MX2008015530A

MX2008015530A - Terapia genica para esclerosis lateral amiotrofica y otros trastornos de la medula espinal.

Info

Publication number: MX2008015530A
Application number: MX2008015530A
Authority: MX
Inventors: James Dodge; Lamya Shihabuddin; Catherine R O'riordan
Original assignee: Genzyme Corp
Priority date: 2006-06-07
Filing date: 2007-06-07
Publication date: 2009-02-06
Also published as: JP2014012697A; MX2019004843A; US20100267812A1; CA3139726A1; EP2029742B1; CA2654292A1; US11554161B2; ES2725552T3; PT2029742T; US20230364200A1; PT2489733T; RU2008152821A; JP2020079234A; TR201906106T4; SI2029742T1; WO2007146046A3; JP6606215B2; EP3540054A3; IL195647A0; EP2029742A2

Abstract

La presente invención proporciona métodos y composiciones para tratar enfermedades o lesiones que afectan la función y control motores en un sujeto. En un aspecto, en la invención se administra un producto de transgenes a la médula espinal de un sujeto mediante la administración al cerebro de un vector viral neurotrófico recombinante que contiene el transgen. El vector viral distribuye el transgen en una región del cerebro que es susceptible de infección por el virus y que expresa el producto del gen viral recombinante codificado. Igualmente se proporcionan composiciones para la distribución de un producto de transgenes a la médula espinal de un sujeto mediante la administración al cerebro del sujeto de un vector viral neurotrófico recombinante que contiene el transgen.

Description

TERAPIA GÉNICA PARA ESCLEROSIS LATERAL AMIOTRÓFICA Y OTROS TRASTORNOS DE LA MÉDULA ESPINAL CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a composiciones y métodos para tratar trastornos que afectan a la función motora de un sujeto y, en particular, a la función motora afectada por una enfermedad o lesión en el cerebro y/o la médula espinal. La terapia génica es una modalidad de tratamiento reciente para trastornos que afectan al sistema nervioso central (SNC) . La terapia génica del SNC se ha facilitado mediante el desarrollo de vectores virales capaces de infectar de forma eficaz neuronas post-mitóticas . El sistema nervioso central está compuesto por la médula espinal y el cerebro. La médula espinal conduce información sensorial desde el sistema nervioso periférico al cerebro y conduce información motora desde el cerebro a diversos efectores. Para una revisión de vectores virales para el suministro de genes al sistema nervioso central, véase Davidson et al. (2003) Nature Rev. 4: 353-364. Se considera que los vectores de virus adenoasociados (AAV) son útiles para la terapia génica del SNC ya que tienen un perfil de toxicidad e inmunogenicidad favorable, son capaces de transducir células neuronales y son capaces de mediar en la expresión a largo plazo en el SNC (Kaplitt et al. (1994) Nat. Genet . 8: 148-154; Barlett et al. (1998) Hum. Gene Ther. 9: 1181-1186; y Passini et al. (2002) J. Neurosci. 22 : 6437-6446) . Una propiedad útil de los vectores de AAV se basa en la capacidad de algunos vectores de AAV de someterse a transporte retrógrado y/o anterógrado en células neuronales. Las neuronas en una región cerebral están interconectadas por axones con regiones cerebrales distales proporcionando de este modo un sistema de transporte para el suministro de vectores. Por ejemplo, un vector de AAV se puede administrar en o cerca de los terminales axonales de neuronas. Las neuronas internalizan el vector de AAV y lo transportan de un modo retrógrado a lo largo del axón hasta el cuerpo celular. Se ha demostrado que propiedades similares de adenovirus, HSV y virus de la pseudorrabia suministran genes a estructurales distales dentro del cerebro (Soudas et al. (2001) FASEB J. 15: 2283-2285; Breakefield et al. (1991) New Biol . 3: 203-218; y deFalco et al. (2001) Science, 291: 2608-2613) . Varios grupos han descrito que la transducción del cerebro por el serotipo 2 de AAV (AAV2) está limitado al sitio de inyección intracraneal (Kaplitt et al. (1994) Nat . Genet. 8 : 148-154; Passini et al. (2002) J. Neurosci . 22 : 6437-6446; y Chamberlin et al. (1998) Brain Res. 793 : 169-175) . Informes recientes sugieren que el transporte axonal retrógrado de vectores virales neurotróficos también puede producirse en circuitos seleccionados del cerebro normal de rata (Raspar et al. (2002) Mol. Ther. 5 : 50-56 (vector AAV); Kasper et al. (2003) Science 301 : 839-842 (vector lentiviral) y Azzouz et al. (2004) Nature 42 9 : 413-417 (vector lentiviral) . Roaul et al. (2005) Nat. Med. 11 ( 4 ) : 423-428 y Ralph et al. (2005) Nat. Med. 11 ( 4 ) : 429-433 describen que la inyección intramuscular de lentivirus que expresan ARN de interferencia de silenciamiento de la Cu/Zn superóxido dismutasa (SOD1) humana retardó la aparición de enfermedad de esclerosis lateral amiotrófica (ALS) en un modelo de roedor de ALS terapéuticamente pertinente. Las células transducidas por vectores de AAV pueden expresar un producto transgénico terapéutico, tal como una enzima o un factor neurotrófico, para mediar los efectos beneficiosos por vía intracelular . Estas células también pueden secretar el producto transgénico terapéutico, que puede captarse posteriormente por células distales donde puede mediar sus efectos beneficiosos. Este proceso se ha descrito como corrección cruzada (Neufeld et al. (1970) Science 169: 141- 146) . Sin embargo, todavía existe una necesidad de composiciones y métodos para tratar una disfunción de la médula espinal que dan como resultado la pérdida de función motora en pacientes humanos. Esta invención satisface esta necesidad y proporciona así mismo ventajas relacionadas. SUMARIO DE LA INVENCIÓN Esta invención proporciona métodos y composiciones para suministrar un transgén a la médula espinal y/o a la región de tronco encefálico de un sujeto mediante administración int raventricular de un vector viral neurotrófico recombinante que contiene un transgén de IGF-1. El suministro viral puede ser en condiciones que favorecen la expresión del transgén en células ependimarias . Esta invención proporciona métodos y composiciones para suministrar un transgén a la médula espinal y/o la región de tronco encefálico de un sujeto mediante administración intravent ricular de un vector viral neurotrófico recombinante que comprende un transgén seleccionado del grupo que consiste en factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-1), calbindina D28K, parvalbúmina, HIFl-alfa, SIRT-2, VEGF, SMN-1, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar), sonic hedgehog (shh), eritropoyetina (EPO) , lisil oxidasa (LOX) , progranulina, prolactina, grelina, neuroserpina , angiogenina y lactógeno placentario. El suministro viral puede ser en condiciones que favorezcan la expresión del transgén en células ependimarias. Esta invención proporciona métodos y composiciones para suministrar un transgén a la médula espinal y/o la región del tronco encefálico de un sujeto mediante administración intraventricular (también conocida como intracerebroventricular o ICV) de un vector viral neurotrófico recombinante que comprende al menos dos transgenes seleccionados del grupo que consiste en factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-1), calbindina D28K, parvalbúmina, HlFl-alfa, SIRT-2, VEGF, SMN-l, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar), sonic hedgehog (shh), eritropoyetina (EPO) , lisil oxidasa (LOX) , progranulina, prolactina, grelina, neuroserpina, angiogenina y lactógeno placentario. En una realización, un vector viral adenoasociado recombinante comprende IGF-1 y VEGF. El suministro viral puede ser en condiciones que favorezcan la expresión del transgén en células ependimarias. Las Tablas 1-3 proporcionan combinaciones potenciales de pares de transgenes útiles en la presente invención. En un aspecto adicional, la invención proporciona composiciones y un método para mitigar los síntomas de un trastorno de neuronas motoras en un sujeto administrando un vector viral neurotrófico recombinante que contiene el transgén terapéutico al cerebro del sujeto y en condiciones que favorezcan la expresión del transgén en una cantidad terapéuticamente eficaz. Se tiene que entender que tanto la descripción general anterior como la descripción detallada siguiente son ilustrativas y solamente explicativas y no restrictivas de la invención reivindicada. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra curvas de supervivencia de Kaplan- eier que comparan la administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa con AAV4 que codifica IGF1. Se observó una diferencia significativa en la supervivencia. Los destinatarios eran ratones SOD. La Figura 2 muestra una comparación de la fuerza de las extremidades anteriores entre ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa (Lac Z) frente a AAV4 que codifica IGF1. Los destinatarios de IGF1 perdieron la fuerza más gradualmente y más lentamente. La Figura 3 muestra una comparación de la fuerza de extremidades posteriores entre ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa (Lac Z) frente a AAV4 que codifica IGF1. Los destinatarios de IGF1 perdieron la fuerza más gradualmente y posteriormente. La Figura 4 muestra una comparación de rodillo giratorio, rotarod, (latencia hasta la caída) entre ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa (Lac Z) frente a AAV4 que codifica a 1GF1. Los destinatarios de IGF1 se deterioraron más gradualmente y posteriormente. La Figura 5 muestra una comparación de la pérdida de masa corporal entre ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa (Lac Z) frente a AAV4 que codifica IGF1. Los destinatarios de IGF1 pierden masa corporal más gradualmente y posteriormente. La Figura 6 muestra una comparación de tinción de GFAP en el tronco encefálico de ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa (Bgal) frente a AAV4 que codifica IGF1. Como se evidencia por la tinción de GFAP disminuida en los ratones tratados con AAV4-IGF1, el suministro intraventricular de AAV4-IGF1 condujo a una disminución de la astrogliosis dentro del tronco encefálico. La Figura 7 muestra una comparación de tinción de GFAP en la médula espinal ventral de ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa (Bgal) frente a AAV4 que codifica IGF1. Como se evidencia por la tinción GFAP disminuida en los ratones tratados con AAV4-IGF1, el suministro intraventricular de AAV4-IGF1 condujo a una disminución de la astrogliosis en la médula espinal ventral. La Figura 8 muestra una comparación de niveles de nitrotirosina en ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica beta-galactosidasa (Bgal) frente a AAV4 que codifica IGF1. Como se evidencia por la tinción disminuida en los ratones tratados con AAV4-IGF1, el suministro intraventricular de AAV4-IGF-1 condujo a una disminución de los niveles de nitrotirosina a lo largo de la médula espinal, por ejemplo, regiones cervical, torácica, lumbar y sacra. La Figura 9 muestra la expresión de proteina verde fluorescente (GFP) en ratones tratados con AAV4-GFP. La GFP se distribuye en la capa de células ependimarias del sistema ventricular después del suministro intraventricular de AAV4-GFP.

