MX2010014302A

MX2010014302A - Compuestos naturales no tóxicos, promotores de germinación de semillas y crecimiento de plántulas, que son compatibles con agroquímicos de acción múltipe.

Info

Publication number: MX2010014302A
Application number: MX2010014302A
Authority: MX
Inventors: Ricardo Hugo Lira Saldivar; Luis Villarreal Cardenas; Marcela Hernandez Suarez
Original assignee: Ct De Investig En Quimica Aplicada
Priority date: 2010-12-20
Filing date: 2010-12-20
Publication date: 2012-06-20

Abstract

La presente invención se refiere al uso de uso de compuestos biológicos conteniendo microorganismos benéficos que coexisten como simbiontes con las raíces de plantas nativas o silvestres y cultivos agrícolas, los cuales aportan nutrimentos como nitrógeno y fosforo, pero además pueden reducir el efecto de fitopatógenos del suelo que atacan las raíces de las plantas, ya que estos pueden actuar como antagonistas de ellos, este es el caso de la bacteria Azospirillum brasilense y el hongo Glomus intraradices que pueden ser aplicados o inoculados a las semillas, solos y/o mezclados con soluciones de cloruro de potasio (KCl). También se refiere al uso de extractos hidrosolubles del arbusto Larrea tridentata que actúan como promotores de la germinación de semillas y en la elongación de talluelos y radículas de plántulas, así como el incremento en la biomasa seca en plántulas de diversos cultivos agrícolas. La invención incluye el método de aplicación, el cual se basa en remojar las semillas en soluciones acuosas de los extractos de L. tridentata durante un determinado tiempo antes de ponerse en condiciones propicias para su germinación y el desarrollo de la plántula. El proceso de extracción de resina de L. tridentata con diferentes solventes, así como el procedimiento para hacerla hidrosoluble se describen en la patente "Proceso para la producción de resina de gobernadora (Larrea) soluble o dispersable en agua" que tiene el número de solicitud de registro 9810828. Los extractos de Larrea tridentata son polvos hidrosolubles que pueden utilizarse solos, mezclados entre sí, o mezclados con otros productos agroquímicos como pueden ser otros reguladores del crecimiento, pesticidas, fertilizantes o nutrientes, para preparar soluciones acuosas a diferentes concentraciones, las cuales dependerán del tipo de semilla que se trate y de los resultados que se quieran obtener.

Description

COMPUESTOS NATURALES NO TÓXICOS, PROMOTORES DE GERMINACIÓN DE SEMILLAS Y CRECIMIENTO DE PLÁNTULAS, QUE SON COMPATIBLES CON AGROQUÍMICOS DE ACCIÓN MÚLTIPLE DESCRIPCIÓN OBJETO DE LA INVENCIÓN Aquí se describe el uso de compuestos conteniendo microorganismos benéficos que coexisten como simbiontes con las raíces de numerosas plantas nativas y cultivadas, los cuales consiguen aportar elementos nutritivos como nitrógeno y fosforo, pero además pueden minimizar el efecto de fitopatógenos del suelo cuando actúan como antagonistas, tal es el caso de la bacteria Azospirillum brasilense y el hongo Glomus intraradices que pueden aplicarse solos y/o mezclados con soluciones de cloruro de potasio (KCI). También se detalla el uso de extractos hidrosolubles de Larrea tridentata como promotores de la germinación de semillas, elongación de tallos y raíces, así como del incremento en la biomasa seca en plántulas de diversos cultivos agrícolas. La invención proporciona también el método de aplicación, el cual se basa en inocular las semillas con los microorganismos señalados e imbibír las semillas por un determinado tiempo en soluciones acuosas, así como en mezclas conteniendo KCI y extractos de L. tridentata; lo cual deberá hacerse antes de poner las semillas en las condiciones propicias temperatura para la germinación y desarrollo de las plántulas. Como resultado de dichos productos y método, es posible incrementar el porcentaje de germinación de semillas, mejorar el crecimiento de radículas y tallos e incrementar la producción de biomasa seca de las plántulas. Los diversos compuesto biológicos y orgánicos aquí promueven una agricultura ecológica y pueden utilizarse solos o mezclados con otros agroquímicos de acción múltiple a diferentes concentraciones, sin provocar un efecto adverso en las semillas y plántulas, así como en los animales y humanos que las consumen.

ANTECEDENTES La semilla es el principal órgano reproductivo de la gran mayoría de las plantas superiores terrestres y acuáticas, ya que desempeña una función fundamental én la renovación, persistencia y dispersión de las poblaciones de plantas, la regeneración de los bosques y la sucesión ecológica. Las semillas tienen gran relevancia en el proceso de producción agrícola. Aunque son el mejor vehículo para hacer llegar al campo los avances tecnológicos, también pueden convertirse en transmisores de organismos fitopatogenos de un área a otra. En condiciones adecuadas para su desarrollo, estos organismos ocasionan un detrimento en el rendimiento de los cultivos y en la calidad de las nuevas semillas [Taller Internacional sobre Identificación de Hongos y Stramenopilas Transmitidos por Semillas. Texcoco, Méx. , 26 al 30 de agosto de 2002]. Actualmente existe una gran demanda mundial de semillas de altas calidad y sanidad, pues trabajar con productos de estas características permite contar con una mayor certeza productiva y asegurar una buena cosecha.

