MX2013005196A

MX2013005196A - Metodos para tratamiento del cancer.

Info

Publication number: MX2013005196A
Application number: MX2013005196A
Authority: MX
Inventors: Christopher Paul Leamon; Joseph Anand Reddy; Binh Nguyen
Original assignee: Endocyte Inc
Priority date: 2010-11-12
Filing date: 2011-11-11
Publication date: 2013-06-28
Also published as: AU2011325982C1; CA2817219A1; CL2013001322A1; IL226246A0; ZA201304225B; KR20130140033A; EA201390695A1; CN103282777A; CL2013001324A1; US20120122893A1; EA026168B1; ZA201304226B; WO2012065079A4; CA2817223A1; WO2012065085A1; EA201390694A1; EP2638395A4; US8987281B2; JP2013542264A; KR20130140032A

Abstract

Se describen métodos y composiciones para tratar tumores epiteliales con un conjugado de folato-vinca en combinación con al menos otro agente terapéutico en el cual los tumores incluyen tumor ovárico, del endometrio o de cáncer de pulmón de célula pequeña, incluyendo tumores ováricos resistentes a platino y tumores ováricos sensibles a platino.

Description

METODOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CANCER CAMPO DE LA INVENCION La invención se refiere a métodos y composiciones el tratamiento de un cáncer con un conjugado de folato- vinca en combinación con al menos un taxano. La invención incluye métodos y composiciones para el tratamiento de tumores que incluyen cánceres de ovario, del endometrio o de pulmón de célula no pequeña.

¡ ANTECEDENTES DE LA INVENCION A pesar de que el hecho de que ha habido significativos desarrollos en la tecnología anticancerígena, tales como radioterapia, quimioterapia y terapia hormonal, el cáncer aún permanece como la segunda causa principal de muerte después de la enfermedad cardiaca en los Estados Unidos. Más en general, el cáncer se trata cpn quimioterapia utilizando fármacos altamente potentes, i tales como mitomicina, paclitaxel y camptotecina . En muchos casos, estos agentes quimioterápéuticos muestran un efecto sensible a la dosis, y aniquilado de las células que es proporcional a la dosis del fármaco. Un estilo altamente agresivo de dosificar de esta forma es necesario para erradicar los neoplasmas. Sin embargo, la alta dosis de quimioterapia se dificulta por una pobre selectividad para células cancerígenas y una severa toxicidad en las células ; Ref. 241109 inormales. Esta falta de tratamiento específica del tumor es ¡uno de los obstáculos que necesitan superarse por la Quimioterapia actual . 1 Una solución a las limitaciones de la quimioterapia actual sería suministrar una concentración biológicamente eficaz de agentes anti-cancerígenos a los tejidos tumorales con una muy alta especificidad. Para obtener este objetivo, se debe experimentar mucho esfuerzo para desarrollar fármacos selectivos de tumor mediante la conjugación de fármacos anti-cancerígenos con tales ligandos ¿orno hormonas, anticuerpos o vitaminas. Por ejemplo, el I compuesto de vitamina de bajo peso molecular, folato, es útil como un agente de activación de tumor.

Otro método para superar las limitaciones i quimioterapéuticas actuales sería suministrar una combinación de un fármaco dirigido al tumor con uno o más agentes quimioterapéuticos en donde el perfil de toxicidad del fármaco dirigido al tumor y el agente quimioterapéutico es d'iferente. Una modificación más de este método es el uso de un fármaco dirigido al tumor y el agente quimioterapéutico en el tratamiento de combinación en cantidades de cada uno menores que la típicamente utilizada cuando el fármaco dirigido al tumor o agente quimioterapéutico se utiliza solo para el tratamiento. i ! El folato es un miembro de la familia B de j ¡vitamina y juega un papel esencial en la supervivencia I celular mediante la participación en la biosíntesis en los ,ácidos nucleicos y los aminoácidos. Esta vitamina esencial ¡también es un ligando de alta afinidad que mejora la ¡especificidad de los fármacos anti -cancerígenos conjugados mediante la activación de las células cancerígenas positivas al receptor de folato (FR, por sus siglas en inglés) . El FR, una proteína anclada a glicosilfosfatidilinositol asociada con el tumor, puede activamente internalizar la unión de los i folatos y los compuestos conjugados de folato a través de i endocitosis mediada por el receptor. Se ha encontrado que el I FR se regula de manera ascendente de más del 90% de los i carcinomas ováricos no mucinosos. El FR también se encuentra a niveles de altos a moderados en carcinomas de riñón, cerebro, pulmón y pecho, a pesar de que ocurre a bajos i niveles en la mayor parte de los tejidos normales. La i densidad del FR también parece que aumenta según la etapa del cáncer se convierte en más avanzada.

Los fármacos activados con folato han sido i desarrollados y se están ensayando en ensayos clínicos como terapéuticos cancerígenos. EC145 comprende un agente quimioterapéutico citotóxico vinca alcaloide altamente pótente, desacetilvinblastina hidracida (DAVLBH) , conjugado con folato. La molécula EC145 activa el receptor de folato encontrado a altos niveles en la superficie de los tumores I epiteliales, incluyendo carcinomas de pulmón de célula no pequeña (NSCLC, por sus siglas en inglés) , cánceres de ovario, del endometrio y renal, y otros, incluyendo carcinoma de la trompa de Falopio y peritoneal primario. Sin desear estar unido a una teoría, se cree que EC145 se une a los tumores que expresan al receptor de folato que suministra la porción vinca directamente a las células cancerígenas a pesar de que evita el tejido normal. Después de la unión, EC145 entra en la célula cancerígena a través de endocitosis, libera DAVLBH y causa la muerte celular mediante la inhibición de la formación del ensamble mitótico Requerido para la división celular. EC145 tiene el Número de Registro de Compendios Químicos 742092-03-1 y la siguiente fórmula : ; EC145 ¡ Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método para el tratamiento, un uso, una composición, una composición, farmacéutica, un kit, o una combinación, el término EC145 significa el agente quimioterapéutico , como se indica anteriormente, o una de sus sales f rmacéuticamente aceptables, y el agente quimioterapéutico puede estar I i presente en solución o suspensión en una forma ionizada, incluyendo una forma protonada. EC145 puede sintetizarse, por ejemplo, a través del método descrito en PCT/US11/037134 , incorporado en la presente por referencia. EC145 se utiliza manera intercambiable con el término "conjugado" .

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION ¡ En una modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer. El método comprende administrar ÉC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos i que tienen un modo de acción se selecciona de la inhibición de desensamble de microtúbulo y la inhibición de mitosis.

I En otra modalidad, el método anterior en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel (por ejemplo, TAXOTERE™) y paclitaxel (por ejemplo, TAXOL™ o ABRAXANE™) se describen i ' En otra modalidad, se describe el uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste i dé inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato i ¡ En otra modalidad, el uso descrito anteriormente es provisto en la presente en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. ¡ i En otra modalidad, se describe el uso de EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que i tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis . i ] En otra modalidad, se describe el uso para la i fabricación de un medicamento descrito anteriormente en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. i En otra modalidad, se describe una composición farmacéutica o combinación que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del i desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis.

I En otra modalidad, se describe la composición o i combinación farmacéutica descrita en la modalidad anterior en ! donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan dfel grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel.

En otra modalidad, se describe una composición que i comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste iI dé inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis para tratar cáncer.

En otra modalidad, se describe la composición descrita en la modalidad anterior en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que Consiste de docetaxel y paclitaxel. j Varias modalidades de la invención se describen a través de las cláusulas enumeradas a continuación: i 1. Un método para el tratamiento de un cáncer, el I método comprende el paso de administrar EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición ¿el desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis. ; 2. El método de la cláusula 1 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. i ¡ 3. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el ágente quimioterapéutico es docetaxel . ; 4. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el ajgente quimioterapéutico es paclitaxel. ; 5. El uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis para el i tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato . i : 6. El uso de la cláusula 5 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que bonsiste de docetaxel y paclitaxel. ! 7. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el agente quimioterapéutico es docetaxel. ' 8. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el agente quimioterapéutico es paclitaxel. 9. El uso de EC145 para la fabricación de un i I medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis. ! 10. El uso de la cláusula 9 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel.

I ; 11. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el i a'gente quimioterapéutico es docetaxel . :i 12. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el algente quimioterapéutico es paclitaxel.

I 13. El método o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde las células que expresan el receptor de folato son células tumorales epiteliales. ; 14. El método o uso de la cláusula 13 en donde el i tumor epitelial es un tumor de ovario, de endometrio o de pulmón de célula no pequeña. 15. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 14 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico.

I 16. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor primario. ¡ 17. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor metastático.

I I ! 18. El método o uso de cualquiera de las cláusulas I I anteriores en donde el agente quimioterapéutico se administra a una dosis que es de 50-80% de la dosis máxima tolerada para e?l agente qui.mi.oterape_utico.

I ; 19. Una composición farmacéutica que comprende ÉC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un rtiodo de acción seleccionado del grupo que consiste de j inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de I mitosis . i '; 20. La composición de la cláusula 19 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel .

I 21. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde el agente quimioterapéutico es docetaxel.

I 22. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde ejl agente quimioterapéutico es paclitaxel. ; 23. Una composición que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del I desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis para tratar cáncer. j 24. La composición de la cláusula 23 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. i 25. La composición de la cláusula 23 o 24 en donde él agente quimioterapéutico es docetaxel. ! 26. La composición de la cláusula 23 o 24 en donde él agente quimioterapéutico es paclitaxel. i ¡ 27. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente i quimioterapéutico está en una forma de dosificación parenteral . 28. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde la forma de dosificación se I selecciona del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e ihtratecal .

I j 29. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico es una composición y en donde la composición además comprende un portador farmacéuticamente aceptable . ; 30. La composición, método o uso de la cláusula 29 n donde el portador farmacéuticamente aceptable es un portador líquido. i 31. La composición, método o uso de la cláusula 30 én donde el portador líquido se selecciona del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones . j 32. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico se administra en una cantidad terapéuticamente eficaz. j 33. La composición, método, o uso de la cláusula 32 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de i aproximadamente 1 ng a aproximadamente 1 mg por kilogramo del peso corporal. 34. La composición, método, o uso de la cláusula i 3'3 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 100 ng a aproximadamente 500 pg por kilogramo del peso corporal. ! 35. La composición, método, o uso de la cláusula 3:4 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de i aproximadamente 100 ng a aproximadamente 50 g por kilogramo I del peso corporal .

I 36. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el tumor es un tumor o árico resistente al platino. i 37. Un método para el tratamiento de un cáncer, el étodo comprende los pasos de administrar EC145 al paciente; administrar al paciente uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo. ¡ 38. El uso de EC145 en combinación con uno o más I agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo para el I tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor i de folato. j 39. El uso de EC145 para la fabricación de un rtiedicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo. i 40. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 39 en donde el agente quimioterapéutico adicional es a taxano . i 41. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 40 en donde el agente quimioterapéutico adicional se i selecciona del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. ; 42. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 3¡7 a 41 en donde el agente quimioterapéutico adicional es docetaxel. í ¡ 43. El método o uso de cualquiera.de las cláusulas ¡37 a 41 en donde el agente quimioterapéutico adicional es I paclitaxel . 1 44. El uso de cualquiera de las cláusulas 38 a 43 í en donde las células que expresan el receptor de folato son i células tumorales epiteliales. i 45. El uso de la cláusula 44 en donde el tumor i epitelial es un tumor de ovario, del endometrio, o de pulmón i de célula no pequeña.

I 46. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor óvárico . 1 47. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor i epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor de i pulmón de célula no pequeña. • 48. El método de conformidad con cualquiera de las i Qláusulas 37 o 40 a 43 en donde el cáncer es un cáncer epitelial . j ' 49. El método de la cláusula 48 en donde el cáncer epitelial es un cáncer de ovario, de endometrio, o de pulmón de célula no pequeña. í 50. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer ovárico. ' 51. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer de pulmón de célula no pequeña. i 52. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden un tumor primario. 53. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden células de tumor metastático. ; 54. El método o uso de cualquiera de las cláusulas i 37 a 53 en donde el agente quimioterapéutico adicional se administra a una dosis de 50 a 80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico. ¡ 55. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 3'7 a 54 en donde el EC145 y el agente o agentes quimioterapéuticos adicionales están en formas de dosificación parenteral . i 56. El método o uso de la cláusula 55 en donde las fprmas de dosificación se seleccionan independientemente del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, I intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal . i 57. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 56 en donde el EC145 es una composición y el agente quimioterapéutico adicional es una composición y en donde la composición además comprende portadores farmacéuticamente i aceptables . i ¡ 58. El método o uso de la cláusula 57 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos . 59. El método o uso de la cláusula 58 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones. ! 60. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 59 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico se i administran en cantidades terapéuticamente eficaces .

