MX2012005003A - Arilindenopirimidinas susitituidas con heterociclico y su uso como antagonistas de los receptores de adenosina a2a altamente selectivos. - Google Patents

Abstract

La presente invención se relaciona con una nueva arilindenopirimidina, A, y sus usos terapéuticos y profilácticos. Los trastornos que se tratan y/o previenen incluyen la enfermedad de Parkinson. (Ver formula). En donde X, R2, R3 y R4 son como se definieron en la especificación.

Description

ARILINDENOPIRIMIDINAS SUSTITUIDAS CON HETEROCICLILO Y SU USO COMO ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES DE ADENOSINA A2A ALTAMENTE SELECTIVOS REFERENCIA CRUZADA A LAS SOLICITUDES RELACIONADAS La presente solicitud reclama los beneficios de la presentación de la Solicitud Provisional de EE.UU. No. 61/255,931 presentada el 9 de octubre de 2009. Las descripciones completas de las solicitudes de patentes relacionadas anteriormente mencionadas se incorporan a la presente descripción como referencia para todos los propósitos.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con arilindenopirimidinas sustituidas con heterociclilo y sus usos terapéuticos y profilácticos. Los trastornos que se tratan y/o previenen incluyen los trastornos neurodegenerativos y motores que se mejoran por la antagonización de los receptores de adenosina A2A- La presente solicitud está dirigida a un subgrupo de un género pendiente de compuestos descrito en la patente de los Estados Unidos núm. US 2009/0054429 A1 .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La adenosina es un nucleótido de purina producido por todas las células metabólicamente activas dentro del organismo. La adenosina ejerce sus efectos a través de cuatro subtipos de receptores de superficie celular (A1 , A2A, A2b y A3), que pertenecen a la superfamilia de receptores acoplados a la proteína G. Los subtipos A1 y A3 se acoplan a la proteína G inhibidora, mientras que A2A y A2b se acoplan a la proteína G estimuladora. Los receptores A2A se encuentran principalmente en el cerebro, tanto en las neuronas como en las células gliales (nivel más alto en el cuerpo estriado y núcleo accumbens, nivel moderado a alto en las regiones del tubérculo olfatorio, hipotálamo, hipocampo, etc.).

En los tejidos periféricos, los receptores A2A se encuentran en las plaquetas, neutrófilos, músculo liso vascular y endotelio. El cuerpo estriado es la región principal del cerebro para regular la actividad motora, especialmente a través de su inervación por parte de neuronas dopaminérgicas que se originan en la sustancia negra. El cuerpo estriado es el objetivo principal de degeneración de neuronas dopaminérgicas en pacientes con la enfermedad de Parkinson (PD, por sus siglas en inglés). Dentro del cuerpo estriado, los receptores A2A se localizan junto con los receptores de dopamina D2, lo que sugiere un sitio importante para la integración de la señalización de la adenosina y dopamina en el cerebro.

Los bloqueadores de los receptores de adenosina A2A pueden proporcionar una nueva clase de agentes antiparkinsonianos (Impagnatiello, F.; Bastía, E.; Ongini, E.¡ Monopoli, A. Emerging Therapeutic Targets, 2000, 4, 635).

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de adicciones. Los principales fármacos de abuso (opiáceos, cocaína, etanol, y similares) modulan directa o indirectamente los mecanismos de señalización de la dopamina en las neuronas, especialmente las que se encuentran en el núcleo accumbens, que contienen altos niveles de receptores de adenosina A2A- Se demostró que la dependencia aumenta con la vía de señalización de la adenosina y que la administración de un antagonista del receptor A2A reduce el deseo de consumir sustancias adictivas ("The Critical Role of Adenosine A2A Receptors and Gi ß? Subunits ¡n Alcoholism and Addiction: From Cell Biology to Behavior", de Ivan Diamond and Lina Yao, (The Cell Biology of Addiction, 2006, págs. 291-316) y "Adaptations in Adenosine Signaling in Drug Dependence: Therapeutic Implications", de Stephen P. Hack and Macdonald J. Christie, Critical Review in Neurobiology, Vol. 15, 235-274 (2003)). Véase también Alcoholism: Clinical and Experimental Research (2007), 31(8), 1302-1307.

Se podría usar un antagonista del receptor A2A para tratar el trastorno de hiperactividad y déficit de atención (ADHD, por sus siglas en inglés), puesto que la cafeína (un antagonista no selectivo de la adenosina) puede ser útil para tratar el ADHD, y existen muchas interacciones entre la dopamina y la adenosina a nivel neuronal. "Clinical Genetics" (2000), 58(1 ), 31-40 y las referencias incluidas allí.

Puede usarse un antagonista de A2A selectivo para tratar la migraña aguda y profilácticamente. Los antagonistas selectivos de adenosina mostraron actividad en los modelos animales agudos y profilácticos para la migraña ("Effects of K-056, a novel selective adenosine A2A antagonist in animal models of migraine", de Kurokawa M. y otros, Abstract from Neuroscience 2009).

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de la depresión. Los antagonistas A2A se conocen por inducir actividad en diversos modelos de depresión, incluidas las pruebas de natación forzada y de suspensión por la cola. La respuesta positiva es mediada por la transmisión dopaminérgica y se causa por una prolongación de la conducta orientada al escape más que por un efecto estimulante motor. Neurology (2003), 61 (supl. 6) S82-S87.

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de la ansiedad. Se ha demostrado que los antagonistas A2A previenen respuestas emocionales/ansiosas in vivo. Neurobiology of Disease (2007), 28(2) 197-205.