La mayoría de los productores de cultivos hortícolas y forrajeros de México importan su semilla de siembra. El resto la producen en pequeños volúmenes o la recolectan directamente del campo, con una calidad germinativa que no satisface los requerimientos agronómicos y además, con problemas de identidad genética y pureza, lo que pone en riesgo todo el proceso productivo y la rentabilidad del cultivo. El 70% de los alimentos consumidos en el mundo son provistos directamente por semillas, principalmente de cereales, como el trigo (Triticum aestivum), v a\z (Zea mays) y arroz (Oryza sativa), como fuente esencial de carbohidratos. En menor proporción, las semillas de leguminosas, como la soya (Glycine max), el chícharo (Pisum sativum) y las distintas especies y variedades de frijoles (Phaseolus spp.) son de particular importancia como fuente de • proteínas. Ambos grupos cubren una amplia gama de requerimientos energéticos nutricionales básicos (carbohidratos, lípidos y proteínas) para el hombre [E. Moreno. 1996. Análisis físico y biológico de semillas agrícolas. UNAM. ISBN 968-36-5778-8].

Con la finalidad de obtener cosechas de alta calidad y rendimiento, así como para optimizar insumos agrícolas como los fertilizantes, pesticidas y otros agroquímicos, se ha recurrido extensivamente al tratamiento de semillas antes de la siembra. Con esto es posible romper la dormancia o latencia, acelerar el tiempo de germinación y/o mejorar el porcentaje y la uniformidad de germinación en diversos cultivos [L. Rivero y J. Espinoza. 1988. Duración de la latencia en semillas de Brachiaria decumbens. Pasturas Tropicales, 10 (1 ): 20-25].

Así como es importante una buena germinación de la semilla para el adecuado establecimiento en campo de cualquier cultivo, también es indispensable un buen desarrollo del sistema radicular. Una raíz bien desarrollada, además de mejorar el anclaje de la planta, absorbe una mayor cantidad de agua y nutrientes debido a que explora un mayor volumen de suelo. Asimismo, tiene una mayor capacidad para almacenar agua y minerales y para conducirlos hacia el tallo y las hojas. En el caso de cultivos que se desarrollan en condiciones de aridez, el almacenamiento de agua en el sistema radicular funciona como una estrategia fisiológica de adaptación para enfrentar la falta de agua en las etapas iniciales del establecimiento de las plantas. Debido a que la absorción de agua es proporcional a la densidad radicular, resulta obvio el beneficio que puede lograrse al promover la elongación celular de las raíces [H. Takahashi, T. K. Scott y H. Suge. 1992. St mulation of root elongation and curvature by calcium. Plant Physiology, 98(1 ): 246-252].

Los productos usados para mejorar la germinación de las semillas y/o estimular la elongación celular en plántulas han sido muchos y muy variados. Para esto se puede utilizar agua caliente o a temperatura ambiente, agua oxigenada, sustancias hormonales como el ácido giberélico (AG) y el ácido indolacético (AIA) y una gran diversidad de productos químicos orgánicos e inorgánicos que funcionan como reguladores del crecimiento [L. S. Katzman. 2001. HortScience 36(5): 979-981 ], Es importante hacer una distinción entre los términos "hormonas vegetales" y "reguladores del crecimiento de las plantas". Las primeras son sustancias naturales producidas en una parte de la planta, que son transferidas o translocadas a otras partes para controlar actividades de la misma planta. Los reguladores de crecimiento que incluyen a las hormonas vegetales, pueden ser naturales o sintéticos y se definen como compuestos orgánicos diferentes de los nutrientes, que utilizados en pequeñas cantidades pueden fomentar, inhibir o modificar diversos procesos fisiológicos de las plantas [H. Hartmann.1981. Plant Science, Growth Development and Utilization of Cultivated Plants, Prentice-Hall, Inc., págs. 133-141].

Las principales hormonas vegetales son las auxinas, las giberelinas, las citocininas y el etileno. Los precursores de estas hormonas son el aminoácido metionina y el ácido linoléico. La auxina más común es el AIA que la planta sintetiza a partir del aminoácido triptófano en las células del meristemo apical del talluelo y ramas, así como en las yemas foliares cuando están en desarrollo. La acción principal del AIA es promover la elongación celular. Las giberelinas (AG) se producen en el embrión o cotiledones de las semillas, en el ápice del tallo de las plantas, principalmente en las pequeñas hojas en formación, y en grandes cantidades, en el sistema radicular. Aunque la función principal del AG es estimular la división y elongación celular, se sabe que en varias especies también interactúa con los fitocromos para estimular la germinación de semillas, la apertura de yemas, el rompimiento del letargo y la floración [P. J. Davies, 2010. Plant Hormones, Their Nature, Occurrence, and Functions. 3a Edition. Springer, Ithaca, New York,].

