MX2007003750A - Agentes de contraste enfocadores del receptor activador de plasminogeno de urocinasa (upar). - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a agentes de contraste para a deteccion del Receptor Activador de Urocinasa (uPAR). Mas especificamente, la invencion se refiere a agentes de contraste que comprenden un vector peptidico que se une al uPAR, marcado con una porcion formadora de imagen.

Description

AGENTES PE CONTRASTE ENFOCADORES DEL RECEPTOR ACTIVADOR DE PLASMINOGENO DE UROCINASA (UPAR) CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a agentes de contraste para la detección del Receptor Activador de Plasminógeno de urocinasa (uPAR). De manera más específica, la invención se refiere a agentes de contraste que comprenden un vector peptídico que se une al uPAR, marcado con una porción formadora de imagen. Los agentes de contraste pueden usarse para identificar sitios donde uPAR es expresada para diagnosticar enfermedades asociadas con este receptor.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La interacción del activador de plasminógeno tipo urocinasa (uPA) con superficies celulares es mediada exclusivamente por su receptor anclado en glicolípido (uPAR) al cual uPA se une con alta afinidad. uPAR está ubicado en la capa exterior de las membranas celulares vía enlace de glicosil fosfatidilinositol (ancla de GPI). Es una proteína glicosilada pesadamente rica en cisteína compuesta de tres dominios homólogos. uPA está compuesto por el dominio de proteasa de serina C-terminal catalítica y una parte N-terminal modular que incluye un dominio similar a factor de crecimiento (GFD; aa 1-49) y un dominio de kringle (aa 50-135) . La interacción entre uPA y uPAR es mediada principalmente por los residuos 19-31 de GFD de uPA. Debido a que la degradación proteolítica de la matriz extracelular ha establecido un papel en la invasión de tumor y metástasis, uPAR representa un objetivo potencial para agentes de contraste diagnóstico. uPAR parece ser sobre-regulada in vivo en la mayoría de carcinomas humanos examinados a la fecha, específicamente, en células de tumor por sí mismas, en células endoteliales asociadas con tumor que experimentan angiogénesis y en macrófagos. La sobre-expresión de uPAR en pacientes con cáncer está presente en la enfermedad avanzada y se ha correlacionado con una pobre prognosis en numerosos carcinomas humanos. El hecho de que la expresión de uPAR es sóbreregulada solamente en estados patológicos que involucran remodelado de matriz extracelular y motilidad celular, tal como cáncer, lo hace un marcador atractivo para diagnóstico. WO 01 /25410 describe proteínas y péptidos enfocadores de uPAR marcados de manera diagnóstica o terapéutica. El péptido o proteína comprende al menos 38 residuos de aminoácidos, incluyendo los residuos 13-30 del sitio de unión uPAR de uPA. US 6,277,818 describe compuestos de péptido cíclico enfocadores de uPAR que pueden conjugarse con una etiqueta diagnóstica. Los péptidos se basan en los residuos de aminoácidos 20-30 de uPA. US 6,514,710 también se dirige a péptidos cíclicos que tienen afinidad por uPAR. Los péptidos pueden portar una etiqueta detectable. El péptido comprende 1 1 aminoácidos unidos mediante una unidad enlazadora. Ploug et al. en Biochemistry 2001 , 40, 12457-12168 describe péptidos enfocadores de uPAR, pero no en el contexto de imagenología, incluyendo secuencias de aminoácidos como se describe en el presente documento. El enfoce e imagenología eficientes de uPAR demanda un vector de alta afinidad, selectivo, que sea químicamente fuerte y estable. Estas condiciones severas son cumplidas por los agentes de contraste de la invención.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En vista de las necesidades de la técnica, la presente invención proporciona agentes de contraste para la detección del Receptor Activador de Plasminógeno de urocinasa (uPAR). Más específicamente, la invención se refiere a agentes de contraste que comprende una secuencia de péptido que se une al uPAR con alta afinidad, marcado con una porción formadora de imagen. Ploug describe, por ejemplo, un péptido enfocador de uPAR con la secuencia X-Phe-X-X-Tyr-Leu-Trp-Ser, en donde las abreviaturas estándares para los aminoácidos se usan y en donde X denota un aminoácido seleccionado de un grupo de 25 aminoácidos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Vista desde un primer aspecto, la invención proporciona un agente de contraste enfocador de uPAR de fórmula la, Z1-W1-X0-X?-P ß-X2-X3-X4-Leu-Trp-Xs-X6-W2-Z2 (la) en donde Xo representa 1 -5 aminoácidos, X-i, X2, X3. X4 y X5 representan independientemente un aminoácido, Phe representa fenilalanina, Leu representa leucina, Trp representa triptófano, X5 representa 0 a 5 aminoácidos o es identificado por la fórmula (Ib), ß-Ala-Lys(Z1-W1-X0-X1-Phe-X2-X3-X4-Leu-Trp-X5) (Ib) en donde las denotaciones son definidas como para la fórmula la, y en donde ß-Ala representa ß-alanina, Lys representa lisina, y en donde WT y W2 representan una porción igual o diferente, y son individualmente un separador, un biomodificador o está ausente, y al menos un Z1 o Z2 está presente, representando una porción formadora de imagen capaz de detección ya sea de manera directa o indirecta en un procedimiento de imagenología diagnóstica. Los aminoácidos X0, X-i , X2, X3, X4, 5 y Xe representan todos aminoácidos naturales o no naturales, y de preferencia son naturales, excepto X1 el cual de preferencia es no natural. Todos los aminoácidos están ya sea en forma D o L, con preferencias como se da más adelante.

