NL8200451A - 1-benzyl-4-4-(2-pyrimidinylamino)benzyl-2,3-dioxopiperazinederivaten, zouten daarvan en werkwijzen voor het bereiden van deze derivaten en van farmaceutische preparaten die ze bevatten. - Google Patents

Description

* 1-benzyl-4-/-^-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine-derivaten, zouten daarvan en werkwijzen voor het bereiden van deze derivaten en van farmaceutische preparaten die ze bevatten.

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe 1-benzy 2-pyrimi dinylamino }benzyl7-2,3-dioxopiperazine- derivaten en zouten daarvan en op werkwijzen voor het bereiden van deze derivaten en van farmaceutische preparaten met een 5 carcinostatische werking die ze bevatten.

De verbindingen volgens de uitvinding hebben op zichzelf een uitstekende carcinostatische werking, een geringe toxiciteit en zijn bruikbaar als geneesmiddelen en eveneens als tussenprodukten.

10 Een doelstelling van deze uitvinding is het verschaffen van nieuwe 1-benzyl-^-/_i+-(2-pyrimidinylamino)benzyl7- 2.3- dioxopiperaz inederivat en en zouten daarvan.

Een ander doel van deze uitvinding is het verschaffen van nieuwe 1-benzyl-k-/“H-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-15 2,3-dioxopiperazinederivaten met een carcinostatische werking en een geringe toxiciteit, alsmede de zouten daarvan.

Weer een ander doel. van deze uitvinding is het verschaffen van nieuwe 1-benzyl-^-/-^-(2-pyrimidinylamino)benzyl7- 2.3- dioxopiperazinederivaten en de zouten daarvan die oraal 20 goed geabsorbeerd worden.

Nog een ander doel van deze uitvinding is het verschaffen van een werkwijze voor het bereiden van nieuwe 1-benzyl-^-/""k-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine-derivaten, alsmede de zouten daarvan.

25 Tenslotte is nog een ander doel van deze uitvinding het verschaffen van een careinostatisch middel dat nieuwe 1 -benzyl-h-/-!*-{2-pyrimidinylamino )benzyl7-2,3-dioxopiperaz inederi vat en, en/of de zouten daarvan, bevat.

Andere doelstellingen en voordelen van deze 30 uitvinding zullen worden toegelicht in de hierna volgende beschrijving.

8200451 . i - 2 -

Volgens de uitvinding worden nieuwe 1-benzyl-H-/"*U-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazinederivaten met formule 1, of een zout daarvan, verschaft, waarin R een al of niet gesubstitueerde, alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, 5 alkadienyl-, aryl- of acylgroep, Rg een waterstofatoom of een alkylgroep en X een zuurstof- of zwavelatoom voorstellen.

In deze formule 1 is een alkylgroep, zoals een methyl-, ethyl-, propyl-, butyl-, pentyl-, hexyl-, heptyl-of octylgroep, of een overeenkomstige groep, een cycloalkylgroep, 10 zoals een cyclopentyl- of cyclohexylgroep, of een overeenkomstige groep, een aralkylgroep, zoals een benzyl- of fenethylgroep, of een overeenkomstige groep, een alkenylgroep, zoals een vinyl- of allylgroep, of een overeenkomstige groep, een alkadienylgroep, zoals een 1,3-butadienyl-, 2,U-hexadienyl-15 of geranylgroep, of een overeenkomstige groep, een arylgroep, zoals een fenyl- of nafthylgroep, of een overeenkomstige groep, of een acylgroep, zoals een acetyl-, propionyl-, butyryl-, pivaloyl-, stearoyl-, benzoyl-, furoyl-, thenoyl-, pyridyl-carbonyl- of cyclohexylcarbonylgroep, of een overeenkomstige 20 groep.

De hiervoor genoemde substituent R^ kan gesubstitueerd zijn door tenminste één substituent gekozen uit de groep bestaande uit halogeenatomen, zoals fluor, chloor, broom, jodium enz,, de hydroxylgroep,, carboxylgroep, alkoxycarbonylgroepen, 25 zoals de methoxycarbonyl- en ethoxycarbonylgroep, enz., aralkoxycarbonylgroepen, zoals benzyloxycarbonyl enz., aryloxy-carbonylgroepen, zoals fenoxycarbonyl enz., alkylgroepen, zoals methyl, ethyl, propyl, isopropyl, outyl enz., alkenylgroepen, zoals vinyl, allyl enz., aralkylgroepen, zoals benzyl, fenethyl 30 enz., cycloalkylgroepen, zoals cyclopentyl, cyclohexyl enz., de cyaangroep, mercaptogroep, alkylthiogroepen, zoals methylthio, ethylthio enz., de nitrogroep, oxogroep, acylaminogroepen, zoals aceetamido enz., alkoxygroepen, zoals methoxy, ethoxy enz., aralkoxygroepen, zoals benzyloxy enz., acylgroepen, zoals 35 formyl, acetyl, propionyl, butyryl, benzoyl enz., de aminogroep, 8200451 * - 3 - alkylaminogroepen, zoals methylamino, ethylaminos hydroxyethyl-amino, propylamino enz., dialkylaminogroepen, zoals dimethyl-amino, diethylamino, bis(hydroxyethyl)amino, dipropylamino enz., arylaminogroepen, zoals anilino enz., aralkylaminogroepen, 5 zoals benzylamino, fenethylamino enz., heterocyclische groepen zoals pyridyl, pyrimidinyl, imidazolyl, thiazolyl, pyrazinyl, oxazolyl, furyl, thienyl, pyrrolyl, pyridazinyl enz. en heterocyclische aminogroepen, zoals pyridylamino, pyrimidinylamino enz., en overeenkomstige verbindingen.