I 61. El método o uso de la cláusula 60 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente i , , , II pg/m a aproximadamente 500 mg/m del área superficial corporal . 62. El método o uso de la cláusula 61 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente H g/m2 a aproximadamente 300 mg/m2 del área superficial corporal . 63. El método o uso de la cláusula 60 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 100 pg/kg del peso corporal del paciente. 64. El método de la cláusula 50 en donde el cáncer s un cáncer ovárico resistente al platino. 65. El uso de la cláusula 46 en donde el tumor es un tumor ovárico resistente al platino. ; 66. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 65 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o paquetes estériles, i 67. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 66 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso. 68. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 67 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . j 69. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 3¡7 a 68 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, e'stériles . 70. Una composición o combinación que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo .

I i 71. Una composición o combinación para tratar cáncer que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción dé inhibición del desensamble de microtúbulo. i 72. Un kit que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo. ; 73. La composición, combinación, o kit de I cualquiera de las cláusulas 70 a 72 en donde el agente quimioterapéutico adicional es a taxano. i 74. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 73 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. ¡ 75. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente I quimioterapéutico adicional es docetaxel. i i 76. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente quimioterapéutico adicional es paclitaxel. i I 77. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 76 en donde el EC145 y el ágente quimioterapéutico adicional están en formas de dosificación parenteral . i 78. La composición, combinación, o kit de la cláusula 77 en donde las formas de dosificación se seleccionan independientemente del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, e intratecal. i 79. La composición, combinación, o kit de i cualquiera de las cláusulas 70 a 78 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en composiciones i farmacéuticas y las composiciones además comprenden ? ¡ portadores farmacéuticamente aceptables. 1 80. La composición, combinación, o kit de la cláusula 79 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos. ! 81. La composición, combinación, o kit de la cláusula 80 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, i alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones .

I I 82. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 81 en donde el EC145 y el I agente quimioterapéutico están en cantidades terapéuticamente e¡ficaces . 83. La composición, combinación, o kit de i cualquiera de las cláusulas 70 a 82 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o paquetes estériles. 84. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso. ; 85. La composición, combinación, o kit de cualquiera . de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el í agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 95% con base en el porcentaje en peso. 86. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 85 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . j 87. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 86 en donde el EC145 y el i agente quimioterapéutico adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles. i ! 88. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 59 en donde el EC145 y/o el agente quimioterapéutico ádicional se administran a dosis inferiores que sus dosis tolerables máximas . i 89. Un método de tratamiento de cáncer de pulmón de célula no pequeña, el método comprende los pasos de I administrar una dosis de EC145 a un paciente en una inyección intravenosa de bolo dos días a la semana durante i las semanas uno y dos de un ciclo de terapia de tres semanas, I Y, I administrar al paciente una dosis de docetaxel durante una en el día uno del ciclo de terapia de tres i sjemanas .

I 90. El método de la cláusula 89 en donde la dosis de EC145 es 2.5 mg. 91. El método de la cláusula 89 o 90 en donde la l dbsis de docetaxel es 75 mg/m2 del área superficial corporal. i 92. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 85 o el método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 67 en donde el EC145 está en i la forma de un liofilizado.

I I BREVE DESCRIPCION DE LA5 FIGURAS I , Figura 1. Volumen tumoral (promedio para los cinco i animales en cada grupo de tratamiento) medido pára ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 144-212 mm3) que fueron i (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 i umol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana o (c) EC145 a 1 mol/kg/inyección, T|IW por 2 semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana. Ejl tratamiento con EC145 solo dio como resultado 0 Respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 1 Cura. El tratamiento con Docetaxel solo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 5 Curas. í Figura 2. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido pára ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 144-212 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a| 1 pmol/kg/ inyección, TIW por 2 semanas o (d) Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana o (c) EC145 a 1 i µ????/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana.

; Figura 3. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones hu/nu con tumores KB (intervalo de .103-173 mm3) que fueron !(B) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Abraxano (es decir una forma unida a albúmina de paclitaxel) at 20 mg/kg, TIW por 1 semana o (T) EC145 a 1 µmol/kg/inyección, TIW por i 2 semanas + Abraxano (un equivalente de Paclitaxel) at 20 mg/kg, TIW por 1 semana. El tratamiento con EC145 solo dio ¿orno resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 0 Curas. El tratamiento con Abraxano solo dio como resultado 1 respuesta parcial, 2 respuestas completas, y 2 Curas. El tratamiento de combinación dio como resultado 2 respuestas completas y 3 Curas.

! Figura 4. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 92-185 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a| 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Abraxano (¡equivalente de Paclitaxel) at 20 mg/kg, TIW por 1 semana o (T)EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Abraxano (equivalente de Paclitaxel) at 20 mg/kg, TIW por 1 semana, j Figura 5. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 111-173 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Paclitaxel at 20 I mg/kg, TIW en Cremóforo/etanol por 1 semana o (T) EC145 a 1 i pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Paclitaxel en Cremóforo/etanol a 20 mg/kg, TIW por 1 semana; o (?) solamente vehículo de Cremóforo/etanol . El tratamiento con EC145 solo dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y .0 Curas. El tratamiento con i Paclitaxel solo dio como resultado 2 respuestas completas y i Curas . El tratamiento de combinación dio como resultado 1 respuesta completa y 4 Curas.

! Figura 6. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido j para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 52-185 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 á 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Paclitaxel i at 20 mg/kg, TIW en Cremóforo/etanol por 1 semana o (T) i ÉC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Paclitaxel en Cremóforo/etanol a 20 mg/kg, TIW por 1 semana; o (?) s'olamente vehículo de Cremóforo/etanol .

; Figura 7. Volumen tumoral (promedio) para ratones c|on tumores IGR-OV1 (ovario humano) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC1 5 a 2 µp???/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana; o (?) EC145 a 2 mol / kg/inyección, TIW por 2 semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana, i I ! Figura 8. Cambio de porcentaje en peso (promedio) para ratones con tumores IGR-0V1 (ovario humano) que fueron M) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Docetaxel a 10 I mg/kg, TIW por 1 semana; o (?) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana. j Figura 9. Volumen tumoral (promedio) para ratones con tumores M109 fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana o (c) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana.

' Figura 10. Cambio de porcentaje en peso (promedio) para ratones con tumores M109 que fueron (a) sin tratar o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana o¡ (c) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana.

¡ DEFINICIONES I Como se utiliza en la presente, El término "Inhibición del crecimiento tumoral" significa la reducción en el tamaño del tumor, la completa desaparición de un tumor, o el crecimiento de un tumor del paciente de menos del 30% sobre el curso de la terapia con EC145 y el fármaco qúimioterapéutico adicional. i Como se utiliza en la presente, en el contexto de-un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, a kit, o una combinación, el i término docetaxel (por ejemplo, TAXOTERE™) significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico I identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 114977-28-5, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. El agente quimioterapéutico (es decir, docetaxel) puede estar presente en solución o suspensión. i Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el termino paclitaxel (por ejemplo, TAXOL™ o ABRAXA E™) siignifica una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de lps Compendios Químicos 33069-62-4, o una de sus sales i farmacéuticamente aceptables. El agente quimioterapéutico (es decir, paclitaxel) puede estar presente en solución o I suspensión.

¡ DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION i i Varias modalidades de la invención se describen a través de las cláusulas enumeradas a continuación y cada una dé las modalidades descritas en la sección de la Descripción Detallada de esta solicitud se aplica a cada una de las siguientes modalidades: I i I 1. Un método para el tratamiento de un cáncer, el método comprende el paso de administrar EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de i mitosis. 2. El método de la cláusula 1 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que i consiste de docetaxel y paclitaxel. i 3. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el agente quimioterapéutico es docetaxel. i 4. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el agente quimioterapéutico es paclitaxel. 5. El uso de EC145 en combinación con uno o más j agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción i s';eleccionado del grupo que consiste de inhibición del I desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor d<= folato. i 6. El uso de la cláusula 5 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. ; 7. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el agente quimioterapéutico es docetaxel. ! 8. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el j agente quimioterapéutico es paclitaxel. 9. El uso de EC145 para la fabricación de un I medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis. ! 10. El uso de la cláusula 9 en donde el uno o más ágentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. ! 11. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el ágente quimioterapéutico es docetaxel. ! 12. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el agente quimioterapéutico es paclitaxel . 13. El método o uso de cualquiera de las i cláusulas anteriores en donde las células que expresan el I receptor de folato son células tumorales epiteliales. 14. El método o uso de la cláusula 13 en donde el tumor epitelial es un tumor de ovario, de endometrio o de pulmón de célula no pequeña. j 15. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 14 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico. ; 16. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor primario. i i 17. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor metastático. ! 18. El método o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el agente quimioterapéutico se administra a una dosis que es de 50-80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico. ! 19. Una composición farmacéutica que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis .

S 20. La composición de la cláusula 19 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. ! 21. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde el agente quimioterapéutico es docetaxel. ¡ 22. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde el agente quimioterapéutico es paclitaxel. j 23. Una composición que comprende EC145 y uno o mas agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición del desensamble de microtúbulo e inhibición de mitosis para tratar cáncer. ! 24. La composición de la cláusula 23 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del i I grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. 1 25. La composición de la cláusula 23 o 24 en donde el agente quimioterapéutico es docetaxel. ; 26. La composición de la cláusula 23 o 24 en i donde el agente quimioterapéutico es paclitaxel. j 27. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico está en una forma de dosificación parenteral . j 28. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde la forma de dosificación se selecciona del grupo que consiste de iintradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, e intratecal . i 29. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico es una composición y en donde la cpmposición además comprende un portador farmacéuticamente a¡ceptable . i 30. La composición, método o uso de la cláusula 29 en donde el portador farmacéuticamente aceptable es un portador líquido. i i ¡ 31. La composición, método o uso de la cláusula 30 en donde el portador líquido se selecciona del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, j amidas y una de sus combinaciones. i 32. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente guimioterapéutico se administra en una cantidad terapéuticamente eficaz. j 33. La composición, método, o uso de la cláusula 32 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 1 ng a aproximadamente 1 mg por kilogramo del peso corporal.

I I i 34. La composición, método, o uso de la cláusula i 33 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 100 ng a aproximadamente 500 pg por kilogramo del peso corporal. ' 35. La composición, método, o uso de la cláusula i 34 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de j aproximadamente 100 ng a aproximadamente 50 g por kilogramo del peso corporal. ! j 36. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el tumor es un tumor ojvárico resistente al platino.

I j 37. Un método para el tratamiento de un cáncer, el método comprende los pasos de administrar EC145 al paciente; i yj ¡ administrar al paciente uno o más agentes qüimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo. j 38. El uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo para el i tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor j de folato. j 39. El uso de EC145 para la fabricación de un i medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que éxpresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo. ¡ 40. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 39 en donde el agente quimioterapéutico adicional es a taxano . 41. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 40 en donde el agente quimioterapéutico adicional se j selecciona del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel. I 42. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 3j7 a 41 en donde el agente quimioterapéutico adicional es docetaxel. j 43. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 3¡7 a 41 en donde el agente quimioterapéutico adicional es I paclitaxel . : 44. El uso de cualquiera de las cláusulas 38 a 43 eh donde las células que expresan el receptor de folato son 'células tumorales epiteliales.

I 45. El uso de la cláusula 44 en donde el tumor epitelial es un tumor de ovario, del endometrio, o de pulmón ele célula no pequeña. ' 46. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico .

I 47. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor épitelial que expresa el receptor de folato es un tumor de pulmón de célula no pequeña. ¡ 48. El método de conformidad con cualquiera de las cláusulas 37 o 40 a 43 en donde el cáncer es un cáncer epitelial .