La Figura 10 muestra la expresión de proteina verde fluorescente (GFP) en ratones tratados con AAV4-GFP. La GFP se distribuye en la capa de células ependimarias del canal central de la médula espinal después del suministro intraventricular de AAV4-GFP. La Figura 11A muestra los resultados de RT-PCR realizada en tejidos de ratones SOD que se trataron mediante inyección intraventricular de AAV4-IGF-1. Se midió la B-actina como un control interno. Se detectó vector a lo largo de la corteza, el tronco encefálico y la médula espinal después del suministro intraventricular. La Figura 11B muestra los resultados de RT -PCR realizada en tejidos de ratones SOD que se trataron mediante inyección intraventricular de AAV4-VEGF. Se midió B-actina como un control interno. Se detectó vector a lo largo de la corteza, el tronco encefálico y la médula espinal después del suministro intraventricular de AAV4-VEGF.

La Figura 12 muestra curvas de supervivencia de Kaplan-Meier de ratones SOD1 que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica proteina verde fluorescente (GFP) o AAV4 que codifica VEGF165. Se observó un aumento significativo de la supervivencia media en ratones que reciben AAV4-VEGF. La Figura 13 muestra una comparación de rodillo giratorio,' rotarod, (latericia hasta la calda) entre ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica GFP frente a AAV4 que codifica VEGF165. Los destinatarios de VEGF165 se deterioraron más gradualmente y posteriormente. La Figura 13 también muestra una comparación de la fuerza de las extremidades posteriores en ratones SOD que recibieron administración intraventricular de AAV4 que codifica GFP frente a AAV4 que codifica VEGF165. Los destinatarios de VEGF165 perdieron fuerza más gradualmente y posteriormente . Las Tablas 1-3 proporcionan varios pares de genes potenciales para el uso en la presente invención donde la realización utiliza más de un gen. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN En primer lugar se definen determinados términos para que la presente invención se pueda comprender más fácilmente. Se indican definiciones adicionales a lo largo de la descripción detallada. La práctica de la presente invención empleará, a menos que se indique de otro modo, técnicas de inmunología, biología molecular, microbiología, biología celular y ADN recombinante convencionales, que están dentro de la especialidad de la técnica. Véase, por ejemplo, Sambrook, Fritsch y Maniatis, MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, 2a edición (1989) ; CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY (F. M. Ausubel, el al. eds . , (1987)) ; las series METHODS IN ENZ YMOLOGY (Academic Press, Inc.) : PCR 2: A PRACTICAL APPROACH (M. J. MacPherson, B. D. Hames y G. R. Taylor eds. (1995)) , Harlow and Lañe, eds. (1988) ANTIBODIES, A LABORATORY MANUAL y ANIMAL CELL CULTURE (R. I. Freshney, ed. (1987) ) . Como se usa en la memoria descriptiva y las reivindicaciones, la forma singular "un", "una" y "el", "la" incluye referencias al plural a menos que el contexto lo indique claramente de otro modo. Por ejemplo, la expresión "una célula" incluye una pluralidad de células, incluyendo mezclas de las mismas. Como se usa en este documento, el término "comprende" tiene por objeto referirse a que las composiciones y métodos incluyen los elementos enumerados, pero que no excluyen otros. "Que consiste esencialmente en", cuando se usa para definir composiciones y métodos, se refiere a que excluye otros elementos de cualquier significación esencial para la combinación. Por tanto, una composición que consiste esencialmente en los elementos como se define en este documento no excluiría contaminantes traza del método de asilamiento y purificación y vehículos farmacéuticamente aceptables, tales como solución salina tamponada con fosfato, conservantes y similares. "Que consiste en" se refiere a que excluye más que elementos traza de otros ingredientes y etapas del método sustanciales para administrar las composiciones de esta invención. Las realizaciones definidas por cada una de estas expresiones de transición están dentro del alcance de esta invención. Todas las indicaciones numéricas, por ejemplo, pH, temperatura, tiempo, concentración y peso molecular, incluyendo intervalos, son aproximaciones que varían (+) o (-) mediante incrementos de 0,1. Se tiene que entender que, aunque no se indique siempre explícitamente, que todas las indicaciones numéricas están precedidas por el término (aproximadamente) . También se tiene que entender, aunque no se indique siempre de forma explícita, los reactivos descritos en este documento son meramente ilustrativos y que se conocen equivalentes de los mismos en la técnica. El término "transgen" se refiere a un polinucleótido que se introduce en una célula y es capaz de transcribirse en ARN y, opcionalmente, traducirse y/o expresarse en condiciones apropiadas. En un aspecto, confiere una propiedad deseada a una célula en la que se introdujo o, de otro modo, conduce a un resultado terapéutico o diagnóstico deseado. Las expresiones "partículas de genoma (gp) " o "equivalentes de genoma" o "copias de genoma" (ge) como se usan en referencia a un título viral, se refieren al número de viriones que contienen el genoma de ADN de AAV recombinante , sin tener en cuenta la infectividad o funcionalidad. El número de partículas de genoma en una preparación de vector particular se puede medir mediante procedimientos tales como los descritos en los Ejemplos de este documento o, por ejemplo, en Clark et al. (1999) Hum. Gene Ther. 10: 1031-1039; Veldwijk et al. (2002) Mol. Ther., 6: 272-278. Las expresiones "unidad de infección (iu)", "partícula infecciosa" o "unidad de replicación" como se usan con referencia a un título viral, se refieren al número de partículas de vector de AAV recombinante con capacidad de replicación e infecciosas, como se mide por el ensayo de centro infeccioso, también conocido como ensayo de centro de replicación como se describe, por ejemplo, en McLaughlin et al. ( 1 98 8 ) J . Virol., 62 : 1 963 - 1 97 3 . La expresión "unidad de transducción (tu)", como se usa con referencia a un título viral, se refiere al número de partículas infecciosas de vector de AAV recombinante que dan como resultado la producción de un producto transgénico funcional como se mide en ensayos funcionales tales como los descritos en los Ejemplos de este documento o, por ejemplo, en Xiao et al. (1997) Exp. Neurobiol., 144: 113-124 ; o en Fischer et al. (1996) J. Virol., 70: 520-532 (ensayo LFU) . Las expresiones "terapéutico", "cantidad terapéuticamente eficaz" y sus afines se refieren a la cantidad de un ARN, ADN o producto de 'expresión de ADN y/o ARN que da como resultado la prevención o retardo de la aparición o mitigación de síntomas en un sujeto o una consecución de un resultado biológico deseado, tal como corrección de una neuropatología , por ejemplo, patología celular asociada a una enfermedad neuronal motora tal como ALS . La expresión "corrección terapéutica" se refiere al grado de corrección que da como resultado la prevención o el retraso de la aparición o la mitigación de síntomas en un sujeto. La cantidad eficaz se puede determinar mediante métodos empíricos conocidos. Una "composición" también tiene por objeto incluir una combinación de agente activo y otro vehículo, por ejemplo, compuesto o composición, inerte (por ejemplo, un agente o marcador detectable) o activo, tal como un adyuvante, diluyente, aglutinante, estabilizante, tampones, sales, disolventes lipófilos, conservante, adyuvante o similares. Los vehículos también incluyen excipientes farmacéuticos y proteínas, péptidos, aminoácidos, lípidos y carbohidratos aditivos (por ejemplo, azúcares, incluyendo monosacáridos , di-, tri-, tetra- y oligosacáridos ; azúcares derivati zados tales como alditoles, ácidos aldónicos, azúcares esterificados y similares; y polisacáridos o polímeros de azúcar) que pueden estar presentes solos o en combinación, que comprenden solos o en combinación el 1-99,99% en peso o volumen. Los excipientes proteicos ilustrativos incluyen albúmina sérica, tal como albúmina sérica humana (HSA) , albúmina humana recombinante (rHA) , gelatina, caseína y similares. Los componentes de aminoácidos/anticuerpos representativos, que también pueden funcionar en una capacidad tamponante incluyen alanina, glicina, arginina, betaína, histidina, ácido glutámico, ácido aspártico, cisteína, lisína, leucina, isoleucina, valina, metionina, fenilalanina, aspartamo y similares. Los excipientes de carbohidratos también se incluyen dentro del alcance de esta invención, cuyos ejemplos incluyen, pero sin limitación, monosacáridos tales como fructosa, maltosa, galactosa, glucosa, D-manosa, sorbosa y similares; disacáridos tales como lactosa, sacarosa, trehalosa, celobiosa y similares; polisacáridos tales como rafinosa, melecitosa, maltodextrinas , dextranos, almidones y similares; y alditoles, tales como manitol, xilitol, maltitol, lactitol, xilitol sorbitol (glucitol) y mioinositol. El término vehículo incluye adicionalmente un tampón o un agente de ajuste del pH; típicamente, el tampón es una sal preparada a partir de un ácido o base orgánica. Los tampones representativos incluyen sales de ácido orgánico tales como sales de ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido glucónico, ácido carbónico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido acético o ácido itálico; Tris, clorhidrato de trometamina o tampones fosfato. Los vehículos adicionales incluyen excipientes/aditivos poliméricos tales como polivinilpirrolidonas , ficoles (un azúcar polimérico) , dextratos (por ejemplo, ciclodextrinas , tales como 2-hidroxipropil-2-ciclodextrina) , polietilenglicoles, agentes aromatizantes, agentes antimicrobianos, edulcorantes, antioxidantes, agentes antiestáticos, tensioactivos (por ejemplo, polisorbatos tales como "TWEEN 20" y "TWEEN 80"), lípidos (por ejemplo, fosfolípidos , ácidos grasos), esteroides (por ejemplo, colesterol) y agentes quelantes (por ejemplo, EDTA) . Como se usa en este documento, la expresión "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye cualquiera de los vehículos farmacéuticos convencionales, tales como una solución salina tamponada con fosfato, agua y emulsiones, tales como una emulsión de aceite/agua o agua/aceite y diversos tipos de agentes humectantes. Las composiciones también pueden incluir estabilizantes y conservantes y cualquiera de