MX2009000013A

MX2009000013A - Nuevos analogos del peptido intestinal vasoactivo.

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Publication number: MX2009000013A
Application number: MX2009000013A
Authority: MX
Inventors: David Robert Bolin; Wajiha Khan; Hanspeter Michel
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 2006-07-06
Filing date: 2007-06-26
Publication date: 2009-01-23
Also published as: MA30590B1; US20080096807A1; CL2007001956A1; TW200819139A; WO2008003612A2; NO20090027L; CR10518A; CN101484468A; IL196122A0; AR061825A1; AU2007271274A1; CA2656757A1; RU2009103811A; BRPI0714306A2; JP2009542593A; WO2008003612A3; EP2041168A2; ECSP099029A; PE20081000A1; KR20090027239A

Abstract

Un agonista del receptor VPAC-2 de fórmula [X-(SEC ID No. :2)-Y) para el tratamiento de las trastornos obstructivos pulmonares, por ejemplo la EPOC, administrado, por ejemplo, por inhalación.

Description

NUEVOS ANALOGOS DEL PEPTIDO INTESTINAL VASOACTIVO DESCRIPCION DE LA INVENCION El péptido intestinal vasoactivo (VIP, por sus siglas en inglés) se descubrió, aisló y purificó inicialmente a partir de intestino porcino [US 3.879.371] . El péptido posee veintiocho (28) aminoácidos y una gran homología con la secretina y el glucagón [Carlquist y otros, Horm. Metab Res., 14.28-29 (1982)] . La secuencia de aminoácidos del VIP es la siguiente: His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys- Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn- Ser-IIe-Leu-Asn (SEC ID No. : 1) El VIP presenta una variedad rango de actividades biológicas en todo el tracto gastrointestinal y el sistema circulatorio. Gracias a su similitud con las hormonas gastrointestinales, se ha detectado que el VIP estimula la secreción pancreática y biliar, la glucogenólisis hepática, la secreción de glucagón e insulina y que activa la liberación de bicarbonato pancreático. Se conocen dos tipos de receptores de VIP y se han clonado los de humano, rata, ratón, pollo, peces y rana. Actualmente se identifican como VPACl y VPAC2 , y responden al VIP nativo con una afinidad comparable. El ARNm del receptor VPAC2 se encuentra en el tracto respiratorio humano, lo que Ref. 199230 incluye el epitelio traqueal y bronquial, células glandulares e inmunes, paredes alveolares y macrófagos . [Groneberg y otros, Lab. Invest. 81:749-755 (2001) y Laburthe y otros, Receptors and Channels 8:137-153 (2002)]. Las neuronas que contienen VIP se han localizado mediante inmunoensayo en células de los sistemas endocrino y exocrino, del intestino y el músculo liso. Se ha descrito que el VIP es un neuro-efector que provoca la liberación de varias hormonas, lo que incluye la prolactina, tiroxina, insulina y glucagón. También se ha descrito que el VIP estimula la liberación de renina del riñon in vivo e in vi tro. Se ha descrito que el VIP está presente en los nervios y terminales nerviosas en las vías respiratorias de varias especies animales y en el hombre. Los efectos cardiovasculares y broncopulmonares del VIP son de interés ya que se ha descrito que el VIP es un potente vasodilatador y relajante del músculo liso, actuando sobre los lechos vasculares periféricos, pulmonares y coronarios. Se ha descrito que el VIP posee un efecto vasodilatador en los vasos sanguíneos del cerebro. Estudios in vitro han demostrado que el péptido intestinal vasoactivo, aplicado de forma exógena a las arterias cerebrales, induce una vasodilatación, lo que sugiere que el VIP es un posible transmisor de la vasodilatación cerebral. El VIP también ha demostrado ser un potente vasodilatador en el ojo.

El VIP puede tener efectos reguladores sobre el sistema inmunitario, por ejemplo, el VIP puede modular la proliferación y la migración de linfocitos. Se ha demostrado que el VIP nativo inhibe la producción de IL- 12 en macrofagos estimulados con LPS con efectos sobre la síntesis de IFNy. El VIP inhibe la producción de TGF-ß? en los macrofagos murinos e inhibe la producción de IL- 8 en monocitos humano a través de NFKB. [Sun y otros, J. Neuroimmunol . 107 : 88 - 99 ( 2000 ) y Delgado y Ganea, Biochem. Biophys. Res. Commun. 3 02 : 275 - 2 83 ( ¾003 ) ] . Como se ha detectado que el VIP relaja el músculo liso y que está presente de forma habitual en los tejidos de las vías respiratorias, tal como se ha dicho antes, se ha hipotetizado que el VIP podría ser un mediador endógeno de la relajación del el músculo liso bronquial. Se ha visto que los tejidos en los pacientes asmáticos no contienen VIP inmuno-reactivo, comparado con los tejidos de pacientes normales. Esto puede ser indicativo de una pérdida de VIP o fibras nerviosas VIPérgicas asociadas con la enfermedad del asma. Las pruebas in vi tro e in vivo han mostrado que el VIP relaja el músculo liso traqueal y protege de los agentes broncoconstrictores como la histamina y la prostaglandina F2a. Se ha demostrado que cuando se administra VIP por vía intravenosa, protege de agentes broncoconstrictores como la histamina, prostaglandina F2a, leucotrienos , factor activador de plaquetas, así como de la broncoconstricción inducida por antígenos . También se ha detectado que el VIP inhibe la secreción de moco en los te idos , de las vías respiratorias humanas in vi tro. Los trastornos de las vías respiratorias tienen causas variadas pero comparten varias características patofisiologicas y clínicas. La limitación del flujo de aire debido a la obstrucción de las vías respiratorias, el engrosamiento de las paredes de las vías respiratorias, la inflamación o la pérdida de elasticidad del tejido intersticial son características de este trastorno. Las co-morbosidades pueden incluir la hipersecreción de moco, la hiper-reactividad de las vías respiratorias y las anormalidades en el intercambio gaseoso, lo que puede resultar en tos, producción de esputos, dificultad en la respiración y disnea. Los trastornos comunes de las vías respiratorias incluyen: asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) , bronquitis crónica, enfisema e hipertensión arterial. [Mayer y otros, Respiration Physiol. 12 8 : 3 - 11 ( 2 001 ) ] . La EPOC es un grupo de estados crónicos definidos por la obstrucción de las vías pulmonares. La EPOC incluye dos enfermedades respiratorias principales que son la bronquitis crónica (obstructiva) y el enfisema. Ambas enfermedades están asociadas con una dificultad para respirar y ahogo. La EPOC puede estar acompañada de hipertensión pulmonar. El consumo de cigarrillos a largo plazo es el factor de riesgo predominante para la EPOC. La limitación de las vías respiratorias asociada con la EPOC se considera generalmente irreversible. La bronquitis crónica es una enfermedad inflamatoria progresiva. Con esta enfermedad se asocia un aumento de la producción de moco en las vías respiratorias y un aumento en la aparición de infecciones bacterianas. Este estado inflamatorio crónico induce el engrosamiento de las paredes de los bronquios que resulta en un aumento de la congestión y disnea. El enfisema es una patología subyacente de la EPOC al dañar el tejido pulmonar, con un aumento de los espacios aéreos y una pérdida de área de superficie alveolar. El daño pulmonar está provocado por la debilitación y rotura de los sacos aéreos dentro de los pulmones. La elasticidad natural del tejido pulmonar también se pierde, provocando una sobretensión y rotura. Los túbulos bronquiales más pequeños pueden dañarse, lo que puede provocar su colapso y la obstrucción del flujo de aire, provocando una falta de aliento . La EPOC, en su sentido médico sustancial, está siempre acompañada por la obstrucción bronquial. Por lo tanto, los síntomas más comunes de la EPOC incluyen la falta de aliento, tos crónica, opresión en el pecho, mayor esfuerzo para respirar, aumento de la producción de moco y frecuente aclaramiento de la garganta. Los pacientes son incapaces de realizar sus actividades cotidianas diarias. Es posible que la bronquitis crónica y el enfisema se desarrollen de forma independiente, pero la mayoría de personas con EPOC muestra una combinación de estos trastornos. La rotura del tejido conectivo en el parénquima pulmonar, en particular de la elastina, resulta en la pérdida de elasticidad que se encuentra en la mayoría de trastornos de las vías respiratorias. Se han mostrado evidencias de la degradación de elastina en el enfisema y la EPOC. La elastasa de los neutrófilos se considera una proteasa primaria responsable de la destrucción de la elastina [Barnes y otros, Eur. Respir. J. 22:672-688 (2003)]. Se ha detectado un aumento de la producción de la elastasa de los neutrófilos en los pulmones de los pacientes con EPOC [Higashimoto y otros, Respiration 72:629-635 (2005)]. Debido a su interesante actividad biológica y la potencial utilidad clínica del VIP, el péptido ha sido el objetivo de varios programas sintéticos publicados, con el fin de aumentar una o más de las propiedades de esta molécula. Takeyama y otros han informado de un análogo de VIP que posee un ácido glutámico sustituido por un ácido aspártico en la posición 8. Se ha detectado que este compuesto es menos potente que el VIP nativo [Chem. Pharm. Bull. 28:2265-2269 (1980)] . Wendlberger y otros han descrito la obtención de un análogo de VIP con una norleucina sustituida en la posición 17 por metionina [Peptide Proc . 168. Eur. Pept. Symp., 290-295 (1980)] . Se encontró que el péptido era equipotente al VIP nativo por su capacidad de desplazar VIP radioyodado en preparaciones de membrana de hígado. Watts y Wooton han informado de una serie de fragmentos lineares y cíclicos de VIP, que contienen entre seis y doce residuos de la secuencia nativa [EP 184.309, EP 325.044, US 4.737.487, US 4.866.039] . Turner y otros han descrito que el fragmento VIP (10-28) es un antagonista de VIP [Peptides 7:849-854 (1986)] . Se ha publicado que el análogo sustituido [4-Cl-D-Phe6, Leu17] -VIP también se une al receptor de VIP y antagoniza la actividad del VIP [Pandol y otros, Gastrointest . Liver Physiol. 13:G553-G557 (1986)] . Gozes y otros han publicado que el análogo [Lys1 , Pro2 , Arg3 , Arg , Pro5 , Tyr6] -VIP es un inhibidor competitivo de VIP que se une a su receptor en las células gliales [Endocrinology 125:2945-2949 (1989)] . Robberecht y otros han descrito varios análogos de VIP con residuos D sustituidos en el extremo N-terminal del VIP nativo [Peptides 9:339-345 (1988)] . Todos estos análogos se unen de forma más débil al receptor de VIP y muestran menos actividad que el VIP nativo en la activación de c-AMP. Tachibana e Ito han descrito varios análogos de la molécula precursora de VIP [en Peptide Chem. Shiba y Sakakibara (eds.), Prot. Res. Foundation, 1988, 481-486, JP 1083012, US 4.822.774]. Estos compuestos resultaron ser broncodilatadores entre 1 y 3 veces más potentes que el VIP y poseen un nivel de actividad hipotensa entre 1 y 2 veces superior. Musso y otros también han descrito varios análogos de VIP que tienen sustituciones en las posiciones 6-7, 9-13, 15-17 y 19-28 [Biochem 27:8174-8181 (1988); US 4.835.252]. Se encontró que estos compuestos eran iguales o menos potentes que el VIP nativo en la unión al receptor de VIP y en la respuesta biológica. Bartfai y otros han descrito una serie de análogos de VIP- [Leu17] sustituidos de forma múltiple. [WO 89/05857]. Gourlet y otros han descrito un derivado [Arg16]-VIP con afinidad por los receptores de VIP [BBA 1314:267-273 (1996)]. Onoue y otros han descrito una serie de derivados de arginina y truncaciones de VIP [Onoue y otros, Life Sci . 74:1465-77 (2004) y Ohmori y otros, Regul . Pept . 123:201-207 (2004)]. También se ha descrito una serie de derivados de poli-alanina [Igarashi y otros, J. Pharm. Exper. Ther. 303:445-460 (2002) e Igarashi y otros, J. Pharm. Exper. Ther. 315:370-81 (2005) ] . En la US 20050203009, se describen los análogos de VIP que poseen una actividad selectiva agonista de VPAC1. Se ha descrito que los análogos de VIP y derivados pegilados en C-terminal son útiles en el tratamiento de trastornos metabólicos, lo que incluye diabetes [por ejemplo, WO2006042152 ] . Se han identificado péptidos que tienen una actividad agonista VPAC2 , e incluyen los análogos de PACAP y VIP [Gourlet y otros, Peptides 18:403-408; Xia y otros, J. .Pharmacol. Exp. Ther. 281:629-633 (1997)]. Se han descrito análogos cíclicos de VIP que poseen una estabilidad y actividad aumentada [Bolin y otros, Biopolymers 37:57-66 , (1995) , US 5.677.419] . Cuando se administra en humanos mediante infusión intravenosa a pacientes, se ha visto que el VIP provoca un aumento en la tasa de flujo respiratorio máximo y protege de la broncodilatación inducida por histamina. [Morice y Sever, Peptides 7:279-280 (1986); Morice y otros, The Lancet, II 1225-1227 (1983)]. No obstante, los efectos pulmonares observados debido a esta infusión intravenosa de VIP vinieron acompañados por efectos secundarios cardiovasculares, sobre todo hipotensión y taquicardia, y también enrojecimiento facial. Cuando se administró en dosis intravenosas que no provocan efectos cardiovasculares, el VIP no alteró la conductancia específica de las vías respiratorias [Palmer y otros, Thorax 41:663-666 (1986)]. La falta de actividad se explicó era debida a la baja dosis administrada y posiblemente a la rápida degradación del compuesto. Cuando se administra en aerosol a humanos, el VIP nativo es efectivo sólo de forma marginal en la protección frente a la broncoconstricción inducida por histamina. [Altieri y otros, Pharmacologist 25:123 (1983)]. Se encontró que el VIP no tenía un efecto significativo sobre los parámetros básales de las vías respiratorias pero tuvo un efecto protector frente a la broncoconstricción inducida por histamina cuando se administró mediante inhalación en humanos [Barnes y Dixon, Am. Rev. Respir. Dis . , 130:162-166 (1984)]. Cuando se administra VIP mediante aerosol, se ha observado que no provoca taquicardia o efectos hipotensos junto con la broncodilatación [Said y otros, en: Vasoactive Intestinal Peptide, Said ed. Raven Press, New York, 1928, 185-191] . Un derivado del VIP, el RO 25-1553, se ha publicado como broncodilatador eficaz de forma preclínica y clínica en asmáticos moderados [Kallstrom y Waldeck, Eur. J. Pharm. 430:335-40 (2001) y Linden y otros, Thorax 58:217-21 (2003)]. Se ha descrito que el VIP nativo es de utilidad para el tratamiento de la EPOC, la hipertensión pulmonar y otros trastornos de las vías respiratorias [WO03061680, WO0243746 y WO2005014030] . Existe una necesidad, no obstante, de nuevos análogos del péptido intestinal vasoactivo con una selectividad para el receptor VPAC2 , que posean la misma o mayor potencia, propiedades farmacocinéticas y propiedades farmacológicas que los agonistas de VPAC existentes.

