MX2013005194A

MX2013005194A - Metodos para el tratamiento del cancer.

Info

Publication number: MX2013005194A
Application number: MX2013005194A
Authority: MX
Inventors: Christopher Paul Leamon; Joseph Anand Reddy
Original assignee: Endocyte Inc
Priority date: 2010-11-12
Filing date: 2011-11-11
Publication date: 2013-06-28
Also published as: CN103282777A; CL2013001322A1; CN103403552B; KR20130140033A; BR112013011659A2; EP2638395A4; AU2011325982A1; WO2012065085A4; MX2013005196A; WO2012065079A4; BR112013011590A2; JP2013542263A; AU2011325982B2; EA201390695A1; SG190244A1; AU2011325982C1; SG190245A1; AU2011325989A1; CA2817223A1; KR20130140032A

Abstract

Se describen métodos y composiciones para tratar tumores epiteliales con un conjugado de folato-vinca en combinación con al menos otro agente terapéutico en el cual los tumores incluyen tumor ovárico, del endometrio o de cáncer de pulmón de célula pequeña, incluyendo tumores ováricos resistentes a platino y tumores ováricos sensibles a platino.

Description

METODOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CANCER CAMPO DE LA INVENCION La invención se refiere a métodos y composiciones para el tratamiento de un cáncer con un conjugado de folato-vinca en combinación con al menos un agente quimioterapéutico adicional. La invención incluye métodos y composiciones para el tratamiento de tumores que incluyen cánceres de ovario, del endometrio o de pulmón de célula no pequeña.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION A pesar de que el hecho de que ha habido significativos desarrollos en la tecnología anti-cancerígena, tales como radioterapia, quimioterapia y terapia hormonal, el cáncer aún permanece como la segunda causa principal de muerte después de la enfermedad cardiaca en los Estados Unidos. Más en general, el cáncer se trata con quimioterapia utilizando fármacos altamente potentes, tales como mitomicina, paclitaxel y camptotecina . En muchos casos, estos agentes quimioterapéuticos muestran un efecto sensible a la dosis, y el aniquilado de las células que es proporcional a la dosis del fármaco. Un estilo altamente agresivo de dosificar de esta forma es necesario para erradicar los neoplasmas. Sin embargo, la alta dosis de quimioterapia se dificulta por una pobre selectividad para células cancerígenas y una severa toxicidad en las células normales.

Ref.241092 Esta falta de tratamiento específica de tumor es uno de los obstáculos que necesitan superarse por la quimioterapia actual .

Una solución a las limitaciones de la quimioterapia actual sería suministrar una concentración bioógicamente eficaz de agentes anti-cancerígenos a los tejidos tumorales con una muy alta especificidad. Para obtener este objetivo, se debe experimentar mucho esfuerzo para desarrollar fármacos selectivos de tumor mediante la conjugación de fármacos anti-cancerígenos con tales ligandos como hormonas, anticuerpos o vitaminas. Por ejemplo, el compuesto de vitamina de bajo peso molecular, folato, es útil como un agente de activación de tumor .

Otro método para superar las limitaciones quimioterapéuticas actuales sería suministrar una combinación de un fármaco dirigido al tumor con uno o más agentes quimioterapéuticos en donde el perfil de toxicidad del fármaco dirigido al tumor y el agente quimioterapéutico es diferente. Una modificación más de este método es el uso de un fármaco dirigido al tumor y el agente quimioterapéutico en el tratamiento de combinación en cantidades de cada uno menores que la típicamente utilizada cuando el fármaco dirigido al tumor o agente quimioterapéutico se utiliza sólo para el tratamiento.

El folato es un miembro de la familia B de vitaminas y juega un papel esencial en la supervivencia celular mediante la participación en la biosíntesis en los ácidos nucleicos y los aminoácidos. Esta vitamina esencial también es un ligando de alta afinidad que mejora la especificidad de los fármacos anti-cancerígenos conjugados mediante la activación de las células cancerígenas positivas al receptor de folato (FR, por sus siglas en inglés) . El FR, una proteína anclada a glicosilfosfatidilinositol asociada con el tumor, puede activamente internalizar la unión de los folatos y los compuestos conjugados de folato a través de endocitosis mediada por el receptor. Se ha encontrado que el FR se regula de manera ascendente en más del 90% de los carcinomas ováricos no mucinosos. El FR también se encuentra a niveles de altos a moderados en carcinomas de riñon, cerebro, pulmón y pecho, a pesar de que ocurre a bajos niveles en la mayor parte de los tejidos normales. La densidad del FR también parece que aumenta según la etapa del cáncer se convierte en más avanzada.

Los fármacos activados con folato han sido desarrollados y se están ensayando en ensayos clínicos como terapéuticos cancerígenos. EC145 comprende un agente quimioterapéutico citotóxico vinca alcaloide altamente potente, desacetilvinblastina hidracida (DAVLBH) , conjugada con folato. La molécula EC145 activa el receptor de folato encontrado a altos niveles en la superficie de los tumores epiteliales, incluyendo carcinomas de pulmón de célula no pequeña (NSCLC, por sus siglas en inglés) , cánceres de ovario, del endometrio y renal, y otros, incluyendo carcinoma de la trompa de Falopio y peritoneal primario. Sin desear estar unido a una teoría, se cree que EC145 se une a los tumores que expresan al receptor de folato que suministra la porción vinca directamente a las células cancerígenas a pesar de que evita el tejido normal. Después de la unión, EC145 entra en la célula cancerígena a través de endocitosis, libera DAVLBH y causa la muerte celular mediante la inhibición de la formación del ensamble mitótico requerido para la división celular. EC145 tiene el Número de Registro del Compendio Químico 742092-03-1 y la siguiente fórmula: EC145 Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método para el tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, un kit, o una combinación, el termino EC145 significa el agente quimioterapéutico, como se indica anteriormente, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión en una forma ionizada, incluyendo una forma protonada. EC145 puede sintetizarse, por ejemplo, a través del método descrito en PCT/US11/037134 , incorporada en la presente por referencia. EC145 se utiliza de manera intercambiable con el término "conjugado" .

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION En una modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer. El método comprende administrar EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, inducción de apoptosis, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis.

En otra modalidad, se describe el método anterior en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina (por ejemplo, PLATINOL™) , carboplatina (por e emplo, PARAPLATIN™) , topotecán (por ejemplo, HYCAMTIN™) , irinotecán (por ejemplo, CAMTOSAR™) , bevacizumab (por ejemplo, AVASTIN™) , erlotinib (por ejemplo, TARCEVA™) , lapatinib (por ejemplo, TYKERB™) , y pemetrexed (por ejemplo, ALIMTA™) .

En otra modalidad, se describe el uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, inducción de apoptosis, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato.

En otra modalidad, el uso descrito anteriormente es provisto en la presente en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed.

En otra modalidad, el uso de EC145 es provisto para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, inducción de apoptosis, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis.

En otra modalidad, se describe el uso para la fabricación de un medicamento descrito anteriormente en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed.

En otra modalidad, una composición farmacéutica o combinación que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inducción de apoptosis, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis.

En otra modalidad, la composición o combinación farmacéutica descrita en la modalidad anterior en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed se describen En otra modalidad, una composición que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, inducción de apoptosis, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis.

En otra modalidad, se describe la composición descrita en la modalidad anterior en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed.

En cualquiera de las modalidades antes descritas, el agente quimioterapéutico también puede ser doxorubicina, o una forma modificada de doxorubicina, tal como doxorubicina pegilada (por ejemplo, DOXIL™) . La doxorubicina (por ejemplo, DOXIL™) puede ser encapsulada en liposomas.

Varias modalidades de la invención se describen a través de las cláusulas enumeradas a continuación: 1. Un método para el tratamiento de un cáncer, el método comprende el paso de administrar EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionadó del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 2. El método de la cláusula 1 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 3. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 4. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 5. El uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato. 6. El uso de la cláusula 5 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 7. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 8. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 9. El uso de EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 10. El uso de la cláusula 9 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 11. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 12. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 13. El método o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde las células que expresan el receptor de folato son células tumorales epiteliales. 14. El método o uso de la cláusula 13 en donde el tumor epitelial es un tumor de ovario, de endometrio o de pulmón de célula no pequeña. 15. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 14 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico. 16. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor primario. 17. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor metastático. 18. El método o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el agente quimioterapéutico se administra a una dosis que es de 50 a 80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico. 19. Una composición farmacéutica que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 20. La composición de la cláusula 19 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 21. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 22. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 23. Una composición que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis para tratar cáncer. 24. La composición de la cláusula 23 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 25. La composición de la cláusula 23 o 24 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 26. La composición de la cláusula 23 o 24 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 27. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico está en una forma de dosificación parenteral. 28. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde la forma de dosificación se selecciona del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal. 29. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico es una composición y en donde la composición además comprende un portador farmacéuticamente aceptable. 30. La composición, método o uso de la cláusula 29 en donde el portador farmacéuticamente aceptable es un portador líquido. 31. La composición, método o uso de la cláusula 30 en donde el portador liquido se selecciona del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones. 32. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva. 33. La composición, método, o uso de la cláusula 32 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 1 ng a aproximadamente 1 mg por kilogramo del peso corporal. 34. La composición, método, o uso de la cláusula 33 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 100 ng a aproximadamente 500 g por kilogramo del peso corporal. 35. La composición, método, o uso de la cláusula 34 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 100 ng a aproximadamente 50 g por kilogramo del peso corporal. 36. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el tumor es un tumor ovárico resistente al platino. 37. Un método para el tratamiento de un cáncer, el método comprende los pasos de administrar EC145 al paciente; y administrar al paciente uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis . 38. El uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato. 39. El uso de EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 40. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 39 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 41. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 40 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de carboplatina y bevacizumab . 42. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 41 en donde el agente quimioterapéutico adicional es carboplatina . 43. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 41 en donde el agente quimioterapéutico adicional es bevacizumab . 44. El uso de cualquiera de las cláusulas 38 a 43 en donde las células que expresan el receptor de folato son células tumorales epiteliales. 45. El uso de la cláusula 44 en donde el tumor epitelial es un tumor de ovario, del endometrio, o de pulmón de célula no pequeña. 46. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico . 47. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor de pulmón de célula no pequeña. 48. El método de conformidad con cualquiera de las cláusulas 37 o 40 a 43 en donde el cáncer es un cáncer epitelial . 49. El método de la cláusula 48 en donde el cáncer epitelial es un cáncer de ovario, de endometrio, o de pulmón de célula no pequeña. 50. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer ovárico. 51. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer de pulmón de célula no pequeña. 52. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden un tumor primario . 53. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden células de tumor metastático. 54. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 53 en donde el agente quimioterapéutico adicional se administra a una dosis de 50 a 80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico . 55. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 54 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en forma de dosificación parenteral. 56. El método o uso de la cláusula 55 en donde las formas de dosificación se seleccionan independientemente del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal. 57. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 56 en donde el EC145 es una composición y el agente quimioterapéutico adicional es una composición y en donde la composición además comprende portadores farmacéuticamente aceptables . 58. El método o uso de la cláusula 57 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos . 59. El método o uso de la cláusula 58 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones. 60. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 59 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico se administran en cantidades terapéuticamente eficaces. 61. El método o uso de la cláusula 60 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 1 µ9/??2 a aproximadamente 500 mg/m2 del área superficial corporal . 62. El método o uso de la cláusula 61 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 1 pg/m2 a aproximadamente 300 mg/m2 del área superficial corporal . 63. El método o uso de la cláusula 60 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 100 g/kg del peso corporal del paciente. 64. El método de la cláusula 50 en donde el cáncer es un cáncer ovárico resistente al platino. 65. El uso de la cláusula 46 en donde el tumor es un tumor ovárico resistente al platino. 66. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 65 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o empaques estériles. 67. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 66 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso. 68. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 67 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . 1 69. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 1 37 a 68 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles . 70. Una composición o combinación que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 71. Una composición o combinación para tratar cáncer que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 72. Un kit que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 73. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 72 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 74. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 73 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de carboplatina y bevacizumab. 75. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente quimioterapéutico adicional es carboplatina. 76. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente quimioterapéutico adicional es bevacizumab. 77. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 76 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en forma de dosificación parenteral . 78. La composición, combinación, o kit de la cláusula 77 en donde las formas de dosificación se seleccionan independientemente del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal . 79. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 78 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en composiciones farmacéuticas y las composiciones además comprenden portadores farmacéuticamente aceptables . 80. La composición, combinación, o kit de la cláusula 79 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos. 81. La composición, combinación, o kit de la cláusula 80 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones . 82. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 81 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico están en cantidades terapéuticamente eficaces . 83. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 82 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o empaques estériles. 84. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso. 85. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 95% con base en el porcentaje en peso. 86. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 85 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . 87. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 86 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles. 88. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 59 en donde el EC145 y/o el agente quimioterapéutico adicional se administran a dosis inferiores que sus dosis tolerables máximas. 89. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 85 o el método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 67 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS Figura 1. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 109-188 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas o (c) Carboplatina a 50 mg/kg, TIW por 1 semana o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Carboplatina a 50 mg/kg, TIW por 1 semana. El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 0 Curas. El tratamiento con Carboplatina solo dio como resultado 3 respuestas parciales. El tratamiento de combinación dio como resultado 1 respuesta completa y 4 Curas .

Figura 2. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores B (intervalo de 109-188 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) Carboplatina a 50 mg/kg, TIW por 1 semana o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Carboplatina a 50 mg/kg, TIW por 1 semana .

