[go: up one dir, main page]

BE1030801B1 - Feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock - Google Patents

Feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock Download PDF

Info

Publication number
BE1030801B1
BE1030801B1 BE20225661A BE202205661A BE1030801B1 BE 1030801 B1 BE1030801 B1 BE 1030801B1 BE 20225661 A BE20225661 A BE 20225661A BE 202205661 A BE202205661 A BE 202205661A BE 1030801 B1 BE1030801 B1 BE 1030801B1
Authority
BE
Belgium
Prior art keywords
feed
xylanase
feed additive
wheat flour
mass ratio
Prior art date
Application number
BE20225661A
Other languages
Dutch (nl)
Other versions
BE1030801A1 (en
Inventor
Dirk Janssens
Ronny Mombaerts
Original Assignee
Nu3Guts Bv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nu3Guts Bv filed Critical Nu3Guts Bv
Priority to BE20225661A priority Critical patent/BE1030801B1/en
Priority to NL2035658A priority patent/NL2035658B1/en
Publication of BE1030801A1 publication Critical patent/BE1030801A1/en
Application granted granted Critical
Publication of BE1030801B1 publication Critical patent/BE1030801B1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10Organic substances
    • A23K20/189Enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/70Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
    • A23K50/75Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

De huidige uitvinding betreft een voederadditief voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit voeder in vee, waarbij het voederadditief een xylanase en een dragermateriaal omvat, waarbij het xylanase een endo-1,4-beta xylanase is, geschikt voor het afbreken van arabinoxylaan, waarbij het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem omvat, en waarbij het voederadditief de geëxtrudeerde tarwebloem en het xylanase omvat in een massaverhouding van minstens 6,5/1. De uitvinding betreft eveneens een werkwijze voor het bereiden van een voornoemd voederadditief, alsook een voedersamenstelling omvattende voornoemd voederadditief en een gebruik van voornoemd voederadditief.The present invention concerns a feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock, wherein the feed additive comprises a xylanase and a carrier material, wherein the xylanase is an endo-1,4-beta xylanase, suitable for breaking down arabinoxylan, wherein the carrier material comprises extruded wheat flour, and wherein the feed additive comprises the extruded wheat flour and the xylanase in a mass ratio of at least 6.5/1. The invention also concerns a method for preparing said feed additive, as well as a feed composition comprising said feed additive and a use of said feed additive.

Description

1 BE2022/56611 BE2022/5661

VOEDERADDITIEF VOOR HET VERHOGEN VAN DE METABOLI SEERBAREFEED ADDITIVE FOR INCREASING METABOLISM

ENERGIE UIT VOEDER IN VEEENERGY FROM FEED IN LIVESTOCK

TECHNISCH DOMEINTECHNICAL DOMAIN

De uitvinding heeft betrekking op een voederadditief voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit voeder in vee, alsook een voedersamenstelling waarin zo’n voederadditief is toegepast, een gebruik van het voederadditief en een werkwijze voor de bereiding van zo’n voederadditief.The invention relates to a feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock, as well as a feed composition in which such a feed additive has been used, a use of the feed additive and a method for the preparation of such a feed additive.

STAND DER TECHNIEKSTATE OF THE TECHNOLOGY

Veevoeders kunnen plantaardige polysachariden omvatten die kunnen fungeren als een belangrijk voedingsbestanddeel in de voeding (b.v. zetmeel), maar ook een aantal niet- zetmeelpolysachariden (NSP). Grote landbouwhuisdieren zoals pluimvee en varkens missen de relevante enzymen in hun spijsverteringskanaal om de NSP te verteren.Animal feeds may include vegetable polysaccharides that can act as an important nutritional component in the diet (e.g. starch), but also a number of non-starch polysaccharides (NSP). Large farm animals such as poultry and pigs lack the relevant enzymes in their digestive tract to digest the NSP.

Arabinoxylanen zijn de meest voorkomende componenten van = niet- zetmeelpolysachariden (NSP's) in granen (waaronder maïs, gerst en tarwe). Zij zijn ook aanwezig in eiwitbronnen van plantaardige oorsprong, zoals sojameel, raapzaadmeel en zonnebloemkoek. Arabinoxylaan bestaat uit twee fracties: oplosbaar arabinoxylaan en onoplosbaar arabinoxylaan. Oplosbare en onoplosbare arabinoxylanen veroorzaken een hoge viscositeit in het bovenste deel van het spijsverteringskanaal, waardoor de beschikbaarheid. Onoplosbaar arabinoxylaan als bestanddeel van de celwand, 'omheinen' voedingsstoffen in het cellumen, vaak aangeduid als het "kooi-effect".Arabinoxylans are the most abundant components of = non-starch polysaccharides (NSPs) in grains (including corn, barley and wheat). They are also present in protein sources of vegetable origin, such as soy meal, rapeseed meal and sunflower cake. Arabinoxylan consists of two fractions: soluble arabinoxylan and insoluble arabinoxylan. Soluble and insoluble arabinoxylans cause high viscosity in the upper digestive tract, reducing availability. Insoluble arabinoxylan as a component of the cell wall, 'fences' nutrients into the cell lumen, often referred to as the "cage effect".

Het gebruik van xylanases in diervoeder is bekend om de benutting van het voer te verbeteren, zoals uit EP2073642, maar gekende voederadditieven omvattende xylanases hebben slechts een beperkte houdbaarheid. Xylanases worden bovendien gebruikt in samengesteld veevoeder voor eenmagigen. Meestal wordt dit voeder gepelletiseerd, d.w.z. door stoominjectie naar hoge temperatuur gebracht om via een matrijs in cilindervormige pellets te worden geduwd. Door de hitte zijn de xylanases vaak onderhevig aan temperatuursinactivatie na hitte-behandelingen of bij pelletisering.The use of xylanases in animal feed is known to improve the utilization of the feed, such as from EP2073642, but known feed additives containing xylanases have only a limited shelf life. Xylanases are also used in composite animal feed for monogastrics. This feed is usually pelletized, i.e. brought to a high temperature by steam injection to be pushed into cylindrical pellets through a die. Due to the heat, the xylanases are often subject to temperature inactivation after heat treatments or during pelletization.

SAMENVATTING VAN DE UITVINDINGSUMMARY OF THE INVENTION

De uitvinding betreft een voederadditief voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit voeder in vee volgens conclusie 1. Voorkeursvormen van het voederadditief zijn weergegeven in conclusies 2 tot en met 11.The invention concerns a feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock according to claim 1. Preferred forms of the feed additive are shown in claims 2 to 11.

2 BE2022/56612 BE2022/5661

In een tweede aspect betreft de uitvinding een werkwijze voor het bereiden van een voederadditief volgens het eerste aspect volgens conclusie 12. In een derde aspect betreft de uitvinding een voedersamenstelling volgens conclusie 13. In een vierde aspect betreft de uitvinding een gebruik conclusie 14. Een voorkeursvorm is weergegeven in conclusie 15.In a second aspect the invention concerns a method for preparing a feed additive according to the first aspect according to claim 12. In a third aspect the invention concerns a feed composition according to claim 13. In a fourth aspect the invention concerns a use claim 14. A preferred form is shown in claim 15.

Een doelstelling van de uitvinding is het verhogen van de metaboliseerbare energie in voeders die arabinoxylanen omvatten, en meer specifiek voeders die oplosbare en onoplosbare arabinoxylaan omvatten.An object of the invention is to increase metabolizable energy in feeds comprising arabinoxylans, and more specifically feeds comprising soluble and insoluble arabinoxylan.

De uitvinding heeft tot doel de oplosbaarheid en/of de afbraak van zowel oplosbare als onoplosbare arabinoxylanen te verbeteren om de voedingswaarde van diervoeders te verhogen, onder meer door het verhogen van de metaboliseerare energie in het voeder maar bijvoorbeeld ook door de voederconversieverhouding (FCR), de groeisnelheid en/of de gewichtstoename te verbeteren.The aim of the invention is to improve the solubility and/or the breakdown of both soluble and insoluble arabinoxylans in order to increase the nutritional value of animal feeds, including by increasing the metabolizable energy in the feed but also, for example, by increasing the feed conversion ratio (FCR). improve growth rate and/or weight gain.

Het is een doelstelling om de viscositeit in de darm van het vee te verminderen.It is an objective to reduce the viscosity in the intestine of cattle.

Bovendien is het eveneens een doelstelling van de uitvinding om het kooi-effect te verminderen of zelfs te vermijden.Moreover, it is also an object of the invention to reduce or even avoid the cage effect.

Het is een doelstelling van de uitvinding een verbetering te bieden voor voederadditieven omvattende xylanases.It is an object of the invention to provide an improvement for feed additives comprising xylanases.

Het is tevens een doelstelling van de uitvinding de enzymstabiliteit van het xylanase in het voederadditief te verhogen. Hiervoor heeft de uitvinding tot doel de houdbaarheid (“shelf life”) van het enzym en dus het voederadditief te verhogen. Hiervoor heeft de uitvinding eveneens tot doel om de hittestabiliteit van het xylanase en dus van het voederadditief te verhogen.It is also an object of the invention to increase the enzyme stability of the xylanase in the feed additive. To this end, the invention aims to increase the shelf life of the enzyme and therefore the feed additive. To this end, the invention also aims to increase the heat stability of the xylanase and thus of the feed additive.

Bovendien heeft de uitvinding als doelstelling verdere processing van voeder, zoals bijvoorbeeld pelletisering, maar ook transport, mogelijk te maken zonder in te boeten aan enzymactiviteit.Moreover, the invention aims to enable further processing of feed, such as pelletization, but also transport, without sacrificing enzyme activity.

Het is tevens een doelstelling van de uitvinding een voederadditief te bieden dat beter gepelletiseerd kan worden.It is also an object of the invention to offer a feed additive that can be better pelletized.

3 BE2022/56613 BE2022/5661

Het is een doelstelling de microbiële stabiliteit van een voederadditief omvattende xylanases te verhogen.It is an objective to increase the microbial stability of a feed additive comprising xylanases.

GEDETAI LLEERDE BESCHRIJVINGDETAILED DESCRIPTION

De uitvinding betreft een voederadditief voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit voeder in vee.The invention concerns a feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock.

Tenzij anders gedefinieerd hebben alle termen die gebruikt worden in de beschrijving van de uitvinding, ook technische en wetenschappelijke termen, de betekenis zoals ze algemeen begrepen worden door de vakman in het technisch veld van de uitvinding.Unless otherwise defined, all terms used in the description of the invention, including technical and scientific terms, have the meanings commonly understood by those skilled in the art of the invention.

Voor een betere beoordeling van de beschrijving van de uitvinding, worden de volgende termen expliciet uitgelegd. “Een”, “de” en “het” refereren in dit document aan zowel het enkelvoud als het meervoud tenzij de context duidelijk anders veronderstelt. Bijvoorbeeld, “een segment” betekent een of meer dan een segment.For a better appreciation of the description of the invention, the following terms are explicitly explained. “A”, “the” and “het” in this document refer to both the singular and the plural unless the context clearly suggests otherwise. For example, “a segment” means one or more than one segment.

