MXPA98001992A - 1,4-benzotiazepin-1, 1-dioxidos hipolipemiantes - Google Patents

Abstract

La presente invención ser refiere a nuevos compuestos hipolipemiantes, a sus procedimientos y nuevos compuestos intermedios para su preparación, a composiciones farmacéuticas que los contienen y a su uso en medicina, particularmente en la profilaxis y tratamiento de estados hiperlipemiantes, tal como la ateroesclerosis. Compuestos de la fórmula (I):en la que R1 a R10 y X son como se ha definido.

Description

1 ,4-Benzotiazep¡n-1 , 1 -dióxidos hipolipemiantes La presente invención se refiere a nuevos compuestos hipolipemiantes, a procedimientos y nuevos compuestos intermedios para su preparación, a composiciones farmacéuticas que los contienen y a su empleo en medicina, particularmente en la profilaxis y tratamientos de estados-hiperlipemiantes, tales como la ateroesclerosis. Los estados hiperlipemiantes están con frecuencia asociados a elevadas concentraciones en el plasma de colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL) y colesterol de lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL). Dichas concentraciones pueden reducirse disminuyendo la absorción de los ácidos biliares procedentes del intestino. Un método por el que puede conseguirse esto es inhibiendo el sistema de absorción activo de los ácidos biliares en el íleo terminal. Dicha inhibición estimula la conversión por el hígado del colesterol en ácido biliar y el aumento resultante en la demanda de colesterol produce un aumento correspondiente en el índice de eliminación del colesterol de las LDL y VLDL del plasma o suero sanguíneo. Actualmente se ha identificado una nueva clase de compuestos heterocíclicos que reducen las concentraciones en plasma o suero del colesterol de las LDL y VLDL y en consecuencia son particularmente útiles como agentes hipolipemiantes. Disminuyendo las concentraciones de colesterol y éster de colesterol en el plasma, los compuestos de la presente invención retardan la acumulación de lesiones ateroescleróticas y reducen la incidencia de episodios relacionados con enfermedades cardíacas coronarias. Estos se definen como episodios cardíacos asociados con mayores concentraciones de colesterol y éster de colesterol en el plasma o suero. Para los fines de esta memoria, se define un estado hiperiipemiante como cualquier estado en el que la concentración total de colesterol (LDL + VLDL) en el plasma o suero es mayor que 240 mg/dl (6,21 mmol/l) (J. Amer. Med. Assn. 256, 20, 2849-2858 (1986)).

La solicitud de patente internacional N° WO 96/05188 describe compuestos de fórmula (0) Los autores de la presente invención han descubierto ahora un grupo de compuestos que tienen mayor actividad hipolipemiante in vivo que los descritos específicamente en la solicitud de patente internacional N° WO 96/05188. Los compuestos difieren en la definición del grupo R7. Por consiguiente, la presente invención proporciona compuestos de la fórmula (I): en la que R1 es un grupo alquilo de C1^ de cadena lineal; R2 es un grupo alquilo de C^ de cadena lineal; R es hidrógeno o un grupo OR11 en el que R11 es hidrógeno, un grupo alquilo de C^ o alquilcarbonilo de C^ opcionalmente sustituidos; R es piridilo o fenilo opcionalmente sustituido; R5, R6 y F son iguales o diferentes y cada uno se selecciona de hidrógeno, halógeno, ciano, R15-acetiluro, OR15 , alquilo de C^g opcionalmente sustituido, COR15, CH(OH)R15, S(O)nR15, P(O)(OR15)2, OCOR15, OCF3, OCN, SCN, NHCN, CH2OR15, CHO, (CH2)pCN, CONR12R13, (CH2)pCO2R15, (CH2)pNR12R13, CO2R15, NHCOCF3, NHS02R15, OCH2OR15, OCH=CHR15, 0(CH2CH2O)nR15, O(CH2)pS03R15, O(CH2)pNR12R13 y 0(CH2)pN+R12R13R14 en los que P es un número entero de 1-4, n es un número entero de 0-3 y 10 R 12 R13, R14 y R15 se seleccionan independientemente de hidrógeno y alquilo de C^ opcionalmente sustituido; R' es un grupo de la fórmula en la que los grupos hidroxilo pueden estar sustituidos con acetilo o bencí- lo, o -20 — alquil (CrC6)-R 17 en el que el grupo alquilo puede estar sustituido con uno o más grupos hidroxilo; 25 R 16 es -COOH -CH2-OH; -CH2-0-acetil, -COOMe, -COOEt; R 17 es H, -OH, -NH2, -COOH o COOR18; R 18 es alquilo (CrC4) o -NH-alquilo (C C4); X es -NH- u -O-; y R9 y R10 son iguales o diferentes y cada uno es hidrógeno o alquilo de C,_g; 30 y sus sales, solvatos y derivados fisiológicamente funcionales.

