MXPA05004994A - Composicion para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales. - Google Patents
Composicion para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales.Info
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Abstract
La invencion se refiere a una preparacion que comprenden 5-50% en peso de cascara de Isphagula; 1-20% en peso de al menos un aminoacido; 20-80% en peso e al menos un carbohidrato y electrolitos. La preparacion para usarse como un agente terapeutico, tal como para usarse en el tratamiento de un estado de enfermedad en el sistema intestinal de animales monogastricos, incluyendo humanos. Un estado de enfermedad en el sistema intestinal es en particula enfermedades intestinales en las cuales la capa epitelial esta danad, la mayoria como un resultado de diarrea por mala absorcion, tambien asociada con deshidratacion.
Description
estrés en el tracto gastrointestinal es disminuir el flujo sanguíneo mucosal y por lo tanto comprometer la integridad de la barrera mucosal. Una parte importante de la función de la barrera es prevenir el tránsito de las bacterias del lumen a través del epitelio. El estrés puede conducir al desarrollo de enfermedades tales como diarrea, también conocida como diarrea del ganado y se asocia con la interrupción d e I a b arrera g astrointestinal j unto c on u na d eshidratación d el a nimal joven. Las infecciones locales por bacterias y virus, expuestas a toxinas, insultos físicos y muchas enfermedades sistémicas que conducen al trastorno. El trastorno puede ser moderado y recuperarse relativamente fácil o puede ser fatal. Las características estructurales de l a b arrera intestinal, tal como las vellosidades que son parte de la mucosa, pueden destruirse totalmente y estar ausentes durante el tiempo de estos estados de enfermedad del sistema intestinal. Por ejemplo el virus corona y el rota virus todos causan la destrucción de las células maduras en las extremidades de las vellosidades intestinales. La absorción de los electrolitos y los azúcares simples se disminuye drásticamente durante estas enfermedades y por lo tanto los animales jóvenes sufren de la inhabilidad para absorber los nutrientes y el agua a la cual puede consumirse.
La EP 0 160 015 describe una preparación para rehidratar a los animales monogástricos Incluyendo los humanos y a los rumiantes recién nacidos que sufren de diarrea, comprendiendo un agente intumescente absorbente, es decir cáscara de IspHagula, electrolitos, enzima (s) de descomposición de la lactosa y la glucosa. La preparación se ajustó especialmente para el tratamiento de diarrea no infecciosa y diarrea causada por el rota virus y el virus corona. Se menciona que la cáscara de Isphagula muestra una habilidad considerable para descomponer la lactosa y esos experimentos indican que la mucosa producida por la cáscara de Isphagula reemplaza la capa de mucosa dañada en los sujetos que sufren de infecciones intestinales de tal manera que actúa como un polímero bioadhesivo que puede mejorar la absorción de glucosa. Por lo tanto, la preparación se describe como teniendo inter alia un efecto protector en la mucosa intestinal.
La EP O 474 282 describe el uso de materiales que contienen polisacárido en las preparaciones para el tratamiento de heridas. El material usado es cáscara de Isphagula (o psyllium) descrito como una fibra material Cuando se usa en el campo del tratamiento de heridas, la cáscara de Isphagula se encuentra que, entre otras características, tiene la ventaja de que ocurre un enlace no específico entre los muco-polisacáridos y las paredes celulares de la bacteria presente en la herida. Por lo tanto, las fibras son capaces de absorber la humedad o de unir la humedad de la herida y producir un material de mucosa en combinación con la humedad. Los materiales de fibra se han usado exitosamente en combinación con otras sustancias activas, que pueden ser estimuladores del crecimiento y electrolitos entre otros. La cáscara de Isphagula no se describe como mejorador del crecimiento celular en la descripción del tratamiento de las heridas. Las preparaciones de preferencia están en la forma de sujetador poroso, por ejemplo una bolsita o un producto como compresa, que llega a estar en contacto con la piel. Las preparaciones también pueden usarse en inter alia la etapa de epitelización, a medida que un medio de humedad se forma debido a la formación de gel llevándose a cabo entre la parte inferior de la bolsita, el cojín y la superficie de la herida.
En "Nuevas terapias para la diarrea en becerros: Terapia y prevención para el nuevo milenio", Elaine Hunt, Colegio de Medicina Veterinaria de la Universidad del Estado de Carolina del Norte, se menciona que la glutamina puede jugar un rol en la enfermedad de diarrea a través de varios mecanismos y que juega un rol en mantener la integridad mucosal del intestino y en incrementar la recuperación de la mucosa intestinal dañada. Se ha encontrado que la glutamina tiene un efecto directo en la absorción del soluto en el intestino del becerro y la glutamina se propone por ser un componente significante de las soluciones de electrolitos en el futuro para tratar la diarrea de becerro. La glutamina, además evita la mucosa intestinal durante la privación de nutrientes, se ha encontrado que incrementa la velocidad de recuperación de la mucosa dañada. Cuando la glutamina se combina con alfa TGF estimuló la recuperación del daño por reperfusión/isquemia e hizo lo mismo con el rotavirus de la enteritis en porcinos. Por lo tanto, se ha encontrado que la glutamina estimula la absorción de Na+ acoplado con glutamina en las células en los e xtremos d e I as vellosidades intestinales en un cerdo y esa glutamina estimula el agua y la absorción de electrolitos mucho más que la glucosa. Por lo tanto se encuentra que un transportador de glutamina está presente a través de las vellosidades del íleon en el becerro y por lo tanto las soluciones de electrolitos orales basadas en glutamina deberían ser más efectivas que las soluciones basadas en glucosa en diarreas osmóticas en becerros. Otras sustancias además de la glutamina se mencionan ya que pueden estimular la proliferación local de las células en el proceso de reparación mucosal, tal como arginina, prostaglandinas y ciertos factores de crecimiento que junto con la glutamina se ha encontrado que estimulan la reparación mucosal en los estudios in vitro.
