MC2091A1 - Procedes pour la preparation de composes a action anti-inflammatoire et de formulations pharmaceutiques les contenant - Google Patents

Description

La présente invention concerne de nouveaux composés de type aryl-hydroxy-urée doués d'activité antiinflammatoire, des procédés pour leur préparation, des formulations pharmaceutiques les contenant, facultative-5 ment avec un ou plusieurs autres ingrédients pharmacolo-giquement actifs, et l'utilisation de ces composés en médecine.

Les composés d'une classe définie dans le brevet européen N° 0 055 418 sont décrits dans ce brevet comme 10 des inhibiteurs doubles des enzymes 5-lipoxygénase et cyclo-oxygénase participant au processus métabolique de l'acide arachidonique chez les mammifères, et ils se sont montrés doués d'activité anti-inflammatoire et d'activités connexes. D'autres composés qui ont été décrits comme des 15 inhibiteurs de 5-lipoxygénase et/ou de cyclo-oxygénase incluent certains dérivés naphtyloxylés, comme décrit par exemple dans le brevet des E.U.A. N° 3 740 437 et dans Proc. Ann. Symp. Inst. Basic Med. Sci., Royal College of Surgeons of England, octobre 1982, pages 263-274. Les 20 composés décrits dans cette dernière référence incluent le composé connu sous le nom de nafazatrom.

Le brevet européen N° 0 196 184 décrit une classe de dérivés d'acides hydroxamiques qui sont des inhibiteurs de l'enzyme 5-lipoxygénase. Le brevet européen 25 N° 0 299 761 décrit une sous-classe d'acides N-alcanoyl-hydroxamiques a-alkylés entrant dans le cadre de la classe des dérivés d'acides hydroxamiques décrite dans le brevet européen N° 0 196 184, les composés de ladite sous-classe possédant des propriétés pharmacologiques particulièrement 30 avantageuses en ce qui concerne leur pouvoir d'inhibition de la 5-lipoxygénase.

La Demanderesse a maintenant découvert, au sein de la classe de composés décrite dans le brevet européen N° 0 196 184, une autre sous-classe de composés, caracté-35 risés comme étant des N-hydroxy-urées a-méthylées, possédant des propriétés pharmacologiques et physiques particu-

*

lièrement avantageuses, par exemple en ce qui concerne leurs propriétés anti-oxydantes et inhibitrices de 5-lipoxygénase et la longue durée d'action que manifestent chacun de leurs deux énantiomères.

5 Selon la présente invention, il est donc fourni un composé de formule (I)

H OH

I /

Ar-O-Ar'-Y-C-N (!)

' \ 12

10 CH3 conr R

dans laquelle

Ar est un groupe 4-halogénophényle ;

Ar' est un groupe 1,3- ou 1,4-phénylène ;

15 Y est un groupe (E)-CH=CH- ; et

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R et R sont choisis indépendamment parmi l'hydrogène et les groupes alkyle en C^-C4 ; et ses sels de bases et dérivés physiologiquement fonctionnels .

20 On notera que les composés de formule (I) et leurs sels de base peuvent exister sous les formes énantiomères (R) ou (S). La présente invention englobe donc chacun des énantiomères (R) et (S) individuels des composés de formule (I) et de leurs sels de bases, sensible-

25 ment exempts, c'est-à-dire associés à moins de 5 %, de l'autre énantiomère, et les mélanges de tels énantiomères en toutes proportions, y compris les mélanges racémiques contenant des quantités sensiblement égales des deux énantiomères.

30 Des composés préférés de l'invention compren nent ceux dans lesquels

Ar est un groupe 4-fluorophényle ; et/ou

Ar1 est un groupe 1,3-phénylène ; et/ou 1 2

R et R sont tous deux de l'hydrogène,

35 et leurs sels de bases et dérivés physiologiquement fonctionnels .

V- —- •*

Un composé particulièrement préféré de formule (I) doué'de propriétés anti-oxydantes et inhibitrices de 5-lipoxygénase exceptionnellement avantageuses, notamment au regard de sa durée d'action, est la (E)-N-{1-méthyl-5 3-E3-(4-fluorophénoxy)phényl]prop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée, de préférence sous la forme d'un mélange racémique des deux énantiomères.

Les sels de bases des composés de formule (I) qui sont utilisables en médecine sont ceux dans lesquels 10 le cation est physiologiquement acceptable. Cependant, les sels de bases comportant des cations non physiologiquement acceptables entrent dans le cadre de la présente invention, que ce soit pour leur utilisation dans des applications non médicales, ou comme composés intermédiaires dans la 15 préparation de composés de formule (I) et de leurs sels physiologiquement acceptables et dérivés physiologiquement fonctionnels.

Les sels selon l'invention comprennent les sels d'ammonium, les sels de métaux alcalins tels que ceux de 20 sodium et de potassium, les sels de métaux alcalino-terreux tels que ceux de calcium et de magnésium, les sels formés avec des bases organiques telles que la dicyclohexylamine et la N-méthyl-D-glucamine, et les sels formés avec des acides aminés tels que 1'arginine et la lysine. 25 Les composés de formule (I) ci-dessus et leurs sels de bases physiologiquement acceptables et dérivés physiologiquemenjt fonctionnels sont appelés ci-après les "composés de l'invention" en rapport avec les aspects thérapeutiques et pharmaceutiques de l'invention examinés 30 ci-dessous.

Sous d'autres aspects de l'invention, il est proposé :

(a) des composés de l'invention pour leur utilisation en thérapie ;

35 (b) des formulations pharmaceutiques contenant un composé de l'invention, au moins un support ou excipient

pharmaceutique et, facultativement, un ou plusieurs autres ingrédients thérapeutiques ;

Ce) l'utilisation d'un composé de l'invention dans la fabrication d'un médicament destiné au traitement ou à 5 la prophylaxie d'un état clinique dans lequel est indi qué un inhibiteur de 5-lipoxygénase ou un anti-oxydant ;

(d) l'utilisation d'un composé de l'invention dans la fabrication d'un médicament pour le traitement ou la prophylaxie de :

10 (i) une affection spasmogène,

(ii) une affection allergique,

(iii) une formation de tumeur,

(iv) une affection impliquant une agrégation plaquet-taire,

15 (v) une affection inflammatoire, ou

(vi) l'athérosclérose ;

(e) un procédé pour le traitement ou la prophylaxie chez un mammifère, tel que l'homme, d'un état clinique dans lequel est indiqué.un anti-oxydant ou un inhibiteur de

20 5-lipoxygénase, qui consiste à administrer audit sujet une quantité à effet thérapeutique d'un composé de l'invention ; et

(f) un procédé pour le traitement ou la prophylaxie chez un mammifère, tel que l'homme, d'un état clinique qui

25 est

(i) une affection spasmogène,

(ii) une affection allergique,

(iii) une formation de tumeur,

(iv) une affection impliquant une agrégation plaquet-30 taire,

(v) une affection inflammatoire, ou

(vi) l'athérosclérose,

qui consiste à administrer audit sujet une quantité à effet thérapeutique d'un composé de l'invention ; 35 (g) des procédés pour la préparation des composés de 11 invention.

•*

Du fait de leurs propriétés inhibitrices de 5-lipoxygénase, les composés de l'invention trouvent une application dans le traitement ou la prophylaxie d'états cliniques dans lesquels est indiqué un inhibiteur du pro-5 cessus métabolique de l'acide arachidonique à médiation de lipoxygénase, en particulier

(i) les affections spasmogènes,

(ii) les affections allergiques,

(iii) la formation de tumeurs,

\

10 (iv) les affections impliquant une agrégation plaquet-taire, et

(v) les affections inflammatoires.

Ces différents cas vont être examinés tour à

tour.

15 (i) Des exemples d'affections spasmogènes sont celles qui touchent le tissu musculaire lisse, notamment une constriction des muscles lisses des voies aériennes, telle que l'asthme intrinsèque (y compris l'asthme bronchique idiopathique et l'asthme 20 cardiaque), la bronchite et une constriction des muscles lisses artériels telle que le spasme coronarien (y compris celui qui est associé à un infarctus du myocarde, pouvant ou non conduire à une insuffisance ventriculaire gauche aboutissant à l'asthme 25 cardiaque) et le spasme ou ictus cérébral. D'autres exemples comprennent des maladies intestinales causées par une contraction musculaire colique anormale telles que les affections dénommées "syndrome du côlon irritable", "colite spasmodique" ou 30 "colopathie fonctionnelle".

(ii) Des exemples d'affections allergiques sont l'asthme extrinsèque, les affections allergiques cutanées ayant une origine partiellement ou totalement allergique telles que l'eczéma, les affections 35 allergiques intestinales (y compris la maladie coeliaque), les affections allergiques de l'oeil

"t «

telles que le rhume des foins (qui peut de plus, ou en variante, affecter les voies respiratoires supérieures), et la conjonctivite allergique.

(iii) Des exemples de tumeurs sont les néoplasmes 5 cutanés, le mastocytome et d'autres formes de prolifération cellulaire, tant bénignes que malignes. Il est à noter que l'efficacité des présents composés dans le traitement et la prophylaxie de tumeurs peut résulter de propriétés autres que l'inhibition de la

10 5-lipoxygénase et qui inhibent également la prolifé

ration cellulaire.

(iv) Des exemples d'affections impliquant une agrégation plaquettaire sont celles qui résultent d'une thrombose, y compris les ictus d'origine thrombo-

15 tique totale ou partielle, la thrombose coronarienne,

la phlébite et la phlébothrombose (ces deux dernières affections pouvant également être associées à une inflammation).

(v) Des exemples d'affections inflammatoires sont

20 celles qui touchent (a) les poumons, (b) les articu lations, (c) les yeux, (d) les intestins, (e) la peau et (f) le coeur, en particulier celles qui sont associés à l'infiltration de leucocytes dans un tissu enflammé. Des exemples de telles affections

25 inflammatoires sont les suivants :

(a) Les affections inflammatoires des poumons comprennent l'asthme, la bronchite et la fibrose kystique (qui peut de plus, ou en variante, toucher l'intestin ou d'autres tissus).

30 (b) Les affections inflammatoires des articulations comprennent l'arthrite rhumatoïde, la spondylite rhumatoïde, l'arthrose, l'arthrite goutteuse et d'autres affections arthritiques.

(c) Les affections inflammatoires de l'oeil compren-

35 nent l'uvéite (y compris l'iritis) et la con jonctivite.

