MXPA99005669A - Compuestos novedosos con efecto analgesico - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula general (I), en donde m es 0ó1, y n es 1ó2, asícomo sus sales farmacéuticamente aceptables, composiciones farmacéuticas que comprende los compuestos novedosos y su uso en terapia, en particular en el manejo del dolor.

Description

COMPUESTOS NOVEDOSOS CON EFECTO ANALGÉSICO CAMPO DE IA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con compuestos novedosos de anillo con nitrógeno, con un proceso para su preparación, con su uso y con composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos novedosos. Los compuestos novedosos son útiles en terapia, y en particular para el tratamiento del dolor.

ANTECEDENTES Y TÉCNICA ANTERIOR Se ha identificado al receptor d como receptores que tienen un papel en muchas funciones corporales tales como el sistema circulatorio y del dolor. Por lo tanto, los ligandos para el receptor d encuentran uso potencial como analgésicos y/o agentes antihipertensivos. También se ha demostrado que los ligandos para el receptor d poseen actividades inmunomoduladoras. Ahora se ha establecido bien la identificación de por lo menos tres poblaciones diferentes de receptores opioides (µ, d y K) y los tres son evidentes en los sistemas nervioso tanto central como periféricos de muchas especies, incluyendo al REF. 30452 hombre. Se ha observado la analgesia en diversos modelos animales cuando se han activado uno o más de estos receptores. Con algunas excepciones, los ligandos d de opioide selectivos disponibles actualmente son naturaleza peptidica y no son adecuados para administración por vias sistémicas. Durante cierto tiempo han estado disponibles algunos antagonistas d no peptidicos (véase Takemori y Portoghese, 1992, Ann. Rev. Pharmacol. Tox., 32:239-269, para una revisión) . Estos compuestos, por ejemplo naltrindol, adolecen de una selectividad más bien pobre (es decir, <10 veces) por el receptor d versus la unión al receptor µ y no muestran actividad analgésica, un hecho el cual subraya la necesidad dada por el desarrollo de ligandos d no peptidicos altamente selectivos . Por lo tanto, el problema que subyace en la presente invención es encontrar analgésicos nuevos que tengan efectos analgésicos mejorados, pero también con un perfil de efecto colateral mejorado con respecto a los agonistas actuales µ asi como con la eficacia oral potencial. Los analgésicos que se han identificado y que existen en la técnica anterior tienen muchas desventajas en que presentan una farmacocinética pobre y no son analgésicos cuando se administran por vias sistémicas. Además, se ha documentado que los documentos preferidos, descritos dentro de la técnica anterior, muestran efectos convulsivos significativos cuando se administran sistémicamente. El problema mencionado antes se ha resuelto al desarrollar compuestos novedosos los cuales poseen un anillo piperidina, el cual puede ser un anillo de nitrógeno de 5 miembros, de 6 miembros o de 7 miembros, como se describirá en lo siguiente.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Los compuestos novedosos de acuerdo con la presente invención se definen por la fórmula general (I) en donde m es 0 ó 1; n es 1 ó 2; R1 se selecciona de hidrógeno; alquilo de Ci-Cg lineal o ramificado; cicloalquilo de C3-C8; (alquil-cicloalquil) C4-C8, en donde alquil es alquil de CÍ-CJ, y cicloalquil es cicloalquil de C3-C6; bencilo; en donde G es un grupo hidroaromático o heteroaromático que tiene 5 ó 6 átomos, y en donde los heteroátomos se seleccionan de O, S y N; y y en donde n = 0 ó 1; arilo de C6-C10; o heteroarilo que tiene de 5 a 10 átomos que se seleccionan de cualquiera de C, S, y O; en donde el arilo y heteroarilo opcionalmente puede estar sustituido independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de cualquiera de hidrógeno, CH3, (CH2)pCF3, halógeno, CONR5R4, COOR5, COR5, (CH2)pNR5R4, (CH2) pCH3 (CH2) pSOR5R4, (CH2)pS02R5, y (CH2)pS02NR5, en donde R4 y R5 son cada uno independientemente como se definen para R1 antes, y p es 0, 1 ó 2; (alquil de C1-C2)-(aril de C6-C10) ; o (alquil de C^ C2) heteroarilo, las porciones heteroarilo tienen 5 a 10 átomos que se seleccionan de cualquiera de C, S, N y O, en donde el arilo o heteroarilo opcionalmente puede estar sustituido independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de cualquiera de hidrógeno, CH3, CONR5R4, COOR5, COR5, (CH2)qNR5R4, (CH2) qCH3 (CH2) qSOR5R4, (CH2)qS02R5, (ChP)qS0:NR5, y (CH2)q0R4, en donde R4 y R5 se definen, cada uno e independientemente, para R1 anterior, y q es 0, 1 ó 2; A es en donde R6, R0 R8, R9, R10, Ru, R12, R13, R14, R15, R16, R1^ y R18 son cada uno e independientemente como se definen para R1 antes y en donde el anillo fenilo de cada sustituyente A puede estar sustituido opcional e independientemente por 1 ó 2 sustituyentes Z1 y Z2 los cuales se seleccionan cada uno e independientemente, de hidrógeno, CH3, (CH2)rCF3, halógeno, CONR2R3, C02R2, COR2, (CH2)rNR2R3, (CH2) rCH3 (CH2) rSOR2, (CH2)rS02R2, y (CH2)rS02NR2R3, en donde R2 y R3 se define cada uno independientemente para R1 anterior, y en donde r es 0, 1 ó 2; X es O, S o NR19, en donde R19 es como se define para R1, B es una porción aromática, heteroaromática, hidroaromájtica o heterohidroaromática sustituida o no sustituida que tiene de 5 a 10 átomos que se seleccionan de cualquiera de C, S, N y O, sustituida opcional e independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de hidrógeno, CH3, (CH2)tCF3, halógeno, (CH2)tCONR5R\ (CH2)tNR5R4, (CH2)tCOR5, (CH2)tCOOR5, OR5, (CH2)tSOR5, (CH2)tS02R5, y (CH2)tS02NR5R4, en donde R4 y R5 se define cada uno independientemente para R1 anterior, y en donde t es 0, 1, 2 ó 3; . , Dentro del alcance de- la invención también están las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula (I), asi como isómeros, hidratos, isoformas y promedicamentos de los mismos. Los compuestos preferidos de acuerdo con la invención son compuestos de la fórmula (I) en donde R1 se selecciona de bencilo; -(CH2)n—G en donde G es un grupo hidroaromático o un grupo heteroaromático que tiene 5 ó 6 átomos, y en donde los heteroátomos se seleccionan de 0, S y N; y y en donde n = 0 ó 1; A se selecciona de cualquiera de ,17 en donde R6, R0 R8, R9, R16, R17 y R18 es cada uno e independientemente como se define para R1 en lo anterior; y Z1, Z2 y X es cada uno e independientemente como se define en lo anterior; B se selecciona de fenilo, naftilo, indolilo, benzofuranilo, dihidrobenzofuranilo, benzotiofenilo, pirrilo, furanilo, quinolinilo, isoquinolinilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, indanilo, indenilo, tetrahidronaftilo, tetrahidroquinilo, tetrahidroisoquinolinilo, ' tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, e indazolinilo, cada uno sustituido opcional e independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de hidrógeno, CH3, CF3, halógeno, -(CH2)tCONR5R4, -(CH2)tNR5R\ -(CH2)tC0R5, - (CH2) tC02Rs, y -OR5, en donde t es 0 ó 1; y en donde R4 y R5 es como se define antes. Los compuestos especialmente preferidos son compuestos de la fórmula (I) , en donde R1 es (alquil de C1-C2) fenilo e hidrógeno; A es en donde R6, R7, R8, R9 es cada uno un grupo etileno; y Z1 y Z2 son como se definen antes; B es fenilo o naftaleno; y m y n es cada uno 1, ó m es 1 y n es 0. Los sustituyentes A y B respectivamente, opcionalmente pueden estar sustituidos en cualquier posición del anillo. Por "halógeno" significamos cloro, flúor, bromo, y yodo. Por "arilo" significamos un anillo aromático que tiene de 6 a 10 átomos de carbono, tal como fenilo y naftilo. Por "heteroarilo" significamos un anillo aromático en el cual 1 ó más de los 5-10 átomos en el anillo son elementos diferentes al carbono, tales como N, S y 0. Por "hidroaromáticos" significamos una estructura de anillo aromático parcial o completamente saturada que tiene 5- 10 átomos de carbono en el anillo. Por "heterohidroaromático" significamos una estructura de anillo aromático parcial o completamente saturado en el cual 1 ó más de 5-10 átomos del anillo son elementos diferentes a carbono, tales como N, S y 0. Por "isómeros" queremos significar compuestos de la fórmula (I) los cuales difieren por la posición de su grupo y/u orientación funcional. Por "orientación" significamos estereoisómeros, diestereoisómeros, regioisómeros y enantiómeros . Por "isoformas" significamos compuestos de la fórmula (I) los cuales difieren por su red cristalina, tales como compuestos cristalinos y compuestos amorfos. Por "promedicamento" significamos derivados farmacológicamente aceptables, por ejemplo esteres y amidas, de manera que el producto de biotransformación resultante del derivado sea un medicamento activo. La referencia de Goodman y Gilmans, The Pharmacological basis of Therapeutics, 8th ed., McGra -Hill, Int. Ed. 1992, "Biotransformation of Drugs, p. 13-15, describe promedicamentos de.manera general, y se incorpora en la presente como referencia. Los compuestos novedosos de la presente invención son útiles en terapia, especialmente para el tratamiento de diversas condiciones de dolor tales como dolor crónico, dolor agudo, dolor por cáncer, dolor causado por artritis reumatoide, migraña, dolor visceral, etc. Sin embargo, esta lista no debe considerarse como limitante. Los compuestos de la invención son útiles como inmunomoduladores, especialmente para enfermedades autoinmunes tales como artritis, para injertos cutáneos, trasplantes de órganos y necesidades quirúrgicas similares, para enfermedades de colágeno, diversas alergias, para uso como agentes antitu orales y agentes antivirales.

