BG113181A

BG113181A - Лиофилизирани продукти от охлюви и метод за получаването им

Info

Publication number: BG113181A
Application number: BG113181A
Authority: BG
Inventors: Валентин Лозанов; Стойчев Лозанов Валентин; Онник Ованезов; Хаик Ованезов Онник; Иван Иванов; Василев Иванов Иван
Original assignee: Онник Ованезов; Хаик Ованезов Онник
Priority date: 2020-07-01
Filing date: 2020-07-01
Publication date: 2022-01-17
Also published as: BG67581B1; WO2022000049A1

Abstract

Методът и продуктите, получавани по него ще намерят приложение в хранителната, козметична и фармацевтична индустрия. Методът е непрекъснат и безотпадъчен и включва следните етапи: етап 1 излюпване на охлюви и/или угояването им, етап 2 получаване на хайвер от охлюви, етап 3 получаване на слуз от охлюви, етап 4 получаване на хемоцианин от охлюви, етап 5 получаване на месо от охлюви, етап 6 получаване на протеинов хидролизат от месо от охлюви, етап 7 получаване на протеинов хидролизат от черупка на охлюви и етап 8 процес на лиофилизация на продуктите от етап 2 до етап 7. Продуктите получавани по него са лиофилизиран хайвер, лиофилизирана слуз, лиофилизиран хемоцианин, лиофилизирано месо, лиофилизиран протеинов хидролизат от месо и лиофилизиран протеонов хидролизат от черупка. Предимства на получаваните по метода продукти са: - пълно запазване на биологичната активност на съдържащите се в тях компоненти; - продължителен срок на годност от 2 до 5 години, без използване на консерванти; - съхранение и транспорт при стандартни условия.

Description

ЛИОФИЛИЗИРАНИ ПРОДУКТИ ОТ ОХЛЮВИ И МЕТОД ЗА ПОЛУЧАВАНЕТО ИМ

ОБЛАСТ НА ТЕХНИКАТА

Методът и продуктите, получавани по него, съгласно изобретението ще намерят приложение в хранителната, козметична и фармацевтична индустрия.

ПРЕДШЕСТВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА

Известен е от патентен документ CN1321587 здравословен продукт от охлюви и метод за получаването му. Продуктът съдържа смес от лиофилизирани продукти, включително и месо от охлюви, а останалите компоненти са лиофилизирано пчелно млечице, галактоза, диетични фибри, витамин С. Методът включва следните технологични операции: изваждане на охлюва от черупката, термична обработка, смилане на месото, замразяване на пастата от охлюви за последваща лиофилизация която се осъществява под вакуум за 24-72 часа.

Патентен документ CN1275 607 се отнася до лечебен състав за лечение на хиперхидрохлория, метод за получаването му и използването му. Лечебният състав включва лиофилизирано месо от охлюви, лиофилизирани черупки от охлюви, а останалите компоненти са: лиофилизирани бяла ряпа или спанак. Приложението му е за инхибиране на стомашната киселина и като противоязвено средство. Методът за получаването му включва процес на лиофилизация протичаща при температура -40 20°С за време 12-42 ч. Останалите етапи са класическите - изваждане на месото, смилане, последващо лиофилизиране и таблетиране.

Известен е от патентен документ CN10049422IC Belly bottom snail polysaccharide and its preparing method метод на получаване на полизахариди от охлюви, който включва следните етапи: а. Суровини и обработка: прясното месо от охлюв се изплакват с вода, последващо източване на водата; б. Хомогенизиране в хомогенизатор и за 15-30 минути, за да се получи хомогенат; сушене при 0°С 70°С, след което се смила на прах, добавят се 0,5-30 пъти вода и се смесват до получаване на хомогенат; Вариантите на последваща обработка включват: ултразвуково лъчение в ултразвуков генератор и осцилиране за 0-4h или/и микровълнова обработка 50-600w за 10 минути; Ензимолиза: добавя се неутрална протеаза с ензимна специфична активност от 600-1200 u/g към хомогената, третиран на етап с, ензимолиза се осъществява при pH 6,5-8,5, при температура 35-50°С за l-3h, добавя се ензимно съотношение след унищожаване на ензима пепсин с активност от 6000-12000 u/g, продължаване на хидролизирането при pH 1.0-3.5, при температура 35-5О°С в продължение на 1-5 часа и след това регулиране на pH 6.5-7.5, цел получаване на месо от охлюви или негов хидролизат; Водно извличане: загряване на хидролизата до 70-100°С, извличане на водата за 0,5-5 часа, извличането е от 1-3 пъти; Концентрация: концентриране на водния екстракт до съдържание на твърдо вещество 15-30%; Утайка от алкохол - Добавят се 2 до 6 обема 95% от масата етанол към концентрирания разтвор и след престой в продължение на 8 до 24 часа се центрофугира при 4000 r/min в продължение на 15 минути, за да се събира утайката; Към протеина се добавя: от 0,5 до 3 пъти обема на водата към утайката, 0,1 до 0,5 пъти на обема, обемно съотношение хлороформ към амилов алкохол от 4:1 до 5:1 или разтвор на n-бутанол, енергично се разклаща за 20 до 30 минути, центрофугиране и отстраняване на денатуриранея протеин на границата между водния слой и слоя разтворител, за да се получи воден разтвор на полизахарид; Утайка от алкохол: добавят се 2 до 6 пъти обема от 95% тегловен етанол към воден разтвор на полизахарид и след престой в продължение на 8 до 24 часа, следва центрофугиране при 4000 r/min в продължение на 15 минути за събиране на утайката; Сушене чрез замразяване: добавят се 0,1 до 0,5 пъти вода, охлаждане до -30 до -35°С, замразяване, след това изсушаване във вакуум от 50 до 80 Ра, температура от 30 до 60°С, последващо изсушаване в продължение на 10 до 15 часа, като сухият прах от полизахарид се получава с добив на полизахарид 3.0-16.0% и чистота 25-55%.

ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Цел на изобретението е да се създаде метод за получаване на продукти от охлюви, който да е непрекъснат и безотпаден и получените продукти по него да са с високи качествени и количествени показатели.

Целта се постига с метод, който съгласно изобретението е непрекъснат и безотпадъчен и включва следните етапи, етап 1 излюпване на охлюви и/или угояването им, етап 2 получаване на хайвер от охлюви, етап 3 получаване на слуз от охлюви, етап 4 получаване на хемоцианин от охлюви, етап 5 получаване на месо охлюви, етап 6 получаване на протеинов хидролизат от месо от охлюви, етап 7 получаване на протеинов хидролизат от черупка на охлюви и етап 8 процес на лиофилизация на продуктите от етап 2 до етап 7, като етап 1 е процес на излюпване на охлюви и/или угояването им в контролирани условия за период от 3-4 месеца, в специализирани за целта помещения, в етап 2 включва оплождане на охлювите, снасяне на хайвер като охлювите са разположени при гъстота от 250-300 броя на м и процесът на снасяне продължава от 36 до 48 часа, етап 3 процесът на получаване на слуз от охлюви се осъществява в съд с еквивалентни количества вода и живи охлюви, съдът е снабден с бъркалка от 30 до 60 оборота в минута и електроди за импулсно подаване на нисковолтово напрежение от 10 до 12 Волта, който се подава за време 60-120 секунди от 2 до 3 пъти, след което охлювите се изваждат от съда, разтворът се оставя да се хомогенизира за 10-14 часа при температура 4-6°С, филтрува се последователно през филтри с размер на порите 50, 30, 20, 10, 5, 1 микрона, след което получения филтрат се подлага на допълнителна филтрация с цел концентриране, чрез обратна осмоза или диализа или ултрафилтрация, етап 4 процесът на получаване на хемоцианин се осъществява ръчно, като по долната част от крака на охлюва се извършва S-образно движение, завършващо в края с леко бодване и отделяне на хемоцианина, етап 5 процес на получаване на месо от охлюви, който се осъществява чрез термична обработка, като отделяне на месото от черупката се осъществява в предварително подгрята до 70°С вода за време 30-40 секунди, следва механично изваждане на месото и потапянето му в предварително изстудена вода с температура 20 С°, етап 6 процес на получаване на протеинов хидролизат от месо от охлюви, който се осъществява чрез ензимна ходролиза в съд от неръждаема стомана снабден с нискооборотна бъркалка и нагревател в алкализирана (рН=8) вода, която предварително е подгрята до 60°С се добавя смляното месо от охлюви и се прибавя ензим, процесът протича за време 10-14 часа при температура от 60°С до 95°С, при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с подходящ алкален разтвор, следва охлаждане до 20°С и подкисляване до рН=4.5-5.5, етап 7 процесът на получаване на протеинов хидролизат от черупка на охлюви протича, като черупките на охлювите получени от етап 5 се измиват многократно с охладена вода, след което се изсушават на въздух до постоянно тегло, следва механичното им смилане до размери 5 мм и поставянето им в съд от неръждаема стомана с нискооборотна бъркалка и нагревател към предварително подгрята до 60°С алкализирана (рН= 8) вода. Към сместа се добавя ензим и процесът на ензимна хидролиза се провежда за 20-24 часа при 60°С и рН=8 на реакционната среда. Процесът се провежда при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с алкален разтвор. В края на процеса, температурата на реакционната смес се повишава до 95°С и се поддържа за 4 часа. След това реакционната смес се охлажда рязко до 20°С и се подкислява до рН=4.5-5.5 с подходяща киселина, етап 8 получените продукти от етапи 2, 3, 4, 5, 6 и 7 се лиофилизират.

Методът съгласно изобретението предлага вариант на изпълнение при който етап 2 и етап 3 могат да се повтарят многократно.

Съгласно изобретението допълнителната филтрация на етап 3 се провежда чрез обратна осмоза или диализа или ултрафилтрация.

Съгласно изобретението процеса на лиофилизацията на продуктите по метода протича при температура минус 40-45°С за време от 32 до 48 часа.

Продукти, получени по метода, съгласно изобретението са:

Лиофилизиран хайвер, който е лек, фин прах с розово-червеникав цвят, със съдържание на протеини 25-35% и въглехидрати 7-12% и е със съдържание на свободни аминокиселини, както следва:

Аминокиселина	съдържание в мг/г
минимално	максимално
__ ΰ Хистидин	0,288	0,352
Аргинин	0,243	0,297
Аспарагин	0,162	0,198
Глутамин	0,252	0,308
4-Хидроксипролин	0,027	0,033
Серин	0,873	1,067
Аспартова киселина	0,405	0,495
Глутамова киселина	0,234	0,286
Треонин*	0,216	0,264
Глицин	0,27	0,33
Г ама-аминобутирова киселина	-	-
Тирозин	0,072	0,088

Пролин	0,117	0,143
Метионин	0,018	0,022
Валин*	0,171	0,209
Левцин/изолевцин*	0,207	0,253
Триптофан*	0,063	0,077
Фенилаланин	0,126	0,154
Орнитин	0,576	0,704
Лизин*	0,261	0,319
Общо съдържание	4,581	5,599

Лиофилизирана слуз, която е фин прах с бежово-кафяв цвят, протеиновата фракция е 40 - 45% и е със съдържание на свободни аминокиселини, както следва

Аминокиселина	съдържание в мг/г
минимално	максимално
Хистидин	0,43	0,53
Аргинин	0,11	0,13
Аспарагин	0,39	0,47
Глутамин	0,40	0,48
4-Хидроксипролин	0,11	0,13
Серин	0,63	0,77
Аспартова киселина	0,90	1,10
Глутамова киселина	1,39	1,69
Треонин*	0,43	0,53
Глицин	2,40	2,94
Гама-аминобутирова киселина	-	-
Тирозин	0,05	0,06

Пролин	0,45	0,55
Метионин	0,10	0,12
Валин**	1,64	2,00
Левцин/изолевцин**	3,40	4,16
Триптофан**	0,19	0,23
Фенилаланин	0,82	1,00
Орнитин	1,48	1,80
Лизин	1,73	2,11
Общо съдържание	17,03	20,81

# незаменима аминокиселина

Лиофилизиран хемоцианин, който е фин бял прах, съдържащ мед (Си) координирани хемоцианинови протеини, достигащи до 90% от съдържанието на продукта.

