MX2007008753A - Agente antitumoral. - Google Patents

Abstract

Un agente antitumoral, una medicina que es util para el tratamiento o prevencion del cancer digestivo, leucemia, tumor de la hipofisis, cancer de pulmon de las celulas pequenas, cancer de tiroides y neuroastrocitrico, el agente antitumoral contiene como un ingrediente activo, ya sea un derivado de la 1,5-benzodiazepina representado por la formula general (1): (en donde R1 representa alquilo de C1-6; R2 representa fenilo o ciclohexilo; y Y representa un enlace sencillo o alquileno de C1-4), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.

Description

AGENTE ANTITUMORAL CAMPO TÉCNICO La presente invención se relaciona con un agente antitumoral, y más particularmente con un agente antitumoral útil para el tratamiento o prevención del cáncer gastrointestinal, leucemia, tumor de la hipófisis, cáncer de pulmón de las células pequeñas, cáncer de tiroides y neuroastrocitoma.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN En Japón, la tasa de mortalidad del cáncer se ha incrementado, y desde 1981 , el cáncer ha sido una causa de muerte principal en el Japón. En el 2002, el cargo por muerte del cáncer fue de 304,286 (es decir, 241.5 por 100,000), constituyendo 31.0% de todas las muertes. Particularmente, la incidencia de los cánceres gastrointestinales, tales como cáncer pancreático, cáncer de colon y cáncer gástrico es alta. Entre estos cánceres gastrointestinales, el cáncer pancreático se conoce como un cáncer intratable. En Japón, únicamente el cloruro de gemcitabina está probado como un agente quimioterapéutico para el cáncer pancreático. Sin embarbo, un agente quimioterapéutico tal como el clorhidrato de gemcitabina o fluorouracilo, con frecuencia causa efectos laterales serios (por ejemplo, mielosupresión y neumonía intersticial), y por lo tanto, se impone una limitación en el intervalo o periodo de administración de tal agente quimioterapéutico. Además, se impone una limitación en la forma de dosificación de tal agente quimioterapéutico, puesto que el agente se proporciona generalmente en la forma de una infusión de goteo intravenoso. Por lo tanto, ha surgido una demanda por el desarrollo de un agente antitumoral que reemplace tal agente quimioterapéutico. Un agente quimioterapéutico que exhibe un efecto citotóxico o citocida se emplea generalmente como un agente antitumoral, y con frecuencia se emplea una quimioterapia de combinación de múltiples fármacos, en vista de que el empleo de varios agentes quimioterapéuticos en combinación, mitiga los efectos laterales adversos de los agentes y mejora el efecto antitumoral de los agentes. La quimioterapia de combinación con múltiples fármacos, que emplea generalmente en combinación agentes farmacéuticos que exhiben diferentes mecanismos de acción y diferentes efectos laterales, causa un problema en que cuando ocurre una toxicidad común a los agentes farmacéuticos (por ejemplo, mielosupresión), las cantidades de los agentes farmacéuticos respectivos deben reducirse (Documento 1 que no es de Patente). También, la quimioterapia de combinación con múltiples fármacos causa un problema en que un agente farmacéutico debe reemplazarse por otro agente farmacéutico debido a la tolerancia del agente farmacéutico.

