MX2014008135A - Nucleosidos carbociclicos y su uso y composiciones farmaceuticas. - Google Patents

Abstract

Se divulgan compuestos de la fórmula I (ver Fórmula) y las sales farmacéuticamente aceptables de tales compuestos. También se divulgan los procesos para la preparación de tales compuestos, productos intermedios que se usan en la preparación de tales compuestos, y los usos de tales compuestos para tratar enfermedades inflamatorias de la piel.

Description

NUCLEÓSIDOS CARBOCÍCLICOS Y SU USO Y COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a nucleósidos carbocíclicos y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, procedimientos para la preparación de tales compuestos, productos intermedios usados en la preparación de tales compuestos, composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos, y los usos de tales compuestos en el tratamiento de enfermedades inflamatorias de la piel, incluyendo, pero no limitado a, la psoriasis, el eccema y la seborriasis.

Los nucleósidos carbocíclicos mencionados anteriormente y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, cuando se administran a un paciente, son capaces de producir, de manera directa o indirecta, compuestos anti-inflamatorios. Tal compuesto puede producirse mediante hidrólisis o puede ser un metabolito. Estos compuestos son, por lo tanto, útiles en el tratamiento de la psoriasis y otras enfermedades inflamatorias de la piel. En la actualidad existe un gran interés en la búsqueda de nuevas terapias para las enfermedades anteriores.

En una modalidad, la presente invención se relaciona con compuestos, composiciones farmacéuticas y métodos para el tratamiento de la psoriasis. La psoriasis es una enfermedad crónica, autoinmune que aparece sobre la piel. En la psoriasis, el ciclo de crecimiento de las células de la piel es acelera mediante señales inmunes defectuosas, pero la causa exacta de la enfermedad no se conoce. Los estudios de investigación en esta área sugieren que el aumento de la proliferación y la hiperplasia de las células de la epidermis están implicados en la patogénesis de la psoriasis [Anderson et. al., Patogénesis de la enfermedad de la piel, 67 (1986)]. La psoriasis también se considera que es una enfermedad inflamatoria de la piel en la que los neutrófilos se asocian con lesiones psoriásicas. Además, se reporta en la literatura que se presentan niveles más altos de ácido araquidónico en las placas psoriásicas que en los tejidos normales. Los metabolitos del ácido araquidónico desempeñan un papel importante en la psoriasis ya que son vasodilatadores y quimioatrayentes para los neutrófilos. También se sabe que en las lesiones psoriásicas, las actividades del gen de ARN relacionado con la Susceptibilidad a la Psoriasis inducida por el Estrés (PRINS por sus siglas en inglés), de la 12R-lipoxigenasa y de la IL-20 aumentaron significativamente. La mayor proliferación de los queratinocitos en las placas psoriásicas también está documentada en la literatura. Se ha encontrado que en las lesiones psoriásicas, los niveles de adenosín monofosfato cíclico (AMPc) se reducen, lo que puede resultar en la regulación disminuida de la división celular debido a la menor activación de la proteína quinasa. Estos estudios sugieren además que la psoriasis no es sólo una enfermedad de la epidermis [Farber et. AL, Psoriasis: una enfermedad de toda la piel. J.Am.Acad. Dermat. 12,150 (1985); Powrie et. a). J. Cxp. ed. 179, 589 (1994)].

La psoriasis es una enfermedad prevalente, y se ha estimado que aproximadamente el 3% de la población del mundo está sufriendo de psoriasis. Esto incluye 2.2% de la población sólo de los Estados Unidos de América. El desarrollar nuevos fármacos para el tratamiento de esta enfermedad crónica es una meta que vale la pena. Una amplia variedad de fármacos no específicos tales como litio, ß-bloqueadores, los antipalúdicos, corticoides y agentes anti-inflamatorios no esteroideos han sido investigados para el control de la psoriasis [Abel et. al., J. Am. Acad. Dermatol. 15, 1007 (1986)], sin embargo, no hay fármacos específicos en el mercado para esta enfermedad.

Los compuestos actualmente disponibles en el mercado para el tratamiento de la psoriasis sufren de una o más deficiencias, incluyendo los efectos secundarios, la falta de eficacia suficiente y un método inconveniente o no estético de administración. En consecuencia, la búsqueda de tratamientos efectivos continúa. La presente invención se relaciona con compuestos nuevos y eficaces para el tratamiento de la psoriasis y otras enfermedades inflamatorias de la piel.

Se establecen bien los modelos animales para la evaluación de la eficacia de las moléculas del fármaco para el tratamiento de la psoriasis [Schon et. al., Nature Med.3, 183-188 (1997); Wrone-Smith et. al., J. Clin. Invest. 98, 1878 - 1887 (1996); Christofidou-Solomidou et. al., J. Am. Pathol. 150, 631 -639 (1997); Nickoloff et. al., J. Invest. Dermatol. 108, 539 (1997); Prens et. al. Clin. Dermatol. 13, 1 15-129 (1995); Carroll et. al., Célula 83, 957-968 (1995); Sundberg et. al., Handbook de Mouse Mutations with Skin and Hair Abnormalities, 253-268 (1994); Boehncke et. al., Arch. Dermatol. Res. 286, 325-330 (1994) and Boehncke et. al., Nature 379, 777 (1996)].

El abacavir, (-)cis-[4-[2-amino-6-ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenten-il]-1 -metanol, un nucleósido carbocíclico que posee un 2,3-anillo dehidrociclopentano, es nombrado en la Patente de Estados Unidos 5,034,394 como un inhibidor de la transcriptasa inversa. Recientemente, se reportó una estrategia de síntesis general para la preparación de este tipo de compuestos y productos intermedios [Crimmins, et. al., J.Org. Chem., 61 , 4192-4193 (1996) y 65, 8499-8509-4193 (2000)]. Como se discute en mayor detalle más adelante, en una modalidad particular, la presente invención se refiere a nuevos ésteres de abacavir, incluyendo, pero no limitado a (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilam¡no)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-l -hidroximetil acetato (también denominado aquí como Prurisol) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. El Prurisol es un compuesto biodisponible por vía oral para el tratamiento de enfermedades inflamatorias de la piel tales como psoriasis, eczema y seborriasis.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra la producción de IL-20 en ratones mediante Prurisol (en dosis de 10 mg/kg o 2 x 10 mg/kg) y MTX (metotrexato) (en dosis de 7.5 mg/kg).

La Figura 2 muestra la supresión del gen de ARN relacionado con la susceptibilidad a la psoriasis inducida por el estrés (PRINS) después de la administración de Prurisol (a dosis de 10 mg/kg o 2 x 10 mg/kg) y MTX (7.5 m/kg).

La Figura 3 muestra la apariencia de piel después de la administración de Prurisol y MTX.

La Figura 4 muestra la normalización de la piel en los parámetros histológicos en comparación con la piel totalmente psoriásica y MTX.

La Figura 5 muestra la inducción de la actividad de la 12-R lipoxigenasa mediante Prurisol y MTX.