Лиофилизирано месо от охлюв, е кафяв на цвят прах със съдържание на протеини 6575%, въглехидрати 14-20% и със съдържание на свободни аминокиселини, както следва:

Аминокиселина	съдържание в мг/г
минимално	максимално
Хистидин**	0,621	0,759
Аргинин	0,18	0,22
Аспарагин	0,333	0,407
Глутамин	2,106	2,574
4-Хидроксипролин	0,063	0,077
Серин	1,026	1,254
Аспартова киселина	0,882	1,078

Глутамова киселина	2,763	3,377
Треонин*	0,549	0,671
Глицин	0,864	1,056
Гама-аминобутирова киселина	-	-
Тирозин	0,414	0,506
Пролин	0,675	0,825
Метионин	0,135	0,165
Валин**	0,756	0,924
Левцин/изолевцин**	0,909	1,111
Триптофан**	0,162	0,198
Фенилаланин	0,603	0,737
Орнитин	7,803	9,537
Лизин**	2,16	2,64
Общо съдържание	23,004	28,116

# незаменима аминокиселина

Лиофилизиран протеинов хидролизат от месо на охлюв, съдържащ ниско молекулни пептиди 65-75%, протеин 10-15%, въглехидрати 10-14% и аминокиселини, както следва:

Аминокиселина	съдържание в мг/г
	минимално	Максимално
Хистидин**	8,73	10,67
Аргинин	2,043	2,497
Аспарагин	14,76	18,04
Глутамин	30,429	37,191
4-Хидроксипролин	0,072	0,088
Серин	0,999	1,221
Аспартова киселина	8,136	9,944
Глутамова киселина	17,838	21,802

Треонин	0,405	0,495
Г лицин	5,004	6,116
Г ама-аминобутирова киселина
Тирозин	15,633	19,107
Пролин	1,926	2,354
Метионин	6,084	7,436
Валин”	17,055	20,845
Левцин/изолевцин	25,713	31,427
Триптофан”	4,509	5,511
Фенилаланин	18,603	22,737
Орнитин	32,724	39,996
Лизин”	26,586	32,494
Общо съдържание	237,249	289,971

# незаменима аминокиселина

Лиофилизиран протеинов хидролизат от черупка на охлюв, който е прах с бежовокафяв цвят и е със съдържание на свободни аминокиселини и микроелементи, както следва:

Аминокиселина	съдържание в мг/г
	минимално	Максимално
Хистидин	0,31	0,38
Аргинин	0,02	0,02
Аспарагин	0,18	0,22
Глутамин	2,99	3,65
4-Хидроксипролин	0,01	0,01
Серин	0,40	0,48
Аспартова киселина	0,02	0,02
Глутамова киселина	0,06	0,07
Треонин”	0,23	0,28
Глицин	0,44	0,54

Гама-аминобутирова киселина	-	-
Тирозин	1,40	1,71
Пролин	0,02	0,02
Метионин	0,06	0,07
Валин*	0,51	0,63
Левцин/изолевцин	0,46	0,57
Триптофан*	0,06	0,07
Фенилаланин	0,76	0,93
Орнитин	0,10	0,13
Лизин*	1,34	1,64
Общо съдържание	9,37	11,45

# незаменима аминокиселина

Микроелемент	съдържание в мг/г
минимално	Максимално
Калций	189,010	231,020
Магнезий	172,800	211,200
Хром	0,003	0,004
Натрий	5,020	6,140
Цинк	0,101	0,123
Желязо	1,066	1,303

Всички процеси, съгласно изобретението, при които има манипулации с живите животни се реализират при стриктно спазване на изискванията на ветеринарните органи.

Методът съгласно изобретението позволява пълно оползотворяване на всички компоненти на охлюва, за които има доказателства, че притежават благоприятни свойства по отношение на човешкото здраве.

Методът включва етапа от излюпване на охлюва до получаване на лиофилизирани продукти от него, без странични отпадъци, оказващи въздействие на околната среда.

Методът се реализира както в специализирани помещения така и на открито в изградени ферми, свързани с угояването на охлювите.

Методът е непрекъснат и безотпаден и от един охлюв при непрекъснат цикъл се получават 6 крайни лиофилизирани продукти, които са:

• Лиофилизиран хайвер;

• Лиофилизиран слуз;

• Лиофилизиран хемоцианин (кръв);

• Лиофилизирано месо;

• Лиофилизиран протеинов хидролизат от месо;

• Лиофилизиран протеонов хидролизат от черупка.

Предимства на получаваните по метода продукти са:

• Пълно запазване на биологичната активност на съдържащите се в тях компоненти;

• Продължителен срок на годност от 2 до 5 години без използване на консерванти;

• Съхранение и транспорт при стандартни условия.

Методът съгласно изобретението осигурява, пълно оползотворяване на изходната суровина - охлюви. Тя включва следните технологични процеси:

• Излюпване на охлювите в специално конструирано люпилно помещение, • Отглеждане (угояване) на охлювите в контролирани условия, максимално близки до естествения им хабитат, • Събиране на хайвер, слуз и хемоцианин при условия, причиняващи минимален стрес на животните.

• Добиване на месо от охлюви • Обработка на черупките на охлювите.

• Получаване на протеинови и аминокиселинни хидролизата.

• Получавамне на лиофилизирани продукти.

• Опаковка и съхранение на получените продукти.

ПРИМЕРНО ИЗПЪЛНЕНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Настоящето изобретение се илюстрира със следните предпочитани примерни изпълнения , които по никакъв начин не ограничават неговия обхват.

Пример 1.

