MXPA06000296A

MXPA06000296A - Compuesto 2,4-bis(trifluoroetoxi)piridina y medicina que lo contiene.

Info

Publication number: MXPA06000296A
Application number: MXPA06000296A
Authority: MX
Inventors: Toru Miura
Original assignee: Kowa Co
Priority date: 2003-07-07
Filing date: 2004-07-06
Publication date: 2006-04-18
Also published as: EP1642899B1; CN101328152A; EP1642899A4; CN101899007B; NO20056169L; ES2389654T3; NO20120857L; EP1642899A1; AU2004254226B2; NO333799B1; NZ544482A; WO2005003119A1; JP4676883B2; US7223764B2; RU2006103364A; KR101048377B1; KR20060026417A; JPWO2005003119A1; US20050020606A1; TW200524904A

Abstract

Un compuesto 2,4-bis(trifluoroetoxi)piridina representado por la formula general (1) (ver formula general (1)): (en donde X1 representa un atomo de fluor o hidrogeno) o una sal del compuesto; y una medicina que contiene el compuesto o sal como un ingrediente activo; el compuesto o sal tiene resistencia metabolica al microsoma hepatico humano, capacidad de ser absorbido satisfactoria oral, y una excelente actividad inhibidora de ACAT.

Description

COMPUESTO 2,4-BISfTRIFLUOROETOXI)PiRIDlNA Y MEDICINA QUE LO CONTIENE CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a un compuesto 2,4- bis(trifluoroetoxi)piridina que exhibe una fuerte acción inhibidora contra ia coenzima A de acil colesterol acetiltransferasa (ACAT) durante la administración oral y de esta forma es útil para la prevención o tratamiento de hiperlipidemia, arteriesclerosis, o trastornos similares, y a intermedios que son útiles para la producción del compuesto.

DESCRIPCION DE LA TECNICA RELACIONADA La coenzima A de acil colesterol acetiltransferasa (ACAT) es una encima que cataliza la síntesis de éster de colesterol a partir del colesterol y realiza un papel importante en el metabolismo del colesterol y su absorción en órganos digestivos. Aunque muchos de los inhibidores ACAT convencionales que sirven como agentes anti-hiperlipidemia o agentes anti-arteriosclerosis actúan en ACAT en el intestino delgado o el hígado para disminuir el nivel de colesterol en la sangre, tales agentes tienen desafortunadamente efectos laterales tales como sangrado intestinal, trastorno intestinal, diarrea, y trastorno de hígado.

De acuerdo a recientes estudios, la regresión de focos de arteriosclerosis per se se espera que se logre a través de prevenir la formación de células espumosas de macrófagos, que realizan una función clave en la formación de focos de arteriosclerosis. Específicamente, las células espumosas derivadas de macrófagos (que almacenan ahí esteres de colesterol como gotas grasas) se observan en un foco de arteriosclerosis. También se ha revelado que la formación de células espumosas derivadas de macrófagos estrechamente se relaciona con el progreso de la lesión. Además, en el sitio de lesión de arteriosclerosis, la actividad de ACAT sobre la pared vascular se ha elevado, y el éster de colesterol se ha acumulado en la pared vascular. De esta forma, la actividad de ACAT sobra la pared vascular puede tener una relación cercana a la arteriosclerosis (Exp. Mol. Pathol., 44, 329-339 (1986)). En consecuencia, cuando un inhibidor de ACAT inhibe la esterificación de colesterol en las paredes vasculares, colesterol libre se almacenará en las células de la pared vascular. Los colesteroles libres almacenados se remueven a través de lipoproteína de alta densidad (HDL) de las células al hígado (transporte inverso a través de HDL) y después se metabolizan. De esta forma, tal inhibidor de ACAT se puede esperar que inhiba la acumulación de ésteres de colesterol en los sitios de lesión de arteriosclerosis (Biochim. Biophys. Acta. 2001 15, 1530 (1): 111-122). Como se describió anteriormente, un inhibidor de ACAT que inhibe ACAT presente en las paredes vasculares se ha considerado por tener un efecto directo de anti-arteriosclerosis. Previamente, después de estudios extensos enfocados en una predicción de que un compuesto que inhibe selectivamente ACAT presentes en las paredes vasculares y previene de esta forma macrófagos de la transformación en células espumosas, puede servir como un agente preventivo o terapéutico para la arteriosclerosis mientras produce efectos secundarios reducidos, los inventores de la presente encuentran que un compuesto representado por la siguiente fórmula (A): (A) (en donde Ar representa un grupo arilo que opcionalmente puede estar sustituido, representa un residuo divalente de benceno, piridina, ciclohexano, o naftaleno que opcionalmente puede ser sustituido, X representa NH, un átomo de oxigeno, o un átomo de azufre, Y representa un átomo de azufre o lo similar, Z representa un enlace sencillo, I es un número entero de 0 al 15, m es 2 o 3, y n es un número entero de 1 a 3), o su sal, o un solvato del compuesto o la sal inhibe selectivamente ACAT presentes en la pared arterial y de esta forma es útil como un agente preventivo o terapéutico para hiperlipidemia o arteriesclerosis (publicación de patente internacional W098/54153). Entre los compuestos descritos en la publicación de patente internacional W098/54153, un compuesto representado por la fórmula (B) posterior y una sal del mismo se encuentra que tienen alta solubilidad al agua y una alta actividad inhibidora de ACAT y exhiben un efecto único farmacológico en una variedad de modelos de animales. Aunque el compuesto (B) y otros compuestos descritos en la publicación de patente Internacional WO 98/54153 exhiben excelentes efectos farmacológicos atribuidos al efecto inhibidor de ACAT en los animales, experimentos realizados in vitro usando microsomas del hígado de origen humano revelan que estos compuestos son metabolizados rápidamente y de esta forma solo un pequeño porcentaje de compuestos sin cambio permanece en el microsoma del hígado de humano. Por lo tanto, la baja concentración sanguínea de estos compuestos ha sido de interés. Además, en la base de un conocimiento reciente de que, del mecanismo de interacción del fármaco, un fármaco que tiene una seguridad más alta se produce a partir de los compuestos que tienen resistencia metabólica más alta, un compuesto que tiene resistencia metabólica más alta en el microsoma del hígado de humano, se desea. Sin embargo, se ha considerado muy difícil mejorar la estabilidad, contra el metabolismo, del compuesto (B) mientras se mantiene su efecto inhibidor de ACAT, debido a que el compuesto (B) tiene muchos grupos funcionales que generalmente son metabolizados fácilmente en organismos vivientes, y estos grupos funcionales se piensa son esenciales para la producción del efecto farmacológico.

(B) BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION En vista de lo anterior, los inventores de la presente han realizado extensos estudios con el objetivo de obtener un compuesto que tenga resistencia metabólica mejorada en el microsoma del hígado de humano, que exhiba buena absorción oral, y provea una alta concentración sanguínea, e inesperadamente encontraron que un compuesto 2,4-b¡s(trifluoroetoxi)piridina representado por la fórmula (1) mostrada posteriormente tiene una concentración sanguínea más alta (Cmax), una AUC superior (área bajo la curva de concentración sanguínea-tiempo), y una absorción oral más alta, aunque este compuesto piridina tiene una baja solubilidad al agua en comparación con aquella del compuesto (B). Además, los inventores de la presente han encontrado que estos compuestos exhiben una actividad inhibidora de ACAT alta y son útiles de esta forma como un agente preventivo o terapéutico para hiperlipidemia o arteriosclerosis. La presente invención ha sido realizada con base a estos hallazgos. En consecuencia, la presente invención provee un compuesto 2,4-bis(trifluoroetoxi)pir¡d¡na representado por la fórmula (1). (1 ) (en donde X1 representa un átomo de flúor o un átomo de hidrógeno) o una sal del mismo y un método para la producción del compuesto o la sal. La presente invención también provee un compuesto piperazina representado por la fórmula (2): (2) (en donde X1 representa un átomo de hidrógeno o un átomo de flúor) o una sal del mismo. La presente invención también provee un compuesto piridina representado por la fórmula (4): (en donde R1 representa un átomo de hidrógeno, un grupo cloroacetilo, un grupo bromoacetilo, o un yodoacetilo) o una sal del mismo. La presente invención también provee 2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metil-3-nitropiridina. La presente invención también provee N-[2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpir¡din-3-il]-2-[4-(2-hidroxiet¡l)piperaz¡n-1-il]acetamida La presente invención también provee una medicina que contiene un compuesto representado por la fórmula anterior (1) o una sal del mismo como un ingrediente activo. La presente invención también provee el uso de un compuesto representado por la fórmula anterior (1) o una sal del mismo para la producción de un fármaco. La presente invención también provee un método para el tratamiento de arteriosclerosis, que comprende la administración de un compuesto representado por la fórmula anterior (1 ) o una sal del mismo en una cantidad efectiva. El compuesto (1) de la presente invención que inhibe de manera selectiva ACAT presente en las paredes de la arteria, tiene una excelente estabilidad contra el metabolismo en el microsoma del hígado de humano, exhibe buena absorción oral, y de esta forma es útil como un agente preventivo o terapéutico para hiperlipidemia o arteriesclerosis.