El componente X0-X?-Phe-X2-X3-X -Leu-Trp-X5-X6 del agente de fórmula la tiene afinidad por uPAR y de aquí en adelante es denotado un vector peptídico. El vector peptídico del agente de contraste tiene homología con el dominio de factor de crecimiento de uPA, pero difiere de los vectores enfocadores de uPAR de la técnica anterior, ya que no comprende una secuencia de aminoácidos idéntica a una secuencia de aminoácidos encontrada en uPA humano. X0 representa 1 a 5, aminoácidos D o L. De preferencia X0 incluye aminoácidos seleccionados del grupo de alanina (Ala), treonina (Thr), glicina (Gly), ácido aspártico (Asp) y ácido glutámico (GIu). Los aminoácidos están de preferencia en la forma L, excepto treonina, la cual de preferencia está en la forma D. Muy preferiblemente X0 representa L-Asp, D-Thr o Gly-Gly-Asp. i de preferencia representa una ß-cicloalquilalanina y es más preferiblemente ß-ciclopentilalanina, ß-ciclohexilalanina (Cha) o ß-cicloheptilalanina, y muy preferiblemente ß-ciclohexilalanina. X2 de preferencia representa serina (Ser) o alanina (Ala), más preferiblemente serina y muy preferiblemente D-serina. X3 de preferencia representa arginina (Arg) o un imitador de arginina, tal como, N-metilarginina (mArg), tirosina (Tyr) o alanina, y más preferiblemente D-arginina. X4 de preferencia representa tirosina, alanina, leucina o ciclohexilalanina, más preferiblemente tirosina y muy preferiblemente L-tirosina. X5 de preferencia representa serina, histidina (His), alanina, tirosina o leucina y más preferiblemente L-serina o D-histidina. X6 de preferencia representa 0 a 5, aminoácidos D o L. De preferencia, X6 incluye aminoácidos seleccionados del grupo de glicina, ácido aspártico, lisina, fenilalanina o ß-alanina (ß-Ala). De manera alternativa, X6 comprende el grupo de fórmula (Ib) ß-Ala-Lys(Z1-W1-Xo-X?-Phe-X2-X3-X4-Leu-Trp-X5) (Ib) en donde todos los símbolos son como se define antes y en donde la ß-Ala de fórmula Ib está enlazada a X5 de fórmula la. La cadena de péptido entre paréntesis está enlazada vía su X5 al grupo e-amino de lisina. En esta alternativa, el agente de contraste comprenderá un dímero sintetizado en una andamio de lisina modificada teniendo su grupo a-amino prederivado con ß-alanina, creando así un dímero pseudo simétrico con respecto al átomo de carbono a de lisina. En esta alternativa, el dímero de preferencia es un homodímero, en donde las secuencias de péptido en los dos monómeros son ¡guales. Muy preferiblemente, X6 está ausente. De manera sorprendente, se ha encontrado que las posiciones X4 y Xs del vector peptídico, en donde Ploug usa tirosina y serina respectivamente, puede reemplazarse con otros aminoácidos como se señala antes. y W2 representan individualmente una porción que actúa como un separador, una porción de biomodificador o ambas, o está ausente, y de preferencia se basa en un bloque de construcción de polietilenglicol (PEG) monodisperso comprendiendo 1 hasta 10 unidades de dicho bloque de construcción. WT O W2 puede representar también 1 hasta 10 residuos de amionóacidos, de preferencia comprendiendo glicina, lisina, ácido aspártico, serina o ácido aminohexanoico. Más preferiblemente, \N o W2 comprende tanto residuos de aminoácidos como una estructura basada en PEG, tal como 1-10 residuos de aminoácidos en combinación con una estructura basada en PEG. De preferencia, ya sea W1 o W2 representa un biomodificador y en una modalidad preferida al menos uno de \N-¡ o W2 representa una unidad comprendida por la estructura basada en PEG monodispersa, ácido 17-amino-5-oxo-6-aza-3,9, 12, 15-tetraoxaheptadecanoico de fórmula (II), fll) en donde m iguala un entero desde 1 hasta 10 y donde el extremo C-terminal es una porción de amida o ácido. Como un biomodificador, W-i o W2 tiene la función de modificar la farmacocinética y velocidades de clarificación de sangre de los compuestos. El biomodificador efectúa menos captación de los compuestos en tejido, es decir, músculo, hígado, etc. , dando así una mejor imagen diagnóstica debido a menos interferencia de soporte. La secreción es principalmente a través de los ríñones, lo cual es una ventaja adicional del biomodificador. Como una porción de biomodificador, W1 o W2 es derivado de preferencia de ácido glutárico y/o succínico y/o una unidad basada en PEG, por ejemplo, incluyendo la porción de fórmula II. W1 o W2 puede actuar además como un separador, con propiedades de biomodificador, enlazar la porción formadora de imagen Z1 o Z2 al vector peptídico. Otros elementos separadores representativos incluyen polisacáridos tipo estructural, polisacáridos tipo almacenamiento, poliaminoácidos y metil y etil esteres de los mismos, y polipéptidos, oligosacáridos y oligonucleótidos, los cuales pueden contener o no sitios de corte de enzima. Como una porción separadora, un papel de V^ o W2 es distanciar una porción formadora de imagen relativamente voluminosa del dominio de unión de receptor del vector peptídico. De manera alternativa, en la forma más simple, W^ o W2 es un enlace funcional o comprende un grupo funcional, el cual permite la fácil conjugación de la porción formadora de imagen al vector peptídico, tales grupos incluyen -RNa-, C02, -N(C=S)-, -N(CO)-, -S, -O-, -0-NH2 y -CHO, en donde el grupo Ra es independientemente H, C1-10 alquilo, C3-10 alquiladlo, C2-10 alcoxialquilo, C1 - 0 hidroxialquilo, C1-10 haloalquilo y a-haloacetilo. Cuando Z1 está ausente y W-i está presente, W, de preferencia tiene un N-terminal con un grupo amino libre o un grupo amino que comprende un grupo inhibidor de metabolismo. Por el término grupo inhibidor de metabolismo, se quiere decir un grupo biocompatible, el cual inhibe o suprime el metabolismo in vivo del péptido o aminoácido en el extremo amino. Tales grupos son bien concidos para aquéllos expertos en la técnica y son seleccionados de manera adecuada del grupo de acetilo, Boc, (ter-butiloxicarbonilo), Fmoc (fluorenilmetoxicarbonilo), benciloxicarbonilo, trifluoroacetilo y aliloxicarbonilo. Los grupos inhibidores de metabolismo preferidos son acetilo y benciloxicarbonilo. Cuando Z2 y W2 están ausentes, la C- terminal del vector peptídico es de preferencia un grupo amida o carboxílico, y de preferencia un grupo amida. Además, cuando Z2 está ausente, y W2 está presente comprendiendo aminoácidos, W2 de preferencia termina con un grupo amida o carboxílico, y más preferiblemente un grupo amida. El agente de contraste de la invención de preferencia comprende un péptido lineal, que significa que no existen puentes entre cualquiera de los aminoácidos, o entre aminoácidos y otras porciones del agente que generan una estructura cíclica. De ahí de preferencia no hay sulfuro, puentes tioéter u otros puentes formadores de estructuras de péptidos cíclicos. El agente de contraste de preferencia comprende un máximo de 20 aminoácidos. En una modalidad preferida, el vector peptídico representado por Xo-X?-Phe-X2-X3-X4-Leu-Trp-X5-X6 de fórmula la comprende la secuencia: Xo-Cha-Phe-Ser-y4rg-Tyr-Leu-Trp-Ser, de manera que el agente de contraste tiene la fórmula Zn-Wi-Xo-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-Xe-Wz^, en donde las denotaciones son como se define antes. Más preferiblemente, el vector peptídico comprende la secuencia: Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser, o 7nr-Cha-Phe-Ser~Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser, en donde la fuente itálica denota D aminoácidos y en donde X6 está ausente. Un ejemplo de un agente de contraste de la invención es: Z1-W1-Gly-Gly-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2 en donde Z y W-¡ son como se define antes, y en donde X2, W2 y Z2 están ausentes, y en donde la C-terminal es un grupo amida. Al menos uno de Z y Z2 está presente y representa una porción formadora de imagen. Z es usado de aquí en adelante para denotar ya sea Zi o Z2. Z puede ser cualquier porción formadora de imagen. La naturaleza de Z dependerá de la modalidad de imagenología utilizada en el diagnóstico. Un amplio rango de porciones adecuadas para la detección en imagenología in vivo es conocido a partir de, por ejemplo, WO 98/47541 , cuyo contenido es incorporado en la presente por referencia. Z es una porción capaz de detección ya sea de manera directa o indirecta en un procedimiento formador de imagen diagnóstico in vivo, tal como, imagenología de radio o SPECT, PET, MR, rayos X, ultrasonido u óptica. Z comprende, por ejemplo, una porción la cual emite o puede provocarse que emita radiación detectable (por ejemplo, mediante decaimiento radioactivo, excitación de fluorescencia, excitación de resonancia de giro, etc.), una porción que afecta los campos electromagnéticos locales (por ejemplo, especie paramagnética, superparamagnética, ferrimagnética o ferromagnética), una porción que absorbe, emite o disemina energía de radiación (por ejemplo, cromóforos, partículas (incluyendo vesículas conteniendo líquido o gas), un elemento pesado y compuestos de los mismos), y un porción que genera una substancia detectable (por ejemplo, generadores de microburbujas de gas).

