MX2011002045A - Composicion bacteriana. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una composición bacteriana que tiene una larga vida en almacenamiento, y un proceso para producir tales composiciones. La invención además se refiere a productos alimenticios que comprenden la composición bacteriana.

Description

COMPOSICION BACTERIANA Campo de la Invención La presente invención se refiere a una composición bacteriana que tiene una larga vida en almacenamiento, y un método para producir tales composiciones. La invención además se refiere a productos alimenticios que comprenden la composición bacteriana.

Antecedentes de la Invención Se reivindican varios documentos de patentes que describen formulaciones bacterianas que se formulan con excipientes o portadores específicos para aumentar la capacidad en almacenamiento de las formulaciones bacterianas. Otros documentos de patente se refieren a disminuir la actividad del agua (aw) de la formulación bacteriana, por ejemplo, mediante la adición de Si02, que unirá algo de agua. También el uso de un desecante en diferentes formas se ha utilizado para eliminar el agua.

US4956295 describe Lactobacillii seco mezclado con un absorbente de gel de sílice. Las mezclas se reivindican para ser capaces de almacenarse sin refrigeración.

US7122370B y US7229818B describen una formulación que comprende una bacteria probiótica con sales de alginato monovalentes, en donde la formulación tiene una actividad de agua de entre 0.1 y 0.7, y en donde, después de la exposición Ref. 217009 a un ambiente ácido, se forman un gel ácido algínico que protege la bacteria probiótica de los efectos antibióticos del ambiente ácido. La sal alginato se seca a un contenido de humedad por debajo de 5% antes de mezclar con la bacteria.

EP1482811B describe un procedimiento para obtener un producto alimenticio que comprende los pasos de: a. mezclar una preparación de microorganismos viables y componentes adicionales, b. secar la mezcla a una actividad de agua por debajo de 0.3 , c. compactar la mezcla, d. recubrir, y e. mezclar con un producto alimenticio.

US2005/0100559 describe una composición bacteriana seca que tiene una actividad de agua de menos de 0.5.

US6953592B describe una matriz a base de carbohidrato que se dispersa en agua o soluble en agua, sin espuma que contiene gas atrapado en los poros cerrados en una cantidad que es suficiente para promover la disolución o la dispersión de la matriz después del contacto con el agua.

US2005/0266069 reivindica una formulación probiótica viable y estable para activación intestinal, que comprende: una pluralidad de microesferas probióticas cada una comprendiendo: un centro que comprende una o más bacterias probióticas, un excipiente celulósico, un disgregante y uno o más aditivos; y un recubrimiento entérico capaz de ser resistente a los fluidos gástricos, que tiene un nivel de humedad residual menor de de 5% y una actividad de agua (aw) entre 0.1 y 0.5.

WO 2005/063200 describe una tableta probiótica que comprende un microorganismo probiótico (por ejemplo, Lactobacillus GG) y otros ingredientes nutricionalmente activos en dos zonas; una primera zona comprende el microorganismo probiótico y una segunda zona comprende por lo menos uno de otros ingredientes activos. La actividad del agua en la primera zona no deberá ser mayor de 0.2. Se indica que la buena viabilidad de los microorganismos se obtiene a pesar del relativamente alto contenido de humedad generado.

WO08048731A reivindica un método para extender la vida en almacenamiento de una formulación nutricional en polvo que contiene LGG a través de la reducción de la actividad del agua de la formulación que contiene LGG a menos de aproximadamente 0.16 y mantener la temperatura de la formulación a o por debajo de 25°C.

US7037708B describe una composición que comprendé por lo menos un Lactobacillus plantarum en una forma unida al portador, el cual a) tiene un tamaño de partícula de al menos aproximadamente 0.1 mm, y b) comprende de aproximadamente 10E10 a 10E12 cfu/g de por lo menos una especie de microorganismo; c) tiene una actividad de agua (aw) menor de 0.15 y d) se comprime. Se describe que el cultivo puede comprender un aditivo efervescente.

Sin embargo, ninguna de estas formulaciones bacterianas es satisfactoria desde un punto de vista comercial, especialmente para células bifidobacterianas . Por consiguiente, existe una necesidad de composiciones que contengan células bacterianas mejoradas, que tengan una estabilidad mejorada y una distribución incrementada de células bacterianas viables .