Preferiblemente, existe una necesidad de compuestos con mayor duración de la actividad que la de los previamente disponibles . La presente invención comprende un agonista del receptor de VPAC-2 de fórmula (I) : X-His-R2-Asp-Ala-R5-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys- R16-Nle-R18-Ala-Lys-Lys21-Tyr-Leu-Asn-Asp25-Leu-R27-R28-Gly-Gly- Thr-Y [X- (SEC ID No. : 2) -Y] en la que X es un hidrógeno del amino N-terminal de la Histidina que puede estar opcionalmente sustituido por un grupo protector amino hidrolizable, más preferiblemente por un grupo acetilo, Y es el hidroxi del carboxilo C-terminal de la Treonina que puede estar opcionalmente sustituida mediante un grupo protector carboxilo hidrolizable, más preferiblemente por NH2, los residuos subrayados indican que presentan una unión covalente de cadena lateral a cadena lateral del primer aminoácido (Lys21) y el último (Asp25) dentro del segmento, R2 es Ser o Ala, R5 es Thr, Ser, Asp, Gln, Pro o CotMeVal, R16 es Gln, Ala o Arg, R18 es Ala, Lys o Glu, R27 es Lys o Leu con la excepción de que R27 debe ser Lys cuando R5 es CaMeVal y R16 es Arg, R28 es Lys o Asn, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. Los compuestos de la invención son agonistas activos del receptor VPAC2 y poseen una estabilidad aumentada frente a la elastasa de neutrófilos humanos. Por lo tanto, los compuestos, como análogos estables selectivos del VIP nativo que poseen una resistencia mejorada a los efectos de la elastasa presente en el pulmón humano, podrían ser útiles para el tratamiento de trastornos de las vías respiratorias, lo que incluye la EPOC. Todas las secuencias peptídicas mencionadas aquí están escritas de acuerdo con la convención habitual, en la que el aminoácido N-terminal está a la izquierda y el aminoácido C-terminal está a la derecha, a menos que se indique lo contrario. Un guión entre dos residuos de aminoácido indica un enlace peptídico. Un segmento de aminoácidos subrayados indica una unión covalente de cadena lateral a cadena lateral entre el primer y último aminoácido dentro del segmento. Normalmente este es un enlace amida. Cuando el aminoácido posee formas isoméricas, la que se representa es la forma L del aminoácido a menos que se indique de forma expresa de otra manera. Por conveniencia en la descripción de esta invención, se utilizan las abreviaturas convencionales y no convencionales de los diferentes aminoácidos. Estas abreviaturas son familiares para aquellos expertos en la materia, pero para mayor claridad se resumen a continuación: Asp= D= Acido Aspártico; Ala= A= Alanina; Arg= R= Arginina; Asn= N= Asparagina; Gly= G= Glicina; Glu= E= Ácido Glutámico; Gln= Q= Glutamina; His= H= Histidina; Ile= 1 = Isoleucina; Leu= L= Leucina; Lys= K= Lisina; Met= M= Metionina; MeVal= MeV= CcxMeVal; Nle= Norleucina; Phe= F= Fenilalanina; Pro= P= Prolina; Ser= S= Serina; Thr= T= Treonina; Trp= W= Triptófano; Tyr= Y= Tirosina y Val= V= Valina . Respecto a los términos "grupo protector amino hidrolizable" y "grupo protector carboxilo hidrolizable" , de acuerdo con esta invención puede utilizarse cualquier grupo protector convencional que pueda ser eliminado por hidrólisis. Ejemplos de tales grupos aparecen más adelante. Los grupos protectores amino preferibles son los grupos acilo de fórmula en la que X3 es alquilo inferior o haloalquilo inferior. De estos grupos protectores, son especialmente preferidos aquellos en los que X3 es alquilo de C1-C3 o haloalquilo de C1-C3. Los grupos protectores carboxilo preferidos son los ésteres de alquilo inferior, NH2 y amidas de alquilo inferior, siendo especialmente preferidos los ésteres de alquilo de C1-C3, H2 y las amidas de alquilo de C1-C3. También por comodidad, se utilizan las siguientes abreviaturas o símbolos fácilmente reconocibles por un experto en la materia para representar las porciones, reactivos y similares utilizados en esta invención: Nle: norleucina; CaMeVal : Coc-metil-L-valina; eVal : COC-metil-L-valina; CH2CI2: cloruro de metileno; Ac : acetilo; Ac20: anhídrido acético; AcOH: ácido acético; ACN: acetonitrilo; DMAc : dimetilacetamida; DMF: dimetilformamida; DIPEA: N,N-di-isopropiletilamina; TFA: ácido trifluoroacético; HOBT: N-hidroxibenzotriazol ; DIC: N, ' -diisopropilcarbodiimida; BOP: benzotriazol-l-iloxi-tris- (dimetilamino) fosfonio-hexafluoro-fosfato; HBTU: 2- ( lH-benzotriazol-1- ilo ) -1.1 , 3.3 - tetra-metiluronio-hexafluorofosfato ; N P: l-metil-2-pirrolidinona; MALDI-TOF: desabsorción ionización mediante láser asistida por matriz - tiempo de vuelo; FAB- S : espectrometría de masas de bombardeo rápido de átomos; ES- S: espectrometría de masas de electro pulverización; TA: temperatura ambiente. Tal como se utiliza aquí, el término "alquilo" indica un radical hidrocarbilo ramificado o sin ramificar, cíclico o acíclico, saturado o insaturado (por ejemplo, alquenilo o alquinilo) que puede estar sustituido o sin sustituir. Cuando es cíclico, el grupo alquilo es preferiblemente de C3 a C12, más preferiblemente de C5 a Cío, más preferiblemente de C5 a C7. Cuando es acíclico, el grupo alquilo es preferiblemente de Ci a Cío, más preferiblemente de Ci a C6, más preferiblemente metilo, etilo, propilo (n-propilo o isopropilo) , butilo (n-butilo, isobutilo o ter-butilo) o pentilo (lo que incluye n-pentilo e isopentilo) , más preferiblemente metilo. Tal y como se utiliza aquí, el término "alquilo inferior" indica un radical hidrocarbilo ramificado o sin ramificar, cíclico o acíclico, saturado o insaturado (por ejemplo, alquenilo o alquinilo) en el que dicho grupo alquilo de Cíclico inferior es C5, Ce o C7, y en el que dicho grupo alquilo acíclico inferior es Ci, C2, C3 o C4, y se selecciona preferiblemente de entre metilo, etilo, propilo (n-propilo o isopropilo) o butilo (n-butilo, isobutilo o ter-butilo) . Tal y como se utiliza aquí, el término "acilo" indica un alquilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo o grupo heteroarilo opcionalmente sustituido unido mediante un grupo carbonilo e incluye grupos como acetilo, propionilo, benzoilo, 3-piridinilcarbonilo, 2-morfolinocarbonilo, 4-hidroxibutanoilo, 4-fluorobenzoilo, 2-naftoilo, 2-fenil-acetilo, 2-metoxiacetilo y similares. Tal y como se utiliza aquí, el término "arilo" indica un grupo aromático carbocíclico sustituido o no sustituido, como fenilo o naftilo, o un grupo heteroaromático sustituido o no sustituido que contiene uno o más heteroátomos , preferiblemente uno. Los grupos alquilo y arilo pueden estar sustituidos o sin sustituir. Cuando están sustituidos, generalmente están presentes de 1 a 3 sustituyentes , preferiblemente 1 sustituyente . Los sustituyentes pueden incluir: grupos que contienen carbono como alquilo, arilo, arilalquilo (por ejemplo, fenilo sustituido o sin sustituir, bencilo sustituido o sin sustituir) ; átomos de halógeno y grupos que contienen halógeno como haloalquilo (por ejemplo, trifluorometilo) ; grupos que contienen oxígeno como los alcoholes (por ejemplo, hidroxilo, hidroxialquilo, aril (hidroxil ) alquilo) , éteres (por ejemplo, alcoxi, ariloxi, alcoxialquilo, ariloxialquilo) , aldehidos (por ejemplo, carboxaldehído) , cetonas (por ejemplo, alquilcarbonilo , alquilcarbonilalquilo , arilcarbonilo, arilalquilcarbonilo, arilcarbonilalquilo) , ácidos (por ejemplo, carboxi, carboxialquilo) , derivados ácidos como los ésteres (por ejemplo, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonil-alquilo, alquilcarboniloxi , alquilcarboniloxialquilo) , amidas (por ejemplo, aminocarbonilo, mono- o di-alquilaminocarbonilo, aminocarbonilalquilo, mono- o di-alquilaminocarbonilalquilo, arilaminocarbonilo) , carbamatos (por ejemplo, alcoxicarbonilamino, ariloxicarbonilamino, aminocarboniloxi , mono- o di-alquilaminocarboniloxi , arilaminocarboniloxi ) y ureas (por ejemplo, mono- o di-alquilaminocarbonilamino o arilaminocarbonilamino) ; grupos que contienen nitrógeno como las aminas (por ejemplo, amino, mono- o di-alquilamino , aminoalquilo , mono- o di-alquil-aminoalquilo) , azidas, nitrilos (por ejemplo, ciano, cianoalquilo) , nitro; grupos que contienen azufre como los astioles, tioéteres, sulfóxidos y sulfonas (por ejemplo, tioalquilo, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, alquiltioalquilo, alquilsulfinilalquilo, alquilsulfonil-alquilo, tioarilo, arilsulfinilo, arilsulfonilo, ariltioalquilo, arilsulfinilalquilo, arilsulfonilalquilo) ; y grupos heterocíclicos que contienen uno o más heteroátomos , preferiblemente uno. Tal y como se utiliza aquí, el término "halógeno" indica un radical flúor, cloro, bromo o yodo, preferiblemente un radical flúor, cloro o bromo y más preferiblemente un radical flúor o cloro. "Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a las sales de adición ácida o sales de adición básica convencionales que retienen la efectividad y propiedades biológicas de los compuestos de fórmula I y están formadas por ácidos no tóxicos orgánicos o inorgánicos, o bases orgánicas o inorgánicas adecuados. Ejemplos de sales de adición ácida incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos como el ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfámico, ácido fosfórico y ácido nítrico, y aquellas derivadas de ácidos orgánicos como el ácido p-toluensulfónico, ácido salicílico, ácido metansulfónico, ácido oxálico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido málico, ácido láctico, ácido fumárico y similares. Ejemplos de sales de adición básica incluyen aquellas derivadas de amonio, potasio, sodio e hidróxidos de amonio cuaternario, como por ejemplo el hidróxido de tetrametilamonio . La transformación química de un compuesto farmacéutico (es decir, un fármaco) en una sal es una técnica bien conocida que se utiliza en un intento de mejorar las propiedades que involucran la estabilidad física o química, por ejemplo la higroscopicidad, fluidez o solubilidad de los compuestos. Véase, por ejemplo, Ansel y otros, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (68 Ed. 1995) en las págs. 196 y 1456-1457. "Ester farmacéuticamente aceptable" se refiere a un compuesto de fórmula I esterificado de forma convencional con un grupo carboxilo, que retienen la efectividad y propiedades biológicas de los compuestos de fórmula I y se escinden in vivo (en el organismo) en el correspondiente ácido carboxílico activo. Ejemplos de grupos éster que se escinden in vivo (en este caso se hidrolizan) en los correspondientes ácidos carboxílicos son aquellos en los que el hidrógeno escindido se sustituye con un alquilo inferior que está opcionalmente sustituido, por ejemplo, con heterociclo, cicloalquilo , etc. Ejemplos de ésteres de alquilo inferior sustituido son aquellos en los que el alquilo inferior está sustituido con pirrolidina, piperidina, morfolina, N-metilpiperazina, etc. El grupo que se escinde in vivo puede ser, por ejemplo, etilo, morfolino etilo y dietilamino etilo. En relación con la presente invención, -CONH2 también se considera un éster, en cuanto -NH2 se escinde in vivo y se sustituye con un grupo hidroxilo, para formar el correspondiente ácido carbox lico. Está disponible más información en referencia a los ejemplos y el uso de ésteres para la liberación de compuestos farmacéuticos en Design of Prodrugs, Bundgaard (ed.) (Elsevier, 1985 ) . Véase también, Ansel et. al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems ( 6 a Ed. 1995 ) en las págs . 108 - 109 ; Krogsgaard-Larsen y otros, Textbook of Drug Design and Development ( 2 a Ed. 1996 ) en las págs. 152 - 191 . En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que X es un hidrógeno del amino N-terminal de la Histidina o en el que dicho hidrógeno está sustituido por un grupo acetilo. En otra modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que X es un hidrógeno del amino N-terminal de la Histidina.