Figura 3. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 120-200 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Cisplatina a 3 mg/kg, BIW por 2 semanas o (c) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Cisplatina a 3 mg/kg, BIW por 2 semanas. El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 1 Cura. El tratamiento con Cisplatina solo dio como resultado 2 respuestas parciales. El tratamiento de combinación dio como resultado 5 Curas .

Figura 4. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 120-200 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 µp???/?^/?^e?????, TI por 2 semanas; o (d) Cisplatina a 3 mg/kg, BI por 2 semanas o (c) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Cisplatina a 3 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 5. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 144-204 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/.inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Topotecán a 5 mg/kg, TIW por 2 semanas o (c) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Topotecán a 5 mg/kg, TIW por 2 semanas. El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 1 Cura. El tratamiento con Topotecán solo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 3 respuestas parciales y 2 respuestas completas.

Figura 6. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 144-204 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Topotecán a 5 mg/kg, TIW por 2 semanas o (c) EC145 a 1 µmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Topotecán a 5 mg/kg, TIW por 2 semanas.

Figura 7. Los isobologramas muestran que la actividad in vitro de EC145 y Topotecán es sinérgica.

Figura 8. Volumen de tumor medido para ratones con tumores IGR-0V1 que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) topotecán a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas o (Y) EC145 a 2 µp???/kg/inyección, TIW por 2 semanas + topotecán a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas .

Figura 9. Cambio de porcentaje en peso de ratones con tumores IGR-OV1 que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 2 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) topotecán a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas o (?) EC145 a 2 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + topotecán a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas .

Figura 10. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores B (intervalo de 114-177 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Irinotecán a 40 mg/kg, BIW por 2 semanas o (Y) EC145 a 1 mol/kg/ inyección, TIW por 2 semanas + Irinotecán a 40 mg/kg, BIW por 2 semanas.

El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 0 Curas. El tratamiento con Irinotecán solo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 1 respuesta completa y 3 Curas .

Figura 11. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 114-177 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Irinotecán a 40 rog/kg, BIW por 2 semanas o (T) EC145 a 1 pmol/kg/ inyección, TIW por 2 semanas + Irinotecán a 40 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 12. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 108-222 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Avastina (es decir bevacizumab) a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas o (c) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Avastina a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas. El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 1 Cura. El tratamiento con Avastina solamente dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 4 respuestas parciales y 1 Cura.

Figura 13. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 108-222 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (d) Avastina a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas o (c) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Avastina a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 14. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones Balb/c con tumores MI09 (intervalo de 86-149 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 µmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) Gemcitabina a 40 mg/kg, BIW, 5 dosis o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Gemcitabina a 40 mg/kg, BIW, 5 dosis. El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 2 Curas. El tratamiento con Gemcitabina solo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa o Cura.

Figura 15. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones Balb/c con tumores M109 (intervalo de 86-149 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con' ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) Gemcitabina a 40 mg/kg, BIW, 5 dosis o (d) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Gemcitabina a 40 mg/kg, BIW, 5 dosis.

Figura 16. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones Balb/c con tumores M109 (intervalo de 99-164 rara3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) Tarceva (es decir erlotinib) a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Tarceva a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas. El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 0 respuestas parciales, 0 respuestas completas, y 0 Curas. El tratamiento con Tarceva solo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa, ó Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 3 respuestas parciales y 1 Cura.

Figura 17. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones Balb/c con tumores M109 (intervalo de 99-164 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) Tarceva a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas o (d) EC145 a 1 µ?t???/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Tarceva a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas.

Figura 18. El isobolograma (IC8o) muestra que la actividad in vitro de EC145 y Tarceva contra células tumorales KB es sinérgico.

Figura 19. El isobolograma (valores IC50) muestra que la actividad in vitro de Tarceva y EC145 frente a células KB son aditivos.

Figura 20. El isobolograma (valores IC8o) muestra que la actividad in vitro de Tarceva y EC145 frente a células KB es sinérgico.

Figura 21. Volumen tumoral (promedio) medido para ratones nu/nu con tumores KB que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas; o (A) Tarceva a 100 mg/kg, BIW por 3 semanas o (?) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas + Tarceva a 100 mg/kg, BIW por 3 semanas.

Figura 22. Cambio de porcentaje en peso (promedio) medido para ratones nu/nu con tumores KB que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 3 semanas; o (A) Tarceva a 100 mg/kg, BIW por 3 semanas o (?) EC145 a 1 µp???/kg/inyección, TIW por 3 semanas + Tarceva a 100 mg/kg, BIW por 3 semanas.

Figura 23. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 114-177 rara3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas o (d) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas. El tratamiento con EC145 solamente dio como resultado 1 respuesta parcial, 0 respuestas completas, y 0 Curas. El tratamiento con DOXIL solo dio como resultado 1 respuesta parcial, 2 respuestas completas, y 1 Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 1 respuesta completa y 4 Curas .

Figura 24. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 114-177 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas o (d) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 25. Volumen tumoral (promedio para los cuatro animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 123-205 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) vindesina a 1 mg/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas (4/4 P ) o (d) vindesina a 1 mg/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas (0/4 PR) . La vindesina sin conjugar antagoniza la actividad de Doxil.

Figura 26. Ganancia de peso en porcentaje (promedio para los cuatro animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 114-177 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) vindesina a 1 mg/kg/inyección, TI por 2 semanas; o (c) DOXIL a 5 mg/kg, BI por 2 semanas o (d) vindesina a 1 mg/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas. La vindesina sin conjugar antagoniza la actividad de Doxil.

Figura 27. Volumen tumoral (promedio para los cuatro animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 122-192 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) DOXIL a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas (4/4 PR) ; o (c) DAVLBH a 0.75 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas o (d) DAVLBH a 0.75 µp??? /kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas (0/4 PR) . DAVLBH sin conjugar antagoniza la actividad de Doxil.

Figura 28. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cuatro animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 114-177 mm3) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) DOXIL a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas; o (c) DAVLBH a 0.75 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas o (d) DAVLBH a 0.75 µ???? /kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 5 mg/kg, BIW por 2 semanas .

Figura 29. Isobolograma (valores IC8o) para actividad in vitro (tratamiento continuo de 72 horas) de combinaciones de Vindesina y Doxorubicina muestran antagonismo .

Figura 30. Isobolograma (valores IC80) para actividad in vitro (tratamiento continuo de 72 horas con Doxorubicina, 2 horas de tratamiento con EC145) de combinaciones de EC145 y Doxorubicina muestran sinergismo.

Figura 31. Citotoxicidad in vitro de Doxorubicina (IC50 34 nM) y Doxil (3900 n ) hacia 'células tumorales KB .

Figura 32. Isobolograma (valores IC50) para actividad in vitro para una combinación de EC145 y Doxil contra células tumorales KB .

Figura 33. Isobolograma (valores IC60) para actividad in vitro para una combinación de EC145 y Doxil contra células tumorales KB.

Figura 34. Isobolograma (valores IC8o) para actividad in vitro para una combinación de EC145 y Doxil contra células tumorales KB .

Figura 35. Isobolograma (valores IC50) para actividad in vitro para una combinación de tratamiento EC145 (2 horas) seguido por tratamiento con Doxorubicina (24 horas) contra células tumorales KB .

Figura 36. Isobolograma (valores IC50) para actividad in vi tro para una combinación de tratamiento con Doxorubicina (24 horas) seguido por tratamiento con EC145 (2 horas) contra células tumorales KB.

Figura 37. Isobolograma (valores IC8o) para actividad in vitro para una combinación de tratamiento EC145 (2 horas) seguido por tratamiento con Doxorubicina (24 horas) contra células tumorales KB.

Figura 38. Isobolograma (valores IC8o) para actividad in vitro para una combinación de tratamiento con Doxorubicina (24 horas) seguido por tratamiento con EC145 (2 horas) contra células tumorales KB.

Figura 39. Isobolograma (valores IC8o) para actividad in vitro para una combinación de tratamiento con Doxorubicina y tratamiento EC145 frente a células de linfoma J64556.

Figura 40. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones con tumores M109 que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 µ?t???/kg/inyección, TIW por 2 semanas (3/5 cures) ; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas (3/5 cures) o (d) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas (5/5 cures) .

Figura 41. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones con tumores M109 que fueron (a) sin tratar; O tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 42. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones con tumores IGR-OV1 que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas o (d) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas .

Figura 43. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones con tumores IGR-OV1 que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas o (d) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 44. Volumen tumoral (promedio) medido para ratones mu/mu con tumores OV90 que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas; o (A) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 3 semanas o (?) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 3 semanas.

Figura 45. Cambio de porcentaje en peso (promedio) medido para ratones mu/mu con tumores OV90 que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas; o ( A ) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 3 semanas o (?) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 3 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 3 semanas.

Figura 46. Volumen tumoral (promedio) medido para ratones con tumores L1210A (leucemia linfocítica) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas o (d) EC145 a 2 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 47. Cambio de porcentaje en peso (promedio) medido para ratones con tumores L1210A (leucemia linfocítica) que fueron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 mol/kg/ inyección, TIW por 2 semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas o (d) EC145 a 2 µmol/kg/inyección/ TIW por 2 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 2 semanas.

Figura 48. Tratamiento de células tumorales KB-DR300 resistentes a EC145 con (a) EC145 + 1 mM de Lapatinib o (b) EC145 + 1 µ? de Lapatinib + 100 µ? de ácido fólico. Se cree que el eflujo pgp bloquea lapatinib de DALVBH de células KB-DR200.

Figura 49. Lapatinib tiene poca actividad contra tres líneas celulares (a) células RAW (ICS0 2.85 µ?) , (b) células IGR-OV1 (IC50 1.75 µ?) , y células OV90 (IC50 2.46 µ?) . 3 Figura 50. KB-DR300, NCI/ADR, y NCI . ADR-C12 que tienen alta expresión pgp resistente a alcaloides vinca. MRD-16 reconoce un epítopo pgp externo. El análisis MRK-16 (a-P-gp) FACS en líneas celulares KB-DR300, NCI/ADR, y NCI.ADR-C12.

Figura 51. Co- tratamiento de líneas celulares resistentes a vinca (NCI/ADR-C12 y KB-DR300) con lapatinib y EC145 aumentan la actividad de EC145. La actividad de EC145 en células no resistentes (células de tumor KB) parece que se ve inafectado por la adición de lapatinib.

Figura 52. Perfiles de concentración sérica en estado estable medio para varias dosis diarias de lapatinib. La sinergia aparece en concentraciones de lapatinib en estado estable plasmático humano de aproximadamente 1 µ?.

Figura 53. Lapatinib aumenta la actividad de EC145 en células de tumor IGR-OV1 y OV90. (a) Células IGR-OV1 tratadas con EC145 (IC50 3.58 nM) , (b) células IGR-OV1 tratadas con EC145 + Lapatinib (IC50 0.73 nM) , (c) células OV90 tratadas con EC145 (IC50 329 nM) , y (d) células OV90 tratadas con EC145 + Lapatinib (IC50 179 nM) .

Figura 54. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 109-188 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o ( A ) Lapatinib a 100 mg/kg, BID qd5 por 2 semanas o (T) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TI por 2 semanas + Lapatinib a 100 mg/kg, BID qd5 por 2 semanas .

Figura 55. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 109-188 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Lapatinib a 100 mg/kg, BID qd5 por 2 semanas o (?) EC145 a 1 pmol/kg/ inyección, TIW por 2 semanas + Lapatinib a 100 mg/kg, BID qd5 por 2 semanas.

Figura 56. Volumen tumoral (promedio para los cinco animales en 'cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 109-188 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Alimta a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas o (Y) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Alimta a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas. Todos los cohortes recibieron 5MTHF = 320 g/kg (705 nmol/kg) a través de cebado oral durante los días de estudio 2-19 (5 días antes del tratamiento al último día del tratamiento) .

Figura 57. Cambio de porcentaje en peso (promedio para los cinco animales en cada grupo de tratamiento) medido para ratones nu/nu con tumores KB (intervalo de 109-188 mm3) que fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a l mol/kg/inyección, TIW por 2 semanas; o (A) Alimta a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas o (?) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 2 semanas + Alimta a 100 mg/kg, qd5 por 2 semanas. Todos los cohortes recibieron 5MTHF = 320 g/kg (705 nmol/kg) a través de cebado oral durante los días de estudio 2-19 (5 días antes del tratamiento al último día del tratamiento) .

Figura 58. Isobolograma (valores IC50) para actividad in vitro para una combinación de EC145 (2 horas de tratamiento) y Vinorelbina (72 horas de tratamiento) contra células tumorales KB.

Figura 59. Isobolograma (valores IC60) para actividad in vitro para una combinación de EC145 (2 horas de tratamiento) y Vinorelbina (72 horas de tratamiento), contra células tumorales KB.

DEFINICIONES Como se utiliza en la presente, el término "inhibición del crecimiento tumoral" significa la reducción en el tamaño de tumor, la completa desaparición de un tumor, o el crecimiento de un tumor del paciente de menos del 30% sobre el curso de la terapia con EC145 y el fármaco quimioterapéutico adicional.

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término topotecán significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 123948-87-8, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión en una forma ionizada o una forma no ionizada.

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término cisplatina significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 15663-27-1; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión.

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término carboplatina significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 41575-94-4; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión.

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término irinotecán significa una composición que comprende el 4 agente quimioterapéutica- identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 100286-90-6, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión.