En años recientes, los mecanismos de, por ejemplo, crecimiento, metástasis, invasión y progresión maligna del cáncer se han elucidado a nivel molecular, y se han desarrollado varios agentes farmacéuticos basados en un objetivo, dirigidos a moléculas específicas. Tal agente farmacéutico objetivo molecular, exhibe generalmente baja citotoxicidad, y se considera que exhibe efectos laterales reducidos, en comparación con un agente quimioterapéutico convencional que exhibe un efecto citotóxico. Tal agente farmacéutico basado en un objetivo, que exhibe sus efectos cuando se emplea de manera única, también se ha vuelto de interés como un agente farmacéutico utilizado en combinación con un agente quimioterapéutico (Documento 2 que no es de Patente). Previamente, el tratamiento del cáncer se ha evaluado únicamente basándose en el encogimiento del cáncer debido al efecto citotóxico de un agente quimioterapéutico empleado. Sin embargo, en años recientes, la mejora en la calidad de vida (QOL), la supresión de metástasis o la progresión del tiempo de supervivencia se han considerado puntos de evaluación útiles para evaluar el tratamiento del cáncer, y el empleo de un agente quimioterapéutico y un agente farmacéutico basado en un objetivo en combinación, se considera un tratamiento para el cáncer promisorio (Documento 3 que no es de Patente). La gastrina es una hormona gastrointestinal que se considera un factor de crecimiento de las células del tumor. Como se ha revelado, un gen del receptor de la gastrina se expresa en las células del cáncer pancreático, cáncer de colon o cáncer gástrico (es decir, un cáncer gastrointestinal), por lo que una potente propiedad de crecimiento de las células, se exhibe en respuesta a la gastrina (Documentos 4 y 5 que no son de Patente). Como se ha reportado, similar al caso de tal cáncer gastrointestinal, un gen del receptor de la gastrina se expresa en el caso de la leucemia, tumor de la hipófisis, cáncer de pulmón de las células pequeñas, cáncer de tiroides o neuroastrocitoma, y la gastrina puede funcionar como un factor de crecimiento de las células cancerosas (Documento 6 que no es de Patente). Previamente, se ha considerado que un incremento en el crecimiento celular ocurre principalmente a través de una trayectoria en la cual la gastrina estimula un receptor de la gastrina presente en la superficie de las células. Sin embargo, los estudios recientes sugieren que existe una trayectoria para incrementar el crecimiento celular por la gastrina, en el cual la gastrina se une a un receptor de la gastrina, y a continuación se toma en las células a través de la endocitosis (Documento 7 que no es de Patente); y que existe otra trayectoria en la cual la gastrina se une a una proteína que se une a la gastrina presente en las células, regulando por lo tanto el crecimiento celular (Documentos 8 y 9 que no son de Patente). También se ha reportado una gastrina extendida con glicina, que es un precursor de la gastrina, que se une a un receptor no identificado además de un receptor de la gastrina, regulando por lo tanto el crecimiento celular (Documentos 10 y 11 que no son de Patente). Por lo tanto, se considera que el crecimiento celular mediado por la gastrina ocurre a través de una pluralidad de trayectorias. Los antagonistas del receptor de la gastrina desarrollados convencionalmente, son compuestos que se dirigen únicamente a los receptores de la gastrina, y así, tales antagonistas del receptor de la gastrina, convencionales, no exhiben un efecto antitumoral consistente y confiable. Por ejemplo, se ha reportado que el L-365,260, que es un compuesto de benzodiazepina, suprime el crecimiento del tumor inducido por la gastrina en un modelo de ratón de xenoinjerto de cáncer pancreático humano PANC-1 , pero que no suprime el crecimiento del tumor sin la estimulación por la gastrina (Documento 12 que no es de Patente). Se han reportado resultados similares en el caso de CR2093, que es un derivado del ácido glutámico (Documento 13 que no es de Patente). Estos datos indican que un antagonista del receptor de la gastrina suprime únicamente el crecimiento celular del cáncer, inducido por una estimulación de la gastrina forzada de manera externa; es decir, el crecimiento de las células del cáncer inducido por una estimulación gástrica no fisiológica. Por lo tanto, un antagonista del receptor de la gastrina, que pierde el efecto supresor del crecimiento celular bajo condiciones fisiológicas, se considera que exhibe un efecto insuficiente como un agente antitumoral. El CI-988, que es un derivado pentapeptídico C terminal de CCK, se conoce como un potente antagonista del receptor de la gastrina. Sin embargo, como se ha reportado, cuando se administra oralmente a un ratón de xenoinjerto de cáncer de colon humano a una dosis de 50 mg/kg, el CI-988 no exhibe un efecto supresor del crecimiento celular, aunque cuando se administra oralmente a una dosis de 25 mg/kg, el CI-988 exhibe un efecto supresor del crecimiento celular sin estimulación gástrica no fisiológica (Documento 14 que no es de Patente). El YF476, que es un compuesto de benzodiazepina, se conoce como un antagonista selectivo y potente del receptor de la gastrina. El Documento 1 de Patente describe que el YF476 exhibe un efecto de encogimiento del tumor en un modelo de xenoinjerto de cáncer pancreático o cáncer de colon. Sin embargo, el documento de la patente describe que este efecto se observa únicamente en el caso en donde el YF476 se administra a una dosis alta de 200 mg/kg o mayor, y que no está claro si el mecanismo de acción del YF476 está mediado por un receptor de la gastrina. Como se describió anteriormente, se han desarrollado numerosos antagonistas del receptor de la gastrina, pero ninguna conclusión establecida se ha obtenido con respecto al efecto antitumoral de tales antagonistas. De manera específica, no se ha descrito que el efecto antagonista del receptor de la gastrina tenga una correlación simple con el efecto antitumoral, y el papel que un receptor de la gastrina juega en el cáncer no se ha elucidado completamente. Mientras tanto, no está actualmente claro si un compuesto de 1 ,5-benzodiazepina descrito en el Documento 2 de Patente y que tiene un efecto antagonista de la gastrina exhibe un efecto antitumoral útil o no.

Documento 1 de Patente: WO 02/092096 Documento 2 de Patente: WO 01/40197 Documento 1 que no es de Patente: Nippon Rinsho 2003, 61 , 6, 1015-1020 Documento 2 que no es de Patente: Nippon Rinsho 2004, 62, 7, 1232-1240 Documento 3 que no es de Patente: J Clin Oncol 2003, 21 , 7, 1404-1411 Documento 4 que no es de Patente: Am J Physiol 1985, 249, G761-769 Documento 5 que no es de Patente: Am J Physiol 1994, 266, R277-283 Documento 6 que no es de Patente: Igaku no Ayumi 1998, 184, 4, 260-261 Documento 7 que no es de Patente: Cell Tissue Res. 1997, 287, 325-333 Documento 8 que no es de Patente: J Gastroenterol Hepatol. 1995, 10, 215-232 Documento 9 que no es de Patente: Eur J Pharmacol. 2000, 388, 9-15 Documento 10 que no es de Patente: Science 1994, 265, 410-412 Documento 11 que no es de Patente: Regul Pept. 2000, 93, 37-44 Documento 12 que no es de Patente: Am J Physiol. 1995, 268, R135-141 Documento 13 que no es de Patente: Br J Cáncer. 1992, 65, 879-883 Documento 14 que no es de Patente: Clin Exp Pharmacol Physiol. 1996, 23, 438-440 BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Problemas a ser solucionados por la invención Un objeto de la presente invención es proporcionar un agente antitumoral; en particular, un agente antitumoral útil para el tratamiento y/o prevención de, por ejemplo, cáncer gastrointestinal, leucemia, tumor de la hipófisis, cáncer de pulmón de las células pequeñas, cáncer de tiroides y neuroastrocitoma.

