MXPA04003239A - Metodo para tratar la fibrosis hepatica y la infeccion de virus de hepatitis c. - Google Patents

Abstract

La presente invencion proporciona metodos para reducir la fibrosis hepatica; metodos para aumentar la funcion hepatica en un individuo que padece de fibrosis hepatica; metodos para reducir la incidencia de complicaciones asociadas con VHC y cirrosis del higado; metodos para reducir la carga viral, y metodos para tratar una infeccion de VHC. Los metodos generalmente incluyen administrar una cantidad terapeuticamente eficaz de IFN-a e IFN-? concurrentemente.

Description

MÉTODOS PARA TRATAR LA FIBROSIS HEPÁTICA Y LA INFECCIÓN DE VIRUS DE HEPATITIS C CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se encuentra en el campo de fibrosis hepática e infección de virus de hepatitis C.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La fibrosis ocurre como resultado de un ataque tóxico crónico al hígado, tal como la infección de virus de hepatitis C crónica (VHC), lesión autoinmune, y exposición crónica a toxinas tales como el alcohol. El ataque tóxico crónico conduce a ciclos repetidos de lesión de hepatocitos y condición lograda por inflamación crónica. Durante un período variable de tiempo, la matriz extracelular anormal progresivamente se acumula como una consecuencia de la respuesta de la condición de la herida del huésped. Al dejar de revisar, esto conduce a la deposición en aumento del material fibroso hasta que la arquitectura del hígado llega a distorsionarse y la habilidad regeneradora del hígado se compromete. La acumulación progresiva del tejido de cicatriz dentro del hígado finalmente da como resultado la fotografía histopatológica de la cirrosis, definida como la formación del tabicado fibroso a través del hígado con la formación de micronódulos. La infección de virus de hepatitis C (VHC) es la infección soportada por sangre crónica más común en los Estados Unidos. A pesar de que los números de nuevas infecciones se han declinado, el peso de la infección crónica es sustancial, con estimados de los Centros para el Control de la Enfermedad de 3.9 millones (1 8%) de personas infectada en los Estados Unidos. La enfermedad de hígado crónica es la décima causa conductora de muerte entre adultos en los Estados Unidos, y cuenta por aproximadamente 25,000 muertes anualmente, o aproximadamente 1 % de todas las muertes. Los estudios indican que 40% de la enfermedad de hígado Crónica se relaciona por VHC, dando como resultado un estimado de 8,000-1 0,000 muertes cada año. La enfermedad del hígado de etapa terminal asociada por VHC es la indicación más frecuente para el transplante de hígado entre adultos. La terapia antiviral de la hepatitis C crónica se ha desarrollado rápidamente durante la última década, con mejoras significantes observadas en la eficacia de tratamiento. Sin embargo, aún con la terapia de combinación que utiliza ribavirina plus de IFN-a pegilatada, 40% a 50% de los pacientes fallan la terapia, es decir, son no respondedores o reincidentes. Estos pacientes actualmente no tienen alternativa terapéutica eficaz. En particular, los pacientes que tienen cirrosis o fibrosis avanzada sobre la biopsia hepática se encuentran en riesgo significante de desarrollar complicaciones de enfermedad del hígado avanzada, incluyendo, ascitis, ictericia, sangrado variceal , encefalopatía, y falla de hígado progresiva, así como también un riesgo marcadamente aumentado del carcinoma hepatocelular. La alta prevalencia de la infección de VHC crónica tiene implicaciones de salud pública importantes para el futuro esencial de la enfermedad de hígado crónica en los Estados Unidos. Los datos derivados de la Encuesta Nutrición y Salud (NHANES IH) indican que un de nuevas infecciones de VHC ocurrió a finales de 1 960 y a principios de 1980, particularmente entre las personas entre 20 a 40 años de edad. Se estima que el número de personas con infección de VHC de péff|¾pnencia larga de 20 años o más podría ser más que el cuádruplo de 1 990 a 2015, de 750 ,000 a más de 3 millones. El aumento proporcional en personas infectadas por 30 a 40 años podría ser aún mayor. Ya que el riesgo de la enfermedad de hígado crónica relacionada por VHC se relaciona a la duración de la infección , con el riesgo de que la cirrosis aumente progresivamente para personas infectadas por más de 20 años, esto dará como resultado un aumento sustancial en la mortalidad y morbidez relacionada a la cirrosis entre los pacientes infectados entre los años de 1965-1 985. Existe una necesidad en la materia de métodos mejorados para tratar las enfermedades del hígado tal como la fibrosis así como también para tratar la infección de VHC. La presente invención señala esta necesidad, y proporciona ventajas relacionadas.

Literatura METAVIR (1 994) Hepatology 20: 15-20; Brunt (2000) Hepatol. 31 :241 -246; Alpini (1 997) J. Hepatol. 27:371 -380; Baroni et al. (1996) Hepatol. 23: 1 1 89-1 199; Czaja ef al. , (1989) Hepatol 10:795-800; Grossman et al. (1998) J. Gastroenterol. Hepatol. 13: 1058-1060; Rockey y Chung (1994) J. Invest. Med. 42:660-670; Sakaida ef al. (1 998) J. Hepatol. 28:471 -479; Shi et al. (1997) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 94: 10663-10668; Baroni eí al. (1999) Liver 19:212-219; Lortat-Jacob ef al. (1997) J. Hepatol. 26:894-903; Llorent et al. , (1996) J. Hepatol 24:555-563; Patente de E.U. No. 5,082,659; Solicitud de Patente Europea EP 294,160; Patente de E.U. No. 4,806,347; Balish ef al. (1992) J. Infect. Diseases 166: 1401 -1403; Katayama et al. (2001 ) J. Viral Hepatitis 8: 180-1 85; Patente de E. U. No. 5,082,659; Patente de E.U. No. 5, 190,751 ; Patente de E. U. No. 4,806,347; andl et al. (1992) Br. J. Haematol. 81 :516-519; Solicitud de Patente Europea No. 294, 160; Patente Canadiense No. 1 ,321 ,348; Solicitud de Patente Europea No. 276,120; Wandl eí al. (1992) Sem. Oncol. 19:88-94; Balish eí al. (1992) J. Infectious Diseases 166: 1401 -1403; Van Dijk eí al. (1994) Int. J. Cáncer 56:262-268; Sundmacher eí al. (1987) Current Eye Res. 6:273-276.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona los métodos para tratar la infección de virus de hepatitis (VHC); métodos para reducir la fibrosis hepática; métodos para aumentar la función hepática en un individuo que padece de la fibrosis hepática; métodos para reducir la incidencia de complicaciones asociadas con VHC y cirrosis del hígado; métodos para reducir la carga viral. Los métodos generalmente incluyen administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-? concurrentemente.

CARACTERÍSTICAS DE LA INVENCIÓN La invención se caracteriza por un método para tratar la infección de virus de hepatitis C (VHC), generalmente incluyendo á^^nistrar a un individuo IFN-? e IFN-a concurrentemente y en una cantidad eficaz para lograr una respuesta viral sostenida. La invención se caracteriza por un método para reducir la fibrosis hepática en un individuo, generalmente incluyendo administrar IFN-a e IFN-? concurrentemente y en una cantidad eficaz para reducir la fibrosis hepática. En algunas modalidades, el grado de fibrosis hepática se determina por el pre-tratamiento y post-tratamiento en etapas por una biopsia hepática, en donde la etapa de fibrosis hepática, según se mide por un sistema de registro estandarizado, se reduce por al menos una unidad cuando se compara el pre-tratamiento con las biopsias hepáticas de post-tratamiento. La invención también se caracteriza por un método para aumentar la función hepática en un individuo que padece de la fibrosis hepática, generalmente incluyendo administrar IFN-a e IFN-? en una cantidad eficaz para aumentar una función hepática. La función hepática puede indicarse al medir un parámetro seleccionado del grupo que consiste de nivel de transaminasa de suero, tiempo de protrombina, nivel de bilirrubina de suero, conteo de plaquetas de sangre , nivel de albúmina de suero, mejora en presión de cuña de portal, reducción en grado de ascitis, reducción en un nivel de encefalopatía, y reducción en un grado de varices internas. La invención también se caracteriza por un método para reducir la incidencia de una complicación de cirrosis del hígado. Los métodos generalmente incluyen administrar IFN-a e I FN-? en una cantidad eficaz para reducir la incidencia de una complicación de cirrosis del hígado. Los ejemplos de las complicaciones de cirrosis hipertensión portal, insuficiencia heJ pea progresiva, y carcinoma hepatocelular. Al llevar a cabo los métodos anteriormente descritos, IFN-a e IFN-? se administran al individua En algunas modalidades, la IFN-a e IFN-? se administran en la misma formulación. En otras modalidades, IFÑ-a e IFN-? se administran en formulaciones separadas. Cuando se administran en formulaciones separadas, la IFN-a e IFN-? pueden administrarse sustancialmente de manera simultánea, o pueden administrarse dentro de aproximadamente 24 horas entre sí. En varias modalidades, la IFIM-a e IFN-? se administran subcutáneamente en múltiples dosis. Las dosis de I FN-? varían de aproximadamente 25 µg dosis a aproximadamente 300 µg/dosis. Las dosis eficaces de IFN-a de consenso incluyen aproximadamente 3 µg, aproximadamente 9 µg , aproximadamente 1 5 µg , aproximadamente 1 8 µg, o aproximadamente 27 µg por dosis. Las dosis eficaces de I FN-a2a e IFN-a2b varían de 3 millones de unidades internacionales (M IU) a 1 0 M IU por dosis. Las dosis eficaces de IFN- 2a PEGilatada varían de 90 a 180 µg por dosis. Las dosis eficaces de IFN-a2b PEGilatada varían de 0.5 µg/kg de peso corporal a 1 .5 µg/kg de peso corporal por dosis. En varias modalidades, IFN-a e I FN-? se administra por un período de al menos tres meses, y puede administrarse durante períodos más largos de tiempo. En algunas modalidades, la IFN-? se administra durante el curso completo del tratamiento de IFN-a. En otras modalidades, IFN-? se administra por un período de tiempo que se recubre con aquel del tratamiento de IFN-a, por ejetf|Íg, el tratamiento IFN-? puede comenzar antes de que el tratamiento de IFr¾ g¡comience y terminar antes de que el tratamiento de IFN-a termine; el tratamiento de IFN-? puede comenzar antes de que el tratamiento de IFN-a comífnce y terminar después de que el tratamiento de IFN-? termine; el tratamiento de IFN-? puede comenzar después de que el tratamiento de IFN-a comience y terminar antes de que el tratamiento de IFN-a termine; o el tratamiento de IFN-? puede comenzar antes de que el tratamiento de IFN-a comience y terminar antes de que el tratamiento de IFN-ot termine. En otras modalidades, la ribavirina se administra además de IFN- e IFN-?.