Cuando R4 es un grupo fenilo sustituido, puede tener de uno a cinco, preferiblemente uno o dos sustituyentes iguales o diferentes y cada uno seleccionado de halógeno, hidroxi, nitro, fenil-alcoxi de C^, alcoxi de C,^ , alquilo de C^ opcionalmente sustituido, S(0)nR15, C02R15, 0(CH2CH20)nR15, 0(CH2)pS03R15, 0(CH2)pNR12R13 y 0(CH2)N+R12R13R14, en los que R12 a R15, n y p son como se han definido anteriormente. Las realizaciones preferidas de los compuestos de fórmula (I) incluyen compuestos de la fórmula (III), (IV) o (IVa) ) en las que R1 a R10 y X son como se han definido anteriormente. Cuando uno o más de R3 a R6, R8 o R11 a F 4 es un grupo alquilo de C^__ sustituido, o comprende un grupo alquilo de C1^, los sustituyentes pueden ser iguales o diferentes y cada uno se selecciona de hidroxi, halógeno, alquilo de C^, alcoxi de C^, COR20, nítrilo, C02R2°, S03R2°, NR21R22, N+R21R22R23, en los que R20 a R23 son iguales o diferentes y cada uno se selecciona de hidrógeno o alquilo de C1^. Adecuadamente R1 es metilo, etilo o n-propilo y preferiblemente R1 es etilo. Adecuadamente R2 es metilo, etilo, n-propilo, n-butilo o n-pentilo. Preferiblemente R2 es n-butilo. Preferiblemente R5 es hidrógeno. Adecuadamente R7 se selecciona de Adecuadamente X es -O-. Adecuadamente R9 y R10 son hidrógeno, metilo o etilo, hidrógeno Preferiblemente R9 y R10 son ambos hidrógeno. - Adecuadamente R4 es piridilo o fenilo opcionalmente sustituido, preferiblemente en la posición 4 y/o 3 con halógeno, metilo, etilo, metoxi, etoxi, trifluorometilo, hidroxi, carboxi u O(CH2)3SO3H. Preferiblemente R4 es fenilo no sustituido. En los compuestos de la fórmula (III): adecuadamente al menos uno, y preferiblemente todos, de R5, R6 y R8 son hidrógeno. Cuando R5, R6 y R8 son distintos de hidrógeno son adecuadamente alquilo de C^ opcionalmente sustituido con flúor, alcoxi de C1-4, halógeno o hidroxi, más adecuadamente metilo, metoxi, hidroxi, trifluorometilo o cloro y preferiblemente metoxi. En los compuestos de la fórmula (IV): adecuadamente dos o tres de R5, R6 y ff son hidrógeno, siendo los otros alquilo de C1^4 opcionalmente sustituido con flúor, alcoxi de C^, halógeno o hidroxi y más adecuadamente metilo, metoxi, hidroxi, trifluorometilo o cloro y preferiblemente metoxi.

En los compuestos de fórmula (IVa): adecuadamente al menos uno, y preferiblemente todos, de R5, R6 y R8 son hidrógeno. Cuando R5, R6 y R8 son distintos de hidrógeno, son adecuadamente alquilo de C1^4 opcionalmente sustituido con flúor, alcoxi de C1^, halógeno o hidroxi, más adecuadamente metilo, metoxi, hidroxi, trifluorometilo o cloro y preferiblemente metoxi. Más preferiblemente, R1 es n-butilo, R2 es etilo, R3, R5, R6, R8, R9 y R10 son hidrógeno, R4 es fenilo y R7 es Las sales farmacéuticamente aceptables son particularmente adecuadas para aplicaciones médicas debido a su mayor solubilidad acuosa con relación a los compuestos precursores, es decir básicos. Dichas sales deben tener claramente un anión o catión farmacéuticamente aceptable. Las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables adecuadas de los compuestos de la presente invención incluyen los derivados de ácidos inorgánicos, tales como ácidos clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, metafosfórico, nítrico, sulfónico y sulfúrico, y de ácidos orgánicos, tales como ácidos acético, bencenosulfónico, benzoico, cítrico, etanosulfónico, fumárico, glucónico, glicólico, isotiónico, láctico, lactobiónico, maleico, málico, metanosulfónico, succínico, p-toluenosulfónico, tartárico y trifluoroacético. Para fines médicos se prefiere particularmente la sal cloruro. Las sales de bases farmacéuticamente aceptables adecuadas incluyen sales de amonio, sales de metales alcalinos, tales como sales de sodio y potasio, y sales de metales alcalino-térreos, tales como sales de magnesio y calcio. Las sales que tienen un anión no farmacéuticamente aceptable están dentro del alcance de la invención como compuestos intermedios útiles para la preparación o purificación de sales farmacéuticamente aceptables y/o para uso en aplicaciones no terapéuticas, por ejemplo in vitro.