Wanneer “ongeveer” in dit document gebruikt wordt bij een meetbare grootheid, een parameter, een tijdsduur of moment, en dergelijke, dan worden variaties bedoeld van +/-20% of minder, bij voorkeur +/-10% of minder, meer bij voorkeur +/-5% of minder, nog meer bij voorkeur +/-1% of minder, en zelfs nog meer bij voorkeur +/-0.1% of minder dan en van de geciteerde waarde, voor zoverre zulke variaties van toepassing zijn in de beschreven uitvinding. Hier moet echter wel onder verstaan worden dat de waarde van de grootheid waarbij de term “ongeveer” of “rond” gebruikt wordt, zelf specifiek wordt bekendgemaakt.When “approximately” is used in this document for a measurable quantity, a parameter, a period of time or moment, etc., variations of +/-20% or less, preferably +/-10% or less, more if preferably +/-5% or less, even more preferably +/-1% or less, and even more preferably +/-0.1% or less than and of the quoted value, to the extent that such variations apply in the described invention. However, this must be understood to mean that the value of the quantity for which the term “approximately” or “around” is used is itself specifically disclosed.

De termen “omvatten”, “omvattende”, “bestaan uit”, “bestaande uit”, “voorzien van”, “bevatten”, “bevattende”, “behelzen”, “behelzende”, “inhouden”, “inhoudende” zijn synoniemen en zijn inclusieve of open termen die de aanwezigheid van wat volgt aanduiden, en die de aanwezigheid niet uitsluiten of beletten van andere componenten, kenmerken, elementen, leden, stappen, gekend uit of beschreven in de stand der techniek.The terms “comprise”, “comprising”, “consist of”, “consisting of”, “providing”, “containing”, “containing”, “containing”, “containing”, “containing”, “containing” are synonyms and are inclusive or open terms that indicate the presence of what follows, and do not exclude or preclude the presence of other components, features, elements, members, steps, known or described in the prior art.

De uitdrukking “gewichtsprocent”, “gew.%", “m%"” of “% gew” refereert in dit document naar het relatieve gewicht van een component gebaseerd op het totale gewicht van het volledige product waarnaar verwezen wordt.The expression “% wt”, “% wt”, “m%”” or “% wt” in this document refers to the relative weight of a component based on the total weight of the entire product being referred to.

4 BE2022/56614 BE2022/5661

De “houdbaarheid” of “shelf life” van een product wordt gedefinieerd als de periode waarin een product kan worden opgeslagen zonder dat de kwaliteit onder een bepaald acceptabel minimumniveau daalt. De beperkende factor van de houdbaarheid is, in het kader van de onderhavige uitvinding voor voederadditieven, enzyminactivatie.The “shelf life” of a product is defined as the period during which a product can be stored without its quality falling below a certain acceptable minimum level. The limiting factor of shelf life, in the context of the present invention for feed additives, is enzyme inactivation.

Het citeren van numerieke intervallen door de eindpunten omvat alle gehele getallen, breuken en/of reële getallen tussen de eindpunten, deze eindpunten inbegrepen.Quoting numerical intervals through the endpoints includes all integers, fractions, and/or real numbers between the endpoints, including these endpoints.

In een eerste aspect betreft de uitvinding een voederadditief voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit voeder in vee.In a first aspect, the invention concerns a feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock.

In een voorkeurdragende uitvoeringsvorm omvat het voederadditief een xylanase en een dragermateriaal. Voor de onderhavige doeleinden betekent een xylanase een eiwit of een polypeptide met xylanase-activiteit.In a preferred embodiment, the feed additive comprises a xylanase and a carrier material. For present purposes, a xylanase means a protein or polypeptide having xylanase activity.

In een voorkeursvorm is het xylanase een enzym geclassificeerd als EC 3.2.1.8. De officiële naam is endo-1,4-bèta-xylanase. De systematische naam is 1,4-beta-D- xylaanxylanohydrolase. Andere namen kunnen worden gebruikt, zoals endo-(1-4)-bèta- xylanase, (1-4)-bèta-xylanase, endo-1,4-xylanase, xylanase, bèta-1,4-xylanase, endo- 1,4-xylanase, endo-1,4-bèta-xylanase, endo-1,4-bèta-xylanase, endo-bèta-1,4- xylanase, endo-1,4-bèta-D-xylanase, 1,4-bèta-xylanase, xylanxylanohydrolase, bèta- xylanase, bèta-1,4-xylanase, xylanxylanohydrolase, endo-1,4-bèta-xylanase, bèta-D- xylanase. De gekatalyseerde reactie is de endohydrolyse van 1,4-beta-D- xylosinebindingen in xylanen.In a preferred form the xylanase is an enzyme classified as EC 3.2.1.8. The official name is endo-1,4-beta-xylanase. The systematic name is 1,4-beta-D-xylan xylanohydrolase. Other names may be used, such as endo-(1-4)-beta-xylanase, (1-4)-beta-xylanase, endo-1,4-xylanase, xylanase, beta-1,4-xylanase, endo-1 ,4-xylanase, endo-1,4-beta-xylanase, endo-1,4-beta-xylanase, endo-beta-1,4-xylanase, endo-1,4-beta-D-xylanase, 1,4 -beta-xylanase, xylanxylanohydrolase, beta-xylanase, beta-1,4-xylanase, xylanxylanohydrolase, endo-1,4-beta-xylanase, beta-D-xylanase. The catalyzed reaction is the endohydrolysis of 1,4-beta-D-xylosine bonds in xylans.

Het xylanase is bij voorkeur een endo-1,4-beta-xylanase geschikt voor het afbreken van arabinoxylaan. In een specifieke voorkeursvorm is het xylanase geschikt voor het hydrolyseren van onoplosbare en oplosbare arabinoxylanen.The xylanase is preferably an endo-1,4-beta-xylanase suitable for breaking down arabinoxylan. In a specific preferred form, the xylanase is suitable for hydrolyzing insoluble and soluble arabinoxylans.

In een uitvoeringsvorm omvat het voederadditief het xylanase, in een hoeveelheid van minimaal 0,5 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van het xylanase gebaseerd op het totale gewicht van het voederadditief, bij voorkeur minimaal 1 m%. In een andere of verdere uitvoeringsvorm omvat het voederadditief het xylanase, in een hoeveelheid van maximaal 15 m%, bij voorkeur maximaal 13 m%.In one embodiment, the feed additive comprises the xylanase, in an amount of at least 0.5 m%, expressed in relative weight of the xylanase based on the total weight of the feed additive, preferably at least 1 m%. In another or further embodiment, the feed additive comprises the xylanase, in an amount of a maximum of 15 m%, preferably a maximum of 13 m%.

Het voederadditief omvat in een andere of verdere uitvoeringsvorm het xylanase, in een hoeveelheid gelegen tussen 0,5 en 15 m%, bij voorkeur tussen 1 en 13 m%.The feed additive comprises in another or further embodiment the xylanase, in an amount between 0.5 and 15 m%, preferably between 1 and 13 m%.

> BE2022/5661> BE2022/5661

In een verdere voorkeursvorm omvat het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem.In a further preferred form, the carrier material comprises extruded wheat flour.

Er werd vastgesteld dat het gebruik van geëxtrudeerde tarwebloem een betere enzymstabiliteit geeft aan het xylanase, zowel in de tijd als bij hitte behandeling.It was found that the use of extruded wheat flour provides better enzyme stability to the xylanase, both over time and with heat treatment.

Het voederadditief bezit bij voorkeur een houdbaarheid van 18 tot 24 maanden. Dit is voordelig daar standaard enzympreparaten gekend in de stand der techniek slechts maximaal 12 maanden houdbaarheid bezitten.The feed additive preferably has a shelf life of 18 to 24 months. This is advantageous since standard enzyme preparations known in the prior art only have a maximum shelf life of 12 months.

Bovendien is het tarwebloem voordelig voor het verhogen van de hittestabiliteit van het xylanase. Door de voorafgaandelijke interactie van het xylanase en het dragermateriaal is een duidelijke stabiliteitsverhoging vastgesteld van het xylanse, zowel in tijd naar houdbaarheid als in temperatuursinactivatie bij hittebehandeling. Dit effect kan worden toegeschreven aan de interactie van het xylanase met zijn substraat, waarbij het xylanase zich vastklemt op de tarwebloem, waardoor het xylanase duidelijk stabiliseert.In addition, the wheat flour is beneficial for increasing the heat stability of the xylanase. Due to the preliminary interaction of the xylanase and the carrier material, a clear increase in stability of the xylanse has been observed, both in terms of shelf life and in temperature inactivation during heat treatment. This effect can be attributed to the interaction of the xylanase with its substrate, whereby the xylanase clamps onto the wheat flour, clearly stabilizing the xylanase.

Deze interactie geeft een meerwaarde in het dagelijks gebruik, een betere houdbaarheid (“shelf life”) en een betere hittestabiliteit. Dit zijn belangrijke parameters voor export en voor de verdere verwerking van het xylanase en het voederadditief doorheen de productie van pellet voeder.This interaction provides added value in daily use, better shelf life and better heat stability. These are important parameters for export and for the further processing of the xylanase and the feed additive throughout the production of pellet feed.

Met geëxtrudeerde tarwebloem wordt tarwebloem beoogd die een extrusieproces heeft doorlopen. Met “extrusieproces” of “extrusie” wordt een proces beoogd dat plaatsvindt bij hoge druk, temperatuur en afschuiving (= shear) en waarbij de tarwebloem gelijktijdig gemixt, gekneed en verwarmd wordt.Extruded wheat flour refers to wheat flour that has gone through an extrusion process. “Extrusion process” or “extrusion” refers to a process that takes place at high pressure, temperature and shear (= shear) and in which the wheat flour is simultaneously mixed, kneaded and heated.

Geëxtrudeerde tarwebloem bevat een belangrijke portie oplosbare en onoplosbare arabinoxylanen. Bovendien is geëxtrudeerde tarwebloem microbieel geïnactiveerd. De geëxtrudeerde bloem heeft niet alleen effect op de microbiële stabiliteit van het voederadditief, de extrusie stelt de oplosbare en onoplosbare arabinoxylanen vrij waardoor een betere binding wordt bekomen tussen het arabinoxylanase en het dragermateriaal, hetgeen vertaald wordt in een verhoogde stabiliteit zoals hierboven geschreven.Extruded wheat flour contains a significant portion of soluble and insoluble arabinoxylans. In addition, extruded wheat flour is microbially inactivated. The extruded flour not only has an effect on the microbial stability of the feed additive, the extrusion releases the soluble and insoluble arabinoxylans, resulting in a better bond between the arabinoxylanase and the carrier material, which is translated into increased stability as written above.