La Figura 6 muestra la apariencia de la piel, a simple vista, en animales con psoriasis y los tratados con Prurisol.

La Figura 7 muestra la reducción de CD4.

La Figura 8 muestra la reducción de CD8.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con compuestos de la fórmula I donde R1 y R2 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo C02Ci-C4, alquilo CrC6, alquenilo C2-C6 y alquinilo C2-C6, en donde los restos alquilo de dichos grupos alquilo, alquenilo, y alquinilo pueden ser lineales, de cadena ramificada o una combinación de cadena lineal y ramificada,- (CH2)nO donde n es 0 a 3, — (CH2)nO donde n es de 1 a 2, cicloalquilo C3-C7, un anillo heterocíclico de tres a doce elementos que contiene hasta 3 heteroátomos donde los heteroátomos se seleccionan independientemente de O, N o S, y donde cada anillo heterocíclico puede estar opcionalmente sustituido en uno o más átomos de carbono por 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre alcoxi Ci-C6, y alquilo O-C Ce; R3 y R4 son seleccionados de manera independiente a partir de hidrógeno y alquilo CrC6; R5 y R6 son seleccionados de manera independiente a partir de hidrógeno y -CO2C4H9; A se selecciona a partir de un enlace covalente, O, S, Se, alquilo Cr 6, y (CH2)nO, donde n es un entero de 0 a 3; X se selecciona a partir de O, S y Se; B se selecciona a partir de un enlace covalente, -CH2, -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, trans-CH=CH-, cis-CH=CH-,-CíC-j-CHR7-CHR8-, cis o trans-CR7=CR8-, donde R7 y R8 son seleccionados de manera independiente a partir de alquilo Ci-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6 , y cicloalquilo C3-C7; y Y se selecciona a partir de OH, SH, OR9 donde R9 es alquilo Ci-C6, alquenilo C2-C6 y alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C7, y (CH2)nOH, donde n es un entero de 1 a 6 y NR9R10 donde R9 y R 0 son seleccionados de manera independiente a partir de alquilo d-C6 y cicloalquilo C3-C7;y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En la fórmula anterior, se debe entender que cuando B es un enlace covalente, Y se conecta mediante dicho enlace covalente al carbono se conecta tanto con X como con A.

Una modalidad de la presente invención se relaciona con (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-1-hidroximetil acetato (Prurisol) y la sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

Una modalidad de la presente invención se relaciona con una composición farmacéutica para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria de la piel, tal como psoriasis, eczema y seborriasis, que comprende un compuesto de la fórmula I como se define en cualquiera de las modalidades anteriores y un portador farmacéuticamente eficaz.

Otra modalidad de la presente invención se relaciona con una composición farmacéutica para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria de la piel, tal como psoriasis, eczema y seborriasis, que comprende una cantidad anti-inflamatoria eficaz de un compuesto de la fórmula I como se define en cualquiera de las modalidades anteriores y un portador farmacéuticamente eficaz. En una modalidad el compuesto es (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-1 -hidroximetil acetato (Prurisol) y la sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

Otras modalidades de la presente invención se relacionan con una composición farmacéutica para el tratamiento de la psoriasis, que comprende una cantidad anti-psoriasis eficaz de un compuesto de la fórmula I como se define en cualquiera de las modalidades anteriores y un portador farmacéuticamente eficaz.

Otra modalidad de la invención se relaciona con un método para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria de la piel, tal como psoriasis, eczema y seborriasis, que comprende administrar a un paciente, que tiene la necesidad de tal tratamiento, una cantidad anti-inflamatoria eficaz de un compuesto de la fórmula I como se define en cualquiera de las modalidades anteriores y un portador farmacéuticamente eficaz. En una modalidad de la invención, la enfermedad inflamatoria de la piel se selecciona de entre psoriasis, eczema y seborriasis Otra modalidad de la presente invención se relaciona con un método para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria de la piel en un paciente que tiene la necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad de un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1 , eficaz para tratar tal enfermedad.

Otra modalidad de la invención se relaciona con un método para el tratamiento de la psoriasis, que comprende administrar a un paciente, que tiene la necesidad de tal tratamiento, una cantidad anti-psoriasis eficaz de un compuesto de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otras modalidades de la invención, las composiciones son composiciones tópicas.

En otras modalidades de la invención, las composiciones son en la forma de una dosis unitaria.

Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I incluyen las sales de adición de ácido y de base (incluyendo disales) de los mismos. Las sales de adición de ácido adecuadas se forman a partir de ácidos que forman sales no tóxicas. Los ejemplos incluyen las sales de acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, edisilato, esilato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, dibenzate, clorhidrato/cloruro, bromhidrato/bromuro, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/fosfato de hidrógeno/fostato de dihidrógeno, sacarato, estearato, succinato , tartrato, tosilato y trifluoroacetato. Las sales de base adecuadas se forman a partir de bases que forman sales no tóxicas. Los ejemplos incluyen sales de aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y zinc. Para una revisión sobre las sales adecuadas, véase el "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002).

Una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula I puede ser fácilmente preparada mediante mezclar soluciones del compuesto de la fórmula I y el ácido o la base deseados, como es adecuado. La sal puede precipitarse de la solución y recogerse por filtración o puede recuperarse por evaporación del disolvente. El grado de ionización en la sal puede variar desde completamente ionizada a casi no-ionizada.

Los compuestos de la fórmula I y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos (en lo sucesivo también denominados como los compuestos activos) pueden existir tanto en formas no solvatizadas como solvatizadas. Los compuestos activos (incluyendo, aquellos en forma de sales, bases libres, ácidos libres y los compuestos neutros) pueden formar hidratos y otros solvatos. El término "solvato" se utiliza en el presente documento para describir un complejo molecular que comprende un compuesto de la invención y una o más moléculas de disolvente farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, etanol. El término "hidrato" se emplea cuando dicho disolvente es agua. Los solvatos farmacéuticamente aceptables incluyen hidratos y otros solvatos, donde el disolvente de cristalización puede ser sustituido de manera isotópica, por ejemplo D20, d6-acetona, d6-DMSO. Los compuestos activos pueden existir como clatratos u otros complejos. En general, las formas solvatadas, hidratadas y similares, son equivalentes a las formas no solvatadas, no hidratadas/anhidros y similares, y los compuestos, composiciones y usos que se reivindican en este documento se pretende que abarquen estas formas, así como las formas isomérica, cristalina y amorfa y los compuestos marcados isotópicamente que se discuten a continuación, dentro del alcance de la presente invención.

Los compuestos de la fórmula I que contienen uno o más átomos de carbono asimétricos pueden existir como dos o más estereoisómeros. Donde un compuesto de la fórmula I contiene un grupo alquenilo o alquenileno o un grupo cicloalquenilo, isómeros geométricos cis/trans (o Z/E) son posibles. Cuando el compuesto contiene, por ejemplo, un grupo ceto u oxima o un resto aromático, puede ocurrir isomería tautomérica ("tautomería"). Corresponde que un solo compuesto puede exhibir más de un tipo de isómero. Los compuestos de la fórmula I también pueden existir como isómeros si forman sales de adición de ácido o de base en las que el contraión es ópticamente activo, por ejemplo, D-lactato o L-lisina, o racémico, por ejemplo, DL-tartrato o DL-arginina.

