MX2012007240A - Composiciones no fermentadas que comprenden una fraccion a base de cereal y un probiotico y usos de estos. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una composición no fermentada que tiene la capacidad de aumentar la formación de ácido butírico en el colon y que comprende al menos una fracción a base de cereal y al menos una cepa probiótica aislada de Lactobacillus, así como también al uso de esta composición fermentada como un simbiótico y para el tratamiento del síndrome metabólico, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, síndrome del intestino irritable (lBS) o enfermedad inflamatoria intestinal (IBD). La composición no fermentada de la invención es útil para el mantenimiento de una mucosa intestinal saludable y/o para el suministro de una función de barrera mejorada de la mucosa intestinal.

Description

COMPOSICIONES NO FERMENTADAS QUE COMPRENDEN UNA FRACCIÓN A BASE DE CEREAL Y UN PROBIÓTICO Y USOS DE ESTOS Campo técnico de la invención La presente invención se refiere a una composición no fermentada que tiene la capacidad de aumentar la formación de ácido butírico en el colon, así como también a diferentes usos de esta composición no fermentada, por ejemplo, para el mantenimiento de una mucosa intestinal saludable mediante el suministro de una función de barrera mejorada.

Antecedentes de la técnica Se ha planteado que el ácido butírico y la glutamina son importantes para la salud del colon. Se ha demostrado que los ß-glucanos de cebada pura producen cantidades comparativamente altas de ácido butírico y que el alimento de cebada germinada, obtenido a partir del bagazo de cervecería (BSG), que contiene cantidades elevadas de ß-glucanos y glutamina, reduce la respuesta inflamatoria en el colon de individuos que padecen colitis ulcerosa.

Recientemente, se ha mostrado gran interés en la relación entre la fibra alimenticia, las bacterias que fomentan la salud y la prevención de las enfermedades del intestino inflamado, que incluye enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa.

La fibra alimenticia es resistente a la digestión en el intestino delgado y por lo tanto se encuentra disponible para la fermentación mediante la flora microbiana en el intestino grueso, formando ácidos grasos de cadena corta (SCFA) junto con gases y calor. Los SCFA formados principales son los ácidos acético, propiónico y butírico, mientras que los ácidos valérico, caproico, heptanoico y los ácidos iso-butíricos e iso-valéricos ramificados se forman en cantidades más pequeñas. Los SCFA se absorben y transportan por medio de la vena porta hasta el hígado, y la fracción que no se absorbe se excreta en las heces. El ácido propiónico es un sustrato para la gluconeogénesis hepática y se informó que inhibe la síntesis del colesterol, mientras que se demostró que el ácido acético estimula la gluconeogénesis y la formación de colesterol mediante acetil-CoA. El ácido butírico constituye la mayor fuente de energía para los colonocitos, y existe la hipótesis de que reduzca el riesgo de cáncer de colon y beneficie la IBD. Recientemente, también se ha sugerido que el ácido butírico posee efectos metabólicos.

Además de la fibra alimenticia, también llegarán al colon pequeñas cantidades de proteína. En este sentido la glutamina es un aminoácido de especial interés. La glutamina, junto con el ácido butírico, es un sustrato importante para las células epiteliales del colon. Esto es de interés ya que la presencia de cantidades elevadas de ácido butírico en el colon reducirá la necesidad de células epiteliales para la glutamina y en este sentido aumentarán los niveles de glutamina en la sangre. Se ha demostrado que los niveles elevados de glutamina en el sistema circulatorio son positivos ya que mejoran la defensa inmune.

Hace mucho tiempo que se utilizan los alimentos a base de cereales y los granos de cereales contienen las proteínas, grasas y carbohidratos requeridos por los seres humanos para el desarrollo y mantenimiento. La fermentación de la cebada puede producir cantidades elevadas de ácido butírico, dado su alto contenido de ß-glucanos, y se ha demostrado que el alimento de cebada germinada (GBF) contiene cantidades elevadas de glutamina. Se ha informado que en el GBF la glutamina se encuentra ligada a la fibra alimenticia y alcanza el intestino grueso, donde puede liberarse durante la fermentación y ser un sustrato para la mucosa colónica. En los estudios que han empleado GBF, los síntomas e inflamaciones se mejoraron en ratas con colitis inducidas con sodio sulfato dextrano (DSS). El mismo efecto se vio en seres humanos con colitis ulcerosa.

Las bacterias probióticas se definen como microorganismos vivos que al ser administrados en cantidades suficientes afectan de manera beneficiosa al huésped. Los lactobacilos y las lactobacterias son las bacterias usadas con mayor frecuencia en productos probióticos. Estas bacterias son generalmente seguras, como lo son también los probióticos a base de estos organismos. La falta de patogenicidad se extiende en todos los grupos de edades y en individuos inmunocomprometidos. Se ha demostrado que el consumo de diferentes bacterias probióticas tiene beneficios clínicos en diversas situaciones fisiológicas o patológicas. Los efectos más definidos se demostraron en la diarrea causada por terapia antibiótica o por infección por rotavirus. También hay estudios que muestran los efectos clínicos positivos en las enfermedades del intestino inflamatorio, la dermatitis atópica e hipercolesterolemia después del consumo de bacterias probióticas. El mecanismo por el cual las bacterias probióticas contribuyen a estas mejoras clínicas no es claro. Lactobacillus rhamnosus es uno de los grupos bacterianos más grandes representados en el intestino de individuos saludables. Cantidades elevadas de bacterias probióticas pueden obstruir la proliferación de bacterias patogénicas. Una combinación de pre y probióticos no solo puede modificar la microflora sino también optimizar la formación de CA.

En WO2007036230 se divulga un producto pronto para usar que comprende cereal fermentado y microorganismos no patogénicos, donde el cereal no fermentado es preferiblemente avena. La presente invención difiere de WO2007036230 por el hecho que las composiciones presentes no son fermentadas y Existe la necesidad de nuevos enfoques sobre cómo mantener la mucosa intestinal saludable proporcionando una función de barrera mejorada en el intestino.

El objetivo de la presente invención es investigar el posible rol de unas pocas fracciones a base de cereales, por ejemplo diferentes fracciones de cebada, como un producto prebiótico, en función de la formación cecal de CA, los niveles de SCFA y de aminoácidos en la sangre y la composición cecal de la flora bacteriana (lactobacilos, bifidobacterias, Enterobacteríacece) y si la adición de cepas probióticas produciría algún efecto adicional.

Sumario de la invención Por consiguiente, la presente invención se refiere, en un aspecto, a una composición no fermentada que tiene la capacidad de aumentar la formación de ácido butírico en el colon y que comprende al menos una fracción a base de cereal y al menos una cepa probiótica aislada de Lactobacillus.

La presente invención se refiere, en un aspecto adicional, al uso de esta composición no fermentada como un simbiótico.