En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que Y es el hidroxilo del carboxi C-terminal de la Treonina o en que dicho hidroxilo está sustituido por NH2. En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que Y es el hidroxilo del carboxilo C-terminal de la Treonina . En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que R2 es Ser. En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que R2 es Ala. En una modalidad de la presente ' invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que R5 es Thr, Ser o CaMeVal. En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que R5 es Thr. En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que R5 es Ser. En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula í en el que R5 es CaMeVal . , En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que R16 es Gln o Arg. En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que R16 es Gln. En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que R16 es Arg.

En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que R18 es Ala. En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que R18 es Lys . En otra modalidad la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que R18 es Glu. En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que R27 es Lys. En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que R28 es Lys. En una modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I en el que X es un hidrógeno del amino N-terminal de la Histidina o dicho hidrógeno está sustituido por un grupo acetilo,, Y es el hidroxilo del carboxilo C-terminal de la Treonina o dicho hidroxilo está sustituido por H2, R2 es Ser o Ala, R5 es Thr, Ser o CocMeVal, R16 es Gln o Arg, R18 es Ala, Lys o Glu, R27 es Lys o Leu con la excepción de que R27 debe ser Lys cuando R5 es CO eVal y R16 es Arg, y R28 es Lys . En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que X es un hidrógeno del amino N-terminal de la Histidina o dicho hidrógeno está sustituido por un grupo acetilo, Y es el hidroxilo del carboxilo C-terminal de la Treonina o dicho hidroxilo está sustituido por NH2, R2 es Ser o Ala, R5 es Thr, Ser o COMeVal, R16 es Gln o Arg, R18 es Ala, Lys o Glu, R27 es Lys o Leu con la excepción de que R27 debe ser Lys cuando R5 es COMeVal y R16 es Arg, y R28 es Lys. En otra modalidad, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I en el que X es un hidrógeno del amino N-terminal de la Histidina o dicho hidrógeno está sustituido por un grupo acetilo , Y es el hidroxilo del carboxilo C-terminal de la Treonina o dicho hidroxilo está sustituido por NH2, R2 es Ser o Ala, R5 es Ser o COMeVal, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys o Leu, y R28 es Lys . Los presentes compuestos representativos pueden sintetizarse fácilmente mediante cualquier procedimiento convencional conocido para la formación de un enlace peptídico entre aminoácidos. Tales procedimientos convencionales incluyen, por ejemplo, cualquier procedimiento en fase líquida que permita una condensación entre el grupo amino alfa libre de un aminoácido o un residuo del mismo, con su grupo carboxilo y otros grupos reactivos protegidos, y el grupo carboxilo primario libre de otro aminoácido o un residuo del mismo con su grupo amino u otros grupos reactivos protegidos . Tales procedimientos convencionales para la síntesis de nuevos compuestos de la presente invención incluyen, por ejemplo, cualquier método de síntesis de péptidos en fase sólida. En tales métodos, la síntesis de los nuevos compuestos puede llevarse a cabo mediante la incorporación secuencial de los residuos de aminoácido deseados uno cada vez en la cadena de péptido creciente' de acuerdo con los principios generales de los métodos en fase sólida. Tales métodos están descritos, por ejemplo, en errifield, J. Amer. Chem. Soc. 85 : 2149 - 2154 ( 1963 ) ; Barany y otros, The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology, Vol . 2 , Gross y Meienhofer, (Eds.) Academic Press 1 - 284 ( 1980 ) , que se incorporan aquí como referencia. La síntesis de péptidos puede realizarse de forma manual o con instrumentación automatizada. También puede utilizarse la síntesis asistida por microondas . En la síntesis química de péptidos, es habitual la protección de los grupos de cadena lateral reactivos de las diferentes porciones de aminoácido con grupos protectores adecuados que evitan que ocurra una reacción química en ese punto hasta que el grupo protector se elimina finalmente. También es habitual la protección del grupo amino alfa en un aminoácido o fragmento mientras esta entidad está reaccionando en el grupo carboxilo, seguido de una eliminación selectiva del grupo protector del amino alfa que permite que tenga lugar una posterior reacción en este punto. Aunque se han descrito grupos protectores específicos en relación al método de síntesis en fase sólida, deberá notarse que cada aminoácido puede estar protegido mediante un grupo protector de los utilizados de forma convencional para los respectivos aminoácidos en la síntesis en fase líquida. Los grupos amino alfa pueden estar protegidos mediante un grupo protector adecuado seleccionado de entre los grupos protectores aromáticos de tipo uretano, como aliloxicarbonilo, benciloxicarbonilo (Z) y benciloxicarbonilo sustituido, como p-clorobenciloxicarbonilo, p-nitro-benciloxicarbonilo, p-bromobenciloxicarbonilo, p-bifenil-isopropiloxicarbonilo , 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc) y p-metoxibenciloxicarbonilo (Moz) , grupos protectores alifáticos de tipo uretano, como t-butiloxicarbonilo (Boc) , diisopropilmetiloxicarbonilo, isopropiloxicarbonilo y ^aliloxicarbonilo . Aquí, Fmoc es el más preferible para la protección amino alfa. Los grupos guanidino pueden estar protegidos mediante un grupo protector adecuado seleccionado de ente nitro, p-toluensulfonilo (Tos), (Z , ) 2.2 , 5.7 , 8-pentametil-croman-6-sulfonilo (Pmc) y 4-metoxi-2.3 , 6 , -trimetilbencensulfonilo (Mtr) . Pmc y Mtr son más preferibles para la arginina (Arg) . Los grupos e-amino pueden estar protegidos mediante un grupo protector adecuado seleccionado de entre 2-cloro-benciloxicarbonilo (2-C1-Z) , 2-bromo-benciloxicarbonilo (2-Br-Z)- y Boc. Boc es el más preferible para (Lys) . Los grupos hidroxilo (OH) pueden estar protegidos mediante un grupo protector adecuado seleccionado de entre bencilo (Bzl), 2.6-diclorobencilo (2.6-diCl-Bzl) y ter-butilo (t-Bu) . tBu es el más preferible para (Tyr) , (Ser) y (Thr) . Los grupos ß- e ?-amida pueden estar protegidos mediante un grupo protector adecuado seleccionado de entre 4- etiltritilo (Mtt) , 2. , 6-trimetoxibencilo (Tmob) , 4.4-dimetoxiditilo/ bis- ( -metoxifenilo) -metilo (Dod) y tritilo (Trt) . Trt es el más preferible para (Asn) y (Gln) . El grupo indol puede estar protegido mediante un grupo protector adecuado seleccionado de entre formilo (For) , mesitil-2-sulfonilo (Mts) y Boc . Boc es el más preferible para (Trp) . Los grupos ß- y ?-carboxilo pueden estar protegidos mediante un grupo protector adecuado seleccionado de t-butilo (tBu) y éster de 2-fenilisopropilo (2Pip) . tBu es el más preferible para (Glu) y 2Pip es el más preferible para (Asp) . El grupo imidazol puede estar protegido mediante un grupo protector adecuado seleccionado de entre bencilo (Bzl) , Boc y tritilo (Trt) . Trt es el más preferible para (His) . Todos los solventes, isopropanol (iPrOH) , cloruro de metileno (CH2CI2) , DMF y MP se compraron de Fisher, JT Baker o Burdick & Jackson y se utilizaron sin destilación adicional. El TFA se compró de Halocarbon, Aldrich o Fluka y se utilizó sin más purificación. Se compraron DIC y DIPEA de Fluka o Aldrich y se utilizaron sin más purificación. Se compraron HOBT, dimetilsulfuro (DMS) y 1.2-etanoditiol (EDT) de Aldrich, Sigma Chemical Co . o Anaspec, y se utilizaron sin más purificación. Los aminoácidos protegidos generalmente estaban en configuración L y se obtuvieron comercialmente de Bachem, Advanced ChemTech, CEM o Neosystem. La pureza de estos reactivos se confirmó mediante cromatografía en capa fina, RMN y punto de fusión antes de utilizarlos. La resina de benzhidrilamina (BHA) es un copolímero de estireno divinilbenceno al 1% (poro de 100 -200 o 200 -400 ) obtenido de Bachem, Anaspec o Advanced Chemtech. El contenido total de nitrógeno de estas resinas fue generalmente entre 0 . 3 y 1 . 2 meq/ g. La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) se realizó en un aparato LDC que consiste en las bombas Constametric I y III, un programador y mezclador de solventes Gradient Master, y un detector de longitud de onda UV variable Spectromonitor III. La HPLC analítica se realizó en el modo de fase inversa utilizando columnas Pursuit Cis ( 4 . 5 x 50 mm) . Las separaciones de HPLC preparativa se separaron en columnas Pursuit ( 50 x 250 mm) . En una modalidad preferida, los péptidos se prepararon utilizando síntesis en fase sólida mediante el método generalmente descrito por Merrifield (J. Amer. Chem. Soc. 85 : 2149 ( 1963 ) ) , aunque pueden utilizarse otras síntesis químicas equivalentes conocidas en la materia, tal y como se ha mencionado previamente. La síntesis en fase sólida se inicia desde el extremo C-terminal del péptido mediante el acoplamiento del aminoácido alfa protegido a una resina adecuada. Tal material de partida puede prepararse mediante la unión de un aminoácido alfa amino protegido mediante un enlace éster a una resina de alcohol p-benciloxibencílico ( ang) , o mediante un enlace amida entre un enlazador Fmoc, como el ácido p- ( (R, S) -a- ( 1 - (9H-fluoren- 9-ilo) -metoxi- formamido ) -2.4-dimetiloxibencilo) -fenoxiacético (enlazador Rink) a una resina de bencidrüamina (BHA) . La preparación de la resina de hidroximetilo es bien conocida' en la materia. Los soportes de resina de Fmoc-enlazador-BHA están disponibles comercialmente y se utilizan en general cuando el péptido deseado que está siendo sintetizado posee una amida no sustituida en el extremo C-terminal. Normalmente, los aminoácidos o miméticos están acoplados en la resina de Fmoc-enlazador-BHA utilizando la forma protegida con Fmoc de un aminoácido o mimético, con de 1 a 5 equivalentes de aminoácido y un reactivo de acoplamiento adecuado. Tras los acoplamientos, la resina puede lavarse y secarse al vacío. La carga del aminoácido en la resina puede determinarse mediante un análisis del aminoácido en una alícuota de resina de Fmoc-aminoácido o mediante la determinación de grupos Fmoc mediante análisis UV. Cualquier grupo amino sin reaccionar puede bloquearse mediante el tratamiento de la resina con anhídrido acético y diisopropiletilamina en cloruro de metileno o DMF. Las resinas se hacen pasar por varios ciclos repetitivos para añadir aminoácidos de forma secuencial. Los grupos protectores Fmoc del amino alfa se eliminan bajo condiciones básicas.. Con este propósito puede utilizarse piperidina, piperazina o morfolina (20-40% v/v) en DMF. Preferiblemente se utiliza piperidina al 40% en DMF .

Tras la eliminación del grupo protector amino alfa, los posteriores aminoácidos protegidos se acoplan paso a paso en el orden deseado para obtener un intermediario, resina de péptido protegido. Los reactivos activadores utilizados para acoplar los aminoácidos en la síntesis de péptidos en fase sólida son bien conocidos en la materia. Por ejemplo, los reactivos apropiados para tal síntesis son BOP, hexafluoro-fosfato de bromo-tris-pirrolidino-fosfonio (PyBroP) , HBTU y DIC. Aquí son preferibles HBTU y DIC . Pueden utilizarse otros agentes activadores descritos por Barany y Merrifield (en: The Peptides, Vol . 2 , Meienhofer (ed.), Academic Press, 1979 , pp 1 -284 ) . Se pueden añadir diferentes reactivos como HOBT, N-hidroxisuccinimida (HOSu) y 3 . 4-dihidro-3-hidroxi- 4-oxo-1 . 2 , 3-benzotriazina (HOOBT) a las mezclas de acoplamiento para poder optimizar los ciclos sintéticos. Aquí se prefiere HOBT. El protocolo para un ciclo de síntesis típico es el siguiente : Protocolo Paso Reactivo Tiempo 1 1 DMF 2 x 30 seg 2 piperidina 20% / DMF 1 min 3 piperidina 20% / DMF 15 min 4 DMF 2 x 30 seg 5 iPrOH 2 x 30 seg 6 DMF 3 x 30 seg 7 Acoplamiento 60 min - 18 horas 8 DMF 2 x 30 seg 9 iPrOH 1 x 30 seg 10 DMF 1 x 30 seg 11 CH2C12 2 x 30 seg Los solventes para todos los lavados y acoplamientos se midieron en volúmenes de 10 - 20 mi/ g de resina. Las reacciones de acoplamiento a lo largo de la síntesis se monitorizaron mediante la prueba de ninhidrina de Kaiser para determinar la extensión de la finalización [Kaiser y otros, Anal. Biochem. 34:595-598 (1970)] . Cualquier reacción de acoplamiento incompleta se volvió a acoplar con aminoácido activado recién preparado o se bloqueó mediante el tratamiento de la resina con péptido con anhídrido acético, tal y como se ha descrito antes. Las resinas con péptido totalmente ensambladas se secaron al vacío durante varias horas . La síntesis dé péptidos puede realizarse utilizando un sintetizador Applied Biosystem 433A (Foster City, CA) . Se utilizaron los ciclos de FastMoc 0.25 mmoles tanto con los recipientes de reacción de 41 mi de muestreo de resina o de muestreo diferente a la resina. La resina de Fmoc-aminoácido se disolvió en 2.1 g de NMP, 2 g de ?0??7 HBTU 0.45 M en DMF y DIEA 2 M, y después se transfirió al recipiente de reacción. El ciclo de acoplamiento básico FastMoc se representó mediante el módulo "BADEIFD, " en el que cada letra representa un módulo. Por ejemplo: B representa el módulo para la desprotección de Fmoc utilizando piperidina al 20%/ NMP y los lavados y lecturas relacionados durante 30 minutos (tanto con monitorización de UV o conductividad); A representa el módulo para la activación de aminoácidos en cartuchos con HBTU/ HOBt 0.45 M y DIEA 2.0 M, y el mezclado con burbujeo de N2; D representa el módulo para el lavado con NMP de la resina en el recipiente de reacción; E representa el módulo para la transferencia del aminoácido activado al recipiente de reacción para el acoplamiento; I representa el módulo para un periodo de espera de 10 minutos con agitación intermitente del recipiente de reacción; y F representa el módulo para la limpieza del cartucho, acoplamiento de aproximadamente 10 minutos y drenaje del recipiente de reacción. Los acoplamientos se prolongan normalmente mediante la adición del módulo "I" una o varias veces. Por ejemplo, se realizaron acoplamientos dobles mediante el procedimiento "BADEIIADEIFD" . Están disponibles otros módulos como el c para lavados de cloruro de metileno y "C" para el bloqueo de los extremos con anhídrido acético. Los módulos individuales también son modificables mediante, por ejemplo, el cambio del tiempo de varias funciones, como el tiempo de transferencia, para alterar la cantidad de solvente o reactivos transferidos. Generalmente, los ciclos anteriores se utilizaron para el acoplamiento de un aminoácido. Para la síntesis de tetrapéptidos , no obstante, los ciclos se repitieron y se enlazaron. Por ejemplo, se utilizó BADEIIADEIFD para acoplar el primer aminoácido seguido de BADEIIADEIFD para acoplar el segundo aminoácido, seguido de BADEIIADEIFD para acoplar el tercer aminoácido, seguido de BADEIIADEIFD para acoplar el cuarto aminoácido, seguido de BIDDcc para la desprotección final y los lavados . La síntesis de péptidos puede realizarse utilizando un Sintetizador de Péptidos de Microondas, Liberty (CEM Corporation, Matthews, NC) . El sintetizador se programó ,para un doble acoplamiento y bloqueo mediante la modificación del ciclo de 0.25 mmoles preexistente. Se utilizó el editor de microondas para programar los métodos de potencia de microondas a utilizar durante la desprotección de Fmoc, el acoplamiento de aminoácido y el bloqueo con anhídrido acético. Este tipo de control de microondas permite la creación de métodos que controlen la reacción a una temperatura determinada durante un determinado periodo de tiempo. El Liberty regula de forma automática la potencia liberada a la reacción para mantener la temperatura en el punto fijado. Los ciclos por defecto para la adición de aminoácidos y la desprotección final se seleccionaron en el editor de ciclos y se cargaron de forma automática mientras se creaba un péptido.