Los compuestos de la invención son útiles en estado de enfermedad en donde está presente la degeneración o disfunción de receptores opioides o está implicado en ese paradigma. Esto puede involucrar el uso de versiones marcadas isotópicamente de los compuestos de la invención en técnicas de diagnóstico y en aplicación de generación de imágenes tales como tomografia de emisión de positrones (PET) . Los compuestos de la invención son útiles para el tratamiento de diarrea, depresión, incontinencia urinaria, diversas enfermedades mentales, tos, edema pulmonar, diversos trastornos gastrointestinales, daño en la médula espinal y adicción a drogas, que incluye el tratamiento de alcohol, nicotina, opioides y otras drogas de abuso, y para trastornos del sistema nervioso simpático, por ejemplo hipertensión. Los compuestos de la invención son útiles como un agente analgésico para uso durante la anestesia general y el cuidado monitoreado de anestesia. Las combinaciones de agentes con diferentes propiedades con frecuencia se utilizan para obtener un equilibrio de efectos necesarios para mantener el estado anestésico (por ejemplo, amnesia, analgesia, relajación muscular y sedación) . Entre estos se incluye una combinación de anestésicos inhalados, sustancias hipnóticas, ansioliticos, bloqueadores neuromusculares y opioides. Los compuestos de la presente invención en forma isotópicamente marcada son útiles como agentes de diagnóstico.

También está dentro del alcance de la invención el uso de cualquiera de los compuestos de acuerdo con la fórmula (I) anterior, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de cualquiera de las condiciones discutidas antes. Un aspecto adicional de la invención es un método para el tratamiento de un sujeto que padece de cualquiera de las condiciones descritas antes, por lo que se administra una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) anterior a un paciente en necesidad de tal tratamiento.

MÉTODOS DE PREPARACIÓN Los compuestos de la fórmula (I), como se describen antes, se pueden obtener por la arilación de una amina de fórmula (II) en donde R1, m y n son como se definen en la fórmula (I) anterior, y W es A o B como se define en la fórmula (I) anterior, por un agente arilante de fórmula (III) W - Z (III) en donde W es A o B, como se define en la fórmula (I) anterior, y Z es un sustituyente adecuado, es decir, un componente reactivo adecuado para ser utilizado en el proceso definido, el cual se apreciará por una persona familiarizada en la técnica, preferiblemente halógeno, triflato (CF3S03-) , mesilato (CH3S03-) , tosilato (CH3 (C6H4) S03-) , tributilestaño, triacetoxilado, diarilbismuto, borato (B(OH)2), cuprato, u otro de tales grupos conocidos en la técnica. La arilación puede ser catalizada por metales, preferiblemente Cu, Ni, Pd o sales, complejos, óxidos o hidróxidos de los mismos adecuados. La 4-aminopiperidina de fórmula (II) anterior se puede convertir completa o parcialmente a su anión correspondiente por tratamiento con bases, preferiblemente trietilamina, 4-dimetilaminopiridina, K2C03, NaOH, "NaH, diisopropilamida de litio, ter-butóxido de sodio o similares, antes un durante el proceso de arilación. La reacción se puede llevar a cabo en presencia de reactivos que formen "" plejos, preferiblemente trifenilfosfina, trifenilarsina, dibencilidenacetona, 2,2'-bis (difenilfosfino) -1,1' -binaftil, 1,1' -bis (difenilfosfino) - ferroceno, oxigeno y otro de tales compuestos conocidos en la técnica. La reacción opcionalmente se puede llevar a cabo en presencia de uno o más solventes tales como tolueno, diclorometano, tetrahidrofurano, dimetilformamida, dioxano, acetonitrilo o sulfóxido de dimetilo, o en mezclas de solventes . R1, y los sustituyentes en A y B del compuesto (I) , como se define en lo anterior, se pueden modificar antes durante la preparación de (I) a partir de (II) y (III) por métodos conocidos en la técnica, por ejemplo reducción, oxidación y alquilación. La amina de la fórmula (II) se puede preparar por aminación reductiva de una cetona de la fórmula (IV) en donde R1, R2, R3 m y n son como se definen en la fórmula (I) anterior, con una arilamina (V) sustituida W - NH2 (V) en donde W es como se define en la fórmula (II) anterior. La aminación reductiva se puede realizar en un proceso de una o de dos etapas que involucra un ácido de Br0nstedt o de Lewis y un agente reductor. Los ácidos adecuados son ácidos sulfúrico, ácido polifosfórico, ácido 4-toluensulfónico, isopropóxido de titanio, tricloruro de aluminio, eterato de dietilo de trifluoruro de boro, o similares. Los agentes reductores adecuados son hidrógeno en presencia de catalizador, preferiblemente Pd, Pd-C, Pd(0H)2, Pt02, Rh-C o níquel Raney, borohidruro de sodio, cianoborohidruro de sodio, hidruro de litio y aluminio, diborano, hidruro de di-iso-butilaluminio, o similar. La reacción se puede llevar a cabo en presencia de uno o más solventes los cuales pueden ser orgánicos o inorgánicos, tales como tolueno, diclorometano, éteres, alcoholes, ácido acético, agua, o en mezcla de solvente. R1 y los sustituyentes en W del compuesto (II), como se define en lo anterior, se pueden modificar después o durante la preparación de (I) a partir de (II) y (III) , por métodos conocidos en la técnica, por ejemplo, reducción, oxidación, y alquilación, después o durante la preparación de (II) a partir de (IV) y (V) .

Los compuestos de fórmula (III), (IV), y (V) pueden estar disponibles comercialmente, se pueden preparar por procedimientos en la literatura o se pueden preparar por métodos conocidos en la técnica. Ahora se describirá con mayor detalle la invención por medio de los siguientes ejemplos, los cuales no deben ser considerados de manera alguna como limitantes de la invención.

EJEMPLOS EJEMPLO 1 (i) Preparación de 4- [N- (l-bencll-p±perxdln-4-il) amino-N,N-dietilbenzamida (compuesto 1) (1) Se agrega Ti(Oi-Pr)4 (14.8 ml, 50 mmoles) a una mezcla de 4-amino- (N,N-dietil) -benzamida (4.81 g, 25 mmoles) y l-bencil-4-piperidona (6.95 ml, 37.5 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se somete a sonicado a 40°C durante 2 h y se agita a 60°C durante 15 h. La mezcla se enfria en un baño de hielo y EtOH (100 ml) y se agregan granulos de NaBH4 (3.5 g, 91 mmoles) . Después de agitar durante 1 h a 0°C y 20 h a temperatura ambiente, se agrega NH4OH 1M (50 ml) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, y se diluye con CH2C12 (100 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa se extrae con CH2C12 (100 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavan con NaHC03 (acuoso, saturado, 100 ml) y se secan sobre K2C03. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, PhMe a Me2CO) y cristalización (PhMe) para proporcionar el compuesto 1 del titulo (7.48 g, 82%) como un sólido beige. IR (KBr) : 3343, 2939, 1608, 1528, 1458, 1422, 1339, 1285, 1174, 1091, 981, 827, 735 cirf1. XH RMN (CDC13) : 7.32 (d, 4H) , 7.26 (t, 1H) , 7.23 (d, 2H) , 6.54 (d, 2H) , 3.72 (s amplio, 1H) , 3.53 (s, 2H) , 3.42 (d amplio, 4H) , 3.32 (s amplio, 1H) , 2.84 (d, 2H) , 2.15 (t, 2H) , 2.02 (d, 2H), 1.48 (c, 2H) , 1.17 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 171.7, 148.1, 138.3, 129.1, 128.5, 128.2, 127.0, 125.3, 112.2, 63.1, 52.2, 49.8, 41.5 (amplio), 32.4, 13.6 (amplio) . Se preparó una muestra analítica por recristalización a partir de PhMe. Análisis calculado para C23H31N30: C, 75.58; H, 8.55; N, 11.50 encontrado: C, 75.58; H, 8.63; N, 11.31 (ii) Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -anilino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 2) (2) Una mezcla de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 1) (0.58 g, 1.59 mmoles), Ph3Bi (0.84 g, 1.90 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.43 g, 2.38 mmoles) en PhMe (25 ml) se calienta a 110°C durante 15 h. Se agregan Ph3Bi (0.84 g, 1.90 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.43 g, 2.38 mmoles), y la mezcla se agita a reflujo durante 6 h. Se agregan Ph3Bi (0.84 g, 1.90 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.43 g, 2.38 mmoles), la mezcla se agita a reflujo durante 15 h, se permite que se enfrie y se suspende con NH4OH 1M (5 ml) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, se diluye con EtOAc (25 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa de color azul oscuro se extrae con EtOAc (25 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavan con H20 (50 ml) y salmuera (25 ml) y se secan sobre K2C03.

La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, PhMe a Me2C0) para proporcionar el compuesto 2 del titulo (0.33 g, 47%) como un aceite incoloro. xñ RMN (CDC13) : 7.53 (t, 2H) , 7.29-7.18 (m, 8H) , 7.01 (d, 2H) , 6.58 (d, 2H) , 3.85 (t, 1H) , 3.49 (s, 2H) , 3.42 (d, 4H), 2.95 (d, 2H), 2.11 (t, 2H) , 1.92 (d, 2H) , 1.51 (c, 2H) , 1.17 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 171.5, 149.0, 143.6, 138.2, 129.5, 129.1, 128.7, 128.2, 128.1, 127.0, 126.7, 125.4, 116.0, 63.1, 55.5, 53.3, 40 (amplio), 30.7, 13 (amplio). Se obtiene una muestra analítica como el clorhidrato al agregar una solución de la base -libre en éter/EtOH a HCl etéreo diluido en hielo frió.

IR (KBr) : 3423, 2975, 2934, 2529, 1606, 1458, 1285, 1094, 750, 705 crn-1. Análisis calculado para C29H35N30*HC1*H20: C, 70.21; H, 7.72; N, 8.47 Encontrado: C, 70.02; H, 7.61; N, 8.35 EJEMPLO 2 Preparación de 4- [N-bencil-piperidin-4-il) -4-metxl-anilino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 3) (3) Una mezcla de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -amino] - N,N-dietilbenzamida (compuesto 1) (0.37 g, 1.00 mmol), tri-4-tolilbismuto (1.59 g, 3.30 mmoles) y Cu(0Ac)2 (0.54 g, 3.00 mmoles) en PhMe (20 ml) se calienta a reflujo durante 16 h. Se permite que la mezcla se enfrie y se suspenden con H20 (2 ml) .