La Patente Norteamericana No. 4,711 ,780 describe un medicamento para tratar la superficie del epitelio que comprende vitamina C, una sal de zinc y un aminoácido, tal medicamento también p uede comprender un mucopolisacárido. El mucopolisacárido se describe como una barrera que actúa para prevenir que las toxinas en la superficie de la piel penetren en el sistema de circulación sanguínea, que de otra manera conduciría a la septicemia. La cantidad de mucopolisacárido, que podría extraerse de la planta de sábila, está presente en una cantidad de aproximadamente 0.05 a 10% en peso. Ningún mecanismo se describe para la co-acción de mucopolisacáridos para ayudar en el crecimiento celular y en la ingesta de aminoácidos.
En "Potential benefits of Psyllium mucilloid supplementation of oral replacement formulas for neonatal calf scours", Artículo 7 de Educación Continua, Edición Norteamericana, vol 14, no. 2, Febrero 1991 247 por Martin J. Fettman, se establece que la proliferación y la función celular intestinal pueden beneficiarse de las proporciones mejoradas de fibra de la producción de ácidos grasos de cadena corta. La adición de psyllium a los cultivos de colonocitos de humanos en alto riesgo de desarrollar cáncer de colon también se encontró que estimula el metabolismo microbial, la producción de grasas de cadena corta y subsecuentemente el crecimiento de colonocitos. Las fórmulas de reemplazo oral que comprenden muciloide psyllium, entre otras cosas, tienen efectos estimulantes en la proliferación de enterocitos, que pueden ser benéficos en la recuperación de la enteritis y el regreso subsecuente a la ingesta de dieta normal. Por lo tanto, se menciona que un experimento se realizó en donde la celulosa se agregó a una dieta liquida elemental en ratas y las proporciones de renovación celular del intestino delgado se incrementaron significativamente.
En "Evaluation of a glutamine-containing oral rehydration solution for the treatment of calf diarrhoea usando un Modelo "Escherichia coli", Brooks et al, The V eterinary J ournal 1 997, 1 53, 163-170, varias diferentes composiciones de ORS's (soluciones de rehidratación oral) se han investigado por existir efectos b enéficos e n I a g lucosa d é l a s angre y e I p eso c orporal p ara I os becerros a los que se les ha administrado oralmente E. coli. Un aminoácido simple se enfoca en, llamado glutamina, que se describe como teniendo el potencial para promover la ingesta de sodio entperico y siendo importante en sostener la forma de vellosidades y el anillo de función para la "Glutamina y la preservación de la integridad del intestino", Van der Hulst et al,m Lancet 341 , 1363-5 (1993)) y también posiblemente como soportando a la barrera de integridad y la función inmune en el intestino (refiriéndose a "combustibles intestinales: glutamina, ácidos grasos de cadena corta y fibra dietética", Evans et al., Joum. Parenteral and Enteral Nutrition, 17, 47-55 (1992)). Los resultados son consistentes con u n resultado p revio: la habilidad de la glutamina para estimular ambas la absorción de sodio electrogénica y la neutral. Se menciona que una de las propiedades benéfica de la glutamina es sostener el efecto del factor de crecimiento epidérmico en la proliferación celular de la mucosa intestinal (refiriéndose a que la "Glutamina es esencial para la proliferación celular intestinal estimulada por el factor de crecimiento epidérmico, o et al., Surgery, 114, 147-54 (1993)).
En "Efecto de la glutamina o glicina conteniendo soluciones de electrolito orales en la morfología mucosal, hallazgos bioquímicos y clínicos en becerros con diarrea inducida viral", J.M. Naylor et al, Can J Vet Res 1997; 61: 43-48, los becerros se trataron con 1 a 3 electrolitos orales cada uno con un aminoácido simple: 40 mtnol/l de glicina o 40 mmol/l de glutamina o 400 mmol/l de glutamina. El tipo de electrolito afectó significativamente I altura del vello duodenal. No existe diferencia significante en el área de la superficie del intestino delgado entre grupos. La prueba no sugiere que la sustitución de glutamina por glicina en las soluciones de electrolitos orales mejore el tratamiento en los becerros con diarrea o la velocidad de las curaciones mucosales.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra la representación gráfica de los resultados de la preparación de las soluciones de la presente invención. Los resultados del Ejemplo I también se incluyen en la Figura 1. La diferencia entre los resultados es estadísticamente significante (p< 0.05) con la excepción de los resultados de las soluciones l y VII, en donde: A = actividad LDH B = días.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Es un objeto de la invención proporcionar una preparación novedosa para el tratamiento de animales monogástricos, incluyendo humanos, que sufren de diarrea, en particular para proporcionar una curación mejorada de la mucosa durante la diarrea.