En particular, existe una necesidad de proporcionar composiciones estables que comprendan cepas bifidobacterianas , que han sido previamente muy difíciles de almacenar por largo plazo a temperatura ambiente.

Breve Descripción de la Invención Los presentes inventores han encontrado sorprendentemente que una tableta que contiene células de una cepa bifidobacteriana y una sal de ácido carbónico, y carbonato de sodio tienen una estabilidad superior especialmente si se almacenan en un entorno que las protege contra la exposición a la humedad circundante, por ejemplo, en una bolsa o caja de aluminio sellada, o en un contenedor de vidrio cerrado. La estabilidad superior es más pronunciada cuando las tabletas protegidas se exponen a alta temperatura durante un largo periodo de tiempo.

Además, los inventores han descubierto que la adición de una sal de ácido carbónico a una composición que contiene las células de una cepa bifidobacteriana sorprendentemente evita o reduce la decoloración (coloración roja) que normalmente ocurre durante el almacenamiento.

Con base en estos sorprendentes hallazgos, la presente invención se refiere a un procedimiento para estabilizar (por ejemplo, aumentar la estabilidad y/o reducir/evitar la decoloración) de una composición que comprende células vivas de una cepa bifidobacteriana a través de la adición de una sal de ácido carbónico a la composición. Especialmente, la invención se refiere a un procedimiento para mejorar la estabilidad del color de una composición que contiene células bacterianas, el proceso comprende mezclar las células bacterianas con una sal de ácido carbónico.

La presente invención puede verse como un procedimiento para mejorar la estabilidad/vida en almacenamiento de una composición bacteriana, y de esta forma la presente invención también se refiere a un procedimiento para preparar una composición bacteriana con estabilidad/vida en almacenamiento incrementada/mejorada/prolongada, que comprende los siguientes pasos: a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas, preferiblemente que pertenecen al género de bifidobacteria, y un portador que comprende una sal de ácido carbónico; y b) opcionalmente comprimir el polvo para formar una tableta o un gránulo.

La invención también se refiere a composiciones estabilizadas, a un producto alimenticio que contiene la composición estabilizada, ya sea integrada en el producto alimenticio, o empacada junto con el producto alimenticio.

En un primer aspecto, la presente invención se refiere a un procedimiento para preparar una composición bacteriana (por ejemplo, para mejorar la supervivencia de las células y/o la reducción de la decoloración de la composición), que comprende los siguientes pasos: a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas de un portador que comprende una sal de ácido carbónico (o sal de carbonato) ; y b) opcionalmente comprimir el polvo.

Además, la invención se refiere a procedimientos para i) aumentar el tiempo de supervivencia de las células bacterianas en una composición, o ii) evitar o reducir la decoloración de una composición bacteriana, o iii) aumentar la vida en almacenamiento de una composición bacteriana, o iv) aumentar la estabilidad de una composición bacteriana, cuyo procedimiento comprende los siguientes pasos: a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas y un portador que comprende una sal de ácido carbónico (o sal de carbonato) ; y b) opcionalmente comprimir el polvo.

En una modalidad interesante de la invención, el procedimiento se utiliza para mejorar la estabilidad (incluyendo la estabilidad del color) de una composición que contiene células bacterianas, a través de la mezcla de las células bacterianas con una sal de ácido carbónico.

Se debe entender que la finalidad del paso de mezclado a) es poner en contacto las células bacterianas con la sal, y de esta forma la secuencia de mezclado no es importante. De esta forma, las células bacterianas pueden mezclarse con un portador antes y/o después y/o al mismo tiempo que la mezcla con la sal. Actualmente se prefiere que todos los constituyentes se mezclen al mismo tiempo.

Al comprimir el polvo, el producto de un procedimiento de la invención será una composición bacteriana en la forma de un polvo, o una forma sólida tal como una tableta o un gránulo.

La sal de ácido carbónico preferiblemente se selecciona del grupo que consiste de carbonato de sodio, bicarbonato de sodio, sesquicarbonato de sodio, carbonato de potasio, bicarbonato de potasio, sesquicarbonato de potasio, carbonato de magnesio, glicin carbonato de sodio, carbonato de L-glicina, carbonato de arginina, carbonato de calcio amorfo, carbonato de amonio, bicarbonato de amonio y sus combinaciones, y actualmente la más preferida es la sal de bicarbonato de sodio.

