MX2014002470A - Inhibidor de pi3k para uso en el tratamiento de cancer de hueso o para prevenir la diseminacion metastasica de celulas de cancer primario en el hueso. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a métodos para el tratamiento de cáncer de hueso y prevención de la diseminación metastásica del cáncer.

Description

INHIBIDOR DE PI3K PARA USO EN EL TRATAMIENTO DE CÁNCER DE HU ESO O PARA PREVENIR LA DISEMINACIÓN METASTÁSIC A DE CÉLULAS DE CÁNCER PRIMARIO EN EL HUESO Campo de la invención La presente invención está relacionada con métodos para el tratamiento de cáncer de hueso, así como también para la prevención de diseminación metastásica de cáncer.

Antecedentes de la invención La diseminación metastásica es la secuela de cáncer más temida, y la causa principal de letalidad. Las células que dejan los tumores primarios pueden alcanzar cada órgano y distrito en el cuerpo. Sin embargo, cada tipo de tumor presenta un patrón metastásico específico que resulta de la interacción de las propiedades celulares y moleculares específicas del órgano e intrínsecas del tumor (1 , 2). Por ejemplo, los objetivos más comunes de diseminación de cáncer de mama son los huesos, los pulmones, órganos viscerales abdominales y el cerebro (3-6). Los cánceres de hueso metastásicos resultan de la diseminación metastásica de cánceres primarios, y son distinguidos de cánceres hematológicos, tales como mieloma múltiple y leucemia, los cuales comienzan en la médula ósea. Los patrones metastásicos determinan no solamente la duración de intervalos libres de recurrencia, sino de manera más importante, calidad de vida y, eventualmente supervivencia. La búsqueda para nuevos agentes antimetastásicos permanece como un objetivo importante en oncolog ía.

Breve descripción de la invención Por consiguiente, en un aspecto , proporcionado en la presente está un método para el tratam iento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratam iento, que comprende administrar un com puesto de conform idad con la fórmula (I) , o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado: en donde W e ' en donde Rw se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1 ) hidrógeno, (2) ciano, (3) halógeno, (4) metilo, (5) trifluorometi lo, (6) sulfonamida ; Ri se selecciona a partir del grupo que consiste de: (b) alquilo sustituido o no sustituido, (c) arilo sustituido y no sustituido, (d) heteroarilo sustituido y no sustituido, (e) heterociclilo sustituido y no sustituido, y (f) cicloalquilo sustituido y no sustituido; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1 ) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) hidroxi, (6) amino, (7) alquilo sustituido y no sustituido, (8) -COR2a, y (9) -NR2aCOR2b , en donde R2a , y R2b son independientemente seleccionados partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, y (b) alquilo sustituido o no sustituido; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1 ) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) alquilo sustituido y no sustituido, (6) alquenilo sustituido y no sustituido, (7) alquinilo sustituido y no sustituido, (8) arilo sustituido y no sustituido, (9) heteroarilo sustituido y no sustituido, (10) heterociclilo sustituido y no sustituido, (1 1 ) cicloalquilo sustituido y no sustituido, (12) -COR3a, (14) -NR3aR3 b (13) -NR3aCOR3 b , (1 5) -NR3aS02R 3b , (16) -OR3a, (1 7) -SR3a, (1 8) -SOR3a, (19) -S02 R3a , en donde R3a, y R3b son independientemente seleccionados partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, (b) alquilo sustituido o no sustituido, (c) arilo sustituido y no sustituido, (d) heteroarilo sustituido y no sustituido, (e) heterociclilo sustituido y no sustituido, y (f) cicloalquilo sustituido y no sustituido; and R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de (1 ) hidrógeno, y (2) halógeno.

En ciertas modalidades del método, el cáncer de hueso se selecciona de condrosarcoma, osteosarcoma , sarcoma de Ewing, cordoma, fibrosareoma, e histiocitoma fibroso maligno (M FH) .

En otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para prevenir la diseminación metastásica de cél ulas de cáncer primario en el hueso de u n sujeto en necesidad de tal prevención , que comprende admin istrar un compuesto de conform idad con la fórmula (I ) , o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la diseminación metastásica de células de cáncer pri mario en el h ueso del sujeto se previene.

En una modal idad del método de prevención , las células de cáncer primario se originan de cánceres de mama, pulmón , páncreas, riñon o próstata. En otra modalidad , las cél ulas de cáncer primario son células de cáncer de mama .

En otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para el tratam iento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, que com prende adm i nistrar una composición farmacéutica que com prende un compuesto de conformidad con la fórm ula (I) , o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y un portador, di luyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado.

En aún otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para preven ir la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención , que comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la fórmula (I), o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la diseminación metastasica de células de cáncer primario en el hueso del sujeto se previene.

En ciertas modalidades de los métodos de tratamiento y métodos de prevención anteriores, W representa CH; R1 representa N-morfolinilo; R2 representa hidrógeno; R3 representa trifluorometilo; y R4 representa hidrógeno.

En todavía otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para el tratamiento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar el Compuesto A, o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado: (A) En ciertas modalidades de los métodos de tratamiento anteriores de cáncer de hueso, el cáncer de hueso es cáncer de hueso metastásico.

En un aspecto particular, proporcionado en la presente está un método para prevenir la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención, que comprende administrar el Compuesto A, o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso del sujeto se previene.

Breve descripción de las figuras Las Figuras 1 A-C representan inhibición de órganos múltiples de crecimiento metastásico de 453-EGFP por el Compuesto A. (Fig. 1 A) Incidencia de metástasis en diferentes sitios; una inhibición significante por el Compuesto A se registró en el cerebro, médula ósea e hígado, p<0.05 al menos, la prueba exacta de Fisher. Muestras representativas de cerebros de ratón tratados y de control disectados (vista ventral , Fig. 1 B y pulmones Fig. 1 C, muestran reducción en la carga metastásica por el Compuesto A.

Las Figuras 2A-F representan el análisis cuantitativo de actividad antimetastásica del Compuesto A. Cada barra representa la media y SEM de grupos de 6-9 ratones tratados i.v. con células 453-EGFP, el porcentaje de inhibición se muestra en cada gráfica arriba de la barra del Compuesto A. (Fig. 2A) La carga metastásica es el cerebro como se evalúa por qPC R, véase Materials and Methods for calculations; (Figs. 2B, 2 D) Determ inación citofluorométrica de células metastásicas positivas-H E R-2 en el cerebro disociado (Fig . 2B) y médula ósea femoral (Fig. 2D) ; (Figs. 2C , 2E, 2F) Conteo visual de sitios metastásicos por ratón . Evaluación estadística de inhi bición de metástasis por el Compuesto A: Figuras 2A, 2B, 2C , 2F, p<0.05 al menos por la prueba de r de Student.

Descripción detal lada de la invención /. Métodos de Tratamiento Los objetivos com unes de disemi nación metastásica incluyen los huesos, el estómago, hígado, i ntestinos, bazo, páncreas, y partes de los tractos urinario y reproductivo) .

La disem inación metastásica y metástasis, de conformidad con la presente descripción, se entiende significan la diseminación de células de cáncer de un sitio origi nal a otra parte del cuerpo. La formación de metástasis es un proceso muy complejo y depende del desprendimiento de célu las malignas a partir del tumor primario, invasión de la matriz extracelular, penetración de las membranas de basamento endotelial para entrar a la cavidad corporal y bazos, y después, de ser transportado por la sangre, infiltración de los órganos objetivos. Finalmente, el crecimiento de un nuevo tumor en el sitio objetivo depende de la angiogénesis. La metástasis del tumor a menudo ocurre aún después de la remoción de los tumores primarios debido a que las célu las del tumor o com ponentes pueden permanecer y desarrollar potencial metastásico. En una modalidad , el término "metástasis" de conformidad con la invención se refiere a "metástasis distante" la cual se refiere a una metástasis la cual es remota a partir del tumor primario.

La presente descripción también se refiere a métodos para tratar y prevenir cáncer de h ueso, una condición caracterizada por un crecim iento anormal de células malignas en o dentro del hueso, excluyendo cánceres que se originan en la médula ósea (por ejemplo, cánceres hematológicos tales como m ieloma m últiple y leucemia) . Ejemplos no l im itantes de cáncer de hueso incluyen condrosarcoma, osteosarcoma , sarcoma de Ewing , cordoma, fibrosarcoma, y histiocitoma fibroso maligno (M FH) . Cánceres que se origina en o dentro del hueso son referidos como cánceres de hueso primarios. Cánceres del hueso que se originan en otra parte del cuerpo (tales como la mama , pulmones, o colon) son cánceres de hueso secundarios, o metastásicos.