La expresión "derivado fisiológicamente funcional" como se utiliza en la presente memoria se refiere a cualquier derivado fisiológicamente aceptable de un compuesto de la presente invención, por ejemplo, un éster, que por administración a un mamífero, tal como un ser humano, es capaz de proporcionar (directa o indirectamente) dicho compuesto o uno de sus metabolitos activos. Un aspecto adicional de la presente invención está constituido por los profármacos de los compuestos de la invención. Dichos profármacos pueden metabol izarse in vivo dando un compuesto de acuerdo con la invención. Estos profármacos pueden ellos mismos ser o no ser activos. i o Los compuestos de la presente invención pueden también existir en diferentes formas polimórficas, por ejemplo, formas amorfas y polimórficas cristalinas. Todas las formas polimórficas de los compuestos de la presente invención están dentro del alcance de la invención y son uno de sus aspectos adicionales. 15 El término "alquilo" como se utiliza en la presente memoria se refiere, a menos que se indique otra cosa, a un radical monovalente de cadena lineal o ramificada. Igualmente, el término "alcoxi" se refiere a un radical monovalente de cadena lineal o ramificada unido al resto molecular precursor por medio de un átomo de oxígeno. El término 'fenilalcoxi" se refiere a un grupo fenilo 0 monovalente unido a un grupo alquileno de C1^ divalente que a su vez está unido al resto molecular precursor por medio de un átomo de oxígeno. Los compuestos de fórmula (I) existen en formas en las que los centros de carbono -C(R1)(R2)- y -CHR4- es/son quirales. La presente invención incluye dentro de su alcance cada isómero óptico posible sustancialmente libre, es decir asociado con menos de un 5%, de cualquier otro(s) isómero(s) óptico(s), y mezclas de uno o más isómeros ópticos en cualesquiera proporciones, incluyendo las mezclas racémicas. Para los fines de esta memoria, las quiralidades absolutas de los centros de carbono antes citados se dan en el orden -C(R1)(R2), y a continuación -CHR4-.

En los casos en los que la estereoquímica absoluta en -C(R )(R2)-, y -CHR4- no ha sido determinada, los compuestos de la invención se definen en función de las posiciones relativas de los sustituyentes R1/R2 y H/R4. Así los compuestos en los que el más voluminoso de los sustituyentes R1 y R2, es decir 5 el sustituyente de mayor masa, y el sustituyente R4 están ambos situados al mismo lado del anillo de tiazepina se denominan en la presente memoria "cis" y los compuestos en los que el más voluminoso de los sustituyentes R1 y R2 está situado en lados opuestos del anillo se denominan "trans" y se prefieren. Será evidente para los expertos que tanto los compuestos "cis" como "trans" de la i o invención puede existir cada uno en dos formas enantiómeras que se denominan individualmente "(+)-" o "(-)-" de acuerdo con la dirección de rotación de un plano de luz polarizada cuando pasa a través de una muestra del compuesto. Los compuestos cis o trans de la invención en los que los enantiómeros individuales no han sido resueltos se denomina en la presente memoria utilizando el prefijo "(+)-". De acuerdo con aspectos adicionales de la invención, se proporcionan también: (a) compuestos de fórmula (I) y sus sales, solvatos y derivados 0 fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables, para uso como agentes terapéuticos, particularmente en la profilaxis y tratamiento de estados clínicos para los que está indicado un inhibidor de la absorción de ácidos biliares, por ejemplo un estado hiperlipemiante, tal como la ateroesclerosis; (b) composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (I) o uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables, al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable y, opcionalmente, uno o más de otros agentes fisiológicamente activos; (c) el uso de un compuesto de fórmula (I) o de uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables, en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de un estado clínico para el que está indicado un inhibidor de la absorción de ácidos biliares, por ejemplo un estado hiperlipemiante, tal como la ateroesclerosis; (d) un método para inhibir la absorción de ácidos biliares procedentes del intestino de un mamífero, tal como un ser humano, que comprende administrar al mamífero una cantidad eficaz inhibidora de la absorción de ácidos biliares de un compuesto de fórmula (I) o de uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables; (e) un método para reducir las concentraciones en plasma o suero sanguíneo de colesterol de LDL y VLDL en un mamífero, tal como un ser humano, que comprende administrar al mamífero una cantidad eficaz reductora del colesterol de un compuesto de fórmula (I) o de uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables; (f) un método para reducir las concentraciones de colesterol y éster de colesterol en el plasma o suero sanguíneo de un mamífero, tal como un ser humano, que comprende administrar al mamífero una cantidad eficaz reductora del colesterol y éster de colesterol de un compuesto de fórmula (I) o de uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables; (g) un método para aumentar la excreción fecal de ácidos biliares en un mamífero, tal como un ser humano, que comprende administrar al mamífero una cantidad eficaz para aumentar la excreción fecal de ácidos biliares de un compuesto de fórmula (I) o de uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables; (h) un método para la profilaxis o tratamiento de un estado clínico en un mamífero, tal como un ser humano, para el que está indicado un inhibidor de la absorción de ácidos biliares, por ejemplo, un estado hiperlipemiante, tal como ateroesclerosis, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la fórmula (I) o de una de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables; (i) un método para reducir la incidencia de episodios relacionados con enfermedades cardíacas coronarias en un mamífero, tal como un ser humano, que comprende administrar una cantidad eficaz reductora de los episodios relacionados con enfermedades cardíacas coronarias de un compuesto de fórmula (I) o de uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionables, farmacéuticamente aceptables; Q) un método para reducir la concentración de colesterol en el plasma o suero sanguíneo de un mamífero, tal como un ser humano, que comprende administrar una cantidad eficaz reductora del colesterol de un compuesto de fórmula (I); (k) procedimientos para la preparación de compuestos de fórmula (I) (incluyendo sus sales, solvatos y derivados fisiológicamente funcionales definidos en la presente memoria); y (I) nuevos compuestos químicos intermedios en la preparación de los compuestos de fórmula (I) ; (m) los compuestos del ejemplo de síntesis 1 a 5 descritos a continuación.