El uso irracional de agroquímicos de origen sintético como los fertilizantes, reguladores del crecimiento y pesticidas ha traído consigo numerosos efectos colaterales, entre los que destacan el desarrollo de poblaciones resistentes de insectos, hongos y bacterias, el resurgimiento de nuevas plagas, la intoxicación de humanos, la eliminación de fauna benéfica, el incremento en los costos de producción y, la contaminación de las cosechas y el ambiente. Esta situación ha originado una demanda creciente de productos orgánicos vegetales y biológicos para ser utilizados en los sistemas de producción agropecuarios y forestales. [D. Torres y T. Capote. 2004. Agroquímicos: un problema ambiental global. Ecosistemas 13 (3): 2-6.

Por otra parte, los microorganismos involucrados en la presente invención son organismos benéficos como bacterias rizosféricas y hongos micorrícicos utilizados como biofertilizantes. Sus poblaciones viven asociadas o en simbiosis con las plantas y ayudan a su proceso natural de nutrición, además de ser regeneradores del suelo. Estos microbios se encuentran de forma natural en suelos que no han sido afectados por el uso excesivo de fertilizantes químicos u otros agroquímicos, que disminuyen o eliminan dichas poblaciones. Los biofertilizantes elaborados con hongos micorriza son productos benéficos que se asocian a las raíces de las plantas y favorecen su nutrición. Están presentes en todos los suelos agrícolas y su asociación con las plantas es benéfica, tanto para la planta como para la micorriza debido al intercambio de sustancias nutritivas. La micorriza permite a la planta incrementar la exploración de la raíz con un aumento en la absorción y transporte de nutrientes como fósforo, nitrógeno, cobre, zinc y agua del suelo, proporcionándole mayores ventajas para su desarrollo y productividad. Estos biofertilizantes no contaminan ni causan daño al suelo, ni a la planta, ni al hombre. Incrementan el rendimiento de los cultivos a un bajo costo y permiten además complementar el uso de los fertilizantes químicos principalmente los nitrogenados y fosfatados [N. Garg y S. Chandel. 2010. Arbuscular mycorrhízal networks: process and functions. A review. Agronomy for Sustainable Deveiopment, 34: 1 -17].

En la rizósfera de numerosas especies de plantas nativas y cultivadas como maíz, sorgo, trigo, pastos, caña de azúcar, etc., se han encontrado bacterias del género Azospirillum sp., que fijan el nitrógeno atmosférico y producen sustancias que estimulan el crecimiento vegetal y el desarrollo del sistema radical [Y. Okon, 1994. Azospirillum/plant associations. CRC Press, Boca Ratón, Fia., USA.]. Cuando estos microorganismos son inoculados a plantas cultivadas en maceta, en el campo e incluso in vitro, provocan modificaciones del sistema radical induciendo mejoras en la nutrición vegetal y en los rendimientos [O. Pérez-Garcia 2010. Journal of Phycology 46: 800-812].

Azospirillum brasilense es una bacteria fijadora de nitrógeno que vive en simbiosis con las raíces de las plantas y puede beneficiar numerosos cultivos de importancia agrícola [A. Hartmann y Y. Bashan, 2009. Ecology and application of Azospirillum and other plant growth-promoting bacteria (PGPB). European Journal of Soil Biology 45: 1 -2]. A. brasilense, es capaz de producir hormonas de crecimiento vegetal, generando un crecimiento importante del sistema radicular, lo que permite mayor capacidad de absorción de agua y nutrientes disponibles en el suelo, incluyendo la mayor absorción de los nutrientes o fertilizantes aplicados [B. M., Hernández y Y. Bashan. 2006. Restoration of giant cardón cacti in barren desert soil amended with common compost and inoculated wit Azospirillum brasilense. Biology and Fertility of Soils 43: 1 12-1 19].

Por lo que respecta a los hongos micorrícicos (HM) el termino micorriza significa asociación hongo-raíz, lo cual es una asociación entre los pelos de la raíz de una planta y el hongo especifico de la micorriza. Ambos microorganismos son capaces de absorber, acumular y transferir los principales macro, micronutrientes y el agua a la planta más rápidamente que las raíces sin micorrizas en plantas cultivadas [R. Sánchez, V. Pecina y J. Loera. 2008. Glomus intraradices y Azospirillum brasilense en trigo bajo dos regímenes de humedad en el suelo. Universidad y Ciencia, 24 (3): 239-245].

Entre los organismos que habitan en el suelo cabe destacar por su función ecológica los HM, los cuales se encuentran ampliamente extendidos por toda la superficie terrestre y establecen simbiosis con, al menos, el 80% de las plantas vasculares. Existen varios tipos de HM siendo más abundantes los hongos endomicorrícicos formadores de micorrizas arbusculares (HMA), que se caracterizan porque sus hifas penetran en las células de las raíces formando estructuras de almacenamiento (vesículas) y de intercambio bidireccional de nutrientes y carbón. [L.B. Martínez y F. I. Pugnaire. 2009. Interacciones entre las comunidades de hongos formadores de micorrizas arbusculares y de plantas. Algunos ejemplos en los ecosistemas semiáridos. Ecosistemas, 18 (2): 44-54].