I 49. El método de la cláusula 48 en donde el cáncer épitelial es un cáncer de ovario, de endometrio, o de pulmón de célula no pequeña. ? i 50. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer ovárico. j 51. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer de pulmón de célula no pequeña.. > 52. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 3[7 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden un tumor primario . ¡ 53. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden células de tumor metastático. ' 5 . El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 53 en donde el agente quimioterapéutico adicional se administra a una dosis de 50 a 80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico. i 55. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 54 en donde el EC145 y el agente o agentes quimioterapéuticos adicionales están en formas de dosificación parenteral . ! 56. El método o uso de la cláusula 55 en donde las formas de dosificación se seleccionan independientemente del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, i intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, e intratecal . i 57. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 56 en donde el EC145 es una composición y el agente quimioterapéutico adicional es una composición y en donde la composición además comprende portadores farmacéuticamente i aceptables . j 58. El método o uso de la cláusula 57 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos . j 59. El método o uso de la cláusula 58 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones. 60. El método o uso de cualquiera de las cláusulas a 59 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico se administran en cantidades terapéuticamente eficaces . ! 61. El método o uso de la cláusula 60 en donde las I cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 1 pg/m2 a aproximadamente 500 mg/m2 del área superficial I corporal . i 62. El método o uso de la cláusula 61 en donde las I cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 1 g/m2 a aproximadamente 300 mg/m2 del área superficial corporal .

I 63. El método o uso de la cláusula 60 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 100 pg/kg del peso corporal del paciente.

I ; 64. El método de la cláusula 50 en donde el cáncer i eis un cáncer ovárico resistente al platino. ¡ 65. El uso de la cláusula 46 en donde el tumor es I un tumor ovárico resistente al platino. i 66. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 3¡7 a 65 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o paquetes estériles. ' 67. El método o uso de cualquiera de las cláusulas i 37 a 66 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso. : 68. El método o uso de cualquiera de las cláusulas i 37 a 67 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . i ; 69. El método o uso de cualquiera de las cláusulas j 37 a 68 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico I adicional están en soluciones acuosas sin pirogeno, i estériles .

I 70. Una composición o combinación que comprende i EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo. i 71. Una composición o combinación para tratar cáncer que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción dje inhibición del desensamble de microtúbulo.

I 72. Un kit que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo. ¡ 73. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 72 en donde el agente quimioterapéutico adicional es a taxano.

I 74. La composición, combinación, o kit de cualquiera . de las cláusulas 70 a 73 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que ! consiste de docetaxel y paclitaxel. 75. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente quimioterapéutico adicional es docetaxel. j 76. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente quimioterapéutico adicional es paclitaxel. 1 77. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 76 en donde el EC145 y el ágente quimioterapéutico adicional están en formas de dosificación parenteral . i 78. La composición, combinación, o kit de la cláusula 77 en donde las formas de dosificación se j seleccionan independientemente del grupo que consiste de ijntradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal . i 79. La composición, combinación, o kit de cyalquiera de las cláusulas 70 a 78 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en composiciones farmacéuticas y las composiciones además comprenden portadores farmacéuticamente aceptables . i 80. La composición, combinación, o kit de la cláusula 79 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos . i 81. La composición, combinación, o kit de la cláusula 80 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, esteres, amidas y una de sus combinaciones . ' 82. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 81 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico están en cantidades terapéuticamente I 83. La composición, combinación, o kit de I cualquiera de las cláusulas 70 a 82 en donde el EC145 y el ajgente quimioterapéutico adicional están en envases o p'aquetes estériles. 1 84. La composición, combinación, o kit de i cualquiera de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso.

I i 85. La composición, combinación, o kit de j cualquiera de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 95% con base en el porcentaje en peso. i 86. La composición, combinación, o kit de i cualquiera de las cláusulas 70 a 85 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . i 87. La composición, combinación, o kit de i cualquiera de las cláusulas 70 a 86 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en soluciones i acuosas sin pirógeno, estériles. ! 88. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 59 en donde el EC145 y/o el agente quimioterapéutico I adicional se administran a dosis inferiores que sus dosis tolerables máximas .

I 89. Un método de tratamiento de cáncer de pulmón de i célula no pequeña, el método comprende los pasos de 1 administrar una dosis de EC145 a un paciente en una j inyección intravenosa de bolo dos días una semana durante las i semanas uno y dos de un ciclo de terapia de tres semanas, y i administrar al paciente una dosis de docétaxel durante una en el día uno del ciclo de terapia de tres semanas . j 90. El método de la cláusula 89 en donde la dosis de EC145 es 2.5 mg .

I 91. El método de la cláusula 89 o 90 en donde la dosis de docétaxel es 75 mg/m2 del área superficial corporal. i En cualquiera de las varias modalidades descritas ejn la presente, las siguientes características pueden estar presentes cuando es aplicable, proporcionando modalidades adicionales de la invención.

¡ Para todas las modalidades, cualquier combinación aplicable de modalidades también se contempla. Cualquier combinación aplicable de las modalidades antes descritas se I considera estando de acuerdo dentro de la invención. j En varias modalidades de los métodos, usos, composiciones, composiciones farmacéuticas, combinaciones, o kits descritos en la presente, el EC145 puede administrarse i solo o en combinación con uno o más taxanos (o con cualquier i combinación de taxanos) . En varias modalidades descritas en i la presente, los otros agentes quimioterapéuticos pueden I seleccionarse de un fármaco que es un inhibidor del i desensambla de microtúbulo y/o un inhibidor de la mitosis . Se i aprecia que el otro fármaco puede tener más de un modo de acción. En una modalidad ilustrativa, el EC145 puede administrarse en combinación con al menos un agente quimioterapéutico seleccionado del grupo que consiste de i docetaxel y paclitaxel. i En otras modalidades de las composiciones, métodos, i usos, composiciones farmacéuticas, o kits descritos en la presente, las sales farmacéuticamente aceptables de los i conjugados descritos en la presente se describen. Las sales farmacéuticamente aceptables de los conjugados descritos en lja presente incluyen las sales de adición y base de ácido de l|as mismas. i Las sales de adición de ácido adecuadas se forman i de ácidos que forman sales no tóxicas. Los ejemplos ilustrativos incluyen las sales de acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, i borato, carasilato, citrato, edisilato, esilato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, clorhidrato/cloro, bromhidrato/bromo, yodohidrato/yodo, isetionato, lactato, malato, raaleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/fosfato ácido/fosfato diácido, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato y trifluoroacetato . j Las sales básicas adecuadas de los conjugados descritos en la presente se forman de bases que forman sales no tóxicas. Los ejemplos ilustrativos incluyen sales de j arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y de zinc. Las hemi-sales de ácidos y i bases también pueden formarse, por ejemplo, sales de hemi-s'ulfato y hemi-calcio . i I En una modalidad, los conjugados o los agentes quimioterapéuticos adicionales descritos en la presente piaeden administrarse como una formulación en asociación con j uno o más portadores farmacéuticamente aceptables . Los portadores pueden ser excipientes. La selección del portador en un gran grado dependerá de los factores tales como el modo dé administración particular, el efecto del portador en la solubilidad y la estabilidad, y la naturaleza de las formas j i de dosificación. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para el suministro de conjugados o agentes quimioterapéuticos adicionales descritos en la presente y métodos para su preparación serán fácilmente evidentes para el experto en la técnica. Tales composiciones y métodos para su preparación pueden encontrarse, por ejemplo, en Remington: The Science & Practice of Pharmacy, 21a. Edición (Lippincott Williams & Wilkins, 2005) , incorporada aquí por referencia.

En un aspecto ilustrativo, un portador I farmacéuticamente aceptable incluye cualquiera y todos los solventes, medios de dispersión, de recubrimiento, agentes I „ , ántibacterianos y antifungicos, agentes isotonicos y de retraso de la absorción, y similares, y sus combinaciones, que son fisiológicamente compatibles. En algunas modalidades, e portador es adecuado para administración parenteral . Los portadores farmacéuticamente aceptables incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para preparación extemporánea de las soluciones o dispersiones I inyectables estériles. Los compuestos activos complementarios también pueden incorporarse en las composiciones de la invención .

: En varias modalidades, las formulaciones líquidas pueden incluir suspensiones y soluciones. Tales formulaciones púeden comprender un portador, por ejemplo, agua, etanol, polietilenglicol , propilenglicol , metilcelulosa, o un aceite j i i ! adecuado, y uno o más agentes emulsionantes y/o agentes de suspensión. Las formulaciones líquidas también pueden prepararse a través de la reconstitución de un sólido, por I ejemplo, de una almohadilla. i En una modalidad, una suspensión acuosa puede contener los materiales activos mezclados con los excipientes apropiados. Tales excipientes con agentes de suspensión, por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de I sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma de aicacia; agentes de dispersión o humectación que pueden ser f'osfatidas de existencia natural, por ejemplo, lecitina; un producto de condensación de un óxido de etileño con un ácido graso, por ejemplo, estearato de polioxietileno ; un producto Í de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático dé cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenoxiacetanol ; un producto de condensación de óxido de etileno con un éter parcial derivado de ácidos grados y un hexitol tal como mónooleato de polioxietilen sorbitol; o un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de ácidos grasos y anhídridos hexitol, por ejemplo, mónooleato de polioxietilen sorbitán. Las suspensiones acuosas pueden también contener uno o más conservantes, por ejemplo, ácido ascórbico, etilo, n-propilo, o p- i hidroxibenzoato; o uno o más agentes de coloración.

En una modalidad ilustrativa, los polvos y granulos dispersables adecuados para preparación de una suspensión acuosa a través de la adición de agua proporcionan al ingrediente activo mezclado con un agente de i dispersión o humectación, agente de suspensión y uno o más I conservantes. Los excipientes adicionales, por ejemplo, agentes de coloración, también pueden estar presentes.

! Los agentes emulsionantes pueden ser gomas de existencia natural, por ejemplo, goma de acacia o goma de i tragacanto; fosfatidas de existencia natural, por ejemplo, lecitina de frijol de soja; y esteres que incluyen ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos hexitol, í por ejemplo, mono-oleato de sorbitán, y productos de condensación de tales ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo, monooleato de polioxietilen sorbitán. j En otras modalidades, los agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, i s rbitol o cloruro de sodio pueden incluirse en la composición. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede obtenerse incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, sales de mpnoestearato y gelatina. i I En un aspecto, se describe un conjugado o agente quimioterapéutico adicional en la presente que puede administrarse directamente en la corriente sanguínea, en el ¡ i músculo, o en un órgano interno. Las rutas adecuadas para tal administración parenteral incluyen la distribución intravenosa, intraarterial , intraperitoneal , intratecal, épidural, intracerebroventricular, intrauretral , intraesternal , intracraneal, intratumoral, intramuscular y subcutánea. Los medios adecuados para administración ¿arenteral incluyen inyectores de aguja (incluyendo micro-agujas) , inyectores sin aguja y técnicas de infusión, 1 En un aspecto ilustrativo, las formulaciones ^arenterales son típicamente soluciones acuosas que pueden contener portadores o excipientes tales como sales, carbohidratos y agentes reguladores del pH (preferiblemente a un pH de 3 a 9) , pero, para algunas aplicaciones, pueden sjer más adecuadamente formuladas como una solución no acuosa elstéril o como una forma seca a ser utilizada junto con un vehículo adecuado tal como agua sin pirógeno, estéril. En j otras modalidades, cualquiera de las formulaciones líquidas descritas en la presente puede adaptarse para administración parenteral de los conjugados o los agentes qüimioterapéuticos adicionales descritos en la presente. La preparación de formulaciones parenterales bajo condiciones estériles, por ejemplo, a través de liofilización bajo i condiciones estériles, pueden fácilmente obtenerse utilizando técnicas farmacéuticas estándares bien conocidas por el experto en la técnica. EC145, por ejemplo, puede íiofilizarse a través del método descrito en la Solicitud de É¡ . U. A. No. de Serie 61/474,428, incorporada aquí por referencia. En una modalidad, EC145 puede estar presente en i la forma de un liofilizado reconstituible . En una modalidad, la solubilidad de un conjugado o del agente quimioterapéutico adicional utilizado en la preparación de una formulación parenteral puede aumentarse a través del uso de técnicas de formulación apropiadas, tales como la incorporación de aceites potenciadores de la solubilidad. Üas formulaciones EC145 se describen en la Solicitud de E.

I U. A. No. de Serie 61/474,428, PCT/USll/037134 , y WO 2011/014821, cada una incorporada aquí por referencia en su totalidad .