La presente invención se refiere, en un aspecto adicional, a esta composición no fermentada, para usar en el tratamiento del síndrome metabólico, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, síndrome del intestino irritable (IBS) o enfermedad inflamatoria intestinal (IBD).

La presente invención se refiere, en otro aspecto adicional, a esta composición no fermentada, para usar en el mantenimiento de una mucosa intestinal saludable y/o para la proporción de una función de barrera mejorada de la mucosa intestinal.

Breve descripción de los dibujos La Fig. 1 muestra los recuentos bacterianos de Lactobacillus (barras blancas), Bifidobacterium (barras negras) y Enterobacteriaceae (barras cuadriculadas) en el contenido del ciego de ratas alimentadas con cebada de grano integral (WGB), malta (Malta) o bagazo de cervecería (BSG), y las mismas dietas suplementadas con L. rhamnosus (Lr). Los valores son medios y aquellos valores de WGB, Malta y BSG, es decir, aquellos sin ningún agregado de probiótico, con letras superíndice disimilares, fueron sustancialmente diferentes, P<0,05. Los valores medios fueron significativamente diferentes de los de las ratas alimentadas con dietas sin bacterias, *P<0,05.

Descripción detallada de las realizaciones de la invención.

La presente invención se refiere a una composición no fermentada que tiene la capacidad de aumentar la formación de ácido butírico en el colon y que comprende al menos una fracción a base de cereal y al menos una cepa probiótica aislada de Lactobacillus. El significado de la frase "que tiene la capacidad para aumentar la formación de ácido butírico en el colon" significa que la presente composición no fermentada que comprende tanto un probiótico como una fracción a base de cereales, aumentará la formación de ácido butírico en el colon y en la sangre, véanse las tablas 4 y 5, en comparación con una fracción a base de cereal dada sola sin un probiótico. En la tabla 4 la formación de ácido butírico en el colon ha aumentado un 157% (de 7 a 18 µ????/g) para la cebada de grano integral, un 50% (de 12 a 18 pmol/g) para cebada malteada y un 33% (de 9 a 12 µ????/g) para el bagazo de cervecería. Por consiguiente, un aumento de la formación de ácido butírico se encuentra en el intervalo del 30-200%, preferiblemente en el intervalo del 40-180%, más preferiblemente en el intervalo del 50-160%. Alternativamente, en otras palabras, el contenido de ácido butírico formado en el colon se encuentra en el intervalo de 14 - 20 pmol/g o >14 µ????/g.

En el presente contexto la frase "composición no fermentada" debe interpretarse como la composición no consumida aún. Se pretende que la fermentación tenga lugar en el tracto gastrointestinal después de consumir la composición. Los ácidos orgánicos formados durante la fermentación gastrointestinal se miden en los contenidos sanguíneos y cecales. En los productos secos de la invención, por ejemplo, cereales, muesli, panes, galletitas, cereales, barras energéticas o productos untables, los ácidos orgánicos no se encuentran presentes en la composición debido a la no fermentación. En los productos húmedos, las bacterias podrían estar presentes en forma de cápsulas para evitar que fermenten la composición antes de ingresar al tracto gastrointestinal. Otro enfoque para prevenir la fermentación es mantener la composición a baja temperatura, es decir, mantener la composición refrigerada o congelada a temperaturas y según fechas de caducidad apropiadas. Las composiciones no fermentadas de la invención pueden ser una composición seca o una composición líquida.

En la Tabla 5 se midió el contenido de ácido butírico formado en la sangre de la vena porta. El aumento para WGB es de un 133% (46 a 107 µ????/L), para la cebada malteada de un 117% (de 96 a 208 pmol/L) y para BSG de un 56% (53 a 83 pmol/L). Por consiguiente, para las tres fracciones de cebada el contenido de ácido butírico es >80 pmol/L.

La fracción a base de cereal se encuentra presente en la composición no fermentada en el intervalo de 40-100 % en peso. Los contenidos restantes de la composición son evidentes para los entendidos en la técnica de formulación de composiciones simbióticas.

Los resultados de presente invención son muy inesperados y el aumento de la formación de ácido butírico observado se duplicó al administrarse una composición de conformidad con la invención en comparación con la administración únicamente de la fracción a base de cereal, véanse las tablas 4 y 5.

En una realización de la invención al menos una fracción a base de cereal de la composición es una fracción de cereal de grano integral, por ejemplo, una cebada de grano integral, una avena de grano integral, un trigo de grano integral, un centeno de grano integral o una combinación de estos. La al menos una fracción a base de cereal usada en la composición de la invención pudo haberse procesado de diferentes maneras antes de ser agregada a la presente composición, por ejemplo la fracción a base de cereal podría ser una fracción a base de cereal molido y/o tratado con calor, o una fracción a base de cereal extrudida, expandida, o una fracción a base de cereal secada por tambor, o una fracción a base de cereal en copos o una fracción a base de cereal cocida al vapor.

En una realización adicional de la invención de al menos una fracción a base de cereal se selecciona del grupo de una fracción de cebada, una fracción de avena, una fracción de trigo, una fracción de centeno y cualquier combinación de estos. La al menos una fracción a base de cereal puede maltearse adicionalmente y en una realización de la invención la fracción a base de cereal malteado es malta o bagazo de cervecería (BSG), que es un producto derivado del proceso cervecero. En la primera etapa, cuando se elabora la cerveza, la cebada se germina y después se tuesta. La malta se tritura y se mezcla con agua y la mezcla se calienta. El BSG es el subproducto cuando la mezcla se filtra y el filtrado continúa hasta la siguiente etapa de procesamiento cervecero. El BSG ha sido usado con frecuencia como alimento para ganado, pero los resultados de estudios anteriores indican que es de interés examinar si el BSG puede usarse como prebiótico en alimentos para seres humanos.

En una realización de la invención la fracción a base de cereal se ha molido para obtener un tamaño adecuado en la composición, donde el tamaño de al menos una fracción a base de cereal se encuentra en el intervalo de aproximadamente 0,1 mm - 10 mm, preferiblemente 0,5 mm a 5 mm.

La menos una cepa aislada de Lactobacillus se encuentra presente en una cantidad de 106 - 1014 CFU/día, preferiblemente 108 - 1012 CFU/día, más preferiblemente 109 - 1011 CFU/día. CFU es la abreviación de unidades que forman colonias y es una unidad bien conocida para un entendido en la técnica de probióticos.

En una realización de la invención al menos una cepa probiótica aislada se selecciona del grupo de Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei y Lactobacillus fermentum.

En una realización de la invención, la al menos una cepa probiótica aislada es una Lactobacillus rhamnosus 271 (DS 6594). En otra realización, la al menos una cepa probiótica se selecciona del grupo de Lactobacillus plantarum 299, DSM 6595, Lactobacillus plantarum 299v, DSM 9843, Lactobacillus plantarum HEAL 9, DSM 15312, Lactobacillus plantarum HEAL 19, DSM 15313 y Lactobacillus plantarum HEAL 99, DSM 15316.