De aquí en adelante todas las referencias a "compuesto(s) de fórmula (I)" se refieren a compuesto(s) de fórmula (I) como los descritos anteriormente junto con sus sales, solvatos y derivados fisiológicamente funcionales definidos en la presente memoria. La cantidad de un compuesto de fórmula (I) que se requiere para conseguir el efecto biológico deseado dependerá, naturalmente, de varios factores, por ejemplo, el compuesto específico elegido, el uso que se pretende de él, el modo de administración y el estado clínico del receptor. En general, una dosis diaria está en el intervalo de 0,3 mg a 100 mg (típicamente de 3 mg a 50 mg) al día por kilogramo de peso, por ejemplo, 3-10 mg/kg/día. Una dosis intravenosa puede, por ejemplo, estar en el intervalo de 0,3 mg a 1 ,0 mg/kg, que puede administrarse convenientemente como una infusión de 10 ng a 100 ng por kilogramo por minuto. Los fluidos de infusión adecuados para esta finalidad pueden contener, por ejemplo, de 0,1 ng a 10 mg, típicamente de 1 ng a 10 mg, por mililitro. Las dosis unitarias pueden contener, por ejemplo, de 1 mg a 10 g del compuesto activo. Así las ampollas para inyección pueden contener, por ejemplo, de 1 mg a 100 mg y las formulaciones de dosis unitarias oralmente administrables, tales como comprimidos o cápsulas, pueden contener, por ejemplo, de 1 ,0 a 1000 mg, típicamente de 10 a 600 mg. En el caso de sales farmacéuticamente aceptables, los pesos antes indicados se refieren al peso del ion de benzotiazepina derivado de la sal. Para la profilaxis o tratamiento de los estados antes citados, pueden utilizarse los compuestos de fórmula (I) como el compuesto per se, pero se presentan preferiblemente con un excipiente aceptable en forma de una composición farmacéutica. Naturalmente, el excipiente debe ser aceptable en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la composición y no debe ser perjudicial para el receptor. El excipiente puede ser sólido o líquido, o ambos, y se formula preferiblemente con el compuesto como una composición de dosis unitaria, por ejemplo, un comprimido, que puede contener de 0,05% a 95% en peso del compuesto activo. Pueden estar también presentes otras sustancias farmacológica-mente activas, incluyendo otros compuestos de fórmula (I). Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden prepararse por cualquiera de las técnicas de farmacia muy conocidas que consisten esencialmente en mezclar los componentes. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención incluyen las adecuadas para administración oral, rectal, tópica, bucal (por ejemplo, sublingual) y parenteral (por ejemplo, subcutánea, intramuscular, intradérmica o intravenosa), aunque la vía más adecuada en cualquier caso dado dependerá de la naturaleza y gravedad del estado que ha de tratarse y de la naturaleza del compuesto particular de fórmula (I) que se va a emplear. Las formulaciones con revestimiento entérico y de liberación controlada con revestimiento entérico están también dentro del alcance de la invención. Se prefieren las formulaciones resistentes a los ácidos y a los jugos gástricos. Los revestimientos entéricos adecuados incluyen acetato-ftalato de celulosa, poli-(acetato de vinilo)-ftalato, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa y polímeros aniónicos de ácido metacrílico y éster metílico del ácido metacrílico. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración oral pueden, presentarse en unidades individuales, tales como cápsulas, sellos, trociscos o comprimidos, conteniendo cada una de ellas una cantidad predeterminada de un compuesto de fórmula (I); como un polvo o granulos; como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión del tipo aceite en agua o del tipo agua en aceite. Como se ha indicado, dichas composiciones pueden prepararse por cualquier método de farmacia adecuado, que incluye la operación de asociar el compuesto activo y el excipiente (que puede estar constituido por uno o más ingredientes accesorios). En general, las composiciones se preparan mezclando uniforme e íntimamente el compuesto activo con un excipiente líquido o sólido finamente dividido, o ambos, y a continuación, si es necesario, conformando el producto. Por ejemplo, un comprimido o tableta puede prepararse comprimiendo o moldeando un polvo o granulos del compuesto, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos pueden prepararse comprimiendo, en una máquina adecuada, el compuesto en una forma de fluidez libre, tal como un polvo o granulos mezclados opcionalmente con un(os) agente(s) aglutinante, lubricante, diluyente inerte y/o tensioactivo/dispersante. Las tabletas moldeadas pueden prepararse moldeando, en una máquina adecuada, el compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración bucal (sub-lingual) incluyen trociscos que comprenden un compuesto de fórmula (I) en una base aromatizada, generalmente sacarosa y, goma arábiga o tragacanto, y pastillas que comprenden el compuesto en una base inerte, tal como gelatina y glicerina o sacarosa y goma arábiga. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración parenteral comprenden convenientemente preparaciones acuosas estériles de un compuesto de fórmula (I), preferiblemente isotónico con la sangre del receptor deseado. Estas preparaciones se administran preferiblemente de forma intravenosa, aunque la administración puede también efectuarse por medio de inyección subcutánea, intramuscular o intradérmica. Dichas preparaciones pueden prepararse convenientemente mezclando el compuesto con agua y haciendo estéril e isotónica con la sangre la solución . resultante. Las composiciones inyectables de acuerdo con la invención contendrán generalmente de 0, 1 a 5% en p/p del compuesto activo. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración rectal se presentan preferiblemente como supositorios en dosis unitarias. Pueden prepararse mezclando un compuesto de fórmula (I) con uno o más excipientes sólidos convencionales, por ejemplo, manteca de cacao, y conformando a continuación la mezcla resultante. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para aplicación tópica para la piel toman preferiblemente la forma de bálsamo, crema, loción, pasta, pulverización, aerosol o aceite. Los excipientes que pueden utilizarse incluyen vaselina, lanolina, polietilenglicoles, alcoholes y combinaciones de dos o más de ellos. El compuesto activo está generalmente presente a una concentración de 0,1 a 15% en p/p de la composición, por ejemplo, de 0,5 a 2%. También es posible ia administración transdérmica. Las compo- siciones farmacéuticas adecuadas para administración transdérmica pueden estar presente como parches individuales adaptados para permanecer en contacto íntimo con la epidermis del receptor durante un período de tiempo prolongado. Dichos parches contienen adecuadamente el compuesto activo en una solución acuosa opcionalmente tamponada, disuelto y/o disperso en un adhesivo, o disperso en un polímero. Una concentración adecuada del compuesto activo es de alrededor de 1 % a 35%, preferiblemente alrededor de 3% a 15%. Como posibilidad particular, el compuesto activo puede ser liberado del parche por electrotransporte o iontoforesis, por ejemplo, como se ha descrito en Pharmaceutical Research, 2(6), 318 (1986). Los compuestos de la invención pueden prepararse por métodos convencionales conocidos por los expertos o de manera análoga a los procedimientos descritos en la técnica. Por ejemplo, los compuestos de la fórmula (I) pueden prepararse por un procedimiento que comprende: a) acilar un compuesto de fórmula (II) por procedimientos de tipo estándar (por ejemplo con N,N-carbonil-diimidazol) en el grupo -X-H o a) alquilar un compuesto de fórmula (II) por procedimientos de tipo estándar en el grupo -X-H o a) glicosilar o glucuronidar un compuesto de fórmula (II) en el grupo -X-H, especialmente utilizando el método de imidato y b) escindir los grupos protectores, especialmente, los grupos funcionales hidroxilo y amino, por ejemplo acetilo por hidrólisis y bencilo por hidrogenolisis. Los compuestos de fórmula (II) pueden prepararse de acuerdo con el método de preparación descrito en el documento WO 96/05188. Los compuestos de fórmula (I), sustancialmente libres de otros isómeros ópticos, pueden obtenerse bien por síntesis quiral, por ejemplo, por el uso del(de los) material(es) de partida quiral(es) apropiado(s), tal como la aziridina, o por resolución de los productos obtenidos por síntesis aquiral, por ejemplo por HPLC quiral o por resolución clásica con ácidos quirales. La conversión opcional de un compuesto de fórmula (I), o un compuesto de fórmula (I) que comprende un sustituyente básico, en una sal de adición de ácido correspondiente puede efectuarse por reacción con una solución del ácido apropiado, por ejemplo, uno de los antes citados. La conversión opcional de un compuesto de fórmula (I) que comprende un sustituyente ácido en una sal con la base correspondiente puede efectuarse por reacción con una solución de la base apropiada, por ejemplo hidróxido sódico. La conversión opcional en un derivado fisiológicamente funcional, tal