MC1727A1 - Derives de cholecalciferol - Google Patents

Description

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L'invention concerne de nouveaux dérivés du cholécalciférol, un procédé pour leur fabrication, de nouveaux intermédiaires dans ce procédé et des médicaments basés sur les dérivés de cholécalciférol précités.

Les dérivés du cholécalciférol selon l'invention sont le 26 ,26 ,26-trif luoro-1oi,25-dihydroxycholécalciférol, . en particulier sous forme de l'épimère 25R essentiellement exempt d'épimère 25S et de l'épimère 25S essentiellement exempt d'épimère 25R. Selon l'invention, ces composés sont préparés en faisant réagir un composé, de formule

û

dans laquelle Y est Si trialkylé, en particulier où l'atome de C hydroxylé possède la configuration R ou S, avec le carbanion de l'oxyde de [3S-(3o*,5/2>,Z]-2-[2-méthylène-3 ,5-b i s[( 1 ,1-diméthyléthyl)diméthylsilyloxy]cyclohexylidène]-éthyldiphénylphosphine et en éliminant les groupes protecteurs silyle.

La réaction ci-dessus peut avoir lieu à des températures réduites, par exemple inférieures à -50°C, de préférence S environ -78°C, sous une atmosphère inerte, par exemple une atmosphère d'argon, dans un solvant inerte comme un éther cyclique, de préférence le tétrahydrofuranne (THF). La transformation de l'oxyde.de phosphine en carbanion correspondant peut être réalisée en traitant d'abord l'oxyde de phosphine avec un alky 1-1ithium, par exemple le n-butyl-1ithium.

L'éliminations du groupe protecteur trialkylsilyle peut être réalisée en traitant le produit de réaction avec une résine échangeuse de cations dans des conditions am-

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i biantes, dans un solvant comme un alcane halogéné, de préférence le chlorure de méthylène. Les produits obtenus peuvent être purifiés, par exemple par chromatographie sur gel de silice.

5 Ainsi qu'on l'emploie dans toute la description et dans les revendications, l'expression "alkyle inférieur" désigne un groupe alkyle à chaîne droite ou ramifiée ayant 1-8 atomes de C, par exemple le méthyle, l'éthyle, le n-propyle, l'i-propyle et le t-butyle. "Aryle" signifie le 10 phényle éventuellement substitué par un ou des groupes alkyle, halogène, nitro, cyano et trif1uorométhyle. Des exemples de groupes arylalkyle sont le benzyle et le phénéthyle.

Les matières premières de type indénone utilisées dans le procédé mentionné ci-dessus peuvent être préparées 15 de la manière suivante :

Le [ 1 R-[ 1£, Os* , 3a<y,4a/?>, 7a£] ] -octahydro-/^», 7a-diméthyl- 4-[ (1,1-diméthyléthyl Jdiméthylsi lyloxy]-<*-éthény 1 -1H-indène-1-éthanol est transformé en[ 1 R-[ 1/î>(R*),3ao/,4^, -7a/>]]-1 -(4-chloro-1-méthyl-2-butênyl)octahydro-4-[(1,1-di-20 méthyléthyl)diméthy1 sily1oxy]-7a-méthy1 -1 H-indène par un traitement avec du chlorure de thionyle suivi de pyridine. On fait ensuite réagir le chlorure allylique obtenu avec un sel d'acide arylsulfinique, par exemple le sel sodique de l'acide benzène-suif inique, pour obtenir le composé aryl-25 sulfonyle correspondant, par exemple le [ 1R-[iyi»(R*) ,3aoi,-4/i, 7âfi] ]-1-[(4-phénylsulfonyl)-1-méthyl-2-butényl]octa-hydro-4-[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyloxy]-7a-méthy 1-1H-indène. L'indène sus-mentionné est ensuite soumis à une hydrogénation catalytique en utilisant un catalyseur palla-30 dium sur charbon (Pd/C) pour donner le composé à chaîne latérale saturée correspondant [ 1 R-[ 1^,(R*) ,3aoM^,7a£]]-1 -[4-(phénylsulfony1)-1-méthylbutyl]-octahydro-4-[(1,1-d iméthyléthyl )diméthyl si lyloxy]-7a-méthyl-1 H-indène. La finition de la chaîne latérale pour produire un composé de for-35 mule I ci-dessous est réalisée en faisant réagir le carba-

9

3

nion du composé sulfonyle sus-mentionné, formé par traitement avec le n-butyl-1ithium ou le 1ithium-diisopropyl-amide, avec la trifluoroacétone.