BREVE DESCRIPCION DEL DIBUJO La figura 1 muestra estabilidad contra el metabolismo de los compuestos (1a), (1 b), y el compuesto (B) (clorhidrato) en microsomas del hígado de humano.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA(S) ODALIDAD(ES) PREFERIDA(S) El compuesto (1) de la presente invención tiene una característica estructural de tener uno o dos átomos de flúor en el anillo benzimidazol y tener dos grupos 2,2,2-trifluoroetoxi en el anillo de piridina. No se han descrito compuestos que tienen esta estructura química única en la publicación de Patente Internacional W098/54153. La presente invención incluye los siguientes dos compuestos y sales de los mismos.

Ejemplos de la sal del compuesto (1) de la presente invención incluyen sales de ácido inorgánico tales como clorhidratos, sulfatos, nitratos, fosfatos; y sales de ácido orgánico tales como metanosulfonatos, maleatos, fumaratos, citratos, butiratos, lactatos, tartratos, ascorbatos, malatos, mandelatos, salicilatos, pantotenatos, tanatos, etanodisulfonatos, bencenosulfonatos, p-toluenosulfonatos, glutamatos, espartatos, trifluoroacetatos, pamoatos, y gluconatos. El compuesto (1) de la presente invención o una sal del mismo pueden tomar la forma de un solvato. No se impone limitación particular sobre el solvato, sólo que el solvato no afecte de manera adversa la actividad inhibidora de ACAT, y el solvato se pueda formar a través de la adición de un solvente que se emplea en el procedimiento de producción y purificación tal como el agua o alcohol. Como un solvente, se prefiere un hidrato. El compuesto (1) de la presente invención se puede producir a través, por ejemplo, del siguiente procedimiento de producción (en donde R representa un grupo protector, Y representa un grupo alquilo o un grupo arilsulfonilo, X1 representa un átomo de hidrógeno o un átomo de flúor, X2 representa un átomo de cloro o un átomo de bromo o un átomo de yodo). Específicamente, 2,4-dicloro-6-metil-3-nitropiridina (5) reacciona con 2,2,2-trifluoroetanol, para producir de esta forma el compuesto (6). El grupo nitro del compuesto (6) se reduce para producir el compuesto (7). El compuesto (7) entonces reacciona con el ácido halogenoacético o un derivado del mismo, para producir así el compuesto (3). En forma separada, un compuesto piperazina etanol (8) cuyo grupo amino ha sido protegido, es sulfonilado para producir el compuesto (9), y el compuesto (9) reacciona con un derivado de tiol (10a) para producir el compuesto (11). Alternativamente, el compuesto (11) se puede producir a través de la reacción del compuesto (8) con un derivado tiol (10a) o (10b) en presencia de un compuesto fósforo. El compuesto (12) se produce a través de la desprotección del grupo de protección (R) del compuesto (11). El compuesto (1) de la presente invención se produce a través de la reacción del compuesto de esta manera obtenido (2) con el compuesto (3). En consecuencia, el compuesto anterior (2), el compuesto (4) representado por la fórmula (4) posterior y el compuesto anterior (6), que es 2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metil-3-nitropiridina, son útiles como intermedios para la producción del compuesto (1) de la presente invención. (en donde R representa un átomo de hidrógeno, un grupo cloroacetilo, un grupo bromoacetilo, o un grupo yodoacetilo).

Cada etapa de la reacción anterior se describirá posteriormente. La reacción de 2,4-dicloro-6-metil-3-nitropiridna (5) con 2,2,2- trifluoroetanol se realiza en un solvente (2,2,2-trifluoroetanol o una mezcla de solventes del mismo con dimetilformamida (DMF), tetrahidrofurano (THF), sulfóxido de dimetilo (DMSO), etc.) en presencia de una base (por ejemplo, un carbonato de metal alcalino tal como carbonato de potasio o carbonato de sodio; un hidróxido de metal alcalino tal como hidróxido de potasio o hidróxido de sodio; o un hidruro de metal alcalino tal como el hidruro de sodio, hidruro de potasio, o hidruro de litio) durante 5 a 24 horas de temperatura ambiente a temperatura de reflujo (preferiblemente durante 15 a 20 horas a temperatura de reflujo). La reducción del compuesto (6) preferiblemente se realiza a través de una de las siguientes reacciones de reducción: (i) reducción a través del uso de un agente de reducción que contiene azufre tal como ditionito de sodio, sulfuro de sodio, sulfuro ácido de sodio, o sulfuro de hidrógeno, (ii) reducción a través del uso de un agente de reducción que contiene metal tal como zinc, hierro, o cloruro de estaño (II), o (¡ii) reducción catalítica bajo hidrógeno. La reacción de reducción (i) se realiza al, por ejemplo, disolver el compuesto (6) en un solvente tal como isopropanol, etanol, o THF, agregando a 80°C una solución acuosa de un agente de reducción que contiene azufre, y permitiendo que la mezcla reaccione durante 10 minutos a 2 horas. La reacción de reducción (¡i) se realiza, por ejemplo, al disolver el compuesto (6) en un solvente tal como un alcohol (tal como etanol o isopropanol), ácido acético, o un solvente de mezcla de agua y cualquiera de estos solventes y permitiendo que la solución reacciones durante 30 minutos a 24 horas de 0 a 100°C. En la reacción (¡i), un ácido tal como el ácido clorhídrico o el ácido sulfúrico se puede añadir si es necesario. La reacción de la reducción catalítica (iii) se realiza al disolver el compuesto (6) en un solvente tal como el dioxano, ácido acético, metanol, etanol o ¡sopropanol o una mezcla de solventes de los mismos y permitiendo que la solución reaccione en presencia de un catalizador tal como níquel Raney, paladio carbón, hidróxido de paladio, o negro de paladio bajo hidrógeno durante 30 minutos a 12 horas de 0 a 50°C, preferiblemente durante 30 minutos a 3 horas a temperatura ambiente. Ejemplos del ácido halogenoacético que se usará en la reacción con el compuesto (7) incluye ácido cloroacético, ácido bromoacético, y ácido yodoacético. Ejemplos del derivado reactivo del ácido halogenoacético incluyen haluro de haiogenoacetilo y anhídrido halogenoacético. Preferiblemente, el compuesto (7) reacciona con haluro de haiogenoacetilo. La reacción del compuesto (7) con haluro de haiogenoacetilo se realiza, por ejemplo, en un solvente (tal como cloruro de metileno, cloroformo, acetato de etilo, acetonitrilo o tolueno) en la presencia de una base (tal como N,N-dimetilanilina, trietilamina, piridina, 4-dimetilaminopridina, o 4-pirrolidinopiridina) durante 10 minutos a 5 horas de 0 a 50°C, preferiblemente de 10 a 60 minutos a 0°C. La síntesis del compuesto (1 1) a partir de un compuesto piperazina etanol (8) se puede realizar a través de la vía "a" (a través de alquiisulfonilación o ariisulfonilacion) o la vía "b" (a través de reacción de un compuesto fósforo). En la vía "a", se realiza la alquiisulfonilación o ariisulfonilacion de un compuesto piperizina etanol (8) en un solvente (tal como DMF, THF, acetato de etilo, o acetonitrilo) en presencia de una base (tal como trietilamina, piridina, N,N-diisoprop¡letilamina, ?,?-dimetilanilina, o 4-dimetilaminopiridina) mediante el uso de un compuesto cloruro de sulfonilo, tal como un agente de alquiisulfonilación o un agente de ariisulfonilacion, tal como cloruro de metanosulfonilo, cloruro de bencenosulfonilo, o cloruro de p-toluenosulfonilo durante 30 minutos hasta 3 horas de 0 a 50°C. El grupo de protección (R) del grupo amino en el compuesto piperizina etanol (8) puede ser grupos de protección empleados en la síntesis peptídica. Ejemplos preferidos de tales grupos de protección incluyen grupos alcoxicarbonilo (tales como benciloxicarbonilo, 2,2,2-tricloroetiloxicarbonilo, y terc-butoxicarbonilo y un grupo formilo. La reacción del compuesto (9) con el compuesto (10a) se realiza en un solvente (tal como DMF, DMSO, o acetonitrilo) en presencia de una base (tal como carbonato de potasio o carbonato de sodio) y un catalizador (tal como 18-corona-6) durante 1 a 5 horas de temperatura ambiente a 100°C, preferiblemente durante 1 a 2 horas de 50 a 80°C. En la vía "b", un compuesto piperizina etanol (8) reacciona con un derivado tiol (10a) o (10b) en presencia de un compuesto fósforo.