El portador en a) puede además comprender un componente ácido, tal como un ácido orgánico, preferiblemente como un polvo.

El componente ácido preferiblemente se selecciona del grupo que consiste de ácido cítrico, ácido tartárico, ácido amálico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido láctico, ácido succínico, fosfato ácido disódico, fosfato diácido sódico y sus combinaciones.

En una modalidad de la invención, un procedimiento además puede incluir un paso de secado, tal como secado por congelamiento, secado al vacío, secado por medio de un desecante, o calentamiento. Un paso de secado puede llevarse a cabo : i) antes del paso de mezclado (es decir, una o más de las células bacterianas o el portador se secan; y/o ii) después del paso de mezclado (es decir, la mezcla se seca) ; y/o iii) después del paso de compresión opcional (es decir, la tableta o el gránulo se secan) .

Las células bacterianas son preferiblemente células productoras de ácido láctico y/o probióticas, tales como células bacterianas que pertenecen al género seleccionado del grupo que comprende: Bifidobacterium, Lactobacillus , y Streptococcus . Actualmente se prefiere que las células bacterianas pertenezcan a especie seleccionada del grupo del grupo de: Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus bifidum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus rhamnosus , Lactobacillus fermentum, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus crispatus, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium brevis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium adolescentis , Bifidobacterium infantis, Streptococcus thermophilus y Lactococcus lactis, tales como las células bacterianas que pertenecen a una cepa selecciona del grupo que consiste de: BB-12®, LA-I, LA-5, BB-02, la cepa DSM15954 de Bifidobacterium animalis, cepa DSM15953 de Bifidobacterium longum de subespecie infantis, cepa DSM15955 de Bifidobacterium longum de subespecie longum, cepa DSM15958 de Énterococcus faecium, cepa DSM13241 de Lactobacillus acidophilus, cepa DSM15956 de Lactobacillus delbrueckii de subespecie bulgaricus, cepa DSM14998 de Lactobacillus helveticus, cepa DSM14997 de Lactobacillus helveticus, cepa DSM14797 de Lactococcus lactis, cepa DSM15957 de Streptococcus thermophilus, cepa ATCC55845 de Lactobacillus fermentum, y cepa ATCC55826 de Lactobacillus rhamnosus, y mutantes o variantes de cualquiera de estos . Actualmente se prefiere que las células bacterianas pertenezcan a la cepa BB-12® bifidobacteria o BB-12® libre.

El portador además puede comprender un componente seleccionado del grupo que consiste de: un ácido inorgánico o una de sus sales, un ácido orgánico o una de sus sales, un carbohidrato, lactosa, un alcohol de azúcar, fibras solubles y almidón.

Los procedimientos de la invención pueden incluir pasos adicionales, tales como el paso de recubrimiento (en donde, por ejemplo, una tableta/gránulo de la invención se recubre en una forma conocida por el experto en la técnica) , y/o un paso de empaque, por ejemplo, que comprende colocar el polvo comprimido (tableta/gránulo) en un contenedor sellable, por ejemplo hecho de aluminio y/o polímero. 2. El procedimiento de la reivindicación 1 para preparar una composición bacteriana sin o una decoloración reducida, que comprende los siguientes pasos: a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas y un portador que comprende una sal de ácido carbónico; y b) opcionalmente comprimir el polvo para formar una tableta o un gránulo. 3. El procedimiento de la reivindicación 1 para preparar una composición bacteriana con una supervivencia mejorada de las células y/o una vida en almacenamiento aumentada, y/o estabilidad aumentada, que comprende los siguientes pasos: a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas y un portador que comprende una sal de ácido carbónico; y b) opcionalmente comprimir el polvo para formar una tableta o un gránulo. 4. El procedimiento de la reivindicación 1 para mejorar la supervivencia de las células en una composición que comprende células bacterianas, que comprende mezclar las células bacterianas con una sal de ácido carbónico. 5. El procedimiento de la reivindicación 1 para mejorar la estabilidad del color de una composición que contiene células bacterianas, que comprende mezclar las células bacterianas con una sal de ácido carbónico.