Medios para solucionar los problemas Los presentes inventores han realizado estudios extensos en el efecto antitumoral de un derivado de la 1 ,5-benzodiazepina descrito en la WO 01/40197, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y se ha encontrado un resultado de que el compuesto exhibe un buen efecto antitumoral. En consecuencia, la presente invención proporciona un agente antitumoral que contiene, como un ingrediente activo, un derivado de la 1 ,5-benzodiazepina representado por la siguiente fórmula (1 ): (en donde R representa un grupo alquilo de C1-6; R2 representa un grupo fenilo o un grupo ciciohexilo; y Y representa un enlace sencillo o un grupo alquileno de C1-4), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención también proporciona el uso de un derivado de 1 ,5-benzodiazepína representado por la fórmula (1 ) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para producir un agente antitumoral. La presente invención también proporciona un método para tratar un tumor, que incluye administrar, en una cantidad efectiva, un derivado de 1 ,5-benzodiazepina representado por la fórmula (1 ) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Efectos de la invención El compuesto de acuerdo con la presente invención no exhibe un efecto citocida que ha exhibido un agente quimioterapéutico convencional, y no exhibe efectos laterales serios en las pruebas de seguridad utilizando animales; es decir, el compuesto tiene un bajo riesgo de efectos laterales serios (por ejemplo, mielosupresión y neumonía intersticial), que de otra manera, serían causados por un agente quimioterapéutico convencional. Por lo tanto, el compuesto es útil como un agente farmacéutico antitumoral para, por ejemplo, cáncer gastrointestinal, leucemia, tumor de la hipófisis, cáncer de pulmón de las células pequeñas, cáncer de tiroides y neuroastrocitoma. Puesto que el agente farmacéutico de acuerdo con la presente invención exhibe baja toxicidad, el agente farmacéutico puede administrarse de una manera continua, y puede administrarse oralmente. Por lo tanto, el agente farmacéutico puede prepararse en una forma de dosificación simple, en comparación con el caso de un agente quimioterapéutico convencional. Cuando el agente farmacéutico de acuerdo con la presente invención se emplea en una quimioterapia de combinación con múltiples fármacos, la dosis de un agente farmacéutico antitumoral que exhibe efectos laterales severos, puede reducirse, probablemente realizando una quimioterapia de combinación con múltiples fármacos que exhibe un buen efecto antitumoral y efectos laterales reducidos. Cuando el agente farmacéutico se administra de una manera continua, incluso después de la administración de un agente quimioterapéutico convencional, se considera que el agente farmacéutico exhibe el efecto de suprimir el crecimiento del tumor; es decir, el agente farmacéutico también puede emplearse como un agente preventivo del tumor.