Los antagonistas A2A se describieron en la patente de Estados Unidos núm. US 7,468,373 B2, y la solicitud de patente de Estados Unidos núm. US 2009/0054429 A1 , y las referencias en ellas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN El género de compuestos descrito en la patente de los Estados Unidos núm. US 2009/0054429 A1 tiene una actividad mixta de antagonismo de los receptores A?A y A1. Para muchos trastornos para los que el antagonismo del receptor A2A es terapéuticamente útil, la actividad del receptor A1 es indeseada y puede contribuir a los efectos secundarios o incluso oponerse al efecto beneficioso de la actividad compuesta primaria de Az La presente invención proporciona un grupo pequeño de compuestos cubiertos por el género descrito en el caso principal pero que han demostrado tener una selectividad sorprendente e inesperada para el receptor A2A. El grupo seleccionado de compuestos de la presente invención tiene relaciones de actividad ?2? /A1 de por lo menos 50/1 , mientras que el elemento promedio del género tiene una relación de actividad A2A /A1 de 1/1. Por lo tanto, se espera que los compuestos de la presente invención tengan una eficacia terapéutica mucho mayor y/o menos efectos secundarios. arilindenopirimidinas sustituidas heteroarilo seleccionadas de la Fórmula A muestran una selectividad inusualmente alta para el antagonismo del receptor A2A por encima del receptor A1. en donde: X es C=0; R2 es fenilo; R4 es NH2 y y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de estos; DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona un compuesto de la Fórmula A JNJ-39928122. en donde: X es C=0; R2 es fenilo; R4 es NH2 y R3 se selecciona del grupo que consiste en y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de estos; La presente invención proporciona, además, un método para tratar a un sujeto que tiene un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A,' el método comprende administrar al sujeto una dosis con eficacia terapéutica de un compuesto de la Fórmula A.

La presente invención proporciona, además, un método para prevenir un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en un sujeto; el método comprende administrar al sujeto una dosis con eficacia profiláctica de un compuesto de la reivindicación 1 , ya sea antes o después de un evento que se piensa causará un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en el sujeto.

Los compuestos instantáneos de la presente pueden estar aislados y usarse como bases libres. También pueden estar aislados y usarse como sales farmacéuticamente aceptables.

Algunos ejemplos de estas sales incluyen sales de los ácidos bromhídrico, hidroyódico, clorhídrico, perclórico, sulfúrico, maleico, fumárico, mélico, tartárico, cítrico, adípico, benzoico, mandélico, metanosulfónico, hidroetanosulfónico, bencenosulfónico, oxálico, palmoico, 2 naftalenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclohexanosulfámico y sacárico.

La presente invención proporciona, además, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula A y un portador farmacéuticamente aceptable.

Los portadores farmacéuticamente aceptables son del conocimiento de aquellos con experiencia en la materia e incluyen, pero no se limitan a, de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 0,1 M y, preferentemente, 0.05 M de fosfato o 0.8 % de suero salino. Estos portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser soluciones acuosas o no acuosas, suspensiones y emulsiones. Algunos ejemplos de solventes no acuosos son propilenglicol, políetilenglicol, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. Los portadores acuosos incluyen agua, etanol, soluciones alcohólicas/acuosas, glicerol, emulsiones o suspensiones, lo que incluye medios salinos y tampones. Los portadores por vía oral pueden ser elixires, jarabes, cápsulas, tabletas y similares. El portador sólido típico es una sustancia inerte, tal como lactosa, almidón, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, fosfato dicálcico, manitol y similares. Los portadores por vía parenteral incluyen solución de cloruro de sodio, dextrosa en solución de Ringer, dextrosa y cloruro de sodio, lactato de Ringer y aceites fijos. Los portadores por vía intravenosa incluyen reabastecedores de nutrientes y fluidos, reabastecedores de electrolitos, tales como los basados en la dextrosa en solución de Ringer, y similares.

También pueden estar presentes conservantes y otros aditivos, tales como, por ejemplo, antimicrobianos, antioxidantes, agentes quelantes, gases inertes, y similares. Todos los portadores se pueden mezclar según sea necesario con desintegrantes, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes y similares con el uso de técnicas convencionales conocidas en la materia.

La presente invención proporciona, además, un método para tratar a un sujeto que tiene una condición que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2AÍ el método comprende administrar al sujeto una dosis con eficacia terapéutica de un compuesto de la Fórmula A.

En una modalidad el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o motor. Algunos ejemplos de trastornos que se pueden tratar con la composición farmacéutica de la presente invención incluyen, sin limitarse a, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer y demencia senil.

En una modalidad preferida el trastorno es la enfermedad de Parkinson.

Como se usa en la presente descripción, el término "sujeto" incluye, sin limitarse a, cualquier animal o animal modificado artificialmente que sufra un trastorno que se mejora por la antagonizacion de los receptores de adenosina A2A- En una modalidad preferida el sujeto es un ser humano.

La administración de un compuesto de la Fórmula A se puede efectuar o llevar a cabo con el uso de cualquiera de los diversos métodos conocidos para aquellos con experiencia en la técnica. Los compuestos de la Fórmula A se pueden administrar, por ejemplo, por vía intravenosa, intramuscular, oral y subcutánea. En una modalidad preferida los compuestos de la Fórmula A se administran por vía oral. Además, la administración puede comprender suministrar al sujeto una pluralidad de dosis durante un período adecuado de tiempo. Estos regímenes de administración se pueden determinar de acuerdo con los métodos de rutina.

Como se usa en la presente descripción una "dosis con eficacia terapéutica" de una composición farmacéutica es una cantidad suficiente para detener, revertir o reducir el avance de un trastorno. Una "dosis con eficacia profiláctica" de una composición farmacéutica es una cantidad suficiente para prevenir un trastorno, es decir, eliminar, mejorar o demorar el inicio del trastorno. En la materia son conocidos los métodos para determinar dosis con eficacia terapéutica y profiláctica para los compuestos de la Fórmula A. Por ejemplo, la dosis eficaz para administrar la composición farmacéutica a un ser humano se puede determinar matemáticamente a partir de los resultados de estudios practicados en animales.