En un segundo aspecto, la invención se refiere a una composición que se obtiene a través de un procedimiento de la invención. Una composición de la invención comprende células bacterianas y un portador que comprende una sal de ácido carbónico (o una sal de carbonato) . Las células bacterianas pueden pertenecer a cualquiera de las especies o cepas antes mencionadas. En una modalidad actualmente interesante, las células pertenecen a la cepa BB-12® de bifidobacteria . La composición puede comprenden por lo menos 10E5 CFU/mg, tal como al menos 10E7 CFU/mg o al menos 10E9 CFU/mg, CFU siendo las unidades formadoras de células de las células bacterianas.

En un tercer aspecto, la presente invención se refiere al uso de una composición de la presente invención como un alimento, aditivo alimenticio, un farmacéutico, un suplemento dietético, o un probiótico. Un alimento o producto alimenticio que comprende una composición de la invención es también un aspecto de la presente invención, y comprende productos tales como: un producto lácteo, tal como leche o leche fermentada, y un jugo de frutas, tal como una malteada.

El alimento/producto alimenticio puede mezclarse con la composición de la invención, ya sea en las instalaciones para el procesamiento de alimentos/alimento, o a través del consumidor. De esta forma, la presente invención también se refiere a un kit de partes, que comprende un alimento/producto alimenticio en una composición de la invención, por ejemplo, un kit que comprende un contenedor con un producto alimenticio y un contenedor con una composición de la invención.

En otro aspecto, la invención se refiere al uso de una sal de ácido carbónico (por ejemplo, sales como se mencionó anteriormente) , como i) estabilizador, tal como un estabilizador de color, ii) para aumentar la vida en almacenamiento, iii) para aumentar la estabilidad, o iv) para aumentar la supervivencia de las células, en una composición bacteriana, especialmente una composición bacteriana que comprende células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria (por ejemplo, que pertenecen a una de las especies seleccionadas del grupo que consiste de: Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium brevis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium adolescentis , Bifidobacterium infantis) .

DEFINICIONES En el presente contexto, el término "tableta" se refiere a un polvo comprimido. El término incluye todas las formas físicas y todos los tamaños, tales como una pildora, un gránulo, una tableta, etc.

Por el término "composición bacteriana" deberá entenderse una composición que comprende células bacterianas, o un cultivo celular. Las células están preferiblemente vivas o latentes, y además se prefiere que la composición contenga por lo menos 10E5 unidades formadoras de célula por grano.

Las células bacterianas pueden pertenecer a una sola cepa, o pueden ser una mezcla de células que pertenecen a diferentes cepas.

En el presente contexto, el término "imitante" deberá entenderse como una cepa derivada de una cepa de la invención por medio de, por ejemplo, modificación genética, radiación y/o tratamiento químico. Se prefiere que el mutante sea un mutante f ncionalmente equivalente, por ejemplo, un mutante que tiene sustancialmente las mismas, o mejoradas, propiedades como la cepa progenitora, por ejemplo, como un probiótico. Tal mutante es una parte de la presente invención. Especialmente, el término "mutante" se refiere a una cepa obtenida- a través del sometimiento de una cepa de la invención a cualquier tratamiento de mutagenización convencionalmente utilizado que incluye el tratamiento con un mutágeno químico tal como etan metan sulfonato (EMS) o n-metil-N' -nitro-N-nitroguanidina (NTG) , luz UV o a un mutante que aparece espontáneamente.

En el presente contexto, el término "variante" deberá entenderse como una cepa que es funcionalmente equivalente a una cepa de la invención, por ejemplo, que tiene sustancialmente las mismas o propiedades mejoradas, por ejemplo, un probiótico. Tales variantes, que pueden identificarse utilizando técnicas de clasificación apropiadas, son una parte de la invención.