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(d) Les affections inflammatoires de l'intestin comprennent la maladie de Crohn, la colite ulcéreuse et la proctite distale.

(e) Les affections inflammatoires de la peau com-5 prennent celles qui sont associées à une prolifération cellulaire, telles que le psoriasis, l'eczéma et la dermatite (qu'elle soit ou non d'origine allergique).

(f) Les affections inflammatoires du coeur compren-10 nent les atteintes coronaires résultant d'un infarctus.

D'autres affections inflammatoires comprennent la nécrose de tissus dans une inflammation chronique et le rejet de tissus à la suite d'une greffe chirurgicale. 15 Du fait de leurs propriétés anti-oxydantes,

les composés de l'invention trouvent également un champ d'application dans le traitement ou la prophylaxie d'états cliniques dans lesquels est indiqué un agent cytoprotec-teur possédant de telles propriétés, par exemple 11athéro-20 sclérose et l'arthrite.

Eu égard à leurs propriétés originales, les composés de l'invention peuvent également être utilisés dans le traitement ou la prophylaxie d'infections bactériennes et fongiques, de la dysménorrhée, de la sclérose 25 en plaques et des états cliniques dans lesquels est indiqué un immunosuppresseur, un anticonvulsivant ou un analgésique. Les composés de l'invention font également preuve d'activité hypocholestérolémique.

La dose du composé de l'invention (qui sera 30 appelé ci-après 1'"ingrédient actif"), qui est nécessaire pour produire un effet thérapeutique variera évidemment selon le composé particulier, la voie d'administration, le mammifère soumis au traitement et l'affection ou maladie particulière à traiter. Une dose convenable pour un mammi-35 fère souffrant, ou susceptible de souffrir, de l'une quelconque des affections décrites précédemment, est de 0,1 jag

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\

à 500 mg de composé par kilogramme de poids corporel. Dans le cas d'une administration systémique, la dose se situe typiquement dans l'intervalle de 0,5 à 500 mg de composé par kilogramme de poids corporel, la posologie la plus 5 appréciée étant une dose de 0,5 à 50 mg/kg de poids corporel, par exemple 5 à 25 mg/kg, administrée deux ou trois fois par jour. Dans le cas d'une administration topique, par exemple à la peau ou à l'oeil, une dose convenable se situe dans l'intervalle de 0,1 ng à 100 pg de base par 10 kilogramme, typiquement aux alentours de 0,1 pg/kg.

Dans le cas d'une administration par voie orale pour le traitement ou la prophylaxie d'une constriction des muscles lisses des voies aériennes, par exemple dans l'asthme ou la bronchite, une dose convenable du composé 15 de l'invention peut être telle que spécifiée dans le paragraphe précédent, mais elle se situe de préférence entre 1 mg et 10 mg de base par kilogramme de poids corporel, la dose la plus appréciée étant de 1 mg à 5 mg/kg de poids corporel, par exemple de 1 à 2 mg/kg. Dans le cas 20 d'une administration pulmonaire, la dose se situe typiquement dans l'intervalle de 2 pg à 100 mg/kg, par exemple de 20 pg à 0,5 mg/kg, notamment de 0,1 à 0,5 mg/kg.

Bien que 1'ingrédient actif puisse être administré seul, il est préférable de le présenter sous forme 25 d'une formulation pharmaceutique comprenant un composé de 11 invention en association avec un support ou excipient pharmaceutiquement acceptable et, facultativement, un ou plusieurs autres ingrédients thérapeutiques. Le support ou excipient doit bien évidemment être compatible avec les 30 autres ingrédients de la formulation et ne pas être préjudiciable au receveur. L'ingrédient actif peut constituer 0,1 à 99,9 % en poids de la formulation. Des doses unitaires typiques d'une formulation selon l'invention contiennent 0,1 mg à 1 g de l'ingrédient actif. Pour une 35 administration topique, l'ingrédient actif constitue de préférence 1 % à 2 % en poids de la formulation, mais

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l'ingrédient actif peut en constituer autant que 10 % en poids. Des formulations adaptées à l'administration par voie nasale ou buccale comprennent typiquement 0,1 à 20 % en poids, par exemple 2 % en poids, d'ingrédient actif.

5 Les formulations selon l'invention comprennent celles dont la forme est adaptée à une administration par voie orale, pulmonaire, ophtalmique, rectale, parentérale (y compris sous-cutanée, intramusculaire et intraveineuse), intra-articulaire, topique ou nasale/buccale. 10 Les formulations de 11 invention peuvent être commodément présentées en formes posologiques unitaires et on peut les préparer par tout procédé bien connu dans l'art pharmaceutique. Tous ces procédés comprennent l'étape consistant à mettre l'ingrédient actif en association avec 15 un support qui se compose d'un ou plusieurs ingrédients secondaires. En général, les formulations sont préparées en mettant uniformément et intimement en association 1'ingrédient actif avec un support liquide ou un support solide finement divisé, ou les deux, puis, si nécessaire, 20 en conformant 1-e produit à la forme désirée.

Les formulations de la présente invention qui sont adaptées à l'administration par voie orale, peuvent avoir la forme d'unités discrètes telles que des capsules, cachets, comprimés ou pastilles, contenant chacun une 25 quantité prédéterminée de l'ingrédient actif ; la forme d'une poudre ou de granulés ; la forme d'une solution ou suspension dans un liquide aqueux ou non aqueux ; ou la forme d'une émulsion de type huile-dans-eau ou eau-dans-huile. L'ingrédient actif peut également être présenté 30 sous forme d'une boulette, d'un électuaire ou d'une pâte.

Un comprimé peut être fabriqué par compression ou moulage de l'ingrédient actif, avec facultativement un ou plusieurs ingrédients secondaires. On peut fabriquer des comprimés pressés en comprimant, dans une machine 35 appropriée, l'ingrédient se trouvant sous une forme à écoulement libre telle qu'une poudre ou des granulés,

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éventuellement en mélange avec un liant, un lubrifiant, un diluant inerte et/ou un agent tensio-actif ou un dispersant. On peut fabriquer des comprimés moulés en moulant, dans une machine appropriée, un mélange de 1'ingré-5 dient actif réduit en poudre et d'un support approprié humecté par un diluant liquide inerte.

Les formulations adaptées à l'administration par voie rectale peuvent avoir la forme d'un suppositoire comprenant l'ingrédient actif et un support tel que le 10 beurre de cacao, ou bien encore la forme d'un lavement.

Les formulations adaptées à l'administration par voie parentérale comprennent typiquement une préparation aqueuse stérile de l'ingrédient actif, qui est de préférence isotonique vis-à-vis du sang du receveur. 15 Les formulations adaptées à l'administration intra-articulaire peuvent avoir la forme d'une préparation aqueuse stérile de l'ingrédient actif, ce dernier pouvant être sous forme microcristalline, par exemple une suspension aqueuse de microcristaux. On peut également utiliser 20 des formulations liposomales et des systèmes à base de polymère biodégradable pour présenter l'ingrédient actif, aussi bien pour l'administration intra-articulaire que pour l'administration ophtalmique.

Les formulations adaptées à 1'administration 25 topique comprennent des préparations liquides et semi-liquides telles que des liniments, lotions et cataplasmes ; des émulsions du type huile-dans-eau et eau-dans-huile telles que des crèmes, pommades et pâtes ; et des solutions et suspensions telles que des gouttes. Par exemple, 30 pour l'administration ophtalmique, l'ingrédient actif peut être présenté en gouttes aqueuses pour instillations oculaires, par exemple sous forme d'une solution à 0,1-1,0 % en poids/volume.

Les formulations adaptées à l'administration 35 par inhalation comprennent des poudres ou brouillards de fines particules qui peuvent être produits par divers

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types de distributeurs d'aérosol sous pression, de nébuliseurs ou d'insufflateurs délivrant une dose déterminée.

la dimension particulaire de la poudre ou des gouttelettes 5 se situe généralement dans l'intervalle de 0,5 à 10 jj.m, de préférence de 1 à 5 jam, afin d'assurer'la distribution dans l'arbre bronchique. Pour une administration nasale, une dimension particulaire de 10 à 500 jum est préférable pour assurer la rétention dans la cavité nasale. 10 Les inhalateurs doseurs sont des distributeurs d'aérosols sous pression, contenant généralement une formulation en suspension ou solution de l'ingrédient actif dans un propulseur liquéfié. A l'emploi, ces dispositifs éjectent la formulation par une valve conçue pour 15 délivrer un volume dosé, typiquement de 10 à 150 jul, en produisant une bouffée de fines particules contenant l'ingrédient actif. Des propulseurs appropriés comprennent certains chlorofluorocarbures, par exemple le dichloro-difluorométhane, le trichlorofluorométhane, le dichloro-20 tétrafluoréthane et leurs mélanges. La formulation peut encore contenir un ou plusieurs co-solvants, par exemple l'éthanol, des agents tensio-actifs tels que l'acide oléique ou le trioléate de sorbitanne, des anti-oxydants et des aromatisants appropriés. 25 Les nébuliseurs sont des dispositifs disponi bles dans le commerce qui transforment des solutions ou suspènsions de l'ingrédient actif en un brouillard d'aérosol thérapeutique, soit par l'accélération d'un gaz comprimé, typiquement l'air ou l'oxygène, à travers un ori-30 fice de venturi étroit, soit par agitation ultrasonore. Des formulations convenant pour être utilisées dans les nébuliseurs comprennent l'ingrédient actif contenu dans un véhicule liquide et constituant au maximum 40 % en poids de la formulation, de préférence moins de 20 % en poids. 35 Le véhicule est généralement de l'eau ou une solution aqueuse alcoolique diluée, de préférence rendue isotonique

Pour une administration pulmonaire par la bouche,

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vis-à-vis des fluides corporels par l'addition, par exemple, de chlorure de sodium. Des additifs facultatifs comprennent des conservateurs si la formulation n'est pas préparée à l'état stérile, par exemple 1'hydroxybenzoate 5 de méthyle, des anti-oxydants, des aromatisants, des huiles volatiles, des tampons et des agents tensio-actifs.