En una modalidad la dosis con eficacia terapéutica y/o profiláctica es una dosis suficiente para suministrar de aproximadamente 0.001 mg por kilo (mg/kg) de peso corporal a aproximadamente 200 mg/kg de peso corporal de un compuesto de la Fórmula A. En otra modalidad la dosis con eficacia terapéutica y/o profiláctica es una dosis suficiente para suministrar de aproximadamente 0.05 mg/kg de peso corporal a aproximadamente 50 rng/kg de peso corporal. Más específicamente, en una modalidad, las dosis por vía oral varían de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 100 mg/kg por día. En otra modalidad las dosis por vía oral varían de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 50 mg/kg por día y, en otra modalidad, de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg por día. En aun otra modalidad, las dosis en infusión se encuentran en el intervalo de aproximadamente 1.0 mg/kg/min a aproximadamente 10 mg/kg/min de inhibidor, en mezcla con un portador farmacéutico durante un período en el intervalo de aproximadamente varios minutos a aproximadamente varios días. En otra modalidad para administrarse tópicamente, el compuesto de la invención se puede combinar con un portador farmacéutico en una relación fármaco-portador de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 0.1.

La presente invención proporciona, además, un método para tratar adicciones en mamíferos; el método comprende administrar una dosis con eficacia terapéutica de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

La invención proporciona, además, un método para tratar el ADHD en mamíferos; el método comprende administrar una dosis con eficacia terapéutica de un compuesto de la Fórmula A.

La invención proporciona, además, un método para tratar la depresión en mamíferos; el método comprende administrar una dosis con eficacia terapéutica de un compuesto de la Fórmula A.

La invención proporciona, además, un método para tratar la ansiedad en mamíferos; el método comprende administrar una dosis con eficacia terapéutica de un compuesto de la Fórmula A.

La invención proporciona, además, un método para tratar la migraña en mamíferos; el método comprende administrar una dosis con eficacia terapéutica de un compuesto de la Fórmula A.

Ejemplos: Los compuestos de Fórmula A pueden prepararse con métodos conocidos para los experimentados en la materia. El siguiente esquema de reacción se representa solamente como un ejemplo de la invención y de ningún modo significa limitar la invención.

Esquema 1 El Esquema 1 ilustra la ruta sintética que conduce al compuesto A. Comenzando con 7-hidroxi indanona I y siguiendo el trayecto indicado por las flechas, la alquilación en condiciones básicas con 1 -bromometil-4-metox¡-benceno (PMBBr) proporciona indanona II que se condensa en condiciones básicas con benzaldehído para proporcionar el bencilideno III. El bencilideno III reacciona después con guanidina (base libre) y da la amino pirimidina IV intermedia y se oxida directamente a la cetona V correspondiente al burbujear aire a través de la solución de N-metil pirrolidinona (NMP) básica.

La desprotección puede llevarse a cabo al tratar V con ácido trifluoroacético (TFA) en CH2CI2 para dar el fenol VI correspondiente. El fenol VI puede convertirse al triflato VII correspondiente por tratamiento con N-feniltriflimida en condiciones básicas en dimetilformamida (DMF). Finalmente, el triflato VII reacciona con las aminas de la fórmula HNR1R2 en NMP para proporcionar compuestos de la fórmula A.

Ejemplo 1 9-r4-(4-acetil-fenil)-piperazin-1 -¡n-2-amino-4-fenil-indenoM .2-d1pirirriidin- 5-ona Ejemplo 1 : etapa a 7-4-metoxi-benciloxi)-indan-1-ona Se agregó 1-bromometil-4-metoxi-benceno (12.3 mi, 84.6 mmol) puro a una suspensión de acetona (300 mi) de 7-hidroxi-indan-1-ona (1 1.9 g, 80.5 mmol) y K2C03 (22.3 g, 161 .0 mmol) y la mezcla resultante se calentó hasta reflujo. Después de 6 h (horas) la mezcla se enfrió, se filtró y se lavó con acetona. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo : etapa b 2-bencilideno-7-(4-metoxi-benciloxi)-¡ndan-1-ona Se agregó una solución acuosa (10 mi) de NaOH (3.1 g, 77.2 mmol) en forma de gotas a una solución de etanol (EtOH) (400 mi) de 7-4-metoxi-benciloxi)-indan-1-ona (5.0 g, 30.8 mmol) y benzaldehído (8.2 mi, 81.1 mmol). Se formó inmediatamente un precipitado. La suspensión acuosa obtenida se agitó vigorosamente por 1.5 horas. Se enfrió la suspensión acuosa en un baño de hielo, se filtró y lavó con EtOH frío. El sólido recogido se secó al vacío para dar el compuesto del título que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 1 : etapa c 9-(4-metoxi-benciloxi)-4-fenil-5H-indeno[1 ,2-d1pirimidin-2-ilamina Se agregó NaOH (15.4 g, 386.0 mmol) en polvo a una solución de EtOH (300 mi) de clorhidrato de guanidina (36.9 g, 386.0 mmol). Después de 30 min, el cloruro de sodio se filtró y el filtrado se añadió a una suspensión de EtOH (200 mi) de 2-bencilideno-7-(4-metoxi-bencíloxi)-¡ndan-1 -ona (27.4 g, 77.2 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante la noche. La solución homogénea se enfrió en hielo por 30 minutos y se filtró para dar el compuesto del título el cual se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 1 : etapa d 2-amino-9-(4-metoxi-benciloxi)-4-fenil-indeno[1 ,2-dlpirimidin-5-ona Se agregó NaOH (860 mg, 21.5 mmol) a una solución de NMP (20 mi) de 9-(4-metoxi-benciloxi)-4-fenil-5H-indeno[1 ,2-d]pirimidin-2-ilamina (8.5 g, 21.5 mmol). La mezcla resultante se calentó a 80 °C y se burbujeó aire a través de la solución. Después de 16 h la mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se agregó agua y el precipitado resultante se filtró y se lavó con agua y EtOH frío. El sólido se secó al vacío para dar el compuesto del título.