Lactobacillus plantarum 299, DSM 6595 y Lactobacillus rhamnosus 271 (DSM 6594) se registraron el 2 de julio de 1991 en el Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zelikulturen GmbH, Lactobacillus plantarum 299v, DSM 9843, se registró el 16 de marzo de 1995 en el Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zelikulturen GmbH, Lactobacillus plantarum HEAL 9, DSM 15312, Lactobacillus plantarum HEAL 19, DSM 15313 y Lactobacillus plantarum HEAL 99, DSM 15316, se registraron el 27 de noviembre de 2002, en el Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zelikulturen GmbH. El al menos un probiótico puede estar presente en la composición como un componente secado por liofilización, en forma de un probiótico en un aceite, en forma de un probiótico en una solución o suspensión acuosa, en forma de probiótico secado por pulverización o en forma de probiótico en un estado graso endurecido.

En una realización de la invención esta composición es una formulación líquida o una formulación sólida. Cuando se preparan las composiciones de la invención, tanto en estado líquido como sólido, se usarán los aditivos convencionales empleados en el campo de la técnica y comprendidos por el entendido en el campo de la técnica.

En otra realización esta composición es un alimento medicinal, un alimento funcional, un suplemento alimentario, un producto nutricional, un alimento o un aditivo alimentario. El aditivo alimenticio podría agregarse por ejemplo a cereales, muesli, panes, galletitas, cereales, barras energéticas o productos untables como una composición en polvo mezclada o cada componente por separado. Un ejemplo de lo anterior es, por ejemplo, administrar la fracción a base de cereal en el alimento relevante como por ejemplo muesli y después agregar la cepa probiótica relevante. Los efectos beneficiosos de la invención se obtienen cuando la fracción a base de cereal y las cepas probióticas se toman juntas. Debe entenderse que no es necesario que la combinación se administre como una composición. Es posible, por ejemplo, mezclar los componentes precisamente antes de su consumo.

En otra realización de la invención el alimento es una bebida, un brebaje, un yogur, un jugo o un helado. Por consiguiente, debe comprenderse que la composición puede tomarse fácilmente en forma de un alimento en forma diaria. Por consiguiente, la salud general de la humanidad podría mejorarse mediante el uso de la composición de conformidad con la invención.

La composición de la presente invención puede usarse como un simbiótico. Un simbiótico es un suplemento que contiene tanto un prebiótico como un probiótico que trabajan juntos para mejorar la "flora inocua" del intestino humano.

En una realización adicional la invención se refiere al uso de una composición, para el tratamiento del síndrome metabólico, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, síndrome del intestino irritable (IBS) o enfermedad inflamatoria intestinal (IBD).

Incluso en otra realización, la invención se refiere a una composición como se define en la presente para usar en el mantenimiento de una mucosa intestinal saludable y/o para proporcionar una función de barrera mejorada de la mucosa intestinal.

Experimentos Materiales y métodos Composición de los materiales de prueba La materia prima usada fue la cebada de grano integral (Viking Malt AB, Halmstad, Suecia), malta y bagazo de cervecería (Carlsberg, Falkenberg, Suecia). La cebada de grano integral, la malta y el bagazo de cervecería provenían del mismo lote de harina. Las materias primas se molieron, antes de incluirse en las dietas, según un tamaño de partícula comprendido en el intervalo de aproximadamente 1 mm. La cepa bacteriana incluida en el experimento fue L. rhamnosus 271 (Probi AB, Lund Suecia) y se suministró secada por liofilización.

Animales y diseño del experimento Se prepararon seis dietas de prueba de conformidad con la Tabla 1 : una dieta de referencia contenía cebada de grano integral (WGB) y 5 dietas de prueba incluían cebada de grano integral y L. rhamnosus 271 (WGB+Lr), malta (Malta), malta y L rhamnosus 271 (Malta+Lr), bagazo de cervecería (BSG) o bagazo de cervecería y L. rhamnosus 271 (BSG+Lr). Las materias primas se agregaron a un nivel de 80 g de fibra alimenticia/kg dieta (dwb, en base a peso seco). Se usó almidón de trigo para ajustar el contenido de materia seca, y se ha demostrado previamente que este tipo de almidón es completamente digestible, y por lo tanto no forma ningún CA. La cepa probiótica se incluyó diariamente en la dieta a la hora de la alimentación para cada rata en una cantidad de 2x108 unidades formadoras de colonias (CFU)/d.

La Tabla 1 muestra la composición de las dietas de prueba suministradas a las ratas en los siguientes grupos: cebada de grano integral (WGB), malta (Malta) o bagazo de cervecería (BSG) con o sin la adición de L. rhamnosus (Lr) (Tabla 1).

Tabla 1 Ingrediente dieta1 WGB WGB+Lr Malta Malta+Lr BSG BSG+Lr Cebada de grano integral,2 g 519.53 519.53 0 0 0 0 Malta,4 g 0 0 661 ,23 661 , 23 0 0 Bagazo de cervecería,4 g 0 0 0 0 135,8a 135.83 Caseína, g 120 120 120 120 120 120 DL-Metionina, g 1 ,2 1 ,2 1 ,2 1 ,2 1 ,2 1 ,2 Aceite de maíz, g 50 50 50 50 50 50 Mezcla minerales,5 g 48 48 48 48 48 48 Mezcla vitaminas,6 g 8 8 8 8 8 8 Cloruro de colina, g 2 2 2 2 2 2 Sucrosa, g 100 100 100 100 100 100 Almidón de trigo,7 g 151 ,3 151 ,3 9,6 9,6 535,0 535,0 1Total ingredientes dieta 1000 g. 2Viking alt AB (Halmstad, Suecia).

Correspondiente a 80 g de fibra alimenticia/kg dieta (dwb).

"Carlsberg (Falkenberg, Suecia). 5Contiene (g/kg): 0,37 CuS04 5H20, 1 ,4 ZnS04 7H20, 332, 1 KH2P04, 171 ,8 NaH2P04 2H20, 324,4 CaC03, 0,068 Kl, 57,2 MgS04, 7,7 FeS04-7H2O, 3,4 nS04 H20, 0,02 CoCI-6H20, 101 ,7 NaCI (Bie & Berntsen A-S, Rodovre, Dinamarca). 6Contiene (g/kg): 0,62 menadiona, 2,5 clorhidrato de tiamina, 2,5 riboflavina, 1 ,25 clorhidrato de piridoxina, 6,25 pantotenato de calcio, 6,25 ácido nicotínico, 0,25 ácido fólico, 12,5 inositol, 1 ,25 ácido p-aminobenzoico, 0,05 biotina, 0,00375 cianocobalamina, 0, 187 palmitato de retinol, 0,00613 calciferol, 25 acetato de d-a-tocoferilo, 941 ,25 almidón de maíz (Apoteket, Malmó, Suecia). 7Almidón de trigo (Cerestar, Krefeld, Alemania).