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término bevacizumab significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 216974-75-3, o una de sus .sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión .

Como se utiliza en la presente, en el contexto de ún método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término gemcitabina significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 95058-81-4, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión .

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término erlotinib significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 183321-74-6, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión.

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término lapatinib significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 231277-92-2, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión .

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición f rmacéutica, una combinación, o un kit, el término pemetrexed significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 137281-23-3, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión.

Como se utiliza en la presente, en el contexto de un método del tratamiento, un uso, una composición, una composición farmacéutica, una combinación, o un kit, el término vinorelbina significa una composición que comprende el agente quimioterapéutico identificado por el número de registro de los Compendios Químicos 71486-22-1; o una de sus sales farmacéuticamente aceptables; y el agente quimioterapéutico puede estar presente en solución o suspensión .

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Varias modalidades de la invención se describen a través de las cláusulas enumeradas a continuación y cada una de las modalidades des.critas en la sección de la Descripción ' Detallada de esta solicitud se aplica a cada una de las siguientes modalidades: : 1. Un método para el tratamiento de un cáncer, el método comprende el paso de administrar EC145 en combinación Con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 2. El método de la cláusula 1 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de doxorubicina, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 3. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 4. El método de la cláusula 1 o 2 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 5. El uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato. 6. El uso de la cláusula 5 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de doxorubicina, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed . 7. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 8. El uso de la cláusula 5 o 6 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 9. El uso de EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 10. El uso de la cláusula 9 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de doxorubicina, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed . 11. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el agente quimioterapéutico es carboplatina. 12. El uso de la cláusula 9 o 10 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 13. El método o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde las células que expresan el receptor de folato son células tumorales epiteliales. 14. El método o uso de la cláusula 13 en donde el tumor epitelial es un tumor de ovario, de endometrio o de pulmón de célula no pequeña. 15. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 14 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico. 16. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor primario. 17. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 13 a 15 en donde el tumor es un tumor metastático. 18. El método o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el agente quimioterapéutico se administra a una dosis que es de 50-80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico. 19. Una composición farmacéutica que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 20. La composición de la cláusula 19 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de doxorubicina, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed . 21. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde él agente quimioterapéutico es carboplatina. 22. La composición de la cláusula 19 a 20 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 23. Una composición que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis para tratar cáncer. 24. La composición de la cláusula 23 en donde el uno o más agentes quimioterapéuticos se seleccionan del grupo que consiste de doxorubicina, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 25. La composición de la cláusula 23 o 24 en donde él agente quimioterapéutico es carboplatina. 26. La composición de la cláusula 23 o 24 en donde el agente quimioterapéutico es bevacizumab. 27. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico está en una forma de dosificación parenteral . 28. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde la forma de dosificación se selecciona del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal . 29. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico es una composición y en donde la composición además comprende un portador farmacéuticamente aceptable . 30. La composición, método o uso de la cláusula 29 en donde el portador farmacéuticamente aceptable es un portador líquido. 31. La composición, método o uso de la cláusula 30 en donde el portador líquido se selecciona del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones. 32. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva. 33. La composición, método, o uso de la cláusula 32 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 1 ng a aproximadamente 1 mg por kilogramo del peso corporal. 34. La composición, método, o uso de la cláusula 3:3 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 100 ng a aproximadamente 500 pg por kilogramo del peso corporal. 35. La composición, método, o uso de la cláusula 34 en donde la cantidad eficaz está en el intervalo de aproximadamente 100 ng a aproximadamente 50 pg por kilogramo del peso corporal. 36. La composición, método, o uso de cualquiera de las cláusulas anteriores en donde el tumor es un tumor ovárico resistente al platino. 37. Un método para el tratamiento de un cáncer, el método comprende los pasos de administrar EC145 al paciente; y administrar al paciente uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 38. El uso de EC145 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato. 39. El uso de EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de células cancerígenas que expresan al receptor de folato en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 40. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 39 en donde el agente quimioterapéu ico adicional se selecciona del grupo que consiste de doxorubicina, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed. 41. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 40 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de carboplatina y bevacizumab . 42. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 41 en donde el agente quimioterapéutico adicional es carboplatina . 43. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 41 en donde el agente quiraioterapéutico adicional es bevacizumab. 44. El uso de cualquiera de las cláusulas 38 a 43 en donde las células que expresan el receptor de folato son células tumorales epiteliales. 45. El uso de la cláusula 44 en donde el tumor epitelial es un tumor de ovario, del endometrio, o de pulmón de célula no pequeña. 46. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico . 47. El uso de la cláusula 45 en donde el tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor de pulmón de célula no pequeña. 48. El método de conformidad con cualquiera de las cláusulas 37 o 40 a 43 en donde el cáncer es un cáncer epitelial . 49. El método de la cláusula 48 en donde el cáncer epitelial es un cáncer de ovario, de endometrio, o de pulmón de célula no pequeña. 50. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer ovárico. 51. El método de la cláusula 49 en donde el cáncer epitelial es un cáncer de pulmón de célula no pequeña. 52. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden un tumor primario. 53. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 51 en donde el cáncer o las células cancerígenas comprenden células de tumor metastático. 54. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 53 en donde el agente quimioterapéutico adicional se administra a una dosis de 50 a 80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico. 55. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 54 en donde el EC145 y el agente o agentes quimioterapéuticos adicionales están en forma de dosificación parenteral . 56. El método o uso de la cláusula 55 en donde las formas de dosificación se seleccionan independientemente del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal . 57. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 56 en donde el EC145 es una composición y el agente quimioterapéutico adicional es una composición y en donde la composición además comprende portadores farmacéuticamente aceptables . 58. El método o uso de la cláusula 57 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos. 59. El método o uso de la cláusula 58 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, esteres, amidas y una de sus combinaciones. 60. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 59 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico se administran en cantidades terapéuticamente eficaces. 61. El método o uso de la cláusula 60 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente l g/m2 a aproximadamente 500 mg/m2 del área superficial corporal . 62. El método o uso de la cláusula 61 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 1 pg/m2 a aproximadamente 300 mg/m2 del área superficial corporal. 63. El método o uso de la cláusula 60 en donde las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 100 pg/kg del peso corporal del paciente. 64. El método de la cláusula 50 en donde el cáncer es un cáncer ovárico resistente al platino. 65. El uso de la cláusula 46 en donde el tumor es un tumor ovárico resistente al platino. 66. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a. 65 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o empaques estériles. 67. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 66 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso. 68. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 67 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . 69. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 68 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles . 70. Una composición o combinación que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 71. Una composición o combinación para tratar cáncer que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis, inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 72. Un kit que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición . de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. 73. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 72 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de doxorubicina, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed . 74. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 73 en donde el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de carboplatina y bevacizumab. 75. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente quimioterapéutico adicional es carboplatina. 76. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 74 en donde el agente quimioterapéutico adicional es bevacizumab. 77. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 76 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en forma de dosificación parenteral. 78. La composición, combinación, o kit de la cláusula 77 en donde las formas de dosificación se seleccionan independientemente del grupo que consiste de intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal , intravenosa, e intratecal. 79. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 78 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en composiciones armacéuticas y las composiciones además comprenden portadores farmacéuticamente aceptables. 80. La composición, combinación, o kit de la cláusula 79 en donde los portadores farmacéuticamente aceptables son portadores líquidos. 81. La composición, combinación, o kit de la cláusula 80 en donde los portadores líquidos se seleccionan independientemente del grupo que consiste de salina, glucosa, alcoholes, glicoles, ésteres, amidas y una de sus combinaciones . 82. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 81 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico están en cantidades terapéuticamente eficaces . 83. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 82 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o empaques estériles. 84. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso. 85. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 83 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 95% con base en el porcentaje en peso. 86. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 85 en donde el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible . 87. La composición, combinación, o kit de cualquiera de las cláusulas 70 a 86 en donde el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles. 88. El método o uso de cualquiera de las cláusulas 37 a 59 en donde el EC145 y/o el agente quimioterapéutico adicional se administran a dosis inferiores que sus dosis tolerables máximas.

En cualquiera de las varias modalidades descritas en la presente, las siguientes características pueden estar presentes cuando es aplicable, proporcionando modalidades adicionales de la invención.

Para todas las modalidades, también se contempla cualquier combinación aplicable de modalidades. Cualquier combinación aplicable de las modalidades antes descritas se considera como estando de acuerdo con la invención.

En varias modalidades de los métodos, usos, composiciones, combinaciones, combinaciones farmacéuticas, o kits descritos en la presente, el EC145 puede administrarse solo o en combinación con uno o más de los agentes quimioterapéuticos adicionales (cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, o pemetrexed, o con cualquier combinación de estos agentes) . En varias modalidades descritas en la presente, los otros agentes quimioterapéuticos pueden seleccionarse de un fármaco que tiene un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis. Se aprecia que el otro fármaco puede tener más de un modo de acción. En una modalidad ilustrativa, el EC145 puede administrarse en combinación con al menos un agente quimioterapéutico seleccionado del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed.

En otras modalidades de las composiciones, métodos, usos, composiciones farmacéuticas, combinaciones, o kits descritos en la presente, las sales farmacéuticamente aceptables de los conjugados descritos en la presente se describen. Las sales farmacéuticamente aceptables de los conjugados descritos en la presente incluyen las sales de adición y base de ácido de las mismas.

Las sales de adición de ácido adecuadas se forman de ácidos que forman sales no tóxicas. Los ejemplos ilustrativos incluyen las sales de acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, edisilato, esilato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, clorhidrato/cloro, bromhidrato/bromo, yodhidrato/yodo, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/fosfato ácido/fosfato diácido, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato y trifluoroacetato .

Las sales básicas adecuadas de los conjugados descritos en la presente se forman de bases que forman sales no tóxicas. Los ejemplos ilustrativos sales de arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y zinc. Hemi-sales de ácidos y bases también pueden formarse, por ejemplo, sales de hemi-sulfato y hemi-calcio .

En una modalidad, los conjugados o los agentes ,quimioterapéuticos adicionales descritos en la presente pueden administrarse como una formulación en asociación con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables. Los portadores pueden ser excipientes . La selección del portador en un gran grado dependerá de los factores tales como el modo de administración particular, el efecto del portador en la solubilidad y la estabilidad, y la naturaleza de las formas de dosificación. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para el suministro de conjugados o agentes quimioterapéuticos adicionales descritas en la presente y métodos para su preparación serán fácilmente evidentes para el experto en la técnica. Tales composiciones y métodos para su preparación pueden encontrarse, por ejemplo, en Remington: The Science & Practice of Pharmacy, 21a. Edición (Lippincott Williams & Wilkins, 2005), incorporada aquí por referencia.

En un aspecto ilustrativo, un portador farmacéuticamente aceptable incluye cualquiera y todos los solventes, medios de dispersión, de recubrimiento, agentes antibacterianos y antifúngicos , agentes isotónicos y de retraso de la absorción, y similares, y sus combinaciones, que son fisiológicamente compatibles. En algunas modalidades, el portador es adecuado para administración parenteral. Los portadores farmacéuticamente aceptables incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para preparación extemporánea de las soluciones o dispersiones inyectables estériles. Los compuestos activos complementarios también pueden incorporarse en las composiciones de la invención.

En varias modalidades, las formulaciones líquidas pueden incluir suspensiones y soluciones. Tales formulaciones pueden comprender un portador, por ejemplo, agua, etanol, polietilenglicol , propilenglicol , metilcelulosa, o un aceite adecuado, y uno o más agentes emulsionantes y/o agentes de suspensión. Las formulaciones líquidas también pueden prepararse a través de la reconstitución de un sólido, por ejemplo, de una almohadilla.

En una modalidad, una suspensión acuosa puede contener los materiales activos mezclados con los excipientes apropiados. Tales excipientes con agentes de suspensión, por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma de acacia; agentes de dispersión o humectación que pueden ser fosfatidas 1 de existencia natural, por ejemplo, lecitina; un producto de condensación de un óxido de etileno con un ácido graso, por ejemplo, estearato de polioxietileno; un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenoxiacetanol ; un producto de condensación de óxido de etileno con un éter parcial derivado de ácidos grados y un hexitol tal como monooleato de polioxietilen sorbítol; o un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de ácidos grasos y anhídridos hexitol, por ejemplo, monooleato de polioxietilen sorbitán. Las suspensiones acuosas pueden también contener uno o más conservantes, por ejemplo, ácido ascórbico, etilo, n-propilo, o p-hidroxibenzoato; o uno o más agentes de coloración.

En una modalidad ilustrativa, los polvos y granulos dispersables adecuados para preparación de una suspensión acuosa a través de la adición de agua proporcionan al ingrediente activo mezclado con un agente de dispersión o humectación, agente de suspensión y uno o más conservantes. Los excipientes adicionales, por ejemplo, agentes de coloración, también pueden estar presentes.

Los agentes emulsionantes pueden ser gomas de existencia natural, por ejemplo, goma de acacia o goma de tragacanto; fosfatidas de existencia natural, por ejemplo, lecitina de frijol de soja; y ésteres que incluyen ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos hexitol, por ejemplo, mono-oleato de sorbitán, y productos de condensación de tales ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo, monooleato de polioxietilen sorbitán.

En otras modalidades, los agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, sorbitol o cloruro de sodio pueden incluirse en la composición. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede obtenerse incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina.