10 stelt een waterstofatoom of een alkylgroep, zoals methyl, ethyl, propyl, butyl, octyl enz., voor.

Voor de bereiding van zouten van de verbindingen met formule 1 kan elk zuur of base worden gebruikt, zolang de verkregen zouten maar farmaceutisch aanvaardbaar zijn, hoewel 15 anorganische en organische zouten,zoals met waterstofchloride, waterstofbromide, zwavelzuur, fosforzuur, p-tolueensulfonzuur enz. en anorganische en organische zouten zoals zouten met kalium, natrium, calcium, ammonium, pyridine, collidine, triethylamine, triethanolamine, procaine enz., bijzonder 20 worden aanbevolen. Bydraten van de verbindingen met formule 1 en hydraten van zouten van de verbindingen met formule 1 vallen eveneens onder deze uitvinding.

De carcinostatische werking en acute toxiciteit van representatieve verbindingen volgens de uitvinding worden 25 hierna toegelicht.

a) De minimale concentratie met een remmende werking (MIC) tegen HeLa S3 cellen en Ehrlich-ceELen.

Toegepast werd een microplaat van 8x12 houders, waarbij aan elke kamer 0,1 ml van een cultuurvloeistof 30 (Eagles MEM + 20 % kalverenserumf/toegevoegd, die een te onderzoeken geneesmiddel en 0,1 ml van een cultuurvloeistof waarin cellen waren gesuspendeerd (2x10^ cel/ml) bevatte.

De concentratie van bette onderzoeken geneesmiddel bedroeg ten hoogste 100yUg/ ml en tenminste 0,05 ^ig/ml, met een reeks 35 tweevoudige verdunningen (12 stappen). De cultuurvloeistof die 8200451 V ♦ - It - het te onderzoeken geneesmiddel bevatte werd steriel gefiltreerd. De cellen werden k dagen gekweekt, waarna de cellen van de cultuurvloeistof werden afgescheiden, tweemalen werden gewassen met een oplossing van Hank's zout, daarna 5 min. werden gefixeerd 5 met 95 #’s ethanol en vervolgens 15 min. werden gekleurd met een

Giemsa-oplossing. De remming van de celgroei werd met het blote oog beoordeeld. De verkregen resultaten zijn opgenomen in tabel A.

Tabel A

no. Verbinding met formule MIC (fs/™1)

HeLa Ehrlich 1 k 0,39 0,39 2 5 1,56 1,56 3 6 0,39 0,39 15 U 7 1,56 3,13 5 8 3,13 3,13 6 9 0,39 0,78 7 10 3,13 6,25 8 11 12,5 12,5 20 b) Effekt op L-1210 leukemie.

L-1210 cellen (1x10^ celleij/kop) werden intraveneus geënt op muizen van de BDF^-stam (mannetjes, 7 weken oud, waarbij elke groep uit 5 muizen bestond) en na 2b uren werden de te onderzoeken geneesmiddelen eenmaal per dag gedurende 25 7 achtereenvolgende dagen oraal toegediend. Het effekt hiervan werd beoordeeld aan de hand van het gemiddelde aantal overlevings-dagen.

De te onderzoeken geneesmiddelen werden toegepast in de vorm van een oplossing of suspensie in een zout-30 oplossing of een 0,3 #'s carboxymethylcellulose bevattende zoutoplossing, De verhouding T/C werd met de volgende vergelijking berekend: 8200451 - 5 - het gemiddelde aantal overlevingsdagen in de groep waaraan het te onderzoeken geneesmiddel T/C = was toegediend_ x 100($) het gemiddelde aantal overlevingsdagen in de controlegroep

De verkregen resultaten zijn opgenomen in tabel B. Tabel B

verbinding no. dosis (mg/kg/dag) T/C (%) 1 50 135 100 162 2 110 120 220 237 k 110 177 220 289 5 65 140 130 177 T 120 118 2k0 177 c) acute toxiciteit.

Elk van de te onderzoeken geneesmiddelen werd oraal eenmaal toegediend aan muizen van de ICR-stam (mannetjes, 7 weken oud, waarbij elke groep bestond uit 5 muizen), waarna de muizen 7 dagen werden geabsorbeerd.

De te onderzoeken geneesmiddelen werden toegepast in de vorm van een oplossing of suspensie in een zoutoplossing of een zoutoplossing die 0,3 % carboxymethylcellulose bevatte,

De verkregen resultaten zijn opgenomen in tabel C.

8200451 » - 6 -

Tabel C

verbinding no. LD^Q (mg/kg) 1 >2000 2 >2000 5 b >2000 5 >2000 7 >2000

Zoals uit de hiervoor vermelde resultaten blijkt, bezitten de verbindingen volgens de uitvinding zulke uitstekende 10 eigenschappen,aangezien ze goed door een levend organisme worden geabsorbeerd indien ze oraal worden toegediend, uitstekende carcinostatische eigenschappen bezitten en een lage toxiciteit hebben. Daardoor zijn ze zeer bruikbaar als carcinostatische middelen.

