MXPA02007096A

MXPA02007096A - Nuevos compuestos cristalinos que comprenden fitosteroles y fitostanoles o derivados de los mismos.

Info

Publication number: MXPA02007096A
Application number: MXPA02007096A
Authority: MX
Inventors: David John Stewart
Original assignee: Forbes Medi Tech Inc
Priority date: 2000-01-21
Filing date: 2001-01-22
Publication date: 2003-01-28
Also published as: AU2009202917B2; WO2001053320A9; ES2262655T3; AU2006201562A1; AU2822101A; WO2001053320A2; DE60118883T2; EP1250350A2; CN1443193A; PT1250350E; CY1105504T1; DK1250350T3; AU2009202917A1; EP1250350B1; ATE323714T1; CA2398970A1; DE60118883D1; BR0107707A; WO2001053320A3; EP1693376A2

Abstract

Una nueva estructura cristalina de compuesto que comprende un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos para utilizarse en el tratamiento o prevencion de enfermedad cardiovascular y sus condiciones fundamentales tales como aterosclerosis e hipercolesterolemia.

Description

NUEVOS COMPUESTOS CRISTALINOS QUE COMPRENDEN FITOSTEROLES Y FITOSTANOLES O DERIVADOS DE LOS MISMOS CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta presente invención se refiere al campo de fitosteroles y fitostanoles y su uso para tratar y prevenir enfermedad cardiovascular, sus condiciones fundamentales tales como aterosclerosis, hipercolesterolemia, e hiperlipidemia y otros desordenes.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Aunque los avances recientes en la ciencia y tecnología ayudan a mejorar la calidad y agregar años a la vida humana, la prevención de aterosclerosis, la causa fundamental de la enfermedad cardiovascular ("CVD") no se ha dirigido suficientemente. La aterosclerosis es un proceso degenerativo que resulta de un interjuego de factores heredados (genético) y factores ambientales tales como dieta y estilo de vida. La investigación a la fecha sugiere que el colesterol puede jugar un papel en aterosclerosis al formar placas ateroscleróticas en vasos sanguíneos, cortando al último el suministro de sangre al músculo del corazón o alternativamente al cerebro o limbos, dependiendo de la ubicación de la placa en el árbol arterial (1 ,2). Los resúmenes han indicado que 1 % de reducción en un colesterol del suero total de la persona producen un 2% de reducción en riesgo de un evento de arteria coronaria (3). Estadísticamente, un 10% de reducción en colesterol de suero promedio (por ejemplo, de 6.0 mmol/L a 5.3 mmol/L) puede resultar en la prevención de 100,000 muertes en los Estados Unidos Anualmente (4). Los esteróles son compuestos que ocurren de manera natural que realizan muchas funciones celulares críticas. Los fitosteroles tales como campesterol, estigmasterol y beta-sitosterol en plantas, ergosterol en hongos y colesterol en animales son cada uno componentes principales de membranas celulares y sub-celulares en sus respectivos tipos celulares. La fuente dietética de fitosteroles en humanos viene de materiales vegetales, es decir, vegetales y aceites de planta. El contenido de fitosterol diariamente estimado en la dieta de tipo oeste convencional es aproximadamente 60-80 miligramos en contraste con la dieta vegetariana que proporcionaría aproximadamente 5000 miligramos por día. Los fitosteroles han recibido un gran trato de atención debido a su habilidad para reducir los niveles de colesterol de suero cuando se alimentan a un número de especies de mamífero, incluyendo humanos. Aunque el mecanismo preciso de acción permanece grandemente desconocido, la relación entre el colesterol y fitosteroles se debe aparentemente en parte a las similitudes entre las estructuras químicas respectivas (las diferencias que ocurren en las cadenas laterales de las moléculas). Se asumen que los fitosteroles desplazan el colesterol de la fase micelar y reducen así su absorción o posiblemente compiten con los sitios de receptor y/o vehículo en el proceso de absorción de colesterol. Durante cuarenta años, Eli Lilly vende una preparación de esterol de subproducto de la producción de pulpa química de madera y por último de aceite de semilla de soya llamado Cytellin™ que se encuentra que disminuye el colesterol de suero por aproximadamente 9% de acuerdo con un reporte (5). Varias investigaciones subsecuentes han explorado los efectos de preparaciones de sitosterol en lípido de plasma y concentraciones de lipoproteína (6) y los efectos de sitosterol y campesterol de fuentes de subproducto de la producción de pulpa química de madera y semilla de soya en colesteroles de suero (7). Una composición de fitosteroles que se ha encontrado que es altamente eficaz para disminuir el colesterol de suero se describe en la Patente de E. U . No. de Serie 5,770,749 para Kutney et al., y comprende no más de 70% en peso de beta-sitosterol, al menos 10% en peso de campesterol y estigmastanol (beta-sitostenol). Se observa en esta patente que existe alguna forma de sinergia entre fitosteroles constituyentes, proporcionando aún mejores resultados que disminuyen el colesterol que se han logrado previamente. A pesar de las ventajas obvias y ahora bien registradas de fitosteroles, no solamente en el tratamiento de CVD y sus condiciones fundamentales tales como hipercolesterolemia, hiperlipidemia, aterosclerosis, hipertensión, trombosis pero en el tratamiento de otras enfermedades tales como diabetes Tipo II, cáncer demencia y envejecimiento, la administración de fitosteroles y la incorporación de los mismos en alimentos, farmacéuticos y otros vehículos de suministro se han complicado por el hecho de que son altamente hidrofóbicos (es decir, tienen solubilidad en agua deficiente) y generalmente también son deficientemente solubles en aceites. La provisión de agua y derivado de fitosterol soluble en aceite que podría administrarse oralmente y que podría incorporarse sin administración adicional en vehículos de suministro, sería altamente deseable. Es un objeto de la presente invención obviar o mitigar las desventajas anteriores.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona una estructura cristalina compuesta que comprende un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos. La presente invención comprende además una composición para tratar o prevenir CVD y sus condiciones fundamentales que incluyen aterosclerosis, hipercolesterolemia, hiperlipidemia, hipertensión, trombosis y enfermedades relacionadas tales como diabetes Tipo II, así como otras enfermedades que incluyen daño oxidativo como parte del proceso de enfermedad fundamental tal como demencia, envejecimiento, y cáncer que comprende una o más estructuras cristalinas de compuesto que comprenden fitosteroles o fitostanoles, o derivados de los mismos y un adyuvante o vehículo de calidad alimenticia o farmacéuticamente aceptable para los mismos. La presente invención proporciona además alimentos, bebidas y nutracéuticos suplementados con una o más de las estructuras cristalinas de compuesto descritas en la presente . La presente invención proporciona un método para tratar o prevenir CVD y sus condiciones fundamentales incluyendo aterosclerosis, hipercolesterolemia, hiperlipidemia, hipertensión, trombosis y enfermedades relacionadas tales como diabetes Tipo II , así como otras enfermedades que incluyen daño oxidativo como parte del proceso de enfermedad fundamental tal como demencia, envejecimiento, y cáncer al administrar a un animal uno o más de las estructuras cristalinas de compuesto como se describe en la presente. La presente invención proporciona además un proceso para preparar una estructura cristalina compuesta que comprende un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos, que comprende: a) disolver el fitosterol y fitostanol en un solvente a una temperatura ambiente o temperatura arriba de la temperatura ambiente pero inferior al punto de ebullición del solvente; b) enfriar el solvente para permitir la formación de cristal; y c) filtrar y enjuagar los cristales así formados. Lo que se logra dentro del alcance de la presente invención es la creación de una estructura cristalina compuesta en donde un fitosterol y un fitostanol, bajo condiciones apropiadas, se recristalizan juntos formando una estructura unitaria que es un endotermo compuesto único como se evidencia utilizando calorimetría de exploración diferencial ("DSC"). Además, estas nuevas estructuras cristalinas tienen sus propios perfiles de difracción en polvo de rayos x ("XRD") , sus propias características químicas y sus propios puntos de fusión particulares en comparación con cada uno de los fitosteroles individuales o fitostanol solos o junto en una composición. En otras palabras, lo que se crea es una estructura química y físicamente ya sea de los materiales de inicio de fitosterol o fitostanol solos, o mezclados en composición.