Ejemplo : etapa e 2-amino-9-hidroxi-4-fenil-indeno[1 ,2-dlpir¡midin-5-ona Se agregó ácido trifluoroacético (TFA) puro (37 mi) a una solución de CH2CI2 (50 mi) de 2-amino-9-(4-metoxi-benciloxi)-4-fenil-indeno[1 ,2-d]pirimidin-5-ona (6.8 g, 16.6 mmol). Después de 2 h, la mezcla se concentró al vacío. El material resultante se suspendió en agua y se añadió NaHC03 saturado acuoso. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío para dar el compuesto del título.

Ejemplo 1 : etapa f Éster del ácido 2-amino-5-oxo-4-fenil-5H-indeno[1 ,2-d1pirim¡din-9-il trifluoro- metanosulfónico Se agregó f-BuOK (íerc-butóxido de potasio, 965 mg, 8.6 mmol) sólido a una solución de D F (30 mi) de 2-amino-9-hidroxi-4-fenil-indeno[1 ,2-d]pirimidin-5-ona (2.1 g, 7.2 mmol). Después de 20 min se agregó PhN(Tf)2 (fenil bis(trifluorometano)sulfonamida. 2.7 g, 7.6 mmol) sólido. Después de 4 h se añadió agua y el precipitado resultante se filtró y se lavó con agua. El sólido se disolvió en THF (tetrahidrofurano) y se empacó en seco en gel de sílice. La cromatografía de columna dio el compuesto titulado.

Ejemplo 1 : etapa g 9-f4-(4-acetil-fenil)-piperazin-1-ill-2-amino-4-fenil-indeno[1 ,2-d1pirimidin-5-ona Se agregó 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona puro (220 mg, 1.08 mmol) a un solución de NMP (0.5 mi) de 2-amino-5-oxo-4-fenil-5H-indeno[1 ,2-d]pirimidin-9-¡l éster de ácido trifluoro-metanosulfónico (180 mg, 0.43 mmol) y la mezcla se calentó hasta 150 °C. Después de 2 h la mezcla se enfrió y se purificó directamente por cromatografía de columna para producir el compuesto titulado. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.03 (dd, J = 1.9, 7.5 Hz, 2 H), 7.93 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 7.47 - 7.60 (m, 4 H), 7.44 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.23 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.00 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 5.59 (br. s., 2 H), 3.61 - 3.77 (m, 4 H), 3.42 - 3.54 (m, 4 H), 2.54 (s, 3 H).

Ejemplo 2 2-amino-9-r4-(5-fluoro-piridin-2-il)-piperazin-1-in-4-fenil-indeno[1 ,2- El compuesto titulado se preparó con el uso de 1 -(5-fluoro-piridin- 2-il)-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.12 (d, J = 3.0 Hz, 1 H), 7.97 - 8.09 (m, 2 H), 7.46 - 7.60 (m, 4 H), 7.43 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 7.29 - 7.38 (m, 1 H), 7.23 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 6.75 (dd, J = 3.4, 9.0 Hz, 1 H), 5.61 (br. s., 2 H), 3.70 - 3.89 (m, 4 H), 3.37 - 3.55 (m, 4 H)¡ MS (ES) m/z: 453 (M+H+).

Ejemplo 3: 4-í4-(2-amino-5-oxo-4-fen¡l-5H-indenori,2-dTpirimidin-9-il)-piperazin-1-i benzonitrilo El compuesto titulado se preparó con el uso de 4-piperazin-1 -il-benzonitrilo en lugar de 1 -(4-piperazin-1 -il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.03 (dd, J = 1 .9, 7.5 Hz, 2 H), 7.47 - 7.64 (m, 6 H), 7.40 - 7.47 (m, 1 H), 7.22 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 6.98 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 5.62 (br. s. , 2 H), 3.58 - 3.75 (m, 4 H), 3.41 -3.55 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 459 (M+H+).

Ejemplo 4: 2-amino-9-r4-(2-fluoro-fenil)-piperazin-1 -il -fenil-indenori .2-d1pirimidin- 5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(2-fluoro-fenil)-piperazina en lugar de 1-(4-p¡perazin-1-¡l-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.03 (dd, J = 2.3, 7.5 Hz, 2 H), 7.46 - 7.60 (m, 4 H), 7.38 - 7.46 (m, 1 H), 7.26 - 7.24 (m, 1 H), 6.95 - 7.20 (m, 4 H), 5.57 (br. s., 2 H), 3.48 - 3.61 (m, 4 H), 3.36 - 3.48 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 452 (M+H+).

Ejemplo 5: 2-amino-9-{4-f2-fluoro-4-(2-metoxi-etoxi)-fenin-Diperazin-1 -il -fenil- indenoM ,2-d1pirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-[2-fluoro-4-(2-metox¡-etox¡)-fenil]-piperaz¡na en lugar de 1-(4-piperaz¡n-1 -il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.02 (dd, J = 2.1 , 7.3 Hz, 2 H), 7.45 - 7.59 (m, 4 H), 7.36 - 7.45 (m, 1 H), 7.24 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 6.98 - 7.07 (m, 1 H), 6.64 - 6.79 (m, 2 H), 5.61 (br. s., 2 H), 4.02 - 4.17 (m, 2 H), 3.69 - 3.83 (m, 2 H), 3.47 (s, 3 H), 3.40 - 3.63 (m, 4 H), 3.27 - 3.40 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 526 (M+H+).