En un aspecto, se describe un conjugado o agente quimioterapéutico adicional en la presente que puede administrarse directamente en la corriente sanguínea, en el músculo, o en un órgano interno. Las rutas adecuadas para tal administración parenteral incluyen intravenosa, intraarterial , intraperitoneal , intratecal, epidural, intracerebroventricular, intrauretral , intraesternal, intracraneal, intratumoral , intramuscular y subcutánea. Los medios adecuados para administración parenteral incluyen inyectores de aguja (incluyendo micro-agujas) , inyectores sin aguja y técnicas de infusión.

En un aspecto ilustrativo, las formulaciones parenterales son típicamente soluciones acuosas que pueden contener portadores o excipientes tales como sales, carbohidratos y agentes reguladores del pH (preferiblemente a un pH de 3 a 9) , pero, para algunas aplicaciones, pueden ser más adecuadamente formuladas como una solución no acuosa estéril o como una forma seca a ser utilizada junto con un vehículo adecuado tal como agua sin pirógeno, estéril. En otras modalidades, cualquiera de las formulaciones líquidas descritas en la presente puede adaptarse para administración parenteral de los conjugados o los agentes quimioterapéuticos adicionales descritos en la presente. La preparación de formulaciones parenterales bajo condiciones estériles, por ejemplo, a través de liofilización bajo condiciones estériles, pueden fácilmente obtenerse utilizando técnicas farmacéuticas estándares bien conocidas por el experto en la técnica. EC145, por ejemplo, puede liofilizarse a través del método descrito en la Solicitud de E . U. A. No. de Serie 61/474,428, incorporada aquí por referencia. En otra modalidad, el EC145 puede estar presente como un liofilizado reconstituido. En una modalidad, la solubilidad de un conjugado o del agente quimioterapéutico adicional utilizado en la preparación de una formulación parenteral puede aumentarse a través del uso de técnicas de formulación apropiadas, tales como la incorporación de aceites potenciadores de la solubilidad. Las formulaciones EC145 se describen en la Solicitud de E. U. A. No. de Serie 61/474,428, PCT/USll/037134 , y O 2011/014821, cada una incorporada aquí por referencia en su totalidad.

En varias modalidades, las formulaciones para administración parenteral pueden formularse para la liberación inmediata y/o modificada. En un aspecto ilustrativo, los agentes activos de la invención pueden administrarse en una formulación de liberación con el tiempo, por ejemplo en una composición que incluye un polímero de lenta liberación. Los compuestos activos pueden prepararse con portadores que protegerán al compuesto contra la rápida liberación, tales como las formulaciones de liberación controlada, incluyendo implantes y sistemas de suministro microencapsulados . Los polímeros biocompatibles , biodegradables pueden utilizarse, tales como acetato de etilen vinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres , ácido poliláctico, copolímeros polilácticos poliglicólicos (PGLA) . Los métodos para la preparación de tales formulaciones son generalmente conocidos por el experto en la técnica. En otra modalidad, los conjugados o los agentes quimioterapéuticos adicionales descritos en la presente o las composiciones que comprenden los conjugados o los agentes quimioterapéuticos adicionales pueden administrarse continuamente, cuando es apropiado.

En una modalidad, se proporciona un kit. Si una combinación de compuestos activos se va a administrar, pueden combinarse dos o más composiciones farmacéuticas en la forma de un kit adecuado para la administración secuencial o la co- 5 administración de las composiciones. Tal kit comprende dos o más composiciones farmacéuticas separadas, al menos una de las cuales contiene un conjugado descrito en la presente, y medios para retener de manera separada las composiciones, tales como un envase, una botella dividida, o un paquete de aluminio dividido. En otra modalidad, las composiciones que comprenden el conjugado o el agente quimioterapéutico adicional descrito en la presente, en un envase que tiene una etiqueta que proporciona instrucciones para uso del tratamiento del conjugado es provista. Las instrucciones también son provista para utilizar el agente quimioterapéutico adicional a ser administrado (por ejemplo, cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, o pemetrexed, o sus combinaciones) .

En una modalidad, las soluciones inyectables estériles pueden prepararse mediante la incorporación del agente activo en la cantidad requerida en un solvente apropiado con uno o una combinación de ingredientes descritos anteriormente, según se requiera, seguido por filtración estéril. Típicamente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión y cualquier ingrediente adicional de los descritos anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son secado al vacío y secado por enfriamiento que producen un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional de una de sus soluciones filtradas estériles previas, o los ingredientes pueden filtrarse estériles juntos.

La composición puede formularse como una solución, microemulsión, liposoma, u otra estructura ordenada adecuada para una alta concentración del fármaco. El portador puede ser un solvente o un medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol, y polietilenglicol líquido, y similares) , y sus mezclas adecuadas. En una modalidad, la fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un revestimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersión y a través del uso de agentes tensioactivos .

Cualquier régimen efectivo para administrar el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional puede utilizarse. Por ejemplo, el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional (es decir, fármaco) pueden administrarse como dosis individuales, o pueden dividirse y administrarse como un régimen diario multi-dosis. Además, un régimen estratificado, por ejemplo, de uno a cinco días por semana puede utilizarse como una alternativa para el tratamiento diario, y para el propósito de los métodos descritos en la presente, tales como el régimen diario intermitente o estratificado se considera como equivalente para un tratamiento de cada día y se contempla. En una modalidad ilustrativa el paciente se trata con múltiples inyecciones del EC145 y el agente quimioterapéutico adicional para eliminar el tumor. En una modalidad, el paciente se inyecta múltiples veces (preferiblemente desde 2 hasta aproximadamente 50 veces) con el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional, por ejemplo, a intervalos de 12-72 horas o a intervalos de 48-72 horas. Las inyecciones adicionales del EC145 y el fármaco adicional pueden administrarse al paciente a un intervalo de días o meses después de la(s) inyección (s) inicial y las inyecciones adicionales pueden evitar la recurrencia del cáncer. En otra modalidad, el régimen para el agente quimioterapéutico adicional es diferente del de para EC145.

La dosis diaria unitaria del EC145 y el agente quimioterapéutico adicional puede variar significativamente dependiendo de la condición del paciente, el estado de énfermedad que se está tratando, la pureza del compuesto y su ruta de administración y distribución tisular, y la posibilidad del co-uso de otros tratamientos terapéuticos, tal como terapia por radiación. La cantidad eficaz a ser administrada en pacientes se basa en un área superficial corporal, la masa, y la evaluación del médico de la condición del paciente. Las dosis efectivas pueden estar en el intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 1 ng/kg a aproximadamente 1 mg/kg, de aproximadamente 1 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg, y de aproximadamente 1 pg/kg a aproximadamente 100 pg/kg. Las dosis se basan en el peso promedio del paciente de aproximadamente 70 kg, y los kg son kg del peso corporal del paciente (masa) .

El EC145 y el agente quimioterapéutico adicional cada uno puede administrarse en una dosis de aproximadamente 1.0 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 10 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 50 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 100 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 500 ng/kg a aproximadamente 1000 pg/kg, de aproximadamente 1 ng/kg a aproximadamente 500 pg/kg, de aproximadamente 1 ng/kg a aproximadamente 100 pg/kg, de aproximadamente 1 pg/kg a aproximadamente 50 pg/kg, de aproximadamente 1 pg/kg a aproximadamente 10 pg/kg, de aproximadamente 5 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg, de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 100 pg/kg, de aproximadamente 20 pg/kg a aproximadamente 200 pg/kg, de aproximadamente 10 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg, o de aproximadamente 50 pg/kg a aproximadamente 500 pg/kg. La dosis total puede administrarse en dosis individual o dividida y puede, a discreción del médico, caer fuera del intervalo típico dado en la presente.

Estas dosificaciones se basan en el peso promedio del paciente en aproximadamente 70 kg y "kg" son kilogramos del peso corporal del paciente. El médico será fácilmente capaz de determinar las dosis para los sujetos cuyo peso cae fuera de este intervalo, tales como niños y personas mayores.

En otra modalidad, el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional cada uno puede administrarse en una dosis de aproximadamente 1 g/m2 a aproximadamente 500 mg/m2, de aproximadamente 1 pg/m2 a aproximadamente 300 mg/m2, o de aproximadamente 100 µq/m2 a aproximadamente 200 mg/m2. En otras modalidades, el EC145 y el fármaco adicional cada uno puede administrarse en una dosis de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 500 mg/m2, de aproximadamente l mg/m2 a aproximadamente 300 mg/m2, de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 200 mg/m2, de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 100 mg/m2, de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 50 mg/m2, o de aproximadamente 1 mg/m2 a aproximadamente 600 mg/m2. La dosis total puede administrarse en dosis individual o dividida y puede, a discreción del médico, caer fuera del intervalo típico dado en la presente. Estas dosis se basan en m2 del área superficial corporal.

Los conjugados y los agentes quimioterapéuticos descritos en la presente pueden contener uno o más centros quirales, o por el contrario pueden ser capaces de existir como estereoisómeros múltiples. Por consiguiente se entiende que la presente invención incluye estereoisómeros puros así como mezclas de estereoisómeros, tales como enantiómeros, diastereómeros , y mezclas enantioméricas diastereoméricamente enriquecidas. Los conjugados y los agentes quimioterapéuticos descritos en la presente pueden ser capaces de existir como isómeros geométricos. Por consiguiente, se entiende que la presente invención incluye isómeros geométricos puros o mezclas de isómeros geométricos .

Se aprecia que los conjugados y los agentes quimioterapéuticos descritos en la presente pueden existir en formas no solvatadas así como formas solvatadas, incluyendo formas hidratadas. En general, las formas solvatadas son equivalentes a formas no solvatadas y están abarcadas dentro del alcance de la presente invención. Los conjugados y los agentes quimioterapéuticos descritos en la presente pueden existir en múltiples formas cristalinas o amorfas. En general, todas formas físicas son equivalentes a los usos contemplados por la presente invención y pretenden estar dentro del alcance de la presente invención.

En otra modalidad, las composiciones y/o formas de dosificación para administración de EC145 o el agente quimioterapéutico adicional se preparan de compuestos con una pureza de al menos aproximadamente 90%, o aproximadamente 95%, o aproximadamente 96%, o aproximadamente 97%, o aproximadamente 98%, o aproximadamente 99%, o aproximadamente 99.5%. En otra modalidad, las composiciones y/o formas de dosificación para administración de EC145 o del fármaco adicional se preparan de compuestos con una pureza de al menos 90%, o 95%, o 96%, O 97%, o 98%, O 99%, O 99.5%.

Como se utiliza en la presente, las determinaciones de la pureza pueden basarse en el porcentaje en peso, el porcentaje en mol, y similares. Además, las determinaciones de la pureza pueden basarse en la ausencia o ausencia sustancial de ciertos compuestos predeterminados, tales como, pero no limitándose a, ácido fólico, componentes que contienen disulfuro sin contener el fármaco vinca, productos de oxidación, componentes de disulfuro que no contienen un folato, y similares. También se entiende que las determinaciones de la pureza son aplicables a soluciones de los compuestos y composiciones purificadas a través de los métodos descritos en la presente. En estos casos, las mediciones de la pureza, incluyendo las mediciones del porcentaje en peso y el porcentaje en mol, se relacionan con los componentes de la solución exclusivos del solvente. En otra modalidad, el EC145 se proporciona como un envase o paquete estéril.

La pureza del EC145 o del fármaco adicional puede medirse utilizando cualquier técnica convencional, incluyendo varias técnicas cromatográficas o espectroscópicas , tales como cromatografía líquida de alta presión o alto rendimiento (HPLC, por sus siglas en inglés) , espectroscopia de resonancia magnética nuclear, TLC, espectroscopia de absorbencia UV, espectroscopia de fluorescencia, y similar.

Los receptores de vitamina expresados en la superficie, tales como el receptor de folato de alta afinidad, se sobre-expresan en células cancerígenas. Los cánceres epiteliales del ovario, glándula mamaria, colon, pulmón, nariz, garganta y cerebro todos han reportado que expresan niveles elevados del receptor de folato. De hecho, más del 90% de los tumores ováricos humanos se sabe que expresan grandes cantidades de este receptor. Por consiguiente, la terapia de combinación descrita en la presente puede utilizarse para tratar una variedad de tipos celulares tumorales .

La terapia descrita en la presente, puede utilizarse tanto para medicina clínica humana como aplicaciones veterinarias. De esta forma, el animal hospedero que alberga la población de células patogénicas y que trata con la terapia de combinación puede ser un humano (es decir, un paciente) o, en el caso de aplicaciones veterinarias, puede ser un animal de laboratorio, agrícola, doméstico, o silvestre. Los métodos descritos en la presente pueden aplicarse a humanos, animales de laboratorio tales como roedores (por ejemplo, ratones, ratas, hámsteres, etc.), conejos, monos, chimpancés, animales domésticos tales como perros, gatos, y conejos, animales agrícolas tales como vacas, caballos, puercos, ovejas, cabras, y animales salvajes en cautiverio tales como osos, pandas, leones, tigres, leopardos, elefantes, cebras, jirafas, gorilas, .delfines, y ballenas.