Las mezclas de estereoisómeros pueden separarse mediante técnicas convencionales conocidas por aquellos expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, "Stereochemistry of Organic Compounds" by E. L. Eliel (Wiley, New York, 1994).

Isómeros cis/trans pueden separarse mediante técnicas convencionales bien conocidas por aquellos expertos en la técnica, por ejemplo, cromatografía y cristalización fraccionada.

En general, los compuestos enantioméricamente puros de la presente invención pueden preparase y pueden aislarse de acuerdo con procedimientos conocidos en la técnica tales como, por ejemplo, la síntesis quiral a partir de un adecuado precursor ópticamente puro y la resolución de un racemato (o un racemato de una sal o derivado). Por ejemplo, un racemato (o un precursor racémico) se puede separar usando cromatografía líquida de alta presión quiral (HPLC). Alternativamente, un racemato (o un precursor racémico) puede hacerse reaccionar con un compuesto adecuado ópticamente activo, por ejemplo, un alcohol, o, en el caso en el que el compuesto de la fórmula I contiene un resto ácido o básico, con un ácido o base, tal como ácido tartárico o 1 -feniletilamina. La mezcla diastereomérica resultante puede separarse por cromatografía o cristalización fraccionada o ambos, y uno o ambos de los diastereoisómeros puede convertirse en el(los) enantiómero(s) puro(s) correspondiente(s) por medios bien conocidos para una persona experta.

Los compuestos quirales de la presente invención (y precursores quirales de los mismos) pueden obtenerse en forma enantioméricamente enriquecida usando cromatografía, típicamente HPLC, sobre una resina con una fase estacionaria asimétrica y con una fase móvil que consiste en un hidrocarburo, típicamente heptano o hexano, que contiene de 0 a 50% de isopropanol, típicamente de 2 a 20%, y de 0 a 5% de una alquilamina, típicamente 0.1 % de dietilamina. La concentración del eluato proporciona la mezcla enriquecida.

En estado sólido, los compuestos de la presente invención pueden existir en forma cristalina o amorfa.

La presente invención incluye todos los compuestos marcados isotópicamente aceptables de manera farmacéutica de la fórmula I, reivindicados en este documento, donde uno o más átomos se reemplazan por átomos que tienen el mismo número atómico, pero una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico encontrado habitualmente en la naturaleza.

Los ejemplos de isótopos adecuados para incluirse en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, tales como 2H y 3H, carbono, tales como 11C, 13C y 14C, cloro, tales como ^Cl, flúor, tales como 18F, yodo, tales como 123l y 125l, nitrógeno, tales como 13N y 15N, oxígeno, tales como 150, 170 y 180, fósforo, tales como 32P, y azufre, tales como ^S. Ciertos compuestos marcados isotópicamente de la fórmula I, por ejemplo, los que incorporan un isótopo radiactivo, son útiles en estudios de fármacos y/o de distribución en tejidos sustrato. Los isótopos radiactivos tritio, es decir 3H, y carbono-14, es decir 14C, son particularmente útiles para este fin, en vista de su facilidad de incorporación y medios rápidos de detección. La sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas resultantes de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, el aumento in vivo de los requerimientos de dosificación de vida media o reducidas, y por lo tanto pueden preferirse en algunas circunstancias. La sustitución con isótopos emisores de positrones, tales como 11C, 18F, 150 y 3N, puede ser útil en la tomografía por emisión de positrones (PET) para examinar la ocupación del receptor de sustrato.

Los compuestos marcados isotópicamente de la fórmula I generalmente pueden prepararse por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o por procesos análogos a los descritos en los Ejemplos adjuntos usando un reactivo marcado isotópicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado previamente.

La presente invención también se relaciona con un proceso para preparar un compuesto de la fórmula I en la que R y R2 son un hidrógeno y un grupo ciclopropilo, respectivamente, como se definió anteriormente para la fórmula I por reacción del compuesto 4 (que se muestra en el Esquema II a continuación) con (terc-butildimetilsililoxi) cloruro de acetilo, seguido de tratamiento con ácido y, si se desea, la preparación de una sal de base libre o de adición de ácido diferente. En una modalidad de la invención el disolvente se selecciona de trietilamina o diisopropiletilamina o N-metil morfolina.

En una modalidad de la invención las sales de adición de ácido de hidrobromuro se prepararon sustituyendo el bromo que contiene un material de partida en los procesos descritos anteriormente. Las sales de mesilato se preparan mediante la sustitución de un material de partida mesilato en los procesos descritos anteriormente. Una disal de la presente invención se puede preparar de manera similar mediante el uso de una sal como el material de partida. Puede ser posible para formar tal sal si la base libre tiene dos centros básicos.

Una modalidad de la presente invención, se relaciona con una composición farmacéutica para el tratamiento de la psoriasis, el eccema y la seborriasis y otras enfermedades inflamatorias de la piel que comprenden (-)cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-1 -hidroximetil acetato (Prurisol). La estructura química de Prurisol se muestra a continuación (véase fórmula 9). Es un compuesto altamente biodisponible por vía oral (F% = 83%) y se metaboliza principalmente a través de la alcohol deshidrogenasa o la glucuronil-transferasa. También es capaz de atravesar la barrera de sangre del cerebro. Es estable y se almacena a temperatura ambiente y protegido de la luz. Como se discute más adelante, (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-1 -hidroximetil acetato (Prurisol) ha demostrado una actividad significativa contra la psoriasis en modelos animales.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los siguientes esquemas de reacción ilustran la preparación del Prurisol. Esquema I m azo e El Esquema I muestra la preparación de cloruro de acetilo terc-butildimetilsililoxi. El ácido glicólico en reacción con TBDMS-CI (cloruro de terc-butildimetilsililoxi) en presencia de imidazol proporcionó O-terc-butildimetilsililoxi ácido acético, que en la reacción con cloruro de oxalilo dio el derivado de cloruro de ácido deseado.

Esquema II 9 Prurisol El Esquema II muestra la síntesis del Prurisol. El material de partida Abacavir (4) puede ser fácilmente preparado mediante el método en la literatura [Crimmins, et. al., J.Org. Chem., 61 , 4192-4193 (1996) y 65, 8499-8509-4193 (2000)], que en tratamiento con TBDMS-CI como se describió anteriormente dio derivado de O-terc-butildimetilsililoxi (5). El compuesto 5, en la reacción con carbonato de di-terc-dibutilo, proporcionó un buen rendimiento del compuesto (6), que tras el tratamiento con fluoruro de tetrabutilamonio proporcionó el intermedio clave 7 deseado. Este compuesto, en la reacción con el compuesto 3, dio el éster protegido 8, el cual seguido de la desprotección con ácido dio el compuesto 9 (Prurisol).