Décadas de investigación muestran que los HM incrementan la tolerancia de la plantas a la sequía, compactación, altas temperaturas del suelo, metales pesados, salinidad, toxinas orgánicas e inorgánicas y extremos de pH del suelo. Estos organismos también prolongan la vida, viabilidad, y productividad del sistema radicular de la planta [S.E. Smith y D. J. Read, 2008. Mycorrhizal Symbiosis. Academic Press, San Diego, USA].

En los ecosistemas terrestres también se encuentra de manera natural el cloruro de potasio (KCI), el cual es utilizado en medicina, agricultura, aplicaciones científicas y en el procesamiento de alimentos. La mayoría del cloruro de potasio producido es utilizado en la fabricación de fertilizante, ya que el crecimiento de muchas plantas es limitado por el consumo de potasio. Como reactivo químico es empleado en la manufactura de hidróxido de potasio y potasio metálico. También se usa en aplicaciones científicas; en medicina se aplica en casos de diarrea, vómitos y en tratamientos postquirúrgico del aparato digestivo [Handbook of Chemistry and Physics, 71 st edition, CRC Press, Ann Arbor, Michigan, 1990].

Por su parte, Larrea tridentata (D.C.) Coville, también conocida como gobernadora, hediondilla, chaparral o creosote bush, pertenece a la familia de las Zigofiláceas (Zygophyllaceae), es un arbusto xerófito que crece en las zonas áridas del norte de México y suroeste de Estados Unidos, específicamente en la zona geográfica de los desiertos Chihuahuense, Sonorense y Mojave. Con las has hojas de L. tridentata se obtienen extractos que contienen una amplia variedad de compuestos químicos como: fenoles, lignanos, flavonoides aglicones, flavonoides glicósidos, saponinas, triterpenos, monoterpenos volátiles, monoterpenos oxigenados, compuestos aromáticos, esteroides, taninos, ésteres cerosos, aminoácidos, vitaminas y minerales, entre otros compuestos. El contenido de aminoácidos y de minerales puede ser de alrededor del 30% [E. Campos, T.J. Mabry y S. Fernández. 1979. LARREA. Serie El Desierto Vol. 2, ISBN 968-823-022-7].

Los extractos vegetales representan una opción viable para la prevención y control de microorganismos patógenos en la agricultura y en la medicina alternativa desde una perspectiva orgánica natural, debido a que son una fuente abundante de bioquímicos que poseen actividad contra bacterias, hongos e insectos [R.H. Lira-Saldivar. 2002. Hydrosoluble extracts of Larrea tridentata from two desertic zones from the north of México and its inhibitory effect on Fusarium oxysporum. F????. International Journal of Experimental Botany. 167-172.], Países como México de amplia biodiversidad, son un reservorio importante de plantas, las que son la fuente directa de fitoquímicos usados para fabricar nuevos biopesticidas. Un caso típico de lo antes mencionado se ejemplifica con el caso del arbusto perenne conocido como gobernadora (L. tridentata) distribuido en las zonas áridas del norte de México. [R. H. Lira-Saldivar. 2003. Estado actual del conocimiento sobre las propiedades antifúngicas y biocidas de Larrea tridentata (D.C.) Coville o gobernadora. Revista Mexicana de Fitopatología, 21 :215-223].

Como resultado de la combinación de microorganismos como la rizobacteria y la micorriza antes señalados; el uso de KCI en un amplio rango de concentraciones y además, cconsiderando que algunos compuestos obtenidos de las plantas son en muchos casos los precursores de hormonas y reguladores del crecimiento en las plantas, también se evaluaron los extractos hidrosolubles de la resina de L. tridentata para estimular la germinación de semillas y promover la elongación celular del talluelo y raíces de las plántulas obtenidas de esas semillas. Por lo tanto, en esta invención se describe la preparación de formulaciones y dosis que no tienen efectos perjudiciales contra humanos, animales, plantas y el ambiente, las cuales mejoran notablemente la germinación de semillas, así como el crecimiento y vigor de plántulas de cultivos agrícolas.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere al uso de microorganismos como A. brasilense y G. intraradices, sales minerales de cloruro de potasio y extractos de L. tridentata, los cuales al emplearse solos y/o mezclados, tienen el efecto de actuar como promotores de germinación de semillas y de elongación celular del sistema radicular y el talluelo de plantas cultivadas, esto ocurre de manera similar a la ocasionada por los fertilizantes tradicionales u hormonas vegetales sintéticas. Los productos reportados en la presente invención pueden utilizarse solos o mezclados entre sí y con otros productos agroquímicos, que pueden actuar como reguladores del crecimiento, pesticidas, fertilizantes o nutrientes. El uso de las mezclas puede tener un efecto de sinergia, antagónico o meramente aditivo.

La bacterja rizosférica A. brasilense, el hongo micorrícico G. intraradices, el KCI y los extractos de L. tridentata, solos o en las mezclas ya mencionadas, pueden utilizarse en forma de soluciones, suspensiones o pastas para inocular las semillas. Las formas de aplicación, así como las concentraciones utilizadas, dependen enteramente de los tipos de semillas que se van a tratar o de los resultados que se desean obtener. Por regla general se aplicarán en forma de soluciones acuosas.