MODALIDADES PREFERIDAS DE LA INVENCIÓN Los ejemplos del grupo alquilo de representados por R1 en la fórmula (1 ) incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo y ter-butilo. De estos, un grupo alquilo de C?- es más preferido, y un grupo alquilo de C es mucho más preferido, con el grupo ter-butilo siendo particularmente preferido. R2 es particularmente de manera preferida, un grupo ciciohexilo. Los ejemplos del grupo alquileno de C?-4 representados por Y incluyen metileno, etileno, propileno, butileno, metilmetileno, dimetilmetileno, 1-metiletileno, 1 ,1-dimetiletileno, 1-metilpropileno y 2-metilpropileno. De estos, un grupo dimetilmetileno es particularmente preferido. Y es particularmente, de manera preferida, un enlace sencillo. Entre los compuestos representados por la fórmula (1 ) (aquí posteriormente los compuestos pueden referirse de manera colectiva como el "compuesto (1 )"), particularmente preferidos son el ácido (R)-(-)-3-[3-(1-ter-butilcarbonilmetil-2-oxo-5-ciclohexil-1 ,3,4,5-tetrahidro-2H-1 ,5-benzodiazepin-3-il)ureido]benzoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (compuesto A); y el ácido (R)-(-)-2-[3-[3-(1-ter-butilcarbonilmetil-2-oxo-5- ciclohexil-1 ,3,4,5-tetrahidro-2H-1 ,5-benzodiazepin-3-il)ureido]fenil-2-metilpropiónico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (compuesto B). De estos, el compuesto A es el más preferido. Los ejemplos de sales del compuesto (1 ) incluyen sales inorgánicas tales como una sal de sodio, una sal de potasio, una sal de calcio y una sal de magnesio; sales orgánicas tales como una sal de amonio, una sal de piridina, una sal de trietilamina, una sal de etanolamina, una sal de la forma (R) o (S) de a-fenetilamina, una sal de bencilamina y una sal de 4-metilbencilamina; y sales de adición de ácido con ácidos orgánicos e inorgánicos. De estos, las sales básicas se prefieren. Entre las sales básicas, las sales inorgánicas son más preferidas. Entre las sales inorgánicas, las sales de un metal alcalinotérreo se prefieren, con una sal de calcio siendo particularmente preferida. Como se utiliza en la presente, el "compuesto (1 )" abarca sus isómeros, diastereómeros óptimamente activos, solvatos (por ejemplo, hidratos), y polimorfos cristalinos. El compuesto (1 ) puede producirse a través del método descrito en la WO 01/40197. Como se describe a continuación en los Ejemplos, el compuesto (1 ) suprime el crecimiento de varios tumores, y prolonga de manera estadísticamente significativa el tiempo de supervivencia de un hospedero que porta el cáncer. Por lo tanto, el compuesto (1 ) es útil como un agente farmacéutico para la prevención o tratamiento de varios tumores. Cuando el compuesto (1 ) (en particular, el compuesto A) se administró a ratas y perros a una dosis de 1 ,000 mg/kg durante 28 días consecutivos, no se observaron muertes. Además, no se encontró anormalidad en el peso corporal, ingesta de alimento, prueba oftalmológica, prueba de orina, peso de los órganos, hallazgos de las autopsias, y la prueba histopatológica; es decir, el compuesto (1 ) exhibe una seguridad muy alta. Ninguna limitación particular está impuesta al cáncer al cual el agente antitumoral de acuerdo con la presente invención se aplica, y los ejemplos de cáncer incluyen cáncer gastrointestinal, leucemia, tumor de la hipófisis, cáncer de pulmón de las células pequeñas, cáncer de tiroides y neuroastrocitoma. El agente antitumoral de acuerdo con la presente invención es útil para la prevención y/o tratamiento de entre los cánceres mencionados anteriormente, cáncer gastrointestinal (en particular, cáncer pancreático, cáncer de colon o cáncer gástrico). El agente antitumoral de acuerdo con la presente invención puede contener un portador o adyuvante farmacéuticamente aceptable, y puede administrarse de manera oral o parenteral. El agente antitumoral puede administrarse oralmente en la forma de un producto sólido, tal como una tableta, un granulo, un polvo o una cápsula. Para la preparación de tal producto sólido, el agente antitumoral puede combinarse con un aditivo apropiado, tal como un excipiente (por ejemplo, lactosa, manitol, almidón de maíz o celulosa cristalina), un aglutinante (por ejemplo, un derivado de celulosa, goma arábica o gelatina), un desintegrante (por ejemplo, carboximetilcelulosa de calcio), o un lubricante (por ejemplo, talco o estearato de magnesio). Tal producto sólido puede prepararse en un producto de liberación controlada mediante el uso de un material de base de recubrimiento tal como ftalato de hidroximetilcelulosa, succinato de acetato de hidroxipropilmetilcelulosa, ftalato de acetato de celulosa o un copolímero de metacrilato. El agente antitumoral también puede prepararse en un producto líquido tal como una solución, una suspensión o una emulsión. El agente antitumoral de acuerdo con la presente invención puede administrarse parenteralmente en la forma de una inyección. Para la preparación de una inyección, el agente antitumoral puede combinarse con, por ejemplo, agua, etanol, glicerina o un tensioactivo empleado de manera convencional. El agente antitumoral también puede prepararse en un supositorio mediante el uso de un material de base apropiado. La dosis del compuesto (1 ) contenido en el agente antitumoral de acuerdo con la presente invención, se determina de manera apropiada considerando el método de administración y la forma del producto del mismo, así como los síntomas, edad, sexo, etc., de los pacientes individuales en necesidad del mismo. La dosis oral diaria del compuesto (1 ) para un adulto es típicamente de 10 a 1 ,000 mg, de manera preferida de 50 a 600 mg, de manera más preferida de 180 a 500 mg. De manera preferida, la dosis oral diaria se administra una vez al día, o en una manera dividida (dos o tres veces al día).