15 De verbindingen volgens de uitvinding met formule 1 en de zouten daarvan kunnen worden verkregen volgens de hierna beschreven werkwijzen (l) en (2).

Werkwijze (1).

Deze werkwijze omvat de reaktie van 1-benzyl-lt-20 /-1*-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine of een reaktief derivaat daarvan met een verbinding met formule 2, waarin een al of niet gesubstitueerde alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl-, aryl- of acylgroep, Rg een waterstofatoom of een alkylgroep, X een zuurstofatoom of een 25 zwavelatoom en Y een reaktieve groep voorstellen.

Werkwijze (2).

Deze werkwijze omvat de reaktie van een 1-benzyl-i+-/"U-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazinederivaat met formule 3, waarin Rg eenzelfde betekenis heeft als hiervoor 30 gegeven en R^ een al of niet gesubstitueerde alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl- of arylgroep voorstelt, met een verbinding met formule H-X-R^» waarin X een hiervoor aangegeven betekenis heeft en R^ een al of niet gesubstitueerde 8200451 - 7 - alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl- of aryl-groep voorstelt.

Bij elk van deze werkwijzen hebben , Rg en X dezelfde betekenissen als hiervoor gedefinieerd en omvatten 5 en R^ in de formules 3 en H-X-R^ dezelfde alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl- en arylgroepen vermeld voor R^, terwijl R^ en R^ door dezelfde substituenten gesubstitueerd kunnen zijn als vermeld voor R^, Als reaktieve groep voor Y in formule 2 kunnen halogeenatomen, zoals chloor, broom, jodium 10 enz., arylsulfonyloxy groepen zoals fenylsulfonyloxy, p-tolueen-sulfonyloxy enz. en alkylsulfonyloxygroepen, zoals methaan-sulfonyloxy, etheensulfonyloxy enz. worden genoemd.

Bij elk van de hiervoor vermelde bereidingsmethoden omvatten de reaktieve derivaten van 1 -benzyl-W"4-15 (2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine verbindingen gevormd door binding van een alkalimetaalatoom, zoals lithium, natrium, kalium enz., een organische silylgroep zoals (CH^Si-, (CH^Si^ , (CH^rtCH^CHZsi-, (CH^Si-, · CH^iCH^O^Si-, (03^)2(0^0)81-, enz. of een organische fosfor-20 groep, zoals (CH-OjgF-, (CglLOjgP-, r0ss Γ°Ν P-, P-, / P- enz., aan de >NH groep.

Lo' CH^O^ Vo''

Deze reaktieve derivaten kunnen gemakkelijk volgens een gebruikelijke methode worden gesynthetiseerd en kunnen zonder afscheiding ^ aan de daarna volgende reaktie worden onderworpen.

Het 1 -benzyl-^-/-!*- (2-pyrimidinylamino )benzyl7- 2,3-dioxopiperazine en de verbindingen weergegeven door formule 3 toegepast bij de hiervoor beschreven bereidingsmethoden kunnen gemakkelijk volgens het op het formuleblad 30 weergegeven reaktie schema en volgens werkwijze (1) worden verkregen. In dit reaktieschema geeft DMF: N,3-dimethylformamide en AcNH-: CH^CONH- aan en hebben de substituenten R^, Rg, R^ en Y de hiervoor gedefinieerde betekenissen.

Hierna worden uitvoeringsvormen van elke 35 bereidingsmethode gegeven.

8200451 * * - 8 -

Werkwijze (1) wordt uitgevoerd in de aan- of afwezigheid van een oplosmiddel dat inert is bij de reaktie. Voorbeelden van bij de reaktie toegepaste oplosmiddelen zijn: ethers, zoals tetrahydrofuran, diettylether, dimethoxyethyl-5 ether, dimethoxyethaan, dioxaan enz., gehalogeneerde koolwaterstof fen, zoals methyleenchloride, chloroform, 1,2-dichloorethaan enz., amiden, zoals dimetïylformamide, dimethylaceetamide enz,, nitriHen, zoals acetonitril, propionitril enz,, aromatische koolwaterstoffen, zoals benzeen, tolueen, xyleen enz., nitroalkanen, zoals nitro-10 methaan, nitroethaan enz., tertiaire aminen, zoals pyridine, chinoline enz., sulfoxyden, zoals dimethylsulfoxyde enz., en fosforamiden, zoals hexamethylfosforzuuramide enz. De hiervoor vermelde oplosmiddelen kunnen eveneens een mengsel van twee of meer oplosmiddelen zijn.

15 De reaktietemperatuur en reaktietijd zijn niet kritisch, hoewel de reaktie bij voorkeur wordt uitgevoerd bij een temperatuur tussen 0 en 150°C, en in dat geval zal de reaktie gewoonlijk tussen 5 min. en 12 uren zijn voltooid.

De verbindingen weergegeven door formule 2 20 worden toegepast in een hoeveelheid die tenminste equimolair is aan, bij voorkeur ligt tussen 1,0 en 1,2 mol per mol, 1-benzyl-U-/”h-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine.