Des formulations adaptées à l'administration par insufflation comprennent des poudres finement broyées qui peuvent être délivrées au moyen d'un insufflateur ou 10 absorbées dans la cavité nasale à la manière d'une prise. Dans 1'insufflateur, la poudre est contenue dans des capsules ou des cartouches, généralement en gélatine ou en matière plastique, qui sont percées ou ouvertes "in situ", et la poudre est délivrée par aspiration d'air à travers 15 le dispositif par inhalation ou au moyen d'une pompe manuelle. La poudre utilisée dans 11insufflateur se compose soit uniquement de l'ingrédient actif, soit d'un mélange de poudres comprenant l'ingrédient actif, un diluant en poudre approprié tel que le lactose, et un 20 agent tensio-actif facultatif. L'ingrédient actif représente généralement 0,1 à 100 % en poids de la formulation.

Outre les ingrédients susmentionnés, les formulations selon l'invention peuvent contenir un ou plusieurs ingrédients supplémentaires tels que des diluants, tampons, 25 aromatisants, liants, agents tensio-actif s, épaississants', lubrifiants, conservateurs, par exemple 1'hydroxybenzoate de méthyle, anti-oxydants et agents émulsionnants. Les composés de l'invention peuvent avantageusement être utilisés en association avec un ou plusieurs autres ingré-30 dients thérapeutiques choisis parmi un antibiotique (par exemple un agent antibactérien), un antifongique ou un agent antiviral, un antihistaminique (en particulier un antihistaminique à action périphérique), ou un antiinflammatoire non stéroïdien (AINS). 35 Les composés de ces associations peuvent être administrés simultanément, par exemple dans la même formu-

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lation ou dans des formulations séparées, ou successivement dans un intervalle de temps suffisamment court pour produire l'effet thérapeutique conjugué désiré. Lorsque les composés sont employés dans la même formulation, on 5 peut utiliser une formulation selon l'invention contenant le ou les autres ingrédients en plus d'un composé de 1'invention.

particulièrement préconisée pour un emploi dans le traite-10 ment et la prophylaxie de l'asthme. Un antihistaminique approprié peut être choisi parmi les composés décrits dans les demandes de brevet européen N° 0 859 959 et 0 117 302. La dose et le schéma posologique convenant pour un tel antihistaminique peuvent être choisis parmi toux ceux 15 énumérés dans ces deux documents. Des antihistaminiques particulièrement préférés sont l'acide (E)-3-(6-(3-pyrro-lidino-1-(4-tolyl)prop-lE-ényl-(2-pyridyl)acrylique et

1'acide (E)-3-(6-(3-pyrrolidino-l-(4-tolyl)prop-lE-ényl-(2-pyridyl)propionique. Un autre antihistaminique préféré 20 est le (E)-1-(4-méthylphényl)-1-(2-pyridyl)-3-pyrrolidino-prop-l-ène, autrement connu sous le nom de triprolidine.

préconisée pour un emploi dans le traitement ou la prophylaxie d'affections inflammatoires des articulations telles 25 que celles mentionnées ci-dessus. On a constaté que l'utilisation de telles associations dans le traitement d'affections inflammatoires des articulations exerce une action thérapeutique supérieure à celle obtenue en utilisant l'un ou l'autre médicament isolément. En particulier, la 30 diminution de l'enflure des articulations et la diminution de l'épaisseur de la couche bordante de synoviale de l'articulation sont nettement améliorées en appliquant la thérapie d'association. En outre, il apparaît une diminution de la perte de protéoglycanes par le cartilage arti-35 culaire et une moindre infiltration des polynucléaires et autres leucocytes dans le tissu synovial, ces effets

L'association avec un antihistaminique est

L'association avec un AINS est particulièrement

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n'étant pas observés en utilisant l'un ou l'autre médicament isolément.

connus pour provoquer des ulcérations gastriques. Outre le 5 meilleur effet thérapeutique observé en utilisant un AINS en association avec un composé de l'invention, les propriétés anti-oxydantes de ce dernier apportent une cyto-protection contre l'effet ulcératif de l'AINS, si bien que de plus fortes doses de l'AINS peuvent être administrées 10 avec moins de risque de provoquer une ulcération.

une formulation pharmaceutique adaptée à l'administration par voie orale ou à l'injection intra-articulaire comprenant un composé de l'invention (tel que défini précédem-15 ment) et au moins un AINS. Des AINS appropriés comprennent les suivants : acémétacine, alminoprofène, amfénac-sodium, aminoprofène, antitrazafène, antrafénine, auranofine, lysinate de bendazac, benzydamine, béprozine, broperamole, bufézolac, carprofène, cétoprofène, cinmétacine, ciproqua-20 zone, clidanac, cloximate, dazidamine, deboxamet, delmé-tacine, détomidine, dexindoprofène, diacéréine, diclo-fénac, difisalamine, difenpyramide, émorfozone, acide enfénamique, énolicam, épirizole, étersalate, étodolac, étofénamate, mésylate de fanétizole, fenclofénac, fen-25 clorac, fendosal, féniflumizole, fentiazac, féprazone, floctafénine, flunixine, .flunoxaprofène, fluproquazone, flurbiprofène, fopirtoline, fosfosal, furcloprofène, furofénac, glucamétacirie, guaxmésal, ibuprofène, ibu-proxam, indométhacine, isofézolac, isonixime, isoprofène, 30 isoxépac, isoxicam, léfétamine-HCl, léflunomide, lofémi-zole, lonazolac-calcium, lotifazole, loxoprofène, clonixi-nate de lysine, méclofénamate-sodium, méséclazone, miro-profène, nabumétone, naproxène, nictindole, nimésulide, orpanoxine, oxamétacine, oxapadol, oxaprozine, citrate de 35 perisoxal, piméprofène, pimétacine, piproxène, pirazolac, pirfénidone, piroxicam, pirprofène, pranoprofène, maléate

Les AINS, en particulier à hautes doses, sont

Ainsi, la présente invention fournit également i

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de proglumétacine, proquazone, pyridoxiprofène, sudoxicam, suprofène, talmétacine, talniflumate, ténoxicam, thiazoli-nobutazone, thiélavine B, acide tiaprofénique, tiaramide-HC1, tiflamizole, timégadine, tioxaprofène, acide tolféna-5 mique, tolpadol, tryptamide, ufénamate et zidométacine.

Des AINS préférés parmi ceux-ci sont les suivants : naproxène, flurbiprofène, cétoprofène, aminopro-fène, carprofène, clidanac, dexindoprofène, diclofénac, acide enfénamique, fenclofénac, flunoxaprofène, ibupro-10 fène, indométhacine, isoprofène, loxoprofène, mécloféna-mate-sodium, miroprofène, piroxicam, pirprofène, pranopro-fène, suprofène, acide tiaprofénique, tioxaprofène et zidométacine.

Des AINS particulièrement préférés pour leur 15 emploi sous cet aspect de l'invention sont le clidanac, le dichlofénac, 11ibuprofène, 11indométhacine, le suprofène, le naproxène, le piroxicam, le flurbiprofène, le cétoprofène et l'acide tiaprofénique.

Les AINS suivants, désignés par le numéro de 20 code de la société (Chemical Abstracts Index Guide, 1989), peuvent également être utilisés : 480156S, AA861, AD1491, AD1590, AFP802, AFP860, AHR6293, A177B, AP504, AU8001, BAYo8276, BPPC, BW540C, BW755C, CHINOIN 127, CN100, C0893XX, CPP, D1Q242, DKA9, DV17, EB382, EGYT2829, EL508, 25 F1044, FZ, GP53'633, GP650, GV3658, HG/3, ITC1, ITF, ITF182, KB1043, KC8973, KCNTE16090, KME4, LA2851, LT696, LU20884, M7074, MED15, MG18311, MR714, MR897, MY309, N0164, 0N03144, PR823, PV102, PV108, QZ16, R830, RS2131, RU16029, RU26559, RUB265, SCR152, SH440, SIR133, SIR136, 30 SIR92, SPAS510, SQ27239, ST281, SX1032, SY6001, SaH46798, TA60, TAI901, TEI615, TVX2706, TVX960, TZI615, U60257, UR2310, WY23205, WY41770, YM09561, YM13162, YS1033 et ZK31945.

D'autres AINS comprennent les salicylates, en 35 particulier l'aspirine, et les phénylbutazones et leurs sels pharmaceutiquement acceptables.

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Typiquement, une formulation selon cet aspect de l'invention comprend une quantité non toxique à effet cytoprotecteur d'un composé de l'invention et une quantité efficace non toxique (mais potentiellement ulcérigène en 5 l'absence du composé de l'invention) de l'AINS.

La quantité d'AINS dans la formulation dépend de l'effet désiré et sera choisie comme il convient par le médecin en fonction de l'âge, du poids corporel, de l'état de santé général), etc., du malade. La quantité du composé 10 de l'invention à inclure dans la composition est choisie de manière à être compatible avec la quantité d'AINS et à assurer un effet cytoprotecteur suffisant pour améliorer ou éviter l'effet d'ulcération gastrique de l'AINS. Des quantités typiques des composés de l'invention à utiliser 15 conjointement à un AINS dans des formulations pour la voie orale ou intra-articulaire, sont telles qu'indiquées précédemment.

Sous un autre aspect de l'invention, il est fourni un procédé de préparation du composé de 1'inven-20 tion, qui consiste à faire réagir un composé de formule (II) :

R3NHOH (II)

3

dans laquelle R est un groupe de formule

25

H

Ar-O-Ar'-Y-C-I

CH.

tel que défini pour un composé de formule (I), avec un ou 30 plusieurs agents appropriés et dans des conditions de réaction qui conviennent pour effectuer la conversion de l'atome d'hydrogène fixé sur N en un groupe CONH2 fixé sur N ;

et, facultativement, à convertir le composé de l'invention 35 ainsi formé en l'un de ses sels correspondants.

