MX2008001399A - Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c - Google Patents

Abstract

Inhibidores de la replicación del HCV de fórmula (I) (ver fórmula (I)) ylos N-óxidos, sales y estereoisómeros de los mismos, donde X es N, CH y cuando X posee un doble enlace es C;R1 es -OR5,-NH-SO2R6, R2 es hidrógeno, ycuando X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C1-6, R3 es hidrógeno, alquilo de C1-6, alcoxi de C1-6- alquilo de C1-6, o cicloalquilo de C3-7;R4 es isoquinolinilo sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes cada uno seleccionado de manera independiente de alquilo de C1-6, alcoxi de C1-6, hidroxi, halo, polihaloalquilo C1-6, polihaloalcoxi de C1-6, amino, mono- o di-alquilamino de C1-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C1-6, alquilcarbonil de C1-6-amino, arilo y Het;n es 3, 4, 5, o 6;cada línea punteada (representada por) representa un doble enlace opcional;R5 es hidrógeno;arilo, Het;cicloalquilo de C3-7 sustituido opcionalmente con alquilo de C1-6;o alquilo de C1-6 sustituido opcionalmente con cicloalquilo de C3-7, arilo o con Het, R6 es arilo;Het, cicloalquilo de C3-7 sustituido opcionalmente con alquilo de C1-6;o alquilo de C1-6 sustituido opcionalmente con cicloalquilo C3-7 arilo o con Het;cada arilo es fenilo sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes;y cada Het es un anillo heterocíclico de 5 o 6 miembros saturado, parcialmente no saturado o completamente no saturado que contiene 1 a 4 heteroátomos, cada uno seleccionado de manera independiente de nitrógeno, oxígeno y azufre y estando sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes;composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos (I) y procedimientos para preparar los compuestos (I);también se proporcionan combinaciones biodisponibles de los inhibidoers de HCV de fórmula (I) con ritonavir.

Description

INHIBIDORES MACROCICLICOS DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C MEMORIA DESCRIPTIVA La presente invención se refiere a compuestos macrocíclicos que poseen actividad inhibidora sobre la replicación del virus de la hepatitis C (HCV -por sus siglas en inglés). Además se refiere a composiciones que comprenden estos compuestos como componentes activos, al igual que procedimientos para preparar estos compuestos y composiciones. El virus de la hepatitis C es la causa principal de la enfermedad hepática crónica a nivel mundial y se ha convertido en un foco de considerable investigación médica. El HCV es un miembro de la familia Flaviviridae de virus del género hepacivirus, y está estrechamente relacionado con el género flavivirus, que incluye una cantidad de virus implicados en enfermedades humanas, tales como el virus del dengue y el virus de la fiebre amarilla y con la familia de pestevirus animales, que incluye el virus bovino de la diarrea viral (BVDV -por sus siglas en inglés). El HCV es un virus de sentido positivo, de ARN de hebra única, con un genoma de alrededor de 9,600 bases. El genoma comprende las dos regiones no traducidas 5' y 3' que adoptan estructuras secundarias de ARN y un marco de lectura abierto central que codifica una poliproteína única de alrededor de 3,010-3,030 aminoácidos. La poliproteína codifica diez productos génicos que se generan a partir de la poliproteína precursora mediante una serie organizada de rupturas endoproteolíticas co- y post-traduccionales mediadas por proteasas del huésped y virales. Las proteínas estructurales virales incluyen la proteína de nucleocápside central y dos glicoproteínas de envoltura E1 y E2. Las proteínas no estructurales (NS) codifican algunas funciones enzimáticas virales esenciales (helicasa, polimerasa, proteasa), al igual que proteínas de función desconocida. La replicación del genoma viral es mediada por una ARN polimerasa ARN-dependiente, codificada por la proteína no estructural 5b (NS5B). Además de las funciones de polimerasa, se demostró que las funciones de helicasa y proteasa virales, ambas codificadas en la proteína NS3 bifuncional, son esenciales para la replicación del ARN de HCV. Además de la serina proteasa NS3, el HCV también codifica una metaloproteinasa en la región NS2. Luego de la infección aguda inicial, una mayoría de individuos infectados desarrollaron la hepatitis crónica debido a que el HCV se replica preferentemente en hepatocitos, pero no es directamente citopático. En especial, la falta de una respuesta vigorosa de los linfocitos T y la elevada tendencia del virus a mutar parecen promover un grado elevado de infección crónica. La hepatitis crónica puede progresar a la fibrosis hepática produciendo cirrosis, enfermedad hepática terminal y HCC (carcinoma hepatocelular), convirtiéndola en la principal causa de transplante de hígado. Existen 6 genotipos principales del HCV y más de 50 subtipos, que se distribuyen geográficamente de manera diferente. El HCV de tipo 1 es el genotipo predominante en Europa y en Estados Unidos. La heterogeneidad genética extensiva del HCV posee un diagnóstico importante e implicaciones clínicas, que posiblemente expliquen las dificultades para el desarrollo de vacunas y la falta de respuesta a la terapia. La transmisión del HCV se puede producir a través del contacto con sangre contaminada o productos sanguíneos, por ejemplo a continuación de la transfusión de sangre o uso de fármacos intravenosos. La introducción de pruebas diagnósticas usadas en la evaluación de sangre produjo una tendencia descendente en la incidencia del HCV en la post-transfusión. Sin embargo, dado el lento avance a la enfermedad hepática terminal, las infecciones existentes continuarán presentando una carga médica y económica seria durante décadas. Las terapias actuales contra el HCV se basan en interferón-alfa (IFN-a) (pegilado) en combinación con ribavirin. Esta terapia de combinación produce una respuesta virológica sostenida en más del 40% de los pacientes infectados por virus del genotipo 1 y alrededor del 80% de aquellos infectados con los genotipos 2 y 3. Además de la eficacia limitada sobre el HCV de tipo 1 , esta terapia de combinación posee efectos secundarios y es escasamente tolerada en muchos pacientes. La mayoría de los efectos secundarios incluyen síntomas similares a la influenza, anormalidades hematológicas y síntomas neuropsiquíatricos. Por lo tanto, existe la necesidad de tratamientos más efectivos, convenientes y mejor tolerados. Recientemente, dos inhibidores de proteasa del HCV péptidomiméticos ganaron la atención como candidatos clínicos, a saber, BILN-2061 descrito en WO00/59929 y VX-950 descrito en WO03/87092. Una cantidad de inhibidores de proteasa del HCV similares también han sido descritos en la literatura académica y de patentes. Ya es evidente que la administración prolongada de BILN-2061 o VX-950 selecciona mutantes del HCV que son resistentes al respectivo fármaco, denominados mutantes de escape del fármaco. Estos mutantes de escape del fármaco poseen mutaciones características en el genoma de la proteasa del HCV, notablemente D168V, D168A y/o A156S. Por consiguiente, se requieren fármacos adicionales con diferentes patrones de resistencia para proporcionar a los pacientes que no mejoran opciones de tratamiento y es probable que la terapia de combinación con múltiples fármacos sea la norma en el futuro, aun para el tratamiento de primera línea. La experiencia con fármacos contra el VIH e inhibidores de proteasa del VIH en particular, ha enfatizado que la farmacocinética sub-óptima y los regímenes de dosificación compleja rápidamente tienen como consecuencia fracasos involuntarios de cumplimiento. Esto a su vez significa que la concentración mínima de 24 horas (concentración plasmática mínima) para los respectivos fármacos en un régimen para VIH con frecuencia disminuye por debajo del umbral de IC90 o ED90 durante gran parte del día. Se considera que un nivel mínimo de 24 horas de al menos la IC50, y de manera más realista, la ICgo o ED90, es esencial para disminuir el desarrollo de los mutantes de escape del fármaco. Alcanzar la farmacocinética y el metabolismo del fármaco necesarios para permitir tales niveles mínimos proporciona un desafío riguroso para el diseño de los fármacos. La fuerte naturaleza péptidomimética de los inhibidores de proteasa de HCV de la técnica anterior, con múltiples enlaces peptídicos, representa obstáculos farmacocinéticas para regímenes de dosificación efectivos. Existe la necesidad de inhibidores de HCV que puedan superar las desventajas de la terapia del HCV actual, tales como efectos secundarios, eficacia limitada, el surgimiento de resistencia y fallas de cumplimiento. WO04/094452 se refiere a inhibidores péptidos macrocíclicos de isoquinolina del HCV. También se describe las composiciones que comprenden los compuestos y métodos para el uso de los compuestos para inhibir el HCV. WO05/010029 describe inhibidores de serina proteasa aza-péptidos macrocíclicos de la hepatitis C; composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos mencionados anteriormente para su administración a un sujeto que padece la infección del HCV; y métodos para el tratamiento de la infección del HCV en un sujeto mediante la administración de una composición farmacéutica que comprende los compuestos de la presente invención. La presente invención se refiere a inhibidores del HCV que son superiores en una o más de las siguientes propiedades farmacológicas relacionadas, es decir potencia, citotoxicidad reducida, farmacocinética mejorada, perfil de resistencia mejorado, dosificación aceptable y carga de la pastilla.

Además, los compuestos de la presente invención poseen peso molecular relativamente bajo y son fáciles de sintetizar, a partir de materiales de partida que se encuentran disponibles comercialmente o que se encuentran fácilmente disponibles a través de procedimientos de síntesis conocidos en la técnica. La presente invención se refiere a inhibidores de la replicación del HCV, que se pueden representar mediante la Fórmula (I): y los ?/-óxidos, sales y estereoisómeros de los mismos, donde X es N, CH y cuando X posee un doble enlace es C; R1 es -OR5, -NH-SO2R6; R2 es hidrógeno, y cuando X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C-i-ß; R3 es hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6-alquilo de C-?-6, o cicloalquilo de C3-7; R4 es isoquinolinilo sustituido opcionalmente por uno, dos o tres sustituyentes cada uno seleccionado de manera independiente de alquilo de C-?-6> alcoxi de C?-6, hidroxi, halo, polihalo-alquilo de C?-6, polihalo-alcoxi de C-i. 6) amino, mono- o di-alquilamino de C?-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C?.6, alquilcarbonil de C?-6-am¡no, arilo, y Het; n es 3, 4, 5, o 6; donde cada linea punteada (representada por ) representa un doble enlace opcional; R5 es hidrógeno; arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido opcionalmente por alquilo de C?-6; o de alquilo C?-6 sustituido opcionalmente por cicloalquilo de C3- , arilo o con Het; R6 es arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido opcionalmente por alquilo de C-i^; o alquilo de C?-6 sustituido opcionalmente por cicloalquilo de C3-7, arilo o con Het; cada arilo es un grupo o parte de un grupo es fenilo sustituido opcionalmente por uno, dos o tres sustituyentes seleccionados de halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6, alcoxi de C-?-6-alquilo de C?-6, alquilcarbonilo de C?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C1-6, azido, mercapto, polihaloalquilo de C-?-6, polihalo-alcoxi de C1-6, cicloalquilo de C3_7, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C-?-6, 4-alquilcarbonil-de C?-6-piperazinilo, y morfolinilo; y donde los grupos morfolinilo y piperidilo se pueden sustituir opcionalmente por uno o dos radicales alquilo de C1-6; y cada Het como un grupo o parte de un grupo es un anillo heterocíclico saturado, parcialmente no saturado o completamente no saturado, de 5 o 6 miembros que contiene 1 a 4 heteroátomos cada uno seleccionado de manera independiente de nitrógeno, oxígeno y azufre, dicho anillo heterocíclico siendo sustituido opcionalmente por uno, dos o tres sustituyentes cada uno seleccionado de manera independiente del grupo que consiste en halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C1-6, alcoxi de C?-6-alquilo de C?-6, alquilcarbonilo de C?-6, amino, mono- o dialquilamino de azido, mercapto, polihaloalquilo de C?.6, polihalo-alcoxi de C?-6, cicloalquilo de C3-7, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquil de C?-6-piperazinilo, 4- alquilcarbonil- de piperazinilo, y morfolinilo y donde los grupos morfolinilo y piperidilo puede ser sustituidos opcionalmente por uno o dos radicales alquilo de C-?-6. La invención además se refiere a métodos para la preparación de los compuestos de fórmula (I), los ?/-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas isoméricas estereoquímicamente de los mismos, sus intermediarios y el uso de los intermediarios en la preparación de los compuestos de fórmula (I). La invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) per se, los ?/-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas isoméricas estereoquímicamente de los mismos, para usar como un medicamento. La invención además se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos mencionados anteriormente para su administración a un sujeto que padece la infección del HCV. Las composiciones farmacéuticas pueden comprender combinaciones de los compuestos mencionados anteriormente con otros agentes anti-HCV. La invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), o un N-óxido, sal de adición, amina cuaternaria, complejo metálico, o formas isoméricas estereoquímicamente de los mismos, para la fabricación de un medicamento para inhibir la replicación del HCV. O la invención se refiere a un método para inhibir la replicación del HCV en un animal de sangre caliente dicho método comprende la administración de una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I), o un ?/-óxido, sal de adición, amina cuaternaria, complejo metálico, o formas isoméricas estereoquímicamente de los mismos. Según se utiliza en lo sucesivo y anteriormente en la presente, las siguientes definiciones se aplican salvo que se especifique de otra manera. El término halo es genérico para fluoro, cloro, bromo y yodo. El término "polihalo-alquilo de C-?.6" como un grupo o parte de un grupo, por ejemplo en polihalo-alcoxi de C?_6, se define como mono- o polihalo alquilo de C-?-6 sustituido, en especial alquilo de C-?-6 sustituido por hasta uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más halo átomos, tales como metilo o etilo por uno o más átomos fluoro, por ejemplo, difluorometilo, trifluorometilo, trifluoro-etilo. Se prefiere trifluorometilo. También se incluyen los grupos perfluoroalquilo de C?-6, que son grupos alquilo de C-?-6 donde todos los átomos de hidrógeno se reemplazan por átomos fluoro, por ejemplo pentafluoroetilo. En el caso que se una más de un átomo halógeno a un grupo alquilo en la definición de polihalo-alquilo de C?.6, los átomos de halógeno pueden ser iguales o diferentes. Según se usa en la presente, "alquilo de C1- " como un grupo o parte de un grupo define radicales hidrocarbonados saturados de cadena recta o ramificada que poseen de 1 a 4 átomos de carbono, tales como por ejemplo metilo, etilo, 1-propilo, 2-propilo, 1-butilo, 2-butilo, 2-metil-1-propilo; "alquilo de C?-6" comprende radicales alquilo de C- y los homólogos superiores de los mismos que poseen 5 o 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo, 1 -pentilo, 2-pentilo, 3-pentilo, 1 -hexilo, 2-hexilo, 2-metil-1 -butilo, 2-metil-1 -pentilo, 2-etil-1 -butilo, 3-metil-2-pentilo y los similares. Es de interés entre los alquilo de C?_6 el alquilo de C- . El término "alquenilo de C2-6" como un grupo o parte de un grupo define radicales hidrocarbonados de cadena recta y ramificada que poseen enlaces saturados de carbono-carbono y al menos un enlace doble y que poseen de 2 a 6 átomos de carbono, tales como, por ejemplo, etenilo (o vinilo), 1 -propenilo, 2-propenilo (o alilo), 1 -butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-metil-2-propenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 2-metil-2-butenilo, 2-metil-2-pentenilo y los similares. Es de interés entre los alquenilos de C2-6 el alquenilo de C2-4, El término "alquinilo de C2-6" como un grupo o parte de un grupo define radicales hidrocarbonados de cadena recta y ramificada que poseen enlaces saturados de carbono-carbono y al menos un enlace triple y que poseen de 2 a 6 átomos de carbono, tales como, por ejemplo, etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 3-butinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo y los similares. Es de interés entre los alquinilos de C2-6 el alquinilo de C2- . El cicloalquilo de C3.7 es genérico para ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexil y cicioheptilo. Alcanodiilo de C,_6 define radicales hidrocarbonados de cadena bivalente recta y ramificada que poseen de 1 a 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo, metileno, etileno, 1 ,3-propanodiilo, 1 ,4-butanodiilo, 1 ,2-propanodiilo, 2,3-butanodiilo, 1 ,5-pentanodiilo, 1 ,6-hexanodiilo y los similares. Es de interés entre los alcanodiilos de C,_6 el alcanodiilo de C,^. Alcoxi de C?-6 significa alquiloxi de C1-6 donde alquilo de C1-6 es según se definió anteriormente. Según se usa en la presente, anteriormente, el término (=0) o oxo forma un resto carbonilo cuando se une a un átomo de carbono, un resto sulfóxido cuando se une a un átomo de azufre y un resto sulfonilo cuando dos de dichos términos se unen a un átomo de azufre. Siempre que un anillo o un sistema anular se sustituye por un grupo oxo, el átomo de carbono al cual el oxo se encuentra unido es un carbono saturado. El radical Het es un heterociclo, según se especifica en la presente memoria y reivindicaciones. Ejemplos de Het comprenden, por ejemplo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazinolilo, isotiazinolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo (including 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo), tetrazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, triazinilo y los similares. Son de interés entre los radicales Het aquellos que son no saturados, en especial aquellos que poseen un carácter aromático. De interés adicional son aquellos radicales Het que poseen uno o dos nitrógenos. Cada uno de los radicales Het mencionados en este y en los siguientes párrafos puede ser sustituido opcionalmente por la cantidad y tipo de sustituyentes mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de compuestos de fórmula (I). Algunos de los radicales Het mencionados en este párrafo y en los siguientes pueden ser sustituidos por uno, dos o tres sustituyentes hidroxi. Tales anillos hidroxi susitutidos pueden producirse como sus formas tautoméricas que poseen grupos ceto. Por ejemplo, un resto de 3-hidroxipiridazina puede presentarse en su forma tautomérica, 2/-/-piridazin-3-ona. Cuando Het es piperazinilo, preferentemente se sustituye en la posición 4 mediante un sustituyente unido al nitrógeno 4 con un átomo de carbono, por ejemplo 4-alquilo de C?-6, 4-polihalo-alquilo de C?-6, alcoxi de de C?-6, alquilcarbonilo de C1-6, cicloalquilo de C3-7. Los radicales Het de interés, comprenden, por ejemplo pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo (incluyendo 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo), tetrazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, triazinilo, o cualquiera de tales heterociclos condensados con un anillo de benceno, tal como indolilo, indazolilo (en especial 1 H-indazolilo), indolinilo, quinolinilo, tetrahidroquinolinilo (en especial 1 ,2,3,4-tetrahidroquinolinilo), isoquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo (en especial 1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo), quinazolinilo, ftalazinilo, benzimidazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo, benzoxadiazolilo, benzotiadiazolilo, benzofuranilo, benzotienilo. Los radicales Het pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, piperazinilo sustituido en la posición 4 se unen preferebntemente mediante su átomo de nitrógeno (es decir 1 -pirrolidinilo, 1-piperidinilo, 4-tiomorfolinilo, 4-morfolinilo, 1 -piperazinilo, piperazinilo sustituido en la posición 4). Se debe observar que las ubicaciones de los radicales en cualquier resto molecular usado en las definiciones pueden encontrarse en cualquier lugar sobre dicho resto, siempre que sea químicamente estable. Los radicales usados en las definiciones de las variables incluyen todos los isómeros posibles, salvo que se indique de otra manera. Por ejemplo, piridilo incluye 2-piridilo, 3-piridilo y 4-piridilo; pentilo incluye 1-pentilo, 2-pentilo y 3-pentilo. Cuando se produce cualquier variable más de una vez en cualquier constituyente, cada definición es independiente. Siempre que en lo sucesivo en la presente se usa el término "compuestos de fórmula (I)", o "los presentes compuestos" o términos similares, se pretende incluir los compuestos de fórmula (I), cada uno y cualquiera de los subgrupos de los mismos, sus pro-fármacos, ?/-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas isoméricas estereoquímicas. Una modalidad comprende los compuestos de fórmula (I) o cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I) que se especifica en la presente, al igual que los ?/-óxidos, sales, como las posibles formas estereoisoméricas de los mismos. Otra modalidad comprende los compuestos de fórmula (I) o cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I) que se especifica en la presente, al igual que las sales como sus posibles formas estereoisoméricas. Los compuestos de fórmula (I) poseen varios centros de quiralidad y existen como formas isoméricas estereoquímicas. El término "formas isoméricas estereoquímicas" según se usa en la presente, define todos los posibles compuestos preparados de los mismos átomos unidos mediante la misma secuencia de enlaces, pero que poseen diferentes estructures tridimensionales que no son intercambiables, que pueden poseer los compuestos de fórmula (I). En referencia a las instancias en las cuales (R) o (S) se usa para designar la configuración absoluta de un átomo quiral en un sustituyente, la designación se lleva a cabo considerado el compuesto completo y no el sustituyente aislado. Salvo que se mencione o indique de otra manera, la designación química de un compuesto comprende la mezcla de todas las formas isoméricas estereoquímicas posibles, que dicho compuesto puede poseer. Dicha mezcla puede contener todos los diastereómeros y/o enantiómeros de la estructura molecular básica de dicho compuesto. Se pretende que todas las formas isoméricas estereoquímicas de los compuestos de la presente invención que requieren ambas, la forma pura o combinada entre sí, se encuentren comprendidas dentro del alcance de la presente invención. Las formas puras estereoisoméricas de los compuestos e intermediarios según se mencionan en la presente se definen como isómeros esencialmente libres de otras formas enantioméricas o diastereoméricas de la misma estructura molecular básica de dichos compuestos o intermediarios. En especial, el término "estereoisoméricamente puro" se refiere a compuestos o intermediarios que poseen un exceso estereoisomérico de al menos 80% (es decir 90% de mínimo de un isómero y un máximo del 10% de otros posibles isómeros) hasta un exceso estereoisomérico del 100% (es decir 100% de un isómero y ninguno de los otros), más en especial, los compuestos e intermediarios que poseen un exceso estereoisomérico del 90% hasta 100%, aún más especialmente que poseen un exceso estereoisomérico del 94% hasta 100% y aún más especialmente que poseen un exceso estereoisomérico del 97% hasta 100%. Se deberían entender los términos "enantioméricamente puro" y "diastereoméricamente puro" de manera similar, pero considerando el exceso enantiomérico y el exceso diastereomérico, respectivamente, de la mezcla en cuestión.

Las formas estereoisoméricas puras de los compuestos y de los intermediarios de la presente invención se pueden obtener mediante la aplicación de procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, los enantiómeros se pueden separar entre sí mediante la cristalización selectiva de sus sales diastereoméricas con ácidos o bases óptimamente activos. Ejemplos de los mismos son ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido ditoluoiltartárico y ácido alcanforsulfónico. De manera alternativa, los enantiómeros se pueden separar mediante técnicas cromatográficas usando fases estacionarias quirales. Dichas formas puras isoméricas estereoquímicas también pueden derivar de las formas puras isoméricas estereoquímicas correspondientes de los materiales de partida apropiados, siempre que la reacción se produzca de manera estereoespecífica. Preferentemente, si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto se sintetizará mediante métodos específicos de preparación. Estos métodos utilizarán de manera ventajosa los materiales de partida enantioméricamente puros. Los racematos diastereoméricos de los compuestos de fórmula (I) se pueden obtener por separado mediante métodos convencionales. Los métodos físicos de separación apropiados que se pueden emplear de manera ventajosa son, por ejemplo, cristalización selectiva y cromatografía, por ejemplo cromatografía en columna. Para algunos de los compuestos de fórmula (I), sus ?/-óxidos, sales, solvatos, aminas cuaternarias, o complejos metálicos y los intermediarios usados en la preparación de los mismos, la configuración estereoquímica absoluta no se determinó de manera experimental. Una persona experta en la técnica es capaz de determinar la configuración absoluta de tales compuestos usando métodos conocidos en la técnica, tales como, por ejemplo, difracción de rayos X. También se pretende que la presente invención incluya todos los isótopos de átomos que se producen en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que poseen la misma cantidad atómica pero diferentes números másicos. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio. Los isótopos del carbono incluyen C-13 y C-14. El término "pro-fármaco", según se usa a lo largo del presente texto, significa los derivados aceptables para uso farmacéutico tales como esteres, amidas y fosfatos, de manera que el producto resultante de biotransformación in vivo del derivado es el fármaco activo, según lo definido en los compuestos de fórmula (I). Mediante la presente, se incorpora la referencia de Goodman y Gilman (The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8,h ed, McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, "Biotransformation of Drugs", p 13-15) que en general describe profármacos. Los pro-fármacos preferentemente poseen excelente solubilidad acuosa, incremento de biodisponibilidad y se metabolizan con facilidad en los inhibidores activos in vivo. Los pro-fármacos de un compuesto de la presente invención se pueden preparar por medio de la modificación de grupos funcionales presentes en el compuesto, de manera que se escindan las modificaciones, ya sea mediante manipulación de rutina o in vivo, para el compuesto progenitor. Se prefieren los pro-fármacos de éster aceptables para uso farmacéutico que son hidrolizables in vivo y que derivan de aquellos compuestos de fórmula (I) que poseen un hidroxi o un grupo carboxilo. Un éster hidrolizable in vivo es un éster, que se hidroliza en el cuerpo humano o animal para producir el ácido o alcohol original. Los esteres adecuados aceptables para uso farmacéutico para carboxi incluyen esteres de alcoximetilo de C?-6, por ejemplo metoximetilo, esteres de alcanoíloximetilo de C?-6 por ejemplo pivaloíloximetilo, ftalidil esteres, esteres de cicloalcoxicarboniloxi de C3-ß-alquilo de C1-6 por ejemplo 1-ciclohexilcarboniloxiethilo; 1 ,3-dioxolen-2-onilmetil esteres, por ejemplo 5-metil-1 ,3-dioxolen-2-onilmetilo; y esteres de alcoxicarboniloxietilo de d-ß por ejemplo 1-metoxicarboniloxietilo, que se pueden formar en cualquier grupo carboxi en los compuestos de esta invención. Un éster hidrolizable in vivo de un compuesto de la fórmula (I) que contiene un grupo hidroxi incluye esteres orgánicos tales como esteres de fosfato y a-aciloxialquil éteres y compuestos relacionados que como resultado de la hidrólisis in vivo de la ruptura del éster se quiebran para dar el grupo hidroxi progenitor. Ejemplos de a-aciloxialquil éteres incluyen acetoximetoxi y 2,2-dimetilpropioniloxi-metoxi. Una selección de éster hidrolizable in vivo que forma grupos para hidroxi incluye alcanoílo, benzoílo, fenilacetilo y benzoílo y fenilacetilo sustituidos, alcoxicarbonilo (para dar esteres de carbonato alquilo), dialquilcarbamoílo y N-(dialquilaminoetil)-N-alquilcarbamoílo (para dar carbamatos), dialquilaminoacetilo y carboxiacetilo. Ejemplos de sustituyentes en el benzoílo incluyen morfolino y piperazino unidos a partir de un átomo de nitrógeno anular mediante un grupo metileno a la posición 3 o 4 del anillo benzoílo. Para uso terapéutico, las sales de los compuestos de fórmula (I) son aquellas en las cuales el contra-ión es aceptable para uso farmacéutico. Sin embargo, las sales de ácidos y bases que no son aceptables para uso farmacéutico también se pueden usar, por ejemplo, en la preparación o purificación de un compuesto aceptable para uso farmacéutico. Todas las sales, ya sean aceptables para uso farmacéutico o no se incluyen en el ámbito de la presente invención. Las sales de adición con ácidos y bases son aceptables para uso farmacéutico según se mencionaron anteriormente en la presente pretenden comprender las formas de sales de adición con ácidos y bases no tóxicas terapéuticamente activas que los compuestos de fórmula (I) son capaces de formar. Las sales de adición acidas aceptables para uso farmacéutico se pueden obtener de manera conveniente tratando la forma de base con dicho ácido apropiado. Los ácidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como hidrácidos, por ejemplo ácido clorhídrico o bromhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico y los ácidos similares; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, ácidos acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico (es decir etanodioico), malónico, succínico (es decir ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico (es decir ácido hidroxibutanodioico), tartárico, cítrico, metansulfónico, etansulfónico, bencensulfónico, p-toluensulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico y ácidos similares. A la inversa, tales formas salinas se pueden transformar mediante tratamiento con una base apropiada en la forma de base libre. Los compuestos de fórmula (I) que contienen un protón ácido también se puede transformar en sus formas de sal de adición de metal o amina no tóxicas mediante el tratamiento con bases apropiadas orgánicas e inorgánicas. Las formas salinas con bases comprenden, por ejemplo, las sales de amonio, las sales de metal alcalino y alcalino-térreo, por ejemplo, sales de litio, sodio, potasio, magnesio, calcio y similares, sales con bases orgánicas, por ejemplo benzatina, ?/-metil-D-glucamina, sales de hidrabamina y sales con aminoácidos tales como, por ejemplo, arginina, lisina y similares. El término sal de adición, según se usó anteriormente en la presente, también comprende los solvatos que los compuestos de la fórmula (I) son capaces de formar, al igual que las sales de los mismos. Tales solvatos son, por ejemplo hidratos, alcoholatos y similares. El término "amina cuaternaria" según se utilizó anteriormente en la presente, define las sales de amonio cuaternario que los compuestos de fórmula (I) son capaces de formar mediante la reacción entre un nitrógeno básico de un compuesto de fórmula (I) y un agente de cuaternización apropiado, tal como, por ejemplo, un haluro de alquilo haluro de arilo o haluro arilalquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, yoduro de metilo o yoduro de bencilo. También se pueden usar otros reactivos con buenos grupos salientes, tales como trifluorometanosulfonatos de alquilo, metansulfonatos de alquilo y p-toluensulfonatos de alquilo. Una amina cuaternaria posee un nitrógeno cargado positivamente. Los contra-iones aceptables para uso farmacéutico incluyen cloro, bromo, yodo, trifluoroacetato y acetato. El contraión de elección se puede introducir usando resinas de intercambio iónico. Las formas de ?/-óxido de los presentes compuestos pretender comprender los compuestos de fórmula (I) donde uno o varios átomos de nitrógeno se oxidan para el denominado ?/-óxido. Se apreciará que los compuestos de fórmula (I) pueden poseer propiedades de formación de unión metálica, quelante, compleja y, por lo tanto, pueden existir como complejos metálicos o quelatos metálicos. Se pretende que tales derivados metálicos de los compuestos de fórmula (I) se incluyan dentro del alcance de la presente invención. Algunos de los compuestos de fórmula (I) también pueden existir en su forma tautomérica. Se pretende que tales formas, aunque no se indican de manera explícita en la fórmula anterior, se incluyan dentro del alcance de la presente invención. Según se mencionó anteriormente, los compuestos de fórmula (I) poseen varios centros asimétricos. Para hacer referencia de modo más eficiente a cada uno de estos centros asimétricos, se usará el sistema de numeración, según se indica en la siguiente fórmula estructural.