Estos compuestos cristalinos tienen numerosas ventajas sobre fitostanoles o fitosteroles individuales o mezclas de los mismos previamente conocidas y descritas en la materia. En particular, se ha encontrado que la solubilidad en aceites, medios a base de aceite y grasas se mejora por un método que es simple, económico y que no requiere modificaciones anteriores extensivas a los esteróles o estañóles, tal como por esterificación. Los fitosteroles y estañóles aislados y que ocurren de manera natural se encuentran en forma cristalina, en polvo, gruesa, que no es dócil para la formación de una mezcla homogénea en agua, aceites o grasas, sin algún tipo de modificación. Aunque la esterificación de fitosteroles y estañóles no los hace considerablemente más solubles en grasas y aceites y es una técnica ampliamente utilizada por razones prácticas, estos derivados esterificados no inhiben la absorción de colesterol como efectivamente los esteróles libres (8). En número de pacientes anteriores, los estañóles, en particular, se esterifican con objeto de aumentar sus solubilidad deficiente (ver, Patente de E. U . No. de Serie 5,502,045 para Raision Tehtaat Oy AB). Las desventajas de los esteres de ácido graso de fitosterol/estanol incluyen las siguientes: absorción reducida de micronutrientes lipofílicos (como beta-caroteno) (8) y tiempo de procesamiento incrementado y costos para preparar. El calentamiento de beta-sitosterol en aceite se describe en PCT/FI99/00121 ; sin embargo, el producto resultante es uno en los cuales los esteróles se disuelven solamente de manera parcial. Dentro del alcance de la presente invención, los fitosteroles que ocurren de manera natural y fitostanoles en forma cristalina, se j^ cristalizan ¡untos para formar estructuras cristalinas de compuesto unitarias que no solamente muestran solubilidad aumentada en aceites y grasas en comparación con fitosteroles o fitostanoles individuales o mezclas para los mismos previamente conocidos y descritos en la materia, sino que también muestran mayor eficacia en disminuir colesterol de suero. De acuerdo con lo anterior, las composiciones a base de grasa y aceite que comprenden las estructuras cristalinas de la presente invención pueden prepararse y utilizarse como tales o pueden incorporarse fácilmente en alimentos, bebidas, complementos dietéticos, farmacéuticos y nutracéuticos. Esta solubilidad aumentada generalmente se traduce en concentraciones inferiores de fitosteroles y/o fitostanoles que necesitan proporcionarse en el aceite o grasa con objeto de lograr el efecto dietético o terapéutico deseado. Estas y otra ventajas de la presente invención se subrayan en más detalle a continuación.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La presente invención se ilustra por los siguientes dibujos no limitantes en los cuales: La Figura 1 es una fotografía microscópica del material cristalino de FCP-3P 1 ; La Figura 2 es otra fotografía microscópica del material cristalino de FCP-3P 1 ; La Figura 3 es una fotografía microscópica de la estructura cristalina de FCP-3P2; La Figura 4 es otra fotografía microscópica de la estructura cristalina de FCP-3P2; La Figura 5 es una fotografía microscópica de una mezcla igual de FCP-3P1 y FCP-3P2 recristalizada de acetato de etilo; La Figura 6 es otra fotografía microscópica de una mezcla igual de FCP-3P1 y FCP-3P2 recristalizada de acetato de etilo; La Figura 7 es otra fotografía microscópica de una mezcla igual de FCP-3P 1 y FCP-3P2 recristalizada de acetato de etilo; La Figura 8 es una fotografía microscópica de una mezcla igual de FCP-3P 1 y FCP-3P2 recristalizada de acetato de etilo; La Figura 9 es el dato de calibración de indio DSC; La Figura 1 0 es el dato DSC que sobrepone FCP-3P 1 , FCP-3P2, la mezcla igual de FCP-3P1 y FCP-3P2 en composición y el material recristalizado (FM-PH-38); La Figura 1 1 es el dato DSC para FCP-3P2; La Figura 12 es el dato DSC para FCP-3P1 ; La Figura 13 es el dato DSC para una mezcla igual de FCP-3P1 y FCP-3P2 en composición; La Figura 14 es el dato DSC para la mezcla igual de FCP-3P1 y FCP-3P2 recristalizada de acetato de etilo; La Figura 15 es el dato de difracción de rayos X para FCP-3P2; La Figura 16 es el dato de difracción de rayos X para FCP-3P1 ; y La Figura 17 es el dato de difracción de rayos X para la mezcla igual de FCP-3P1 y FCP-3P2 recristalizada de acetato de etilo.