De este modo, en un aspecto, proporcionado en la presente está un método para el tratamiento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, que com prende adm inistrar un compuesto de conformidad con la fórm ula (I ) , o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado: (D en donde W es CRW o N, en donde Rw se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1) hidrógeno, (2) ciano, (3) halógeno, (4) metilo, (5) trifluorometilo, (6) sulfonamida; Ri se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) alquilo sustituido y no sustituido, (6) alquenilo sustituido y no sustituido, (7) alquinilo sustituido y no sustituido, (8) arilo sustituido y no sustituido, (9) heteroarilo sustituido y no sustituido, (10) heterociclilo sustituido y no sustituido, (11) cicloalquilo sustituido y no sustituido, (12) -CORia, (13) -C02Ria, (14) -CONRiaRib, (15) -NRiaRit>, (16) -NRiaCORib, (17) -NRiaS02Rib, (18) -OCORia, (19) -ORia, (20) -SRia, (21) -SORia, (23) -S02NR,aRib, en donde Ría, y Rit> son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, (b) alquilo sustituido o no sustituido, (c) arilo sustituido y no sustituido, (d) heteroarilo sustituido y no sustituido, (e) heterociclilo sustituido y no sustituido, y (f) cicloalquilo sustituido y no sustituido; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) hidroxi, (6) amino, (7) alquilo sustituido y no sustituido, (8) -COR2a, y (9) -NR2aCOR2b, en donde R2a , y 2b son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, y (b) alquilo sustituido o no sustituido; 5 R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1 ) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) alquilo sustituido y no sustituido, (6) alquenilo sustituido y no sustituido, (7) alquinilo sustituido y no sustituido, (8) arilo sustituido y no sustituido, (9) heteroarilo sustituido y no sustituido, (1 0) heterociclilo sustituido y no sustituido, í o (1 1 ) cicloalquilo sustituido y no sustituido, (12) -CO R3a, (14) -NR3a R3b, (13) -NR3aCOR3b , (1 5) -NR3aS02 R3b , (16) -OR3a, ( 17) -SR3a, ( 18) -SOR3a, (19) -S02 3a , en donde R3a, y 3b son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, (b) alquilo sustituido o no sustituido, (c) arilo sustituido y no sustituido, (d) 15 heteroarilo sustituido y no sustituido, (e) heterociclilo sustituido y no sustituido, y (f) cicloalquilo sustituido y no sustituido; y R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de (1 ) hidrógeno, y (2) halógeno.

En una modalidad del método para el tratamiento de cáncer 20 de hueso, el cáncer de hueso es cáncer de hueso metastásico.

En otra modalidad del método para el tratamiento de cáncer de hueso, W representa CH, R1 representa heterociclilo sustituido y no sustituido, R2 representa hidrógeno, R3 representa alquilo sustituido y no sustituido, y R4 representa hidrógeno. En otra modalidad, W 25 representa CH, R representa N-morfolinilo, R2 representa hidrógeno, R3 representa trifluorometilo, y R4 representa hidrógeno.

En ciertas modalidades del método, el cáncer de hueso se selecciona de condrosarcoma, osteosarcoma, sarcoma de Ewing, cordoma, fibrosarcoma, y histiocitoma fibroso maligno (MFH).

En otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para prevenir la diseminación metastásica de células de cáncer primario en un sujeto en necesidad de tal prevención, que comprende administrar un compuesto de conformidad con la fórmula (I), o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la diseminación metastásica de células de cáncer se previene.

En una modalidad del método de prevención la diseminación metastásica de células de cáncer primario, las células de cáncer primario se originan de cánceres de mama, pulmón, páncreas, riñón o próstata. En otra modalidad , las células de cáncer primario son células de cáncer de mama . En todavía otra modalidad, las células de cáncer primario se previenen de diseminarse en órganos seleccionados de hueso, pulmones, órganos viscerales abdominales, y el cerebro. En una modalidad particular, las células de cáncer primario se previenen de diseminarse en el hueso del sujeto.

De este modo, en otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para prevenir la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención, que comprende administrar un compuesto de conformidad con la fórmula (I), o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso del sujeto se previene.

En ciertas modalidades de los métodos para prevenir la diseminación metastásica de células de cáncer primario, W representa CH, R1 representa heterociclilo sustituido y no sustituido, R2 representa hidrógeno, R3 representa alquilo sustituido y no sustituido, y R4 representa hidrógeno. En otras modalidades, W representa CH , R1 representa N-morfolinilo, R2 representa hidrógeno, R3 representa trifluorometilo, y R4 representa hidrógeno.

En otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para el tratamiento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar el Compuesto A, o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado: (A) En una modalidad del método para el tratamiento de cáncer de hueso, el cáncer de hueso es cáncer de hueso metastásico.

En un aspecto particular, proporcionado en la presente está un método para prevenir la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención, que comprende administrar el Compuesto A, o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso del sujeto se previene.

En una modalidad preferida, el compuesto de fórmula (I) es el inhibidor pan-fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K) 5-(2,6-di-morfolin-4-il-pirimidin-4-il)-4-trifluorometil-piridin-2-ilamina (referido en la presente como "Compuesto A").

La síntesis del Compuesto A se describe en el documento WO 2007/084786 (véase Ejemplo 10, páginas 1 39-140), los contenidos de las cuales se incorporan en la presente por referencia. A menos que se especifique de otro modo, o claramente se indica por el texto, la referencia al compuesto de fórmula I de la invención incluye tanto la base libre del compuesto, como todas las sales farmacéuticamente aceptables del compuesto.

//. Composiciones Farmacéuticas En otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para el tratamiento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la fórmula (I) , o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado.

En una modalidad del método para el tratam iento de cáncer de hueso, el cáncer de hueso es cáncer de hueso metastásico.

En aún otro aspecto, proporcionado en la presente está un método para preveni r la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención, que com prende adm inistrar una com posición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la fórmula (I) , o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la disem i nación metastásica de células de cáncer primario en el hueso del sujeto se previene.

Los com puestos de la invención son útiles in vitro o in vivo en el tratamiento de disem inación metastásica. Los compuestos pueden ser usados solos o en composiciones junto con un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable. Composiciones farmacéuticas de la presente invención com prenden una cantidad terapéuticamente efectiva de un com puesto in hibidor de fosfatidili nositol 3-cinasa descrito en la presente form ulado junto con u no o más portadores farmacéuticamente aceptables. Como se usa en la presente , el término "portador farmacéuticamente aceptable" significa un material encapsulante, di luyente, relleno no tóxico, sólido inerte, semi-sól ido o líquido, o auxiliar de formulación de cualq u ier tipo. Alg unos ejemplos de materiales los cuales pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables son azúcares tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones tales como almidón de maíz y almidón de papa; celulosa y sus derivados tales como carboximetilceluosa de sodio, etilcelulosa y acetato de celulosa; tragacanto en polvo; malta; gelatina; talco; excipientes tales como manteca de cacao y ceras de supositorios; aceites tales como aceite de maní, aceite de semilla de algodón; aceite de cártamo; aceite de ajonjolí; aceite de oliva; aceite de maíz y aceite de soya; glicoles; tales como propilenglicol; ésteres tales como oleato de etilo y laurato de etilo; agar; agentes amortiguadores tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; ácido algínico; agua libre de pirógeno; salina isotónica; solución Ringer; alcohol etílico, y soluciones amortiguadoras de fosfato, así como también otros lubricantes compatibles no tóxicos tales como lauriisulfato de sodio y estearato de magnesio, así como también agentes colorantes, agentes de liberación, agentes de recubrimiento, endulzantes, saborizantes y agentes perfumantes, conservadores y antioxidantes también pueden estar presentes en la composición, de conformidad con el juicio del formulador. Otros excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados se describen en "Remington's Pharmaceutical Sciences," ack Pub. Co. , New Jersey, 1991 , incorporado en la presente por referencia.

Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados a humanos y otros animales oralmente, parenteralmente, sublingualmente, por aerosolización o atomización por inhalación, rectalmente, intracisternalmente, intravaginalmente, intraperitonealmente, bucalmente, o tópicamente en formulaciones de dosificación unitaria que contienen portadores, adyuvantes, y vehículos farmacéuticamente aceptables no tóxicos convencionales, como se desee. La administración tópica también puede involucrar el uso de administración transdermal tal como parches transdermales o dispositivos de ionofóresis. El término parenteral como se usa en la presente incluye inyecciones subcutáneas, intravenosas, intramusculares, inyección intrasternal, o técnicas de infusión.

Los métodos de formulación son bien conocidos en la técnica y se describen, por ejemplo, en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 19a Edición (1995). Composiciones farmacéuticas para uso en la presente invención pueden estar en la forma de soluciones o suspensiones líquidas no pirogénicas, estériles, cápsulas recubiertas, supositorios, polvos liofilizados, parches transdermales u otras formas conocidas en la técnica.

Preparaciones inyectables, por ejemplo suspensiones acuosas u oleaginosas inyectables estériles pueden ser formuladas de conformidad con la técnica conocida usando agentes humectantes o dispersantes adecuados y agentes de suspensión. La preparación inyectable estéril puede también ser una solución, suspensión o emulsión inyectable estéril en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, como una solución en 1 ,3-propanodiol o 1 ,3-butanodiol. Entre los vehículos y solventes aceptables que pueden ser empleados son agua, solución Ringer, U.S.P. y solución isotónica de cloruro de sodio. Además, aceites fijos, estériles, son convencionalmente empleados como un solvente o medio de suspensión.

Para este propósito cualquier aceite fijo blando puede ser empleado incluyendo mono- o di-glicéridos sintéticos. Además, ácidos grasos tales como ácido oleico encuentran uso en la preparación de inyectables. Las formulaciones inyectables pueden ser esterilizadas, por ejemplo, por filtración a través de un filtro de retención bacterial, o incorporando agentes esterilizantes en la forma de soluciones sólidas estériles las cuales pueden ser disueitas o dispersadas en agua estéril u otro medio inyectable estéril previo al uso.