En varias modalidades, las formulaciones para j administración parenteral pueden formularse para la liberación inmediata y/o modificada. En un aspecto ilustrativo, los agentes activos de la invención pueden administrarse en una formulación de liberación con el tiempo, por ejemplo en una composición que incluye un p'olímero de lenta liberación. Los compuestos activos pueden prepararse con portadores que protegerán al compuesto contra lja rápida liberación, tales como las formulaciones de liberación controlada, incluyendo implantes y sistemas de suministro microencapsulados . Los polímeros biocompatibles , biodegradables pueden utilizarse, tales como acetato de I étilen vinilo, polianhídridos , ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres , ácido poliláctico, copolímeros polilácticos poliglicólicos (PGLA) . Los métodos para la preparación de tales formulaciones son generalmente I conocidos por el experto en la técnica. En otra modalidad, los conjugados o los agentes quimioterapéuticos adicionales descritos en la presente o las composiciones que comprenden los conjugados o los agentes quimioterapéuticos adicionales I pueden administrarse continuamente, cuando es apropiado. i 1 En una modalidad, se proporciona un kit. Si una combinación de compuestos activos se va a administrar, pueden combinarse dos o más composiciones farmacéuticas en i ía forma de un kit adecuado . para la administración secuencial o la co-administración de las composiciones. Tal kit comprende dos o más composiciones farmacéuticas separadas, al menos una de las cuales contiene un conjugado descrito en la presente, y medios para retener de manera i separada las composiciones, tales como un envase, una botella dividida, o un paquete de aluminio dividido. En otra 1 mpdalidad, las composiciones que comprenden el conjugado o el agente quimioterapéutico adicional descrito en la presente, en un envase que tiene una etiqueta que proporciona instrucciones para uso del tratamiento del conjugado es provista. Las instrucciones también son provista para utilizar el agente quimioterapéutico adicional i ¡a ser administrado (por ejemplo, el taxano) .

! En una modalidad, las soluciones inyectables estériles pueden prepararse mediante la incorporación del agente activo en la cantidad requerida en un solvente i apropiado con uno o una combinación de ingredientes descritos anteriormente, según se requiera, seguido por filtración estéril. Típicamente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión y cualquier i ingrediente adicional de los descritos anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son secado al vacío y secado por enfriamiento que producen un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional de una de sus soluciones filtradas estériles previas, o los ingredientes pueden filtrarse éstériles juntos.

; La composición puede formularse como una solución, i microemulsión, liposoma, u otra estructura ordenada adecuada para una alta concentración del fármaco. El portador puede s;er un solvente o un medio de dispersión que contiene, por eljemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, piropilenglicol , y polietilenglicol líquido, y similares), y sus mezclas adecuadas. En una modalidad, la fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de µ? revestimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersión y a través del uso de agentes tensioactivos . j Cualquier régimen efectivo para administrar el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional puede utilizarse. Por ejemplo, el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional (es decir, fármaco) pueden administrarse como dosis individuales, o pueden dividirse y administrarse como un resumen diario multi-dosis. Adem s, un régimen estratificado, por ejemplo, de uno a cinco días por semana puede utilizarse como una alternativa para el tratamiento diario, y para el propósito de los métodos descritos en la presente, tales como el régimen diario intermitente o estratificado se considera como equivalente para un tratamiento de cada día y se contempla. En una rtiodalidad ilustrativa el paciente se trata con múltiples inyecciones del EC145 y el agente quimioterapéutico adicional para eliminar el tumor. En una modalidad, el paciente se inyecta múltiples veces (preferiblemente desde 2 h'asta aproximadamente 50 veces) con el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional, por ejemplo, a intervalos de 1^-72 horas o a intervalos de 48-72 horas. Las inyecciones adicionales del EC145 y el fármaco adicional pueden administrarse al paciente a un intervalo de días o meses después de la(s) inyección (s) inicial y las inyecciones ¡adicionales pueden evitar la recurrencia del cáncer. En otra modalidad, el régimen para el agente quimioterapéutico jadicional es diferente del de para EC145.

; En una modalidad, EC145 se administra como una i inyección intravenosa de bolo de 2.5 mg, dos días a la I semana durante las semanas 1 y 2 de un ciclo de tres I semanas. En otra modalidad, el taxano (por ejemplo, docetaxel) se administra a 75 mg/m2 durante 1 hora en el día 1 del ciclo de tres semanas. En aún otra modalidad, las modalidades descritas en este párrafo pueden combinarse. Las Lis en mg/,.» se basan en un m> del área superficial corporal . j La dosis diaria unitaria del EC145 y el agente quimioterapéutico adicional puede variar significativamente I dependiendo de la condición del paciente, el estado de enfermedad que se está tratando, la pureza del compuesto y su ruta de administración y distribución tisular, y la posibilidad del co-uso de otros tratamientos terapéuticos, tjal como terapia por radiación. La cantidad eficaz a ser administrada en pacientes se basa en un área superficial qorporal, la masa, y la evaluación del médico de la cjondición del paciente. Las dosis eficaces pueden estar en eil intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 1 ng/kg a aproximadamente 1 mg/kg, de aproximadamente 1 µ?/kg a aproximadamente 500 µ?/kg, y de aproximadamente 1 g/kg a I aproximadamente 100 pg/kg. Las dosis se basan en el peso promedio del paciente de aproximadamente 70 kg, y los kg son kg del peso corporal del paciente (masa) . i El EC145 y el agente quimioterapéutico adicional cada uno puede administrarse en una dosis de aproximadamente .0 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 10 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 50 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 100 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 500 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 1 ng/kg a aproximadamente 500 pg/kg, de aproximadamente 1 ng/kg a aproximadamente 100 pg/kg, de' aproximadamente 1 g/kg a aproximadamente 50 pg/kg, de aproximadamente 1 pg/kg aproximadamente 10 pg/kg, de aproximadamente 5 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg, de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 100 pg/kg, de aproximadamente 20 pg/kg a i aproximadamente 200 pg/kg, de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg, o de aproximadamente 50 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg. La dosis total puede administrarse en dosis individual o dividida y puede, a discreción del médico, caer fuera del intervalo típico dado én la presente. Estas dosificaciones se basan en el peso promedio del paciente en aproximadamente 70 kg y "kg" · son kilogramos del peso corporal del paciente. El médico será fácilmente capaz de determinar las dosis para los sujetos ? j buyo peso cae fuera de este intervalo, tales como niños y personas mayores. i En otra modalidad, el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional cada uno puede administrarse en una dosis de aproximadamente 1 g/m a aproximadamente 500 mg/m2, de aproximadamente 1 yg/m2 a aproximadamente 300 mg/m2, o de aproximadamente 100 yg/m2 a aproximadamente 200 mg/m2. En otras modalidades, el EC145 y el fármaco adicional cada uno puede administrarse en una dosis de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 500 mg/m2, de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 300 mg/m2, de aproximadamente 1 mg/m2 á aproximadamente 200 mg/m2, de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 100 mg/m2, de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 50 mg/m2, o de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 600 mg/m2. La dosis total puede administrarse en dosis individual o dividida y puede, a discreción del médico, caer fuera del intervalo típico dado ! en la presente. Estas dosis se basan en m2 del área sjuperficial corporal. i I Los conjugados y los agentes quimioterapéuticos déscritos en la presente pueden contener uno o más centros I quirales, o por el contrario pueden ser capaces de existir cómo estereoisómeros múltiples. Por consiguiente se entiende qüe la presente invención incluye estereoisómeros puros así cpmo mezclas de estereoisómeros, tales como enantiómeros , i i cliaestereómeros, y mezclas enantioméricas diaestereoméricamente enriquecidas. Los conjugados y los i agentes quimioterapéuticos descritos en la presente pueden, ser capaces de existir como isómeros geométricos. Por consiguiente, se entiende que la presente invención incluye j isómeros geométricos puros o mezclas de isómeros geométricos .

¡ Se aprecia que los conjugados y los agentes quimioterapéuticos descritos en la presente pueden existir en formas no solvatadas así como formas solvatadas, I I incluyendo formas hidratadas. En general, las formas solvatadas son equivalentes a formas no solvatadas y están i barcadas dentro del alcance de la presente invención. Los Conjugados y los agentes quimioterapéuticos descritos en la presente pueden existir en múltiples formas cristalinas o amorfas. En general, todas formas físicas son equivalentes a l s usos contemplados por la presente invención y pretenden j estar dentro del alcance de la presente invención. i j En otra modalidad, las composiciones y/o formas de dosificación para administración de EC145 o el agente qúimioterapéutico adicional se preparan de compuestos con una i pureza de al menos aproximadamente 90%, o aproximadamente i 95%, o aproximadamente 96%, o aproximadamente 97%, o aproximadamente 98%, o aproximadamente 99%, o aproximadamente 99.5%. En otra modalidad, las composiciones y/o formas de i i i ! dosificación para administración de EC145 o del fármaco 'adicional se preparan de compuestos con una pureza de al i menos 90%, o 95%, o 96%, o 97%, o 98%, o 99%, o 99.5%.

¡ Como se utiliza en la presente, las determinaciones de la pureza pueden basarse en el porcentaje en peso, el porcentaje en mol, y similares. Además, las determinaciones de la pureza pueden basarse en la ausencia o ausencia sustancial de ciertos compuestos predeterminados, tales como, pero no limitándose a, ácido fólico, componentes gue contienen disulfuro sin contener el fármaco vinca, productos de oxidación, componentes de disulfuro que no i contienen un folato, y similares. También se entiende que ías determinaciones de la pureza son aplicables a soluciones de los compuestos y composiciones purificadas a través de i los métodos descritos en la presente. En estos casos, las mediciones de la pureza, incluyendo las mediciones del i porcentaje en peso y el porcentaje en mol, se relacionan con ios componentes de la solución exclusivos del solvente. En ótra modalidad, el EC145 se proporciona como un envase o paquete estéril.

: La pureza del EC145 o del fármaco adicional puede medirse utilizando cualquier técnica convencional, incluyendo varias técnicas cromatográficas o espectroscópicas , tales como cromatografía líquida de alta presión o alto rendimiento (HPLC, por sus siglas en inglés) , I I ; I espectroscopia de resonancia magnética nuclear, TLC, espectroscopia de absorbencia UV, espectroscopia de fluorescencia, y similar.

! Los receptores de vitamina expresados en la superficie, tales como el receptor de folato de alta afinidad, se sobre-expresan en células cancerígenas. Los cánceres epiteliales del ovario, glándula mamaria, colon, pulmón, nariz, garganta y cerebro todos han reportado que expresan niveles elevados del receptor de folato. De hecho, más del 90% de los tumores ováricos humanos se sabe que expresan grandes cantidades de este receptor. Por consiguiente, la terapia de combinación descrita en la resente puede utilizarse para tratar una variedad de tipos celulares tumorales . i i ¡ La terapia descrita en la presente, puede i utilizarse tanto para medicina clínica humana como aplicaciones veterinarias. De esta forma, el animal hospedero que alberga la población de células patogénicas y que trata con la terapia de combinación puede ser un humano I (es decir, un paciente) o, en el caso de aplicaciones veterinarias, puede ser un animal de laboratorio, agrícola, doméstico, o silvestre. Los métodos descritos en la présente i pueden aplicarse a humanos, animales de laboratorio tales como roedores (por ejemplo, ratones, ratas, hámsteres, etc.), conejos, monos, chimpancés, animales domésticos tales ! I ¡como perros, gatos, y conejos, animales agrícolas tales como vacas, caballos, puercos, ovejas, cabras, y animales í salvajes en cautiverio tales como osos, pandas, leones, tigres, leopardos, elefantes, cebras, jirafas, gorilas, delfines, y ballenas.

En un aspecto, la respuesta al tratamiento se caracterizó utilizando el criterio de Evaluación de Respuesta en el Criterio de Tumores Sólidos (RECIST, por sus i siglas en inglés) . Ilustrativamente, el criterio ha sido adaptado del WHO Handbook (3) original, tomando en cuenta ías mediciones del diámetro más largo de todas las lesiones ¿bjetivo: respuesta completa, (CR, por sus siglas en inglés) i - la desaparición de todas lesiones objetivo; respuesta parcial (PR, por sus siglas en inglés) — por lo menos un 30% de disminución en la suma del diámetro más largo de las i lesiones objetivo, tomando como referencia el diámetro más ! llargo de la suma de la línea base; la enfermedad estable (jSD, por sus siglas en inglés) —ni un encogimiento suficiente para calificar para PR ni un aumento suficiente para calificar para PD, tomando como referencia el diámetro más largo de la suma más pequeña desde que se inició el i tratamiento; enfermedad progresiva (PD, por sus siglas en inglés) — al menos un 20% de aumento en la suma del diámetro mas largo de las lesiones objetivo, tomando como referencia el diámetro más largo de la suma más pequeña registrada i i i ' I jdesde el inicio del tratamiento o la aparición de una o más nuevas lesiones. Otro criterio incluye el grado de respuesta !tumoral general (ORR = CR + PR) , el grado de control de enfermedad (DCR = CR + PR + SD) , y la supervivencia general i ,(0S , por sus siglas en inglés) — el tiempo para la muerte de ün paciente dado definido como el número de días desde el primer día que un paciente recibió el tratamiento del I protocolo a la fecha de la muerte del paciente.