Los centros asimétricos se encuentran presentes en las posiciones 1 , 4 y 6 del macrociclo, al igual que en el átomo de carbono 3' en el anillo de 5 miembros, átomo de carbono en la posición 2' donde el sustituyente R2 es alquilo de C-?-6 y en la posición 1' del átomos de carbono, donde X es CH. Cada uno de estos centros asimétricos se puede presentar en su configuración R o S. La estereoquímica en la posición 1 , preferentemente, corresponde a aquella de una configuración de aminoácido L, es decir, aquel de la L-prolina. Cuando X es CH, los 2 grupos carbonilo sustituidos en las posiciones 1' y 5' del anillo ciclopentano preferentemente se encuentran en una configuración trans. El sustituyente carbonilo en la posición 5', preferentemente se encuentra en esa configuración que corresponde a una configuración de L-prolina. Los grupos carbonilo sustituidos en las posiciones V y 5', preferentemente, son según se describen a continuación en la estructura de la siguiente fórmula: Los compuestos de fórmula (I) incluyen un grupo ciclopropilo, según se representa en el fragmento estructural a continuación: donde C7 representa el carbono en la posición 7 y los carbonos en la posición 4 y 6 son átomos de carbono asimétricos del anillo de ciclopropano. Sin importar otros posibles centros asimétricos en otros segmentos de los compuestos de fórmula (I), la presencia de estos dos centros asimétricos significa que los compuestos pueden existir como mezclas de diastereómeros, tales como los diastereómeros de los compuestos de fórmula (I) donde el carbono en la posición 7 se configura ya sea syn para el carbonilo o syn para la amida, según se muestra a continuación.

C7 syn para carbonilo C7 syn para amida C7 syn para carbonilo C7 syn para amida Una modalidad se refiere a compuestos de fórmula (I) donde el carbono en la posición 7 se configura syn para el carbonilo. Otra modalidad se refiere a compuestos de fórmula (I) donde la configuración en el carbono en la posición 4 es R. Un subgrupo específico de compuestos de fórmula (I) son aquellos en los cuales el carbono en la posición 7 se configura syn para el carbonilo y donde la configuración en el carbono en la posición 4 es R. Los compuestos de fórmula (I) pueden incluir un residuo de prolina (cuando X es N) o un residuo ciclopentilo o ciclopentenilo (cuando X es CH o C). Se prefieren los compuestos de fórmula (I) donde el sustituyente en la posición (o 5') y el sustituyente -O-R4 (en la posición 3') se encuentran en una configuración trans. Son de particular interés los compuestos de fórmula (I) donde la posición 1 posee la configuración correspondiente a L-prolina y el sustituyente -O-R4 se encuentra en una configuración trans con respecto a la posición 1. Preferentemente, los compuestos de fórmula (I) poseen la estereoquímica según se indica en las estructuras de las fórmulas (I-a) y (l-b) a continuación: (I-a) d-b) Una modalidad de la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) o de fórmula (I-a) o de cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I), donde se aplican una o más de las siguientes condiciones: (a) R2 es hidrógeno; (b) X es nitrógeno; (c) un doble enlace se encuentra presente entre átomos de carbono 7 y 8. Una modalidad de la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) o de las fórmulas (I-a), (l-b), o de cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I), donde se aplican una o más de las siguientes condiciones: (a) R2 es hidrógeno; (b) X es CH; (c) un doble enlace se encuentra presente entre átomos de carbono 7 y 8. Los subgrupos especiales de compuestos de fórmula (I) son aquellos representados mediante las siguientes fórmulas estructurales: (l-c) (l-d) Entre los compuestos de fórmula (l-c) y (l-d), aquellos que poseen la configuración estereoquímica de los compuestos de fórmulas (I-a) y (l-b), respectivamente, son de particular interés. El enlace doble entre los átomos de carbono 7 y 8 en los compuestos de fórmula (I), o en cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I), se pueden encontrar en una configuración cis o en una trans.

Preferentemente, el enlace doble entre los átomos de carbono 7 y 8 se encuentra en una configuración cis, según se describe en las fórmulas (l-c) y (l-d).

Un enlace doble entre los átomos de carbono 1' y 2' se pueden encontrar presentes en los compuestos de fórmula (I), o en cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I), según se describe en la fórmula (l-e) a continuación.

(I-e) Aún otro subgrupo particular de compuestos de fórmula (I) son aquellos representados mediante las siguientes fórmulas estructurales: (1-f) d-g) (l-h) Entre los compuestos de fórmulas (l-f), (l-g) o (l-h), aquellos que poseen la configuración estereoquímica de los compuestos de fórmulas (I-a) y (l-b) son de particular interés: En (l-a), (l-b), (l-c), (l-d), (I-e), (l-f), (l-g) y (l-h), donde sea aplicable, X, n, R1, R2, R3 y R4 son según se especificó en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o en cualquiera de los subgrupos de compuestos de fórmula (I) que se especifica en la presente.

Se debe entender que se pretende que los subgrupos definidos anteriormente de compuestos de fórmulas (1-a), (l-b), (l-c), (l-d), (l-e), (1-f), (l-g) o (l-h), al igual que cualquier otro subgrupo definido en la presente, también comprendan cualquier pro-fármaco, ?/-óxido, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas isoméricas estereoquímicas de tales compuestos. Cuando n es 2, el resto -CH2- agrupado por "n" corresponde a etanodiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I). Cuando n es 3, el resto -CH2- agrupado por "n" corresponde a propanodiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I). Cuando n es 4, el resto -CH2-agrupado por "n" corresponde a butanodiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I). Cuando n es 5, el resto -CH2- agrupado por "n" corresponde a pentanodiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I). Cuando n es 6, el resto -CH2- agrupado por "n" corresponde a hexanodiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I). Subgrupos particulares de los compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos donde n es 4 o 5. Las modalidades de la invención son los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde (a) R1 es -OR5, en particular donde R5 es alquilo de C?-6, tal como metilo, etilo, o ter-butilo y de mayor preferencia donde R5 es hidrógeno; o (b) R es -NHS(=O)2R6, en particular donde R6 es alquilo de C?-6, cicloalquilo de C3- sustituido opcionalmente por alquilo de C?-6) o arilo, por ejemplo donde R6 es metilo, ciclopropilo, metilciclopropilo, o fenilo. Además, las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de compuestos de fórmula (I) donde (a) R2 es hidrógeno; (b) R2 es alquilo de C?-6, preferentemente metilo. Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de compuestos de fórmula (I) donde (a) X es N, C (X encontrándose unido mediante un enlace doble) o CH (X encontrándose unido mediante un enlace simple) y R2 es hidrógeno; (b) X es C (X encontrándose unido mediante un enlace doble) y R2 es alquilo de C-i-ß, preferentemente metilo. Otras modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de compuestos de fórmula (I) donde (a) R3 es hidrógeno; (b) R3 es alquilo de C?-6; (c) R3 es alcoxi de C-uß-alquilo de C-?-6 o cicloalquilo de C3.7.

Las modalidades preferidas de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de compuestos de fórmula (I) donde R3 es hidrógeno, o alquilo de C-?-6, más preferentemente hidrógeno o metilo. Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es isoquinolin-1-ilo opcionalmente mono, di, o tri sustituido por alquilo de C ß, alcoxi de C-?-6, hidroxi, halo, trifluorometilo, mono- o di-alquilamino de d-ß, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C1-6, arilo, Het; donde arilo o Het son cada uno, de manera independiente, sustituido opcionalmente por halo, alquilo de C-?-6, alcoxi de polihalo-alcoxi de C?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C-?-6, cicloalquilo de C3-7 (en especial ciclopropilo), pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de (en especial 4-metil-piperazinilo) o morfolinilo. Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es isoquinolin-1-ilo opcionalmente mono, di, o tri sustituido por metilo, etilo, isopropilo, ter-butilo, metoxi, etoxi, trifluorometilo, trifluorometoxi, fluoro, cloro, bromo, mono- o di-alquilamino de C?-6, mono- o di-alquilaminocarbonílo de Ci. 6, fenilo, metoxifenilo, cianofenilo, halofenilo, piridilo, alquilpiridilo de C?- , pirimidinilo, morfolinilo, piperazinilo, alquil de Cr4-piperazinilo, pirrolidinilo, pirazolilo, alquil de Cr4-pirazolilo, tiazolilo, alquiltiazolilo de d-4, ciclopropil-tiazolilo, o mono- o di-alquil de Ci^-aminotiazolilo.

Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde en en esta y en las siguientes fórmulas estructuras que representan modalidades del radical R4, cada R a, R4b , R4b son de manera independiente cualquiera de los sustituyentes seleccionados de aquellos mencionados como posibles sustituyentes en los sistemas anulares monocíclico o bicíclico de R1, según se especificó en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I). Específicamente, R4a puede ser hidrógeno, halo, alquilo de C?-6, alcoxi de C?-6, mono- o alquilamino de C1-6, amino, arilo, o Het; dicho arilo o Het siendo cada uno, de manera independiente, sustituido opcionalmente por cualquiera de los sustituyentes de Het o arilo mencionado en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente dicho arilo o Het siendo cada uno, de manera independiente, sustituido opcionalmente por alquilo de C-?-6, alcoxi de C?-6, polihalo-alcoxi de C1-6, amino, mono- o di-alquilamino de C-?-6, halo, morfolinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C?-6 (tal como 4-metilpiperazinilo); y cada R4b y R b son, de manera independiente, hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C?-6, mono- o di-alquilamino de C?-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C1-6, hidroxi, halo, trifluorometilo, arilo, o Het; dicho arilo o Het siendo cada uno, de manera independiente, sustituido opcionalmente por cualquiera de los sustituyentes de Het o arilo mencionado en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente dicho arilo o Het siendo cada uno, de manera independiente, sustituido opcionalmente por alquilo de C-?-6, alcoxi de C?-6, polihalo-alcoxi de Ci-ß, amino, mono- o di-alquilamino de C?-6; morfolinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C-?-6 (tal como 4-metilpiperazinilo). Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4a es un radical o, en particular, donde R1a se selecciona del grupo que consiste donde, cuando es posible un nitrógeno puede poseer un sustituyente R4c o una unión al resto de la molécula; donde cada R4c es, cada uno de manera independiente, cualquiera de los sustituyentes de Het mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o de manera específica cada R4c es, cada uno de manera independiente, hidrógeno, halo, alquilo de C-?-6, amino, o mono- o dialquilamino deC?-6, morfolinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C-?-6 (tal como 4-metilpiperazinilo); y donde los grupos morfolinilo y piperidilo se pueden sustituir opcionalmente por uno o dos radicales alquilo de C-i-ß; de manera más específica cada R4c es, de manera independiente, hidrógeno, halo, alquilo de C-?-6, amino, o mono- o di-alquilamino de C e; y cuando R4c se sustituye en un átomo de nitrógeno, preferentemente es un carbono que contiene sustituyente que se conecta al nitrógeno mediante un átomo de carbono o uno de sus átomos de carbono; y donde en la instancia R c de preferencia es alquilo de C-?.6- Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde cada R b y R4b , de manera independiente, son según se especificó anteriormente; o de manera específica cada R4b y R b , de manera independiente, are hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6, mono- o dialquilamino de C-?-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C?-6, hidroxi, halo, trifluorometilo, arilo, o Het; y R4d y R4d , de manera independiente are cualquiera de los sustituyentes de arilo mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente R4d o R4d , de manera independiente are hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C?-6, o halo. Otras modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde cada R b y R4b son, de manera independiente, según se especificó anteriormente; o de manera específica cada R4b y R4b , de manera independiente, son hidrógeno, alquilo de C1-6, alcoxi de C?-6, mono- o dialquilamino de C?-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C?-6, hidroxi, halo, trifluorometilo, arilo o Het; y R4e es cualquiera de los sustituyentes de arilo mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente R4e es hidrógeno, alquilo de C1-6> alcoxi de C-?-6, o halo. Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde cada R4b y R b son según se especificó anteriormente; o de manera específica cada R4b y R4b son, de manera independiente, hidrógeno, alquilo de C-?-6, alcoxi de C?-6, mono- o di-alquilamino de C1-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C-?-6, hidroxi, halo, trifluorometilo; de preferencia R4b es alcoxi de C?-6, de mayor preferencia metoxi; y R4f es cualquiera de los sustituyentes de arilo mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente R4f hidrógeno, alquilo de C?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C?-6, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C?-6 (en especial 4-metil-piperazinilo), o morfolinilo. Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde cada R4b y R4 son según se especificó anteriormente; o de manera específica cada R b y R b son, de manera independiente, hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6, mono- o di-alquilamino de C1-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C?-6, hidroxi, halo, trifluorometilo; de preferencia R4 es alcoxi de C-?-6, de mayor preferencia metoxi, halo, o alquilo de C?-3; y R4g es cualquiera de los sustituyentes de arilo mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente R g es hidrógeno, alquilo de C-?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C1-6, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C 6 (en especial 4-metil-piperazinilo), o morfolinilo. Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde cada R4b y R b son según se especificó anteriormente; o de manera específica cada R b y R4b son, de manera independiente, hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6, mono- o di-alquilamino de C-?-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C1-6, hidroxi, halo, trifluorometilo; de preferencia R4b es alcoxi de C1-6, de mayor preferencia metoxi, halo, o alquilo de C?-3; y R4h es cualquiera de los sustituyentes de arilo mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente R4h es hidrógeno, alquilo de C?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C-?-6, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C1-6 (en especial 4-metil-piperazinilo), o morfolinilo; y donde R4h también puede ser sustituido en uno de los átomos de nitrógeno del anillo pirazol en cuyo caso, de preferencia es alquilo de C-?-6. Las modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde cada R4 y R4b son según se especificó anteriormente; o de manera específica cada R4b y R b son, de manera independiente, hidrógeno, alquilo de C-|,6, alcoxi de C-uß, mono- o di-alquilamino de C-?.6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C?-6, hidroxi, halo, trifluorometilo; de preferencia R4b es alcoxi de C1-6, de mayor preferencia metoxi, halo, o alquilo de C1-3; y R4' es cualquiera de los sustituyentes de arilo mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o de cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I); o específicamente R4' es hidrógeno, alquilo de C?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C-?-6, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4- alquilpiperazinilo de d-6 (en especial 4-metil-piperazinilo), o morfolinilo.

Las modalidades preferidas de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde R4a es según lo definido en cualquiera de los grupos o sub-grupos de compuestos de fórmula (I); y R4b es hidrógeno, halo, o trifluorometilo. Otras modalidades preferidas de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde R a es metoxi, etoxi o propoxi; y R4b es hidrógeno, fluoro, bromo, cloro, iodo, metilo, etilo, propilo, o trifluorometilo. Otras modalidades de la invención son compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los subgrupos de los compuestos de fórmula (I) donde R4 es: donde R4b es hidrógeno, halo, o trifluorometilo. Los compuestos de fórmula (I) consisten en tres bloques de construcción P1 , P2, P3. El bloque de construcción P1 además contiene una cola P1'. El grupo carbonilo marcado con un asterisco en el compuesto (l-c) abajo, puede ser parte de cualquiera del bloque de construcción P2 o del bloque de construcción P3. Debido a razones químicas, el bloque de construcción P2 de los compuestos de fórmula (I) donde X es C incorpora el grupo carbonilo unido a la posición 1'. La unión de los bloques de construcción P1 con P2, P2 con P3 y P1 con P1' (cuando R1 es -NH-S02R6) comprende formar un enlace amida. La unión de los bloques P1 y P3 comprende la formación del enlace doble. La unión de los bloques de construcción P1 , P2 y P3 para preparar los compuestos (I-i) o (l-j) se puede llevar a cabo en cualquier secuencia dada. Una de las etapas comprende la ciclación mediante los cuales se forma el macrociclo. A continuación en la presente se representan los compuestos (I-i) que son compuestos de fórmula (I) donde los átomos de carbono C7 y C8 se encuentran unidos por un enlace doble y los compuestos (l-j) que son compuestos de fórmula (I) donde los átomos de carbono C7 y C8 se encuentran unidos por un enlace simple. Los compuestos de fórmula (l-j) se pueden preparar a partir de los compuestos correspondientes de fórmula (I-I) mediante la reducción del doble enlace en el macrociclo. (l-i) (l-j) Los procedimientos de síntesis descritos a continuación en la presente pretenden ser aplicables también para los racematos, intermediarios estereoquimicamente puros o productos finales, o cualquier mezcla estereoquímica. Los racematos o mezclas estereoquímicas se pueden separar en formas estereoisoméricas en cualquier etapa de los procedimientos de síntesis. En una modalidad los intermediarios y productos finales poseen la estereoquímica que se especificó anteriormente en los compuestos de fórmula (l-a) y (l-b). En una modalidad, los compuestos (l-¡) se preparan formando primero los enlaces amida y posteriormente formando la unión del doble enlace entre P3 y P1 con la ciclación consecutiva al macrociclo.

En una modalidad preferida, los compuestos (I) donde el enlace entre C7 y C8 es un doble enlace, que son compuestos de fórmula (l-i), según se definió anteriormente, se pueden preparar según se indica en el siguiente esquema de reacción: (1a) La formación del macrociclo se puede llevar a cabo mediante una reacción de metátesis de olefina en la presencia de un catalizador de metal adecuado, tal como por ejemplo el catalizador en base a Ru reportado por Miller, S.J., Blackwell, H.E., Grubbs, R.H. J. Am. Chem. Soc. 118, (1996), 9606-9614; Kingsbury, J. S., Harrity, J. P. A., Bonitatebus, P. J., Hoveyda, A.

H., J. Am. Chem. Soc. 121 , (1999), 791-799; y Huang et al., J. Am. Chem.

Soc. 121 , (1999), 2674-2678; por ejemplo un catalizador de Hoveyda-Grubbs. Se pueden usar los catalizadores de rutenio estables en aire tales como cloruro de bis(triciclohexilfosfina)-3-fenil-1H-inden-1-ilideno rutenio (Neolyst M1®) o bicloruro de bis(triciciohexilfosfina)-[(feniltio)metileno]rutenio (IV). Otros catalizadores que se pueden usar son los catalizadores de primera y segunda generación de Grubbs, es decir, bencilideno- bis(triciclohexilfosfina)diclororutenio y (1 ,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidinilideno)dicloro(fenilmetileno)-(triciclohexilfosfina)rutenio, respectivamente. Son de particular interés los catalizadores de primera y segunda generación de Hoveyda-Grubbs, que son dicloro(o-isopropoxifenilmetileno)(triciclohexilfosfina)-rutenio(ll) y 1 ,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidinilideno)dicloro(o-isopropoxifenilmetileno)rutenio respectivamente. Asimismo, otros catalizadores que contienen otros metales de transición, tales como Mo, se pueden usar para esta reacción. Las reacciones de metátesis se pueden llevar a cabo en un solvente adecuado tal como por ejemplo, éteres, por ejemplo THF, dioxano; hidrocarburos halogenados, por ejemplo diclorometano, CHCI3, 1 ,2-dicloroetano y los similares, hidrocarburos, por ejemplo tolueno. En una modalidad preferida, la reacción de metátesis se lleva a cabo en tolueno. Estas reacciones se llevan a cabo a temperaturas incrementadas bajo atmósfera de nitrógeno. Los compuestos de fórmula (I) donde la unión entre C7 y C8 en el macrociclo es un enlace simple, es decir compuestos de fórmula (l-j), se pueden preparar a partir de los compuestos de fórmula (l-i) mediante la reducción del doble enlace C7-C8 en los compuestos de fórmula (l-i). esta reducción se puede llevar a cabo mediante la hidrogenación catalítica con hidrógeno en la presencia de un catalizador de metal noble, tal como, por ejemplo, Pt, Pd, Rh, Ru o níquel de Raney. Es de interés Rh en alúmina. La reacción de hidrogenación preferentemente se lleva a cabo en un solvente, tal como, por ejemplo un alcohol tal como metanol, etanol, o un éter tal como THF, o mezclas de los mismos. También se puede agregar agua a estos solventes y mezclas de solventes. El grupo R1 puede encontrarse conectado al bloque de construcción P1 en cualquier etapa de la síntesis, es decir, antes o después de la ciclación o antes o después del a ciclación y reducción, según lo descrito anteriormente en la presente. Los compuestos de fórmula (I), en los cuales R1 representa -NHSO2R6, dichos compuestos siendo representados por la fórmula (l-k-1), se pueden preparar uniendo el grupo R1 al P1 mediante la formación de un enlace amida entre ambos restos. De manera similar, los compuestos de fórmula (I), en los cuales R representa -OR5, es decir los compuestos (l-k-2), se pueden preparar mediante la unión del grupo R a P1 mediante la formación de un enlace de éster. En una modalidad, los grupos -OR5 se introducen en la última etapa de la síntesis de los compuestos los compuestos (I) según se indica en los siguientes esquemas de reacción en los cuales G representa un grupo: (l-k-1) 0 '/ G-COOH + HOR5 -< OR5 (2a) (2c) " (i-k-2) El intermediario (2a) se puede acoplar con la amina (2b) mediante una reacción de formación de amina tal como cualquiera de los procedimientos para la formación de un enlace amida descrito a continuación en la presente. En especial, (2a) se puede tratar con el agente de acoplamiento, por ejemplo ?/,?/'-carbonildiimidazol (CDI), EEDQ, IIDQ, EDCI o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-pirrolidinofosfonio (disponible comercialmente como PyBOP®), en un solvente tal como éter, por ejemplo THF, o un hidrocarburo halogenado, por ejemplo diclorometano, cloroformo, dicloroetano y se puede hacer reaccionar con la sulfonamida deseada (2b), preferentemente después de la reacción (2a) con el agente de acoplamiento. Las reacciones de (2a) con (2b) preferentemente se llevan a cabo en la presencia de a base, por ejemplo a trialquilamina tal como trietilamina o diisopropiletilamina, o 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU). El Intermediario (2a) también se pueden transformar en una forma activa, por ejemplo una forma activa de la fórmula general G-CO-Z, donde Z representa halo, o la parte restante de un éster activo, por ejemplo Z es un grupo ariloxi tal como fenoxi, p.nitrofenoxi, pentafluorofenoxi, triclorofenoxi, pentaclorofenoxi y los similares; o Z puede ser el resto de un anhídrido combinado. En una modalidad, G-CO-Z es un cloruro de ácido (G-CO-CI) o un anhídrido de ácido mixto (G-CO-O-CO-R o G-CO-O-CO-OR, R en el último siendo, por ejemplo, alquilo de C?-4, tal como metilo, etilo, propilo, i-propilo, butilo, t-butilo, i-butilo o bencilo). La forma activa G-CO-Z se hace reaccionar con la sulfonamida (2b). La activación del ácido carboxílico en (2a) según se describe en las reacciones anteriores pueden conducir a una reacción de ciclación interna a una azalactona intermediaria de fórmula: donde X, R2, R3, R4 , n son según se especificó anteriormente y donde los centros estereogénicos pueden poseer la configuración estereoquímica según se especificó anteriormente, por ejemplo como en (l-a) o (l-b). Los intermediarios (2a-1) se pueden aislar de la mezcla de reacción, usando la metodología convencional y el intermediario aislado (2a-1) se hace reaccionar entonces con (2b), o la mezcla de reacción que contiene (2a-1) se puede hacer reaccionar además con (2b) sin el aislamiento de (2a-1). En una modalidad, donde la reacción con el agente de acoplamiento se lleva a cavo en un solvente inmiscible en agua, la mezcla de reacción que contiene (2a-1) se puede lavar con agua o con agua levemente básica para remover todos los productos secundarios solubles en agua. La solución lavada obtenida de esa manera se puede hacer reaccionar entonces con (2b), sin etapas adicionales de purificación. El aislamiento de los intermediarios (2a-1), por otra parte, puede proporcionar ciertas ventajas en que el producto aislado, después de la purificación adicional opcional, se puede hacer reaccionar con (2b), dando lugar a menos productos secundarios y a un procesamiento más fácil de la reacción. El intermediario (2a) se puede acoplar con el alcohol (2c) mediante una reacción de formación de éster. Por ejemplo, (2a) y (2c) se hacen reaccionar junto con la remoción de agua, ya sea físicamente, por ejemplo, mediante la remoción azeotrópica de agua, o químicamente, mediante el uso de un agente deshidratante. El intermediario (2a) también se pueden convertir en una forma activa de G-CO-Z, tal como las formas activas mencionadas anteriormente y que posteriormente se hacen reaccionar con el alcohol (2c). Las reacciones de formación de éster, preferentemente, se llevan a cabo en la presencia de una base tal como un carbonato de metal alcalino o carbonato de hidrógeno, por ejemplo sodio o carbonato de potasio hidrógeno, o una amina terciaria, tal como las aminas mencionadas en la presente en relación con las reacciones de formación de amida, en especial, una trialquilamina, por ejemplo trietilamina. Los solventes que se pueden usar en las reacciones que forman éster comprender éteres tales como THF; hidrocarburos halogenados, tal como diclorometano, CH2CI2; hidrocarburos tales como tolueno; solventes apróticos polares tales como DMF, DMSO, DMA; y los solventes similares. Los compuestos de fórmula (I) donde R3 es hidrógeno, dichos compuestos siendo representados mediante (I-I), también se pueden preparar mediante la remoción de un grupo protector PG, de un intermediario correspondiente protegido por nitrógeno (3a), como en el siguiente esquema de reacción. El grupo protector PG en especial es cualquier de los grupos protectores de nitrógeno mencionados a continuación en la presente y se pueden remover usando procedimientos que también se mencionan a continuación en la presente: Los materiales de partida (3a) en ia reacción anterior se puede preparar siguiendo los procedimientos para la preparación de compuestos de fórmula (I), pero usando intermediarios donde el grupo R3 es PG. Los compuestos de fórmula (I) también se pueden preparar haciendo reaccionar un intermediario (4a) con el intermediario (4b) según se indica en el siguiente esquema de reacción donde los diversos radicales poseen los significados especificados anteriormente: Y en (4b) representa hidroxi o un grupo saliente LG tal como haluro, por ejemplo bromuro o cloruro, o un grupo arilsulfonilo, por ejemplo mesilato, triflato o tosilato y los similares. En una modalidad, la reacción de (4a) con (4b) es una reacción de O-arilación e Y representa un grupo saliente. Esta reacción se puede llevar cabo siguiendo los procedimientos descritos por E. M. Smith et al. (J. Med. Chem. (1988), 31 , 875-885). En especial, esta reacción se lleva a cabo en la presencia de una base, preferentemente una base fuerte, en un solvente inerte de la reacción, por ejemplo uno de los solventes mencionados para la formación de un enlace de amida. En una modalidad particular, el material de partida (4a) se hace reaccionar con (4b) en la presencia de una base que es lo suficientemente fuerte para reducir un hidrñogeno del grupo hidroxi, por ejemplo, un álcali de hidruro de metal alcalino tal como LiH o hidruro de sodio, o alcóxido de metal alcalino, tal como metóxido o etóxido de sodio o potasio, ter-butóxido de potasio, en un solvente inerte de la reacción como un solvente aprótico dipolar, por ejemplo DMA, DMF y los similares. El alcoholato resultante se hace reaccionar con un agente de arilación (4b), donde Y es un grupo saliente adecuado, se mencionó anteriormente. La conversión de (4a) a (I) usando este tipo de reacción de O-arilación no cambia la configuración estereoquímica en el carbono que posee el grupo hidroxi. De manera alternativa, la reacción de (4a) con (4b) también se puede llevar a cabo mediante una reacción de Mitsunobu reaction (Mitsunobu, 1981 , Synthesis, January, 1-28; Rano et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 22, 3779-3792; Krchnak et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 5, 6193-6196; Richter et al., Tetrahedron Lett., 1994, 35, 27, 4705-4706). Esta reacción comprende el tratamiento del intermediario (4a) con (4b) donde Y es hidroxilo, en la presencia de trifenilfosfina y un agente de activación tal como un azocarboxilato de dialquilo, por ejemplo, azodicarboxilato de dietilo (DEAD), azodicarboxilato de diisopropilo (DIAD) o similares. La reacción de Mitsunobu cambia la configuración estereoquímica en el carbono que posee el grupo hidroxi. De manera alternativa, para preparar los compuestos de fórmula (I), se forma primero un enlace de amida entre los bloques de construcción P2 y P1 , seguido por el acoplamiento del bloque de construcción P3 al resto P1 en P1-P2 y la formación posterior del enlace de carbamato o éster entre P3 y el resto P2 en P2-P1-P3 con cierre del anillo simultáneo.