Werkwijze (2) wordt eveneens uitgevoerd in de aan- of afwezigheid van een oplosmiddel dat inert is bij de 25 reaktie. Voorbeelden van bij de reaktie toegepaste oplosmiddelen zijn: ethers, zoals tetrahydrofuran, diethyletber, dioxan, dimethoxyethaan enz., aromatische koolwaterstoffen, zoals benzeen, tolueen, xyleen enz., nitroalkanen, zoals nitromethaan, nitroethaan enz., nitrilen, zoals acetonitril, propionitril enz., 30 amiden, zoals dimethylformamide, dimethylaceetamide enz., gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals methyleenchloride, chloroform enz. en vetzuren, zoals azijnzuur, propionzuur enz.

Deze oplosmiddelen kunnen eveneens een mengsel van 2 of meer oplosmiddelen zijn. De reaktietemperatuur en de reaktietijd 35 zijn weer niet kritisch, hoewel de reaktie bij voorkeur wordt 8200451 - 9 - uitgevoerd bij een temperatuur tussen 0 en 150°C, in welk geval de reaktie gewoonlijk tussen 30 min. en 2b uren is voltooid.

De verbindingen weergegeven door formule H-X-R^ worden gewoonlijk toegepast in een hoeveelheid die 5 tenminste equimolair is aan de verbinding weergegeven door formule 3, in die zin dat de verbinding met formule H-X-R^ eveneens als oplosmiddel kan fungeren. Bovendien kunnen als katalysator protonische zuren, zoals waterstofchloride, waterstof-bromide, zwavelzuur enz., en Lewis-zuren, zoals zinkchloride, 10 aluminiumchLoride, tinchloride, titaantetrachloride, borium-trifluoride enz., worden gebruikt.

Nadat de hiervoor beschreven werkwijzen (1) of (2) op de hiervoor geschetste wijze is uitgevoerd, kan de verbinding met formule 1,volgens een gebruikelijke methode 15 uit het reaktiemengsel worden afgescheiden en volgens methoden, zoals kolomchromatografie, herkristalliseren enz., worden gezuiverd. Een zout van de verbinding met formule 1 kan worden verkregen door de reaktie volgens een gebruikelijke methode onder toepassing van een anorganisch zuur, zoals waterstof-20 chloride, waterstofbromide, zwavelzuur, fosforzuur enz., een organisch zuur, zoals p-tolueensulfonzuur, azijnzuur enz., een anorganische base, zoals kaliumlydroxyde, natriumhydroxyde, kaliumcarbonaat, natriumcarbonaat, natriumwaterstofcarbonaat, kaliumwaterstofcarbonaat en ammonia enz. of een organische base 25 zoals pyridine, collidine, triethylamine, triethanolamine, procaine enz., uit te voeren en daarna het reaktieprodukt af te scheiden en te zuiveren. Bij de hiervoor beschreven bereidingsmethoden kunnen, indien de verbindingen met formules 2, 3 en H-X-R^ een aktieve groep, zoals amino, hydroxyl, 30 carboxyl enz., aan de niet-reaktieve kant bezitten, verbindingen met een beschermende groep worden verkregen door de aktieve groep met een bekende beschermende groep te beschermen en daarna de werkwijze volgens de uitvinding uit te voeren. Een verbinding met een vrije aktieve groep kan verkregen worden door 35 de verbinding met een beschermende groep volgens een bekende 8200451 -10- methode te behandelen teneinde de beschermende groep af te splitsen.

De verbindingen volgens de uitvinding, die op de hiervoor beschreven wijze kunnen worden verkregen, zijn zeer 5 bruikbaar als carcinostatisch middel. Geschikt worden farma ceutisch aanvaardbare toevoegsels aan de verbindingen toegevoegd en het verkregen mengsel kan tot verschillende geneesmiddelvormen worden verwerkt, zoals orale preparaten, bijvoorbeeld tabletten, siropen, capsules, poeders, korrels enz., en injekteerbare 10 preparaten, bijvoorbeeld voor intramusculaire injektie, intra veneuze injektie, druppelinfusie enz. en daarna als carcinostatisch middel warden toegediend. De wijze van toedienen, de dosering en het aantal toedieningen worden gekozen en zijn afhankelijk van de conditie van de patient, hoewel aan orale 15 toediening de voorkeur wordt gegeven. In het algemeen zal bij volwassenen de verbinding 1 tot 3 malen daags in een totale dosering van 1-^000 mg/kg daags worden toegediend.

Voorbeeld I

(1) Men suspendeerde in 23 ml N,N-dimethyl-20 formamide (hierna verder aangeduid als DMF) 0,88 g natrium- hydride (zuiverheid 60 %) en voegde aan de verkregen suspensie H,5 g 1-benzyl-2,3-dioxopiperazine toe, waarna het verkregen mengsel gedurende 10 min. bij 80°C werd geroerd en daarna tot 65°C werd afgekoeld. Hierin druppelde men 15 ml van een 25 DMF-oplossing die ^,0 g H-acetylaminobenzylchloride bevatte en liet bet verkregen mengsel 30 min. reagerentij 60-65°C. Na voltooiing van de reaktie destilleerde men het oplosmiddel onder verminderde druk af en voegde aan het residu 20 ml ethanol toe, waarna de neergeslagen kristallen werden afgefiltreerd. De aldus 30 verkregen kristallen werden toegevoegd aan 60 ml 2N-zoutzuur en de verkregen oplossing werd gedurende een uur onder terugvloeiing verhit. Na voltooiing van de reaktie werd het reaktiemengsel afgekoeld tot kamertemperatuur en hieraan voegde men U,0 g natriumwaterstofcarbonaat toe, waarna de neergeslagen kristallen 35 werden afgefiltreerd, gedroogd en daarna werden herkristalliseerd 8200451 - 11 - uit etlylacetaat. Aldus verkreeg men 4,9 g (90 %) 1-(4-amino-benzyl)-4-benzyl-2,3-dioxopiperazine met een smeltpunt van ( 193-194°C.