los vehículos que se han señalado anteriormente con la condición adicional de que sean aceptables para el uso in vivo. Para ejemplos de vehículos, estabilizantes y adyuvantes véase Martin REMINGTON ' S PHARM. SCI., 15a Ed . (Mack Publ. Co . , Easton (1975) and Williams & Williams, (1995), y en el "PHYSICIAN'S DESK REFERENCE" , 52a ed., Medical Economics, Montvale, N. J. (1998) . Los vehículos también pueden comprender líquido cefalorraquídeo artificial (LCRa) . Un "sujeto", "individuo" o "paciente" se usa de forma intercambiable en este documento, que se refiere a un vertebrado, preferiblemente un mamífero, más preferiblemente un ser humano. Los mamíferos incluyen, pero sin limitación animales murinos, ratas, simios, seres humanos, animales de granja, animales deportivos y mascotas. Un "control" es un sujeto o una muestra alternativa usada en un experimento para propósitos de comparación. Un control puede ser "positivo" o "negativo." Por ejemplo, cuando el propósito del experimento es determinar una correlación de un nivel de expresión alterado de un gen con un tipo particular de patología (véase ALS, por ejemplo, a continuación) , generalmente es preferible usar un control positivo (un sujeto o una muestra de un sujeto, que lleva tal alteración y que muestra síntomas característicos de esa enfermedad) y un control negativo (un sujeto o una muestra de un sujeto que carece de la expresión alterada y del síntoma clínico de esa enfermedad) . "Diferencialmente expresado" como se aplica a un gen, se refiere a la producción diferencial del ARNm transcrito a partir del gen o el producto proteico codificado por el gen. Un gen expresado diferencialmente se puede sobreexpresar o subexpresar en comparación con el nivel de expresión de una célula normal o de control. En un aspecto, se refiere a un diferencial que es al menos 1,5 veces, o al menos 2,5 veces o, alternativamente, al menos 5 veces o alternativamente o al menos 10 veces superior o inferior al nivel de expresión detectado en una muestra de control. La expresión "diferencialmente expresado" también se refiere a secuencias de nucleótidos en una célula o tejido que se expresan mientras que son silenciosas en una célula de control o que no se expresan cuando se expresan en una célula de control. Como se usa en este documento, el término "modular" se refiere a variar la cantidad o intensidad de un efecto o resultado, por ejemplo, para mejorar, aumentar, disminuir o reducir. Como se usa en este documento, el término "mitigar" es sinónimo con "aliviar" y significa disminuir o mitigar. Por ejemplo, se pueden mitigar los síntomas de una enfermedad o trastorno haciendo que sean más llevaderos. Para la identificación de estructuras en el cerebro humano véase, por ejemplo, The Human Brain: Surface, Three-Dimensional Sectional Anatomy With MRI, and Blood Supply, 2a ed., eds. Deuteron et al., Springer Vela, 1999; Atlas of the Human Brain, eds. Mai et al., Academic Press; 1997; y Co-Planar Stereotaxic Atlas of the Human Brain: 3-Dimensional Proportional System: An Approach to Cerebral Imaging, eds. Tamarack et al., Thyme Medical Pub . , 1988. Para la identificación de estructuras en el cerebro de ratón, véase, por ejemplo, The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates, 2a ed., Academic Press, 2000. Se puede realizar suministro intracerebroventricular o intraventricular de un vector viral recombinante en uno cualquiera o más de los ventrículos del cerebro, que están rellenos con líquido cefalorraquídeo (LCR) . El LCR es un fluido transparente que llena los ventrículos, está presente en el espacio subaracnoideo y rodea el cerebro y la médula espinal. El LCR se produce por los plexos coroideos y mediante el rezumamiento o transmisión de fluido tisular por el cerebro hacia los ventrículos. El plexo coroideo es una estructura que reviste el suelo del ventrículo lateral y el techo del tercer y cuarto ventrículo. Determinados estudios han indicado que estas estructuras son capaces de producir 400-600 mi de fluido al día que concuerda con una cantidad para llenar los espacios del sistema nervioso central cuatro veces al día. En adultos, se ha calculado que el volumen de este fluido es de 125 a 150 mi (4-5 oz) . El LCR está en formación, circulación y absorción continua. Determinados estudios han indicado que aproximadamente de 430 a 450 mi (aproximadamente 2 tazas) de LCR se pueden producir cada día. Determinados cálculos estiman que la producción equivale aproximadamente a 0,35 mi por minute en adultos y 0,15 por minuto en niños. Los plexos coroideos de los ventrículos laterales producen la mayoría del LCR. Fluye a través de los agujeros de Monro hacia el interior del tercer ventrículo donde se suma a la producción del tercer ventrículo y continúa hacia abajo a lo largo del acueducto de Silvio hasta el cuarto ventrículo. El cuarto ventrículo añade más LCR; después, el fluido viaja al interior del espacio subaracnoideo a través de los agujeros de Magendie y Luschka. Después circula a lo largo de la base del cerebro, alrededor de la médula espinal hacia abajo y hacia arriba sobre los hemisferios cerebrales. El LCR se vacía en la sangre por las vellosidades aracnoideas y los senos vasculares intracraneales. En aspectos en los que la transferencia génica está mediada por un vector viral de ADN, tal como un adenovirus (Ad) o virus adenoasociado (AAV) , una construcción de vector se refiere al polinucleótido que comprende el genoma viral o parte del mismo y un transgén. Los adenovirus (Ad) son un grupo de virus relativamente bien caracterizado, homogéneo, que incluye más de 50 serotipos. Véase, por ejemplo, la Solicitud PCT Internacional N° O 95/27071. Los Ad son fáciles de cultivar y no requieren integración en el genoma celular del hospedador. También se han construido vectores obtenidos de Ad recombinantes , particularmente los que disminuyen el potencial de recombinación y generación de virus de tipo silvestre. Véanse las Solicitudes PCT Internacionales N° WO 95/00655 y WO 95/11948. El AAV de tipo silvestre tiene alta infectividad y especificidad para integrarse en el genoma de la célula del hospedador. Véase, Hermonat y Muzyczka (1984) Proc. Nati. Acad. Sci . USA 81: 6466-6470 y Lebkowski, el al. (1988) Mol.. Cell. Biol . 8: 3988-3996. En un aspecto, la invención proporciona un método para suministrar un transgén al cerebro de un sujeto por administración intraventricular de un vector viral neurotrófico recombinante que contiene el transgén de IGF-1. El suministro es en condiciones que favorecen la expresión del transgén en células ependimarias . En otro aspecto, la invención proporciona un método para suministrar un producto transgénico terapéutico a una célula diana del SNC, que es una neurona o una célula glial, en un mamífero que padece un trastorno neuronal motor, por ejemplo, ALS o un lesión traumática de la médula espinal, donde el transgén puede ser IGF-1. El transgén se puede administrar mediante un virus neurotrófico. El virus se puede administrar por los ventrículos. Las células ependimarias se pueden transducir para expresar el transgén y secretar el producto proteico codificado. En una realización alternativa, la invención es un método para tratar un trastorno de neurona motora en un sujeto por administración intraventricular de un vector viral neurotrófico recombinante que contiene un transgén terapéutico al cerebro del sujeto, donde el transgén se expresa en una cantidad terapéuticamente eficaz en el sujeto. Esta invención también es un método para mitigar los síntomas de un trastorno de neurona motora en un sujeto mediante administración intraventr icular de un vector viral neurotrófico recombinante que contiene un transgén terapéutico al cerebro, donde dicho transgén se expresa en una cantidad terapéuticamente eficaz en el sujeto. Los vectores virales neurotróficos adecuados para la práctica de esta invención incluyen, pero sin limitación, vectores virales adenoasociados (AAV) , vectores virales de herpes simple (Patente de Estados Unidos N° 5.672.344) y vectores lent ivirales . En los métodos de la invención, se puede usar AAV de cualquier serotipo. El serotipo del vector viral usado en determinadas realizaciones de la invención se selecciona del grupo que consiste en AAV1, AAV2 , AAV3 , AAV4 , AAV5 , AAV6, AAV7 y AAV8 (véase, por ejemplo, Gao et al. (2002) PNAS, 99: 11854-11859; y Viral Vectors for Gene Therapy: Methods and Protocols, ed. Machida, Humana Press, 2003) . Se pueden usar otros serotipos además de los enumerados en este documento. Además, también se pueden utilizar vectores AAV pseudot ipados en los métodos descritos en este documento. Los vectores AAV pseudotipados son los que contienen el genoma de un serotipo de AAV en la cápsida de un segundo serotipo de AAV; por ejemplo, un vector de AAV que contiene la cápsida de AAV2 y el genoma de AAV1 o un vector de AAV que contiene la cápsida de AAV5 y el genoma de AAV2 (Auricchio et al., (2001) Hum. Mol. Genet., 10(26) : 3075-81) . Los vectores de AAV se obtienen de parvovirus de ADN monocatenarios (me) que no son patógenos para mamíferos (revisado en Muzyscka (1992) Curr. Top. Microb. Immunol . , 158: 97-129) . En resumen, los vectores basados en AAV recombinantes que tienen eliminados los genes virales rep y cap, que representan el 96% del genoma viral, dejando las dos repeticiones terminales invertidas (ITR) de 145 pares de bases (pb) flanqueantes, que se usan para iniciar la replicación, empaquetamiento e integración de ADN viral. En ausencia de virus auxiliar, el AAV de tipo silvestre se integra en el genoma de célula hospedadora humana, con especificidad de sitio preferencial en el cromosoma 19q 13.3, o se puede mantener episómicamente . Una única partícula de AAV puede alojar hasta 5 kb de ADNmc, dejando de este modo aproximadamente 4.5 kb para un transgén y elementos reguladores, que típicamente es suficiente. Sin embargo, los sistemas de corte y empalme en trans como se describen, por ejemplo, en la Patente de Estados Unidos N° 6.544.785, pueden casi duplicar este limite. En una realización ilustrativa, el AAV es AAV . Los virus adenoasociados de muchos serotipos, especialmente AAV2 , se han estudiado extensamente y caracterizado como vectores de terapia génica . Los especialistas en la técnica estarán familiarizados con la preparación de vectores de terapia génica basados en AAV funcionales. Se pueden encontrar numerosas referencias a diversos métodos de producción, purificación