DEFINICIONES Según se utiliza en la presente, el término "fibrosis hepática", utilizado intercambiablemente en la presente con "fibrosis de hígado", se refiere al crecimiento de tejido de cicatriz en el hígado que puede ocurrir en el contexto de una infección de hepatitis crónica. Los términos "individuo", "huésped", "sujeto", y "paciente" se utilizan intercambiablemente en la presente, y se refieren a un mamífero, incluyendo, pero no limitándose a, primates, incluyendo simios y humanos. Según se utiliza en la presente, el término "función hepática" se refiere a una función normal del hígado, incluyendo, pero no limitándose a, una función sintética, incluyendo, pero no limitándose a, síntesis de las proteínas tales como las proteínas de suero (por ejemplo, albúmina, factores de coagulación, fos||tasa alcalina , aminotransferasas (por ejemplo, transaminasa de aliaba, transaminasa de aspartato), 5'-nucleosidasa, y-glutaminiltranspeptiffasa, etc.), síntesis de bilirrubina , síntesis de colesterol, y síntesis de ácidos biliares; una función metabólica de hígado, incluyendo, pero no lirffitándose a, metabolismo de carbohidrato, metabolismo de áfconio y aminoácido, metabolismo de hormona, y metabolismo lípido; destoxificación de fármacos exógenos; una función hemodinámica , incluyendo hemodinámica portal y visceral; y lo similar. El término "respuesta viral sostenida" (SVR; también referida como una "respuesta sostenida" o una "respuesta durable"), según se utiliza en la presente, se refiere a la respuesta de un individuo a un régimen de tratamiento para la infección de VHC, en términos de concentración de VHC de suero. Generalmente, una "respuesta viral sostenida" se refiere a ARN VHC no detectable (por ejemplo, menos de aproximadamente 500, menos de aproximadamente 200, o menos de aproximadamente 100 copias de genoma por mililitro de suero) encontrado en el suero del paciente por un período de al menos aproximadamente un mes, al menos aproximadamente dos meses, al menos aproximadamente tres meses, al menos aproximadamente cuatro meses, al menos aproximadamente cinco meses, o al menos aproximadamente seis meses siguiendo la cesación del tratamiento. "Pacientes de falta de tratamiento" según se utiliza en la presente, generalmente se refiere a pacientes infectados por VHC que fallan en responder a la terapia previa para VHC (referidos como "no "reincidentes"). La terapia prev ^generalmente puede incluir el tratamiento con la monoterapia de IFN-a o terapia de combinación de IFN- , en donde la terapia de combinación puede incluir la administración de IFN-a y un agente antiviral tal como ribavirina . Según se utiliza en la presente, los términos "tratamiento", "tratar", y lo similar, se refieren a obtener un efecto fisiológico y/o farmacológico deseado. El efecto puede ser profiláctico en términos de prevenir completa o parcialmente una enfermedad o síntoma de la misma y/o puede ser terapéutico en términos de una cura parcial o completa para una enfermedad y/o efecto adverso atribuible a la enfermedad . El "tratamiento", según se utiliza en la presente, cubre cualquier tratamiento de una enfermedad en un mamífero, particularmente en un humano , e incluye: (a) prevenir a la enfermedad de originarse en un sujeto que puede predisponerse a la enfermedad pero que todavía no ha sido diagnosticado como que la tiene; (b) inhibir la enfermedad, es decir, detener su desarrollo; y (c) aliviar la enfermedad , es decir, originando la regresión de la enfermedad. Los términos "individuo", "huésped", "sujeto", y "paciente" se utilizan intercambiablemente en la presente, y se refieren a un mamífero, incluyendo, pero no limitándose a, murinos, simios, humanos, animales de granja mamíferos, animales de deporte mamíferos, y mascotas mamíferas. Antes de que la presente invención se describa más, se entenderá que esta invención no se limita a las modalidades en particular fffi ¾if,i¡iírlititia f. r se entenderá propósito de describir las modalidades en particu½r solamente, y no se pretende que sean limitantes, ya que el alcance de la presente invención se limitará solamente por las reivindicaciones anexas. En donde un rango del^alores se proporciona, se entiende que cada valor intermedio, a la décima de la unidad del límite inferior al menos que el contexto lo dicte claramente de otra forma, entre el límite inferior y superior de ese rango y cualquier otro valor intermedio o establecido en ese rango establecido, se comprende dentro de la invención. Los límites, inferior y superior, de estos rangos más pequeños pueden incluirse independientemente en los rangos más pequeños, y también se comprenden dentro de la invención , sometidos a cualquier límite específicamente excluido en el rango establecido. En donde el rango establecido incluye uno o ambos lím ites, los rangos que excluyen cualquiera o ambos de aquellos límites incluidos también se incluyen en la invención. Al menos que se defina de otra forma, todos los términos científicos y técnicos utilizados en la presente tienen el mismo significado según se entiende comúnmente por un experto en la materia a quien pertenece esta invención . A pesar de que cualquiera de los métodos y materiales similares o equivalentes a aquellos descritos en la presente también pueden utilizarse en la práctica o prueba de la presente invención , los materiales y métodos preferidos ahora se describen . Todas las publicaciones mencionadas en la presente se incorporan en la presente para referencia a fin de describir los métodos y/o materiales en relación con las publicaciones que se citan. Debe señalarse que según se utiliza en la presente y en las reivindicaciones anexas, las formas singulares "una", "y", y "el" incluyen referencias plurales al menos que el contexto claramente lo dicte de otra forma. De esta manera , por ejemplo, la referencia a "un método" incluye una pluralidad de tales métodos y la referencia á "una dosis" incluye la referencia a una o más dosis y equivalentes de las mismas conocidas por aquellos expertos en la materia, y así sucesivamente. Las publicaciones discutidas en la presente se proporcionan solamente para su descripción antes de la fecha de presentación de la presente solicitud. Nada en la presente deberá interpretarse como una admisión que la presente invención no se titula para preceder tal publicación por virtud de la invención anterior. Además, las fechas de publicación proporcionadas pueden ser diferentes de las fechas de publicación actuales que no necesitan confirmarse independientemente.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona métodos para tratar la infección de VHC, métodos para tratar la fibrosis hepática, incluyendo reducir la fibrosis hepática clínica , reducir la probabilidad de que la fibrosis hepática ocurrirá , y reducir un parámetro asociado con la fibrosis hepática. Los métodos generalmente incluyen administra una cantidad eficaz de IFN-a e I FN-? a un individuo en necesidad del mismo. La terapia de combinación tiene efectos sinergísticos que son más eficaces que IFN-a e IFN-? solo. De particular interés en var½ modalidades de humanos. f| La fibrosis hepática es " un precursor a las complicaciones asociadas con la cirrosis hepática, tal como hipertensión portal, insuficiencia hepática progresiva, y carcinoma hepatocelular. Una reducción en la fibrosis hepática de esta manera reduce la incidencia de tales complicaciones futuras. De acuerdo con lo anterior, la presente invención además proporciona métodos para reducir la probabilidad de que un individuo desarrollará complicaciones asociadas con cirrosis del hígado. Los presentes métodos generalmente incluyen administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-?. Según se utiliza en la presente, una "cantidad terapéuticamente eficaz" de la combinación de IFN-a e IFN-? es una cantidad de IFN-a e IFN-? que es eficaz en el tratamiento de una infección de VHC, en el logro de una respuesta viral sostenida, en la reducción de fibrosis hepática; y/o que es eficaz en la reducción de la probabilidad de que un individuo desarrollará fibrosis hepática; y/o que es eficaz en la reducción de un parámetro asociado con fibrosis hepática; y/o que es eficaz en la reducción de un desorden asociado con cirrosis del hígado.