Las semillas que pueden ser tratadas con los microorganismos, productos y extractos aquí mencionados con el propósito de promover la germinación de semillas, así como estimular la elongación celular de radículas y talluelos, además de incrementar la producción de biomasa o peso seco por plántula incluyen, pero no se limitan, a Leguminosas como el frijol, Gramíneas como el maíz, Solanáceas como tomate y chile, Cruciferas como brócoli, Cucurbitáceas como melón, Amarilidáceas como cebolla y Compuestas como lechuga; esas especies de cultivos entre muchas otras de utilidad e importancia agrícola, medicinal y/o pecuaria.

El método a utilizar en la aplicación de los microorganismos, productos o extractos sería cualquier método de los que convencionalmente se utilizan para la aplicación de los compuestos comerciales promotores de la germinación de las semillas y/o crecimiento radicular y del talluelo de plántulas. Generalmente el método consiste en inocular las semillas con el polvo que contienen los microorganismos, mas el producto usado como adherente orgánico (grenetina, goma arábiga, azúcar, etc.), remojar o imbibir las semillas en las soluciones que contienen los promotores o estimulantes, durante un tiempo determinado previo a la siembra de las semillas.

La rizobacteria y la micorriza se aplican directamente a la semilla. En cultivos anuales con tamaño de semilla mediano como maíz, sorgo, frijol y soya se aplica un kg del polvo o medio que las contiene para sembrar una hectárea de terreno. En cultivos con semilla de grano pequeño como trigo, cebada, avena la semilla se requiere hasta de 3 kg para mezclarla con la semilla requerida con la finalidad de sembrar una hectárea. Se debe colocar en un recipiente el contenido del sobre con el adherente y agregar de 250 a 300 mi de agua. Después se debe agitar para obtener una mezcla homogénea. De esta manera las semillas quedan inoculadas con los microorganismos y listas para la siembra.

En el caso de los extractos de L. trídentata, se requieren cantidades pequeñas que habitualmente son alrededor de 50 a 3000 ppm en un litro de agua, y preferentemente entre 250 a 1000 ppm del extracto disperso en agua, resultan ser efectivos cuando se aplican a semillas para promover su germinación así como la elongación celular de las radículas y talluelos de las plántulas, además de incrementar la cantidad de biomasa seca por plántula. Dependiendo del tipo de semilla que se deseé tratar, los tiempos de imbibición pueden ser de 1 a 12 horas, sin embargo, tiempos de 1 hasta 3 horas son efectivos para lograr los beneficios antes mencionados. Por lo que respecta al uso del cloruro de potasio las cantidades usuales para emplearse en la solución acuosa destinada para imbibir las semillas, oscilan entre 8 a 12 gramos de esta sal por litro de agua, las cuales pueden incrementarse progresivamente hasta alcanzar de 20 a 30 gramos de KCI por litro de agua.

MEJOR MÉTODO PARA LLEVAR A CABO LA INVENCIÓN A continuación se presentan algunos ejemplos de las evidencias generadas con diversas semillas de cultivos de gran importancia económica, respecto al beneficio obtenido en la germinación de semillas, crecimiento de plántulas y acumulación de biomasa seca, con el uso de los microorganismos A. brasilense y G. intraradices, solos y mezclados con cloruro de potasio; así como con los extractos de L. tridentata. Asimismo, se menciona el método seguido para tratamiento de las semillas y los resultados obtenidos en dichas evaluaciones. Estos ejemplos se ofrecen para ilustrar adicionalmente la novedad y la utilidad de la presente invención, pero no con la intención de limitar indebidamente la misma.

En todos los ejemplos los productos biológicos y orgánicos de evaluación se refieren a la bacteria A. brasilense, al hongo micorrícico G. intraradices y a los extractos hidrosolubles metanólico o etanólico, de las hojas de L. tridentata. El proceso de extracción de la resina de L tridentata con diferentes solventes, así como el procedimiento para hacerla hidrosoluble se describen en la patente "Proceso para la producción de resina de gobernadora (Larrea) soluble o dispersable en agua" que tiene el número de solicitud de registro 9810828. El producto de evaluación se disuelve en agua, solo o mezclado con diferentes dosis de ácido giberélico (AG3), para preparar soluciones a diferentes concentraciones y potenciar el efecto de las mismas sobre semillas de diferentes cultivos.

Ejemplo 1 : Ensayos para comparar la germinación de semillas de chile chilaca, tomate bola, melón, pepino y chile ancho, las cuales fueron inoculadas con una pasta acuosa de suelo y polvo conteniendo cepas de la bacteria A. brasilense y el hongo G. iñtraradices, solas y mezcladas para formar un coinóculo, además se incluyen como puntos de comparación o referencia, tratamientos con agua destilada y con 300 ppm/Lt de ácido giberélico.