y preparación de . AAV para administración a sujetos humanos en el amplio grueso de bibliografía publicada (véase, por ejemplo, Viral Vectors for Gene Therapy: ethods and Protocols, ed. Machida, Humana Press, 2003) . Adicionalmente , la terapia génica basada en AAV dirigida a células de SNC se ha descrito en las Patentes de Estados Unidos N° 6.180.613 y 6.503.888. Son vectores de AAV ilustrativos adicionales vectores recombinantes de los serotipos AAV2/1, AAV2/2, AAV2/5, AAV2/7 y AAV2/8, que codifican proteínas humana. En determinados métodos de la invención, el vector comprende un transgén unido de forma funcional a un promotor. El transgén codifica una molécula biológicamente activa, cuya expresión en el SNC da como resultado una corrección al menos parcial de una neuropatologia y/o la estabilización de la progresión de la enfermedad. El transgén puede ser factor de crecimiento de insulina 1 (IGF- 1), calbindina D28, parvalbúmina, HIFl-alfa, SIRT-2, VEGF, SMN-1, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar), sonic hedgehog (shh) , eritropoyetina (EPO), lisil oxidasa (LOX) , progranulina , prolactina, grelina, neuroserpina , angiogenina y lactógeno placentario . En determinados métodos de la invención, el vector comprende más de un transgén, donde cada transgén está unido de forma funcional a un promotor para permitir la expresión de más de un transgén por un único vector de AAV. En métodos adicionales, los transgenes pueden unirse de forma funcional al mismo promotor. Cada transgén codifica una molécula biológicamente activa, cuya expresión en el SNC da como resultado una corrección al menos parcial de una neuropatologia. Adicionalmente , en caso en los que suministra más de un transgén, los transgenes se pueden suministrar por más de un vector de AAV, donde cada vector de AAV comprende un transgén unido de forma funcional a un promotor. Los transgenes se pueden seleccionar del grupo que consiste en: factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-I), calbindina D28, parvalbúmina, HIFI-alfa, SIRT-2, VEGF, SMN-1, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar), sonic hedgehog (shh) , eritropoyetina (EPO), lisil oxidasa (LOX) , progranulina , prolactina, grelina, neuroserpina y lactógeno placentario. Por ejemplo, los transgenes pueden comprender VEGF, tal como VEGF165 e IGF-1. El gen del factor de crecimiento similar a insulina (IGF-1) tiene una estructura compleja, que se conoce bien en la técnica. Tiene al menos dos productos de ARNm de corte y empalme alternativos que surgen del transcrito génico. Hay un péptido 153 aminoácidos, conocido por varios nombre incluyendo IGF-IA o IGF-lEa, y un péptido de 195 aminoácidos, conocido por varios nombres incluyendo IGF-1B o IGF-lEb. La forma Eb también se puede conocer como Ec en seres humanos. La forma madura de IGF-1 es un polipéptido de 70 aminoácidos. Tanto IGF-lEa como IGF-lEb contienen el péptido maduro de 70 aminoácidos pero difieren en la secuencia y longitud de sus extensiones carboxilo terminales. Las secuencias peptidicas de IGF-lEa e IGF-lEb se representan por las SEC ID N°: 1 y 2, respectivamente. Los ADNc genómicos y funcionales de IGF-1 humana, asi como información adicional con respecto al gen de IGF-1 y sus productos, están disponibles en el N° de entrada de Unigene NM_00618. La proteina de IGF-1 puede tener la secuencia mostrada en la SEC ID N°: 3 o variantes alélicas de la misma. Las variantes alélicas pueden diferir por un único o un pequeño número de restos aminoacídicos , típicamente menos de 5, menos de 4, menos de 3 restos. La secuencia proteica de IGF-1 se puede modificar para contener el dominio de transducción TAT (YGRKKRRQRRR ) como se muestra en la SEC ID N° : 4. Aunque sus funciones no se conocen completamente, se ha establecido la hipótesis de que la calbindina D28K (también denominada calbindina D28) y la parvalbúmina son proteínas de unión a calcio que están implicadas en el tamponamiento de calcio. Sin quedar limitado a una teoría, hay pruebas que sugieren que la homeostasis del calcio está alterada en sujetos con ALS . Hay pruebas que sugieren que niveles bajos de calbindina-D28K y/o parvalbúmina pueden aumentar la vulnerabilidad de neuronas motoras en ALS disminuyendo su capacidad para manejar una carga de calcio aumentada. Esta disminución puede conducir a lesión celular y posible muerte de neuronas motoras. Pruebas adicionales sugieren que las neuronas ricas en proteínas de unión a calcio, tales como calbindina D28K y parvalbúmina, son resistentes a la degeneración . La HIF-1 es una proteína heterodimérica compuesta por dos subunidades ; (i) una subunidad beta (ß) expresada constitutivamente también conocida como translocalizador nuclear de hidrocarburos de arilo (ARNT) (que se comparte con otros factores de transcripción relacionadas (por ejemplo, el receptor de hidrocarburos de arilo/dioxina (DR/AhR)) y (ii) una subunidad alfa (a) (véase, por ejemplo, el documento O 96/39426, la Solicitud Internacional N° PCT/US96/10251 que describe la reciente purificación por afinidad y clonación molecular de HIF-loc) cuya acumulación se regula por un mecanismo post-t raduccional de tal forma que solamente se pueden detectar niveles altos de la subunidad alfa durante condiciones hipóxicas. Ambas subunidades son miembros de la familia de factores de transcripción hélice-bucle-hélice (bHLH)-PAS básicos. Estos dominios regulan la unión a ADN y la dimerización . El dominio de transactivación está en el extremo C terminal de la proteina. La región básica consiste en aproximadamente 15 aminoácidos predominantemente básicos responsables de la unión directa a ADN. Esta región es adyacente a dos hélices anfipáticas, separadas por un bucle de longitud variable, que forma la interfaz de dimerización primaria entre miembros de la familia (Moore, A. W., et al., Proc. Nati. Acad. Sci . USA 97: 10436-41 (2000) ) . El dominio PAS, que se denomina según las tres primeras proteínas en las que se identificó (Per, ARNT y Sim) , incluye 200-300 aminoácidos que contienen dos regiones débilmente conservadas, en gran medida hidrófobas de aproximadamente 50 aminoácidos, denominadas PAS A y PAS B. La subunidad HIF-la es inestable durante condiciones normóxicas, siendo la sobreexpresión de esta subunidad en células cultivadas con niveles de oxígeno normales capaz de- inducir la expresión de genes inducida normalmente por hipoxia. Una estrategia alternativa sería modificar la subunidad HIF-?a de tal forma que no se desestabilice más por condiciones normóxicas y, por lo tanto, sería más potente en un intervalo de condiciones de oxígeno. La sustitución de la región C terminal (o transactivación) de la proteína de factor inducible por hipoxia por un dominio de transactivación fuerte de una proteína activadora de la transcripción tal como, por ejemplo, VP16 de virus herpes simple (HSV) , NFKB O factores de transcripción de levadura GAL4 y GCN4, está diseñada para estabilizar la proteína en condiciones normóxicas y proporcionar activación transcripcional constitutiva fuerte. Para estabilizar la proteína de factor inducible por hipoxia en condiciones normóxicas y proporcionar una activación transcripcional constitutiva fuerte, se construyó una proteína de fusión híbrida/quimérica que consiste en los dominios de unión a ADN y de dimerización de HIF-?a y el dominio de transactivación de la proteína VP16 del virus herpes simple (HSV). La administración de este híbrido/quimera a las células de un sujeto por terapia génica induce la expresión de genes normalmente regulados positivamente en respuesta a hipoxia (es decir, VEGF y similares). Se ha demostrado que un híbrido constitutivamente estable de HIF-?a es eficaz para tratar pacientes isquémicos (Patentes de Estados Unidos N° 6.432.927 y 7.053.062, que se incorporan ambas como referencia en su totalidad en este documento) . Los miembros de la familia del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) están entre los moduladores más potentes de la biología vascular. Regulan la vasculogénesis , la angiogénesis y el mantenimiento vascular. El VEGF165 es uno de tales miembros de la familia de VEGF que se pueden usar en la presente invención. La base molecular de la atrofia muscular espinal (SMA), un trastorno neuromuscular autosómico recesivo es la pérdida en homocigosis del gen 1 de neurona motora de supervivencia (SMN1). Una copia prácticamente idéntica del gen SMN1, denominada SMN2, modula la gravedad de la enfermedad. La diferencia funcional entre ambos genes es una mutación traduccionalmente silenciosa que, sin embargo, altera un potenciador de corte y empalme exónico que provoca un salto del exón 7 en la mayoría de los transcritos de SMN2. Solamente el 10% de los transcritos de SMN2 codifican la proteína de longitud completa funcional idéntica a SMN1. La proteína SMN desempeña un papel bien establecido en el ensamblaje del empalmosoma y también puede mediar en el tránsito del ARNm en el axón y en el extremo nervioso de las neuronas. El CNTF (factor neurotrófico ciliar) es una neurocitoquina expresada por células gliales en nervios periféricos y el sistema nervioso central. El CNTF se reconoce generalmente por su función en soporte y supervivencia de tipos celulares no neuronales y neuronales. Véase, por ejemplo, Vergara, C y Ramírez, B; Brain Res, Brain Res. Rev. 2004; 47: 161-73. El sonic hedgehog (Shh) controla importantes procesos de desarrollo, incluyendo supervivencia neuronal y de células gliales. La eritropoyet ina (EPO) es un regulador principal de células progenitoras eritroides. Sin embargo, se expresa funcionalmente en el sistema nervioso y se ha descrito que tiene efectos neuroprotectores . Véase, por ejemplo, Bartesaghi, S., 2005. Neurotoxicology , 26: 923-8. La lisil oxidasa (LOX) oxida la cadena lateral de peptidil lisina convirtiendo ele este modo determinados restos de lisina en alfa-aminoadípico-delta-semialdehído . Esto es un cambio post-traduccional que, por ejemplo, permite el entrecruzamiento covalente de las cadenas componentes de colágeno y elastina. Estabiliza los depósitos fibrosos de estas proteínas en la matriz extracelular . LOX también puede oxidar la lisina dentro de una diversidad de proteínas catiónicas, lo que sugiere que sus funciones son más amplias que la estabilización o la matriz extracelular. LOX se sintetiza como una preproteína ; surge de la célula como proLOX y se procesa de forma proteolítica hasta la enzima activa. Véase, por