Virus De Hepatitis C La presente invención proporciona los métodos para tratar VHC. Los métodos generalmente incluyen administrar IFN-a e IFN-? a un individuo en una cantidad que es eficaz para reducir la carga viral en el individuo, y para lograr una respuesta viral sostenida. a , fibrosis hepática, elevaciones en niveles de transaminasa de suero, y actividad necroinflamatoria en el hígado. Los indicadores de la fibrosis La carga viral puede medirse al medir la concentración o nivel de virus en suero. Estos métodos incluyen , pero no se limitan a, una reacción en cadena de polimerasa cuantitativa (PCR) y una prueba de ADN ramificado (bADN). Los ensayos cuantitativos para medir la carga viral (concentración) de ARN VHC, se han desarrollado. Varios de tales ensayos se encuentran comercialmente disponibles, incluyendo un PCR de transcripción inversa cuantitativa (RT-PCR) (Amplicor VHC Monitor™, Roche Molecular Systems, New Jersey); y un ensayo de amplificación de señal de ADN ramificado (ácido deoxiribonucléico) (Quantiplex™ VHC RNA Assay (bDNA), Chiron Corp. , Emeryville, California). Ver, por ejemplo, Gretch et al. (1995) Ann. Intern. Med. 1 23: 321 -329. general, u na cantidad eficaz de IFN-a e I FN-? es una cantidad que es eficaz para reducir la carga viral a niveles no detectables, por ejemplo, menos que aproximadamente 5000, menos que aproximadamente 1 000, menos que aproximadamente 500, o menos que aproximadamente 200 copias de genoma/mL de suero. En algunas modalidades, una cantidad eficaz de IFN-a e IFN-? es una cantidad que es eficaz para reducir la carga viral a menos de 1 00 copias de genoma/mL de suero. En varias modalidades, los métodos de la invención logran una viral sostenida, por ejemplo, la carga viral se reduce a niveles no detectables por un período de al rtilnos aproximadamente un mes, al menos aproximadamente dos meses, al menos aproximadamente tres nos aproximadamente cuatro meses, al menos cinco meses, o al menos aproximadamente seis meses siguiendo la cesación del tratamiento. Según se señala anteriormente, si un método sujeto es eficaz en el tratamiento de una infección de VHC puede determinarse al medir un parámetro asociado con la infección de VHC, tal como fibrosis hepática. Los métodos para determinar el grado de fibrosis hepática se discuten a detalle abajo. En algunas modalidades, el nivel de un marcador de suero de fibrosis hepática indica el grado de fibrosis hepática. Como un ejemplo no limitante, los niveles de aminotransferasa de alanina de suero (ALT) se miden, utilizando ensayos estándares. En general, un nivel de ALT de menos de aproximadamente 45 unidades internacionales se considera normal. En algunas modalidades, una cantidad eficaz de IFN-a e I FN-? es una cantidad eficaz para reducir los niveles de ALT a menos de aproximadamente 45 lU/mL de suero. Una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-? es una cantidad que es eficaz para reducir un nivel de suero de un marcador de fibrosis hepática por al menos aproximadamente 10%, al menos aproximadamente 20% , al menos aproximadamente 25%, al menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 35%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente 45%, al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 55%, al menos aproximadamente 60%, al menos aprontadamente 65% ' '*^f nrerí< » aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 75%, o al menos aproximadamente 80%, o más, en comparación al nivel del marcador en un individuo sin tratar, o a un individuo tratado por placebo. Los métodos para medir los marcadores de suero incluyen métodos de base linmunológica, por ejemplo, ensayos inmunoabsorbentes enlazados por tzima (ELISA), radioinmunoensayos, y lo similar, utilizando el anticuerpo específico para un marcador de suero dado.