Las ratas Wistar macho (peso inicial, 134 ± 1 g) se obtuvieron en Scanbur (Sollentuna, Suecia). Se dividieron aleatoriamente en seis grupos de siete ratas cada uno y se encerraron individualmente en jaulas metabólicas, en un ambiente a temperatura de 22°C, con ciclos de 12 horas luz/oscuridad. El consumo de alimentos se limitó a 12 g/d (dwb) y las ratas tuvieron acceso libre a agua. Los animales se dejaron adaptar a la dieta durante 7 días y luego continuó un período experimental de 5 días en los que se recogieron diariamente las heces y los residuos de alimentos. Las muestras fecales se conservaron a -20°C y luego se secaron por liofilización y se molieron antes del análisis de la fibra alimenticia. Al final del experimento los animales se anestesiaron mediante inyección subcutánea de una mezcla (1 :1 :2) de Hypnorm (División of Janssen-Cilag Ltd., Janssen Pharmaceutica, Beerse, Belgium), Dormicum (F. Hoffman-La Roche AG, Basel, Suiza) y agua estéril con una dosificación de 0,15 ml/100 g y se recogió sangre, tejido y contenido cecal. Las muestras de sangre se tomaron de la vena porta y se hicieron muestras en dos tubos: una para el plasma que contiene EDTA y otra para el suero. Las muestras de plasma y suero se centrifugaron durante 15 min (2500 x g) y luego se almacenaron a -40°C hasta que se llevó a cabo el análisis de aminoácidos y SCFA. El peso, el contenido y el pH tisular cecal, se midieron directamente. El contenido cecal se dividió en un tubo estéril que contenía medios congelados y se congeló inmediatamente en nitrógeno líquido para el análisis de la microflora y la otra parte del contenido cecal se congeló y almacenó a -40°C hasta realizarse el análisis de la CA, que también se llevó a cabo para diferentes partes del intestino posterior.

Análisis Fibra alimenticia. Se usó un método gravimétrico para determinar la cantidad de fibra alimenticia soluble e insoluble en la materia prima. La , composición del residuo de fibra aislado se analizó usando cromatografía de gas líquido (GLC) de los azúcares neutros, por ejemplo, los acetatos de alditol, y el contenido de ácidos urónicos se analizó mediante un método espectrofotométrico. Los monómeros de fibras en las heces se caracterizaron directamente sin el aislamiento previo de la fibra alimenticia.

CA en heces. Se usó un método GLC para analizar SCFA (ácidos acéticos, propiónicos, isobutíricos, butíricos, isovaléricos, valéricos, caproicos, y heptanoicos) en el contenido intestinal (ciego, colon proximal y distal). Se agregó una solución diluida (HCI 2,5 M) y ácido 2-etilbutírico (estándar interno, 1 mM) a las muestras antes de la homogenización. Después las muestras se centrifugaron antes de inyectarse en una columna capilar de sílice fundida.

El ácido succínico y láctico se cuantificaron de forma espectrofotométrica con equipos enzimáticos disponibles a nivel comercial (Cat. Nos. 10176281035 y 1 112821 , respectivamente; Boehringer Mannheim, Mannheim, Alemania). Los procedimientos se llevaron a cabo de conformidad con las instrucciones del fabricante.

SCFA en suero. Se analizó el SCFA en suero con un método GLC. Se agregó agua y ácido 2-etilbutirico (estándar interno, 1 mM) junto con ácido clorhídrico a las muestras, y luego se sumergió una fibra hueca en la solución de suero para extraer el SCFA. Después de la extracción, se purgó el SCFA del lumen de la fibra y luego se inyectó en una columna capilar de sílice fundido (DB-FFAP 125-3237, J&W Scientific, Agilent Technologies Inc., Folsom, CA USA). Se usó software de GC ChemStation (Agilent Technologies Inc., Wilmington, DE, Estados Unidos) para realizar el análisis.

Contenido de aminoácido en el plasma. Se agregó ácido sulfosalicílico a las muestras de plasma para purificar los aminoácidos libres mediante la precipitación de proteínas de alto peso molecular. Se usó un analizador de aminoácidos (Biochrom 30, Biochrom Ltd, Cambridge, Reino Unido) a base de cromatografía por intercambio iónico para cuantificar la cantidad de aminoácidos. Se usó el paquete de software de EZChrom Elite (Scientific Software Inc., Pleasanton, CA, Estados Unidos) para realizar el análisis.

Microflora intestinal. Las muestras cecales se descongelaron y después de la homogenización se completó un procedimiento de dilución seriado convencional y las diluciones apropiadas se distribuyeron en placas de agar. Se obtuvieron recuentos viables de agar Rogosa (Oxoid, Unipath Ltd., Basingstoke, Reino Unido) incubado anaeróbicamente a 37°C durante 72 h (recuentos de lactobacilos), de agar Modified Wilkins-Chalgren (Oxoid) incubado anaeróbicamente a 37°C durante 72 h (recuentos de bifidobacteria), y de violeta rojo bilis glucosa agar VRBG (Oxoid) incubado aeróbicamente a 37°C durante 24 h (recuentos de Enterobacteriaceae). Se contó la cantidad de colonias formadas en cada placa y se corrigió en función del peso de las muestras originales.

Cálculos y análisis estadísticos La concentración de cada CA (µ????/g) se multiplicó por la cantidad de contenido cecal para obtener las mezclas cecales (µ?t???). Para corregir las cantidades pequeñas de residuos alimenticios los valores de las mezclas se extrapolaron hasta el consumo completo de la fibra alimenticia (4,8 g). La ganancia de peso corporal durante el período experimental se calculó por gramo de alimento consumido.

Para determinar los efectos de la fibra alimenticia (Fibra), los probióticos (Pro) y sus interacciones (FibraxPro) se aplicó ANOVA de 2 vías (Tablas 3-5 y 7). Se aplicó ANOVA de una vía para medios individuales para evaluar el efecto de la fibra alimenticia o el efecto del probiótico mediante el procedimiento de Tukey. Cuando se encontró que la variación de errores era heterogénea, los datos se transformaron mediante transformación de BoxCox antes de aplicar ANOVA. Los valores se presentaron como promedios ± SEM y las diferencias resultantes en valores P menores a 0,05 se consideraron significativos. Todas las evaluaciones se llevaron a cabo con software estadístico de Minitab (Lanzamiento 14).