IR (KBr) cm”1: υΜ 3450, 3350 5 uc=0 1660

Elementairanalyse (voor C^gH^N^Og) • berekend C 69,88 Jf; H 6,19 %i N 13,58 % gevonden C 69,82 %\ H 6,26 %\ N 13,52 % NMR (dg-DMSO) ppm waarden: 10 3,34 (4H, s, piperazinering CHg x 2), 4,38 (2H, s, 0¾ x 1), 4,53 (2H, s,CH2 x 1), 4,99 (2H, s, UHg x 1), 6,50 (2H, d, J=9, 0Hz, benzeenring H x 2), 6,93 (2H, d, J“9,0 Hz, benzeenring H x 2), 7,22 (5H, s, benzeenring H x 5) 15 (2) Men suspendeerde 1,3 g 1-(4-aminobenzyl)-4- * benzyl-2,3-dioxopiperazine in 3,9 ml ettyleenglycol en voegde onder roeren en bij 140°C 0,57 g 2-chloorpyrimidine aan de verkregen suspensie toe. Daarna liet men het verkregen mengsel 30 min. bij 140-150°C reageren. Na afloop van de reaktie 20 koelde men het reaktiemengsel af tot 100°C en voegde 2,42 ml water aan het reaktiemengsel toe. Nadat men het verkregen tmengsel had laten staan voegde men weer 17 ml water aan toe en roerde het verkregen mengsel, waarna men de neergeslagen kristallen affiltreerde, droogde en daarna berkristalliseerde 25 uit ethanol. Aldus verkreeg men 0,9 g (opbrengst 75 %) 1-benzyl-4-/~4-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine met een smeltpunt van 175-176°C.

IR (KBr) cm"1: υ^Η 3320 υο=ο 1^° 30 Elementairanalyse voor ^22^21^5^2^ berekend: C 68,20 %\ H 5,46 %\ N 18,08 % gevonden: C 68,24 H 5,38 %\ N 17,89 % NMR (dg-DMSO) ppm waarden: 3,42 (4h, bs, piperazinering CI^ x 2), 35 ' 4,51 (2H, s, x 1), 4,54 (2H, s, 0¾ x 1), 8200451 - 12 - 6,75 (1H, t, J=l+,5Hz, pyrimidinering Hx 1), 7,15 (2H, d, J=8,5 Hz, benzeenring Hx 2), 7,25 (5H, s, benzeenring H x 5), 7,70 (2H, d, J=8,5Hz, benzeenring H x 2), 5 8,1+0 (2Η, d, J=l+ ,5 Hz, pyrimidinering H x 2), 9,68 (1 Η, s, NH x 1) (3) Men druppelde onder roeren en gedurende 30 min. aan een mengsel van 372 mg natriumhydride (zuiverheid 50 %) en 30 ml DMF een oplossing van 3 g 1-benzyl-l+-/ 1+-(2-10 pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine in 20 ml DMF toe, waarna men het verkregen mengsel een uur liet reageren bij een : temperatuur tussen 60 en 70°C, Na voltooiing van de reaktie druppelde men gedurende 10 min. en bij dezelfde temperatuur hieraan 1,3 g pivaloyloxymethylchloride toe. Na het toedruppelen 15 liet men het verkregen mengsel 30 min. reageren bij een temperatuur tussen 70 en 80°C. Na voltooiing van de reaktie 'destilleerde men het oplosmiddel onder verminderde druk af en extraheerde het aldus verkregen residu met 100 ml chloroform.

Men waste de chloroformlaag met 30 ml water en daarna 1+0 ml 20 van een verzadigde oplossing van natriumchloride in water en droogde boven watervrij magnesiumsulfaat, waarna men het oplosmiddel onder verminderde druk afdestilleerde. Ket aldus verkregen residu werd gezuiverd door kolomchromatografie (Wakogel C-200, elutie met chloroform) en daarna uit een 25 mengsel van ethylacetaat en diisopropylether herkristalliseerd, waardoor men 2,5 g (opbrengst 61+,3 %) 1-Denzyl-l+-{l+-/“N-pivaloyl-oxymethyl-N-('2-pyrimdinyl)aaino7benzyi\ -2,3-dioxopiperazine met een smeltpunt van 11+1+ - 11+6°C verkreeg.