Con el fin de prolongar el efecto de un fármaco, es a menudo deseable disminuir la absorción del fármaco a través de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto puede ser realizado por el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo con pobre solubilidad en agua. La velocidad de absorción del fármaco entonces depende de su velocidad de disolución la cual, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y forma cristalina.

Alternativamente, la absorción retardada de una forma de fármaco parenteralmente administrado puede ser realizada disolviendo o suspendiendo el fármaco en un vehículo aceitoso. Las formas de depósito inyectables son elaboradas formando matrices microencapsuladas del fármaco en polímeros biodegradables tales como poliláctido-poliglicólido. Dependiendo de la relación de fármaco a polímero y la naturaleza del polímero particular empleado, la velocidad de liberación del fármaco puede ser controlada. Ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). Las formulaciones inyectables de depósito también pueden ser preparadas atrapando el fármaco en liposomas o microemulsiones, las cuales son compatibles con tejidos corporales.

Las composiciones para administración rectal o vaginal son preferiblemente supositorios los cuales pueden ser preparados mezclando los compuestos de esta invención con excipientes o portadores no irritantes adecuados tales como manteca de cacao, polietilenglicol o una cera de supositorio los cuales son sólidos a temperatura ambiente pero líquidos a temperatura corporal y por lo tanto de derriten en el recto o cavidad vaginal y liberan el compuesto activo.

Las formas de dosificación sólida para administración oral incluyen cápsulas, tabletas, pildoras, polvos y gránulos. En tales formas de dosificación sólida, el compuesto activo es mezclado con al menos un excipiente o portador farmacéuticamente aceptable, inerte, tal como citrato de sodio o fosfato dicálcico y/o a) rellenos o extendedores tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, y ácido silícico, b) ligantes tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidinona, sacarosa, y acacia, c) humectantes tales como glicerol, d) agentes desintegrantes tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos, y carbonato de sodio, e) agentes retardantes de solución tales como parafina, f) aceleradores de absorción tales como compuestos de amonio cuaternario, g) agentes humectantes tales como, por ejemplo, alcohol acetílico y monoestearato de glicerol, h) absorbentes tales como caolín y arcilla de bentonita, y i) lubricantes tales como talco, estearato de calcio, esterato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, laurilsulfato de sodio, y mezclas de los mismos. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, la forma de dosificación también puede comprender agentes amortiguadores.

Composiciones sólidas de un tipo similar también pueden ser empleadas como rellenos en cápsulas de gelatina llenas duras y blandas usando tales excipientes como lactosa o azúcar de leche así como también polietilenglicoles de alto peso molecular y similares. Las formas de dosificación sólidas de tabletas, grajeas, cápsulas, pildoras, y gránulos pueden ser preparados con recubrimientos y capas tales como recubrimientos entéricos y otros recubrimientos bien conocidos en la técnica de formulación farmacéutica. Opcionalmente contienen agentes opacificantes y también pueden ser de una composición que liberan el(los) ingrediente(s) activos solamente, o preferentemente, en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, en una manera retardada. Ejemplos de composiciones incluidas que pueden ser usadas incluyen sustancias poliméricas y ceras. Los compuestos activos también pueden estar en forma micro-encapsulada con uno o más excipientes como se indica anteriormente. Las formas de dosificación sólida de tabletas, grajeas, cápsulas, pildoras, y gránulos pueden ser preparadas con recubrimientos y capas tales como recubrimientos entéricos, recubrimientos que controlan la liberación y otros recubrimientos bien conocidos en la técnica de formulación farmacéutica. En tales formas de dosificación sólidas el compuesto activo puede ser mezclado con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa o almidón. Tales formas de dosificación pueden también comprender, como es práctica normal, sustancias adicionales distintas de diluyentes inertes, por ejemplo, lubricantes de tableteado y otros auxiliares de tableteado tales como estearato de magnesio y celulosa microcristalina. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes amortiguadores. Opcionalmente contienen agentes opacificantes y también pueden ser de una composición que liberan el(los) ingrediente(s) activo(s) solamente, o de manera preferida, en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, en una manera retardada. Ejemplos de composiciones incluidas que pueden ser usadas incluyen sustancias poliméricas y ceras. Las formas de dosificación líquida para administración oral incluyen emulsiones farmacéuticamente aceptables, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires. Además de los compuestos activos, las formas de dosificación líquida pueden contener diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica tales como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes solubilizantes y emulsificadores tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, EtOAc, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1 ,3-butilenglicol, dimetilformamida, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, cacahuate, maíz, germen, oliva, ricino y ajonjolí), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ásteres de ácido graso de sorbitán, y mezclas de los mismos. Además de diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes tales como agentes humectantes, agentes emulsificantes y de suspensión, endulzantes, saborizantes, y agentes perfumantes.

Cantidades efectivas de los compuestos de la invención generalmente incluyen cualquier cantidad suficiente para tratar de manera detectable o prevenir el cáncer de hueso o diseminación metastásica de células de cáncer por cualquiera de los ensayos descritos en la presente, por otros ensayos conocidos por aquellos que tienen habilidad ordinaria en la técnica, o detectando una inhibición o alivio de los síntomas de cáncer de hueso o diseminación metastásica de células de cáncer. La cantidad de ingrediente activo que puede ser combinada con los materiales portadores para producir una forma de dosificación única variará dependiendo del hospedero tratado y el modo particular de administración.

Se entenderá, sin embargo, que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración , ruta de administración, velocidad de excreción, combinación de fármaco, y la severidad de la enfermedad particular que se somete a terapia. La cantidad terapéuticamente activa para una situación dada puede ser fácilmente determinada por experimentación de rutina y está dentro de la habilidad y juicio del especialista ordinario.

De conformidad con los métodos de tratamiento de la presente invención, la diseminación metastásica se reduce o previene en un paciente tal como un humano o animal inferior administrando al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención, en tales cantidades y por tal tiempo como sea necesario para lograr el resultado deseado.

III. Definiciones "Tratar" se usa en la presente por significar la reducción o alivio de los síntomas asociados con un trastorno o enfermedad, o cese de progreso adicional o empeoramiento de estos síntomas, o prevención o profilaxis de la enfermedad o trastorno. Por ejemplo, dentro del contexto de tratar pacientes en necesidad de tratamiento de cáncer de hueso, el tratamiento exitoso puede incluir prevención de la incidencia de cáncer de hueso, o una prevención de la diseminación metastásica de células cancerosas en hueso, un alivio de los síntomas relacionados con un crecimiento canceroso o tumor en el hueso, proliferación de capilares, o tejido enfermo, una detención en la proliferación capilar, o una detención en el progreso de una enfermedad tal como cáncer o en el crecimiento de células cancerosas. El tratamiento puede también incluir administrar los compuestos usados en la presente invención en combinación con otras terapias. Por ejemplo, los compuestos y formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser administrados antes, durante, o después del procedimiento quirúrgico y/o terapia por radiación. Los compuestos de la invención también pueden ser administrados en conjunto con otros fármacos anticancerígenos que incluyen aquellos usados en terapia de gene y antisentido.

Como se usa en la presente, "límite", "trata" y "tratamiento" son términos intercambiables como son "limitar" y "tratamiento" y, como se usa en la presente, incluyen tratamiento preventivo (por ejemplo, profiláctico) y paliativo o el acto de proporcionar tratamiento preventivo o paliativo.

El térm ino "sujeto" está propuesto para inclu ir animales. Ejemplos de sujetos incluyen mamíferos, por ejemplo, humanos, perros, vacas, caballos, cerdos, ovejas, cabras , gatos , ratones, conejos, ratas y animales transgénicos no humanos. En ciertas modalidades, el sujeto es un humano, por ejemplo, un mam ífero que sufre de , en riesgo de sufrir de, o potencialmente capaz de sufrir de cáncer óseo metastásico.

Por una "cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto de la invención sign ifica una cantidad suficiente del com puesto para tratar o prevenir la diseminación metastásica , a una relación beneficio/riesgo razonable aplicable a cua lqu ier tratamiento médico. Se entenderá , sin embargo, q ue el em pleo d iario total de los compuestos y com posiciones de la presente invención se decid irá por el especial ista que atiende dentro del cam po del juicio médico sano. El nivel de dosis terapéuticamente efectivo específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores que incluyen el trastorno a ser tratado y la severidad del trastorno; la actividad del compuesto específico empleado; la composición específica empleada; la edad, peso corporal , salud general , sexo y dieta del paciente , el tiempo de adm inistración , ruta de administración , y velocidad de excreción del compuesto específico empleado; la duración del tratam iento; fármacos usados en combinación o coincidentes con el compuesto específico em pleado; y factores similares bien conocidos en las artes médicas.

Para propósitos de la presente invención, u na dosis terapéuticamente efectiva en general será una dosis diaria total administrada a u n hospedero en dosis únicas o divididas, o pueden ser en cantidades , por ejemplo, desde 0.001 hasta 1 000 mg/kg de peso corporal diario y más preferida desde 1 .0 hasta 30 mg/kg de peso corporal diario. Las composiciones de dosificación un itaria pueden contener tales cantidades de submúltiplos de la m isma para hacer la dosis diaria. En general , los reg ímenes de conformidad con la presente invención comprenden la adm inistración a un paciente en necesidad de tal tratamiento desde aproximadamente 1 0 mg hasta aproximadamente 2000 mg del com puesto(s) de esta invención por d ía en dosis única o m últi ples.