Ejemplo 6 2-amino-9-r4-(2,4-difluoro-fenil)-piperazin-1-il -fenil-indenori.2- dlpirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(2,4-difluoro-fenil)-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d = 7.95 (d, J = 6.4 Hz, 2 H), 7.65 (m, 1 H), 7.44 - 7.59 (m, 4 H), 7.18 - 7.44 (m, 3 H), 6.99 - 7.12 (m, 1 H), 3.37 - 3.52 (m, 4 H), 3.20 - 3.32 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 470 (M+H+).

Ejemplo 7: 2-r4-(2-amino-5-oxo-4-fenil-5H-indenoH benzonitrilo El compuesto titulado se preparó con el uso de 2-piperazin-1-il-benzonitrilo en lugar de 1-(4-piperazin-1 -il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d = 7.90 - 8.00 (m, 2 H), 7.75 (m, 1 H), 7.66 (m, 1 H), 7.43 - 7.58 (m, 5 H), 7.33 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.25 (d, J = 6.8 Hz, 1 H), 7.14 (t, J = 7.3 Hz, 1 H), 3.43 - 3.64 (m, 4 H), 3.1 1 - 3.41 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 459 (M+H+).

Ejemplo 8 6 4-(2-amino-5-oxo^-fenil-5H-indenori.2-d1pm nicotinonitrilo El compuesto titulado se preparó con el uso de 6-piperazin-1-il-nicotinonitrilo en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d = 8.54 (d, J = 2.3 Hz, 1 H), 7.84 - 8.03 (m, 3 H), 7.42 - 7.60 (m, 4 H), 7.19 - 7.34 (m, 2 H), 7.05 (d, J = 9.4 Hz, 1 H), 3.90 - 4.09 (m, 4 H), 3.25 - 3.32 (m, 4 H).

Ejemplo 9 2-amino-4-fenil-9-f4-(4-trifluorometil-fenil)-piperaz»n-1-in-indenof1 ,2- dlpirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(4-trifluorometil-fenil)-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.03 (dd, J = 1.9, 7.5 Hz, 2 H), 7.47 - 7.61 (m, 6 H), 7.40 - 7.47 (m, 1 H), 7.24 (d, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.05 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 5.58 (br. s., 2 H), 3.55 - 3.68 (m, 4 H), 3.43 - 3.55 (m, 4 H).

Ejemplo 10 2-amino-9-r4-(3-fluoro-piridin-2-il)-piperazin-1-il1-4-fenil-indenori.2- dlpirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(3-fluoro-piridin-2-il)-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.00 - 8.10 (m, 3 H), 7.45 - 7.60 (m, 4 H), 7.37 - 7.45 (m, 1 H), 7.21 - 7.34 (m, 2 H), 6.82 (ddd, J = 3.2, 4.8, 7.8 Hz, 1 H), 5.67 (br. s., 2 H), 3.77 - 3.87 (m, 4 H), 3.42 -3.57 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 453 (M+H+).

Ejemplo 11 2-amino-9 4 4-f2-metoxi-etoxi)-fenin-piperazin-1-il)-4-fenil-indenori.2- d1pirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1 -[4-(2-metoxi-etoxi)-fenil]-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1 -il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1 H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.02 (dd, J = 2.1 , 7.3 Hz, 2 H), 7.45 - 7.59 (m, 4 H), 7.37 - 7.45 (m, 1 H), 7.23 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 6.96 - 7.06 (m, 2 H), 6.87 - 6.96 (m, 2 H), 5.69 (br. s., 2 H), 4.04 - 4.18 (m, 2 H), 3.70 - 3.82 (m, 2 H), 3.44 - 3.56 (m, 4 H), 3.47 (s, 3 H), 3.33 -3.44 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 508 (M+hf).

Ejemplo 12 2-amino-9-(4-fenetil-piperazin-1-il)-4-fenil-indenori ,2-d1pirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-fenetil- piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 7.92 - 8.09 (m, 2 H), 7.44 - 7.59 (m, 4 H), 7.13 - 7.44 (m, 7 H), 5.59 (br. s., 2 H), 3.28 - 3.55 (m, 4 H), 2.81 - 3.01 (m, 6 H), 2.68 - 2.81 (m, 2 H); MS (ES) m/z: 462 (M+H+).

Ejemplo 13 2-amino-9-(4-hidroxi-4-fenil-piperidin-1 ^^ ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 4-fenil-piperidin-4-ol en lugar de 1-(4-piperazin-1 -il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloróformo-d) d = 8.02 (dd, J = 2.3, 7.5 Hz, 2 H), 7.59 - 7.71 (m, 2 H), 7.27 - 7.57 (m, 9 H), 5.59 (br. s., 2 H), 3.67 (d, J = 1 1.7 Hz, 2 H), 3.32 - 3.49 (m, 2 H), 2.85 (s, 1 H), 2.45 - 2.65 (m, 2 H), 1.97 -2.09 (m, 2 H); MS (ES) m/z: 449 (M+H+).

Ejemplo 14 2-r4-(2-amino-5-oxo^-fenil-5H-indenof1,2-d1pirimidin-9-il)-píperazin-1-il nicotinonitrilo El compuesto titulado se preparó con el uso de 2-piperazin-1-il-nicotinonitrilo en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.42 (dd, J = 1.9, 4.9 Hz, 1 H), 8.03 (dd, J = 2.1 , 7.3 Hz, 2 H), 7.84 (dd, J = 1.9, 7.5 Hz, 1 H), 7.48 - 7.55 (m, 4 H), 7.41 - 7.45 (m, 1 H), 7.23 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 6.84 (dd, J = 4.7, 7.7 Hz, 1 H), 5.63 (br. s., 2 H), 4.02 - 4.09 (m, 4 H), 3.47 - 3.53 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 460 (M+H+).