In een specifieke voorkeursvorm bezit het voederadditief de geëxtrudeerde tarwebloem en het xylanase, in een massaverhouding van minstens 6,5/1, meer bij voorkeur minstens 6,8/1, nog meer bij voorkeur minstens 7/1.In a specific preferred form, the feed additive has the extruded wheat flour and the xylanase, in a mass ratio of at least 6.5/1, more preferably at least 6.8/1, even more preferably at least 7/1.

6 BE2022/56616 BE2022/5661

Gebleken is dat een massaverhouding van minstens 6,5/1 g geëxtrudeerde tarwebloem op g xylanase nodig is opdat de voornoemde toegevoegde waarde inzake stabiliteit, zowel thermisch als in de tijd, aanwezig zou zijn in het voederadditief.It has been found that a mass ratio of at least 6.5/1 g extruded wheat flour to g xylanase is necessary in order for the aforementioned added value in terms of stability, both thermal and over time, to be present in the feed additive.

In een andere of verdere voorkeursvorm bezit het voederadditief de geëxtrudeerde tarwebloem en het xylanase, in een massaverhouding van maximaal 99/1, meer bij voorkeur maximaal 95/1, nog meer bij voorkeur maximaal 90/1.In another or further preferred form, the feed additive contains the extruded wheat flour and the xylanase, in a mass ratio of a maximum of 99/1, more preferably a maximum of 95/1, even more preferably a maximum of 90/1.

In een uitvoeringsvorm is het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem, d.w.z. dat het dragermateriaal minstens 99 m% geëxtrudeerde tarwebloem omvat.In one embodiment, the carrier material is extruded wheat flour, i.e. the carrier material comprises at least 99 m% extruded wheat flour.

In een alternatieve en voorkeurdragende uitvoeringsvorm omvat het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem en een tweede drager. In een voorkeursvorm omvat het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem en krijt als tweede drager.In an alternative and preferred embodiment, the carrier material comprises extruded wheat flour and a second carrier. In a preferred form, the carrier material comprises extruded wheat flour and chalk as a second carrier.

In een uitvoeringsvorm omvat het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem, in een hoeveelheid zodat het voederadditief een massaverhouding van minstens 6,5/1 g geëxtrudeerde tarwebloem per g xylanase bezit, waarbij het dragermateriaal verder aangevuld is met een tweede drager, bij voorkeur is de tweede drager krijt.In one embodiment, the carrier material comprises extruded wheat flour, in an amount such that the feed additive has a mass ratio of at least 6.5/1 g extruded wheat flour per g xylanase, wherein the carrier material is further supplemented with a second carrier, preferably the second carrier is chalk .

Het dragermateriaal in deze uitvoeringsvorm omvat bijgevolg geëxtrudeerde tarwebloem, in een hoeveelheid nodig om een massaverhouding van minstens 6,5/1 g geëxtrudeerde tarwebloem per g xylanase te verkrijgen in het voederadditief, waarbij het dragermateriaal verder aangevuld is met een tweede drager, bij voorkeur krijt.The carrier material in this embodiment therefore comprises extruded wheat flour, in an amount necessary to obtain a mass ratio of at least 6.5/1 g extruded wheat flour per g xylanase in the feed additive, wherein the carrier material is further supplemented with a second carrier, preferably chalk .

In een uitvoeringsvorm omvat het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem in een hoeveelheid van minimaal 6,5 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van de geëxtrudeerde tarwebloem gebaseerd op het totale gewicht van het dragermateriaal, bij voorkeur minimaal 13 m%.In one embodiment, the carrier material comprises extruded wheat flour in an amount of at least 6.5 m%, expressed in relative weight of the extruded wheat flour based on the total weight of the carrier material, preferably at least 13 m%.

In een verdere uitvoeringsvorm omvat het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem, in een hoeveelheid van maximaal 99 m%, bij voorkeur maximaal 95 m%.In a further embodiment, the carrier material comprises extruded wheat flour, in an amount of a maximum of 99 m%, preferably a maximum of 95 m%.

In een uitvoeringsvorm omvat het voederadditief geëxtrudeerde tarwebloem in een hoeveelheid van minimaal 6,5 m%, bij voorkeur minimaal 13 m%.In one embodiment, the feed additive comprises extruded wheat flour in an amount of at least 6.5 m%, preferably at least 13 m%.

In een verdere uitvoeringsvorm omvat het voederadditief geëxtrudeerde tarwebloem, in een hoeveelheid van maximaal 99 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van een deIn a further embodiment, the feed additive comprises extruded wheat flour, in an amount of a maximum of 99 m%, expressed in relative weight of a

7 BE2022/5661 geëxtrudeerde tarwebloem gebaseerd op het totale gewicht van het voederadditief, bij voorkeur maximaal 95 m%.7 BE2022/5661 extruded wheat flour based on the total weight of the feed additive, preferably a maximum of 95 m%.

Met de term “voeder”, zoals gebruikt in de tekst, worden alle verbindingen, preparaten, mengsels of samenstellingen beoogd die geschikt zijn voor of bedoeld zijn voor consumptie door een dier.The term “feed”, as used in the text, refers to all compounds, preparations, mixtures or compositions suitable for or intended for consumption by an animal.

De term “verhogen van de metaboliseerbare energie” van een diervoeder betekent verhogen van de hoeveelheid energie die beschikbaar is voor groei of voortplanting en voor de ondersteuning van stofwisselingsprocessen zoals arbeid. De voedingswaarde van het voeder wordt daardoor verhoogd en de groeisnelheid en/of de gewichtstoename en/of de voederconversie (d.w.z. het gewicht van het opgenomen voeder in verhouding tot de gewichtstoename) van het dier wordt/worden verbeterd.The term “increasing the metabolizable energy” of an animal feed means increasing the amount of energy available for growth or reproduction and to support metabolic processes such as work. The nutritional value of the feed is thereby increased and the growth rate and/or weight gain and/or feed conversion (i.e. the weight of the feed consumed in relation to the weight gain) of the animal is/are improved.

De term “verbeteren van de voedingswaarde” van een diervoeder betekent verbetering van de beschikbaarheid van de eiwitten, hetgeen leidt tot een verhoogde eiwitextractie, een hogere eiwitopbrengst, en/of een verbeterde eiwitbenutting. De voedingswaarde van het voeder wordt daardoor verhoogd en de groeisnelheid en/of de gewichtstoename en/of de voederconversie (d.w.z. het gewicht van het opgenomen voeder in verhouding tot de gewichtstoename) van het dier wordt/worden verbeterd.The term “improving the nutritional value” of an animal feed means improving the availability of proteins, which leads to increased protein extraction, a higher protein yield, and/or improved protein utilization. The nutritional value of the feed is thereby increased and the growth rate and/or weight gain and/or feed conversion (i.e. the weight of the feed consumed in relation to the weight gain) of the animal is/are improved.

De term vee omvat alle dieren die in de landbouw en visserij om economische redenen gehouden worden, doorgaans als voedselbron. Voorbeelden van dieren zijn niet- herkauwers en herkauwers. Herkauwers omvatten bijvoorbeeld dieren zoals schapen, geiten, paarden en runderen, bijvoorbeeld vleesrunderen, koeien en jonge kalveren. In een bijzondere belichaming is het dier een niet-herkauwend dier. Niet-herkauwende dieren omvatten mono-gastrische dieren, b.v. varkens of zwijnen (met inbegrip van, maar niet beperkt tot, biggen, groeiende varkens, en zeugen); pluimvee zoals kalkoenen, eenden en kippen (met inbegrip van, maar niet beperkt tot, vleeskuikens, leghennen); jonge kalveren; en vissen (met inbegrip van, maar niet beperkt tot zalm, forel, tilapia, meerval en karpers; en schaaldieren (met inbegrip van, maar niet beperkt tot garnalen en steurgarnalen).The term livestock includes all animals kept in agriculture and fisheries for economic reasons, usually as a source of food. Examples of animals are non-ruminants and ruminants. For example, ruminants include animals such as sheep, goats, horses and cattle, for example beef cattle, cows and young calves. In a particular embodiment, the animal is a non-ruminant animal. Non-ruminant animals include monogastric animals, e.g. pigs or boars (including, but not limited to, piglets, growing pigs, and sows); poultry such as turkeys, ducks and chickens (including but not limited to broilers, laying hens); young calves; and fish (including, but not limited to, salmon, trout, tilapia, catfish, and carp; and crustaceans (including, but not limited to shrimp and prawns).

In een uitvoeringsvorm omvat het voederadditief verder water. Het voederadditief omvat in een verdere uitvoeringsvorm water, in een hoeveelheid gelegen tussen 1 en 10 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van het water gebaseerd op het totale gewicht van het voederadditief, bij voorkeur tussen 2 en 10 m%, nog meer bij voorkeur tussenIn one embodiment the feed additive further comprises water. In a further embodiment, the feed additive comprises water, in an amount between 1 and 10 m%, expressed in relative weight of the water based on the total weight of the feed additive, preferably between 2 and 10 m%, even more preferably between

8 BE2022/5661 3 en 9 m%, zelfs nog meer bij voorkeur tussen 4 en 8 m%, en met de meeste voorkeur tussen 5 en 7 m%.8 BE2022/5661 3 and 9 m%, even more preferably between 4 and 8 m%, and most preferably between 5 and 7 m%.

In een voorkeursvorm omvat het voederadditief: - geëxtrudeerde tarwebloem en een xylanase, in een massaverhouding van minstens 6,5/1, - water, in een hoeveelheid gelegen tussen 1 en 10 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van het water gebaseerd op het totale gewicht van het voederadditief, en - krijt.In a preferred form, the feed additive comprises: - extruded wheat flour and a xylanase, in a mass ratio of at least 6.5/1, - water, in an amount between 1 and 10 m%, expressed in relative weight of the water based on the total weight of the feed additive, and - chalk.

In een specifieke voorkeursvorm bevat het voederadditief: - geëxtrudeerde tarwebloem en een xylanase, in een massaverhouding van minstens 6,5/1, - water, in een hoeveelheid gelegen tussen 1 en 10 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van het water gebaseerd op het totale gewicht van het voederadditief, - krijt, en - additieven en/of onzuiverheden, in een hoeveelheid van maximaal 1 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van de totale hoeveelheid additieven en/of onzuiverheden gebaseerd op het totale gewicht van het voederadditief.In a specific preferred form, the feed additive contains: - extruded wheat flour and a xylanase, in a mass ratio of at least 6.5/1, - water, in an amount between 1 and 10 m%, expressed in relative weight of the water based on the total weight of the feed additive, - chalk, and - additives and/or impurities, in an amount not exceeding 1 m%, expressed in relative weight of the total amount of additives and/or impurities based on the total weight of the feed additive.

In een specifieke voorkeursvorm bezit het voederadditief een xylanase-enzymactiviteit gelegen tussen 10 en 1000 IU/g geëxtrudeerde tarwebloem, bij voorkeur gelegen tussen 100 en 750 IU/g geëxtrudeerde tarwebloem.In a specific preferred form, the feed additive has a xylanase enzyme activity between 10 and 1000 IU/g extruded wheat flour, preferably between 100 and 750 IU/g extruded wheat flour.