Es un objeto de la presente invención proporcionar una preparación mejorada para la restauración de la capa epitelial de los intestinos.
Es un objeto de la presente invención proporcionar una preparación mejorada para suministrar los nutrientes a la capa del epitelio de los intestinos en una forma mejorada.
Es un objeto de la presente invención proporcionar una preparación mejorada para suministrar los nutrientes a un animal monogástrico, incluyendo humanos, que sufren de diarrea, en particular a animales jóvenes.
Es un objeto d e I a p resente i nvención p roporcionar u na p reparación p ara e I c recimiento celular mejorado, especialmente para las células del epitelio intestinal.
Es un objeto de la presente invención proporcionar una preparación para usarse como un agente terapéutico.
Estos objetos se logran mediante las siguientes preparaciones.
En una modalidad, la preparación comprende 5-50% en peso de cáscara de Isphagula y 1-20% en peso de al menos un aminoácido y 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos para usarse como un agente terapéutico.
En una modalidad la preparación comprende 5-50% en peso de cáscara de Isphagula y 1- 20% en peso de al menos un aminoácido y 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos, dicha cáscara de Isphagula, en al menos un aminoácido y al menos un carbohidrato y electrolitos como una preparación combinada de uso simultáneo y secuencial en el tratamiento de un estado de enfermedad del sistema del intestino de animales monogástricos, incluyendo humanos.
En una modalidad la preparación para tratar un estado de enfermedad del sistema intestinal de animales monogástricos, incluyendo humanos, comprende 5-50% en peso de lá cáscara de Isphagula y 1-20% en peso de al menos un aminoácido y 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos.
En una modalidad la preparación para restaurar la capa del epitelio de los intestinos de los mamíferos, incluyendo humanos, comprende 5-50% en peso de Isphagula Husk y 1-20% en peso de al menos un aminoácido, 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos.
Las preparaciones antes mencionadas pueden consistir de los ingredientes expresados, exclusivamente.
La diarrea puede ser todas las clases de diarrea, especialmente la diarrea no infecciosa, mala absorción/mala digestión, diarrea osmótica por ejemplo causada por rotavirus y virus "Cryptosporidium parvum" Corona, los cuales todos causan destrucción de las células maduras en las extremidades de las vellosidades intestinales. La preparación de conformidad con la invención se conformó para el tratamiento de cualquier diarrea asociada con una necesidad de suministrar nutrientes a las células en el intestino.
En una modalidad, la cantidad de cáscara de Isphagula en el intervalo de 10-40% en peso, de preferencia 15-35% en peso, más preferiblemente 25-30% en peso.
La cáscara de Isphagula es un material fibroso, que también se llama psyllium (cáscara) y se describe en EP 0 160 015 y EP 0 474 282, que se incorporan por referencia. El material de fibra para usarse de conformidad con la i nvención comprende u n s upuesto m ucopolisacárido q ue se origina de la Plantago ovata que contiene una estructura básica polixilosa y una o más cadenas seleccionadas del grupo que comprende ácido galacturónico, galactosa, mañosa, glucosa, fucosa, ramnosa y arabinosa. La cáscara de Isphagula puede caracterizarse como un agente intumescente, que absorbe el agua y muestra una habilidad considerable para descomponer la lactosa y por lo tanto proporcionar un enlace no especifico entre los mucopolisacáridos y las paredes celulares de la bacteria.
En una modalidad, la cantidad de al menos un aminoácido está en el intervalo de 1-12% en peso, de preferencia 2-9% en peso, más preferiblemente 3-7% en peso.
En una modalidad, la cantidad de carbohidrato está en el intervalo de 25-50% en peso, de preferencia 30-45% en peso, más preferiblemente 35-40% en peso.
El carbohidrato se define como siendo un azúcar s imple tal como u n m onosacárido, d e preferencia glucosa como monohidrato de dextrosa o puede ser un disacárido tal como sucrosa. La glucosa se absorbe en el intestino delgado del animal y proporciona una fuente de energía y ayuda al proceso de recuperación. Las cantidades relativas del carbohidrato y de la cáscara de Isphagula en la preparación de conformidad con la invención es tal, que cuando la preparación se administra al animal, la preparación contiene una cantidad de carbohidrato total agregado que no se une a la Cáscara de Isphagula, pero está presente en la fase líquida de la mezcla de preparación sin un enlace a la Cáscara de Isphagula.
En una modalidad, la cantidad de electrolito está en el intervalo de 8-40% en peso, de preferencia 12-30% en peso, más preferiblemente 15-25% en peso.
Una mezcla de aminoácidos de conformidad con la Invención puede proporcionarse a partir de una levadura láctica ("Milchhefe") que se ha procesado para proporcionar los componentes solubles de las células de levadura. El proceso puede ser cualquiera de los dos o una combinación de los procesos siguientes: plasmoiisis, autólisis, termólisis o interrupción mecánica. La mezcla de levadura I áctica d e p referencia es u na fuente de aminoácidos debido al contenido relativamente alto de aminoácidos en un producto rápidamente disponible y barato. El valor indicativo del contenido de aminoácidos en una mezcla de levadura láctica es 48-52% en peso. En teoría, cualquier célula que puede ser sometida a los procesos mencionados anteriormente pueden procesarse y usarse como una fuente de aminoácidos.