La porción formadora de imagen Z puede ser representada por una entidad M y una porción Y,, en donde M representa iones metálicos, metales paramagnéticos, radio-nucleidos de metal, metales pesados y óxidos de metales pesados. La porción Y-¡ debe ser capaz de portar una o varias porciones M. Por portar se quiere decir cualquier forma de asociación entre la porción Y^ y M, tal como, un enlace químico, por ejemplo, enlace covalente o enlaces electrovalentes o iónicos o mediante absorción o cualquier otro tipo de asociación, y de preferencia M es quelado por una porción quelante Yi . Modalidades de imagenología y porciones formadoras de imagen Z son descritas con más detalle a continuación: En una primera modalidad de este aspecto, Z comprende una o más porciones M útiles en la modalidad de imagenología de radio y SPECT, tal como un ion de metal radioactivo o un halógeno radioactivo gamma-emisor, opcionalmente portado por una porción Y^ De preferencia, M es un gamma-emisor con baja o ninguna alfa- y beta-emisión y con una vida media de más de una hora. Los grupos M preferidos son los radionúclidos 67Ga, 1 1 ln, 123l , 125l, 13 l, 81 mKr, "Mo, 99mTc, 20 TI y 33Xe. El más preferido es 99mTc. M puede ser representado adicionalmente por los siguientes isótopos o par de isótopos: 47Sc2-, ; 141Ce58; 188Re75; 177Lu71 ; 199Au79; 47Sc21 ; 131 l53; 67Cu29; 131 l53 e 123l53; 188Re75 y 99mTc43; 87Y39 y 87Y39; 47Sc21 y 44Sc21; 90Y39 e 123l53; 146Sm62 y 153Sm62; y 90Y39 e 1 1 1 ln49. Cuando M denota un radionúclido metálico para radio imagenología o de SPECT, entonces Y^ de preferencia denota un agente quelante adecuado para formar un quelato estable con M. Tales agentes quelantes son bien concidos del estado de la técnica y ejemplos normales de tales agentes quelantes son descritos en la Tabla I de WO 01 /77145. Son particularmente preferidos los agentes quelantes Y., de fórmula (III): (III) en donde: cada R\ R2, R3 y R4 es independientemente H o C-,.-^ alquilo, C3-10 alquilarilo, C2-10 alcoxialquilo, C?-10 hidroxialquilo, C1-10 alquilamina, fluoroalquilo o 2 o más grupos R, junto con los átomos a los cuales están unidos, forman un anillo carbocíclico, heterocíclico, saturado o insaturado. Son más particularmente preferidos los agentes quelantes Y-¡ de fórmula (II I), donde R\ R2 y R3 son hidrógeno o grupos metilo y R4 es un grupo alquilo o alquilamina. Más preferiblemente, Y-¡ es el quelato de fórmula (IV), denotado aquí cPN216, y muy preferiblemente la porción formadora de imagen M es 99mTc. La estrella denota un posible sitio de enlace.