Cuadro 1. Porcentaje de germinación, peso seco por plántula, longitudes de raíz y tallo de semillas de chile chilaca tratadas con agua destilada, ácido giberélico (AG3), A. brasilense, G. iñtraradices y la mezcla de A. brasilense + G. iñtraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Parámetros medidos en Chile chilaca Tratamientos: 1 ) Agua destilada, 2) Acido giberélico (AG3), 3) A. brasilense, 4) G. iñtraradices, 5) A. brasilense + G. iñtraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Cuadro 2. Porcentaje de germinación, peso seco por plántula, longitudes de raíz y tallo de semillas de chile ancho criollo tratadas con agua destilada, ácido giberélico (AG3), A. brasilense, G. intraradices y la mezcla de A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Parámetros medidos en Chile ancho criollo "Tratamientos: 1 ) Agua destilada, 2) Acido giberélico (AG3), 3) A. brasilense, 4) G. intraradices, 5) A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Cuadro 3. Porcentaje de germinación, peso seco por plántula, longitudes de raíz y tallo de semillas de tomate bola tratadas con agua destilada, ácido giberélico (AG3), A. brasilense, G. intraradices y la mezcla A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Parámetros medidos en Tomate bola Tratamientos: 1 ) Agua destilada, 2) Acido giberélico (AG3), 3) A. brasilense, 4) G. intraradices, 5) A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Cuadro 4. Porcentaje de germinación, peso seco por plántula, longitudes de raíz y tallo de semillas de melón cantaloupe tratadas con agua destilada, ácido giberélico (AG3), A. brasilense, G. intraradices y la mezcla A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Parámetros medidos en Melón cantaloupe Tratamientos: 1 ) Agua destilada, 2) Acido giberélico (AG3), 3) A. brasilense, 4) G. intraradices, 5) A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Cuadro 5. Porcentaje de germinación, peso seco por plántula, longitudes de raíz y tallo de semillas de pepino corto tratadas con agua destilada, ácido giberélico (AG3), A. brasilense, G. intraradices y la mezcla A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

Parámetros medidos en Pepino corto Tratamientos: 1 ) Agua destilada, 2) Acido giberélico (AG3), 3) A. brasilense, 4) G. intraradices, 5) A. brasilense + G. intraradices + 10 gr/Lt de KCI.

EJEMPLO 2: Ensayos para comparar la germinación de semillas de lechuga romana, cebolla bola y frijol que fueron imbibidas en agua, en soluciones acuosas de un extracto hidrosoluble, metanólico o etanólico, de Larrea tridentata y en mezclas del extracto metanólico con ácido giberélico.

Las semillas utilizadas en este ensayo fueron de dos cultivos hortícolas (lechuga y cebolla) y de dos leguminosas (dos variedades de frijol). Las semillas recibieron un tratamiento que consistió en sumergirlas en recipientes conteniendo soluciones acuosas del extracto de L. tridentata a diferentes concentraciones, dejando que se remojaran o embebieran durante un determinado tiempo, que en esté caso fue de 1.5 horas. Al final del período de imbibición, las semillas se sacaron de los recipientes y se colocaron en un trozo de papel absorbente Anchor con dimensiones de 25 x 45 cm, el cual fue previamente humedecido en agua corriente. En cada porción de papel se sembraron 25 semillas orientándolas con el hilio hacia el mismo lado. Posteriormente el papel se enrolló y ambos extremos se amarraron con ligas de hule. Los rollos de papel conteniendo las semillas se colocaron en bolsas de polietileno, las cuales a su vez se introdujeron en una cámara de germinación con temperatura constante de 25°C, con ciclos diarios de 12 horas luz y 12 horas de oscuridad durante 7 días.

En el Cuadro 6 se presenta la comparación realizada entre el porcentaje de germinación obtenido al tratar las semillas con agua (testigo) y con soluciones acuosas del extracto de L. tridentata en cuatro concentraciones. En este cuadro se puede apreciar que el porcentaje de germinación en las cuatro especies agrícolas fue consistentemente mayor cuando fueron tratadas con los extractos de L. tridentata en cualquiera de las concentraciones empleadas.

Cuadro 6. Porcentaje de germinación de semillas de lechuga variedad Clemente, cebolla variédad Tribute y frijol de las variedades Pinto Villa (PV) y Bayo Zacatecas (BZ) tratadas con soluciones acuosas de un extracto hidrosoluble, metanólico o etanólico, de L. tridentata.

L. Tridentata (ppm) ESPECIE 250 500 1000 2000 Agua (Testigo) Lechuga 99 100 99 99 98.0 Cebolla 95 86 85 94 81.0 Frijol PV 84.3 86.6 82.6 84 71.6 Frijol BZ 98.3 96.6 98.3 97.3 92.0 También se prepararon soluciones acuosas conteniendo 1000 ppm del extracto metanólico de L. tridentata mezcladas con la fitohormona ácido giberélico a las concentraciones de 270, 540 y 810 ppm. Esto se hizo con la finalidad de hacer la comparación del efecto de utilizar el extracto solo y mezclado con esta hormona, la cual se usa extensivamente de manera práctica y comercial para estimular la germinación de semillas. En el Cuadro 7 se presentan los valores de germinación de semillas de frijol de las variedades Pinto Villa y Bayo Zacatecas tratadas o ímbibidas en las soluciones antes mencionadas. En este cuadro se aprecia que el extracto solo de L. tridentata mejoró la germinación en las dos variedades de frijol e incluso, en algunos casos sus resultados fueron mejores que los obtenidos con las mezclas..