18

La réaction est typiquement exécutée par traitement du composé de formule(II) avec un cyanate du Groupe I,

par exemple le cyanate de potassium, dans un solvant non polaire tel que le tétrahydrofuranne (THF), en présence 5 d'un acide.

parés par oximation de la cétone correspondante en utilisant, par exemple, 1'hydroxylamine dans un solvant polaire approprié tel que le méthanol, puis réduction "in situ" de 10 11oxime en utilisant, par exemple, du cyanoborohydrure de sodium et de l'acide oxalique. La cétone appropriée peut être obtenue dans le commerce ou en faisant réagir l'aldéhyde correspondant avec, par exemple, de l'hydroxyde de sodium (NaOH) aqueux et de l'acétone ou bien de l'acétyl-15 méthylphosphonate de diméthyle et du carbonate de potassium anhydre dans un solvant approprié tel que THF. L'aldéhyde approprié peut être obtenu dans le commerce ou bien, par exemple, par lithiation du composé bromé correspondant, puis traitement par le diméthylformamide (DMF). Le 20 composé bromé peut être obtenu dans le commerce ou bien, par exemple, en faisant réagir un composé de formule ArLS, où Ar et L sont tels que définis précédemment et S est un métal du Groupe I, avec un composé de formule Ar'Br, où Ar' est tel que défini précédemment, dans un solvant 25 approprié tel que la l-méthyl-2-pyrrolidinone. La lithiation est typiquement effectuée en utilisant du butyl-lithium à basse température, par exemple à -60°C, dans un solvant non polaire tel que THF. L'aldéhyde peut également être obtenu en traitant le composé dibromométhylé corres-. 30 pondant avec du sel disodique d'acide éthylènediamine-tétracétique (EDTA.2Na) et du carbonate de calcium dans un système de solvants polaires tel qu'un système éthanol/-eau. Le composé dibromométhylé peut être obtenu dans le commerce ou bien, par exemple, en irradiant un composé de 35 formule ArLAr'CH^, où Ar, L et Ar' sont tels que définis précédemment, dans un solvant non polaire tel que CC14, en

Les composés de formule (II) peuvent être pré-

19

présence de N-bromosuccinimide (NBS) et d'azobisisobutyro-nitrile (AIBN).

Les énantiomères individuels du composé de 11 invention peuvent être obtenus par séparation des composants 5 du mélange racémique, par exemple au moyen d'une colonne de chromatographie chirale, ou en préparant et séparant les diastéréoisomères appropriés, ou par synthèse directe à partir du composé chiral correspondant de formule (II) par le procédé décrit ci-dessus. 10 Les composés chiraux de formule (II) peuvent commodément être obtenus par hydrolyse acide ou basique du composé chiral doublement bloqué correspondant, par exemple le composé -IsKCC^MeJOCC^Me ou le composé -N(BOC)OBOC où BOC est le groupe t-butoxycarbonyle. Ce dernier composé 15 peut être obtenu en traitant l'alcool chiral A approprié avec HN(BOC)OBOC en présence de triphénylphosphine et d'azodicarboxylate de diéthyle (ADDE) à basse température dans un solvant non polaire tel que le toluène, ou en faisant réagir le composé chiral correspondant de formule 20 (III)

H ^OR4 (III)

H-C-CH-C-N

2 I \ 5 W XR°

25

dans laquelle W est tel que défini précédemment et R4 et

5

R sont tous deux des groupes t-butoxycarbonyle, avec un composé de formule (IV)

Ar-L-Ar'-T (IV)

dans laquelle Ar,, L et Ar' sont tels que définis pour le composé de l'invention et T est un groupe partant approprié tel que bromo, typiquement à une température élevée en présence d'acétate de palladium (II), de tri(o-tolyl)-phosphine et d'une base appropriée?par exemple la tri-(n-butyl)aminé.

U

30

35

20

Les composés chiraux de formule (III) peuvent être commodément obtenus en. traitant l'alcool chiral B approprié avec HN(BOC)OBOC en présence de triphénylphos-phine et d1ADDE ou en réduisant partiellement 11alcyne 5 chiral correspondant, par exemple par hydrogénation quantitative sur un catalyseur approprié tel que du palladium sur sulfate de baryum, dans un solvant basique tel que la pyridine. L'alcyne chiral peut être obtenu en traitant l'alcool chiral C correspondant avec HN(BOC)OBOC en pré-10 sence de triphénylphosphine et d'ADDE. Les alcools chiraux A, B et C appropriés peuvent être obtenus dans le commerce ou préparés à partir des cétones correspondantes au moyen d'agents réducteurs chiraux appropriés (JACS 109, 7925 (198 7)). En variante, on peut les obtenir à partir des 15 alcools racémiques par formation de dérivés et hydrolyse sélective (JCS Chiem. Comm. 598 (1988)) ou par la séparation de diastéréoisomères appropriés (J. Med. Chem. 31q, 156 (1988)). Les composés de formule (IV) sont disponibles dans le commerce ou peuvent être préparés par des procédés 20 décrits dans la littérature.

La conversion facultative du composé de l'invention en un sel de base correspondant peut être exécutée commodément par réaction avec la base appropriée.

Les exemples suivants sont donnés à titre illus-25 tratif pour mieux expliquer la présente invention.

EXEMPLES DE SYNTHESE Exemple de Synthèse 1

Préparation de la (E)-N-{3-[3-(4-fluorophénoxy)phényl]-1-(R,S)-méthylprop-l-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée 30 (a) 3-(4-fluorophénoxy)toluène

On ajoute goutte à goutte, en 1 heure, une solution de 112,0 g de 4-fluorophénol (Aldrich) dans 250 ml d1anisole à une suspension sous agitation de 26,4 g de NaH dans 250 ml d'anisole. Lorsque l'addition est 35 terminée, on agite le mélange à la température ambiante pendant 16 heures. On ajoute ensuite successivement, en

21

i

30 minutes, 188,1 g de 3-bromotoluène (Aldrich), 50,0 g de chlorure de cuivre(I) et 158 ml de TDA-1 (tris[2-(2-méthoxy-éthoxy)éthyljamine). Lorsque l'addition est terminée, on chauffe le mélange au reflux pendant 22 heures, puis le 5 refroidit à la température ambiante et l'on ajoute 2000 ml d'éther. On filtre le mélange sur Hyflo et on lave le v

filtrat avec HC1 aqueux 2M, NaOH aqueux 1M et de l'eau, puis le déshydrate et l'évaporé sous vide. On distille l'huile restante pour obtenir 101,9 g du produit désiré à 10 Eb. 129-134°C/1,2 kPa.

(b) l-dibromométhyl-3-(4-fluorophénoxy)benzène

On chauffe au reflux une solution de 101,9 g du produit de l'étape (a) et 206,7 g de NBS dans 500 ml de CCl^. On ajoute ensuite 100 mg de AIBN et l'on irradie le 15 mélange avec une lampe à moyenne pression à 254 nm tout en chauffant au reflux pendant 7 heures. On ajoute d'autres portions de 100 mg de AIBN au bout de 0,5, 1, 2, 4 et 6 heures. On refroidit le mélange à la température ambiante, le filtre et évapore lefiltrat sous vide pour obtenir 20 195,3 g du produit désiré sous forme d'une huile orangée.

(c) 3-(4-fluorophénoxy)benzaldéhyde

On chauffe au reflux pendant 20 heures un mélange de 181,8 g du produit de l'étape (b), 151,7 g de CaCO^ et 37,7 g de EDTA.2Na.2H2O dans un mélange éthanol/eau 25 (1140 ml/284 ml). On refroidit le mélange à la température ambiante, le filtre et évapore le filtrat sous vide. On reprend l'huile restante dans 500 ml d'éther, on lave avec HC1 aqueux 2M, une solution aqueuse saturée de NaHCO^ et de l'eau, et l'on déshydrate et évapore sous vide pour 30 obtenir une huile orangée visqueuse que l'on chromatogra-phie deux fois sur gel de silice en utilisant un mélange éther/éther de pétrole 40-60 à 1:9 pour obtenir 69,6 g du produit désiré.

(d) 1 — C 3—(4-fluorophénoxy)phényl3but-l-ène-3-one

35 On chauffe au reflux pendant 24 heures un mélange de 69,6 g du produit de l'étape (c), 56,2 g d'acétylméthyl-

22

phosphonate de diméthyle et 88,9 g de K^CO^ anhydre dans 500 ml de THF. On refroidit le mélange à la température ambiante, le filtre et évapore le filtrat sous vide. On reprend l'huile restante dans 500 ml d'éther, on lave 5 avec de l'eau, une solution aqueuse saturée de NaHCO^ et de l'eau, et l'on déshydrate et évapore sous vide pour obtenir 83,4 g du produit désiré.

(e) N—{1—[3—(4-fluorophénoxy)phényl]but-2-ène-3-yl)-hydroxylamine

10 On ajoute goutte à goutte, en 1 heure, 63,6 g de pyridine à une solution sous agitation de 82,5 g du produit de l'étape (d) et 33,6 g de chlorhydrate d'hydroxylamine dans 1000 ml de méthanol. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange pendant 1,5 heure, puis le 15 refroidit dans un bain de glace et d'eau et l'on ajoute 289,8 g d'acide oxalique anhydre. On ajoute encore 750 ml de méthanol et 101,2 g de cyanoborohydrure de sodium au mélange sous agitation en une période de 3,5 heures. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange 20 pendant 2 heures entre 0 et 5°C puis pendant 20 heures à la température ambiante. On filtre le mélange, évapore le filtrat sous vide et reprend l'huile restante dans 1000 ml d'éther, et on lave à l'eau et refroidit dans un bain de glace et d'eau. On ajuste le pH du mélange à environ 9 par 25 addition de NaOH aqueux 10M et 11 on sépare la phase organique. On extrait la phase aqueuse à l'éther et l'on rassemble la phase organique et l'extrait que l'on lave à l'eau, puis déshydrate et évapore sous vide pour obtenir 92,7 g du produit désiré sous forme d'une huile de couleur 30 tan qui cristallise au repos.

(f) (E)-N-{3-[3-(4-fluorophénoxy)phényl3-1(R,S)-méthyl-prop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée

On ajoute en 1,5 heure 645 ml de HC1 aqueux 2M à une solution sous agitation de 88,0 g du produit de 35 l'étape (e) et 79,2 g de cyanate de potassium dans 750 ml de THF, en opérant à 0°C. Lorsque l'addition est terminée,

23

on agite le mélange à 0°C pendant 2 heures, puis le laisse se séparer. On sépare la phase organique, on extrait la phase aqueuse avec de l'éther et l'on rassemble la phase organique et les extraits que l'on lave avec une solution 5 aqueuse saturée de NaHCO^ et de l'eau, puis déshydrate et évapore sous vide pour obtenir un solide collant incolore. On triture ce dernier avec un mélange éther/éther de pétrole 40-60 (3:2), puis le recristallise dans un mélange acétate d'éthyle/éther de pétrole 40-60 (2:1) pour obtenir 10 6 7,8 g d'un solide incolore ayant un point de fusion de 133,5-135°C (déc.). Le spectre RMN de ^"H à 200 MHz et le spectre IR correspondent au produit désiré. Analyse : C-64,81 % (64,54 %) ; H-5,43 % (5,42 %) ; N-8,52 % (8,86 %).