ejemplo, Lucero, HA y Kagan, HM, Cell Mol. Life Sci. 2006; 63(19-20): 2304-16. La progranulina (PGRN) es una proteína pleiotrópica que ha obtenido la atención de la comunidad neurocientí fica con los recientes descubrimientos de mutaciones en el gen que provocan la degeneración del lóbulo frontotemporal . La PGRN en el sistema nervioso centra se expresa por microglía y neuronas y desempeña un papel en el desarrollo cerebral. La PGRN también está implicada en múltiples procesos de "modelado tisular" que incluyen desarrollo, cicatrización y oncogénesis. La PGRN se convierte en granulina (GRN) por enzimas elastasas. Aunque la progranulina tiene propiedades tróficas, las GRN son más parecidas a mediadores inflamatorios. Los estudios de expresión génica de modelos animales de enfermedad de SNC muestran un aumento diferencial en PGRN en combinación con activación microglial e inflamación. Se sugiere que el aumento de la expresión de PGRN está muy relacionado con la activación microglial y la neuroinflamación . Además, la expresión de PGRN está aumentada en microglia activada en muchas enfermedades neurodegenerativas, incluyendo enfermedad de neurona motora y enfermedad de Alzheimer. Estudios han identificado mutaciones en PGRN como una causa de enfermedad neurodegenerativa e indican la importancia de la función de PGRN para la supervivencia neuronal. Prolactina y lactógeno placentario: los oligodendrocitos , . las células mielinizantes del SNC, continúan generándose por las células precursoras de oligodendrocitos (OPC) a lo largo de la vida adulta (Gensert y Goldman, 1997; Levison et al., 1999; Menn et al., 2006; Peters y Sethares, 2004) y se requieren para la reparación intrínseca de la lesión de mielina en el SNC adulto (Polito y Reynolds, 2005) . Se conocen ampliamente los acontecimientos fisiológicos que modulan la proliferación de OPC y la generación de nuevos oligodendrocitos mielinizantes en el SNC adulto . Recientemente se ha descrito que pacientes con esclerosis múltiple, una enfermedad desmiel ini zante , tienen una tasa de recaída disminuida durante el tercer trimestre de embarazo, sugiriendo que las hormonas influyen en la generación de oligodendrocitos (Confavreux et al., 1998; Voskuhl, 2003) . La remisión en pacientes con MS está correlacionada con una disminución del número y el tamaño de lesiones de la sustancia blanca activas (van alderveen et al., 1994) . De forma interesante, la gestación en ratones da como resultado un aumento en la generación de nuevos oligodendrocitos y el número de axones mielinizados dentro del SNC maternal (Gregg et al., 2007) . La prolactina, una hormona que se estanca durante la fase final de la gestación, se ha demostrado que regula la proliferación de OPC durante la gestación y promueve la reparación de la sustancia blanca en ratones hembra no sometidas a reproducción (Gregg et al., 2007) . Hay razones para creer que el lactógeno placentario humano (hPL) , una hormona que también alcanzó su máximo durante el tercer trimestre de la gestación (Selenkow et al, 1969), puede tener una influencia similar sobre la generación de oligodendrocitos . El hPL tiene varias actividades biológicas que son cualitativamente similares a la hormona de crecimiento humana (hGH) y la prolactina (Lesniak et al., 1977) y parece ser un regulador principal de la producción de IGF-1 (Handwerger et al., 1992; Zimkeller, 2000; Handwerger et al., 2000) . Tanto la hGH como la IGF-1 han demostrado ser estimuladores de la mielini zación en el SNC adulto (Carson et al., 1993; Peltwon et al., 1977) . Por lo tanto, el tratamiento de enfermedades del SNC que implican desmielini zación tales como MS, ALS, apoplejía y lesión de la médula espinal pueden beneficiarse de terapias basadas en PRL o hPL de inyección intraventricular de un vector viral que expresa rhPRL o hPL. La grelina es una hormona gástrica que se reconoció como un mediador de la liberación de la hormona del crecimiento en 1999. Véase, por ejemplo, Wu, JT et al., 2004; Ann . Surg . 239: 464. La neuroserpina es un miembro de la familia de inhibidores de serpina proteasa. En determinadas afecciones del sistema nervioso central, la neuroserpina puede desempeñar un papel neuroprotector potencialmente por el bloqueo de los efectos de tPA. Véase, por ejemplo, Galliciotti, G y Sonderegger, P. 2006, Front Biosci 11: 33; Simonin, Y et al., 2006. J Neurosci ; _ 26 : 10614; Miranda, E y Lomas, DA, 2006, Cell Mol Life Sci 63:709. La angiogenina es un miembro de la superfamilia de ARNasa. Es un constituyente normal de la circulación pero también se ha implicado como un factor de riesgo en enfermedades de neurona motora. Sin limitación a una teoría, el IGF-1 es una proteína terapéutica para el tratamiento de ALS debido a sus muchas acciones a diferentes niveles del neuroeje (véase Dore et al., Trenes Neurosci, 1997, 20: 326-331). En el cerebro: se piensa se disminuye la apoptosis tanto neuronal como glial, protege las neuronas contra toxicidad inducida por hierro, colchicina, desestabilizantes de calcio, peróxidos y citoquinas. También se piensa que modula la liberación de los neurotransmisores acetilcolina y glutamato. También se piensa que induce la expresión de neurofilamento, tubulina y proteína básica de mielina. En la médula espinal: se piensa que IGF-1 modula la actividad de ChAT activity y atenúa la pérdida del fenotipo colinérgico, mejora la ramificación de neuronas motoras, aumenta la mielinización, inhibe la desmielinización, estimula la proliferación y diferenciación de neuronas motoras a partir de células precursoras y promueve la división, maduración y crecimiento de células de Schwann. En el músculo: se piensa que IGF-1 induce la formación de agrupamientos de receptores de acetilcolina en la unión neuromuscular y aumenta la función neuromuscular y la fuerza muscular. El nivel de expresión transgénica en células eucariotas está determinado en gran medida por el promotor transcripcional dentro del cásete de expresión de transgenes. Los promotores que muestran actividad a largo plazo y son específicos de tejidos e incluso de células se usan en algunas realizaciones. Los ejemplos no limitantes de promotores incluyen, pero sin limitación, el promotor de citomegalovis (CMV) (Kaplitt et al. (1994) Nat . Genet . 8: 148-154), el promotor de CMV/p3-globina humana (Mandel et al. (1998) J. Neurosci. 18: 4271-4284), el promotor de GFAP (Xu et al. (2001) Gene Ther. 8: 1323-1332), el promotor de enolasa específica de neurona de 1,8-kb (NSE) (Klein et al. (1998) Exp. Neurol. 150: 183-194), el promotor de ß-actina de pollo (CBA) (Miyazaki (1989) Gene 79: 269-277), el promotor de ß-glucuronidasa (GUSB) (Shipley et al. (1991) Genetics 10: 1009-1018) y promotores de ubiquitina tales como los aislados a partir de ubiquitina A humana, ubiquitina B humana, ubiquitina C humana, como se describen en la Patente de Estados Unidos N° 6.667.174. Para prolongar la expresión se pueden unir de forma funcional adicionalmente otros elementos reguladores al transgén, tales como, por ejemplo el elemento post-regulador del virus de la hepatitis de la marmota (WPRE) (Donello et al. (1998) J. Virol. 72: 5085-5092) o el sitio de poliadenilación de la hormona de crecimiento bovina (BGH) . Para algunas aplicaciones de terapia génica de SNC, puede ser necesario controlar la actividad transcripcional . Con este fin, se puede obtener regulación farmacológica de la expresión génica con vectores virales incluyendo diversos elementos reguladores y promotores sensibles a fármacos como se describe, por ejemplo Haberma et al. (1998) Gene Ther. 5:1604-16011; y Ye et al. (1995) Science 283: 88-91. En determinadas realizaciones, la concentración o el titulo del vector en la composición es al menos: (a) 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25 ó 50 (xlO12 gp/ml); (b) 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25 ó 50 (xlO9 tu/ml); o (c) 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25 ó 50 (xlO10 ui/ml) . En un aspecto, el transgén codifica una molécula biológicamente activa, cuya expresión en el SNC da como resultado una corrección al menos parcial de neuropatologia y/o la estabilización de la progresión de la enfermedad. En algunas realizaciones, el producto transgénico terapéutico es una proteína IGF-1 que alivia y/o previene los síntomas de ALS. Véase Roaul et al. (2005) Nat. Med. 11 (4) : 423-428 y Ralph et al. (2005) Nat. Med. 11 (4) : 429-433. En otros aspectos, se codifican dos transgenes, por ejemplo IGF-1 y VEGF, cuya expresión en el SNC da como resultado una corrección al menos parcial de neuropatología tal como alivio y/o prevención y/o estabilización y/o ralent i zación de la progresión de los síntomas de ALS. En un aspecto, cuando se realizan estos métodos, el transgén expresa una cantidad terapéutica de factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-1), calbindina D28, parvalbúmina, HIFl-alfa, SIRT-2, VEGF, SMN-1, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar) , sonic hedgehog (shh) , eritropoyetina (EPO) , lisil oxidasa (LOX) , progranulina , prolactina, grelina, neuroserpina , angiogenina, y lactógeno placentario . Para la identificación de estructuras en el cerebro humano, véase, por ejemplo, The Human Brain: Surface, Three-Dimensional Sectional Anatomy With MRI, and Blood Supply, 2a ed., eds . Deuteron et al., Springer Vela, 1999; Atlas of the Human Brain, eds. Mai et al., Academic Press; 1997; y Co-Planar Stereotaxic Atlas of the Human Brain: 3-Dimensional Proportional System: An Approach to Cerebral Imaging, eds . Tamarack et al., Thyme Medical Pub., 1988. Para identificación de estructuras en el cerebro de ratón véase, por ejemplo, The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates, 2a ed., Academic Press, 2000. Para suministrar la solución u otra composición que contiene el vector viral específicamente a una región particular del sistema nervioso central, tal como a un ventrículo particular, por ejemplo, a los ventrículos laterales o al cuarto ventrículo del cerebro, se puede administrar por microinyección estereotáxica . Por ejemplo, el día de la cirugía, a los pacientes se les fijará el marco estereotáxico en su sitio (atornillado al cráneo) . El cerebro con la base de marco estereotáxico (compatible con MRI con marcas fiduciarias) se representará usando MRI de alta resolución. Las imágenes de MRI se transferirán después a un ordenador que procesa un software estereotáxico. Se usarán una serie