El agente antitumoral de acuerdo con la presente invención puede administrarse en combinación con un agente antitumoral empleado en una terapia de combinación con múltiples fármacos (es decir, al menos un agente antitumoral diferente al agente antitumoral de acuerdo con la presente invención), o con terapia de radiación, en la cual estos agentes antitumorales pueden administrarse de manera simultánea o separada a la misma frecuencia de dosificación o diferentes frecuencias a través del mismo método de administración o métodos de administración diferentes. Así, el agente antitumoral de acuerdo con la presente invención puede emplearse en combinación con una terapia de combinación con múltiples fármacos o con terapia de radiación para tratar pacientes con cáncer. Cuando el agente antitumoral de acuerdo con la presente invención se emplea en una terapia de combinación con múltiples fármacos, el agente antitumoral puede agregarse a varios agentes farmacéuticos empleados en la terapia de combinación, o puede sustituirse por uno o dos agentes anticancerígenos entre los agentes farmacéuticos. Los ejemplos de agentes antitumorales que se emplean de manera preferida en combinación con el agente antitumoral de acuerdo con la presente invención incluyen, de manera no exclusiva, antimetabolitos tales como fluorouracilo, clorhidrato de gemcitabina, metotrexato, citarabina y fludarabina; antibióticos antitumorales tales como clorhidrato de bleomicina, mitomicina C, clorhidrato de doxorrubicina, clorhidrato de daunorrubicina y clorhidrato de idarrubicína; agentes alquilantes tales como busulfan, complejos de metales de coordinación (carboplatina y cisplatina), ciclofosfamida, dacarbazina y melfalan; inhibidores de la aromatasa no esteroidales tales como anastrozol y exemestano; agentes inmunoterapéuticos tales como trastuzumab y rituximab; inhibidores mitóticos tales como paclitaxel, hidrato de docetaxel, sulfato de vincristina y sulfato de vinblastina; inhibidores de la topoisomerasa tales como clorhidrato de irinotecano; agentes para la terapia hormonal tales como citrato de tamoxifeno y acetato de leuprorelina; y otros agentes antitumorales tales como levofolinato de calcio, inhibidores de la tirosina cinasa (por ejemplo, gefitinib), anticuerpos monoclonales (por ejemplo, cetuximab y bevacizumab), inhibidores de la metaloproteasa de la matriz e inhibidores de la farnesiltransferasa. Particularmente, de manera preferida, el agente antitumoral de acuerdo con la presente invención se agrega durante el uso del clorhidrato de gemcitabina, que se conoce por exhibir el efecto de tratar el cáncer pancreático, o el agente antítumoral se agrega a la terapia de combinación empleando clorhidrato de gemcítabina y otro agente quimioterapéutico (por ejemplo, fluorouracilo, levofolinato de calcio, clorhidrato de irinotecano, o un complejo de metal de coordinación). Cuando el compuesto (1 ) se emplea en combinación con otros agentes antitumorales, la dosis del compuesto (1 ) o los agentes antitumorales se determina de manera apropiada considerando, por ejemplo, la identidad de cada uno de los agentes antitumorales, los síntomas de un paciente en necesidad de los mismos, y el método de administración de los mismos. En la terapia de combinación con múltiples fármacos, la dosis del compuesto (1 ) es similar a aquélla descrita anteriormente. El periodo de administración, la frecuencia de administración y la forma de dosificación del compuesto (1 ) se optimizan en consideración de la identidad de cada uno de los agentes antitumorales empleados en combinación con el compuesto (1 ). De manera específica, el compuesto (1 ) y al menos un agente antitumoral (de manera preferida, uno a cuatro agentes antitumorales), se administran de manera simultánea o separada a la misma frecuencia o diferentes frecuencias en la misma forma de dosificación o diferentes formas de dosificación. En la terapia de combinación con múltiples fármacos, de manera preferida, el compuesto (1 ) se administra de manera oral o intravenosa una o más veces al día. Un agente antítumoral se administra generalmente a través de una infusión intravenosa, pero se administra de manera más preferida mediante ruta oral, en vista de que puede seleccionarse una forma de dosificación simple. Como se describe a continuación en los Ejemplos, cuando el agente antitumoral de acuerdo con la presente invención se emplea en combinación con otro agente antitumoral, se logra un excelente efecto antitumoral sin un incremento en los efectos laterales. Por lo tanto, cuando el agente farmacéutico de acuerdo con la presente invención se emplea en una quimioterapia de combinación con múltiples fármacos, la dosis de otro agente antitumoral que exhibe efectos laterales severos puede reducirse. El agente antitumoral de acuerdo con la presente invención puede administrarse de manera continua incluso después de la quimioterapia, y por lo tanto, se considera en gran medida, que se obtiene además, un efecto antitumoral excelente. Se ha reportado que el compuesto (1 ) tiene una alta afinidad de unión con el receptor de la gastrina de rata (valor de Ki = 0.24 nM), y la administración intraduodenal del compuesto (1 ) a dosis de 0.17 mg/kg, suprime la secreción del ácido gástrico estimulada por la gastrina, en la rata por el 50% (Gastroenterology 2001 ; A-311 : 1605). En contraste, el agente antitumoral para la presente invención requiere dosis más altas para la expresión del efecto antitumoral.

EJEMPLOS La presente invención se describirá a continuación con detalle con referencia a los Ejemplos y los Ejemplos Comparativos, pero la invención no está limitada a estos Ejemplos. El efecto antítumoral y la toxicidad del compuesto (1 ) se describirán en los Ejemplos 1 a 6. La preparación del agente antitumoral para la presente invención se describirá en los Ejemplos de Formulación 1 a 3.

EJEMPL0 1 3 x 106 células de células de cáncer pancreático humano (MIAPaCa 2), se implantaron subcutáneamente en el abdomen derecho de ratones atímicos hembra Balb/c. Después de que el volumen del tumor se ha vuelto de 100 mm3 o más, el (R)-(-)-3-[3-(1-ter-butilcarbonilmetil-2-oxo-5-cíclohexil-1 ,3,4,5-tetrahidro-2H-1 ,5-benzodiazepin-3-íl)ureido]benzoato de calcio (aquí posteriormente llamado "compuesto A1"), se administró oralmente a ratones en grupos de administración a dosis de 10, 30 y 100 mg/kg una vez al día durante 21 días. En el día siguiente a la administración final, el tumor se retiró y pesó. Para comparación, el vehículo se administró oralmente a los ratones en un grupo de control, y el peso del tumor se midió de manera similar a aquélla descrita anteriormente. El por ciento de inhibición del crecimiento del tumor se calculó basándose en los pesos del tumor en cada grupo de administración versus aquéllos en un grupo de control. Como resultado, el por ciento de inhibición de 30 mg/kg y 100 mg/kg del compuesto A1 fueron de 40% y 42%, respectivamente. La administración del compuesto A1 inhibió de manera significativa el crecimiento del tumor MIAPaCa 2 de una manera dependiente de la dosis.