Ejemplos del compuesto fósforo incluyen reactivos fosfina empleados en la reacción Mitsunobu; reactivos fosforosos que contienen un reactivo fosfina y un reactivo azo o un reactivo ácido etilenodicarboxílico tal como maleato de dimetilo o ?,?,?',?'-tetrametilfumaramida; y reactivos iluro de fosfonio. En la vía "b", la reacción preferiblemente se realiza a través de cualquiera de los siguientes procedimientos: (i) reacción del compuesto (8) con un derivado tiol (10a) en presencia de un reactivo fosfina y un reactivo azo o un reactivo ácido etilenodicarboxílico tal como maleato de dimetilo o ?,?,?',?'-tetrametilfumaramida (método A), (ii) reacción del compuesto (8) con un derivado tiol (10a) en presencia de un reactivo iluro de fosfonio (método B), y (iií) reacción del compuesto (8) con un derivado tiol (10b) en presencia de un reactivo fosfina (método C).

Método A El método A se puede realizar a través de la disolución del compuesto (8), un derivado tiol (10a), y un reactivo fosfina en un solvente de reacción, agregando un reactivo azo o un reactivo ácido etilenodicarboxílico a esto, y permitiendo que la mezcla reaccione bajo argón o nitrógeno durante 2 a 24 horas de 0 a 100°C, preferiblemente de temperatura ambiente a 80°C. Ejemplos del reactivo fosfina empleado en el método A incluyen trialquilfosfinas tales como trimetilfosfina, trietilfosfina, tripropilfosfina, triisopropilfosfina, tributilfosfina, triisobutilfosfina, y triciclohexilfosfina, y triarilfosfinas tales como trifenilfosfina, y difenilfosfinopoliestireno. Entre estos compuestos, trimetilfosfina, tributllfosfina, y trifenilfosfina se prefieren. Ejemplos del reactivo azo incluyen azodicarboxilato de dietilo (DEAD), 1 ,1 '-azobis(N,N-dimetilformamida) (TMAD), 1 ,1 '- (azodicarbonil)dipiperidina (ADDP), ,1'-azobis(N,N-diisopropilformamida) (TIPA), y 1 ,6-dimetil-1 ,5,7-hexahidro-1 ,4,6,7-tetrazocin-2,5-diona (DHTD). Entre estos, se prefiere particularmente el azodicarboxilato de dietilo. Ejemplos de solvente de reacción para ser empleado incluyen DMF, THF, dioxano, acetonitrilo, nitrometano, acetona, acetato de etilo, benceno, clorobenceno, tolueno, cloroformo, y cloruro de metileno. Entre ellos, DMF, THF, dioxano, y acetonitrilo se prefieren, y DMF y THF son particularmente preferidos.

Método B El método B se puede realizar mediante la disolución del compuesto (8), un derivado tiol (10a), y un reactivo iluro de fosfonio en un solvente de reacción, y permitiendo que la solución reaccione bajo argón o nitrógeno durante 2 a 12 horas a temperatura ambiente a 120°C, preferiblemente de 80 a 100°C. Ejemplos del reactivo iluro de fosfonio empleado en el método B incluyen alcanoilmetilenotrialquilfosforano, alcanoilmetilenotriarilfosforano, alcoxicarbonilmetileno trialquilfosforano, alcoxicarbonilmetilenotriarilfosforano, cianometilenotrialquilfosforano, y cianometilenotriarilfosforano. Ejemplos del triaiquilo incluyen trimetilo, trietilo, tripropilo, triisopropilo, tributilo, triisobutilo, y triciclohexilo. Ejemplos de triarilo incluyen trifenilo y difenilpoliestireno. Alternativamente, esta reacción se puede realizar mediante la adición del solvente de reacción, el compuesto (8) y un derivado tiol (10a) con un reactivo haluro de fosfonio en presencia de una base, para producir de esta forma un reactivo iluro de fosfonio en el sistema de reacción. Ejemplos del reactivo haluro de fosfonio empleado en esta reacción incluyen haluro de (cianometil)trialquilfosfonio, haluro de (cianometil)triarilfosfonio, haluro de (alquilcarbonilmetil)trialquilfosfonio, haluro de (alquilcarbonilmetil)triarilfosfonio, haluro de (alcoxicarbonilmetil)trialquilfosfonio, y haluro de (alcoxicarbonilmetil)triarilfosfonio. Entre los reactivos haluro de fosfonio anteriores, haluro de (cianometil)trialquilfosfonio y haluro de (cianometil)triarilfosfonio se pueden preparar mediante la reacción de un acetonitrilo halogenado correspondiente con una trialquilfosfina y triarilfosfina correspondientes, respectivamente (Tetrahedron, Vol. 57, pp. 5451-5454, 2001). Los otros reactivos se pueden preparar mediante la reacción de un alcanoilhalometilo o alcoxicarbonilhalometilo correspondiente con una trialquilfosfina o triarilfosfina correspondientes de una manera similar. Ejemplos de las trialquilfosfina y triarilfosfina incluyen los compuestos enumerados en relación al método A. Entre ellos, trimetilfosfina, tributilfosfina y trifenilfosfina se prefieren, y particularmente se prefiere trimetilfosfina. Ejemplos del grupo alcanoilo del alcanoil halometilo descrito anteriormente incluyen formilo, acetilo, propionilo y butirilo. Entre ellos, acetilo y propionilo son preferidos. Ejemplos del grupo alcoxi del alcoxi carbonilhalometilo incluyen metoxi, etoxi, propoxi, y butoxi. Entre ellos, metoxi, etoxi, y butoxi se prefieren. Ejemplos preferidos del átomo de halógeno incluyen, cloro, bromo, y yodo. Ejemplos de la base incluyen bases orgánicas tales como trietilamina, ?,?-diisopropiletilamina, 1,4-diazabiciclo[2,2,2]octano (DABCO), 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undeca-7-eno (DBU), y 1 ,5-diazabiciclo[4,3,0]nona-5-eno (DBN); y bases inorgánicas tales como carbonato de potasio, carbonato de sodio, carbonato de cesio, carbonato de litio, diisopropilamida de litio, y hexametildisilazida de potasio. Entre estos, N,N-diisopropiletilam¡na, carbonato de potasio, diisopropilamida de litio, y hexametildisilazida de potasio se prefieren, y ?,?-diisopropiletilamina y carbonato de potasio son particularmente preferidos. Ejemplos preferidos del solvente para la reacción incluyen dioxano, THF, tolueno, benceno, DMF, D SO, acetonitrilo, y propionitrilo, siendo preferido particularmente el propionitrilo.

Método C El método C se puede realizar mediante la disolución del compuesto (8), un derivado tiol (10b) y un reactivo fosfina en un solvente de reacción similar al que se emplea en relación al método A y permitiendo la reacción de la solución bajo argón o nitrógeno durante 2 a 48 horas de temperatura ambiente a 100°C, preferiblemente de 60 a 100°C. Ejemplos del reactivo fosfina empleado en el método C incluyen trialquilfosfina y triarilfosfina, que se describen en relación al método A. Ejemplos específicos incluyen trimetilfosfina, trietilfosfina, tripropilfosfina, trüsopropilfosfina, tributilfosfina, triisobutilfosfina, triciclohexilfosfina, trifenilfosfina, y difenilfosfino poliestireno. Entre ellos, trimetilfosfina, tributilfosfina, y trifenilfosfina se prefieren, y trimetilfosfina y trifenilfosfina son particularmente preferidas. El derivado tiol (10a) se puede producir mediante el método descrito en la publicación de patente internacional mencionada anteriormente W098/54153 o mediante un método de acuerdo a esta. El derivado tiol (10b) se puede producir fácilmente a partir del derivado tiol (10a). La reacción de desprotección del compuesto (11) se realiza mediante un método conocido de acuerdo con el grupo de protección, por ejemplo, a través de hidrólisis, reducción, etc. La reacción del compuesto obtenido de esta forma (2) con el compuesto (3) se realiza en presencia de una base (tal como el carbonato de potasio, carbonato de sodio, carbonato ácido de potasio, o carbonato ácido de sodio) en un solvente (tal como DMF, THF, o acetonitrilo, o un solvente de mezcla de agua y cualquiera de estos solventes) durante 5 a 30 horas de temperatura ambiente a 50°C, preferiblemente durante 10 a 20 horas a temperatura ambiente. Alternativamente, el compuesto (1) de la presente invención se puede producir mediante un procedimiento para el esquema de reacción descrito posteriormente. Específicamente 1-(2-hidroxietil)piperazina (12) reacciona con un compuesto halógeno acetamida (3) para producir de esta forma el compuesto (13), y el compuesto (13) reacciona con un derivado tiol (10a) o (10b) en presencia de un compuesto fósforo. (en donde X1 tiene el mismo significado al defftíido anteriormente). La reacción del compuesto (12) con ei compuesto (3) se realiza de acuerdo con un método para la producción del compuesto (1) a partir del compuesto (2).