Aún otra metodología sintética alternativa es la formación de un enlace amida entre los bloques de construcción P2 y P3, seguido por el acoplamiento del bloque de construcción P1 al resto P3 en P3-P2 y una última formación de enlace de amida entre P1 y P2 en P1-P3-P2 con cierre del anillo simultáneo. Los bloques de construcción P1 y P3 se pueden unir a una secuencia P1-P3. Si se desea, la unión del doble enlace P1 y P3 se puede reducir. La secuencia P1-P3 formada de esa manera, ya sea reducida o no, se puede acoplar al bloque de construcción P2 y formando de esa manera la secuencia P1-P3-P2, ciclada posteriormente, mediante la formación de un enlace de amida. Los bloques de construcción P1 y P3 en cualquiera de los enfoques anteriores se pueden unir mediante la formación de dobles enlaces, por ejemplo, mediante la reacción de metátesis de olefina que se describe posteriormente en la presente o una reacción de tipo Wittig. Si se desea, el enlace doble formado de esa manera se puede reducir, de manera similar a la descrita anteriormente para la conversión de (l-i) a (l-j). El doble enlace también se puede reducir en una etapa posterior, es decir después de la adición de un tercer bloque de construcción o después de la formación del macrociclo. Los bloques de construcción P2 y P1 se encuentran unidos mediante la formación de enlace de amida y P3 y P2 se encuentran unidos mediante la formación de carbamato o de éster.

La cola P1' se puede encontrar unida mediante enlace al bloque de construcción P1 en cualquier etapa de la síntesis de los compuestos de fórmula (I), por ejemplo antes o después del acoplamiento de los bloques de construcción P2 y P1 ; antes o después del acoplamiento del bloque de construcción P3 a P1 ; o antes o después del cierre del anillo. Los bloques de construcción individuales se pueden preparar primero y posteriormente acoplarlos juntos o de una manera alternativa, los precursores de los bloques de construcción se pueden acoplar juntos y se pueden modificar en una etapa posterior a la composición molecular deseada. Los grupos funcionales en cada uno de los bloques de construcción se pueden proteger para evitar las reacciones secundarias. La formación de enlaces de amida se puede llevar a cabo usando procedimientos estándar, tales como aquellos usados para el acoplamiento de enlaces en la síntesis de péptidos. Esta última comprende el acoplamiento deshidratante de un grupo carboxilo de un reactivo con un grupo amino del otro reactivo para formar un enlace amida de unión. La formación del enlace amida se puede llevar a cabo haciendo reaccionar los materiales de partida en la presencia de un agente de acoplamiento convirtiendo el grupo funcional carboxilo en una forma activa, tal como un éster activo, anhídrido combinado o un cloruro o bromuro de ácido carboxilo. Las descripciones generales de tales reacciones de acoplamiento y los reactivos que se utilizan en las mismas se pueden encontrar en libros de textos generales sobre química de péptidos, por ejemplo, M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2nd rev. ed., Springer-Verlag, Berlín, Germany, (1993). Ejemplos de reacciones de acoplamiento con la formación de enlace de amida incluye el método de la azida, el método del anhídrido mixto de ácido carbónico-carboxílico (cloroformiato de isobutilo), el método de la carbodiimida (diciclohexilcarbodiimida, diisopropilcarbodiimida o una carbodiimida soluble en agua tal como ?/-etil-?/-[(3-dimetilamino)propil]carbodiimida), el método del éster activo (por ejemplo esteres de p-nitrofenilo, p-clorofenilo, triclorofenilo, pentaclorofenilo, pentafluorofenilo, ?/-hidroxisuccínico ¡mido y similares), el método K del reactivo de Woodward, el método del 1 ,1-carbonildiimidazol (CDI o N,N'-carbonildiimidazol), los métodos de reactivos fosforados o de oxidación-reducción. Algunos de estos métodos se pueden perfeccionar agregando catalizadores adecuados, por ejemplo en el método de la carbodiimida por agregado de 1 -hidroxibenzotriazol, DBU (1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno), o 4-DMAP. Otros agentes de acoplamiento son hexafluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxi)tris-(dimetilamino) fosfonio, ya sea por sí mismo o en presencia de 1 -hidroxibenzotriazol o 4-DMAP; o tetrafluoroborato de 2-(IH-benzotriazol-1-il)-?/,?/,?/',?/'-tetra-metiluronio, o hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-¡l)-/V,?/,/V,,?/-tetrametiluronio. Estas reacciones de acoplamiento se pueden llevar a cabo en cualquier solución (fase líquida) o fase sólida.

Una formación de enlace de amida preferida se lleva a cabo usando N-etiloxicarbonil-2-etiloxi-1 ,2-dihidroquinolina (EEDQ) o N-isobutiloxi-carbonil-2-isobutiloxi-1 ,2-dihidroquinolina (IIDQ). A diferencia del procedimiento del anhídrido clásico, EEDQ y IIDQ no requieren base ni temperaturas bajas de reacción. Típicamente, el procedimiento comprende hacer reaccionar cantidades equimolesares de los componentes carboxilo y amina en un solvente orgánico (se puede utilizar una amplia variedad de solventes). Entonces, se agrega EEDQ o IIDQ en exceso y se permite que la mezcla se agite a temperatura ambiente. Las reacciones de acoplamiento preferentemente se llevan a cabo en un solvente inerte, tal como hidrocarburos halogenados, por ejemplo diclorometano, cloroformo, solventes apróticos dipolares tales como acetonitrilo, dimetilformamida, dimetilacetamida, DMSO, HMPT, éteres tales como tetrahidrofurano (THF). En muchas instancias, las reacciones de acoplamiento se llevan a cabo en presencia de una base adecuada tal como una amina terciaria, por ejemplo trietilamina, diisopropiletilamina (DIPEA), ?/-metil-morfolino, N-metilpirrolidina, 4-DMAP o 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU). La temperatura de reacción puede oscilar entre 0°C y 50°C y el tiempo de reacción puede oscilar entre 15 min y 24 h. Los grupos funcionales en los bloques de construcción que se encuentran unidos se pueden desproteger para evitar la formación de enlaces no deseados. Los grupos protectores apropiados que se pueden usar se enumeran por ejemplo en Greene, "Protective Groups en Organic Chemistry", John Wiley & Sons, New York (1999) y "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, New York (1987). Los grupos carboxilo se pueden proteger como un éster que se puede escindir para dar ácido carboxílico. Los grupos protectores que se pueden usar incluyen 1) esteres de alquilo tales como metilo, trimetilsililo y ter-butilo; 2) esteres de arilalquilo tales como bencilo y bencilo sustituido; o 3) esteres que se pueden escindir mediante una base moderada o medios reductores leves, tales como esteres de tricloroetilo y fenacilo. Los grupos amino se pueden proteger mediante una diversidad de grupos protectores, tales como: (1) grupos acilo, tales como formilo, trifluoroacetilo, ftalilo y p-toluensulfonilo; (2) grupos carbamato aromáticos, tales como benciloxicarbonilo (Cbz o Z) y benciloxicarbonilos sustituidos y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); (3) grupos carbamato alifáticos tales como ter-butiloxicarbonilo (Boc), etoxicarbonilo, diisopropilmetoxi-carbonilo y aliloxicarbonilo; (4) grupos carbamato de alquilo cíclico, tales como ciclopentiloxicarbonilo y adamantiloxicarbonilo: (5) grupos alquilo, tales como trifenilmetilo, bencilo o bencilo sustituido tal como 4-metoxibenzilo; (6) trialquilsililo, tal como trimetilsililo o t.Bu dimetilsililo; y (7) grupos que contiene tiol, tales como feniltiocarbonilo y ditiasuccinoilo. Los grupos protectores de amino de interés son Boc y Fmoc. Preferentemente, el grupo amino protector se escinde antes de la siguiente etapa de acoplamiento. La remoción de los grupos N-protectores se puede llevar a cabo siguiendo procedimientos conocidos en la técnica. Cuando se usa un grupo Boc, los métodos de elección son el ácido trifluoroacético, puro o en diclorometano, o HCl en dioxano o en acetato de etilo. La sal de amonio resultante se neutraliza entonces, ya sea antes del acoplamiento o en situ con soluciones básicas tales como reguladores de pH acuosos, o aminas terciares en diclorometano o acetonitrilo o dimetilformamida. Cuando se usa el grupo Fmoc, los reactivos de elección son piperidina o piperidina sustituida en dimetilformamida, pero se puede usar cualquier amina secundaria. La desprotecci?n se lleva a cabo a una temperatura entre 0°C y temperatura ambiente, comúnmente alrededor de 15-25°C o 20-22°C. Otros grupos funcionales que pueden interferir en las reacciones de acoplamiento de los bloques de construcción también se pueden proteger. Por ejemplo, los grupos hidroxilo se pueden proteger como éteres de bencilo o bencilo sustituido, por ejemplo 4-metoxibencil éter, esteres de benzoílo o de benzoílo sustituido, por ejemplo 4-nitrobenzoil éster, o con grupos trialquilsililo (por ejemplo trimetilsililo o ter-butildimetilsililo). Otros grupos amino se pueden proteger por medio de los grupos protectores que se pueden escindir de manera selectiva. Por ejemplo, cuando se usa Boc como grupo a-amino protector, los siguientes grupos protectores de cadena lateral son adecuados: restos p-toluensulfonilo (tosilo) se pueden usar para proteger otros grupos amino; bencil (Bn) éteres se pueden usar para proteger grupos hidroxi; y bencil esteres se pueden usar para proteger otros grupos carboxilo. O cuando se elige Fmoc para la protección de a-amino, comúnmente son aceptables los grupos protectores a base de ter-butilo. Por ejemplo, se puede usar Boc para otros grupos amino; ter-butil éteres para grupos hidroxilo; y ter-butil esteres para otros grupos carboxilo. Cualquiera de los grupos protectores se pueden remover en cualquier etapa del procedimiento de síntesis, pero preferentemente, los grupos protectores de cualquiera de los grupos funcionales involucrados en las etapas de reacción se eliminan después de completar la preparación del macrociclo. La remoción de los grupos protectores se puede llevar a cabo de cualquier manera determinada por la elección de los grupos protectores, cuyas maneras son conocidas para aquellas personas expertas en la técnica. Los intermediarios de la fórmula (1a) donde X es N, dichos intermediarios siendo representados mediante la fórmula (1a-1), se pueden preparar a partir de los intermediarios (5a) que se hacen reaccionar con una alquenamina (5b) en la presencia de un agente de introducción de carbonilo según se indica en el siguiente esquema de reacción. (5a) (l a- 1) Los agentes de introducción de carbonilo (CO) incluyen fosgeno o derivados de fosgeno, tales como carbonilo diimidazol (CDI) y similares. En una modalidad (5a) se hace reaccionar con el agente de introducción de CO en la presencia de una base adecuada y un solvente, que pueden ser las bases y solventes usados en las reacciones de formación de amida, según se describió anteriormente. En una modalidad particular, la base es un hidrogenocarbonato, por ejemplo NaHCO3, o una amina terciaria, tal como trietilamina y los similares, y el solvente es un éter o hidrocarburo halogenado, por ejemplo THF, CH2CI2, CHCI3 y similares. Luego, se agrega la amina (5b) obteniendo de esa manera intermediarios (1a-1) como en el esquema anterior. Una ruta alternativa que usa condiciones de reacción similares comprende, primero, hacer reaccionar el agente de introducción de CO con la alquenamina (5b) y luego, hacer reaccionar el intermediario formado de esa manera con (5a). Los intermediarios (1a-1), de manera alternativa, se pueden preparar de la siguiente manera: PG1 es un grupo protector de O, que puede ser cualquiera de los grupos mencionados en la presente y, en especial, es un grupo benzoílo o benzoílo sustituido, tal como 4-nitrobenzoílo. En esta última instancia, este grupo se puede eliminar mediante la reacción con un hidróxido de metal alcalino (LiOH, NaOH, KOH), en especial donde PG1 es 4-nitrobenzoilo, con LiOH, en un medio acuoso que comprende agua y un solvente orgánico soluble en agua, tal como alcanol (metanol, etanol) y THF. Los intermediarios (6a) se hacen reaccionar con (5b) en la presencia de un agente de introducción de carbonilo, similar según se describió anteriormente y esta reacción produce los intermediarios (6c). Estos se desprotegen, en especial, usando las condiciones de reacción mencionadas anteriormente. El alcohol resultante (6d) se hace reaccionar con intermediarios (4b), según se describió anteriormente para la reacción de (4a) con (4b) y esta reacción produce los intermediarios (1a-1). Los intermediarios de la fórmula (1a) donde X es C, dichos intermediarios siendo representados mediante la fórmula (1a-2), se pueden preparar mediante una reacción de formación de amina partiendo de los intermediarios (7a) que se hacen reaccionar con an amina (5b), según se muestra en el siguiente esquema de reacción, usando las condiciones de reacción para preparar amidas, tales como aquellas descritas anteriormente.

Los intermediarios (1a-1) se pueden preparar de manera alternativa de la siguiente manera: despr elección El PG1 es un grupo protector-O, según se describió anteriormente. Se pueden usar las mismas condiciones de reacción, según se describió anteriormente; la formación de amida, según se describió anteriormente, la remoción de PG1 como en la descripción de los grupos protectores y la introducción de R4, como en las reacciones de (4a) con los reactivos (4b). Los intermediarios de la fórmula (2a) se pueden preparar, ciclando primero la amida abierta (9a) a un éster macrocíclico (9b), que a su vez se transforma en (2a), de la siguiente manera: PG2 es un grupo protector carboxilo, por ejemplo uno de los grupos protectores de carboxilo mencionados anteriormente, en especial a alquilo de C1-4 o éster de bencilo, por ejemplo a metilo, etilo o t-butil éster. La reacción de (9a) a (9b) es una reacción de metátesis y se lleva a cabo según se describió anteriormente. El grupo PG2 se remueve siguiendo los procedimientos que también se describieron anteriormente. Cuando PG1 es un éster de alquilo de C- , se remueve mediante hidrólisis alcalina, por ejemplo con NaOH o preferentemente LiOH, en un solvente acuoso, por ejemplo una mezcla de alcanol C?-4 /agua. Un grupo bencilo se puede remover mediante hidrogenación catalítica. En una síntesis alternativa, los intermediarios (2a) se pueden preparar de la siguiente manera.

El grupo PG1 se selecciona de manera que se puede escindir de manera selectiva con respecto a PG2. PG2 puede ser por ejemplo, esteres de metilo o etilo, que se pueden eliminar mediante el tratamiento con un hidróxido de metal alcalino en un medio acuoso, en cuyo caso PG1, por ejemplo, es t.butilo o bencilo. PG2 puede ser esteres de t-butilo que se pueden remover en condiciones débilmente acidas o PG1 puede ser esteres de bencilo que se pueden remover con ácido fuerte o mediante hidrogenaci?n catalítica, en los últimos dos casos, PG1 por ejemplo es un éster benzoico tal como un éster 4-nitrobenzoico. Primero, los intermediarios (10a) se ciclan a los esteres macrocíclicos (10b), estos últimos se desprotegen mediante la remoción del grupo PG1 a (10c), que se hacen reaccionar con intermediarios (4b), seguido por la remoción del grupo protector de carboxilo PG2. La ciclación, desprotección de PG1 y PG2 y el acoplamiento con (4b) son según se describió anteriormente. Los grupos R1 se pueden introducir en cualquier etapa de la síntesis, ya sea como la última etapa, según se describió anteriormente, o con anterioridad, antes de la formación del macrociclo. En el siguiente esquema, se introducen los grupos R1 siendo -NH-SO2R6 o -OR5 (que son según se especificó anteriormente): En el esquema anterior, PG2 es según se definió anteriormente y L1 es un grupo P3 donde n y R3 son según se definió anteriormente y donde X es N, L1 también puede ser un grupo protector de nitrógeno (PG, según se definió anteriormente) y donde X es C, L1 también puede ser un grupo -COOPG2a, donde el grupo PG2a es un grupo protector carboxilo similar como PG2, pero donde PG2a se puede escindir de manera selectiva con respecto a PG2. En una modalidad, PG2a es t-butilo y PG2 es metilo o etilo. Los intermediarios (11c) y (11d) donde L1 representa un grupo (b) corresponden a los intermediarios (1a) y se pueden procesar además según se especificó anteriormente.

Acoplamiento de los bloques de construcción p1 y p2 Los bloques de construcción P1 y P2 se unen usando una reacción de formación de amida siguiendo los procedimientos que se describieron anteriormente. El bloque de construcción P1 puede poseer un grupo protector de carboxilo PG2 (como en (12b)) o ya se puede encontrar unido al grupo PV (como en (12c)). L2 es un grupo protector N (PG), o un grupo (b), según se especificó anteriormente. L3 es hidroxi, -OPG1 o un grupo -O-R4 según se especificó anteriormente. Cuando en cualquiera de los siguientes esquemas de reacción, L3 es hidroxi, antes de cada etapa de reacción, se puede proteger como un grupo -OPG1 y, si se desea, después se puede desproteger nuevamente para una función hidroxi libre. De manera similar, según se describió anteriormente, la función hidroxi se puede convertir en un grupo -O-R4.

En el procedimiento del esquema anterior, un ciclopropil aminoácido amino (12b) o (12c) se acopla a la función acida del bloque de construcción P2 (12a) con la formación de una unión de amida, siguiendo los procedimientos que se describieron anteriormente. Se obtuvieron los intermediarios (12d) o (12e). donde en estos últimos, L2 es un grupo (b), los productos resultantes son secuencias de P3-P2-P1 que comprenden algunos de los intermediarios (11c) o (11d) en el esquema de reacción anterior. La remoción del grupo protector ácido en (12d), usando las condiciones apropiadas para el grupo protector usado, seguido por el acoplamiento con una amina H2N-SO2R6 (2b) o con HOR5 (2c), según se describió anteriormente, nuevamente da los intermediarios (12e), donde -COR1 son grupos amida o éster. Cuando L2 es un grupo N-protector, se puede remover dando los intermediarios (5a) o (6a). En una modalidad, PG en esta reacción es un grupo BOC y PG2 es metilo o etilo. Cuando, adicionalmente L3 es hidroxi, el material de partida (12a) es Boc-L-hidroxiprolina. En una modalidad particular, PG es BOC, PG2 es metilo o etilo y L3 es -O-R4. En una modalidad, L2 es un grupo (b) y estas reacciones comprenden el acoplamiento de P1 a P2-P3, que produce los intermediarios (1a-1) o (1a) mencionados anteriormente. En otra modalidad, L2 es un grupo protector N PG, que es según se especificó anteriormente y la reacción de acoplamiento produce intermediarios (12d-1) o (12e-1), de los cuales se puede eliminar el grupo PG, usando las condiciones de reacción mencionadas anteriormente, obteniendo los intermediarios (12-f) o respectivamente (12g), que comprende los intermediarios (5a) y (6a), según se especificó anteriormente: En una modalidad, el grupo L3 en los esquemas anteriores representa un grupo -O-PG1 que se puede introducir en un material de partida (12a) donde L3 es hidroxi. En esta instancia, PG1 se selecciona de manera que se puede escindir de manera selectiva con respecto al grupo L2 que es PG. De manera similar, los bloques de construcción P2 donde X es C, que son derivados de ciclopentano o ciclopenteno, se pueden unir a los bloques de construcción P1 , según se indica en el siguiente esquema donde R1, R2, L3 son según se especificó anteriormente y PG2 y PG2a son grupos protectores de carboxilo. PG2a típicamente se selecciona de manera que se puede escindir de manera selectiva con respecto al grupo PG2. La remoción del grupo PG a en (13c) da los intermediarios (7a) o (8a), que se pueden hacer reaccionar con (5b), según se describió anteriormente.

En una modalidad particular, donde X es C, R2 es H y donde X y el R2 que posee carbono se encuentran unidos por un enlace simple (P2 siendo un resto de ciclopentano), PG2a y L3 tomados juntos forman un enlace y el bloque de construcción P2 se representa mediante la fórmula: El ácido bicíclico (14a) se hace reaccionar con (12b) o (12c) similar, según se describió anteriormente para (14b) y (14c) respectivamente, donde la lactona se abre dando los intermediarios (14c) y (14e). Las lactonas se pueden abrir usando procedimientos de hidrólisis de éster, por ejemplo usando las condiciones de reacción que se describieron anteriormente para la remoción alcalina de un grupo PG1 en (9b), en especial usando condiciones básicas, tales como un hidróxido de metal álcali, por ejemplo NaOH, KOH, en especial LiOH.

Los intermediarios (14c) y (14e) se pueden procesar adicionalmente, según se describe a continuación en la presente.

Acoplamiento de los bloques de construcción P3 y P2 Para los bloques de construcción P2 que poseen un resto de pirrolidina, los bloques de construcción P3 y P2 o P3 y P2-P1 se unen usando una reacción de formación de carbamato siguiendo los procedimientos que se describieron anteriormente para el acoplamiento de (5a) con (5b). Un procedimiento general para el acoplamiento de los bloques P2 que poseen un resto de pirrolidina se representa en el siguiente esquema de reacción donde L3 es según se especificó anteriormente y L4 es un grupo -O-PG2, un grupo (e En una modalidad, L4 en (15a) es un grupo -OPG2, el grupo PG 2 puede elimianrse y el ácido resultante acoplarse con los ciclopropil aminoácidos (12a) o (12b), dando los intermediarios (12d) o (12e) donde L2 es un radical (d) o (e). Un procedimiento general para el acoplamiento de los bloques P3 con un bloque P2 o con un bloque P2-P1 donde el P2 es un ciclopentano o ciclopenteno se muestra en el siguiente esquema. L3 y L4 son según se especificó anteriormente.

En una modalidad particular, L3 y L4 tomados juntos pueden formar un puente de lactona como en (14a) y el acoplamiento de un bloque P3 con un bloque P2 es de la siguiente manera: La lactona bicíclica (14a) se hace reaccionar con (5b) en una reacción de formación de amida a amida (16c) en la cual el puente de lactona se abre a (16d). Las condiciones de reacción para las reacciones de formación de amida y de apertura de lactona son según se describió anteriormente o a continuación en la presente. El intermediario (16d) a su vez se puede acoplar a un grupo P1 , según se describió anteriormente. Las reacciones en los esquemas anteriores se llevan a cabo usando los mismos procedimientos según se describió anteriormente para las reacciones de (5a), (7a) o (8a) con (5b) y, en especial, las reacciones anteriores donde L4 es un grupo (d) o (e) corresponden a las reacciones de (5a), (7a) o (8a) con (5b), según se describió anteriormente. Los bloques de construcción P1 , P1', P2 y P3 usados en la preparación de los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar a partir de intermediarios conocidos en la técnica. Una cantidad de dichas síntesis se describen a continuación en mayor detalle.

Los bloques individuales de construcción se pueden preparar primero y después acoplarlos juntos o de manera alternativa, los precursores de los bloques de construcción se pueden acoplar juntos y se pueden modificar en una etapa posterior para la composición molecular deseada. Los grupos funcionales en cada uno de los bloques de construcción se pueden proteger para evitar las reacciones secundarias.

Síntesis de los bloques de construcción P2 Los bloques de construcción P2 contienen cualquiera de un resto de pirrolidina, un ciclopentano o ciclopenteno sustituido por un grupo -O-R4. Los bloques de construcción P2 que contienen un resto de pirrolidina pueden ser derivados de hidroxi prolina disponible comercialmente. La preparación de los bloques de construcción P2 que contienen un anillo cilopentano se pueden llevar a cabo según se muestra en el siguiente esquema.

El ácido bicíclico (17b) se puede preparar, por ejemplo, a partir de 3,4-bis(metoxicarbonil)ciclopentanona (17a), según lo descrito por Rosenquist et al. en Acta Chem. Scand. 46 (1992) 1127-1129. Una primera etapa en este procedimiento comprende la reducción de un grupo ceto con un agente reductor como borohidruro de sodio en un solvente tal como metanol, seguido por la hidrólisis de los esteres y finalmente el cierre anular para la lactona bicíclica (17b) usando procedimientos de formación de lactona, en especial mediante el uso de anhídrido acético en la presencia de una base débil, tal como piridina. El grupo funcional de ácido carboxílico en (17b) se puede proteger entonces mediante la introducción de un grupos protector de carboxilo adecuado, tal como un grupo PG2, que es según se especificó anteriormente, proporcionando de esa manera éster biciclico (17c). El grupo PG2 en especial es de ácido inestable, tal como un grupo t.butil y se introduce por ejemplo mediante el tratamiento con isobuteno en la presencia de un ácido de Lewis o con dicarbonato de di-ter-butilo en la presencia de una base tal como una amina terciaria, como dimetilaminopiridina o trietilamina en un solvente como diclorometano. La apertura de lactona (17c) usando las condiciones de reacción que se describieron anteriormente, en especial con hidróxido de litio, da el ácido (17d), que se puede usar además en reacciones de acoplamiento con los bloques de construcción P1. El ácido libre en (17d) también se puede proteger, preferentemente con un grupo protector ácido PG2a que se puede escindir de manera selectiva con respecto a PG2 y la función hidroxi se puede convertir en un grupo -OPG1 o en un grupo -O-R4.