Un experto ordinario en la técnica sabrá cómo seleccionar las condiciones de las discutidas antes o hacer modificaciones de las mismas con el fin de hacer otros compuestos específicos de la Fórmula I que son de interés, incluyendo compuestos en los que R1 y R2 son distintos de hidrógeno y un compuestos en los que R2 es distinto de un grupo ciclopropilo.

La presente invención también incluye un método de inhibición de la psoriasis que es una enfermedad crónica, autoinmune que aparece en la piel. El método incluye poner en contacto las células de la piel con compuesto de la fórmula I en una cantidad suficiente para inhibir el ciclo de crecimiento. En general, la fórmula I es útil en el tratamiento de las enfermedades inflamatorias de la piel incluyendo eccema, esclerodermatitis y seborriasis. Los compuestos descritos en este documento pueden formar el ingrediente activo de una composición farmacéutica, y se administran típicamente en mezcla con excipientes o vehículos adecuados seleccionados como son tabletas o cápsulas orales. Las composiciones de dosificación tales como tabletas, cápsulas, pildoras, supositorios y polvos dependen del modo de administración pretendida, que puede ser a través de cualquier vía aceptable. Estas vías de administración incluyen la vía oral, local, transdérmica, subcutánea y nasal. Una o más de estas vías pueden ser utilizadas en un solo paciente. Los compuestos de la invención preferiblemente se pueden usar para su administración en forma de dosificación oral y se pueden combinar con vehículos inactivos farmacéuticamente aceptables no tóxicos tales como agua, glicerol, etanol y similares. Los excipientes inertes, que se utilizan comúnmente como aglutinantes, agentes disgregantes y agentes colorantes también se pueden incorporar en la mezcla para la administración oral.

Si es necesario, la composición farmacéutica a ser administrada también puede contener cantidades menores de sustancias no tóxicas tales como agentes equilibrantes del pH, agentes emulsionantes, acetato de sodio, etc. El régimen de dosificación de la utilización de los compuestos dependerá de la especie, sexo, peso, edad, condiciones médicas de paciente, la vía de administración y la gravedad de la afección a tratar. Un médico experto puede determinar fácilmente y prescribir la dosis efectiva del fármaco para tratar la enfermedad.

Dependiendo de la enfermedad y el estado del paciente, el término "tratamiento" tal como se usa en el presente documento puede incluir uno o más de tratamiento curativo, paliativo y profiláctico. La dosis precisa administrada de cada compuesto activo variará dependiendo de un número de factores, incluyendo pero no limitado a, el tipo de paciente y el tipo de estado de enfermedad que se está tratando, la edad del paciente, y la vía(s) de administración.

Para la administración a pacientes humanos, se prevé que la dosis diaria total de los compuestos activos esté en el intervalo de 1 mg a 100 mg por kg de peso corporal, dependiendo del modo de administración. Por ejemplo, la administración oral puede requerir una dosis diaria total de a partir de 10 mg a100 mg por kg del peso corporal. La dosis diaria total se puede administrar en dosis únicas o divididas. Para un sujeto humano promedio que tiene un peso de aproximadamente 70 kg, la dosis sería de alrededor de 70 mg a 7000 mg para administración oral. El médico será capaz fácilmente de determinar las dosis para sujetos cuyo peso esté fuera de este rango, como los lactantes y los ancianos. Un veterinario será fácilmente capaz de determinar las dosis para otros mamíferos.

En una modalidad, la invención comprende administrar una administración oral por medio de cápsula de gelatina o suspensión que comprende 10 mg de un compuesto activo por kg de peso corporal. Para los usos terapéuticos arriba mencionados, la dosis administrada variará, por supuesto, con el compuesto empleado, el modo de administración, el tratamiento deseado y el trastorno indicado. La dosis diaria total se puede administrar en dosis únicas o divididas. La presente invención también abarca composiciones de liberación sostenida.

La composición farmacéutica puede, por ejemplo, estar en una forma adecuada para administración oral como un comprimido, cápsula, pildora, polvo, formulación de liberación sostenida, solución, suspensión o emulsión, para administración tópica como un ungüento o crema, o para administración rectal como un supositorio. La composición farmacéutica puede estar en formas de dosificación unitarias adecuadas para la administración única de dosis precisas. La composición farmacéutica incluirá un vehículo o excipiente farmacéutico convencional y un compuesto activo. Además, puede incluir otros agentes medicinales o farmacéuticos, vehículos, adyuvantes, etc.

Los vehículos farmacéuticos adecuados incluyen diluyentes o rellenos inertes, agua y diversos disolventes orgánicos. Las composiciones farmacéuticas pueden, si se desea, contener ingredientes adicionales tales como saborizantes, aglutinantes, excipientes y similares. Así, para la administración oral, los comprimidos que contienen diversos excipientes, tales como ácido cítrico, se pueden emplear junto con diversos disgregantes tales como almidón, ácido algínico y ciertos silicatos complejos y con agentes aglutinantes tales como sacarosa, gelatina y goma arábiga. Además, los agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, lauril sulfato sódico y talco son a menudo útiles para la preparación de comprimidos. Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden emplear en cápsulas de gelatina rellenas blandas y duras. Componentes útiles de estas composiciones incluyen lactosa o azúcar de leche y polietilenglicoles de alto peso molecular. Cuando se desean suspensiones acuosas o elixires para la administración oral, el compuesto activo puede combinarse con diversos agentes edulcorantes o saborizantes, materias colorantes o tintes y, si se desea, agentes emulsionantes o agentes de suspensión, junto con diluyentes tales como agua, etanol, propileno de glicol, glicerina, o sus combinaciones.

Los métodos de preparación de diversas composiciones farmacéuticas con una cantidad específica de compuesto activo son conocidos, o serán evidentes, para los expertos en esta técnica. Para ejemplos, véase Remington Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa., 15 a edición (1975).

Los intervalos de dosificación establecidos en este documento son ejemplares solamente y no están destinados a limitar el alcance o práctica de la composición reivindicada. Por ejemplo, las dosis pueden ser ajustadas en base a parámetros farmacocinéticos o farmacodinámicos, que pueden incluir efectos clínicos tales como efectos tóxicos y/o los valores de laboratorio. Por lo tanto, la presente invención abarca escalada de dosis intrapaciente según lo determinado por el experto en la técnica. Determinar las dosificaciones y regímenes adecuados para la administración de los agentes quimioterapéuticos son bien conocidos en la técnica relevante y se entendería que estén abarcados por el experto en la técnica una vez provistos de las enseñanzas descritas en este documento.

Psoriasis es una enfermedad autoinmune. La administración sistémica de fármacos es un modo preferido de administración de un fármaco. Esta enfermedad autoinmune provoca lesiones en la piel que causan picazón y prurito. Dado que esto puede causar la degeneración del tejido, una aplicación tópica del fármaco puede incluir un emoliente. En la administración sistémica, el nivel de fármaco en el tejido es un factor decisivo, por lo tanto, se puede administrar dos veces al día o tres veces al día.