MODALIDADES PREFERIDAS DE LA INVENCIÓN De acuerdo a una modalidad de la presente invención, se proporciona una estructura cristalina compuesta que comprende un fitosterol y fitostanol, o un derivado de ya sea cualquiera de los dos adecuado para utilizarlo per se para tratar o prevenir CVD y sus condiciones fundamentales, tales como aterosclerosis, hipercolesterolemia, hiperlipidemia, hipertensión, trombosis, y enfermedades relacionadas tales como diabetes Tipo I I , así como para tratar y prevenir otras enfermedades que incluyen daño oxidativo como parte del proceso de enfermedad fundamental tal como demencia, envejecimiento y cáncer. Al inicio, se cree que durante esta especificación, los términos "estructura cristalina compuesta", "estructura compuesta cristalina", "nuevas estructuras cristalinas", "cristales compuestos", "nuevas estructuras", "compuesto" y "estructuras cristalinas" se utilizan de manera intercambiable y se proponen, al menos que se establezca claramente de otra manera, poseer el mismo significado. Fitosteroles/Fitostanoles El término "fitosterol" dentro del alcance de la presente invención, incluye todos los fitosteroles sin limitación, por ejemplo: sitosterol, campesterol, estigmasterol, brasicasterol, desmosterol, calinosterol, poriferasterol, clionasterol y todas las formas sintetizadas o naturales y derivados de los mismos, incluyendo isómeros. El término "fitostanol" incluye todos los fitosteroles hidrogenados o saturados y todas las formas sintetizadas o naturales y derivados de las mismas, incluyendo isómeros. Se entiende que las modificaciones a los fitosteroles y fitostanoles, es decir, incluir cadenas laterales modificadas también cae dentro del resumen de esta invención. También debe entenderse que, cuando la duda a través de la especificación, el término "fitosterol" comprende tanto fitosterol y fitostanol, es decir, los términos pueden utilizarse intercambiablemente al menos que se especifique de otra manera. Los fitosteroles y fitostanoles para utilizarse en la formación de estructuras compuestas cristalinas de acuerdo con esta invención pueden procurarse de una variedad de fuentes naturales. Por ejemplo, pueden obtenerse del procesamiento de aceites de planta (incluyendo plantas acuáticas) tales como aceite de maíz y otros aceites vegetales, aceite de germen de trigo, extracto de soya, extracto de arroz, salvado de arroz, aceite de semilla de colza, aceite de sésamo y aceites de pescado. Sin limitar la generalidad de lo anterior, se entiende que existen otras fuentes de fitosteroles y fitostanoles tales como animales marinos de los cuales la composición de la presente invención puede prepararse. La Patente de E. U . No. de Serie 4,420,427 enseña la preparación de esteróles de fango de aceite vegetal utilizando solventes tal como metanol. Alternativamente, los fitosteroles y fitostanoles pueden obtenerse de jabón o grado de subproducto de la producción de pulpa química de madera, sub-productos de practicas forestales como se describe en la Patente de E. U . No. de Serie 5, 770,749, incorporada en la presente para referencia. Los fitosteroles y fitostanoles se encuentran ampliamente disponibles a través de compañías de suministro comercial. Sin limitar la generalidad de lo anterior, se entiende que existen numerosos métodos conocidos para extraer y purificar fitosteroles y fitostanoles de la "fuente" de elección y la presente invención no se limita a ningún método para lograr estos fitostanoles y fitosteroles purificados. Sin embargo, generalmente, los fitosteroles y fitostanoles, purificados de la fuente, se encuentra en una forma cristalina, con cada esterol y estanol representados por una estructura cristalina individual, y que tiene sus propio endotermo DSC y perfil XRD. En una forma más preferida, la estructura compuesta cristalina de la presente invención se forma con campesterol o beta-sitosterol sintetizado o derivado de manera natural y ya sea sitostanol o campestanol, o mezclas de los mismos. Proceso de Recristalización En una forma preferida, el proceso de recristalización es como sigue: a) uno o más fitosteroles y fitostanoles se seleccionan para la combinación en la estructura cristalina única; b) estos fitosteroles y fitostanoles se disuelven en un solvente a una temperatura ambiente o temperatura arriba de la ambiente pero inferior al punto de ebullición del solvente; c) el solvente se enfría para permitir la formación cristalina; y d) los cristales así formados se filtran y secan. Muchos solventes son adecuados para utilizarse dentro del método de la presente invención. Más preferentemente, el solvente se selecciona de cualquiera de los siguientes, solos o en combinación: 1 ) cualquier solvente de hidrocarburo tal como pentano, hexano, y miembros de la familia más elevadas de C7 a C 10 inclusiva, o derivados de los mismos; 2) cualquier alcohol de la familia C1 a C 10 inclusiva, incluyendo sin limitación, etanol, alcohol de isopropilo y metanol, o derivados de los mismos; 3) solventes aromáticos tales como tolueno y xileno y derivados de los mismos; 4) acetonas que tienen de 1 a 10 átomos de carbono, incluyendo sin limitación, acetona, propanona, metilisobutil acetona y butanona, o derivados de las mismas; y 5) esteres tal como acetato de etilo y aquellos derivados de ácidos carboxílicos de la familia C2 a C10 inclusiva. En una forma preferida, los fitosteroles y fitostanoles se disuelven en el solvente a temperatura ambiente de 18 a 30°C, aunque no se propone que el proceso se limite a cualquier temperatura particular. Por ejemplo, cuando alcohol de isopropilo se utiliza como el solvente de recristalización, la temperatura de disolución de los fitosteroles y fitostanoles se encuentra más preferentemente en el rango de 50-80°C. Lo que es crítico es que substancialmente todos los fitosteroles y fitostanoles se disuelven en el solvente elegido (el solvente se "satura") que la temperatura elegida es inferior al punto de ebullición del solvente seleccionado. Esta disolución puede tomar en donde sea de 30 minutos a 6 horas dependiendo del solvente utilizado y los fitosteroles/estanoles constituyentes. Del mismo modo, la temperatura de enfriamiento de la etapa b), para promover la formación de los cristales puede variar considerablemente pero es generalmente de 1 a 20°C. Preferentemente, el enfriamiento ocurre rápidamente en menos de una hora y más preferentemente en aproximadamente 30 minutos a una temperatura en la cual comienza la formación de cristal. La pasta resultante se agita mejor lentamente durante este proceso. Después de que los esteroles/estanoles se han precipitado de la solución, los cristales así formados se filtran y enjuagan repetidamente (por ejemplo, con agua desionizada), y después se comprimen ligeramente y succionan libre de líquido. Una vez que la recristalización se completa, para confirmar la confirmación de nuevas estructuras cristalinas, el análisis endotérmico utilizando tecnología DSC y perfiles XRD u otras técnicas en las cuales la estructura molecular o matriz puede verificarse. Lo que se ha encontrado es que nuevas estructurales cristalinas así formadas tienen propiedades (mostradas como datos DSC y XRD) que son diferentes de cada uno de los materiales iniciales solos (los fitosteroles o fitostanoles particulares) o en composición y que son, de hecho, compuestos intermedios entre las propiedades de materiales iniciales. En una modalidad, el cristal compuesto de la presente invención puede utilizarse directamente y sin ninguna adaptación o alzamientos en los procedimientos dietéticos y terapéuticos subrayados abajo. En otra modalidad, el cristal compuesto puede formarse en un polvo sólido a través de precipitación, filtración y secado, secado por rocío, liofilización o por otras técnicas de alzamiento convencionales. Esta forma de polvo puede entonces utilizarse en los procedimientos dietéticos y terapéuticos observados abajo. El método de la presente invención, en el cual los fitosteroles y fitostanoles se recristalizan juntos para formar nuevas estructuras cristalinas, puede utilizarse: 1 ) para formar nuevas composiciones "diseñadoras" de fitosteroles y fitostanoles que tienen cualquier rango de concentración deseado de los constituyentes; o 2) mezclar o perforar fitosteroles y