Los productos obtenidos al remover el grupo PG2 son los intermediarios (17g) y (17i) que corresponden a los intermediarios (13a) o (16a) especificados anteriormente. Los intermediarios con estereoquímica específica se pueden preparar por medio de resolver los intermediarios en la secuencia de reacción anterior. Por ejemplo, (17b) se puede resolver siguiendo lo be resolved siguiendo procedimientos conocidos en la técnica, por ejemplo mediante la acción de la forma de sal con una base ópticamente activa o mediante cromatografía quiral y los estereoisómeros resultantes se pueden procesar también según se describió anteriormente. Los grupos OH y COOH en (17d) se encuentran en esta posición cis. Los análogos trans se pueden preparar mediante la inversión de la estereoquímica en el carbono que posee la función OH mediante el uso de reactivos específicos en las reacciones introduciendo OPG1 o O-R4 que invierten la estereoquímica, tal como, por ejemplo, mediante la aplicación de una reacción de Mitsunobu. En una modalidad, los intermediarios (17d) se acoplan a los bloques P1 (12b) o (12c), cuyas reacciones de acoplamiento corresponden ai acoplamiento de (13a) o (16a) con los mismos bloques P1 , usando las mismas condiciones. La posterior introducción de un sustituyente -O-R4, según se describió anteriormente, seguido por la remoción del grupo de protección ácido PG2 da los intermediarios (8a-1), que son una subclase de los intermediarios (7a), o una parte de los intermediarios (16a). Los productos de reacción de la remoción de PG2 se pueden acopiar además al bloque de construcción P3. En una modalidad PG2 en (17d) es t-butilo que se puede remover en condiciones acidas, por ejemplo con ácido trifluoroacético.

Un bloque de construcción P2 no saturado, es decir un anillo ciclopenteno se puede preparar según se ilustra en el esquema a continuación.

Una reacción de eliminación de bromación de 3,4-bis(metoxicarbonil)ciclopentanona (17a) según lo descrito por Dolby et al. en J. Org. Chem. 36 (1971) 1277-1285 seguido por la reducción del grupo funcional ceto con un agente de reducción como borohidruro de sodio proporciona el ciclopentenol (19a). La hidrólisis de éster selectiva usando, por ejemplo, hidróxido de litio en un solvente como una mezcla de dioxano y agua, proporciona el ciclopentenol monoéster sustituido por hidroxi (19b).

Un bloque de construcción P2 no saturado donde R2 también puede ser diferente a hidrógeno, se puede preparar según se ilustra en el esquema a continuación.

La oxidación del 3-metil-3-buten-1-ol (20a) disponible comercialmente, en especial mediante un agente de oxidación como clorocromato de piridinio, da (20b), que se convierte en el éster de metilo correspondiente, por ejemplo, mediante el tratamiento con cloruro de acetilo en metanol, seguido por la reacción de bromación con bromo dando el bromo a-bromo éster (20c). Este último se puede condensar con el éster de alquenilo (20e), obtenido de (20d) mediante una reacción de formación de éster. El éster en (20e) preferentemente es un éster de t-butilo que se puede preparar a partir del correspondiente ácido disponible comercialmente (20d), por ejemplo, mediante el tratamiento con dicarbonato de di-ter-butilo en la presencia de una base como dimetilaminopiridina. El intermediario (20e) se trata con una base, tal como diisopropil amida de litio en un solvente como tetrahidrofurano y se hace reaccionar con (20c) para dar el éster de alquenilo (20f). La ciclación de (20f) mediante una reacción de metátesis de olefina, que se lleva a cabo según se describió anteriormente, proporciona derivado de ciclopenteno (20g). La epoxidación estereoselectiva de (20g) se puede llevar a cabo usando el método de epoxidaci?n asimétrica de Jacobsen para obtener el epóxido (20h). Por último, una reacción de apertura de epóxido en condiciones básicas, por ejemplo, mediante la adición de una base, en especial DBN (1 ,5-diazabiciclo-[4,3,0]non-5-eno), da el alcohol (20i). Opcionalmente, el doble enlace en el intermediario (20i) se puede reducir, por ejemplo mediante la hidrogenación catalítica usando un catalizador como paladio sobre carbono, dando el compuesto de ciclopentano correspondiente. El éster de t-butilo se puede remover al ácido correspondiente, que posteriormente se acopla a un bloque de construcción P1. El grupo -O-R4 se puede introducir en los anillos de pirrolidina, ciclopentano o ciclopenteno en cualquier etapa conveniente de la síntesis de los compuestos de acuerdo con la presente invención. Un enfoque es introducir primero el grupo -O-R4 a los anillos mencionados y posteriormente agregar los otros bloques de construcción deseados, es decir P1 (opcionalmente con la cola P1') y P3, seguido por la formación del macrociclo. Otro enfoque es acoplar los bloques de construcción P2, que no posee sustituyente -O-R4, con cada P1 y P3 y agregar el grupo -O-R4 ya sea antes o después de la formación del macrociclo. En este último procedimiento, los restos P2 poseen un grupo hidroxi, que se puede proteger mediante un grupo protector PG1. Los grupos R4 se pueden introducir en los bloques de construcción P2 por medio de hacer reaccionar los intermediarios sustituidos por hidroxi (21a) o (21b) con los intermediarios (4b) similares, según se describió anteriormente para la síntesis de (l)a partir de (4a). Estas reacciones se representan en los siguientes esquemas, donde L2 es según se especificó anteriormente y L5 y L5a independientemente entre sí, representan hidroxi, un grupo protector de carboxilo -OPG2 o -OPG2a, o L5 también puede representar un grupo P1 tal como un grupo (d) o (e), según se especificó anteriormente, o L5a también puede representar un grupo P3 tal como un grupo (b) según se especificó anteriormente. Los grupos PG2 y PG2a son según se especificó anteriormente. Cuando los grupos L5 y L5a son PG2 o PG2a, se seleccionan de manera que cada grupo se puede escindir de manera selectiva con respecto al otro. Por ejemplo, uno de L5 y L5a puede ser un grupo metilo o etilo y el otro un grupo bencilo o t-butilo. En una modalidad en (21a), L2 es PG y L5 es -OPG2 o en (21d), L5a es -OPG2 y L5 es -OPG2 y los grupos PG2 se remueven según se describió anteriormente.

En otra modalidad, el grupo L es BOC, L5 es hidroxi y el material de partida (21a) es BOC-hidroxiprolina disponible comercialmente, o cualquier otra forma estereoisomérica de la misma, por ejemplo BOC-L-hidroxiprolina, en especial, el isómero trans de esta última. Cuando L5 en (21 b) es un grupo protector de carboxilo, se puede eliminar siguiendo los procedimientos que se describieron anteriormente para (21c). En aún otra modalidad, PG en (21b-1) es Boc y PG2 es un éster de alquilo inferior, en especial un éster metilo o etilo. La hidrólisis de este último éster al ácido se puede llevar a cabo mediante procedimientos estándar, por ejemplo, la hidrólisis acida con ácido clorhídrico en metanol o con un hidróxido de metal alcalino tal como NaOH, en especial con LiOH. En otra modalidad, los análogos de ciclopentano o ciclopenteno sustituidos por hidroxi (21 d) se convierten en (21 e), que, cuando L5 y L5a son - OPG2 o -OPG2a, se pueden convertir en los ácidos correspondientes (21f) mediante la remoción del grupo PG2. La remoción de PG2a en (21e-1) conduce a intermediarios similares. Los intermediarios (4b), que son derivados de isoquinolina, se pueden preparar usando procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, US 2005/0143316 proporciona diversos métodos para la síntesis de isoquinolinas como R4-OH o intermediarios R -LG. La metodología para la síntesis de tales isoquinolinas ha sido descrito por N. Briet et al., Tetrahedron, 2002, 5761 y se muestra a continuación, donde R4a, R4b y R4b' son sustituyentes en el resto de isoquinolina que posee los significados que se definen en lap resente para los sustituyentes del grupo R4.

Los derivados del ácido cinnámico (22b) se transforman en 1-cloroisoquinolinas en un procedimiento de tres etapas. Las cloroisoquinolinas resultantes (22e) se pueden acoplar posteriormente a derivados de hidroxipirrolidina, hidroxiciclopentano o hidroxiciclopentenoderivatives según se describió en la presente. En una primera etapa, se activa el grupo carboxilo en los ácidos cinnámicos (22b), por ejemplo mediante el tratamiento con un cloroformato de alquilo C?-6 (en especial metilo o etilo) en presencia de una base. Los anhídridos combinados resultantes se tratan luego en acida de sodio dando las acil azidas (22c). Otros varios métodos se encuentran disponibles para la formación de acilazidas a partir de ácidos carboxílicos, opr ejemplo el ácido carboxílico se puede tratar con difenilfosforilazida (DPPA) en un solvente aprótico, tal como cloruro de metileno, en presencia de una base. En una etapa siguiente, las acilazidas (22c) se transforman en las correspondientes isoquinolonas (22d), en especial, calentando las acilazidas en un solvente de alta ebullición, tal como difeniléter. Los ácidos cinámicos de partida (22d) se encuentran disponibles en el mercado o se pueden obtener de los correspondientes benzaldehídos (22a) mediante condensación directa con ácidos masónicos o derivados de los mismos, o empleando una reacción de Wittig. Las isoquinolonas del intermediario (22d) se pueden transformar en las 1-cloro-isoquinolinas correspondientes mediante el tratamiento con un agente halogenante tal como oxicloruro de fósforo. Los grupos R4 que son isoquinolinas también se pueden preparar siguiendo los siguientes procedimientos, según lo descrito en K. Hirao, R. Tsuchiya, Y. Yano, H. Tsue, Heterocycles 42(1) 1996, 415-422.

Un método alternativo para la síntesis del sistema anular de isoquinolina es el procedimiento de Pomeranz-fritsh. Este método comienza con la conversión de un derivado de benzaldehgido (23a) en una imina funcionarizada (23b), que luego se transforma en un sistema anular de isoquinolina mediante el tratamiento con un ácido a temperatura elevada. Este método es especialmente útil para la preparación de intermediarios de isoquinolina que se sustituyen en la posición C8 indicada mediante el asterisco. Las isoquinolinas del intermediario (23c) se pueden transformar en las 1-cloroquinolinas (23e) correspondientes en un procedimiento de dos etapas. La primera etapa comprende la formación de un N-óxido de isoquinolina (23d) mediante el tratamiento de isoquinolina (23c) con un peróxido tal como el ácido meta-cloroperbenzoico en un solvente apropiado tal como diclorometano. El intermediario (23d) se transforma en la 1-cloroisoquinolina correspondiente mediante tratamiento con un agente halogenante, tal como oxicloruro de fósforo. Otro método para la síntesis del sistema anular de isoquinolina se muestra en el esquema a continuación.

En este procedimiento, la forma aniónica del derivado de orto-alquilbenzamida (24a) se obtiene mediante el tratamiento con una base fuerte tal como ter-butil litio en un solvente tal como THF y posteriormente se condensa con un derivado de nitrilo, dando isoquinolina (24b). Este último se puede transformar en la 1-cloroisoquinolina correspondiente mediante los métodos que se describieron anteriormente. R' y R" en (24a) son grupos alquilo, en especial, grupos alquilo de C1-4, por ejemplo metilo o etilo. El siguiente esquema muestra un método adicional para la síntesis de isoquinolinas.

El intermediario (24a) se desprotona usando una base fuerte como las que se describieron anteriormente. R' y R" son según se especificó anteriormente. El anión del intermediario resultante se condensa con un éster (25a), obteniendo intermediario de cetona (25b). En una reacción posterior, el último intermediario (25b) se hace reaccionar con un amoníaco o sal de amonio, por ejemplo, acetato de amonio, a temperatura elevada, dando la formación de isoquinolona (24b). Una variedad de ácidos carboxílicos con la estructura general (25a) se puede usar en la síntesis anterior. Estos ácidos se encuentran disponibles, ya sea comercialmente o se pueden preparar mediante procedimientos conocidos en la técnica. Se muestra un ejemplo de la preparación derivados de 2-aminocarboxi -(sustituido)-aminotiazol (25a-1), siguiendo el procedimiento descrito por Berdikhina et al. en Chem. Heterocycl. Compd. (Engl. Transí.) (1991), 427-433, en el siguiente esquema de reacción que ilustra la preparación de 2-carboxi-4-isopropil-tiazol (25a-1): Se hace reaccionar tiooxamato de etilo (26a) con la ß-bromocetona (26b) para formar el éster tiazolilo del ácido carboxílico (26c), que se hidroliza al ácido correspondiente (25a-1). El etil éster en estos intermediarios se puede reemplazar por los grupos protectores carboxilo PG2, según se definió anteriormente. En el esquema anterior, R4c es según se definió anteriormente y en especial es alquilo C1- , más en especial, i-propilo. La bromocetona (26b) se puede preparar a partir de 3-metil-butan-2-ona (MIK) con un agente sililante (tal como TMSCI) en la presencia de una base adecuada (en especial LiHMDS) y bromo.

La síntesis de otros ácidos carboxílicos (25a), en especial, de ácidos carboxílicos amino tiazol sustituidos (25a-2) se ilustra a continuación en la presente: La tiourea (33c) con varios sustituyentes R a, que, en especial, son alquilo C?-6, se puede formar mediante la reacción de la amina apropiada (33a) con ter-butilisotiocianato en la presencia de una base como diisopropiletilamina en un solvente como diclorometano seguido por la remoción del grupo ter-butilo en condiciones acidas. La posterior condensación del derivado de tiourea (33c) con ácido 3-bromopirúvico proporciona el ácido tiazol carboxílico (25a-2). Además, un método adicional para la preparación de isoquinolinas se ilustra en el siguiente esquema de reacción.

En la primera etapa de este procedimiento se somete un derivado de orto-alquilarilimina (28a) a condiciones de desprotonación (por ejemplo sec-butil litio, THF) y el anión resultante se condensa con un derivado de ácido carboxílico activo, tal como una amida de Weinreb (28b). La ceto imina resultante (28c) se convierte en la isoquinolina (28d) mediante condensación con acetato de amonio a temperaturas elevadas. Las isoquinilinas obtenidas de esa manera se pueden convertir en las 1-cloroisoquinolinas correspondientes mediante los métodos descritos en la presente. Las isoquinolinas descritas en la presente, actúa ya sea como tal o incorporado en los restos de hidroxipirrolidina, hidroxiciclopentano o hidroxiciclopentano en los compuestos de fórmula (I) o en cualquiera de los intermediarios que se mencionan en la presente, también se pueden funcionalizar. Un ejemplo de tal functionalización se ilustra a continuación en la presente.

El esquema anterior muestra la conversión de una 1-cloro-6-fluoro-isoquinolina en el resto correspondiente de 1-cloro-6-alcoxi C-?-6-isoquinolina (29b), mediante el tratamiento de (29a) con un alcóxido de sodio o potasio en un solvente de alcohol del cual deriva el alcóxido. L6 en el esquema anterior representa halo o un grupo R en el esquema anterior representa alquilo C1-6 y LG es un grupo de salida. En una modalidad LG es fluoro. L7 y L8 representan variso sustituyentes que se pueden unir en estas posiciones del resto P2, en particular grupos tales como OL5, o L8 puede ser un grupo P1 y L7 un grupo P3, o L7 y L8 tomados juntos pueden formar el resto del sistema anular macrociclico de los compuestos de fórmula (I). El siguiente esquema proporciona un ejemplo para la modificación de isoquinolinas mediante las reacciones de Suzuki. Estos acoplamientos se pueden emplear para funcionalizar una isoquinolina en cada posición del sistema anular siempre que dicho anillo se active o sea funcional de manera adecuada, como por ejemplo con cloro. (30e) (30f) Esta secuencia comienza con 1-cloroisoquinolina (30a) que cuando se trata con un peróxido tal como ácido metacloroperbenzoico se transforma en el correspondiente N-óxido (30b). El último intermediario se transforma en la correspondiente 1 ,3-dicloroisoquinolina (30c) medíante tratamiento con un agente halogenante, por ejemplo oxi cloruro de fósforo. El intermediario (30c) se puede acoplar con un intermediario (30d), donde L6 es un grupo PG cuando X es N, o L6 es un grupo -COOPG2 cuando X es C, usando métodos descritos en la presente para introducir grupos-O-R4-, para proporcionar el intermediario (30e). El intermediario (30e) se deriva usando un acoplamiento de Suzuki con un ácido aril borónico, en presencia de un catalizador de paladio y de una base, en un solvente tal como THF, tolueno o un solvente dipolar aprótico tal como DMF, para dar el intermediario de C3-arilisoquinolina (30f). También se pueden emplear ácidos heteroarilborónicos en este procedimiento de acoplamiento para proporcionar C3-heteroarilisoquinolinas. Los acoplamientos de Suzuki de sistemas de isoquinolinas con grupos arilo o heteroarilo también se pueden emplear en una etapa posterior de síntesis en la preparación de compuestos de fórmula (I). Los sistemas anulares de isoquinolina también se pueden convertir en grupos funcionales mediante el uso de otras reacciones del catalizador de paladio, tal como los acoplamientos de Heck, Sonogashira o Stille, según lo ilustrado por ejemplo en US 2005/1043316.

Síntesis de los bloques de construcción P1 El ciclopropanaminoácido usado en la preparación del fragmento P1 se encuentra disponible comercialmente o se puede preparar usando procedimientos conocidos en la técnica. En especial, el etil éster amino-vinil-ciclopropilo (12b) se puede obtener de acuerdo con el procedimiento descrito en WO 00/09543 o según se ilustra en el siguiente esquema, donde PG2 es un grupo protector carboxilo según se especificó anteriormente: -1) (12b) El tratamiento de imina (31a) disponible en el mercado o que se puede obtener fácilmente con 1 ,4-dihalobuteno en presencia de una base produce (31b), que después de la hidrólisis da ciclopropil aminoácido (12b), que posee el sustituyente alilo syn para el grupo carboxilo. La resolución de la mezcla enantiomérica (12b) produce (12b-1). La resolución se lleva a cabo usando procedimientos conocidos en la técnica tal como separación enzimática; cristalización con un ácido quiral; o derivación química; o mediante cromatografía quiral en columna. Los intermediarios (12b) o (12b-1) may se pueden acoplar a los derivados P2 apropiados según se describió anteriormente. Los bloques de construcción P1 para la preparación de compuestos de acuerdo con la fórmula general (I) donde R1 es -OR5 o -NH-SO2R6 se pueden preparar haciendo reaccionar los aminoácidos (32a) con el alcohol apropiado o amina, respectivamente, en condiciones estándar para la formación de éster o amida. Los ciclopropil aminoácidos (32a) se preparan introduciendo un grupo protector N PG y removiendo PG2 y los aminoácidos (32a) se convierten en las amidas (12c-1) o esteres (12c-2), que son subgrupos de los intermediarios (12c), según se indica en el siguiente esquema de reacción, donde PG es según se especificó anteriormente.

La reacción de (32a) con amina (2b) es un procedimiento de formación de amina. La reacción similar con (2c) es una reacción de formación de éster. Ambas se pueden llevar a cabo siguiendo los procedimientos que se describieron anteriormente. Esta reacción da los intermediarios (32b) o (32c) de los cuales se remueve el grupo amino protector mediante métodos estándar tales como aquellos que se describieron anteriormente. Esto a su vez, produce el intermediario deseado (12c-1). Los materiales de partida (32a) se puede preparar a partir de los intermediarios mencionados anteriormente (12b) introduciendo primero un grupo protector N PG y posteriormente, removiendo el grupo PG2, En una modalidad, la reacción de (32a) con (2b) se lleva a cabo mediante el tratamiento del aminoácido con el agente de acoplamiento, por ejemplo N.N'-carbonil-dümidazol (CDI) o los similares, en un solvente como THF, seguido por la reacción con (2b) en la presencia de una base tal como 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU). De manera alternativa, el amino ácido se puede tratar con (2b) en la presencia de una base como diisopropiletilamina, seguido por el tratamiento con un agente de acoplamiento, tal como hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-pirrolidino-fosfonio (disponible en el mercado como PyBOP®) para efectuar la introducción del grupo de sulfonamida. Los Intermediarios (12c-1) o (12c-2) a su vez, se pueden acoplar a los derivados de prolina, ciclopentano o ciclopenteno apropriados según se describió anteriormente.

Síntesis de los bloques de construcción P3 Los bloques de construcción P3 se encuentran disponibles en el mercado o pueden prepararse de acuerdo con metodologías conocidas para aquellas personas con experiencia en el arte. Una de estas metodologías se muestra en el esquema que sigue y usa aminas monoaciladas, tales como trifluoroacetamida o una amina protegida con Boc.

En el esquema anterior, R junto con el grupo CO forma un grupo protector N, en particular R es í-butoxi, trifluorometilo; R3 y n son como se los definió con anterioridad y LG es un grupo saliente, en particular halógeno, por ej. cloro o bromo. Las aminas monoaciladas (33a) se tratan con una base fuerte tal como hidruro de sodio y posteriormente se hacen reaccionar con un reactivo LG-alquenilo de C5-ß (33b), en particular haloalquenilo de Cs-ß, para formar las correspondientes aminas protegidas (33c). La desprotección de (33c) produce (5b), que son bloques de construcción P3. La desprotección dependerá del grupo funcional R, así si R es f-butoxi, la desprotección de la correspondiente amina protegida con Boc puede lograrse con tratamiento con un ácido, por ej. ácido trifluoroacético. En forma alternativa, cuando R es por ejemplo trifluoro-metilo, la eliminación del grupo R se logra con una base, por ej. hidróxido de sodio. El siguiente esquema ilustra incluso otro método para preparar un bloque de construcción P3, es decir una síntesis de Gabriel de las alquenilaminas de C5-8 primarias, que puede llevarse a cabo por tratamiento de una ftalimida (34a) con una base, tal como NaOH o KOH, y con (33b), que es como se especificó con anterioridad, seguido por hidrólisis de la N-alquenilimida intermediaria para generar una alquenilamina de C5-8 primaria (5b-1).

En el esquema anterior, n es como se definió con anterioridad. Los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse entre sí siguiendo reacciones de transformación de grupos funcionales conocidas en el arte. Por ejemplo, los grupos amino pueden N-alquilarse, los grupos nitro reducirse a grupos amino, un átomo de halo puede cambiarse por otro halo. Los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse en la correspondiente forma de ?/-óxido siguiendo procedimientos conocidos en el arte para convertir un nitrógeno trivalente en su forma de ?/-óxido. Dicha reacción de ?/-oxidación puede llevarse a cabo en general haciendo reaccionar el material de partida de fórmula (I) con un peróxido orgánico o inorgánico apropiado. Los peróxidos inorgánicos apropiados comprenden, por ejemplo, peróxido de hidrógeno, peróxidos de metales alcalino o metales alcalino-térreos, por ej. peróxido de sodio, peróxido de potasio; los peróxidos orgánicos apropiados pueden comprender peroxiácidos tales como, por ejemplo, ácido bencencarboperoxoico o ácido bencencarboperoxoico sustituido con halo, por ej. ácido 3-clorobencencarboperoxoico, ácidos peroxoalcanoicos, por ej. ácido peroxoacético, alquilhidroperóxidos, por ej. hidro-peróxido de ter-butilo. Los solventes apropiados son, por ejemplo, agua, alcoholes inferiores, por ej. etanol y similares, hidrocarburos, por ej. tolueno, cetonas, por ej. 2-butanona, hidrocarburos halogenados, por ej. diclorometano, y mezclas de dichos solventes. La forma estereoquímicamente pura de los compuestos de fórmula (I) puede obtenerse mediante la aplicación de procedimientos conocidos en el arte. Los diasterómeros pueden separarse por métodos físicos tales como técnicas cromatográficas y cristalización selectiva, por ej., distribución a contra-corriente, cromatografía líquida y similares. Los compuestos de fórmula (I) pueden obtenerse como mezclas racémicas de enantiómeros que pueden separarse de otros siguiendo procedimientos de resolución conocidos en el arte. Los compuestos racémicos de fórmula (I), que son lo suficientemente alcalinos o ácidos pueden convertirse en la correspondiente forma de sal diasteromérica por reacción con un ácido quiral apropiado, respectivamente base quiral. Dichas formas de sal diasteromérica se separan posteriormente, por ejemplo, por cristalización selectiva o fraccionada y se liberan de éstas los enantiómeros por álcali o ácido. Una forma alternativa de separar la forma enantiomérica de los compuestos de fórmula (I) implica cromatografía líquida, en particular cromatografía líquida usando una fase fija quiral. Dicha forma isomérica estereoquímicamente pura también puede derivarse de la correspondiente forma estereoquímicamente pura de los materiales de partida apropiados, siempre que la reacción ocurra de manera estereoespecífica. Con preferencia si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto puede sintetizarse por métodos de preparación estereoespecíficos. Estos métodos pueden emplear en forma ventajosa materiales de partida enantioméricamente puros. En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I) como se especifica aquí, o un compuesto de cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) como se especifica aquí, y un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico. Una cantidad terapéuticamente efectiva en este contexto es una cantidad suficiente para actuar en forma profiláctica, para estabilizar o reducir la infección viral, y en particular la infección viral por HCV, en sujetos infectados o sujetos que presentan riesgo de infección. Incluso en un aspecto adicional, esta invención se refiere a un procedimiento para preparar una composición farmacéutica como se especifica aquí, que comprende mezclar minuciosamente un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico con una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I), como se especifica aquí, o de un compuesto de cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) como se especifica aquí. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención o cualquier sub-grupo de éstos pueden formularse en varias formas farmacéuticas para fines de administración. Como composiciones apropiadas pueden citarse todas las composiciones empleadas normalmente para la administración sistémica de fármacos. Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención, una cantidad efectiva del compuesto particular, de manera opcional en forma de sal de adición o complejo metálico, como componente activo se combina en íntima mezcla con un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico, cuyo vehículo puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para administración. Estas composiciones farmacéuticas se desean en forma de dosificación unitaria apropiada, en particular, para administración por vía oral, rectal, percutánea o por inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, puede emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos usuales tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y similares en el caso de preparaciones líquidas orales tales como suspensiones, jarabes, elixires, emulsiones y soluciones; o vehículos sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes, agentes desintegrantes y similares en el caso de polvos, pildoras, cápsulas y comprimidos. Debido a su facilidad de administración, los comprimidos y las cápsulas representan la forma unitaria de dosificación oral más ventajosa, en cuyo caso obviamente se emplean vehículos farmacéuticos sólidos. Para composiciones parenterales, el vehículo usualmente comprenderá agua estéril, por lo menos en gran parte, aunque pueden incluirse otros componentes, por ejemplo, para ayudar en la solubilidad. Pueden prepararse soluciones inyectables, por ejemplo, en las cuales el vehículo comprende solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y solución de glucosa. Pueden preparase también suspensiones inyectables en cuyo caso pueden emplearse vehículos líquidos apropiados, agentes de suspensión y similares. También se incluyen las preparaciones de forma sólida que pretenden convertirse, inmediatamente antes de su uso, en preparaciones de forma líquida. En las composiciones apropiadas para administración percutánea, el vehículo comprende, en forma opcional, un agente potenciador de la penetración y/o un agente humectante apropiado, combinado en forma opcional con aditivos apropiados de cualquier naturaleza en menores proporciones, cuyos aditivos no introducen un efecto perjudicial significativo en la piel. Los compuestos de la presente invención también pueden administrarse por inhalación o insuflación oral por medio de métodos y formulaciones empleados en el arte para administración por esta vía. De este modo, en general los compuestos de la presente invención pueden administrarse a los pulmones en forma de una solución, una suspensión o un polvo seco, prefiriéndose una solución. Cualquier sistema desarrollado para la administración de soluciones, suspensiones o polvos secos por inhalación o insuflación oral son apropiados para la administración de los presentes compuestos. De este modo, la presente invención proporciona, de manera adicional, una composición farmacéutica adaptada para administración por inhalación o insuflación a través de la boca que comprende un compuesto de fórmula (I) y un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico. Con preferencia, los compuestos de la presente invención se administran a través de inhalación de una solución en dosis nebulizadas o en aerosoles. Resulta especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas mencionadas con anterioridad en forma de dosificación individual para facilidad de administración y uniformidad de dosificación. Forma de dosificación individual como se usa aquí se refiere a unidades físicamente individuales apropiadas como dosificaciones unitarias, cada unidad contiene una cantidad predeterminada de componente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. Algunos ejemplos de dichas formas de dosificación unitaria son los comprimidos (incluyendo comprimidos con ranuras o recubiertos), cápsulas, pildoras, supositorios, paquetes de polvo, obleas, las soluciones inyectables o suspensiones y similares, y sus múltiples adicionales. Los compuestos de fórmula (I) muestran propiedades antivirales.