Una composición farmacéutica de la invención puede ser preparada, envasada o comercializada a granel, como una dosis unitaria única, o como una pluralidad de dosis unitarias individuales. Como se usa aquí, una "dosis unitaria" es una cantidad discreta de la composición farmacéutica que comprende una cantidad predeterminada del compuesto activo. La cantidad del compuesto activo es generalmente igual a la dosificación del compuesto activo que se administra a un sujeto o una fracción conveniente de tal dosificación tal como, por ejemplo, la mitad o un tercio de tal dosificación.

Las cantidades relativas del compuesto activo, el vehículo farmacéuticamente aceptable, y cualquiera de los ingredientes adicionales en una composición farmacéutica de la invención, variarán dependiendo de la identidad, tamaño, y condición del sujeto tratado y dependiendo además de la vía por la que la composición será administrada. A modo de ejemplo, la composición puede comprender entre 0.1 % y 100% (m/m) del ingrediente activo.

Puesto que los compuestos de la presente invención se pueden administrar tanto por vía oral, así como por vía tópica (por ejemplo, como una crema o ungüento), la dosis administrada variará en función del modo de administración. En una modalidad, una composición oral se administra a una dosis de 5 mg/kg/día en una dosis única o 10 mg/kg/día en una dosis única o dosis múltiples de tales fuerzas se pueden administrar dos veces al día, tres veces por día o cuatro veces por día de acuerdo a la severidad de las condiciones. En una modalidad, si el compuesto de la presente invención se administra como una crema, un porcentaje propuesto del compuesto es 10% en peso de la crema y esto resultaría en una dosis de aproximadamente 10mg/100g de crema que se aplica ad libitum (como se guste). En una modalidad, un producto que se vende en mostrador (OTC) podría contener un porcentaje del compuesto de la presente invención en una concentración de 2% en peso de la crema y esto resultaría en una dosis de aproximadamente 2mg/100g de crema que se aplica ad libitum (como se guste).

Además del compuesto activo, una composición farmacéutica de la invención puede comprender además uno o más compuestos terapéuticamente eficaces adicionales como se discutió anteriormente.

Como se usa en el presente documento, "administración parenteral" de una composición farmacéutica incluye cualquier vía de administración caracterizada por atravesar físicamente un tejido de un sujeto y la administración de la composición farmacéutica a través de la brecha en el tejido. La administración parenteral incluye por tanto, pero no se limita a, la administración de una composición farmacéutica por inyección de la composición, por aplicación de la composición a través de una incisión quirúrgica, por aplicación de la composición a través de una herida no quirúrgica de penetración en tejido, y similares. Por lo tanto, los compuestos activos se pueden administrar directamente en el torrente sanguíneo, en el músculo, o en un órgano interno. Los medios adecuados para la administración parenteral incluyen intravenosa, intraarterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrauretral, intraesternal, intracraneal, intramuscular y subcutánea, y técnicas de infusión dialíticas renales. Los dispositivos adecuados para tal administración parenteral incluyen inyectores de aguja (incluyendo micro agujas), inyectores sin aguja y aparato de infusión.

Las formulaciones parenterales son típicamente soluciones acuosas que pueden contener excipientes tales como sales, carbohidratos y agentes equilibrantes (preferiblemente a un pH de 3 a 9), pero, para algunas aplicaciones, se pueden formular más adecuadamente como una solución no acuosa estéril o como una forma seca a usar junto con un vehículo adecuado tal como agua estéril libre de pirógenos.

La preparación de formulaciones parenterales en condiciones estériles, por ejemplo, por liofilización, puede realizarse fácilmente usando técnicas farmacéuticas estándar bien conocidas por los expertos en la técnica.

Las formulaciones de una composición farmacéutica adecuada para la administración parenteral comprenden el ingrediente activo combinado con un vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como agua estéril o solución salina isotónica estéril. Tales formulaciones pueden prepararse, envasarse o comercializarse en una forma adecuada para la administración en bolo o para la administración continua. Las formulaciones inyectables pueden prepararse, envasarse o comercializarse en forma de dosificación unitaria, tal como en ampolletas o en recipientes multidosis que contienen un conservante. Las formulaciones para administración parenteral incluyen, pero no se limitan a, suspensiones, soluciones, emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, pastas y formulaciones de liberación sostenida o biodegradables implantables como se discute abajo. Tales formulaciones pueden comprender además uno o más ingredientes adicionales incluyendo, pero no limitado a, agentes de suspensión, de estabilización o de dispersión. En una modalidad de una formulación para la administración parenteral, el ingrediente activo se proporciona en forma seca (es decir, de polvo o granular) para reconstitución con un vehículo adecuado (por ejemplo, agua estéril libre de pirógenos) antes de la administración parenteral de la composición reconstituida.

Las composiciones farmacéuticas pueden prepararse, envasarse o comercializarse en forma de una solución o suspensión acuosa u oleosa inyectable estéril. Esta suspensión o solución pueden formularse de acuerdo con la técnica conocida, y pueden comprender, además del ingrediente activo, ingredientes adicionales tales como los agentes dispersantes, agentes humectantes, o agentes de suspensión descritos en este documento. Tales formulaciones inyectables estériles pueden prepararse usando un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, tal como agua o 1 ,3 butano diol, por ejemplo. Otros diluyentes y disolventes aceptables incluyen, pero no se limitan a, la solución de Ringer, solución isotónica de cloruro sódico, y aceites fijos tales como mono o di-glicéridos sintéticos. Otras formulaciones parenteralmente administrables que son útiles incluyen aquellas que comprenden el ingrediente activo en forma microcristalina, en una preparación liposomal, o como un componente de un sistema de polímero biodegradable. Las composiciones para liberación sostenida o implantación pueden comprender materiales poliméricos o hidrófobos farmacéuticamente aceptables tales como una emulsión, una resina de intercambio iónico, un polímero moderadamente soluble, o una sal moderadamente soluble.

General Métodos: Los siguientes Ejemplos no limitativos ilustran la preparación de los nuevos compuestos y su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias de la piel. Los espectros de 1H RMN (Resonancia Magnética Nuclear) se obtuvieron a partir de un espectrofotómetro Varían 300 MHz y los valores de desplazamiento químico se indican en partes por millón (ppm, d) campo abajo de tetrametilsilano usando abreviaturas convencionales (en inglés) para la designación de los picos principales: por ejemplo s, solo; d, doble; t, triple; q, cuarteto; m, múltiple; br, amplio. El análisis de TLC (cromatografía de capa fina) se llevó a cabo en placas de TLC pre-recubiertas con gel de sílice 60F254 [E Merck]. Todos los productos intermedios y compuestos finales se caracterizaron por los datos espectrales de H RMN y LCMS (cromatografía de líquidos/espectrometría de masas). La pureza se comprobó mediante HPLC (cromatografía de líquidos de alta resolución), y las estrategias sintéticas generales para la preparación de (-)cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-1 -hidroximetil acetato (Prurisol) se muestran en la Figura 2. Los espectros de masas (m/z) se registraron en un espectrómetro de masas Agilent modelo 1100 usando ionización por electrospray (ESI) o ionización química a presión atmosférica (APCI). Las siguientes abreviaturas se han usado para disolventes comunes: CDCI3 cloroformo deuterado; D6- DMSO dimetilsulfóxido deuterado; CD3OD metanol deuterado.