Етап 1 Излюпване на охлювите в специално конструирано люпилно помещение Възпроизводството на охлювите се осъществява в изкуствени условия. В специализирани помещения се пресъздават условия, близки до условията в природата. В специални съоръжения /хамаци/ се разполагат животните. Тук те се оплождат и снасят хайвера си в специфична пръст /торф/, поставена в кофичка.

Отглеждане (угояване) на охлювите в контролирани условия

Процесът на угояване на охлювите се извършва в специализирани ферми на открито. В тях се извършва интензивно хранене на охлювите с комбиниран стартов фураж - до първия месец и камбиниран фураж за угояване - до момента на тяхвата готовност за събиране. Малките охлюви създадени в изкуствени условия се пускат при залез слънце във фермата на открито. Във фермата се угояват от 3 до 4 месеца. През периода на угояване и периода на извличане на суровините от охлювите към комбинирания фураж в някои случаи се добавя и търговски достъпен продукт LBB (Lactis Bacillus Bulgaricus), който допълнително стимулира растежа на охлювите и действа благоприятно за по-дългия период на преживяване в хибернация.

Етап 2. Получаване на хайвер от охлюви

След оплождането, охлювите снасят хайвера си в специфична пръст /торф/, поставена в кофичка. Самото снасяне е процес, който продължава от 46 до 48 часа. След това кофичката се изсипва, хайвера е под формота на топка, която се разсява в съд с капак, където в период от 12-15 дни се излюпват охлювите. Съгласно изобретението се достига до 90% излюпване на охлювите, докато в природата този процес е едва 10%. В люпилнята върху специално конструирани за целта хамаци, се разполагат охлювите при гъстота от 250-300 броя на м . Животните се оплождат и снасят яйцата си (хайвера) в специално поставени за целта полиетиленови кофички, запълнени със специална почва (торф или подобна почва). Охлювите се връщат в хамаците, а хайвера се събира от кофичките. Той е под формата на топки, всяка от които се състои от около 100-120 броя отделни зрънца хайвер.

Етап 3 Получаване на слуз от охлюви

В съд от неръждаема стамана с обем от 300 литра снабден с нискооборотна 60 оборота/мин бъркалка и електроди за импулсно подаване на нисковолтово напрежение 12 Волта, се поставят еквивалентни количества вода и живи охлюви в случая 100 кг. При непрекъснато разбъркване в съда се подава за време 120секунди нисковолтовото напрежение два пъти. В периодите на подаване на нисковолтово напрежение, охлювите изпадат в стресово състояние и като защитна реакция отделят слуз. В края на процеса охлювите се изваждат от съда и се връщат в люпилнята. Разтворът на слуз и вода се съхранява при температура от 4°С за 12 часа в хладилни помещения, за да се хомогенизира. Полученият разтвор на слуз се филтрува последователно на филтри с размер на порите 50, 30, 20, 10, 5, 1 микрона. Следва процес на допълнителна филтрация с цел концентриране, чрез обратна осмоза при стандартни за процеса условия.

Етап 4. Получаване на хемоцианин

Хемоцианин се добива ръчно от оператор. За целта животното се взема в ръка и по долната част от крака на охлюва се извършва леко S-образно движение завършващо в края с леко бодване. При обождането се отделят до две капки бяла гъста течност, която в досег с кислорода от въздуха се оцветява в синьо.

Етап 5 . Получаване на месо от охлюв

Съгласно изобретението охлювите се подлагат на термична обработка. За отделяне на месото от черупката охлювите се потапят в предварително подгрята до 70°С вода за 30 секунди. Охлювът се потапя в предварително изстудена вода до 20°С с цел запазване нативната форма на съдържащите се протеини, месото се отделя от черупката по механичен начин.

Етап 6. Получаване на протеинов хидролизат от месо

В съд от неръждаема стамана с обем не по-малък от 200 литра снабден с нискооборотна бъркалка и нагревател към 100 литра, предварително подгрята до 60°С, алкализирана (рН=8) вода, се добавят 80 кг свежо смляно месо от охлюв. Към сместа се добавя предварително пресметнато съгласно указанията на производителя количество ензим Alcalase 2.5, Novozymes. Процесът на ензимна хидролиза се провежда за 14 часа при 60°С и рН=8 на реакционната среда. Процесът се провежда при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с подходящ алкален разтвор. В края на процеса, температурата на реакционната смес се повишава до 95°С и се поддържа за 4 часа. След това реакционната смес се охлажда рязко до 20°С и подкислява до рН=5.5 с подходяща киселина.

Етап 7. Получаване на протеинов хидролизат от черупка

Черупките на охлювите получени съгласно описаното в етап 5 се измиват многократно с охладена вода, след което се изсушават на въздух до постоянно тегло. Сухите черупки се смилат механично до размери около 5 мм. В съд от неръждаема стомана с обем от 200 литра снабден с нискооборотна бъркалка и нагревател към 100 литра предварително подгрята до 60°С алкализирана рН=8 вода, се добавят 30 кг свежо смлени черупки от охлюви. Към сместа се добавя предварително пресметнато съгласно указанията на производителя количество ензим Alcalase 2.5, Novozymes. Процесът на ензимна хидролиза се провежда за 24 часа при 60°С и рН=8 на реакционната среда. Процесът се провежда при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с подходящ за целта алкален разтвор. В края на процеса, температурата на реакционната смес се повишава до 95°С и се поддържа в продължение на 4 часа. След това реакционната смес се охлажда рязко до 20°С и се подкислява до рН=4,5

Посочените количествени резултати на крайните продукти варират, поради факта, че са в зависимост от изходната суровина, която е жив организъм и има индивидуални показатели

Етап 8 Получаване на лиофилизирани продукти по метода от етап 2 до етап 8

8.1. Получаване на лиофилизиран хайвер

Полученият хайвер се измива многократно с пречистена охладена вода за отстраняване на следи от почва. След което е помоща на пасатор (шейкър) се смила дополучаване на хомогенна смес. Розовата на цвят смес се замразява на тънък слой в тавите за лиофилизация при минус 40°С и процеса на лиофилизация се провежда за 32 часа при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта получен по метода на етап 2

Продуктът е лек, фин прах с розово-червеникав цвят. Продуктът е с относително ниско съдържание на протеини 25% и въглехидрати 7%. Съдържанието на свободните мастни киселини е под 1%.