de imágenes coronales, sagitales y axiales para determinar el sitio diana de la inyección de vector y la trayectoria. El software traduce directamente la trayectoria en coordenadas tridimensionales apropiadas para el marco estereotáxico. Se taladran orificios de trepanación por encima del sitio de entrada y se localiza el aparato estereotáxico con la aguja implantada a la profundidad dada. Después se inyectará la solución de vector en un vehículo farmacéuticamente aceptable. Se pueden usar vías de administración adicionales, por ejemplo, aplicación cortical superficial con visualización directa u otra aplicación no estereotáxica . Un modo de suministrar el vector viral es con el uso de una bomba. Tales bombas están disponibles en el mercado, por ejemplo, en Alzet (Cupertino, CA) o Medtronic (Minneapolis , MN) . La bomba puede ser implantable. Otro modo práctico de administrar el vector es usando un cánula o un catéter. La invención objeto proporciona métodos para modular, corregir o aumentar la función motora en un sujeto afectado con lesión neuronal motora. Solamente con el propósito de ilustración, el sujeto puede padecer una o más de esclerosis lateral amiotrófica (ALS) , atrofia muscular bulboespinal , atrofia muscular espinal, ataxia cerebelar espinal, esclerosis lateral primaria (PLS) o lesión de médula espinal traumática . Sin quedar limitada a una teoría, la patología asociada a lesión de neurona motora puede incluir la degeneración de neurona motora, gliosis, anomalías de neurofilamento, pérdida de fibras mielinizadas en tractos corticoespinales y raíces ventrales. Se reconocen dos tipos de comienzo: comienzo bulbar, que afecta a neuronas motoras de tronco encefálico (afecta a los músculos faciales, al habla y a la deglución) ; y comienzo en extremidades, que afecta a neuronas motoras de la médula espinal, se refleja por espacticidad, debilidad generalizada, atrofia muscular, parálisis e insuficiencia respiratoria. En la ALS, los sujetos tienen comienzo tanto bulbar como en extremidades. En la PLS, los sujetos tienen comienzo bulbar. La capacidad de organizar y ejecutar actos motores complejos depende de señales de las áreas motoras de la corteza cerebral, es decir, la corteza motora. Las órdenes motoras corticales descienden en dos tractos. Las fibras corticobulbares controlan los núcleos motores en el tronco encefálico que mueven los músculos faciales y las fibras cort icoespinales controlan las neuronas motoras espinales que inervan los músculos de tronco y extremidades. La corteza cerebral también influye indirectamente en la actividad motora espinal actuando sobre las vías descendentes del tronco encefálico. La corteza motora principal se sitúa a lo largo de la circunvolución precentral en el área de Broadmann (4) . Los axones de las neuronas corticales que se proyectan hacia la médula espinal confluyen en el tracto corticoespinal, un haz masivo de fibras que contienen aproximadamente 1 millón de axones . Aproximadamente un tercio de las mismas se originan en la circunvolución precentral del lóbulo frontal. Otro tercio se origina en el área 6. El resto se origina en la áreas 3, 2 y 1 en la corteza somatosensorial y regulan la transmisión de entrada aferente a través del asta dorsal. Las fibras corticoespinales confluyen con fibras corticobulbares a través de la extremidad posterior de la cápsula interna para alcanzar la parte ventral del mesencéfalo. Se separan en el puente en pequeños haces de fibras y que cuyo recorrido pasa entre los núcleos pontinos. Se reagrupan en la médula para formar la pirámide medular. Aproximadamente tres cuartos de las fibras corticoespinales atraviesan la linea media en la decusación piramidal en la unión del bulbo raquídeo y la médula espinal. Las fibras cruzadas descienden en la parte dorsal de las columnas laterales (columna dorsolateral ) de la médula espinal, formando el tracto corticoespinal lateral. Las fibras no cruzadas descienden en las columnas ventrales como el tracto corticoespinal ventral. Las divisiones lateral y ventral del tracto corticoespinal terminan en aproximadamente las mismas regiones de la sustancia gris espinal que los sistemas lateral y medial del tronco encefálico. El tracto corticoespinal lateral se proyecta principalmente hacia núcleos motores en la parte lateral del asta ventral y hacia interneuronas en la zona intermedia. El tracto corticoespinal ventral se proyecta bilateralmente hacia la columna celular ventromedial y a partes adyacentes de la zona intermedia que contiene las neuronas motoras que inervan los músculos axiales . Si se desea, la estructura del cerebro humano se puede correlacionar con estructuras similares en el cerebro de otro mamífero. Por ejemplo, la mayoría de los mamíferos, incluyendo seres humanos y roedores, muestran una organización topográfica similar de las proyecciones del complejo hipocampo-entorrinal con neuronas en la parte lateral tanto de la corteza entorrinal lateral como medial que se proyectan hacia la parte dorsal o polo septal del hipocampo, mientras que la proyección hacia el hipocampo ventral se origina principalmente . de neuronas en partes mediales de la corteza entorrinal (Principies of Neural Science, 4a ed., eds Kandel et al., McGraw-Hill, 1991; The Rat Nervous Systems, 2a ed.. ed. Paxinos, Academia Press, 1995) . Además, las células de la capa II de la corteza entorrinal se proyectan hacia la circunvolución dentada y termina en los dos tercios externos de la capa molecular de la circunvolución dentada. Los axones de las células de la capa III se proyectan bilateralmente hacia las áreas del asta de Ammon CAI y CA3 del hipocampo, terminando en la capa molecular lacunosa del estrato. En un aspecto, los métodos descritos incluyen administrar al SNC de un sujeto afectado un vector viral neurotrófico que lleva un transgén que codifica un producto terapéutico y que permite que el transgén se exprese dentro del SNC cerca del sitio de administración a un nivel suficiente para ejercer un efecto terapéutico a medida que la proteina expresada se transporta por el LCR a lo largo del SNC. Además, el vector puede comprender un polinucleótido que codifica una molécula biológicamente activa eficaz para tratar el trastorno del SNC. Tales moléculas biológicamente activas pueden comprender péptidos incluyendo, pero sin limitación, versiones nativas o mutadas de proteínas de longitud completa, versiones nativas o mutadas de fragmentos proteicos, polipéptidos sintéticos. En una realización ilustrativa, la administración se consigue por inyección directa de una solución de vector de alto título en uno o más de los espacios ventriculares del cerebro, tales como el ventrículo lateral de un sujeto o paciente. Por ejemplo, la administración es por inyección embolada directa en uno o más ventrículos de cerebro tales como los ventrículos laterales y cuarto. En algunas realizaciones, el método comprende la administración de un vector neurotrófico de alto título que lleva un transgén terapéutico de tal forma que el producto transgénico se exprese a un nivel terapéutico en un primer sitio dentro del SNC distal al sitio final de acción del producto expresado. En algunas realizaciones, el título viral de la composición es al menos: (a) 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25 ó 50 (xlO12 gp/ml); (b) 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25 ó 50 (xlO9 tu /mi); o (c) 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25 ó 50 (xlO10 ui/ml ) . En ratones experimentales, el volumen total de solución de AAV inyectada es, por ejemplo, entre 1 y 20 µ? . Para otros mamíferos, incluyendo el cerebro humano, los volúmenes y las velocidades de suministro se aumentan a escala de forma apropiada. Por ejemplo, se ha demostrado que se pueden inyectar de forma segura volúmenes de 150 µ? en el cerebro de primate (Janson et al. (2002) Hum. Gene Ther. 13:1391-1412) . El tratamiento puede consistir en una inyección única por sitio diana o se puede repetir en uno o más ventrículos. Los ventrículos adecuados incluyen los ventrículos laterales, el tercer ventrículo y el cuarto ventrículo. Se pueden usar múltiples sitios de inyección. Por ejemplo, en algunas realizaciones, además del primer sitio de administración, una composición que contiene un vector viral que lleva un transgén se administra en otro sitio que puede ser contralateral o ipsilateral al primer sitio de administración. Las inyecciones pueden ser únicas o múltiples, unilaterales o bilaterales. Se pueden producir preparaciones de AAV de alto, título usando procedimientos conocidas en la técnica, por ejemplo, como se describe en la Patente de Estados Unidos N° 5.658.776 y Viral Vectors for Gene Therapy: Methods and Protocols, Ed. Machida, Humana Press, 2003. Los siguientes ejemplos proporcionan realizaciones ilustrativas de la invención. Un especialista en la técnica reconocerá que se pueden realizar numerosas modificaciones y variaciones sin alterar el espíritu o el alcance de la presente invención. Tales modificaciones y variaciones están incluidas dentro del alcance de la invención. Los ejemplos no limitan de ningún modo la invención. EJEMPLOS Titulación de Vectores Recombinantes Se miden los títulos de vector de AAV de acuerdo con el número de copias de genoma (partículas de genoma por mililitro) . Las concentraciones de partículas genómicas se basan en Taqman® PCR del ADN de vector, como se ha descrito previamente (Clark et al. (1999) Hum. Gene Ther., 10: 1031-1039; Veldwijk et al. (2002) Mol. Ther., 6: 272-278) . Los vectores que llevan un gen marcador ensayable tal como el gen de ß-galactosidasa (Lac Z) o proteína verde fluorescente (GPF) se pueden titular un ensayo de infectividad . El AAV se introduce por transducción en células susceptibles (por ejemplo, células HeLa o COS) y se realiza un ensayo para determinar la expresión génica tal como tinción de células transducidas con vector de ß-galactosidasa con X-gal ( 5-bromo-4 -cloro-3-indolil- -D-galactopiranósido ) o microscopía de fluorescencia para células transducidas con GFP. Por ejemplo, el ensayo se realiza del siguiente modo: se siembran 4 x 104 células HeLa en cada pocilio de una placa de cultivo de 24 pocilios usando medio de cultivo normal. Después de la unión, es decir, aproximadamente 24 horas después, las células se infectan con Ad de tipo 5 con una multiplicidad de infección (MOI) de 10 y se transducen con diluciones seriadas de vector empaquetado y se incuba a 37°C.