Gebleken is dat in het bereik gelegen tussen 100 IU/g geëxtrudeerde tarwebloem tot 750 IU/g geëxtrudeerde tarwebloem de toegevoegde waarde inzake stabiliteit, zowel thermisch als in de tijd, aanwezig is.It has been found that the added value in terms of stability, both thermal and over time, is present in the range between 100 IU/g extruded wheat flour to 750 IU/g extruded wheat flour.

In een andere voorkeursvorm bezit het voederadditief een xylanase-enzymactiviteit gelegen tussen 10 en 1000 IU/g voederadditief, bij voorkeur gelegen tussen 50 en 700In another preferred form, the feed additive has a xylanase enzyme activity ranging from 10 to 1000 IU/g feed additive, preferably ranging from 50 to 700.

IU/g voederadditief. “IU” of “U” is de enzymeenheid die enzymatische activiteit weergeeft. 1 U of 1 IU (Hmol/min) wordt gedefinieerd als de hoeveelheid enzym die in staat is om in 1 minuut de omzetting van 1 umol substraat te katalyseren.IU/g feed additive. “IU” or “U” is the enzyme unit that represents enzymatic activity. 1 U or 1 IU (Hmol/min) is defined as the amount of enzyme capable of catalyzing the conversion of 1 umol of substrate in 1 minute.

9 BE2022/56619 BE2022/5661

Xylanase-enzymactiviteit kan worden gemeten onder toepassing van elke bepaling, waarbij een substraat wordt toegepast, dat 1,4-beta-D-xylosidine-endo-bindingen in xylanen omvat.Xylanase enzyme activity can be measured using any assay using a substrate comprising 1,4-beta-D-xylosidine endo bonds in xylans.

Assay-pH en assay-temperatuur moeten worden aangepast aan het betreffende xylanase. Voorbeelden van assay-pH-waarden zijn pH 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 of 11.Assay pH and assay temperature should be adjusted to the xylanase of interest. Examples of assay pH values are pH 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 or 11.

Voorbeelden van testtemperaturen zijn 30, 35, 37, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 of 80°C.Examples of test temperatures are 30, 35, 37, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 or 80°C.

Voor de bepaling van xylanase-activiteit zijn bijvoorbeeld verschillende typen substraten beschikbaar.For example, different types of substrates are available for the determination of xylanase activity.

Metaboliseerbare energie (ME) is de netto-energie die overblijft na uitwerpselen en urineverlies, en is de energie die beschikbaar is voor groei of voortplanting en voor de ondersteuning van stofwisselingsprocessen zoals arbeid (voortbeweging) en ademhaling (thermoregulatie, onderhoudsmetabolisme, HIF). Metaboliseerbare energie kan worden berekend op basis van de NRC-publicatie Nutrient Requirements in Swine, negende herziene editie 1988, Subcommissie varkensvoeding, commissie diervoeding, raad landbouw, nationale onderzoeksraad. National Academy Press, Washington, D.C., blz. 2-6, en de Europese tabel van energiewaarden voor veevoeders van pluimvee,Metabolizable energy (ME) is the net energy remaining after feces and urine loss, and is the energy available for growth or reproduction and to support metabolic processes such as work (locomotion) and respiration (thermoregulation, maintenance metabolism, HIF). Metabolizable energy can be calculated from the NRC publication Nutrient Requirements in Swine, Ninth Revised Edition 1988, Subcommittee on Pig Nutrition, Committee on Animal Nutrition, Council on Agriculture, National Research Council. National Academy Press, Washington, D.C., pp. 2-6, and the European Table of Energy Values for Poultry Feeds,

Spelderholt centrum voor onderzoek en uitbreiding van pluimvee, 7361 DA Beekbergen,Spelderholt center for research and expansion of poultry, 7361 DA Beekbergen,

Nederland. Grafisch bedrijf Ponsen & looijen bv, Wageningen. ISBN 90-71463-12-5.The Netherlands. Graphic company Ponsen & looijen bv, Wageningen. ISBN 90-71463-12-5.

In een andere specifieke uitvoeringsvorm is het xylanase van de uitvinding afgeleid van een bacterieel xylanase.In another specific embodiment, the xylanase of the invention is derived from a bacterial xylanase.

De uitdrukking "xylanase, afgeleid van een bacteriële xylanase", zoals hierboven gebruikt, omvat elk wildtype xylanase, isoleerbaar of geïsoleerd uit de bacterie in kwestie, alsook varianten of fragmenten daarvan die xylanase-activiteit behouden.The term "xylanase derived from a bacterial xylanase", as used above, includes any wild-type xylanase, isolable or isolated from the bacterium in question, as well as variants or fragments thereof that retain xylanase activity.

De term "variant" verwijst naar een xylanase dat een substitutie, deletie en/of insertie van één of meer aminozuren in vergelijking met het gespecificeerde xylanase omvat.The term "variant" refers to a xylanase that involves a substitution, deletion and/or insertion of one or more amino acids compared to the specified xylanase.

De variant kan een natuurlijke variant (allelvariant) zijn of synthetisch bereid zijn. Bij voorkeur zijn aminozuurveranderingen van een ondergeschikte aard, bijvoorbeeld conservatieve aminozuursubstituties die niet significant de vouwing en/of activiteit van het eiwit beïnvloeden; kleine deleties; kleine amino- of carboxyl-eindstandige verlengingen, zoals een amino-eindstandige methioninerest; een klein linkerpeptide; of een kleine verlenging die zuivering vergemakkelijkt door het veranderen van nettoThe variant can be a natural variant (allelic variant) or synthetically prepared. Preferably, amino acid changes are of a minor nature, for example conservative amino acid substitutions that do not significantly affect the folding and/or activity of the protein; small deletions; small amino- or carboxyl-terminal extensions, such as an amino-terminal methionine residue; a small linker peptide; or a small extension that facilitates purification by changing net

10 BE2022/5661 lading of een andere functie, zoals een polyhistidineketen, een antigeen epitoop of een bindingsdomein.10 BE2022/5661 charge or another function, such as a polyhistidine chain, an antigenic epitope or a binding domain.

Een "fragment" van een gespecificeerde xylanase heeft één of meer aminozuren verwijderd uit de amino- en/of carboxylterminus van de aminozuursequentie van de xylanase.A "fragment" of a specified xylanase has one or more amino acids deleted from the amino and/or carboxyl terminus of the amino acid sequence of the xylanase.

In een voorkeursvorm is het xylanase isoleerbaar uit een bacterie. In een verdere voorkeursvorm is het xylanase geïsoleerd uit een bacterie.In a preferred form, the xylanase is isolable from a bacterium. In a further preferred form, the xylanase has been isolated from a bacterium.

In een verdere voorkeursvorm is het xylanase isoleerbaar uit een bacterie uit hetIn a further preferred form, the xylanase can be isolated from a bacterium

Bacillus geslacht, bij voorkeur Bacillus subtilis. In een verdere voorkeursvorm is het xylanase geïsoleerd uit een bacterie uit het Bacillus geslacht, bij voorkeur Bacillus subtilis.Bacillus genus, preferably Bacillus subtilis. In a further preferred form, the xylanase has been isolated from a bacterium from the Bacillus genus, preferably Bacillus subtilis.

In een specifieke uitvoeringsvorm wordt het xylanase volgens de uitvinding geïsoleerd, d.w.z. in wezen vrij van andere polypeptiden met enzymactiviteit, b.v. ten minste ongeveer 20% zuiver, bij voorkeur ten minste ongeveer 40% zuiver, met meer voorkeur ongeveer 60% zuiver, met nog meer voorkeur ongeveer 80% zuiver, met de meeste voorkeur ongeveer 90% zuiver en met nog meer voorkeur ongeveer 95% zuiver, zoals bepaald door SDS-PAGE. Zoals in het vakgebied algemeen bekend is, kan de SDS-gel voor detectiedoeleinden worden gekleurd met Coomassie-kleuring of kleuring met zilver. Er moet voor worden gezorgd dat geen overbelasting heeft plaatsgevonden, bijvoorbeeld door het controleren van de lineariteit door het aanbrengen van verschillende concentraties in verschillende lanen op de gel.In a specific embodiment, the xylanase of the invention is isolated, i.e. essentially free of other polypeptides with enzyme activity, e.g. at least about 20% pure, preferably at least about 40% pure, more preferably about 60% pure, even more preferably about 80% pure, most preferably about 90% pure and even more preferably about 95% pure , as determined by SDS-PAGE. As is well known in the art, the SDS gel can be stained with Coomassie stain or silver stain for detection purposes. Care must be taken to ensure that no overload has occurred, for example by checking linearity by applying different concentrations in different lanes on the gel.

Xylanase met zuiverheden van deze orde van grootte zijn met name te verkrijgen met behulp van recombinante productiemethoden.Xylanase with purities of this order of magnitude can mainly be obtained using recombinant production methods.

Het gebruik van een geïsoleerd en/of gezuiverd xylanase is voordelig. Het is bijvoorbeeld veel gemakkelijker om op juiste wijze enzymen te doseren die in wezen vrij zijn van interfererende of contaminerende andere enzymen. De term juiste dosering verwijst in het bijzonder naar het doel van het verkrijgen van consistente en constante resultaten van diervoeder en het vermogen van het optimaliseren van dosering gebaseerd op het gewenste effect.The use of an isolated and/or purified xylanase is advantageous. For example, it is much easier to properly dose enzymes that are essentially free of interfering or contaminating other enzymes. The term correct dosage specifically refers to the goal of obtaining consistent and constant results from animal feed and the ability of optimizing dosage based on the desired effect.

In specifieke uitvoeringsvormen is het xylanase van de uitvinding voor gebruik in voeder voor (i) niet-herkauwende dieren; bij voorkeur (ii) monogastrische dieren; met meerIn specific embodiments, the xylanase of the invention is for use in feed for (i) non-ruminant animals; preferably (ii) monogastric animals; with more

11 BE2022/5661 voorkeur (iii) varkens, pluimvee, vis en schaaldieren; of met nog meer voorkeur (iv) varkens en pluimvee; of met de meeste voorkeur (v) pluimvee.11 BE2022/5661 preference (iii) pigs, poultry, fish and crustaceans; or even more preferably (iv) pigs and poultry; or most preferably (v) poultry.

Het xylanase volgens de uitvinding kan aan het vee worden gevoerd voor, na of gelijktijdig met het voeder. Dit laatste verdient de voorkeur.The xylanase according to the invention can be fed to livestock before, after or simultaneously with the feed. The latter is preferable.

Het xylanase is aanwezig in een voederadditief dat vervolgens aan voeder voor vee wordt toegevoegd (of in een behandelingsproces wordt gebruikt).The xylanase is present in a feed additive that is then added to livestock feed (or used in a treatment process).

Meer informatie over voeder of diervoedersamenstellingen wordt hieronder gevonden.More information about feed or feed compositions can be found below.