EJEMPLOS Ejemplo 1 A. Síntesis de (terc-butildimetilsililoxi) cloruro de acetilo 1. A una solución agitada de ácido hidroxiacético (1.0 g, 13.16 mmol) y cloruro de terc-dimetilsililo (4.32 g, 28.80 mmol) en dimetilformamida (DMF) (10 mi), se añadió imidazol (3.73 g, 54.91 mmol) y la mezcla de reacción resultante se agitó en atmósfera de N2 durante 18 horas. A continuación, la mezcla se vertió en agua (100 mi) y el compuesto se extrajo con hexano (3 x 25 mi). La capa de hexano combinada se lavó con solución saturada de NaHC03, y se secó sobre MgS04. La capa orgánica en evaporación dio 2.94 g (73%) de un sólido de color blanco. 2. A una solución de (terc-butildimetilsiloxi) ácido acético terc-butildimetilsililo éster (2.01 g, 6.61 mmol) en diclorometano (10 mi) que contenía 4 gotas de DMF, se añadió una solución de cloruro de oxalilo (1.05 g, 8.26 mmol) lentamente en atmósfera de N2 durante 40 minutos. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción resultante, en evaporación, proporcionó 1.37 g de residuo de color amarillo con un rendimiento casi cuantitativo, que se utilizó, como tal, para el próximo paso.

B. (-)cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentenona-1 -0-(terc-butildimetilsililoxi)metil éter Una mezcla de abacavir (6.0 g, 20.98 mmol), cloruro de terc-butildimetilsililo (3.78 g, 25.20 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (DMAP) (0.13 g, 1.05 mmol) en diclorometano (100 mi) se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A continuación, una cantidad adicional de cloruro de terc-butildimetilsililo (0.63 g, 4.2 mmol) se agitó y se continuó la reacción durante 1.5 horas. Entonces se añadió una solución saturada de NaHC03 (100 mi) y la capa se separó. La capa orgánica se lavó con salmuera (100 mi), y se secó sobre MgS04. El diclorometano se eliminó a presión reducida y el residuo se purificó mediante un Sistema CombiFlash™ con una columna RediSep™ con gel de sílice como un soporte sólido, usando una mezcla de hexano/acetato de etilo (100-5:0-95) como eluyente, para dar 5.55 g (66.15%) del producto deseado que se utilizó, como tal, para el próximo paso.

C. (-)cis-[4-[2-N(bis-butiloxicarbonil)amino-6-(N-butoxicarbonil,N-ciclopropil)amino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1 -0-(terc-butildimetilsililoxi)metil éter.

Una mezcla de derivado de TBDMS (5.55 g, 13.88 mmol), dicarbonato de di-terc-butilo (10.59 g, 48.58 mmol) y DMAP (0.17 g, 1.388 mmol) en acetonitrilo (170 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. Entonces se añadió una cantidad adicional de dicarbonato de di-terc-butilo (4.54 g, 20.83 mmol) y DMAP (0.17 g, 1.388 mmol) y la mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 48 horas. Entonces se eliminó el disolvente y el residuo se disolvió en diclorometano (100 mi). La capa orgánica se lavó con NaHC03 saturado (100 mi), y después con salmuera (100 mi), y después se secó sobre MgS04. La capa orgánica se evaporó y el residuo resultante se purificó usando un Sistema de CombiFlash™ con una columna RediSep™ con gel de sílice como un soporte sólido, usando una mezcla de hexano/acetato de etilo (100:00 a 70:30) como eluyente, para dar 4.40 g (45.30%) de producto.

D. (-)cis-[4-[2-N(bis-butiloxicarbonil)am¡no-6-(N-butoxicarbonil,N-cicloprop¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l]-2-ciclopentano-1-0-metanol.

A una solución agitada enfriada con hielo de 0-(terc-butildimetilsililoxi)-N, N, N-tributoxicarbonil abacavir (4.40 g, 6.29 mmol) en tetrahidrofurano (100 mi), se añadió una solución de fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF) en tetrahidrofurano (4.5 mi, 9.43 mmol). La mezcla de reacción resultante se dejó calentar a temperatura ambiente, y se continuó la agitación durante 1 hora. Después, el disolvente se evaporó y el residuo se suspendió en acetato de etilo (100 mi) y se lavó con 1 NaHS04 (100 mi), a continuación con NaHC03 saturado (100 mi), y después con salmuera (100 mi), y después se secó sobre MgS04. Entonces la capa orgánica se evaporó y el residuo resultante se purificó mediante un Sistema de CombiFlash™ con una columna RediSep™ con gel de sílice como un soporte sólido, usando una mezcla de hexano/acetato de etilo (100:00 a 00:100) como eluyente, para dar 3.51 g (95.38%) de producto.

E. (-)cis-[4-[2-N(bis-butiloxicarbonil)amino-6-(N-butoxicarbonil,N-ciclopropil)amino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1-(0-terc-butildimetilsililoxi)metil acetato.

A una solución agitada enfriada con hielo del compuesto titulado del anterior paso D (1.02 g, 1.74 mmol) y trietilamina (TEA) (5 mi) en diclorometano (100 mi), se añadió gota a gota cloruro de O-terc-butildimetilsililoxiacetil (0.36 g, 1.73 mmol). La mezcla de reacción resultante se agitó durante 1 hora y a continuación se añadió una solución saturada de NaHC03 (100 mi). La capa de diclorometano se separó, se lavó con salmuera y se secó sobre MgS04. Entonces la capa orgánica se evaporó hasta secado y el residuo resultante se purificó mediante un Sistema de CombiFlash™ con una columna RediSep™ con gel de sílice como un soporte sólido, usando una mezcla de hexano/acetato de etilo (100:00 a 60:40) como eluyente, para dar 0.38 g (28.78%) de producto.

F. (-) cis-[4-[2-amino-6-ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1 -hidroximetil acetato (Prurisol).

A una solución enfriada con hielo agitada de O-(terc-butildimetilsililoxi) acetiloxi-N,N,N-tributoxicarbonilabacavir (0.38 g, 0.50 mmol) en diclorometano (30 mi), se añadió ácido trifluoroacético (TFA) (12 mi) y se dejó la mezcla calentar a temperatura ambiente durante 1 hora. A continuación el disolvente fue retirado, y fue añadido acetonitrilo (30 mi), seguido por adición de 40% TFA en agua (4.5 mi). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante una hora, luego se evaporó el acetonitrilo a presión reducida, y se añadieron diclorometano (30 mi) y solución saturada de NaHC03. La capa orgánica se separó, se secó sobre MgS04 y se evaporó a secado. El residuo resultante se purificó mediante un Sistema de CombiFlash™ con una columna RediSep™ con gel de sílice como un soporte sólido, usando una mezcla de diclorometano/metanol (100:00 a 94:6) como eluyente, para dar 0.132 g (75.43%) de producto final. 1H RMN (DMSO-d6, base libre) ?? 0.45 - 0.76 (4H, m, CH2), 1.58 (1 H, m, CH), 2.65 (1 H, m, CH), 2.92 - 3.18 (2H, m, CH2),3.98 (2H, dd, CH2), 4.13 (2H, d, CH2), 5.30 (1 H, t, CH), 5.39 (1 H, m, CH), 5.80 (2H, bs, NH2), 5.93 (1 H, dt, CH), 6.06 (1 H, dt, CH), 7.27 (1 H, d, NH), 7.78 (1 H, s, Ar-H); masa (C16H2oN603, 344.37) se encuentra (m+1 ) 345.1.