15 Exemple de Synthèse 2

Préparation de la (E)-N- (3 — C3—(4-fluorophénoxy)phényl]~ 1(R)-méthylprop-2-ène-l-yl }-N-hydroxy-urée

(a) But-3-yne-2(S)-ol

On obtient le but-r3-yne-2 ( S )-ol par le dédouble-20 ment de (±)-but-3-yne-2-ol (Aldrich) selon le mode opératoire décrit dans J. Med. Chem. 33., 156 (1988).

(b) N,O-bis(t-butoxycarbonyl)-N-[but-3-yne-2(R)-yl ] hydroxylamine

On ajoute goutte à goutte, en 1 heure, 180,0 g 25 de ADDE à une solution sous agitation.de 55,0 g de but-3-yne-2(S)-ol provenant de l'étape (a), 258,0 g de tri-phénylphosphine et 183 g de N,O-bis(t-butoxycarbonyl)-hydroxylamine (Fluka) dans 1500 ml de toluène, en opérant à -78°C. Lorsqike l'addition est terminée, on laisse le 30 mélange se réchauffer jusqu'à la température ambiante, puis on l'agite pendant 2 heures. On ajoute 1500 ml d'éther de pétrole 40-60, on filtre le mélange sur Hyflo et évapore le filtrat sous vide pour obtenir 200,0 g du produit désiré sous forme d'une huile qui cristallise au 35 repos.

24

(c) N,O-bis(t-butoxycarbonyl)-N-[but-3-ène-2(E)-yl] hydroxylamine

On hydrogène à la pression atmosphérique un mélange sous agitation de 200,0 g du produit de l'étape 5 (b) et 8,8 g de Pd à 5 % en poids/BaSO^ dans 1000 ml de pyridine, jusqu'à ce que l'absorption d'hydrogène ait cessé. On filtre le mélange sur Hyflo, évapore le filtrat sous vide et reprend l'huile résiduelle dans 1000 ml d'éther, on lave avec une solution aqueuse d'acide citri-10 que à 20 % en poids/volume et de l'eau, et l'on déshydrate et évapore sous vide pour obtenir 192,0 g du produit désiré.

(d) l-bromo-3-(4-fluorophénoxy)benzène

On ajoute une solution aqueuse de 49,0 g de KOH 15 dans 100 ml d'eau à une solution sous agitation de 84,0 g de 4-fluorophénol (Aldrich) dans 250 ml de méthanol. Lorsque l'addition est terminée, on évapore le mélange sous vide et l'on pulvérise le solide résiduel et le reprend dans 300 ml de l-méthyl-2-pyrrolidinone. On ajoute 20 131,3 g de 3-fluorobromobenzène (Aldrich) et chauffe le mélange au reflux pendant 24 heures, puis le refroidit à la température ambiante, le verse dans 1500 ml d'eau et l'extrait à l'éther. On lave les extraits rassemblés avec NaOH aqueux 2M, HC1 aqueux 2M et de l'eau, et on les 25 déshydrate et les évapore sous vide. On distille l'huile restante pour obtenir 103,0 g du produit désiré à Eb. 85-100°C/33,3 Pa.

(e) (E)-N-{3-[3-(4-fluorophénoxy)phényl]-l(R)-méthyl-prop-2-ène-l-yl}hydroxylamine

30 On agite à 115°C pendant 3 heures un mélange de

100,7 g du produit de l'étape (c), 103,0 g du produit de l'étape (d), 10,0 g de tri(o-tolyl)phosphine et 4,0 g d'acétate de palladium(II) dans 300 ml de tri(n-butyl)-aminé. On refroidit le mélange à environ 90°C, l'évaporé 35 sous vide et reprend le résidu dans 1000 ml d'éther, on lave avec une solution aqueuse d'acide citrique à 33 % en

I

25

poids/volume et on filtre sur Hyflo. On lave le filtrat avec une solution aqueuse d'acide citrique à 10 % en poids/volume et de l'eau, le déshydrate et l'évaporé sous vide pour obtenir une huile visqueuse de couleur tan. On 5 reprend cette dernière dans 1000 ml de méthanol et 100 ml de HC1 concentré et l'on chauffe le mélange au reflux pendant 1 heure, puis le refroidit à la température ambiante et l'évaporé sous vide. On reprend le résidu dans 1000 ml d'eau et 125 ml de NaOH aqueux 10M, on l'extrait à 10 1'éther et on lave les extraits rassemblés avec de l'eau, les déshydrate et les évapore sous vide. On chromatogra-phie l'huile restante de couleur tan sur du gel de silice en utilisant un mélange éther/éther de pétrole 40-60 (9:1), puis de 1'éther, pour obtenir 21,9 g du produit 15 désiré sous forme d'une huile jaune.

(f) (E)-N- (3 — [3—(4-fluorophénoxy)phényl3-1(R)-méthyl-prop-2-ène-l-yl }-N-hydroxy-urée

On ajoute goutte à goutte, en 1 heure, 160 ml de HC1 aqueux 2M à une solution sous agitation de 21,9 g du 20 produit de l'étape (e)' et 19,7 g de cyanate de potassium dans 190 ml de THF, en opérant à 0°C. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange à 0°C pendant 1,5 heure, puis l'on ajoute une solution aqueuse saturée de NaCl et sépare la phase organique. On extrait la phase aqueuse 25 avec de 1 ' éther et l'on rassemble la phase organique et les extraits que l'on lave avec HC1 aqueux 2M, une solution aqueuse saturée de NaHCO^ et une solution aqueuse saturée de NaCl, puis déshydrate et évapore sous vide pour obtenir un solide de couleur crème que l'on recristallise 30 dans un mélange acétate d1éthyle/éther de pétrole 40-60 (2:1') pour obtenir 17,7 g de plaquettes incolores ayant un point de fusion de 133-135°C (déc.). Le spectre RMN de "'"H à 200 MHz et le spectre IR correspondent au produit désiré. Analyse : C-64,10 % (64,54 %) ; H-5,47 % (5,42 %); 35 N-8,78 % (8,86 %) . [a]^3 +40,81° (c = 1,0, EtOH).

26

Exemple de Synthèse 3

Préparation de la (E)-N-{3-[3-(4-fluorophénoxy)phényl]-1(S)-méthylprop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée

(a) But-3-yne-2(R)-ol

5 On obtient le but-3-yne-2(R)-ol par le dédouble ment de (t)-but-3-yne-2-ol (Aldrich) selon le mode opératoire décrit dans J. Med. Chem. _3^L, 156 (1988).

(b) N,O-bis(t-butoxycarbonyl)-N-[but-3-yne-2(S)-yl ]-hydroxylamine

10 On ajoute goutte à goutte, en 1 heure, 81,8 g de

ADDE à une solution sous agitation de 25,0 g de but-3-yne-2(R)-ol provenant de l'étape (a), 117,0 g de triphényl-phosphine et 83,2 g de N,O-bis(t-butoxycarbonyl)hydroxylamine (Fluka) dans 760 ml de toluène, en opérant à -70°C.. 15 Lorsque l'addition est terminée, on laisse le mélange se réchauffer jusqu'à la température ambiante, le filtre et évapore le filtrat sous vide. On soumet deux fois l'huile restante à une chromatographie instantanée sur gel de silice en utilisant respectivement du DCM et un mélange 20 éther/éther de pétrole 40-60 (1:4), pour obtenir 98,6 g du produit désiré sous forme d'une huile jaune pâle.

(c) N,O-bis(t-butoxycarbonyl)-N-[but-3-ène-2(S)-yl ]-hydroxylamine

On hydrogène à la pression atmosphérique un 25 mélange sous agitation de 9 8,6 g du produit de l'étape (b) et 2,2 g de Pd à 10 % en poids/BaSO^ dans 500 ml de pyri-dine jusqu'à ce que l'absorption d'hydrogène ait cessé. On filtre le mélange sur Hyflo, évapore le filtrat sous vide et reprend l'huile restante dans 500 ml d'éther, on lave 30 avec une solution aqueuse d'acide citrique à 20 % en poids/volume et de l'eau, puis déshydrate et évapore sous vide pour obtenir 90,0 g du produit désiré sous forme d'une huile de couleur orangé pâle.

(d) l-bromo-3-(4-fluorophénoxy)benzène

35 On prépare le l-bromo-3-(4-fluorophénoxy)benzène par le mode opératoire décrit dans l'étape (d) de l'Exemple de Synthèse 2 ci-dessus.

27

(e) (E)-N-{3—[3—(4-fluorophénoxy)phényl3-1(S)-méthyl-prop-2-ène-l-yl}-hydroxylamine

On agite à 110-120°C pendant 3,5 heures un mélange de 57,4 g du produit de l'étape (c), 58,7 g du 5 produit de l'étape (d), 5,0 g de tri(o-tolyl)phosphine et 2,0 g d'acétate de palladium(II) dans 150 ml de tri-(n-butyl)aminé. On refroidit le mélange à la température ambiante, l'évaporé sous vide et reprend le résidu dans 500 ml d'éther et le .filtre sur Hyflo. On lave le filtrat 10 avec une solution aqueuse d'acide citrique à 10 % en poids/volume et de l'eau, le déshydrate et l'évaporé sous vide pour obtenir une huile de couleur tan. On reprend cette dernière dans 500 ml de méthanol et 50 ml de HC1 concentré et l'on chauffe le mélange au reflux pendant 15 1 heure, puis le refroidit à la température ambiante et l'évaporé sous vide. On reprend le résidu dans 500 ml d'eau et 60 ml de NaOH aqueux 10M, on extrait à 1'éther et on lave les extraits rassemblés avec de l'eau jusqu'à neutralité, les déshydrate et les évapore sous vide. On 20 soumet le résidu à une chromatographie instantanée sur gel de silice en utilisant un mélange éther/éther de pétrole 40-60 (1:1 (jeté), puis 9:1) pour obtenir 32,5 g du produit désiré sous forme d'une huile visqueuse jaune pâle.