Fibrosis Si el tratamiento con IFN-a e IFN-? es eficaz en la reducción de la fibrosis hepática se determina por cualquiera de un número de técnicas bien establecidas para medir la fibrosis hepática y la función hepática. La reducción de la fibrosis hepática se determina al analizar una muestra de biopsia hepática. Un análisis de una biopsia hepática comprende las valoraciones de dos principales componentes: necroinflamación valorada por "grado" como una medida de la severidad y actividad de enfermedad activa, y las lesiones de la fibrosis y el remoldeo vascular o parenquimal según se valora por la "etapa" por encontrarse reflectante del avance de la enfermedad a largo plazo. Ver, por ejemplo, Brunt (2000) Hepatol. 31 :241 -246; y METAVIR (1994) Hepatology 20: 15-20. En base al análisis de la biopsia hepática, se asigna un registro. Un número de sistemas de registro estandarizados existen, los cuales proporcionan una valoración cuantitativa del grado y severidad de la fibrosis. Estos incluyen los sistemas de registro METAVIR, Kno.dell, Scheuer, Ludwig , e Ishak. El sistema de registro se basa en el análisis de diversas características de una biopsia hepática, incluyendo la fibrosis (fibrosis portal , fibrosis centrilobular, y cirrosis); necrosis (necrosis lobular y en pedazos, retracción acidofílica, y degeneración de hinchazón); inflamación (inflamación de tracto de portal, agregados linfoides de portal, y distribución de la inflamación de portal); cambios de ducto biliar; y el índice Knodell (registros de necrosis periportal, necrosis lobular, inflamación de portal, fibrosis, y actividad de enfermedad global). Las definiciones de cada etapa en el sistema METAVIR son como sigue: registro: 0, sin fibrosis; registro: 1 , alargamiento estelar de la extremidad reforzada de tracto de portal sin formación de tabiques; registro: 2 , alargamiento del tracto de portal con formación de tabiques raros; registro: 3, numerosos tabiques sin cirrosis; y registro:4, cirrosis. El sistema de registro de Knodell, también llamado el índice de Actividad de Hepatitis, clasifica los especímenes en base a los registros en cuatro categorías de características histológicas: I. Necrosis de puenteo y/o Periportal; II. Necrosis focal y degeneración intralobular; I II . Inflamación de portal; y IV. Fibrosis. En el sistema en etapas de Knodell, los registros son como sigue: registro: 0, sin fibrosis; registro: 1 , fibrosis media (expansión de portal fibroso); registro: 2 , fibrosis moderada; registro: 3, fibrosis severa (fibrosis de puenteo); y registro: 4, cirrosis. Mientras más alto el registro, más severo el daño de tejido de hígado. Knodell (1 981 ) Hepatol. 1 :431 . En el sistema de registro de Scheuer, los registros son como sigue: registro: 0, de portal fibrótico, alargado; registro: o periportal, pero arquitectura intacta; arquitectónica, pero sin cirrosis obvia; registro: 4, cirrosis definitiva o probable. Scheuer (1991 ) J. Hepatol. 13:372. El sistema de registr¾Jde Ishak se describe en Ishak (1995) J. Hepatol. 22:696-699. Etapa 0, Sin fibrosis; Etapa 1 , Expansión fibrosa de algunas áreas de portal, con o sin tabiques fibrosos cortos; etapa 2, Expansión fibrosa de la mayoría de las áreas de portal, con o sin tabiques fibrosos cortos; etapa 3, Expansión fibrosa de la mayoría de las áreas de portal con portal ocasional a puente de portal (P-P); etapa 4, Expansión fibrosa de áreas de portal con puenteo marcado (P-P) así como también portal-central (P-C); etapa 5, puenteo marcado (P-P y/o P-C) con nodulos ocasionales (cirrosis incompleta); etapa 6, Cirrosis, probable o definitiva. El beneficio de la terapia anti-fibrótica también puede medirse y valorarse al utilizar el sistema de registro Child-Pugh que comprende un sistema de punto multicomponente en base a las anormalidades en nivel de bilirrubína de suero, nivel de albúmina de suero, tiempo de protrombina, la presencia y severidad de ascitis, y la presencia y severidad de encefalopatía. En base a la presencia y severidad de la anormalidad de estos parámetros, los pacientes pueden colocarse en una de tres categorías de severidad en aumento de la enfermedad clínica: A, B, o C. En algunas modalidades, una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-? es una cantidad de IFN-a e IFN-? que efectúa un cambio de una unidad o más en la etapa de fibrosis en base a las biopsias hepáticas de pre- y post-terapia. En las modalidades en ai $f pjÉ una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-? reduce la fibrosis hepática por al menos una unidad en el sistema de registro METAVIR, Knodell, Scheuer, Ludwig, o Ishak. Los índices secundarios, o indirectos, de la función hepática también pueden utilizarse para evaluar la eficacia del tratamiento de IFN-a e IFN-?. La valoración semi-automática computarizada morfométrica del grado cuantitativo de la fibrosis hepática en base a la coloración específica de colágeno y/o marcadores de suero de fibrosis hepática también pueden medirse como una indicación de la eficacia de un método de tratamiento sujeto. Los índices secundarios de la función hepática incluyen, pero no se limitan a, los niveles de transaminasa de suero, tiempo de protrombina , bilirrubina , conteo de plaquetas, presión de portal, nivel de albúmina , y valoración del registro Child-Pugh . Una cantidad eficaz de IFN-a e IFN-? es una cantidad que es eficaz para aumentar un índice de función hepática por al menos aproximadamente 10%, al menos aproximadamente 20%, al menos aproximadamente 25%, al menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 35%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente 45%, al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 55%, al menos aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 65%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 75%, o al menos aproximadamente 80% , o más, en comparación al índice de la función hepática en un individuo sin tratar, o a un individuo tratado por placebo. Aquellos expertos en la materia pueden medir fácilmente tales índices de rutinariamente en establecimientos CMTIÍCOS. Los marcadores de suero de la fibrosis hepática también pueden medirse como una indicación d !la eficacia de un método de tratamiento sujeto. Los marcadores de suero de la fibrosis hepática incluyen, pero no se limitan a, hialuronato, peptido procolágeno III de terminal N, dominio 7S de colágeno tipo IV, peptido procolágeno I de terminal C, y laminina. Los marcadores adicionales de la fibrosis de hígado incluyen a-2-macroglobulina, haptoglobina, globulina gamma, apolipoproteína A, y transpeptidasa de glutamil gamma. Una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-? es una cantidad que es eficaz para reducir un nivel de suero de un marcador de fibrosis hepática por al menos aproximadamente 10%, al menos aproximadamente 20%, al menos aproximadamente 25%, al menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 35%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente 45%, al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 55%, al menos aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 65%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 75%, o al menos aproximadamente 80%, o más, en comparación al nivel del marcador en un individuo sin tratar, o a un individuo tratado por placebo. Aquellos expertos en la materia pueden medir fácilmente tales marcadores de suero de fibrosis hepática, utilizando los métodos de ensayo estándares, varios de ¡os cuales se encuentran comercialmente disponibles, y se utilizan rutinariamente en establecimien Los métodos para f^^ir los marcadores de suero ^ y n. métodos de base inmunológica , por ejemplo, ensayos inmunoabsorbentes enlazados por enzima (ELISA), radioinmunoensayos, y lo similar, utilizando anticuerpo específico para un marcador de suero dado. Las pruebas cuantitativas de la reserva de hígado funcional también pueden utilizarse para valorar la eficacia del tratamiento con IFN-a e IFN-?. Estas incluyen: eliminación verde de indocianina (ICG) , él* capacidad de eliminación de galactosa (GEC), prueba de aliento de aminopirina (ABT), eliminación de antipirina, eliminación de monoetilglicina-xilidida (MEG-X), y la eliminación de cafeína. Según se utiliza en la presente, una "complicación asociada con la cirrosis del hígado" se refiere a un desorden que es una secuela de la enfermedad de hígado descompensado, es decir, u ocurre subsecuentemente en y como resultado del desarrollo de fibrosis hepática, e incluye, pero no se limita al, desarrollo de ascitis, sangrado variceal, hipertensión portal, ictericia, insuficiencia hepática progresiva, encefalopatía , carcinoma hepatocelular, falla de hígado que requiere el transplante de hígado, y mortalidad relacionada al hígado. Una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN- e IFN-? es una cantidad que es éficaz en la reducción de la incidencia (por ejemplo, la probabilidad de que un individuo desarrollará) de un desorden asociado con cirrosis del hígado por al menos aproximadamente 10%, al menos aproximadamente 20%, al menos aproximadamente 25% , al menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 35%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente aproximadamente 50%, al mert s aproximadamente aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 65%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 75%, o al menos aproximadamente 80% , o más, en comparación a un individuo sin tratar, o a un individuo sin tratar placebo. Si el tratamiento con IFN-a e IFN-? es eficaz en la reducción de la incidencia de un desorden asociado con cirrosis del hígado, puede determinarse fácilmente por aquellos expertos en la materia. La reducción en la fibrosis de hígado aumenta la función hepática. De esta manera, la invención proporciona los métodos para aumentar la función hepática, generalmente incluyendo administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-?. Las funciones hepáticas incluyen , pero no se limitan a, síntesis de proteínas tales como proteínas de suero (por ejemplo, albúmina, factores de coagulación , fosfatasa alcalina, aminotransferasa (por ejemplo, transaminasa de alanina, transaminasa de aspartato), 5'-nucleosidasa, ?-glutaminiltranspeptidasa , etc.), síntesis de bilirrubina, síntesis de colesterol, y síntesis de ácidos biliares; una función metabólica hepática, incluyendo, pero no limitándose a metabolismo de carbohidrato, metabolismo de amonio y aminoácido, metabolismo de hormona, metabolismo lípido; destoxificación de fármacos exógenos; una función hemodinámica , incluyendo hemodinámica portal y visceral; y lo similar. Si se aumenta una función de hígado es fácilmente verificable por aquellos expertos en la materia, utilizando las pruebas bien establecidas de la función h ca. De esta manera, la síntesis de los marcadores de la función albúmina, fosfatasa alcalina, transaminasa de alanina, aspartato, bilirrubina, y lo similar, puede valorarse al medir el nivel de estos marcadores en el suero, utilizando ensayos enzimáticos e inmunológicos estándares. La circulación visceral y hemodinám^ de portal puede medirse por la presión de cuña de portal y/o resistencia utilizando los métodos estándares. Las funciones metabóiicas pueden medirse al medir el nivel de amonio en el suero. Si las proteínas de suero normalmente secretadas por el hígado se encuentran el rango normal, pueden determinarse al medir los niveles de tales proteínas, utilizando los ensayos enzimáticos e inmunológicos estándares. Aquellos expertos en la materia saben los rangos normales para tales proteínas de suero. Los siguientes son ejemplos no limitantes. El nivel normal de transaminasa de alanina es aproximadamente 45 IU por mililitro de suero. El rango normal de transaminasa de aspartato es de aproximadamente 5 a aproximadamente 40 unidades por litro de suero. La bilirrubina se mide utilizando los ensayos estándares. Los niveles de bilirrubina normales usualmente son menores a aproximadamente 1 .2 mg/dL. Los niveles de albúmina de suero se miden utilizando los ensayos estándares. Los niveles normales de albúmina de suero se encuentran en el rango de desde aproximadamente 35 a aproximadamente 55 g/L. La prolongación del tiempo de protrombina se mide utilizando los ensayos estándares. El tiempo de protrombina normal es menor a aproximadamente 4 segundos más largo que el control. aproximadamente 1 0%, al menos ' aproximadamente 2 , a menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 80%, o más. Por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFN-? es una cantidad eficaz para reducir un nivel elevado de un marcador de suero de función hepática por al menos aproximadamente 10%, al menos aproximadamente 20%, al menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 80%, o más, o para reducir el nivel del marcador de suero de la función hepática a dentro de un rango normal. Una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-? también es una cantidad eficaz para aumentar un nivel reducido de un marcador de suero de función hepática por al menos aproximadamente 10%, al menos aproximadamente 20%, al menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 80%, o más, o para aumentar el nivel del marcador de suero de función hepática a dentro de un rango normal.