Ejemplo 2 Eficacia In Vivo del Prurisol en Modelos Animales Tejido Psoriásico y Ratones Con el fin de examinar la eficacia de la (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-l -hidroximetil acetato en ratones, fueron adquiridos ratones SCID (las siglas en inglés de Severe Combined Immunodeficient) machos y hembras (24 a 28 g) de 6 a 8 semanas de edad del Charles River Laboratory (Wilmington, MA). Los animales se mantuvieron en jaulas estándar para roedores con tapas aislantes, a temperatura de 18-26 °C, y una humedad relativa de 30-70%, en un ciclo de 12 horas de luz/12 horas de oscuridad. Los ratones recibieron comida para roedores y agua ad libitum. Los animales se aclimataron durante un período de una semana y se observó a cada animal al menos una vez al día para detectar cualquier anormalidad o el desarrollo de enfermedad infecciosa. Los animales adecuados se seleccionaron para el estudio asignado.

Todos los animales considerados inaceptables para el uso en este estudio fueron reemplazados por animales de edad y peso similar de mismo proveedor. Tejidos humanos psoriásicos se adquirieron del Intercambio Nacional de Investigación de Enfermedades, en Filadelfia, PA.

Irradiación Corporal Total (TBI) Los ratones fueron sometidos a la irradiación corporal total, para ligeramente suprimir el sistema inmune, a 120 rads por animal en un Radiador Gamma de células. Los ratones fueron identificados por perforación de oreja.

Implantación del Tejido Psoriásico 24 horas después del TBI, un corte de 5 mm x 5 mm del tejido psoriásico humano fue trasplantado en la piel de los ratones, con anestesia de cetamina/xilazina. Los tejidos fueron adheridos mediante el uso de un pegamentó para piel. Todos los animales sobrevivieron a la anestesia y la cirugía para el experimento. La fusión completa de los tejidos se logró al día 27. Durante los tratamientos, los ratones se observaron diariamente para cualquier efecto adverso. Los pesos corporales de los ratones fueron tomados antes del tratamiento y cada dos días durante el post tratamiento. Si un animal se ponía enfermo, se suspendía cualquier tratamiento de dicho animal. Si no había recuperación, el animal se sacrificaba. Un animal que mostraba una pérdida de peso mayor del 15% se consideraba enfermo. Cualquier animal que mostraba una pérdida de peso mayor de 20% se sacrificaba. Cualquier animal que presentara ulceración prolongada de la piel sobre el sitio, fue sacrificado. Las medidas del tamaño del área trasplantada en los ratones fueron tomadas antes del tratamiento y cada dos días durante el post tratamiento. El mismo científico fue el responsable de tomar las mediciones a lo largo del estudio Una vez que un sitio de trasplante del grupo vehículo alcanzó una condición clínicamente intolerable para los animales, todos los animales de todo el grupo alcanzado fueron sacrificados por asfixia con C02. Tras el sacrificio, se retiraron y se analizaron los sitios de trasplante.

Protocolos de Eficacia In Vivo Grupos de 5 ratones machos y 5 ratones hembra que llevaban tejidos psoriásicos se trataron tanto con (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenteno-1-hidroximetil acetato (Prurisol) solo o con metotrexato (MTX), de acuerdo con el siguiente esquema. Otro grupo de ratones permanecieron sin tratar para servir como controles.

Los datos se presentan como la media del volumen sobre el tiempo. La eficacia del tratamiento es analizada de 3 maneras. En primer lugar, los volúmenes individuales de tejido psoriásico se comparan en un solo punto de tiempo. En segundo lugar, el número de días para que cada tejido llegara a un tamaño de punto final predeterminado, es decir, se analiza el tiempo hasta el punto final (TTE). Si los datos se distribuyen normalmente, a continuación, se hace un análisis estadístico de dos colas en p=0.05 que utiliza prueba de suma de rangos de Mann-Whitney-Wilcoxon para determinar las diferencias significativas entre los grupos. En tercer lugar, el crecimiento psoriásico se calcula como la diferencia entre la media del TTE para el grupo de tratamiento y la media del TTE del grupo de control, expresado como un porcentaje del grupo de control.

Resultados Cambios en el Peso El Prurisol se administró por vía oral (PO) a los ratones, junto con la aplicación tópica en la zona afectada a intervalos de 8 horas. La pérdida de peso debido a la administración del compuesto estuvo dentro de límites aceptables. 5 mg/kg administrados en los días 11 a 35, y 20 mg/kg en el programa por vía tópica resultaron en ninguna pérdida de peso, lo que sugirió que el Prurisol no es tóxico. En la psoriasis, la proteína G1 P3 antiapoptótica está sobre expresada, que está regulada por el ARN no codificante. El gen de ARN relacionado a la Susceptibilidad a la Psoriasis inducida por Estrés (PRINS) fue examinado en los trasplantes de los animales de control y en los tratados (la expresión en las placas psoriásicas será 10 veces mayor), y los resultados de estos estudios se muestran a continuación.

Los resultados de este estudio demostraron que el Prurisol reduce la PRINS significativamente en comparación con el metotrexato (MTX). IL-20 fue también medida utilizando técnica ELISA y los datos también se muestra por debajo.

Los resultados anteriores indican que el Prurisol y metotrexato reducen la concentración de IL-20 en el tejido en 3 veces y 1.4 veces, respectivamente. En general, estos resultados sugieren que el Prurisol es más eficaz que el metotrexato en el control de la psoriasis. Los resultados anteriores también se representan en las Figuras 1 , 2 y 3.

Las lesiones o zona de la piel donde se implantaron los xenoinjertos se diseccionaron asépticamente. Bajo un micrótomo, rebanadas de 0.5 uM de grosor se prepararon y se montaron sobre vidrio. Las muestras fueron tratadas en porcentajes ascendentes de alcohol, hasta el 100%, cada vez manteniendo la muestra en un porcentaje determinado de alcohol durante dos horas. Las muestras se secaron y se tiñeron con hematoxilina y eosina. Los cortes se examinaron bajo un microscopio LEICA™ bajo 20 X. Las rebanadas fueron calificadas de 1 a 10, siendo 1 el tejido normal, y 10 es el tejido con psoriasis muy severa. Los resultados se muestran en la Figura 4.