25 (f) (E)-N- {3 — E 3—(4-fluorophénoxy)phényl3-1(S)-méthyl-prop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée

On ajoute goutte à goutte, en 45 minutes,

71.4 ml de HC1 aqueux 2M à une solution sous agitation de

32.5 g du produit de l'étape (e) et 29,3 g de cyanate de 30 potassium dans 282 ml de THF, en opérant à 0°C. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange à 0°C pendant 45 minutes, puis on ajoute une solution aqueuse saturée de NaCl et sépare la phase organique. On extrait la phase aqueuse à 1'éther et l'on rassemble l'extrait et la phase 35 organique que l'on lave avec HC1 aqueux 2M et de l'eau, puis déshydrate et ' évapore sous vide pour obtenir un

solide collant que l'on recristallise dans l'acétate d'éthyle pour obtenir 25,8 g de plaquettes incolores ayant un point de fusion de 131-132,5°C (déc.). Le spectre RMN de H à 200 MHz et le spectre IR correspondent au produit 5 désiré. Analyse ' : C-64,37 % (64,54 %) ; H-5,42 % (5,42 %) ; N-8,79 % (8,86 %). [a ]^3 -41,61° (c = 1,0, EtOH).

Exemple de Synthèse 4

Préparation de la (E)-N-{3 — [3-(4-chlorophénoxy)phényl3-10 2(R,S)-méthylprop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée

(a) (E)-1-[3-(4-chlorophénoxy)phényl3butène-3-one

On ajoute 2 ml de NaOH aqueux ION à une solution de 23,3 g de 3-(4-chlorophénoxy)benzaldéhyde (Aldrich) dans 150 ml d'acétone et l'on agite énergiquement. Au bout 15 de quelques minutes d'agitation, la température s'élève à 32°C. On laisse le mélange pendant 5 minutes, puis le verse dans 600 ml de HC1 aqueux 2M et l'extrait avec 400 ml d'un mélange éther/éther de pétrole (1:1). On lave l'extrait avec de l'eau et une solution aqueuse saturée de 20 NaCl, le déshydrate sur MgSO^ et chasse les substances volatiles pour obtenir 1'aldol comme produit. On reprend ce dernier dans 300 ml de toluène, on ajoute 1 g d'acide p-toluènesulfonique et l'on chauffe le mélange pendant 1 heure. On refroidit ensuite le mélange, le lave avec une 25 solution aqueuse 1 saturée de NaHCO^ et une solution aqueuse saturée de NaCl, le déshydrate sur MgSO^ et chasse les substances volatiles. On élue le résidu à travers une colonne de gel de silice en utilisant un mélange chlorure de méthylène/éther de pétrole 40-60 (1:1, puis 3:1) et 30 l'on chasse les substances volatiles de l'éluat pour obtenir 19,0 g du produit désiré.

(b) Oxime de (E)-l-[3-(4-chlorophénoxy)phényl3butène-3-one

On reprend 19,0 g du produit de l'étape (a) et 6,9 g de chlorhydrate d'hydroxylamine dans 100 ml de 35 méthanol, on ajoute 20 ml de pyridine et l'on agite le mélange pendant 1 heure. On chasse ensuite les substances

29

volatiles du mélange, on redissout le résidu dans 200 ml d'éther, le lave avec HC1 aqueux 2M et une solution aqueuse saturée dé NaCl, le déshydrate sur MgSO^ et chasse les substances volatiles pour obtenir 20,3 g du produit 5 désiré.

(c) (E)-N- {l-méthyl-3-[3-(4-chlorophénoxy)phényl3-prop-2-ényl}hydroxylamine

On reprend 20 g du produit de l'étape (b) dans 100 ml de méthanpl et l'on ajoute 31,3 g d'acide oxalique. 10 On refroidit le mélange dans un bain de glace et l'on ajoute par portions 22 g de cyanoborohydrure de sodium, sous N2, en une période de 3 heures. On agite le mélange pendant encore 1,5 heure, puis on ajoute un supplément de 2 g de cyanoborohydrure de sodium et l'on poursuit 1'agi-15 tation pendant encore 0,5 heure. On chasse les substances volatiles du mélange et l'on partage le résidu entre 300 ml d'acétate d'éthyle et 300 ml d'eau. On sépare la phase organique, la lave avec une solution aqueuse saturée de NaHCOg et une solution aqueuse saturée de NaCl, puis on 20 en chasse les substances volatiles pour obtenir . 1'hydroxylamine brute.

(d) (E)-N-{l-méthyl-3-[3-(4-chlorophénoxy)phényl3-prop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée

On reprend une portion de 6,0 g du produit de 25 l'étape (c) dans 60 ml de THF et l'on ajoute, à 0°C, 4,9 g de cyanate de potassium. Après 15 minutes, on ajoute goutte à goutte 20 ml de HC1 aqueux 5M et l'on agite le mélange pendant 10 minutes. On ajoute ensuite 100 ml d'une solution aqueuse saturée de NaCl et 100 ml d'éther, et 30 l'on sépare la phase organique, la lave avec 100 ml de HC1 aqueux 2M et 100 ml d'une solution aqueuse saturée de NaCl, la déshydrate sur MgS04 et on en chasse les substances volatiles pour obtenir le produit désiré que l'on recristallise dans un mélange acétate d'éthyle/éther de 35 pétrole. Quantité obtenue : 4,4 g ; P.F. 132-135°C.

30

Exemple de Synthèse 5

Préparation de la (E)-N-{3-[3-(4-chlorophénoxy)phényl3-1(S)-méthylprop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée

(a) (E)-l-[3-(4-chlorophénoxy)phényl3but-l-ène-3-one

5 On agite sous N2 a 50-55°C pendant 20 heures un mélange de 50,0 g de 3-(4-chlorophénoxy)benzaldéhyde (Aldrich), 35,7 g d'acétylméthylphosphonate de diméthyle (Lancaster) et 59,4 g de K2C03 dans 300 ml de THF. On filtre le mélange refroidi, lave le résidu avec THF et 10 évapore sous vide les filtrats rassemblés pour obtenir une huile orangée que l'on soumet à une chromatographie instantanée à travers une colonne de gel de silice en utilisant un mélange éther/éther de pétrole (1:1 en volume) comme éluant pour obtenir 52,8 g du produit désiré sous 15 forme d'une huil4 visqueuse jaune pâle.

(b) (E)-1(R)-méthyl-3-[3-(4-chlorophénoxy)phényl3-prop-2-ène-l-ol

On ajoute simultanément, sous N2, 96 ml de BH2.THF (1,0M) et une solution de 52,7 g du produit de 20 l'étape (a) dans THF (volume total 96 ml) à 33 ml d'une solution sous agitation de (S)-3,3-diphénylpyrrolo-[1,2-c][1,3,23oxazaborolidine dans THF (0,3M, préparée par le mode opératoire décrit dans JOC 5_3, 2861 (1988)). Lorsque les additions sont terminées, on agite le mélange 25 à la température ambiante pendant 15 minutes, puis le verse sur un mélange de 300 mg de glace et 300 ml de HC1 aqueux 2M, l'agite pendant 30 minutes et l'extrait à 11éther (3 x 300 ml). On lave les extraits rassemblés avec 200 ml de HC1 aqueux 2M, 200 ml d'une solution aqueuse 30 saturée de NaHCO^ et 200 ml d'eau, les déshydrate sur Na2S04 et les évapore sous vide pour obtenir 55,3 g du produit désiré sous forme d'une huile visqueuse jaune qui cristallise partiellement dans un mélange éther/éther de pétrole 40-60 (1:1 en volume). On sépare la liqueur-mère 35 par décantation et la soumet à une chromatographie instantanée à travers une colonne de silice pour obtenir 25,7 g

du produit désiré sous forme d'une huile jaune pâle ; [o]q3'5 +8,7° (c = 3,0, EtOH). Le spectre RMN de 1H à 200 MHz et le spectre IR correspondent à la structure proposée.

5 (c) (E)-N,O-bis(t-butoxycarbonyl)-N-{1(S)-méthyl-3—[3—(4-chlorophénoxy)phényljprop-2-ène-l-yl}-hydroxylamine

On ajoute une solution de 24,5 g de ADDE dans 50 ml de toluène à un mélange sous agitation de 25,7 g du 10 produit de l'étape (b), 22,9 g de N,O-bis(t-butoxycarbonyl ) hydroxylamine (Fluka) et 36,8 g de triphénylphosphine dans 375 ml de toluène, en opérant entre -65 et -70°C. Lorsque l'addition est terminée, on agite le mélange pendant 4 heures entre -65 et -70°C, puis on ajoute un 15 supplément de 5,0 g de triphénylphosphine, puis un supplément de 3,3 g de ADDE et l'on agite le mélange pendant une heure de plus entre -65 et -70°C. On évapore sous vide le mélange réchauffé pour obtenir une huile brune que l'on soumet ensuite à une chromatographie instantanée successi-20 vement à travers deux colonnes de gel de silice en utilisant respectivement du. DCM et un mélange DCM/éther de pétrole 40-60/éther (3:6:0,25 en volume) comme éluants pour obtenir 20,3 g du produit désiré sous forme d'une huile visqueuse jaune. 25 (d) (E)-N-{1(S)-méthyl-3-[3-(4-chlorophénoxy)phényl]-prop-2-ène-l-yl }-hydroxylamine

On ajoute 28 ml d'acide trifluoracétique à une solution sous agitation de 20,3 g du produit de l'étape (c) dans 112 ml de DCM, en opérant sous ^ à 0°C. Lorsque 30 l'addition est terminée, on agite le mélange à la température ambiante pendant 3 heures, puis on ajoute 100 ml d'éther et 100 ml d'eau. On ajoute 32 ml de NaOH aqueux 10N au mélange sous agitation énergique, en opérant à 0°C. On alcalinise le mélange avec un excès d'une solution 35 aqueuse saturée de NaHCO^, on l'extrait avec 200 ml d'éther et on lave l'extrait avec 100 ml d'une solution

32

aqueuse saturée de NaHCC^ et 2 x 100 ml d'eau, puis le déshydrate sur Na2SC>4 et 1 ' évapore sous vide pour obtenir une huile visqueuse jaune que l'on soumet à une chromatographie instantanée à travers une colonne de silice en 5 utilisant un mélange éther/éther de pétrole (4:1) pour obtenir le produit désiré. P.F. 83-84°C ; Ca]^Q -31,1° (c = 1,2, CHC13).