En un aspecto, la respuesta al tratamiento se caracterizó utilizando el criterio de Evaluación de Respuesta en el Criterio de Tumores Sólidos (RECIST, por sus siglas en inglés) . Ilustrativamente, el criterio ha sido adaptado del NHO Handbook (3) original, tomando en cuenta las mediciones del diámetro más largo de todas las lesiones objetivo: respuesta completa, (CR, por sus siglas en inglés) — la desaparición de todas lesiones objetivo; respuesta parcial (PR, por sus siglas en inglés) — por lo menos un 30% de disminución en la suma del diámetro más largo de las lesiones objetivo, tomando como referencia el diámetro más largo de la suma de la línea base; la enfermedad estable (SD, por sus siglas en inglés) — ni un encogimiento suficiente para calificar para PR ni un aumento suficiente para calificar para PD, tomando como referencia el diámetro más largo de la suma más pequeña desde que se inició el tratamiento; enfermedad progresiva (PD, por sus siglas en 7 inglés) — al menos un 20% de aumento en la suma del diámetro más largo de las lesiones objetivo, tomando como referencia el diámetro más largo de la suma más pequeña registrada desde el inicio del tratamiento o la aparición de una o más nuevas lesiones. Otro criterio incluye el grado de respuesta tumoral general (ORR = CR + PR) , el grado de control de la enfermedad (DCR = CR + PR + SD) , y la supervivencia general '(OS, por sus siglas en inglés) — el tiempo para la muerte de un paciente dado definido como el número de días desde el primer día que un paciente recibió el tratamiento del protocolo a la fecha de la muerte del paciente.

En una modalidad se proporciona un método para el tratamiento de un tumor epitelial que expresa el receptor de folato en un paciente en la necesidad de éste que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de EC145 én combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva del agente quimioterapéutico adicional. El EC145 y el agente quimioterapéutico adicional pueden administrarse simultáneamente en una o múltiples composiciones, o secuencialmente . Otra modalidad es el uso de EC145 en combinación con el agente quimioterapéutico adicional para el tratamiento de un tumor epitelial que expresa el receptor de folato en un paciente. Una modalidad más es el uso de EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento en combinación con el agente quimioterapéutico adicional de un tumor epitelial que expresa el receptor de folato en un paciente.

Para cualquiera de los métodos, usos, composiciones, composiciones f rmacéuticas, combinaciones, o kits descritos en la presente, una modalidad de un tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico, del endometrio o de pulmón de célula no pequeña (NSCLC) . El tratamiento de NSCLC puede ocurrir en cualquier etapa incluyendo la etapa 0, I, II, IIIA, IIIB, o IV. Para cualquiera de los métodos, usos, composiciones, composiciones f rmacéuticas, combinaciones, o kits anteriores, otra modalidad de un tumor epitelial que expresa el receptor de folato es un tumor ovárico. El tumor ovárico puede ser resistente al patino o sensible al platino.

En otra modalidad para cualquiera de los métodos, usos, composiciones, composiciones farmacéuticas, combinaciones, o kits, el EC145 es un compuesto que tiene la fórmula o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. Como se utiliza en la presente, EC145 puede estar presente en solución o suspensión en una forma ionizada, incluyendo una forma protonada.

En una modalidad, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer ovárico resistente a platino en un paciente en la necesidad de éste que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de EC145 en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva del agente quimioterapéutico adicional. En otra modalidad, se proporciona el uso de EC145 en combinación con el agente quimioterapéutico adicional para el tratamiento de cáncer ovárico resistente al platino en un paciente. En otra modalidad, se proporciona el uso de EC145 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento en combinación con el agente quimioterapéutico adicional de cáncer ovárico resistente al platino en un paciente.

Para cualquier método, uso, composición farmacéutica, combinación o kit descrito anteriormente con referencia al tratamiento de cáncer ovárico resistente a platino utilizando EC145 en combinación con el agente quimioterapéutico adicional, una modalidad es una en donde la pureza del EC145 o del fármaco adicional es de al menos 90%. Otra modalidad es una en donde el EC145 o el agente quimioterapéutico adicional son provistos en una formulación líquida estéril acuosa.

En otra modalidad, un método para seleccionar un paciente para el tratamiento se describe en donde el método comprende el paso de administrar al paciente una composición que comprende EC20 combinado con un isótopo de tecnecio como se describe en PCT/US2010/043992 (la estructura EC20 se describe en PCT/US2010/043992 , ahora publicada como O 2011/014821) , la descripción de la cual se incorpora por referencia en la presente en su totalidad, en donde los pacientes se seleccionan para terapia si expresan el receptor de folato a niveles de al menos FR+ (es decir, al menos una lesión expresa el receptor de folato) o FR++ (es decir, todas las lesiones expresan el receptor de folato) . En una modalidad de este procedimiento formador de imágenes, el paciente se inyecta con 0.5 mg de ácido fólico, seguido dentro de 1 a 3 minutos por de 1 a 2 mi de inyección de 0.1 mg de EC20 marcado con de 20 a 25 de mCi de 99mTc y se lleva a cabo la formación de imágenes de 1 a 2 horas después. En una modalidad, los métodos formadores de imágenes se seleccionan del grupo que consiste de formaciones de imágenes planas, SPECT, y SPECT/CT.

En otra modalidad, los métodos, usos, composiciones, composiciones farmacéuticas, combinaciones, o kits descritos en la presente incluyen los siguientes ejemplos. Los ejemplos además ilustran características adicionales de las varias modalidades de la invención descritas en la presente. Sin embargo, se entiende que los ejemplos son ilustrativos y no pretenden construirse como limitantes de otras modalidades de la invención descritas en la presente. Además, se aprecia que las otras variaciones de los ejemplos se incluyen en las varias modalidades de la invención descritas en la presente.

EJEMPLOS MATERIALES El ácido N10-trifluoroacético se compró de Eprova AG, Schaffhausen, Suiza. Los reactivos para síntesis de péptido se compraron de NovaBiochem y Bachem. Las placas de celulosa y las placas de intercambio de ión DEAE se compraron de J.T. Baker. DOXIL® se obtuvo de Ortho Biotech Products, LP, Raritan, NJ. El sodio pemetrexed, Topotecán HCl, HCl de Erlotinib, HCl de Irinotecan, y Topotecán HCL se compraron de A. K. Scientific (Mountain View, CA) . La cisplatina y carboplatina se compraron de Sigma (St. Louis. MO) . Gemzar se compró de Purdue Pharmacy (West Lafayette, IN) METODOS ESTUDIOS DE INHIBICION DE CRECIMIENTO CELULAR Las células KB o J6456 exponencialmente cultivadas se sembraron en placas de 24 cavidades 24 h antes del tratamiento con los f rmacos. Las células se expusieron a concentraciones escalonadas (cuatro duplicados) de EC145 (o vindesina o DAVLBH) o fármaco de combinación (doxorubicina) ya sea solas o en combinación. Las células que recibieron EC145 o EC145 + doxorubicina se pulsaron durante 2 h a 37°C, enjuagaron 4 veces con 0.5 mi del medio y después atraparon en 1 mi de medio fresco o medio fresco + doxorubicina hasta por 72 h. Las células tratadas con vindesina, DAVLBH o doxorubicina sola se trataron por 72 h. Se evaluó un total de cinco concentraciones del fármaco para cada fármaco más un control sin fármaco. Las células después se trataron con medio fresco conteniendo 3H-timidina por 2 h a 37°C. Las células además se lavaron con PBS y trataron con 5% de ácido trifluoroacético helado. Después de 15 min, el ácido trifluoroacético se aspiró y las células se solubilizaron por la adición de 0.25 N de hidróxido de sodio por 15 min a temperatura ambiente. Cada muestra solubilizada se transfirió a recipientes de cintilación conteniendo coctel de cintilación Ecolume y se contaron en un contador de cintilación líquido. Los valores quimio-sensibles se expresaron como la concentración del fármaco que inhibió el crecimiento celular en 80% (IC8o) determinado de las relaciones de concentración-efecto utilizando el prisma GraphPad. Se siguió el mismo protocolo general para medir la actividad in vitro de lapatinib en varias líneas celulares (ver FIGS . 48 y 49) y la actividad in vitro de una combinación de EC145 con lapatinib en células IGR-OV1 y OV90 (ver FIG. 53) . Se utilizó el mismo protocolo general para medir la citotoxicidad de EC145 en la presencia o ausencia de lapatinib en varias líneas celulares que son resistentes a DAVLBH y EC145 (ver FIG. 51) .

EXPERIMENTOS ANTI -TUMOR IN VIVO De cuatro a seis ratones nu/nu hembra de seis semanas de edad (Charles River, Wilmington, MA) o de seis a siete ratones Balb/c hembra de siete semanas de edad (Harían Sprague Dawley, Inc., Indianápolis , IN) o de cuatro a seis ratones DBA hembra de seis semanas de edad (Harían Sprague Dawley, Inc., Indianápolis, IN) se mantuvieron en un ciclo de 12 h de luz -oscuridad estándar y alimentaron ad liJitum con comida deficiente en folato (dieta Harían #TD00434, Harían Teklad, Madison, WI) durante todo el experimento. Se cultivaron células KB nasofaríngeas humanas positivas a FR, células IGR-OV1 de ovario humano, células OV90 de ovario humano y células L1210 de leucemia linfocíticas de ratón singénico continuamente como una monocapa, medio RPMI sin folato (FFRPMI, por sus siglas en inglés) conteniendo 10% de suero de becerro fetal inactivado por calor (HIFCS, por sus siglas en inglés) a 37°C en una atmósfera humidificada con 5% de C02/95% de aire sin antibióticos. Las células de carcinoma de pulmón Madison 109 positivas a Fr singénicas (M109) se generaron de tumores M109 y cultivaron unos cuantos días en FFRPMI conteniendo 10% HIFCS por unos cuantos días antes del implante en los ratones. Las células KB (1 x 106 por ratón nu/nu) , las células M109 (1 x 106 por ratón Balb/c) , las células IGR-OV1 (4 x 106 por ratón nu/nu) o células OV90 (1 x 106 por ratón nu/nu) o células L1210 (2 x 105 por ratón DBA) en 100 µ? se inyectaron en el subcutis del área dorsal media. Los ratones se dividieron en grupos de cinco, y los artículos de prueba se prepararon frescos e inyectaron a través de la vena lateral de la cola bajo condiciones estériles en un volumen de 200 µ? de salina regulada en pH de fosfato (PBS, por sus siglas en inglés) . Los tratamientos intravenosos (i.v.) se iniciaron típicamente cuando los tumores tuvieron aproximadamente 100-200 mm3 en volumen. Los ratones en los grupos de control no recibieron tratamiento. El crecimiento de cada tumor s.c. fue seguido por la medición del tumor tres yeces por semana durante el tratamiento y a continuación dos veces por semana hasta que se obtuvo un volumen de 1500 mm3. Los tumores se midieron en dos direcciones perpendiculares utilizando calibradores Vernier, y sus volúmenes se calcularon como 0.5 x L x 2, en donde L = medición de eje más largo en mm y W = medición del eje perpendicular a L en mm. Como una medición de toxicidad general, se determinaron los cambios en los pesos corporales en el mismo horario como mediciones del volumen tumoral . La supervivencia de los animales se monitoreó diariamente. Los animales que estaban moribundos (o incapaces de alcanzar la comida o agua) se sacrificaron por asfixia con C02. Todos los estudios in vivo se realizaron de acuerdo con las instrucciones de la Asociación de Acreditación Americana para el Cuidado de Animales de Laboratorio.

Para tumores individuales, una respuesta parcial (P ) como se define como regresión del volumen > 50% pero quedando siempre un tumor mensurable (> 2 mm3) . La respuesta completa (CR) se define como la desaparición de la masa tumoral mensurable (< 2 mm3) en algún punto hasta el final del estudio. Una cura se define como una CR sin el recrecimiento del tumor dentro del marco de tiempo del estudio.

ANALISIS DE EFECTOS DE FARMACOS COMBINADOS La sinergia del fármaco se determinó mediante el isobolograma y método de índice de combinación, derivados del principio del efecto medio. Los datos obtenidos de los experimentos inhibidores del crecimiento se utilizaron para llevar a cabo estos análisis. El isobolograma es una representación gráfica de la interacción del fármaco y se forma mediante la selección de una fracción de aniquilación de célula deseada (80% en este caso) y graficando las dosis de fármaco individuales requeridas para generar esa fracción en sus ejes x- e y- respectivos. Después se traza una línea recta para conectar los puntos. Se grafican múltiples combinaciones de concentraciones de fármaco respectivas que obtienen el 80% del efecto inhibidor del crecimiento en el isobolograma. Los puntos de datos de combinación que caen en la línea representan una interacción de f rmaco- fármaco aditiva, mientras los puntos de datos que caen por debajo o arriba de la línea representan sinergismo o antagonismo, respectivamente. El método de índice de combinación es una representación cuantitativa de una interacción de dos fármacos. Para cada combinación de concentraciones de fármaco (por ejemplo: EC145/doxorubicina) [DECi45 (so) / Ddox0ru icina <so)]/ que produce en combinación con el efecto IC80, el índice de combinación (?FIC80) se calcula como sigue: ?FIC8o = (DECI 5 (ß?) ',/ IC8o/ EC145) + DdoxorubiCina (so/ IC80/ doxorubicina) , en donde ICao/ EC145 y IC80/ doxorubicina son las concentraciones de cada fármaco individual que producirá el efecto IC80 si se da solo. Un ?FIC8o de 1 indica un efecto aditivo entre dos agentes, mientras un a ?FIC8o < 1 o ?FIC8o > 1 indica sinergismo o antagonismo, respectivamente. Ver FIGS. 7, 18-20, 29-30, 32-39, y 58-59.