Otros agentes quelantes preferidos son de fórmula (V) (V) en donde R1 -R6 independientemente representan H, alquilo, arilo o una combinación de los mismos, donde los grupos R1 -R6 contienen una o más porciones funcionales, de manera que el quelato puede ser conjugado a \N o W2 de fórmula (la). Las porciones funcionales adecuadas son, por ejemplo, alquilamina, alquilsulfuro, alcoxi alquil carboxilato, arilamina, aril sulfuro o alfa-haloacetilo. Si Z representa un halógeno radioactivo gamma-emisor, tal como, 123l, 125l, 131 l y 77Br, en donde 125l es preferido, puede enlazarse covalentemente a Wi o W2 mediante una reacción de substitución o adición bien conocida del estado de la técnica, o de manera alternativa a Xi o X6 si W-i o W2 está ausente, o directamente a X5 si X6 está ausente. En una segunda modalidad, el compuesto de fórmula (la) comprende una porción Z útil en la modalidad formadora de imágenes de PET. Z comprende entonces un radioemisor con propiedades emisoras de positrones, de preferencia un no metal radioactivo emisor de positrones. Los grupos Z preferidos comprenden cualquiera de los emisores de positrones 1 1C, 18F, 13N, 150, 77F, 75Br, 76Br e I124. 18F es preferido específicamente. Los emisores de positrones metálicos adecuados son 6 Cu, 48V, 52Fe, 55Co, 94mTc, 68Ga o 82Rb, siendo preferido 68Ga, el cual puede quelarse con un agente quelante Y-|. Los radionúclidos tales como aquéllos que comprende 18F pueden enlazarse covalentemente a la porción \N? o W2 cuando está presente, o de manera alternativa a X0, X5 o X6 mediante reacción de adición o substitución bien conocida del estado de la técnica. Cuando Z es un grupo aldehido, tiol o aminooxi 18F-marcado, entonces W? O W2 de preferencia tiene un grupo funcional que comprende una porción alfa-halo acetilo, un grupo aldehido o aminooxi. La química de acoplamiento de tiol y la química de acoplamiento de aldehido y aminooxi, 18F-sintones y péptidos etiquetados preparados usando esta química, se describe en WO 03/080544 y WO 04/080492, cuyo contenido es incorporado en la presente por referencia. De manera alternativa, 18F puede introducirse mediante otras porciones que comprende 18F, tal como, por ejemplo, 18F-fluorobenzaIdehído. El sitio de enlace, , , W2, X0, X5 o X6 comprendería entonces, de preferencia, un grupo aminooxi. Cuando M denota un emisor de positrones metálico para imagenología de PET, entonces Y1 denota un agente quelante adecuado para formar un quelato estable con M. Tales agentes quelantes son bien conocidos a partir del estado de la técnica y ejemplos normales de tales agentes quelantes se describen en la Tabla I de WO 01/77145 y en la modalidad previa dirigida a radioimagenología e imagenología de SPECT. En una modalidad preferida, Y^ es el agente quelante DOTA y M es 68Ga, el cual puede introducirse fácilmente en el quelato usando química de microondas. En una tercera modalidad, Z comprende una porción Yi que porta una o más porciones M útiles en la modalidad de imagenología de MR. M aquí denota un metal paramagnético, tales iones metálicos adecuados incluyen: Gd(l l l), Mn(ll), Cu(l l), CR(I I I), Fe(l l l), Co(ll), Er(l l), Ni(l l), Eu(l ll) o Dy(l l l). Gd(l l l) , Dy(l l l), Fe(ll l) y Mn(ll) son particularmente preferidos. Y-i denota un agente quelante, en particular un agente quelante, tal como, poliaminocarboxilatos acíclicos o cíclicos (por ejemplo, DTPA, DTPA-BMA, DOTA y D03A) como se describe, por ejemplo, en US 4,647,447 y WO 86/02841. M también puede denotar óxidos metálicos, tales como, especies superparamagnéticas, ferrimagnéticas o ferromagnéticas, las cuales son adsorbidas por o unidas a Y1 ( por ejemplo, de manera que Y-¡ funcionan como un recubrimiento al óxido de metal. Los óxidos de metal para usarse como agentes de contraste de MR son descritos, por ejemplo, en la patente estadounidense 6,230,777, la cual es incorporada en la presente por referencia. En una cuarta modalidad, Z representa una porción formadora de imagen útil en la modalidad de imagenología de rayos X. Z comprende aquí un metal pesado, tal como, tungsteno, oro y bismuto de preferencia en la forma de óxidos. Z también puede representarse mediante derivados de arilo yodados, particularmente bien conocidos como agentes de contraste de rayos X, por ejemplo, lopamironMR y OmnipaqueMR. Estos agentes pueden ser enlazados vía sus funciones de ácido o amina al vector peptídico de fórmula (la) , opcionalmente vía W, o W2. En una modalidad adicional, el compuesto de fórmula (la) comprende Z en la forma de microvesículas llenadas con gas. Tales agentes de imagenología de ultrasonida pueden ser utilizados en la imagenología de receptores, por ejemplo, cuando son funcionalizados para unirse a un péptido, tal como se describe en el estado de la técnica, por ejemplo, en WO98/1 8500. En una sexta modalidad, y preferida, de la presente invención, la porción Z de fórmula (la) puede ser cualquier porción capaz de detección ya sea directa o indirectamente, en un procedimiento de imagenología óptica. La porción detectable puede ser un dispersador de luz (por ejemplo, una partícula coloreada o no coloreada), un absorbedor de luz o un emisor de luz. Más preferiblemente, Z es representado por un tinte, tal como, un cromóforo o un compuesto fluorescente. La porción Z puede ser cualquier tinte que interactúe con luz en el espectro electromagnético con longitudes de onda desde la luz ultravioleta hasta cercano al infrarrojo. En una versión preferida, Z tiene propiedades fluorescentes.

Las porciones de tinte orgánico preferidas incluyen grupos que tienen un sistema de electrones deslocalizado extenso, por ejemplo, cianinas, merocianinas, indocianinas, ftalocianinas, naftalocianinas, trifenilmetinas, porfirinas, tintes de pirilio, tintes de tiapirilio, tintes de escuarilio, tintes de croconio, tintes de azulenio, indoanilinas, tintes de benzofenoxazinio, tintes de benzotiafenotiazinio, antraquinonas, naftoquinonas, indatrenos, ftaloilacridonas, trisfenoquinonas, tintes azo, tintes de transferencia de carga intramolecular e intermolecular, y complejos de tintes, troponas, tetrazinas, complejos de bis(ditioleno), complejos de bis(benceno-ditioleato), tintes de yodoanilina y complejos de bis(S,0-ditioleno). De los tintes fluorescentes, el grupo de tintes de cianina es preferido. Son aún más preferidos los grupos de carbacianinas, oxacianinas, tiacianinas y azacianinas. Los grupos de tintes Cy5 y Cy7 son los tintes fluorescentes más preferidos, y estos pueden enlazarse al vector peptídico por un éster de N-hidroxisuccinimida (NHS-éster). Las proteínas fluorescentes, tales como, proteína fluorescente verde (GFP) y modificaciones de GFP que tienen diferentes propiedades de absorción/emisión también son útiles. Los complejos de ciertos metales de tierras raras (por ejemplo, europio, samario, terbio o disprosio) se usan en ciertos contextos, como son nanocristales fluorescentes (puntos de quantum). Los tintes preferidos son seleccionados del grupo de carbacianinas, y aún más preferidos son los tintes de carbacianina del tipo indol. Los tintes preferidos de este tipo son ilustrados por la fórmula VI: (VI) en donde los grupos Q^ son iguales o diferentes y son grupos alquilo inferior substituidos o no substituidos, por ejemplo, grupos alquilo de C., a C6, los cuales son opcionalmente substituidos. Los grupos alquilo son substituidos, por ejemplo, con grupos carboxi, ácido sulfónico, amina, amonio o éster, tales como grupos de éster heterocíclico (por ejemplo, NHS-éster). Los grupos Q2 son iguales o diferentes y son grupos de alquilo inferior, tales como alquilos de C-, a C6, de preferencia grupos metilo, opcionalmente substituidos con, por ejemplo, grupos carboxilo o ácido sulfónico. Los grupos aromáticos opcionales son indicados por líneas punteadas, para incluir ambas estructuras comprendiendo benzo anillos condensados y nafto anillos condensados. Cualesquiera de los anillos son substituidos o no substituidos. Los anillos pueden ser substituidos con un grupo V seleccionado de grupos de ácido sulfónico, grupos carboxílicos, grupos hidroxilo, grupos alquil(sulfoalquil)amino, grupos bis(sulfoalquil)amino, grupos sulfoalcoxi, grupo sulfoalquilsulfonilo, grupos alquilo o alquilo substituido o sulfoalquilamino. p es un entero positivo 1 , 2, 3 o 4. De preferencia, el tinte cianina es un tinte de pentametina o heptametina con puentes de carbono de 5 y 7 átomos de carbono, respectivamente. Q, , Q2 y V son sitios de enlace potencial para el enlace del tinte al vector peptídico, opcionalmente vía \N-¡ y/o W2, siendo 0^ y grupo V los sitios de enlace preferidos. En un aspecto preferido, un grupo 0^ es enlazado al vector peptídico mientras que el otro grupo Q, es un grupo alquilo inferior opcionalmente substituido. Visto desde un segundo aspecto, la invención proporciona compuestos enfocadores de uPAR de fórmula (Vil) W1-X0-X?-Phe-X2-X3-X4-Leu-Trp-X5-X6-W2 (Vil) en donde las denotaciones son definidas como para la fórmula la, y en donde al menos uno de W-i y W2 está presente y representa un biomodificador como se describe. Los compuestos de fórmula Vil pueden enlazarse a una porción formadora de imagen, como se describe en el primer aspecto, o puede tener otros usos, tal como en terapia. Los compuestos de la presente invención pueden ser sintetizados usando los métodos conocidos de síntesis química, pero es particularmente útil la metodología de fase sólida de Merrifield, que emplea un sintetizador de péptido automatizado (J. Am. Chem. Soc, 85:2149 (1964)). Normalmente, las secuencias deseadas son ensambladas mediante síntesis de péptido de fase sólida. Los procedimientos estándares para la estrategia de síntesis empleada para los ejemplos de esta invención se describen en E. Atherton & R.C. Sheppard, "Solid phase peptide synthesis: a practical approach" (Síntesis de péptido de fase sólida: una aproximación práctica), 1989, IRL Press, Oxford.