Resultados Excreción fecal de la fibra alimenticia El contenido de la fibra alimenticia fue similar en la cebada de grano integral y la malta (15,4 y 12,1 g/100g, dwb, respectivamente), mientras que el bagazo de cervecería contenía de 4-5 veces más fibra alimenticia (58,2 g/100g, dwb). Los principales componentes de los polisacáridos de la fibra alimenticia fueron glucosa (35-49%), xilosa (29-35%) y arabinosa (16-22%). Los polisacáridos de la fibra alimenticia en la cebada de grano integral y el bagazo de cervecería estaban más fermentados en el colon de rata que la malta (Tabla 2). El cincuenta y seis por ciento de la fibra de la malta se excretó en heces, mientras que se excretó un 38% y un 49%, respectivamente, de la fibra de la cebada de grano integral y del bagazo de cervecería (P<0,001). De los principales componentes, la xilosa se fermentó de forma similar 45 ± 4%, mientras que la arabinosa y sobre todo la glucosa se fermentaron con diferentes grados (P<0,01 y P<0,001 , respectivamente). Los polímeros que contienen glucosa fueron más resistentes a la fermentación en la malta (72% se excretó en heces) y más fermentados en la cebada de grano integral (36% se excretó en heces). No se pudieron observar diferencias en el grado de fermentación al agregarse Lr a las dietas, siendo una excepción las pequeñas cantidades de ácido urónico presentes, que fue más fermentado con Lr presente en la dieta que la cebada de grano integral sola (P=0,040).

Tabla 2 WGB WGB WGB+Lr Malta Malta Malta+Lr BSG BSG BSG+Lr g/100 g/100 g/100 % de consumo % de consumo % de consumo g g g Ramnosa tr1 tr1 tr1 tr1 tr1 tr1 tr1 tr1 tr1 36a,b Arabinosa 2,0 33a 35 1 ,7 40b 37 7,7 36 Xilosa 3,5 43 41 2,7 49 48 12,1 45 45 Mañosa 0,3 19a 18 0,2 34b 33 0,5 37b 40 Galactosa 0,2 66a 72 0,2 68a 67 1 ,1 51 b 54 Glucosa 5,9 36a 35 2,7 72" 68 13,8 57 58 Ácido 0,3 64 56* 0,3 56 55 1 ,3 59 60 uránico Polisacáridos fibra 12,2 38a 38 7,8 56" 54 36,7 49° 49 alimenticia Lignina 3,2 nd2 nd2 4,3 nd2 nd2 21 ,5 nd2 nd2 Total 15,4 nd2 nd2 12,1 nd2 nd2 58,2 nd2 nd2 1tr = vestigios, menos de 0,05 g/100 g. 2nd - sin determinar.

Consumo de alimento y aumento de peso corporal Las ratas de los diferentes grupos comieron la mayor parte de la dieta proporcionada (56,6-59,3 g/5d). Asimismo, el aumento del peso corporal, y del contenido cecal, peso tisular y pH fueron bastante similares entre estos grupos (Tabla 3). Cuando se agregaron los probióticos a las dietas se pudieron ver algunas diferencias. Hubo una mayor ganancia de peso corporal en ratas con BSG (P=0,044), y un contenido cecal y un peso tisular más altos junto con WGB (P=0,019 y P=0,004, respectivamente). Se pudo observar un pH cecal más bajo con WGB (P=0,01 1) y con Malta (P=0,032). La capacidad volumétrica fue más alta en ratas alimentadas con Malta en comparación con los otros productos (P<0,001).

Tabla 3 BWG significa ganancia peso corporal g/g CC significa contenido cecal, g CTW significa peso tejido cecal, g BC significa capacidad volumétrica, g g fibra ingerida Los valores son medios ± SEM, n = 7. Malta+Lr, n = 6 2Los valores medios de WGB, Malta y BSG, es decir, aquellos sin ningún agregado probiótico, on letras superíndices diferentes fueron significativamente distintos (P<0,05). 3Los valores medios fueron significativamente diferentes a aquellos de las ratas alimentadas con dietas sin bacterias: *P<0,05, **P<0,01 .

La formación de CA en el intestino posterior de ratas Las ratas alimentadas con Malta tenían un nivel y una mezcla más altos de CA que las ratas alimentadas con WGB (79 con respecto a 62 µ????/g, P=0,027 y 173 con respecto a 1 16 pmol, P=0,037, respectivamente), mientras que las otras dos fracciones de cebada tuvieron niveles (62-66 pmol/g) y mezclas (123-173 pmol) cecales similares de CA (Tabla 4). En general, la cepa probiótica modificó los niveles cecales de más CA individuales que las diferentes fracciones de fibra. Sin embargo, únicamente se observaron diferencias significativas entre las dietas que contenían L. rhamnosus y las dietas correspondientes sin esta cepa probiótica en ratas alimentadas con WGB. El mayor ácido formado en el ciego de ratas alimentadas con las seis dietas de prueba fue ácido acético (62 ± 3%), seguido por ácido butírico (15 ± 4%) y ácido propiónico (14 ± 1%).

Tabla 4: 1Los valores son medios ± SEM, n = 7. Malta+Lr, n = 6. Distal: Malta+Lr, n = 6; WGB, BSG, n = 5. 2Los valores medios de WGB, Malta y BSG, es decir, aquellos sin ningún agregado probiótico, con letras superíndices diferentes fueron significativamente distintos (P<0,05). 3Los valores medios fueron significativamente distintos de aquellos de las ratas alimentadas con dietas sin bacterias: *P<0,05, **P<0,01.

El nivel cecal se presenta en µ?-nol/g.

El nivel cecal de ácido acético en ratas alimentadas con Malta fue más alto en ratas alimentadas con WGB (P=0,035), que también podían observarse con ácido butírico (P=0,016) y ácido láctico (P=0,024). Asimismo, las ratas que recibieron BSG tenían un nivel más alto de ácido láctico que el grupo de WGB (P=0,003). Los niveles de todos los ácidos, salvo los niveles de ácido láctico y succínico, fueron más altos cuando se agregaron los probióticos al grupo WGB (P=0,011-0,033).

Los niveles en la parte proximal y distal del colon (no se muestran los datos) fueron muy similares a las diferentes dietas de prueba (46-56 pmol/g y 44-73 pmol/g, respectivamente). En la parte distal del colon, la fracción de fibra generalmente tenía un impacto superior sobre los niveles de CA que L. rhamnosus. Sin embargo, hubo únicamente una diferencia individual entre los materiales de prueba relativos a los niveles de ácido butírico, es decir, las ratas alimentadas con WGB tenían un nivel más bajo de ácido butírico que las ratas alimentadas con Malta (P=0,025). Los niveles de ácido acético y propiónico y el nivel distal total fueron más altos en ratas alimentadas con Malta suplementada con L. rhamnosus en comparación con Malta únicamente (P=0,02, P=0,048 y P=0,038, respectivamente). También se encontró un nivel más alto de ácido propiónico en las ratas que recibieron WGB+Lr que en las ratas alimentadas con WGB únicamente (P=0,047).