CITOMETRIA DE FLUJO CON EL ANTICUERO MRK- 16 (ANTI-PGP) Las células KB, KB-DR300, N/A-R, N/A-R-C12, A549 Progenitoras & A549-LVFR (~1 x 106 células/muestra) se incubaron con 10 pg/ml de MRK-16 o IgG2a de ratón en 1% de BSA/PBS por lh @ 4°C. Las células se lavaron dos veces con 1% de regulador de pH BSA/PBS e incubaron con 20 µg/ml de Alexa Flúor 488 o 1% de BSA/PBS (control sin tratar) por 1 h @ 4°C. Las células se lavaron con 1% de regulador de pH BSA/PBS y fijaron en 1% de paraformaldehído por 15 min a temperatura ambiente. Las células se volvieron a lavar, se volvieron a suspender en 1% de BSA/PBS, y analizaron en un citómetro de Flujo Beckman Coulter FC-500. Ver FIG. 50.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Carboplatina: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 109-188 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (c) Carboplatina a 50 mg/kg, TIW por 1 semana o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Carboplatina a 50 mg/kg, TIW por 1 semana. Ver FIG. 1 para la respuesta del tumor y FIG. 2 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento solo con Carboplatina dio como resultado 3 respuestas parciales. El tratamiento de combinación dio como resultado 1 respuesta completa y 4 Curas.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Cisplatina: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 120-200 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (d) Cisplatina a 3 mg/kg, BIW por dos semanas o (c) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Cisplatina a 3 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. 3 para la respuesta del tumor y FIG. 4 para él cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento solo con Cisplatina dio como resultado 2 respuestas parciales. El tratamiento de combinación dio como resultado 5 Curas .

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Topotecán: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 144-204 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 ,pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (d) Topotecán a 5 ,mg/kg, TIW por dos semanas o (c) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Topotecán a 5 mg/kg, TIW por dos semanas. Ver FIG. 5 para la respuesta del tumor y FIG. 6 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento solo con Topotecán dio como resultado 3 respuestas parciales y 2 respuestas completas. El tratamiento de combinación dio como resultado 3 respuestas parciales y 2 respuestas completas.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con DOXIL: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 114-177 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas o (d) EC145 a 1 mol/kg/inyección, TIW por dos semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas.

Ver FIG. 23 para la respuesta del tumor y FIG. 24 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento con DOXIL sólo dio como resultado 1 respuesta parcial, 2 respuestas completas, y 1 Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 1 respuesta completa y 4 Curas .

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Irinotecan: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (114-177 mm3 intervalo) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TI por dos semanas; o (c) Irinotecan a 40 mg/kg, BIW por dos semanas o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Irinotecan a 40 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. 10 para la respuesta del tumor y FIG. 11 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento con Irinotecan sólo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuestas completas, o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 1 respuesta completa y 4 Curas.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Avastina: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo 108-222 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o' tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (d) Avastina a 5 mg/kg, BIW por dos semanas o (c) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Avastina a 5 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. ,12 para la respuesta del tumor y FIG. 13 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento con Avastina sólo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa, o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado 4 respuestas parciales y 1 Cura.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Gemcitabina: Ratones Balb/c distribuidos aleatoriamente con tumores MIO 9 (intervalo de 86-149 ratn3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (c) Gemcitabina a 40 mg/kg, BIW, 5 dosis o (d) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Gemcitabina a 40 mg/kg, BIW, 5 dosis. Ver FIG. 14 para la respuesta del tumor y FIG. 15 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento con Gemcitabina sólo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa, o Cura. El tratamiento de combinación dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa, o Cura.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Tarceva (ÍErlotinib) : Ratones Balb/c distribuidos aleatoriamente con tumores M109 (intervalo de 99-164 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (c) Tarceva a 100 mg/kg, qd5 por dos semanas o (d) EC145 a 1 mol/kg/ inyección, TIW por dos semanas + Tarceva a 100 mg/kg, qd5 por dos seman s. Ver FIG. 16 para la respuesta del tumor y FIG. 17 para el cambio en el peso durante el período de tratamiento. El tratamiento con Tarceva sólo dio como resultado ninguna respuesta parcial, respuesta completa, ni Curas. El tratamiento de combinación dio como resultado 3 respuestas parciales y 1 Cura.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Tarceva (Erlotinib) : : Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB fueron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas; o (A) Tarceva a 100 mg/kg, BIW por 3 semanas o (T) EC145 a 1 mol/kg/ inyección, TIW por 3 semanas + Tarceva a 100 mg/kg, BIW por 3 semanas. Ver FIG. 21 para la respuesta del tumor y FIG. 22 el cambio en peso en porcentaje.

EJEMPLO Terapia de Combinación de vindesina sin conjugar con Doxil: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 123-205 mm3) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) vindesina a 1 mg/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (c) DOXIL a 5 mg/kg, BIW por dos semanas o (d) vindesina a 1 mg/kg/inyección, TIW por dos semanas + DOXIL a 5 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. 25 para la respuesta del tumor y FIG. 26 el cambio en peso en porcentaje. El tratamiento con Doxil sólo dio como resultado 4 PR de los 4 animales . El tratamiento de combinación dio como resultado 0 PR de los animales. La vindesina sin conjugar antagoniza la actividad de Doxil.

EJEMPLO Terapia de Combinación de DAVLBH sin conjugar con Doxil: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo de 122-192 mm3) que estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) DOXIL a 5 mg/kg, BIW por dos semanas; o (c) DAVLBH a 0.75 mol/kg/inyección, TIW por dos semanas o (d) DAVLBH a 0.75 pmol /kg/inyección, TIW por dos semanas + DOXIL a 5 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. 27 para la respuesta del tumor y FIG. 28 el cambio en peso en porcentaje. El tratamiento con Doxil sólo dio como resultado 4 PR de los 4 animales . El tratamiento de combinación dio como resultado 0 PR de los animales. DAVLBH sin conjugar antagoniza la actividad de Doxil EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Lapatinib: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (intervalo 109-188 mm3) estuvieron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC1 5 a 1 µ?t???/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (A) Lapatinib a 100 mg/kg, BID qd5 por dos semanas o (T) EC145 a 1 I mol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Lapatinib a 100 mg/kg, BID qd5 por dos semanas. Ver FIG . 54 para la respuesta del tumor y FIG. 55 el cambio en peso en porcentaj e .

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Alimta (pemetrexed) : Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores KB (109-188 mm3 intervalo) estuvieron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 1 µ????/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (?) Alimta a 100 mg/kg, qd5 por dos semanas o (?) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + Alimta a 100 mg/kg, qd5 por dos semanas. Todos los cohortes recibieron 5MTHF = 320 pg/kg (705 nmol/kg) vía cebadura oral durante los días 2-19 del estudio (5 días antes del último día del tratamiento) . Ver FIG. 56 para la respuesta del tumor y FIG. 57 el cambio en peso en porcentaje.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con Topotecán-.

Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores IGR-0V1 estuvieron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: (·) EC145 a 2 µ????/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (A) topotecán a 5 mg/kg, BIW por dos semanas o (Y) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + topotecán a 5 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. 8 para la respuesta del tumor y FIG. 9 el cambio en peso en porcentaje.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con DOXIL: Ratones nu/nu aleatoriamente distribuidos con tumores IGR-0V1 estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas o (d) EC145 a 2 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. 42 para la respuesta del tumor y FIG. 43 el cambio en peso en porcentaje.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con DOXIL: Ratones Balb/c distribuidos aleatoriamente con tumores M109 estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por dos semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas o (d) EC145 a 1 umol/kg/inyección, TIW por dos semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas. El tratamiento con EC145 sólo y Doxil sólo cada uno dio como resultados 3 curas de los 5 animales . El tratamiento de combinación dio como resultado 5 curas de los 5 animales.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con DOXIL: Ratones mu/mu distribuidos aleatoriamente con tumores OV90 estuvieron (¦) sin tratar; o tratados con ya sea: ( · ) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas; o ( A ) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 3 semanas o (?) EC145 a 1 pmol/kg/inyección, TIW por 3 semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por 3 semanas. Ver FIG. 44 para la respuesta del tumor y FIG. 45 el cambio en peso en porcentaje.

EJEMPLO Terapia de Combinación de EC145 con DOXIL: Ratones DBA distribuidos aleatoriamente con tumores L1210A (leucemia linfocítica) estuvieron (a) sin tratar; o tratados con ya sea: (b) EC145 a 2 µmol/kg/ inyección, TIW por dos semanas; o (c) DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas o (d) EC145 a 2 µ????/kg/inyección, TIW por dos semanas + DOXIL a 4 mg/kg, BIW por dos semanas. Ver FIG. 46 para la respuesta del tumor y FIG. 47 el cambio en peso en porcentaje.

EJEMPLOS DE COMPUESTOS MATERIALES EC145 API (producto de fármaco activo) se preparó de acuerdo con la descripción de US 7,601,332 o de WO 2011/014821 o como se describe más adelante (PCT/US2011/037134) .

Otros materiales, instrumentos y equipo se obtuvieron de fuentes comerciales, incluyendo las siguientes: Agua para inyección (WFI) ; Citrato Trisódico Dihidratado, EMD 1.06432.0500; Acido Cítrico, JT Baker 0122-01; Manitol, JT Baker 2553-01; Argón; Nitrógeno; Filtro, Pall 12122; Entubado; Frascos, Wheaton # 223685 / W008230, 5 mi, 20 mm, Entubado, Vidrio de Tipo I; Obturadores, (West pharmaceutical #19700021 O 19700022) 20 mm, S-10-F451, 4432/50 Gris c/ recubrimiento B2-40 (obturador sérico) ; Corrugadores , Azul (con obturador sérico) ; Obturadores, West 20 mm 4432/50, S-87-J, Gris c/ recubrimiento B2-44 (obturador de liofilización de falda dividida); Corrugadores, Helvoet Pharma 110009704, Brown 6028 (con obturador de liofilización de falda dividida) ,- agua Milli-Q, Millipore Direct Q 3 UV System; Fosfato sódico monobásico monohidratado, Mallinckrodt 7868; Fosfato de sodio dibásico dihidratado, Fisher S472-500; Cloruro de sodio, Mallinckrodt 7581; Cloruro de potasio, Fisher P330-500; Citrato de sodio dihidratado, Aldrich 39,807-1; Sacarosa, Sigma S3929-1KG; Hidróxido de sodio, JT Baker 3278-01; Acido clorhídrico, EMD HX0603P-S; Acido Acético Glacial, EMD AX0074-6; Acetato de trietilamina, Fisher, 04885-1; 5 N Hidróxido de Amonio, Acros, AC612570010 ; Acetonitrilo, Sigma-Aldric 34851-4L; Columna aters HPLC Simetría C18, 3.5 µp?, 4.6 x 75mm, P/N WAT066224; Columna Waters Guard Simetría C18, 5 µp?, 3.9 x 20 mm, P/N WAT054225.

Instrumentos y Equipo HPLC: Waters Alliance 2695 con Detector de Absorbencia Dual ? Waters 2487; HPLC: Agilent 1200 con detector PDA; medidor de H, pH-08, Corning 340; Autoclave, Esterilizador de Vapor Hotpack, PE5-004; Horno, VWR 1370FM; Horno, horno de calor seco Gruenberg; Balanza, Sartorius R300S; Balanza, Sartorius CP34001; Bomba, Watson Marlow 505S; Medidor de pipeta, Repetidores Eppendorf Plus, con 50 mi puntas Combi; Liofilizador : FTS LyoStar II con Recolector de Datos LyoManager II; Colocador de tapas, Westcapper NPW-500, 5A-018.

Las abreviaturas comúnmente utilizadas para por ejemplo, solventes, reactivos y grupos protectores, se utilizan en la presente. CDSI se utiliza para denotar el intermediario de disulfuro de carbamoilo (4) .

Los métodos HPLC utilizados para la evaluación de la fracción y la muestra en los ejemplos incluyen lo siguiente : EC145-CMC-IP-0001 Preparación de la muestra: diluir el material a aproximadamente 0.5 mg/ml con 8 M de HCl de guanidina.

! Columna: Waters XBridge BEH C18, 3.5 µ??, 2.1 x 100 mra.

Fases Móviles: A) 500 mM de bicarbonato de amonio, pH 9.2; B) 75:25 acetonitrilo-metanol .

Volumen de inyección: 10 µ? Detección UV: 280 nm Temperatura de columna: 50 °C Temperatura de la muestra 5°C .Gradiente: Tiempo (min) Flujo (ml/min) %A %B 0.0 0.55 95 5 0,5 0.55 95 5 1.0 0.55 80 20 5.0 0.55 73.5 26.5 21.0 0.55 71.5 28.5 27.0 0.55 70 30 29.0 0.55 55 45 ; 30.0 0.55 30 70 33.0 0.55 30 70 33.1 0.75 95 5 40.0 0.75 95 5 EC145-CMC-A -0001 (versión 2.3) Preparación de la muestra: diluir el material a aproximadamente 1 mg/ml con salina regulada en pH con fosfato o 1:1 acetonitrilo-agua (v/v) .

Columna: Waters Simetría C18, 3.5 µt?, 4.6 x 75 rara. Fases Móviles: A) 10 mM acetato de trietilamonio, H 7.5; B) acetonitrilo .

Volumen de inyección: 10 µ? Detección UV: 280 nm Temperatura de columna: 25 °C Temperatura de la muestra 5°C Gradiente: Tiempo (min) Flujo (ml/min) %A %B 0.0 1.0 85 15 20.0 1.0 50 50 25.0 1.0 20 80 30.0 1.0 20 80 31.0 1.0 85 15 41.0 1.0 85 15 EJEMPLO Preparación de EC119 EC119 se sintetizó utilizando química de fase sólida con base en Fmoc como sigue: ler. Acoplamiento * Agregar resina de cloruro de 2 -clorotritilo a un frasco para síntesis de péptido. Dejar expandir en DMF (10 mg/g de resina) . Lavar con DMF 2 veces (10 mg/g de resina) . Agregar 0.8 equivalentes de Fmoc-Cys (Trt) -OH en DCM/DMF.