Granen zijn belangrijke bestanddelen van diervoeder. Granen bevatten plantenpolysachariden, waarvan sommige, b.v. zetmeel, kunnen functioneren als een belangrijke voedingscomponent van het dieet. Maar graankorrels bevatten ook verschillende soorten niet-zetmeelpolysachariden (NSP), die niet kunnen worden gebruikt door niet-herkauwende dieren zoals pluimvee en varkens.Grains are important components of animal feed. Grains contain plant polysaccharides, some of which, e.g. starch, can function as an important nutritional component of the diet. But cereal grains also contain several types of non-starch polysaccharides (NSP), which cannot be used by non-ruminant animals such as poultry and pigs.

Het type en de hoeveelheid NSP variëren van graan tot graan. Voorbeelden van NSP zijn xylanen, arabinoxylanen, beta-glucanen en cellulose. Het type en de hoeveelheidThe type and amount of NSP vary from grain to grain. Examples of NSP are xylans, arabinoxylans, beta-glucans and cellulose. The type and quantity

NSP variëren van graan tot graan. De volgende zijn voorbeelden van benaderd NSP- gehalte (%, gew./gew., droge stof) van verschillende graankorrels: gepelde rijst 1%, sorghum 5%, maïs 8%, tarwe 11%, rogge 13%, triticale 16% en gerst 17%.NSP vary from grain to grain. The following are examples of approximate NSP content (%, wt/wt, dry matter) of various cereal grains: husked rice 1%, sorghum 5%, maize 8%, wheat 11%, rye 13%, triticale 16% and barley 17%.

Voor tarwe, triticale en maïs vormen arabinoxylanen meer dan 50% van het NSP, terwijl voor gerst, sorghum, rogge en rijst de arabinoxylanen ongeveer 25-45% van het NSP uitmaken, d.w.z. nog steeds een aanzienlijke hoeveelheid.For wheat, triticale and maize, arabinoxylans make up more than 50% of the NSP, while for barley, sorghum, rye and rice, arabinoxylans make up about 25-45% of the NSP, i.e. still a significant amount.

Voor arabinoxylanen en beta-glucanen wordt een onderscheid gemaakt tussen oplosbare en onoplosbare polysacchariden.For arabinoxylans and beta-glucans, a distinction is made between soluble and insoluble polysaccharides.

De termen oplosbaar en onoplosbaar zijn in het vakgebied bekend en verwijzen naar wateroplosbaarheid/onoplosbaarheid in water, in het bijzonder naar de vorm (oplosbaar/onoplosbaar) van deze polysacchariden a) onder spijsverteringscondities, b) onder darmcondities (in de dunne darm), of bij voorkeur c) na een in vitro procedure (d.w.z. 1,5 uur bij pH 3,0 en 40°C in de aanwezigheid van pepsine, en 4,5 uur bij pH 6,8 en 40°C in de aanwezigheid van pancreatine).The terms soluble and insoluble are known in the art and refer to water solubility/water insolubility, in particular to the form (soluble/insoluble) of these polysaccharides a) under digestive conditions, b) under intestinal conditions (in the small intestine), or preferably c) after an in vitro procedure (i.e. 1.5 hours at pH 3.0 and 40°C in the presence of pepsin, and 4.5 hours at pH 6.8 and 40°C in the presence of pancreatin) .

12 BE2022/566112 BE2022/5661

Onoplosbare arabinoxylanen zijn geassocieerd met de inkapseling van nutriënten zoals zetmeel en eiwit. Deze inkapseling maakt het mogelijk dat waardevolle voedingsstoffen de vertering omzeilen.Insoluble arabinoxylans are associated with the encapsulation of nutrients such as starch and protein. This encapsulation allows valuable nutrients to bypass digestion.

Wanneer onoplosbare arabinoxylanen ook worden gedigereerd of oplosbaar gemaakt, resulteert een verbeterde blootstelling van voedingsstoffen.When insoluble arabinoxylans are also digested or solubilized, improved nutrient exposure results.

De volgende zijn voorbeelden van benaderd oplosbaar arabinoxylaan-gehalte (%, gew./gew., droge stof) van verschillende graankorrels: mais 0,1%, tarwe 1,5%, tarwezemelen 1%, sojameel 0,4%, zonnebloemmeel 0,6%, rijstzemelen 0,2%.The following are examples of approximate soluble arabinoxylan content (%, wt/wt, dry matter) of various cereal grains: corn 0.1%, wheat 1.5%, wheat bran 1%, soybean meal 0.4%, sunflower meal 0 .6%, rice bran 0.2%.

De volgende zijn voorbeelden van benaderd onoplosbaar arabinoxylaan-gehalte (%, gew./gew., droge stof) van verschillende graankorrels: mais 4,5%, tarwe 5,4%, tarwezemelen 18%, sojameel 2,6%, zonnebloemmeel 6,1%, rijstzemelen 7,4%.The following are examples of approximate insoluble arabinoxylan content (%, wt/wt, dry matter) of various cereal grains: corn 4.5%, wheat 5.4%, wheat bran 18%, soybean meal 2.6%, sunflower meal 6 .1%, rice bran 7.4%.

In een voorkeursvorm is het xylanase volgens de uitvinding in staat onoplosbare vezelpolysachariden, zoals NSP, en meer bepaald arabinoxylanen, op te lossen.In a preferred form, the xylanase according to the invention is capable of dissolving insoluble fiber polysaccharides, such as NSP, and more specifically arabinoxylans.

Dienovereenkomstig heeft de uitvinding betrekking op het gebruik van een voederadditief omvattende een xylanase volgens de uitvinding voor het oplosbaar maken van (anders onoplosbare) arabinoxylanen tijdens maag- en darmvertering en het verhogen van de metaboliseerbare energie.Accordingly, the invention relates to the use of a feed additive comprising a xylanase according to the invention for solubilizing (otherwise insoluble) arabinoxylans during gastrointestinal digestion and increasing metabolizable energy.

De term polysaccharide is in de techniek bekend sacchariden met 10 of meer monosacchariden aan te duiden (zie bijvoorbeeld. Voedselchemie, 3e editie, SpringerThe term polysaccharide is known in the art to denote saccharides with 10 or more monosaccharides (see, for example, Food Chemistry, 3rd edition, Springer

Verlag, ISBN 3-540-40817-7, Belitz, Grosch, Schieberle (editors), sectie 4.3.1 op p. 294), met andere woorden, met een polymerisatiegraad (DP) van ten minste 10.Verlag, ISBN 3-540-40817-7, Belitz, Grosch, Schieberle (editors), section 4.3.1 on p. 294), in other words, with a degree of polymerization (DP) of at least 10.

Polysacchariden met een DP van ten minste 10 kunnen worden onderscheiden van oligosacchariden met een DP lager dan 10 zoals in de techniek bekend is, bijvoorbeeld door gelfiltratie op Biogel P-2 in supernatanten verkregen na 80% ethanolprecipitatie (zie "The Uppsala method for rapid analysis of to- tale dieet fiber" door Theander et al, in het bijzonder Fig. 2 op p. 277, in New Developments in Dietary Fiber, Furda en Brine (editors), Plenum Press, 1990, p. 273-281).Polysaccharides with a DP of at least 10 can be distinguished from oligosaccharides with a DP lower than 10 as is known in the art, for example by gel filtration on Biogel P-2 in supernatants obtained after 80% ethanol precipitation (see "The Uppsala method for rapid analysis or total dietary fiber" by Theander et al, especially Fig. 2 on p. 277, in New Developments in Dietary Fiber, Furda and Brine (editors), Plenum Press, 1990, pp. 273-281).

In het bijzonder is het xylanase volgens de uitvinding in staat om de hoeveelheid onoplosbare arabinoxylanen te verminderen in een in vitro model dat de maag- en dunnedarmdigestiestappen nabootst bij monogastrische digestie.In particular, the xylanase of the invention is able to reduce the amount of insoluble arabinoxylans in an in vitro model that mimics the gastric and small intestinal digestion steps in monogastric digestion.

13 BE2022/566113 BE2022/5661

Bij voorkeur is de hoeveelheid achtergebleven (d.w.z. na incubatie met xylanase) onoplosbare arabinoxylanen niet hoger dan 85% (w/w), met meer voorkeur niet hoger dan 84, 83, 82, 81, 80, 79, 78, 77, 76, 75, 74, 73, 72, 71 of 70% (w/w) ten opzichte van een controle zonder toegevoegd xylanase-enzym (100%).Preferably, the amount of residual (i.e. after incubation with xylanase) insoluble arabinoxylans is not higher than 85% (w/w), more preferably not higher than 84, 83, 82, 81, 80, 79, 78, 77, 76, 75, 74, 73, 72, 71 or 70% (w/w) compared to a control without added xylanase enzyme (100%).

Dit komt overeen met een vermindering van de hoeveelheid onoplosbare arabinoxylanen van ten minste 15%, bij voorkeur ten minste 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, of ten minste 30% (w/w) ten opzichte van een controle zonder toegevoegd xylanase-enzym (,0%)This corresponds to a reduction in the amount of insoluble arabinoxylans of at least 15%, preferably at least 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, or at least 30% (w/w) compared to a control without added xylanase enzyme (.0%)

De uitvinding heeft ook betrekking op het gebruik van een voederadditief omvattende een xylanase volgens de uitvinding voor de afbraak van zowel oplosbare als onoplosbare arabinoxylanen tijdens maag- en darmvertering.The invention also relates to the use of a feed additive comprising a xylanase according to the invention for the degradation of both soluble and insoluble arabinoxylans during gastrointestinal digestion.

Behalve het xylanase volgens de uitvinding omvat het voederadditief volgens de uitvinding in een uitvoeringsvorm een fytase, een protease, een amylase of een combinatie hiervan omvat.In addition to the xylanase according to the invention, the feed additive according to the invention comprises in one embodiment a phytase, a protease, an amylase or a combination thereof.

Een fytase is een fosfatase-enzym dat geschikt is voor het katalyseren van de hydrolyse van fytinezuur (een onverteerbare, organische vorm van fosfor die in veel plantenweefsels wordt aangetroffen, vooral in granen en oliehoudende zaden) en een bruikbare vorm van anorganisch fosfor vrij te maken.A phytase is a phosphatase enzyme capable of catalyzing the hydrolysis of phytic acid (an indigestible, organic form of phosphorus found in many plant tissues, especially in grains and oilseeds) and releasing a useful form of inorganic phosphorus .

De term "protease" wordt hierin gedefinieerd als een enzym dat peptidebindingen hydrolyseert. De term "protease" omvat elk enzym dat behoort tot de EC 3.4- enzymgroep (inclusief elk van de dertien subklassen daarvan). Het EC-nummer verwijst naar Enzyme Nomenclature 1992 van NC-IUBMB, Academic Press, San Diego, Californië.The term "protease" is defined herein as an enzyme that hydrolyzes peptide bonds. The term "protease" includes any enzyme belonging to the EC 3.4 enzyme group (including any of its thirteen subclasses). The EC number refers to Enzyme Nomenclature 1992 from NC-IUBMB, Academic Press, San Diego, California.