Nivel de SCFA en la sangre de la vena porta El ácido acético (976-1596 µ????/?), el ácido propionico (72-195 µ?t???/?) y el ácido butírico (46-208 µ?t???/?) fueron los ácidos más presentes en la sangre de la vena porta (Tabla 5). Las ratas alimentadas con Malta tenían niveles más altos de ácido propionico y de ácido butírico en la sangre de la vena porta que las ratas que recibieron WGB (P=0,039 y P=0,011 , respectivamente) y BSG (P=0,020 y P=0,032, respectivamente). Las ratas que recibieron Malta+Lr tuvieron un nivel muy alto de ácido butírico en la sangre de la vena porta, en comparación con el grupo de Malta. La diferencia en el nivel de ácido butírico no fue significativa, pero muy próxima a serlo (P=0,055). Los ácidos menores (ácidos ¡so-butírico, iso-valérico y valérico) fueron más altos en la sangre de la vena porta de las ratas alimentadas con WGB+Lr que en las ratas alimentadas únicamente con WGB (P=0,040).

Tabla 5: Vos valores son medios ± SEM, Malta, n = 6; WGB, WGB+Lr, Malta+Lr, BSG, n = 5; BSG+Lr, n = 4. 2Los valores medios de WGB, Malta y BSG, es decir, aquellos sin ningún agregado probiótico, con letras superíndices diferentes fueron significativamente distintos (P<0,05). 3Los valores medios fueron significativamente distintos de aquellos de las ratas alimentadas con dietas sin bacterias: *P<0,05.

Composición de aminoácidos en productos de cebada Las cantidades totales de aminoácidos fueron aproximadamente iguales en la cebada de grano integral y la malta (9,7 g/100 g y 9,5 g/100 g), mientras que el bagazo de cervecería contenía considerablemente más (24,3 g/100 g) (Tabla 6). El patrón de aminoácidos de los productos de cebada fue similar a la proporción más alta de ácido glutámico, seguido por ácido prolina, leucina y asparagina.

Tabla 6 Cebada de Bagazo de Malta grano integral cervecería Ácido asparagina, % 6 7 7 Treonina, % 3 4 4 Serina, % 5 4 4 Ácido glutámico, % 23 20 20 Prolina, % 12 1 1 10 Glicina, % 4 4 4 Alanina, % 4 5 5 Valina, % 5 6 6 Cisteína, % 3 3 2 Metionina, % 2 2 2 Iso-leucina, % 4 4 4 Leucina, % 7 7 8 Tirosina, % 3 3 4 Fenilalanina, % 5 5 6 Usina, % 4 4 4 Histidina, % 2 3 2 Arginina, % 5 5 5 NH4, % 3 3 2 Total, g/100 g 9,7 9,5 24,3 Consumo total, g/5 d 3,0 3,8 2,0 Distribución de aminoácidos en la sangre de la vena porta Había cantidades detectabies de 19 aminoácidos en todos los grupos, pero se indican únicamente los aminoácidos con diferencias significativas en la Tabla 7. Las fracciones de fibras modificaron los aminoácidos en una medida similar a la de la cepa probiotica, aunque no modificaron los mismos aminoácidos.

Vos valores son medios ± SEM, n = 7; Malta, Malta+Lr, n = 6; BSG, n = 5. 2Los valores medios de WGB, Malta y BSG, es decir, aquellos sin ningún agregado probiótico, con letras superíndices diferentes fueron significativamente distintos (P<0,05). 3Los valores medios fueron significativamente distintos de aquellos de las ratas alimentadas con dietas sin bacterias: *P<0,05, **P<0,01.

Las ratas que recibieron WGB tuvieron la proporción más alta de glutamina (P=0,01 en comparación con el grupo que recibió Malta) y tirosina (P=0,027 en comparación con el grupo que recibió BSG), mientras que la proporción de histidina y NH4 fue la más baja de las tres fracciones (P=0,01 en comparación con las ratas alimentadas con BSG, y P=0,01 en comparación con Malta y BSG, respectivamente). La proporción de glutamina y tirosina fue más alta en el grupo BSG+Lr que en el grupo BSG (P=0,046 y P=0,025, respectivamente). Sobre todo, la proporción portal de seronina fue más alta en las ratas alimentadas con BSG que las otras dietas de prueba, aunque no se pudieron observar significancias individuales entre las ratas alimentadas con las diferentes fracciones de fibra.

Bacteriología En general, los recuentos cecales viables de bifidobacteria y Enterobacteiaceae se vieron afectados por las fracciones de fibras y los recuentos de bifidobacteria también se vieron afectados por L rhamnosus (Fig. 1). Las ratas alimentadas con Malta tuvieron un recuento más bajo de bifidobacteria que las ratas que recibieron WGB o BSG (6,3 ± 0,2 log CFU/g contenido cecal con respecto al contenido cecal 7,0 ± 0,1 log CFU/g medio, P<0,006), y al agregarse L. rhamnosus a la dieta de WGB los recuentos de bifidobacteria fueron más bajos que en las ratas alimentadas con WGB únicamente (6,3 ± 0.2 log CFU/g contenido cecal con respecto a 6,9 ± 0,1 log CFU/g contenido cecal, P=0,021). Si bien los recuentos viables de Enterobacteriaceae en el grupo de Malta no fueron significativamente más bajos que en el grupo WGB, el valor p fue muy próximo a tener significancia (P=0,059).

Se ha planteado que el ácido butírico es importante para la salud del colon ya que, por ejemplo, reduce el riesgo de las enfermedades inflamatorias del intestino y del cáncer de colon. Estos efectos pueden deberse a su función como principal fuente de energía de las células epiteliales, y a su rol fundamental en la regulación de la proliferación y diferenciación de las células. Se ha informado que la glutamina también constituye una fuente de energía importante de las células epiteliales mucosales, y como tales, son capaces de recuperar y conservar la mucosa intestinal y prevenir la translocación bacteriana. Se ha informado que el GBF, que se sabe contiene cantidades elevadas de ß-glucanos y glutamina, reduce la respuesta inflamatoria epitelial tanto en individuos con colitis ulcerosa como en ratones con colitis inducida por DSS. Se ha demostrado anteriormente que los ß-glucanos de cebada pura proporcionan cantidades comparativamente altas de ácido butírico en ratas, y se ha sugerido que la glutamina en GBF es un sustrato para la mucosa, ya que se encuentra ligada a la fibra de la cebada. En este experimento, se usaron tres fracciones diferentes de cebada sola o en combinación con una cepa probiótica L. rhamnosus para evaluar el rol potencial del bagazo de cervecería (BSG) como un producto prebiótico, contemplando la formación cecal de CA, los niveles de SCFA y aminoácidos en la sangre, y la composición cecal de la flora bacteriana (lactobacilos, bifidobacterias, Enterobacteriacece) en ratas en comparación con la cebada en grano (WGB) y la malta (Malta), y si la suplementación de L. rhamnosus producía algún efecto adicional.