Las infecciones virales y sus enfermedades asociadas que pueden tratarse usando los compuestos y métodos de la presente invención incluyen aquellas infecciones generadas por el HCV y otros flavivirus patogénicos tales como Fiebre amarilla, Fiebre del dengue (tipos 1-4), Encefalitis de St. Louis, Encefalitis japonesa, Encefalitis del valle de Murray, Virus del Nilo Occidental y Virus de Kunjin. Las enfermedades asociadas con el HCV incluyen fibrosis hepática progresiva, inflamación y necrosis conducente a la cirrosis, enfermedad hepática terminal, y HCC; y para los otros flavivirus patogénicos las enfermedades incluyen fiebre amarilla, fiebre del dengue, fiebre hemorrágica y encefalitis. Una cantidad de los compuestos de esta invención incluso son activos contra cepas mutadas de HCV. En forma adicional, muchos de los compuestos de esta invención muestran un favorable perfil de farmacocinética y tienen propiedades atractivas en lo que respecta a la biodisponibilidad, incluyendo una vida media, AUC (área bajo la curva) y valores pico aceptables y carecen de fenómenos desfavorables tales como inicio rápido insuficiente y retención de tejidos. La actividad antiviral in vitro contra el HCV de los compuestos de fórmula (I) se evaluó en un sistema de replicón del HCV celular basado en Lohmann et al. (1999) Science 285:110-113, con las modificaciones adicionales descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, que de manera adicional se ejemplifica en la sección de ejemplos. Este modelo, mientras que no es un modelo de infección completo para HCV, es ampliamente aceptado como el modelo más robusto y eficiente de replicación de ARN de HCV autónomo actualmente disponible. Los compuestos que exhiben actividad anti-HCV en este modelo celular se consideran candidatos para desarrollo adicional en el tratamiento de infecciones producidas por el HCV en mamíferos. Se apreciará que es importante distinguir entre compuestos que interfieren específicamente con las funciones del HCV de aquellos que ejercen efectos citotóxicos o citostáticos en el modelo de replicón del HCV, y como consecuencia provocan una reducción en el ARN del HCV o concentración de enzimas informantes relacionadas. Se conocen en el campo ensayos para la evaluación de la citotoxicidad celular basada, por ejemplo, en la actividad de enzimas mitocondriales usando colorantes redox fluorogénicos tales como la resazurina. De manera adicional, existen pantallas contra-celulares para la evaluación de la inhibición no selectiva de la actividad de los genes informantes relacionados, tales como luciferasa de la mosca del fuego. Los tipos de células apropiadas pueden equiparse por transfección estable con un gen informante de luciferasa cuya expresión depende de un promotor constitutivamente activo, y dichas células pueden usarse como contra-pantalla para eliminar inhibidores no selectivos. Debido a sus propiedades antivirales, en particular sus propiedades anti-HCV, los compuestos de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, sus profármacos, ?/-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas estereoquímicamente isoméricas, son útiles en el tratamiento de individuos que experimentan una infección viral, en particular una infección por HCV, y para la profilaxis de estas infecciones. En general, los compuestos de la presente invención pueden ser útiles en el tratamiento de animales de sangre caliente infectados con virus, en particular flavivirus tales como HCV. Los compuestos de la presente invención o cualquier sub-grupo de éstos pueden usarse por lo tanto como medicamentos. Dicho uso como medicamento o método de tratamiento comprende la administración sistémica a sujetos infectados con el virus o a sujetos susceptibles de contraer infecciones virales de una cantidad efectiva para combatir las afecciones asociadas con la infección viral, en particular la infección por HCV. La presente invención se refiere, de manera adicional, al uso de los presentes compuestos o cualquier sub-grupo de éstos en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de infecciones virales, en particular la infección por HCV. La presente invención de manera adicional se refiere a un método de tratamiento de un animal de sangre caliente infectado por un virus, o que presenta riesgo de infección por un virus, en particular por HCV, dicho método comprende la administración de una cantidad efectiva desde el punto de vista antiviral de un compuesto de fórmula (I), como se especifica aquí, o de un compuesto de cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I), como se especifica aquí. De manera adicional, la combinación del compuesto anti-HCV conocido con anterioridad, tal como, por ejemplo, interferón-a (IFN-a), interferón-a pegilado y/o ribavirina, y un compuesto de fórmula (I) puede usarse como medicamento en un tratamiento combinado. El término "tratamiento combinado" se refiere a un producto que contiene obligatoriamente (a) un compuesto de fórmula (I), y (b) en forma opcional otro compuesto anti-HCV, como preparación combinada para uso simultáneo, separado o consecutivo en el tratamiento de infecciones producidas por el HCV, en particular, en el tratamiento de infecciones con HCV.

Los compuestos anti-HCV abarcan agentes seleccionados de un inhibidor de polimerasa del HCV, un inhibidor de proteasa del HCV, un inhibidor de otro blanco en el ciclo de vida del HCV, y un agente inmunomodulador, un agente antiviral y sus combinaciones. Los inhibidores de polimerasa del HCV incluyen, sin carácter limitativo, NM283 (valopicitabina), R803, JTK-109, JTK-003, HCV-371 , HCV-086, HCV-796 y R-1479. Los inhibidores de proteasas del HCV (Inhibidores de NS2-NS3 e inhibidores de NS3-NS4A) incluyen, sin carácter limitativo, los compuestos de WO02/18369 (ver, por ej., página 273, líneas 9-22 y página 274, línea 4 hasta la página 276, línea 11); BILN-2061 , VX-950, GS-9132 (ACH-806), SCH-503034, y SCH-6. Otros agents adicionales que pueden usarse son aquellos descritos en WO-98/17679, WO-00/056331 (Vértex); WO 98/22496 (Roche); WO 99/07734, (Boehringer Ingelheim), WO 2005/073216, WO2005073195 (Medivir) y agentes con estructuras similares. Los inhibidores de otros blancos en el ciclo de vida del HCV, incluyendo helicasa NS3; inhibidores de metaloproteasa; inhibidores de oligonucleótidos antisentido, tales como ISIS-14803, AVI-4065 y similares; siARN tales como SIRPLEX-140-N y similares; ARN de bulbos capilares cortos codificados por vectores (shRNA); DNAzimas; ribozimas específicas del HCV tales como heptazima, RPI.13919 y similares; inhibidores de entrada tales como HepeX-C, HuMax-HepC y similares; inhibidores de alfa glucosidasa tales como celgosivir, UT-231 B y similares; KPE-02003002; y BIVN 401. Los agentes inmunomoduladores incluyen, sin carácter limitativo; compuestos con isoforma de interferón natural y recombinante, incluyendo a-interferón, ß-interferón, ?-interferón, ?-interferón y similares, tales como Intron A®, Roferon-A®, Canferon-A300®, Advaferon®, Infergen®, Humoferon®, Sumiferon MP®, Alfaferone®, IFN-beta®, Feron® y similares; compuestos con estructura de interferón derivado (pegilado) de polietilenglicol, tales como interferón-a-2a PEG (Pegasys®), interferón-a-2b PEG (PEG-Intron®), IFN-a-conl pegilado y similares; formulaciones y derivaciones de acción prolongada de compuestos con estructura de interferón tales como el interferón fusionado con albúmina albuferón a y similares; compuestos que estimulan la síntesis de interferón en las células, tales como resiquimod y similares; interleucinas; compuestos que potencian el desarrollo de la respuesta de células T ayudantes del tipo 1 , tales como SCV-07 y similares; agonistas del receptor símil TOLL tales como CpG-10101 (actilon), isatoribina y similares; timosina a-1 ; ANA-245; ANA-246; diclorhidrato de histamina; propagermanio; tetraclorodecaóxido; ampligen; IMP-321 ; KRN-7000; anticuerpos, tales como civacir, XTL-6865 y similares; y vacunas profilácticas y terapéuticas tales como InnoVac C, HCV E1 E2/MF59 y similares. Otros agentes antivirales incluyen, sin carácter limitativo, ribavirina, amantadina, viramidina, nitazoxanida; telbivudina; NOV-205; taribavirina; inhibidores del ingreso de ribosoma interno; inhibidores virales de amplio espectro, tales como inhibidores de IMPDH (por ej., compuestos de US5,807,876, US6,498,178, US6,344,465, US6,054,472, WO97/40028, WO98/40381 , WO00/56331 , y ácido micofenólico y sus derivados, y incluyendo, sin carácter limitativo VX-950, merimepodib (VX-497), VX-148, y/o VX-944); o combinaciones de cualquiera de los anteriores. De este modo, para combatir o tratar las infecciones por HCV, los compuestos de fórmula (I) pueden administrarse en forma concomitante en combinación con por ejemplo, interferón-a (IFN-a), interferón-a pegilado y/o ribavirina, como también productos terapéuticos basados en anticuerpos dirigidos contra epítopes de HCV, ARN de interferencia pequeña (Si RNA), ribozimas, DNAzimas, ARN antisentido, antagonistas de moleséculas pequeñas de por ejemplo proteasa NS3, helicasa NS3 y polimerasa NS5B. En consecuencia, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos como se definió con anterioridad para la fabricación de un medicamento útil para inhibir la actividad del HCV en un mamífero infectado con virus del HCV, donde dicho medicamento se usa en un tratamiento combinado, dicho tratamiento combinado con preferencia comprende un compuesto de fórmula (I) y otro compuesto inhibidor de HCV, por ej. IFN-a (pegilado) y/o ribavirina. Incluso en otro aspecto se proporcionan combinaciones de un compuesto de fórmula (I) como se especifica aquí y un compuesto anti-VIH. Los últimos son con preferencia aquellos inhibidores del VIH que tienen un efecto positivo sobre el metabolismo de los fármacos y/o sobre su farmacocinética que mejora la biodisponibilidad. Un ejemplo de dicho inhibidor de VIH es ritonavir. Como tal, la presente invención proporciona, de manera adicional, una combinación que comprende (a) un inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico; y (b) ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico. El compuesto ritonavir, y sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y los métodos para su preparación se describen en W094/14436. Para obtener una forma de dosificación preferida de ritonavir, ver US6,037,157, y los documentos citados allí: US 5,484,801 , US 08/402,690, y WO95/07696 y WO95/09614. Ritonavir tiene la siguiente fórmula: En una modalidad adicional, la combinación comprende (a) un inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico; y (b) ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico; de manera adicional comprende un compuesto anti-HCV adicional seleccionado de los compuestos como se describe aquí.

En una modalidad de la presente invención se proporciona un procedimiento para preparar una combinación como se describe aquí, que comprende la etapa de combinar un inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico. Una modalidad alternativa de esta invención proporciona un procedimiento en el cual la combinación comprende uno o más agentes adicionales como se describe aquí. Las combinaciones de la presente invención pueden usarse como medicamentos. Dicho uso como medicamento o método de tratamiento comprende la administración sistémica a sujetos infectados con HCV de una cantidad efectiva para combatir las afecciones asociadas con HCV y otros flavi- y pestivirus patogénicos. En consecuencia, las combinaciones de la presente invención pueden usarse en la fabricación de un medicamento útil para tratar, prevenir o combatir la infección o enfermedad asociada con la infección por HCV en un mamífero, en particular para tratar afecciones asociadas con HCV y otros flavi- y pestivirus patogénicos. En una modalidad de la presente invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende una combinación de acuerdo con cualquiera de las modalidades descritas aquí y un excipiente aceptable desde el punto de vista farmacéutico. En particular, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de la fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, (b) una cantidad terapéuticamente efectiva de ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y (c) un excipiente aceptable desde el punto de vista farmacéutico. En forma opcional, la composición farmacéutica de manera adicional comprende un agente adicional seleccionado de un inhibidor de polimerasa del HCV, un inhibidor de proteasa del HCV, un inhibidor de otro blanco en el ciclo de vida del HCV, y un agente inmunomodulador, un agente antiviral y sus combinaciones. Las composiciones pueden formularse en formas de dosificación farmacéutica apropiadas tales como la forma de dosificación descrita con anterioridad. Cada uno de los componentes activos puede formularse por separado y las formulaciones pueden administrarse en forma concomitante o una formulación que contiene ambos y si se desea pueden proporcionarse componentes activos adicionales. Como se usa aquí, el término "composición" pretende abarcar un producto que comprende los componentes especificados, como también cualquier producto que se obtiene, directamente o indirectamente, de la combinación de los componentes especificados. En una modalidad las combinaciones provistas aquí también pueden formularse como preparación combinada para uso simultáneo, separado o consecutivo en la terapia contra el VIH. En tal caso, el compuesto de fórmula general (I) o cualquier sub-grupo de éstos, se formula en una composición farmacéutica que contiene otros excipientes aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y ritonavir se formula por separado en una composición farmacéutica que contiene otros excipientes aceptables desde el punto de vista farmacéutico. De manera conveniente, estas dos composiciones farmacéuticas separadas pueden ser parte de un equipo para uso simultáneo, separado o consecutivo. De este modo, los componentes individuales de la combinación de la presente invención pueden administrarse por separado en diferentes momentos durante el transcurso del tratamiento o en forma concurrente en forma de combinación individual o dividida. Se debe entender que la presente invención, por lo tanto, abarca todos dichos regímenes de tratamiento alternativo o simultáneo y el término "administrar" debe interpretarse en consecuencia. En una modalidad preferida, las formas de dosificación separadas se administran aproximadamente en forma simultánea. En una modalidad, la combinación de la presente invención contiene una cantidad de ritonavir, o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, que es suficiente para mejorar a nivel clínico la biodisponibilidad del inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) con relación a la biodisponibilidad cuando dicho inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) se administra solo. En otra modalidad, la combinación de la presente invención contiene una cantidad de ritonavir, o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, que es suficiente para aumentar por lo menos una de las variables de farmacocinética del inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) seleccionadas de t-? 2, Cm¡n, Cma , Css, AUC a las 12 horas, o AUC a las 24 horas, con relación a dicha por lo menos una variable de farmacocinética cuando el inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) se administra solo. Una modalidad adicional se refiere a un método para mejorar la biodisponibilidad de un inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV que comprende administrar a un individuo que necesita dicha mejoría una combinación como se define aquí, que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de cada componente de dicha combinación. En una modalidad adicional, la invención se refiere al uso de ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, como mejorador de por lo menos una de las variables de farmacocinética de un inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) seleccionada de t-? 2, Cm¡n, Cmax, Css, AUC a las 12 horas, o AUC a las 24 horas; con la salvedad de que dicho uso no se practique en el cuerpo humano o de un animal. El término "individuo" como se usa aqui se refiere a un animal, con preferencia un mamífero, con la mayor preferencia un humano, que ha sido objeto de tratamiento, observación o experimentación. Biodisponibilidad se define como la fracción de dosis administrada que alcanza la circulación sistémica. t1 2 representa la vida media o el tiempo transcurrido para que la concentración plasmática vuelva a la mitad de su valor original. Css es la concentración en estado estacionario, es decir la concentración a la cual la velocidad de ingreso del fármaco es igual a la velocidad de eliminación. Cm¡n se define como la concentración más baja (mínima) medida durante el intervalo de dosificación. Cmax, representa la concentración más alta (máxima) durante el intervalo de dosificación. AUC se define como el área bajo la curva de concentración plasmática-tiempo para un período de tiempo definido. Las combinaciones de esta invención pueden administrarse a los humanos en escalas dosificación específicos para cada componente incluido en dichas combinaciones. Los componentes comprendidos en dichas combinaciones pueden administrarse juntos o por separado. Los inhibidores de proteasa NS3/4a de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, y ritonavir o una de sus sales o esteres aceptables desde el punto de vista farmacéutico, pueden tener niveles de dosificación en el orden de 0.02 a 5.0 gramos por día. Cuando el inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) y ritonavir se administran en combinación, la relación en peso del inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) a ritonavir se encuentra de manera apropiada en la escala de desde aproximadamente 40:1 hasta aproximadamente 1:15, o desde aproximadamente 30:1 hasta aproximadamente 1:15, o desde aproximadamente 15:1 hasta aproximadamente 1: 15, normalmente desde aproximadamente 10: 1 hasta aproximadamente 1 :10, y más normalmente desde aproximadamente 8:1 hasta aproximadamente 1 :8. También son útiles las relaciones en peso de los inhibidores de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) a ritonavir que oscilan desde aproximadamente 6:1 hasta aproximadamente 1 :6, o desde aproximadamente 4:1 hasta aproximadamente 1 :4, o desde aproximadamente 3:1 hasta aproximadamente 1 :3, o desde aproximadamente 2:1 hasta aproximadamente 1 :2, o desde aproximadamente 1.5:1 hasta aproximadamente 1:1.5. En un aspecto, la cantidad en peso de los inhibidores de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) es igual a o mayor que la de ritonavir, donde la relación en peso del inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) a ritonavir se encuentra de manera apropiada en la escala de desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 15: 1 , normalmente desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 10: 1 , y más normalmente desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 8: 1. También son útiles las relaciones en peso del inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) a ritonavir que oscilan desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 6: 1 , o desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 5: 1 , o desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 4:1 , o desde aproximadamente 3:2 hasta aproximadamente 3:1, o desde aproximadamente 1:1 hasta aproximadamente 2:1 o desde aproximadamente 1 :1 hasta aproximadamente 1.5:1. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" como se usa aqui se refiere a aquella cantidad de compuesto activo o componente o agente farmacéutico que produce la respuesta biológica o medicinal que se busca en un tejido, sistema, animal o humano, en vista de la presente invención, por un investigador, veterinario, médico u otro clínico, que incluye el alivio de los síntomas de la enfermedad tratada. Dado que la presente invención se refiere a combinaciones que comprenden dos o más agentes, la "cantidad terapéuticamente efectiva" es esa cantidad de agentes tomados juntos de modo tal que el efecto combinado produzca la respuesta biológica o medicinal deseada. Por ejemplo, la cantidad terapéuticamente efectiva de una composición que comprende (a) el compuesto de fórmula (I) y (b) ritonavir, sería la cantidad del compuesto de fórmula (I) y la cantidad de ritonavir que cuando se toman juntos tienen un efecto combinado que es terapéuticamente efectivo. En general se contempla que una cantidad diaria antiviral efectiva sería desde 0.01 mg/kg hasta 500 mg/kg de peso corporal, con mayor preferencia desde 0.1 mg/kg hasta 50 mg/kg de peso corporal. Puede resultar apropiado administrar la dosis requerida como una, dos, tres, cuatro, o más (sub-)dosis a intervalos apropiados durante el día. Dichas (sub-)dosis pueden formularse como forma de dosificación unitaria, por ejemplo, que contiene 1 a 1000 mg, y en particular 5 a 200 mg de componente activo por forma de dosificación unitaria. La dosis y la frecuencia de administración exactas depende del compuesto particular de fórmula (I) usado, la condición tratada en particular, la gravedad de la afección tratada, la edad, el peso, el sexo, el grado de trastorno y la condición fisica general del paciente particular como también otra medicación que el individuo pudiera estar tomando, como resulta conocido para aquellos con experiencia en el arte. De manera adicional, es evidente que dicha cantidad diaria efectiva puede reducirse o aumentarse dependiendo de la respuesta del sujeto tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescribe los compuestos de la presente invención. Las escalas de cantidad diaria efectiva mencionados con anterioridad son, por lo tanto, solo guías. De acuerdo con una modalidad, el inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) y ritonavir pueden administrarse en forma concomitante una o dos veces por dia, con preferencia por vía oral, donde la cantidad de los compuestos de fórmula (I) por dosis es desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 2500 mg, y la cantidad de ritonavir por dosis es desde 1 hasta aproximadamente 2500 mg. En otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por dia son desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 1500 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 1500 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por dia son desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 1000 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 800 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 150 hasta aproximadamente 800 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 600 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 200 hasta aproximadamente 600 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 400 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 200 hasta aproximadamente 600 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 20 hasta aproximadamente 300 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 400 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 40 hasta aproximadamente 100 mg de ritonavir. Las combinaciones de ejemplo del compuesto de fórmula (I) (mg)/r¡tonavir (mg) para una dosificación de una o dos veces por día 50/100, 100/100, 150/100, 200/100, 250/100, 300/100, 350/100, 400/100, 450/100, 50/133, 100/133, 150/133, 200/133, 250/133, 300/133, 50/150, 100/150, 150/150, 200/150, 250/150, 50/200, 100/200, 150/200, 200/200, 250/200, 300/200, 50/300, 80/300, 150/300, 200/300, 250/300, 300/300, 200/600, 400/600, 600/600, 800/600, 1000/600, 200/666, 400/666, 600/666, 800/666, 1000/666, 1200/666, 200/800, 400/800, 600/800, 800/800, 1000/800, 1200/800, 200/1200, 400/1200, 600/1200, 800/1200, 1000/1200, y 1200/1200. Otras combinaciones de ejemplo del compuesto de fórmula (I) (mg)/ritonavir (mg) para una dosificación de una o dos veces por día 1200/400, 800/400, 600/400, 400/200, 600/200, 600/100, 500/100, 400/50, 300/50, y 200/50.

En una modalidad de la presente invención se proporciona un artículo de fabricación que comprende una composición efectiva para tratar una infección por HCV o inhibir la proteasa NS3 del HCV; y material de envasado que comprende una etiqueta que indica que la composición puede usarse para tratar la infección causada por el virus de la hepatitis C; donde la composición comprende un compuesto de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, o la combinación como se describe aquí. Otra modalidad de la presente invención se refiere a un equipo o recipiente que comprende un compuesto de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, o una combinación de acuerdo con la invención combinar un inhibidor de proteasa NS3/4a del HCV de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, en una cantidad efectiva para usar como estándar o reactivo en una prueba o un ensayo para determinar la capacidad de potenciales productos farmacéuticos para inhibir la proteasa NS3/4a del HCV, el crecimiento del HCV, o ambos. Este aspecto la invención puede encontrar su uso en programas de investigación farmacéutica. Los compuestos y combinaciones de la presente invención pueden usarse en análisis de analíticos blanco de alta resolución tales como aquellos para medir la eficacia de dicha combinación en el tratamiento del HCV.

EJEMPLOS Se pretende que los siguientes ejemplos ilustren la presente invención y no que la limiten.

EJEMPLO 1 Preparación de los intermediarios representativos Síntesis de 1 -hidrox¡-3-(4-isopropilt¡azol-2-il)-6-metoxiisoqu¡nolina Í6) Etapa A A una solución agitada de 3-metil-2-butanona (27.0 g, 313 mmoles) en metanol (150 ml) se agregó bromo (50 g, 313 mmoles). Se dejó que la reacción continúe (decoloración) por debajo de 10°C. Luego, se continuó revolviendo a temperatura ambiente durante 30 min antes de agregar agua (100 ml). Después de 15 min, la mezcla se diluyó con agua (300 ml) y se extrajo cuatro veces con dietil éter Et20. Los extractos de éter se lavaron posteriormente con solución al 10% de Na2C03, agua, salmuera, y se secaron (Na2S04) para dar 42 g (81%) del producto de objetivo como un líquido.

Etapa B A una solución en ebullición de etil tiooxamato (13.3 g ,100g, 100 mmoles) en etanol (100 ml) se agregó 1-bromo-3-metilbutan-2-ona (17.6 g ,g, 106 mmoles) gota a gota durante 15 minutos. La solución se reflujo durante una hora. La solución se agregó a 250 ml de agua congelada y se hizo básica con solución de amoníaco concetrada. Esta mezcla se extrajo dos veces con acetato de etilo AcOEt. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2S04) y se evaporó a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna con diclorometano a diclorometano con 2% de metanol MeOH para dar 13.1 g (65%) del producto de objetivo: 1H-RMN-CDCI3: 7.20 (s, 1 H), 4.49 (m, 2H), 3.25 (m, 1 H), 1.42 (t, 3H), 1.35 (d, 6H).

Etapa C A una solución de ?/,?/-dietil-4-metoxi-2-metilbenzamida 4 (2.4 g, 11 mmoles) en THF anhídrido (30 ml) s -78°C bajo nitrógeno se agregó gota a gota n-buLi (8.9 ml, solución 2.5 M en hexanos). La solución se mantuvo a -78°C durante 30 min. adicionales. Luego, se agregó una solución de tiazol 3 en THF (5 ml) gota a gota. Después de 2h, la reacción se dividió entre agua congelada y AcOEt-acetato de etilo. La purificación mediante cromatografía en columna (acetato de etiloAcOEt/Petróleo éter de petróleo/CH2CI2, 1 :2: 1) dio 1.8 g (43%) del producto de objetivo 4 como un aceite amarillo: >95% puro mediante LCMS.

Etapa D Se calentó una mezcla de 5 (1.98 g, 5.29 mmoles) y acetato de amonio (12.2 g, 159 mmoles) a 140°C en un tubo sellado durante 1 h, luego, se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se dividió entre agua congelada y CH2CI2, se secó (Na2S04) y se filtró sobre gel de sílice para dar 1.59 g (78%) del producto de objetivo 6 como un polvo blanco m/z = 301 (M+H)+.

Síntesis de 1-hidroxi-3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolina (7) El producto de título se obtuvo a partir de metilciclopropilcetona siguiendo los procedimientos reportados para 1-hidroxi-3-(4-isopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolina 6.

Síntesis de 1 ,3-dicloro-6-metoxiisoquinolina (12) Etapa A Se agregó trietilamina (80.5 ml, 578 mmoles) a 0°C bajo nitrógeno a una suspensión de ácido 3-metoxicinnámico (49.90 g, 280 mmoles) en acetona (225 ml). Después de 10 min a 0°C, se agregó etilcloroformato (46.50 g, 429 mmoles) gota a gota mientras que la temperatura se mantuvo a 0°C. Después de 1 h a 0°C, se agregó una solución de azida de sodio (27.56 g, 424 mmoles) en agua (200 ml) lentamente, luego la mezcla de reacción se permitió que se caliente hasta TA, temperatura ambiente. Después de 16 h, la mezcla de reacción se vertió en agua (500 ml) y la acetona se evaporó. El residuo se extrajo con tolueno para dar una solución de 8, que se usó como tal en la siguiente etapa.

Etapa B La solución de tolueno de 8 de la etapa anterior se agregó gota a gota a una solución caliente de difenilmetano (340 ml) y tributilamina (150 ml) a 190°C. El tolueno se destiló de manera inmediata mediante en un dispositivo Dean-Srark. Después de completar la adición, la temperatura de la reacción se elevó a 210°C durante 2 h. Después de enfriar, el producto precipitado se recolectó mediante filtración, se lavó con heptano para dar 49.1 g (29%) del producto de objetivo 9 como un polvo blanco: m/z = 176 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.33 (d, J = 8.9 Hz, 1 H), 7.13 (d, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.07 (dd, J = 8.9 Hz, 2.5 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H).