La mezcla se agita durante 1 h, se diluye con EtOAc (25 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa se extrae con EtOAc (25 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavan con H20 (50 ml) y salmuera (25 ml) y se secan sobre MgS04. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, CH2C12 a 8% Me0H/CH2Cl2) para proporcionar el compuesto 3 del titulo (0.09 g, 20%) como un aceite incoloro. XH RMN (CDC13) : 7.30-7.16 (m, 9H) , 6.94 (d, 2H) , 6.52 (d, 2H) , 3.83 (t, 1H) , 3.48 (s, 2H) , 3.42 (d, 4H) , 2.93 (d, 2H) , 2.36 (s, 3H) , 2.07 (t, 2H) , 1.90 (d, 2H) , 1.50 (c, 2H) , 1.16 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 171.6, 149.7, 140.4, 138.2, 136.1, 130.2, 130.2, 129.0, 128.1, 128.0, 126.9, 125.3, 113.8, 63.0, 55.4, 41 (amplio), 30.5, 21.0, 13 (amplio). Se obtiene una mezcla analítica como un clorhidrato al agregar una solución etérea de la base libre a HCl etero diluido y enfriado con hielo. IR (KBr) : 2936, 2528, 1605, 1510, 1457, 1428, 1284, 1094, 952, 742, 701 era"1. Análisis calculado para C30H37N3O*HCl*0.5 H20: C, 71.91; H, 7.84; N, 8.39 Encontrado: C, 71.75; H, 7.83; N, 8.32 EJEMPLO 3 Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -1-naftilamxno] -N,N-dxetilbenzamida (compuesto 4) (4) Una mezcla de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 1) (0.37 g, 1.00 mmol) de tri-1-naftilbismuto (0.53 g, 1.20 mmoles) y Cu(0Ac)2 (0.27 g, 1.50 mmoles) en PhMe (20 ml) se calienta a reflujo durante 17 h. Se agrega a temperatura ambiente tri-1-naftilbismuto (0.53 g, 1.20 mmoles) y Cu(0Ac)2 (0.27 g, 1.50 mmoles). La mezcla se agita a reflujo durante 22 h, se permite que enfrie y se suspende con NH4OH 1M (5 ml) . La mezcla se agita durante 30 min, se diluye con EtOAc (25 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa de color azul oscuro se extrae con EtOAc (25 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavan con H20 (50 ml) y salmuera (25 ml) y se secan sobre K2C03. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente PhMe a Me2CO) para proporcionar el compuesto 4 del titulo (0.41 g, 83%) como un sólido de color café. IR (KBr) : 2939, 2796, 1619, 1511, 1456, 1420, 1346, 1282, 1180, 1099, 783 crn-1. XH RMN (CDC13) : 7.83 (t, 2H) , 7.79 (d, 1H) , 7.51 (t, 1H), 7.46 (t, 1H) , 7.37 (t, 1H) , 7.31 (d, 1H) , 7.28-7.19 (m, 5H) , 7.17 (d, 2H) , 6.41 (d, 2H) , 4.08 (t, 1H) , 3.46 (s, 2H) , 3.40 (d,, 4H), 2.89 (d, 2H) , 2.11 (t, 2H) , 2.08 (s amplio, 2H) , 1.50 (s amplio, 2H) , 1.14 (t, 6H) . • 13C RMN (CDCI3) : 171.7, 149.8, 138.9, 138.1, 135.0, 133.4, 129.1, 129.0, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.0, 126.4, 126.2, 126.1, 124.6, 124.5, 112.2, 63.0, 56.5, 53.3, 40 (amplio), 30.4, 13.5 (amplio). Se obtiene una muestra analítica por recristalización a partir de EtOH. Análisis calculado para C33H37N30: C, 80.61; H, 7.59; N, 8.55 Encontrado: C, 80.48; H, 7.41; N, 8.52 EJEMPLO 4 Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -2-naf ilamino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 5) (5) Una mezcla de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 1) (0.67 g, 1.83 mmoles), tri-2-naftilbismuto (0.97 g, 2.20 mmoles) y Cu(0Ac)2 (0.50 g, 2.75 mmoles) en PhMe (35 ml) se calienta a reflujo durante 15 h. Se agrega tri-2-naftilbismuto (0.97 g, 2.20 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.50 g, 2.75 mmoles), y la mezcla se agita a reflujo durante 22 h. Se agrega tri-2-naftilbismuto (0.97 g, 2.20 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.50 g, 2.75 mmoles). Después se someter a reflujo durante 70 h, se permite que la mezcla se enfrie y se suspende con NH4OH 1M (10 ml) . La mezcla se agita durante 30 min, se diluye con EtOAc (35 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa de color azul oscuro se extrae con EtOAc (35 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavan con H20 (75 ml) y salmuera (35 ml) y se secan sobre MgS04. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, PhMe a Me2CO) para proporcionar el compuesto 5 del titulo (0.63 g, 70%) como un aceite café que solidifica al dejar reposar. IR (KBr) : 2935, 2807, 1614, 1510, 1424, 1248 crn-1. 01 RMN (CDC13) : 7.83-7.78 (m, 2H) , 7.74 (d, 1H) , 7.48-7.42 ( , 3H) , 7.27-7.21 (m, 7H) , 7.10 (dd, 1H) , 6.66 (d, 2H) , 3.94 (t, 1H) , 3.48 (s, 2H) , 3.43 (s amplio, 4H) , 2.94 (d, 2H) , 2.14 (t, 2H) , 1.99 (s, 2H) , 1.57 ( , 2H) , 1.17 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 171.4, 148.8, 141.3, 138.1, 134.2, 131.2, 131.2, 129.2, 129.0, 128.1, 128.0, 127.5, 127.4, 127.2, 126.9, 126.2, 125.4, 125.3; 116.8, 63.0, 55.8, 53.3, 41 (amplio) 30.7, 13.6 (amplio). Se obtiene una muestra analítica a partir de MeOH. Análisis calculado para C.H37N30: C, 80.61; H, 7.59; N, 8.55 Encontrado: C, 80.35; H, 7.59; N, 8.46 EJEMPLO 5 Preparación de N,N-dietil-4- (N-piperidin-4-il-anilino)benzamida (compuesto 6) (6) Una solución de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -anilino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 2) (1.21 g, 2.74 mmoles) en MeOH (25 ml) se hidrogena a 4.2 kg/cm2 (60 psi) durante 4 d en presencia de una cantidad catalítica de Pd(OH)2 en carbono. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, CH2C12 a CH2Cl2/MeOH (9:1) a CH2Cl2/MeOH/NH4OH (concentrado, acuoso) (80:18:2) para proporcionar el compuesto 6 del titulo (0.62 g, 64%) como un aceite incoloro. XH RMN (CDC13) : 7.37 (t, 2H) , 7.25-7.22 (m, 3H) , 7.01 (d, 2H), 6.61 (d, 2H) , 3.98 (t, 1H) , 3.42 (d amplio, 4H) , 3.17 (d, 2H) , 2.78 (t, 2H) , 2.00 (d, 2H) , 1.71 (s amplio, 1H) , 1.41 (c, 2H) , 1.18 (t, 6H) . • 13C RMN (CDCI3) : 171.4, 148.2, 143.1, 129.8, 128.0, 127.9, 127.7, 125.7, 116.9, 53.5, 44.4, 41 (amplio), 28.7, 13.5 (amplio) . Se obtiene una muestra analítica como el clorhidrato al agregar una solución etérea de la fase libre a HCl etéreo diluido en frió con hielo. IR (KBr) : 3426, 3359, 2936, 2722, 1603, 1473, 1281, 1091, 708, 503 cm"1. Análisis calculado para C22H29N30*HC1*H20: C, 65.09; H, 7.95; N, 10.35 Encontrado: C, 65.37; H, 7.94; N, 10.38 EJEMPLO 6 Preparación de N,N-dietil-4- ( [N-piperidin-4-il] -1-naftilamino benzamida (compuesto 7) (7) Una solución de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -naftilamino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 4) (0.22 g, 0.45 mmoles) en EtOH (20 ml) se hidrogena a 4.2 kg/cm2 (60 psi) durante 64 h en presencia de una cantidad catalítica de Pd(OH)2 en carbono. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, CH2C12 a CH2Cl2/MeOH (9:1) a CH2Cl2/MeOH/NH4OH (acuoso concentrado) (80:18:2)) para proporcionar el compuesto 7 del titulo (0.12 g, 67%) como un aceite incoloro que solidifica al dejar reposar. IR (KBr) : 2942, 1609, 1512, 1448, 1280 crrf0 XH RMN (CDC13) : 7.86 (t, 2H) , 7.80 (d, 1H) , 7.50 (t, 1H) , 7.45 (t, 1H) , 7.36 (t, 1H) , 7.30 (d, 1H) , 7.18 (d, 2H) , 6.42 (d, 2H) , 4.20 (t, 1H) , 3.40 (d amplio, 4H) , 3.06 (d, 2H) , 2.79-2.63 (m, 3H) , 2.03 (s amplio, 2H) , 1.39 (s amplio, 2H) , 1.14 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 171.6, 149.4, 138.7, 134.8, 133.3, 128.7, 128.2, 128.1, 127.9, 126.3, 126.1, 126.0, 124.4, 124.2, 112.1, 56.1, 46.0, 41 (amplio), 31.3, 13.4 (amplio). Análisis calculado para C26H31N30*1.25 H20: C, 73.64; H, 7.96; N, 9.91 Encontrado: C, 73.77; H, 7.54; N, 9.96 EJEMPLO 7 Preparación de N,N-dietil-4- ( [N-piperidin-4-il] -2-naftilamino benzamida (compuesto 8) (8) Se agrega cloroformiato de (1-cloroetilo) (58 µl, 0.53 mmoles) a una solución de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -2-naftilamino] -N, N-dietilbenzamida (compuesto 5) (105 mg, 0.21 mmoles) en dicloroetano (2.5 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se calienta a reflujo durante 17 h y después se permite que se enfrie hasta la temperatura ambiente y se concentra. Se agrega metanol (2.5 ml) y la mezcla se calienta a reflujo durante 2.5 h, se permite que se enfrie y se concentra. El residuo se divide entre CH2C12 (10 ml) y NH4 OH 1M (10 ml) . Las capas se separan y la fase orgánica se lava con H20 (10 ml) y salmuera (10 ml) , y seca sobre K2C03. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, CH2C12 a CH2Cl2/MeOH/NH4OH (acuoso, concentrado) (85:13.5:1.5) y CLAP (LiChroPrep RP-18, elución con cantidades cada vez mayores de TFA 0.1%/MeCN en TFA 0.1%/H2O) para proporcionar el compuesto 8 del titulo (30 mg) como el trifluoroacetato . IR (puro) : 3420, 1680, 1600 cm"1. ?ñ RMN (CDC13, sal de TFA) d: 1.10 (6H, m) , 1.78 (2H, m) , 2.10 (2H, m, CH (CH) CH (N) CH (CH) ) , 3.00 (2H, m, CH(CH)NHCH(CH) ) , 3.35 (6H, m) , 4.15 (1H, m) , 6.65 (2H, m) , 7.00 (1H, m) , 7.20 (2H, m) , 7.40 (3H, m) , 7.75 (3H, m, Ar) .