Amylase is een enzym dat tijdens de spijsvertering zetmeel hydrolyseert. Een amylase is geschikt voor het aangrijpen op de lineair a-1,4-glycoside polymeerbinding tussen de glucosemoleculen van zetmeel.Amylase is an enzyme that hydrolyzes starch during digestion. An amylase is suitable for attacking the linear α-1,4-glycoside polymer bond between the glucose molecules of starch.

Macromineralen worden in een uitvoeringsvorm ook opgenomen in het voederadditief.In one embodiment, macrominerals are also included in the feed additive.

Verder zijn eventuele voederadditiefbestanddelen kleurstoffen, bijvoorbeeld carotenoïden zoals beta-caroteen, astaxanthine en luteïne; aromaverbindingen; stabilisatoren; antimicrobiële peptiden; meervoudig onverzadigde vetzuren; reactieveFurthermore, possible feed additive components are colorants, for example carotenoids such as beta-carotene, astaxanthin and lutein; aroma compounds; stabilizers; antimicrobial peptides; polyunsaturated fatty acids; reactive

14 BE2022/5661 zuurstof genererende species; en/of ten minste één ander enzym gekozen uit een ander xylanase (EC 3.2.1.8); en/of beta-glucanase (EC 3.2.1.4 of EC 3.2.1.6).14 BE2022/5661 oxygen-generating species; and/or at least one other enzyme selected from another xylanase (EC 3.2.1.8); and/or beta-glucanase (EC 3.2.1.4 or EC 3.2.1.6).

Voorbeelden van antimicrobiële peptiden (AMP's) zijn CAP18, Leucocine A, Tritrpticine,Examples of antimicrobial peptides (AMPs) are CAP18, Leucocin A, Tritrpticine,

Protegrine-1, Thanatine, Defensine, Lactoferrine, Lactoferricine, en Ovispirine zoalsProtegrin-1, Thanatin, Defensin, Lactoferrin, Lactoferricin, and Ovispirin such as

Novispirine (Robert Lehrer, 2000), Plectasinen, en Statinen, waaronder de verbindingen en polypeptiden beschreven in WO 03/044049 en WO 03/048148, alsook varianten of fragmenten van het bovenstaande die antimicrobiële activiteit behouden.Novispirin (Robert Lehrer, 2000), Plectasins, and Statins, including the compounds and polypeptides described in WO 03/044049 and WO 03/048148, as well as variants or fragments of the above that retain antimicrobial activity.

Voorbeelden van antifungale polypeptiden (AFP's) zijn de Aspergillus giganteus enExamples of antifungal polypeptides (AFPs) are Aspergillus giganteus and

Aspergillus niger peptiden, alsook varianten en fragmenten daarvan die antifungale activiteit behouden, zoals beschreven in WO 94/01459 en WO 02/090384.Aspergillus niger peptides, as well as variants and fragments thereof that retain antifungal activity, as described in WO 94/01459 and WO 02/090384.

Voorbeelden van meervoudig onverzadigde vetzuren zijn meervoudig onverzadigdeExamples of polyunsaturated fatty acids are polyunsaturated

C18-, C20- en C22-vetzuren, zoals arachidonzuur, docosohexaeenzuur, eicosapentaeenzuur en gamma-linoleïnezuur.C18, C20 and C22 fatty acids, such as arachidonic acid, docosohexaenoic acid, eicosapentaenoic acid and gamma-linoleic acid.

Voorbeelden van reactieve zuurstof genererende verbindingen zijn chemicaliën zoals perboraat, persulfaat of percarbonaat; en enzymen zoals een oxidase, een oxygenase of een syntethase.Examples of reactive oxygen generating compounds are chemicals such as perborate, persulfate or percarbonate; and enzymes such as an oxidase, an oxygenase or a synthetase.

In een voorkeursvorm is het xylanase stabiel bij een temperatuur gelegen tussen 70 en 100°C, bij voorkeur bij een temperatuur gelegen tussen 75 en 90°C, en met de meeste voorkeur bij een temperatuur gelegen tussen 80 en 85°C.In a preferred form, the xylanase is stable at a temperature between 70 and 100°C, preferably at a temperature between 75 and 90°C, and most preferably at a temperature between 80 and 85°C.

In een voorkeursvorm is het xylanase stabiel bij een pH gelegen tussen 4 en 9, bij voorkeur tussen 4,5 en 8,5, en met meeste voorkeur tussen 5 en 8.In a preferred form, the xylanase is stable at a pH between 4 and 9, preferably between 4.5 and 8.5, and most preferably between 5 and 8.

In een voorkeursvorm is het voederadditief geschikt voor het verhogen van de voederconversie met ten minste 1%, meer bij voorkeur minstens 2%.In a preferred form, the feed additive is suitable for increasing the feed conversion by at least 1%, more preferably at least 2%.

Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voedseladditief geschikt is voor het verhogen van de metaboliseerbare energie met tussen 10 en 250 kcal/kg, bij voorkeur tussen 70 en 150 kcal/kg.Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the food additive is suitable for increasing the metabolizable energy by between 10 and 250 kcal/kg, preferably between 70 and 150 kcal/kg.

Het voederadditief kan worden bereid volgens in de stand der techniek bekende methoden en kunnen de vorm hebben van een vloeibare of een droge samenstelling.The feed additive can be prepared according to methods known in the art and can be in the form of a liquid or a dry composition.

Het xylanase kan bijvoorbeeld de vorm hebben van een granulaat of eenThe xylanase can, for example, be in the form of a granule or a

15 BE2022/5661 microgranulaat. Het in de samenstelling op te nemen xylanase kan worden gestabiliseerd volgens in de kunst bekende methoden.15 BE2022/5661 microgranulate. The xylanase to be included in the composition can be stabilized according to methods known in the art.

In een voorkeursvorm wordt het voederadditief toegevoegd aan een voeder zodat een xylanase-enzymactiviteit van tussen 1 en 100 IU/kg voeder bereikt wordt, bij voorkeur tussen 5 en 15 IU/kg voeder.In a preferred form, the feed additive is added to a feed so that a xylanase enzyme activity of between 1 and 100 IU/kg feed is achieved, preferably between 5 and 15 IU/kg feed.

In een tweede aspect betreft de uitvinding een werkwijze voor het vervaardigen van een voederadditief volgens het eerste aspect.In a second aspect, the invention concerns a method for manufacturing a feed additive according to the first aspect.

In een voorkeurdragende uitvoeringsvorm omvat de werkwijze het aanbrengen van een xylanase op een dragermateriaal.In a preferred embodiment, the method comprises applying a xylanase to a carrier material.

In een uitvoeringsvorm kan het xylanase in vloeibare toestand aangebracht worden op het dragermateriaal middels verstuiven. In een andere uitvoeringsvorm kan het xylanase aangebracht worden op het dragermateriaal in poedervorm middels een menging.In one embodiment, the xylanase can be applied in liquid state to the carrier material by spraying. In another embodiment, the xylanase can be applied to the carrier material in powder form by means of mixing.

Het xylanase is bij voorkeur een endo-1,4-beta xylanase, geschikt voor het afbreken van arabinoxylaan, en het dragermateriaal omvat bij voorkeur geëxtrudeerde tarwebloem.The xylanase is preferably an endo-1,4-beta xylanase, suitable for breaking down arabinoxylan, and the carrier material preferably comprises extruded wheat flour.

In een voorkeursvorm omvat het voederadditief de geëxtrudeerde tarwebloem en het xylanase in een massaverhouding van minstens 6,5/1.In a preferred form, the feed additive comprises the extruded wheat flour and the xylanase in a mass ratio of at least 6.5/1.

In een andere of verdere voorkeursvorm wordt bij de werkwijze een xylanase- enzymactiviteit gelegen tussen 10 en 1000 IU/g geëxtrudeerde tarwebloem bereikt in het voederadditief, meer bij voorkeur tussen 100 en 750 IU/g geëxtrudeerde tarwebloem.In another or further preferred form, the method achieves a xylanase enzyme activity of between 10 and 1000 IU/g extruded wheat flour in the feed additive, more preferably between 100 and 750 IU/g extruded wheat flour.

In een derde aspect betreft de uitvinding een voedersamenstelling voor vee.In a third aspect, the invention concerns a feed composition for livestock.

In een voorkeurdragende uitvoeringsvorm omvat de voedersamenstelling een voederadditief volgens het eerste aspect en een voeder.In a preferred embodiment, the feed composition comprises a feed additive according to the first aspect and a feed.

In een voorkeursvorm omvat het voeder oplosbare en onoplosbare arabinoxylaan, in een massaverhouding van minimaal 0,01, bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,011, meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,012, nogIn a preferred form, the feed comprises soluble and insoluble arabinoxylan, in a mass ratio of at least 0.01, preferably in a mass ratio of at least 0.011, more preferably in a mass ratio of at least 0.012, yet

16 BE2022/5661 meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,013, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,014, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,015, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,016, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,017, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,018, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,019, meest bij voorkeur in een massaverhouding van minimaal 0,02.16 BE2022/5661 more preferably in a mass ratio of at least 0.013, even more preferably in a mass ratio of at least 0.014, even more preferably in a mass ratio of at least 0.015, even more preferably in a mass ratio of at least 0.016, even more preferably in a mass ratio of at least 0.017, even more preferably in a mass ratio of at least 0.018, even more preferably in a mass ratio of at least 0.019, most preferably in a mass ratio of at least 0.02.

In een andere of verdere voorkeursvorm omvat het voeder oplosbare en onoplosbare arabinoxylaan, in een massaverhouding van maximaal 0,5, bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,48, meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,46, nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,44, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,42, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,40, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,38, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,36, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,34, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,32, meest bij voorkeur in een massaverhouding van maximaal 0,3.In another or further preferred form, the feed comprises soluble and insoluble arabinoxylan, in a mass ratio of maximum 0.5, preferably in a mass ratio of maximum 0.48, more preferably in a mass ratio of maximum 0.46, even more preferably in a mass ratio of up to 0.44, even more preferably in a mass ratio of up to 0.42, even more preferably in a mass ratio of up to 0.40, even more preferably in a mass ratio of up to 0.38 , even more preferably in a mass ratio of up to 0.36, even more preferably in a mass ratio of up to 0.34, even more preferably in a mass ratio of up to 0.32, most preferably in a mass ratio of maximum 0.3.

In een andere of verdere voorkeursvorm omvat het voeder oplosbare en onoplosbare arabinoxylaan, in een massaverhouding gelegen tussen 0,01 en 0,5, bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,011 en 0,48, meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,012 en 0,46, nog meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,013 en 0,44, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,014 en 0,42, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,015 en 0,40, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,016 en 0,38, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,017 en 0,36, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,018 en 0,34, zelfs nog meer bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,019 en 0,32, meest bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,02 en 0,3.In another or further preferred form, the feed comprises soluble and insoluble arabinoxylan, in a mass ratio between 0.01 and 0.5, preferably in a mass ratio between 0.011 and 0.48, more preferably in a mass ratio between 0.012 and 0.46, even more preferably in a mass ratio between 0.013 and 0.44, even more preferably in a mass ratio between 0.014 and 0.42, even more preferably in a mass ratio between 0.015 and 0.40 , even more preferably in a mass ratio between 0.016 and 0.38, even more preferably in a mass ratio between 0.017 and 0.36, even more preferably in a mass ratio between 0.018 and 0.34, even even more preferably in a mass ratio between 0.019 and 0.32, most preferably in a mass ratio between 0.02 and 0.3.