La malta produjo niveles más altos de ácido butírico en el ciego, la parte distal del colon y en la sangre de la vena porta de las ratas en comparación con WGB, y en la sangre de la vena porta también en comparación con BSG. El nivel de ácido propiónico también fue más alto en la sangre de la vena porta. Los niveles de circulación aumentados tanto de ácido butírico como propiónico se asocian con los efectos metabólicos. Recientemente, se ha sugerido que estos ácidos pueden modular marcadores proinflamatorios y de esa manera afectar parámetros conectados con los trastornos metabólicos. También se ha informado que un consumo aumentado de fibra alimenticia de la cebada por la noche mejora la tolerancia a la glucosa en un desayuno estandarizado tomado posteriormente, lo que se puede relacionar con niveles de plasma aumentados de SCFA. Se podría especular sobre si la microflora cecal modificada en ratas alimentadas con Malta facilitó el transporte de SCFA a través de la mucosa, en comparación con WBG y BSG. La importancia de la composición de la microflora, en este respecto, se establece también por el hecho que la cepa probiótica L rhamnosus 271 , generalmente influye el nivel y patrón de SCFA formado. Por consiguiente, los niveles de ácido butírico tanto en el ciego como en la sangre de la vena porta fueron más altos cuando se agregaron las cepas a las dietas. Si bien se observaron pocas diferencias individuales entre los grupos, especialmente en la sangre, el probiótico agregado tenía claramente un efecto y aumentaba los niveles de SCFA, lo que se indica por la significancia general en las Tablas 4 y 5 (Pro). El valor p de la diferencia en ácido butírico entre la Malta y Malta+Lr estuvo muy próximo a la significancia (P=0,055), y puede especularse si ratas adicionales en los grupos o un período experimental más largo hubieran producido una diferencia significativa. Se ha indicado anteriormente, un nivel más alto de SCFA en la sangre al agregarse probióticos a las dietas ricas en fibras. Sin embargo, debe notarse que los niveles de, especialmente ácido butírico pero también ácido propiónico en el ciego y sangre de la vena porta, fueron considerablemente más altos en las ratas alimentadas con las fracciones de cebadas en comparación con este experimento anterior en el que las ratas se alimentaron con cáscaras de arándanos. El grado de fermentación aumentada también se reflejó en los pH de los probióticos y fue menor en los grupos que recibieron L. rhamnosus 271. Al respecto, vale la pena mencionar que un pH bajo, reduce el crecimiento de patógenos potenciales, por ejemplo, Clostridia, y por consiguiente parece que L. rhamnosus 271 puede contrarrestar una flora patogénica.

Las ratas alimentadas con Malta tuvieron el nivel más alto de ácido butírico en la parte distal del colon (P<0,05 en comparación con WBG). Es de suma importancia que las fibras alimenticias puedan alcanzar no solo el colon proximal pero también la parte distal, ya que las enfermedades colónicas por ejemplo, colitis ulcerosa y cáncer de colon tienen lugar con frecuencia en este sitio del colon. Los individuos con colitis ulcerosa aumentaron sus niveles fecales de ácido butírico después de 4 semanas siguiendo una dieta con ß-glucanos enriquecidos con salvado de avena, y a diferencia de los controles, las quejas al ingresar mejoraron con este tratamiento. Se obtuvieron resultados similares por Kanauchi y sus colaboradores con alimento de cebada germinada.

Las mezclas cecales y los niveles de CA fueron más altos en las ratas alimentadas con Malta en comparación con WGB, lo que indica una gran medida de fermentación de la fibra. Sin embargo, la fibra, incluida la glucosa que contiene los polisacáridos de fibra alimenticia, en la malta fue la menos fermentada de las tres fracciones de cebada estudiadas. Una posible explicación podría ser que la fibra de la cebada de grano integral se degrada durante el malteado y no se precipita en etanol durante el análisis de fibra alimenticia. Esto significa que el consumo de fibra alimenticia para las ratas alimentadas con Malta fue de hecho más alto que con las otras preparaciones de cebada, lo que llevó a una formación más alta de CA. Los valores de la Tabla 2 se basan en un análisis de fibras, es decir, únicamente se miden los polisacáridos que tienen un grado más alto de polimerización (aproximadamente 20), lo que produce un grado aparente más bajo de fermentación. Sin embargo, esto no constituye un problema con este método únicamente, pero con todas las metodologías de fibras alimenticias usadas actualmente. La inclusión de carbohidratos indigestibles con un grado de polimerización más bajo en el cálculo de fermentación disminuirá la excreción fecal en aproximadamente un 36%. El BSG fue el menos fermentado (P<0,05 en comparación con WGB), probablemente debido a un enriquecimiento de celulosa que contiene polisacáridos, que se sabe son pobremente fermentados.

La cantidad de recuentos de bifidobacterias fue más baja con la Malta que con otras fracciones de cebada. Si bien las bacterias contadas en este experimento no constituyen la totalidad de la microflora, puede indicar que la microflora se vio alterada. Una microflora modificada también puede producir otras vías de fermentación y una formación modificada de productos de degradación, como se juzga a partir de los niveles más altos de ácido butírico en el ciego y la parte distal del colon en ratas alimentadas con Malta en comparación con los otros productos de cebada.

El contenido total de proteínas, medido como aminoácidos, fue cerca de tres veces más alto en el bagazo de cervecería que en la malta y la cebada de grano integral, mientras que la composición de la proteína fue muy similar en las tres fracciones de cebada. La contribución de proteínas a partir de las fracciones de cebada en las dietas, sin embargo, fue la más alta con la Malta (Tabla 6). Sin embargo, no hubo diferencias en la cantidad total de aminoácidos en la sangre de la vena porta. No obstante, se encontraron algunas diferencias en la distribución de los aminoácidos, y las ratas alimentadas con WGB tuvieron una proporción más alta de glutamina en el plasma que el grupo alimentado con Malta. En este experimento, no se determinó si la cebada de grano integral contenía proteína indigestible, incluida la glutamina, que podía alcanzar el colon para la fermentación. Se ha sugerido que una formación aumentada de ácido butírico puede reducir la necesidad de glutamina, aumentando así la circulación de los niveles de glutamina. La Malta que proporciona altas cantidades de ácido butírico no figuró en ninguno de los niveles altos de glutamina en plasma de ratas de otras fracciones de cebada, lo cual indica que la glutamina no alcanza el colon en ninguna medida importante y por lo tanto no se absorbe ahí. De hecho, se ha demostrado que las cáscaras de arándanos en una dieta que contiene caseína como una fuente proteica, proporcionan niveles de plasma similares de glutamina, como en el presente experimento, utilizando el mismo modelo animal (datos no publicados). Esto puede implicar que ninguna de las fracciones de cebada empleadas en este experimento aumentó los niveles de plasma de la glutamina más que la caseína. Los efectos beneficiosos de GFB en hombres con colitis ulcerosa y en ratas con colitis inducida por DSS han sido atribuidos en parte a la glutamina.