fitostanoles en composiciones de esterol extraídas de fuentes naturales con objeto de asegurar uniformidad de especificación entre grupos. Composiciones "diseñadoras" pueden prepararse, bajo condiciones controladas, que tienen cualquier concentración de fitosteroles y fitostanoles deseada. Por ejemplo, una composición que tiene 99% en peso ("p/p") de fitosteroles y 1 % p/p de fitostanoles o en cualquier lugar en entre o que tiene 99% p/p de fitostanoles y 1 % p/p de fitosteroles o en cualquier lugar entre estos puede prepararse utilizando el procedimiento de recristalización. De acuerdo con lo anterior, se proporciona un gran trato de flexibilidad de procesamiento ya que las cantidades relevantes de cada esterol y estenol en la composición final pueden ajustarse por recristalizaciones sucesivas. Por ejemplo, si una concentración relativa más elevada de sitostanol se desea en una composición dada, el sitostanol puede recristalizarse con el esterol/estanoles ya en la composición produciendo una o más estructuras cristalinas de compuesto dentro esa composición. Preferentemente, la composición diseñadora de la presente invención, preparada por recristalización comprende 20 a 80% p/p de fitosteroles y de 80 a 20% p/p fitostanoles, más preferentemente de 30 a 70% p/p fitosteroles y de 70 a 30 p/p fitoestanoles, más preferentemente de 40 a 60% p/p fitosteroles y de 60 a 40% p/p de fitostanoles y más preferentemente 50% p/p de fitosteroles y fitostanoles. La mezcla o perforación de fitosteroles y fitostanoles en composiciones extraídas de fuentes naturales también tiene un número de aplicaciones comerciales críticas. Sin considerar la fuente natural de la cual los fitosteroles y fitostanoles se extraen y purifican , siempre habrá alguna variación, grupo a grupo, en las cantidades relativas de cada fitosterol y fitostanol. Esto puede ser un problema de producción cuando es necesario consistentemente producir una composición que tiene un conjunto particular de especificaciones. El método de recristalización de la presente invención dirige y resuelve este problema. Por ejemplo, si un grupo extraído y purificado no cumple con la especificación necesaria en que la concentración de sitostanol es demasiado baja, esta puede ajustarse fácilmente al recristalizar en la composición una cantidad inicial de sitostanol para "perforar" el nivel. Tanto la formación de las composiciones diseñadoras como la perforación de las composiciones naturales existentes pueden lograrse con fitosteroles y fitostanoles originalmente derivados de cualquier fuente (sin limitación, jabón de subproducto de la producción de pulpa química de madera, grado de subproducto de la producción de pulpa química de madera, destilado vegetal, extracto de semilla de soya y lo similar) . Además, se contempla completamente que las fuentes de fitostanol y fitosterol pueden "mezclarse". En otras palabras, una composición naturalmente derivada de jabón de subproducto de la producción de pulpa química de madera puede "perforarse" y recristalizarse con un esterol o estanol derivado de extracto de semilla de soya. La "perforación" de las composiciones se describe en más detalle en los Ejemplos. Ventajas de Nuevas Estructuras Compuestas Cristalinas Las nuevas estructuras de la presente invención proporcionan muchas ventajas terapéuticas y dietéticas cuando se comparan con el uso de fitosteroles/fitostanoles solos o juntos en composición. Lo que se logra principalmente por la formación de los cristales compuestos es la solubilidad aumentada de los constituyentes de fitosterol/estanol en aceites y grasas, sin la necesidad de modificaciones químicas u otras modificaciones estructurales a los esteróles y estañóles. No solamente esto facilita la incorporación de esteróles y estañóles en vehículos de "suministro" (con el costo concomitante y ahorros de tiempo) pero esta nueva estructura unitaria se absorbe más fácilmente en micela de ácido biliar, desplazando así de manera eficiente el colesterol y bloqueando su absorción. Tanto los fitosteroles como fitostanoles primero deben disolverse en micelas de aceite en el intestino antes de que la interacción con colesterol ocurra.

Por razones que aún no están claras, las estructuras cristalinas de la presente invención, en las cuales los fitosteroles y fitostanoles se forman en estructuras urinarias, maximizan muchas de las ventajas individuales de fitosteroles y fitostanoles, aunque minimizan las 5 desventajas respectivas. Por ejemplo, muchos estudios sugieren que los estañóles en general, y sitostanol en particular, son los inhibidores más eficaces de absorción de colesterol, sin embargo, tienen solubilidad de lípido deficiente (10). Los fitosteroles son generalmente más solubles pero son menos eficaces en disminución de colesterol (1 1 , 12 y 13). Las 10 estructuras cristalinas de la presente invención son más solubles en aceites y grasas que los fitosteroles, es decir, muestran una solubilidad en aceite en entre aquella de fitosteroles y fitostanoles y sorprendentemente, muestran eficacia de disminución de colesterol más comparable con los estañóles que esteróles. Esta combinación permite una acción más eficaz 15 para disminuir el colesterol que cualquiera de fitosteroles o fitostanol solos o en composición juntos. Métodos de Uso Las estructuras de la presente invención pueden utilizarse directamente y sin modificación adicional en cocimiento, horneado y lo 20 similar como agentes para disminuir colesterol de suero en animales, particularmente humanos. Pueden agregarse a cualquier aceite comestible y utilizarse para cocimiento, horneo y uso general. Alternativamente, las estructuras pueden tratarse para aumentar el suministro en varios otros medios de suministro. Por ejemplo, las 25 estructuras cristalinas pueden modificarse físicamente como se describe rimHiwám iiitit iafíit & >i .? ^ „&, a- __*____»_._»___ ¡. „-_______. .-_ . *._._ __ _._ _ -,. _, ,„ ^ y ,.. ,,__^______^^_^_.^__5_____ __- __.____._a__. ^ „ _ „ ,- _ ^ *. « *. "^^-^-«*^___?_^_ en la Solicitud Internacional No. PCT/CA99/00402, específicamente páginas 1 1 -23, (publicada el 25 de Noviembre de 1999 y se incorpora en la presente para referencia) para aumentar aún más la solubilidad y dispersabilidad del fitosterol y/o fitostanol en el medio de suministro elegido. Además, la presente invención contempla completamente la formación de productos alimenticios de gel oleaginoso tal como mantequilla de maní, mayonesa, helado y difusiones de margarina que incorporan tales estructuras. Además, los cristales compuestos pueden incluirse fácilmente en una variedad de alimentos bajos en grasa tales como yogures en los cuales los cristales finos se dispersan uniformemente en el producto. Existen numerosos modos o "vehículos" de suministro de esta composición, de acuerdo con lo anterior, esta invención no se propone para limitarse a los siguientes ejemplos de suministro. 1 ) Formas de Dosis Farmacéuticas: Se contempla dentro del alcance de la presente invención que las estructuras de la presente invención puedan incorporarse en varias preparaciones farmacéuticas convencionales y formas de dosis tales como tabletas (sencillas o revestidas) para utilizarse oralmente, bucalmente o lingualmente, cápsulas (duras y suaves, gelatina, con o sin revestimientos adicionales), polvos, granulos (incluyendo granulos efervescentes), pastillas, micropartículas, soluciones (tales como micelar, jarabes, elixires y gotas), comprimidos, ampolletas, emulsiones, microemulsiones, pomadas, cremas, supositorios, geles y parches transdérmicos, formas de dosis de liberación modificada junto con excipientes habituales y/o diluyentes y estabilizadores. Las estructuras de la presente invención, adaptadas en la forma de dosis apropiada como se describe arriba pueden administrarse a animales, incluyendo humanos, oralmente, por inyección (intra-venosamente, subcutáneamente, intra-peritonealmente, intradérmicamente o intra-muscularmente), tópicamente o en otras maneras. Aunque el mecanismo preciso de acción no está claro, las estructuras de la presente invención, administradas intravenosamente, disminuyen colesterol de suero. Se cree que algunas mezclas de fitosteroles, en concierto, pueden tener, además el papel como un inhibidor de absorción de colesterol en el intestino, un