Agregar 2 equivalentes de DIPEA. Agitar por 30 min. Agregar metanol (1 ml/g de resina) y agitar por 10 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Lavar con DMF 3 veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser para confirmar la 'finalización del acoplamiento. 2o. Acoplamiento Lavar con DMF 3 veces (10 mg/g de resina) . Agregar 2 equivalentes de Fmoc-Asp (OtBu) -OH en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 2 equivalentes de DIC. Agitar por 1.5-3 h. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser. 3er. Acoplamiento Lavar con DMF 3 veces. Agregar 2 equivalentes de Fmoc-Asp (OtBu) -OH en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 2 equivalentes de DIC. Agitar por 1.5-3 h. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser. 4o. Acoplamiento Lavar con DMF. Agregar 2 equivalentes de Fmoc- Arg(Pbf)-0H en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 2 equivalentes de DIC. Agitar por 1.5 -3h. Confirmar 'el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser. 5o. Acoplamiento Lavar con DMF 3 veces. Agregar 2 equivalentes de Fmoc-Asp (OtBu) -OH en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 2 equivalentes de DIC. Agitar por 1.5 -3 h. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser. 6o. Acoplamiento Lavar con DMF 3 veces. Agregar 2 equivalentes de Fmoc-Glu-OtBu en DMF. Agregar 2 equivalentes de HOBt en DMF.

Agregar 2 equivalentes de DIC. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con MTBE 2 veces. Lavar con DMF 2 veces. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Agregar 6% de piperazina en 0.1M de HOBt en DMF y agitar por 10-20 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Realizar la prueba Kaiser. 7o. Acoplamiento Lavar con DMF 3 veces. Agregar 1.2 equivalentes de N10-TFA-Pte-OH en una cantidad mínima de DMSO. Agregar 1.2 equivalentes de HOBt en DMF. Agregar 1.2 equivalentes de PyBOP en DMF. Agregar 2.4 equivalentes de DIPEA. Agitar por 3-5 h. Confirmar el acoplamiento con la prueba Kaiser. Lavar con DMF 2 veces. Lavar con MTBE 2 veces.

Desprotección - eliminación del grupo trifluoroacetilo Lavar con DMF 2 veces. Agregar 2% de hidracina en DMF y agitar por 5 min. Agregar 2% de hidracina en DMF y agitar por 5 min. Agregar 2% de hidracina en DMF y agitar por 5 min. Lavar con DMF 3 veces. Lavar con MTBE 3 veces. Secar la resina al vacío a temperatura ambiente.

Separación de la resina Agregar reactivo de separación (10 mg/g de resina) conteniendo 85% TFA, 2.5% de triisopropilsilano, 2.5% agua y 10% de etanditiol a un matraz. Enfriar la mezcla en un baño helado. Agregar la resina y dejar reaccionar por 2-3 horas a temperatura ambiente. Filtrar y recolectar el filtrado.

Agregar el filtrado a MTBE frío (10 mi de MTBE por l mi de filtrado) . Agitar a 0-5°C por 30 ± 10 min. Filtrar el producto precipitado a través de un filtro de vidrio de porosidad media. Lavar el precipitado con MTBE frío 3 veces. Secar el producto al vacío a temperatura ambiente. Almacenar bajo nitrógeno a -20°C.

Purificación El EC119 crudo se purificó por HPLC preparativa utilizando una columna C18 de fase inversa (columna de 15.24 .cm (6 pulgadas), 2.8kg, 10 µt?, 100Á) . Las fases móviles son 0.5% de NH4OAc (A) y 0.5% de NH4OAc/ACN ( 1 : 4 ) (B) . Se disolvieron 40 g de EC119 crudo en 1-5% de TFA, filtraron a través de un filtro de fibra de vidrio de 1 m y cargaron en la columna de 15.24 cm (6 pulgadas). Las fracciones se recolectaron y muestrearon para análisis HPLC. El pH de cada fracción se ajustó a 3-4 inmediatamente después de la recolección utilizando 50% de AcOH bajo nitrógeno para precipitar el producto. El producto precipitado se centrifugó, lavó con 0.1% de AcOH y almacenó a 2-8°C hasta el procesamiento adicional. Los envases de limpiaron con nitrógeno durante la operación de centrifugación para reducir el potencial de oxidación. El criterio del grupo es pureza > 98%, isómeros de D-Arg4, D-Glu2 y D-Asp3 < 0.25%, otras impurezas < 0.5%. Los isómeros de D-Asp5, D-Asp6 y D-Cys no pueden eliminarse por HPLC-Prep y deberán suprimirse en el proceso de la síntesis. Los materiales que cumplen con el criterio del grupo se liofilizaron tan pronto como fue posible (la solución EC119 y el precipitado húmedo no son estables). La pureza del producto final es mayor de 98%. La producción global de EC119 puro incluyendo la síntesis se fase sólida y purificación es de aproximadamente 40%. El producto se empacó en una botella de vidrio ámbar bajo nitrógeno y almacenó a -20°C.

EJEMPLO A. Conversión Típica de Sulfato de Vinblastina en Desacetilvinblastina Hidracida Sulfato de Vinblastina Materiales Sulfato de Vinblastina: USP; FW = 909.05 g/mol; Metanol: anhidro; Hidracina: anhidra; FW =32 g/mol; Agua desionizada; Acetato de etilo: Grado LC/GC; Tolueno: Grado LC/GC; Fosfato sódico monobásico: = 99.0%; FW = 120 g/mol; Fosfato sódico dibásico: =99.0%; FW = 142 g/mol; Cloruro de sodio: grado del reactivo; FW = 58.4 g/mol; Sulfato de sodio: anhidro; Acido 5-norbornen-2-carboxílico .

Procedimiento La reacción, desarrollo extractivo y aislamiento se corrieron bajo una atmósfera de nitrógeno o argón. Se utilizaron filtros de presión para eliminar el sulfato de sodio y capturar el producto. Las soluciones de cloruro de .sodio utilizadas en la extinción y el lavado se rociaron con nitrógeno o argón hasta que el nivel de oxígeno disuelto no fue más de 0.9 ppm .

El sulfato de vinblastina y el metanol anhidro se cargaron en un reactor de purga de argón. Se agregó ácido 5-horbornen-2-carboxílico e hidracina anhidra al reactor. La mezcla se agitó, y después de la disolución de los sólidos, calentar la mezcla a alrededor de 60 °C. Mediante el análisis HPLC, cuando se completa la reacción, se enfría, extingue y extrae en acetato de etilo. Después del secado, el producto se cristaliza a partir de acetato de etilo y tolueno. Los sólidos se secaron al vacío durante la noche a temperatura ambiente .

El NaCl regulado en pH contiene: 10.0 g de NaCl, 7.10 - 7.30 g de NaH2P04, 4.40 - 4.60 g de Na2HP0 y 90 mi de agua. La solución se roció con argón o nitrógeno (contenido de oxígeno disuelto < 0.9 ppm) . i Una producción aislada típica es de 50 - 60% del máximo teórico.

B. Pasos 2 y 3 del Proceso EC145 Procesos del Paso 2 y Paso 3 Materiales Desacetilvinblastina hidracida: F =768.9 g/mol; 20.5 g, 26.7 mmol; Carbonato Mixto (3): FW=384.9 g/mol; 10.7 g, 27.8 mmol; Acetonitrilo : c.s.: Trietilaraina : FW=101.2 ,g/mol; 2.67 g, 26.4 raraol; Na2P04. 7 H20: 47.84 g; EC119: 29.9 g 28.6 mmol 0.5 N HC1 : c . s . ; WFI : c.s.

Procedimiento Observar que toda el agua utilizada en este proceso es agua para inyección (WFI) .

Purgar un frasco apropiado con argón. Cargar 20.5±0.3 g de des-acetilvinblastina hidracida; esta carga se ajusta en potencia, es decir, si la potencia fue de 90.0%, la carga sería de 22.8 g. Cargar 10.7+0.2 g de Carbonato Mixto (potencia ajustada) . Cargar 800±30 mi de acetonitrilo y 2.67+0.11g de trietilamina. Mezclar en argón a 10-14°C por 20-28 horas. Tomar una muestra para HPLC (EC145-CMC-AM-0001, versión 2.3) . El resultado esperado es la proporción de CDSI a hidracida = 25:1. Si no es asi, continuar mezclando bajo argón a 10-14 °C por 2-4 horas y muestrear de nuevo.

Rociar 780-820 mi de agua con argón hasta que el nivel de oxígeno disuelto sea menor de 0.9 ppm; registrar el nivel de oxígeno disuelto. Disolver 47.8+0.5 g de fosfato dibásico de sodio heptahidratado en el agua desoxigenada. En un envase adecuado, agregar 29.8+0.5 g de EC119; (la carga tiene potencia ajustada) . Agregar la solución de fosfato de sodio al EC119 y mezclar bajo argón. Medir el pH de la s lución y ajustar el pH a 5.8 - 6.2 con 0.5 N de HC1 si es necesario .

Agregar la solución de EC119 regulada en pH a la mezcla de reacción. Mezclar en argón a 20-25°C por 60-75 minutos. Tomar una muestra para HPLC (EC145-CMC-AM-0001, versión2.3) . Si la proporción de EC145 a CDSI es > 25:1, proceder. Si no es así, continuar mezclando bajo argón a 20-25°C y muestrear de nuevo. Si la proporción de EC145 a CDSI es > 25:1, proceder. Si no es así, agregar un 1 g adicional de EC119 y mezclar bajo argón a 20-25°C por 30 minutos y muestrear de nuevo.

Preparar 6.9 L - 7.1 L de 25 mM de regulador de pH de fosfato, 185 - 195 mM de NaCl, pH 7.2 - 7.5 hecho de agua rociada con argón hasta que el nivel de oxígeno disuelto sea menor de 0.9 ppm. Diluir la mezcla de reacción con este regulador de pH. Si la mezcla desarrolla más de una bruma apenas perceptible, la solución del producto necesita filtrarse (Whatman Polycap TC75 o TC150, 0.45 o 1.0 mieras); ésta filtración puede hacerse mientras se carga el producto en la columna Biotage.

Purificación Cromatográfica Líquida Utilizar un cartucho Biotage 150M, C18. Este tamaño de cartucho puede acomodar una mezcla de reacción de dos veces el tamaño de la actualmente descrita.

Preparación de columna: a. Enjuagar la columna con 1 i. 12 - 13 L de acetonitrilo ii. 12 - 13 L de 80% de acetonitrilo y 20% de agua (v/v) iii. 12 - 13 L de 50% de acetonitrilo y 50% de agua (v/v) iv. 12 - 13 L de 10% de acetonitrilo y 90% de agua (v/v) [ Purificación: Preparar 25 mM de regulador de pH de fosfato, (185 - 195 mmol) NaCl, pH 7.3 - 7.5 Rociar el buffer con argón hasta que el contenido de oxígeno disuelto sea = 0.9 ppm.

Preparar: 41 L de 10% de acetonitrilo en salina regulada en pH (v/v) ; 13 L de 16% de acetonitrilo en salina regulada en pH (v/v) , 52 L de 27% de acetonitrilo en salina regulada en pH (v/v) .

Verificar el contenido de oxígeno disuelto de las soluciones de la fase móvil. Si el contenido de oxígeno disuelto es mayor de 0.9 ppm, rociar la fase móvil con argón o nitrógeno hasta que el nivel del oxígeno disuelto sea = 0.9 ppm.

Enjuagar la columna con 26 -27 L del 10% de la fase móvil de acetonitrilo.

Cargar la solución del producto en la columna Eluir el producto utilizando la siguiente secuencia de fases móviles: i. 13 -14 L del 10% de la fase móvil de acetonitrilo . ii. 13 L del 16% de la fase móvil de acetonitrilo. iii. 51 -52 L del 27% de la fase móvil de acetonitrilo.

Notas: Un detector uv en línea es útil; El producto deberá emerger partiendo de 15 - 19 L del 27% de la fase móvil de acetonitrilo con un ancho de banda de 8 -13 L.

Evaluación de la Fracción i. Método HPLC EC145-CMC-IP-0001 ii. Fracción pasante = = 97.0% de EC145 y sin impurezas = 0.8% Tratamiento de Columna Post-Corrida: La columna puede reutilizarse una vez. Si la columna se utilizará en una segunda corrida, realizar los pasos ii - iv. i. Enjuagar la columna con 12-13 L de 1:1 de acetonitrilo-agua .