Por ejemplo, se usan resinas con una variedad de grupos enlazadores lábiles al ácido, que producirán péptidos con un ácido, amina o amida C-terminal. El grupo protector de amino es removido entonces y el segundo aminoácido en la secuencia es acoplado usando un reactivo de condensación adecuado. Se emplean aminoácidos con grupos protectores amino semi-permanentes y grupos protectores permanentes para las cadenas laterales funcionales. Los ciclos de acoplamiento y amino-desprotección son repetidos entonces en pasos alternos hasta que la secuencia de interés es ensamblada. De manera alternativa, los péptidos pueden ser sintetizados a través de los métodos de síntesis de péptido de solución conocidos en la técnica, ya sea en una manera en forma de pasos a partir del extremo carboxilo y/o a través de la aplicación de condensación de segmento o métodos de ligado, empleando estrategias de protección completas o mínimas. También pueden aplicarse aproximaciones de condensación de segmento de fase solida-solución combinadas. En general, los grupos de cadena lateral reactiva presentes (por ejemplo, grupos amino, hidroxilo, guanidino y carboxilo) serán protegidos durante la síntesis global como se indica antes. Una amplia elección de grupos protectores para aminoácidos es conocida (ver, por ejemplo, Greene, T.W. & Wuts, P.G.M. (1991 ) Protective groups in organic synthesis (Grupos protectores en síntesis orgánica), John Wiley & Sons, Nueva York). Los grupos amino protectores que pueden ser empleados incluyen 9-fIuorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) y t- butiloxicarbonilo (Boc). Los grupos protectores de cadena lateral, los cuales pueden ser empleados incluyen t-butilo (tBu), tritilo (Trt), Boc y 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonilo (Pmc). Se apreciará que un amplio rango de otros de tales grupos son conocidos en la técnica. Finalmente, los grupos protectores de cadena lateral permanente son removidos y el péptido es cortado de la resina, usualmente de manera simultánea a través del tratamiento con un reactivo ácido adecuado, por ejemplo, ácido trifluoroacético (TFA). \N? y/o W2 pueden conjugarse al vector peptídico usando métodos conocidos de síntesis química. Es particularmente útil la conjuación directa de WT y/o W2 al vector peptídico mediante formación de enlace de amida, en cuanto la preparación del vector peptídico. De manera alternativa, una reacción de substitución de nucleófilo donde un grupo que sale en el extremo N de péptido es reemplazado por un grupo nucleofílico en W y/o W2 puede usarse. Tal grupo que sale puede ser un bromuro unido en la posición alfa a un grupo carbonilo y tal nucleófilo puede ser nitrógeno. Z puede conjugarse directamente al péptido usando los mismos métodos en cuanto a la conjugación de \Nt y/o W2 al vector peptídico. En el caso donde Z se une al péptido vía W-i o W2, cualquier método de síntesis química puede usarse en la conjugación de Z y W, o W2. Es particularmente útil el acoplamiento automático de Z, produciendo, por ejemplo, en enlace de amida entre el péptido y la porción formadora de imagen. Los métodos para enlazar una porción reportadora a un péptido es bien concida en la técnica y dependerá del reportador elegido y en el cual se usan los separadores. El vector peptídico y el agente de contraste puede purificarse usando cromatografía líquida de alto desempeño (HPLC) y caracterizado por la espectrometría de masa y HPLC analítica. Los requerimientos de los compuestos de la invención funcionan como agentes de contraste eficientes del sistema uPA/uPAR es que por un lado el vector peptídico debería tener una alta afinidad por el receptor, y por otra parte, que el vector debería "permanecer" en el receptor tanto tiempo como sea necesario. De esta manera, el sistema agente de contraste/uPAR debería exhibir de preferencia cinética de disociación lenta (la así llamada "velocidad de salida"), la cual puede expresarse convenientemente como la constante de velocidad de disociación Kd¡ss. Se ha encontrado que los agentes de contraste de la invención tienen cinética de unión de receptor enormemente mejorada. Con base en la misma, los agentes de contraste de la invención, los cuales son especialmente preferidos, tienen una constante de velocidad de disociación (Kd¡ss), en relación al dominio de factor de crecimiento de uPA (GFD) de preferiblemente < 50, más preferiblemente < 20, aún más preferiblemente < 10, y muy preferiblemente < 1 . Los agentes de contraste de la invención son capaces de preferencia de inhibir la unión de uPA a uPAR de superficie celular. El agente de contraste de la invención es de preferencia equipotente con uPA inactivado con fluorofosfatos de diisoproilo. El parámetro IC50 da la concentración donde 50% de uPA son competidos. Los agentes de contraste preferidos de la invención tienen una IC50 < 50 nM, de preferencia < 25 nM, más preferiblemente < 10 nM y aún más preferiblemente < 3 nM. Los agentes de contraste de acuerdo con la invención son usados de preferencia para identificar sitios donde uPAR se expresa para diagnosticar enfermedades asociadas con sobre-regulación del receptor. El receptor es de preferencia más de 50% más abundante en el tejido enferme que en tejido circundante. Más preferiblemente, el receptor es más de dos veces más abundante en tejido enfermo que en tejido circundante. Aún más preferiblemente, el receptor es más de 5 veces más abundante en tejido enfermo que en tejido circundante. Visto desde un aspecto adicional, la invención proporciona un método para detectar la presencia de uPAR en la superficie de una célula, en un tejido, en un órgano o en una muestra biológica que se sospecha sobre-expresa uPAR debido a un estado patológico. El método comprende los pasos de a) contactar la célula, tejido, órgano o muestra biológica con el agente de contraste de la invención y b) detectar la presencia de la porción formadora de imagen asociada con la célula, tejido, órgano o muestra. En este método, tanto el contacto como la detección pueden conducirse in vitro, de manera alternativa el contacto es in vivo y la detección in vitro, de preferencia el contacto y la detección es in vivo. Un método preferido incluye generar una imagen de un cuerpo humano o animal mediante imagenología diagnóstica que involucra administrar un agente de contraste como se describe a dicho cuerpo, por ejemplo, en el sistema vascular, y generar una imagen de al menos una parte de dicho cuerpo, al cual se ha distribuido dicho agente de contraste. Visto desde todavía un aspecto adicional, la invención proporciona un método para generar imágenes intensificadas de un cuerpo humano o animal mediante imagenología, previamente administrado con una composición de agente de contraste comprendiendo un agente de contraste como se define, dicho método comprende generar una imagen de al menos parte de dicho cuerpo. Los nuevos agentes de contraste de la invención pueden usarse como agentes de contraste en cualquier modalidad de ¡magenología, dependiendo de la porción formadora de imagen elegida. De ahí, el uso de los agentes de contraste en imagenología diagnóstica es un aspecto de la invención. Un aspecto preferido es agentes de contraste como se describe para usarse en imagenología de diangóstico de diferentes formas de cáncer y metástasis, por ejemplo, cáncer de pecho, piel, colorrectal, pancreático, próstata, pulmón u ovario. De manera alternativa, el agente de contraste puede usarse para la detección de enfermedades donde los macrófagos activados están presentes, tal como placa vulnerable en aterosclerosis. La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva, por ejemplo, una cantidad efectiva para intensificar contraste de imagen en imagenología in vivo de un agente de contraste de la invención, o una sal del mismo, junto con uno o más auxiliares, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Visto desde un aspecto adicional, la invención proporciona el uso de un agente de contraste de la invención para la fabricación de un agente intensificador de contraste para usarse en un método de diangóstico, que involucra la administración de dicho agente intensificador de contraste a un cuerpo humano o animal y generación de una imagen de al menos parte de dicho cuerpo. La presente invención será ilustrada ahora adicionalmente a manera de ejemplos no limitantes, en los cuales se usan las siguientes abreviaturas: BAEEG: bis-(aminoetil)etilengIicol Boc: t-butiloxicarbonilo Cy: cianina DEG: dietilenglicol DMF: N,N-dimetilformamida Fmoc: 9-fluorenilmetoxicarbonilo HATU: hexafluorofosfato de 2-(7-aza-1 H-benzotriazol-1 -il)-1 , 1 ,3,3-tetrametiluronio HPLC: cromatografía líquida de alto desempeño Krytofix 222: 4, 7, 13, 16, 21 , 24-hexaoxa-1 , 10-diazabiciclo- (8,8,8)hexacosano LC: cromatografía líquida MS: espectroscopia de masa NHS: N-hidroxisuccinimida NMM: N-metilmorfolina PEG: polietilenglicol PBS: amortiguador de fosfato Pmc: 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonilo PyAOP: hexafluorofosfato de (7-azabenzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio Resina MBHA de amida de Rink: 4-metilbenzhidrilamina enlazada a una matriz de poliestireno RP-HPLC: HPLC de fase inversa RT: temperatura ambiente Sep-Pak: columna de separación con resina C1 8 TFA: ácido trifluoroacético TIS: triisoproilsilano EJEMPLO 1 : Cy5(bis-S03)-777 --Cha-Phe-Ser-y4rg-Tyr-Leu-Trp-Ser-OH (2) Síntesis de H-777r-Cha-Phe-Ser-Arq-Tyr-Leu-Trp-Ser-OH (1 ) El péptido correspondiente a la secuencia anterior fue sintetizado mediante química de péptido de fase sólida estándar.