Interferona-Alfa Cualquier IFN-a conocida puede utilizarse en la presente invención . El término "¡nterferona-alfa" según se utiliza refiere a una familia de polipéptidos relacionados que inhiben la duplicación viral y proliferación celular y modulan la respuesta inmune. El término "IFN-a" incluye IFN-a que ocurre naturalmente; IFN-a sintética; IFN-a derivatizada (por ejemplo, IFN-a PEGilatada , IFN-a glicosilatada, y lo similar) y análogos de IFN-a sintética o que ocurre naturalmente; esencialmente cualquier IFN-a que tiene propiedades antivirales, según se describe para la IFN-a que ocurre naturalmente. Las interferonas alfa adecuadas incluyen , pero no se limitan a , IFN-a que ocurre naturalmente (incluyendo, pero no limitándose a, IFN-a2a, IFN-a2b que ocurren naturalmente); interferona alfa-2b recombinante tal como interferona Intron-A disponible de Schering Corporation, Kenilworth , N.J ; interferona alfa-2a recombinante tal como interferona Roferon disponible de Hoffmann-La Roche, Nutley, N .J. ; interferona alfa-2C recombinante tal como interferona alfa 2 Berofor disponible de Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc. , Ridgefield, Conn.; interferona alfa-n 1 , una mezcla purificada de interferonas alfa naturales tales como Sumiferon disponible de Sumitomo, Japón o como interferona alfa-n 1 Wellferon (INS) disponible de Glaxo-Wellcome Ltd. , Londres, Gran Bretaña ; e interferona alfa-n3 una mezcla de interferonas alfa naturales elaboradas por Interferon Sciences y disponible de Purdue Frederick Co. , Norwalk, Conn . , bajo la marca Alferon. El término "IFN-a" también comprende la IFN-a consenso. La IFN-a consenso (también referida como "C IFN" e "I FN-con") comprende pero no se limita a las secuencias de aminoácidos designada IFN-con^ t < IFN-con2 e IFN-con3 las cuales se describen en las Patentes de E. U. Nos. 4,695,623 y 4,897,471 ; según se define por la determinación de una secuencia consenso de interferonas alfas que ocurren naturalmente (por ejemplo, Infergen®, Amgen, Thousand Oaks, Calif .). Las secuencias de ADN que codifican IFN-con pueden sintetizarse según se describe en las paténfes anteriormente mencionadas u otros métodos estándares. El uso de CIFN es de interés en particular. El término "IFN-a" también comprende los derivados de IFN-a que se derivan (por ejemplo, se modifican químicamente) para alterar ciertas propiedades tales como vida media del suero. Como tal, el término "IFN-a" incluye IFN-a glicosí latada; IFN-a derivada con glicol de polietileno (" IFN-a PEGilatada"); y lo similar. La IFN-a PEGilatada, y los métodos para elaborar la misma, se discute en, por ejemplo, las Patentes de E.U. Nos. 5, 382,657; 5,981 ,709; y 5,951 ,974. La IFN-a PEGilatada comprende los conjugados de PEG y cualquiera de las moléculas de IFN-a anteriormente descritas, incluyendo, pero no limitándose a, PEG conjugado en interferona alfa-2a (Roferon, Hoffman La-Roche, Nutley, N.J.) interferona alfa 2b (Intron, Schering-Plough , adison, NJ), interferona alfa-2c (Berofor Alfa, Boehringer Ingelheim, Ingelheim, Alemania); e interferona de consenso según se define por la determinación de una secuencia de consenso de interferonas alfas que ocurren naturalmente (Infergen, Amgen, Thousand Oaks, Calif ).

Interferona-Gamma Puede accederse a las secuencias de ácido nucleico que varios polipéptidos de IFN-y de mamífero son de interés, para el tratamiento de la enfermedad humana, generalmente se utilizará la proteína humana. La secuencia codificadora de IFN-? humana puede encontrarse en Genbank, núméros de acceso X1 3274; V00543; y NM_000619. La secuencia genómica correspondiente puede encontrarse en Genbank, números de accesos J00219; M37265; y V00536. Ver, por ejemplo, Gray et al. , (1982), Nature 295:501 (Genbank XI3274); y Rinderknecht et al. (1 984) J. B. C. 259:6790. La IFN-y1 b (Actimmune®; interferona humana) es un polipéptido de cadena única de 140 aminoácidos. Se elabora de manera recombinante en E. coli y no se glicosilata . Rinderknecht er al. (1 984) J. Biol. Chem. 259:6790-6797. La IFN-? a utilizarse en los métodos de la presente invención pueden ser cualquiera de las IFN-ys naturales, I FN-ys recombinantes y los derivados de las mismas mientras que tengan una actividad de IFN-?, particularmente actividad IFN-? humana. La IFN-? humana muestra las propiedades anti-proliferativas y antivirales características de las interferonas, así como también un número de otras actividades inmunomoduladoras, según se conocen en la materia. A pesar de que la IFN-? se basa en las secuencias según se proporciona anteriormente, la producción de la proteína y el procesamiento proteolítico puede dar como resultado las variantes de procesamiento de la misma. La secuencia sin procesar proporcionada por Gray er al. , supra, consiste de 166 aminoácidos (aa). A pesar de que pr&ij (4 en . coli originalmente se creyó que era (coméWatido en el aminoácido 20) se encontró subsecuentemente que la IFN-? humana nativa se divide después del residuo 23, para producir una proteína 143 aa , o 144 aa si la metionina terminal se presenta , según se requiere para la expresión en la bacteria. Durante 1$ purificación, la proteína madura puede dividirse adicionalmente en la terminal C después del residuo 162 (refiriéndose a la secuencia de Gray et al.), dando como resultado una proteína de 1 39 aminoácidos, o 140 aminoácidos si la metionina inicial se presenta, por ejemplo, si se requiere para la expresión bacteriana. La metionina de terminal N es un artefacto codificado por la señal de "inicio" translacional de mARN AUG que, en el caso en particular de la expresión de E. coli no se procesa lejos. En otros sistemas microbianos o sistemas de expresión eucarióticos, puede removerse la metionina . Para utilizarse en los métodos sujetos, cualquiera de los péptidos de IFN-? nativos, modificaciones y variantes de los mismos, o una combinación de uno o más péptidos, pueden utilizarse. Los péptidos IFN-? de interés incluyen fragmentos, y pueden truncarse de manera diversa en la terminal de carboxilo en relación a la secuencia completa. Tales fragmentos continúan mostrando las propiedades características de la interferona gamma humana, mientras que los aminoácidos 24 a aproximadamente 149 (numeración de los residuos del polipéptido sin procesar) se presentan. Las secuencias ajenas pueden sustituirse por la secuencia de aminoácidos siguiendo el aminoácido 1 55 sin la pérdida de actividad. Ver, por ejemplo, Patente de E. U. No. 5,690,925. Las porciones de IFN-? nativa incluyen moléctftgs que residuos de aminoácido 24-1 50; 24¾ff1 ; Cualquiera de estas variantes, y otras variantes conocidas en la materia y que tienen actividad IFN-?, pueden utilizarse en los presentes métodos . La secuencia del polipépliUo de IFN-? puede alterarse en diversas formas conocidas en la materia para generar los cambios de objetivo en secuencia . Un polipéptido variante usualmente será susta ncialmente similar a las secuencias proporcionadas en la presente, es decir, diferirán por al menos un aminoácido, y pueden diferir por al menos dos pero no más de aproximadamente diez aminoácidos. Los cambios de secuencia pueden ser sustituciones, inserciones o supresiones. Las mutaciones de exploración que introducen sistemática mente la alanina , u otros resid uos , pueden utilizarse para determinar los aminoácidos clave . Las sustituciones de aminoácido específicas de interés incluyen cambios conservadores y no conservadores. Las sustituciones de aminoácido conservador típicamente incluyen sustituciones dentro de los siguientes g rupos: (glicina , alanina); (valina , isoleucina , leucina); (ácido aspártico , ácido glutámico); (asparagi na , glutamina); (serina , treon ina) ; (Usina , arginina) ; o (fenila lan ina , tirosina) . Las modificaciones de interés que pueden o no pueden alterar la secuencia de aminoácidos primaria i ncluyen la derivación de los polipéptidos, por ejemplo , acetilación , o carboxilación ; cambios en la secuencia de aminoácidos que i ntroducen o remueven un sitio de glicosilación ; cambios en la secuencia de aminoácidos que hacen la proteína susceptible a la PEGilatación; y ^ similar. También se^^^^yen las modificaciones de glicosilacién, por ejemplo, aquellas elaboradas al modificar los modelos de glicosilación de un polipéptido durante su síntesis y etapas de procesamiento o en procesamiento adicional; por ejemplo, al exponer el polipéptido a enzimas que afectan la glicosilación, tales como las enzimas de deglicosiílíión o glicosilación de mamífero. También se comprenden las secuencias que tienen residuos de aminoácido fosforilatado, por ejemplo, fosfotirosina, fosfoserina, o fosfotreonina. Incluidos en la invención sujeto se encuentran los polipéptidos que se han modificado utilizando las técnicas químicas ordinarias a fin de mejorar su resistencia a la degradación proteolítica, para optimizar las propiedades de solubilidad, o para volverlas más adecuadas como un agente terapéutico. Por ejemplo, el elemento principal del peptido puede ciclizarse para mejorar la estabilidad (ver Friedler et al. (2000) J. Biol. Chem. 275:23783-23789. Pueden utilizarse los análogos que incluyen los residuos diferentes a los L-aminoácidos que ocurren naturalmente, por ejemplo, los D-aminoácidos o los aminoácidos sintéticos que no ocurren naturalmente. La proteína puede pegilatarse para mejorar la estabilidad. Los polipéptidos pueden prepararse por síntesis in vitro, utilizando los métodos convencionales según se conocen en la materia, mediante métodos recombinantes, o pueden aislarse de las células inducidas o que producen naturalmente la proteína. La secuencia particular y la manera de preparación se determinará por conveniencia, economía, pureza requerida, y lo similar. Si se desea, diversos grupos pueden introducirse en el polipéptido durante la síntesis o durante la expresión , que se permite superficie. De esta mánera, los tioéteres, histidinas para unirs^» un complejo de ión metálico, grupos carboxilo para formar amidas o (ásteres, grupos amino para formar amidas, y lo similar. Los polipéptidos también pueden aislarse y purificarse de acuerdo con los métodos converi^bnales de la síntesis recombinante. Un lisato puede prepararse del huésped de expresión y el lisato se purifica utilizando HPLC, cromatografía de exclusión , electroforesis de gel, cromatografía de afinidad, u otra técnica de purificación. Para la mayor parte, las composiciones que se utilizan comprenderán al menos 20% en peso del producto deseado, más usualmente al menos aproximadamente 75% en peso, preferentemente al menos aproximadamente 95% en peso, y para propósitos terapéuticos, usualmente al menos aproximadamente 99.5% en peso, en relación a los contaminantes relacionados al método de preparación del producto y su purificación. Usualmente, los porcentajes se basarán en la proteína total .