efecto sistémico en homeostasis de colesterol a través de la síntesis del ácido biliar, enterocito y excreción de colesterol biliar, excreción de ácido biliar y cambio en cinéticas de enzima y transporte de colesterol entre varios compartimientos dentro del cuerpo (PCT/CA97/00474 que se publicó el 15 de Enero de 1998). Las estructuras como se describen en la presente pueden utilizarse tanto en capacidades dietéticas como terapéuticas con objeto de tratar y/o prevenir CVD, sus condiciones fundamentales tales como hipercolesterolemia, hiperlipidemia, arterosclerosis, hipertensión, trombosis, enfermedades relacionadas tales como diabetes Tipo II, así como otras enfermedades que incluyen daño oxidativo como parte del proceso de enfermedad fundamental tal como demencia, envejecimiento, y cáncer. En poblaciones, que se consideran de "alto riesgo" para CVD o cualquiera de los desordenes relacionados con oxidación, se contempla que las composiciones y productos alimenticios en los cuales se contienen pueden utilizarse en programas de tratamiento terciarios y secundarios. Con objeto de apreciar los diversos vehículos posibles del suministro de las composiciones, se proporciona la lista de abajo. Las dosis de los derivados variarán dependiendo de, entre otros factores, el modo de suministro (es decir, como y en que alimento o bebida o farmacéutico los derivados se incorporan por último), el tamaño del paciente y condición, el resultado a lograrse, así como otro factores conocidos por aquellos expertos en la materia de aditivos alimenticios y agentes medicinales. Generalmente, sin embargo, se prefiere que los derivados de la presente invención se administren a humanos en una forma que comprende hasta 6 gramos (en base a una persona de 70 kg) de fitosteroles y/o fitostanoles por día, más preferentemente de 1 -5 gramos por día y más preferentemente 1 .5 gramos por día. Se reconocerá que la provisión de dosis diarias más grandes de los derivados no' es dañina al huésped animal, como exceso simplemente pasará a través de los canales excretorios normales. 2) Alimentos/Bebidas/Nutracéuticos: En otra forma de la presente invención, las estructuras de la presente invención pueden incorporarse en alimentos, bebidas y nutracéuticos, incluyendo, sin limitación, lo siguiente: 1 ) Productos Diarios - tales como quesos, mantequilla, leche y otras bebidas diarias, dispersadores y mezclas diarias, helado y yogurt; 2) Productos a base de Grasa - tales como margarinas, dispersadores, mayonesa, manteca para mezclar con la grasa, aceites para freír y cocinar y aderezos; 3) Productos a base de Cereal - comprendiendo granos (por ejemplo, pan y pastas) si estos bienes se cocina, hornean o de otra manera procesan; 4) Confitería - tal como chocolate, dulces, gomas de mascar, postres, coronamientos no diarias (por ejemplo Cool Whip™), sorbetes, hielos y otros rellenos; 5) Bebidas - ya se alcohólicas o no alcohólicas y que incluyen colas y otras bebidas suaves, bebidas frutales, complemento dietético y bebidas de reemplazo de carne tales como aquellas vendidas bajo las marcas comerciales Boost™ y Ensure™; y 6) Productos Misceláneos - incluyendo huevos y productos de huevos, alimentados procesados, tales como sopas, pastas pre-preparadas. La proporción óptima de fitosteroles a fitostanoles en el compuesto depende, a algún grado, en la matriz en el cual el compuesto es para suspenderse o incorporarse. Generalmente, los alimentos con un alto contenido en grasa acomodará una proporción más elevada de fitostanoles que alimentos bajos en grasa. Esto puede determinarse empíricamente con cada tipo de alimento/bebida en el/la que se desea agregar el compuesto. Las estructuras de la presente invención pueden incorporarse directamente y sin modificación adicional en el alimento, nultracéutico o bebida por técnicas tales como mezclado, infusión, inyección, mezclado, dispersión, emulsión, inmersión, rocío y amasado.

Alternativamente, estas estructuras pueden aplicarse directamente sobre un alimento o en una bebida, por el consumidor antes de la ingestión. Estos son modos económicos y simples de suministro. Aunque los siguientes ejemplos se proponen ilustrar varios aspectos de la presente invención y para ayudar en la preparación de las estructuras, no se proponen limitar el alcance de la invención como se describe en la presente. EJEMPLO 1 Recristalización de Acetato de Estilo Una mezcla igual (1 : 1 en peso) de una composición derivada de aceite subproducto de la producción de pulpa química de madera que comprenden principalmente Campesterol y beta-sitosterol (de aquí en adelante llamada FCP-3P1 ) y una composición de fitosterol derivada de subproducto de la producción de pulpa química de madera hidrogenada que comprende principalmente estostanol y Campestanol (21 °C) para lograr solución de saturación. Fitosterol se recristaliza de la solución de acetato de etilo a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse sobre papel de filtro Whatman No. 1 utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes de almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. Este material recristalizado de acetato de etilo de una mezcla igual de FCP-3P1 y FCP-3P2 se refiere en algunas de las figuras como FM-PH -38. Un análisis de este nuevo producto cristalizado se toma utilizando fotografía microscópica, Calorimetría de Exploración Diferencial ("DSC") y Difracción de rayos ("XRD") y comparaciones apropiadas se hacen entre los datos para FM-PH-38 y: 1 ) cada uno de los materiales solos: FCP-3P1 y FCP-3P2;y 2) y una mezcla igual de FCP-3P 1 y FCP-3P2 en composición, es decir, sin recristalizar juntos. Fotografía Microscópica: Las estructuras cristalinas de estado sólido de FCP-3P1 , FCP-3P2 y FM-PH-38 se investigan utilizando fotografía microscópica a 15X y 40X de magnificación (aunque solamente 40X de magnificación se muestra en las Figuras). El material individual se examina bajo una luz de microscopio y registros fotográficos se obtienen contra un fondo obscuro utilizando película en blanco y negro. Los registros para FCP-3P1 se representan en las Figuras 1 y 2. Los registros para FCP-3P2 se representan en las Figuras 3 y 4. Los registros para el producto recristalizado FM-PH-38 se representan en las Figuras 5 a 8 inclusivas. Calorimetría de Exploración Diferencial Las determinaciones de DSC se llevan a cabo utilizando un DSC Modelo 910S de Dupont (New Castle, DL) calibrado con indio. Las muestras que pesan entre 3 a 4 mg se colocan en cacerolas de aluminio abiertas (n=3 para cada uno de los materiales de prueba). La célula DSC se purga con nitrógeno que fluye a 40 ml/min. Todas las mediciones se hacen con una velocidad de exploración de 10°C/min. Las exploraciones se obtienen mediante el calentamiento desde temperatura ambiente hasta 350°C. Los datos DSC para FCP-3P1 , FCP-3P2 y FM-PH-38 se presentan en las Figuras 9 a 14. __ __& Difracción de rayos X Las mediciones de XRD de FCP-3P1 , FCP-3P2 y FM-PH-38 se logran utilizando un difractor de rayos X de amplio ángulo y se presentan en las Figuras 5 a 17. Generalmente, XRD es el método clásico para investigar como los cristales se forman y se ensamblan juntos. Composición Química Las características de la composición química se investigan utilizando cromatografía de gas/espectrometría de masa ("GC/MS"). Este método incluye el uso de una fase unida 5% de columna capilar de sílice fusionada de dimetilsiloxano de difenilo para la separación de los cuatro fitosteroles. La cuantificación de los cuatro componentes de fitosterol se basa en un planteamiento de proporción estándar interno con el uso de colestano agregado a cada muestra como el estándar interno. La proporción de área pico de cada fitosterol y colestano se diagrama contra las concentraciones estándar de calibración perforada. Las curvas estándar de calibración se establecen de análisis de regresión lineal pesado (1 /Y) de proporciones de área pico contra un mínimo de 6 concentraciones estándar de fitosterol sobre un rango de 0.01 a 3.0 mg/ml. Un cromatógrafo de gas Hewlett Packard Modelo 5890 Serie II se opera con un auto-muestreador modelo 5971 GC/MS (MSD) y modelo 3635 utilizando los siguientes parámetros: Columna GC 30m x 0.25 mm x 0.25 um SAC-5 Temp del Horno GC 270 grados C Gas de vehículo de