IR (KBr) cm"1: i>c=Q 1725, 1670 30 Elementairanalyse (voor CggH^^N^O^) berekend’. C 67,05 Η 6,23 %\ N 13,96 % gevonden: C 66,99 %\ H 6,23 %\ N 13,85 % NMR (CDClg) ppm waarden: 1,17 (9H, s, CH^ x 3);, 3,38 (1+H, s, piperazine-35 ring CH2 x 2), U,65 (^H, s, CH2 x 2), 5,95 8200451 - 13 - (2H, s, CH2 x 1), 6,68 (1H, t, J=5,0Hz, pyrimidinering H x 1), 7,23 (^H, s, benzeen-ring H x U), 7>25 (5H, s, benzeenring H x 5), 3,33 (2H, d, J=5,0Hz, pyrimidinering H x 2)

5 Voorbeeld II

Men loste in 30 ml ethylacetaat 1 g 1-benzyl- i+-[U-/-N-piyaloyloxymethyl-I'i- (2-pyrimidinyl) -amino7benzyl] -2,3- dioxopiperazine op en voegde hieraan 1 g glycolzuur en 0p2 ml van een N-oplossing van waterstofchloride in ethanol toe, 10 waarna men het verkregen mengsel 3 uren onder roeren liet reageren. Na afloop van de reaktie destilleerde men het oplos- \ middel onder verminderde druk af en extraheerde het aldus verkregen residu met 100 ml methyleenchloride. Men waste de methyleenchloridelaag met 30 ml water en daarna 30 ml van een 15 verzadigde oplossing van natriumchloride in water en droogde boven watervrije magnesiumsulfaat, waarna men het oplosmiddel onder verminderde druk afdestilleerde. Ket op deze wijze verkregen residu werd gezuiverd door kolomehromatografie (Wakogel C-200;, elutie met een mengsel van chloroform en 20 ethanol) en herkristalliseerd uit een mengsel van ethylacetaat en diisopropylether. Aldus verkreeg men 0,5 g (opbrengst 52,8 %) 1-benzyl-^-{k-/~N-carboxymethoxymethyl-N-£-pyrimidinyl)amino7 benzyl]-2,3-dioxopiperazine met een smeltpunt van 85-90°C.

IR (KBr) cm"1: i>c_0 1735, 1665 25 Eïementair analyse (voor C^H^N^Ot-) berekend: C 63,15 %\ H 5,30 %·, N 14,73 % * gevonden:* C 63,22;#;H 5,38 N 1^,62 % NMR (CDCl^) ppm waarden: 3,^0 (UH, s, piperazinering CHg x 2), U,17 30 (2H, s, CH2 x 1), M3 (^H, s, CH2 x 2), 5,25 (2H, s, CH2 X 1), 6,75 (1H, t, J=5,0 Hz, pyrimidinering H x 1), 7,22 (5H, s, benzeenring H x 5), 7,28 (kïï, s, benzeenring H x k)> 8,3^ (2H, d, J=5,0Hz, pyrimidinering H x 2), 35 9,82 (1H, bs, carbonzuur H x 1) 8200451 - 11* -

Voorbeeld III

* Men loste 1,0 g 1-benzyl-^-[i+-/“N-pivaloyloxy- methyl-N-(2-pyrimidinyl)-amino7benzyl^ -2,3-dioxopiperazine op in 10 ml ethylmercaptan en voegde hieraan 0,01 ml van een 5 5,7 N oplossing van waterstofchloride in dioxan toe, waarna men het verkregen mengsel 3 uren bij kamertemperatuur liet reageren. Na voltooiing van de reaktie destilleerde men het oplosmiddel onder verminderde druk af en voegde 50 ml diiso-propylether aan de aldus verkregen kristallen toe, waarna men 10 deze kristallen affiltreerde. De aldus verkregen kristallen werden herkristalliseerd uit isopropylalkohol, waardoor men 0,8 g (opbrengst 86,8 l) wit kristallijn 1-benzyl-H-ethylthiomethyl-N-(2-pyrimidinyl)amino7-benzyl^ -2,3-dioxopiperazine met een smeltpunt van 11*-U°C verkreeg, 15 IR (KBr) cm”1: 1670

Elementair analyse (voor C„-H--Nc0r,S1) 25 5 2 1 berekend: C 65,05 ï; H 5,89 N 15,17 % gevonden: C 65,02 %\ H 5,8U %\ IÏ 15,12 % NMR (CDCL^) ppm waarden: 20 1,1¾ (3H, t, CH3 x 1), 2,53 (2H, *, CHg x 1), 3,39 (1*H, s, piperazinering CHg x 2), i*,o2 (Uh, s, CH2 x 2), 5,15 (2H, s, 0¾ x 1), 6,57 (1Hf t, pyrimidinering H x 1), 7,23 - 7,27 (9H, m, benzeenring H x 9), 8,25 (2H, d, pyrimidine 25 ring H x 2)

Op dezelfde wijze als hiervoor beschreven, werd de volgende verbinding verkregen: 1-benzyl-U-{U-/“N-fenylthiomethyl-N-(2-pyrimidinyl)amino7benzyl|-2,3-dioxopiperazine 30 smeltpunt: 6U - 65°C (herkristalliseerd uit isopropylalkohol) IR (KBr) cm"1: uc_0 1670 elementairanalyse (voor ^9^27^5^2^1) berekend: C 68,3b %\ H 5,3b N 13,7¾ % C 68,36 %, H 5,32 %·, N 13,71 % 35 NMR (CDCl^) ppm waarden: 8200451 - 15 - 3,33 (i*H, s, piperazinering CH2 x 2), U,61 (2H, s, CH2 x 1), U,65 (2H, s, CH2 x 1), 5,50 (2H, s, CH2 x 1), 6,60 (1H, t, pyrimidinering H x 1), 6,98 - 7,28 (1UH, m, benzeenring H x 1^), 8,30 5 (2H, d, pyrimidinering H x 2)