como un éster, puede realizarse por métodos conocidos por los expertos en la técnica u obtenibles en la bibliografía química. Además, los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse en diferentes compuestos de fórmula (I) por métodos típicos conocidos, o disponibles en la bibliografía, por los expertos en la técnica, por ejemplo por alquilación de un grupo hidroxi. Comparación de la actividad hipolipemiante de los compuestos de acuerdo con la invención con el compuesto número 11 del documento WO 96/05188: Para proporcionar la mayor actividad hipolipemiante de los compuestos de acuerdo con la invención, se realizaron ensayos por medio de tres líneas de células genéticamente modificadas. Procedían de la línea de células de "ovario de hámster chino" (CHO) generalmente conocida, que debido a tener incoforados plásmidos de expresión producían adicionalmente transportadores de ácidos biliares dependientes del sodio. La primera línea de células (CHO/pRIBAT8) era en este caso el transportador de íleon de conejo (RIBAT), la segunda (CHO/pHIBAT8) el transportador de íleon de seres humanos (HIBAT) y la tercera (CHO/pHLBAT5) el transportador hepático de seres humanos. Todos los plásmidos se basaron en el plásmido pCDNAI neo estándar, que como elementos importantes tiene un promotor citomegaloviral para la expresión permanente de genes heterólogos y un gen para la producción de resistencia de las células frente a la sustancia G418. El material de partida para la producción del plásmido para la línea de células productoras de RIBAT (pRIBATd) era RNA total del íleon terminal del conejo. A partir de él por medio de un procedimiento de RT-PCR (reacción de transcriptasa inversa, seguida por una reacción en cadena de la polimerasa) con ayuda de los oligonucleótidos 5'-GTCAGACCAGAAGCTTGGGCTTCTGCAGAC-3r y 5'-ATCTTAATAATATTCTAGACAG I I I I I CTTTG-3' se sintetizó un cDNA que contenía la región codificadora de la proteína total del RIBAT, y también 41 pares de bases adyacentes a 5' y 31 pares de bases en la región no traducida adyacente a 3'. Esta región estaba flanqueada por sitios de escisión para las enzimas de restricción Hind3 (en el extremo 5') y Xbal (en el extremo 3'). El cDNA obtenido y el DNA del plásmido pcDNAl neo se sometieron a digestión utilizando las dos enzimas de restricción mencionadas y los fragmentos resultantes se unieron por medio de ligasa para dar el plásmido de expresión pRIBATd. Análogamente se preparó el plásmido para la línea de células productoras de HIBAT (pHIBAT8) a pRIBATd. En este caso, el RNA total del íleon terminal humano y los oligonucleótidos S'-TAAAAGTTGGATCCGGTAGAAGTAAACG-S' y 5,-TCTGTTTTGTCCTCTAGATGTCTACTTTTC-3, sirvieron como material de partida. Además de la región codificadora de la proteína total de HIBAT, el cDNA resultante contenía también 97 pares de bases adyacentes a 5' y 5 pares de bases en la región no traducida adyacente a 3'. Esta región estaba flanqueada por los sitios de escisión para las enzimas de restricción BamHl (en el extremo 5') y Xbal (en el extremo 3'). El cDNA obtenido y el DNA del plásmido pcDNAl neo se sometieron a digestión utilizando las dos enzimas de restricción mencionadas y los fragmentos resultantes se unieron por medio de ligasa para dar el plásmido de expresión pRIBATd. Un banco de genes de cDNA comercialmente disponible preparado a partir del hígado humano sirvió como material de partida para el plásmido para la preparación de la línea de células productora de HLBAT (pHLBAT5). A partir de él por medio de un procedimiento de PCR (reacción en cadena de la polimerasa) con ayuda de los oligonucleótidos S'-GGAGTGGTCTTCCACTGGATCCCAGGAGGATGGAGG-S' y 5'-CCAGAATCCAGGCCACCTCTAGAAGGGCTAGGCTGT-3', se sintetizó un cDNA que contenía la región codificadora de la proteína total del HLBAT, y también 7 pares de bases adyacentes a 5' y 6 pares de bases en la región no traducida adyacente a 3'. Esta región estaba flanqueada por sitios de escisión para las enzimas de restricción BamHl (en el extremo 5') y Xbal (en el extremo 3'). El cDNA obtenido y el DNA del plásmido pcDNAI neo se sometieron a digestión utilizando las dos enzimas de restricción mencionadas y los fragmentos resultantes se unieron por medio de ligasa para dar el plásmido de expresión pHLBAT5. Para la preparación de las líneas de células modificadas genéticamente, las células de CHO se transfectaron con DNA de pRIBATd, pHIBATd o pHLBATd y las células que desarrollaron resistencia frente a la sustancia de selección G418 se cultivaron selectivamente más por adición de la sustancias al medio celular. Las células de CHO/pRIBATd, CHO/pHIBATd y CHO/pHLBAT5 se aislaron a continuación de la cantidad de células resistentes a G41 d y se cultivaron las líneas clónales puras. La herramienta utilizada para seguir el proceso de aislamiento fue en este caso un derivado fluorescente de ácidos biliares (3ß-NBD-NCT; N-[7-(4-nitrobenzo-2-oxa-1 ,3-diazol)]-3ß-amino- 7a,12a-dihidroxi-5ß-colan-24-oil)-2'-aminoetanosulfonato). Las células con transportadores intactos de ácidos biliares absorbieron rápidamente esta sustancia del medio celular y como resultado se hicieron fluorescentes. Podían con ello diferenciarse fácilmente de las células sin transportadores intactos de ácidos biliares con ayuda de un microscopio de fluorescencia. Las tres líneas de células transportaban eficazmente ácido taurocólico radiomarcado desde el medio extracelular al interior de la célula. Este procedimiento dependía del sodio. En contraste con esto, las células de CHO sin transportadores intactos de ácidos biliares sólo absorbían cantidades muy pequeñas de ácido taurocólico. Basándose en este conocimiento, se realizó como sigue una caracterización de las sustancias de ensayo de acuerdo con la invención: células del tipo CHO/pRIBATd, CHO/pHIBAT8 o CHO/pHLBAT5 se expusieron simultáneamente en placas de cultivo a ácido taurocólico radiomarcado y una sustancia de ensayo y se midió la absorción por las células del material radioactivo. Las concentraciones de la sustancia de ensayo de la presente invención se variaron sistemáticamente de una placa a otra y los demás parámetros se mantuvieron constantes. Para prepararlas para el experimento, las células se cultivaron de forma rutinaria en un medio (medio esencial mínimo (MEM); solución al 1% en aminoácidos no esenciales de MEM; suero de ternero fetal al 10%; 400 g/ml de G418) en frascos de cultivo, si es necesario se separaron de su medio ambiente por medio de tripsina, se inocularon en forma diluida en placas de cultivo (diámetro: 3,5 cm) y se cultivaron más en el medio. Poco antes de alcanzar la confluencia celular, se retiró el medio de las células y el contenido de cada placa se lavó dos veces con 1 ,5 ml de PBS (solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco). Después de separar la solución de lavado, se añadió a cada placa 1 ml de concentración definida de la sustancia de ensayo en PBS y a continuación se incubaron a 21 °C durante 30 minutos. Esta solución de preincubación fue sustituida entonces por una solución de ensayo que contenía ácido [24-14C]-taurocólico en una concentración de 4,3 M y de una radiactividad específica de 7400 Bq/ml, pero que tenía además el mismo volumen y la misma composición que la solución antes de la incubación. Las células se expusieron a la solución de ensayo a 21 °C durante 30 minutos y a continuación se lavaron cinco veces con 1 ,5 ml de PBS por placa. Para lisar las células, se añadió a cada placa 1 ml de una solución acuosa que contenía 0,1 mol/l de NaOH y 0,1% (peso/volumen) de SDS, que se incubó durante 30 minutos a 21 °C y se trituró. Por último, el contenido de cada placa se mezcló con 10 ml de una solución de centelleo comercialmente disponible y se determinó la radiactividad absorbida por las células con ayuda de un aparato medidor del centelleo. Para determinar los resultados de transporte, los valores de la radiactividad no se representaron directamente, sino su porcentaje de relación a un valor testigo en el caso de que se hubiera realizado dicha medida sin inhibir la sustancia de ensayo. De aquí se obtuvieron gráfica o aritméticamente los valores de inhibición máxima de la mitad (Cl50): Ejemplo 3 Cl50 (RIBAT) 70 nM = 0,07 µM Ejemplo 11 del documento WO 96/05188 Cl50 (RIBAT) 4 µM Una investigación análoga del efecto de las mismas sustancias sobre el transporte de la línea de células CHO/pHIBAT8 mostró que en ese caso el valor de Cl50 correspondiente variaba aproximadamente dentro del mismo orden de magnitud. En contraste con ello, el valor Cl50 determinado con la línea de células CHO/pHLBAT5 era varias potencias de 10 mayor que él. Esto muestra que los compuestos de acuerdo con la invención pueden ejercer un efecto comparable sobre los transportadores ortólogos de ácidos biliares dependientes de sodio de diversas especies y, en contraste con ello, el efecto sobre los transportadores parálogos de otros órganos puede ser mucho menor. Para un mejor entendimiento de la invención, se da el siguiente ejemplo como ilustración (vgr. con N,N-carbonil-diimidazol) y no ha de entenderse que limita el alcance de la invención.