Se agregó oxicloruro de fósforo (25 ml) lentamente a 9 (1 0.0 g, 57 mmoles) y esta mezcla se calentó a reflujo suave durante 3 h. Después de completar la reacción, oxicloruro de fósforo se evaporó. El residuo se vertió en agua congelada (40 ml) y el pH se reguló a 10 con una solución de NaOH en agua (50%). La mezcla se extrajo con CHCI3, se lavó con salmuera, se secó (Na2S0 ), se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2), para dar 8.42 g del producto de objetivo 10 como un sólido amarillo: m/z = 194 (M+H)+; H-RMN (CDCI3): 8.21 (d, J = 9.3 Hz, 1 H), 8.18 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 7.47 (d, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.28 (dd, J = 9.3 Hz, 2.5 Hz, 1 H), 7.06 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 3.98 (s, 3H).

Etapa D Se agregó ácido metacloroperbenzoico (6.41 g, 28.6 mmoles) en pequeñas partes a 0°C a una solución de 10 (2.70 g, 13.9 mmoles) en CH2CI2 (10 ml). Después de 30 min a 0°C, la mezcla de reacción se calentó hasta la temperatura ambiente durante 12h. Luego, la mezcla de reacción se dividió entre NaOH 1 N y CH2CI2 y posteriormente se lavó con NaOH 1 N y salmuera. La capa orgánica se secó (Na2S04), se filtró y se evaporó para dar 1.89 g (64%) del producto de objetivo 11 como un sólido de color naranja: m/z = 209.9 (M+H)+ Etapa E Se calentó una solución de 11 (1.86 g, 8.86 mmoles) en oxicloruro de fósforo (18 ml) a reflujo durante 3 h. Luego, el oxicloruro de fósforo se evaporó in vacuo. El residuo se vertió en agua congelada (50 ml) y el pH se reguló a 10 con NaOH al 50% en agua. La mezcla se extrajo con CHCI3, la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2S04), se filtró y se evaporó. El material bruto se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2), para dar 350 mg (17%) del producto de objetivo 12 como un sólido amarillo: m/z = 227.9 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.16 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.50 (s, 1 H), 7.25 (dd, J = 9.3 Hz, 2.5 Hz, 1 H), 6.98 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 3.98 (s, 3H).

Síntesis de 4-bromo-1-hidroxi-6-metoxi¡soquinolina (13) Se agregó ?/-bromosuccinimida (2.33 g, 143 mmoles) a una solución de 9 (2.06 g, 11.8 mmoles) en DMF (40 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente hasta el día siguiente. Luego, el DMF se evaporó y CH2CI2 se agregó al residuo. Esta suspensión se calentó a 45°C durante 15 min. El sólido blanco se filtró y se lavó con éter isopropilo, para dar 2.07 g (69 %) del producto de objetivo 13: m/z = 253.7 (M+H)+; 1H RMN (DMSO 6): 8.14 (d, J = 8.8 Hz, 1 H); 7.52 (s, 1 H), 7.17 (dd, J = 8.8 Hz, 2.5 Hz, 1 H), 7.11 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 3.83 (s, 3H).

Síntesis de 5-bromo-1-cloro-6-metoxiisoquinolina (19) Etapa A Una solución equimolesar de p-metoxibenzaldehído (10 g, 73.5 mmoles) y aminoacetaldehído dimetilacetal (7.93 g, 75.4 mmoles) en tolueno (50 ml) se reflujo hasta el día siguiente en un aparato Dean-Stark. Luego, la solución se evaporó in vacuo para dar el producto de objetivo 14 que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional: m/z = 224 (M+H)0 Etapa B Se agregó cloroformato de etilo (8.02 g, 73.9 mmoles) a -10°C, agitando de manera vigorosa, a una solución de 14 (73.5 mmoles) en THF seco (50 ml). Después de 30 min, se permitió que la mezcla de reacción se caliente hasta temperatura ambiente y se agregó trimetilfosfito (10.6 g, 85.2 mmoles). Después de 15h, los volátiles se evaporaron en vacío. El aceite resultante se co-evaporó 3 veces con tolueno para dar el producto de objetivo 15 como un aceite: m/z = 406 (M+H)0 Etapa C El material obtenido a partir de la Etapa B (15) se disolvió en CH2CI2 (200 ml) y se enfrió a 0°C. Luego, se agregó Tetracloruro de titanio (86.0 g, 453 mmoles) y la solución se reflujo hasta el día siguiente. Se permitió que a mezcla de reacción se enfríe a temperatura ambiente. Luego, una solución de NaOH (73 g) en agua (500 ml) se agregó y la mezcla se agitó durante 10 min. El precipitado de Ti02 se filtró, y el filtrado se extrajo con HCl 3N. El pH de la capa acuosa se reguló a 10 con NaOH. El producto se extrajo con CH2CI2, se secó (Na2S04) y se evaporó para dar 5.32 g (45%) del producto de objetivo 16, que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa: m/z = 16O (M+H)0 Etapa D Se agregó lentamente 6-metoxiisoquinolina 16 (5.32 g, 33.4 mmoles) a 0°C a H2S04 conc. (33.5 ml). La mezcla se enfrió a -25°C y se agregó NBS (7.68 g, 43.2 mmoles) en un grado tal que la temperatura de la reacción se mantuvo entre -25°C y -22°C. La mezcla se agitó a -22°C durante 2 h y a -18°C durante 3 h, luego se vertió sobre hielo triturado. El pH se reguló a 9 usando NH3 acuoso concentrado y luego, la suspensión alcalina se extrajo con dietil éter. Las fraccioens orgánicas combinadas se lavaron con NaOH 1 N y agua, se secaron (Na2S04), se filtraron y se evaporaron hasta que se secaron para dar 5.65 g (71%) del producto de objetivo 17: m/z = 237.8 (M+H)0 17 18 Se agregó ácido metacloroperbenzoico (6.73 g, 30 mmoles) a 0°C a una solución de 17 (5.65 g, 24 mmoles) en CH2CI2 (50 ml). Después de 30 min a 0°C para permitir que la mezcla de reacción se caliente hasta temperatura ambiente durante 3.5 h. Luego, se agregó CH2CI2 adicional (300 ml) y esta mezcla se lavó sucesivamente con NaOH 1N y con salmuera. La capa orgánica se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó para dar 6.03 g (100%) del producto de objetivo 18 que se usó como tal en la siguiente etapa: m/z = 253.9 (M+H)0 Se agregó lentamente oxicloruro de fósforo (60 ml) a un 18 frío (6.03 g, 23.7 mmoles) y luego esta mezcla se calentó a reflujo suave durante 30 min. Una vez completada la reacción, se evaporó el oxicloruro de fósforo. El residuo se vertió en agua congelada (50 ml) y el pH se reguló a 10 con NaOH. La mezcla se extrajo con CHCI3, la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2S0 ), se filtró y se evaporó. El material bruto se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2) para dar 1.15 g (18%) del producto de título como un polvo blanco: m/z = 271 ,7 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.17 (d, J = 9.3 Hz, 1 H), 8.28 (d, J = 6.0 Hz, 1 H), 7.94 (d, J = 6.0 Hz, 1 H), 7.41 (d, J = 9.3 Hz, 1 H).

Síntesis de (hex-5-enil)(metil)amina (21) 0 CF, 1 ^ ^ ^ L 3 F3C^N^ Br^^^> ~ ^^^N^0 - ^^^^NH H 20 I 21 I Etapa A Se agregó hidruro de sodio (1.05 eq) lentamente a 0°C a una solución de ?/-metiltrifluoroacetamida (25 g) en DMF (140 ml). La mezcla se revolvió durante 1 h a temperatura ambiente en nitrógeno. Luego, se agregó gota a gota una solución de bromohexeno (32.1 g) en DMF (25 ml) y la mezcla se calentó a 70°C durante 12 horas. La mezcla de reacción se vertió sobre agua (200 ml) y se extrajo con dietiléter (4 x 50 ml), se secó (MgS04), se filtró y se evaporó para dar 35 g del producto de objetivo 20 como un aceite amarillo que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa.

Etapa B Se agregó gota a gota una solución de hidróxido de potasio (187.7 g) en agua (130 ml) a una solución de 20 (35 g) en metanol (200 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Luego, la mezcla de reacción se vertió sobre agua (100 ml) y se extrajo con dietiléter (4 x 50 ml), se secó (MgS04), se filtró y el dietiléter se destiló a presión atmosférica. El aceite resultante se purificó mediante destilación en vacío (13 mm Hg de presión, 50°C) para dar 7.4 g (34 %) del producto de titulo 21 como un aceite incoloro: 1H-RMN (CDCI3): d 5.8 (m, 1 H), 5 (ddd, J = 17.2 Hz, 3.5 Hz, 1.8 Hz, 1 H), 495 (m, 1 H), 2.5 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.08 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 1.4 (m, 4H), 1.3 (br s, 1 H).

EJEMPLO 2 Preparación de ácido 17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxi-isoquinolin- 1-iloxiM3-metil-2.14-dioxo-3.13-diazatriciciori3.3.0.046loctadec-7-eno^4- carboxílico (29) Etapa A 3-Oxo-2-oxa-biciclo[2,2,1]heptano-5-carboxílico ácido 22 (500 mg, 3.2 mmoles) en 4 ml DMF se agregó a 0°C a hexafluorofosfato de 2-(7-Aza-1H-benzotriazol-1-il)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluronio (HATU) (1.34 g, 3.52 mmoles) y ?/-metilhex-5-enilamina (435 mg, 3.84 mmoles) en DMF (3 ml), seguido por N,N-diisopropiletilamina (DIPEA). Después de revolver durante 40 min a 0°C, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. Luego, el solvente se evaporó, el residuo se disolvió en EtOAc acetato de etilo (70 ml) y se lavó con NaHC?3 saturado (10 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo EtOAc (2 x 25 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con NaCI saturado (20 ml), se secaron (Na2S04) y se evaporaron. La purificación mediante cromatografía instantánea (acetato de etiloEtOAc/éter de petróleo, 2:1) dio 550 mg (68%) del producto de objetivo 23 como un aceite incoloro: m/z = 252 (M+H)0 Etapa B Se agregó una solución de LiOH (105 mg en 4 ml de agua) a 0°C a la lactona amida 23, después de 1h, la conversión se completó (HPLC). La mezcla se acidó a pH 2-3 con HCl 1 N, se extrajo con acetato de etilo AcOEt, se secó (MgS04), se evaporó, se co-evaporó con tolueno varias veces y se secó en alto vacio hasta el dia siguiente para dar 520 mg (88%) del producto de objetivo 24: m/z = 270 (M+H)0 Etapa C Se agregaron el clorhidrato de etil éster del ácido 1-(amino)-2-(vinil)ciclopropanocarboxílico 25 (4.92 g, 31.7 mmoles) y HATU (12.6 g, 33.2 mmoles) a 24 (8.14 g, 30.2 mmoles). La mezcla se enfrió en un baño de hielo bajo argón, y luego se agregaron DMF (100 ml) y DIPEA (12.5 ml, 11.5 mmoles) consecutivamente. Después de 30 min a 0°C, la solución se agitó a temperatura ambiente durante un adicional de 3 h. Luego, la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc acetato de etilo y agua, se lavó posteriormente con HCl 0.5 N (20 ml) y NaCI saturado (2 x 20 ml), y se secó (Na2S04). La purificación mediante cromatografía instantánea (acetato de etiloAcOEt/CH2CI2/pÉter de petróleo, 1 :1 :1) dio 7.41 g (60%) del producto de objetivo 26 como un aceite incoloro: m/z = 407 (M+H)4.

Etapa D Se agregó DIAD (218 µl, 1.11 mmoles) a -20°C bajo atmósfera de nitrógeno a una solución de 26 (300 mg, 0.738 mmoles), isoquinolina 7 (308 mg, 1.03 mmoles) y trifenilfosfina (271 mg, 1.03 mmoles) en THF seco (15 ml). Luego, la reacción se calentó hasta la temperatura ambiente. Después de 1.5 h, el solvente se evaporó y el producto bruto se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (gradiente de éter de petróleo/CH2CI2/éter, 3:1.5:0.5 a 1 :1 :1) para dar 290 mg del producto de objetivo contaminado con productos secundarios (90% puro). En segundo lugar, la purificación (el mismo eluyente) dio 228 mg (43%) del producto de objetivo 27: m/z = 687 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 8.11-7.98 (m, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.13-7.10 (m, 2H), 6.89 (s, 1 H), 5.78-5.69 (m, 2H), 5.30-5.25 (m, 1 H), 5.11-5.09 (m, 1H), 499-487 (m, 2H), 415-408 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.71-3.58 (m, 1 H), 3.48-3.15 (m, 4H), 3.03 (s, 3H), 2.90-2.85 (m, 2H), 2.60-2.25 (m, 2H), 2.11-1.82 (m, 6H), 1.55-1.10 (m, 7H), 0.98-0.96 (m, 4H).

Etapa E Se calentó una solución de 27 (220 mg, 0.32 mmoles) y catalizador de 1 ra generación Hoveyda-Grubbs (19 mg, 0.032 mmoles) en 1 ,2-dicloroetano seco desgasificado (400 ml) a 70°C bajo nitrógeno durante 12 h. Luego, el solvente se evaporó y el residuo purificado mediante cromatografía de gel de sílice (Éter de petróleo/CH2CI2/Et2Odietil éter; 3:1 :1) para dar 180 mg (85%) del producto de objetivo 28: m/z = 659 (M+H)\ 1H-RMN (CDCI3): 8.11-8.08 (m, 1 H), 7.98 (s, 1H), 7.10-7.19 (m, 2H), 7.09 (s, 1 H), 6.88 (s, 1 H), 5.70-5.78 (m, 1 H), 5.61-5.69 (m, 1H), 5.18-5.29 (m, 1 H), 463-469 (m, 1H), 405-415 (m, 3H), 3.92 (s, 3H), 401-408 (m, 1 H), 3.28-3.36 (m, 1 H), 3.06 (s, 3H), 2.88-3.05 (m, 2H), 2.61-2.69 (m, 2H), 2.10-2.41 (m, 3H), 1.90-2.02 (m, 4H), 1.71-1.90 (m, 3H), 0.87-1.62 (m, 9H).

Etapa F Se agregó una solución de LiOH (327 mg) en agua (3 ml) a una solución agitada de 28 en THF (15 ml) y MeOH metanol (10 ml). Después de 48h, el solvente se evaporó y el residuo se dividió entre agua y dietiléter. La capa acuosa se acidó (pH = 3) y se extrajo con AcOEt acetato de etilo, se secó (MgS04) y se evaporó. El residuo se cristalizó a partir de dietiléter para dar 128 mg (74%) del compuesto de objetivo 29: m/z = 631 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 8.00-8.03 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 7.12 (s, 1 H), 7.10 (dd, J = 9.0 Hz, 2.4 Hz, 1 H), 7.06 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 6.87 (s, 1 H), 5.64-5.71 (m, 1 H), 5.57-5.61 (m, 1 H), 5.16 (t, J = 9.5 Hz, 1 H), 457-464 (m, 1 H), 3.92 (s, 3H), 3.52-3.60 (m, 1 H), 3.25-3.37 (m, 1 H), 2.42-2.68 (m, 4H), 2.17-2.33 (m, 3H), 2.08-2.17 (m, 2H), 1.71-2.00 (m, 5H), 1.33-1.62 (m, 5H), 0.96-0.99 (m, 4H).

EJEMPLO 3 Preparación de ^-f17-f3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxi-isoquinolin-1 iloxi1-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclori3.3.0.04 61octadec-7-eno-4- carbonilKciclopropiDsulfonamida (30) Se calentó a reflujo una mezcla de 29 (91 mg, 0.14 mmoles) y 1 ,1'-carbonildiimidazol (CDI) (47 mg, 0.29 mmoles) en THF seco (7 ml) durante 2h en nitrógeno. El análisis de LCMS mostró un pico del intermediario (TA = 5.37). Opcionalmente, si se desea se puede aislar el derivado de azalactona. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agregó ciclopropilsulfonamida (52 mg, 0.43 mmoles). Luego, se agregó DBU (50 µl, 0.33 mmoles) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1h, y luego se calentó a 55°C durante 24h. El solvente se evaporó, y el residuo se dividió entre AcOEt acetato de etilo y agua acida (pH = 3). El material bruto se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etiloAcOEt/CH2CI2/Éter de petróleo, 1 :1 :1). El residuo se cristalizó en dietil éter, se filtró para dar el compuesto de objetivo contaminado con la ciclopropilsulfonamida. Este material se trituró en 3 ml de agua, se filtró, se lavó con agua y se secó hasta el día siguiente con la bomba de alto vacío para dar 60 mg (57%) del compuesto de objetivo 30 como un polvo de color levemente amarillo: m/z = IZA (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 10.94 (s, 1 H), 8.08 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.12-7.15 (m, 2H), 6.91 (s, 1 H), 6.35 (s, 1 H), 5.74-5.77 (m, 1H), 5.63-5.69 (m, 1 H), 5.06 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 460 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.35-3.42 (m, 2H), 3.04 (s, 3H), 2.89-2.96 (m, 2H), 2.52-2.52 (m, 2H), 2.37-2.45 (m, 2H), 2.10-2.32 (m, 2H), 1.61-1.93 (m, 4H), 1.3-1.51 (m, 4H), 0.90-1.30 (m, 8H).

EJEMPLO 4 Preparación de ácido 17-[3-(4-isopropiltiazol-2-il) -6-metoxiisoquinolin-1- iloxil-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclof13.3.0.04 61octadec-7-eno- 4-carboxílico (31) El producto de título se obtuvo a partir de 1-hidroxi-3-(4-isopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolina 6, siguiendo los procedimientos reportados para ácido 17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2, 14-dioxo-3, 13-diazatriciclo[13.3.0.0 '6]octadec-7-eno-4- carboxílico 29 (Ejemplo 2): m/z = 633 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 8.03 (d, J = 8.9 Hz, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.20 (s, 1 H), 7.08-7.13 (m, 2H), 6.93 (s, 1 H), 5.61-5.69 (m, 2H), 5.17 (t, J = 9.5 Hz, 1 H), 457-464 (m, 1 H), 3.92 (s, 3H), 3.55-3.63 (m, 1 H), 3.25-3.36 (m, 1 H), 3.11-3.20 (m, 1 H), 3.05 (s, 3H), 2.72-2.83 (m, 1 H), 2.53-2.66 (m, 2H), 2.40-2.51 (m, 1 H), 2.17-2.32 (m, 2H), 1.89-1.93 (m, 2H), 1.71-1.83 (m, 2H), 1.43-1.60 (m, 2H), 1.37 (dd, J = 6.9 Hz, 2.5 Hz, 6H), 1.18-1.36 (m, 2H).

EJEMPLO 5 Preparación de ^-[17-f3-(4-isopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1- iloxil-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclori3.3.0.04 61octadec-7-eno- 4-carbon¡n(ciclopropil)sulfonamida (32) El producto de título se obtuvo a partir de ácido 17-[3-(4-isopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.0 -,4,'6- ]octadec-7-eno-4-carboxílico 31, siguiendo los procedimientos reportados para ?/-[17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinol¡n-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo-[13.3.0.04,6)octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida 30 (Ejemplo 3): m/z = 736 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 10.90 (s, 1 H), 8.02-8.09 (m, 2H), 7.11- 7.14 (m, 2H), 6.96 (s, 1 H), 6.29 (s, 1 H), 5.78-5.83 (m, 1 H), 5.62-5.69 (m, 1 H), 5.06 (t, J = 10.5 Hz, 1 H), 456-464 (m, 1 H), 3.93 (s, 3H), 3.37-3.42 (m, 2H), 3.15-3.21 (m, 1 H), 3.04 (s, 3H), 2.89-2.98 (m, 2H), 2.52-2.61 (m, 2H), 2.23-2.43 (m, 3H), 1.64-1.93 (m, 4H), 1.31-1.50 (m, 10H), 1.18-1.30 (m, 2H), 0.96- 1.15 (m, 2H).

EJEMPLO 6 Preparación de ácido 17-[3-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-6-metoxi- isoquinolin-1-iloxiM3-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclori3.3.0.04 61- octadec-7-eno-4-carboxílico (33) El producto de título se obtuvo a partir de 1-hidroxi-3-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-6-metoxiisoquinolina, siguiendo los procedimientos reportados para ácido 17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il) -6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04 6]octadec-7-eno-4-carboxílico 29 (Ejemplo 2): m/z = 648 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 8.03 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 7.69 (s, 1 H), 7.19 (s, 1 H), 7.04-7.11 (m, 3H), 5.60-5.68 (m, 2H), 5.20 (t, J = 9.2 Hz, 1 H), 454-461 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.54-3.70 (m, 2H), 3.12-3.20 (m, 1 H), 2.83 (s, 3H), 2.35-2.60 (m, 4H), 2.11-2.30 (m, 2H), 1.80-1.93 (m, 2H), 1.69-1.79 (m, 2H), 1.40-1.51 (m, 2H), 1.30 (d, = 13.1 Hz, 6H), 1.10-1.21 (m, 2H).

EJEMPLO 7 Preparación de V-f17-[3-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-6-metoxiisoquinolin- 1-iloxi1-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclori3.3.0.0 61octadec-7-eno^- carbonilKciclopropiDsulfonamida (34) El producto de título se obtuvo a partir de ácido 17-[3-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-6-metoxiisoquinolin-1 -iloxi]-13-metil-2, 14-dioxo-3, 13-diazatriciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico 33, siguiendo los procedimientos reportados para ?/-[17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida 30 (Ejemplo 3): m/z = 751 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 10.90 (s, 1 H), 8.04 (d, J = 9.3 Hz, 1 H), 7.75 (s, 1 H), 7.04-7.07 (m, 3H), 6.32 (s, 1 H), 5.80-5.84 (m, 1 H), 5.62-5.69 (m, 1 H), 5.06 (t, J = 10.3 Hz, 2H), 458-465 (m, 1 H), 3.91 (s, 3H), 3.71-3.79 (m, 1 H), 3.24-3.41 (m, 2H), 3.03 (s, 3H), 2.71-2.97 (m, 2H), 2.57-2.60 (m, 2H), 2.30-2.41 (m, 2H), 2.15-2.30 (m, 1 H), 1.78-2.02 (m, 4H), 0.87-1.58 (m, 14 H).

EJEMPLO 8 Preparación de ácido 17-[3-(pirazol-1-il)-6-metoxi*soqt?inolin-1-?lox¡1-13- metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclori3.3.0.04,61octadec-7-eno- -carboxílico Í22] El producto de título se obtuvo a partir de 1-hidroxi-3-(pirazol-1-il)-6-metoxiisoquinolina, siguiendo los procedimientos reportados para ácido 17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico 29 (Ejemplo 2): m/z = 574 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 8.45 (d, J = 2.3 Hz, 1 H), 8.03 (d, J = 8.9 Hz, 1 H), 7.71 (d, J = 1.0 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.22 (s, 1 H), 7.01-7.05 (m, 2H), 6.43-6.45 (m, 1 H), 5.63-5.70 (m, 2H), 5.18 (dd, J = 10.3 Hz, 2.0 Hz, 1 H), 453-442 (m, 1 H), 3.90 (s, 3H), 3.58-3.67 (m, 1 H), 3.26-3.35 (m, 1 H), 3.02 (s, 3H), 2.65-2.77 (m, 1 H), 2.59-2.68 (m, 1 H), 2.35-2.58 (m, 2H), 2.15-2.30 (m, 2H), 1.89-2.05 (m, 2H), 1.70-1.75 (m, 2H), 1.18-1.61 (m, 4H).

EJEMPLO 9 Preparación de yV-f17-r3-(p¡razol-1-il)-6-metoxiisoquinolin-1-¡loxi1- 13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatricicloM 3.3.0.04 ,61octadec-7-eno- 4-carbonil](ciclopropil) sulfonamida (36) El producto de título se obtuvo a partir de ácido 17-[3-(pirazol-1-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico 22, siguiendo los procedimientos reportados para /-[17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04,6]-octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida 30 (Ejemplo 3): m/z = 677 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 8.49 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 8.06 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.04-7.08 (m, 2H), 6.46-6.48 (m, 1 H), 6.37 (br s, 1 H), 5.71-5.82 (m, 1 H), 5.63-5.69 (m, 1 H), 5.06 (t, J = 10.5 Hz, 1 H), 458-465 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.36-3.44 (m, 2H), 3.04 (s, 3H), 2.80-2.95 (m, 2H), 2.50-2.62 (m, 2H), 2.33-2.45 (m, 2H), 2.20-2.31 (m, 1H), 1.80-2.00 (m, 4H), 1.32-1.70 (m, 2H), 1.17-1.30 (m, 2H), 0.90-1.15 (m, 4H).

EJEMPLO 10 Síntesis del ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14- dioxo-3.13l15-triaza-triciclo| 3.3.0.0 '61octadec-7-eno-4-carboxíl¡co (42) Etapa A A una solución de Boc-hidroxiprolina (760 mg, 3.29 mmoles) en DMSO (50 ml) se agregó ter-butóxido de potasio (1.11 g, 9.87 mmoles). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h antes de agregar 1 ,3-dicloro-6-metoxiisoquinolina 12 (750 mg, 3.29 mmoles). Después de 12 h a temperatura ambiente bajo nitrógeno la mezcla de reacción se desactivó con agua fría, se acidó a pH 4 con HCl, y se extrajo con AcOEt acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó (MgS0 ), se filtró, se evaporó para dar 1.39 g (90%) of 37 como un sólido blanco: m/z = 423 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.10 (d, J = 9.3 Hz, 1 H), 7.15 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.10 (dd, J = 9.3 Hz, 2.5 Hz, 1 H), 6.9 (s, 1 H), 5.80-5.67 (br s, 1 H), 445 (t, J = 7.9, 1 H), 3.95 (s, 3H), 3.80-3.90 (br s, 1 H), 3.70-3.80 (m, 1 H), 2.75-2.6 (m, 1 H), 2.35-2.45 (m, 1H), 1.50 (s, 9H).

Etapa B Se agitó una solución del compuesto 37 (1.25 g, 2.96 mmoles), clorhidrato de etil éster del ácido 1-amino-2-vinilciclopropano carboxilico 25 (526 mg, 2.96 mmoles), HATU (1.12 g, 2.96 mmoles) y DIPEA (1.29 ml, 7.39 mmoles) en DMF (50 ml) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. Después de 12 h, se agregó diclorometano y la solución se lavó consecutivamente con NaHC03 acuoso y agua. La capa orgánica se secó (MgS04) y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH2CI2/MeOH, 95:5) para dar 1.5 g (90%) del producto deseado 38 como una espuma de color amarillo: m/z = 561 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.10 (d, J = 9.3 Hz 1 H), 7.50 (s, 1 H), 7.25 (dd, J = 9.3 Hz, 2.5 Hz, 1 H), 6.98 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 5.80-5.67 (m, 1 H), 5.29 (d, J = 17.1 Hz, 1 H), 5.12 (d, J = 10.3 Hz, 1 H), 445-45 (br s, 1 H), 41-418 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.8-3.9 (br s, 1 H), 3.7-3.8 (m, 1 H), 3.25-3.35 (m, 2H), 2.35-2.45 (m, 1 H), 2.1-2.2 (m, 1 H), 1.5-2 (m, 6H), 1.5 (s, 9H).