La síntesis se llevó a cabo en una escala de 0 . 25 mmoles utilizando una resina Fmoc-enlazador-BHA ( 450 mg, 0 . 25 mmoles) . La resina se añadió al recipiente de reacción de 30 mi con 10 mi de DMF . La desprotección de Fmoc se realizó con piperidina al 20% en solución de DMF. Para cada acoplamiento de aminoácido, el aminoácido Fmoc protegido se disolvió en DMF para realizar una solución 0 . 2 M y se añadió al recipiente de reacción. Todas las reacciones de acoplamiento se realizaron con HOBT/ HBTU 0 . 5 M y DIEA/ NMP 2 M. Cualquier reacción de acoplamiento incompleta se volvió a acoplar con aminoácido recién preparado o se bloqueó mediante el tratamiento de la resina de péptido con anhídrido acético al 25% en DMF. Cada desprotección, acoplamiento y reacción de bloqueo se realizó utilizando microondas a 70°C durante 300 segundos a 50 vatios de potencia y con burbujeo de nitrógeno. Para cada acoplamiento de aminoácido tras el ciclo de acoplamiento de 0 . 25 mmoles se utilizó: Protocolo 2 Transferencia de la resina al recipiente Adición de la desprotección de Piperidina (10 mi) Método de microondas para la desprotección (50 vatios; 70°C; 300 segundos) Lavado de la resina con DMF (10 mi) Adición de aminoácido (5 mi) Adición de activador (HOBT/ HBTU) ( 2 mi) Adición de base activadora (DIEA) (1 mi) Método de microondas para el acoplamiento (50 vatios; 70°C; 300 segundos) Lavado de la resina con D F (10 mi) Adición de aminoácido (5 mi) Adición de activador (?0??7 HBTU) (2 mi) Adición de base activadora (DIEA) (1 mi) Método de microondas para el acoplamiento (50 vatios; 70°C; 300 segundos) Lavado de la resina con DMF (10 mi) Adición de bloqueo (Anhídrido acético 10 mi) Método de microondas (bloqueo) (50 vatios; 70°C; 300 segundos) Lavado de la resina con DMF (10 mi) Para la síntesis de los compuestos presentados aquí, se muestra un procedimiento sintético preferido en el Esquema de reacción 1.

Esquema de Reacción 1 moc-Rink MBHA 1 1) Pipe rid ina/D F 2) Fmoc-AA(P) VDIC,BOPo HBTU Resina-Fmoc-AA(P)31-R¡nk-MBHA Repetir pasos 1 & 2 anterior Resina Resina Ac-AA(P)'-AA(P)2 VP)3-AA(P)4-AA(P)S-M^ AA(P)'2-M(P)137^A(P)14 HP)1S-AA^ (P)3-M(P)4-M5-M(P)26-^ Ac- '-AA-M3-M4- 5-Me- 7-M8-M9-Mio-Mii-M' -Mi3-AA^- i5^ -?'9- 2°-???-? -?2- 24-??2«-?^ El tratamiento de la resina Fmoc -Rink-MBHA, 1, con piperidina/ DMF seguido del acoplamiento con Fmoc-AA(P) 31 con un reactivo como el DIC, BOP o HBTU, en el que AA31 representa el residuo de aminoácido 31s y P representa un grupo protector apropiado, proporciona la resina- Fmoc -AA ( P ) 31 - Rink , 2 La repetición de los pasos 1 y 2 durante 30 ciclos mediante la adición del aminoácido apropiado protegido en cada ciclo, proporciona la resina de péptido 3. Los grupos protectores de la cadena lateral en el AA25 y AA21 se eliminan mediante el tratamiento con TFA al 2% en CH2C12 y PdCl2/ nBu3SnH, respectivamente. La amina y el carboxilo de la cadena lateral del AA21 y AA25 se enlazan mediante el tratamiento con BOP y NMM en DMF para proporcionar 4. Para cada compuesto, se eliminan los grupos de bloqueo y se escinde el péptido de la resina en el mismo paso. Por ejemplo, las resinas de péptido pueden tratarse con 100 µL de etanditiol, 100 µ? de dimetilsulfuro, 300 µL de anisol, y 9., 5 mi de TFA, por gramo de resina, a TA durante 180 minutos O alternativamente, las resinas de péptido pueden tratarse con 1.0 mi de triisopropil silano y 9.5 mi de TFA, por gramo de resina, a TA durante 180 minutos La resina se separa por filtración y los filtrados se precipitan éter de etilo frío. Los precipitados se centrifugan y la fase de éter se decanta. El residuo se lava con dos o tres volúmenes de Et20 y se re-centrifuga. El producto bruto 5 se seca al vacío . Las purificaciones de los péptidos crudos se realizan en un sistema Shimadzu LC-8A mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) en una columna Pursuit C-18 de fase inversa (50 x 250 mm. 300 Á, 10 µ?) . Los péptidos se disuelven en una cantidad mínima de agua y acetonitrilo y se inyectan en una columna. La elución del gradiente se inicia generalmente con regulador de pH B al 2%, B al 2%-70% durante 70 minutos (regulador de pH A: TFA al 0.1%/ H20, regulador de pH B: TFA al 0.1%/ CH3CN) a una tasa de flujo de 50 mi/ minutos La detección UV se realiza a 220/280 nm. Las fracciones que contienen los productos se separan y se mide su pureza en un sistema analítico Shimadzu LC-10AT utilizando una columna de fase inversa Pursuit C18 (4.6 x 50mm) a una tasa de flujo de 2.5 mi/ minutos, con gradiente (2-70 %) durante 10 minutos [regulador de pH A: TFA al 0.1%/ H20, regulador de pH B: TFA al 0.1%/ CH3CN) ] . Las fracciones de una pureza suficiente se unen y se liofilizan. La pureza de los productos finales se revisó mediante HPLC analítica en una columna de fase inversa como se ha mencionado antes. Todos los productos finales también se someten a una espectrometría de masas por bombardeo rápido de átomos (FAB-MS) o espectrometría de masas por electroaspersión (ES- S) . En los Ejemplos, todos los productos proporcionaron los iones M+H parentales esperados dentro de unos límites aceptables. Los análogos de VIP descritos en la invención son agonistas del receptor VPAC2 como se demuestra en el Ejemplo 25. De acuerdo con los experimentos sobre la estabilidad en elastasa del Ejemplo 25, tales compuestos poseen una estabilidad mejorada en elastasa de neutrofilo humano. Por lo tanto, la administración de estos agonistas del receptor VPAC2 podría ser de utilidad para el tratamiento de trastornos de las vías respiratorias como la EPOC. Los compuestos de la presente invención pueden proporcionarse en forma de sales farmacéuticamente aceptables. Ejemplos de sales preferidas son aquellas formadas con ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, ácido acético, láctico, maleico, cítrico, málico, ascórbico, succínico, benzoico, salicílico, metansulfónico, toluensulfónico, trifluoroacético o pamoico, así como ácidos poliméricos como el ácido tánico o la carboximetil celulosa, y sales con ácidos inorgánicos, como los hidrácidos (por ejemplo, ácido clorhídrico) , ácido sulfúrico o ácido fosfórico y similares. Se puede utilizar cualquier procedimiento conocido por un experto en la materia para obtener una sal farmacéuticamente aceptable. En la práctica del método de la presente invención, se administra una cantidad efectiva de cualquiera de los péptidos de esta invención o una combinación de cualquiera de los péptidos de esta invención o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, mediante cualquiera de los métodos usuales y aceptables conocidos en la materia, tanto solos como en combinación. Los compuestos o composiciones pueden así administrarse por vía oral (por ejemplo, por la cavidad bucal) , por vía sublingual, por vía parenteral (por ejemplo, por vía intramuscular, por vía intravenosa o por vía subcutánea) , por vía rectal (por e emplo, mediante supositorios o lavados) , por vía transdérmica (por ejemplo, electroporación de la piel) o mediante inhalación (por ejemplo, mediante aerosol) , y en forma de dosificaciones sólidas, líquidas o gaseosas, lo que incluye comprimidos y suspensiones. La administración puede llevarse a cabo en forma de dosis unitaria con una terapia continua o en una terapia de dosis única a voluntad. La composición terapéutica también puede estar en forma de una emulsión oleosa o dispersión junto con una sal lipofílica como el ácido pamoico, o en forma de una composición de liberación sostenida biodegradable para la administración subcutánea o intramuscular . Así, el método de la presente invención se utiliza cuando se requiere de forma específica o inminente un alivio de los síntomas. Alternativamente, el método de la presente invención se utiliza de forma efectiva como un tratamiento continuo o de prevención. Los portadores farmacéuticos útiles para la preparación de las presentes composiciones, pueden ser sólidos, líquidos o gaseosos; así, las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos, pildoras, cápsulas, supositorios, polvos, formulaciones entéricas recubiertas o protegidas de otra manera (por ejemplo, unidas a resinas de intercambio iónico o empaquetadas en vesículas de lípido-proteína) , formulaciones de liberación sostenida, soluciones, suspensiones, elíxires, aerosoles y similares. El portador puede seleccionarse de entre varios aceites incluyendo los derivados del petróleo, animales, vegetales o sintéticos, por ejemplo, el aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite mineral, aceite de sésamo y similares. Los portadores líquidos preferidos son el agua, solución salina, dextrosa acuosa y glicoles, en particular (cuando son isotónicos con la sangre) para soluciones inyectables. Por ejemplo, las formulaciones para la administración intravenosa comprenden soluciones acuosas estériles del (de los) ingrediente (s) activo (s) que se preparan al disolver el (los) ingrediente ( s ) sólido (s) activo (s) en agua para producir una solución acuosa, y consiguiendo una solución estéril. Los excipientes farmacéuticos adecuados incluyen el almidón, celulosa, talco, glucosa, lactosa, gelatina, malta, arroz, harina, tiza, sílice, estearato magnésico, estearato sódico, monoestearato de glicerol, cloruro sódico, leche descremada en polvo, glicerol, propilenglicol , agua, etanol y similares. Las composiciones pueden contener aditivos farmacéuticos convencionales como conservadores, agentes estabilizantes, agentes humectantes o emulsionantes, sales para ajustar la presión osmótica, tampones y similares. Los portadores farmacéuticos adecuados y su formulación están descritos en Remington's Pharmaceutical Sciences de E. W. Martin. Tales composiciones contendrán, en cualquier caso, una cantidad efectiva del compuesto activo junto con un portador adecuado para preparar la forma de dosificación adecuada para una administración adecuada al receptor. La dosis de un compuesto de la presente invención depende de una serie de factores, como por ejemplo, la forma de administración, la edad y el peso corporal del sujeto, el estado del sujeto que va a ser tratado, y en último término la decidirá el médico o veterinario presente. Esta cantidad de compuesto activo determinada por el médico o veterinario presente se refiere aquí, y en las reivindicaciones, como una "cantidad efectiva". Por ejemplo, la dosis para la administración por inhalación está normalmente en el rango de entre alrededor de 0 . 5 y alrededor de 100 ug/ kg de peso corporal. Preferiblemente, el compuesto de la presente invención se administra a una tasa de dosificación de entre alrededor de 1 ug/ kg y alrededor de 50 ug/ kg/ día. Los regímenes de liberación representativos incluyen la administración oral, parenteral (incluyendo la subcutánea, intramuscular y intravenosa), rectal, bucal (incluyendo la sublingual), transdérmica, pulmonar e intranasal . La ruta preferida de administración es la administración pulmonar mediante la inhalación oral. Los métodos para la administración pulmonar pueden incluir la aerosolización de una solución acuosa de los péptidos cíclicos de la presente invención o la inspiración de formulaciones de polvo seco micronizado. Las composiciones aerosolizadas pueden incluir el compuesto empaquetado en micelas o liposomas reversos . Es bien conocida la preparación de polvo micronizado de tamaño de partícula adecuadamente controlado para proporcionar la liberación alveolar de forma efectiva. Los inhaladores para la liberación de las dosis especificadas de tales formulaciones directamente en los pulmones (Inhaladores de Dosis Medidas o "IDM") son bien conocidos en la materia. Así, la presente invención también abarca las composiciones farmacéuticas que contienen tales agonistas y la utilización de tales agonistas para el tratamiento de enfermedades pulmonares, lo que incluye la EPOC. En una modalidad, la invención proporciona una composición farmacéutica para la administración por inhalación que comprende un compuesto de fórmula I y al menos un portador farmacéuticamente aceptable o excipiente, en solución o en forma de polvo seco micronizado, en la que el compuesto está presente en una concentración farmacológicamente efectiva, para la liberación pulmonar de dicha composición. En otra modalidad, la invención proporciona una composición farmacéutica para la administración por inhalación que comprende un compuesto de fórmula I y al menos un portador farmacéuticamente aceptable o excipiente, en solución o en forma de polvo seco micronizado, en la que la concentración del compuesto es suficiente para liberar entre alrededor de 1 ug/kg y alrededor de 50 ug/kg del compuesto en una dosis única inhalada . En una modalidad, la invención proporciona un método para tratar los trastornos obstructivos pulmonares, por ejemplo la EPOC, que comprende la administración mediante inhalación de una cantidad efectiva, por ejemplo entre alrededor de 1 ug/kg/dia y alrededor de 50 ug/kg/dia, de una composición farmacéutica para su administración por inhalación que comprende un compuesto de fórmula I y al menos un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable en forma de solución o polvo seco micronizado, en la que el compuesto está presente en una concentración farmacológicamente efectiva para la liberación pulmonar de dicha composición, por ejemplo a una persona que sufre este trastorno. La invención se describirá a continuación . en detalle en los siguientes Ejemplos, que pretenden tan sólo ilustrar y no limitar el alcance de la invención.