El término " intervalo de dosis" como se usa en la presente se refiere a un lím ite superior y uno inferior de una variación aceptable de la cantidad de agente especificado. Típicamente , una dosis del agente en cualquier cantidad dentro del intervalo especificado puede ser adm in istrada a pacientes que se someten a tratamiento.

El térm ino "alrededor" o "aproximadamente" usualmente sig nifica dentro de 20% , más preferiblemente dentro de 1 0%, y muy preferiblemente todavía dentro de 5% de un valor o intervalo dado. Alternativamente, especialmente en sistemas biológ icos, el término "aproximadamente" significa dentro de aproximadamente un log (es decir, un orden de magnitud) preferiblemente dentro de un factor de dos de un valor dado.

Como se usa en la presente, el término "alqui lo" se refiere a grupos alquilos que no contienen heteroátomos. De este modo la frase incluye grupos alquilo de cadena recta tales como metilo, etilo, propilo, butilo, pentiio, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo y similares. La frase también incluye isómeros de cadena ramificada de grupos alquilo de cadena recta, que incluyen pero no se limitan a, los siguientes los cuales se proporcionan por medio del ejemplo: -CH(CH3)2, -CH(C H 3)(CH2CH3), -CH(CH2CH3)2, -C(CH3)3 > -C(CH2CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)(CH2CH3), -CH2CH(CH2CH3)2, -CH2C(CH3)3, -CH2C(CH2CH3)3, -CH(CH3)-CH(CH3)(CH2CH3), -CH2CH2CH(CH3)2, -CH2CH2CH(CH3)(CH2CH3), -CH2CH2CH(CH2CH3)2, -CH2CH2C(CH3)3, -CH2CH2C(CH2CH3)3, -CH(CH3)CH2-CH(CH3)2, CH(CH3)CH(CH3)CH(CH3)2, -CH(CH2CH3)CH(CH3)CH(CH3)(CH2CH3), y otros. De este modo la frase "grupos alquilo" incluye grupos alquilo primarios, grupos alquilo secundarios, y grupos alquilo terciarios. Grupos alquilo preferidos incluyen grupos alquilo de cadena recta y ramificada que tienen 1 hasta 12 átomos de carbono o 1 hasta 6 átomos de carbono.

El término "alquenilo" se refiere a grupos de cadena recta, ramificada, o cíclicos desde 2 hasta aproximadamente 20 átomos de carbono tales como aquellos descritos con respecto a grupos alquilo como se define anteriormente, excepto que tienen uno o más enlaces dobles carbono-carbono. Ejemplos incluyen, pero no se limitan a vinilo, -CH=C(H)(CH3) , -CH=C(CH3)2, -C(CH3)=C(H)2, -C(CH3)=C(H)(CH3), -C(CH2CH3)=CH2, ciclohexenilo, ciclopentenilo, ciclohexadienilo, butadienilo, pentadienilo, y hexadienilo entre otros. Grupos alquenilo preferidos incluyen grupos de cadena recta y ramificada y grupos alquenilo cíclicos que tienen 2 hasta 1 2 átomos de carbono o 2 hasta 6 átomos de carbono.

El término "alquinilo" se refiere a grupos de cadena recta, ramificada, o cíclicos desde 2 hasta aproximadamente 20 átomos de carbono tales como aquellos descritos con respecto a grupos alquilo como se define anteriormente, excepto que tienen uno o más enlaces triples carbono-carbono. Ejemplos incluyen, pero no se limitan a -C=C(H), -C=C(CH3), -C=C(CH2CH3), -C(H2)C=C(H), -C(H)2C=C(CH3), y -C(H) 2C=C(C H2CH 3) entre otros. Grupos alquinilo preferidos incluyen grupos alquinilo de cadena recta y ramificada que tienen 2 hasta 12 átomos de carbono o 2 hasta 6 átomos de carbono.

Grupos alquilo, alquenilo, y alquinilo pueden ser sustituidos. "Alquilo sustituido" se refiere a un grupo alquilo como se define anteriormente en el cual uno o más enlaces a carbono(s) o hidrógeno(s) son reemplazados por un enlace a átomos no de hidrógeno y no de carbono tales como, pero no limitados a, un átomos de halógeno tal como F, Cl, Br, y I ; un átomos de oxigeno en grupos tales como grupos hidroxilo, grupos alcoxi , grupos ariloxi, y grupos éster; un átomos de azufre en grupos tales como grupos tiol, grupos de sulfuro de arilo y alquilo, grupos sulfona, grupos sulfonilo y grupos sulfóxido; un átomos de nitrógeno en grupos tales como aminas, amidas, alquilaminas, dialquilaminas, arilaminas, alquilarilaminas, diarilaminas, N-óxidos, imidas, y enaminas; un átomos de silicio en grupos tales como en grupos trialquilsililo, grupos dialquilarilsililo, grupos alquildiarilsililo, y grupos triarilsililo; y otros heteroátomos en varios otros grupos. Grupos alquilo sustitu idos también incl uyen grupos en los cuales uno o más enlaces a un átomos de carbono(s) o hidrógeno(s) son reem plazados por un en lace de orden superior (por ejemplo, un doble o triple enlace) a un heteroátomo tal como óxido en grupos oxo, carboni lo , carboxilo y éster; nitrógeno en grupos tales como ¡mi nas, oximas, h idrazonas, y n itrilos. Grupos alquilo sustituidos incluyen además grupos alqui lo en los cuales uno o más enlaces a un átomo(s) de carbono(s) o hidrógeno(s) es reemplazado por un enlace a un grupo arilo, heteroarilo, heterociclilo, o cicloalq ui lo. Grupos alquilo preferidos sustituidos incluyen , entre otros, grupos alqui lo en los cuales uno o más enlaces a un átomo de carbono o hidrógeno es/son reemplazados por uno o más en laces a un grupo fluoro, cloro , o bromo. Otro grupo alquilo sustituido preferido es el grupo trifluorometilo y otros grupos alqu ilo que contienen el grupo trifluorometi lo. Otros grupos alquilo sustituidos preferidos incluyen aquel los en los cuales uno o más enlaces a un átomo de carbono o hidrógeno es reemplazado por un enlace a un átomo de oxígeno de manera que el grupo alquilo sustituido contiene u n grupo hidroxilo, alcoxi o ariloxi. Otros grupos alquilo sustituidos preferidos incl uyen grupos alquilo que tienen un ami na, o un grupo alq uilamina, dialquilam ina , arilamina , (alquil)(aril)am ina , diarilam ina , heterocicli lamina , diheterociclilam ina , (alqui l)(heterocicli!)am¡na, o (aril)(heterociclil)am ina sustituido o no sustituido. Todavía otros grupos alquilo sustituidos preferidos incluyen aquellos en los cuales uno o más enlaces a un átomo de carbono(s) o hidrógeno(s) es reemplazado por un enlace a un grupo arilo, heteroarilo, heterociclilo, o cicloalquilo. Ejemplos de alquilo sustituido son: -(CH2)3N H2, -(CH2)3NH(CH3), -(CH2)3NH(CH3)2, -CH2C(=C H2)CH2NH2, .CH2C(=0)CH2NH2, CH2S(=0)2CH3, -CH2OCH2NH2. -C02H. Ejemplos de sustituyentes de alquilo sustituidos son: -CH3, -C2H5 , -CH2OH, -OH, -OCH3, -OC2H5, -OCF3, -OC(=0)CH3, -OC( = 0)NH2, -OC( = 0)N(CH3)2, -CN , -N02, -C(=0)CH3, -CO2 H , -C02CH3, -CONH2, -NH2,-N(CH3)2, -N HS02CH3, -N H COC H 3, -NHC(=0)OCH3 l -NHSO-2CH3, -S02CH3, -S02NH2 l halo.

El término "alquenilo sustituido" tiene el mismo significado con respecto a grupos alquenilo que grupos alquilo sustituidos tienen con respecto a grupos alquilo no sustituidos. Un grupo alquenilo sustituido incluye grupos alquenilo en los cuales un átomo no de carbono o no de hidrógeno se une a un carbono doble unido a otro carbono y aquellos en los cuales uno de los átomos no de carbono o no de hidrógeno está unido a un carbono no involucrado en un enlace doble a otro carbono.

El término "alquinilo sustituido" tiene el mismo significado con respecto a grupos alquinilo que grupos alquilo sustituidos tienen con respecto a grupos alquilo no sustituidos. Un grupo alquinilo sustituido incluye grupos alquinilo en los cuales un átomo no de carbono o no de hidrógeno está unido a un carbono triple unido a otro carbono y aquellos en los cuales un átomo no de carbono o no de hidrógeno está unido a un carbono no involucrado en un enlace triple a otro carbono.

El término "alcoxi" se refiere a RO- en donde R es alquilo. Ejemplos representativos de grupos alcoxi incluyen metoxi, etoxi, t- butoxi, trifluorometoxi , y similares.