Las células de levadura láctica se prefieren debido al hecho de que la composición de los aminoácidos se parece a la composición encontrada en el calostro. También, la composición de vitaminas, minerales, esteróles, ácidos grasos poli-insaturados, la glutationa que se parece a la del calostro. Esta composición de aminoácido está bien adaptada para tratar un animal joven que sufre de un estado de enfermedad del sistema intestinal, en particular un becerro, un becerro o un lechón recién nacido.
En una modalidad de la invención al menos un aminoácido está comprendido en un extracto de levadura, en donde la levadura es levadura láctica.
En una modalidad de la invención al menos un aminoácido está comprendido en los componentes solubles de la levadura láctica.
En una modalidad de la invención al menos un aminoácido está comprendido en levadura láctica seca, plasmolisada.
En una modalidad de la ¡nvenció al menos un aminoácido está comprendido en un extracto seco de la levadura láctica seleccionada.
El extracto de la levadura láctica también puede ser un extracto de levadura líquida (con un contenido de sólidos secos de 50 a 65%) o un tipo de pasta altamente viscosa (con un contenido de sólidos secos de 70 a 80%).
En u na modalidad, la preparación comprende al menos un aminoácido seleccionado del grupo que consiste de todos los aminoácidos conocidos, de preferencia en al menos un aminoácido seleccionado del grupo que consiste de glutamina, arginina, lisina, histidina, fenilalanina, tirosina, leucina, isoleucina, metionina, valina, alanina, glicina, prollna, ácido glutámico, serina, treonina, ácido aspártico, triptofano, cisteína, más preferiblemente en al menos un aminoácido seleccionado del grupo que consiste de glutamina, arginina, alanina y glicina. La glutamina, arginina, alanina y glicina se piensa que son de particular valor para la restauración del epitelio.
En una modalidad la mezcla de aminoácidos se caracteriza por tener una cantidad relativa de a minoácidos, q ue p ueden e ncontrarse e n e I c alostro d e I os m amíferos, d e p referencia e n e I calostro de un animal bovino.
En una modalidad, la mezcla de aminoácidos puede ser un juego de partes de una fuente de proteínas y la proteasa apropiada para la degradación controlada de las proteínas en dicha mezcla.
En una modalidad la cantidad de glutamina puede estar en el intervalo de más de 10% en peso, de preferencia de más de 5% en peso, más preferiblemente 0.1-4% en peso, incluso más preferiblemente 0.2-3%.
La glutamina es L-glutamina y la fuente puede ser L glutamina por si misma o L-alanil-L-glutamina (conocida con la marca registrada "Glutamax I") o glicil-L-glutamina (conocida con la marca registrada "Glutamax II") o glicil-L-glutamina (conocida con la marca registrada "Glutamax II"). La glutamina es importante en los procesos de regeneración mucosales. La glutamina se ha encontrado que priva la integridad de la mucosa del intestino en los estados de privación de nutrientes en muchas especies. Mediante aislar los segmentos del íleo de becerros, se ha demostrado que la glutamina funcionará para mantener la integridad de la mucosa del intestino que de otra manera se ha privado de nutrientes locales. También se encuentra que incrementa la velocidad de recuperación de la mucosa dañada.
En una modalidad, la cantidad de arginina está en el intervalo de más de 5% en peso, de preferencia más del 3% en peso, más preferiblemente 0.1-2% en peso, incluso más preferiblemente 0.1-0.5%.
En una modalidad, la preparación comprende al menos una de las sales comprendidas por los electrolitos y es al menos una de las sales que reemplazará al menos una de las sales perdidas por la diarrea. Cuando se administra una preparación de conformidad con la invención, las sales perdidas por la diarrea se proporcionan mediante reemplazar las sales comprendidas por ios electrolitos para proporcionar ambas rehidratación o detener la deshidratación.
En una modalidad dicho al menos carbohidrato es glucosa.
En una modalidad la preparación comprende electrolitos que son una mezcla de al menos dos sustancias seleccionadas del grupo que consiste de óxido de magnesio, hidróxido del carbonato de magnesio, hidróxido de magnesio, silicato de magnesio, silicato de calcio, carbonato de calcio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, carbonato de hidrógeno de sodio, carbonato de hidrógeno de potasio, fosfato de aluminio, hidróxido de aluminio, ácido cítrico, citrato de sodio, bihidrato de citrato de trisodio y citrato de potasio.
En una modalidad, la preparación comprende electrolitos que son una mezcla de al menos dos de las sustancias seleccionadas del grupo que consiste de hidróxido de magnesio, cloruro de sodio, c loruro d e p otasio, c arbonato d e h idrógeno d e s odio, á cido cítrico, bihidrato de citrato de trisodio y citrato de sodio.
En una modalidad, la preparación comprende al menos un agente de relleno, al menos un corrector del sabor en al menos un agente colorante.
En una modalidad el agente de relleno es un material de salvado fibroso.
En una modalidad el agente de relleno es harina de trigo.