Cuadro 7. Porcentaje de germinación de semillas de dos variedades de frijol tratadas con soluciones acuosas de 1000 ppm de un extracto metanólico de L. tridentata y mezclas de 1000 ppm del extracto evaluado con tres diferentes dosis de ácido giberélico (AG3).

Dosis de AG3, mas 1000 ppm del extracto de L. tridentata EJEMPLO 3: Ensayo para comparar el crecimiento de la radícula de plántulas de lechuga romana, cebolla bola y dos variedades de frijol provenientes de semillas imbibidas en soluciones acuosas con diferentes concentraciones de un extracto hidrosoluble, metanólico o etanólico, de L tridentata.

La metodología de este ejemplo es igual a la mencionada en el Ejemplo 2. En el Cuadro 8 se hace una comparación del crecimiento observado en la radícula de plántulas de lechuga, cebolla y frijol, provenientes de semillas tratadas con soluciones acuosas del extracto de L. tridentata, medido a los ocho días después de haberse puesto a germinar las semillas en papel Anchor. En este cuadro se puede apreciar que las plántulas de las especies mencionadas fueron estimuladas con el extracto evaluado, ya que de manera consistente mostraron un mayor crecimiento que las imbibidas én agua (testigo). Es importante destacar que en el caso de las plántulas de lechuga el efecto del extracto a las dosis de 500 y 1000 ppm promovió que la longitud de radícula fuera superior en un 78% a la longitud de la radícula del testigo. .

Cuadro 8. Crecimiento radicular (cm) de plántulas de lechuga variedad Clemente, cebolla variedad Tribute y frijol de las variedades Pinto Villa (PV) y Bayo Zacatecas (BZ). provenientes de semillas tratadas con soluciones acuosas de un extracto hidrosoluble, metanólico o etanólico, de L. tridentata.

L. Tridentata (ppm) ESPECIE 250 500 1000 2000 Agua (Testigo) Lechuga 16.12 16.55 16.50 10.17 9.25 Cebolla 13.45 14.40 13.12 10.60 1 1.87 Frijol PV 19.24 19.35 19.31 18.77 17.24 Frijol BZ 16.05 15.62 15.54 16.76 14.10 EJEMPLO 4: Ensayo para comparar el crecimiento del talluelp de plántulas de frijol provenientes de semillas tratadas, a dos tiempos de imbibición, en soluciones acuosas del extracto metanólico hidrosoluble de L. tridentata y en mezclas del mismo extracto con ácido giberélico.

La metodología seguida en este ejemplo es igual a la descrita en el Ejemplo 2. En el Cuadro 9 se presenta la comparación de la longitud del talluelo (plúmula) de plántulas de frijol variedad Bayo Zacatecas medida a los ocho días después de haberse puesto a germinar las semillas en papel Anchor. En, este cuadro se puede , apreciar que las plántulas de las semillas tratadas con el extracto de L trídentata y con las mezclas del mismo extracto con ácido giberélico, mostraron consistentemente un mayor crecimiento que las imbibidas en agua (testigo).

Cuadro 9. Crecimiento del tallo (cm) de plántulas de frijol variedad Bayo Zacatecas (BZ) provenientes de semillas tratadas con soluciones acuosas de 1000 ppm del extracto metanólico hidrosoluble de L. trídentata y con mezclas de 1000 ppm del mismo extracto con tres diferentes dosis de ácido giberélico (AG3).

Dosis de AG3 mas 1000 ppm de L. trídentata EJEMPLO 5: Ensayo para comparar la producción de biomasa seca de plántulas de frijol provenientes de semillas imbibidas, a tres diferentes tiempos, en soluciones acuosas del extracto metanólico hidrosoluble de L. trídentata.

La metodología seguida es la misma descrita en el Ejemplo 4, sólo que en este caso se varió el tiempo de imbibición de las semillas (1 .5, 3.0, y 4.5 horas). Al final de estos períodos las semillas se sacaron de los recipientes y se dispusieron para germinar tal como se señala en el Ejemplo 4. En el Cuadro 9 se presentan los resultados obtenidos con respecto al efecto del extracto L. trídentata sobre la producción de biomasa seca de plántulas de frijol variedad Pinto Villa, medida a los ocho días después de haberse puesto a germinar las semillas en papel Anchor. En este cuadro se aprecia que la producción promedio de biomasa seca fue consistentemente mayor con respecto al testigo, en las plántulas obtenidas de semillas tratadas con el extracto de L. tridentata.

Con respecto al tiempo de remojo o imbibición de las semillas en las soluciones, los mejores resultados se obtuvieron para los tiempos de 1.5 y 3 horas.