I ii. Enjuagar la columna con 20-22 L de acetonitrilo iii. Repetir los pasos de preparación de columna ii -; iv Ultra-filtración Rociar una c.s. de agua con argón o nitrógeno hasta que el nivel del oxígeno disuelto sea menor de 0.9 ppm. Las fracciones cromatográficas pasantes se combinaron y diluyeron con un volumen equivalente de agua rociada. Ensamblar un aparato de ultra-filtración utilizando membrana de celulosa regenerada Millipore con un corte MW nominal de 1000 (cat# CDUF002LA) y enjuagarla con 9 L de agua desoxigenada. Iniciar la ultra- filtración de la solución del producto. Mantener una retro-presión de 2.11-3.52 kg/cm2 (30-50 psi) . Continuar la ¡ultra- filtración hasta que el volumen retenido sea de 2 a 3 L. Agregar de 11 a 12 L de agua desoxigenada. Continuar la ultra-filtración hasta que el volumen retenido sea de 2 a 3 L. Agregar de 11 a 12 L de agua desoxigenada. Continuar la ultra- filtración hasta que el volumen retenido sea de 2 a 3 L. Agregar de 8 a 10 L de agua desoxigenada. Continuar la ultra- filtración hasta que el volumen del retenato sea de 2 L. El punto final de la ultra-filtración debe determinarse mediante el análisis de una muestra del retenato mediante GC y concentración. La especificación es de = 50 microgramos de acetonitrilo por miligramo de EC145. Si no se obtiene, realizar otro ciclo de la ultra- filtración .

La concentración de las soluciones API deben ajustarse de tal forma que el material empacado sea de 6 a 12 mg/ml. Al finalizar la ultra- filtración, El aparato deberá enjuagarse con 1 litro de agua. Enseguida, continuar la ultra-filtración o agregar agua según sea necesario. Una vez que la solución del producto sale del aparato de ultra-filtración, enjuagar el aparato de ultra-filtración con 1 L de agua desoxigenada y combinar con la solución del producto.

Después de combinar el enjuague con la solución del producto, esta solución debe filtrarse a través de un filtro absoluto de 0.2 mieras, y este filtrado se empacó (realizar bajo una atmósfera inerte) .

Un rendimiento típico del producto aislado es de 50 - 60% del máximo teórico.

EJEMPLO EC145 Liofilizado Dos frascos de una solución acuosa de EC145 con un volumen total de 22 mi se descongelaron a temperatura ambiente y transfirieron en cuatro frascos de liofilización de 20 mi. Los frascos se transfirieron a un congelador por aproximadamente 1.5 horas. La liofilización se condujo utilizando un congelador-secador LABCONCO que se pre-enfrió a -72 °C (temperatura de anaquel) antes de cargar las muestras. Las muestras se liofilizaron por -30 minutos a -20 °C, seguido por otras 38.5 horas a 20°C. El sólido amarillo pálido esponjado resultante se combinó en un frasco para caracterización adicional.

Formulaciones Formulaciones Acuosas: Se proporcionan a continuación formulaciones que pueden utilizarse para proveer EC145 a una concentración de 1.4 mg/ml de EC145. Se utilizaron frascos individuales para proveer 2.5 mg de una dosis de bolo de EC145.

EJEMPLO Formulación EC145 regulada en pH con Fosfato, pH 7.4 La siguiente formulación proporciona un producto de fármaco EC145 (DP) para administración intravenosa (IV) como 2.0 mi de una formulación líquida estéril acuosa, pH 7.4 , en frascos de vidrio transparentes de un solo uso con obturadores de goma recubiertos con Flurotech™, que se almacenaron congelados bajo gas inerte. Cada frasco contiene 1.4 mg/ml de EC145. La composición cuantitativa del producto de fármaco se muestra en la tabla siguiente. Los frascos se utilizaron para proporcionar una dosis de bolo de 2.5 mg de EC145. Esta formulación proporciona 10 mM de regulador de pH de fosfato, pH 7.4; 138 mM de cloruro de sodio, y 2.7 mM de cloruro de potasio.

Componentes del Producto de Fármaco EC145 EJEMPLO Formulación EC145 regulada en pH con Citrato, pH 6.2 La siguiente formulación proporciona una solución que es una solución EC145 de 50 mM pH 6.2 regulada en pH con citrato .

' Componentes del Producto de Fármaco EC145 Formulaciones para liofilización: EJEMPLO Formulación EC145 regulada en pH con Citrato, pH 6.2 con 3% de Manitol La siguiente formulación proporciona una solución que es una solución con pH 6.2 EC145 regulada en pH con citrato conteniendo 3% de manitol como agentes de volumen útiles para liofilización y reconstitución.

Componentes del Producto de Fármaco EC145 EJEMPLO ; Formulación EC145 regulada en pH con Citrato, pH 6.2 con 4% Manitol/1% Sacarosa La misma formulación como para 3% de manitol anterior, pero con 80 mg de manitol y 20 mg de sacarosa.

; EJEMPLO Formulación de Placebo regulada en pH con citrato, pH 6.2 con 3¾ de Manitol : La siguiente formulación proporciona una solución de placebo faltante que es una solución regulada en pH con citrato, H 6.2 conteniendo 3% de manitol como agentes de volumen útiles para liofilización y reconstitución.

Componente del Producto de Placebo EJEMPLO Preparación de Composiciones Farmacéuticas de EC145 Liofilizado y Placebo Los ciclos de liofilización se corrieron con frascos de EC145 conteniendo 3% de manitol, frascos de EC145 conteniendo 4% de manitol / 1% de sacarosa, y frascos de placebo (sin API EC145) . Las sondas se colocaron dentro de los frascos con solución EC145 y los frascos con placebo para registrar la temperatura de la solución durante el ciclo. Antes de exponer el producto final al aire, todos los ciclos se rellenaron con argón con los frascos obturados en el liofilizador . Inmediatamente después de la obturación, los frascos se plegaron y marcaron.

En un número de corridas de liofilización de parámetros variables, no se pudieron ver diferencias visibles entre los frascos que contenían 3% de manitol y los frascos que contenían 4% de manitol / 1% de sacarosa.

EJEMPLO Descripción del Proceso de Formulación Se cargó un gran matraz con WFI en exceso y se roció con gas inerte por 30 minutos para reducir el contenido de oxígeno a < 1.0 ppm. Una prueba dentro del proceso se utilizó para confirmar el contenido de oxígeno antes de iniciar la formulación. Una manta de gas inerte de presión positiva, constante se mantuvo en la solución de la formulación en todo el proceso de formulación.

Se removió la solución de la sustancia del fármaco (API) EC145 del congelador y descongeló en una temperatura de 20°C - 25°C controlada en un baño de agua circulante. La solución API descongelada se agregó a un frasco purgado con gas inerte, con tara, para determinar la cantidad de solución API a ser formulada. Con base en la densidad de la concentración de EC145 en la solución, el peso de la solución agregada al frasco con tara se utilizó para definir la solución final total disponible para rellenar 1.4 mg de EC145 '/ mi.

Un frasco con barra de agitación se pesó y cargó con 62.5% del volumen total del volumen de relleno de WFI . Se agregó manitol para proporcionar una concentración final de 3% de manitol. Se agregó citrato de sodio al frasco seguido por un enjuague con WFI rociado. La solución rociada se mezcló hasta que se disolvió todo el ácido cítrico.

A medidor de pH se estandarizó con estándares de regulador de pH 4 y 7 para medir el pH de la solución. Si el pH no es 6.0 - 6.2, entonces el pH se ajustó con 1.0M de ácido cítrico o 1.0M de citrato de sodio.

El frasco se envolvió en aluminio para proteger EC145 de la luz. La solución de la sustancia del fármaco ÉC145 se agregó al frasco de la formulación con agitación y rociando con gas inerte. El frasco conteniendo la sustancia del fármaco se enjuagó dos veces con solución WFI. La mezcla se agitó con rociado hasta que se obtuvo una mezcla visualmente homogénea. El peso de la formulación objetivo final se determinó y la solución se cargó con WFI al peso objetivo .

La solución se filtra a través de un filtro estéril de 0.22 mieras, pre-humedece y ensaya con punto de burbuja, utilizando una bomba peristáltica. Una purga de gas inerte del frasco receptor se mantiene durante todo el proceso de filtración. Después de la filtración, Después de la filtración para asegurar que la efectiva filtración se mantenga en todo el proceso.

Se calibra un cabezal de relleno para suministrar 2.03 gramos (2.0 mi, 2.8 mg EC145) de la solución de la formulación EC145 a cada frasco. La cantidad de relleno se verifica rutinariamente durante el proceso de llenado.

Los obturadores se asientan a la mitad en los frascos en todo el proceso de llenado.

Los termopares se colocan en frascos apropiados en charolas de liofilización, y las charolas se liofilizan en cuanto al ciclo definido.

EJEMPLO Ciclo de Liofilización El siguiente ciclo de liofilización, utilizando la solución de EC145 regulada en pH con citrato pH 6.2 conteniendo 3% de manitol descrita anteriormente (2 mi en un frasco de 5 mi) proporciona la formulación de EC145 liofilizada con una apariencia de torta satisfactoria, que se reconstituye fácilmente en agua, y que retiene una alta pureza API (>95%) .

' Los frascos se rocían con argón, llenan con 2 mi de la formulación EC145, obturan con a obturador de liofilización de falda dividida en la posición asentada a la mitad. Tan pronto como una charola se llena y obtura, se coloca en el liofilizador a 5°C. 1. Pre-enfriar los anaqueles del liofilizador a 5°C. 2. Cargar las charolas llenas en los anaqueles pre-enfriados . ! 3. Iniciar el ciclo de liofilización después de completar la carga. 4. Mantener la temperatura del anaquel a 5°C 30-60 minutos Alternativamente, al pre-enfriar los anaqueles a -50°C a 5°C permite un tiempo reducido para pre-enfriar las charolas llenas; y el paso 4 puede no ser necesario. 5. Inmediatamente elevar la temperatura del anaquel a -50°C. 6. Mantener la temperatura del anaquel a -50°C de 60 a 360 minutos. 7. Reducir la presión de la cámara a 50 a Í50 mTorr. 8. Mantener la temperatura del anaquel a -50°C de 180 a 1740 minutos. ; 9. Elevar la temperatura del anaquel a -37°C durante 73 minutos (0.20°C/minuto) . : 10. Mantener la temperatura del anaquel a -37°C de 60 a 720 minutos. 11. Elevar la temperatura del anaquel a -20 °C por 150 minutos (0.11°C /minuto). 12. Mantener la temperatura del anaquel a -20°C de 60 a 360 minutos. 13. Elevar la temperatura del anaquel de 20°C a 30°C de 60 a 360 minutos. 14. Mantener la temperatura del anaquel de 20°C a 30°C de 60 a 600 minutos. 15. Volver a llenar la cámara con argón o nitrógeno a 870 mbares (12.5 psia) . 16. Colapsar los anaqueles (frascos completamente obturados) . 17. Rellenar a presión atmosférica con aire filtrado. 18. Descargar el liofilizador.

Un ejemplo particular del ejemplo del ciclo de liofilización anterior, con enfriamiento inicial por 30 minutos a 5°C, puede representarse en forma de resumen como sigue: 1 Los frascos después se taparon para proporcionar el producto final como una torta satisfactoria en cada frasco.

A pesar de que ciertas modalidades de la invención han sido descritas y/o e emplificadas anteriormente, se contempla que son posibles considerables variaciones y modificaciones a las mismas. Por consiguiente, la presente invención no está limitada a las modalidades particulares descritas y/o ejemplificadas en la presente.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el ¡mejor método conocido por la solicitante para llevar a la ¡práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1. Un método para el tratamiento de un cáncer, caracterizado porque comprende los pasos de administrar EC145 a un paciente; y administrar al paciente uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales que tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis, en donde el EC145 y el agente quimioterapéu ico adicional están en envases o paquetes estériles.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed.

3. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de carboplatina y bevacizumab .

4. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional es carboplatina.

5. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional es bevacizumab.

! 6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el cáncer es un cáncer epitelial.

7. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el cáncer epitelial es un cáncer de ovario, de endometrio, o de pulmón de célula no pequeña.

8. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el cáncer epitelial es un cáncer ovárico.

9. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el cáncer epitelial es un cáncer de pulmón de célula no pequeña.

10. El método de conformidad con la reivindicación l, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional se administra una dosis que es 50 a 80% de la dosis máxima tolerada para el agente quimioterapéutico.

11. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico se administran en cantidades terapéuticamente eficaces.

12. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 1 µ?/??2 a aproximadamente 500 mg/m2 del área superficial corporal.

13. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 1 pg/m2 a aproximadamente 300 mg/m2 del área superficial corporal.

14. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque las cantidades eficaces están en el intervalo de aproximadamente 10 g/kg a aproximadamente 100 g/kg del peso corporal del paciente.

15. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porgue el cáncer es un cáncer ovárico resistente al platino.

16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso.

17. El método de conformidad con la reivindicación í, caracterizado porque el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible .

18. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico ádicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles.

19. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional se administran a dosis inferiores a sus dosis tolerables máximas .

20. Un kit que comprende EC145 y uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales caracterizado porque tienen un modo de acción seleccionado del grupo que consiste de inhibición de angiogénesis , inhibición del ensamble de microtúbulo, reticulación de ADN, inhibición de topoisomerasa, intercalación de ADN, inhibición de la síntesis de ADN, inhibición de tirosina cinasa, e inhibición de mitosis.

21. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de cisplatina, carboplatina, topotecán, irinotecán, bevacizumab, erlotinib, lapatinib, y pemetrexed.

; 22. El kit de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste de carboplatina y bevacizumab.

23. El kit de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional es carboplatina .

24. El kit de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el agente quimioterapéutico adicional es bevacizuraab.

25. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en cantidades terapéuticamente eficaces.

26. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en envases o paquetes estériles .

27. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 90% con base en el porcentaje en peso.

28. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional tienen una pureza del al menos 95% con base en el porcentaje en peso.

29. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 está en la forma de un liofilizado reconstituible .

30. El kit de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el EC145 y el agente quimioterapéutico adicional están en soluciones acuosas sin pirógeno, estériles.