Ejemplo 1 A una solución de 2,9 g de metil-2,3,4-tri-0-acetil-glucuronato en 100 ml de diclorometano anhidro a temperatura ambiente bajo argón se añadieron 4,6 ml de tricloroacetonitrilo y la solución se agitó durante 10 minutos. A continuación se añadieron 730 mg de carbonato potásico. Después de 30 min de agitación a la temperatura ambiente, la mezcla se filtró á través de un pequeño trozo de sílice, eluyendo con éter. El filtrado se concentró a vacío proporcionando el producto en bruto como un sólido de color amarillo pálido (3,7 g). Se disolvió 1.0 g de este producto en 15 ml de diclorometano anhidro y se añadió a una solución de Phenol I (transracemato) en 30 ml de diclorometano anhidro. Después de enfriar a 10°C, a continuación se añadieron 0.32 ml de BF3.ET20 y después de 30 minutos a -10°C ia mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 20 horas. A continuación la mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso y salmuera. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se evaporó al vacío de disolvente. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre sílica gel, (n-heptano/acetato de etilo, 2: 1 ), para obtener 625 mg del ejemplo 1. . Rf=0.17 (n-heptano/acetato de etilo 1 :1 ) C34H43NO12S(689):MS(FAB,3-NBA):690(M+H+).