La reacción del compuesto (13) con un derivado tiol (10a) o (10b) se realiza de acuerdo con el compuesto de reacción (8) con un derivado tiol (10a) o (10b). Esto indica que el compuesto (13), que es N-[2,4-bis (2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridina-3-il]-2-[4-(2-hidroxietil)piperadina-1-il]acetami es útil como un intermedio en la producción del compuesto (1) de la presente invención. El aislamiento y purificación del compuesto (1) de la presente invención se puede realizar a través de cualquier combinación adecuada de lavado, extracción, recristalización, cualquier tipo de cromatografía, etc. La sal de adición de ácido se puede producir a través de un método de rutina. La resistencia al metabolismo en el microsoma del hígado humano se estudia in vitro. La figura 1 muestra el porcentaje restante del compuesto sin cambio 30 minutos después de la incubación. Como se muestra en la figura 1 , el compuesto (B) (clorhidrato) se encuentra que exhibe un porcentaje restante del 16%, mientras que el compuesto (1a) se encuentra que exhibe un porcentaje restante de 27%, y el compuesto (1b) exhibe aún un porcentaje restante más alto del 62%. Es decir, los compuestos de la presente invención exhiben un porcentaje restante más alto que aquel del compuesto (B) (clorhidrato). Por lo tanto, el compuesto (1) de la presente invención se encuentra que tiene una resistencia metabólica dramáticamente mejorada en el microsoma del hígado humano. Además, la solubilidad al agua se estudia. Como se muestra en el cuadro 3, la solubilidad al agua del compuesto (1) de la presente invención es mucho más baja que aquella del compuesto (B) (clorhidrato). De esta forma, el compuesto (1) de la presente invención se anticipa teniendo una baja capacidad de ser absorbido baja durante la administración oral. Sin embargo, los datos obtenidos mediante una prueba de administración oral en ratas macho y hembra han revelado resultados muy diferentes. Contrario a lo que se esperaba, el compuesto (1) de la presente invención se encuentra que exhibe una concentración sanguínea de dos a tres veces (Cmax) y un valor AUC de dos a cuatro veces en comparación con el caso donde el compuesto (B) (clorhidrato) se emplea. Por lo tanto, se admite que el compuesto (1) de la presente invención tiene una absorción oral más alta en comparación con el compuesto (B) (clorhidrato). Además, la actividad inhibidora de ACAT se estudia in vitro. Como se muestra en el cuadro 1 , el compuesto (1) de la presente invención se encuentra que exhibe una actividad inhibidora de ACAT fuerte equivalente con aquella del compuesto (B) (clorhidrato). Los resultados anteriores del compuesto (1) de la presente invención exhibe una fuerte actividad inhibidora de ACAT en comparación con aquella del compuesto (B), una resistencia metabólica más alta en microsomas del hígado humano que aquella del compuesto (B) y una absorción oral alta que indica que el compuesto (1) de la presente invención es útil como un agente preventivo o terapéutico para hiperlipidemia o arteriosclerosis.

El compuesto (1) de la presente invención tiene una acción inhibidora de ACAT excelente y de esta forma es útil como un fármaco preventivo o terapéutico, por ejemplo, para hiperlipidemia, arteriosclerosis, arteriosclerosis cervical o cerebral, trastorno cerebrovascular, cardiopatía isquémica, enteropatía isquémica, arteriosclerosis coronaria, nefrosclerosis, nefrosclerosis arteriosclerótica, nefrosclerosis maligna, oclusión vascular mesentérica aguda, angina intestinal crónica, colitis isquémica, aneurisma aórtica, o arterosclerosis obliterante (ASO). Cuando el compuesto (1) de la presente invención se usa como un fármaco, el compuesto (1) o una sal del mismo se puede formar, ya sea de manera individual o en combinación con uno o más portadores farmacológicamente aceptables (por ejemplo, un excipiente, un aglutinante y un diluyente), en una forma de dosificación tal como tabletas, cápsulas, gránulos, polvos, inyecciones o supositorios. Tal preparación de fármaco se puede producir a través de métodos conocidos. Por ejemplo, una preparación de fármaco para la administración oral se puede producir mediante la formulación del compuesto (1) de la presente invención con uno o más portadores adecuados que incluyen un excipiente tal como almidón, manitol, o lactosa; un aglutinante tal como carboximetilcelulosa de sodio o hidroxipropilcelulosa de sodio: un desintegrante tal como celulosa cristalina o carboximetilcelulosa de calcio; un lubricante tal como talco o estearato de magnesio: o un agente que mejora ia fluidez tal como el ácido salicílico anhidro ligero.

El fármaco de la presente invención se administra ya sea de manera oral o parenteral, pero la administración oral es la preferida. La dosis del fármaco de la presente invención difiere dependiendo de, por ejemplo, el peso corporal, edad, sexo o síntoma del paciente. La dosis diaria del compuesto (1) de la presente invención para un adulto normalmente es de 1 a 500 mg, preferiblemente de 5 a 200 mg. El compuesto (1) preferiblemente se administra una vez al día o dos o tres veces al día de una manera dividida.

EJEMPLOS La presente invención se describirá posteriormente con mayor detalle a manera de ejemplos, los cuales no se deben construir como limitantes del alcance técnico de la invención.

EJEMPLO DE PRODUCCION 1 Producción de 5,6-d¡fluoro-2-mercaptobenzimidazol 4,5-difluoro-2-nitroanilina (5.75 g, 33.03 mmol) se disuelve en ácido acético (100 mi) y ácido clorhídrico concentrado (2.3 mi), y mientras la mezcla se agita vigorosamente en un baño de hielo, se añade polvo de zinc (6.91 g, 105.6 mmol) a esto durante 0 minutos. La mezcla resultante se agita durante 20 minutos a la misma temperatura y después durante 130 minutos a temperatura ambiente. También, el polvo de zinc, (1.20 g, 18.35 mmol) se añade a esto durante 5 minutos a la misma temperatura, y la mezcla resultante se agita durante 30 minutos a la misma temperatura. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida, y el residuo es naturalizado con bicarbonato saturado acuoso, seguido por filtración a través del uso de celita. El filtrado se extrae con cloroformo, y la capa orgánica se lava con salmuera saturada. El producto se seca sobre anhidrato sulfato de sodio y después se concentra bajo presión reducida, para producir de esta manera un aceite color café (4.73 g). El aceite café se disuelve en etanol (200 mi), y O-etilxantanato de potasio (15.75 g, 98.25 mmol) se añade a esto, seguido por reflujo durante 14 horas. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida, el residuo se extrae con acetato de etilo-ácido clorhídrico 1 -mol/I, y la capa orgánica se lava con salmuera saturada. El producto se seca sobre sulfato de sodio anhidro y después se concentra bajo presión reducida, y el residuo se cristaliza a partir de cloroformo-hexano, para producir de esta forma 5,6-difluoro-2-mercaptobenzimidazol (5.58 g, rendimiento total del 91%) como un polvo color café pálido.

EJEMPLO DE PRODUCCION 2 Producción de 1 -terc-butoxicarbonil-4-r2-(5,6-difluorobenzimidazol-2- iltiotetillpiperazina A una solución de 1-terc-butoxicarbonil-4-(2-h¡droxietil)piperazina (7.40 g, 32.13 mmol) en THF (100 mi), mientras se agita en un baño de hielo, se añaden trietilamina (4.36 g, 43.09 mmol), 4-dimetilaminopiridina (200 mg, 1.64 mmol), y cloruro de metanosulfonilo (7.40 g, 38.76 mmol) de manera secuencial. La temperatura de la mezcla se deja retornar a temperatura ambiente, y la mezcla se agita durante 50 minutos. La mezcla de reacción se filtra, y el filtrado se concentra bajo presión reducida. El residuo se disuelve en DMF (200 mi), y a temperatura ambiente se añaden 5,6-difluoro-2-mercaptobenzimidazol (5.00 g, 26.86 mmol), carbonato de potasio (8.64 g, 62.51 mmol), y 18-corona-6 (500 mg, 1.92 mmol) de manera secuencial a la solución, seguido por agitamiento durante 90 minutos a 80°C. La mezcla de reacción se concentró bajo una presión reducida, y el residuo fue purificado por cromatografía de columna con gel de sílice (gel de sílice 200 g, hexano; acetona = 8:1 a 1:1). El producto fue cristalizado a partir de acetona-éter-hexano, para producir de esta manera 1-tert-butoxicarbonil-4-[2-(5,6-difluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina (7.26 g, rendimiento 68%) como cristales incoloros. pf: 192.3-193.0°C IR (KBr): 3061 , 2976, 2836, 1672, 1475, 1427 (crn"1).