Voorbeeld IV

Men loste in 1*0 ml DMF 3,0 g 1 -benzyl-1*-/-1t-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3-dioxopiperazine op en voegde hieraan 0,372 g natriumhydride (zuiverheid 52 %) toe, waarna 10 men het verkregen mengsel 30 min. onder roeren liet reageren bij 80°C. Daarna koelde men het reaktiemengsel af en voegde hieraan 0,72 ml chloormethylmethylsulfide toe, waarna men het verkregen mengsel 2 uren liet reageren bij een temperatuur tussen 50 en 60°C. üa voltooiing van de reaktie destileerde 15 men het reaktiemengsel onder verminderde druk en extraheerde het aldus verkregen residu met chloroform en vaste vervolgens met water. De aldus verkregen oplossing werd boven watervrij magnesiumsulfaat gedroogd en het oplosmiddel werd door destilleren onder verminderde druk verwijderd. De aldus verkregen kristallen 20 werden herkri sballiseerd uit isopropylalkohol, waardoor men 3,0 g (opbrengst 86,1*5 %) wit kristallijn 1-benzyl-1*-[i*-/~N-methylthiomethyl-N-(2-pyrimidinyl)amino7-benzyl} -2,3-dioxopiperazine meteen smeltpunt van 15ö°C verkreeg.

IR (KBr) cm-1: 1670 25 elementairanalyse (voor berekend C 61*,1*1 %\ H 5,63 N 15,65 % gevonden C 61*,38 %\ H 5,61 %\ N 15,60 % NMR (CDCl^) ppm waarden: 2,10 (3H, s, CH^ x 1), 3,1*0 (1*H, s, piperazine-30 ring CHg x 2), 1+,63 (1*H, s, CHg x 2), 5,15 (2H, s, CHg x 1), 6,58 (1H, t,. pyrimidinering H x 1), 7,10 - 7,35 (9H, m, benzeenring H x 9), 8,26 (2H, d, pyrimidinering H x 2)

Op dezelfde wijze als hiervoor beschreven heeft 35 men de volgende verbinding bereid : 8200451 - 16 - 1-benzyl-^-{U-/~N-isopropylthiometbyl-N--{2-pyrimidinyl) amino7benzyl]-2,3-dioxopiperazine smeltpunt: 135°C (herkristalliseerd uit isopropyl-alkohol) 5 IR (KBr) cm-1: u^_q 1670 elementairanalyse (voor C26H29N5°2S 1> berekend: C 65,66 %\ H 6,1U %·, N 72 % gevonden: C 65,6U %\ H 6,12 %\ N 1U,68 % NMR (CDCl^) ppm waarden: 10 1,25 (6η, d, CI^ x 2), 2,97 (1H, q, CH x 1), 3,37 (^H, s, piperazinering CHg x 2), ^,63 (^H, s, x 2), 5,16 (2H, s, CI^ x 1), 6.,:56 (1H, t, pyrimidinering Hx 1), 7,22 - 7,27 (9H, m, benzeenring H x 9), 8,26 (2H, d, pyrimidinering 15 H x 2)

Voorbeeld V

Op basis van de voorbeelden I en II werden ter verkrijging van de verbindingen vermeld in de hierna volgende tabel C de geschikte uitgangsmaterialen gekozen.

20 Noot: (1) in tabel C, IPA = isopropylalkohol.

IPE = diisopropylether, AcOEt = ethylacetaat en Et20 = diethylether.

(2) In de "werkwijze1’ kolom duidt "Pro" en de op het werkwijzenummer vermeld in de beschrijving/verbinding 25 waarnaar in de regel waarin het "Pro nummer" is vermeld werd op dezelfde wijze gesynthetiseerd als in het hiervoor vermelde voorbeeld dat betrekking heeft op deze werkwijze of volgens de methode beschreven in de beschrijving op basis van dit voorbeeld.

30 (3) In de kolom onder "herkristallisatie- oplosmiddel" duidt de uitdrukking " kolom" op het feit dat het produkt door kolomehromatografie werd gezuiverd.

82 0 G 4 5 1 - 1T -

<D

Η •Ο λ λ Λ Λ Α ^ ^ ^ C w w w 3 ^ οοοοοο ο ρ Ο tj (j L L ^ ^ J“* ^pHpLt^P^O-ί P* (¾ ^ ω •Η « .3 Ο Η Η Η °<Μ ft Η <υ 4J 7 ca Ό Η (*,

£ :S +> +3 -Ρ Η S

.2 0 5 δ who ° ,

fc I Ο 9, 3 ο 3^ Ο oS

Λίοο ο ο _2 *7 g ρ ΐ Η <! < <<ήΟ^ Η <U ft «- Λ Ο 4) ϋ 1 3 t a & ¢8 4-1 r— 's - S ~ 3 ö o° ^

H) E O

c · 5 ® 00 > >a •S 43· - - ® -d® ge·,, 1 5 c B i 1 a;·-' o *fl CO ΙΛ IA VO IA ^ ï m m -* - t- d fi 3° -i 4) r- T- ^ ur-1^ > ><•'0 0 0 0 0 0 0

p-W B W WWW* W

OJ

w o

OJ

w ,i“ af1 n 3“ 00 O O o W Ό JN ~ cvi

,- O r- W W -V

W "a ^ K W W

_in o w 0-00 o

*T w ^ 3 nT* ^ W

O o o 0=0 O o o 8200451 - 18 -

Berexdingsvoorbeeld 1.