- - Ejemplo 2 Ejemplo 3 A una solución de 900 mg del Ejemplo 1 en 45 ml de metanol se agregaron 15 ml de NaOH 1 N. Después de 4 horas a temperatura ambiente se agregaron 150 ml de H20 y el disolvente orgánico se evaporó al vacío. La solución acuosa se ajustó a un pH de 3 con HCl 2N y se evaporó hasta que estuvo seca. La cromatografía sobre sílica-gel (CH2CI2/MeOH/NH3 acuoso al 33%, 30:10:3) rindió dos fracciones.

Fracción 1 : Ejemplo 2, Rf=0.85(CH2CI2/MeOH/NH3 acuoso al 33%, 30: 10:3). C27H33N08S(531):MS(ESI):532(M+H+) Fracción 2: Ejemplo 3, Rf=0.52(CH2CI2/MeOH/NH3 acuoso al 33%, 30:10:3). (C27H35NO9S(549):MS(FAB,3-NBA):550(IVI+H+) Ejemplo 4 El ejemplo 4 se obtuvo de manera análoga al ejemplo 1. Rf=0.20(n-heptano/acetato de etilo 1:1). C35H45NO12S(703):MS(ESI):704(M+H+) Ejemplo 5 El ejemplo 5 se obtuvo de manera análoga al ejemplo 2. Rf=O.20(CH2CI2/MeOH/NH3 acuoso al 33%, 60:10:3).