H-RMN (400 MHz, CDCI3) d. .50 (9H, s), 2.51-2.68 (4H, m), 2.94 (2H, t, J = 5.4 Hz), 3.28 (2H, t, J = 5.4 Hz), 3.45-3.65 (4H, m), 6.85-7.62 (2H, m).

EJEMPL0 1 Producción de sal de ácido tris(trifluoroacético) de 1-f2-(5,6- difluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina Bajo agitación en un baño de hielo, se agregó 1-tert-butoxicarbonil-4-[2-(5,6-difluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina (7.26 g, 18.22 mmol) a ácido trifluoroacético (50 mi) durante 15 minutos y se disolvió. Después de que la mezcla se había agitado durante 10 minutos bajo enfriamiento con hielo, se agregaron a la misma éter (100 mi) y hexano (100 mi), y los cristales formados fueron recogidos por filtración. Los cristales fueron recristalizados a partir de etanol-éter, para producir así sal de ácido tris(trifluoroacético) de 1 -[2-(5,6-difluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina (9.58 g, rendimiento 82%) como un polvo amarillo pálido, pf: 141.2-142.9°C IR (KBr): 3417, 3026, 2749, 2483, 1671 , 1484 (crn"1). 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) d: 2.78-3.26 (10H, m), 3.49 (2H, t, J = 7.2 Hz), 7.51 (2H, t, J = 9.0 Hz), 8.76 (2H, m).

EJEMPLO DE PRODUCCION 3 Producción de 1-[2-(5,6-dffluorobencimidazol-2-ilt¡o)et¡ll-4- formilptperazina Se disolvieron 1-formil-4-(2-hidroxietil)piperazina (1.11 g, 7.0 mmol), 5,6-difluoro-2-mercaptobencimidazol (1.30 g, 7.0 mmol), y diisopropiletilamina (3.62 g, 28.0 mmol) en propionitrilo (50 mi), y se agregó a los mismos yoduro de cianometiltrimetilfosfonio (6.80 g, 28.0 mmol), seguido por agitación durante 1 hora a 92°C bajo argón. La mezcla de reacción se dejó enfriar y después se vertió en agua ( 00 mi), seguido por la extracción con cloroformo (100 mi x 3). Se lavó la capa orgánica con una solución salina saturada y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y el producto se concentro bajo una presión reducida. El producto crudo fue cristalizado a partir de acetona-éter, para producir así 1-[2-(5,6-dilfuorobencimidazol-2-iltio)etil]-4-formilpiperazina (1.78 g, rendimiento 78%) como un polvo cristalina amarillo. pf: 197.0-198.0°C IR (KBr) cm"1: 3441 , 2825, 1648, 1476, 1431 , 1363. 1H-RMN (DMSO-d6): 52.38 (2H, t, J = 5.1 Hz), 2.44 (2H, t, J = 5.0 Hz), 2.69 (2H, t, J = 7.0 Hz), 3.23-3.38 (4H, m), 3.41 (2H, t, J = 7.0 Hz), 7.38-7.58 (2H, m), 7.97 (1 H, s), 12.8 (1 H, s). S (m/z): 326 ( +), 140 (100).

EJEMPLO 2 Producción de 1-f2-(5,6-difluorobencimidazol-2-iltio)etinpipera2ina Se disolvió 1-[2-(5,6-difluorobencimidazol-2-iltio)etil]-4-formilpiperazina (1.70 g, 5.2 mmol) en metanol (20 mi), y se le añadió 12N de ácido clorhídrico (2 mi) a la solución, seguido por la agitación durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue concentrada bajo una presión reducida, y se añadió a la misma amoniaco saturado-metanol, seguido por agitación durante 5 minutos a temperatura ambiente. Se removió el solvente bajo una presión reducida, y el residuo fue purificado por medio de cromatografía de columna con gel de sílice (cloroformo: amoniaco saturado-metanol = 100:3), para producir así 1-[2-(5,6-difluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina (1.40 g, rendimiento 90%) como aceite café. IR (KBr) cm"1: 2925, 2853, 1664, 1602, 1478, 1435, 1364. 1H-RMN (CDCI3): 82.61-2.82 (4H, m), 3.00 (2H, t, J = 4.8 Hz), .10 (4H, t, J = 4.8 Hz), 3.16 (2H, t, J = 4.8 Hz), 7.16-7.42 (2H, m). MS (m/z): 298 ( +), 70 (100).