El uso de los términos "uno" y "una" y "el, la" y referentes similares en un contexto de la descripción de la invención (especialmente en el contexto de las siguientes reivindicaciones) se construyen para cubrir ambas formas singulares y plurales, a menos que el contexto indique lo contrario o claramente se contradiga por el contexto. Los términos "que comprende", "que tiene", "que incluye" y "que contiene" se construyen como términos abiertos (es decir, significan "que incluye, pero no se limita a,") a menos que se indique lo contrario. La recitación de los intervalos de valores en la presente meramente pretenden servir como un método breve para referirse individualmente a cada valor separado que cae dentro del intervalo, a menos que se indique lo contrario en la presente, y cada valor separado se incorpora en la especificación como si se recitará individualmente en las presente. Todos los métodos descritos en la presente pueden llevarse a cabo en cualquier orden adecuado a menos que se indique lo contrario en la presente, o claramente se contradiga por el contexto. El uso de cualquiera y todos los ejemplos, o el lenguaje ilustrativo (por ejemplo, "tal como") provistos en la presente, pretenden meramente iluminar mejor la invención y no posee una limitación en el alcance de la invención a menos que se reivindique lo contrario. Ningún lenguaje en la especificación deberá construirse como indicando cualquier elemento no reivindicado como esencial para la práctica de la invención .

Breve Descripción de las Figuras Figura 1: Supervivencia de BB-12® en polvo H1069 y H1071 cuando se almacena a 37 °C por 3 meses.

Figuras 2A a 2D: Fotografías que muestran las mezclas de polvo H1184 A (Figura 2A) , H1184 B (Figura 2B) , H1184 C (Figura 2C) y H1184 D (Figura 2D) después de dos semanas a temperatura ambiente .

Descripción Detallada de la Invención EJEMPLOS Ejemplo 1: Se hicieron dos mezclas, una mezcla de polvo H1069 conteniendo BB-12® HA molido (5.1% (v/v) y excipientes (Manitol; 10% (v/v), Lactosa; 84.4% (v/v) Estearato de Magnesio; 0.5% (v/v) sin bicarbonato de sodio, y mezcla de polvo H1071 conteniendo BB-12® HA molido (5.1% (v/v) y excipientes (Manitol; 10% (v/v), Lactosa; 54.4% (v/v) Estearato de Magnesio; 0.5% (v/v) con bicarbonato de sodio; 30% (v/v) . La concentración del bicarbonato de sodio se obtuvo reemplazando la parte de lactosa de los excipientes con bicarbonato de sodio dejando todos los otros componentes a concentraciones iguales en el polvo.

Los polvos se empacaron en bolsas de hoja de aluminio (20-30 g) y se almacenaron a 37°C durante 3 meses. Las bolsas se tomaron para análisis de unidades formadoras de colonia (cfu/g) (aw) justo antes del empaque (0 meses) , 1 mes, y 3 meses de almacenamiento.

Resultados: La actividad del agua de los polvos H1069 y H1071 fue equivalente, aw (H1069) = 0.19 y aw (H1071) = 0.19 justo antes del empaque. Después del almacenamiento durante 1 y 3 meses la actividad del agua de los polvos se aumentó a aw = 0.27-0.31. Los resultados de las unidades formadoras de colonia mostraron cfu/g equivalentes a 0 y mes pero mostraron la diferencia dramática en la supervivencia BB- 12® después de 3 meses (Figura 1) .

Conclusión: El remplazo del excipiente de dextrosa con bicarbonato de sodio dio como resultado una supervivencia mejorada de BB-12® durante almacenamiento. Este resultado muestra que el bicarbonato de sodio mejoró la supervivencia de Bifidobacterium animalis en polvos durante el almacenamiento .

Ej emplo 2 : Prueba para saber si el bicarbonato de sodio influencia el desarrollo del color rojo en las formulaciones de Bifidobacteria que contienen ascorbato.

Contenido de las mezclas de polvo (v/v) .

- H1184 A: cultivo HA BB-12® molido al 24%, 51% de manitol y 25% de inulina.

- H1184 B: cultivo HA BB-12® molido al 24%, 51% de manitol y 25% de bicarbonato de sodio - H1184 C: cultivo HA BB-12® molido al 12%, 63% de manitol y 25% de inulina - H1184 D: cultivo HA BB-12® molido al 12%, 63% de manitol y 25% de bicarbonato de sodio El cultivo HA BB-12® molido contiene ascorbato como un agente crioprotector . El ascorbato reacciona con residuos de la fermentación y desarrollo en color rojo. La reacción se aceleró a través de temperaturas elevadas y humedad.