De uno a tres días después, antes de que se observen efectos citopáticos extensos, se realiza el ensayo apropiado en las células (por ejemplo, tinción con X-gal o microscopía de fluorescencia) . Si se usa un gen indicador tal como ß-galactosidasa , las células se fijan en paraformaldehído al 2%, glutaraldehído al 0,5% y se tiñen para actividad de ß-galactosidasa usando X-gal. Se cuentan diluciones de vector que proporcionan células bien separadas. Cada célula positiva representa 1 unidad de transducción (tu) de vector. Modelo Terapéuticamente Relevante de Esclerosis Lateral Amiotrófica (ALS) La esclerosis lateral amiotrófica (ALS) es una enfermedad neurodegenerativa mortal que se caracteriza por una pérdida selectiva de neuronas motoras en la corteza, el tronco encefálico y la médula espinal. La progresión de la enfermedad puede conducir a atrofia de músculos de extremidades, axiales y respiratorios. La muerte celular de neurona motora está acompañada por gliosis reactiva, anomalías de neurofilamento y una pérdida significativa de fibras mielinizadas grandes en los tractos cort icoespinales y las raíces ventrales1"6. Aunque la etiología de ALS se comprende poco, cada vez más pruebas indican que la ALS esporádica (SALS) y familiar (FALS) comparten muchas características patológicas similares; por tanto, proporcionando una esperanza de que el estudio de cualquiera de las formas conducirá a un tratamiento común7. La FALS representa aproximadamente el 10% de casos diagnosticados, de los cuales el 20% están asociados a mutaciones dominantemente heredadas en la Cu/Zn superóxido dismutasa (SOD1)8. Los ratones transgénicos que expresan la proteína de SOD1 humana mutante (por ejemplo, ratones, S0D1G93A) resumen muchas características patológicas de ALS y son un modelo animal disponible para estudiar la ALS9. Para la SALS, se han implicado una miríada de mecanismos patológicos como la causa subyacente, incluyendo excitotoxicidad inducida por glutamato, exposición a toxinas, disfunción de proteasoma, lesión mitocondrial , desorganización del neurofilamento y pérdida de soporte neurotrófico10"11. Hasta la fecha no existe ninguna terapia eficaz para tratamiento de la ALS. Se han investigado de forma extensa factores neurotróficos tales como el factor de crecimiento de insulina I (IGF-1) por su utilidad potencial en el tratamiento de la ALS. El suministro intracraneal de vectores virales a regiones del SNC que están interconectadas con el tronco encefálico y neuronas motoras espinales por el LCR proporciona un medio para administrar terapéuticos potenciales, tales como IGF-1, a áreas a las que, de otro modo, seria difícil dirigirse por medios de la técnica anterior . Sin limitación a una teoría, el IGF-1 es una proteína terapéutica para el tratamiento de ALS debido a sus muchas acciones a diferentes niveles del neuroeje (véase Dore et al., Trenes Neurosci, 1997, 20: 326-331) . En el cerebro: se piensa se disminuye la apoptosis tanto neuronal como glial, protege las neuronas contra toxicidad inducida por hierro, colchicina, desestabilizantes de calcio, peróxidos y citoquinas. También se piensa que modula la liberación de los neurotransmisores acetilcolina y glutamato. También se piensa que induce la expresión de neurofilamento, tubulina y proteína básica de mielina. En la médula espinal: se piensa que IGF-1 modula la actividad de ChAT activity y atenúa la pérdida del fenotipo colinérgico, mejora la ramificación de neuronas motoras, aumenta la mielinización, inhibe la desmielini zación , estimula la proliferación y diferenciación de neuronas motoras a partir de células precursoras y promueve la división, maduración y crecimiento de células de Sch ann. En el músculo: se piensa que IGF-1 induce la formación de agrupamientos de receptores de acetilcolina en la unión neuromuscular y aumenta la función neuromuscular y la fuerza muscular. En los siguientes experimentos se utilizó la forma IGF-lEa de la proteina. Ejemplo 1: Suministro Intracerebrovent ricular de AAV4-IGF-1 Se realizaron experimentos para determinar si el suministro int raventricular de AAV4-IGF-1 condujo a (1) extensión significativa de la esperanza de vida; (2) rendimiento mejorado en tareas de rotarod y fuerza de agarre; (3) neuropatologia disminuida (es decir, alivio de gliosis y supervivencia de neuronas motoras mejorada) en el tronco encefálico y la médula espinal. Se trataron ratones SOD1 sintomáticos (es decir, de 90 días de edad) con AAV4-IGF-1 o vector de control AAV4-Bgal (Bgal también se denomina Lac Z) . Para cada ratón, se inyectaron vectores tanto en los ventrículos laterales (A-P: -0,3 del bregma, M-L: -1,0 del bregma, D-V: -2,0 de la duramadre, barra de incisión: 0,0) como en el 4o (A-P: -5,90 del bregma, M-L: 0,0 del bregma, D-V: -2,9 de la duramadre, barra de incisión: 0,0) usando un marco estereotáxico . Los vectores se suministraron con una jeringa de Hamilton de 10 µ? a una velocidad de 0,5 µ?/minuto para un total de 1,80 x 1010 copias de genoma por ventrículo. El volumen de inyección final para cada vector fue de 10 µ? /ventrículo . A los 110 días de edad o en la etapa final, se sacrificaron 4 ratones de cada grupo de tratamiento para el análisis histológico (es decir, tinción de GFAP (proteína ácida fibrilar glial) y recuentos de MN en el tronco encefálico y la médula espinal) . Los criterios de valoración que se evaluaron incluyen análisis se supervivencia, rotarod, ensayos de fuerza de agarre de extremidad posterior y extremidad anterior y masa corporal . El ensayo de la función motora usando un dispositivo rotarod y un medidor de fuerza de agarre (Columbus Instruments, Columbus, OH) puede comenzar a los 70 días de edad. Cada sesión semanal puede consistir en tres experimentos en el rotarod de aceleración elevada comenzando con 5 rpm/min. El tiempo que cada ratón permanece sobre el rodillo se puede registrar automáticamente. El ensayo del medidor de fuerza de agarre se puede realizar permitiendo que los animales se agarren a una plataforma seguido de una acción de tirar del animal hasta que suelta la plataforma: la medición de fuerza se registra en cuatro experimentos separados. Se define el comienzo de la debilidad relacionada con la enfermedad cuando una extremidad posterior muestra debilidad muscular y arrastre de extremidad sobre el rotarod, como se evalúa por dos observadores independientes. Para determinar la mortalidad de un modo fiable y humano, se usó un criterio de valoración artificial definido por la incapacidad de los ratones de enderezarse por si mismo 30 segundos después de haberse colocado sobre sus costados. El suministro intracerebroventricular de AAV4-IGF-1 dio como resultado una extensión significativa de la esperanza de vida de los ratones SOD1 en comparación con ratones que recibieron AAV4-Bgal como un vector de control. Los ratones que recibían AAV4-IGF-1 tenían un tiempo de supervivencia medio de 141,5 días en comparación con el tiempo de supervivencia medio de 121 días de ratones tratados con AAV4-Bgal (Figura 1) . Los ratones SOD1 tratados con AAV4-IGF-1 tenían resultados funcionales mejorados medidos por el ensayo de rotarod, fuerza de agarre de extremidades anteriores y fuerza de agar de extremidades posteriores en comparación con ratones tratados con control. Los resultados se muestran en la Figuras 1-5. La evaluación histológica de GFAP, que es un marcador de gliosis y una característica patológica de la ALS, demostró que la astrogliosis disminuyó significativamente en ratones tratados con AAV4-IGF-1 en comparación con ratones de control tratados con AAV4-Bgal. Esta disminución se observó tanto en la región del tronco encefálico del SNC (por ejemplo, núcleo trigeminal, núcleo facial, núcleo hipogloso; Figura 6) como en la médula espinal ventral (por ejemplo, cervical, toráfica, lumbar, sacra; Figura 7) . La evaluación histológica de niveles de nitrotirosina , que es un marcador de peroxinitrito y un marcador patológico asociado a ALS, demostró que los niveles de nitrotirosina disminuyeron significativamente en ratones tratados con AAV4-IGF-1 en comparación con ratones de control tratados con AAV4-Bgal. Esta disminución de los niveles de nitrotirosina se observó a lo largo de la médula espinal, por ejemplo, regiones cervical, toráfica, lumbar y sacra (Figura 8) . Ejemplo 2: Suministro Intracererbrovent ricular de AAV4-IGF-1 y AAV4-GFP Se trataron ratones SOD1 sintomáticos (es decir, de 88-90 días de edad) con vector AAV4-IGF-1 o AAV4-GFP por inyección intracerebrovent ricular del vector tanto en el ventrículo lateral como el 4o. Los ratones recibieron una dosis de 210 gc/ventrículo . Se utilizó proteína verde fluorescente como una proteína de control, que permitió la visualización de la expresión mediada por la inyección de los vectores de AAV. Los criterios de valoración evaluados incluyeron supervivencia, ensayo de rotarod, fuerza de agarre (extremidad posterior y extremidad anterior) , recuentos de células neuronales motoras, distribución de proteína GFP, niveles de proteína ácida fibrilar glial (GFAP) , niveles de nitrotirosina y RT-PCR para medir la distribución viral dentro del SNC. A la edad de 110 días o en la etapa final se sacrificaron ratones de cada grupo de tratamiento para un análisis adicional. Se evaluaron histológicamente los niveles de proteína ácida fibrilar glial (GFAP) . La GFAP es un marcador de gliosis, que es una característica patológica de la ALS. Los niveles de nitrotirosina se evaluaron histológicamente; la nitrotirosina es un marcador de peroxinitrito. El suministro intracerebroventricular de AAV4-IGF-1 dio como resultado una extensión significativa de la esperanza de vida en ratones SOD1 en comparación con ratones que recibían AAV4-GFP como un vector de control. Los ratones SOD1 tratados con AAV 4-IGF-l tenían resultados funcionales mejorados como se midió por ensayo de rotarod, fuerza de agarre de extremidades anteriores y fuerza de agarre de extremidades posteriores en comparación con ratones tratados con control. La visualización de la expresión de proteína verde fluorescente (GFP) en ratones que se habían tratado con AAV4 -GFP indicó que la GFP se distribuía a lo largo de la capa celular ependimaria del sistema ventricular. Por ejemplo, la GFP se visualizó en los ventrículos laterales anteriores, los ventrículos laterales, el tercer ventrículo y el cuarto ventrículo (Figura 9) . La GFP también se visualizó en el plexo coloideo del sistema ventricular y la capa de células ependimarias del canal central de la médula espinal (incluyendo las regiones cervical, toráfica y lumbar) (Figura 10) . La RT-PCR para el vector de AAV4-IGF-1 demostró que el vector estaba presente en la corteza, el tronco encefálico y la médula espinal después del suministro intraventricular (Figura 11A) . Ejemplo 3: Suministro Intracerebroventricular de AAV4-VEGF y AAV4-GFP Se trataron ratones SOD1 sintomáticos (es decir, de 88-90 días de edad) con vector AAV4-VEGF-165 o AAV4-GFP por inyección intracerebroventricular del vector tanto en el ventrículo lateral como en el 4o. Los ratones recibieron una dosis de 210 gc/ventrículo . Se utilizó proteína verde fluorescente como una proteína de control, que permitió la visualización de expresión mediada por la inyección de los vectores de AAV. Los criterios de valoración evaluados incluyeron supervivencia, ensayo de rotarod, fuerza de agarre (extremidad posterior y extremidad anterior) y RT-PCR para medir la distribución viral dentro del SNC . El suministro int racerebroventricular de AVV4-VEGF dio como resultado una extensión significativa de la esperanza de vida de ratones S0D1 en comparación con ratones que recibían AAV4-GFP, como un vector de control. Los tiempos de supervivencia medios para ratones que recibían AAV4-VEGF eran 140 días mientras que los tiempos de supervivencia medios para ratones que recibían AVV4-GFP eran de 120 días (Figura 12) . Los ratones SOD1 tratados con AAV4-VEGF tenían resultados funcionales mejorados medidos por ensayo de Rotarod (Figura 13) , fuerza de agarre de extremidad anterior y fuerza de agarre de extremidad posterior (Figura 13) en comparación con ratones tratados con control. El suministro intraventricular de AAV4-VEGF no influyó en la masa corporal en ratones SOD1. La RT-PCR para el vector AAV4-IGF-1 demostró que el vector estaba presente en la corteza, el tronco encefálico y la médula espinal después del suministro intraventricular (Figura 11B) . La memoria descriptiva se comprende más extensamente a la luz de las descripciones de las referencias citadas dentro de la memoria descriptiva. Las realizaciones dentro de la memoria descriptiva proporcionan una ilustración de realizaciones de la invención y no se deben considerar limitantes del alcance de la invención. El especialista en la técnica reconoce fácilmente que muchas otras realizaciones están incluidas en la invención. Todas las publicaciones, patentes y secuencias biológicas citadas en esta descripción se incorporan como referencia en su totalidad. En el caso de que el material incorporado como referencia contradiga o sea incoherente con la presente memoria descriptiva, la presente memoria descriptiva prevalecerá sobre cualquier material de ese tipo. La citación de cualquier referencia en este documento no es una admisión de que tales referencias sean técnica anterior de la presente invención. A menos que se indique de otro modo, todos los números que expresan cantidades de ingredientes, cultivo celular, condiciones de tratamiento, etc., usados en la memoria descriptiva, incluyendo las reivindicaciones, se tienen que considerar como modificados en todos los casos por el término "aproximadamente". En consecuencia, a menos que indique de otro modo lo contrario, los parámetros numéricos son aproximaciones y dependen en gran medida de las propiedades deseadas que se pretenden obtener por la presente invención.