El térm ino "halógeno" o "halo" se refiere a grupos cloro, bromo, fluoro, y yodo. El término "haloalqui lo" se refiere a un radical alquilo sustituido con uno o más átomos de halógeno. El térm ino "haloalcoxi" se refiere a un radical alcoxi sustituido con uno o más átomos de halógeno.

El término "alcoxialquil" se refiere al grupo-alqi -0-alq2 donde a Iq 1 es alqu ilo o alquenilo, y alq2 es alq u ilo o alquenilo. El térm ino "ariloxialquilo" se refiere al grupo -alquil O-arilo. El término "aralcoxialquilo" se refiere al grupo -alquilenil-O-aralqu ilo.

El término "carbonilo" se refiere al grupo divalente -C(O)-. El término "cicloalquilo" se refiere a un sustituyente alquilo mono- o policíclico, heterocíclico o carbocíclico. Grupos cicloalquilo representativos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, y ciclooctilo y tales anillos sustituidos con grupos alquilo de cadena recta y ram ificada como se define anteriormente . Sustituyentes cicloalquilo típicos tienen desde 3 hasta 8 átomos en el armazón (es decir, anillo) en los cuales cada átomo del armazón es ya sea un carbono o un heteroátomo. El término "heterocicloalquilo" se refiere en la presente a sustituyentes cicloalquilo que tienen desde 1 hasta 5, y más típicamente desde 1 hasta 4 heteroátomos en la estructura del anillo. Heteroátomos adecuados em pleados en com puestos de la presente invención son nitrógeno, oxígeno, y azufre. Porciones heterocicloalq ui lo representativas incluyen , por ejemplo, morfolino, piperazinilo, piperadini lo, y sim ilares. Grupos carbocicloalquilo son grupos cicloalquilo en los cuales todos los átomos del anillo son carbono. Cuando se usa en conjunto con sustituyentes cicloalquilo, el término "policíclico" se refiere en la presente a estructuras alquilo cíclicas fusionadas y no fusionadas.

El término "arilo" se refiere a grupos aromáticos monocíclicos y policíclicos opcionalmente sustituidos que tienen desde 3 hasta 14 átomos de carbono o hetero en el armazón, e incluyen tanto grupos arilo carbocíclicos como grupos arilo heterocíclicos. El término se refiere a, pero no se limita a, grupos tales como fenilo, bifenilo, antracenilo, naftenilo por medio del ejemplo. Grupos arilo carbocíclicos son grupos arilo en los cuales todos los átomos del anillo en el anillo aromático son carbono. El término "heteroarilo" se refiere en la presente a grupos arilo que tienen desde 1 hasta 4 heteroátomos como átomos en el anillo en un anillo aromático con el resto de los átomos siendo átomo de carbono.

El término "arilo no sustituido" incluye grupos que contienen anillos condensados tales como naftaleno. No incluye grupos arilo que tienen otros grupos tales como grupos alquilo o halo unidos a uno de los elementos del anillo, como grupos arilo tales como tolilo son considerados en la presente por ser grupos arilo sustituidos como se describe abajo. Un grupo arilo no sustituido preferido es fenilo. Grupos arilo no sustituido pueden ser unidos a uno o más átomo(s) de carbono, átomo(s) de oxígeno, átomo(s) de nitrógeno, y/o átomo(s) de azufre en el compuesto precursor, sin embargo.

El término "grupo arilo sustituido" tiene el mismo significado con respecto a grupos arilo no sustituido que grupos alquilo sustituido tienen con respecto a grupos alquilo no sustituidos. Sin embargo, un grupo arilo sustituido también incluye grupos arilo en los cuales uno de los carbonos aromáticos está unido a uno de los átomos no de carbono o no de hidrógeno descrito anteriormente y también incluye grupos arilo en los cuales uno o más carbonos aromáticos del grupo arilo está unido a un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo sustituido o no sustituido, como se define en la presente. Esto incluye arreglos de enlace en los cuales dos átomos de carbono de un grupo arilo están unidos a dos átomos de un grupo alquilo, alquenilo, o alquinilo para definir un sistema de anillo fusionado (por ejemplo, dihidronaftilo o tetrahidronaftilo). De este modo, la frase "arilo sustituido" incluye, pero no se limita a tolilo e hidroxifenilo entre otros.

El término "heteroarilo sustituido" como se usa en la presente se refiere a un grupo heteroarilo como se define en la presente por reemplazo independiente de uno, dos, o tres de los átomos de hidrógeno de este con Cl, Br, F, I, -OH, -CN, alquilo C1-C3, alcoxi Ci-Ce, alcoxi C1-C6 sustituido con arilo, haloalquilo, tioalcoxi, amino, alquilamino, dialquilamino, mercapto, nitro, carboxaldehído, carboxi, alcoxicarbonilo y carboxamida. Además, cualquier sustituyente puede ser un grupo arilo, heteroarilo, o heterocicloalquilo.

El término "heterociclo sustituido", "grupo heterocíclico", "heterociclo" o "heterociclilo", como se usa en la presente se refiere a cualquier anillo de 3- o 4-elementos que contiene un heteroátomo seleccionado de nitrógeno, oxígeno, y azufre o un anillo de 5- o 6- elementos que contiene desde uno hasta tres heteroátomos seleccionados del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno, o azufre; en donde el anillo de 5 elementos tiene 0-2 enlaces dobles y el anillo de 6 elementos tiene 0-3 enlaces dobles; en donde el átomo de nitrógeno y azufre puede ser opcionalmente oxidado; en donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden ser opcionalmente cuaternizados; y que incluyen cualquier grupo bicíclico en el cual cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriores es fusionado a un anillo benceno u otro anillo heterocíclico de 5- o 6- elementos independientemente definido anteriormente. Ejemplos de grupos heterociclilo incluyen, pero no se limitan a: anillos de 3- u 8-elementos no saturados que contienen 1 hasta 4 átomos de nitrógeno tales como, pero no limitado a pirrolilo, dihidropiridilo, pirimidilo, pirazinilo, tetrazolilo, (por ejemplo, 1H-tetrazolilo, 2H-tetrazolilo); grupos heterocíclicos no saturados condensados que contienen 1 hasta 4 átomos de nitrógeno tales como, pero no limitados a, isoindolilo, indolinilo, indolizinilo, quinolilo, indazolilo; anillos de 3- a 8- elementos insaturados que contienen 1 hasta 2 átomos de oxígeno y 1 hasta 3 átomos de nitrógeno tales como, pero no limitados a, oxadiazolilo (por ejemplo, 1 ,2,4-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1 ,2,5-oxadiazolilo); anillos de 3- a 8-elementos saturados que contienen 1 hasta 2 átomos de oxígeno y 1 hasta 3 átomos de nitrógeno tales como, pero no limitados a, morfolinilo; grupos heterocíclico condensados no saturados que contienen 1 hasta 2 átomos de oxígeno y 1 hasta 3 átomos de nitrógeno, por ejemplo, benzoxadiazolilo, benzoxazinilo (por ejemplo, 2H-1 ,4-benzoxazinilo); anillos de 3- a 8- elementos insaturados que contienen 1 hasta 3 átomos de azufre y 1 hasta 3 átomos de nitrógeno tales como, pero no limitados a, tiadiazolilo (por ejemplo, 1 ,2,3-tiadiazolilo, 1 ,2,4-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, 1 ,2, -tiadiazolilo); anillos de 3- a 8-elementos saturados que contienen 1 hasta 2 átomos de azufre y 1 hasta 3 átomos de nitrógeno tales como, pero no limitados a, tiazolodinilo; anillos de 3- a 8-elementos no saturados y condensados que contienen 1 hasta 2 átomos de azufre tales como, pero no limitados a, dihidroditienilo, dihidroditionilo, tetrahidrotiofeno, tetra-hidrotiopirano; anillos heterocíclicos condensados no saturados que contienen 1 hasta 2 átomos de azufre y 1 hasta 3 átomos de nitrógeno tales como, pero no limitados a, benzotiadiazolilo, benzotiazinilo (por ejemplo, 2H-1.4-benzotiazinilo), dihidrobenzotiazinilo {por ejemplo, 2H-3.4-dihidrobenzotiazinilo), anillos de 3- a 8- elementos insaturados que contienen átomos de oxígeno tales como, pero no limitados a, furilo; anillos heterocíclicos condensados no saturados que contienen 1 hasta 2 átomos de oxígeno tales como benzodioxoilo (por ejemplo, 1,3-benzodioxoilo); anillos de 3- a 8- elementos insaturados que contienen un átomo de oxígeno y 1 hasta 2 átomos de azufre tales como, pero no limitados a, dihidrooxatienilo; anillos de 3- a 8-elementos saturados que contienen 1 hasta 2 átomos de oxígeno y 1 hasta 2 átomos de azufre tales como 1 ,4-oxatiana; anillos condensados no saturados que contienen 1 hasta 2 átomos de azufre tales como benzoditienilo; y anillos heterocíclicos condensados no saturados que contienen un átomo de oxígeno y 1 hasta 2 átomos de oxígeno tales como benzoxatienilo. Heterociclos preferidos incluyen, por ejemplo: diazapinilo, pirrilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, imidazoilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piridilo, piperidinilo, pirazinilo, piperazinilo, N-metil piperazinilo, azetidinilo, N-metilazetidinilo, pirimidinilo, piridazinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, indolilo, quinolinilo, ¡soquinolinilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, furilo, tienilo, triazolilo, y benzotienilo. Grupos heterociclilo también incluyen aquellos descritos anteriormente en los cuales uno o más átomos de S en el anillo están unidos dobles a uno o dos átomos de oxígeno (sulfóxidos y sulfonas). Por ejemplo, grupos heterociclilo incluyen tetrahidrotiofeno, óxido de tetrahidrotiofeno, y 1 , 1 -dióxido de tetrahidrotiofeno. Grupos heterociclilo preferidos contienen 5 o 6 elementos en el anillo. Grupos heterociclilo más preferidos incluyen piperazina, 1 ,2, 3-triazol, 1 ,2,4-triazol, tetrazol, tiomorfolina, homopiperazina, oxazolidin-2-ona, pirrolidin-2-ona, quinuclidina, y tetrahidrofurano.