EJEMPLOS Ejemplo 1: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Thr- Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys- Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No. : 3 ) - H2] , es decir, el compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2# R2 es Ser, R5 es Thr, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys El péptido anterior se sintetizó utilizando la química de Fmoc en un Applied Biosystem 433A o un sintetizador de péptidos por microondas. El sintetizador se programó para un doble acoplamiento utilizando los módulos descritos en el Protocolo 1 o 2 con anterioridad. La síntesis se llevó a cabo en una escala de 0.25 mmoles utilizando la resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles). Al final de la síntesis, la resina se transfirió a un recipiente de reacción en un agitador. La resina de péptido en DMF se filtró y se lavó con CH2CI2. La resina se trató cinco veces con TFA al 2% en CH2CI2 durante 3 minutos cada vez. La resina se trató inmediatamente dos veces con DIPEA al 5%/ CH2C12 y se lavó con CH2C12 y DMF. La resina de péptido se volvió a suspender en DMF en un recipiente de agitación ajustado de forma segura con un tapón de goma. A este se le añadieron 60 mg de PdCl2 (Ph3P) 2, 150 µ? de morfolina y 300 µ? de AcOH. El recipiente se purgó con Ar. Entonces se añadió nBu3SnH mediante una jeringa. La solución negra se agitó durante 30-45 minutos, se lavó con DMF y se volvió a repetir. Tras el-segundo tratamiento con Pd, la resina se lavó con DMF, 2 x iPrOH, DMF, DIPEA al 5%/ DMF y DMF. En DMF, la resina de péptido se enlazó mediante el tratamiento con BOP y NMM durante toda la noche. La resina se lavó con DMF y CH2C12 y después se secó al vacío. El péptido se escindió de la resina utilizando 13.5 mi de TFA al 97%/ H20 al 3% y 1.5 mi de triisopropilsilano durante 180 minutos a TA. La solución de desprotección se añadió a 100 mi de Et20 frío, y se lavó con 1 mi de TFA y 30 mi de Et20 frío para precipitar el péptido. El péptido se centrifugó en dos tubos de 50 mi de polipropileno. Los precipitados de los tubos individuales se combinaron en un solo tubo, se lavaron 3 veces con Et20 frío y se secaron en un desecador bajo vacío centralizado. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa en una columna Pursuit C18 (250 x 50 mm, 10 µ?? de tamaño de partícula) y se eluyó con un gradiente lineal de B 2-70% (regulador de pH A: TFA al 0.1%/ H20; regulador de pH B: TFA al 0.1%/ CH3CN) en 90 minutos, con una tasa de flujo de 60 mi/ minutos, y la detección a 220/280 nm. Las fracciones se recogieron y se comprobaron mediante HPLC analítica. Las fracciones que contenían el producto puro se combinaron y liofilizaron para proporcionar 106 mg (9.7%) de un polvo amorfo blanco. (ES)+ -LCMS m/e calculado ("cale") para C159H256 46O 7 3565.05, encontrado 3563.7. Ejemplo 2: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No.:4)- H2], es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 28 mg (2.5%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C158H25 46O47 3551.02, encontrado 3548.7. Ejemplo 3: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Asp-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr- H2 [Ac-(SEC ID No.:5)-NH2], es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Asp, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA ( 450 mg, 0 . 25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 9 . 2 mg (1%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para Ci59H254N46048 3579 . 03 , encontrado 3 577 . 8 . Ejemplo 4: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Gln-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr- H2 [Ac-(SEC ID No.:6)-NH2], es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2f R2 es Ser, R5 es Gln, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA ( 450 mg, 0 . 25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 9 . 8 mg (1%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para Ci6oH257N47047 3592 . 07 , encontrado 3 589 . 5 . Ejemplo 5: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Pro- Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No.:7)-NH2], es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Pro, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys.

La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 inmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 15.2 mg (1.4%) de un polvo blanco amorfo. (ES) + -LCMS m/e calculado para C160H256 46O46 3561.06, encontrado 3560.0. Ejemplo 6: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-MeVal- Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys- Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr- H2 [Ac-(SEC ID No. :8) - H2] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac# Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Meval, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys.

La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 40 mg (3.6%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ - LCMS m/e calculado para C161H260 46O46 3577.10, encontrado 3576.8.

Ejemplo 7: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Glu-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH [Ac-(SEC ID No.:9)-NH2], es decir, compuesto de fórmula I en el que X es ACf Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Gln, R18 es Glu, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 126 mg (11.4%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C160H256 46O49 3609.06, encontrado 3609.2. Ejemplo 8: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Leu-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No . : 10 ) -NH2 ] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac , Y es NH2 , R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Leu y R28 es Lys . La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 77 mg (7.3%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C 1 5 8 H 2 5 3 4 5 O 4 7 3536.00, encontrado 3534.95.