C27H37N08S(535):MS(FAB,3-NBA):536(M+H+).

Datos de RMN del Ejemplo 3 Desplazamientos químicos en MeOHd4 a 300 K

Claims (13)

1. REIVINDICACIONES 1.- Un compuesto de la fórmula (I) en la que R es un grupo alquilo de C^ de cadena lineal; es un grupo alquilo de C^ de cadena lineal; R es hidrógeno o un grupo OR11 en el que R11 es hidrógeno, un grupo alquilo de C,^ o alquilcarbonilo de C^ opcionalmente sustituidos; R es piridilo o fenilo opcionalmente sustituido; R5, R6 y F? son iguales o diferentes y cada uno se selecciona de hidrógeno, halógeno, ciano, R15-acetiluro, OR15 , alquilo de C1^ opcionalmente sustituido, COR15, CH(OH)R15, S(O)nR15, P(O)(OR15)2, OCOR15, OCF3, OCN, SCN, NHCN, CH2OR15, CHO, (CH2)pCN, CONR12R13, (CH2)pCO2R15, (CH2)pNR12R13, CO2R >1'5°, NHCOCF3, NHSO2R 1'5°, OCH2OR >15 OCH=CHR15, O(CH2CH2O)nR15, O(CH2)pSO3R15, O(CH2)pNR12R13 y O(CH2)pN+R12R13R14 en los que es un número entero de 1 -4, n es un número entero de 0-3 y R12, R13, R14 y R15 se seleccionan independientemente de hidrógeno y alquilo de C,^ opcionalmente sustituido; R7 es un grupo de la fórmula en la que los grupos hidroxilo pueden estar sustituidos con acetilo o bencilo, o — alquil (CrC6)-R17 en el que el grupo alquilo puede estar sustituido con uno o más grupos hidroxilo; R 16 es -COOH o -CH2-OH; -CH2-0-acetilo, -COOMe o -COOEt; R17 es H, -OH, -NH2, -COOH o COOR18; R 18 es alquilo (CrC4) o -NH-alquilo (CrC4); es -NH- u -O-; y R y R son iguales o diferentes y cada uno es hidrógeno o alquilo de C1^; y sus sales, solvatos y derivados fisiológicamente funcionales.
2. 2.- Los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 , que tienen la fórmula (III) en la que R1 a R y X son como se han definido en la reivindicación 1.
3. 3.- Los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 , que tienen la fórmula (IV): en la que R1 a R y X son como se han definido en la reivindicación 1.
4. 4.- Los compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 que tienen la fórmula (IVa) en la que R1 a R10 y X son como se han definido en la reivindicación 1.
5. 5.- Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R7 se selecciona de 15 20 25 30 y X es -0-
6. 6.- Un compuesto de la fórmula
7. 7 '.- Una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
8. 8.- Una composición farmacéutica resistente a los ácidos y jugos gástricos, que comprende uno o más compuestos de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
9. 9.- Un método para tratar un estado clínico en un mamífero para el que está indicado un inhibidor de la absorción de ácidos biliares, que comprende administrar a un mamífero una cantidad eficaz inhibidora de la absorción de ácido biliar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
10. 10.- Un método para tratar un estado hiperlipemiante en un mamífero, que comprende administrar al mamífero, una cantidad eficaz para tratamiento hiperlipemiante de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
11. 11.- El método de la reivindicación 10, en el que ei estado hiperlipemiante es ateroesclerosis.
12. 12.- El uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o uno de sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, farmacéuticamente aceptables, en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de un estado clínico para el que está indicado un inhibidor de la absorción biliar.
13. 13.- Un método para la preparación de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, y sus sales, solvatos o derivados fisiológicamente funcionales, que comprende a) acilar un compuesto de fórmula II por procedimientos de tipo estándar en el grupo -X-H o a) alquilar un compuesto de fórmula II por procedimientos de tipo estándar en el grupo -X-H o a) glicosilar o glucuronidar un compuesto de fórmula II en el grupo -X-H, y b) escindir los grupos protectores, especialmente los grupos funcionales hidroxilo y amino.