Ejemplo 15 2-amino-9-r4-(4-metanosulfonil-fenil)-piperazin-1-il1-4-fenil-indenori.2- dlpirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(4-metanosulfonil-fenil)-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-¡l-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.03 (dd, J = 2.1 , 7.7 Hz, 2 H), 7.84 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 7.43 - 7.57 (m, 4 H), 7.45 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 7.21 -7.30 (m, 1 H), 7.06 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 5.63 (br. s., 2 H), 3.64 - 3.73 (m, 4 H), 3.45 - 3.53 (m, 4 H), 2.73 (s, 3 H); MS (ES) m/z: 512 (M+H+).

Ejemplo 16 2-amino-9-r4-(4-metoxi-fenil)-piperazin-1 -ill-4-fenil-indenori,2-dTpi El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(4-metoxi-fenil)-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-¡l-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 7.99 - 8.09 (m, 2 H), 7.46 -7.60 (m, 4 H), 7.38 - 7.46 (m, 1 H), 7.22 - 7.34 (m, 1 H), 7.03 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 6.91 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 5.60 (br. s., 2 H), 3.81 (s, 3 H), 3.46 - 3.59 (m, 4 H), 3.34 - 3.46 (m, 4 H)¡ MS (ES) m/z: 464 (M+H+).

Ejemplo 17 2-amino-4-fenil-9-(4-piridin-2-il-piperazin-1 -il)-indenof 1 ,2-dlpirimid in-5- ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-piridin-2-il-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1 -il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.26 (d, J = 3.8 Hz, 1 H), 8.03 (dd, J = 2.3, 7.5 Hz, 2 H), 7.46 - 7.64 (m, 5 H), 7.42 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 7.23 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 6.77 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 6.70 (dd, J = 4.9, 6.8 Hz, 1 H), 5.67 (br. s., 2 H), 3.77 - 3.95 (m, 4 H), 3.36 - 3.56 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 435 (M+H+).

Ejemplo 18 2-amino-9-r4-(4-metoxi-fenil)-piperidm 5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 4-(4-metoxi-fenil)-piperidina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 7.94 - 8.09 (m, 2 H), 7.43 -7.59 (m, 4 H), 7.34 - 7.43 (m, 1 H), 7.18 - 7.34 (m, 3 H), 6.91 (d, J = 8.7 Hz, 2 H), 5.68 (br. s., 2 H), 3.87 - 3.91 (m, 2 H), 3.82 (s., 3 H), 2.84 - 3.03 (m, 2 H), 2.60 - 2.79 (m, 1 H), 1.95 - 2.27 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 463 (M+H+).

Ejemplo 19 2-amino-4-fenil-9-(4-propil-piperazin-1 -il)-indenori ,2-d1pirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-propil-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.02 (dd, J = 2.1 , 7.3 Hz, 2 H), 7.42 - 7.61 (m, 4 H), 7.33 - 7.42 (m, 1 H), 7.20 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 5.64 (br. s., 2 H), 3.27 - 3.50 (m, 4 H), 2.68 - 2.86 (m, 4 H), 2.36 - 2.49 (m, 2 H), 1 .50 - 1.67 (m, 2 H), 0.97 (t, J = 7.3 Hz, 3 H); MS (ES) m/z: 400 (M+H+).

Ejemplo 20 4-ri-(2-amino-5-oxo^-fenil-5H-indenori .2-d1pirimidin-9-il)-piperid benzamida El compuesto titulado se preparó con el uso de 4-piperidin-4-il-benzamida en lugar de 1-(4-piperazin-1 -¡l-fen¡l)-etanona como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (300 MHz, acetona) d = 8.03 - 8.14 (m, 2 H), 7.92 (d, J = 8.3 Hz, 2 H), 7.42 - 7.61 (m, 6 H), 7.28 (d, J = 6.8 Hz, 1 H), 7.33 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.02 (br. s., 2 H), 6.55 (br. s., 2 H), 3.85 - 4.01 (m, 2 H), 3.35 (t, J = 7.0 Hz, 2 H), 2.89 - 3.06 (m, 2 H), 2.1 1 - 2.29 (m, 2 H), 1.88 - 2.01 (m, 1 H); MS (ES) m/z: 476 (M+H+).

Ejemplo 21 2-amino-9-r4-(4-cloro-fenil)-piperazin-1-ill-4-fenH ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(4-cloro-fenil)-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 7.95 - 8.08 (m, 2 H), 7.45 -7.61 (m, 4 H), 7.37 - 7.45 (m, 1 H), 7.16 - 7.34 (m, 3 H), 6.95 (d, J = 9.0 Hz, 2 H), 5.62 (br. s., 2 H), 3.35 - 3.56 (m, 8 H); MS (ES) m/z: 468 (M+H+).

Ejemplo 22 2-amino-9-(4-ciclopropilmetil-piperazin-1 -il -4-fenil-indenof1 ,2- dlpirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-ciclopropilmetil-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 7.93 - 8.10 (m, 2 H), 7.43 -7.60 (m, 4 H), 7.34 - 7.43 (m, 1 H), 7.21 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 5.57 (br. s., 2 H), 3.29 - 3.51 (m, 4 H), 2.78 - 3.02 (m, 4 H), 2.42 (d, J = 6.4 Hz, 2 H), 0.90 - 1.09 (m, 1 H), 0.51 - 0.67 (m, 2 H), 0.13 - 0.28 (m, 2 H)¡ MS (ES) m/z: 412 (M+H+).

Ejemplo 23 9-(4-alil-piperazin-1-il)-2-amino-4-fenil-indenof1,2-d1pirimidin-5-ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-alil-piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 7.98 - 8.07 (m, 2 H), 7.43 - 7.57 (m, 4 H), 7.36 - 7.42 (m, 1 H), 7.16 - 7.24 (m, 1 H), 5.86 - 6.03 (m, 1 H), 5.58 (br. s., 2 H), 5.18 - 5.35 (m, 2 H), 3.32 - 3.46 (m, 4 H), 3.15 (d, J = 6.4 Hz, 2 H), 2.73 - 2.84 (m, 4 H); MS (ES) m/z: 398 (M+H+).