Ejemplo 9: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Lys-Ala-Lys-Lys-Tyr - Leu -Asn- Asp - Leu - Ly s - Ly s - Gly- Gly- Thr -NH2 [Ac-(SEC ID No . : 11 ) -NH2] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Gln, R18 es Lys, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 minóles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 79 mg (7.5%) de un polvo blanco amorfo. (ES) + -LCMS m/e calculado para Ci6iH26i 47047 3608.11, encontrado 3607.6. Ejemplo 10: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Ala-Nle-Glu-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No . : 12 ) -NH2 ] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Ala, R18 es Glu, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 65 mg (6%) de un polvo blanco amorfo . (ES) +-LCMS m/e calculado para C158H253N45O48 3552.00, encontrado 3551.2.

Ejemplo 11: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Ly s -Tyr - Leu -Asn- Asp - Leu - Leu -Asn- Gly-Gly- Thr - H2 [Ac-(SEC ID No. :13)-NH2] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es AC, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Leu y R28 es Asn. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida impurificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 109 mg (10.6%) de un polvo blanco amorfo. (ES) + -LCMS m/e calculado para C156H247 45O48 3521.93, encontrado 3520.5. Ejemplo 12: Preparación de Ac-His-Ala-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn- Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No. : 14) -NH2] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac , Y es NH2, R2 es Ala, R5 es Ser, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 20 mg (1.8%) de un polvo blanco amorfo. (ES) + -LCMS m/e calculado para C158H254 46O46 3535.02 , encontrado 3533.4.

Ejemplo 13: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No. : 15) -NH2] es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Arg, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 60 mg (5.3%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C159H258N48O46 3579.08, encontrado 3577.8. Ejemplo 14: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Al -Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Ala-Al -Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Leu-Asn-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No . : 16 ) -NH2 ] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac , Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Arg, R18 es Ala, R27 es Leu y R28 es Asn. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 40 mg (3.7%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ - LCMS m/e calculado para Ci5 H25i 47047 3549.99, encontrado 3549.2.

Ejemplo 15: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Glu-A Lys- yr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr- H2 [Ac-(SEC ID No. :17) -NH2] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es AC, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Arg, R18 es Glu, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 36 mg (3.6%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para Ci6iH26oN48048 3637.11, encontrado 3636.4. Ejemplo 16: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Lys-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No . : 18 ) -NH2 ] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Arg, R18 es Lys, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 51 mg (4.4%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para Ci62H265 4904 6 3636.17, encontrado 3634.8.

Ejemplo 17: Preparación de Ac-His-Ala-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Glu-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No. :19)- H2] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ala, R5 es Ser, R16 es Arg, R18 es Glu, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 27 mg (2.7%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para Ci6iH26oN48047 3621.11, encontrado 3620.4. Ejemplo 18: Preparación de Ac-His-Ala-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Lys-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No . : 20 ) -NH2 ] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ala, R5 es Ser, R16 es Arg, R18 es Lys, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 53.5 mg (4.6%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C162H265N49O45 3620.17, encontrado 3618.8.

Ejemplo 19: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Glu-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Leu-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No. :21) -NH2] / es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es Ser, R16 es Arg, R18 es Glu, R27 es Leu y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 33 mg (3.3%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para Ci6iH259 47048 3622.10, encontrado 3620.8. Ejemplo 20: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala- eVal-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Leu-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No . : 22 ) -NH2 ] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es MeVal, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Leu y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 55 mg (5.2%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C 1 6 1 H 2 5 9N4 5 O 4 6 3562.09, encontrado 3561.09.

Ejemplo 21: Preparación de Ac-His-Ala-Asp-Ala- eVal-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No. :23) -NH2] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ala, R5 es MeVal, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 49 mg (4.5%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C161H260N46O45 3561.10, encontrado 3560.0. Ejemplo 22: Preparación de Ac-His-Ser-Asp-Ala-MeVal-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No . : 2 ) -NH2 ] , es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ser, R5 es MeVal, R16 es Arg, R18 es Ala, R27 es Lys y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 13.8 mg (1.2%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C162H26 48O45 3605.16, encontrado 3604.0.