EJEMPLO 8 Preparación de 4- [N- (1- [2-feniletil] -piperidin-4-il) anilino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 9) O) Se agrega (2-bromoetil) benceno (0.18 ml, 1.30 mmoles) con agitación a una solución enfriada con hielo de N,N-dietil- 4- (N-piperidin-4-il-anilino) benzamida (compuesto 6) (0.21 g, 0.59 mmoles), Et3N (0.10 ml, 0.75 mmoles) y una cantidad catalítica de 4-dimetilaminopiridina en CH2C12 (5 ml) . Se permite que la mezcla agitada alcance la temperatura ambiente durante 5 h, se calienta a reflujo durante 16 h, se permite que enfrie a temperatura ambiente, se diluye con CH2C12 (10 ml) y se lava con H20 (15 ml) , salmuera (15 ml) y se seca sobre K2C03. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, PhMe a PhMe/Me2CO (2:1)) para proporcionar el compuesto 9 del titulo (0.11 g, 40%) como un aceite incoloro el cual solidifica al dejar reposar. IR (KBr) : 2928, 1612, 1504, 1437, 1280, 1980, 754 cpT0 ^ RMN (CDC13) : 7.36 (t, 2H) , 7.30-7.15 (m, 8H) , 7.01 (d, 2H) , 6.61 (d, 2H) , 3.88 (t, 1H) , 3.42 (d amplio, 4H) , 3.08 (d, 2H) , 2.76 (m, 2H) , 2.57 (m, 2H) , 2.17 (t, 2H) , 1.97 (d, 2H), 1.55 (c, 2H) , 1.18 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 171.5, 149.0, 143.5, 140.3, 129.6, 128.6, 128.4, 128.1, 126.8, 126.1, 125.4, 116.1, 60.6, 55.5, 53.5, 41 (amplio), 33.9, 30.7, 13.6 (amplio). Análisis calculado para C30H37 3O*0.2 C3H60: C, 78.66; H, 8.24; N, 8.99 Encontrado: C, 78.55; H, 7.75; N, 8.91 EJEMPLO 9 (i) Preparación de 3- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 10) (10) Se agrega Ti(0i-Pr)4 (0.70 ml, 2.37 mmoles) a una mezcla de 3-amino- (N,N-dietil) benzamida (150 mg, 0.78 mmoles) y l-bencil-4-piperidona (0.18 ml, 0.97 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se somete a sonicado a 40°C durante 6 h y se agita a temperatura ambiente durante 15 h. La mezcla se enfria en un baño de hielo y se agregan EtOH (5 ml) y NaBH4 (75 mg, 1.98 mmoles) . Después de agitar durante 1 h a 0°C y 2 d a temperatura ambiente, se agrega NH4OH 2M (5 ml) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, se diluye con CH2C12 (10 ml) y se filtra a través de CeliteMR. Se separan las capas en el filtrado, se extrae la capa acuosa con CH2C12 (3x10 ml) . Las fases orgánicas combinadas se lavan con HCl 10% (2x15 ml) . Se ajusta el pH en los extractos acuosos combinados a 10 con NaOH 2N, y se extrae con CH2C12 (3x10 ml) . Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2S04, se filtran, se concentran y el residuo se purifica por cromatografía (9:1:0.1 EtOAc: heptano :Et3N) para proporcionar el compuesto 10 del titulo (173 mg, 61%) como un aceite espeso de color amarillo claro. IR (puro) : 3333, 1612 cm'0 XH RMN (CDC13) : 7.40-7.10 (7H, m) , 6.55 (2H, m) , 3.50 (4H, m) , 3.22 (4H, m) , 2.80 (2H, m) , 2.12 (2H, m) , 2.00 (2H, m) , 1.43 (2H, m) , 1.20 (3H, m) , 1.05 (3H, m) . 13C RMN (CDCI3) : 171.6, 147.1, 138.3, 138.2, 129.1, 129.0, 128.1, 126.9, 114.6, 113.8, 110.6, 63.0, 52.2, 49.8, 43.1, 38.9, "32.4, 14.1, 12.8. Análisis calculado para C23H31N30*HC1*2.1 H20: C, 63.07; H, 8.28; N, 9.59 Encontrado: C, 63.19; H, 7.94; N, 9.25 (ii) Preparación de 3- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -anilino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 11) (11) Una mezcla de 3- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 10) (360 mg, 0.98 mmoles), Ph3Bi (1.10 g, 2.50 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.45 g, 2.48 mmoles) en tolueno (10 ml) se calienta a 110°C durante 12 h. Se agrega otra porción de Cu(OAc)2 (0.45 g) y la mezcla se calienta a 110°C durante 12 h adicionales y se permite que enfrie hasta la temperatura ambiente. Se agrega agua (10 ml) y la mezcla se filtra a través de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, y la fase orgánica se lava con agua, salmuera, se seca sobre Na2S04 y se concentra. La cromatografía del residuo (9:1 de EtOAc/heptano) proporciona el compuesto 11 del titulo (255 mg, 59%) como un aceite espeso de color amarillo claro. IR (puro) : 3056, 3010, 2937, 2810, 1629 crn-1. XH RMN (CDC13) : 7.40-6.60 (14H, m) , 3.80 (1H, m) , 3.43 (s amplio, 4H) , 3.20 (2H, s amplio), 2.90 (2H, m) , 2.05 (2H, m) , 1.90 (2H, m) , 1.48 (2H, m) , 1.20 (3H, s amplio), 1.00 (3H, s amplio) . 13C RMN (CDCI3) : 171.3, 147.3, 144.4, 138.1, 129.3, 129.0, 128.0, 126.9, 126.4, 123.9, 119.7, 117.5, 116.5, 62.9, 55.3, 53.2, 43.0, 39.0, 30.6, 14.0, 12.7. Análisis calculado para C29H35N30*1.25HC1*0.5 H20: C, 70.15; H, 7.41; N, 8.47; Cl 8 94 Encontrado: C, 69.69; H, 7.34; N, 8.25; Cl 8.96 EJEMPLO 10 Preparación de N,N-dietil-3- (N-piperidin-4-il-anilino) benzamida (compuesto 12) (12) Una solución de 3- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -anilino] -N, N-dietilbenzamida (compuesto 11) (102 mg, 0.23 mmoles) en EtOH (15 ml) se hidrogena a 2.8 kg/cm2 (40 psi) en presencia de una cantidad catalítica de Pd(OH)2 en carbono, durante 2 h. La mezcla se filtra a través de CeliteMR y se concentra. El residuo se purifica por cromatografía (9:1:0.5 de EtOAc/heptano/Et3N) para producir el compuesto 12 del titulo (50 mg, 81%) como un aceite viscoso de color amarillo claro. IR (sal clorhidrato, puro) : 3421, 1597, 1494 cm"1. ? RMN (CDC13) : 7.80-6.50 (9H, m) , 4.00 (1H, m) , 3.21 (2H, s amplio) 3.30 (2H, m) , 3.20 (2?-, s amplio), 2.90 (2H, m) , 2.05 (2H, m) , 1.70 (2H, m) , 1.17 (3H, s amplio), 1.00 (3H, s amplio) . 13C RMN (CDCI3) : 171.0, 143.7, 140.7, 138.0, 129.5, 129.2, 128.2, 124.5, 119.7, 117.9, 116.5, 53.2, 43.1, 41.1, 39.0, 28.7, 14.0, 8.9. Se obtiene una muestra analítica como un clohidrato al agregar una solución etérea de la base libre a HCl diluido en frió con hielo. Análisis calculado para C28H33N30*HC1*1.3 H20: C, 62.30; H, 8-08; N, 9.91 Encontrado: C, 62.40; H, 7.67; N, 9.80 EJEMPLO 11 (i) Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperxdin-3-il) amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 13) (13) Se agrega Ti(Oi-Pr)4 (2.2 ml, 7.45 mmoles) a una mezcla de 4-amino- (N,N-dietil) benzamida (0.36 g, 1.87 mmoles) y l-bencil-3-piperidona (0.70 g, 3.69 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se somete a sonicado a 40°C durante 1 h, y se agita a temperatura ambiente durante 15 h. La mezcla se enfria en un baño de hielo y se agregan EtOH (15 ml) y NaBH4 (0.21 g, 5.55 mmoles). Después de agitar durante 16 h a temperatura ambiente, se agrega NH4OH 2M (15 ml) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, se diluye con CH2C12 (10 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa se extrae con CH2C12 (3x15 ml) . Las fases orgánicas combinadas se lavan con HCL 10% (2x20 ml) . El pH en los extractos acuosos combinados se ajustan a 10 con NaOH 2N, y se extrae con CH2C12 (3x10 ml) . Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2S04, se filtran y concentran. El residuo se purifica por cromatografía (9:1:0.1 de EtOAc/Et3N) para proporcionar el compuesto 13 del titulo (0.32 g, 47%) como un aceite espeso de color amarillo claro. IR (puro) 3320, 1736, 1608 cm"1. XH RMN (CDC13) : 7.20 (7H, m) , 6.50 (2H, m) , 4.22 (1H s amplio), 3.60-3.30 (7H, m) , 2.60 (1H, m) , 2.35 (3H, m) , 1.65 (2H, m) , 1.50 (2H, m) , 1.10 (6H, m) . 13C RMN (CDCI3) : 171.7, 147.9, 138.1, 128.7, 128.4, 128.1, 126.9, 124.9, 112.1, 63.0, 58.6, 53.5, 48.3, 41.4, 28.6, 22.3, 13.4. Análisis calculado para C23H31N30*HC1*2.1 H20: C, 62.81; H, 8.30; N, 9.55 Encontrado: C, 62.75; H, 7.94; N, 9.63 (ii) Preparación de 4- [N- (l-bencil-pxperxdin-3-xl) anilino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 14) (14) Una mezcla de 4- [N- (l-bencil-piperidin-3-il) -amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 13) (0.29 mg, 0.79 mmoles), Ph3Bi (0.87 g, 1.98 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.36 g, 1.98 mmoles) en tolueno (5 ml) , se calienta a 110°C durante 12 h, y se permite que enfrie hasta la temperatura ambiente. Se agrega agua (5 ml) y la mezcla se filtra a través de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan y la fase orgánica se lava con agua, salmuera, se seca sobre Na2S04 y se concentra. La cromatografía del residuo (9:1 de EtOAc/heptano) proporciona el compuesto 14 del titulo (0.24 g, 67%) como un aceite viscoso de color amarillo claro. IR (puro) : 3056, 3012, 2938, 2800, 1613, 1492 c "1. XH RMN (CDC13) : 7.40-7.10 (10H, m) , 6.95 (2H, d) , 6.55 (2H, d) , 4.05 (1H, m) , 3.45 (2H, s), 3.38 (4H, s amplio), 3.19 (1H), 2.75 (1H, m) , 1.90 (1H, m) , 1.80-1.60 (4H, m) , 1.12 (6H, m) . Se obtiene una muestra analítica como un clorhidrato al agregar una solución etérea de la base libre a HCl etéreo diluido en frió. 13C RMN (CDCI3) : 171.4, 148.8, 143.4, 138.2, 129.3, 128.7, 128.6, 128.4, 128.0, 127.8, 126.8, 125.3, 123.9, 115.7, 62.9, 57.2, 54.4, 53.2, 42 (b) , 29.8, 25.9, 13.4(b). Análisis calculado para C29H35N30*1.25HC1*0.5 H20: C, 70.15; H, 7.41; N, 8.47; Cl, 8.94 Encontrado: C, 70.30; H, 7.30; N, 8.43; Cl, 8.34 EJEMPLO 12 Preparación de N,N-dietil-4- (N-piperidin-3-il-anilino) benzamida (compuesto 15) (15) Una solución de 4- [N- (l-bencen-piperidin-3-il) -anilino] -N, N-dietilbenzamida (compuesto 14 ) (0.28 g, 0.63 mmoles) en EtOH (10 ml) se hidrogena a 2.1 kg/cm2 (30 psi) en presencia de una cantidad catalítica de Pd(OH)2 en carbono, durante 6 h. La mezcla se filtra a través de CeliteMR, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente 9:1:0 a 9:1:0.5 de EtOAc/heptano/Et3N) para proporcionar el compuesto 15 del titulo (80 mg, 36%) como un aceite viscoso de color amarillo claro. IR (puro) : 3300-3500, 1464 c "1.