columna helio Temp de línea de transferencia GC/MSD 300 grados C Temp del inyector 300 grados C Volumen de inyección 1 ul Modo de inyección sin hendiduras (tiempo de purga 0.5 minutos) Resultados y Discusión: Fotomicrográf icas: Las diferencias en apariencia de la cristal subrayado entre FCP-3P 1 , FCP-3P2 y FM-PH-38 en las Figuras 1 a 8 muestran que estos tres materiales son químicamente únicos. Los cristales de FM-PH-38 en las Figuras 5 a 8 muestran claramente varillas más delgadas. Aunque la claridad parece ser similar a FCP-3P2, la forma no es del todo similar a los cristales en forma de bloque mostrados en las Figuras 3 y 4. DSC: Los datos se presentan en su totalidad en las Figuras 9 y 13 pero se resumen en la Tabla 1 : Tabla 1 Los puntos de fusión para estañóles y esteróles individuales, en grados C son como sigue: Beta-sitosterol 140 Sitostanol 1 38- 1 39 Campesterol 157-158 Campestanol 146.5-147.8 Los endotermos DSC perfilados en las Figuras 9 a 13 indicaron que los cuatro componentes principales durante la fusión no se correlacionan directa o simplemente con los puntos de fusión de los componentes individuales. Una mezcla física (composición) de FCP-3P1 y FCP-3P2 muestra dos endotermos a 1 18.31 °C y 138.72°C en comparación con el material recristalizado (FM-PH-38) que demuestra un endotermo compuesto único con picos a 135.37° C y 139.39°C que comprende tres picos cercanamente superpuesto (triplete). Esto muestra claramente que los dos materiales iniciales se han combinado para producir una estructura cristalina de compuesto que tiene sus propias propiedades de fusión particulares en comparación con los materiales iniciales individuales solos, o en composición. XRD: Los datos se muestran en las Figuras 15 a 17. Los espectros para FM-PH-38 muestra picos no bien definidos que indica que no existe orden de cristal bien definido como en la mayoría de las estructuras cristalinas, incluyendo FCP-3P1 y FCP-3P2. En resumen, el habito de cristal de FM-PH-38 es diferente de otros materiales. Composición Química: 1 1 e¡__.? nilllilil-i Los resultados de GC/MS que indican la proporción de los cuatro fitosteroles principales en los tres materiales son como sigue: Tabla 2 Resumen de Cuatro Fitosteroles Principales Tabla 3 Cuantificación de GC/MS de Fitosteroles Principales en FCP- 3P2 Tabla 4 Cuantificación de GC/MS de Fitosteroles Principales en FCP- 3P 1 Tabla 5 Cuantificación de GC/MS de Fitosteroles Principales en FM- PH-38 EJEMPLO 2 Recristalización de Alcohol de Isopropilo Una mezcla igual (1 : 1 en peso) de FCP-3P1 y FCP-3P2 se disuelve en alcohol de isopropilo a 75°C para lograr solución de saturación. El fitosterol se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. EJEMPLO 2 Recristalización de Acetona de Metilisobutilo ("MIBK") Una mezcla igual (1 : 1 en peso) de FCP-3P 1 y FCP-3P2 se disuelve en MIBK a temperatura ambiente para lograr solución de saturación. El fitosterol se recristaliza de la solución de MIBK saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. EJEMPLO 3 Recristalización de Tolueno Una mezcla igual (1 : 1 en peso) de FCP-3P1 y FCP-3P2 se disuelve en tolueno a temperatura ambiente para lograr solución de saturación. El fitosterol se recristaliza de la solución de tolueno saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. EJEMPLO 5 Recristalización de Hexano/Acetona Una mezcla igual (1 : 1 en peso) de FCP-3P1 y FCP-3P2 se disuelve en una mezcla de hexano/acetona (50% de cada uno p/p) a temperatura ambiente para lograr solución de saturación. El fitosterol se recristaliza de la solución de hexano/acetona saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. EJEMPLO 6 Purificación e hidrogenación de fitosteroles de subproducto de la producción de pulpa química de madera crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente utilizando proceso de recristalización. Objetivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 38-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 9-28% Campestanol 2-14% a) Purificación: esteróles de subproducto de la producción de pulpa química de madera (55 kg) se dispersan en 220 L de alcohol de isopropilo ("IPA"). El carbono activado (5.5 kg) se agrega para purificar los esteróles. La purificación se lleva a cabo al agitar la mezcla por 2 horas a 65°C. El carbono se filtra utilizando un filtro Mott, también a 65°C. b) Hidrogenación: una porción (30% p/p) de la mezcla de fitosterol purificado (59.41 % de beta-sitosterol; 4.73% de sitostanol; 24. 19% de campesterol; y 7.39% de campestanol, todos en % p/p) se hidrogena en I PA utilizando paladio en catalizador de 5 alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: la porción hidrogenada (74.47% de sitostanol 10 y 20.35% de campestanol) y la porción no hidrogenada (70% p/p con especificación observada arriba) se disuelven en solución I PA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en 15 papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto 20 recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% P/p)- Beta-sitosterol 41 .59% Sitostanol 25.65% Campesterol 16.93% 25 Campestanol 1 1 .28% La concentración de sitostanol es significativamente más elevada en el producto recristalizado que el material originalmente purificado (25.65% en comparación con 4.73%) que se traduce en un producto de eficacia terapéutica más elevada-EJEMPLO 7 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados vegetales crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente utilizando proceso de recristalización. Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 18-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 9-28% Campestanol 2-14% Estigmasterol n/a Brasicasterol n/a a) Purificación: esteróles de soya se compran comercialmente de ADM. b) Hidrogenación: una porción (44% p/p) de la mezcla de fitosterol purificado (45.70% de beta-sitosterol; 2.1 % de sitostanol; 27.90% de campesterol; y 14.80% de estigmasterol y 5.3% de brasicasterol, todos en % p/p) se hidrogena en IPA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: la porción hidrogenada (con una especificación de 62.60% de sitostanol y 33.20% de campestanol) y la porción no hidrogenada (en una cantidad de 56% p/p y que tiene la especificación observada arriba) se disuelven en solución IPA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: Beta-sitosterol 25.60% Sitostanol 28.70% Campesterol 1 5.60% Campestanol 14.60% Estigmasterol 8.30% Brasicasterol 3.00% Como en el ejemplo 6 de arriba, la concentración de sitostanol es significativamente más elevada en el producto recristalizado que el material originalmente purificado (25.60% en comparación a 2.10%) que se traduce en un producto de eficacia terapéutica más elevada. EJEMPLO 8 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados vegetales crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente con fitosteroles derivados del subproducto de la producción de pulpa química de madera utilizando proceso de recristalización Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 18-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 9-28% Campestanol 10-30% Estigmasterol n/a Brasicasterol n/a a) Purificación: esteróles de soya se compran comercialmente de Henkel. b) Hidrogenación: La mezcla de fitosterol vegetal se hidrogena en IPA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: los esteróles hidrogenados (con una especificación de 0% de beta-sitosterol; 40% de sitostanol, 0% de campesterol; 40 % de campestanol y 0% de brasicasterol, todos en % p/p) y los esteróles derivados del subproducto de la producción de pulpa química de madera (con una especificación de 59.1 % de beta- sitosterol; 4.7% de sitostanol; 24.2% de campesterol; 7.4% de campestanol y 0% de brasicasterol, todos en % en p/p) en una proporción de 55:45% p/p se disuelven en solución IPA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: Beta-sitosterol 25.7% Sitostanol 24.1 % Campesterol 1 0.9% Campestanol 25.3% Brasicasterol 0% EJEMPLO 9 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados del subproducto de la producción de pulpa química de madera, y mezclado o "perforación" subsecuente con fitosteroles derivados vegetales utilizando proceso de recristalización Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 18-60% <.» _. ___.