DOSIFICACIONES, FORMULACIONES, Y VÍAS DE ADMINISTRACIÓN La IFN-a e IFN-? se administran a individuos en una formulación con un (os) excipiente (s) farmacéuticamente aceptable (s). Una amplia variedad de excipientes farmacéuticamente aceptables se conocen en la materia y no necesitan discutirse a detalle en la presente. Los excipientes farmacéuticamente aceptables se han descrito ampliamente en una variedad de publicaciones, incluyendo, por ejemplo, A.

Gennaro (2000) "Remington: The Science and Practice edición, Lippincott, Williams, & lijÉ ns; Pharmaceutical Dosage Fowfrs and Drug Delivery Systems (1 999) H. C. Ansel ef al. eds. , 7a ed. , Lippincott, Williams & Wilkins; y Handbook of Pharmaceutical Excípients (2000) A. H . Kibbe et al. , eds. , 3a ed. Amer. Pharmacegical Assoc. Los excipientes farmacéuticamente aceptables, tales como los vehículos, adyuvantes, vehículos o diluyentes, se encuentran disponibles al público. Además, las sustancias auxiliares farmacéuticamente aceptables, tales como agentes reguladores y de ajuste de pH, agentes de ajuste de tonicidad, estabilizadores, agentes humectantes y lo similar, se encuentran fácilmente disponibles para el público. En los métodos sujeto, los agentes activos pueden administrarse al huésped utilizando cualquier medio conveniente capaz de dar como resultado el efecto terapéutico deseado. De esta manera, los agentes pueden incorporarse en una variedad de formulaciones para la administración terapéutica. Más particularmente, los agentes de la presente invención pueden formularse en composiciones farmacéuticas por combinación con diluyentes y vehículos farmacéuticamente aceptables, adecuados, y pueden formularse en preparaciones en formas sólidas, semi-sólidas, líquidas o gaseosas, tales como tabletas, cápsulas, polvos, gránulos, ungüentos, soluciones, supositorios, inyecciones, inhaladores y aerosoles. Como tal, la administración de los agentes puede lograrse en diversas maneras, incluyendo oral, bucal, rectal, parenteral, intraperitoneal, intradérmica, transdérmica, intraqueal, etc. aceptables, o también pueden utilizarse solos o en asociación adecuada , así como también en combinación, con otros compuestos farmacéuticamente activos. Los siguientes métodos y excipientes son meramente ejemplares y no son é¾hinguna manera limitantes. Para las preparaciones orales, los agentes pueden utilizarse solos o en combinación con los aditivos adecuados para elaborar tabletas, polvos, gránulos o cápsulas, por ejemplo, con aditivos convéncionales, tales como lactosa, manitol, almidón de ma íz o almidón de papa; con aglutinantes, tales como celulosa cristalina, derivados de celulosa, acacia, almidón de maíz o gelatinas; con desintegradores, tales como almidón de maíz, almidón de papa o carboximetilcelulosa de sodio; con lubricantes, tales como talco o estearato de magnesio; y si se desea, con diluyentes, agentes reguladores, agentes humectantes, conservadores y agentes saborizantes. Los agentes pueden formularse en las preparaciones para inyección al disolverlas, suspenderlas o emulsificarlas en un solvente acuoso o no acuoso, tales como aceites vegetales u otros similares, glicéridos de ácido alifático sintético, ésteres de ácidos alifáticos más altos o glicol de propileno; y si se desea, con aditivos convencionales tales como solubilizadores, agentes isotónicos, agentes de suspensión, agentes emulsificadores, estabilizadores y conservadores. Además, los agentes pueden elaborarse en supositorios al mezclarse con una variedad de bases tales como bases emulsificadoras o bases solubles en agua. Los compuestos de la presente invención puedéf administrarse rectalmente por m d o de un supositorio. El supositorio puede incluir vehículos tales como* manteca de coco, carboceras y glícoles de polietileno, que se fusionan a temperatura corporal, todavía se solidifican a temperatura ambiente. Las formas de dosis de unidad para la administración rectal u oral tales como jarabes, elíxires, y suspensiones pueden proporcionarse en donde cada unidad de dosis, por ejemplo, cucharita llena, cucharada, tableta o supositorio, contiene una cantidad predeterminada de la composición que contiene uno o más inhibidores. De igual forma, las formas de dosis de unidad para la administración intravenosa o de inyección pueden comprender los inhibidores en una composición como una solución en agua estéril, salina normal u otro vehículo farmacéuticamente aceptable. El término "forma de dosis de unidad", según se utiliza en la presente, se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias para los sujetos, animal y humano, cada unidad conteniendo una cantidad predeterminada de compuestos de la presente invención calculada en una cantidad suficiente para producir el efecto deseado en asociación con un diluyente, portador o vehículo farmacéuticamente aceptable. Las especificaciones para las nuevas formas de dosis de unidad de la presente invención dependen del compuesto en particular empleado y el efecto a lograr, y la farmacodinámica asociada con cada compuesto en el huésped. En todas las modalidades, al menos una dosis de IFN-? se administra concurrentemente con al mert é una dosis de IF - v j j$iJjfón se utiliza en la presente, el término "concurrentemente" indica que IFN-a e IFN-? se administran por separado y se administran dentro de aproximadamente 5 segundos a aproximadamente 15 segundos, dentro de aproximadamente 15 segundos a aproximadamente 30 segundos, dentro de aproximadamente 30 segundos a aproximadamente 60 segundos, dentro de aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 5 minutos, dentro de aproximadamente 5 minutos a aproximadamente 15 minutos, dentro de aproximadamente 15 minutos a aproximadamente 30 minutos, dentro de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 60 minutos, dentro de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 2 horas, dentro de aproximadamente 2 horas a aproximadamente 6 horas, dentro de aproximadamente 6 horas a aproximadamente 12 horas, dentro de aproximadamente 12 horas a aproximadamente 24 horas, o dentro de aproximadamente 24 horas a aproximadamente 48 horas entre sí. En algunas modalidades, IFN-? se administra durante el curso completo del tratamiento de IFN-a. En otras modalidades, la IFN-? se administra por un período de tiempo que se recubre con aquel del tratamiento de IFN-a, por ejemplo, el tratamiento de IFN-? puede comenzar antes de que el tratamiento de IFN-a comience y terminar antes de que el tratamiento de IFN-a termine; el tratamiento de IFN-? puede comenzar antes de que el tratamiento de IFN-a comienza y terminar después de que el tratamiento de IFN-? termine; el tratamiento de IFN-? puede comenzar después de que el tratamiento de IFN-a comience y terminar antes de que el tratamiento de IFN-a termine; o el tratamiento de IFN-? puede comenzar antes de que el tratamiento de IFN-a comience y terminar antes de que el tratamiento Las dosis eficaces de^FN-? varían de aproximadamente 0.5 µ?/??2 a aproximadamente 500 µglmz, usualmente de aproximadamente 1.5 µ9/??2 a 200 µ9/?? , dependiendo del tamaño del paciente. Esta actividad se basa en 106 unidades internacionales (IU) por 50 µg de proteína. La IFN-? puede administrarse diariamente, un día sí y un día no, tres veces a la semana, o sustancialmente de manera continua. Las dosis eficaces de IFN-a consenso incluyen aproximadamente 3 µ?, aproximadamente 9 µ9, aproximadamente 15 µ9, aproximadamente 18 µ9, o aproximadamente 27 µ9 por dosis. Las dosis eficaces de IFN-a2a e IFN-a2b varían de 3 millones de unidades internacionales (MIU) a 10 MIU por dosis. Las dosis eficaces de IFN-a2a PEGilatada varían de 90 a 180 µ9 por dosis. Las dosis eficaces de IFN-a2b PEGilatada varían de 0.5 µ? ?ßß? corporal a 1.5 µ9/?<9 de peso corporal por dosis. La IFN-a puede administrarse de manera diariamente, un día sí y un día no, una vez a la semana, tres veces a la semana, o sustancialmente de manera continua. En algunas modalidades, la IFN-a se administra en un primer régimen de dosificación, seguido por un segundo régimen de dosificación. El primer régimen de dosificación de IFN-a (también referido como "el régimen de inducción) generalmente incluye la administración de una dosis más alta de IFN-cc. Por ejemplo, en el caso de IFN-a consenso (CIFN), el primer régimen de dosificación comprende administrar CIFN a aproximadamente 9 µ9, aproximadamente 15 µ9, aproximadamente 18 µ9, o aproximadamente 27 g. El primer régimen de dosificación puede comprender un caso de dosificación única, o al menos dos o más casos de dosificación. El primer régimen de dosificación de IFN-a puede administrarse diariamente, un día sí y un día no, tres veces a la semana, o sustancialmente de manera continua a fin de lograr una concentración de suero diaria promedio deseada de IFN-a. El primer régimen de dosificación de IFN-a se administra por un primer período de tiempo, cuyo período de tiempo puede ser al menos aproximadamente 4 semanas, al menos aproximadamente 8 semanas, o al menos aproximadamente 12 semanas.} El segundo régimen de dosificación de IFN-a (también referido como "la dosis de mantenimiento") generalmente incluye la administración de una cantidad inferior de IFN-a. Por ejemplo, en el caso de CIFN, el segundo régimen de dosificación comprende administrar el CIFN al menos aproximadamente 3 µg, al menos aproximadamente 9 µg, al menos aproximadamente 1 5 µg, o al menos aproximadamente 18 µg. El segundo régimen de dosificación puede comprender un caso de dosificación única, o al menos dos o más casos de dosificación. El segundo régimen de dosificación de IFN-a puede administrarse diariamente, un día sí y un día no, tres veces a la semana, o sustancialmente de manera continua a fin de lograr una concentración de suero diaria promedio deseada de IFN-a. En algunas modalidades, en donde el régimen de dosificación de "inducción'Vmantenimiento" de IFN-a se administra, una dosis "iniciadora" de IFN-? se incluye. En estas modalidades, IFN-? se administra por un período de tiempo de aproximadamente 1 día a aproximadamente 14 días, de aproximadamente 2 días a aproximadamente 10 días, o de aproximadamente 3 días a aproximadamente 7 días, antes del comienzo del tratamiento con IFN-a. Este período de tiempo se refiere como la fase "iniciadora". En algunas de estas modalidades, el tratamiento de IFN-? se continúa a lo largo del período entero de tratamiento con IFN-a. En otras modalidades, el tratamiento de IFN-? se discontinúa antes de finalizar el tratamiento con IFN-a. En estas modalidades, el tiempo total de tratamiento con IFN-? (incluyendo la fase "iniciadora") es de aproximadamente 2 días a aproximadamente 30 días, de aproximadamente 4 días a aproximadamente 25 días, de aproximadamente 8 días a aproximadamente 20 días, de aproximadamente 10 días a aproximadamente 18 días, o de aproximadamente 12 días a aproximadamente 16 días. Todavía en otra modalidad, el tratamiento de IFN-? se discontinúa una vez que el tratamiento de IFN-ct comienza. En otras modalidades, el IFN-oc se administra en régimen de dosificación única. En estas modalidades, la dosis de IFN-a generalmente s encuentra en el rango de desde aproximadamente 3 µg a aproximadamente 15 µg, o de aproximadamente 9 µg a aproximadamente 15 µg. La dosis de IFN-a se administra generalmente de manera diaria, una día sí y un día no, tres veces a la semana, o sustancialmente de manera continua. La dosis de IFN-a se administra por un período de tiempo, cuyo período de tiempo puede ser, por ejemplo, de al menos aproximadamente 24 semanas a al menos aproximadamente 48 semanas, o más.