XH RMN (CDCI3) : 7.35 (2H, m) , 7.18 (3H, m) , 6.95 (2H, m) , 6.56 (2H, m) , 4.30 (1H, s amplio), 4.0 (1H, m) , 3.38 (4H, s amplio), 2.95 (1H, m) , 2.35 (2H, m) , 1.95 (1H, m) , 1.70 (2H, m) , 1.15 (2H, m) , 1.10 (6H, m) . 13C RMN (CDCI3) : 171.3, 148.5, 142.8, 129.3, 128.5, 127.7, 126.4, 125.5, 115.4, 54.1, 49.3, 45.4, 44-38 (b) , 29.9, 25.6, 13.3(b) . Análisis calculado para C22H29N3O*HCl*0.4 H20: C, 66.87; H, 7.86; N, 10.63 Encontrado: C, 66.85; H, 7.68; N, 10.44 EJEMPLO 13 (i) Preparación de 3- [N- (l-bencil-piperidin-3-il) amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 16) (16) 13C RMN (CDCI3) : 171.4, 146.9, 138.1, 137.9, 128.9, 128.6, 127.9, 126.7, 114.1, 113.5, 110.4, 62.8, 58.5, 53.3, 48.3, 42.9, 38.7, 28.6, 22.2, 13.9, 12.6. (ii) Preparación de 3- [N- (l-bencil-piperidin-3-il) -anilino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 17) (17) Una mezcla de 3- [N- (l-bencil-piperidin-3-il) -amino] -N, N-dietilbenzamida (compuesto 16) (0.25 g, 0.68 mmoles), Ph3Bi (0.75 g, 1.70 mmoles) y Cu(0Ac)2 (0.31 mg, 1.70 mmoles) en tolueno (5 ml) se calienta a 110°C durante 14 h y se permite que enfrie hasta la temperatura ambiente. Se agrega agua (5 ml) y la mezcla se filtra a través de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan y la fase orgánica se lava con agua y salmuera, se seca sobre Na2S04 y se concentra. La cromatografía del residuo (9:1 de EtOAc/heptano) proporciona el compuesto 17 del titulo (0.16 g, 52%) como una aceite viscoso de color amarillo claro. IR (puro) : 3010, 2930, 1630, 1610 cm"1. XH RMN (CDC13) : 7.40-6.60 (14H, m) , 4.05 (1H, m) , 3.45 (4H, s amplio), 3.18 (2H, m) , 2.75 (1H, m) , 1.90 (1H, m) , 1.80-1.60 (4H, m) , 1.18 (3H, s amplio), 1.00 (3H, s amplio). 13C RMN (CDCI3) : 171.3, 147.1, 144.5, 138.3, 138.1, 129.3, 129.1, 128.8, 128.1, 126.9, 125.9, 123.7, 119.8, 117.8, 116.9, 63.0, 57.5, 54.4, 53.2, 43.1, 39.0, 29.9, 25.0, 14.1, 12.8. Análisis calculado para C29H35N30*1.4HC1*0.5 H20: C, 69.38; H, 7.46; N, 8.37; Cl, 9.91 Encontrado: C, 69.11; H, 7.14; N, 8.08; Cl, 10.12.

EJEMPLO 14 Preparación de N,N-dietil-3- (N-piperidin-3-il-anilino) benzamida (compuesto 18) (18) Una solución de 3- [N- (l-bencil-piperidin-3-il) -anilino] -N, N-dietilbenzamida (compuesto 17) (50 mg, 0.11 mmoles) en EtOH (5 ml) se hidrogena a 2.1 kg/cm2 (30 psi) en presencia de una cantidad catalítica de Pd(OH)2 en carbono, durante 6 h. La mezcla se filtra a través de CeliteMR, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, 9:1:0 a 9:1:0.5 EtOAc/heptano/Et3N) para proporcionar el compuesto 18 del titulo (15 mg, 36%) como un aceite viscoso de color amarillo claro. ^ RMN (CDC13) : 7.40-6.60 (9H, m) , 4.40 (1H, m) , 3.60 (2H, m) , 3.40 (2H, s amplio), 3.15 (3H, m) , 2.50 (2H, m) , 1.80 (2H) , 1.20 (2H, m) , 1.18 (3H, s amplio), 0.95 (3H, s amplio). 13C RMN (CDCI3) : 171.2, 146.9, 144.0, 138.0, 129.4, 126.4, 124.3, 119.7, 117.8, 116.5, 54.1, 45.1, 43.1, 39.0, 30.0, 14.0, 12.7. • Se obtiene una muestra analítica como el clorhidrato al' agregar una solución etérea de la base libre a HCl etéreo diluido y enfriado con hielo. IR (puro) : 3412, 1598, 1493 cm"1 Análisis calculado para C22H29N30*HC1*H20: C, 65.09; H, 7.95; N, 10.35 Encontrado: C, 65.03; H, 7.80; N, 10.02 EJEMPLO 15 (i) Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperidin-3-il) amino] -N, -dietilbenzamida (compuesto 19) (19) Se agrega Ti(Oi-Pr)4 (3.1 ml, 10.4 mmoles) a una mezcla de 4-amino- (N,N-dietil) benzamida (0.50 g, 2.51 mmoles) y l-bencil-3-pirrolidona (0.85 ml, 5.30 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se somete a sonicado a 40°C durante 3 h, y se agita a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se enfria en un baño de hielo y se agregan EtOH (30 ml) y NaBH4 (0.30 g, 8.00 mmoles). Después de agitar durante 16 h a temperatura ambiente, se agregan NH4OH 2M (20 ml) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, se diluye con CH2C12 (20 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa se extrae con CH2C12 (3x20 ml) . Las fases orgánicas combinadas se lavan con HCl 10% (2x20 ml) . Se ajusta el pH en los extractos acuosos combinados a 10 con NaOH 2N, y se extrae con CH2C12 (3x20 ml) . Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2S04, se filtran, se concentran y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, 9:1:0.5 a 9:0:1 EtOAc/heptano/Et3N) para proporcionar el compuesto 19 del titulo (0.40 g, 44%) como un aceite viscoso amarillo claro. IR (puro) : 3322, 1609, 1527, 1455 cm"1. XH RMN (CDC13) : 7.40-7.10 (7H, m) , 6.60-6.40 (2H, m) , 4.20 (1H, m) , 3.95 (1H, m) , 3.55 (2H, s), 3.35 (4H, s amplio), 2.70 (2H, m) , 2.50-2.35 (2H, m) , 2.25 (1H, m) , 1.60 (1H, m) , 1.15 (6H, t amplio). 13C RMN (CDCI3) : 171.4, 148.2, 138.4, 128.5, 128.2, 128.1, 126.7, 126.1, 113.8, 112.1, 60.5, 59.9, 52.5, 51.9, 41(b), 32.2, 13.3. (ii) Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperidin-3-il) -amino] -N,N-dietilbenzamida (compuesto 20) (20) Una mezcla de 4- [N- (l-bencil-pirrolidin-3-il) -amino] -N, N-dietilbenzamida (compuesto 19) (0.40 g, 1.14 mmoles), Ph3Bi (1.25 g, 2.84 mmoles), y Cu(0Ac)2 (0.52 g, 2.86 mmoles) en tolueno (10 ml) se calienta a 110°C durante 16 h y se permite que enfrie hasta la temperatura ambiente. Se agrega agua (5 ml) y la mezcla se filtra a través de CeliteMR. El filtrado se lava con agua, salmuera, se seca sobre Na2S04 y se concentra. La cromatografía del residuo (95:5 de EtOAc/MeOH) proporciona el compuesto 20 del título (0.19 g, 40%) como un aceite viscoso amarillo claro. 2H RMN (CDC13) : 7.40-7.18 (10H, m) , 7.05 (2H, m) , 6.70 (2H, m) , 4.57 (1H, m) , 3.60 (1H, d amplio), 3.40 (5H, m) , 2.80 (1H, m) , 2.60 (1H, m) , 2.58 (2H, m) , 2.20 (1H, m) , 1.90 (1H, m) , 1.18 (6H, s amplio). 13C RMN (CDCI3) : 171.4, 149.3, 145.2, 138.9, 129.4, 128.4, 128.1, 128.0, 127.7, 127.2, 126.7, 125.0, 117.1, 60.3, 58.3, 57.8, 53.0, 41(b), 29.5, 13.4. Se obtiene una muestra analítica como un clorhidrato al agregar una solución etérea de la base libre a HCl etéreo diluido en frío con hielo. IR (puro): 3430, 1610, 1457 cm"1. Análisis calculado para C28H33N30*HC1*1.3 H20: C, 68.99; H, 7.24; N, 8.62 Encontrado: C, 68.99; H, 7.57; N, 8.62 EJEMPLO 16 Preparación de N,N-dietil-4- (N-pirrolidin-3-il-anilino) benzamida (compuesto 21) (21) Una mezcla del compuesto 20 (90 mg, 0.2105 mmoles), NH40,CH (27 mg, 0.4282 mmoles) y una cantidad catalítica de Pd 10%/C en MeOH (5 ml) se agita vigorosamente a temperatura ambiente durante la noche. El catalizador se remueve a través de CeliteMR y el filtrado se condensa in vacuo para proporcionar una muestra cruda la cual se purifica a través de MPLC (100:0 a 9:1 de CH2Cl2/MeOH (TEA al 10%) en gel de silice 60) para proporcionar el compuesto 21 del título (30 mg, 42%) como un aceite espeso amarillo claro.