Existen algunas dificultades al analizar la glutamina en los materiales de prueba. Durante la hidrólisis ácida, la glutamina se convierte en ácido glutámico y la cantidad de ácido glutámico por lo tanto incluye también la cantidad de glutamina. Sin embargo, únicamente se pueden encontrar rastros de ácido glutámico en el alimento de cebada germinada y por lo tanto, la mayoría de las cantidades medidas deben ser glutamina. Asimismo, se ha informado que la glutamina en la cebada se encuentra ligada a la fibra alimenticia, que alcanza el colon y después de la fermentación de la fibra es un sustrato para la mucosa colónica. A pesar de esto, se sabe que la glutamina es un aminoácido muy frágil y la mayoría de la glutamina que no se encuentra ligada a la fibra alimenticia se degrada por el ácido gástrico. El grupo de Malta tuvo niveles más bajos de plasma de glutamina, y podría especularse sobre esto está relacionado de alguna manera con el proceso de malteado. Como se discute anteriormente, parece que la fibra alimenticia se hubiera degradado durante el malteado, lo que puede producir cantidades más reducidas de glutamina ligada.

El nivel de amoníaco en el plasma en el grupo de Malta fue más alto en las ratas alimentadas con WGB y BSG. El origen del amoníaco en la vena porta es complejo, pero algo se origina a partir del metabolismo de glutamina. Esto puede constituir otra razón para la proporción más baja de glutamina en el grupo de Malta. Estudios anteriores realizados en hombres, demostraron que una cantidad aumentada de bifidobacteria fecal estaba asociada con un nivel reducido de amoníaco en las heces y sangre. Se sabe que Bifidobacterium spp. utilizan amoníaco como una fuente de nitrógeno para su crecimiento. Las ratas alimentadas con Malta tenían un recuento viable más bajo de bifidobacteria cecal, lo que indica que esto podría explicar la proporción más alta de amoníaco encontrada en la sangre de la vena porta. Se ha demostrado que el amoníaco es tóxico para las células y que altera la síntesis de ADN y por consiguiente ha sido propuesto como un promotor de carcinogénesis en humanos. Una manera de disminuir el nivel de amoníaco en las ratas alimentadas con Malta puede ser agregar bifidobacteria. El L. rhamnosus utilizado en este experimento no disminuyó, sino que por el contrario aumentó el nivel de amoníaco en la sangre.

En conclusión, en los experimentos llevados a cabo de conformidad con la presente invención, la cebada en forma de cebada de grano integral, el bagazo de cervecería o la cebada malteada en combinación con una cepa probiótica dieron lugar a un aumento considerable en la formación de ácido butírico en el colon, véase la tabla 4, y en la sangre, véase la tabla 5, en comparación con la situación en que las fracciones de cebada se administraban por si solas. Como puede observarse en la tabla 5, el aumento es más del doble para WGB y Malta, y casi el doble para BSG en la sangre. El interés comercial de una composición que comprende estos componentes radica en los muchos efectos beneficiosos vinculados al ácido butírico. Por consiguiente, la formación de CA, no sólo de ácido butírico, aumentó cuando la cepa probiótica L. rhamnosus se agregó a las fracciones de cebada, aunque muchos de los efectos se indicaron junto con WBG, por ejemplo, niveles mayores de ácido butírico en el ciego y la sangre de la vena porta. En vista de las similitudes de los cereales de cebada, avena y centeno, se espera que también se obtengan los mismos resultados con los otros cereales.

Claims (17)

REIVINDICACIONES

1 . Una composición no fermentada que tiene la capacidad de aumentar la formación de ácido butírico en el colon que comprende al menos una fracción a base de cereal y al menos una cepa probiótica aislada de Lactobacillus, donde la al menos una fracción a base de cereal es una fracción de cebada y se encuentra presente en la composición no fermentada en el intervalo de un 40-100 % en peso.

2. Una composición no fermentada de conformidad con la reivindicación 1 , donde la al menos una fracción a base de cereal es una fracción de cereal de grano integral.

3. Una composición no fermentada de conformidad con la reivindicación 1 o 2, donde la al menos una fracción a base de cereal es una fracción a base de cereal molido y/o tratado con calor, una fracción a base de cereal extruido, expandido, una fracción a base de cereal secado por tambor, una fracción a base de cereal en copos o una fracción a base de cereal cocido al vapor.

4. Una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -3, donde la al menos una fracción a base de cereal se somete a malteado adicional.

5. Una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -4, donde la al menos una cepa aislada de Lactobacillus se encuentra presente en una cantidad de 10e - 1014 CFU/día, preferiblemente 08 - 1012 CFU/día, más preferiblemente 109 -1011 CFU/día.

6. Una composición no fermentada seca que tiene la capacidad de aumentar la formación de ácido butírico en el colon que comprende al menos una fracción a base de cereal y al menos una cepa probiótica aislada de Lactobacillus, donde la al menos una fracción a base de cereal es una fracción de cebada y esta fracción de cebada se encuentra presente en la composición no fermentada como bagazo de cervecería y la al menos una cepa aislada de Lactobacillus se encuentra presente en una cantidad de 106 - 1014 CFU/día, preferiblemente 108 - 1012 CFU/día, más preferiblemente 109 - 1011 CFU/día.

7. Una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde el tamaño de la al menos una fracción a base de cereal se encuentra en el intervalo de aproximadamente 0,1 mm - 10 mm.

8. Una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, donde la al menos una cepa probiótica aislada de Lactobacillus se selecciona del grupo de Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei y Lactobacillus fermentum.

9. Una composición no fermentada de conformidad con la reivindicación 8, donde la al menos una cepa probiótica aislada es una Lactobacillus rhamnosus 271 , DSM 6594.

10. Una composición no fermentada de conformidad con la reivindicación 8, donde la al menos una cepa probiótica se selecciona del grupo de Lactobacillus plantarum 299, DSM 6595, Lactobacillus plantarum 299v, DSM 9843, Lactobacillus plantarum HE AL 9, DSM 15312, Lactobacillus plantarum HE AL 19, DSM 15313 y Lactobacillus plantarum HEAL 99, DSM 15316.

11. Una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-10, donde esta composición es un alimento medicinal, un alimento funcional, un suplemento alimentario, un producto nutricional, un alimento o un aditivo alimentario.

12. Una composición no fermentada de conformidad con la reivindicación 11 , donde el aditivo alimenticio se agrega a cereales, muesli, panes, galletitas, cereales, barras energéticas o productos para untar.

13. Una composición no fermentada de conformidad con la reivindicación 11 , donde el alimento es una bebida, un brebaje, un yogur, un jugo o un helado.

14. Una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -13, para usar en el tratamiento del síndrome metabólico, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, síndrome del intestino irritable (IBS) o enfermedad inflamatoria intestinal (IBD).

15. Una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-13, para usar en el mantenimiento de una mucosa intestinal saludable y/o para la proporción de una función de barrera mejorada de la mucosa intestinal.

16. Uso de una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -13 para la fabricación de una composición para el tratamiento del síndrome metabólico, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, síndrome del intestino irritable (IBS) o enfermedad inflamatoria intestinal (IBD).

17. Uso de una composición no fermentada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -13, como un simbiótico.