Conjugación de Cv5(bis SQ3) Mono NHS éster a péptido (1 ) Se disolvió Cyt(bis S03) mono NHS éster (1 .18 mg, 0.0017 mmol) en DMF y péptido (1 ) (2 mg, 0.0015 mmol) fue adicionado como un sólido a la solución, seguido por la adición de NMM (0.55 µl, 0.005 mmol). El recipiente de reacción fue envuelto en papel aluminio y se colocó en un aparato agitador durante 16 horas. El producto deseado fue confirmado mediante MS de electroatomización: [M+H]+ de producto esperado a 1850.85 m/z, encontrado a 1 850.9 m/z.

EJEMPLO 2: Cy5(bis-S03)-Gly-Giy-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2 (3) Síntesis de Cvdfbis-SO^-GIv-Gly-Asp-Cha-Phe-Ser-Arq-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH, (3) Los aminoácidos en la secuencia anterior fueron ensamlados mediante química de péptido de fase sólida estándar. Cy5(bis S03) mono NHS éster (0.5 eq) se disolvió entonces en DMF y se adicionó a H-Gly-Gly-Asp(OtBu)-Cha-Phe-Ser(tBu)-Arg(Pmc)-Tyr(tBu)-Leu-Trp(Boc)-Ser(tBu)-resina MBHA amida de Rink ( 1 eq) seguido por adición de NMM (3 eq). El recipiente de reacción fue envuelto en papel aluminio y se colocó en un aparato agitador durante 1 6 horas. El péptido conjugado con tinte Cy5 fue desprotegido y cortado de la resina mediante tratamiento con TFA conteniendo 2.5% de agua y 2.5% de TIS durante 1 hora. El producto deseado fue confirmado mediante MS de electroatomización: [M+H]+ de producto esperado 1977.88 m/z, encontrado a 1977.8 m/z.

EJEMPLO 3: Cyt(bis-S03)-Asp-Cha-Pher-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-ßAla-Lys(Cy5(bis-S03)-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser)-NH2 (5) Síntesis de H-Asp-Cha-Phe-Ser-Arq-Tyr-Leu-Trp-Ser-ßAla-Lvs(H-Asp-Cha-Phe-Ser-Arq-Tyr-Leu-Trp-Ser)-NH? (4) El péptido correspondiente a la secuencia anterior fue ensamblado mediante química de péptido de fase sólida estándar.