IR (sal clorhidrato, película) v: 3428 (NH) , 1607 (CONEt2) cm"1. XH RMN (amina libre, 400 MHz, CDC13) d: 1.06 (6H, m, 2xCH2CH3) , 1.90 (1H, m, ArNCHCH (CH) CH2) , 2.30 (1H, m, ArNCHCH (CH) CH2) , 2.58 (2H, m, ArNCHCH2CH2N) , 2.95 (1H, m, NHCH(CH)CH2) , 3.23 (lh, m, NHCH (CH) CH2) , 3.40 (4H, s amplio, 2xCH2CH3), 4.70 (1H, m, ArNCH), 6.68 (2H, m, Ar) , 7.22 (3H, m, Ar) , 7.38 (2H, m, Ar) . 13C RMN (amina libre, 100 Hz, CDC13) d: 13.4, 29.7, 41.9, 54.6, 57.9, 59.3, 117.5, 125.5, 127.9, 128.0, 129.7, 144.8, 149.2, 171.2. Análisis elemental calculado para C21H29N30C12.1.5H20: C, 57.66; H, 7.37; N, 9.61 Encontrado: C, 57.86; H, 7.38; N, 9.03 EJEMPLO 17 (i) Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) amino] -N,N-dietilbencensulfonamida (compuesto 22) (22) Se agrega Ti(0-i-Pr)4 (2.10 ml, 7.10 mmoles) a una mezcla de 4-amino- (N,N-dietil) bencensulfonamida (0.81 g, 3.55 mmoles) y l-bencil-4-piperidona (0.99 ml, 5.32 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se somete a sonicado a 40°C durante 40 min, y se agita a 60°C durante 18 h. La mezcla oscura se enfría en un baño de hielo y se agrega EtOH (15 ml) seguido por granulos de NaBH4 (0.5 g, 13.2 mmoles). Después de agitar durante 1 h a 0°C y 20 h a temperatura ambiente, se agrega NH4OH 1M (5 ml) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, se diluye con CH2C12 (25 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa se extrae con CH2C12 (15 ml) , y las fases orgánicas combinadas se lavan con NaHC03 (acuoso saturado, 25 ml) y se secan sobre K2C03. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, PhMe a Me2CO) para proporcionar el compuesto 22 del título (0.91 g, 46%) como un sólido canela. IR (KBr): 2942, 1560, 1520, 1321, 1146, 920 cm"1. XH RMN (CDC13) : 7.55 (d, 2H) , 7.34-7.23 (m, 5H) , 6.54 (d, 2H), 4.08 (d, 1H) , 3.53 (s, 2H) , 3.29 (s amplio, 1H) , 3.17 (c, 4H), 2.85 (d, 2H), 2.16 (t, 2H) , 2.01 (d, 2H) , 1.51 (c, 2H), 1.11 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 150.2, 138.2, 129.1, 129.0, 128.2, 127.0, 126.8, 63.0, 52.1, 49.6, 41.9, 32.2, 14.1. (ii) Preparación de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) amino] -N,N-dietilbencensulfonamida (compuesto 23) (23) Una mezcla de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -amino] -N,N-dietilbencensulfonamida (compuesto 22), (0.44 g, 1.10 mmoles), Ph3Bi (0.58 g, 1.31 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.30 g, 1.64 mmoles) en PhMe (20 ml) se calienta a reflujo durante 24 h. Se agregan Ph3Bi (0.58 g, 1.31 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.30 g, 1.64 mmoles) . La mezcla se agita a reflujo durante 24 h y se agregan Ph3Bi (0.58 g, 1.31 mmoles) y Cu(OAc)2 (0.30 g, 1.64 mmoles). Después de someter a reflujo durante 24 h, se permite que la mezcla enfríe y se suspende con NH4OH 1M (5 ml) . La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, se diluye con EtOAc (25 ml) y se filtra a través de una almohadilla de CeliteMR. Las capas en el filtrado se separan, la capa acuosa de color azul oscuro se extrae con EtOAc (25 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavan con H20 (50 ml) y salmuera (25 ml) y se secan sobre K2C03. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por cromatografía (gradiente, PhMe a Me2C0) para proporcionar el compuesto 23 del título (50 mg, 10%) como un aceite café. XH RMN (CDC13) : 7.51 (d, 2H) , 7.43 (t, 2H) , 7.35 (t, 1H), 7.30-7.22 (m, 5H) , 7.07 (d, 2H) , 6.48 (d, 2H) , 3.86 (t, 1H), 3.48 (s, 2H), 3.18 (c, 4H) , 2.94 (d, 2H) , 2.11 (t, 2H) , 1.91 (d, 2H), 1.50 (c, 2H) , 1.11 (t, 6H) . 13C RMN (CDCI3) : 151.8, 141.5, 138.1, 131.1, 129.9, 129.1, 128.6, 128.1, 127.5, 127.0, 125.9, 112.7, 63.0, 55.8, 53.1, 42.0, 30.6, 14.2.

La purificación por CLAP (LiChroPrep RP-18, elución con cantidades cada vez mayores de TFA 0.1%/MeCN en TFA 0.1%/H,O) proporciona una muestra analítica como un sólido blanco. IR (KBr): 3433, 1677, 1586, 1496, 1324, 1196, 1148, 719 c -1. Análisis calculado para C28H35N302S*1.25CF3COOH: C, 59.07; H, 5.89; N, 6.78 Encontrado: C, 59.00; H, 6.01; N, 7.01 EJEMPLO 18 Preparación de N,N-dietil-4- (N-piperidxn-4-il-anilino) bencensulfonamida (compuesto 24) (24) Se agrega cloroformiato de (1-cloroetilo) (10 µl, 0.1 mmoles) a una solución de 4- [N- (l-bencil-piperidin-4-il) -anilino] -N,N-dietilbencensulfonamida (compuesto 23) (19 mg, 40 µmoles) en tolueno (1 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se agita a reflujo durante 16 h, se permite que enfríe a temperatura ambiente y se concentra. Se agrega metanol (1 ml) y la mezcla se calienta a reflujo durante 4 h, se permite que enfríe y se concentra. El residuo se divide entre CH2C12 (5 ml) y NH4OH 1M (5 ml) . Las capas se separan y la fase orgánica se lava con H20 (5 ml) y salmuera (5 ml) y se secan sobre K2C03. La mezcla se filtra, se concentra y el residuo se purifica por CLAP (LiChroPrep RP-18, elución con cantidades cada vez mayores de TFA 0.1%/MeCN en TFA 0.1%/H2O) para proporcionar el compuesto 24 del título (13 mg, 84%) como el trifluoroacetato. IR (KBr) : 3420, 1658, 1199, 1146, 714 crn"1. 2H RMN (CD3OD) d: 7.66-7.63 (m, 4H) , 7.55 (t, 1H) , 7.28 (d, 2H), 6.76 (d, 2H) , 4.50 (t, 1H) , 3.54 (d, 2H) , 3.35-3.23 (m, 6H) , 2.34 (d, 2H) , 1.73 (c, 2H) , 1.19 (t, 6H) . 1C RMN (CD3OD) d: 153.4, 142.4, 132.8, 131.7, 130.1, 129.7, 128.8, 114.4, 53.6, 45.2, 43.6, 29.2, 14.9. Análisis calculado para C28H35N302Sx2CF3COOHxl . 5H20 : C, 46 . 73 ; H, 5 . 33 ; N, 6 . 54 Encontrado : C, 46 . 54 ; H, 5 . 01 ; N, 6 . 71 El mejor modo de realizar la invención, conocido hasta el momento, es utilizar los compuestos de los ejemplos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 17 y 18.

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Los compuestos novedosos de acuerdo con la presente invención se pueden administrar por via oral, intramuscular, subcutánea, tópica, intranasal, intraperitonial, intratorácica, intrevenosa, epidural, intratecal, intracerebroventricular y por inyección en las articulaciones. Una via preferida de administración es por vía oral, intravenosa o intramuscular. La dosificación dependerá de la via de administración, la gravedad de la enfermedad, la edad y el peso del paciente, y otros factores considerados normalmente por el médico quien atiende, cuando se determine el régimen individual y el nivel de dosificación como el más apropiado para un paciente particular. Para preparar composiciones farmacéuticas a partir de los compuestos de esta invención, los portadores inertes y farmacéuticamente aceptables pueden sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, tabletas, granulos dispersables, cápsulas, cachets y supositorios..