Ejemplo 23: Preparación de Ac-His-Ala-Asp-Ala- eVal-P e-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Leu-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2 [Ac-(SEC ID No. :25)-NH2] r es decir, compuesto de fórmula I en el que X es Ac, Y es NH2, R2 es Ala, R5 es MeVal, R16 es Gln, R18 es Ala, R27 es Leu y R28 es Lys. La resina Fmoc-Rink-Enlazador-BHA (450 mg, 0.25 mmoles) se sometió a una síntesis en fase sólida y purificación siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1 para proporcionar 30.2 mg (2.8%) de un polvo blanco amorfo. (ES)+ -LCMS m/e calculado para C161H259 47O45 3546.09, encontrado 3544.8. Ejemplo 24: Ensayo de agonistas mediante cAMP en Sup-Tl La línea celular T-linfoide humana Sup-Tl, que expresa el receptor VPAC2, se obtuvo de la Colección de Cultivo de Tipo Americano (ATCC (por sus siglas en inglés) , CRL-1942) y se mantuvo en medio de crecimiento a unas densidades de entre 0.2 y 2 x 106 células/ mi en una incubadora de C02 a 37°C. El medio de crecimiento fue RPMI 1640 (Invitrogen) suplementado con regulador de pH HEPES 25 mM y suero fetal bovino al 10% (Gemini Bioproducts) . Para evaluar la actividad del compuesto agonista de VPAC2 , las células en crecimiento en fase logarítmica se lavaron una vez con medio de crecimiento a TA y se colocaron en placas en placas de 96 cavidades a una densidad de 4 x 104 células por cavidad en 150 µ? de medio de crecimiento. Se añadieron entonces 50 µ? de los compuestos a probar, preparados a concentraciones apropiadas en medio de crecimiento, a las cavidades designados. Tras 5 minutos a TA, las células se lisaron al añadir 25 µ? de reactivo de lisis 1A (sistema cAMP Biotrak EIA, Amersham Biosciences, RPN225) a cada cavidad. Las placas de 96 cavidades se mantuvieron a TA durante 10 minutos en agitación y después se almacenaron a 4°C hasta el análisis de cAMP (en 2 horas) . Los niveles de AMP cíclico se determinaron en 100 µ? de cada lisado utilizando el equipo de inmunoensayo enzimático (EIA) de cAMP de Biotrak, de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Amersham Biosciences, RPN225) . La actividad de cada compuesto agonista de VPAC2 (valor CE5o) se estimó ajustando los datos de dosis-respuesta de 7 concentraciones a una ecuación sigmoidal de dosis-respuesta proporcionada por el programa GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc.) . Tabla 1 Compuesto del Ejemplo CE50 cAMP en Sup-Tl (nM) 1 38 2 69.7 3 98 4 85 5 1206 6 2.35 7 632 8 11.4 9 1200 10 447 11 16.8 12 7.4 13 17.6 14 94.1 15 116.7 16 1030 17 23.3 18 276 19 68.4 20 9.45 21 4.75 22 10.54 23 4.07 Ejemplo 25: Estabilidad Peptídica frente a Elastasa de Neutrófilos Las estabilidades proteolíticas de los análogos de péptido se establecieron mediante cromatografía líquida de alta presión en fase inversa (RP HPLC) y espectroscopia de masas con electroaspersion de iones (ESI MS) . Los análogos de péptidos se incubaron con elastasa de neutrófilo humano y se determinó la cantidad de análogo sin digerir mediante ESI MS a los puntos de tiempo apropiados . Se pueden incluir múltiples análogos de péptido en un experimento siempre que se puedan diferenciar mediante el tiempo de retención y/o mediante el peso molecular en la HPLC. En todos los experimentos se utilizó como control y como estándar de referencia Ac-His Ac-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr-NH2. La utilización simultáneo de múltiples análogos de péptido junto con un estándar de referencia permitió la compensación de variaciones en la fidelidad proteol tica de la enzima en los diferentes experimentos. Las corrientes de iones integradas obtenidas del péptido individual no digerido se utilizaron para la cuantificación. Para calcular el tiempo medio, se asumió un comportamiento cinético de primer orden, y todos los cálculos se normalizaron respecto al tiempo medio del estándar de referencia. Las soluciones concentradas de péptido se prepararon en agua a una concentración de 2.5 mg/ mi . Si no se estaban utilizando, todas las soluciones concentradas se mantuvieron a -20°C. Para determinar el contenido relativo de péptido en las soluciones concentradas preparadas, se realizó una HPLC de fase inversa con una alícuota y se comparó la absorbancia UV observada con la de una alícuota comparable del estándar de referencia. Las concentraciones de los análogos de péptido se ajustaron de acuerdo con ello. Para realizar la digestión proteolitica, se disolvieron los péptidos en regulador de pH fosfato salino (PBS) a una concentración de 0.1 mg/ mi. Se mezclaron seis análogos de péptido diferentes en un volumen de reacción de 50 µ?.. El estándar de referencia se añadió a todos los experimentos como referencia y estándar interno. Se añadió la elastasa (Neutrófilo Humano, Calbiochem, 2 Cat. 324681) a partir de una solución de reserva de elastasa a una concentración de 1 a 2 µg/ mi. Se escogieron diferentes cantidades de enzima para compensar las diferencias en las estabilidades proteolí ticas de los análogos de péptido. Previamente, se preparó una solución de reserva de elastasa en agua a una concentración de 1 mg/ mi. Se mantuvieron pequeñas alícuotas de la solución de reserva de enzima a -20°C para mantener la actividad del enzima al limitar el número de ciclos de congelación y descongelación. La digestión se realizó a temperatura ambiente en un tubo de procesado de muestras dentro del procesador de muestras automático del sistema HPLC (Agilent 1100 Series) . Para un ensayo a lo largo del tiempo, se inyectaron alícuotas de 5 ]ih a intervalos de 70 minutos en la columna de HPLC de fase inversa (Phenomenex, Luna C18, 3µ, 100Á, 150 x 2.00 mm) . Para el punto inicial se inyectó una alícuota justo antes de la adición de la enzima proteolí tica . Se pueden registrar hasta un total de ocho puntos temporales de un experimento, incluyendo el punto inicial. Los péptidos se separaron en la columna de fase inversa con un gradiente de 50 minutos de fase orgánica al 5% hasta el 30%. La fase acuosa fue de 0.05% (v/v) de ácido tr i f luoroacét ico en agua y la fase orgánica fue de 0.045% (v/v) de ácido tr i f luoroacético en acetonitrilo . La absorbencia se registró a 214 y 280 nm, respectivamente. Todo el efluente de la columna se introdujo en la fuente turbo V del espectrómetro de masas de ionización por electroaspersión (ABI 4000 QTrap LC/MS/MS System) . El espectro de masas se obtuvo en el modo Q3MS en un rango de masas que incluye todos los iones cargados de forma triple de los análogos de péptido no degradados. Se tuvo la precaución de asegurar que los análogos de péptido pudieran diferenciarse claramente mediante el tiempo de retención cromatográf ica o mediante la diferencia en el peso molecular. Las cantidades relativas de los respectivos análogos de péptido no digerido se calcularon a partir de la corriente de iones integrada total. Se escogió una ventana de 2.5 Da y el programa del fabricante se utilizó para integrar las corrientes de iones individuales. El tiempo medio total de un análogo de péptido individual se calculó asumiendo un comportamiento cinético de primer orden y se normalizó respecto del tiempo medio del estándar de referencia. Tabla 2 Compuesto del Ejemplo Estabilidad Relativa frente a elastasa 1 3.9 2 5.2 3 4.5 4 3.9 5 4.9 6 6 7 16.4 8 3.5 9 12.0 10 7.4 11 2.4 12 5.2 13 1.7 14 4.5 15 4.8 16 4.4 17 4.6 18 5.1 19 3.3 20 3.4 21 5.7 22 1.8 23 3.6 Ejemplo 26: Efecto de los Compuestos en la Inflamación Pulmonar inducida por LPS en Ratones C57BL/6 Macho LPS por Aerosol : Los ratones C57bl/6 se pretrataron con vehículo o fármaco antes de la exposición a un aerosol de lipopolisacárido (LPS, 500 µg/ mi en solución salina estéril) durante 15-30 minutos. El aerosol se genera mediante un nebulizador Pari Ultra neb jet, cuya salida se conecta a una pequeña cámara de plástico trasparente [A x An x L, 10.7 x 25.7 x 11 cm (4 x 10 x 4.5 pulgadas)] que contenía los animales. El lavado broncoalveolar (BAL) se realizó 24 horas después para determinar la intensidad de la inflamación celular. El procedimiento de BAL se realizó como se describe más adelante . Administración Intranasal de LPS: Los ratones se pre-trataron con vehículo o fármaco antes de la administración intranasal de lipopolisacárido (0.05-0.3 mg/ kg en solución salina estéril; volumen total 50 µ?, 25 µ?