Conjugación de Cv5(bis SQ3) mono NHS éster a péptido (4) El Cy5(bis S03) mono NHS éster (2.2 eq) es disuelto en DMF y péptido (4)(1 eq) es adicionado como un sólido a la solución seguido por la adición de NMM (3 eq). El recipiente de reacción es envuelto en aluminio y colocado en un aparato agitador durante 24 horas para dar el producto bis-conjugado deseado. El producto es analizado por RP-HPLC y MS de electroatomización.

EJEMPLO 4 N-(4-18F-fluorobenciliden)aminooxiacetil-PEG(4)-digIicoloil-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-NH2 (8) Síntesis de N-Boc-aminooxiacetil-PEG(4)-diqlicoloil-Asp-Cha-Phe-Ser- ra-tyr-Leu-Trp-Ser-NH, (7) Puede prepararse ácido Boc-aminooxiacetil-PEG(4)-diglicólico por un técnico experto usando un éster activo de ácido Boc-aminooxiacético y haciéndolo reaccionar con el ácido amino-PEG(4)-diglicólico correspondiente. El producto obtenido ácido Boc-aminooxiacetil-PEG(4)-diglicólico (1 .5 eq) y PyAOP (1 .2 eq) se disuelve en DMF. Se agrega NMM (2 eq, 200 µl) y la mezcla se agita adurante 5 min. Una solución de péptido (6) (1 eq) y NMM (4 eq) en DMF se adiciona y la mezcla de reacción es agitada durante 30 min. DMF se evapora a vacío y el producto es purificado usando RP-HPLC preparatoria. Las fracciones conteniendo el producto deseado se ajusta a pH 5 usando 0.3% de amoníaco (NH3)/agua antes de la liofilización, con el fin de prevenir la remoción del grupo protector Boc. El producto es analizado mediante PR-HPLC y MS de electroatomización.

Etiquetado con 1 8F de péptido (7) 18F-fluoruro es secado azeotrópicamente en la presencia de Kryptofix 222 (5 mg en 0.5 mi de ACN) y carbonato de potasio (50 µl de solución 0.1 M) al calentar a 1 10°C bajo un flujo de nitrógeno durante 20 min. Durante este tiempo, se agregan 3 x 0.5 mi de ACN y se remueve. La mezcla se enfría a <40°C y se agrega triflato de benzaldehído de trimetilamonio, sintetizado de acuerdo con el procedimiento descrito por Haka et al en J. Labelled Cpds. & Radiopharms 1989 27(7) 823, (1 mg en 0.4 mi de dimetiisulfóxido). El recipiente de reacción es sellado y calentado a 90°C durante 15 min para efectuar el etiquetado. La solución de 4-18F-fluorobenzaIdehído crudo es enfriada entonces a temperatura ambiente. Mientras tanto, el péptido (7) (6 mg) es tratado con 5% de agua en TFA (200 µl) durante 5 min a temperatura ambiente para remover el grupo Boc-protector. Los solventes son removidos a vacío. El péptido Boc-desprotegido es redisuelto en solución de acetato de amonio 0.1 M (pH 4, 0.4 mi) y se combina con la solución de 4-1 8F-fluorobenzaldehído crudo en el recipiente de reacción. El recipiente es sellado y calentado a 70°C durante 15 min para efectuar la conjugación. Después de enfriar a temperatura ambiente, el conjugado crudo es purificado mediante HPLC prep. La fracción conteniendo el conjugado deseado es diluida con 10 mi de agua y cargada sobre una C18 Sep-Pak (pre-preparada al lavar secuencialmente con 10 mi de etanol y 20 mi de agua). La Sep-Pak es enjuagada con 10 I de agua, entonces levigada con 2 mi de etanol. El etanol es removido a vacío y el producto (8) es formulado en PBS.

EJEMPLO 5 Acetil-PEG(4)-diglicoloil-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-Gly- BAEEG-GIut-cPN216 (10) Síntesis de Acetil-PEG(49-diglicoloil-Asp-Cha-Phe-Ser-ArQ/-Tyr-Leu-Trp-Ser-GIv-BAEEG-NH, (9) La resina de peptidilo correspondiente a la secuencia anterior es sintetizada mediante química de péptido de fase sólida estándar. Acido acetiI-PEG(4)-digIicóIico (5 eq>) y PyAOP (4.5 eq) se disuelven en DMF. Se agrega NMM (10 eq, 200 µl) y la mezcla se agita durante 5 min. La mezcla se adiciona entonces a la resina de péptido pre-hinchada en DMF y la reacción se continúa durante la noche. El péptido es desprotegido entonces y cortado de la resina usando TFA conteniendo 2.5% de agua y 2.5% de TIS durante 1 hora. El producto es analizado mediante RP-HPLC y MS de electroatomización.

Conjugación de cPN216 a péptido (9) El péptido (9) (1 eq) es disuelto en DMF y cPN216-glutaril-tetrafluorotiofenil éster (2 eq) se adiciona seguido por NMM (3 eq). Después de agitar durante la noche, la mezcla de reacción es trabajada al remover el solvente bajo presión reducida y el producto (10) es purificado mediante RP-HPLC preparatoria. El producto es analizado por RP-HPLC y MS de electroatomización.

Etiquetado con 99mTc de péptido (1 0) El péptido (10) (0.1 mg) es reconstituido en solución salina o metanol (0.1 mi) y se transfiere a un kit Toolbox secado por congelación de exipientes. El kit Toolbox, diseñado para proporcionar condiciones de radioetiquetado genéricas para quelatos basados en amina, contenía dehidrato de cloruro estañoso (16 µg), ácido metilendifosfónico (25 µg), carbonato ácido de sodio (4500 µg), carbonato de sodio (600 µg), para-aminobenzoato de sodio (200 µg), Kit pH = 9.2. Entonces se adiciona una inyección de pertecnetato de sodio (99mTc) (2.1 GBq) en solución salina (3 mi), el kit es invertido unas cuantas veces para disolver los contenidos y entonces se deja incubar a temperatura ambiente durante 15-20 min. Una muestra es analizada inmediatamente mediante HPLC e ITLC y el péptido 99mTc-etiquetado (1 1 ) será administrado al ensayo en cuestión entre 1 -3 horas después de la reconstitución del kit.

EJEMPLO 6 Complejo de gadolinio(l l l) de acetil-Asp-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp- Ser-GIy-BAEG-Glut-DOTA (15) Síntesis de acetil-Asp-Cha-Phe-Ser-y4rq-Tyr-Leu-Trp-Ser-Glv-DEG-NH? 1121 El péptido correspondiente a la secuencia anterior es sintetizado mediante química de péptido de fase sólida estándar.