Sitostanol 14-34% Campesterol 9-28% Campestanol 2-30% Estigmasterol n/a Brasicasterol n/a a) Purificación: esteróles de subproducto de la producción de pulpa química de madera (55 kg) se dispersan en 220 L de alcohol de isopropilo ("IPA"). El carbono activado (5.5 kg) se agrega para purificar los esteróles. La purificación se lleva a cabo al agitar la 10 mezcla por 2 horas a 65°C. El carbono se filtra utilizando un filtro Mott, también a 65°C. b) Hidrogenación: Los fitosteroles de subproducto de la producción de pulpa química de madera se hidrogenan en I PA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo 15 a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: los esteróles hidrogenados (con una especificación de 0% de beta-sitosterol; 74.5% de sitostanol, 0% de 20 campesterol; 20.4 % de campestanol y 0% de brasicasterol, todos en % p/p) y los esteróles derivados vegetales crudos comprados comercialmente de Henkel (con una especificación de 40% de beta- sitosterol; 0% de sitostanol; 33% de campesterol; 0% de campestanol y 7% de brasicasterol, todos en % en p/p) en una 25 proporción de 33:67% p/p se disuelven en solución IPA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: Beta-sitosterol 28.6% Sitostanol 24.6% Campesterol 22.1 % Campestanol 6.7% Brasicasterol 4.7% EJEMPLO 10 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados vegetales crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente con fitosteroles derivados vegetales utilizando proceso de recristalización Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 18-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 9-28% Campestanol 10-30% Estigmasterol n/a Brasicasterol n/a a) Purificación: esteróles vegetales se compran comercialmente de Henkel y ADM. b) Hidrogenación: la mezcla de fitosterol vegetal de ADM se hidrogena en IPA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: los esteróles hidrogenados (con una especificación de 0% de beta-sitosterol; 55.6% de sitostanol, 0% de campesterol; 23.9% de campestanol y 6.9% de brasicastanol y 0% de brasicasterol, todos en % p/p) y los esteróles derivados vegetales no hidrogenados de Henkel (con una especificación de 40% de beta- sitosterol; 0% de sitostanol; 33% de campesterol; 0% de campestanol y 7% de brasicasterol, todos en % en p/p) en una proporción de 44:56% p/p se disuelven en solución IPA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: Beta-sitosterol 22.4% Sitostanol 24.5% Campesterol 18.5% Campestanol 10.5% Brasicasterol 3.9% Brasicastanol 3.0% EJEMPLO 1 1 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados vegetales crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente con fitosteroles derivados vegetales utilizando proceso de recristalización Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 10-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 9-26% Campestanol 10-30% Estigmasterol n/a Brasicasterol n/a a) Purificación: esteróles vegetales se compran comercialmente de Henkel. b) Hidrogenación: la mezcla de fitosterol vegetal se hidrogena en IPA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: los esteróles hidrogenados (con una especificación de 0% de beta-sitosterol; 40% de sitostanol, 0% de 5 campesterol; 39% de campestanol y 0% de brasicasterol, todos en % p/p) y los esteróles derivados vegetales no hidrogenados (con una especificación de 40% de beta-sitosterol; 0% de sitostanol; 33% de campesterol; 0% de campestanol y 6% de brasicasterol, todos en % en p/p) en una proporción de 73:27% p/p se disuelven en solución 10 I PA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca 15 entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: 20 Beta-sitosterol 10.8% Sitostanol 29.2% Campesterol 8.9% Campestanol 28.5% Brasicasterol 1 .6% 25 EJEMPLO 12 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados vegetales crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente con fitosteroles derivados vegetales utilizando proceso de recristalización Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 10-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 5-28% Campestanol 10-30% Estigmasterol n/a Brasicasterol n/a a) Purificación: esteróles vegetales se compran comercialmente de Cargill. b) Hidrogenación: la mezcla de fitosterol vegetal se hidrogena en I PA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: los esteróles hidrogenados (con una especificación de 0% de beta-sitosterol; 67% de sitostanol, 0% de campesterol; 25.6% de campestanol y 0% de brasicasterol, todos en % p/p) y los esteróles derivados vegetales no hidrogenados (con una especificación de 43% de beta-sitosterol; 1 .0% de sitostanol; 24% de campesterol; 0.8% de campestanol, 23% de estigmasterol y 0.8% de brasicasterol, todos en % en p/p) en una proporción de 49:51 % p/p se disuelven en solución I PA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: Beta-sitosterol 21 .9% Sitostanol 33.3% Estigmasterol 1 1 .7% Campesterol 12.2% Campestanol 13% Brasicasterol 0.4% EJEMPLO 13 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados vegetales crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente con fitosteroles derivados vegetales utilizando proceso de recristalización Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 10-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 5-28% Campestanol 10-30% Estigmasterol n/a Brasicasterol n/a a) Purificación: esteróles vegetales se compran comercialmente de Cargill y Henkel. b) Hidrogenación: la mezcla de fitosterol vegetal de Henkel se hidrogena en IPA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: los esteróles hidrogenados (con una especificación de 0% de beta-sitosterol; 40% de sitostanol, 0% de campesterol; 36-44% de campestanol y 0% de brasicasterol, todos en % p/p) y los esteróles derivados vegetales no hidrogenados de Cargill (con una especificación de 43% de beta-sitosterol; 1 .0% de sitostanol; 24% de campesterol; 0.8% de campestanol, 23% de estigmasterol y 0.8% de brasicasterol, todos en % en p/p) en una proporción de 72:28% p/p se disuelven en solución IPA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: Beta-sitosterol 12% Sitostanol 29.1 % Estigmasterol 6.4% Campesterol 6.7% Campestanol 26.1 -31 .9% Brasicasterol 0.2% EJEMPLO 14 Purificación e hidrogenación de fitosteroles derivados vegetales crudos, y mezclado o "perforación" subsecuente con fitosteroles derivados vegetales utilizando proceso de recristalización Obietivo: La composición terapéutica a prepararse ha caído dentro de las siguientes especificaciones predeterminadas: Beta-sitosterol 5-60% Sitostanol 14-34% Campesterol 5-28% Campestanol 10-40% Estigmasterol n/a Brasicasterol 1 -5% a) Purificación: esteróles vegetales se compran comercialmente de Henkel. b) Hidrogenación: la mezcla de fitosterol vegetal se hidrogena en IPA utilizando paladio en catalizador de alúmina. El proceso de hidrogenación se lleva a cabo a 70°C y presión de hidrógeno de 60 psi por 3 horas. Un filtro Mott se utiliza para recuperar el catalizador de paladio después de hidrogenación. c) Mezcla/Perforación: los esteróles hidrogenados (con una especificación de 0% de beta-sitosterol; 40% de sitostanol, 0% de campesterol; 36-44% de campestanol y 0% de brasicasterol, todos en % p/p) y los esteróles derivados vegetales no hidrogenados (con una especificación de 40% de beta-sitosterol; 0% de sitostanol; 30- 36% de