En única de IFN-a se administra, una dosis "iniciadora" de IFN-? se Incluye. En estas modalidades, la I F N-? se administra por un período de tiempo de aproximadamente 1 día a aproximadamente 14 días, de aproximadamente 2 días a aproximadamente 1 0 días, o de aproximadamente 3 días a aproximadamente 7 días, antes de que comience el tratamiento con I FN-a. Este período de tiempo se refiere como la fase "iniciadora". En algunas de estas modalidades, el tratamiento de I FN-? se continúa a lo largo del período entero de tratamiento con I FN-a. En otras modalidades, el tratamiento de IFN-? se discontinua antes de que finalice el tratamiento con IFN-a. En estas modalidades, el tiempo total del tratamiento con IFN-? (incluyendo la fase "iniciadora") es de aproximadamente 2 días a aproximadamente 30 días, de aproximadamente 4 días a aproximadamente 25 días, de aproximadamente 8 días a aproximadamente 20 días, de aproximadamente 1 0 días a aproximadamente 18 días, o de aproximadamente 12 días a aproximadamente 1 6 días. Todavía en otras modalidades, el tratamiento de IFN-? se discontinúa una vez que el tratamiento de IFN-a comienza. Aquellos expertos en la materia apreciarán fácilmente que los niveles de dosificación pueden variar como una función del compuesto específico, la severidad de los síntomas y la susceptibilidad del sujeto a IQS efectos secundarios. Las dosis preferidas para un compuesto dado se determinan fácilmente por aquellos expertos en la materia por una variedad de medios. Aquellos expertos en la materia fácilmente apreciarán que los niveles de dosificación pueden variar como una función de los compuestos específicos, la severidad de los síntomas y la susceptibilidad del sujeto a los efectos secundarios. Las dosis preferidas por Un compuesto dado se determinan fácilmente por aquellos expertos en la materia por una variedad de medios. Un medio preferido es medir la potencia fisiológica de un compuesto dado. En algunas modalidades, IFN-a e IFN-? se administran en la misma formulación, y se administran de manera simultánea. En otras modalidades, IFN-a IFN-? se administran por separado, por ejemplo, en formulaciones separadas. En algunas de estas modalidades, IFN-a e IFN-? se administran por separado, y se administran simultáneamente. En otras modalidades, IFN-oc e IFN-? se administran por separado y se administran dentro de aproximadamente 5 segundos a aproximadamente 15 segundos, dentro de aproximadamente 1 5 segundos a aproximadamente 30 segundos, dentro de aproximadamente 30 segundos a aproximadamente 60 segundos, dentro de aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 5 minutos, dentro de aproximadamente 5 minutos a aproximadamente 15 minutos, dentro de aproximadamente 15 minutos a aproximadamente 30 minutos, dentro de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 60 minutos, dentro de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 2 horas, dentro de aproximadamente 2 horas a aproximadamente 6 horas, dentro de aproximadamente 6 horas a aproximadamente 1 2 horas, dentro de aproximadamente 12 horas a aproximadamente 24 horas, o dentro de aproximadamente 24 horas a aproximadamente 48 horas entre sí. Las múltiples dosis de IFN-a e IFN-? pueden administrarse, por ejemplo, la IFN-a e IFN-? ptteden administrarse una vez por mes, dos veces por mes, tres veces por"tfj jes, una vez por semana, dos veces por semana, tres veces por semana, ccfetro veces por semana, cinco veces por semana, seis veces por semana , o de manera diaria, durante un período de tiempo que varía de aproximadamente un día a aproximadamente una semana, de aproximadamente dos semanas a aproximadamente cuatro semanas, de aproximadamente un mes a aproximadamente dos meses, de aproximadamente dos meses a aproximadamente cuatro meses, de aproximadamente cuatro meses a aproximadamente seis meses, de aproximadamente seis meses a aproximadamente ocho meses, de aproximadamente ocho meses a aproximadamente 1 año, de aproximadamente 1 año a aproximadamente 2 años, o de aproximadamente 2 años a aproximadamente 4 años, o más. En las modalidades en particular de interés, IFN-a e IFN-? se administra tres veces por semana durante un período de aproximadamente 48 semanas. Cuando el agente es un polipéptido, polinucleótido (por ejemplo, un polinucleótido que codifica IFN-a o IFN-?), puede introducirse en tejidos o células huésped por cualquier número de vías, incluyendo la infección viral, microinyección, o fusión de vesículas. La inyección por mezcla también puede utilizarse para la administración intramuscular, según se describe por Furth et al. (1 992) Anal. Biochem. 205:365-368. El ADN puede revestirse sobre micropartículas de oro, y suministrarse intradérmicamente mediante un dispositivo de bombardeo de películas, o "pistola de genes" según se describe en la literatura (ver, por ejemplo, Tang et al. (1 992) Nature 356: 152-1 54), en donde los microproyectiles de oro se revisten con el ADN terapéutico, dejfpués se bombardean hacia las células de la piel. De particular ¡nteré f esta modalidades, se encuentra el uso de un promotor específico de h ígado para conducir la transcripción de unas secuencias codificadoras de IFN-a e IFN-? operativamente enlazadas preferentemente en las células hepáticas.