EJEMPLO 2 1 x 106 células de células de cáncer pancreático humano (PAN1VC), se implantaron en el páncreas de ratones atímicos macho. Desde el día siguiente a la implantación del tumor, el compuesto A1 se administró oralmente a dosis de 30 mg/kg y 100 mg/kg una vez al día durante 36 días.

Uno, tres y seis días después de la implantación del tumor, el clorhidrato de gemcitabina (Inyección de Gemzar(R)), se administró intravenosamente a una dosis de 5 mg/kg. El por ciento de inhibición del crecimiento del tumor se calculó basándose en los pesos del tumor en cada uno de los grupos de administración versus aquellos en un grupo de control. Como resultado, el por ciento de inhibición de una sola dosis de clorhidrato de gemcitabina (Inyección de Gemzar(R), 30 mg/kg del compuesto A1 , y 100 mg/kg del compuesto A1 fueron 32%, 19% y 23%, respectivamente. En contraste, cuando el clorhidrato de gemcitabína (Inyección de Gemzar(R)) y el compuesto A1 se administraron en combinación, el por ciento de inhibición de 30 mg/kg y 100 mg/kg del compuesto A1 , fueron de 73% y 84%, respectivamente. Estos datos indican que la combinación del compuesto A1 y el clorhidrato de gemcitabína (Inyección de Gemzar(R)), exhiben un excelente efecto antitumoral.

EJEMPLO 3 1.5 x 106 células de células de cáncer de colon humano (C170HM2), se inyectaron intraperitonealmente en ratones atímicos macho. Después de la implantación, en los grupos de administración, el compuesto A1 se administró oralmente a los ratones a dosis de 3 mg/kg y 30 mg/kg una vez al día. Mientras tanto, en un grupo de control positivo, la combinación de 5-fl uoro uracilo (llamado aquí posteriormente "5-FU") y leucovorina, se administró intravenosamente (para cada compuesto, 25 mg/kg/inyección), uno, cuatro, siete y 10 días después de la implantación del tumor. Cuarenta días después de la implantación del tumor C170HM2, el peso del hígado metastatizado con el tumor se midió. La administración del compuesto A1 a dosis de 3 mg/kg y 30 mg/kg, resultó en la inhibición de la metástasis del tumor al hígado por 73% y 81 %, respectivamente. En contraste, el por ciento de inhibición de la metástasis en un grupo de control positivo fue de 63%. Estos datos indican que el compuesto A1 exhibe un efecto antimetastático en comparación con, o mayor que aquél del agente quimioterapéutico.

EJEMPLO 4 5 x 105 células de cáncer gástrico humano (MGLVA1 ), se inyectaron intraperitonealmente en ratones SCID hembra. Después de la implantación, el compuesto A1 se administró oralmente a los ratones a dosis de 3 mg/kg y 30 mg/kg una vez al día. La prolongación del tiempo de supervivencia por el compuesto A1 , se evaluó debido a que este modelo que utiliza MGLVA1 es un modelo letal. En el día 6 después del inicio de la administración, la proporción de supervivencia fue de 6.7% en un grupo de control, mientras que la proporción de supervivencia fue de 46.7% en un grupo de administración del compuesto A1 a una dosis de 30 mg/kg. Estos datos indican que el compuesto A1 exhibe el efecto de prolongar el tiempo de supervivencia después de la implantación del tumor.

EJEMPLO 5 1 x 106 células de células de cáncer de colon humano (HT-29), se implantaron subcutáneamente en el abdomen derecho de ratones atímicos hembra Balb/c. Desde los cuatro días después de la implantación del tumor, el compuesto A1 se administró oralmente a los ratones en grupos de administración a dosis de 10, 30 y 100 mg/kg una vez al día durante 17 días. En el día siguiente a la administración final, el tumor se retiró y pesó. En un grupo de control, el vehículo se administró oralmente a los ratones, y el peso del tumor se midió de manera similar a aquella descrita anteriormente. El por ciento de inhibición del crecimiento del tumor se calculó basándose en los pesos del tumor en cada uno de los grupos de administración versus aquéllos en un grupo de control. Como resultado, el por ciento de inhibición de 30 mg/kg y 100 mg/kg del compuesto A1 fueron de 44% y 500, respectivamente. La administración del compuesto A1 inhibió de manera significativa el crecimiento del tumor de una manera dependiente de la dosis.