In een verder of andere uitvoeringsvorm bezit de voedersamenstelling een xylanase- enzymactiviteit gelegen tussen 10 en 1000 IU/g geëxtrudeerde tarwebloem, bij voorkeur gelegen tussen 100 en 750 IU/G geëxtrudeerde tarwebloem.In a further or different embodiment, the feed composition has a xylanase enzyme activity ranging between 10 and 1000 IU/g extruded wheat flour, preferably ranging between 100 and 750 IU/G extruded wheat flour.

17 BE2022/566117 BE2022/5661

Het voeder volgens de uitvinding heeft een gehalte aan ruw eiwit van 50-800 g/kg, bij voorkeur 500-600 g/kg, met meer voorkeur 60-500 g/kg, met nog meer voorkeur 70- 500 en met de meeste voorkeur 80-400 g/kg.The feed according to the invention has a crude protein content of 50-800 g/kg, preferably 500-600 g/kg, more preferably 60-500 g/kg, even more preferably 70-500 and most preferably 80-400g/kg.

In aanvullende voorkeursuitvoeringsvormen is het gehalte aan ruw eiwit 150-800, 160- 800, 170-800, 180-800, 190-800 of 200-800 - allemaal in g/kg (droog materiaal).In additional preferred embodiments, the crude protein content is 150-800, 160-800, 170-800, 180-800, 190-800 or 200-800 - all in g/kg (dry material).

Verder, of als alternatief (voor het hierboven aangegeven gehalte aan ruw eiwit), heeft het voeder van de uitvinding een gehalte aan calcium van 0,1-200 g/kg; en/of een gehalte aan beschikbare fosfor van 0,1-200 g/kg; en/of een gehalte aan methionine van 0,1-100 g/kg; en/of een gehalte aan methionine plus cysteïne van 0,1-150 g/kg; en/of een gehalte aan lysine van 0,5-50 g/kg.Furthermore, or alternatively (to the crude protein content indicated above), the feed of the invention has a calcium content of 0.1-200 g/kg; and/or an available phosphorus content of 0.1-200 g/kg; and/or a methionine content of 0.1-100 g/kg; and/or a methionine plus cysteine content of 0.1-150 g/kg; and/or a lysine content of 0.5-50 g/kg.

Ruw eiwit wordt berekend als stikstof (N) vermenigvuldigd met een factor 6,25, d.w.z.Crude protein is calculated as nitrogen (N) multiplied by a factor of 6.25, i.e.

Ruw eiwit (g/kg) = N (g/kg) x 6,25. Het stikstofgehalte wordt bepaald volgens deCrude protein (g/kg) = N (g/kg) x 6.25. The nitrogen content is determined according to

Kjeldahl-methode (A.O.A.C. 1984, Official Methods of Analysis, 14e druk, Association ofKjeldahl method (A.O.A.C. 1984, Official Methods of Analysis, 14th edition, Association of

Official Analytical Chemists, Washington DC).Official Analytical Chemists, Washington DC).

In een vierde aspect betreft de uitvinding een gebruik van een voederadditief volgens het eerste aspect voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit een voeder in vee.In a fourth aspect, the invention concerns a use of a feed additive according to the first aspect for increasing the metabolizable energy from a feed in livestock.

In een voorkeurdragende uitvoeringsvorm wordt bij dit gebruik het voederadditief gedoseerd of toegevoegd aan het voeder zodat een xylanase-enzymactiviteit gelegen tussen 1 en 100 IU/kg voeder bereikt wordt, bij voorkeur tussen 5 en 15 IU/kg voeder.In a preferred embodiment, in this use the feed additive is dosed or added to the feed so that a xylanase enzyme activity of between 1 and 100 IU/kg feed is achieved, preferably between 5 and 15 IU/kg feed.

In een andere uitvoeringsvorm wordt het voederadditief gedoseerd aan het voeder in een hoeveelheid van 10-500 ppm, uitgedrukt in g voederadditief per ton voeder, bij voorkeur in een hoeveelheid van 10-100 ppm.In another embodiment, the feed additive is dosed to the feed in an amount of 10-500 ppm, expressed in g feed additive per ton of feed, preferably in an amount of 10-100 ppm.

In een voorkeursvorm wordt de metaboliseerbare energie in het voeder verhoogd met tussen 10 en 250 kcal/kg, bij voorkeur tussen 70 en 150 kcal/kg.In a preferred form, the metabolizable energy in the feed is increased by between 10 and 250 kcal/kg, preferably between 70 and 150 kcal/kg.

In wat volgt, wordt de uitvinding beschreven a.d.h.v. niet-limiterende voorbeelden die de uitvinding illustreren, en die niet bedoeld zijn of geïnterpreteerd mogen worden om de omvang van de uitvinding te limiteren.In what follows, the invention is described by means of: non-limiting examples that illustrate the invention and are not intended or should be construed to limit the scope of the invention.

18 BE2022/566118 BE2022/5661

VOORBEELDENEXAMPLES

Voorbeelden 1-3Examples 1-3

Voorbeelden 1, 2 en 3 betreffen voederadditieven volgens de huidige uitvinding. De voederadditieven werden onderworpen aan een houdbaarheidstest, waarbij na 24 maanden opslag bij 25°C de residuele enzymactiviteit hoger dan 90% was.Examples 1, 2 and 3 concern feed additives according to the present invention. The feed additives were subjected to a shelf life test, where after 24 months of storage at 25°C the residual enzyme activity was higher than 90%.

Geëxtrudeerde | Xylanase | GT/ xylanase Water Xylanase- tarwebloem (m%) (m/m) (m%) enzymactiviteit (GT) (m%) (IU/g GT) wije |? [6 |€ [ wijs fe #7 |€ [a wije Je Jee je |æExtruded | Xylanase | GT/ xylanase Water Xylanase- wheat flour (m%) (m/m) (m%) enzyme activity (GT) (m%) (IU/g GT) wee |? [6 |€ [ wise fe #7 |€ [a wije Je Jee je |æ

Er is gebleken dat in het bereik van 6,8 g geëxtrudeerde tarwebloem/ g xylanase tot 46 g geëxtrudeerde tarwebloem/ g xylanase de toegevoegde waarde inzake stabiliteit, zowel thermisch als in de tijd, steeds aanwezig is. Een massaverhouding van minstens 6,5/1 g geëxtrudeerde tarwebloem op g xylanase is nodig om de toegevoegde waarde te verkrijgen.It has been shown that in the range of 6.8 g extruded wheat flour/g xylanase to 46 g extruded wheat flour/g xylanase, the added value in terms of stability, both thermal and over time, is always present. A mass ratio of at least 6.5/1 g extruded wheat flour to g xylanase is required to obtain the added value.

Voorbeeld 4 en vergelijkend voorbeeld 5Example 4 and comparative example 5

Een voederadditief volgens de huidige uitvinding werd toegevoegd aan een voeder in een hoeveelheid van 10 IU/kg voeder (voorbeeld 4) en vergeleken met een voederadditief uit de stand der techniek (vergelijkend voorbeeld 5). Beide voeders werden gepelletiseerd, waarbij bleek dat de xylanase recovery (1) groter bleef dan 80% (amper verlies aan enzymstabiliteit) bij pelletisering bij 80-89°C, terwijl het vergelijkend voorbeeld bij 85°C reeds onder 70% gezakt is, zoals te zien is in figuur 1.A feed additive according to the present invention was added to a feed in an amount of 10 IU/kg feed (example 4) and compared with a prior art feed additive (comparative example 5). Both feeds were pelleted, showing that the xylanase recovery (1) remained greater than 80% (barely any loss of enzyme stability) when pelleted at 80-89°C, while the comparative example at 85°C has already dropped below 70%, as shown can be seen in figure 1.

Voorbeelden 6-8Examples 6-8

Voorbeelden 6, 7 en 8 betreffen experimentele gegevens over de gemiddelde verbetering in voederconversie, de gemiddelde verbetering in groei/ eiproductie, en de gemiddelde verhoging in metaboliseerbare energie in leghennen (vb. 6), vleeskuikens die gevoederd worden met een hoofzakelijk maïs omvattend voeder (vb. 7), en vleeskuikens die gevoederd worden met een hoofzakelijk tarwe omvattend voeder (vb. 8).Examples 6, 7 and 8 concern experimental data on the average improvement in feed conversion, the average improvement in growth/egg production, and the average increase in metabolizable energy in laying hens (ex. 6), broilers fed a feed mainly containing corn ( example 7), and broiler chickens fed with a feed mainly containing wheat (ex. 8).

Een voederadditief volgens de huidige uitvinding werd verstuift in het voeder, gevoederd aan het vee, en vervolgens werden de gemiddelde verbetering in voederconversie, deA feed additive according to the present invention was sprayed into the feed, fed to livestock, and then the average improvement in feed conversion, the

19 BE2022/5661 gemiddelde verbetering in groei/ eiproductie, en de gemiddelde verhoging in metaboliseerbare energie bepaald.19 BE2022/5661 average improvement in growth/egg production, and the average increase in metabolizable energy determined.