EJEMPLO DE PRODUCCION 4 Producción de 2,4-bisf2,2.2-trifluoroetoxi)-6-metil-3-nitropiridina Se disolvió 2,4-dicloro-6-metil-3-nitrop¡ridina (30 g, 144.9 mmol) en 2,2,2,-trifluoroetanol (250 mi), y se añadió a la misma carbonato de potasio (50 g, 361.8 mmol), seguido por reflujo durante 21 horas. La mezcla de reacción fue diluida con agua, y después se sometió a extracción con cloroformo. Se lavó la capa orgánica con una solución salina saturada y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo una presión reducida, para producir así 2,4-bis(2,2,2-tr¡fluoroetox¡)-6-metil-3-nitropiridina (45.40 g, rendimiento 94%) como un sólido amarillo pálido, pf: 72.8-73.2°C IR (KBr): 3432, 31 1 , 2975, 1610, 1585, 1535 (cm"1). 1H-RMN (400MHz, CDCI3) d: 2.50 (3H, s), 4.49 (2H, q, J = 7.7 Hz), 4.85 (2H, q, J = 8.3 Hz), 6.53 (1 H, s). Análisis elemental C^aFe^C^ Calculado C, 35.94; H, 2.41 ; N, 8.38 Encontrado C, 35.94; H, 2.45; N, 8.49 EJEMPLO 3 Producción de 3-amino-2,4-bis(2,2,2-tr¡fluoroetoxi)-6-metílpir¡dina Se disolvió 2,4-Bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metil-3-nitropiridina (45.00 g, 134.7 mmol) en isopropanol (300 mi), y se añadió a la misma una solución de ditionito de sodio (78.00 g, 448.0 mmol) en agua (300 mi) bajo agitación a 80°C. 15 minutos después de haber iniciado la reacción, se añadió una solución de ditionito de sodio (16.50 g, 94.8 mmol) en agua (51 mi) a la mezcla de reacción. También, 25 minutos después de haber iniciado la reacción, se añadió una solución de ditionito de sodio ( 1.10 g, 63.8 mmol) en agua (51 mi) a la mezcla de reacción y después se agitó durante 0 minutos. Después de terminar la reacción, se añadió 4 moles/l de ácido sulfúrico acuoso (201 mi) a la mezcla de reacción, seguido por agitación durante 30 minutos a 90°C. Después se dejó que la mezcla de reacción se enfriará, se le agregó a la misma 28% de amoniaco acuoso (360 mi) bajo enfriamiento con hielo, seguido por agitación durante 30 minutos. La mezcla de reacción fue diluida con agua y después se extrajo con cloroformo. Se lavó la capa orgánica con una solución salina saturada y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo una presión reducida. Los cristales obtenidos de esta manera fueron recristalizados a partir de hexano, para producir así 3-amino-2,4-b¡s(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpirid¡na (132.91 g, rendimiento 80%), como agujas amarillas pálidas, pf: 53.5-53.8°C IR (KBr): 3453, 3314, 2968, 1603, 1505, 1456 (crrf1). 1H-RMN (400MHz, CDCI3) d 2.34 (3H, s), 3.66 (2H, br. S), 4.39 (2H, q, J = 8.0 Hz), 4.79 (2H, q, J = 8.6 Hz), 6.35 (1 H, s). Análisis elemental 010????6?2?2 ?.55?2?: Calculado C, 38.24; H, 3.56; N, 8.92 Encontrado: C, 37.96; H, 3.19; N, 8.94 EJEMPLO 4 Producción de 2-bromo-Nr2,4-bis(2,2,2-trifloroetoxi)-6-meti¡piridin-3- ¡nacetamida: Se añadió N,N-d¡metilanilina (20.46 g, 168.8 mmoles) a una solución de 3-amino-2,4-bis(2,2,2-trifluoroetox¡)-6-metilpiridina (42.29 g, 139.0 mmoles) en diclorometano (600 ml). Mientras se agitaba la mezcla bajo enfriamiento con hielo, se le añadió a la misma una solución de bromuro de bromoacetilo (28.73 g, 142.3 mmoles) en diclorometano (100 ml), seguido por la agitación durante 10 minutos. La mezcla de reacción fue diluida con agua y después se extrajo con cloroformo. Se lavó la capa orgánica con una solución salina saturada y después se secó bajo sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo una presión reducida. Los cristales obtenidos de esta manera fueron recristalizados a partir de cloroformo-hexano, para producir así 2-bromo-N-[2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi){6-metilpindin-3-il]acetamida (50.25 g, rendimiento 85%) como agujas incoloras. pf: 142.8-154.0°C IR (KBr): 3250, 3053, 1677, 1597, 1541, 1456 (cnT1). 1H-RMN (400MHz, CDCI3) d 2.43 (3H, s), 4.02 (2H, s), 4.42 (2H, q, J = 7.9 Hz), 4.78 (2H, q, J = 8.5 Hz), 6.47 (1 H, s), 7.49 (1 H, br s) Análisis elemental C12H1iBrF5N2 .55H203 Calculado C, 33.90; H, 2.61; N, 6.59 Encontrado: C, 34.30; H, 2.66; N, 6.65 EJEMPLO 5 Producción de 2-r4-r2-(5,6-difluorobencimidazol-2-íltio)etinpiperazin-1 -¡II- N-r2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpir¡din-3-¡nacetamida (compuesto Se disolvieron una sal de ácido tris(trifluoroacético) de 1-[2-(5,6-d¡fluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina (4.00 g. 6.25 mmoles) y carbonato de potasio (31.26 mmoles), en acetonitrilo (100 mi) y agua (30 mi). Mientras la solución se agitaba bajo enfriamiento con hielo, se añadió a la misma 2-bromo-N-[2,4-b¡s(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-il]acetamida (2.20 g, 5.22 mmoles) durante 15 minutos. Se permitió que la temperatura de la mezcla regresará a al temperatura ambiente, y la mezcla se agitó durante 15 horas, después la mezcla de reacción fue diluida con agua y después se extrajo con cloroformo. La capa orgánica fue lavada con una solución salina saturada y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo una presión reducida. El residuo fue purificado con cromatografía de columna de gel de sílice (gel de sílice 150 g, hexano: acetona = 4:1 a 2:1 a 1 :1). Los cristales obtenidos de esta manera fueron recristal izados a partir de cloroformo-hexano, produciendo así 2-[4-[2-(5,6-difluorobencimidazol-2- iltio)etil]piperzin-1-il]-N-[2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-il]acetamida (3.04 g rendimiento 91%) como un polvo amarillo pálido pf: 191-192.0°C IR (KBr): 3275, 1686, 604, 1591 , 1509 (crn"1). 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6) d 2.38 (3H, s), 2.42-2.62 (8H, m), 2.672 (2H, t, J = 6.7 Hz), 3.30 (2H, s), 3.40 (2H, t, J = 6.7 Hz), 4.82 (2H, q, J = 8.8 Hz), 4.90 (2H, q, J = 8.8 Hz), 6.91 (1 H, s ) 4.82 (2H, q, J = 8.8 Hz), 4.90 (2H, q, J = 8.8 Hz), 6.91 (1H, s), 7.47 (2H, m), 8.77 (1 H, s), 12.82 (1 H, br.s) Análisis elemental C25H26F8N603S Calculado C, 46.73; H, 4.08; N, 13.08 Encontrado: C, 45.55; H, 4.12; N, 12.94 EJEMPLO PE PRODUCCION 5 Producción de 5-fluoro-2-mercaptobencimidazol Se disolvió 4-fluoro-2-nitroanilina (8.00 g, 51.22 mmoles) en metanol (100 mi), y se añadió a la misma un polvo de paladio-carbono al 10% (0.80 g), seguido por agitación durante 4 horas a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno. La mezcla de reacción fue filtrada, y el filtrado se concentró bajo una presión reducida. El residuo fue purificado mediante cromatografía de columna (gel de sílice 150 g, hexano: acetato de etilo = 1 :4), para producir así un aceite café (5.67 g rendimiento 88%). El aceite café (5.64 g, 44.72 mmoles) fue disuelto en etanol (150 mi), y se le añadió al mismo O-etilxantato de potasio (8.60 g, 53.65 mmoles) seguido por reflujo durante tres horas. Se le añadió más o-etilxantato de potasio (1.43 g, 8.92 mmoles), y la mezcla se sometió a reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción fue concentrada bajo una presión reducida, y el residuo se purificó a través de cromatografía de columna (gel de sílice 150 g, hexano: acetato de etilo = 2:1), para producir 5-fluoro-2-mercaptobencimidazol (5.93 g, rendimiento 79%) como un polvo café.

EJEMPLO DE PRODUCCION 6 Producción de 1-ter-butoxicarbonil-4-r2-(5-fluorobencimidazol-2- iítiotetinpiperazina: Se disolvió 1-tert-butoxicarbonil-4-(2-hidroxietil)piperazina (6.00 g, 26.05 mmoles) en THF (36 mi) y se le añadió al mismo trietilamina (3.43 g, 33.90 mmoles) y 4-dimetilaminpiridina (159 mg, 1.30 mmoles). Bajo enfriamiento con hielo, se añadió gota a gota una solución de cloruro de metanosulfonilo (3.58 g, 31.25 mmoles) en THF (9 mi) a la mezcla. La mezcla resultante fue agitada durante 1 hora y después se filtró, y el filtrado se concentró bajo una presión reducida. El residuo se disolvió en DMF (90 mi). Mientras se agitaba la solución a temperatura ambiente, se añadieron secuencialmente 5-fluoro-2-mercaptobencimidazol (4.82 g, 28.66 mmoles), carbonato de potasio (5.40 g, 39.07 mmoles), y 18-crown-6 (688 mg, 2.60 mmoles) a la solución, y la mezcla resultante se agitó durante 2 horas a 80°C. La mezcla de reacción se concentró bajo una presión reducida, y se le añadió agua al residuo, seguido por la extracción con acetato de etilo. Se lavó la capa orgánica con agua y con una solución salina saturada, después se secó bajo sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo presión reducida. El residuo se purificó con cromatografía de columna de gel de sílice (gel de sílice 150 g, hexano: acetato de etilo = 2:1 a 1 :1 a 1 :2), para producir así 1 -tert-butoxicarbonil-4-[2-(5-fluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina (7.28 g, rendimiento 73%). 1H-RMN (400MHz, CDCI3) d 1.49 (9H, s), 2.63 (4H, t, J = 4.9 Hz), 4.94 (2H, t, J = 5.9 Hz), 3.29 (2H, t, J = 5.9 Hz), 3.58 (4H, t, J = 4.9 Hz), 6.93 (1 H, dd, J = 9.2, 2.5 Hz), 7.19 (1 H, dd, J = 9.2, 2.5 Hz), 7.40 (1 H, dd, J =9.2, 4.9 Hz) EJEMPLO 6 Producción de sal de ácido tris (trifiuoroacético) de 1-[2-(5- fluorobencimidazol-2-iltio)etir|piperazina Mientras se agitaba el ácido trifiuoroacético (17 mi) bajo enfriamiento con hielo, se añadió 1-tert-butoxicarbonil-4-[2-(5- f!uorobencimidazol-3-iltio)etil]piperazina (6.50 g 17.08 mmoles) durante 30 minutos y se disolvió en el mismo. Se permitió que la temperatura de la mezcla regresará a la temperatura ambiente, y la mezcla se agitó durante 30 minutos. Después, se añadieron a la misma éter y hexano, y se recogió por filtración el sólido formado. El producto recogido se lavó con éter, para producir así sal de ácido tris(trifluoroacético) de 1-[2-(5-fluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazina (10.50 g, rendimiento 99%) como un polvo café, pf: 27.7-129.3°C IR (KBr): 3143, 3032, 2731 , 1789, 1747, 1660 (cnrf1). 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6) d 3.29-3.47 (8H, m), 3.48 (2H, t, J = 6.6 Hz), 3.62 (2H, t, J = 6.6 Hz), 7.03 (1 H, t, J = 9.0 Hz), 7.32 (1 H, d, J = 9.0 Hz), 7.48 (1 H, dd, J = 9.0, 4.4 Hz), 9.36 (2H, br), 13.76 (3H, br).