EJEMPLO 6 1 x 106 células de células de cáncer de colon humano (HT-29), se implantaron subcutáneamente en el abdomen derecho de ratones atímicos hembra Balb/c. Desde los 10 días después de la implantación del tumor, el compuesto A1 se administró oralmente a los ratones en un grupo de administración a una dosis de 30 mg/kg una vez al día durante 12 días. Para comparación, el 5-FU se administro intraperitonealmente a ratones en grupos de control positivo a dosis de 3, 10 y 30 mg/kg una vez al día durante 12 días. Además, la combinación del compuesto A1 (30 mg/kg) y 5-FU (3, 10 ó 30 mg/kg), se administró a ratones en cada uno de los grupos de la combinación. En el día siguiente a la administración final, el tumor se retiró y pesó. En un grupo de control, el vehículo se administró a los ratones, y el peso del tumor se midió de manera similar a aquélla descrita anteriormente. El por ciento de inhibición del crecimiento del tumor se calculó basándose en los pesos del tumor en cada uno de los grupos de administración versus aquéllos en un grupo de control. El por ciento de inhibición de una sola administración del compuesto A1 a una dosis de 30 mg/kg fue de 34%. El por ciento de inhibición de una sola administración de 5-FU a dosis de 3, 10 y 30 mg/kg fue de 24%, 30% y 58%, respectivamente. En contraste, cuando el compuesto A1 a una dosis de 30 mg/kg y 5-FU a un a dosis de 3, 10 ó 30 mg/kg se administraron en combinación, el por ciento de inhibición fue de 31%, 54% ó 76%, respectivamente. Estos datos indican que la combinación del compuesto A1 y 5-FU exhibe un excelente efecto antítumoral.

EJEMPLO 7 Una pequeña pieza (70 a 80 mg) de células de cáncer pancreático humano (PANC-1 ), se implantó en el páncreas de ratones SCID hembra (15 ratones por cada grupo). En un grupo de ratones, desde los siete días después de la implantación, el compuesto A1 se administró oralmente a una dosis de 100 mg/kg una vez al día. En otro grupo de ratones, en el día siete, 10 y 14 días después de la implantación, el clorhidrato de gemcitabina (Inyección de Gemzar(R)) como un control positivo, se inyectó intravenosamente a una dosis de 100 mg/kg. La prolongación del tiempo de supervivencia por el compuesto A1 se evaluó debido a que este modelo que utiliza PANC-1 es un modelo letal. A los cuarenta días después del inicio de la administración (a los 46 días después de la implantación), la tasa de supervivencia en un grupo de control (administración del vehículo), fue del 46.7%, mientras que la tasa de supervivencia en el grupo de la administración del compuesto A1 (100 mg/kg) fue de 86.7%. Mientras tanto, la tasa de supervivencia en el grupo de administración del clorhidrato de gemcitabina fue de 93.3%. Estos datos indican que el compuesto A1 ejerce un beneficio de la • supervivencia después de la implantación del tumor comparable a un agente quimioterapéutico.

EJEMPLO 8 Una pequeña pieza (70 a 80 mg) de células de cáncer pancreático humano (PANC-1 ), se implantó en el páncreas de ratones SCID hembra (15 ratones por cada grupo). En un grupo de ratones, desde los siete días después de la implantación, el compuesto A1 se administró oralmente a una dosis de 100 mg/kg una vez al día. En otro grupo de ratones, en los días siete, 10 y 14 días después de la implantación, el clorhidrato de gemcitabína (Inyección de Gemzar(R)) se administró intravenosamente a una dosis de 100 mg/kg. La prolongación del tiempo de supervivencia por el compuesto A1 se evaluó debido a que este modelo que utiliza PANC-1 es un modelo letal. Como se muestra en el Cuadro 1 , la administración del clorhidrato de gemcitabina ("GEM" en el Cuadro 1 ) (100 mg/kg) y el compuesto A1 (100 mg/kg) en combinación, prolonga el tiempo de supervivencia. Estos datos indican que la administración del compuesto A1 y un agente quimioterapéutico en combinación, exhibe el beneficio de supervivencia después de la implantación del tumor.

CUADRO 1 * <0.05 en comparación con el control (método de Kaplan-Meier, pruebas de rango logarítmico múltiple) EJEMPLO DE PRUEBA 1 Prueba de toxicidad a través de una administración oral repetida de 28 días a ratas El compuesto A1 se administró oralmente a ratas SD machos y hembras de seis semanas de edad, a una dosis de 30, 100, 300 ó 1 ,000 mg/kg durante 28 días de una manera repetida. En ningún grupo se observaron muertes y no se encontró anormalidad en el peso corporal, ingesta de alimento, prueba oftalmológica, prueba de orina, peso de los órganos, hallazgo de la autopsia y prueba histopatológica.

EJEMPLO DE PRUEBA 2 Prueba de toxicidad a través de la administración oral repetida de 28 días a perros El compuesto A1 se administró oralmente a perros sabueso machos y hembras de ocho meses de edad a una dosis de 30, 100, 300 ó 1 ,000 mg/kg durante 28 días de una manera repetida. En ningún grupo se observaron muertes, y no se encontró ninguna anormalidad en el peso corporal, ingesta de alimento, prueba oftalmológica, electrocardiograma, presión sanguínea, prueba de orina, peso hematológica, prueba bioquímica sanguínea, peso de los órganos y hallazgos de la autopsia.

EJEMPLO DE FORMULACIÓN 1 El compuesto A1 (20 g), lactosa (315 g), almidón de maíz (125 g), y celulosa cristalina (25 g), se mezclaron de manera uniforme, y una solución acuosa de hídroxipropilcelulosa al 7.5% (200 mL), se agregó a la mezcla resultante. La mezcla se granuló por medio de un granulador por extrusión que emplea un tamiz (diámetro de la malla: 0.5 mm), e inmediatamente después, el producto resultante se formó en esferas por medio de un marumerizador, seguido por secado, para proporcionar granulos.