Se agitó una solución de 38 (3.0 g, 5.36 mmoles) en TFA-dCM 1 :2 (3 ml) a TA temperatura ambiente durante 60 min. Luego, se agregó tolueno (3 ml) y la mezcla resultante se evaporó hasta que se secó para dar el producto de objetivo 39 (pureza mediante HPLC >95%) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional: m/z = 460 (M+H)0 Etapa D mmoles) a una solución ae 39 (1.0 g, 2.17 mnñole^s) en Tetrahidrofurano (25 ml). Luego, se agregó fosgeno (1.6 ml, 1.9 M en tolueno 45 eq). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h luego se filtró. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió en diclorometano (25 ml). Luego, se agregó carbonato hidrogenado de sodio (1.83 g, 21.7 mmoles) seguido por (hex-5-enil)(metil)amina 21 (1.2 g, 8.04 mmoles). Después de 12h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró. El filtrado se dividió entre agua y diclorometano. La capa orgánica se secó (MgS04), se filtró, y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH2CI2/EtOAc, 95:5) para dar 0.80 g (69.3%) del producto de objetivo 40: m/z = 600 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.10 (d, J = 9.3 Hz, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 7.25 (dd, J = 9.3 Hz, 2.4 Hz, 1 H), 6.98 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 5.81-5.62 (m, 2H), 5.56 (t, J = 3.8 Hz 1 H), 5.29 (dd, J = 1.3 Hz, 17.2 Hz, 1 H), 5.12 (dd, J = 1.5 Hz, 10.4 Hz, 1 H), 5.00-486 (m, 3H), 435 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.48-3.37 (m, 1 H), 3.10-3.00 (m, 1 H), 2.87 (s, 3H), 2.77-2.67 (m, 2H), 2.41-2.32 (m, 1 H), 2.10 (dd, J = 8.6 Hz, 17.4 Hz, 1 H), 1.98 (dd, J = 144 Hz, 7.1 Hz, 2H), 1.88 (dd, J = 5.6 Hz, 8.1 Hz, 1 H), 1.57-1.46 (m, 3H), 1.35-1.18 (m, 5H).

Etapa E Se agregó catalizador de 1ra generación de Hoveyda-Grubbs (261 mg, 20 moles %) a una solución de 40 (1.3 g, 2.17 mmoles) en dicloroetano seco desgasificado (1 L). Luego, la mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 20 h en nitrógeno. La mezcla resultante se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró mediante evaporación por rotación. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH2CI2/EtOAc 90/10) para dar 720 mg (58%) del producto de título 41 como un sólido de color beige: m/z = 572 (M+H)+; H-RMN (CDCI3): 7.95 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.15 (s, 1 H), 7.10 (dd, J = 9.1 Hz, 2.4 Hz, 1 H), 6.91 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 5.85 (br s, 1 H), 5.65 (dd, J = 18.2 Hz, 8.0 Hz, 1 H), 5.15 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 480 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 419-428 (m, 2H), 405 (dd, J = 3.7 Hz, J = 11.3 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.69 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.49-3.58 (m, 1 H), 3.00-3.10 (m, 1 H), 2.90 (s, 3H), 2.45-2.55 (m, 2H), 2.30-2.45 (m, 1 H), 2.10- 2.20 (m, 1 H), 1.90-1.95 (m, 3H), 1.50-1.70 (m, 2H), 1.20-1.45 (m, 5H).

Etapa F Se agregó hidróxido de litio (150 mg, 3.6 mmoles) en agua (3 ml) a una solución de 41 (100 mg, 0.18 mmoles) en tetrahidrofurano (5 ml) y metanol (2 ml). Después de 48 h a temperatura ambiente, se agregó agua y el pH de la solución resultante se reguló a 3 con HCl 1 N. Luego, la mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo, se secó (Na2SO4), y se evaporó. El residuo se trituró con dietiléter y se filtró para dar 85 mg (89%) del producto de título 42 como un polvo blanco: m/z = 544 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 7.95 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.15 (s, 1 H), 7.10 (dd, J = 9.1 Hz, 2.4 Hz, 1 H), 6.90 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.85 (br s, 1H), 5.65 (dd, J = 18.2 Hz, 8.0 Hz, 1 H), 5.15 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 480 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 405 (dd, J = 11.3 Hz, 3.7 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.70-3.80 (m, 1 H), 3.60 (d, J = 11.3 Hz, 1 H), 2.85 (s, 3H), 2.80-2.85 (m, 1 H), 2.25-2.50 (m, 4H), 1.95-2.00 (m, 1 H), 2.90 (dd, J = 8.6 Hz, 5.9 Hz, 1 H), 1.55-1.60 (m, 3H), 1.30-1.50 (m, 3H).

EJEMPLO 11 Síntesis de ¿V-[17-(3-cloro-6-metox¡isoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14- dioxo-3.13.15-triaza-triciclori3.3.0.04,61octadec-7-eno-4- carbonilKciclopropil) sulfonamida (43) Se agitó una solución de ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2, 14-dioxo-3, 13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04 6]octadec-7-eno-4-carboxílico (42), (80 mg, 0.147 mmoles) y carbonildiimidazol (48 mg, 0.295 mmoles) en THF seco (25 ml) a reflujo bajo nitrógeno durante 3h. Luego, la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se agregaron ciclopropilsulfonamida (54 mg, 0.442 mmoles) y DBU (52 mg, 0.34 mmoles). La solución resultante se agitó a 50°C durante 48h. Luego, la mezcla de reacción se dividió entre AcOEt acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó (MgS0 ), se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH2CI2/EtOAc, 95:05) para dar el producto de título contaminado con ciclopropilsulfonamida. Este sólido se trituró 10 min en agua y se filtró, se lavó con agua, se secó en alto vacío, se trituró nuevamente en dietiléter y se filtró para dar 37 mg (39%) del producto de título 43 como un polvo blanco: m/z = 647 (M+H)+; H-RMN (CDCI3): 10.40 (br s, 1 H), 7.95 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.15 (s, 1H), 7.10 (dd, J = 9.12 Hz, 2.4 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.85 (br s, 1H), 5.65 (dd, J = 18.2 Hz, 8.0 Hz, 1H), 5.15 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 48 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 410 (dd, J = 11.3 Hz, 3.8 Hz, 1H), 3.9 (s, 3H), 3.60-3.70 (m, 1 H), 3.6 (d, J = 11 .3 Hz, 1H), 3.10-3.20 (m, 1H), 2.90-3.00 (m, 1 H), 2.85 (s, 3H), 2.4-2.6 (m, 3H), 1.90-2.20 (m, 3H), 1.25-1.60 (m, 7H), 0.90-1.10 (m, 2H).

EJEMPLO 12 Síntesis del ácido 17-(5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14- dioxo-3.13,15-triazatriciclori3.3.0.04,61octadec-7-eno-4-carboxílico (50) Se agregó diisopropiletilamina (1.9 ml, 10.9 mmoles) a una solución de Boc-hidroxiprolina (1.0 g, 44 mmoles), ciclopropilaminoácido 25 (825 mg, 43 mmoles), HATU (1.7 g, 448 mmoles) en DMF (10 ml). Después de 2 h a temperatura ambiente, se agregó diclorometano (200 ml). La solución se lavó consecutivamente con NaHC?3 saturado y agua. La capa orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2/EtOAc, 50:50) para dar 1.2 g (76%) del producto de objetivo 44: m/z = 369 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 5.80-5.67 (m, 1 H), 5.32-5.24 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.16-5.08 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 461-445 (m, 1H), 445-429 (bs, 1 H), 423-403 (m, 2H), 3.78-3.39 (m, 2H), 2.14-1.97 (m, 1 H), 1.97-1.81 (br s, 1 H), 1.81-1.32 (m, 12 H), 1.22 (t, J = 7.1 Hz, 3H).

Se agregó trietilamina (3.2 ml, 22 mmoles) a 0°C a una solución de 44 (5.42 g, 7.4 mmoles) en CH2CI2 (100 ml). Después de 5 min, se agregó gota a gota una solución de cloruro de para-nitrobenzoilo (3.26 g, 18 mmoles) en CH2CI2 (50 ml) a 0°C. Luego, la mezcla de reacción se permitió que se caliente hasta temperatura ambiente. Después de 20 h, la solución se vertió sobre agua fría, se lavó con salmuera, se secó (Na2S04), se filtró, y se evaporó. El residuo bruto se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2/EtOAc, 90:10) para dar 2.15 g (56%) del producto de objetivo 45: m/z = 518 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.30 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.82-5.70 (m, 1 H), 5.59-5.54 (m, 1 H), 5.31 (dd, J = ?l 2 Hz, 1.5 Hz, 1 H), 5.14 (d, J = 10.1 Hz, 1 H), 456-440 (br s, 1 H), 426-415 (m, 2H), 3.80-3.67 (m, 2H), 2.16-2.06 (m, 1 H), 1.98-1.84 (bs, 1 H), 1.59-1.48 (bs, 1H), 1.48-1.38 (bs, 12H), 1.28-1.21 (m, 3H).

Etapa C Una solución de 45 (2.15 g, 415 mmoles) en TFA-dCM 1 :2 (80 ml) se mantuvo a temperatura ambiente durante 4 h. Luego, se agregó tolueno (10 ml) y la solución se evaporó hasta que se secó para dar el compuesto de objetivo 46 (Pureza mediante HPLC >95%): m/z = 418 (M+H)0 Se agregó fosgeno (1.6 ml, 1.9 M en tolueno 9.28 g, 45 eq) a una mezcla de 46 (1.73 g, 414 mmoles) y carbonato hidrogenado de sodio (3.53 g, 42 mmoles) en THF (35 ml). Después de 1.5 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró, el filtrado resultante se evaporó y el producto bruto se re-disolvió en diclorometano (35 ml). Luego, se agregó carbonato hidrogenado de sodio (3.35 g, 42 mmoles) seguido por (hex-5-enil)(metil)amina 21 (1.1 g, 9.67 mmoles). Después de 12 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró. Luego, se agregó agua y la mezcla se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04), se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH2CI2/EtOAc, 95:5) para dar 2.31 g (79%) del producto de objetivo 47: m/z = 557 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.28 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 8.13 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.39 (s, 1 H), 5.81-5.62 (m, 2H), 5.56 (t, J = 3.8 Hz, 1 H), 5.29 (dd, J = ?l .2 Hz, 1.3 Hz, 1 H), 5.12 (dd, J = 10.4 Hz, 1.52 Hz, 1H), 5.00-486 (m, 3H), 420-406 (m, 2H), 3.79 (dd, J = 12.1 Hz, 3.5 Hz, 1 H), 3.57 (dd, J = 12.1 Hz, 1.8 Hz, 1 H), 3.48-3.37 (m, 1 H), 3.10-3.00 (m, 1 H), 2.87 (s, 3H), 2.77-2.67 (m, 1H), 2.41-2.32 (m, 1 H), 2.10 (dd, J = 8.6, 17.4 Hz, 1 H), 1.98 (dd, J = 144 Hz, 7.1 Hz, 2H), 1.88 (dd, J = 8.1 Hz, 5.6 Hz, 1H), 1.57-1.46 (m, 3H), 1.35-1.18 (m, 5H).

Etapa E Se calentó una mezcla de 47 (1.8 g, 3.28 mmoles) catalizador de 1ra generación Hoveyda-Grubbs (400 mg, 20 moles %) en dicloroetano seco desgasificado (2.0 L), a 70°C bajo nitrógeno durante 20 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró mediante evaporación por rotación. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2/EtOAc, 90:10) para dar 888 mg (51 %) del compuesto deseado como un sólido de color beige 48: m/z = 529 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.28 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.47 (s, 1 H), 5.76-5.67 (m, 1 H), 5.62-5.57 (t, J = 3.5 Hz, 1 H), 5.29 (dd, J = 10.5 Hz, 7.8 Hz, 1 H), 482 (dd, J = 9.8 Hz, 7.1 Hz, 1 H), 418-407 (m, 2H), 400-3.88 (m, 2H), 3.55 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.07-2.97 (m, 1 H), 2.91 (s, 3H), 2.64-2.54 (m, 1 H), 2.48-2.29 (m, 2H), 2.16 (dd, 1 H, J = 17.4 Hz, 8.6 Hz, 1 H), 1.96-1.83 (m, 3H), 1.80-1.61 (m, 2H), 1.45-1.25 (m, 2H), 1.22 (t, J = 7.1 Hz, 3H).

Etapa F '0 Se agregó una solución de hidróxido de litio (71 mg, 1.66 mmoles) en agua (5 ml) a 0°C a una solución de 48 (451 mg, 853 mmoles) en THF (25 ml). Después de 3 h a 0°C, la mezcla de reacción se diluyó con agua (25 ml), luego se acidó a pH 3 con HCl 1 N. La solución resultante se extrajo con AcOEt acetato de etilo, se secó (MgS04), se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2/MeOH, 90:10) para dar 234 mg (72%) de 49: 8.18 (s, 1 H), 7.66 (s, 1H), 5.69 (dd, J = 18.0 Hz, 7.6 Hz, 1 H), 5.37 (\, J = 9.6 Hz, 1H), 468 (dd, J = 9.6 Hz, 7.6 Hz, 1 H), 478-411 (bs, 1H), 418-3.91 (m, 2H), 3.79-3.61 (m, 2H), 3.34 (d, J = 11.1 Hz, 1 H), 3.19-3.06 (m, 1 H), 2.85 (s, 3H), 2.34-2.09 (m, 4H), 2.00-1.89 (m, 2H), 1.73 (dd, J = 8.8 Hz, 5.6 Hz, 1 H), 1.69-1.52 (m, 2H), 1.40-1.27 (m, 2H), 1.20 (t, J = 7.1 Hz, 3H).

Etapa G Se agregó hidruro de sodio (68.25 mg, 1.7 mmoles) en partes pequeñas a 0°C a una solución de 49 (260 mg, 0.683 mmoles) en DMF (8 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Luego, se agregó isoquinolina 19 (241 mg, 0.887 mmoles) bajo nitrógeno en una parte. La mezcla se permitió que se caliente hasta temperatura ambiente. Después de 20 hrs., la mezcla de reacción se vertió en agua fría (20 ml) y se extrajo con CH2CI2, se secó (Na2S04), se filtró y se evaporó. La purificación mediante cromatografía en columna (CH2CI2/MeOH 96/4), seguida por la hidrólisis del éster según se describió anteriormente, proporcionó 159 mg (40%) del producto de título 50 como un polvo blanco: m/z = 588 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.13 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 7.97 (d, J = 6.2 Hz, 1 H), 7.54 (d, J = 6.2 Hz, 1 H), 7.39-7.30 (bs, 1 H), 7.22 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 5.90-5.83 (bs, 1 H), 5.71 (dd, J = 17.9 Hz, 8.1 Hz, 1 H), 5.18 (t, J = 10.1 Hz, 1 H), 479 (dd, J = 9.1 Hz, 7.3 Hz, 1 H), 410-3.97 (m, 4H), 3.81-3.66 (m, 1 H), 3.62 (d, 1 H, J = 11.6 Hz, 1 H), 3.19- 3.05 (m, 1 H), 2.85 (s, 3H), 2.59-2.22 (m, 4H), 2.01-1.90 (m, 1 H), 1.89 (dd, J = 8.6 Hz, 5.8 Hz, 1 H), 1.70 (dd, J = 9.8 Hz, 6.1 Hz, 1 H), 1.67-1.58 (m, 2H), 1.43-1.28 (m, 2H).

EJEMPLO 13 Síntesis de iV-f17-(5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14- dioxo-3l13,15-tríaza-triciclof13.3.0.04,61octadec-7-eno-4-carbonin (ciclopropil)sulfonamida (51) Se agitó una solución de 50 (151 mg, 0.257 mmoles) y carbonildiimidazol (162 mg, 0.437 mmoles) en THF seco (10 ml) a reflujo bajo nitrógeno durante 2h. Opcionalmente, el derivado de azalactona, si se desea, se puede aislar. Luego, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agregaron ciclopropilsulfonamida (58 mg, 0.482 mmoles) y DBU (76 mg, 0.502 mmoles). La solución resultante se agitó a 50°C durante 12h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se desactivó con agua y se extrajo con AcOEt acetato de etilo, se secó (MgS04), se filtró y se evaporó. El material bruto se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2/EtOAc, 95:5). El sólido obtenido se trituró en agua, se filtró, se secó en alto vacío, se trituró en dietiléter y se secó nuevamente en alto vacío para dar 138 mg (77%) del producto de titulo 51 como un polvo blanco: m/z = 691 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 10.70 (br s, 1 H), 8.12 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 7.97 (d, J = 6.3 Hz, 1 H), 7.54 (d, J = 6.3 Hz, 1 H), 7.21 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 6.70 (bs, 1 H), 5.88 (bs, 1 H), 5.74 (dd, J = 17.3 Hz, 8.3 Hz, 1 H), 5.16 (t, J = 10.4 Hz, 1 H), 474 (dd, J = 9.4 Hz, 7.3 Hz, 1 H), 411-3.98 (m, 4H), 3.69-3.55 (m, 2H), 3.27-3.10 (m, 1 H), 3.02-2.89 (m, 1 H), 2.83 (s, 3H), 2.58-2.35 (m, 3H), 2.29-2.13 (m, 1 H), 2.11-1.92 (m, 2H), 1.75-0.76 (m, 9H).

EJEMPLO 14 Síntesis de N-\"\ 7-f5-(4-metil-3-piridil)-6-metoxiisoquinolin-1 -iloxil-13- metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclori3.3.0.04 ß1octadec-7-eno-4- carbonill (ciclopropil)sulfonamida (52) Se calentaron una solución de 51 (17.3 mg, 0.025 mmoles), ácido 6-metilpiridina-3-borónico (5.9 mg, 0.028 mmoles), teíra í/strifenilfosfina paladio (8.2 mg, 0.005 mmoles) y carbonato de sodio (5.8 mg, 0.055 mmoles) en DMF (2 ml) a 90°C durante 20 h. Luego, la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y el solvente se evaporó. El residuo se purificó mediante HPLC para dar 3,7 mg (21%) del producto de título 52 como un polvo blanco, m/z = 703 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 10.6 (bs, 1H), 8.8 (s, 1H), 8.12 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.9 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J=6.3 Hz, 1H), 7.3 (d, J =9.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.68 (brs, 1H), 5.87 (br s, 1H), 5.74 (dd, J = 17.3 Hz, 8.3 Hz, 1H), 5.16 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 474 (dd, J = 9.4 Hz, 7.3 Hz, 1H), 411-3.98 (m, 4H), 3.69-3.55 (m, 2H), 3.27-3.10 (m, 1H), 3.02-2.89 (m, 1H), 2.83 (s, 3H), 2.58-2.35 (m, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.29-2.13 (m, 1H), 2.11-1.92 (m, 2H), 0.75-1.76 (m, 9H).

EJEMPL015 Síntesis de N-\ 17-r5-(4-metoxífen¡l)-6-metoxiisoquinolin-1 -iloxi]-13-metil- 2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclori3.3.0.0461octadec-7-eno-4-carbon¡n (ciclopropil)sulfonamida (53) El producto de título se preparó a partir de ?/-[17-(5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1 -iloxi)-13-metil-2, 14-dioxo-3, 13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil] (ciclopropil) sulfonamida (51, ejemplo 13) y ácido 4-metoxibencenoborónico siguiendo el procedimiento descrito para ?/-[17-[5-(4-metil-3-piridil)-6-metoxiisoquinolin-1 -iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0 '6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (52, Ejemplo ?A):m/z = 718 (M+H)+.

EJEMPLO 16 Síntesis de JV-ri7-f5-fenil-6-metoxüsoquinolin-1-iloxp-13-metil-2,14-d¡oxo- 3.13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,61octadec-7-eno-4-carbonin(ciclopropil) sulfonamida (54) El producto de título se preparó a partir de ?/-[17-(5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil] (ciclopropil) sulfonamida (51, ejemplo 13) y ácido bencenoborónico siguiendo el procedimiento descrito para ?/-[17-[5-(4-metil-3-piridil)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3, 13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04 6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (52, Ejemplo 14): m/z = 688 (M+H)0 EJEMPLO 17 Síntesis de ácido 17-(6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo- 3,13,15-triaza-triciclof 13.3.0.04 ß1octadec-7-eno-4-carboxílico (55) El producto de título 55 se preparó a partir de 1-cloro-6-metoxiisoquinolinona 10 siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-d¡oxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico (42, Ejemplo 10): m/z = 509 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 7.98 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.9 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 7.2 (s, 1 H), 7.1 (dd, J = 9.2 Hz, 2.4 Hz, 1 H), 7.10 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 6.90 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 5.85 (br s, 1 H), 5.65 (dd, J = 18.2 Hz, 8.0 Hz, 1H), 5.15 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 480 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 405 (dd, J = 11.3 Hz, 3.7 Hz, 1 H), 3.90 (s, 3H), 3.70-3.80 (m, 1H), 3.60 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.80-2.85 (m, 1 H), 2.25-2.50 (m, 4H), 1.95-2.00 (m, 1 H), 2.90 (dd, J = 8.6 Hz, 5.9 Hz, 1H), 1.55-1.60 (m, 3H), 1.30-1.50 (m, 3H).

EJEMPLO 18 Síntesis de V-ri7-(3-fenil-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo- 3.13,15-triaza-triciclori 3.3.0.04,61octadec-7-eno-4-carbonin(ciclopropil) sulfonamida (56) El producto de título 56 se preparó a partir de ácido 17-(6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0 ,6]octadec-7-eno-4-carboxílico (55) siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ?/-[17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo-[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (43, Ejemplo 11): m/z - 688.

EJEMPLO 19 Síntesis de ácido 17-(3-(4-trifluorometoxifenil)-6-metoxiisoquinolin-1- iloxi)-13-metil-2.14-dioxo-3.13.15-triaza-triciclof13.3.0.04 61octadec-7-eno- 4-carboxílico (57) El producto de titulo 57 se preparó a partir de 1-cloro-3-[4-(trifluorometil)fenil]-6-metoxiisoquinolinona siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triazatriciclo- [13.3.0.04'6]octadec-7-eno-4-carboxílico (42, Ejemplo 10): m/z = 669 (M+H)+; H-RMN (CDCI3): 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.02 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.11 (dd, J = 9.1 Hz, 1.5, 1 H), 7.05 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 6.07-5.95 (bs, 1H), 5.71 (dd, J = 8.8 Hz, J = 17.4 Hz, 1 H), 5.24-5.09 (m, 1 H), 484-479 (m, 1 H), 414-403 (m, 1 H), 3.92 (s, 3H), 3.77-3.58 (m, 3H), 3.20-3.07 (m, 1 H), 2.86 (s, 3H), 2.63-2.38 (m, 3H), 2.38-2.22 (m, 1 H), 2.01-1.84 (m, 2H), 1.74-1.38 (m, 5H).

EJEMPLO 20 Síntesis de V-[17-(3-(4-trifluorometoxifenil)-6-metoxiisoqu¡nolin-1 -iloxi)- 13-metil-2.14-dioxo-3.13.15-triaza-triciclori3.3.0.04 61octadec-7-eno-4- carbonil] (ciclopropil)sulfonamida (58) El producto de titulo 58 se preparó a partir de ácido 17-(3-(4-trifluorometoxifenil)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbox¡lico (57) siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ?/-[17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (43, Ejemplo 11): m/z = 772 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 10.63-10.57 (br s, 1 H), 8.00 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.94 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 7.49 (s, 1 H), 7.26 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.01 (dd, J = 9.0 Hz, 2.4, 1H), 6.98 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 6.79-6.72 (bs, 1 H), 5.98-5.92 (m, 1 H), 5.67 (dd, J = 7.8 Hz, J = 18.9 Hz, 1 H), 5.09 (t, J = 10.4 Hz, 1 H), 471 (t, J = 8.1 Hz, 1 H), 403 (dd, J = 11.0 Hz, 40, 1 H), 3.85 (s, 3H), 3.64 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 3.61-3.53 (m, 1 H), 3.15-3.03 (m, 1 H), 2.93-2.82 (m, 1 H), 2.77 (s, 3H), 2.54-2.38 (m, 3H), 2.25-2.08 (m, 1 H), 2.04-1.87 (m, 2H), 1.66-0.86 (m, 9H).

EJEMPLO 21 Síntesis de ácido 17-(4-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2.14- dioxo-3.13,15-triaza-triciclo[13.3.0.0 61octadec-7-eno-4-carboxílico (65) Etapa A Se agregó DIAD (8.2 g, 41 mmoles) a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno a una solución de 44 (10 g, 27 mmoles), ácido 4-nitrobenzoico (6.8 g, 41 mmoles) y trifenilfosfina (11 g, 41 mmoles) en THF seco (200 ml). Luego, la reacción se calentó hasta la temperatura ambiente. Después de 12 h, el solvente se evaporó y el producto bruto se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (gradiente de EtOAc/CH2CI2, 95/5 a 75/25) para dar 8.1 g (58 %) del producto de objetivo, m/z = 518 (M+H)+, 1H-RMN (CDCI3): 8.20 (s, 4H), 5.65-5.80 (m, 1 H), 5.55 (br s, 1 H), 5.2 (dd, J = 17.0 Hz, 10.2 Hz, 1 H), 44-45 (m, 1 H), 3.9-41 (m, 2H), 3.75-3.85 (m, 1 H), 3.6-3.7 (m, 1 H), 2.0-2.1 (m, 1 H), 1.80-1.90 (m, 1 H), 1.50-1.70 (m, 5), 1.50 (s, 9H), 1.10 (t, J = 7.1 Hz, 3H).

Etapa B Se mantuvo a temperatura ambiente una solución de 59 (6.89 g, 13.3 mmoles) en TFA-dCM 1 :4 (250 ml) durante 4 h. Luego, se agregó tolueno (30 ml) y la solución se evaporó hasta que se secó para dar el compuesto de objetivo 60 (Pureza mediante HPLC >97%): m/z = 418 (M+H)0 Etapa C Se agregó fosgeno (1.6 ml, 1.9 M en tolueno, 45 eq) a una mezcla de 60 (5.56 g, 13.3 mmoles) y carbonato hidrogenado de sodio (11.5 g, 137 mmoles) en THF (120 ml). Después de 1.5 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró, el filtrado resultante se evaporó y el producto bruto se re-disolvió en diclorometano (35 ml). Luego, se agregó carbonato hidrogenado de sodio (11.55 g, 137 mmoles) seguido por (hex-5-enil)(metil)amina 21 (2.65 g, 23.4 mmoles). Después de 12 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró. Luego, se agregó agua y la mezcla se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04), se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH2CI2/EtOAc, 95:5) para dar 7.41 g (58%) del producto de objetivo 61: m/z = 557 (M+H)+; 1 H-RMN (CDCI3): 8.28 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 8.13 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.39 (s, 1 H), 5.81-5.62 (m, 2H), 5.56 (t, J = 3.8 Hz, 1 H), 5.29 (dd, J = 17.2 Hz, 1.3 Hz, 1 H), 5.12 (dd, J = 10.4 Hz, 1.52 Hz, 1 H), 5.00-486 (m, 3H), 420-406 (m, 2H), 3.79 (dd, J = 12.1 Hz, 3.5 Hz, 1 H), 3.57 (dd, J = 12.1 Hz, 1.8 Hz, 1 H), 3.48-3.37 (m, 1 H), 3.10-3.00 (m, 1 H), 2.87 (s, 3H), 2.77-2.67 (m, 1 H), 2.41-2.32 (m, 1 H), 2.10 (dd, J = 8.6, 17.4 Hz, 1 H), 1.98 (dd, J = 144 Hz, 7.1 Hz, 2H), 1.88 (dd, J = 8.1 Hz, 5.6 Hz, 1H), 1.57-1.46 (m, 3H), 1.35-1.18 (m, 5H).