Съдържание на свободни аминокиселини в лиофилизиран хайвер

Аминокиселина	съдържание в мг/г
минимално	Максимално
_ _ й Хистидин	0,288	0,352
Аргинин	0,243	0,297
Аспарагин	0,162	0,198
Глутамин	0,252	0,308
4-Хидроксипролин	0,027	0,033
Серин	0,873	1,067
Аспартова киселина	0,405	0,495
Глутамова киселина	0,234	0,286
Треонин*	0,216	0,264
Глицин	0,27	0,33
Гама-аминобутирова киселина	-	-
Тирозин	0,072	0,088
Пролин	0,117	0,143
_ _ й Метионин	0,018	0,022

Валин”	0,171	0,209
41 Левцин/изолевцин	0,207	0,253
Триптофан”	0,063	0,077
Фенилаланин”	0,126	0,154
Орнитин	0,576	0,704
Лизин”	0,261	0,319
Общо съдържание	4,581	5,599

# незаменима аминокиселина

8.2. Получаване на лиофилизирана слуз

Концентриран разтвор на слуз се замразява при температура -40°С в тавите за лиофилизация и процеса на лиофилизация се провежда за 30 часа при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта получен по метода на етап 3

Продуктът е фин прах с бежово-кафяв цвят. Биохимичният анализ на продукта показва, че той е сложна смес от протеини, въглехидрати, липиди, флавоноиди, неорганични вещества и нискомолекулни съединения. Протеиновата фракция е основният компонент на слузта в количество 40%.

Съдържание на свободни аминокиселини в лиофилизиран слуз

Аминокиселина	съдържание в мг/г
Минимално	максимално
.... й Хистидин	0,43	0,53
Аргинин	0,11	0,13
Аспарагин	0,39	0,47
Глутамин	0,40	0,48
4-Хидроксипролин	0,11	0,13
Серин	0,63	0,77

Аспартова киселина	0,90	1,10
Глутамова киселина	1,39	1,69
Треонин*	0,43	0,53
Глицин	2,40	2,94
Гама-аминобутирова киселина		-
Тирозин	0,05	0,06
Пролин	0,45	0,55
Метионин	0,10	0,12
Валин*	1,64	2,00
Левцин/изолевцин*	3,40	4,16
Триптофан”	0,19	0,23
Фенилаланин	0,82	1,00
Орнитин	1,48	1,80
Лизин*	1,73	2,11
Общо съдържание	17,03	20,81

# незаменима аминокиселина

8.3. Получаване на лиофилизиран хемоцианин

Полученият хемоцианин се замразява на тънък слой в тавите за лиофилизация при минус 40-45°C и процеса на лиофилизация се провежда за 36-38 часа, при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта получен по метода от етап 4

Лиофилизираният хемоцианин е фин бял прах. Основни компоненти на продукта са мед (Си) координирани хемоцианинови протеини, представляващи до 90% от съдържанието на продукта.

8.4. Получаване на лиофилизирано месо

Охладеното месо се смила на стандартна месомелачка, разстила се на тънък слой в тавите за лиофилизация, замразява се при -45°С и процеса на лиофилизация се провежда за 36 часа при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта получен от етап 5

Лиофилизираното месо е кафяв на цвят прах с високо съдържание на протеини 75% и въглехидрати 20% и сравнително ниско ниво на липиди под 4%. Биохимичният анализ показва, че около 70% от съдържащия се протеин е водоразтворим.

Съдържание на свободни аминокиселини в лиофилизирано месо от охлюв

Аминокиселина	съдържание в мг/г
минимално	максимално
Хистидин	0,621	0,759
Аргинин	0,18	0,22
Аспарагин	0,333	0,407
Глутамин	2,106	2,574
4-Хидроксипролин	0,063	0,077
Серин	1,026	1,254
Аспартова киселина	0,882	1,078
Глутамова киселина	2,763	3,377
Треонин*	0,549	0,671
Глицин	0,864	1,056
Гама-аминобутирова киселина	-	-
Тирозин	0,414	0,506
Пролин	0,675	0,825
Метионин	0,135	0,165
Валин*	0,756	0,924

Левцин/изолевцин	0,909	1,111
Триптофан*	0,162	0,198
Фенилаланин	0,603	0,737
Орнитин	7,803	9,537
Лизин*	2,16	2,64
Общо съдържание	23,004	28,116

# незаменима аминокиселина

8.5. Получаване на лиофилизиран протеинов хидролизат от месо

След филтруване (филтърно платно) получения хидролизат се разстила на тънък слой в тавите за лиофилизация, замразява се при -40°С и процеса на лиофилизация се провежда за 34 часа, при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта получен от етап 6

Продуктът е кафяв на цвят прах с висока разтворимост във вода до 90 % на база сухо вещество. Основни компоненти на лиофилизарания хидролизат са ниско молекулни пептиди 65% (до 5 kD) и свободни аминокиселини. Продуктът съдържа още протеин, 10% , въглехидрати 10% и под 4% липиди.

Съдържание на свободни аминокиселини в лиофилизиран хидролизат от месо на охлюв

Аминокиселина	съдържание в мг/г
	минимално	максимално
й Хистидин	8,73	10,67
Аргинин	2,043	2,497
Аспарагин	14,76	18,04
Глутамин	30,429	37,191
4-Хидроксипролин	0,072	0,088
Серин	0,999	1,221
Аспартова киселина	8,136	9,944

Глутамова киселина	17,838	21,802
Треонин*	0,405	0,495
Глицин	5,004	6,116
Г ама-аминобутирова киселина
Тирозин	15,633	19,107
Пролин	1,926	2,354
Метионин	6,084	7,436
Валин*	17,055	20,845
Левцин/изолевцин*	25,713	31,427
Триптофан*	4,509	5,511
Фенилаланин	18,603	22,737
Орнитин	32,724	39,996
Лизин*	26,586	32,494
Общо съдържание	237,249	289,971

# незаменима аминокиселина

8.6. Получаване на лиофилизиран протеинов хидролизат от черупка

Полученият хидролизат се разстила на тънък слой в тавите за лиофилизация, замразява се при минус 40-45°С и процеса на лиофилизация се провежда за 34-38 часа при контролирани условия на вакуум и температура.