I I En una modalidad se proporciona un método para el tratamiento de un tumor epitelial que expresa el receptor de Í i folato en un paciente en la necesidad de esto que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de EC145 en i combinación con una cantidad terapéuticamente eficaz del agente quimioterapéutico adicional. El EC145 y el agente quimioterapéutico adicional pueden administrarse I simultáneamente en una o múltiples composiciones, o secuencialmente . Otra modalidad es el uso de EC145 en ciombinación con el agente quimioterapéutico adicional para i el tratamiento de un tumor epitelial que expresa el receptor de folato en un paciente. Una modalidad más es el uso de i EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento en combinación con el agente quimioterapéutico adicional de un tumor epitelial que expresa el receptor de i folato en un paciente. i Para cualquiera de los métodos, usos, ¡composiciones, composiciones farmacéuticas, combinaciones, o kits descritos en la presente, una modalidad de un tumor 'epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor i bvárico, del endometrio o de pulmón de célula no pequeña j(NSCLC) . El tratamiento de NSCLC puede ocurrir en cualquier etapa incluyendo la etapa 0, I, II, IIIA, IIIB, o IV. Para cualquiera de los métodos, usos, composiciones, composiciones farmacéuticas, combinaciones, o kits ánteriores, otra modalidad de un tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico. El tumor ¡ ovárico puede ser resistente a platino o sensible a j platino .

'¦ En otra modalidad para cualquier método, uso, composición, composición farmacéutica, combinación, o kit, el EC145 es un compuesto que tiene la fórmula j o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. i Como se utiliza en la presente, EC145 puede estar I presente en solución o suspensión en una forma ionizada, i incluyendo una forma protonada. j En una modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer ovárico resistente a platino en un ¡paciente en la necesidad del mismos comprende administrar una ¡cantidad terapéutica de EC145 en combinación con una cantidad 'terapéutica del agente quimioterapéutico adicional . En otra modalidad, se proporciona el uso de EC145 en combinación con el agente quimioterapéutico adicional para el tratamiento de páncer ovárico resistente al platino en un paciente. En otra modalidad, se proporciona el uso de EC145 para la fabricación ke un medicamento para el tratamiento en combinación con el agente quimioterapéutico adicional de cáncer ovárico resistente al platino en un paciente.

I ' Para cualquier método, uso, composición farmacéutica, combinación o kit descrito anteriormente con referencia al tratamiento de cáncer ovárico resistente a platino utilizando EC145 en combinación con el agente quimioterapéutico adicional, una modalidad es una en donde la pureza del EC145 o del fármaco adicional es de al menos 90%.

Otra modalidad es una en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico adicional son provistos en una formulación líquida estéril acuosa.

En otra modalidad, un método para seleccionar un pjaciente para el tratamiento se describe en donde el método comprende el paso de administrar al paciente una composición que comprende EC20 combinado con un isótopo de tecnecio como sé describe en PCT/US2010/043992 (la estructura EC20 se déscribe en PCT/US2010/043992 , ahora publicada como O i I j I '2011/014821), la descripción de la cual se incorpora por i deferencia en la presente en su totalidad, en donde los i pacientes se seleccionan para terapia si expresan el receptor i 'de folato a niveles de al menos FR+ (es decir, al menos una 'lesión expresa el receptor de folato) o FR++ (es decir, todas i las lesiones expresan el receptor de folato) . En una modalidad de este procedimiento formador de imágenes, el i paciente se inyecta con 0.5 mg de ácido fólico, seguido dentro de 1 a 3 minutos por de 1 a 2 mi de inyección. de 0.1 mg de EC20 marcado con de 20 a 25 de mCi de 99mTc y se lleva a ¿abo la formación de imágenes de 1 a 2 horas después. En una modalidad, los métodos formadores de imágenes se seleccionan del grupo que consiste de formaciones de imágenes planas, SPECT, y SPECT/CT. i En otra modalidad, los métodos, composiciones, composiciones farmacéuticas, combinaciones, kits, y usos i descritos en la presente incluyen los siguientes ejemplos. Líos ejemplos además ilustran características adicionales de l|as varias modalidades de la invención descritas en la presente. Sin embargo, se entiende que los ejemplos son ilustrativos y no pretenden construirse como limitantes de otras modalidades de la invención descritas en la presente.

Además, se aprecia que las otras variaciones de los ejemplos se incluyen en las varias modalidades de la invención descritas en la presente.

I j EJEMPLOS ! MATERIALES ¡ El ácido N10-trifluoroacético se compró de Eprova AG, Schaffhausen, Suiza. Los reactivos para síntesis de péptido se compraron de NovaBiochem y Bachem. Las placas de celulosa y las placas de intercambio de ión DEAE se compraron die J.T. Baker. Paclitaxel se compró de A. K. Scientific ^Mountain View, CA) . Taxotere y abraxano se compraron de Purdue Pharmacy (West Lafayette, IN) ! METODOS I ! EXPRIMENTOS ANTI UMOR IN VIVO.

De cuatro a seis ratones nu/nu hembra de seis i semanas de edad (Charles River, Wilmington, MA) o de seis a siete ratones Balb/c hembra de siete semanas de edad (Harían Sprague Dawley, Inc., Indianápolis , IN) se mantuvieron en un i ciclo de 12 h de luz-oscuridad estándar y alimentaron ad libitum con comida deficiente en folato (dieta Harían #;TD00434, Harían Teklad, Madison, WI) durante todo el ejXperimento . Las células KB nasofaríngeas humanas positivas a i FiR y las células de ovario humano IGROV se cultivaron continuamente como una monocapa, medió RPMI sin folato (FFRPMI, por sus siglas en inglés) conteniendo 10% de suero de becerro fetal inactivado por calor (HIFCS, por sus siglas eh inglés) a 37 °C en una atmósfera humidificada con 5% de C02/95% aire sin antibióticos. Se generaron células de i carcinoma de pulmón Madison 109 (M109) positivas a Fr singenésico de con tumores MIO9 y se cultivaron unos cuantos Idías en FFRPMI conteniendo 10% de HIFCS por unos cuantos días antes del implante en los ratones. Las células KB (1 x 10s por ratón nu/nu) , M109 células (1 x 106 por ratón Balb/c) , IGROV células (4 x 106 por ratón nu/nu) en 100 µ? se inyectaron en el subcutis del área dorsal media. Los ratones dividieron en grupos de cinco, y los artículos de prueba prepararon frescos e inyectaron a través de la vena lateral de la cola bajo condiciones estériles en un volumen de 200 µL de salina regulada en pH de fosfato (PBS, por sus siglas en inglés). Los tratamientos intravenosos (i.v.) se I iniciaron típicamente cuando los tumores tuvieron aproximadamente 100-200 mm3 en volumen. Los ratones en los grupos de control no recibieron tratamiento. El crecimiento de cada tumor s.c. fue seguido por la medición del tumor tres veces por semana durante el tratamiento y a continuación dos I veces por semana hasta que se obtuvo un volumen de 1500 mm3. i Los tumores se midieron en dos direcciones perpendiculares utilizando calibradores Vernier, y sus volúmenes se calcularon como 0.5 x L x W2 , en donde L = medición de eje mas largo en mm y = medición del eje perpendicular a L en mm. Como una medición de toxicidad general, se determinaron los cambios en los pesos corporales en el mismo horario como mediciones del volumen tumoral . La supervivencia de los ^animales se monitoreó diariamente. Los animales que estaban 'moribundos (o incapaces de alcanzar la comida o agua) se 'sacrificaron por asfixia con C02. Todos los estudios in vivo 'se realizaron de acuerdo con la Asociación de Acreditación Americana de las Instrucciones para el Cuidado de Animales de Laboratorio .

I Para tumores individuales, una respuesta parcial ;(PR) como se define como regresión del volumen > 50% pero con i!in tumor mensurable (> 2 mm3) quedando todo el tiempo. La respuesta completa (CR) se define como la desaparición de la masa tumoral mensurable (< 2 mm3) en algún punto hasta el final del estudio. Las Curas se definen como CR sin el re-crecimiento del tumor dentro del marco de tiempo del estudio.

! EJEMPLO i Terapia de Combinación de EC145 con Docetaxel: j Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 144-212 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 i p'mol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (d) Docetaxel a 10 i m'g/kg, TIW por 1 semana o (c) EC145 a 1 µ?????/kg/inyección, TIW por dos semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana. Vér FIG. 1 para la respuesta del tumor y FIG. 2 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El i tratamiento con Docetaxel sólo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuestas completas o Curas. El tratamiento de combinación dio como resultado 5 Curas.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Abraxano: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 103-173 mm3) estuvieron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 ^mol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (A) Abraxano '(equivalente de Paclitaxel) a 20 mg/kg, TIW por 1 semana o i '(Y) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Abraxano (equivalente de Paclitaxel) a 20 mg/kg, TIW por 1 i semana. Ver FIG. 3 para la respuesta del tumor y FIG. 4 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento, j EJEMPLO ¡ Terapia de Combinación de EC145 con Paclitaxel en Cremóforo/etanol : ¡ ¡ Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 111-173 mm3) estuvieron (¦) sin I tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 ijimol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (A) Paclitaxel a 20 mg/kg, TIW en Cremóforo/etanol por 1 semana o (Y) EC145 a 1 lmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Paclitaxel en Cremóforo/etanol a 20 mg/kg, TIW por 1 semana; o (?) yehículo de Cremóforo/etanol solo. Ver FIG. 5 para la i respuesta del tumor y FIG. 6 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. i i EJEMPLO ' Ratones con tumores IGR-OV1 (ovario humano) ¡ estuvieron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a ¡2 pmol/kg/inyección, TI por dos semanas; o (A) Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana; o (Y) EC145 a 2 ¡ jamol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por l semana. Ver FIG. 7 para la respuesta del tumor y FIG. 8 para el cambio en el peso durante el período tratamiento.

EJEMPLO Ratones con tumores MIO 9 estuvieron (a) sin tratar; ratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW dos semanas; o (d) Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana ó (c) EC145 a 2 mol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Docetaxel a 10 mg/kg, TIW por 1 semana. Ver FIG. 9 para la respuesta del tumor y FIG. 10 para el cambio en el peso j durante el período de tratamiento.

I EJEMPLOS DE COMPUESTOS 1 MATERIALES i EC145 API (producto de fármaco activo) se preparó de acuerdo con la descripción de US 7,601,332 o de WO 2011/014821 o como se describe más adelante ( PCT/US2011/ 037134 .

I ! Otros materiales, instrumentos y equipo se obtuvieron de . fuentes comerciales, incluyendo las i I ¡siguientes: Agua para inyección ( FI, por sus siglas en i nglés) ; Citrato Trisódico Dihidratado, EMD 1.06432.0500; Acido Cítrico, JT Baker 0122-01; Manitol, JT Baker 2553-01; Argón; Nitrógeno; Filtro, Pall 12122; Entubado; Frascos, i Wheaton # 223685 / W008230, 5 mi , 20 mm, Entubado, Vidrio de Tipo I; Obturadores, (West pharmaceutical #19700021 o 19700022) 20 mm, S-10-F451, 4432/50 Gris c/ recubrimiento i B2-40 (obturador sérico); Corrugadores , Azul (con obturador sérico) ; Obturadores, West 20 mm 4432/50, S-87-J, Gris c/ recubrimiento B2-44 (obturador de liofilización de falda dividida) ; Corrugadores, Helvoet Pharraa 110009704, Brown 6028 (con obturador de liofilización de falda dividida) ; agua Milli-Q, Millipore Direct Q 3 UV System; Fosfato sódico monobásico monohidratado, Mallinckrodt 7868; Fosfato i de sodio dibásico dihidratado, Fisher S472-500; Cloruro de sodio, Mallinckrodt 7581; Cloruro de potasio, Fisher P330- 500; Citrato de sodio dihidratado, Aldrich 39,807-1; ¿acarosa, Sigma S3929-1KG; Hidróxido de sodio, JT Baker 3278-01; Acido clorhídrico, EMD HX0603P-S; Acido Acético Glacial, EMD AX0074-6; Acetato de trietilamina, Fisher, Ó4885-1; 5 N Hidróxido de Amonio, Acros, AC612570010; Ácetonitrilo, Sigma-Aldrich 34851-4L; Columna Waters HPLC Simetría C18, 3.5 m, 4.6 x 75mm, P/N WAT066224; Columna Waters Guard Simetría C18, 5 µt?, 3.9 x 20 mm, P/N WAT054225.