Cuadro 9. Producción de biomasa seca de plántulas de frijol variedad Pinto Villa provenientes de semillas sometidas a diferentes tiempos de imbibición en soluciones acuosas del extracto metanólico hidrosoluble de L. tridentata.

L. Tridentata ppm) Tiempo (horas) 250 500 Agua (Testigo) ?5 92.88 : 92.54 ¦ 87.63 3.0 97.33 91.1 1 84.64 4.5 88.96 88.59 79.73

Claims

REIVINDICACIONES Habiendo descrito suficiente mi invención, considero como una novedad y por lo tanto reclamo como de mi exclusiva propiedad, lo contenido en las siguientes cláusulas:

1. El método para utilizar microorganismos de vida libre como la rizobacteria Azospirillum brasilense y el hongo Glomus intraradices, los cuales pueden ser utilizados solos y/o mezclados con la sal cloruro de potasio, los cuales actúan como aceleradores de la germinación, amplificadores de crecimiento y potenciadores del desarrollo de raíces y tallos de numerosos cultivos agrícolas, forrajeros y otros de uso medicinal.

2. El uso como promotores de la germinación de semillas, de los extractos hidrosolubles de resina de las hojas de Larrea tridentata, cuyo proceso de extracción con diferentes solventes, así como el procedimiento para hacerlos hidrosolubles se describen en la patente "Proceso para la producción de resina de gobernadora {Larrea) soluble o dispersable en agua" que tiene el número de solicitud de registro 9810828.

3. El uso como promotores del crecimiento radicular y del talluelo de plántulas, de los extractos hidrosolubles de resina de las hojas de Larrea tridentata, cuyo proceso de extracción con diferentes solventes, así como el procedimiento para hacerlos hidrosolubles se describen en la patente "Proceso para la producción de resina de gobernadora {Larrea) soluble o dispersable en agua" que tiene el número de solicitud de registro 9810828.

4. El uso como promotores del incremento en la cantidad de biomasa seca de plántulas, de los extractos hidrosolubles de resina de las hojas de L. tridentata, cuyo proceso de extracción con diferentes solventes, así como el procedimiento para hacerlos hidrosolubles se describen en la patente "Proceso para la producción de resina de gobernadora {Larrea) soluble o dispersable en agua" que tiene el número de solicitud de registro 9810828.

El uso de extractos hidrosolubles de Larrea tridentata de conformidad con las reivindicaciones 2, 3 y 4, caracterizado porque pueden utilizarse solos o mezclados entre sí, o mezclados con otros productos agroquímicos, los cuales pueden actuar como reguladores del crecimiento, pesticidas, fertilizantes o nutrientes, además de que estos pueden ser de origen natural o sintético. La cantidad de los componentes de las mezclas, así como las relaciones en peso entre estos componentes, dependen enteramente de los tipos de semillas que se van a tratar o de los resultados que se desean obtener.

El uso de extractos hidrosolubles de Larrea tridentata de conformidad con las reivindicaciones 2, 3, 4 y 5, caracterizado porque pueden utilizarse en forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, miniemulsiones, microemulsiones o pastas. Aunque por regla general se aplicarán en forma de soluciones acuosas. Las concentraciones de los extractos, cuando se utilicen solos, o las concentraciones de las mezclas de extractos con otros componentes en las soluciones, dependen enteramente de los tipos de semillas que se van a tratar o de los resultados que se desean obtener. En la práctica pueden utilizarse de 50 ppm a alrededor de 3000 ppm, y con preferencia de 250 ppm a alrededor de 1000 ppm.

El uso de extractos hidrosolubles de L. tridentata de conformidad con las reivindicaciones 2, 3, 4, 5 y 6, caracterizado porque se aplica a semillas de cultivos que incluyen, pero no se limitan, a Leguminosas tales como el frijol, Gramíneas tales como el maíz, Solanáceas tales como el tomatillo, Cucurbitáceas tales como el brócoli, Amarilidáceas tales como la cebolla, y Compuestas tales como la lechuga, entre muchas otras especies de utilidad agrícola.

8. Un método para promover la germinación de semillas, caracterizado porque antes de sembrar las semillas, éstas se remojan o embeben en una solución acuosa preparada de conformidad con las reivindicaciones 2, 4, 5, 6 y 7 durante un periodo que puede ser de 1 a 12 horas, aunque más específicamente de 1 a 3 horas.

9. Un método para promover el crecimiento de la radícula y el talluelo de plántulas, caracterizado porque las plántulas provienen de semillas que antes de 'Ser sembradas, fueron remojadas o imbibidas en una solución acuosa preparada de conformidad con las reivindicaciones 3, 4, 5, 6 y 7, durante un periodo que puede ser de 1 a 12 horas, aunque más específicamente de 1 a 3 horas.

10. Un método para incrementar la cantidad de biomasa seca de plántulas, caracterizado porque las plántulas provienen de semillas que antes de ser sembradas, fueron remojadas o imbibidas en una solución acuosa preparada de conformidad con las reivindicaciones 4, 5, 6 y 7, durante un periodo que puede ser de 1 a 12 horas, aunque más específicamente de 1 a 3 horas.