Los polvos se mantuvieron en bolsas de hoja de aluminio herméticas al aire. Para la prueba de los polvos se tomaron de las bolsas de aluminio en cantidades de 5-8 gramos y se colocaron en pequeños contenedores de plástico (fabricados por Rotronic para utilizarse en mediciones de aw) . Los contenedores de plástico se dejaron a temperatura ambiente y después de dos semanas se podría ver la diferencia en el desarrollo de color como se muestra en la Figura 2. Los polvos tuvieron un aw similar de aproximadamente 0.4. La Figura 2 muestra que los polvos A y C tuvieron cambio de color a un rojo pálido, mientras los polvos B y D mantuvieron su color amarillo pálido original.

Conclusión: La presencia de bicarbonato de sodio en las mezclas de polvo tiene un efecto en el desarrollo del color rojo. El color rojo no se desarrolla cuando el bicarbonato de sodio está presente en la mezcla de polvo.

Las modalidades preferidas de esta invención se describen en la presente, incluyendo el mejor modo conocido por los inventores para llevar a cabo la invención. Las variaciones a estas modalidades preferidas pueden hacerse evidentes para los expertos en la técnica después de la lectura de la descripción anterior. Los inventores esperan que los expertos en la técnica utilicen tales variaciones según sea apropiado, y los inventores pretenden que la invención. se practique de forma diferente a la específicamente descrita en la presente. Por consiguiente, esta invención incluye todas las modificaciones y equivalentes del tema recitado en las reivindicaciones anexas a la misma como permitidas por la ley aplicable. Además, cualquier combinación de los elementos antes descritos en todas sus posibles variaciones está abarcada por la invención a menos que indique lo contrario en la presente o por el contrario se contradiga claramente por el contexto.

REFERENCIAS US2004175389, WO03075676, US2005100559 , US6953592, WO03012819, WO05266069, WO05063200 Todas las referencias citadas en este documento de patente se incorporan en la presente en su totalidad por referencia.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (35)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1.- Un procedimiento para preparar una composición bacteriana, caracterizado porque comprende los siguientes pasos : a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria y un portador que comprende una sal de ácido carbónico; y b) opcionalmente comprimir el polvo para formar una tableta o un gránulo.

2. - El procedimiento de . conformidad con la reivindicación 1, para preparar una composición bacteriana sin o con una decoloración reducida, caracterizado porque comprende los siguientes pasos: a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria y un portador que comprende una sal de ácido carbónico; y b) opcionalmente comprimir el polvo para formar una tableta o un gránulo.

3. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores para preparar una composición bacteriana con supervivencia mejorada de las células y/o una vida en almacenamiento aumentada, y/o estabilidad aumentada, caracterizado porque comprende los pasos de: a) proveer un polvo mediante la mezcla de células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria y un portador que comprende una sal de ácido carbónico; y b) opcionalmente comprimir el polvo para formar una tableta o un gránulo.

4. - El procedimiento de conformidad con la reivindicación anterior, caracterizado porque la composición bacteriana está en la forma de un polvo, un granulado, una tableta, o un gránulo.

5. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la sal de ácido carbónico se selecciona del grupo que consiste de carbonato de sodio, bicarbonato de sodio, sesquicarbonato de sodio, carbonato de potasio, bicarbonato de potasio, sesquicarbonato de potasio, carbonato de magnesio, glicin carbonato de sodio, carbonato de L-lisina, carbonato de arginina, carbonato de calcio amorfo, carbonato de amonio, bicarbonato de amonio, y sus combinaciones.

6. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el portador en a) además comprende un componente ácido, tal como un ácido orgánico, preferiblemente como un polvo.

7. - El procedimiento de conformidad con cualquiera r de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el componente ácido se selecciona del grupo que consiste de ácido cítrico, ácido tartárico, ácido amálico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido láctico, ácido succínico, fosfato ácido disódico, fosfato diácido sódico y sus combinaciones .

8. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque además incluyen un paso de secado, tal como un secado por congelamiento, secado al vacío, secado por medio de un desecante, o calentamiento.

9. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el paso de secado se lleva a cabo: i) antes del paso de mezclado (es decir, una o más de las células bacterianas o el portador se secan); y/o ii) después del paso de mezclado (es decir, la mezcla se seca); y/o iii) después del paso de compresión opcional (es decir, el polvo, la tableta o el gránulo se secan) .

10. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las células bacterianas pertenecen al género de bifidobacteria son células productoras de ácido láctico y/o probióticas.

11. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las células bacterianas pertenecen a especies seleccionadas del grupo que consiste de: Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium brevis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium adolescentis , Bifidobacterium infantis.

12. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las células bacterianas pertenecen a las especies de Bifidobacterium animalis, tales como Bifidobacterium animalis de subespecie lactis.

13. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las células bacterianas pertenecen a una cepa seleccionada del grupo que consiste de BB-12®, BB-02, cepa DSM15954 de Bifidobacterium animalis, cepa DSM15953 de Bifidobacterium longum de subespecie infantis, cepa DSM15955 de Bifidobacterium longum de subespecie longum, y mutantes o variantes de cualquiera de estos.

14. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las células bacterianas pertenecen a la cepa BB-12® de bifidobacteria .

15.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las células bacterianas pertenecen a la cepa BB-12® de bifidobacteria libre.

16. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el portador además comprende un componente seleccionado del grupo que consiste de ácido inorgánico o una de sus sales, ácido orgánico o una de sus sales, un carbohidrato, lactosa, alcohol de azúcar, fibras solubles y almidón.

17. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque además incluye un paso de recubrimiento.

18. - El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque además incluye un paso de empaque, por ejemplo, que comprende colocar el polvo o el polvo comprimido en un contenedor sellable, por ejemplo, hecho de aluminio y/o un polímero.

19. - Una composición caracterizada porque se obtiene a través de un procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

20. - Una composición caracterizada porque comprende células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria y un portador que comprende una sal de ácido carbónico .

21. - La composición de conformidad con la cualquiera de las reivindicaciones 19 a 20, caracterizada porque las células bacterianas pertenecen a especies seleccionadas del grupo que consiste de Bifidobacterium longura, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium brevis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium adolescentis , Bifidobacterium infantis.

22. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 21, caracterizada porque las células bacterianas pertenecen a las cepa BB-12® de bifidobacteria .

23. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 22, caracterizada porque comprende por lo menos 10E5 CFU/mg, tal como al menos 10E7 CFU/mg o al menos 10E9 CFU/mg, CFU siendo unidades formadoras de colonia de las células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria .

24. - El uso de la composición de conformidad con cualquiera de la reivindicaciones 19 a 23 como un alimento o aditivo alimenticio, un farmacéutico, un suplemento diabético o un probiótico.

25. - Un alimento o producto alimenticio caracterizado porque comprende una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23.

26.- El producto de conformidad con la reivindicación anterior, caracterizado porque es un producto ? lácteo, tal como leche o leche fermentada.

27.- El producto de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque es un jugo de frutas.

28.- Un kit de partes, caracterizado porque comprende una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23 y un producto alimenticio, por ejemplo, un producto lácteo, tal como leche o leche fermentada, o un jugo de frutas.

29. - El kit de conformidad con la reivindicación anterior, caracterizado porque comprende un contenedor con un producto alimenticio, y un contenedor con una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23.

30. - El uso de una sal de ácido carbónico como un estabilizante de color en una composición bacteriana.

31.- El uso de la reivindicación anterior, en donde la composición bacteriana comprende células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria .

32. - El uso de una sal de ácido carbónico para aumentar la supervivencia de las células en una composición bacteriana, en donde la composición bacteriana comprende células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria .

33. - El uso de una sal de ácido carbónico para aumentar la vida en almacenamiento de una composición bacteriana en donde la composición bacteriana comprende células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria .

34. - El uso de una sal de ácido carbónico para aumentar la estabilidad de una composición bacteriana, en donde la composición bacteriana comprende células bacterianas que pertenecen al género de bifidobacteria .

35. - El uso de conformidad con la reivindicación anterior, en donde las células bacterianas pertenecen a especies seleccionadas del grupo que consiste de Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium brevis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium adolescentis , Bifidobacterium infantis.