INSTRUMENTOS Y EQUIPO HPLC: Waters Alliance 2695 con Detector de Absorbencia Waters 2487 Dual ?; HPLC: Agilent 1200 con I 'detector PDA; medidor de H, pH-08, Corning 340; Autoclave, Esterilizador de Vapor Hotpack, PE5-004; Horno, VWR 1370FM; Horno, horno de calor seco Gruenberg; Balanza, Sartorius R300S; Balanza, Sartorius CP34001; Bomba, Watson Marlow 505S; Medidor de pipeta, Repetidores Eppendorf Plus, con puntas de 50 mi Combi; Liofilizador : FTS LyoStar II con i LyoManager II Recolector de Datos; Colocador de tapas, i Westcapper NPW-500, 5A-018.

Las abreviaturas comúnmente utilizadas para por ejemplo, solventes, reactivos y grupos protectores, se utilizan en la presente. CDSI se utiliza para denotar el i intermediario de disulfuro de carbamoilo (4) . i j Los métodos HPLC utilizados para la evaluación de lia fracción y la muestra en los ejemplos incluyen lo siguiente : ¡ EC145-CMC-IP-0001 i Ii i Preparación de la muestra: diluir el material a ajproximadamente 0.5 mg/ml con 8 M de HC1 de guanidina.

¡ : Columna: Waters XBridge BEH C18, 3.5 µp?, 2.1 x 100 Fases Móviles: A) 500 mM de bicarbonato de amonio, .2; B) 75:25 acetonitrilo-metanol .

Volumen de inyección: 10 µ? Detección UV: 280 nm Temperatura de columna: 50°C Temperatura de la muestra 5°C pradiente : Tiempo (min) Flujo (ml/min) %A *B ¡ 0.0 0 , .55 95 5 0.5 0 , .55 95 5 1.0 0. .55 80 20 5.0 0. .55 73. ,5 26.5 21.0 0. .55 71. .5 28.5 .0 0. .55 29.0 0. .55 55 45 30.0 0. .55 30 70 33.0 0. .55 30 70 33.1 0. , 75 95 5 40.0 0. , 75 95 5 I EC145-CMC-A -0001 (versión 2.3) ¡ Preparación de la muestra: diluir el material a aproximadamente 1 mg/ml con salina regulada en pH con fosfato o: 1:1 acetonitrilo-agua (v/v) .

Columna: aters Simetría C18, 3.5 m, 4.6 x 75 mm. Fases Móviles: A) 10 mM de acetato de I trietilamonio, pH 7.5; B) acetonitrilo .

¡ Volumen de inyección: 10 µ? Detección UV: 280 nm Temperatura de columna: 25 °C Temperatura de la muestra 5°C Gradiente : Ti* ¡o (min) Flujo (ml/min) %A %B 0.0 1 , .0 85 15 20.0 1. .0 50 50 25.0 1. .0 20 80 80 15 15 ¡ El EC119 se sintetizó utilizando química de fase sólida con base en Fmoc como sigue: I ler. Acoplamiento I Agregar resina de cloruro de 2 -clorotritilo a un frasco para síntesis de péptido. Dejar expandir en DMF (10 mg/g de resina) . Lavar con DMF 2 veces (10 mg/g de resina) .

I Agregar 0.8 equivalentes de Fmoc-Cys (Trt ) -OH en DCM/DMF.

Agregar 2 equivalentes de DIPEA. Agitar por 30 min. Agregar metanol (1 ml/g de resina) y agitar por 10 min. Lavar con DMF 3 veces . Lavar con MTBE 3 veces . Lavar con DMF 3 veces . lAgregar 6% de piperazina en 0. IM de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0. IM de HOBt en DMF y por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE ¡3 veces. Realizar la prueba Kaiser para confirmar la 'finalización del acoplamiento. i 2o. Acoplamiento Lavar con DMF 3 veces (10 mg/g de resina) . Agregar 2 equivalentes de Fmoc-Asp (OtBu) -OH en DMF. Agregar 2 ¡ equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 2 equivalentes de DIC . Agitar por 1.5-3 h. Confirmar el acoplamiento con la prueba kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0. IM de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0. IM de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser. ¡ 3er. Acoplamiento j Lavar con DMF 3 veces . Agregar 2 equivalentes de F^noc-Asp (OtBu) -OH en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 2 equivalentes de DIC. Agitar por 1.5-3 h. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0. IM de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0. IM de HOBt en DMF y agitar por I ¡10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces.

Realizar la prueba Kaiser. j ! 4o. Acoplamiento Lavar con DMF. Agregar 2 equivalentes de Fmoc- (Pbf)-0H en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF.

Agregar 2 equivalentes de DIC. Agitar por 1.5 -3h. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. i Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la i prueba Kaiser. i 5o. Acoplamiento j Lavar con DMF 3 veces. Agregar 2 equivalentes de Fmoc-AsP (OtBu) -OH en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF . Agregar 2 equivalentes de DIC. Agitar por 1.5 -3 h.

Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con i MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de j piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 1J0-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Rfealizar la prueba Kaiser.

I 6o. Acoplamiento ¡ Lavar con DMF 3 veces. Agregar 2 equivalentes de Fmoc-Glu-OtBu en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF. i j i Agregar 2 equivalentes de DIC. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 j ¡veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y gitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser. 7o. Acoplamiento Lavar con DMF 3 veces. Agregar 1.2 equivalentes de Ñ10-TFA-Pte-OH en una cantidad mínima de DMSO. Agregar 1.2 equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 1.2 equivalentes de PyBOP en DMF. Agregar 2.4 equivalentes de DIPEA . Agitar por 3-5 h. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con DMF 2 veces . Lavar con MTBE 2 veces .

Desprotección - eliminación del grupo trifluoroacetilo i Lavar con DMF 2 veces. Agregar 2% de hidracina en DMF y agitar por 5 min. Agregar 2% de hidracina en DMF y agitar por 5 min. Agregar 2% de hidracina en DMF y agitar p r 5 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. S(ecar la resina al vacío a temperatura ambiente.

I Separación de la resina ! Agregar reactivo de separación (10 mg/g de resina) conteniendo 85% TFA, 2.5% de triisopropilsilano, 2.5% agua y l!o% de etanditiol a un matraz. Enfriar la mezcla en un baño helado. Agregar la resina y dejar reaccionar por 2-3 horas a temperatura ambiente. Filtrar y recolectar el filtrado.

Agregar el filtrado a MTBE frío (10 mi de MTBE por 1 mi de I ¡filtrado) . Agitar a 0-5°C por 30 ± 10 min. Filtrar el producto precipitado a través de un filtro de vidrio de porosidad media. Lavar el precipitado con MTBE frío 3 veces. ¡Secar el producto al. vacío a temperatura ambiente. Almacenar bajo nitrógeno a -20 °C.

¡ Purificación ¡ El EC119 crudo se purificó por HPLC preparativa utilizando una columna C18 de fase inversa (columna de .24 cm (6 pulgadas), 2.8 kg, 10 µ??, 100Á) . Las fases móviles son 0.5% de NH„OAc (A) y 0.5% de NH4OAc/ACN ( 1 : 4 ) (B) . Se disolvieron 40 g de EC119 crudo en 1-5% de TFA, filtraron a través de un filtro de fibra de vidrio de 1 µp? y cargaron en la columna de 15.24 cm (6 pulgadas) . Las fracciones se recolectaron y muestrearon para análisis HPLC. El pH de cada fracción se ajustó a 3-4 inmediatamente después de la recolección utilizando 50% de AcOH bajo nitrógeno para precipitar el producto. El producto I precipitado se centrifugó, lavó con 0.1% de AcOH y almacenó a 2-8 °C hasta el procesamiento adicional. Los envases de limpiaron con nitrógeno durante la operación de centrifugación para reducir el potencial de oxidación. El I . criterio del grupo es pureza > 98%, isómeros de D-Arg , D- Glu2 y D-Asp3 0.25%, otras impurezas < 0.5%. Los isómeros de D-Asp5, D-Asp6 y D-Cys no pueden eliminarse por HPLC-Prep ¡y deberán suprimirse en el proceso de la síntesis. Los ¡materiales que cumplen con el criterio del grupo se I jliofilizaron tan pronto como fue posible (la solución EC119 y el precipitado húmedo no son estables) . La pureza del producto final es mayor de 98%. La producción global de ¡EC119 puro incluyendo la síntesis se fase sólida y purificación es de aproximadamente 40%. El producto se ¡empacó en una botella de vidrio ámbar bajo nitrógeno y I almacenó a -20 °C.

I j EJEMPLO i ! A. Conversión Típica de Sulfato de Vinblastina en Desacetilvinblastina Hidracida ; Materiales I Sulfato de Vinblastina: USP; F = 909.05 g/mol; I Metanol : anhidro; Hidracina: anhidra; FW =32 g/mol; Agua desionizada; Acetato de etilo: Grado LC/GC; Tolueno:! Grado LC/GC; Fosfato sódico monobásico: =99.0%; FW = 120 g/mol; Fosfato sódico dibásico: =99.0%; FW = 142 g/mol; Cloruro de sodio: grado del reactivo; FW = 58.4 g/mol; Sulfato de sodio: ¡anhidro; Acido 5-norbornen-2-carboxílico.

Procedimiento ¡ La reacción, desarrollo extractivo y aislamiento se corrieron bajo una atmósfera de nitrógeno o argón. Se ¡utilizaron filtros de presión para eliminar el sulfato de I ¡sodio y capturar el producto. Las soluciones de cloruro de ¡sodio utilizadas en la extinción y el lavado se rociaron con j nitrógeno o argón hasta que el nivel de oxígeno disuelto no 'fue más de 0.9 ppm .

¡ El sulfato de vinblastina y el metanol anhidro se cargaron en un reactor de purga de argón. Se agregó ácido 5-norbornen-2 -carboxílico e hidracina anhidra al reactor. La mezcla se agitó, y después de la disolución de los sólidos, Calentar la mezcla a alrededor de 60 °C. Mediante el análisis HPLC, cuando se completa la reacción, se enfría, extingue y extrae en acetato de etilo. Después del secado, el producto i se cristaliza a partir de acetato de etilo y tolueno. Los sólidos se secaron al vacío durante la noche a temperatura ambiente .

El NaCl regulado en pH contiene: 10.0 g de NaCl, 7.10 - 7.30 g de NaH2P04, 4.40 - 4.60 g of Na2HP04 y 90 mi de agua. La solución se roció con argón o nitrógeno (contenido de oxígeno disuelto < 0.9 ppm) .

; Una producción aislada típica es de 50 - 60% del máximo teórico.

B . Pasos 2 y 3 del Proceso EC145 Materiales I Desacetilvinblastina hidracida: FW=768.9 g/mol; 2 .5 g, 26.7 mraol; Carbonato Mixto (3) : FW=384.9 g/mol; i 10.7 g, 27.8 mmol; Acetonitrilo: c.s. : Trietilamin : FW=101.2 g/mol; 2.67 g, 26.4 mmol; Na2P04. 7 H20: 47.84 g; EC119: 29.9 i ¡g 28.6 mmol; 0.5 N HC1 : C . S . ; WFI : C.S.

Procedimiento I Observar que toda el agua utilizada en este proceso es agua para inyección (WFI) . i Purgar un frasco apropiado con argón. Cargar 20.5±0.3 g de des-acetilvinblastina hidracida; esta carga se ajusta en potencia, es decir, si la potencia fue de 90.0%, la Carga sería de 22.8 g. Cargar 10.7+0.2 g of Carbonato Mixto ¡(potencia ajustada) . Cargar 800±30 mi of acetonitrilo y i 2.67+0.11g of trietilamina . Mezclar en argón a 10-14°C por i 20-28 horas. Tomar una muestra para HPLC (EC145 -CMC-AM- 0001 , yersión2.3) . El resultado esperado es la proporción de CDSI a > 25:1. Si no es así, continuar mezclando bajo -14°C por 2-4 horas y muestrear de nuevo.

