AR100339A1 - Reducción de nicotina para la conversión de nornicotina en plantas - Google Patents

Abstract

La presente se refiere a una célula de planta de tabaco no natural o transgénica mutante que comprende: (i) un polinucleótido que comprende, consiste o consiste esencialmente en una secuencia que codifica una nicotina N-demetilasa funcional y que tiene al menos el 95% de identidad de secuencia con la SEQ ID Nº 2; (ii) un polipéptido codificado por el polinucleótido establecido en (i); (iii) un polipéptido que comprende, consiste o consiste esencialmente en una secuencia que codifica una nicotina N-demetilasa y que tiene al menos el 95% de identidad de secuencia con la SEQ ID Nº 3; o (iv) un constructo, vector o vector de expresión que comprende el polinucleótido aislado establecido en (i), y en donde la expresión o la actividad de dicha nicotina demetilasa se reduce en comparación con una célula de planta de tabaco de control en donde la expresión o la actividad de dicha nicotina demetilasa no fue reducida. Reivindicación 10: Una planta mutante, no natural o transgénica o componente o parte de ella que comprende la célula de planta de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9. Reivindicación 13: Un método de preparación de una planta de tabaco con reducidos niveles de nornicotina y/o NNN, que comprende las etapas de: (a) proporcionar una planta que comprende (i) un polinucleótido que comprende, consiste o consiste esencialmente en una secuencia que codifica una nicotina N-demetilasa funcional y que tiene al menos el 95% de identidad de secuencia con SEQ ID Nº 2; (b) insertar una o varias mutaciones en dicho polinucleótido de dicha planta de tabaco para crear una planta de tabaco mutante; (c) opcionalmente curar el material de la planta de tabaco; y (d) medir el nivel de nornicotina y/o NNN en la planta de tabaco mutante, en donde una reducción en el nivel de nornicotina y/o NNN en la planta de tabaco mutante en comparación con una planta de tabaco de control es indicativa de que el nivel de nornicotina y/o NNN en dicha planta de tabaco mutante se redujo. Reivindicación 17: Un método para producir material de planta curado, con preferencia hojas curadas o flores con reducidos niveles de nornicotina en comparación con el material de planta de control o reducidos niveles de al menos NNN dentro en comparación con el material de planta de control o una de sus combinaciones que comprende las etapas de: (a) proporcionar una planta de acuerdo con la reivindicación 10 o el material de planta de acuerdo con la reivindicación 11; (b) opcionalmente cosechar el material de planta de allí; y (c) curar el material de planta durante un período tal que los niveles de al menos nornicotina o NNN sean inferiores que el material de planta curada de control. Reivindicación 20: Un polipéptido aislado que comprende una secuencia seleccionada de: (i) la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 3; (ii) una secuencia de aminoácidos que tiene al menos el 95% de identidad de secuencia con SEQ ID Nº 3; (iii) un fragmento de una secuencia de aminoácidos de acuerdo con (ii), en donde dicho fragmento comprende al menos 15 aminoácidos contiguos de SEQ ID Nº 3, en donde dichos 15 aminoácidos se superponen con al menos una de las secuencias establecidas en los residuos 1 - 15, 330 - 345, 420 - 450 y 480 - 510 de SEQ ID Nº 3.