EJEMPLO DE FORMULACIÓN 2 El compuesto A1 (20 g), lactosa (100 g), almidón de maíz (36 g), celulosa cristalina (30 g), carboximetilcelulosa de calcio (10 g), y estearato de magnesio (4 g), se mezclaron de manera uniforme. La mezcla resultante se formó en tabletas (200 mg cada una) por medio de una máquina tableteadota con un solo punzón que tiene un martinete de 7.5 mm de diámetro.

EJEMPLO DE FORMULACIÓN 3 El compuesto A1 (100 mg), acetato de sodio (2 mg), ácido acético (para ajustar el pH a 5.8) (cantidad apropiada), y agua destilada (resto) (total: 10 mL/vial), se formularon en una inyección mediante un método acostumbrado.

Claims (16)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 1.- Un agente antitumoral que comprende, como ingredientes: (A) un derivado de 1 ,5-benzodiazepina representado por la siguiente fórmula (1 ): (en donde R1 representa un grupo alquilo de C-i-ß; R2 representa un grupo fenilo o un grupo ciciohexilo; y Y representa un enlace sencillo o un grupo alquileno de C?-4), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (B) un agente antitumoral en combinación. 2.- El agente antitumoral de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque en la fórmula (1 ), R1 es un grupo ter-butilo, R2 es un grupo ciclohexílo, y Y es un enlace sencillo. 3.- El agente antítumoral de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el ingrediente (A) es el ácido (R)-(-)-3-[3-(1-ter- but¡lcarbonilmet¡l-2-oxo-5-ciclohexil-1 ,3,4,5-tetrah¡dro-2H-1 ,5-benzodiazep¡n-3-il)ureido]benzoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 4.- El agente antitumoral de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el ingrediente (A) es el ácido (R)-(-)-3-[3-(1-ter-butílcarbonilmetil-2-oxo-5-ciclohexil-1 ,3,4,5-tetrahidro-2H-1 ,5-benzodiazepin-3-il)ureído]benzoico o una sal de calcio del mismo. 5.- El agente antitumoral de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado además porque el agente antitumoral como el ingrediente (B) se selecciona de grupo que consiste en antimetabolitos, antibióticos antitumorales, antentes de alquilación, complejos de metales de coordinación, inhibidores no esteroidales de aromatasa, agentes inmunoterapéuticos, inhibidores mitóticos, inhibidores de topoisomerasa, agentes de terapia de hormonas, inhibidores de tirosina cinasa, anticuerpos monoclonales, inhibidores de metaloproteasa de la matriz, e inhibidores de farnesiltransferasa. 6.- El agente antitumoral de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado además porque el agente antítumoral como el ingrediente (B) se selecciona de grupo que consiste en antimetabolitos, complejos de metales de coordinación, inhibidores de topoisomerasa, inhibidores de tirosina cinasa y anticuerpos monoclonales. 7 '.- El agente antitumoral de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado además porque es un agente peroral. 8.- El uso de (A) un derivado de 1 ,5-benzodiazepina, representado por la siguiente fórmula (1 ): (en donde R1 representa un grupo alquilo de C?-6; R2 representa un grupo fenílo o un grupo ciciohexilo; y Y representa un enlace sencillo o un grupo alquileno de C1- ), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (B) un agente antitumoral en combinación, para la fabricación de un medicamento útil para tratar un tumor. 9.- El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde en la fórmula (1 ), R1 es un grupo ter-butilo, R2 es un grupo ciciohexilo, y Y es un enlace sencillo. 10.- El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde el ingrediente (A) es el ácido (R)-(-)-3-[3-(1-ter-butilcarbonilmetil-2-oxo-5-cíclohexil-1 ,3,4,5-tetrahidro-2H-1 ,5-benzodiazepin-3-il)ureido]benzoíco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 11.- El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde el ingrediente (A) es el ácido (R)-(-)-3-[3-(1-ter-butilcarbonílmetil-2-oxo-5- ciclohexil-1 ,3,4,5-tetrahidro-2H-1 ,5-benzodíazepin-3-il)ureido]benzoico o una sal de calcio del mismo. 12.- El uso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11 , en donde el el ingrediente (B) se selecciona de grupo que consiste en antimetabolitos, antibióticos antitumorales, antentes de alquilacíón, complejos de metales de coordinación, inhibidores no esteroidales de aromatasa, agentes inmunoterapéuticos, inhibidores mitóticos, inhibidores de topoisomerasa, agentes de terapia de hormonas, inhibidores de tirosína cinasa, anticuerpos monoclonales, inhibidores de metaloproteasa de la matriz, e inhibidores de famesiltransferasa. 13.- El uso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11 , en donde el ingrediente (B) se selecciona de grupo que consiste en antímetabolitos, complejos de metales de coordinación, inhibidores de topoisomerasa, inhibidores de tirosína cinasa y anticuerpos monoclonales. 14.- El uso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11 , en donde el medicamento es útil para el tratamiento del cáncer gastrointestinal y el cáncer de pulmón de célula pequeña. 15.- El uso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11 , en donde el medicamento es útil para el tratamiento del cáncer pancreático, cáncer de colon o cáncer gástrico. 16.- El uso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 8 a 15, en donde el medicamento se adapta para ser oralmente administrable.