Ejemplo 24 2-amino-9-(4-morfolin^-il-piperidin-1-il)-4-fenil-indenori,2-d1pirim ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 4-p¡peridin-4-il-morfolina en lugar de 1-(4-piperazin-1 -il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.01 (dd, J = 2.3, 7.5 Hz, 2 H), 7.48 - 7.57 (m, 3 H), 7.45 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.33 - 7.40 (m, 1 H), 7.19 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.61 (br. s., 2 H), 3.74 - 3.87 (m, 6 H), 2.78 - 2.92 (m, 2 H), 2.62 - 2.73 (m, 4 H), 2.32 - 2.47 (m, 1 H), 2.00 - 2.12 (m, 2 H), 1.84 - 2.00 (m, 2 H); MS (ES) m/z: 442 (M+H+).

Ejemplo 25 9-(4-aceti -fenil-piperidin-1-iO-2-amin^ ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-(4-fenil-p¡peridin-4-il)-etanona en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 7.96 - 8.07 (m, 2 H), 7.28 - 7.56 (m, 10 H), 7.16 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.79 (br. s., 2 H), 3.56 (d, J = 12.1 Hz, 2 H), 3.16 (t, J = 10.0 Hz, 2 H), 2.70 (d, J = 13.9 Hz, 2 H), 2.27 - 2.50 (m, 2 H), 1.99 (s, 3 H); MS (ES) m/z: 475 (M+H+).

Ejemplo 26 2-amino-4-fenil-9-(4-piridin-3-il-piperazm^ ona El compuesto titulado se preparó con el uso de 1-piridin-3-il- piperazina en lugar de 1-(4-piperazin-1-il-fenil)-etanona como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, cloroformo-d) d = 8.46 (m, 1 H), 8.11 - 8.24 (m, 1 H), 7.98 - 8.06 (m, 2 H), 7.46 - 7.59 (m, 4 H), 7.40 - 7.46 (m, 1 H), 7.20 - 7.36 (m, 3 H), 5.67 (br. s., 2 H), 3.53 - 3.60 (m, 4 H), 3.45 - 3.53 (m, 4 H)¡ MS (ES) m/z: 435 (M+hf).

Ensayos y actividad biológica Ensayo de unión de ligandos para el receptor de adenosina A?A. El ensayo de unión de ligandos del receptor de adenosina A2A se realizó por medio del uso de una membrana plasmática de células HEK293 que contenía el receptor de adenosina A?A (PerkinElmer, RB-HA2A) y el radioligando [3H] CGS21680 (PerkinElmer, NET1021). El ensayo se realizó en una placa de polipropileno de 96 pocilios en un volumen total de 200 pl por la adición secuencial de 20 µ? de membrana diluida 1 :20, 130 µ? de amortiguador de ensayo (50 mM Tris HCI, pH 7.4, 10 mM MgCI2 1 mM, EDTA) que contenía [3H] CGS21680, 50 µ? del compuesto diluido (4X) o vehículo de control en el amortiguador de ensayo. Se determinó la unión no específica con 80 mM de ÑECA. La reacción se realizó a temperatura ambiente por 2 horas antes del filtrado a través de una placa de filtro GF/C de 96 pocilios remojada previamente en Tris HCI 50 mM, pH 7.4 que contenía 0.3 % de polietilenimina. Después, las placas se lavaron 5 veces con Tris HCI 50 mM frío, pH 7.4, se secaron y sellaron en el fondo. Se agregó 30 µ? de fluido de microcentelleo en cada pocilio y la parte superior se selló. Las placas se contaron en un contador Packard Topcount para [3H]. Los datos se analizaron en programas de Microsoft Excel y GraphPad Prism. (Varani, K.; Gessi, S.; Dalpiaz, A.; Borea, P.A. British Journal of Pharmacology, 1996, 117, 1693) Ensayo funcional del receptor de adenosina AgA (AgAGAL2) Para comenzar el ensayo funcional se descongelaron células CHO-K1 criopreservadas que sobreexpresaban el receptor de adenosina A2A humana y contenían un gen reportero de la beta-galactosidasa inducible por cAMP, se centrifugaron, se eliminó el medio que contenía DMSO y, después, se sembraron con medio de cultivo fresco en placas tratadas con cultivo de tejido de 384 pocilios transparentes (BD núm. 353961) a una concentración de 10 K células/pocilio. Antes del ensayo estas placas se cultivaron durante dos días a 37 °C, C02 al 5 %, humedad relativa de 90 %. El día del ensayo funcional se eliminaron los medios de cultivo y se reemplazaron con 45 µ? del medio del ensayo (Ham/F-12 Modified (Mediatech, núm. 10-080CV) suplementado con BSA al 0.1 %). Los compuestos de prueba se diluyeron y se crearon curvas de 11 puntos a una concentración de 1000x en 100 % de DMSO. Inmediatamente después de la adición del medio de ensayo a las placas de células, se adicionaron a las placas de células 50 ni de las curvas de control del antagonista o agonista del compuesto de prueba adecuado por medio del uso de un Cartesian Hummingbird. Las curvas del compuesto se dejaron incubar a temperatura ambiente en las placas de célula por aproximadamente 15 minutos antes de la adición de un reto con agonista ÑECA 15 nM(Sigma E2387) (volumen 5 µ?). Además, en cada placa se incluyó una curva de control de ÑECA, un control D SO/medio y una sola dosis de Forskolin (Sigma F3917). Después de las adiciones, las placas de células se dejaron incubar a 37 °C, CO2 al 5 %, humedad relativa de 90 % durante 5.5 -6 horas. Después de la incubación, los medios se eliminaron y las placas de células se lavaron 1x 50 µ? con DPBS sin Ca & Mg (Mediatech 21-031-CV). Se usó pocilios secos; en cada pocilio se agregó 20 µ?_ de amortiguador reportero de lisis 1x (Promega E3971 (diluido en dH20 de solución base 5x)) y las placas se congelaron a -20 °C durante la noche. Para el ensayo colorimétrico de enzima ß-galactosidasa, las placas se descongelaron a temperatura ambiente y en cada pocilio se agregó 20 µ?_ de amortiguador de ensayo 2X (Promega). Se dejó que el color se desarrollara a 37 °C, C02 al 5 %, humedad relativa de 90 % durante 1 - 1.5 h o hasta que apareciera una señal razonable. La reacción colorimétrica se detuvo con la adición de 60 µ?/pocillo de carbonato sódico 1 M. Las placas se contaron a 405 nm en un lector de microplacas SpectraMax (Molecular Devices). Los datos se analizaron en Microsoft Excel y las curvas de IC/EC50 se ajustaron con una macro estándar.

