram observadas no grupo do pla- cebo. A distensão retardada (Uv) no grupo tratado diminuiu de forma signifi- cativa (16%, p<0,05) depois de 5 semanas de tratamento. Esse parâmetro reflete as propriedades viscoelásticas da pele e o comportamento da derme.

Após 5 semanas, foi também observada uma significativa mudança (-12%, p<0,05) na Ue, que é principalmente influenciada pela hidratação e proprie- dades mecânicas da camada de córneo. A diminuição na Uv e Ue, junto com a estabilidade da Ur, mostra o aumento de firmeza da pele.

Avaliação do Córneo A aparência macia e lisa da pele depende principalmente da presença de uma adequada quantidade de água na camada córnea. O corneômetro é um dispositivo comercialmente disponível (Comeometer CM 825, Combi 3, Courage & Khazaka, Alemanha) que mede as mudanças de capacitância resultantes de mudanças na hidratação da pele. O teste foi realizado usando o corneômetro em ambas as faces.

Depois de 5 semanas, foi observada uma significativa mudança no grupo tratado, em particular, a hidratação da pele aumentou de 17,5%, enquanto no grupo do placebo diminuiu de 3%.

Avaliação de Rugas Impressões feitas com silício foram realizadas em pessoas na posição sentada. As impressões (2x5 cm) foram obtidas no início e no fim de 5 semanas, usando um "material de impressão de silício Silflo" (disponí- vel da Flexico, UK).

As impressões foram depois analisadas através do sistema Ana- lisador de Imagem da Pele, usando o software Quantirides-Monademn, que distingue o microrrelevo cutâneo de rugas medianas e rugas profundas e calcula seu número e profundidade; finalmente, o valor total da área de ru- gas é obtido.

Após 5 semanas, foram observadas significativas mudanças no grupo tratado. Em particular, foi observada uma diminuição de 21,3% (p<0,05) na área de rugas, enquanto no grupo de placebo a diminuição foi de 0,4%.

Uma diminuição estatisticamente significativa foi observada prin- cipalmente no número e profundidade de rugas medianas e profundas.

Conclusão O estudo permitiu concluir que o creme indicado no Exemplo 7 apresentou uma satisfatória atividade cosmética no tratamento da pele com sinais de idade cronológica e de idade fotográfica, na medida em que a fir- meza e hidratação da pele são aumentadas e a área rugosa média é dimi- nuída, em particular, as microrrugosidades e macrorrugosidades profundas.

De forma visível, a pele apresentou uma aparência mais firme e mais lisa.

Claims (8)

1. Processo para preparação de ferutinina de fórmula (Ia): caracterizado pelo fato de que compreende as seguintes etapas: a) extração dos ésteres de daucano de Ferula spp; b) hidrólise básica dos ésteres de daucano proporcionando o derivado de jaeschkenadiol de fórmula (II): c) esterificação do derivado de jaeschkenadiol de fórmula (II) com o ácido p-pivaloilóxi-benzóico de fórmula (III): proporcionando o derivado de p-pivaloilferutinina de fórmula (IV): d) hidrólise do derivado de p-pivaloilferutinina de fórmula (IV), proporcionando a ferutinina.

2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os ésteres de daucano são extraídos de Ferula communis.

3. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os ésteres de daucano são extraídos de Ferula hermonis.

4. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que os ésteres de daucano são extraídos com dióxido de carbono supercrítico, sob uma temperatura entre 35 e 65°C e uma pressão entre 200 e 260 bar.

5. Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que a temperatura é de 45°C.

6. Processo de acordo com a reivindicação 4 ou 5, caracterizado pelo fato de que a separação é realizada sob uma temperatura entre 25 e 45°C e sob uma pressão entre 45 e 55 bar.

7. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que as etapas (c) e (d) são realizadas sucessi- vamente, sem a recuperação do composto de fórmula (IV).

8. Uso de p-pivaloilóxi-ferutinina, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de composições cosméticas e/ou dermatológicas.