campesterol; 0% de campestanol y 6.8% de brasicasterol, todos en % en p/p) en una proporción de 83: 17% p/p se disuelven en solución IPA a 75°C para lograr la solución de saturación. El producto se recristaliza de la solución de alcohol de isopropilo saturada a aproximadamente 6°C durante la noche antes de filtrarse en papel de filtro No. 1 Whatman utilizando un embudo de filtro de vidrio Buchner con succión al vacío. El material recristalizado se seca entonces a 35°C bajo atmósfera abierta en un horno caliente por 48 horas antes del almacenamiento en un tubo con tapón de rosca de polipropileno de 50 ml. El producto recristalizado así formado tuvo las siguientes especificaciones (% p/p) que caen satisfactoriamente dentro de los rangos deseados: Beta-sitosterol 6.8% Sitostanol 33.2% Estigmasterol 0% Campesterol 5.1 -6.1 % Campestanol 29.9-36.5% Brasicasterol 1-4% REFERENCIAS 1. Law M.R., Wald N.J., Wu., Hacksaw ZA., Bailey A.; Systemic underestimation of association between serum cholesterol concentration and ischemic heart disease in observational studies: Data from BUPA Study; Br. Med. J. 1994; 308:363-366 2. Law M.R., Wald N.J., Thompson S.G.; By how much and how quickly does reduction in serum cholesterol concentration lower risk of ischemic heart disease? Br. Med. J. 1994; 308:367-373 3. La Rosa J.C., Hunninghake D. Bush D. et al.; The cholesterol facts: A summary of the evidence relating to dietary fats, serum cholesterol and coronary heart disease:Ajoint statement by the American Heart Association and the National Heart, Lung and Blood Instituto. Circulation 1990; 81:1721-1733 4. Havel R.J., Rapaport E.. Drug Therapy: Management of Primary Hyperlipidemia. New England Journal of Medicine, 1995; 332:1491-1498 5. Kuccodkar et al.; Effects of plant sterols on cholesterol metabolisrn. Atherosclerosis, 1976; 23:239-248 6. Lees R.S., Lees A.M. Effects of sitosterol therapy on plasma lipid and fipoprotein concentrations. In: Greten H (Ed) Lipoprotein Metabolism. Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, 1976:119-124 7. Lees A.M., Mok H.Y.I., Lees R.S., McCIuskey M.A., Grundy S.M. Plant sterols as cholesterol-lowering agents., clinical triáis in patients with hypercholesterolemia and, studies of sterol balance. Atherosclerosis 1977; 28: 325-338 8. Mattson FH et al.: American Journal of Clinical Nutrition.35(4): 697-700, 1982 9. Gyling H. K. et al. Circulation 1996; 6:1-578 10. Hassan A.S. and Rampone A.J. J. Lipid Res. 1979:20; 646-653 11. Lees R.S, Lees A.M. Effects of sitosterol therapy on plasma lipids and lipoprotein concentrations, pp 119-124 in "Lipoprotein Metabolism" Ed Greten H., Berlin, Heidelburg, NY: Springer-Verlag, 1976 12. Mattson F.H., Volpenhein R.A. and Erickson B.A. J. Nutrition 1977:107; 1109-1146 13.Heinemann et al. Agents Actions(Suppl) 1988:26; 117-122

Claims

REIVINDICACIONES 1 . Una estructura cristalina de compuesto que comprende un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos. 2. La estructura según la reivindicación 1 , caracterizada porque el fitosterol se selecciona del grupo que consiste de sitosterol, campesterol, estigmasterol, brasicasterol, desmosterol, calinosterol, poriferasterol, clionasterol y todas las formas naturales o sintetizadas y derivados de los mismos, incluyendo isómeros. 3. La estructura según la reivindicación 1 , caracterizada porque el fitostanol se selecciona del grupo que consiste de todos los fitosteroles hidrogenados o saturados y todas las formas naturales o sintetizadas y derivados de los mismos, incluyendo isómeros. 4. Un método para tratar o prevenir enfermedad cardiovascular y sus condiciones fundamentales incluyendo aterosclerosis e hipocoleserolemia en un animal que comprende administrar al animal una estructura cristalina de compuesto que comprende un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos. 5. El método según la reivindicación 4, caracterizado porque el fitosterol se selecciona del grupo que consiste de sitosterol, campesterol, estigmasterol, brasicasterol, desmosterol, calinosterol, poriferasterol, clionasterol y todas las formas naturales o sintetizadas y derivados de los mismos, incluyendo isómeros. 6. El método según la reivindicación 4, caracterizado porque el fitostanol se selecciona del grupo que consiste de todos los fitosteroles saturados o hidrogenados y todas las formas naturales o sintetizadas y derivados de los mismos, incluyendo isómeros. 7. El método según la reivindicación 4, caracterizado porque el animal es humano. 8. Un método para disminuir el colesterol de suero en un animal que comprende administrara al animal una estructura cristalina de compuesto que comprende un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos. 9. Un producto terapéuticamente eficaz para tratar o prevenir la enfermedad cardiovascular, en particular sus condiciones fundamentales, aterosclerosis e hipercolesterolemia, que comprende una estructura cristalina de compuesto que comprende un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos y un vehículo de grado alimenticio o farmacéuticamente aceptable de los mismos. 10. Una bebida o comestible que comprende una estructura cristalina de compuesto de un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los. 1 1 . Un proceso para hacer una estructura cristalina de compuesto de un fitosterol y un fitostanol, o un derivado de cualquiera de los dos, que comprende: a) disolver el fitosterol y el fitostanol en un solvente a una temperatura ambiente o temperatura arriba de la temperatura ambiente pero inferior al punto de ebullición del solvente; b) enfriar al solvente para permitir la formación de cristal; y c) filtrar y enjuagar los cristales así formados. 12. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el solvente es cualquier hidrocarburo que tiene de 5 a 10 átomos de carbono. 13. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el solvente es cualquier alcohol que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. 14. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el solvente es aromático. 15. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el solvente es cualquier acetona que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. 16. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el solvente es cualquier éster derivado de ácidos carboxílicos que tiene de 2 a 10 átomos de carbono. 17. El proceso según la reivindicación 15, caracterizado porque el solvente es acetato de etilo. 18. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el fitosterol y fitostanol se disuelven en el solvente a una temperatura de entre 18 y 80°C. 19. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el solvente se enfría, en la etapa b) a una temperatura de entre 1 y 20°C. 20. El proceso según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el fitosterol se selecciona del grupo que consiste de sitosterol, campesterol, estigmasterol, brasicasterol, desmosterol, calinosterol, poriferasterol, clionasterol y todas las formas naturales o sintetizadas y derivados de los mismos, incluyendo isómeros. 21 . El método según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque el fitostanol se selecciona del grupo que consiste de todos los 5 fitosteroles saturados o hidrogenados y todas las formas naturales o sintetizadas y derivados de los mismos, incluyendo isómeros. niiiiillliHiii- *^"t""1,^,_--.,_t.-J_.»-_-__t,»___. .