Porciones heterocíclicas pueden ser no sustituidas o monosustituidas o disustituidas con varios sustituyentes seleccionados independientemente de hidroxi, halo, oxo (C=0), alquilimino (RN=, en donde R es un grupo alquilo o alcoxi), amino, alquilamino, dialquilamino, acilaminoalquilo, alcoxi, tioalcoxi, polialcoxi, alquilo, cicloalquilo o haloalquilo. "Heterociclilo no sustituido" incluye anillos heterocíclicos condensados tales como bencimidazolilo, no incluyen grupos heterociclilo que tienen otros grupos tales como grupos alquilo o halo unidos a uno de los elementos del anillo como compuestos tales como 2-metilbencimidazolilo son grupos heterociclilo sustituidos.

Los grupos heterocíclicos pueden estar unidos en varias posiciones como será aparente para aquellos que tienen habilidad en las artes de química orgánica y medicinal en conjunto con la presente descripción. Ejemplos no limitantes de grupos heterocíclicos también incluyen los siguientes: donde R es H o un sustituyente heterocíclico, como se describe en la presente.

Heterocíclicos representativos incluyen, por ejemplo, imidazolilo, piridilo, piperazinilo, azetidinilo, tiazolilo, furanilo, triazolilo bencimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, ftalazinilo, indolilo, naftpiridinilo, indazolilo, y quinolizinilo.

El término "opcionalmente sustituido" o "sustituido" se refiere al reemplazo de hidrógeno con uno o más radicales monovalentes o divalentes. Grupos de sustitución adecuados incluyen, por ejemplo, hidroxilo, nitro, amino, imino, ciano, halo, tio, sulfonilo, tioamido, amidino, imidino, oxo, oxamidino, metoxamidino, imidino, guanidino, sulfonamido, carboxilo, formilo, alquilo, alquilo sustituido, haloalquilo, alquilamino, haloalquilamino, alcoxi, haloalcoxi, alcoxi-alquilo, alquilcarbonilo, aminocarbonilo, arilcarbonilo, aralquilcarbonilo, heteroarilcarbonilo, heteroaralquil-carbonilo, alquiltio, aminoalquilo, cianoalquilo, arilo, bencilo, piridilo, pirazolilo, pirrol, tiofeno, imidazolilo, y similares.

El grupo de sustitución puede el mismo ser sustituido. El grupo sustituido en el grupo de sustitución puede ser carboxilo, halo, nitro, amino, ciano, hidroxilo, alquilo, alcoxi, aminocarbonilo, -SR, tioamido, -SO3H, -SO2R, o cicloalquilo, donde R es típicamente hidrógeno, hidroxilo o alquilo.

Cuando el sustituyente sustituido incluye un grupo de cadena recta, la sustitución puede ocurrir ya sea dentro de la cadena (por ejemplo, 2-hidroxipropilo, 2-aminobutilo, y similares) o en el término de la cadena (por ejemplo, 2-hidroxietilo, 3-cianopropilo, y similares).

Sustituyentes sustituidos pueden ser arreglos de cadena recta, ramificada o cíclicos de heteroátomos de carbono covalentemente unidos.

Grupos aminocarbonilo sustituidos representativos incluyen, por ejemplo, aquellos mostrados abajo. Estos pueden ser además sustituidos por grupos heterociclilo y grupos heteroarilo como será aparente para aquellos que tienen habilidad en las artes de química orgánica y medicinal en conjunto con la descripción de la presente. Grupos aminocarbonilo preferidos incluyen: N-(2-cianoetil)carboxamida, N-(3-metoxipropil)carboxamida, N-ciclopropi lea rboxa mida, N-(2-hidroxi-isopropil)carboxamida, 2-carbonilamino-3-hidroxipropanoato de metilo, N-(2-hidroxipropil)carboxamida, N-(2-hidroxi-isopropil)ca rboxa mida, N-[2-hidroxi-1 -(hidroximetil)etil]carboxamida, N-(2-carbonilaminoetil)acetamida, N-(2-(2-piridil)etil)carboxamida, N-(2-piridilmetil)carboxamida, N-(oxolan-2-ilmetil)carboxamida, N-(4-hidroxipirrolidin-2-il)carboxamida, N-[2-(2-hidroxietoxi)etil]carboxamida, N-(4-hidroxiciclohexil)carboxam¡da, N-[2-(2-oxo-4-imidazolinil)etil]-carboxamida, N-(carbonilaminometil)acetamida, N-(3-pirrolidinilpropil)carboxamida, N-[1 -(carbonilaminometi pirrolidin-S-iljacetamida, N-(2-morfolin-4-iletil)carboxamida, N-[3-(2-oxopirrolidinil)propil]carboxamida, 4-metil-2-oxopiperazincarbaldehído, N-(2-hidroxi-3-pirrolidinilpropil)carboxamida, N-(2-hidroxi-3-morfolin-4-ilpropil)carboxamida, N-{2-[(5-ciano-2-piridil)amino]etil}carboxamida, 3-(dimetilamino)pirrolidincarbaldehído, N-[(5-metilpirazin-2-il)metil]carboxamida, 2,2,2-trifluoro-N-(1 -formilpirrolidin-3-il)acetamida, Grupos alcoxicarbonilo sustituidos representativos incluyen, por ejemplo, aquellos mostrados abajo. Estos grupos alcoxicarbonilo pueden ser además sustituidos como será aparente para aquellos que tienen habilidad en las artes de química orgánica y medicinal en conjunto con la descripción de la presente.

Grupos alcoxicarbonilo sustituidos representativos incluyen, por ejemplo, aquellos mostrados abajo. Estos grupos alcoxicarbonilo pueden además ser sustituidos como será aparente para aquellos que tienen habilidad en las artes de química orgánica y medicinal en conjunto con la descripción de la presente.

El término "amino" se refiere en la presente al grupo El término "alquilamino" se refiere en la presente al grupo -NRR' en donde R es alquilo y R' es hidrógeno o alquilo. El término "arilamino" se refiere en la presente al grupo -NRR' en donde R es arilo y R' es hidrógeno, alquilo o arilo. El término "arilalquilamino" se refiere en la presente al grupo -NRR' en donde R es aralquilo y R' es hidrógeno, alquilo, arilo o aralquilo.

El término "alcoxialquilamino" se refiere en la presente al grupo -NR-(alcoxialquilo), en donde R es típicamente hidrógeno, aralquilo o alquilo.

El término "aminocarbonilo" se refiere en la presente al grupo -C(0)-NH2. "Aminocarbonilo sustituido" se refiere en la presente al grupo -C(0)-N RR' en donde R es alquilo y R' es hidrógeno o alquilo. El término "arilaminocarbonilo" se refiere en la presente al grupo -C(O)-NRR' en donde R es arilo y R' es hidrógeno, alquilo o arilo. "Aralquilaminocarbonilo" se refiere en la presente al grupo -C(0)-NRR' en donde R es aralquilo y R' es hidrógeno, alquilo, arilo o aralquilo.

El término "amidino" se refiere a las porciones R-C(=N)-NR'-(el radical estando en el nitrógeno "N1") y R(NR')C=N- (el radical estando en el nitrógeno "N2"), en donde R y R' pueden ser hidrógeno, alquilo, arilo o aralquilo.

Como se usa en la presente, el término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere al ácido no tóxico o sales de metal alcalino térreo de los compuestos de piridina de la invención. Estas sales se pueden preparar in situ durante el aislamiento y purificación final de los compuestos de pirimidina, o separadamente haciendo reaccionar las funciones básicas o ácidas con un ácido o base orgánico o inorgánico adecuado, respectivamente. Las sales respectivas incluyen, pero no se limitan a, los siguientes: acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencensulfonato, bisulfato, butirato, canforato, canforsulfonato, digluconato, ciclopentanpropionato, dodecilsulfato, etansulfonato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemi-sulfato, heptanoato, hexanoato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2-hidroxietansulfonato, lactato, maleato, metansulfonato, nicotinato, 2-naft-alensulfonato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilproionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluensulfonato, y undecanoato. También, los grupos de nitrógeno que contiene nitrógeno se pueden cuaternizar con estos agentes como haluros de alquilo, tal como cloruro, bromuro y yoduros de metilo, etilo, propilo, y butilo; sulfates de dialquilo como sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo, y diamilo, haluros de cadena larga tal como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, mlristilo, y estearilo, haluros de alquilo como bromuros de bencilo y fenetilo, y otros. Productos dispersables o solubles en agua o aceite son de este modo obtenidos.