A menos que se indique de otro modo, la expresión "al menos" que precede a una serie de elementos se tiene que considerar que se refiere a cada elemento en la serie. Los especialistas en la técnica entenderán o serán capaces de establecer usando no más que una experimentación de rutin, muchos equivalentes de las realizaciones especificas de la invención descrita en este documento. Se tiene por objeto incluir tales equivalentes en las siguientes reivindicaciones. Tabla 1: Pares de genes potenciales para el uso en un vector viral recombinante Gen IGF- Calbindin Parvalbúmi HIFl- SIRT- CNTF 1 a D28 na alfa 2 IGF-1 X X X X X Calbindina X X X X X D28 Parvalbúmina X X X X X HIFl-alfa X X X X X SIRT-2 X X X X X VEGF X X X X X X SMN-1 X X X X X X SMN-2 X X X X X X CNTF X X x : X X shh X X X X X X EPO X X X X X X LOX X X X X X X Progranulina X X X X X X Prolactina X X X X X X Lactógeno X X X X X X placentario Grelina X X X X X X Angiogenina X X X X X X Neuroserpina X X X X X X Tabla 2: Pares de gene potenciales para el uso en un vector viral recombinante Gen Progranul Prolact Lactógeno Greli Angiogeni ina ina placentar na na io IGF-1 X X X X X Calbindina X X X X X D28 Parvalbúmin X X X X X a HIFl-alfa X X X X X SIRT-2 X X X X X VEGF X X X X X SMN-1 X X X X X SMN-2 X X X X X CNTF X X X X X shh X X X X X EPO X X X X X LOX X X X X X Progranulin X X X X a Prolactina X X X X Lactógeno X X X X placentario Grelina X X X X Angiogenina X X X X Neuroserpin X X X X X a Tabla 3: Pares de genes potenciales para el uso en un vector viral recombinante Gen shh EPO LOX VEGF SMN-1 SMN-2 Neuroserpi na IGF-1 X X X X X X X Calbindina D28 X X X X X X X Parvalbúmina X X X X X X X HIFl-alfa X X X X X X X SIRT-2 X X X X X X X VEGF X X X X X X SMN-1 X X X X X X SMN-2 X X X X X X CNTF X X X X X X X shh X X X X X X EPO X X X X X X LOX X X X X X X Progranulina X X X X X X X Prolactina X X X X X X X Lactógeno X X X X X X X placentario Grelina X X X X X X X Angiogenina X X X X X X X Neuroserpina X X X X X X Referencias 1. 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Claims

REIVINDICACIONES 1. Un método para suministrar un producto transgénico a la médula espinal en un sujeto, que comprende: administrar un vector viral neurotrófico recombinante que comprende dicho transgén en al menos un ventrículo del cerebro, por lo que dicho transgén se expresa y el producto proteico expresado se suministra a la médula espinal. 2. El método de la reivindicación 1, en el que el vector viral es un vector AAV. 3. El método de la reivindicación 1, en el que el vector viral es AAV4. 4. El método de la reivindicación 1, en el que el transgén es IGF-1. 5. El método de la reivindicación 1, en el que el vector viral se administra por inyección directa en el interior de un ventrículo del cerebro. 6. El método de la reivindicación 1, en el que el vector viral se administra por inyección directa en el interior de un ventrículo lateral del cerebro. 7. El método de la reivindicación 1, en el que el vector viral se administra por inyección directa en el interior del cuarto ventrículo del cerebro. 8. El método de la reivindicación 1, en el que el sujeto tiene esclerosis lateral amiotrófica. 9. Un método para suministrar IGF-1 a la médula espinal en un sujeto que tiene esclerosis lateral amiotrófica, que comprende : administrar un vector viral de AAV4 recombinante que comprende un transgén que codifica IGF-1 en al menos un ventrículo del cerebro seleccionado del grupo que consiste en un ventrículo lateral y el cuarto ventrículo, por lo que dicho transgén se expresa y se suministra IGF-1 a la médula espinal . 10. Un método para tratar un trastorno de neurona motora en un sujeto, que comprende administrar un vector viral neurotrófico recombinante que comprende un transgén terapéutico en al menos un ventrículo del cerebro, por lo que dicho transgén se expresa en una cantidad terapéuticamente eficaz. 11. El método de la reivindicación 10, en el que el vector viral es un vector de AAV. 12. El método de la reivindicación 10, en el que el vector viral es AAV4. 13. El método de la reivindicación 10, en el que el transgén es IGF-1. 14. El método de la reivindicación 10, en el que el vector viral se administra por inyección directa en el interior de un ventrículo del cerebro. 15. El método de la reivindicación 10, en el que el vector viral se administra por inyección directa en el interior de un ventrículo lateral del cerebro. 16. El método de la reivindicación 10, en el que el vector viral se administra por inyección directa en el interior del cuarto ventrículo del cerebro. 17. El método de la reivindicación 10, en el que el sujeto tiene esclerosis lateral amiotrófica. 18. Un método para tratar esclerosis lateral amiotrófica en un sujeto, que comprende administrar un vector viral de AAV4 recombinante que comprende un transgén de IGF-1 en al menos un ventrículo del cerebro seleccionado del grupo que consiste en un ventrículo lateral y el cuarto ventrículo, por lo que dicho transgén se expresa en una cantidad terapéuticamente eficaz . 19. El método de la reivindicación 1 ó 10, en el que dicho transgén se selecciona del grupo que consiste en factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-1), calbindina D28, parvalbúmina, HIFl-alfa, SIRT-2, VEGF, SMN-1, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar), sonic hedgehog (shh), eritropoyetina (EPO) , lixil oxidasa (LOX) , progranulina, prolactina, grelina, neuroserpina , angiogenina y lactógeno placentario . 20. El método de la reivindicación 1 ó 10, en el que el sujeto tiene una afección seleccionada del grupo que consiste en esclerosis lateral amiotrófica (ALS) , atrofia muscular espinobulbar , ataxia espinocerebelar , atrofia muscular espinal y lesión traumática de la médula espinal. 21. El método de la reivindicación 1 ó 10, en el que dicho sujeto es un mamífero. 22. El método de la reivindicación 21, en el que dicho mamífero se selecciona del grupo que consiste en un roedor, un murino, un simio y un ser humano. 23. El método de la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho sujeto es un paciente humano. 24. El método de la reivindicación 23, en el que dicho paciente humano subexpresa una cantidad eficaz de una proteína seleccionada del grupo que consiste en factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-1), calbindina D28, parvalbúmina , HIFl-alfa, sonic hedgehog (shh), eritropoyetina (EPO), SIRT-2, VEGF, SMN-1, SMN-2 y CNTF (factor neurotrófico ciliar) . 25. El método de la reivindicación 1 ó 10, en el que dicho transgén expresa una cantidad terapéutica de una proteina seleccionada del grupo que consiste en factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-1) , calbindina D28, parvalbúmina , HIF1-alfa, SIRT-2, VEGF, S N-1, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar) , sonic hedgehog (shh) , eritropoyet ina (EPO) , lixil oxidasa (LOX) , progranulina , prolactina, grelina, neuroserpina , angiogenina y lactógeno placentario. 26. Un ensayo para detectar pérdida de función del SNC en un sujeto que comprende: administrar en un ventrículo del cerebro del sujeto una cantidad diagnósticamente eficaz de un vector viral neurotrófico que contiene un transgén que codifica un marcador; y explorar para determinar la presencia de dicho marcador en el SNC de dicho sujeto. 28. El ensayo de la reivindicación 26, en el que dicho transgén marcador es proteína verde fluorescente. 29. El método de la reivindicación 1, 9, 10 ó 18 en el que el producto proteico del transgén esta modificado con TA . 30. El método de la reivindicación 28, en el que el producto proteico del transgén comprende un motivo de 11 aminoácidos del dominio de transducción de proteina de la proteina TAT del VIH. 31. El método de la reivindicación 1 ó 10, en el que dicho transgén expresa una cantidad terapéutica de al menos dos proteínas seleccionadas del grupo que consiste en factor de crecimiento de insulina 1 (IGF-1), calbindina D28, parvalbúmina, HIFl-alfa, SIRT-2, VEGF, SMN-1, SMN-2, CNTF (factor neurotrófico ciliar), sonic hedgehog (shh), eritropoyetina (EPO) , lixil oxidasa (LOX) , progranulina , prolactina, grelina, neuroserpina , ¦ angiogenina y lactógeno placentario.