Описание на продукта получен от етап 7

Продуктът е бежово - кафяв на цвят прах с относително ниска разтворимост във вода до 15% на база сухо вещество. Продуктът се разтваря добре в разтвори на разредени минерални киселини. Основни органични компоненти на лиофилизарания хидролизат са до 25% ниско молекулни пептиди и свободни аминокиселини.

Съдържание на свободни аминокиселини в лиофилизиран хидролизат от черупка на охлюв

Аминокиселина	съдържание в мг/г
	минимално	максимално
Хистидин	0,31	0,38
Аргинин	0,02	0,02
Аспарагин	0,18	0,22
Глутамин	2,99	3,65
4-Хидроксипролин	0,01	0,01
Серин	0,40	0,48
Аспартова киселина	0,02	0,02
Глутамова киселина	0,06	0,07
Треонин*	0,23	0,28
Глицин	0,44	0,54
Гама-аминобутирова киселина	-	-
Тирозин	1,40	1,71
Пролин	0,02	0,02
Метионин	0,06	0,07
Валин*	0,51	0,63
Левцин/изолевцин*	0,46	0,57
Триптофан*	0,06	0,07
— й Фенилаланин	0,76	0,93
Орнитин	0,10	0,13
Лизин*	1,34	1,64
Общо съдържание	9,37	11,45

# незаменима аминокиселина

Съдържание на микроелементи в лиофилизиран хидролизат от черупка на охлюв

Пример 2

Получаване на лиофилизиран хайвер, съгласно изобретението на етап 2

Полученият хайвер се измива многократно с пречистена охладена вода за отстраняване на следи от почва. След което с помоща на пасатор (шейкър) се смила дополучаване на хомогенна смес. Розовата на цвят смес се замразява на тънък слой в тавите за лиофилизация при минус 45 °C и процеса на лиофилизация се провежда за 38 часа при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта:

Продуктът е лек, фин прах с розово-червеникав цвят. Продуктът е със съдържание на протеини 35% и въглехидрати 12%.

Останалите етапи и получените продукти техните качествени и количествени характеристики са както в пример 1.

Пример 3

Получаване на слуз от охлюви, съгласно изобретението на етап 3

В съд от неръждаема стомана с обем не по-малък от 250 литра снабден с нискооборотна с 60 оборота/мин бъркалка и електроди за импулсно подаване на нисковолтово напрежение 10 Волта, се поставят еквивалентни количества вода и живи охлюви в случая 100 кг. При непрекъснато разбъркване в съда се подава нисковолтовото напрежение за време 120 секунди три пъти. В периодите на подаване на нисковолтово напрежение, охлювите изпадат в стресово състояние и като защитна реакция отделят слуз. В края на процеса охлювите се изваждат от съда и се връщат в люпилнята. Разтворът на слуз и вода се съхранява при температура от 6 С за 10 часа в хладилни помещения, за да се хомогенизира. Полученият разтвор на слуз се филтрува последователно на филтри с размер на порите 50, 30, 20, 10, 5, 1 микрона. Следва процес на допълнителна филтрация с цел концентриране, чрез диализа при стандартни за процеса условия.

Пример 3

В съд от неръждаема стамана с обем не по-малък от 250 литра снабден с нискооборотна с 30 оборота/мин бъркалка и електроди за импулсно подаване на нисковолтово напрежение 12 Волта, се поставят еквивалентни количества вода и живи охлюви в случая 100 кг. При непрекъснато разбъркване в съда се подава за кратко време 60 секунди три пъти нисковолтово напрежение. В периодите на подаване на нисковолтово напрежение, охлювите изпадат в стресово състояние и като защитна реакция отделят слуз. В края на процеса охлювите се изваждат от съда и се връщат в люпилнята. Разтворът на слуз и вода се съхранява при температура от 4 С за 14 часа в хладилни помещения, за да се хомогенизира. Полученият разтвор на слуз се филтрува последователно на филтри с размер на порите 50, 30, 20, 10, 5, 1 микрона. Следва процес на на допълнителна филтрация с цел концентриране, чрез ултрафилтрация при стандартни за нея условия.

Получаване на лиофилизирана слуз:

Концентриран разтвор на слуз се замразява при температура до -45°С в тавите за лиофилизация и процеса на лиофилизация се провежда до 38 часа при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта:

Продуктът е фин прах с бежово-кафяв цвят. Биохимичният анализ на продукта показва, че той е сложна смес от протеини, въглехидрати, липиди, флавоноиди, неорганични вещества и нискомолекулни съединения. Протеиновата фракция е основният компонент на слузта и е в количество 43%.

Пример 4

Получаване на месо от охлюв, съгласно изобретението на етап 5

Съгласно изобретението охлювите се подлагат на термична обработка. За отделяне на месото от черупката охлювите се потапят в предварително подгрята до 70°С вода за 40 секунди. Охлювът се потапя в предварително изстудена вода до 20°С с цел запазване нативната форма на съдържащите се протеини, месото се отделя от черупка по механичен начин.

Получаване на лиофилизирано месо:

Охладеното месо се смила на стандартна месомелачка, разстила се на тънък слой в тавите за лиофилизация, замразява се при минус 40°С и процеса на лиофилизация се провежда за 30 часа при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта:

Лиофилизираното месо е кафяв на цвят прах с високо съдържание на протеини 65% и въглехидрати 14% и сравнително ниско ниво на липиди под 4%. Биохимичният анализ показва, че около 70% от съдържащия се протеин е водоразтворим.