EJEMPLO DE PRODUCCION 7 Producción de 1 -r2-(5-fluorobenc¡midazol-2-¡ltio)etill-4-formilpiperazina Se disolvieron 1-formil-4-(2-hidroxietil)piperazina (1.20 g, 7.6 mmoles), 5-fluoro-2-mercaptobencimidazol (1.28 g, 7.6 mmoles), y diisopropiletilamina (3.93 g, 30.4 mmoles) en propionitrilo (50 mi), y se le añadió a la mezcla yoduro de cianometiltrimetilfosfonio (7.39 g, 30.4 mmoles), seguido por agitación durante 1 hora a 92°C bajo argón. Se dejó que la mezcla de reacción se enfriará y después se vertió en agua (100 mi), seguido por la extracción con cloroformo ( 00 mi x 3). La capa orgánica resultante se lavó con una solución salina saturada y después se seco sobre sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo una presión reducida. El producto crudo se cristalizó a partir de acetona-éter, para producir así 1-[2-(5- fluorobencimidazol-3-iltio)etil)]-4-formilpiperazina (1.87 g, rendimiento 80%) como un polvo cristalino café. pf: 173.0-175.0°C IR (KBr) crrT : 3435, 2953, 2825, 1648, 1503, 1446 1H-RMN (DMSO-d6) d 2.38 (2H, t, J = 5.2 Hz), 2.44 (2H, t, J = 5.0 Hz), 2.70 (2H, t, J = 7.0 Hz), 3.22-3.38 (4H, m), 3.42 (2H, t, J = 7.0 Hz), 6.87-6.98 ( H, m), 7.23 (1 H, br s), 7.39 (1 H, br s), 7.97 (1 H, s), 12.6 (1 H s). MS (m/z): 308 (M+), 140 (100) EJEMPLO 7 Producción de 1 -r2-(5-fluorobencimidazo.2-íltio¾et¡npiperazina: Se disolvió 1 -[2-(5-fluorobencimizol-2-iltio)etil]-4-formilpiperazina (1.80 g, 5.8 mmoles) en metanol (20 mi) y se añadió al mismo 12N de ácido clorhídrico (2 mi), seguido por agitación durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró bajo una presión reducida, y se añadió al mismo amoniaco saturado-metanol, seguido por agitación durante 5 minutos a temperatura ambiente. Se removió el solvente bajo una presión reducida, y el residuo fue purificado por medio de cromatografía de columna de gel de sílice (cloroformo: amoniaco saturado-metanol = 100:3), para producir así 1-[2-(5-fluorobenc¡midazo-2-iltio)etil]piperazina (1.33 g, rendimiento 81%) como un aceite café. IR (KBr) cm' : 3059, 2947, 2815, 1626, 1602, 1482, 1444, 1408. 1H-RMN (DMSO-de) d 2.30 (4H, m), 2.62 (2H, t, J = 6.8 Hz), 2.67 (4H, t, J = 4.8 Hz), 3.39 (2H, t, J = 6.8 Hz), 6.90-6.98 (1 H, m), 7.23 (1 H, dd, J = 9.5, 2.5 Hz), 7.39 (1 H, dd, J = 8.8, 4.9 Hz). MS (m/z): 280 (M+), 70 (100).

EJEMPLO 8 Producción de 2-r4-f2-(5-fíuorobencimidazol-2-iltio)etinpiperazin-1 -ill-N- f2,4-bis(2,2,2-trifluoroetox0-6-metilpiridin-3-inacetamida (compuesto 1a) Se suspendieron una sal de ácido tris(trifluoroacético) de 1-[2-(5-fluorobencimidazol-2-iltio)etil]pieprazina (6.92 g, 11.12 mmoles) y 2-bromo-N-[2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-il]acetamida (4.50 g, 10.59 mmoles) en acetonitrilo (90 mi), y se añadió gradualmente carbonato de potasio (5.85 g, 42.33 mmoles) a la suspensión. La mezcla se agitó durante 5 horas a temperatura ambiente, y se añadió agua (100 mi) a la mezcla de reacción, seguido por la extracción con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con una solución salina saturada y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo una presión. El residuo fue purificado por medio de cromatografía de columna con gel de sílice (cloroformo: metanol =50:1). Los cristales obtenidos de esta manera fueron recristalizados a partir de acetona-éter, Para producir 2-[4-[2-(5- fluorobencimidazol-2-iltio)etil]piperazin-1-il]-N-[2,4-bis(2,2,2-tr¡fluoroetoxi)^^ met¡lpiridin-3-il)acetamida (4.72g, rendimiento 71 %) como prismas café pálido, pf: 182.0-183.7°C IR (KBr): 3282, 2824, 1509, 14 3, 1272, 166, (crn 1). 1H-RMN (400MHz, CDCI3) d: 2.41 (3H, s), 2.66-2.91 (8H, m), 2.97(2H, t, J= 5.1 Hz), 3.25 (2H, t, J= 5.1 Hz), 3.29 (2H, s), 4.41 (2H, q, J=8.0 Hz), 4.75 (2H, q, J=8.5Hz), 6.45 (1H, s), 6.93 (1 H, td, J=9.0, 2.3 Hz), 7.10-7.56 (2H, m), 8.28 (1 H,s), 13.14 (1 H, br.s) Análisis Elemental C25H27F7N6O3S: Calculado: C, 48.08; H, 4.36; N, 13.46 Encontrado: C, 47.98, H, 4.38; N, 13.31 EJEMPLO 9 Producción de N-r2,4-bisí2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-in-2-f2- hidroxietil)p¡perazin-1-íl]acetamida: Se disolvieron 1-(2-hidrohietil)piperazin (1.95 g, 15.0 mmoles) y 2-bromo-N-[2,4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-¡l]acetamida (5.00 g, 12.5 mmoles) en acetonotrilo (30 mi), y se añadió a la solución carbonato de potasio (2.25 g, 16.3 mmoles). La mezcla se agitó durante 5 horas a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción fue diluida con agua, seguida por la extracción de acetato de etilo. Se lavo la capa orgánica con agua y una solución salina saturada y se seco sobre anhidrato de sulfato de sodio, seguido por la concentración bajo una presión reducida. El residuo resultante se purifico por medio de cromatografía de columna con gel de sílice (solvente de desarrollo: amoniaco -metanol saturado/cloroformo =1/20) para producir así N-[2,4-bis (2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-il]-2-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]acetamida (5.40 g, rendimiento: 91% como cristales incoloros H-RMN (CDCI3)6: 2.42 (3H, s), 2.48-2.82 (8H, m), 2.57 (2H, t, J = 5.3 Hz), 3.17 (2H, s), 3.63 (2H, t, J = 5.3 Hz), 4.41 (2H, q, J = 8.0 Hz), 4.75 (2H, q, J = 8.5 Hz), 6.47 (1 H, s), 8.38 (1H, br.s) EJEMPLO 10 Producción de 2-G4-G2-(5, 6-difluorobencimidazol-2-iltio)etinpiperazin-1-in- ?-G2, 2, 2-tr¡fluoroetoxi)-6-metilpirídin-3-il]acetamida (compuesto 1b) Bajo una atmósfera de argón, se disolvieron N-[2, 4-bis(2,2,2-trifluorometoxi)-6-metilpiridin-3-il]-2-hidroxietilpiperazin-1 -il-acetamida (4.0 g, 8.43 mmoies), 5,6-difluoro-2-mercaptobencimidazol (5.8 g, 31.2 mmoies) y trifenilfosfina (7.8 g, 29.7 mmoies) en N, N-dimetilformam¡da (170 mi), y bajo un enfriamiento con hielo, se añadió gota a gota a azodicarbonato de dietilo (solución de tolueno al 40 % p/v 1 1.0 mi, 25.3 mmoies) a la mezcla, seguido por la agitación durante 1.5 horas a la misma temperatura. A la mezcla de reacción se le añadieron acetato de etilo y 1 mol/L de ácido clorhídrico, y se separó la capa acuosa. La capa orgánica se extrajo adicionalmente con 1 mol/L de ácido clorhídrico. La capa acuosa se combinó y la mezcla resultante fue alcalinizada por hidróxido de sodio (1 mol/L), seguido por la extracción con acetato de etilo. Se lavo la capa orgánica con agua y con una solución salina saturada, y después se seco sobre sulfato de sodio anhidro, seguido por la concentración bajo una presión reducida. El residuo se purificó por medio de cromatografía de columna con gel de sílice (solvente de elución; amoniaco saturado-metanol/cloroformo = 100:3), para producir así 2-[4-[2-(5,6-difluorobencimidazol-2-iltio)etil] piperaz¡n-1-il]-N-[2, 4-bis(2, 2, 2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-il]acetamida (4.9 g, rendimiento: 90.1 %)como cristales incoloros.