Etapa D Se agregó una solución de hidróxido de litio (632 mg, 148 mmoles) en agua (40 ml) a 0°C a una solución de 61 (434 g, 6.39 mmoles) en THF (180 ml). Después de 2 h, a 0°C, la mezcla de reacción se diluyó con agua (25 ml), luego se acidó a pH 6 con HCl 1 N. La solución resultante se extrajo con AcOEt acetato de etilo, se secó (Na2S04), se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2/MeOH, 96:04) para dar 2.1 g (80%) de 62: m/z = 408 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 5.84-5.68 (m, 2H), 5.29 (dd, J = ?l Hz, 1.3 Hz, 1 H), 5.12 (dd, J = 10.4 Hz, 1.52, 1 H), 5.05-493 (m, 2H), 478 (dd, J = 9,1 Hz, 1.77, 1 H), 460 (d, J = 9.1 , 1 H), 446-437 (m, 1 H), 424-405 (m, 2H), 3.66 (d, J = 10.4 Hz, 1 H), 3.43 (dd, J = 10.4 Hz, 455, 1 H), 3.37-3.26 (m, 1 H), 3.17-3.07 (m, 1 H), 2.88 (s, 3H), 2.29-2.02 (m, 5H), 1.87 (dd, J = 8.3 Hz, 5.6, 1 H), 1.67-1.52 (m, 3H), 1.49 (dd, J = 9.8 Hz, 5.31 , 1 H), 1.44-1.38 (m, 2H), 1.22 (t, J = 7.1 Hz, 3H).

Etapa E Se agregó DIAD (669 mg, 3.31 mmoles) a -25°C bajo atmósfera de nitrógeno a una solución de 62 (900 mg, 2.208 mmoles), isoquinolina 13 (673 mg, 2.65 mmoles) y trifenilfosfina (810 mg, 3.1 mmoles) en THF seco (50 ml). Luego, la reacción se mantuvo entre -10 a -15°C durante 3 h. La mezcla se vertió sobre solución de agua fría y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04), se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (gradiente de EtOAc/CH2CI2, 90/10) para dar 1 g del producto de objetivo 63: m/z = 644 (M+H)0 Etapa F Se calentó una mezcla de 63 (1 g, 1.55 mmoles) y catalizador de 1ra. Generación de Hoveyda-Grubbs (186 mg, 310 mmoles) en dicloroetano seco desgasificado (1.0 L), a 70°C bajo nitrógeno durante 20 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró mediante evaporación por rotación. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2CI2/EtOAc, 90:10) para dar 360 mg (38%) del compuesto deseado 64 como un sólido de color beige: m/z = 616 (M+H)0 Etapa G Se agregó hidróxido de litio (375 mg, 8.77 mmoles) en agua (3 ml) a una solución de 64 (360 mg, 0.585 mmoles) en tetrahidrofurano (15 ml) y metanol (5 ml). Después de 48 h a temperatura ambiente, se agregó agua y el pH de la solución resultante se reguló a 3 con HCl 1 N. Luego, la mezcla de reacción se extrajo con EtOAc acetato de etilo, se secó (Na2S04), y se evaporó. El residuo se trituró con dietiléter y se filtró para dar 300 mg (87%) del producto de título 65 como un polvo blanco: m/z = 588 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 8.5 (s, 1 H), 8.2 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 7.35 (br s, 1 H), 7.3 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.17 (dd, = 9.1 Hz, 2.5 Hz, 1 H), 5.8-5.85 (br s, 1 H), 5.7 (dd, J = 18.3 Hz, 7.8 Hz, 1 H), 5.15 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 480 (dd, J = 9.2 Hz, 7, 1 H), 405 (dd, J = 11.2 Hz, 4 Hz, 1 H), 3.95 (s, 3H), 3.70-3.80 (m, 1 H), 3.60 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3-3.1 (m, 1 H), 2.85 (s, 3H), 2.40-2.50 (m, 3H), 2.25-2.40 (m, 1 H), 1.85-1.95 (m, 3H), 1.6-1.7 (m, 4H).

EJEMPLO 22 Síntesis de N-H7-(4-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-met¡l-2.14- dioxo-3.13.15-triaza-triciclof 13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4- carbonilKciclopropil) sulfonamida (66) El producto de titulo 66 se preparó a partir de ácido 17-(4-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico (65) siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ?/-[17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1 -iloxi)-13-metil-2, 14-dioxo-3, 13,15-triaza-triciclo- [13.3.0.0 ,6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (43, Ejemplo 11): m/z = 691 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 10.7 (br s, 1 H), 8.09 (d, J = 9.1 Hz, 1 H), 7.3 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.25 (s, 1 H), 7.15 (dd, J = 9.1 Hz, 2.4, 1 H), 7 (br s, 1 H), 5.8 (br s, 1 H), 5.74 (dd, J = 18.2 Hz, 8, 1 H), 5.16 (t, J = 10.3 Hz, 1 H), 474 (dd, J = 9.3 Hz, 7, 1 H), 405 (dd, J = 11.1 Hz, 4, 1 H), 3.95 (s, 3H), 3.6 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.1-3.2 (m, 1 H), 2.9-3 (m, 1 H), 2.83 (s, 3H), 2.4-2,5 (m, 3H), 2.19-2 (m, 2H), 2.5-2.7 (m, 4H), 1.4-1 (m, 3H), 1.2-1.35 (m, 2H), 1.05-1.15 (m, 1 H), 0.95-1 (m, 1 H).

EJEMPLO 23 Síntesis de ácido 17-(3-pirazol-1-il-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil- 2.14-dioxo-3.13.15-triaza-triciclori3.3.0.04 &loctadec-7-eno-4-carboxílico (67) El producto de título 67 se preparó a partir de 1-hidroxi-6-metoxi- 3-(pirazol-1-il)isoquinolina siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triazatriciclo [13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico (42, Ejemplo 10): m/z = 575 (M+H)0 EJEMPLO 24 Síntesis de <V-ri7-(3-pirazol-1-il-6-metoxiisoquinolin-1-íloxi)-13-metil-2.14- dioxo-3.13.15-triaza-triciclof13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonin (ciclopropil)sulfonamida (68) El producto de título 68 se preparó a partir de ácido 17-(3-pirazol- 1-il-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico (67) siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ?/-[17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (43, Ejemplo 11): m/z = 678 (M+H)+; 1H-RMN (CDCI3): 10.5 (br s, 1 H), 8.4 (dd, J = 2.5 Hz, 0.5, 1 H), 8 (d, J = 9.8 Hz, 1 H), 7.75 (s, 2H), 7.00-7.10 (m, 2H), 6.55 (s, 1 H), 6.45 (dd, J = 2.5 Hz, 0.5, 1 H), 5.95 (br s, 1 H), 5.75 (dd, J = 18.1 Hz, 8 Hz, 1 H), 5.1 (t, J = 10.3 Hz, 1 H), 475 (t, J = 7.0 Hz, 1 H), 41 (dd, J = 11.0 Hz, 43, 1 H), 3.90 (s, 3H), 3.70 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 3.10-3.20 (m, 1 H), 2.90-3.01 (m, 1 H), 2.85 (s, 3H), 2.50-2.62 (m, 3H), 2.20-2.30 (m, 1 H), 1.90-2 00 (m, 2H), 1.55-1.60 (m, 4H), 1.30-1.50 (m, 6H).

EJEMPLO 25 Síntesis de ácido 17-f3-(4-isopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxp- 13-metil-2.14-dioxo-3.13.15-triaza-triciclori3.3.0.0461octadec-7-eno-4- carboxílico (69) El producto de título 69 se preparó a partir de 1-hidroxi-3-(4-isopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolina (6) siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triazatriciclo [13.3.0.04,6] octadec-7-eno-4-carboxilico (42, Ejemplo 10): m/z = 634 (M+H)0 EJEMPLO 26 Síntesis de W-ri7-[3-(4-isopropiltiazol-2-¡l)-ß-metoxiisoqu¡nolin-1-iloxi1-13- metil-2.14-dioxo-3.13.15-triaza-triciclori3.3.0.04 61octadec-7-eno-4- carbonill (ciclopropil)sulfonamida (70) El producto de título 70 se preparó a partir de ácido 17-[3-(4-isopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxilico (69) siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ?/-[17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1 -iloxi)-13-metil-2, 14-dioxo-3, 13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (43, Ejemplo 11): m/z = 737 (M+H)0 EJEMPLO 27 Síntesis de ácido 17-r3-(2-isoprop¡laminotiazol-4-il)-6-metoxiisoquinolin- 1-iloxiM3-metil-2.14-dioxo-3.13.15-triaza-triciclori3.3.0.04 61octadec-7- eno-4-carboxílico (71) El producto de título 71 se preparó a partir de 1-hidroxi-3-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-6-metoxiisoquinolina siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxilico (42, Ejemplo 10): m/z = 649 (M+H)0 EJEMPLO 28 Síntesis de W-ri7-[3-(2-isopropilaminotiazo -il)-6-metoxiisoquinolin-1- iloxn-13-metil-2,14-dioxo-3,13.15-triaza-triciclof13.3.0.04 61octadec-7-eno- 4-carbonin (ciclopropil)sulfonamida (72) El producto de título 72 se preparó a partir de ácido 17-[3-(2-isopropilaminotiazol-4-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carboxílico (71) siguiendo los mismos procedimientos descritos para la preparación de ?/-[17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04,6]octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (43, Ejemplo 11): m/z = 752 (M+H)0 1H RMN (CDCI3): 0.93-1.03 (m, 1 H), 1.05-1.15 (m, 1H), 1.18-1.28 (m, 3H), 1.32 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.34 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.36-1.67 (m, 4H), 1.93-2.07 (m, 2H), 2.22-2.36 (m, 1H), 2.45-2.65 (m, 3H), 2.85 (s, 3H), 2.91-3.00 (m, 1 H), 3.05-3.17 (m, 1 H), 3.64-3.80 (m, 3H), 3.89 (s, 3H), 408 (dd, J = 3.8 Hz, J = 10.9 Hz, 1 H), 478 (t, J = 8.1 Hz, 1 H), 5.15 (t, J = 10.4 Hz, 1 H), 5.21-5.36 (amplio s, 1 H), 5.73 (dd, J = 8.1 Hz, J = 18.4 Hz, 1 H), 5.94-6,02 (m, 1 H), 6.92-6.99 (amplio s, 1 H), 7.00-7.07 (m, 2H), 7.22 (s, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.95 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 10.54-10.99 (amplio s, 1 H).

EJEMPLO 29 Síntesis de ácido 18-[5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-2,15-dioxo- 3.14.16-triazatriciclori43.0.04,61nonadec-7-eno-4-carboxílico (74) Etapa A A una solución de Boc-hidroxiprolina (1.15 g, 499 mmoles) en THF (50 ml) se agregó NaH (60% en aceite mineral, 500 mg, 12.5 mmoles). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h antes de agregar 5-bromo-6-metoxiisoquinolina (1.36 g, 499 mmoles). Después de 48 h a temperatura ambiente bajo nitrógeno, la mezcla de reacción se desactivó con agua fría, se acidó a pH 4 con HCl y se extrajo con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró, y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (gradiente EtOAc/CH2CI2, 5:95 a 50:50) para dar 751 mg (32.2 %) de 73 como un sólido blanco: m/z = 468 (M+H)0 Síntesis de ácido 18-[5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxfl-2.15-dioxo-3,14,16-tr¡azatriciclo[143,0,04'61nonadec-7-eno-4-carboxilico (74) Etapa B El compuesto de título se preparó a partir del intermediario 73 y hept-8-enamina siguiendo el procedimiento (Pasos B-f) reportado para ácido 17-(3-cloro-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi)-13-metil-2,14-dioxo-3,13,15-triaza-triciclo[13.3.0.04'6]octadec-7-eno-4-carboxílico (42): m/z = 588 (M+H)0 EJEMPLO 30 Síntesis de V-f18-[5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxil-2.15-dioxo- 3.14.16-triazatriciclori43,0.04,6lnonadec-7-eno-4- carbonill(ciclopropil)sulfonamida (75) El compuesto de título se preparó a partir de ácido 18-[5-bromo-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-2,15-dioxo-3, 14,16-triazatriciclo[143,0,04,6]nonadec-7-eno-4-carboxílico (74) siguiendo el procedimiento reportado para síntesis de ?/-[17-[3-(4-ciclopropiltiazol-2-il)-6-metoxiisoquinolin-1-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04,6]-octadec-7-eno-4-carbonil](ciclopropil)sulfonamida (30): m/z = 691 (M+H)0 EJEMPLO 31 Síntesis de ciclopentano cristalino Síntesis de ter-butil éster del ácido 3-oxo-2-oxa-biciclof2,2.nheptano-5- carboxílico (77) Se agregó DMAP (14 mg, 0.115 mmoles) y Boc20 (252 mg, 1.44 mmoles) a una solución agitada de 76 (180 mg, 1.15 mmoles) en 2 ml CH2CI2 bajo atmósfera de argón inerte a 0 °C. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se revolvió hasta el día siguiente. La mezcla de reacción se concentró y el producto bruto se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (tolueno/acetato de etilo gradiente de 15:1 , 9:1 , 6:1 , 4:1 , 2:1) que dio el compuesto de título (124 mg, 51%) como cristales de color blanco. 1H-RMN (300 MHz, CD3OD) d 1.45 (s, 9H), 1.90 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 2.10-2.19 (m, 3H), 2.76-2.83 (m, 1 H), 3.10 (s, 1 H), 499 (s, 1 H); 13C-RMN (75.5 MHz, CD3OD) d 27.1 , 33.0, 37.7, 40.8, 46.1 , 81.1 , 81.6, 172.0, 177.7.

Método alternativo para la preparación del compuesto 77 Se disolvió compuesto 76 (13.9 g, 89 mmoles) en diclorometano (200 ml) y luego se enfrió hasta aproximadamente -10°C en nitrógeno. Luego, se hizo burbujear isobutileno en la solución hasta que el volumen total incrementó a aproximadamente 250 ml que dio una solución turbia. Se agregó BF3 Et20 (5.6 ml, 445 mmoles, 0.5 eq.) y la mezcla de reacción se mantuvo a aproximadamente -10°C en nitrógeno. Después de 10 min, se obtuvo una solución clara. La reacción se monitoreó mediante TLC (acetato de etilo-tolueno 3:2 se acidó con unas pocas gotas de ácido acético y hexano-etOAc acetato de etilo 4:1 , transferencia con solución básica de permanganato). A los 70 min, solamente restaban trazas del compuestos 76 y se agregó NaHC?3 acuoso saturado (200 ml) a la mezcla de reacción, que luego se agitó de manera enérgica durante 10 min. La capa orgánica se lavó con NaHC03 saturado (3 x 200 ml) y salmuera (1 x 150 ml), luego se secó son sulfito de sodio, se filtró y el residuo se evaporó para un residuo oleoso. Al agregar hexano al residuo, el producto se precipitó. La adición de más hexano y el calentamiento hasta reflujo dio una solución clara a partir de la cual el producto se cristalizó. Los cristales se recolectaron mediante filtración y se lavaron con hexano (temp. ambiente), luego se secó con aire durante 72 h dando agujas incoloras (12.45 g, 58.7 mmoles, 66%).

EJEMPLO 32 Actividad de los compuestos de fórmula (I) Ensayo de replicón Los compuestos de fórmula (I) se examinaron para determinar la actividad en la inhibición de la replicación de ARN del HCV en un ensayo celular. El ensayo demostró que los compuestos de fórmula (I) exhibieron actividad contra los replicones de HCV funcionales en un cultivo celular. El ensayo celular se basó en una construcción de expresión bicistrónica, como se describe en el texto escrito por Lohmann et al. (1999) Science vol. 285 pp. 110-113 con las modificaciones descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, en una estrategia de selección de múltiples blancos. En esencia, el método fue el siguiente. El ensayo utilizó la línea celular transfectada de manera estable Huh-7 luc/neo (denominada de aquí en adelante Huh-Luc). Esta línea celular alberga una construcción de expresión bicistrónica que codifica un ARN que comprende las regiones de tipo salvaje de NS3-NS5B del HCV tipo 1b transfectado de un Sitio de Entrada al Ribosoma Interno (Internal Ribosome Entry Site (IRES)) del virus de encefalomiocarditis (EMCV), precedido por una porción informante (FfL-luciferasa), y una porción marcadora seleccionable (neoR, fosfotransferasa de neomicina). La construcción está bordeada por 5' y 3' NTRs (regiones no traducidas) del HCV tipo 1b. El cultivo continuo de las células de replicón en presencia de G418 (neoR) depende de la replicación del ARN del HCV. Las células de replicón transfectadas de manera estable que expresan ARN del HCV, que se replica en forma autónoma y hasta altos niveles, que codifican inter alia luciferasa, se usan para evaluación de los compuestos antivirales. Se colocaron células de replicón en placas de 384 pocilios en presencia de los compuestos de prueba y control que se agregan en varias concentraciones. Luego de una incubación de tres días, la replicación del HCV se midió por ensayo de la actividad de luciferasa (usando sustratos para ensayos de luciferasa estándar y reactivos y un dispositivo de imagines con micoplaca Perkin Elmer ViewLuxTm ultraHTS). Las células de replicón en los cultivos de control tienen alta expresión de luciferasa en ausencia de un inhibidor. La actividad inhibidora del compuesto sobre la actividad de luciferasa se monitoreó sobre las células Huh-Luc, permitiendo la modalidad de una curva dosis-respuesta para cada compuesto de prueba. Luego se calcularon los valores de ECso, cuyo valor representa la cantidad de compuesto requerido para reducir en un 50% el nivel de actividad de luciferasa detectada, o en forma más específica, la capacidad de replicación del ARN de replicón del HCV ligado genéticamente.

Ensayo de inhibición El objetivo de este ensayo in vitro fue medir la inhibición de complejos de proteasa NS3/4A del HCV por los compuestos de la presente invención. Este ensayo proporciona una indicación de la efectividad de los compuestos de la presente invención en la inhibición de la actividad proteolítica de NS3/4A del HCV. La inhibición de la enzima de proteasa NS3 de la hepatitis C de longitud completa se midió en esencia como se describe en Poliakov, 2002 Prot Expression & La purificación 25 363 371. En síntesis, la síntesis de un sustrato dipsipéptido, Ac-DED(Edans)EEAbu?[COO]ASK(Dabcyl)-NH2 (AnaSpec, San José, USA), se midió por espectrofluorometría en presencia de un co-factor peptídico, KKGSWIVGRIVLSGK (Ake Engstróm, Department of Medical Biochemistry and Microbiology, Uppsala University, Sweden). [Landro, 1997 #Biochem 36 9340-9348]. La enzima (1 nM) se incubó en HEPES 50 mM, pH 7.5, DTT 10 mM, 40% de glicerol, 0.1 % de n-octil-D-glucósido, con 25 µM de cofactor NS4A e inhibidor a 30°C durante 10 min, luego de lo cual se inició la reacción con el agregado de 0.5 µM de sustrato. Los inhibidores se disolvieron en DMSO, se sonicaron durante 30 seg. y se agitaron con vórtex. Se conservaron las soluciones a -20°C entre mediciones. La concentración final de DMSO en la muestra de ensayo se ajustó hasta 3.3%. La tasa de hidrólisis se corrigió para los efectos de filtro interno de acuerdo con los procedimientos publicados. [Liu, 1999 Analytical Biochemistry 267 331-335]. Se estimaron los valores de Ki por análisis de regresión no lineal (GraFit, Erithacus Software, Staines, MX, UK), usando un modelo para inhibición competitiva y un valor fijo para Km (0.15 µM). Se realizó un mínimo de dos replicaciones para todas las mediciones.

El siguiente Cuadro 1 enumera compuestos que se prepararon de acuerdo con cualquiera de los ejemplos anteriores. También se muestran las actividades de los compuestos analizados.

CUADRO 1

Claims (14)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN
2. REIVINDICACIONES 1.- Un compuesto que posee la fórmula un ?/-óxido, sal o estereoisómero del mismo, donde X es N, CH y cuando X posee un doble enlace es C; R1 es -OR5, -NH-S02R6; R2 es hidrógeno, y cuando X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C-?-6; R3 es hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C?-6-alquilo de d-6, o cicloalquilo de C3-7; R4 es isoquinolinilo sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes cada uno seleccionado de manera independiente de alquilo de C1-6, alcoxi de C1-6, hidroxi, halo, polihaloalquilo de C1-6, polihaloalcoxi de C1-6, amino, mono-o di-alquilamino de C-?-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C1-6, alquilcarbonil de C?-6-amino, arilo y Het; n es 3, 4, 5 o 6; donde cada línea punteada (representada por ) representa un doble enlace opcional; R5 es hidrógeno; arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido opcionalmente con alquilo de o alquilo de C?_6 sustituido opcionalmente con cicloalquilo de C3.7, arilo o con Het; R6 es arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido opcionalmente con alquilo de C?-6; o alquilo de C-?.6 sustituido opcionalmente con cicloalquilo de C3-7, arilo o con Het; cada arilo como grupo o parte de un grupo es fenilo sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados de halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C-?-6, alcoxi de C-?-6, alcoxi de C-?.6-alquilo de C-?-6, alquilcarbonilo de C -6, amino, mono- o dialquilamino de C1-6, azido, mercapto, polihaloalquilo de C?-6, polihaloalcoxi de C?-6, ciclopropilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilpiperazinilo de C-?-6, 4-alquilcarbonil C?-6-piperazinilo y morfolinilo; y donde los grupos morfolinilo y piperidilo pueden estar sustituidos opcionalmente por uno o dos radicales alquilo de C1-6; y cada Het como grupo o parte de un grupo es un anillo heterocíclico saturado, parcialmente no saturado o completamente no saturado de 5 o 6 miembros que contiene 1 a 4 heteroátomos, cada uno seleccionado de manera independiente de nitrógeno, oxígeno y azufre, y estando sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes, cada uno seleccionado de manera independiente del grupo que consiste en halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C1-6, alcoxi de C-?-6-alquilo de C?-6, alquilcarbonilo de C?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C?-6, azido, mercapto, polihaloalquilo de C-?-6, polihaloalcoxi de C-?-6, cicloalquilo de C3-7, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquil de C?-6-piperazinilo, 4-alquilcarbonil de C?-6 -piperazinilo y morfolinilo, y donde los grupos morfolinilo y piperidilo pueden estar sustituidos opcionalmente con uno o dos radicales alquilo de C-?-6. 2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , cartacterizado además porque el compuesto posee la fórmula (l-c), (l-d), o (I-e):
3. 3 - El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, caracterizado además porque R4 es donde cada R4b y R4b son, de manera independiente, hidrógeno, alquilo de C^e, alcoxi de C?-6, mono- o di-alquilamino de C-?-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C?-6, hidroxi, halo, trifluorometilo, arilo o Het; y R4d o R4d de manera independiente son hidrógeno, alquilo de d-ß, alcoxi de C-|.6 o halo. 4.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, caracterizado además porque R4 es donde R se selecciona de los siguientes restos donde R c es, cada uno de manera independiente, hidrógeno, halo, alquilo de C?-6, amino, o mono- o di-alquilamino de C ß, morfolinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, piperazinilo,
4. 4-alquilpiperazinilo de C 6; y R4 es hidrógeno, halo o trifluorometilo.
5. 5.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, caracterizado además porque (a) R1 es -OR5, donde R5 es alquilo de C?-6 o hidrógeno; o (b) R1 es -NHS(=0)2R6, donde R6 es metilo, ciclopropilo, metilciclopropilo o fenilo. 6.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5 caracterizado además porque R3 es hidrógeno o alquilo de C?_6. 7.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, caracterizado además porque n es 4 ó 5. 8.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, caracterizado además porque no es un N-óxido o una sal. 9.- Una combinación que comprende: (a) un compuesto definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o una sal aceptable desde el punto de vista farmacéutico del mismo; y (b) ritonavir, o una sal aceptable desde el punto de vista farmacéutico del mismo. 10.- Una composición farmacéutica que comprende un vehículo y como componente activo, una cantidad efectiva como agente anti-viral de un compuesto reivindicado en cualquiera de las reivindicaciones 1-7 o una combinación de acuerdo con la reivindicación 9. 11.- El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-7 o una combinación de la reivindicación 9, para usar como medicamento. 12.- Uso de un compuesto como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1-7 o una combinación de la reivindicación 9, para la fabricación de un medicamento útil para inhibir la replicación del HCV. 13.- El uso de un compuesto como se reclama en las reivindicaciones 1-7 o una cantidad efectiva de cada componente de la combinación de la reivindicación 9, para la elaboración de un medicamento útil para inhibir la replicación de HCV en un animal de sangre caliente. 14.- Un procedimiento para preparar un compuesto reivindicado en cualquiera de las reivindicaciones 1-8, donde dicho procedimiento comprende: (a) preparar un compuesto de fórmula (I) donde el enlace entre C y C8 es un doble enlace, que es un compuesto de fórmula (l-i), mediante la formación de un doble enlace entre C7 y C8, en especial mediante una reacción de metátesis olefínica, con la delación concomitante al macrociclo según se indica en el siguiente esquema de reacción: (b) convertir un compuesto de fórmula (l-i) en un compuesto de fórmula (I) donde el enlace entre C7 y C8 en el macrociclo es un enlace simple, es decir un compuesto de fórmula (l-j): (--i) mediante una reducción del doble enlace C7-C8 en los compuestos de fórmula (l-j): (c) preparar un compuesto de fórmula (I) donde R1 representa -NHS02R6, estando dichos compuestos representados por la fórmula (l-k-1), mediante la formación de un enlace amida entre un intermediario (2a) y una sulfonilamina (2b), o preparar un compuesto de fórmula (I) donde R1 representa -OR5, es decir un compuesto (l-k-2), mediante la formación de un enlace éster entre un intermediario (2a) y un alcohol (2c) según se indica en el siguiente esquema, donde G representa un grupo: O G-COOH + H2N-S02R6 HN- S02R6 (2a) (2b) (l-k-1) (d) preparar un compuesto de fórmula (I) donde R3 es hidrógeno, estando dicho compuesto representado por (l-l), a partir de un intermediario correspondiente con nitrógeno protegido (3a), donde PG representa un grupo protector de nitrógeno: (3a) (l-l) (e) hacer reaccionar un intermediario (4a) con un intermediario (4b) según se indica en el siguiente esquema de reacción: (4a) m donde Y en (4a) representa hidroxi o un grupo saliente; reacción que en particular es una reacción de O-arilación donde Y representa un grupo saliente, o una reacción de Mitsunobu, donde Y representa hidroxi; (f) convertir los compuestos de fórmula (I) entre sí mediante una reacción de transformación de grupos funcionales; o (g) preparar una forma salina haciendo reaccionar la forma libre de un compuesto de fórmula (I) con un ácido o una base. RESUMEN DE LA INVENCIÓN Inhibidores de la replicación del HCV de fórmula (I) y los ?/-óxidos, sales y estereoisómeros de los mismos, donde X es N, CH y cuando X posee un doble enlace es C; R1 es -OR5, -NH-S02R6; R2 es hidrógeno, y cuando X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C^; R3 es hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C?_
6. 6-alquilo de C?-6, o cicloalquilo de C3- ; R4 es isoquinolinilo sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes cada uno seleccionado de manera independiente de alquilo de C?.6, alcoxi de C?-6, hidroxi, halo, polihaloalquilo C^, polihaloalcoxi de C?_6, amino, mono- o di-alquilamino de C1-6, mono- o di-alquilaminocarbonilo de C-i. 6, alquilcarbonil de C?-6-arnino, arilo y Het; n es 3, 4, 5, o 6; cada línea punteada (representada por) representa un doble enlace opcional; R5 es hidrógeno; arilo; Het; cicloalquilo de C3.7 sustituido opcionalmente con alquilo de C?-6; o alquilo de C?-6 sustituido opcionalmente con cicloalquilo de C3-7, arilo o con Het; R6 es arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido opcionalmente con alquilo de C?-6; o alquilo de C -6 sustituido opcionalmente con cicloalquilo C3- , arilo o con Het; cada arilo es fenilo sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes; y cada Het es un anillo heterocíclico de 5 o 6 miembros saturado, parcialmente no saturado o completamente no saturado que contiene 1 a 4 heteroátomos, cada uno seleccionado de manera independiente de nitrógeno, oxigeno y azufre y estando sustituido opcionalmente con uno, dos o tres sustituyentes; composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos (I) y procedimientos para preparar los compuestos (I); también se proporcionan combinaciones biodisponibles de los inhibidores de HCV de fórmula (I) con ritonavir. 41 B P08/31 F