(e) (E)-N-{1(S)-méthyl-3-[3-(4-chlorophénoxy)phényl]-prop-2-ène-l-yl}-N-hydroxy-urée 10 On reprend une portion de 0,29 g du produit de l'étape (d) dans 10 ml de THF et, à 0°C, on ajoute 0,25 g de cyanate de potassium. Au bout de 15 minutes, on ajoute goutte à goutte 2 ml de HC1 aqueux 2M et l'on agite le mélange pendant 2 heures. On ajoute ensuite 50 ml d'une 15 solution aqueuse saturée de NaCl et 50 ml d'éther et l'on "sépare la phase organique, la lave avec 50 ml d'une solution aqueuse saturée de NaCl, la déshydrate sur MgSO^ et en chasse les substances volatiles pour obtenir le produit désiré que l'on recristallise dans un mélange acétate 20 d'éthyle/éther de pétrole. Quantité obtenue : 0,26 g ; P.F. 119-120°C ; [a]q3 -40,0° (c = 1,0, EtOH).

d

33

Exemple de synthèse 6

Préparation du sel sodiaue de la (E)-N-r3-T3-(4-fluorophénoxy)phénvll-1(R.S)-méthvlprop-2-ène-l-vll-N-hvdroxv-urée.

On dissout 1,0 g du composé de l'exemple de synthèse 1 dans un mélange d'une solution aqueuse de NaOH (0,11 g dans 25 ml d'eau) et de 30 ml de méthanol. On évapore le méthanol sous pression réduite et on lyophilise la solution restante. On obtient ainsi le produit voulu sous la forme d'un solide crémeux.

Spectre de RMN à 200 MH3 (DMSO -dg,ppm) : 1,10-1,21 (3H, d, -CH3), 4, 75-4, 92 (1H, m, ~CH-) , 5,27-6,14 (2H, si, -NH2), 6,22-6,51 (2H, s, . -HOCH-) et 6, 69-7, 37 (9H, m, aromatique); pas de signal -OH.

EXEMPLES DE FORMULATIONS PHARMACEUTIQUES

Dans les formulations suivantes, 11"ingrédient actif" est un quelconque composé de l'invention (tel que défini ci-dessus, par exemple, l'un quelconque des composés des Exemples de Synthèse 1 à 5).

Exemple A : Comprimé

Par comprimé

Ingrédient actif 5,0 mg

Lactose 82,0 mg

Amidon 10,0 mg

Polyvinylpyrrolidone 2,0 mg

Stéarate de magnésium 1,0 mg

Mélanger ensemble l'ingrédient actif, le lactose et l'amidon. Granuler les poudres en utilisant une solution de polyvinylpyrrolidone dans de l'eau purifiée.

î

34

Sécher les granulés, ajouter le stéarate de magnésium et comprimer pour produire des comprimés pesant chacun 100 mg.

Exemple B : Pommade 5 Ingrédient actif 1,0 g

Vaseline pute, jusqu'à 100,0 g

Disperser l'ingrédient actif dans un petit volume du véhicule. Incorporer progressivement la dispersion résultante dans la masse pour former un produit lisse 10 et homogène. En remplir des tubes métalliques compressibles .

Exemple C : Crème à Usage Topique

15

Ingrédient actif

O 1—1

g

Polawax GP 200

20 ,0

g

Lanoline anhydre

2,0

g

Cire d'abeilles blanche

2,5

g

Hydroxybenzoate de méthyle

0,1

g

Eau distillée, jusqu'à

100,0

g

Chauffer ensemble le Polawax, la cire d'abeilles 20 et la lanoline à 60°C. Ajouter une solution d'hydroxybenzoate de méthyle. Homogénéiser en agitant à grande vitesse. Laisser la température descendre à 50°C. Ajouter et disperser l'ingrédient actif. Laisser refroidir sous agitation à faible vitesse.

25 Exemple D : Lotion à Usage Topique

Ingrédient actif 1,0 g

Monolaurate de sorbitanne 0,6 g

Polysorbate 20 0,6 g

Alcool cétostéarylique 1,2 g

30 Glycérine 6,0 g

Hydroxybenzoate de méthyle 0,2 g

Eau purifiée B.P. (Pharmacopée Britannique), jusqu'à 100,00 ml

Dissoudre 1'hydroxybenzoate de méthyle et la 35 glycérine dans 70 ml d'eau à 75°C. Faire fondre ensemble le monolaurate de sorbitanne, le Polysorbate 20 et l'ai-

* *

3 5

cool cétostéarylique à 75°C et les ajouter à la solution aqueuse. Homogénéiser l'émulsion résultante, laisser refroidir sous agitation continue et ajouter l'ingrédient actif sous forme d'une suspension dans l'eau restante.

5 Agiter le tout jusqu'à homogénéité.

Exemple E : Gouttes pour Instillations Oculaires Ingrédient actif 0,5 g

Hydroxybenzoate de méthyle 0,01 g

Hydroxybenzoate de propyle 0,04 g

10 Eau purifiée B.P., jusqu'à 100,00 ml

Dissoudre les hydroxybenzoates de méthyle et de propyle dans 70 ml d'eau purifiée à 75°C et laisser refroidir la solution résultante. Ajouter ensuite l'ingrédient actif et porter la solution à 100 ml avec de l'eau 15 purifiée. Stériliser la solution par filtration à travers une membrane filtrante ayant une taille de pores de 0,22 um et conditionner aseptiquement dans des récipients stériles appropriés.

Exemple f : Solution Injectable 20 Ingrédient actif 10,0 mg

Eau pour injections B.P., jusqu'à 1,0 ml

Dissoudre l'ingrédient actif dans la moitié de l'eau pour injections, puis porter au volume et stériliser par filtration. Distribuer la solution résultante dans des 25 ampoules sous conditions aseptiques.

Exemple g : Capsules de Poudre pour Inhalation Ingrédient actif

(poudre de 0,5-7,0 pm) 4 mg

Lactose (poudre de 30-90 pm) 46,0 mg

30 Mélanger les poudres jusqu'à homogénéité et en remplir des capsules de gélatine dure convenablement dimensionnées (50 mg par capsule).

Exemple H : Produit à atomiser en aérosol pour inhalations Ingrédient actif 35 (poudre de 0,5-7,0 pm) 200 mg

Trioléate de sorbitanne 100 mg

3 6

Saccharinate de sodium

(poudre de 0,5-7,0 jum) 5 mg

Méthanol 2 mg

Trichlorofluorométhane 4,2 g

5 Dichlorodifluorométhane, jusqu'à 10,0 ml

Dissoudre le trioléate de sorbitanne et le méthanol dans le trichlorofluorométhane. Disperser le saccharinate de sodium et l'ingrédient actif dans le mélange et transvaser ensuite celui-ci dans un flacon 10 métallique pour aérosol approprié et injecter le dichlorodif luorométhane par le système de valve. Chaque dose de 100 jul de cette composition apporte 2 mg d'ingrédient actif.

DONNEES BIOLOGIQUES 15 Inhibition de la 5-lipoxygénase "ex vivo"

Des études préliminaires sur des rats et des lapins ont montré que le racémate de l'Exemple de Synthèse 1 et les énantiomères correspondants des Exemples de Synthèse 2 et 3 inhibent efficacement la synthèse stimulée 20 du leucotriène B^ (LTB^), un composé formé à partir .d'acide arachidonique par la voie métabolique de la 5-lipoxygénase.

Après administration du composé à étudier, la concentration de LTB^ dans le plasma est mesurée périodi-25 quement et exprimée par un pourcentage de la valeur témoin moyenne. Le mode opératoire suivi est décrit dans Br. J. Pharmacol., 9_4, 528 (1988) et peut être résumé de la façon suivante. i

Dans les 2 minutes suivant le prélèvement, on 30 stimule des échantillons de 0,5 ml de sang en double exemplaire avec 11ionophore calcique A23187 (concentration finale 15 jug/ml) pendant 30 minutes à 37°C. A la fin de l'incubation, on centrifuge les échantillons (12 000 £ pendant 2 minutes) et l'on retire le plasma acellulaire. 35 On détermine ensuite la concentration plasmatique de LTB^ par un dosage radio-immunologique spécifique.

Les composés des Exemples de Synthèse là 3 ont tous inhibé la synthèse stimulée "ex vivo" de LTB^ pendant plusieurs heures après leur administration. Le composé de administré par voie orale à des lapins à une dose de 2 mg/kg, a inhibé de plus de 50 % la synthèse de LTB^ pendant une période supérieure à 16 heures. Le même composé, lorsqu'il a été administré par voie orale à des rats à'une dose de 10 mg/kg, a inhibé de plus de 50 % la synthèse de LTB^ pendant plus de 10 heures. Les énantiomères des Exemples de Synthèse 2 et 3 ont donné des résultats similaires.

i

Inhibition de la 5-lipoxygénase "in vitro"

On centrifuge du sang prélevé sur des volontaires n'ayant pas pris d'aspirine pour séparer les leucocytes des érythrocytes et des plaquettes. On ajoute 10 jul d'une solution du composé d'essai dans DMSO (concentration finale dans l'intervalle de 0,01-100 pM) à 470 pl de l'ho-mogénat cellulaire et l'on fait incuber le mélange à 3 7°C pendant 5 minutes. On ajoute simultanément des solutions d'acide arachidonique dans du méthanol (10 jul, 25 0 pM, concentration finale 5pM) et de chlorure de calcium dans l'eau (10 pl, lOOmM, concentration finale 2mM) et l'on fait incuber le mélange à 37°C pendant encore 5 minutes. On arrête la réaction par ébullition. On effectue un dosage radio-immunologique du leucotriène B^.

On répète l'expérience en utilisant du sang humain entier stimulé par un ionophore.

Pour les composés des Exemples de Synthèse 1 à 5, les résultats suivants ont été obtenus :

l'Exemple de Synthèse 1, par exemple, lorsqu'il a été

Çl50_ifiM)

Exemple de Synthèse

Homogénat 0 ,20 0,20 0,20

Sang entier 0,15 0,08 0, 08

1

2

3

3 8

Activité anti-oxydante

Comme mesure de l'activité anti-oxydante, on détermine le pouvoir de fixation des radicaux peroxyle présenté par des composés de 11 invention en examinant

5 1'aptitude de chaque composé à inhiber la peroxydation de

1'acide linoléique en utilisant la méthode décrite dans

Biochem. Pharm. _38, 1465 (1989).