En una modalidad, la preparación comprende un agente colorante farmacéuticamente aceptable.
En una modalidad, la preparación comprende el agente colorante FD&C ROJO #40.
En una modalidad, la preparación comprende alfa-tocoferol (vitamina E natural).
En una modalidad, la preparación se compone de 27.16% de Cascara de Isphagula, 10.66% de levadura láctica incluyendo glutamina, 19.75% de electrolitos que se hacen de 3.3.% de cloruro de potasio, 7.08% de carbonato de hidrógeno de sodio, 4.85% de cloruro de sodio, 3.45% de b ihidrato d e c itrato de trisodio, 1.07% de hidróxido de magnesio, 38.10% de monohidrato de dextrosa, 0.87% de nicotinamida, 0.30% de agente saborizante, 0.20% de dióxido de silicio, 2.43% de harina de trigo, 0.03% de agente colorante para alimentos, 0.50% de alfa-tocoferol (vitamina E natural) en donde el porcentaje en peso se calcula en la base de la preparación terminada.
En una modalidad, la preparación se usa para la fabricación de un medicamento para tratar la diarrea.
En una modalidad la preparación se usa para la fabricación de un medicamento para tratar la capa de epitelio, de preferencia la capa de epitelio del intestino, más preferiblemente las células epiteliales de las vellosidades.
El estrés es casi siempre asociado con las erosiones mucosales. Las vellosidades que son una parte estructural de la barrera mucosa, pueden interrumpirse por una extensión más grande o más chica durante un estado de enfermedad del sistema intestinal tal como durante la diarrea. La condición de salud se agrava dramáticamente en dicha interrupción, a medida que la absorción de los nutrientes en los intestinos no funciona apropiadamente. Hasta que la curación de las vellosidades se ha completado a una extensión en donde la absorción de las sustancias tiene un efecto positivo en la condición total del animal, el animal estará en un estado crítico. Por lo tanto es crucial para la recuperación para ser oportuna, comúnmente se piensa que pocas horas son importantes. La curación requiere que las células epiteliales en los márgenes del defecto proliferen, diferenciando y migrando dentro del área dañada para recuperar la arquitectura y función celular normal. El proceso de curación puede describirse como un proceso con retroalimentación positiva con las vellosidades de crecimiento siendo gradualmente capaces de absorber más y más sustancias nutrientes. Un efecto pequeño positivo en el estado temprano se cree además que tiene un gran efecto en el tiempo completo de la recuperación y por lo tanto en los cambios de la supervivencia.
Se ha encontrado absolutamente inesperado que la adición de un agente que comprende un rehidratante que contiene Cáscara de Isphagula y una mezcla que comprende aminoácidos a un cultivo celular mejore el crecimiento celular significativamente comparado con agregar ambos, el rehidratante que contiene la cáscara Isphagula sola al cultivo celular o un rehidratante sin cáscara de Isphagula y la mezcla al cultivo celular.
Un posible mecanismo para el efecto positivo mejorado inesperado en ei crecimiento celular mostrado posteriormente para un agente con una combinación de cáscara de Isphagula y una mezcla de aminoácido podría ser que esa cáscara de Isphagula actúe como un mediador. Un mediador proporciona un medio potencial mejorado para la comunicación del exterior de la célula al interior de una célula. La cáscara de Isphagula no puede pasar la pared celular por si misma debido a su gran estructura y no tiene efecto directo en el crecimiento celular. Como las observaciones sin embargo muestran un efecto de la Cáscara de Isphagula en combinación con una mezcla de aminoácidos, puede ser que la cáscara de Isphagula esté presente en el nivel de la pared celular en donde ayuda a la ingesta de aminoácidos. Para nuestro conocimiento entre las muchas características atribuidas a la cáscara de Isphagula, las características de la Cáscara de Isphagula actúan como un mediador que no se ha descrito antes.
Sin un mediador para la comunicación mejorada con el interior de la célula, los nutrientes no se suministrarán tan eficientemente, comparativamente y esto puede explicar porque solamente existe un efecto modesto positivo (ver posteriormente) en el crecimiento de un cultivo celular en la presencia de una mezcla que comprende un aminoácido y un rehidratante sin la Cáscara de Isphagula.
El agente que comprende una combinación de un rehidratante que contiene Cascara de Isphagula y una mezcla que comprende aminoácidos se usará para el tratamiento de la diarrea entre toda la progenitura de los rumiantes tanto como existen monogástricos y para el tratamiento de diarrea no infecciosa y diarrea causada por rotavirus y virus corona entre todos los otros animales de un estómago, incluyendo humanos.
Los hallazgos anteriormente mencionados se presentan posteriormente en mayor detalle.
La proliferación celular en un medio de cultivo celular estándar se examinó en la presencia y en la ausencia de la Cascara de Isphagula.
Un medio de cultivo celular estándar se usó, Medio de Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) con o sin glutamina como se indicó posteriormente.
Las dos soluciones se prepararon: El equipo de cultivo celular I contuvo DMEM con glutamina, 10% de suero de becerro fetal, 100 lU/ml de penicilina y 100 lU/ml de estreptomicina.
El equipo cultural celular II contuvo DMEM con glutamina, 10% de suero de becerro fetal, 100 IU de penicilina y 100 lU/ml de estreptomicina más 20% de Cáscara de Isphagula.