Ensayo funcional del receptor de adenosina A1 (A1GAL2) Para comenzar el ensayo funcional se descongelaron células CHO-K1 criopreservadas que sobreexpresaban el receptor de adenosina A1 humana y contenían un gen reportero de la beta-galactosidasa inducible por cAMP, se centrifugaron, se eliminó el medio que contenía DMSO y después se sembraron con medio de cultivo fresco en placas tratadas con cultivo de tejido de 384 pocilios transparentes (BD núm. 353961) a una concentración de 10 K células/pocilio. Antes del ensayo estas placas se cultivaron durante dos días a 37 °C, CO2 al 5 %, humedad relativa de 90 %. El día del ensayo funcional se eliminaron los medios de cultivo y se reemplazaron con 45 µ? del medio del ensayo (Ham/F-12 Modified (Mediatech, núm. 10-080CV) suplementado con BSA al 0.1 %). Los compuestos de prueba se diluyeron y se crearon curvas de 11 puntos a una concentración de 1000x en 100 % de DMSO. Inmediatamente después de la adición del medio de ensayo a las placas de células, se adicionaron a las placas de células 50 ni de las curvas de control del antagonista o agonista del compuesto de prueba adecuado por medio del uso de un Cartesian Hummingbird. Las curvas del compuesto se dejaron incubar a temperatura ambiente en las placas de células por aproximadamente 15 minutos antes de la adición del reto con agonista r-PIA 4 nM (Sigma P4532)/1 uM forescolina (Sigma F3917) (volumen 5 µ?). Además, en cada placa se incluyó una curva de control de r-PIA en 1 uM Forskolin, un control DMSO/medio y una sola dosis de Forskolin. Después de las adiciones, las placas de células se dejaron incubar a 37 °C, C02 al 5 %, humedad relativa de 90 % durante 5.5 - 6 horas. Después de la incubación, el medio se eliminó, y las placas de células se lavaron 1x 50 µ? con DPBS sin Ca & Mg (Mediatech 2 -03 -CV). Se usó pocilios secos; en cada pocilio se agregó 20 ? de amortiguador reportero de lisis 1x (Promega E3971 (diluido en dl- O de solución base 5x)) y las placas se congelaron a -20 °C durante la noche. Para el ensayo colorimétrico de enzima ß-galactosidasa, las placas se descongelaron a temperatura ambiente y en cada pocilio se agregó 20 pL de amortiguador de ensayo 2X (Promega). Se dejó desarrollar el color a 37 °C, C02 al 5 %, humedad relativa de 90 % durante 1 - 1.5 h o hasta que apareció una señal razonable. La reacción colorimétrica se detuvo con la adición de 60 µ?/pocillo de carbonato sódico 1 M. Las placas se contaron a 405 nm en un lector de microplacas SpectraMax (Molecular Devices). Los datos se analizaron en Microsoft Excel y las curvas de IC/EC50 se ajustaron con una macro estándar.

Datos del ensayo de A?A Los compuestos de la Fórmula A mostraron una selectividad sorprendente e inesperada para el antagonismo del receptor A2A por encima del receptor A1 .

Aunque la especificación anterior enseña los principios de la presente invención con ejemplos provistos para fines de ilustración, se entenderá que la práctica de la invención abarca todas las variaciones, adaptaciones o modificaciones usuales que entran dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones y sus equivalentes.

Todas las publicaciones descritas en la descripción anterior se incorporan en su totalidad como referencia en la presente descripción.

Claims (16)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES: . Un compuesto que es: caracterizado porque: X es C=0; R2 es fenilo; R4 es NH2 y R3 se selecciona del grupo que consiste en y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de estos;
2. 2. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.
3. 3. El uso de un compuesto de la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para tratar un sujeto que tiene un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en células adecuadas en el sujeto.
4. 4. El uso de un compuesto de la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para prevenir un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en células adecuadas en un sujeto; en donde el medicamento está adaptado para ser administrable antes o después de un evento que se piensa causará un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2A en células adecuadas en el sujeto.
5. 5. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el medicamento comprende una dosis terapéutica o profilácticamente efectiva de la composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 2.
6. 6. El uso como el que se reclama en la reivindicación 4, en donde el medicamento comprende una dosis terapéutica o profilácticamente efectiva de la composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 2.
7. 7. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o un trastorno motor.
8. 8. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste en enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer, o demencia senil.
9. 9. El uso como el que se reclama en la reivindicación 4, en donde el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o un trastorno motor.
10. 10. El uso como el que se reclama en la reivindicación 4, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste en enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer, o demencia senil.
11. 11. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la enfermedad de Parkinson.
12. 12. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la adicción.
13. 13. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la hiperactividad y déficit de atención (ADHD).
14. 14. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la depresión.
15. 15. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la ansiedad.
16. 16. El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde el trastorno es la migraña.