El ADNc de 12R-lipoxigenasa es detectable por PCR (reacción en cadena de la polimerasa) en escamas psoriásicas y como un ARNm de 2.5 kilobases por análisis Northern de los queratinocitos. La identificación de esta enzima extiende la distribución conocida de R-lipoxigenasas a los seres humanos y presenta un objetivo adicional para potenciales intervenciones terapéuticas en la psoriasis, y los resultados cuando los animales se dosificaron a 10 mg/kg se ilustran a continuación en la Figura 5.

La Figura 5 muestra la inducción de la actividad de la 12-R lipoxigenasa mediante Prurisol y MTX Animales con SCID (Inmunodeficiencia combinada severa), recibieron una radiación corporal total y se implantaron con el tejido psoriásico humano. Todos los animales fueron tratados ya sea mediante vehículo, Prurisol, 10 mg, o bien una vez al día o dos veces al día y MTX. Después del tratamiento, los animales se recuperaron de la psoriasis como la imagen en la Figura 6 indica.

Los datos mostrados en las Figuras 7 y 8 para CD4 y CD8, respectivamente, se obtuvieron por Clasificación de Células Activadas por Fluorescencia (FACS). Los términos CD4 y CD8 denotan la gravedad de la inhibición de la tolerancia por los animales. Un nivel bajo de CD4 y CD8 indica que los animales se están volviendo inmunodeprimidos, si el nivel desciende por debajo del 70% de los niveles originales debe suspenderse el tratamiento. CD4 y CD8 son miembros de la superfamilia de las inmunoglobulinas. CD4 y CD8 (grupo de diferenciación 4 o 8) son glicoproteínas que expresan en la superficie de las células T auxiliares, monocitos, macrófagos, y células dendríticas.

Aunque la invención ha sido descrita anteriormente con referencia a las modalidades divulgadas, aquellos expertos en la técnica fácilmente apreciarán que los experimentos específicos detallados son sólo ilustrativos de la invención. Se debe entender que diversas modificaciones puede hacerse sin apartarse del el espíritu de la invención. En consecuencia, la invención se limita sólo mediante las siguientes reivindicaciones.

Claims (23)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la fórmula i caracterizado porque R1 y R2 son seleccionados de manera independiente a partir de hidrógeno, alquilo C02Ci-C4 alquilo Ci-C6, alquenilo C2-C6 y alquinilo C2-C6, en el que los restos alquilo de dichos grupos alquilo, alquenilo, y alquinilo pueden ser lineales, de cadena ramificada o una combinación de cadena lineal y ramificada,- <CH2)nOen el que n es 0 a 3, — (CH*)nO donde n es de 1 a 2, cicloalquilo C3-C7, un anillo heterocíclico de tres a doce elementos que contiene hasta 3 heteroátomos donde los heteroátomos se seleccionan independientemente de O, N o S, y donde cada anillo heterocíclico puede estar opcionalmente sustituido en uno o más átomos de carbono por 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre alcoxi d-C6, y alquilo 0-d-C6; R3 y R4 son seleccionados de manera independiente a partir de hidrógeno y alquilo CrC6; R5 y R6 son seleccionados de manera independiente a partir de hidrógeno y -CO2C4H9; A se selecciona de un enlace covalente, O, S, Se, alquilo CrC6, y (CH2)nO, donde n es un entero de 0 a 3; X se selecciona a partir de un enlace covalente, O, S y Se; B se selecciona a partir de un enlace covalente, -CH2, -CH2-CH2-, - CH2-CH2-CH2-, trans-CH=CH-, cis-CH=CH-,-CiC-,-CHR7-CHR8-, cis o trans-CR7=CR8-, donde R7 y R8 son seleccionados de manera independiente a partir de alquilo CrC6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, y cicloalquilo C3-C7; y Y se selecciona a partir de OH, SH, OR9 donde R9 es alquilo Ci-C6, alquenilo C2-C6 y alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C7, y (CH2)nOH, donde n es un entero de 1 a 6 y NR9R10 donde R9 y R10 son seleccionados de manera independiente a partir de alquilo C C6 y cicloalquilo C3-C7; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto caracterizado porque tiene la fórmula

Prurisol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. compuesto (-) cis-[4-[2-amino-6-ciclopropilamino)-9H-pur¡n-9-il]-2- ciclopentano-1 -hidroximethil acetato de acuerdo con la reivindicación 2.

4. Una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto (-) cis-[4-[2-amino-6-ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1-hidroximethil acetato de acuerdo con la reivindicación 2.

5. Una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades inflamatorias de la piel caracterizada porque comprende una cantidad antiinflamatoria eficaz de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

6. Una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades inflamatorias de la piel caracterizada además porque comprende una cantidad antiinflamatoria eficaz de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

7. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 5 o 6, caracterizada además porque dicha composición está en forma de dosificación unitaria.

8. Una composición farmacéutica para el tratamiento de la psoriasis, el eccema, o seborriasis caracterizada además porque comprende una cantidad eficaz antipsoriasis, antieccema o antiseborriasis de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

9. Un método para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria de la piel en un paciente que tiene la necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende administrar a dicho paciente una cantidad de un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 1 , eficaz para tratar tal enfermedad.

10. Un método de acuerdo con la reivindicación 9 caracterizado además porque dicho compuesto es (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1 -hidroximetil acetato (Prurisol) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

11. Un método de acuerdo con la reivindicación 9 caracterizado además porque dicha enfermedad inflamatoria es psoriasis.

12. Un método de acuerdo con la reivindicación 9 caracterizado además porque dicha enfermedad inflamatoria eccema.

13. Un método de acuerdo con la reivindicación 9 caracterizado además porque dicha enfermedad inflamatoria seborriasis.

14. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 12 caracterizado además porque dicho compuesto es (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1 -hidroximetil acetato (Prurisol).

15. El uso de un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la producción de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria de la piel en un paciente en necesidad de tal tratamiento.

16. Un uso de acuerdo con la reivindicación 15 en el que dicho compuesto es (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1-hydroximetil acetato (Prurisol) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

17. Un uso de acuerdo con la reivindicación 15 en el que dicha enfermedad inflamatoria es psoriasis.

18. Un uso de acuerdo con la reivindicación 15 en el que dicha enfermedad inflamatoria es eccema.

19. Un uso de acuerdo con la reivindicación 15 en el que dicha enfermedad inflamatoria es seborriasis.

20. Un uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15 a 19 en el que dicho compuesto es (-) cis-[4-[2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopentano-1-hydroximetil acetato (Prurisol) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

21. Un compuesto de la fórmula

Un compuesto de la fórmula caracterizado porque R1, R5 y R6 son seleccionados de manera independiente a partir del grupo que consiste de hidrógeno y -CO2C4H9.

23. Un compuesto de la fórmula caracterizado porque R1, R5 y R6 son seleccionados de independiente a partir del grupo que consiste de hidrógeno y - CO2C4H9. Un compuesto de la fórmula caracterizado porque R1, R5 y R6 son seleccionados de manera independiente a partir del grupo que consiste de hidrógeno y -C02C4H9.