Ejemplos de ácidos que pueden ser empleados para formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables incluyen estos ácidos inorgánicos como ácido clorhídrico, ácido borhídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico y ácido fosfónico y estos ácidos orgánicos como ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido metansulfónico, ácido succínico, ácido málico, ácido metansulfónico, ácido bencensulfónico y ácido p-toluensulfónico, ácido cítrico y aminoácidos ácidos tal como ácido aspártico y ácido glutámico.

Se pueden preparar sales de adición básica in situ durante el aislamiento y purificación final de los compuestos de pirimidina, o separadamente haciendo reaccionar porciones de ácido carboxílico con una base adecuada tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión de metal farmacéuticamente aceptable o con amoníaco, o una amina primaria, secundaria o terciaria orgánica. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, cationes a base de metales álcali o alcalino térreo, tal como sales de sodio, litio, potasio, calcio, magnesio, aluminio y similares, así como también cationes de amonio, amonio cuaternario y amina no tóxicos, que incluyen pero no se limitan a amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, etilamina y similares. Otras aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de base incluyen dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, piridina, picolina, trietanolamina y similares, y aminoácidos básicos tales como arginina, lisina y ornitina.

I V. Materiales y Métodos Experimentales Ratones: Rag2 '"; 112 rg _ criados fueron suministrados por los Doctores T. Nomura y M. Ito del I nstituto Central para Animales Experimentales (Kawasaki, Japón). Los ratones entonces se criaron en nuestras instalaciones para animal bajo condiciones estériles. Ratones atímicos Cr1 :CD-1 -Fox/? inu nu (referidos como ratones sin pelo) se adquirieron de Charles River Italy y se mantuvieron bajo condiciones estériles. Los experimentos se autorizaron por la junta de revisión institucional de la Universidad de Bologna y se hicieron de acuerdo a la guía Italiana y Europea.

Líneas celulares: líneas celulares de cáncer de mama MDA-MB-453 y BT-474 se obtuvieron originalmente del Dr. Serenella M . Pupa (Instituto Nazionale dei Tumori, Milán, Italy). Las líneas celulares se autentificaron por huellas dactilares de DNA el 1 1 de Noviembre de 2010 (realizado por DSMZ, Braunschweig, Alemania). Las células se cultivaron rutinariamente en el medio obtenido del Instituto Memorial Roswell Park (RPMI) complementado con suero de bovino fetal al 10% y se mantuvieron a 37°C en una atmósfera de CO2 al 5% humidificada. Todos los constituyentes del medio se adquirieron de Invitrogen, Milán, Italia. Para visualizar las células/lesiones metastásicas, las líneas celulares de cáncer de mama se transfectaron con un plásmido que expresa la Proteína Fluorescente Verde Mejorada (pEGFP-N 1 , Clontech, Mountain View, CA) usando Lipofectamina 2000 (Invitrogen). Los transfectantes estables se seleccionaron usando G418 (I nvitrogen). La expresión EGFP se monitoreó por microscopio fluorescente y se cuantificó por análisis citofluorométrico.

Inducción de metástasis: Se usaron nueve ratones Rag '"; I 1 2rg '" hembra de 20 semanas de edad a través de este trabajo. Se indujeron tumores locales con células de tumor humano viables 107 inyectadas ya sea subcutáneamente en la pata trasera derecha o en la almohadilla de grasa de la cuarta glándula mamaria izquierda (abdominal) en 0.2 mi de PBS. Los diámetros del tumor se midieron periódicamente con calibradores digitales y los volúmenes de tumor calculados como 7i/2x[V(axb)]3/6, en donde a=diámetro de tumor máximo y 6=diámetro de tumor principal perpendicular a a. Para administraciones intravenosas (i.v), se inyectaron células 2x1 06 en 0.4 mi de PBS en una vena de la cola. Se trataron ratones sin pelo (5-6 semanas de edad) i.v. con antisuero GM1 anti-asialo (Wako, Dusseldorf, Germany), 0.4 mi de una dilución 1 :30 en PBS, para actividad NK agotada, 24 h antes de la inyección de células de tumor humanas. Se realizaron experimentos piloto para valorar cada línea celular, tiempo en el cual las metástasis experimentales pueden ser detectadas.

Detección y cuantificación de metástasis: Se sacrificaron ratones que portan el tumor a varios tiempos (véase Resultados), dependiendo del crecimiento de tumor y metástasis, y se sometieron a una necropsia precisa. Los pulmones se tiñeron con tinta de India negra para delinear mejor las metástasis y se fijaron en solución de Fekete. Se cuantificaron las metástasis de pulmón e hígado usando un microscopio de bisección. Cuando las células que expresan EGFP se inyectaron, el ratón completo y los órganos bisecados se examinaron cuidadosamente usando un sistema de imagen Lightools (Lightools Research, Encinitas, CA) para detectar depósitos metastásicos fluorescentes. La cuantificación de carga metastásica en el cerebro y médula ósea se realizó por inmunofluorescencia seguido por análisis citofluorimétrico y por PCR de tiempo real. El cerebro se picó con tijeras y se pasó a través de un filtro celular de 70 µ?? (Becton Dickinson, Bedford, MA, EE.UU.) para obtener una suspensión celular homogénea. La médula ósea se lavó a chorro de ambos fémures en PBS y se filtró a través de un filtro de 70 µ??. Se usó un anticuerpo monoclonal de ratón contra HER-2 humano (clon Neu 24.7, Becton Dickinson, San José, CA, EE.UU.) etiquetado con ficoeritrina para cuantificar células humanas por análisis citofluorométrico. Se realizó PCR de Tiempo-Real en DNA genómico extraído con 10 mM de amortiguador Tris-HCI a pH 8.3 que contiene 50 mM de KCI, 2.5 mM de MgCI2, 0.01% de gelatina, 0.45% de igepal, 0.45% de tween 20 y 120 pg/ml de proteinasa K (todos los reactivos de Sigma, Milán, Italia) por una incubación durante la noche a 56°C seguido por 30 min de incubación a 95°C para inactivar la proteinasa K. Una secuencia de la región a-satélite del cromosoma humano 17 se amplificó. Las secuencias de sonda y cebadoras se derivaron de Becker et al. (British Journal of Cáncer 2002, 87:1328-1335) con la única alteración de que la sonda llevó el tinte apagador no fluorescente TAMRA al extremo-3'. 100 ng de DNA por muestra se amplificaron usando 250 nM de cebadores y 100 nM de sonda en un volumen final de 25 µ? de Mezcla Maestra de PCR TaqMan Universal (Applied Biosystems, Milán, Italia). Después de una etapa de desnaturalización inicial a 95°C por 10 min, 45 ciclos de amplificación (95°C 30 seg más 60°C 1 min) se realizaron en un Sistema de Detección 5700 (Applied Biosystems). Para cuantificar células humanas, se construyó una curva estándar agregando cantidades a escala de células humanas MDA-MB-453 a células del cerebro completo de ratón. Los valores Ct (ciclo de umbral) obtenidos a partir de las muestras experimentales se interpolaron en la corrida de curva estándar en cada PCR.

Terapia de metástasis con el Compuesto A: Se formuló el Compuesto A en 1-metil-2-pirrolidona (NMP)/poli-etilen glicol 300 (PEG300) (Fluka) (10/90, v/v). Se prepararon soluciones (7.5 mg/ml) recientes cada día de tratamiento y se cubrieron de la luz cuidadosamente. Grupos de 6-9 hembras Rag2-/~;ll2rg- ~ se estimularon con células 453-EGFP i.v. Una dosis de 50 mg/kg de Compuesto A se dio diariamente per os partiendo del día después de la inyección celular, el ratón de control recibió vehículo solo. Los ratones recibieron cuatro administraciones de fármaco en la primera semana, y cinco administraciones de fármaco en las siguientes semanas, para una cantidad total de 37 tratamientos. Los ratones se sacrificaron 1-4 días después del último tratamiento.

V. Resultados Experimentales Crecimiento de tumor y d isem inación metastásica en ratones Rag2_/~; l l2rg-/~: Muchas líneas de células de cáncer de mama humano interesantes, en particular aquellas que expresan HER-2 , crecen 5 pobremente en ratones sin pelo, y usualmente no hacen metástasis, aún si la actividad de N K es tem poralmente bloqueada por tratamiento del hospedero con anticuerpos agotados de NK. Células H ER-2+ MDA-M B- 453 y BT-474 no fueron tumorigénicas en ratones sin pelo. Las mismas células dieron origen a tumores locales progresivos en ratones Rag2-/~ i o ; l l2rg_/~ con tiempos de latencia muy cortos, ambos después de la adm in istración ortotópica (i ntramamariamente) y subcutánea .

La diseminación metastásica en ratones Rag2~/_; I l2rg~/- fue extensa, y alcanzó todos los sitios com únmente afectados en pacientes humanos, incluyendo pulmones, h ígado , huesos y cerebro. De manera 15 interesante, la diseminación metastásica de tumores locales fue solamente marginalmente diferente entre tumores que crecen ortotópicamente o subcutáneamente, am bos para los que se relacionan a la lí nea de célu las MDA-M B-453 más maligna y la menos maligna BT- 474. La administración intravenosa de células mejoró significantemente 20 la dispersión metastásica de cél ulas BT-474 , con la proporción de ratones afectados logrando 1 00% .