Per capsule werden 100 mg 1-benzyl-U-{U—/~N— methoxymethyl-N-(2-pyrimidinyl)amino7benzyl] -2,3-dioxopiperazine, 50 mg melksuiker, U8 mg maïszetmeel en 2 mg magnesiumstearaat 5 gemengd en capsules werden met het aldus verkregen mengsel gevuld, waardoor men een geneesmiddel in een capsule verkreeg.

Bereidingsvoorbeeld 2.

Per tablet mengde men 250 mg 1-benzyl-^-(i*-/”N-ethoxymethyl-N-(2-pyrimidinyl)amino7benzyl]-2,3-dioxopiperazine, 10 50 mg melksuiker, 38 mg maïszetmeel, 10 mg polyvinylpyrrolidon en 2 mg magnesiumstearaat en het aldus verkregen mengsel vormde men op een gebruikelijke wijze tot tabletten, waardoor men een geneesmiddel in tabletvorm verkreeg.

8200451

Claims (11)

1. Verbindingen met formule 1, waarin een al of niet gesubstitueerde alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl-, aryl- of acylgroep, Rg een waterstofatoom of een 5 alkylgroep en X een zuurstof- of zwavelatoom voorstellen, of een zout daarvan.

2. Verbindingen volgens conclusie 1, waarin Rg een waterstofatoom voorstelt.

3. Verbindingen volgens conclusie 2, waarin X 10 een zuurstofatoom voorstelt. h. Verbindingen volgens conclusie 3, waarin R^ een al of niet gesubstitueerde acylgroep voorstelt.

5. Verbindingen volgens conclusie 3, waarin een al of niet gesubstitueerde alkylgroep voorstelt. 15 6, Verbinding volgens conclusie 5, l-benzyl-4-fU- /“N-methoxymet iyl-N-(2-pyrimidinyl)amino7benzyl] -2,3-dioxopipera-zine met formule 7, of een zout daarvan. 7« Verbinding volgens conclusie 5, 1-benzyl-U-{l|-/“N-et boxymethyl-N-(2-pyrimidinyl)amino7benzyl]-2,3-dioxo-20 piperazine met formule 12, of een zout daarvan.

8. Werkwijze voor het bereiden van een aromatische verbinding, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 1, waarin R^ een al of niet gesubstitueerde alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl-, aryl- of acylgroep, Rg een 25 waterstofatoom of een alkylgroep en X een zuurstof- of een zwavelatoom voorstellen, of een zout daarvan, bereidt door a) 1-benzyl-2-pyrimidinylamino )benzyl7- 2,3-dioxopiperazine of een reaktief derivaat daarvan te laten reageren met een verbinding met formule 2, waarin Y een reaktieve 30 groep voorstelt en R1, Rg en X de hiervoor aangegeven betekenis sen hebben, of b) een verbinding met formule 3,waarin R^ een al of niet gesubstitueerde alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl- of arylgroep voorstelt en Rg een hiervoor gedefinieer-35 de betekenis heeft, te laten reageren met een verbinding met 8200451 > - 20 - formule H-X-R^j waarin R^ een al of niet gesubstitueerde alkyl-, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl- of arylgroep voorstelt en X een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft.

9. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, 5 dat men 1-benzyl-k-/”^-(2-pyrimidinylamino)benzyl7-2,3- dioxopiperazine of een reaktief derivaat daarvan laat reageren met een verbinding met formule 2, waarin , R^·, X en Y de in conclusie 8 aangegeven betekenissen hebben.

10. Werkwijze volgens conclusie 8,met het kenmerk, 10 dat men een verbinding met formule 13, waarin Rg, R^ en X de in conclusie 8 vermelde betekenissen hebben, bereidt door een verbinding met- formule 3, waarin R,, en R^ de in conclusie 8 vermelde betekenissen hebben, te laten reageren met een verbinding met formule H-X-R^, waarin R^ en X de in conclusie 8 15 aangegeven betekenissen hebben.

11. Therapeutisch preparaat met carcinostatische eigenschappen, welk preparaat een of een aantal verbindingen met formule 1,. waarin R1 een al of niet gesubstitueerde alkyl, cycloalkyl-, aralkyl-, alkenyl-, alkadienyl-, aryl- of acylgroep,

20 R^ een waterstofatoom of een alkylgroep en X een zuurstof- of zwavelatoom voorstellen, en/of een zout daarvan, bevat.

12. Werkwijze voorheb bereiden of vervaardigen van een therapeutisch preparaat met carcinostatische werking, met het kenmerk, dat men een of een aantal verbindingen met 25 formule 1, als gedefinieerd in conclusie 11, en/of een zout daarvan, in een voor een dergelijke toepassing geschikte toedieningsvorm brengt.

13. Werkwijzen als beschreven in de beschrijving en/of voorbeelden. 30 1U. Gevormde therapeutische preparaten, verwaar digd onder toepassing van een werkwijze volgens conclusie 12 of 13. r 8200451