Las células usadas se proporcionaron de prepucios humanos obtenidos del departamento quirúrgico del Centro Médico Académico, Ámsterdam. La epidermis se removió; la capa dérmica se cortó en piezas finas y se incubó en 0.25% de dispasa/0.25% de colagenasa por 2 horas a 37° C. La suspensión se filtró a través de una cámara de infusión, las células se centrifugaron y se re-suspendieron en el medio de cultivo. Los cultivos de fibroblasto se mantuvieron a 37° C al aire y 5% de C02.
Por solución, se prepararon tres platos con pozos de cultivo. Los fibroblastos se sembraron en una densidad de 103 células por cm cuadrado. Para cuantificar el crecimiento celular, el número de células se determinó midiendo la actividad del lactato de dehidrogenasa (LDH) como se describió en Matsuda et al. (catador automatizado, Cobas Fara, HofFman LaRoche Ltd. Basel, Suiza) en el día 0, día 1 , día 3, día 7 y día 14 y se dan en unidades arbitrarias (a.u.). La Tabla 1 muestra los datos sin procesar de los resultados LDH.
Tabla 1 Niveles LDH medidos para las soluciones I y II Solución I II Día O 165, 160, 162 171 Día 0 (media) 162 71 Día 0 (desviación 2.5 - estándar) Día 1 201, 210, 203 221 Día 1 (media) 205 221 Día 1 (desviación 4.7 - estándar) Día 3 405, 413, 410 510 Día 3 (media) 409 510 Día 3 (desviación 4.0 - estándar) Día 7 824, 870, 802 971 Día 7 (media) 832 971 Día 7 (desviación 34.7 - estándar) Día 14 999, 1005, 1201 1041 Día 14 (media) 1068 1041 Día 14 (desviación 114.9 - estándar) Las diferencias entre I y II para la actividad LHD indican que la adición de la cáscara Isphagula mejora el crecimiento celular.
La proliferación celular en un medio de cultivo celular estándar también se examinó en la presencia de rehidratantes de diferentes composiciones.
Se prepararon cinco soluciones III, IV, V, VI y Vil (todos los porcentajes establecidos están en peso):
El equipo de cultivo celular III contuvo: 20% de DMEM con glutamina, 100 lU/ml de penicilina y 100 lU/ml de estreptomicina; 60% del rehidratante no. 1 (ver la tabla posterior para la composición); 20% de protibel.
El equipo de cultivo celular IV contuvo: 20% de DMEM sin glutamina, 100 lU/ml de penicilina y 00 lU/ml de estreptomicina; 80% de rehidratante no. 1.
El equipo de cultivo celular V contuvo: 20% de DMEM sin glutamina, 100 lU/ml de penicilina y 100 IU/ml de estreptomicina; 80% de un rehidratante WHO estándar (29.8 g de dlucosa, 1.9 g de KCl, 2.1 g de NaHC03, 0.6 g de NaCI/litro).
El equipo de cultivo celular VI contuvo: 20% de DMEM sin glutamina, 100 IU/ml de penicilina y 100 IU/ml de estreptomicina; 80% de rehidratante hipertónico (90 g de glucosa, 1.9 g de KCl, 2.1 g de NaCH03, 0.6 g de NaCI/litro).
El equipo de cultivo celular VII contuvo: 20% de DME con glutamina, 100 IU/ml de penicilina y 100 IU/ml de estreptomicina; 60% de rehidratante no. 1 pero reducido de cascara de Isphagula; 20% de Protibel.
Composición del Rehidratante No. 1
Composición del Protibel ("levadura láctica", "Milchhefe"). Datos tomados de las características analíticas del fabricante, Protibel D100P, Bel Industries. Valor Componente Unidad indicativo H20 6.3 % Cenizas 6.2 % Grasa (muy similar a esa de la 6.6 % leche c on u na a Ita proporción de ácidos grasos poli- insaturados esenciales) Azúcar total 22.7 % (principalmente fructosa, glucosa, galactosa) Aminoácidos Arginina 2.3 g/ 00 g de levadura seca Lisina 3.2 g/100 g de levadura seca Histidina 0.85 g/100 g de levadura seca Fenilalanina 1.88 g/100 g de levadura seca Tirosina 1.43 g/100 g de levadura seca Leucina 3.23 g/100 g de levadura seca Isoleucina 2.08 g/100 g de levadura seca Metionina 0.57 g/100 g de levadura seca Valina 2.36 g/100 g de levadura seca Alanina 2.53 g/100 g de levadura seca Glicina 2.07 g/100 g de levadura seca Prolina 1.59 g/100 g de levadura seca Ácido Glutámico 6.78 g/100 g de levadura seca Serina 2.12 g/100 g de levadura seca Treonina 2.16 g/100 g de levadura seca Ácido Aspártico 4.07 g/100 g de levadura seca Triptofano 0.56 g/100 g de levadura seca Cistina 0.39 g/100 g de levadura seca Otros aminoácidos 4.32 mg/100 g de levadura seca Glutationa 0.2 % Subtotal de proteínas 48-52 % Vitaminas íen selección) B1 0.96 mg/100 g de levadura seca B2 4.49 mg/100 g de levadura seca B6 0.99 mg/100 g de levadura seca B12 0.00653 mg/100 g de levadura seca C 3.67 mg/100 g de levadura seca Minerales 6.5-8.5 % Esteróles libre 0.2 % de lípidos neutrales
Las células usadas se proporcionaron a partir de prepucios humanos obtenidos del departamento quirúrgico del Centro Médico Académico, Ámsterdam. La epidermis se removió, la capa dérmica se cortó en piezas finas y se incubó en 0.25% de dispasa/0.25% de colagenasa por 2 horas a 37° C. La suspensión se filtró a través de una cámara de infusión, las células se centrifugaron y se resuspendieron en el medio de cultivo. Los cultivos de fibroblasto se mantuvieron a 37° C en aire y 5% de C02.