Пример 5

Получаване на протеинов хидролизат от месо, съгласно изобретението на етап 6

В съд от неръждаема стамана с обем не по-малък от 200 литра снабден с нискооборотна бъркалка и нагревател към 100 литра, предварително подгрята до 60°С, алкализирана (рН=8) вода, се добавят 80 кг свежо смляно месо от охлюв. Към сместа се добавя предварително пресметнато (съгласно указанията на производителя) количество ензим Alcalase 2.5, Novozymes. Процесът на ензимна хидролиза се провежда за 10 часа при 60°С и рН=8 на реакционната среда. Процесът се провежда при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с подходящ алкален разтвор. В края на процеса, температурата на реакционната смес се повишава до 95°С и се поддържа за 4 часа. След това реакционната смес се охлажда рязко до 20°С и подкислява до рН=4.5 с подходяща киселина.

Лиофилизиран протеинов хидролизат от месо:

След филтруване с филтърно платно получения хидролизат се разстила на тънък слой в тавите за лиофилизация, замразява се при -45С° и процеса на лиофилизация се провежда за 38 часа, при контролирани оптимални условия на вакуум и температура.

Описание на продукта:

Продуктът е кафяв на цвят прах с висока разтворимост във вода до 90% на база сухо вещество. Основни компоненти на лиофилизарания хидролизат 75% са ниско молекулни пептиди до 5 kD и свободни аминокиселини. Продуктът съдържа още 15% протеин, 14% въглехидрати и под 4% липиди.

Пример 6

Получаване на протеинов хидролизат от черупка, съгласно изобретението на етап 7

Черупките на охлювите получени съгласно описаното в етап 5 се измиват многократно с охладена вода, след което се изсушават на въздух до постоянно тегло. Сухите черупки се смилат механично до размери около 5 мм. В съд от неръждаема стомана с обем от 200 литра снабден с нискооборотна бъркалка и нагревател към 100 литра предварително подгрята до 60°С алкализирана рН=8 вода, се добавят 30 кг свежо смляно месо от охлюв. Към сместа се добавя предварително пресметнато съгласно указанията на производителя количество ензим Alcalase 2.5, Novozymes. Процесът на ензимна хидролиза се провежда за 20 часа при 60°С и рН=8 на реакционната среда. Процесът се провежда при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с подходящ за целта алкален разтвор. В края на процеса, температурата на реакционната смес се повишава до 95 °C и се поддържа в продължение на 4 часа. След това реакционната смес се охлажда рязко до 20°С и се подкислява до рН=5,5.

Claims

1. Метод за получаване на лиофилизирани продукти от охлюви включващ ензимна хидролизация и лиофилизация, характеризиращ се с това, че методът е непрекъснат и безотпадъчен и включва следните етапи: етап 1 излюпване на охлюви и/или угояването им, етап 2 получаване на хайвер от охлюви, етап 3 получаване на слуз от охлюви, етап 4 получаване на хемоцианин от охлюви, етап 5 получаване на месо охлюви, етап 6 получаване на протеинов хидролизат от месо от охлюви, етап 7 получаване на протеинов хидролизат от черупка на охлюви и етап 8 процес на лиофилизация на продуктите от етап 2 до етап 7, като етап 1 е процес на излюпване на охлюви и/или угояването им в контролирани условия за период от 3-4 месеца, в специализирани за целта помещения и съоръжения , в етап 2 включва оплождане на охлювите, снасяне на хайвер като охлювите са разположени при гъстота от 250-300 броя на м ’ и процесът на снасяне продължава от 46 до 48 часа, етап 3 процесът на получаване на слуз от охлюви се осъществява в съд с еквивалентни количества вода и живи охлюви, съдът е снабден с бъркалка от 30 до 60 оборота в минута и електроди за импулсно подаване на нисковолтово напрежение от 10 до 12 Волта, който се подава за време 60-120 секунди от 2 до 3 пъти , охлювите се изваждат от съда, разтворът се хомогенезира за време от 10 до 14 часа при температура от 4-6°С , филтрува се последователно през филтри с размер на порите 50, 30, 20, 10, 5, 1 микрона, получения филтрат се подлага на допълнителна филтрация, етап 4 процесът на получаване на хемоцианин се осъществява ръчно, като по долната част от крака на охлюва се извършва S-образно движение, завършващо в края с леко бодване и отделяне на хемоцианина, етап 5 процес на получаване на месо от охлюви, който се осъществява чрез термична обработка, като отделяне на месото от черупката се осъществява в предварително подгрята до 70°С вода за време 30 - 40 секунди, следва механично изваждане на месото и потапянето му в предварително охладена до 20°С вода, етап 6 процес на получаване на протеинов хидролизат от месо от охлюви, който се осъществява чрез ензимна ходролиза в съд от неръждаема стомана снабден с нискооборотна бъркалка и нагревател в алкализирана (pH = 8) вода, която предварително е подгрята до 60°С се добавя смляното месо от охлюви и се прибавя ензим, процесът протича за време 10-14 часа при температура от 60С° до 95°С при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с алкален разтвор, следва охлаждане до 20°С и подкисляване до рН=4.5-5.5, етап 7 процесът на получаване на протеинов хидролизат от черупка на охлюви протича като черупките на охлювите получени от етап 5 се измиват многократно с охладена вода, след което се изсушават на въздух до постоянно тегло, следва механичното им смилане до размери 5 мм, поставят се в съд от неръждаема стомана с нискооборотна бъркалка и нагревател към предварително подгрята до 60°С алкализирана pH = 8 вода, към сместа се добавя ензим и процесът на ензимна хидролиза се провежда за време от 20 до 24 часа при 60°С и рН=8 на реакционната среда, процесът протича при непрекъснат контрол на pH и при необходимост се коригира с алкален разтвор, в края на процеса, температурата на реакционната смес се повишава до 95°С и се поддържа в продължение на 4 часа, следва рязко охлаждане до 20°С след което се подкислява до рН=4.5-5.5 , етап 8 получените продукти от етапи 2, 3, 4, 5, 6 и 7 се лиофилизират.

2. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че в даден случай етап 2 и етап 3 се повтарят многократно.

3. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че лиофилизацията на продуктите протича при температура от минус 40-45°С за време от 32 до 48 часа.

4. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че на етап 3 допълнителната филтрация се провежда чрез обратна осмоза или диализа или ултрафилтрация.

5. Продукти получени по метода, съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че е лиофилизиран хайвер, който е фин прах с розово-червеникав цвят, със съдържание на протеини 25-35%, въглехидрати 7-12% и е със съдържание на свободни аминокиселини както следва:

Аминокиселина съдържание в мг/г минимално максимално

Хистидин 0,288 0,352

Аргинин 0,243 0,297

Аспарагин 0,162 0,198

Глутамин 0,252 0,308

4-Хидроксипролин 0,027 0,033

Серин 0,873 1,067

Аспартова киселина 0,405 0,495

Глутамова киселина 0,234 0,286

Треонин 0,216 0,264

Глицин 0,27 0,33

Гама-аминобутирова киселина - -

Тирозин 0,072 0,088

Пролин 0,117 0,143

Метионин 0,018 0,022

Валин 0,171 0,209

Левцин/изолевцин 0,207 0,253

Триптофан 0,063 0,077

Фенилаланин 0,126 0,154

Орнитин 0,576 0,704

Лизин 0,261 0,319

Общо съдържание 4,581 5,599

6. Продукти, получени по метода, съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че е лиофилизирана слуз, която е фин прах с бежово-кафяв цвят, протеиновата фракция е 40 - 45% и е със съдържание на свободни аминокиселини, както следва:

Хистидин 0,43 0,53

Аргинин 0,11 0,13

Аспарагин 0,39 0,47

Глутамин 0,40 0,48

4-Хидроксипролин 0,11 0,13

Серии 0,63 0,77

Аспартова киселина 0,90 1,10

Глутамова киселина 1,39 1,69

Треонин 0,43 0,53

Глицин 2,40 2,94

Гама-аминобутирова киселина - -

Тирозин 0,05 0,06

Пролин 0,45 0,55

Метионин 0,10 0,12

Валии 1,64 2,00

Левцин/изолевцин 3,40 4,16

Триптофан 0,19 0,23

Фенилаланин 0,82 1,00

Орнитин 1,48 1,80

Лизин 1,73 2,11

Общо съдържание 17,03 20,81

7. Продукти получени по метода ,съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че е лиофилизиран хемоцианин, който е фин бял прах, съдържащ мед (Си) координирани хемоцианинови протеини,

8. Продукти получени по метода ,съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че е лиофилизирано месо от охлюв, което е кафяв на цвят прах със съдържание на протеини 65-75%, въглехидрати 14-20% и със съдържание на свободни аминокиселини, както следва:

Хистидин 0,621 0,759

Аргинин 0,18 0,22

Аспарагин 0,333 0,407

Глутамин 2,106 2,574

4-Хидроксипролин 0,063 0,077

Серин 1,026 1,254

Аспартова киселина 0,882 1,078

Глутамова киселина 2,763 3,377

Треонин 0,549 0,671

Глицин 0,864 1,056

Г ама-аминобутирова киселина - -

Тирозин 0,414 0,506

Пролин 0,675 0,825

Метионин 0,135 0,165

Валии 0,756 0,924

Левцин/изолевцин 0,909 1,111

Триптофан 0,162 0,198

Фенилаланин 0,603 0,737

Орнитин 7,803 9,537

Лизин 2,16 2,64

Общо съдържание 23,004 28,116

9. Продукти, получени по метода, съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че е лиофилизиран протеинов хидролизат от месо на охлюв, който е бежово-кафяв на цвят прах, съдържа на ниско молекулни пептиди 65-75%, протеин 10-15%, въглехидрати 1014 % и аминокиселини, както следва:

Хистидин 8,73 10,67

Аргинин 2,043 2,497

Аспарагин 14,76 18,04

Глутамин 30,429 37,191

4-Хидроксипролин 0,072 0,088

Серин 0,999 1,221

Аспартова киселина 8,136 9,944

Глутамова киселина 17,838 21,802

Треонин 0,405 0,495

Глицин 5,004 6,116

Г ама-аминобутирова киселина

Тирозин 15,633 19,107

Пролин 1,926 2,354

Метионин 6,084 7,436

Валин 17,055 20,845

Левцин/изолевцин 25,713 31,427

Триптофан 4,509 5,511

Фенилаланин 18,603 22,737

Орнитин 32,724 39,996

Лизин 26,586 32,494

Общо съдържание 237,249 289,971

10. Продукти, получени по метода, съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че е лиофилизиран хидролизат от черупка на охлюв, който е бежово-кафяв на цвят прах и е със съдържание на свободни аминокиселини и микроелементи, както следва:

Хистидин 0,31 0,38

Аргинин 0,02 0,02

Аспарагин 0,18 0,22

Глутамин 2,99 3,65

4-Хидроксипролин 0,01 0,01

Серин 0,40 0,48

Аспартова киселина 0,02 0,02

Глутамова киселина 0,06 0,07

Треонин 0,23 0,28

Глицин 0,44 0,54

Гама-аминобутирова киселина - -

Тирозин 1,40 1,71

Пролин 0,02 0,02

Метионин 0,06 0,07

Валии 0,51 0,63

Левцин/изолевцин 0,46 0,57

Триптофан 0,06 0,07

Фенилаланин 0,76 0,93

Орнитин 0,10 0,13

Лизин 1,34 1,64

Общо съдържание 9,37 11,45

Микроелемент съдържание в мг/г

минимално максимално

Калций 189,010 231,020

Магнезий 172,800 211,200

Хром 0,003 0,004

Натрий 5,020 6,140

Цинк 0,101 0,123

Желязо 1,066 1,303