Leghennen | Vleeskuikens Vleeskuikens (vb.6) (maïs gebaseerd | (tarwe gebaseerd voeder) voeder) (vb.7) (vb. 8)Laying hens | Broiler Chickens Broiler (ex.6) (corn based | (wheat based feed) feed) (ex.7) (ex. 8)

Gemiddelde verbetering in 3,0% 2,5% 3,9% ee LR TEAverage improvement in 3.0% 2.5% 3.9% ee LR TE

Gemiddelde verbetering in 2,0% 2,6% 3,2% re ee TTAverage improvement in 2.0% 2.6% 3.2% re ee TT

Gemiddelde verhoging in | 74 kcal/kg 109 kcal/kg 133 kcal/kg eee |] UTSAverage increase in | 74 kcal/kg 109 kcal/kg 133 kcal/kg eee |] UTS

Claims (15)

20 BE2022/5661 CONCLUSIES20 BE2022/5661 CONCLUSIONS 1. Een voederadditief voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit voeder in vee, waarbij het voederadditief een xylanase en een dragermateriaal omvat, waarbij het xylanase een endo-1,4-beta xylanase is, geschikt voor het afbreken van arabinoxylaan, waarbij het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem omvat, en waarbij het voederadditief de geëxtrudeerde tarwebloem en het xylanase omvat in een massaverhouding van minstens 6,5/1.1. A feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock, wherein the feed additive comprises a xylanase and a carrier material, wherein the xylanase is an endo-1,4-beta xylanase, suitable for breaking down arabinoxylan, wherein the carrier material extruded wheat flour, and wherein the feed additive comprises the extruded wheat flour and the xylanase in a mass ratio of at least 6.5/1. 2. Voederadditief volgens conclusie 1, waarbij het voederadditief een xylanase- enzymactiviteit bezit, gelegen tussen 10 en 1000 IU/ g geëxtrudeerde tarwebloem, bij voorkeur tussen 100 en 750 IU/ g geëxtrudeerde tarwebloem.2. Feed additive according to claim 1, wherein the feed additive has a xylanase enzyme activity ranging between 10 and 1000 IU/g extruded wheat flour, preferably between 100 and 750 IU/g extruded wheat flour. 3. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voederadditief het xylanase omvat, in een hoeveelheid gelegen tussen 1 en 15 m%, uitgedrukt in relatieve gewicht van het xylanase gebaseerd op het totale gewicht van het voederadditief, bij voorkeur tussen 1 en 13 m%.3. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the feed additive comprises the xylanase, in an amount between 1 and 15 m%, expressed in relative weight of the xylanase based on the total weight of the feed additive, preferably between 1 and 13 m% %. 4. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het dragermateriaal verder krijt omvat.4. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the carrier material further comprises chalk. 5. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voederadditief omvat: - geëxtrudeerde tarwebloem en een xylanase, in een massaverhouding van minstens 6,5/1, - water, in een hoeveelheid gelegen tussen 1 en 10 gewichtspercent, uitgedrukt in gram water op gram totale hoeveelheid voederadditief, en - krijt.5. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the feed additive comprises: - extruded wheat flour and a xylanase, in a mass ratio of at least 6.5/1, - water, in an amount between 1 and 10 percent by weight, expressed in grams of water on grams of total amount of feed additive, and - chalk. 6. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voederadditief toegevoegd wordt aan het voeder zodat een xylanase- enzymactiviteit gelegen tussen 1 en 100 IU/kg voeder bereikt wordt, bij voorkeur tussen 5 en 15 IU/kg voeder.6. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the feed additive is added to the feed so that a xylanase enzyme activity of between 1 and 100 IU/kg feed is achieved, preferably between 5 and 15 IU/kg feed. 7. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voeder oplosbare en onoplosbare arabinoxylaan omvat, in een massaverhouding gelegen tussen 0,01 en 0,5, bij voorkeur in een massaverhouding gelegen tussen 0,02 en 0,3.7. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the feed comprises soluble and insoluble arabinoxylan, in a mass ratio between 0.01 and 0.5, preferably in a mass ratio between 0.02 and 0.3. 21 BE2022/566121 BE2022/5661 8. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het xylanase isoleerbaar is uit Bacillus subtilis.8. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the xylanase can be isolated from Bacillus subtilis. 9. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voederadditief een houdbaarheid gelegen tussen 18 en 24 maanden omvat.9. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the feed additive has a shelf life of between 18 and 24 months. 10. Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voederadditief geschikt is voor het verhogen van de metaboliseerbare energie met tussen 10 en 250 kcal/kg, bij voorkeur tussen 70 en 150 kcal/kg.10. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the feed additive is suitable for increasing the metabolizable energy by between 10 and 250 kcal/kg, preferably between 70 and 150 kcal/kg. 11.Voederadditief volgens een der voorgaande conclusies, waarbij het voederadditief verder een fytase, een protease, een amylase of een combinatie hiervan omvat.11. Feed additive according to any one of the preceding claims, wherein the feed additive further comprises a phytase, a protease, an amylase or a combination thereof. 12. Een werkwijze voor het vervaardigen van een voederadditief volgens een van de conclusies 1-11 omvattende het aanbrengen van een xylanase op een dragermateriaal, bijvoorbeeld door te verstuiven, waarbij het xylanase een endo- 1,4-beta xylanase is, geschikt voor het afbreken van arabinoxylaan, waarbij het dragermateriaal geëxtrudeerde tarwebloem omvat, en waarbij het voederadditief de geëxtrudeerde tarwebloem en het xylanase omvat in een massaverhouding van minstens 6,5/1.12. A method for manufacturing a feed additive according to any one of claims 1-11, comprising applying a xylanase to a carrier material, for example by spraying, wherein the xylanase is an endo-1,4-beta xylanase, suitable for breaking down arabinoxylan, wherein the carrier material comprises extruded wheat flour, and wherein the feed additive comprises the extruded wheat flour and the xylanase in a mass ratio of at least 6.5/1. 13.Een voedersamenstelling voor vee omvattende een voederadditief volgens een van de conclusies 1-11 en een voeder, waarbij het voeder oplosbare en onoplosbare arabinoxylaan omvat, in een verhouding gelegen tussen 0,01 en 0,5, en waarbij de voedersamenstelling geëxtrudeerde tarwebloem en een xylanase omvat in een massaverhouding van minstens 6,5/1.13. A feed composition for livestock comprising a feed additive according to any one of claims 1-11 and a feed, wherein the feed comprises soluble and insoluble arabinoxylan, in a ratio between 0.01 and 0.5, and wherein the feed composition contains extruded wheat flour and a xylanase in a mass ratio of at least 6.5/1. 14. Een gebruik van een voederadditief volgens een van de conclusies 1-11, voor het verhogen van de metaboliseerbare energie uit een voeder in vee, waarbij dit voederadditief gedoseerd wordt aan het voeder zodat een xylanase- enzymactiviteit gelegen tussen 1 en 100 IU/kg voeder bereikt wordt.A use of a feed additive according to any one of claims 1-11, for increasing the metabolizable energy from a feed in livestock, wherein this feed additive is dosed to the feed so that a xylanase enzyme activity is between 1 and 100 IU/kg feed is reached. 15. Gebruik volgens conclusie 14, waarbij de metaboliseerbare energie verhoogd wordt met tussen 10 en 250 kcal/kg, bij voorkeur tussen 70 en 150 kcal/kg.Use according to claim 14, wherein the metabolizable energy is increased by between 10 and 250 kcal/kg, preferably between 70 and 150 kcal/kg.
BE20225661A 2022-08-23 2022-08-23 Feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock BE1030801B1 (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BE20225661A BE1030801B1 (en) 2022-08-23 2022-08-23 Feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock
NL2035658A NL2035658B1 (en) 2022-08-23 2023-08-23 FEED ADDITIVE FOR INCREASING METABOLIZABLE ENERGY FROM FEED IN LIVESTOCK

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BE20225661A BE1030801B1 (en) 2022-08-23 2022-08-23 Feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BE1030801A1 BE1030801A1 (en) 2024-03-18
BE1030801B1 true BE1030801B1 (en) 2024-03-26

Family

ID=83149177

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BE20225661A BE1030801B1 (en) 2022-08-23 2022-08-23 Feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock

Country Status (2)

Country Link
BE (1) BE1030801B1 (en)
NL (1) NL2035658B1 (en)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998018345A1 (en) * 1996-10-29 1998-05-07 Finnfeeds International Limited Use of an enzyme for promoting pigment uptake from a feed
WO2006083240A2 (en) * 2003-12-19 2006-08-10 Syngenta Participations Ag Microbially expressed xylanases and their use as feed additives and other uses
WO2007044968A2 (en) * 2005-10-12 2007-04-19 Genencor International, Inc. Stable, durable granules with active agents
US20140234279A1 (en) * 2011-02-18 2014-08-21 Dupont Nutrition Biosciences Aps Feed additive composition
WO2020182602A1 (en) * 2019-03-11 2020-09-17 Novozymes A/S Fibrous maize-based animal feed with gh30 glucuronoxylan hydrolase

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK91192D0 (en) 1992-07-10 1992-07-10 Novo Nordisk As PROTEIN
EP1389217B1 (en) 2001-05-04 2008-05-21 Novozymes A/S Antimicrobial polypeptide
US7972814B2 (en) 2001-11-20 2011-07-05 Novozymes Adenivro Biotech A/S Antimicrobial polypeptides from Pseudoplectania nigrella
JP2005513042A (en) 2001-12-03 2005-05-12 ノボザイムス アクティーゼルスカブ Statin-like compounds
ES2559059T3 (en) 2006-09-29 2016-02-10 Novozymes A/S Xylanases for animal feed

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998018345A1 (en) * 1996-10-29 1998-05-07 Finnfeeds International Limited Use of an enzyme for promoting pigment uptake from a feed
WO2006083240A2 (en) * 2003-12-19 2006-08-10 Syngenta Participations Ag Microbially expressed xylanases and their use as feed additives and other uses
WO2007044968A2 (en) * 2005-10-12 2007-04-19 Genencor International, Inc. Stable, durable granules with active agents
US20140234279A1 (en) * 2011-02-18 2014-08-21 Dupont Nutrition Biosciences Aps Feed additive composition
WO2020182602A1 (en) * 2019-03-11 2020-09-17 Novozymes A/S Fibrous maize-based animal feed with gh30 glucuronoxylan hydrolase

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KIM J C ET AL: "The digestible energy value of wheat for pigs, with special reference to the post-weaned animal [Review]", ANIMAL FEED SCIENCE AND TECHNOLOGY, ELSEVIER, AMSTERDAM, NL, vol. 122, no. 3-4, 1 September 2005 (2005-09-01), pages 257 - 287, XP027871418, ISSN: 0377-8401, [retrieved on 20050901] *

Also Published As

Publication number Publication date
NL2035658B1 (en) 2024-03-04
BE1030801A1 (en) 2024-03-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10959942B2 (en) Animal feed compositions and uses thereof
US20200305465A1 (en) Animal feed compositions comprising muramidase and uses thereof
CN104507329A (en) Method for the degradation of keratin and use of the keratin hydrolysate produced
WO2019121930A1 (en) Animal feed compositions and uses thereof
US20230180791A1 (en) Animal feed compositions
US12439939B2 (en) Animal feed compositions and uses thereof
BE1030801B1 (en) Feed additive for increasing the metabolizable energy from feed in livestock
BR112021004501A2 (en) composition of animal feed and its use
US20210292725A1 (en) Animal feed compositions and uses thereof
EP4448740A1 (en) Protease animal feed formulation
US20240122209A1 (en) Animal feed compositions and uses thereof
US20230276828A1 (en) Animal feed compositions
WO2022179757A1 (en) Method of improving carbohydrate digestibility by a carbohydratase in an animal feed by employing serine protease
BE1030865B1 (en) FEED ADDITIVE FOR IMPROVING INTESTINAL HEALTH AND/OR DIGESTIBILITY OF FEED IN LIVESTOCK
US20220054600A1 (en) Animal feed compositions and uses thereof
EP3852545A1 (en) Animal feed compositions and uses thereof
CN116615110A (en) Protease animal feed formulations
EP4297583A1 (en) Method of improving carbohydrate digestibility by a carbohydratase in an animal feed by employing serine protease
WO2021078839A1 (en) Animal feed composition

Legal Events

Date Code Title Description
FG Patent granted

Effective date: 20240326