Por solución, se prepararon tres platos con pozos de cultivo. Los fibroblastos se sembraron en una densidad de 103 células por cm cuadrado. El número de células se determinó midiendo la actividad del lactato de dehidrogenasa (LDH) como se describió en Matsuda et al. (catador automatizado, Cobas Fara, Hoffman LaRoche Ltd. Basel, Suiza) en el día 0, día 1, día 3, día 7 y día 14 y los resultados medidos se usaron para cuantificar el crecimiento celular. La Tabla 2 muestra los datos sin procesar de los resultados LDH.
La Tabla 2 muestra los datos sin procesar.
Tabla 2 Niveles de LDH medidos para las soluciones III, IV, V, VI y VII. Soluciones III IV V VI VII Día O 170, 171 , 180, 171, 165 163, 162 155, 164 161, 170 166, 162 Día 0 (media) 165 163 1 0 166 165 Día 0 (desviación estándar) 4.4 8.0 9.5 4.5 - Día 1 174, 140, 139, 101, 90, 68 170, 180 138, 130 30, 128 88 Día 1 (media) 175 136 132 93 138 Día 1 (desviación estándar) 5.0 5.3 5.9 7.0 - Día 3 285, 175, 167, 18, 7, 12 200 270, 314 167, 180 157, 150 Día 3 (media) 290 174 158 12.3 200 Día 3 (desviación estándar) 22.4 6.6 8.5 5.5 - Día 7 421 , 166, 151, 0, 0, 0 291 447, 437 150, 146 143, 128 Día 7 (media) 435 154 141 0 291 Día 7 (desviación estándar) 13.1 10.6 11.7 - - Día 14 593, 136, 118, 0, 0, 0 395 621 , 600 144, 129 112, 108 Día 14 (media) 605 136.6 113 0 395 Día 14 (desviación estándar) 14.6 7.5 5.0 - - Mediante comparar los resultados experimentales mostrados en la Figura , se observa el efecto positivo del nivel LDH de la solución III que comprende una combinación de un rehidratante que contiene la Cascara Isphagula y una mezcla que comprende los aminoácidos. El efecto positivo se observa mediante la comparación del nivel LHD de las soluciones IV y V, ambas comprendiendo los aminoácidos, con el nivel LDH de la solución VII comprendiendo una combinación de la mezcla comprendiendo los aminoácidos y un rehidratante sin la cáscara de Isphagula.
También, mediante la comparación de los resultados experimentales mostrados en la Figura 1 , se observó el efecto positivo en el nivel LDH de la solución II comprendiendo una combinación de un equipo de cultivo celular estándar conteniendo suero de becerro fetal y Cáscara de Isphagula. Se observó el efecto positivo mediante la comparación del nivel LDH de la solución I comprendiendo el equipo de cultivo celular estándar conteniendo solo suero de becerro fetal sin Cáscara de Isphagula.
Ejemplo 1 La preparación de conformidad con la invención por ejemplo, puede componerse como sigue: Monohidrato de dextrosa 38.10%
Polvo de Psyllium (Cáscara de Isphagula) 27.16%
Cloruro de Potasio, KCI 3.30% Carbonato de Hidrógeno de Sodio 7.08% Cloruro de Sodio, NaCI 4.85% Bihidrato de citrato de trisodio 3.45% Nicotinamida 0.87% Mezcla de levadura láctica con altos contenidos de proteínas, vitaminas B y 10.66% ácido ascórbico incluyendo glutamina Agente saborizante (durazno dulce) 0.30% Dióxido de silicio 0.20% Harina de trigo 2.43% FD& C Rojo # 40 (agente colorante para alimentos) 0.03% Hidróxido de magnesio, ago 1.07% Alfa-tocoferol (vitamina E natural) 60% 0.50% TOTAL 100.00%
Los porcentajes se establecieron como porcentajes en peso.
Los ingredientes individuales están todos disponibles como polvos secos y se mezclan mecánicamente. L a p reparación d e conformidad con la invención no puede ser administrada en forma seca, pero debe ser suspendida en agua y administrarse como una solución o suspensión, como se d escribió en E P O 1 60 0 15, q ue se i ncorpora e n este documento como referencia. La mezcla de 75 g de la preparación con 1 litro de agua produce una suspensión o una solución de la preparación apropiada para la administración a los becerros.
Claims (25)
1. Una preparación que comprende: 5-50% en peso de Cáscara de Isphagula y 1-20% en peso de al menos un aminoácido y 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos para usarse como un agente terapéutico.