Se observaron d iferentes cargas metastásicas en diferentes órganos, y el uso de células etiquetadas con EGFP fue instrumental para permitir una detección precisa de depósitos metastásicos en hueso, 25 hígado y cerebro. Sin em bargo, la evaluación de disem inación metastásica en ratones Rag2~/_; H2rg~ _ no fue limitada a la detección EGFP, por ejemplo se usó qPCR con cebadores específicos humanos para cuantificar la carga metastásica en el cerebro, y citometría de flujo para detectar células de tumor diseminado HER-2 positivas en la médula ósea (Figuras 2A-F).

Metástasis cerebral: El cerebro es el sitio común de diseminación metastásica, pero el crecimiento del tumor en ratones inmunodeficientes falla para reproducir esta propiedad fatídica de tumores humanos, a menos que se usen líneas de células únicas, variantes seleccionadas y/o rutas de inyección especiales. Por el contrario, metástasis de cerebro espontánea de tumores locales fueron comunes en ratones Rag2~ _; I l2rg-/", y su frecuencia alcanzó 100% después de la inyección intravenosa. En resumen, el ratón Rag2~/_; N2rg~/_ mouse es un modelo exquisito para el estudio de diseminación cerebral.

Terapia de cáncer de mama humano diseminado: La diseminación metastásica de cáncer de mama humano es un mayor reto terapéutico y un objetivo en movimiento, debido a que las terapias actuales han modificado el riesgo de recaída metastásica den diferentes órganos, por ejemplo los anticuerpos monoclonales parecen mejorar el riesgo de metástasis cerebral (7). Por lo tanto un modelo de ratón de diseminación metastásica de órganos múltiples es una herramienta importante para investigar nuevos fármacos antimetastásicos. El Compuesto A, un inhibidor de PI3K selectivo con excelente penetración de la barrera hematoencefálica (8), afecta el crecimiento metastásico en diferentes órganos objetivo de células 453-EGFP. El Compuesto A produce una reducción extendida y altamente significante de la carga metastásica. En sitios múlti ples una proporción considerable de los ratones estuvieron libres de metástasis. (Figura 1 A) . El número de metástasis ósea se disminuyó por 67% (Figura 2C) . Aún en los órganos más fuertemente colonizados, tales como el cerebro y pulmones , el Compuesto A in hibe fuertemente el crecimiento de 453-EG FP (Figura 1 B-C) . Para eval uar mejor la actividad terapéutica del Compuesto A contra metástasis cerebral, célu las hu manas se cuantificaron usando citometría de flujo de qPCR o H ER-2 específica h umana. En los cerebros de ratones tratados con el Compuesto A, se encontró >90% de inhibición en el nú mero de células humanas con ambas tecnologías (Figuras 2A-B) .

La eficacia del Compuesto A para controlar el crecimiento metastásico en órganos múlti ples, que incluye el cerebro, pronostica el impacto clínico en situaciones clínicas análogas .

VI. Referencias 1 . Nguyen DX, Bos PD, Massag ue J . Metástasis: from dissemination to organ-specific colonization . Nat Rev Cáncer. 2009;9(4): 274-84. 2. Langley RR, Fidler IJ . The seed and soil hypothesis revisited-The role of tumor-stroma interactions in metástasis to different organs. Int J Cáncer. 201 1 ; 128( 1 1 ) :2527-35. 3. Jonkers J , Derksen PW. Modeling metastatic breast cáncer in mice. J Mammary Gland Biol Neoplasia.2007;12(2-3): 191 -203. 4. Weigelt B, Peterse JL, van't Veer LJ. Breast cáncer metástasis: markers and models. Nat Rev Cáncer.2005;5(8):591-602. 5. Weilbaecher KN, Guise TA, McCauley LK. Cáncer to bone: a fatal attraction. Nat Rev Cáncer.2011 ; 1 (6):411-25. 6. Lee YT. Breast carcinoma: pattern of metástasis at autopsy. J Surg Oncol. 1983;23(3): 175-80. 7. Steeg PS, Camphausen KA, Smith QR. Brain metastases as preventive and therapeutic targets. Nat Rev Cáncer. 2011 ; 11 (5):352-63. 8. Sánchez CG, Ma CX, Crowder RJ, et al. Preclinical modeling of combined phosphatidylinositol-3-kinase inhibition with endocrine therapy for estrogen receptor-positive breast cáncer. Breast Cáncer Res.2011; 13(2):R21.

Claims (9)

REIVINDICACIONES

1. Un método para el tratamiento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende administrar un compuesto de conformidad con la fórmula (I), o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado: en donde W es CRW o N, en donde Rw se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1) hidrógeno, (2) ciano, (3) halógeno, (4) metilo, 5) trifluorometilo, (6) sulfonamida; Ri se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1 ) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) alquilo sustituido y no sustituido, (6) alquenilo sustituido y no sustituido, (7) alquinilo sustituido y no sustituido, (8) arilo sustituido y no sustituido, (9) heteroarilo sustituido y no sustituido, (10) heterociclilo sustituido y no sustituido, (11) cicloalquilo sustituido y no sustituido, (12) -CORia, (13) -COaRla, (14) -CONRiaRib, (15) -NRiaRib, (16) -NR1aCORib, (17) -NRiaS02R1b, (18) -OCORia, (19) -ORia, (20) -SRia, (21) -SORia, (23) -S02NRiaRib, en donde Ria, y Rib son independientemente seleccionados partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, (b) alquilo sustituido o no sustituido, (c) arilo sustituido y no sustituido, (d) heteroarilo sustituido y no sustituido, (e) heterociclilo sustituido y no sustituido, y (f) cicloalquilo sustituido y no sustituido; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1 ) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) hidroxi, (6) amino, (7) alquilo sustituido y no sustituido, (8) -COR2a, y (9) - N R2aC O R2 b , en donde R2a , y ?b son independientemente seleccionados partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, y (b) alquilo sustituido o no sustituido; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de: (1 ) hidrógeno, (2) ciano, (3) nitro, (4) halógeno, (5) alquilo sustituido y no sustituido, (6) alquenilo sustituido y no sustituido, (7) alquinilo sustituido y no sustituido, (8) arilo sustituido y no sustituido, (9) heteroarilo sustituido y no sustituido, (1 0) heterociclilo sustituido y no sustituido, (1 1 ) cicloalquilo sustituido y no sustituido, (1 2) -COR3a, (14) -NR3aR3b (1 3) -NR3aCOR3b, (1 5) -NR3aS02R 3 b , (16) -OR3a, (17) -SR3a, (1 8) -SOR3a, (1 9) -S02R3a, en donde R3a, y R3 son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de: (a) hidrógeno, (b) alquilo sustituido o no sustituido, (c) arilo sustituido y no sustituido, (d) heteroarilo sustituido y no sustituido, (e) heterociclilo sustituido y no sustituido, y (f) cicloalquilo sustituido y no sustituido; y R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de (1 ) hidrógeno, y (2) halógeno.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque W representa CH ; R1 representa N-morfolinilo; R2 representa hidrógeno; R3representa trifluorometilo; R4representa hidrógeno.

3. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -2 , caracterizado porque el cáncer de hueso se selecciona de condrosarcoma, osteosarcoma , sarcoma de Ewing , cordoma, fibrosarcoma, e histiocitoma fibroso maligno (MFH) .

4. Un método para prevenir la d isem inación metastásica de cél ulas de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención , caracterizado porque comprende administrar un compuesto de conformidad con la fórmula (I ) , o un estereoisomero, tautómero, o sal del m ismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera q ue la diseminación metastásica de cél ulas de cáncer primario en el hueso del sujeto se previene.

5. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porq ue W representa CH ; R1 representa N-morfolinilo; R2 representa hidrógeno; R3representa trifluorometi lo; R representa hidrógeno.

6. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 4-5 , caracterizado porque las células de cáncer primario se originan de cánceres de mama, pulmón, páncreas, riñon o próstata.

7. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 4-6, caracterizado porque las células de cáncer primario son células de cáncer de mama.

8. Un método para el tratamiento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la fórmula (I), o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado.

9. Un método para prevenir la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención, caracterizado porque comprende administrar una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la fórmula (I), o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que la diseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso del sujeto se previene. 1 0. Un método para el tratamiento de cáncer de hueso en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende administrar el Compuesto A, o un estereoisómero, tautómero, o sal del mismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera que el cáncer de hueso es tratado: (A) 1 1 . El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -3, 8 y 10 , caracterizado porque el cáncer de hueso es cáncer de hueso metastásico. 1 2. Un método para prevenir la d iseminación metastásica de células de cáncer primario en el hueso de un sujeto en necesidad de tal prevención , caracterizado porque comprende adm inistrar el Compuesto A, o un estereoisómero, tautómero, o sal del m ismo farmacéuticamente aceptable, al sujeto de manera q ue la diseminación metastásica de cél ulas de cáncer primario en el h ueso del sujeto se previene. RESU M EN La presente invención se refiere a métodos para el tratamiento de cáncer de hueso y prevención de la diseminación metastásica del cáncer.