Agentes Terapéuticos Adicionales En algunas modalidades, el método además incluye la administración de ribavirina. La ribavirina, ? -ß-D-ribofuranosil-l H-1 ,2,4-triazola-3-carboxamida, disponible de ICN Pharmaceuticals, Inc. , Costa Mesa , Calif . , se describe en el índice Merck, No. de compuesto 8199, Edición Onceava. Su elaboración y formulación se describe en la Pat. de E. U. No. 4,21 1 ,771 . La invención también contempla el uso de derivados de ribavirina (ver, por ejemplo, Pat. de E. U. No. 6,277,830). La ribavirina puede administrarse oralmente en cápsula o forma de tableta, o en la misma o diferente forma de administración y en la misma o diferente vía como la IFN-a. Por supuesto, otros tipos de administración de ambos medicamentos, a medida que llegan a estar disponibles, se contemplan tales como por rocío nasal, transdérmicamente, intravenosamente, por supositorio, por forma de dosificación de liberación sostenida, etc. Cualquier forma de administración trabajará mientras que las dosificaciones adecuadas se suministran sin destruir el ingrediente activo. La ribavirina generalmente se administra en una cantidad que varía de aproximadamente 30 mg a aproximadamente 60 mg, de aproximadamente 60 mg a aproximadamente 1 25 mg , de aproximadamente 125 mg a aproximadamente 200 mg , de aproximadamente 200 mg a aproximadamente 300 mg¾ j e aproximadamente 300 mg a aproximadamente 400 mg, aproximadamente 400 mg a aproximadamente 1 200 mg, de aproximadamente 600 mg a aproximadamente 1 000 mg, o de aproximadamente 700 a aproximadamente 900 mg por día . En algunas modalidades, la ribavirina se administra a lo largo del curso completo del tratamiento de IFN-a. En otras modalidades, la ribavirina se administra menos que el curso completo del tratamiento de IFN-a, por ejemplo, solamente durante la primer fase del tratamiento de IFN-oc, solamente durante la segunda fase del tratamiento de IFN-a, o alguna otra parte del régimen de tratamiento de IFN-a.

DESÓRDENES DISPUESTOS AL TRATAMIENTO La presente invención proporciona los métodos para tratar la infección de VHC, y métodos para tratar la fibrosis hepática, al administrar una combinación de IFN-a e IFN-? en una cantidad terapéuticamente eficaz a un individuo en necesidad del mismo . Los individuos que se tratarán de acuerdo a los métodos de la invención incluyen individuos que se han diagnosticado clínicamente con fibrosis hepática, los individuos diagnosticados con VHC, así como también los individuos que no han desarrollado la fibrosis hepática clínica pero que se consideran en riesgo de desarrollar la fibrosis hepática. Tales individuos incluyen individuos que se infectan con VHC. Los individuos que se han diagnosticado clínicamente como infectados con VHC son de interés en pa rticu lar en varias mddálidades. Los individ uos q ue están infectados con VHC se identifican por tener ARN VHC en su sang re , y/o tener anticuerpo anti-VHC en su suero. Los individ uos que se diag nostican clínicamente como infectados con VHC incluyen los individ uos nativos (por ejem plo , i ndivid uos previamente no tratados por VHC) y los individ uos que han fallado el tratamiento anterior para VHC (pacientes de "falla de tratamiento"). Los pacientes de falla de tratamiento incluyen no respondedores (por ejemplo , individuos en quienes la concentración de VHC no fue significativamente o se redujo suficientemente por u n trata miento previo para VHC); y reincidentes (por ejemplo, individuos que se trataron previamente por VHC , cuya concentración de VHC se redujo, y por consecuencia se aumentó) . También de interés se encuentran los individuos positivos de VHC (seg ú n se describe anteriormente) qu ienes muestran fibrosis severa o cirrosis temprana (no descompensada , clase A de Child-Plug o menos), o más cirrosis avanzada (descompensada , clase B o C de Child-Plug) debido a la infección de VHC crón ica y qu ienes son virémicos en lugar del tratamiento anti-viral anterior con terapias a base de I FN-ct o quienes no pueden tolerar las terapias a base de I FN-a, o q uienes tienen una contraindicación a tales terapias. E n las modalidades en particular de interés, los ind ividuos positivos de VHC con fibrosis hepática de etapa 3 o 4 de acue rdo al sistema de reg istro METAVI R son adecuados para el tratamiento con los métodos de la presente invención. En otras modalidades, los individ uos adecuados para el trata miento con los métodos de la presente invención son pacientes con cirrosis descompensada con manifestaciones clínicas, incluyendo pacientes con cirrosis hepática muy avanzada, incluyendo aquellos que esperan respuesta para el transplante de hígado. Todavía en otras modalidades, los individuos adecuados para el tratamiento con los métodos de la presente invención incluyen pacientes con grados más intermedios de fibrosis incluyendo aquellos con fibrosis temprana (etapas 1 y 2 en los sistemas de registro de METAVIR, Ludwig, y Schéuer; o etapas 1 , 2, o 3 en el sistema de registro Ishak). Mientras que la presente invención se ha descrito con referencia a las modalidades específicas de la misma, deberá señalarse por aquellos expertos en la materia que diversos cambios pueden hacerse y los equivalentes pueden sustituirse sin alejarse del verdadero espíritu y alcance de la invención . Además, varias modificaciones pueden hacerse para adaptar una situación en particular, material, composición de materia , proceso, etapa o etapas del proceso, al objetivo, espíritu y alcance de la presente invención . Se pretende que tales modificaciones se encuentren dentro del alcance de las reivindicaciones anexas a la misma.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1 . Un método para reducir la fibrosis hepática en un individuo, comprendiendo administrar IFN-a e IFN-? en una cantidad eficaz para reducir la fibrosis hepática . 2. Un método para tratar una infección de virus de hepatitis C en un individuo, comprendiendo administrar IFN-a e IFN-? en una cantidad eficaz para lograr uná respuesta viral sostenida. 3. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque un grado de fibrosis hepática se determina por etapas, en donde la etapa de fibrosis hepática, según se mide por un sistema de registro estandarizado, se reduce por al menos una unidad . 4. El método según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado porque IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 µg a aproximadamente 300 µ9 por dosis, en donde IFN-a se administra en una cantidad de desde aproximadamente 3 a aproximadamente 27 g, y en donde la IFN-a e IFN-? se administran simultáneamente. 5. El método según la reivindicación 1 o reivindicación 2 , en donde IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 µg a aproximadamente 300 µg por dosis, en donde IFN-a se administra en una cantidad de desde aproximadamente 3 µg a aproximadamente 27 µg, y en donde la IFN-a e IFN-? se administran dentro de aproximadamente 24 horas entre sí. 6. El método según la reivindicación 1 o reivindicación 2, caracterizado porque IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 µg a aproximadamente 30^¾ p r < dosis, en donde IFN-a se administra en una cantidad de desde aproximadamente 3 µg a aproximadamente 27 µg, y en donde la IFN-a e IFN-? se administra en múltiples dosis. 7. Un método para aumentar la función hepática en un individuo que padece de fibrosis hepática, comprendiendo administrar IFN-a e IFN-? en una cantidad eficaz para aumentar una función hepática. 8. El método según la reivindicación 7, caracterizado porque la función hepática se indica al medir un parámetro seleccionado del grupo que consiste de nivel de transaminasa de suero, tiempo de protrombina, nivel de bilirrubina de suero, conteo de plaquetas de sangre, carga viral y nivel de albúmina de suero. 9. El método según al reivindicación 7, caracterizado porque IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 µg a aproximadamente 300 µg por dosis, en donde IFN-a se administra en una cantidad de desde aproximadamente 3 µ?} a aproximadamente 27 µg, y en donde IFN-a e IFN-? se administran en dosis seriales. 10. Un método para reducir la incidencia de una complicación de cirrosis del hígado, comprendiendo administrar a un individuo que padece de fibrosis hepática una combinación de IFN-a e IFN-? en una cantidad eficaz para reducir la incidencia de una complicación de cirrosis del hígado. 11. El método según la reivindicación 10, caracterizado porque IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 a aproximadamente 300 µ9 por dosis, *^^^mle IFN-a se administra en una cantidad de desde aproximadamente 3 a aproximadamente 27 µg , y en donde IFN-a e IFN-? se administran en múltiples dosis. 12. Un método para tratar el virus de hepatitis C en un individuo, comprendiendo administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de IFN-a e IFIM-?. 1 3. El método según la reivindicación 12, caracterizado porque el nivel de aminotransferasa de alanina se reduce a abajo de aproximadamente 45 unidades internacionales por mililitro de suero. 14. El método según la reivindicación 12, caracterizado porque la carga viral del individuo se reduce a abajo de aproximadamente 500 copias de genoma por mililitro de suero. 1 5. El método según la reivindicación 12, caracterizado porque IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 µg a aproximadamente 300 µg por dosis, en donde IFN-oc se administra en una cantidad de desde aproximadamente 3 µ a aproximadamente 27 µg, y en donde IFN-a e IFN-? se administran simultáneamente. 1 6. El método según la reivindicación 12, caracterizado porque IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 µg a aproximadamente 300 µg por dosis, en donde IFN-a se administra en una cantidad de desde aproximadamente 3 ? a aproximadamente 27 µg , y en donde IFN-a e IFN-? se administran por separado. 17. El método según la reivindicación 12, caracterizado porque IFN-? se administran subcutáneamente en una cantidad de desde aproximadamente 25 µ? a aproximadamente 300 µg por dosis, en donde. IFN-a se administran en una cantidad de desde aproximadamente 3 µ9 a aproximadamente 27 9, y en donde IFN-a e IFN-y se administran en dosis seriales. 1 8. Un método para reducir la carga viral en un individuo que padece de virus de hepatitis C, comprendiendo administrar IFN-a e IFN-? en una cantidad eficaz para reducir la carga viral.