Un portador sólido puede ser una o más sustancias las cuales también pueden actuar como diluyentes, agentes saborizantes, solubilizantes, lubricantes, agentes que mejoran la suspensión, aglutinantes o agentes que desintegran la tableta; también puede ser un material encapsulante. En polvo, el portador es un sólido finamente dividido el cual está en una mezcla con el componente activo finamente dividido. En las tabletas, el componente activo se mezcla con el portador que tiene las propiedades de unión necesarias en proporciones adecuadas y compactado en la forma y tamaño deseados . Para preparar composiciones de supositorios, una cera de punto de fusión bajo, tal como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos y manteca de cacao se funde primero, y el ingrediente activo se dispersa en la misma, por ejemplo, por agitación. La mezcla homogénea fundida posteriormente se vierte en moldes dimensionados convenientemente y se permite que enfríe y solidifique. Los portadores adecuados son carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, lactosa, azúcar, peptina, dextrina, almidón, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, una cera con un bajo punto de fusión, manteca de cacao y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables son acetato, bencensulfonato, benzoato, bicarbonato, bitartrato, bromuro, acetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, citrato, diclorhidrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, glucaptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, baminohidrato, bromohidrato, clorhidrato, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, parmoato (embonato) , pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, _ silicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, tanato, tartrato, teoclato, trietiodida, benzatina, cloroprocaina, colina dietanolamina, etilendiamina, meglumina, procaina, aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y zinc. Las sales preferidas farmacéuticamente aceptables son los clorhidratos, trifluoroacetatos y bitartratos. Se considera que el término composición incluye la formulación del componente activo con un material encapsulante como un portador que proporciona una cápsula en la cual está rodeado el componente activo (con o sin otros portadores) por un portador el cual de esta manera está en asociación con el mismo. Similarmente, se pueden incluir cachets o saquitos. Las tabletas, polvos, cachets y cápsulas pueden ser utilizadas como formas de dosificación sólidas adecuadas para administración oral.

El líquido de las composiciones incluye soluciones, suspensiones y emulsiones. Las soluciones estériles en agua o en agua-propilenglicol de los compuestos activos se pueden mencionar como ejemplos de preparaciones líquidas adecuadas para administración parenteral. Las composiciones líquidas también se pueden formular en disolución, en una solución acuosa de polietilenglicol. Las soluciones acuosas para administración oral se pueden preparar al disolver el componente activo en agua y agregar colorantes, agentes saborizantes, estabilizantes y agentes espesantes adecuados según se desee. Las suspensiones acuosas para uso se pueden fabricar al dispersar el componente activo finamente dividido en agua junto con un material viscoso tal como gomas sintéticas o naturales, resinas, metilcelulos'a, carboximetilcelulosa de sodio y otros agentes que mejoran la suspensión conocidos en la técnica de formulaciones farmacéuticas . Preferiblemente, las composiciones farmacéuticas están en una forma de dosificación unitaria. En tal forma, la composición se divide en dosis unitarias que contienen cantidades apropiadas del componente activo. La forma de dosificación unitaria puede ser una preparación empacada, el empaque contiene cantidades separadas de las preparaciones, por ejemplo, tabletas empacadas, cápsulas y polvos en frascos o ampollas. La forma de dosificación unitaria también puede ser una cápsula, cachet o tableta en si misma, o puede ser una cantidad apropiada de cualquiera de estas formas empacadas.

EVALUACIÓN BIOLÓGICA A) MODELO IN VITRO Cultivo Celular Se hacen crecer células 293S humanas que expresan los receptores µ, d y K humanos clonados y resistencia a neomicina, en una suspensión a 37°C y C02 5% en matraces de agitación que contienen DMEM 10% libre de calcio FBS, BCS 5%, plurónico F-68 0.1% y 600 µg/ml de geneticina.

Preparación de Membrana Las células se sembraron en placas y se resuspendieron en amortiguador de lisis (Tris 50 mM, Ph 7.0, EDTA 2.5 mM con PMSF agregado justo antes de su uso a 0.1 mM a partir de un concentrado 0.1 M en etanol), incubado en hielo durante 15 min y después homogenizado con un polytron durante 30 seg. La suspensión se centrifugó a 1000 g (max) durante 10 in a 4°C. El sobrenadante se guardó en hielo y los sedimentos se resuspendieron y centrifugaron como en lo anterior. Los sobrenadantes de ambas centrifugaciones se combinaron y se centrifugaron a 46000 g (max) durante 30 min. Los sedimentos se resuspendieron en amortiguador Tris frío (Tris-Cl 50 mM, pH 7.0) y se centrifugaron nuevamente. Los sedimentos finales se resuspendieron en amortiguador de membrana (Tris 50 mM, sacarosa 0.32 M, pH 7.0). Se congelaron alícuotas (1 ml) en tubos de polipropileno en hielo seco/etanol y se almacenaron a -70°C hasta su uso. Las concentraciones de proteínas se determinaron por un ensayo de Lowry y modificado con SDS.

Ensayos de Unión Las membranas se recalientan a 37°C, se enfrian en hielo, se hacen pasar tres veces a través de una aguja calibre y se diluyen en amortiguador de unión (Tris 50 mM, MgCl2 3 mM, 1 mg/ml de BSA (Sigma A-7888) , pH 7.4, el cual se almacena a 4°C después de filtración después de un filtro de 0.22 m, y al cual se le ha agregado recientemente 5 µg/ml de aprotinina, bestatina 10 µM, diprotina A 10 µM, sin DTT) . Se agregan alícuotas de 100 µl (para µg de proteína véase tabla 1) a tubos de polipropileno de 12 x 75 mm, en hielo, que contienen 100 µl del radioligando apropiado (véase la tabla 1) , y 100 µl de péptidos de prueba, a diversas concentraciones. Se determinó la unión total (TB) y no específica (NS) en ausencia y presencia de naloxona 10 µM, respectivamente. Los tubos se sometieron a vortex y se incuban a 25°C durante 60-75 min, tiempo después del cual el contenido se filtra al vacio rápidamente y se lava con aproximadamente 12 ml/tubo de amortiguador de lavado con hielo (Tris 50 mM, pH 7.0, MgCl2 3 mM) a través de filtros GF/B (Whatman) , preenjuagados durante por lo menos 2 h en polietilenimina 0.1%. La radioactividad retenida (dpm) en los filtros se mide con un contador beta después de humedecimiento de los filtros durante por lo menos 12 h, en minifrascos que contienen 6-7 ml de fluido de centelleo. En el ensayo que se establece en placas de pozos de 96 lugares, la filtración es sobre filtros únicos enjuagados con PEÍ de 96 lugares, los cuales se lavaron con amortiguador de lavado 3 x 1 ml y se secaron en un horno a 55°C durante 2 h. Las placas de filtro se contaron en un equipo TopCount (Packard) después de agregar 50 µl de fluido de centelleo MS-20/pozo.

Análisis de Datos Se calculó la unión específica (SB) como TB-NS y la SB en presencia de diversos péptidos de prueba se expresan como porcentaje de SB control. Se calcularon los valores de CI50 y el coeficiente de Hill (nH) para ligandos en desplazamiento de radioligando unido específicamente a partir de gráficas logit de los programas de ajuste de curvas tales como Ligand, GraphPad Prism, SigmalPlot o receptor Fit. Se calcularon los valores Kx a partir de la ecuación de Cheng-Prussoff. Se reportan las medias + M.E.E. (media de error estándar) de CI50, ?0 y nH para ligandos probados en por lo menos tres curvas de desplazamiento .

Experimentos de Saturación de Receptor Se determinaron valores Kd de radioligando al realizar los ensayos de unión sobre membranas de célula con los radioligandos apropiados a concentraciones que varían desde 0.2 hasta 5 veces la K6 estimada (hasta 10 veces si las cantidades de radioligando necesario era factibles) . La unión específica de radioligandos se expresa como pmol/mg de proteína de membrana. Se obtienen los valores de Kd y ßmax para experimentos individuales a partir de ajustes no lineales de radioligando unido específicamente (B) vs nM libres (F) de individuo, de acuerdo con el modelo de un sitio.

B) MODELO BIOLÓGICO (MODELO IN VIVO) ADYUVANTE COMPLETO DE FREUND (FCA) Y MANGUITO DEL NERVIO ASCIÁTICO QUE INDUCE MECANO-ALODINIA EN RATA Animales Se utilizaron ratas macho Sprague-Da ley (Charles River, St-Constant, Canadá) que pesan 175-200 g en el momento de la cirugía. Se albergaron en grupos de tres en cuartos mantenidos termostáticamente a 20°C con ciclo de luz/oscuridad de 12:12 h y con acceso libre a alimento y agua. Después de la llegada, se permitió que los animales se aclimatarán durante por lo menos dos días antes de la cirugía. Los experimentos fueron aprobados por el Comité Ético Médico apropiado para estudios animales.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL ADYUVANTE COMPLETO DE FREUND Las ratas fueron anestesiadas primero en una cámara de Halotano después de lo cual se inyectaron 10 µl de FCA s.c. en la región dorsal de la pata izquierda, entre el segundo y tercero dígitos externos. Posteriormente a los animales se les permitió que se recuperaran de la anestesia bajo observación en su jaula propia.

MANGUITO DEL NERVIO CIÁTICO Se prepararon a los animales de acuerdo con el método descrito por Mosconi y Kruger (1996) . Se anestesian ratas con una mezcla de ketamina/xilazina i.p. (2 ml/kg) y se colocaron sobre su lado derecho, se realizó una incisión a lo largo del eje de la cara lateral del fémur izquierdo. Se separaron los músculos del cuadricep superior para mostrar el nervio ciático en el cual se colocó alrededor un manguito plástico (tubería PE-60 de 2 mm de largo) . La herida se cierra en dos capas con suturas de vicril y cera 3-0.

DETERMINACIÓN DE MECANO-ALODINIA UTILIZANDO LA PRUEBA DE VON FREY La prueba se realizó utilizando 0.8:00 y 16:00 h utilizando el método descrito por Chaplan et al. (1994) . Se colocaron ratas en una jaula de Plexiglás en la parte superior de un fondo de malla de alambre el cual permitía el acceso de las plantas, y se dejó que se habituaran durante 10-15 min. El área de prueba fue la planta del cuarto trasero izquierdo en la parte de la planta media, evitando las almohadillas de la patas menos sensibles. La planta de la pata se tocaba con una serie de pelos Von Frey 8 con rigidez logarítmicamente mayor (0.41, 0.69, 1.20, 2.04, 3.63, 5.50, 8.51 y 15.14 gramos; Stoelting, 111, USA) . El pelo de Von Frey se aplica desde el piso de la malla perpendicular a la superficie de la planta con fuerza suficiente para provocar un rechazo ligero contra la pata, y se mantenía durante aproximadamente 6-8 seg. Se observaba una respuesta positiva si la almohadilla se retiraba rápidamente. El retroceso inmediatamente ante la remoción del pelo también se consideraba como una respuesta positiva. El caminar se consideró una respuesta ambigua y en tales casos se repite el estímulo.