Síntesis de Tri-tBu-DOTA (13) Tri-tBu-D03A (tri-ter-butil éster de ácido 1 ,4,7, 10-tetraazaciclododecan-N,N',N"-triacético, 10 mmol) y ácido bromoacético (1 0 mmol), se disolvió en MeOH (50 mi). K2C03 (30 mmol) disuelto en agua (50 mi) se agregó (pH 1 1 en la mezcla de MeOH/agua) y la reacción se agitó durante 24 horas y entonces se calentó a 40 grados durante otras 24 horas. El producto crudo se purificó mediante RP-HPLC (Phenomenex Luna 5 mieras, C18, 250 x 21 .2 mm, gradiente 5-50% B durante 40 min a 10 ml/min). El producto deseado fue confirmado mediante MS de electroatomización: [M+Na]+ de producto esperado a 595.4 m/z, encontrado a [M+Na]+ 595.3 m/z y mediante 1H-NMR a 80 grados.

Síntesis de péptido DOTA-conjugado (14) Tri-tBu-DOTA (1 3) (tri-ter-butil éster de ácido 1 ,4,7, 1 0-tetraazaciclododecan-N,N',N", N'"-tetraacético, 1 eq) es activado con HATU (1 eq) en DMF en la presencia de y NMM (3 eq) durante 5 min. La mezcla es adicionada a péptido (12) y la reacción es continuada durante la noche. El solvente es removido a vacío y el producto es tBu-desprotegido en TFA conteniendo 5% de agua. El producto es purificado mediante RP-HPLC y analizado mediante RP-HPLC y MS de electroatomización.

Formación de complejo con Gd(l ll) El péptido DOTA-conjugado (14) (1 eq) se hace reaccionar con GdCI3 (1 eq) en una solución acuosa a pH 6.5 a RT. Gd(ll l) no en complejo es removido mediante centrifugación de la solución a pH básico. El producto (15) es aislado mediante liofilización.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1 . Un agente de contraste enfocador de uPAR de fórmula la, Zi-Wi-Xo-Xi-Phe-Xz-Xa-X^ eu-Trp-Xs-Xß-Wa-Za (la) en donde X0 representa 1 -5 aminoácidos, X? , X2, X3, X4 y X5 representan independientemente un aminoácido, Phe representa fenilalanina, Leu representa leucina, Trp representa triptófano, X5 representa 0 a 5 aminoácidos o es identificado por la fórmula (Ib), ß-Ala-LysíZi-Wí-Xo-Xi-Phe-Xa-Xs-X^Leu-Trp-Xs) (Ib) en donde las denotaciones son definidas como para la fórmula la, y en donde ß-Ala representa ß-alanina, Lys representa lisina, y en donde ß-Ala de fórmula Ib está enlazada a X5 de fórmula la, y en donde W1 y W2 representan una porción igual o diferente, y son individualmente un separador, un biomodificador o está ausente, y al menos un Z1 o Z2 está presente, representando una porción formadora de imagen capaz de detección ya sea de manera directa o indirecta en un procedimiento de imagenología diagnóstica. 2. Un agente de contraste como se reclama en la reivindicaión 1 , en donde X0 representa 1 a 5 aminoácidos seleccionados del grupo de alanina, treonina, glicina, ácido aspártico y ácido glutámico. 3. Un agente de contraste como se reclama en la reivindicación 1 o 2, en donde X^ representa una ß-cicloalquilalanina. 4. Un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde X2 representa serina o alanina. 5. Un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde X3 representa arginina, un imitador de arginina, tirosina o alanina. 6. Un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde X representa tirosina, alanina, leucina o ciciohexilalanina. 7. Un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde X5 representa serina, histidina, alanina, tirosina o leucina. 8. Un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde X6 comprende aminoácidos seleccionados del grupo de glicina, ácido aspártico, lisina, fenilalanina o ß-alanina o está ausente. 9. Un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivndicaciones 1 a 8, que comprende la secuencia de péptido Z?-W- Xo-Cha-Phe-Ser-Arg-Tyr-Leu-Trp-Ser-X6-W2-Z2, en donde Cha representa ciciohexilalanina, Ser representa serina, Arg representa arginina, Tyr representa tirosina y todas las demás denotaciones son como se define antes. 10. Un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones previas, en donde al menos uno de \N-\ y W2 comprende 1 -10 unidades de un bloque de construcción de PEG monodisperso o 1 a 10 residuos de aminoácidos. 1 1 . Un agente de contraste de cualquiera de las reivindicaciones previas, en donde uno o ambos de Z^ y Z2 representan una porción formadora de imagen para usarse en diagnóstico in vivo, que comprende una porción detectable en imagenología de radio, SPECT, PET, rayos X, MR, ultrasonido u óptica. 12. Un agente de contraste como se reclama en la reivindicación 1 1 , en donde uno o ambos de Z-i y Z2 comprenden una porción M representando una porción gamma-emisora para radioimagenología o de SPECT seleccionada de 67Ga, 111 ln, 123l, 125l , 131 l , 81 mKr, 99Mo, 99mTc, 201TI y 33Xe. 13. Un agente de contraste como se reclama en la reivindicación 1 1 , en donde uno o ambos de Z^ y Z2 comprenden una porción M que representa un radio emisor con propiedades emisoras de positrones para imagenología de PEG, seleccionado de 1 1C, 18F, 13N, 50, 77F, 75Br, 76Br, 124l , 64Cu, 48V, 52Fe, 55Co, 94mTc, 68Ga o 82Rb. 14. Un agente de contraste como se reclama en la reivindicación 1 1 , en donde uno o ambos de Zi y Z2 comprenden una porción M que representa un metal paramagnético seleccionado del grupo de Gd(lll), Mn(ll); Cu(l l), Cr(lll), Fe(l ll), Co(l l), Er(l l), Ni(l l), Eu(lll) o Dy(lll) o un óxido de metal, tal como una especie superparamagnética, ferromagnética o ferrimagnética para imagenología de MR. 15. Un agente de contraste como se reclama en la reivindicación 1 1 , en donde al menos cualquiera de Z-i y Z2 representan un dispersador de liz, un absorbedor de luz o un emisor de luz para imagenología óptica. 16. Una composición farmacéutica que comprende un agente de contraste de cualquiera de las reivindicaciones precias, junto con uno o más auxiliares, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. 17. Los agentes de contraste de cualquiera de las reivindicaciones 1 -15 para usarse en imagenología diagnóstica. 18. Un método para generar imágenes de cuerpo humano o animal mediante imagenología diagnóstica que involucra administrar un agente de contraste como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 -15 a dicho cuerpo, y generar una imagen de al menos una parte de dicho cuerpo al cual es administrado dicho agente de contraste.