/ narina) . La administración intranasal se realizó presentando pequeñas gotas de la solución se realizó presentando pequeñas gotas de la solución de dosificación en la narina utilizando una pipeta eppendorff de 2 5 - 5 0 µ? . El BAL se realizó de 3 a 2 4 h después de la exposición del LPS como se ha descrito antes para determinar la intensidad de la inflamación celular . Lavado Broncoalveolar: 24 h después de la exposición al LPS, los animales se anestesiaron con pentobarbital ( 80- 100 mg/ kg, i.p.)/ ketamina/ xilacina ( 80-120 mg/kg/ 2 -4 mg/kg, i.p.) o uretano ( 1 . 5 -2 . 4 g/ kg, i.p.); y a través de una pequeña incisión en la parte media del cuello ( 15-20 mm) , se expuso la tráquea y se canuló con un adaptador de tubo de calibre 20 . Se lavaron los pulmones con 2 x 1 mi de solución salina equilibrada de Hank estéril sin Ca++ y Mg++ (HBSS) . El fluido de lavado se recuperó tras 30 s mediante una aspiración suave y se combinó para cada animal . Las muestras se centrifugaron entonces a 2000 rpm durante 10 minutos a 5°C. El sobrenadante se aspiró, y se lisaron los glóbulos rojos del botón resultante con 0 . 5 mi de agua destilada durante 30 s antes de restaurar la osmolaridad a las células restantes mediante la adición de 5 mi de HBSS. Las muestras se centrifugaron de nuevo a 2000 rpm durante 10 minutos a 5°C y el sobrenadante se aspiró. El botón resultante se volvió a suspender en 1 mi de HBSS. El número de células totales se determinó mediante exclusión con azul alícuota de la suspensión celular utilizando un hemocitómetro o contador coulter. Para el conteo diferencial de células, se centrifugó una alícuota de suspensión celular en un Cytospin (5 minutos, 1300 rpm; Shandon Southern Instruments, Sewickley, PA) y los portaobjetos se fijaron y tiñeron con una tinción de Wright modificada (Equipo de tinción Hema 3, Fisher Scientific) . Se utilizaron los criterios morfológicos estándar en la clasificación de al menos 300 células bajo el microscopio óptico. Los datos en la Tabla 3 indican células del BAL x 104/ animal para neutrófilos y células totales, o porcentaje de inhibición de la respuesta neutrofílica del fluido del BAL inducido por LPS . Tabla 3 Compuesto en DOSis Inhibición de la neutrofilia el Ejemplo inducida por LPS (+ 10-30%. ++ >30%) 1 0.1% + 2 0.1% + 6 0.01% ++ 7 0.01% ++ 8 0.1% ++ 9 0.01% + 10 0.01% ++ 11 0.01% ++ 12 0.01% + 13 0.01% ++ 15 0.01% + 17 0.01% + 19 0.01% + Ejemplo 27: Efecto de los Compuestos sobre el Broncoespasmo inducido por Metacolina en Ratones La función respiratoria se mide en ratones conscientes, con libertad de movimiento utilizando pletismógrafos de cuerpo entero (PCE) de BUXCO Electronics, Inc. (Troy, NY) . Las cámaras de PCE permiten a los animales moverse libremente dentro de la cámara mientras se miden las funciones respiratorias. Se utilizaron ocho cámaras de forma simultánea para poder medir a ocho ratones a la vez. Cada cámara PCE se conectó a un regulador de flujo polarizado para suministrar un flujo constante y suave de aire fresco durante las pruebas . Un transductor unido a cada cámara detecta los cambios de presión que ocurren mientras el animal respira. Se amplificaron las señales de presión mediante un preamplificador MAX II Strain Gauge y se analizaron con el programa Biosystem XA suministrado con el sistema (BUXCO Electronics, Inc.). Los cambios de presión dentro de cada cámara se calibraron antes de realizar las pruebas mediante la inyección exacta de 1 mi de aire a través del puerto de inyección y ajustando la señal del ordenador. Los ratones se colocaron en las cámaras PCE y se dejaron aclimatar durante 10 minutos antes de las pruebas. Las pruebas se llevaron a cabo dejando a los animales moverse y respirar libremente durante 15 minutos mientras se medían los siguientes parámetros: Volumen de marea (mi), Tasa Respiratoria (inspiraciones por minutos), Volumen por Minuto (volumen de la marea multiplicado por la tasa respiratoria, mi/ minutos), Tiempo de Inspiración (s) , Tiempo de Expiración (s) , Flujo Inspiratorio Máximo (mi/ s) , y Flujo Respiratorio Máximo (mi/ s) . Los datos crudos de cada uno de los parámetros enumerados anteriormente se capturaron en la base de datos del programa y se promediaron una vez cada minuto para proporcionar un total de 1 5 puntos de datos por parámetro. Se informa de la media de los 1 5 puntos de datos. El Volumen Acumulado (mi) es un valor acumulativo (no la media) y representa la suma de todos los volúmenes de la marea de la sesión de pruebas de 1 5 minutos El protocolo se modificó para incluir las mediciones antes, durante y después de la exposición al espasmógeno para la determinación de Penh. Los efectos dosis-respuesta de un espasmógeno particular (es decir, metacolina (MCh) , acetilcolina , etc.) se obtuvieron administrando un aerosol nebulizado ( 3 0 - 6 0 s de exposición) en intervalos aproximados de 5 - 1 0 minutos Los ratones (balb/c) se trataron con vehículo (DMSO al 2% en H20) o fármaco disuelto en 4 mi de vehículo durante 20 minutos mediante aerosol, como se ha descrito anteriormente, antes de la exposición al espasmógeno. Se determinó el Penh a 5, 30 y 60 minutos pos t-exposición . Los datos se muestran como un porcentaje de inhibición del Penh en relación al vehículo . Tabla 4 Se hace constar que con relación a esta fecha, mejor método conocido por la solicitante para llevar a práctica la citada invención, es el que resulta claro de presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1.- Un análogo cíclico del péptido intestinal vasoactivo de fórmula I X-His-R2-Asp-Ala-R5-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Le R16-Nle-R18-Ala-Lys-Lys21-Tyr-Leu-Asn-Asp25-Leu-R27-R28-Gly-Gly- Thr-Y [X- (SEC ID No. :2) -Y] caracterizado porque X es un hidrógeno del amino N-terminal de la Histidina que puede estar opcionalmente sustituida por un grupo protector amino hidrolizable, más preferiblemente por un grupo acetilo, Y es el hidroxilo del carboxilo C-terminal de la Treonina que puede estar opcionalmente sustituida por un grupo protector carboxilo hidrolizable, más preferiblemente por NH2, los residuos subrayados indican una unión covalente de cadena lateral a cadena lateral del primer aminoácido (Lys21) y el último (Asp25) dentro del segmento, R2 es Ser o Ala, R5 es Thr, Ser, Asp, Gln, Pro o CaMeVal, R16 es Gln, Ala o Arg, R18 es Ala, Lys o Glu, R27 es Lys o Leu con la excepción de que R27 debe ser Lys cuando R5 es CaMeVal y R16 es Arg, R28 es Lys o Asn, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. 2. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque R5 es Ser o CaMeVal . 3. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 2 caracterizado porque R27 es Lys. 4. - Un compuesto caracterizado porque se selecciona de entre el grupo que consiste en His-Ser-Asp-Ala-Thr-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr (SEC ID No . : 3 ) , His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr (SEC ID No. : 4) , His-Ser-Asp-Ala-MeVal-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Ly Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys -Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr (SEC ID No. : 8), His-Ser-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Lys-Ala-Lys -Lys -Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr ( SEC ID No . : 11 ) , His-Ala-Asp-Ala-Ser-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Nle-Glu-Ala-Lys -Lys -Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys- Lys-Gly-Gly-Thr ( SEC ID No . : 19 ) , His-Ala-Asp-Ala-MeVal-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Lys-Lys-Gly-Gly-Thr (SEC ID No. : 23) , y His-Ala-Asp-Ala-MeVal-Phe-Thr-Glu-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Asp-Leu-Leu-Lys-Gly-Gly-Thr (SEC ID No. : 25) . 5.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 caracterizado porque es X-(SEC ID No. :8)-Y. 6.- Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y al menos un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable. 7. - Un método para el tratamiento de enfermedades pulmonares obstructivas caracterizado porque comprende la administración por inhalación de una cantidad efectiva de una composición que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y al menos un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable a una persona que padece tal trastorno. 8. - Uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades pulmonares obstructivas. 9. - Un proceso para la preparación de un compuesto caracterizado porque es de conformidad con la reivindicación

1.