¡ Rociar 780-820 mi de agua con argón hasta que el nivel de oxígeno disuelto sea menor de 0.9 ppm; registrar el nivel de oxígeno disuelto. Disolver 47.8 ±0.5 g de fosfato dibásico de sodio heptahidratado en el agua desoxigenada. En un envase adecuado, agregar 29.8±0.5 g de EC119; (la carga tiene potencia ajustada) . Agregar la solución de fosfato de sodio al EC119 y mezclar bajo argón. Medir el pH de la solución y ajustar el pH a 5.8 - 6.2 con 0.5 N de HC1 si es necesario . i Agregar la solución de EC119 regulada en pH a la mezcla de reacción. Mezclar en argón a 20-25°C por 60-75 iminutos. Tomar una muestra para HPLC (EC145-CMC-AM-0001, jversión2.3) . Si la proporción de EC145 a CDSI > 25:1, proceder. Si no es así, continuar mezclando bajo argón a 20- 25°C y muestrear de nuevo. Si la proporción de EC145 a CDSI > 25:1, proceder. Si no es así, agregar 1 g adicional de EC119 !y mezclar bajo argón a 20-25°C por 30 minutos y muestrear de jnuevo . i i Preparar 6.9 L - 7.1 L de 25 mM de regulador de pH i ¡de fosfato, 185 - 195 mM de. NaCl, pH 7.2 - 7.5 hecho de agua ;rociada con argón hasta que el nivel de oxígeno disuelto sea i menor de 0.9 ppm. Diluir la mezcla de reacción con este regulador de pH. Si la mezcla desarrolla más de una bruma 'apenas perceptible, la solución del producto necesita filtrarse (Whatman Polycap TC75 o TC150, 0.45 o 1.0 mieras); filtración puede hacerse mientras se carga el producto en la columna Biotage .

I I Purificación Cromatográfica Líquida ! i Utilizar un cartucho Biotage 150M, C18. Este tamaño de cartucho puede acomodar una mezcla de reacción de dos i veces el tamaño de la actualmente descrita.

Preparación de columna: a. Enjuagar la columna con i. 12 - 13 L de acetonitrilo ii- 12 - 13 L de 80% de acetonitrilo y 20% de agua i iii. 12 - 13 L de 50% de acetonitrilo y 50% de agua j (v/v) j i. 12 - 13 L de 10% de acetonitrilo y 90% de agua i (v/v) I Purificación: i Preparar 25 mM de regulador de pH de fosfato, (185 j- 195 mmol) NaCl, pH 7.3 - 7.5 ! Rociar el regulador de pH con argón hasta que el ontenido de oxígeno disuelto sea = 0.9 ppm. i i Preparar: 41 L de 10% de acetonitrilo en salina iregulada en pH (v/v) ; 13 L de 16% de acetonitrilo en salina regulada en pH (v/v) , 52 L de 27% de acetonitrilo en salina regulada en pH (v/v) .

I Verificar el contenido de oxígeno disuelto de las i soluciones de la fase móvil. Si el contenido de oxígeno I disuelto es mayor de 0.9 ppm, rociar la fase móvil con argón i ó nitrógeno hasta que el nivel del oxígeno disuelto sea = I Ó .9 ppm .

I Enjuagar la columna con 26 -27 L del 10% de la fase móvil de acetonitrilo.

¡ Cargar la solución del producto en la columna j Eluir el producto utilizando la siguiente secuencia de fases móviles : i i. 13 -14 L del 10% de la fase móvil de acetonitrilo. ii. 13 L del 16% de la fase móvil de acetonitrilo. j iii. 51 -52 L del 27% de la fase móvil de ¡acetonitrilo. i Notas: Un detector uv en línea es útil; El producto :deberá emerger partiendo de 15 - 19 L del 27% de la fase i jmóvil de acetonitrilo con un ancho de banda de 8 -13 L.

Evaluación de la Fracción Método HPLC EC145-CMC-IP-0001 Fracción pasante = = 97.0% EC145 y sin impurezas = 0.8! I Tratamiento Post- Cor-árida de la Columna : ! La columna puede reutilizarse una vez. Si la columna se utilizará en una segunda corrida, realizar los pasos ii - iv. i i. Enjuagar la columna con 12 -13 L de 1:1 de acetonitrilo-agua . i ii. Enjuagar la columna con 20 -22 L de ajcetonitrilo ¡ iii. Repetir los pasos de preparación de columna ii Ultra-filtración Rociar una es. de agua con argón o nitrógeno hasta que el nivel del oxigeno disuelto sea menor de 0.9 ppm. Las fracciones cromatográficas pasantes se combinaron y diluyeron con un volumen equivalente de agua rociada. i ¡Ensamblar un aparato de ultra-filtración utilizando membrana ¡de celulosa regenerada Millipore con un corte MW nominal de I 1000 (cat# CDUF002LA) y enjuagarla con 9 L de agua I desoxigenada. Iniciar la ultra-filtración de la solución del producto. Mantener una retro-presión de 2.11-3.52 kg/cm2 (30-i 50 psi) . Continuar la ultra- filtración hasta que el volumen ! del retenato sea de 2 a 3 L. Agregar de 11 a 12 L de agua I desoxigenada. Continuar la ultra-filtración hasta que el volumen del retenato sea de 2 a 3 L. Agregar de 11 á 12 L agua desoxigenada. Continuar la ultra-filtración hasta el volumen del retenato sea de 2 a 3 L. Agregar de 8 a L de agua desoxigenada. Continuar la ultra- filtración hasta que el volumen del retenato sea de 2 L. El punto t final de la ultra- filtración debe determinarse mediante el análisis de una muestra del retenato mediante GC y concentración. La especificación es de = 50 microgramos de ácetonitrilo por miligramo de EC145. Si no se obtiene, izar otro ciclo de la ultra- filtración .

La concentración de las soluciones API deben I ajustarse de tal forma que el material empacado sea de 6 a 12 mg/ml. Al finalizar la ultra- filtración, El aparato deberá enjuagarse con 1 litro de agua. Enseguida, continuar la u'ltra-filtración o agregar agua según sea necesario. Una vez que la solución del producto sale del aparato de ultra-filtración, enjuagar el aparato de ultra-filtración con 1 L de agua desoxigenada y combinar con la solución del producto.

J Después de combinar el enjuague con la solución del producto, esta solución debe filtrarse a través de un filtro i absoluto de 0.2 mieras, y este filtrado se empaca (realizar bajo una atmósfera inerte) .

, Un rendimiento típico del producto aislado es de 50 - 60% del máximo teórico.

¡ EJEMPLO ! EC145 Liofilizado I Dos frascos de una solución acuosa de EC145 con un I volumen total de 22 mi se descongelaron a temperatura ámbiente y transfirieron en cuatro frascos de liofilización de 20 mi. Los frascos se transfirieron a un congelador por aproximadamente 1.5 horas. La liofilización se condujo utilizando un congelador-secador LABCONCO que se pre-enfrió a 472°C (temperatura de anaquel) antes de cargar las muestras. Las muestras se liofilizaron por -30 minutos a -20 °C, seguido por otras 38.5 horas a 20°C. El sólido amarillo pálido I esponjado resultante se combino en un frasco para caracterización adicional. i i Formulaciones I I ¡ Formulaciones Acuosas: I i Se proporcionan a continuación formulaciones que I pueden utilizarse para proveer EC145 a una concentración de I lj.4 mg/ml de EC145. Se utilizaron frascos individuales para proveer 2.5 mg de una dosis de bolo de EC145.

EJEMPLO ! Formulación EC145 regulada en pH con Fosfato, pH 7.4 ! La siguiente formulación proporciona un producto de fármaco EC145 (DP) para administración intravenosa (IV) como j2.0 mi de una formulación líquida estéril acuosa, pH 7.4, en frascos de vidrio transparentes de un solo uso con I Obturadores de goma recubiertos con Flurotech™, que se i 'almacenaron congelados bajo gas inerte. Cada frasco contiene I jl .4 mg/ml de EC145. La composición cuantitativa del producto de fármaco se muestra en la tabla siguiente. Los frascos se utilizaron para proporcionar una dosis de bolo de 2.5 mg de EC145. Esta formulación proporciona 10 mM de regulador de pH de fosfato, pH 7.4; 138 mM de cloruro de sodio, y 2.7 mM de j ¡cloruro de potasio. j ; Componentes del Producto de Fármaco EC145 Formulaciones para liofilización: EJEMPLO ! Formulación EC145 regulada en pH con Citrato, pH 6.2 con 3¾ de Manitol La siguiente formulación proporciona una solución que es una solución con pH 6.2 EC145 regulada en pH con citrato conteniendo 3% de manitol como agentes de volumen útiles para lio ilización y reconstitución.

Componentes del Producto de Fármaco EC145 Cantidad por Función Grado frasco (mg) EC145 Activo Interno 2.8 Citrato pH control trisódico USP 27 tonicidad dihidratado pH control ácido cítrico USP 1.5 Tonicidad Agente de volumen, Manitol Agente USP 60 Estabilizante Tonicidad Manitol/1 Sacarosa ¡ La misma formulación como para 3% de manitol i anterior, pero con 80 mg de manitol y 20 mg de sacarosa.

! EJEMPLO Formulación de Placebo regulada en pH con citrato, pH 6.2 con i i 3% de Manitol 1 La siguiente formulación proporciona una solución de placebo faltante que es una solución regulada en pH con ¿itrato, pH 6.2 conteniendo 3% de manitol como agentes de i volumen útiles para liofilización y reconstitución.

Componente del Producto de Placebo I Preparación de Composiciones Farmacéuticas de EC145 ' Liofilizado y Placebo ' Los ciclos de liofilización se corrieron con i firascos de EC145 conteniendo 3% de manitol, frascos de EC145 onteniendo 4% de manitol / 1% de sacarosa, y frascos de i pjlacebo (sin API EC145) . Las sondas se colocaron dentro de los frascos con solución EC145 y los frascos con placebo ¡ para registrar la temperatura de la solución durante el ciclo. Antes de exponer el producto final al aire, todos los i cíelos se rellenaron con argón con los frascos obturados en I el liofilizador . Inmediatamente después de la obturación, i los frascos se plegaron y marcaron. i '¡ En un número de corridas de liofilización de í parámetros variables, no se pudieron ver diferencias i visibles entre los frascos que contenían 3% de manitol y los frascos que contenían 4% de manitol / 1% de sacarosa. i I de Formulación z con WFI en exceso y se roc con gas ner e por minutos para reducir el contenido de oxígeno a < 1.0 ppm. Una prueba dentro del proceso se utilizó para confirmar el contenido de oxígeno antes de iniciar la formulación. Una manta de gas inerte de presión positiva, constante se mantuvo en la solución de la formulación en todo el proceso de formulación. i i Se removió la solución de la sustancia del fármaco i (API) EC145 del congelador y descongeló en una temperatura I de 20°C - 25°C controlada en un baño de agua circulante. La i solución API descongelada se agregó a un frasco purgado con gas inerte, con tara, para determinar la cantidad de solución API a ser formulada. Con base en la densidad de la concentración de EC145 en la solución, el peso de la i solución agregada al frasco con tara se utilizó para definir la solución final total disponible para rellenar 1.4 mg de I Efcl45 / mi. i Un frasco con barra de agitación se pesó y cargó cón 62.5% del volumen total del volumen de relleno de WFI. Se agregó manitol para proporcionar una concentración final de 3% de manitol. Se agregó citrato de sodio al frasco seguido por un enjuague con WFI rociado. Se agregó ácido cítrico al frasco seguido por un enjugue con WFI rociada. La I solución rociada se mezcló hasta que se disolvió todo el !acido cítrico.

! A medidor de pH se estandarizó con estándares de ¡regulador de pH, pH 4 y 7 para medir el pH de la solución. Isi el pH no es 6.0 - 6.2, entonces el pH se ajustó con 1.0M ácido cítrico o 1.0M de citrato de sodio.

El frasco se envolvió en aluminio para proteger EC145 de la luz. La solución de la sustancia del fármaco i ÉC145 se agregó al frasco de la formulación con agitación y rociando con gas inerte. El frasco conteniendo la sustancia i del fármaco se enjuagó dos veces con solución WFI . La mezcla se agitó con rociado hasta que se obtuvo una mezcla i visualmente homogénea. El peso de la formulación objetivo final se determinó y la solución se cargó con WFI al peso óbjetivo. i ; La solución se filtra a través de un filtro i éstéril de 0.22 mieras, pre-humedece y ensaya con punto de , utilizando una bomba peristáltica. Una purga de gas del frasco receptor se mantiene durante todo el proceso de filtración. Después de la filtración, se repite I la prueba de punto de burbuja para asegurar que la efectiva i filtración se mantenga en todo el proceso. i ¡ Se calibra un cabezal de relleno para suministrar 2Í 03 gramos (2.0 mi, 2.8 mg EC145) de la solución de la formulación EC145 a cada frasco. La cantidad de relleno se i i i i ; j verifica rutinariamente durante el proceso de llenado. j Los obturadores se asientan a la mitad en los frascos en todo el proceso de llenado. i Los termopares se colocan en frascos apropiados en charolas de liofilización, y las charolas se liofilizan en cuanto al ciclo definido. i ? EJEMPLO i I < Ciclo de Liofilización I I El siguiente ciclo de liofilización, utilizando la i I solución de EC145 regulada en pH con citrato pH 6.2 conteniendo 3% de manitol descrita anteriormente (2 mi en un frasco de 5 mi) proporciona la formulación de EC145 liofilizada con una apariencia de torta satisfactoria, que se reconstituye fácilmente en agua, y que retiene una alta pureza API (>95%) .