Le composé de l'Exemple de Synthèse 1 présente une constante de vitesse apparente (k ) de fixation des

An

10 radicaux peroxyle de 0,408.

Effets d'association avec un AINS

On immunise des lapins blancs mâles de Nouvelle-Zélande (2,5 à 3 kg) par des injections intradermiques de 4 mg d'ovalbumine dans 1 ml d'adjuvant complet de Freund. 15 On immunise de nouveau les animaux 14 jours plus tard de la même manière. Cinq jours après la seconde immunisation, on provoque une arthrite dans 1'articulation du genou droit en injectant 1 ml d'une solution stérile d'ovalbumine (5 mg/ml) dans la cavité articulaire. 20 On mesure le diamètre des articulations (en aveugle avec répartition au hasard) à l'aide de compas à intervalles fréquents après la provocation par l'antigène. On sacrifie les animaux au bout de 14 jours et on lave l'interligne articulaire avec 1 ml de solution saline et 25 prend le fluide résultant pour des numérations leucocytaires totales et différentielles.

On répartit au hasard les animaux sensibilisés en groupes de 5 à 8. On administre le composé de l'Exemple de Synthèse 1, à savoir la (E)-N- l-méthyl-3-C3-(4-fluoro-30 phénoxy)phényl]prop-2-ène-l-yl -N-hydroxy-urée (composé A), en suspension après un broyage à billes de 18 h dans du Celacol à 0,25 % comme véhicule. On dissout 1'indométhacine employée comme anti-inflammatoire non-stéroïdien dans un petit volume de tampon Tris 1M pH 8, puis on porte 35 au volume avec du Celacol à 0,25 %. Les animaux témoins reçoivent du Celacol à 0,25 %. Chaque animal reçoit une ll>

3 9

dose orale (environ 5 ml) de véhicule ou de médicament trois fois par 24 heures. On administre les doses à 8.00 h, 16.00 h et 24.00 h pendant 16-17 jours en commençant 1 h avant l'injection de l'antigène au jour 0. Toutes les 5 doses sont administrées par voie orale par une sonde gastrique. Les groupes se répartissent comme suit : 1-7 : Témoins (5 ml de Celacol à 0,25 % x 3/24 h) 8-14 : 1 mg/kg d'indométhacine dissoute dans du Celacol à 0,25 % x 3/24 h 10 15-21 : 2 mg/kg de composé A en suspension dans du Celacol à 0,25 % x 3/24 h 22-28 : 2 mg/kg de composé A en suspension dans du

Celacol à 0,25 % plus 1 mg/kg d'indométhacine dissoute dans du Celacol à 0,25 /.

15 Enflure articulaire

Chez les animaux témoins, la provocation par l'antigène a entraîné une augmentation du diamètre de l'articulation de 6 à 7 mm passant par un maximum 2 jours après l'injection. L'enflure articulaire a persisté chez 20 le groupe témoin pendant la période de l'expérience (14 jours) et, au moment où les animaux ont été sacrifiés, les diamètres des articulations arthritiques mesuraient environ 5 mm de plus que celui des articulations controlaté-rales. Aucun des traitements médicamenteux n'a réduit 25 l'enflure articulaire pendant les deux premiers jours après l'injection, mais à partir du jour 3, le composé A a réduit l'enflure de jusqu'à 26 % et 1'indométhacine de jusqu'à 53 % comparativement aux témoins traités par le véhicule. Les réductions' les plus fortes et les plus 30 constantes de l'enflure (jusqu'à 72 %) ont été observées dans le groupe recevant une association de composé A et d'indométhacine. Les résultats sont présentés au Tableau 1.

40

TABLEAU 1 ENFLURE ARTICULAIRE (mm)

Durée de A + Indo-

1'arthrite

Composé A

Indométhacine méthacine

Témoin

1

4,6

4,3

3,9

5,6

2

5,2

4,5

4,2

6,0

3

4,6

3,5

3,1

5,7

8

3,5

2,6

1,6

4,3

14

3,2

2,0

1,2

4,3

10 Etudes sur le liquide synovial

On prélève du tissu de la couche bordante de synoviale de l'articulation, et on le fixe, le traite, le sectionne et le colore en vue d'un examen microscopique. Les évaluations histologiques sont effectuées pour la 15 masse totale de couche bordante de synoviale enflammée, l'infiltration de lymphocytes et la teneur en polynucléaires. Les coupes sont examinées en aveugle avec répartition au hasard.

Les liquides synoviaux provenant des articula-

20 tions arthritiques d'animaux témoins contenaient environ

6 ^

10 leucocytes dont environ 80 % étaient des polynucléaires. Le composé A ou 1'indométhacine isolément ont légèrement réduit l'infiltration moyenne de leucocytes dans le liquide synovial, mais la plus forte réduction a 25 résulté du composé A en association avec 1'indométhacine. Les résultats sont présentés au Tableau 2.

TABLEAU 2

LEUCOCYTES (NOMBRE DE CELLULES X 1Q6)

Composé A Indométhacine A + Indométhacine Témoin

30 6,1 7,3 0,9 7,9

Dosage des protéoglycanes du cartilage

On prélève du cartilage articulaire par dissection des extrémités des fémurs et les met à digérer avec de la papaïne avant de mesurer la concentration des gly-35 cosaminoglycanes sulfatés (GAG). La teneur en protéogly-

41

canes est exprimée en pg de GAG/mg de poids humide de cartilage et comparée aux valeurs obtenues avec un cartilage provenant de l'articulation controlatérale témoin.

Le cartilage articulaire retiré par dissection 5 des articulations arthritiques des animaux traités par le véhicule 14 jours après l'injection d'antigène contenait 43 % de protéoglycanes de moins que le cartilage provenant des articulations controlatérales des mêmes animaux. Le composé A ou 1'indométhacine seule ont tous deux réduit la 10 perte de protéoglycanes par le cartilage, mais la plus forte réduction a été observée dans le groupe recevant le composé A et 1'indométhacine. Les résultats sont présentés au Tableau 3.

TABLEAU 3

15 Composé A Indométhacine A + Indométhacine Témoin

34 38 26 43

Evaluation histologique de la couche bordante de synoviale Les nombres de lymphocytes et de cellules totales de la couche bordante de synoviale du groupe 20 recevant à la fois le composé A et 1'indométhacine ont été tous deux nettement réduits. Les résultats sont présentés au Tableau 4.

TABLEAU 4

A + Indo-

25 Composé A Indométhacine méthacine Témoin

Lymphocytes 59 51 36 68

Cellules

Totales 367 365 255 435

Les résultats ci-dessus démontrent l'effet 30 cytoprotecteur du composé A dans l'arthrite, notamment en présence de 1'indométhacine comme anti-inflammatoire non-stéroïdien.

Données toxicologiques

On a administré le composé de l'Exemple de Syn-35 thèse 1 à des souris par voie orale à des doses atteignant

42

300 mg/kg et par voie intrapéritonéale à des doses atteignant 100 mg/kg. On n1 a observé aucun cas mortel et aucun effet délétère grave.

4 3

Claims (10)

1. REVENDICATIONS 1. Procédé pour la préparation d'un composé de formule (I)

   H ^OH

   Ar-O-Ar'-Y-C-N (I)

   I \ 12

   CHg CONR R

   dans laquelle

   10 Ar est un groupe 4-halogénophényle ;

   Ar1 est un groupe 1,3- ou 1,4-phénylène ;

   Y est un groupe (E)-CH=CH- ; et 1 2

   R et R sont choisis indépendamment parmi l'hydrogène et les groupes alkyle en 15 Cx-C4 ;

   caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un composé de formule (II)

   R3NHOH (II)

   20

   3

   dans laquelle R est un groupe de formule

   H

   I

   Ar-O-Ar'-Y-C-

   !

   CH3

   telle que définie ci-dessus, avec un ou plusieurs agents 25 appropriés et dans des conditions de réaction qui conviennent pour effectuer la conversion de l'hydrogène fixé sur N en un groupe CONI^ fixé sur N ;

   et, facultativement, à convertir le composé de formule (I)

   ainsi formé en un sel de base ou dérivé physiologiquement

   30 fonctionnel correspondant.
2. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé

   en ce que, dans la formule (I),

   Ar est un groupe 4-fluorophényle ; et/ou

   Ar1 est un groupe 1,3-phénylène ; et/ou 1 2

   35 R et R sont tous deux de l'hydrogène.

   44
3. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que ledit composé de formule (I) est la (E)-N-^l-méthyl-3-[3-(4-fluorophénoxy)phényl]prop-2-ène-l-ylJ-N-hydroxy-urée sous l'une ou l'autre de ses formes énantio-

   5 mères (R) et (S) ou en un mélange de celles-ci en toutes proportions.
4. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le composé de formule (II) est optiquement actif et le composé de formule (I)

   10 est obtenu sous sa forme énantiomère (R) et sensiblement exempt de l'isomère (S).
5. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le composé de formule (II) est optiquement actif et le composé de formule (I)

   15 est obtenu sous sa forme énantiomère (S) et sensiblement exempt de l'isomère (R).
6. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le composé de formule (II) est optiquement inactif et le composé de formule (I)

   20 est obtenu sous sa forme racémique.
7. 7. Procédé de préparation d'une formulation pharmaceutique, caractérisé en ce qu'il consiste :

   (a) à préparer un composé tel que défini dans la revendication 1 par un procédé selon l'une quelconque

   25 des revendications 1 à 6 ; et

   (b) à mélanger ou dissoudre/mettre en suspension le produit de l'étape (a) et, facultativement, un ou plusieurs autres ingrédients pharmacologiquement actifs avec ou dans un support ou excipient pharmaceutiquement

   30 acceptable.
8. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'étape (b) comprend le mélange ou la dissolution/mise en suspension d'un ou plusieurs autres ingrédients pharmacologiquement actifs choisis parmi les anti-

   35 biotiques, les antifongiques, les agents antiviraux, les antihistaminiques et les anti-inflammatoires non stérox-

   45 '

   diens avec ou dans le support ou excipient.
9. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'étape (b) comprend le mélange ou la dissolution/mise en suspension d'un ou plusieurs anti-inflam-

   5 matoires non stéroïdiens avec ou dans le support ou excipient .
10. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9, caractérisé en ce qu'il comporte une étape supplémentaire (c) dans laquelle le produit de l'étape (b)

    10 est amené à une forme adaptée à une administration orale, topique, pulmonaire ou intra-articulaire.

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