PROTOCOLO DE PRUEBA Se probaron animales en el día 1 posoperatorio para el grupo tratado con FCA y en el día 7 posoperatorio para el grupo con el manguito en el nervio ciático. Se determinó el umbral de retiro de 50% utilizando el método de arriba-abajo de Dixon (1980) . La prueba se inicia con pelo de 2.04 g, en la parte media de la serie. Los estímulos siempre se presentaron de manera consecutiva, ya sea ascendente o descendentemente. En ausencia de una respuesta de retiro de pata al pelo seleccionado inicialmente, se presentaba un estímulo más fuerte; en el caso de retiro de la planta de la pata, se elegía el siguiente estímulo más débil. El cálculo del umbral óptimo por este método requiere de 6 respuesta en la vecindad inmediata del umbral 50%, y la continuación de estas 6 respuestas comienza cuando se produce el primer cambio en la respuesta, por ejemplo cuando se cruza por primera vez el umbral. En los casos en los que los umbrales se encuentran fuera del intervalo de estímulo, se asignaron respectivamente valores de 15.14 (sensibilidad normal) o 0.41 (alodínico máximo) . El patrón resultante de respuestas positivas y negativas se tabula utilizando una gradación convencional, X = sin retiro; O = retiro, y se interpone el umbral de retiro 50% utilizando la fórmula: 50% g umbral = 10<xf + d,/10,000 en donde Xf = valor del último pelo von Frey utilizado (unidades logarítmicas) ; k = valor tabular (de Chaplan et al. (1994)) para el patrón de respuestas positivas/negativas; y d = diferencia media entre estímulos (unidades logarítmicas). En este caso, d = 0.224. Los umbrales de Von Frey se convierten a por ciento de posible efecto máximo (% MPE) , de acuerdo con Chaplan et al., 1994. Se utiliza la siguiente ecuación para calcular % MPE: % MPE = umbral tratado con medicamentos (g) - umbral con alodinia (g) X 100 umbral control (g) - umbral con alodinia (g) ADMINISTRACIÓN DE SUSTANCIA DE PRUEBA Se inyectó a ratas (por vía subcutánea, intraperitonial u oral) con una sustancia de prueba antes de realizar la prueba de von Frey, el tiempo de administración del compuesto de prueba y la prueba de von Frey varia en base a la naturaleza del compuesto de prueba. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos o productos a que la misma se refiere.

Claims (24)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones

1. Un compuesto de la fórmula (I) caracterizado porque: m es 0 ó 1; n es 1 ó 2; R1 se selecciona de hidrógeno; alquilo de C1-C6 lineal o ramificado; cicloalquilo de C3-C8; (alquil-cicloalquilo) de C4-C8, en donde alquilo es alquilo de C-L-C; y cicloalquilo es cicloalquilo de C3-C6; bencilo; en donde G es un grupo hidroaromático o heteroaromático que tiene 5 ó 6 átomos, y en donde los heteroátomos se seleccionan de O, S y N; y y en donde n = 0 ó 1; arilo de C6-C10; o heteroarilo que tiene de 5 a 10 átomos que se seleccionan de cualquiera de C, S, N y O; en donde el arilo y heteroarilo opcionalmente puede estar sustituido independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de cualquiera de hidrógeno, CH3, (CH2)pCF3, halógeno, CONR5R4, COOR5, COR5, (CH2) pNR5R4, (CH2)pCH3(CH2)pSOR5R\ (CH2)pS02R5, y (CH2)pS02NR5, en donde R4 y R5 son cada uno independientemente como se definen para R1 antes, y p es 0, 1 ó 2; (alquil de C1-C2)-(aril de C6-C10) ; o (alquil de Cx- C2) heteroarilo, las porciones heteroarilo tienen 5 a 10 átomos que se seleccionan de cualquiera de C, S, N y O, en donde el arilo o heteroarilo opcionalmente puede estar sustituido independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de cualquiera de hidrógeno, CH3, CONR5R4, COOR5, COR5, (CH2)qNR5R4, (CH2) qCH3 (CH2) qSOR5R4, (CH2)qS02R5, (CH2)qS02NR5, y (CH2)qOR4, en donde R4 y R5 se definen, cada uno e independientemente, para R1 anterior, y q es 0, 1 ó 2; A es ,17 en donde R6, R0 Rs, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R1"1 y R18 son cada uno e independientemente como se definen para R1 antes y en donde el anillo fenilo de cada sustituyente A puede estar sustituido opcional e independientemente por 1 ó 2 sustituyentes Z1 y Z2 los cuales se seleccionan cada uno e independientemente, de hidrógeno, CH3, (CH2)rCF3, halógeno, CONR:R3, C02R2, COR2, (CH2)rNR2R3, (CH2) rCH3 (CH2) rSOR2, (CH2)rS02R2, y (CH2)rS02NR2R3, en donde R2 y R3 se define cada uno independientemente para R1 anterior, y en donde r es 0, 1 ó 2; X es O, S o NR19, en donde R19 es como se define para R1, B es una porción aromática, heteroaromática, hidroaromática o heterohidroaromática sustituida o no sustituida que tiene de 5 a 10 átomos que se seleccionan de cualquiera de C, S, N y O, sustituida opcional e independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de hidrógeno, CH3, (CH2)tCF3, halógeno, (CH2)tCONR5R4, (CH2)tNR5R4, (CH2)tCOR5, (CH2)tCOOR5, OR5, (CH2)tSOR5, (CH,)tS02R5, y (CH2)tS02NR5R4, en donde R4 y R5 se define cada uno independientemente para R1 anterior, y en donde t es 0, 1, 2 ó 3; así como sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (I) e isómeros, hidratos, isoformas y promedicamentos de los mismos.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: R1 se selecciona de bencilo; en donde G es un grupo hidroaromático o heteroaromático que tiene 5 6 6 átomos, y en donde los heteroátomos se seleccionan de 0, S y N; y y en donde n = 0- ó 1; A se selecciona de cualquiera de en donde R6, R7, R8, R9, R16, R17 y R18 es cada uno e independientemente como se define para R1 en lo anterior; y Z1, Z2 y X es cada uno e independientemente como se define en lo anterior; B se selecciona de fenilo, naftilo, indolilo, benzofuranilo, dihidrobenzofuranilo, benzotiofenilo, pirrilo, furanilo, quinolinilo, isoquinolinilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, indanilo, indenilo, tetrahidronaftilo , t e t rahidroquinilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, e indazolinilo, cada uno sustituido opcional e independientemente por 1 ó 2 sustituyentes que se seleccionan independientemente de hidrógeno, CH3, CF3, halógeno, -(CH2)tCONR5R4, -(CH2)tNR5R4, -(CH2)tC0R5, - (CH2) tC02R5, y -OR5, en donde t es 0 ó 1; y en donde R4 y R5 es como se define para R1.

3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque: R1 es (alquil de Cx-C2) fenilo e hidrógeno; A es en donde R6, R7, R8, R9, es cada uno un grupo etileno; y Z1, Z2, son como se define en lo anterior; B es fenilo o naftaleno; y m y n son cada l o es l y n es O.

4. El compuesto de conformidad con la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se selecciona de cualquiera de 10 25

5. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque está en forma de su sal clorhidrato, bitartrato o trifluoroacetato.

6. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones previas, caracterizado porque se utiliza en terapia .

7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la terapia es manejo del dolor.

8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la terapia se dirige hacia trastornos gastrointestinales .

9. El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la terapia se dirige hacia daños en la médula espinal.

10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la terapia se dirige a desórdenes del sistema nervioso simpático.

11. El uso de un compuesto de conformidad con la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se utiliza para la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de dolor.

12. El uso de un compuesto de conformidad con la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se utiliza para la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de trastornos gastrointestinales .

13. El uso de un compuesto de conformidad con la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se utiliza para la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de daños en la médula espinal .

14. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado además porque está marcado isotópicamente.

15. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque se utiliza como un agente de diagnóstico.

16. Un compuesto marcado isotópicamente caracterizado porque es de fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1.

17. Un agente de diagnóstico, caracterizado porque comprende un compuesto de la fórmula (I), de conformidad con la reivindicación 1.

18. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de la fórmula (I), de conformidad con la reivindicación 1, como un ingrediente activo, junto con un portador farmacológica y farmacéuticamente aceptable.

19. Un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: (i) se somete una cetona de la fórmula (IV) en donde R1, m y n son como se definen en la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, a aminación reductiva con una arilamina sustituida de la fórmula (V) W - NH2 (V) en donde es como se define en la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, opcionalmente en presencia de un solvente, lo que proporciona un compuesto de la fórmula (ID en donde R1, m y n son como se definen en la fórmula (I) anterior, y es A o B, como se define en la fórmula (I) anterior; (ii) R1 y en la fórmula (II), opcionalmente se modifican después o durante la preparación de (II) a partir de (IV) y (V) ; (iii) el compuesto de la fórmula (II) que se obtiene en la etapa (i) se somete a una reacción de arilación, por reacción con un agente arilante de la fórmula (III) - Z (III) en donde W es A o B, como se define en la fórmula (I) anterior, y Z es un sustituyente adecuado, opcionalmente en principio de un catalizador, lo que proporciona un compuesto de la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1; y (iv) R0 y los sustituyentes en A y B, opcionalmente están modificados de manera adicional.

20. Un compuesto de la fórmula caracterizado porque R1, m y n son como se definen en la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, y W es como se define para A o B en la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1.

21. El compuesto de fórmula (II) de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque se selecciona de cualquiera de

22. Un método para el tratamiento de dolor, caracterizado porque se administra una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, a un sujeto en necesidad de manejo de dolor.

23. El método para el tratamiento de trastornos gastrointestinales, caracterizado porque se administra una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, a un sujeto que padece un trastorno gastrointestinal .

24. El método para el tratamiento de daño en la médula espinal, caracterizado porque se administra una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1, a un sujeto que padece de daño en la médula espinal.