I i Los frascos se rocían con argón, llenan con 2 mi de la formulación EC145, obturan con a obturador de liofilización de falda dividida en la posición asentada a la mitad. Tan pronto como una charola se llena y obtura, se coloca en el liofilizador a 5°C. i I 1. Pre-enfriar los anaqueles del liofilizador a 5°C.

I i ¡ 2. Cargar las charolas llenas en los anaqueles pre-enf iados . 3. Iniciar el ciclo de liofilización después de jcompletar la carga. j 4. Mantener la temperatura del anaquel a 5°C ¡30-60 minutos ¡ Alternativamente, pre-enfriar los anaqueles de ¡-50 °C a 5°C permite un tiempo reducido de pre-enfriamiento ¡para llenar las charolas, y el paso 4 puede no ser necesario . i ! 5. Inmediatamente elevar la temperatura del anaquel a -50°C. i 6. Mantener la temperatura del anaquel a -50°C i de 60 a 360 minutos. i \ 7. Reducir la presión de la cámara a 50 a i 150 mTorr.

I ! 8. Mantener la temperatura del anaquel a -50°C de 180 a 1740 minutos.

I j 9. Elevar la temperatura del anaquel a -37 °C por i 73 minutos (0.20°C/minuto) . 10. Mantener la temperatura del anaquel a -37 °C 60 a 720 minutos. 11. Elevar la temperatura del anaquel a -20°C por 150 minutos (0.11°C /minuto) . ¡ 12. Mantener la temperatura del anaquel a -20°C i de 60 a 360 minutos.

I 13. Elevar la temperatura del anaquel de 20°C a 30°C por 60 a 360 minutos. i 14. Mantener la temperatura del anaquel de 20°C a 30 °C de 60 a 600 minutos. 15. Volver a llenar la cámara con argón o ¡nitrógeno a 870 mbares (12.5 psia) . ¡ 16. Colapsar los anaqueles (frascos completamente !obturados) . 17. Rellenar a presión atmosférica con aire jfiltrado . i 18. Descargar el liofilizador .

! I Un ejemplo particular del ciclo de liofilización ? anterior, con enf iamiento inicial por 30 minutos a 5°C, puede representarse en la forma resumida como sigue : Los frascos después se taparon para proporcionar ¡producto final como una torta satisfactoria en cada frasco, j EXPERIMENTOS ANTITUMOR j Se encontró previamente en el estudio de la fase ¡II de EC145 de un solo agente en pacientes NSCLC pre-¡tratados densamente (media de 6 antes de los regímenes ¡quimioterapéuticos) que el subgrupo cuyas lesiones tumorales ¡expresaron el receptor de folato (FR++) tuvieron una supervivencia libre de avance prolongado prometedora de 7.1 meses y una supervivencia de 10.8 meses. Los estudios in ¡vi ro e in vivo en un modelo KB de enfermedad mostró un buen sinergismo entre EC145 y TAXOTERE™.

¡ Se midió la actividad del EC145 de agente individual frente a TAXOTERE™ estándar actual en pacientes i con NSCLC de la segunda linea cuyas lesiones tumorales todas i expresan el receptor de folato (FR++) . i i Los pacientes en dos subgrupos con NSCLC de la segunda línea (cáncer de pulmón de célula no pequeña) se trataron con una combinación de EC145 más TAXOTERE™: (1) pacientes cuyas lesiones tumorales todas expresan el Receptor de folato (FR++) y (2) pacientes que tiene al menos p¡ero no todas las lesiones que expresan el receptor de i fiolato (FR+) . j Las siguientes mediciones se determinaron durante el tratamiento: Supervivencia Libre de Avance (PFS) ; Grado Gbneral de Respuesta de Tumor (0RR=CR+PR) ; Duración de la ¡respuesta del tumor (DOR, por sus siglas en inglés) ; Grado jde Control de la enfermedad (DCR=CR+PR+SD) ; Duración de DCR; ¡y Supervivencia Global (OS) . Otras pruebas son seguras en ¡cuanto a tolerabilidad de terapia con EC145, ¡EC145+TAXOTERE™, y agente individual TAXOTERE™, y la segura ¡tolerabilidad de tratamientos 99mTc-EC20.

¡ Los pacientes se clasificaron para inclusión en el estudio por tomografía computarizada de emisión de fotones i planos e individuales (SPECT, por sus siglas en inglés) I mediante formación de imágenes con 99mTc-EC20. j Los pacientes calificados que cumplieron con el de elegibilidad se distribuyeron aleatoriamente para uno de los tres regímenes de tratamiento: tratamiento con EC145 sólo (Brazo A) , tratamiento con una j combinación de EC145+TAX0TERE™ (Brazo B) , o tratamiento con i TAXOTERE™ sólo (Brazo C) .

I La distribución aleatoria de los pacientes se éstratificó por tiempo desde la última quimioterapia (< 3 i frente a = 3 meses), mejor respuesta en la ultima quimioterapia (respuesta de tumor objetivo/enfermedad estable frente a enfermedad progresiva/desconocida) , etapa (¡IIIB frente a IV) , y tratamiento anterior con inhibidor I EGFR (si frente a no) , FR+ frente a FR++ para el brazo de TAXOTERE™ del estudio y el brazo TAXOTERE™ + EC145 del e'studio.

Administración de 99mTc-EC20: Antes del procedimiento formador de imágenes EC20e, los pacientes recibieron una inyección intravenosa (IV) de 0.5 mg de ácido fólico, seguido dentro de 1 a 3 minutos por una inyección de 1- a 2-ml de 0.1 mg de EC20 marcado con de 20 a 25 mCi de 99mTc . Los pacientes experimentaron formación de imágenes planas (muslo medio a cabeza, imágenes posterior y anterior) ' de 1 a 2 horas después de la inyección de 99mTc-EC20. Las ¡imágenes SPECT de la(s) región(s) que se sabe que contienen ila(s) lesión (s) objetivo se obtienen inmediatamente después 'de la adquisición de las imágenes planas. Si no se puede I : identificar la región anatómica que contiene el tumor antes de las imágenes SPECT, se adquieren imágenes SPECT (o SPECT/tomografía computarizada [CT] ) del pecho /abdomen y j abdomen/pelvis . i Administración de EC145 (Brazo A y B) : EC145 se I ¡administró como una inyección de bolo IV de 2.5-mg, Lunes y i ¡Miércoles, durante las Semanas 1 y 2 de un ciclo de 3 ¡semanas . i Administración de TAXOTERE™ (Brazo B y C) : i ¡Taxotere se administró a 75 mg/m2 IV durante 1 hora en el i ¡día de un ciclo de 3 semanas. Los primeros 3 pacientes en el ¡Brazo B de combinación se observarán cercanamente por ¡seguridad. Los pacientes se evaluaron con CT al final de ¡cada 2 ciclos .

Brazo A: EC145 (n=60 FR++) : 2.5 mg IV; M, W Sem 1, ¡2 q 3 sems .

: Brazo B: EC145+ TAXOTERE™ (n= 60 FR++, 60 FR+) en cuanto a los programas del Brazo A y Brazo C. i I Brazo C: TAXOTERE™ (n=60 FR++, 60 FR+) . j ¡ Se determina la supervivencia sin avance (PFS) ¡entre los brazos de tratamiento. i ¡ Las comparaciones de interés primario son: EC145 + frente a TAXOTERE™ (subgrupos separados FR+ y 145 frente a TAXOTERE™ (FR++ solamente) .

Análisis Estadístico: El nivel de significancia es alfa unilateral = justes para múltiples pruebas.

Para cada una de las comparaciones anteriores, 94 PFS de los 120 pacientes proporcionan Aproximadamente 75% de poder para detectar una relación I arriesgada igual a 0.67. Asumiendo que PFS medio para TAXOTERE™ es de 3 meses, estas relaciones arriesgadas corresponden a 4.5 meses en los brazos ensayados, es decir, una mejora de 50% en PFS medio.

I I A pesar de que ciertas modalidades de la invención i I han sido descritas y/o ejemplificadas anteriormente, se i contempla que son posibles considerables variaciones y modificaciones a las mismas. Por consiguiente, la presente invención no está limitada a las modalidades particulares 'descritas y/o ejemplificadas en la presente. j Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. i

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : j

1. Un método para el tratamiento de un cáncer, caracterizado porque comprende los pasos de administrar EC145 a. un paciente; y administrar al paciente uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de microtúbulo en donde el ÉC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o paquetes estériles.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional i es a taxano.

3. El método de conformidad con la reivindicación , caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de docetaxel y i paclitaxel .

4. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional és docetaxel.

5. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional es paclitaxel.

! 6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el cáncer es un cáncer epitelial. i

I 7. El método de conformidad con la reivindicación i 6, caracterizado porque el cáncer epitelial es un cáncer de vario, de endometrio, o de pulmón de célula no pequeña.

' 8. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el cáncer epitelial es un cáncer ovárico .

I i 9. El método de conformidad con la reivindicación í 7, caracterizado porque el cáncer epitelial es un cáncer de pulmón de célula no pequeña.

: 10. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional se administra a una dosis de 50 a 80% de la dosis máxima I tolerada para el agente quimioterapéutico.

! 11. El método de conformidad con la reivindicación I, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico se administran en cantidades j terapéuticamente eficaces.

! 12. El método de conformidad con la reivindicación I II, caracterizado porque las cantidades eficaces están en el Í intervalo de aproximadamente 1 µ?/m2 a aproximadamente 500 mg/m2 del área superficial corporal. i

13. El método de conformidad con la reivindicación i i i ¡11, caracterizado porque las cantidades eficaces están en el ¡intervalo de aproximadamente 1 g/m2 a aproximadamente 300 mg/m2 del área superficial corporal.

¡ 14. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 10 ug/kg a aproximadamente 100 g/kg del peso corporal del paciente. I

15. El método de conformidad con la reivindicación i 1, caracterizado porque el cáncer es un cáncer ovarico

I resistente al platino. j 16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso.

! 17. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el EC145 está en la forma de un íiofilizado reconstituible . i

; 18. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el EC145 y el agente adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles.

¡ 19. El método de conformidad con la reivindicación i, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional se administran a dosis inferiores que sus dosis tolerables máximas.

20. Un kit caracterizado porque comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción de inhibición del desensamble de

I microtúbulo . j 21. El kit de conformidad con la reivindicación i 2¡0, caracterizado porque él agente quimioterapéutico adicional es a taxano. i 1 22. El kit de conformidad con la reivindicación i 21, caracterizado porque el agente quimioterapéutico i adicional se selecciona del grupo que consiste de docetaxel y paclitaxel.

I 23. El kit de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional es docetaxel.

I i 24. El kit de conformidad con la reivindicación 2¡2 , caracterizado porque el agente quimioterapéutico

I adicional es paclitaxel.

¡ 25. El kit de conformidad con la reivindicación i 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico están en cantidades terapéuticamente i e¡ficaces . í

26. El kit de conformidad con la reivindicación i ¿0, caracterizado porque el EC145 y el agente I quimioterapéutico adicional están en envases o paquetes éstériles. i I ; íoo

; 27. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos j 90% con base en el porcentaje en peso.

! 28. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 9|5% con base en el porcentaje en peso. i

: 29. El kit de conformidad con la reivindicación ¿0, caracterizado porque el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . i

I i 30. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente están en soluciones acuosas sin j

31. Un método para el tratamiento de cáncer de pulmón de célula no pequeña, caracterizado porque comprende ljos pasos de ' administrar una dosis de EC145 a un paciente en una inyección intravenosa de bolo dos días una semana durante las siemanas uno y dos de un ciclo de terapia de tres semanas; y I administrar al paciente una dosis de docetaxel durante una hora en el día uno del ciclo de terapia de tres siemanas . 1

32. El método de conformidad con la reivindicación i caracterizado porque la dosis de EC145 es 2.5 mg.

33. El método de conformidad con la reivindicación caracterizado porque la dosis de docetaxel es 75 mg/m2 del área superficial corporal.