EJEMPLO DE PRUEBA 1 Prueba de la actividad inhibidora de ACAT en las células J774A Se sembraron células J774 (2X105 celulas/pozo) en una placa de 24 pozos y se incubaron durante 24 horas en DMEM (10 %FBS, 50 µ?). Después del reemplazo con un nuevo medio se añadieron al mismo 25-hidroxicolesterol (10 µg/ml) e inhibidor de ACAT (concentración final: 0, 10"9 a 0"5 mol/L), seguido por la incubación durante 18 horas. Después de lavar con cloruro de sodio al 0.9%, se extrajo el lípido con hexano-isopropanol (3:2) (250 µ?) y después otra vez con hexano-isopropanol (3:2) (250 µ?). El colesterol éster (CE) obtenido de esta manera fue cuantificado a través de la prueba de encima fluorescente. Las células de las cuales había sido extraído el lípido se sometieron a la prueba de proteína (prueba micro BCA) para determinar de está manera la cantidad de CE por mg de proteína. A partir de una relación de producción de CE del compuesto de prueba con respecto al del control, se calculó IC5o (concentración del compuesto inhibidor 50% de producción de CE) a N=4. Los resultados se muestran en el cuadro 1. Como se puede ver en el cuadro 1 , se confirmó que los compuestos (1a) y (1b) tienen una alta actividad inhibidora de ACAT.

CUADRO 1 EJEMPLO DE PRUEBA 2 Prueba de la estabilidad metabóüea en el microsoma de hígado humano De acuerdo con el cuadro 2 que se describe más adelante, se añadió una solución NRS (sistema regenerador NADPH) y albúmina de suero humano al 16 %, a 0.1 mol/L de un regulador de pH de fosfato (pH 7.4), y se añadió a la misma una solución de un compuesto de prueba (100 µ ) en acetonitrilo (0.1 mi). La mezcla fue preincubada durante 5 minutos en un baño caliente a 37°C, y se añadió a la misma microsoma de hígado humano (POOLED HUMAN LIVER MICROSOMES, Lot. No. 20, Producto de GENTEST), y después de permitió la reacción durante 30 minutos en un baño caliente a 37°C. Se recogió una alícuota (0.25 mi) de la mezcla de reacción y de cero a 30 minutos después del inicio de la reacción, seguida por la extracción. Se determino la cantidad del compuesto de prueba a través de HPLC. Se calculó el porcentaje residual del compuesto no cargado después de 30 minutos basándose en la siguiente ecuación: área pico después de 30 minutos/área pico al minuto 0) =100. Los resultados aparecen en la figura 1. Como se puede ver en la figura 1 , se confirmó que los compuestos (1a) y (1 b) tienen una resistencia metabólica drásticamente mejorada en el microsoma de hígado humano en comparación con el compuesto (B) (clorhidrato).

CUADRO 2 Composición de la mezcla de reacción del microsoma de hígado humano (1ml) Microsoma de hígado humano (POOLED): 0.05 mi Contiene 1 mg de proteína en 0.05 mi Solución NRS (sistema de regeneración NADPH): Contiene, en 0.25 mi de la misma, 2 mg de ß-nicotinamida-adenina dinuleótido, tipo forma oxidizada, 0.25 mi 2 mg de D-glucosa 6-fosfato disodio, y unidad de 0.8 de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa 16% albúmina de suero humano 0.25 mi 0.1 mol/l regulador de pH de fosfato (pH 7.4) 0.44 mi Solución de acetonitrilo del compuesto de prueba (100 µ?) 0.1 mi Total 1 mi *Procedimiento de extracción A cada muestra se le agregó un regulador de pH de glicina (pH 10, 1.0 mi), una sustancia estándar interna (0.1 mi), y metil éter tert-butílico (5.0 mi). La mezcla se agitó durante 10 minutos y después se sometió a centrifugado a 2,500 rpm durante 10 minutos, y se recogió la capa orgánica.

EJEMPLO DE PRUEBA 3 Prueba de solubilidad (solución I de la Farmacopea Japonesa Cada compuesto de prueba se disolvió en acetonitrilo para formar una solución a 100 µ?, y la solución fue agregada a la solución I de la farmacopea Japonesa para formar una solución de 1000 ng/ml. La solución resultante se agitó durante 10 minutos., y se colocó una alícuota (1 mi) en un tubo de inyección y después se pasó a través de un filtró de 0.2-µ?? (HLC-DISK 13, agua/solvente, Kanto Kagaku Kabushiki-kaisya). El filtrado (0.5 mi) se sometió a un procedimiento de extracción *, y la cantidad del compuesto fue determinada por medio de HPLC. Los resultados aparecen en el cuadro 3. Como se puede ver en el cuadro 3, se encontró que el compuesto (1 a) y el compuesto (1b) tienen una solubilidad inferior en comparación con la del compuesto (B) (clorhidrato). Basándose en la solubilidad inferior antes descrita, se esperaba que los compuestos de la presente invención tuvieran una baja absorbencia en la administración oral.

CUADRO 3 *Procedimiento de extracción La extracción se realizó de una manera similar a la de la prueba de la estabilidad metabólica en el microsoma de hígado humano.

EJEMPLO DE PRUEBA 4 Prueba de la administración oral en ratas Cada compuesto de prueba se disolvió en una solución de ácido clorhídrico a 0.01 N10, y la solución fue administrada peroralmente a ratas macho o hembra a 10 mg/5 ml/kg. se recogieron muestras sanguíneas (cada una de 0.25 mi) a los 30, 60, 120, 180, 240 y 360 minutos después de la administración. Las muestras de sangre recogidas se sometieron a centrifugado durante 5 minutos a 4°C y 9,000 g, para preparar así las muestras de plasma. Las muestras de plasma se almacenaron a -30°C antes de la medición. Las muestras se sometieron a un procedimiento de extracción *, y se determinaron los niveles de plasma del compuesto de prueba por medio de LC/MS/MS. Los resultados aparecen en el cuadro 4. Como se puede ver en el cuadro 4, se encontró que el compuesto (1a) y el compuesto (1b) exhiben una Cmax más alta y una AUC (área bajo la curva) más alta en comparación con el compuesto (B) (clorhidrato) confirmando que el compuesto (1a) y el compuesto (1b) tienen una buena absorbencia en la administración oral en comparación con el compuesto (1B) (clorhidrato) CUADRO 4 (10 mg/kg»p.o.) *procedimiento de extracción La extracción se realizo de una manera similar a la de la prueba de la estabilidad contra el metabolismo en el microsoma de hígado humano. En comparación con el compuesto (B) que se describe en la publicación de patente internacional W098/54153 se encontró que el compuesto (1) de la presente invención exhibe una excelente estabilidad contra el metabolismo en el microsoma de hígado9 humano y una alta actividad inhibidora de ACAT. Aunque el compuesto (1) de la presente invención tiene una solubilidad inferior en agua en comparación con la del compuesto (B) (clorhidrato), exhibe una buena absorción oral como lo indica la prueba de administración oral en ratas. Por lo tanto, se espera que el compuesto (1) de la presente invención tenga una excelente biodisponiblidad en los humanos.

Claims

49 NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1- Un compuesto 2,4-bis(trifluoroetoxi)p¡ridina representado por en donde X1 representa un átomo de flúor o un átomo de hidrógeno, o una sal del mismo. 2. - Una medicina que contiene, como un ingrediente activo del mismo, un compuesto o una sal del mismo como se define en la reivindicación 1. 3. - La medicina de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque es un agente preventivo o terapéutico para hiperlipidemia y/o arteriesclerosis. 4. - Un método para la producción de un compuesto o una sal del mismo como se describe en la reivindicación 1 , que comprende la reacción de un compuesto piperazina representado por la fórmula (2): 50 (2) (en donde X1 representa un átomo de flúor o un átomo de hidrógeno) compuesto piridina representado por la fórmula (3): (3) (en donde X2 representa un átomo de cloro, un átomo de bromo o un átomo de yodo). 5.- Un compuesto piperizina representado por la fórmula (2): (2) (en donde X1 representa un átomo de flúor o un átomo de hidrógeno) o una sal del mismo. 51 6.- Un compuesto piridina representado por la fórmula (4): (en donde R1 representa un átomo de hidrógeno, un grupo cloroacetilo, un grupo bromoacetilo, o un grupo yodoacetilo) o una sal de mismo. 7.- 2,4-bis(2,2,

2-trifluoroetoxi)-6-metil-

3-nitropiridina. 8.- N-[2,

4-bis(2,2,2-trifluoroetoxi)-6-metilpiridin-3-il]-2-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]acetamida. 9.- Una composición medicinal que comprende un compuesto o una sal de la misma como se describe en la reivindicación 1 y un portador farmacológicamente aceptable de la misma. 10.- El uso del compuesto como se describe en la reivindicación 1 o una sal del mismo, para la elaboración de una medicina para el tratamiento de hiperlipidemia y/o arteriosclerosis en un sujeto.