2. Una preparación que comprende: 5-50% en peso de Cáscara de Isphagula y 1-20% en peso de al menos un aminoácido y 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos, dicha Cáscara de Isphagula, al menos un aminoácido y al menos un carbohidrato y electrolitos como una preparación combinada para el u so s ecuencial y s imultáneo en el tratamiento de un estado de enfermedad del sistema intestinal de los animales monogástricos, incluyendo humanos.
3. Una preparación para tratar un estado de enfermedad del sistema intestinal de animales monogástricos, incluyendo humanos, dicha preparación comprendiendo: 5-50% en peso de Cáscara de Isphagula y 1-20% en peso de al menos un aminoácido y 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos.
4. Una preparación para restaurar la capa de epitelio de los intestinos de mamíferos incluyendo humanos, dicha preparación comprendiendo: 5-50% en peso de un agente que comprende cáscara de Isphagula y 1-20% en peso de al menos un aminoácido; 20-80% en peso de al menos un carbohidrato y electrolitos.
5. Una preparación de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la cantidad de cascara de Isphagula está en el intervalo de 10-40% en peso, de preferencia 15-35% en peso, más preferiblemente 25-30% en peso.
6. Una preparación de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la cantidad de al menos un aminoácido está en el intervalo de 1-12% en peso, de preferencia 2-9% en peso, más preferiblemente 3-7% en peso.
7. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la cantidad de carbohidrato está en el intervalo de 25-50% en peso, de preferencia 30- 45% en peso, más preferiblemente 35-40% en peso.
8. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la cantidad del electrolito está en el intervalo de 8-40% en peso, de preferencia 12-30% en peso, más preferiblemente 15-25% en peso.
9. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde al menos un aminoácido está comprendido en los componentes solubles de la levadura láctica.
10. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, que comprende al menos un aminoácido seleccionado del grupo que consiste de todos los aminoácidos conocidos, de preferencia en al menos un aminoácido seleccionado del grupo que consiste de glutamina, arginina, lisina, histidina, fenilalanina, tirosina, leucina, isoleucina, metionina, valina, alanina, glicina, prolina, ácido glutámico, serina, treonina, ácido aspártico, triptofano, cistina, más preferiblemente al menos un aminoácido seleccionado del grupo que consiste de glutamina, arginina, alanina y glicina.
11. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde la cantidad de glutamina está en el intervalo de más de 10% en peso, de preferencia más de 5% en peso, más preferiblemente 0.1-4% en peso, incluso más preferiblemente 0.2-3% en peso.
12. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde la cantidad de arginina está en el intervalo de más de 5 % en p eso. d e preferencia más del 3% en peso, más preferiblemente 0.1-2% en peso, incluso más preferiblemente.1-0.5% en peso.
13. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde al menos una de las sales está comprendida por los electrolitos y está en al menos una de las sales las cuales se reemplazarán en al menos una de las sales pérdida por la diarrea.
14. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde dicho al menos carbohidrato es glucosa.
15. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde los electrolitos son una mezcla de al menos dos sustancias seleccionadas del grupo que consiste de óxido de magnesio, hidróxido de carbonato de magnesio, hidróxido de magnesio, silicato de magnesio, silicato de calcio, carbonato de calcio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, carbonato de hidrógeno de sodio, carbonato de hidrógeno de potasio, fosfato de aluminio, hidróxido de aluminio, ácido cítrico, citrato de sodio, bihidrato de citrato de trisodio y citrato de potasio.
16. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde los electrolitos son una mezcla de al menos dos de las sustancias seleccionadas del grupo que consiste de hidróxido de magnesio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, carbonato de hidrógeno de sodio, ácido cítrico, bihidrato de citrato de trisodio y citrato de sodio.
17. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, que además comprende al menos un agente de relleno, en al menos un corrector del sabor en al menos un agente colorante.
18. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, que además comprende un agente de relleno.
19. Una preparación de conformidad con la reivindicación 18, en donde el relleno es material de salvado fibroso.
20. Una preparación de conformidad con la reivindicación 18, en donde el agente de relleno es harina de trigo.
21. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, que además comprende un agente colorante farmacéuticamente aceptable.
22. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde el agente colorante es FD&C Rojo # 40.
23. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, que además comprende alfa-tocoferol (vitamina E natural).
24. Una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes, en donde dicha preparación consiste de 27.16% de Cascara de Isphagula, 10.66% de mezcla levadura láctico incluyendo glutamina, 19.75% de electrolitos que se aumentan a más de 3.30% de cloruro de potasio, 7.08% de carbonato de hidrógeno de sodio, 4.85% de cloruro de sodio, 3.45% de bihidrato de citrato de trisodio, 1.07% de hidróxido de magnesio, 38.10% de monohidrato de dextrosa, 0.87% de nicotinamida, 0.30% de agente saborizante, 0.20% de dióxido de silicio, 2.43% de harina de trigo, 0.03% de agente colorante para alimento, 0.50% de alfa-tocoferol (vitamina E natural), en donde el porcentaje en peso se calcula en base de la preparación terminada.
25. El uso de una preparación de conformidad con cualesquiera de una de las reivindicaciones precedentes para la fabricación de un medicamento para tratar la diarrea.
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