Dans le composé de formule

10

15

20

25

30

obtenu, dans laquelle X est un groupe aryle et R

2 3 R et R

35

sont un groupe alkyle inférieur, aryle ou arylalkyle, de

1 3

préférence X est le phényle, R et R sont le méthyle et ?

R est le t-butyle.

Un composé de formule I, sous forme d'un mélange d'épimères en position 4 sur la chaîne latérale, peut être déarylsulfonylé avec un métal alcalin ou avec un amalgame de métal alcalin, en présence d'un phosphate de métal alcalin, dans un solvant organique inerte comme un alcanol inférieur, un éther cyclique ou, de préférence, un de leurs mélanges. Les réactifs préférés sont l'amalgame de sodium et 1'hydrogénophosphate dipotassique. Parmi les solvants préférés figurent le méthanol, le THF et leurs mélanges. L'addition d'amalgame de métal alcalin est réalisée sous refroidissement, de préférence à des températures inférieures à 0°C, mieux encore à environ -20°C.

On peut faire réagir le produit de réaction, après purification, par exemple par chromatographie sur gel de silice, avec un agent d'époxydation comme un peracide, de préférence l'acide trifluoroperacétique, à des températures réduites, par exemple à 0°C. De préférence, la réaction est réalisée en présence d'une base minérale, par exemple une

4

base de type phosphate, de préférence 11hydrogénophosphate dipotassique, dans un solvant organique inerte, par exemple un solvant de type alkylique ou arylique halogéné, de préférence le chlorure de méthylène. Dans les conditions de la 5 réaction, une partie du produit obtenu peut être constitué par le produit désilylé. Ainsi, le produit de réaction est un mélange des composés protégé et non protégé de formule

15

dans laquelle R1 est -Si(R1,R2,R3) ou H, et R1, R2 et R3 sont tels que ci-dessus.

Après purification, par exemple par chromatographie 20 éclair, un des constituants du mélange ci-dessus ou les deux constituants de formule II peuvent être traités avec un agent réducteur, par exemple un métal alcalin ou un hy-drure métallique, de préférence l'hydrure de lithium-aluminium, dans un solvant organique inerte, par exemple un 25 éther alkylique comme l'éther éthylique, de préférence dans des conditions ambientes et sous une atmosphère inerte, par exemple d'argon. Il est ainsi produit les composés protégés et/ou non protégés de formule

35

dans laquelle R4 est tel que ci-dessus, sous forme d'un mélange des épimères en position 5 dans la chaîne latérale. Les composés de formule III peuvent être purifiés, par exem pie par chromatographie sur gel de silice. Les composés épi mères de formule III peuvent alors être traités avec une ré sine échangeuse de cations pour déprotéger tout composé si-lylé et le mélange des épimères peut être séparé par chromatographie liquide à hautes performances, après purification, par exemple par chromatographie liquide sur gel de silice. Pour l'obtention de produits finaux sous forme de mélanges des épimères, il suffit d'éliminer l'étape de chro matographie liquide à hautes performances .

Le composé déprotégé de formule III peut ensuite être traité avec un agent oxydant, comme un sel chromate, en par ticulier avec une aminé organique basique, par exemple un halogénochromate de pyridinium, de préférence le chlorchro-mate de pyridinium. La réaction est commodément réalisée dans des conditions ambiantes, dans un solvant inerte comme un alcane halogène, par exemple un chloroalcane, de préférence le chlorure de méthylène. On obtient la cétone de for mule IV ci-dessus, dans laquelle Y représente l'hydrogène.

La cétone obtenue peut ensuite être traitée sans être isolée avec un réactif introduisant un groupe protecteur triméthylsilyle sur la chaîne latérale hydroxy, par exemple avec la triméthylsilylimidazole, à température ambiante dans une atmosphère inerte. Les composés protégés obtenus répondent à la formule IV dans laquelle Y est Si trialkylé.

Les composés de formules I et IV dans lesquelles Y est l'hydrogène ou un Si trialkylé sont nouveaux et font à ce titre partie de l'invention.

Le ?S,26,26-trie

Le 26,26, 2 6-trif luoro-l<<, 2 5-dihydroxychlolécalcif érol possède une activité analogue à celle de la vitamine D3 et présente des effets anti-prolifératifs et inducteurs de différentiation. Ces effets anti-prolifératifs et inducteurs de différentiation sur des cellules HL-60 peuvent

être mis en évidence in vitro en utilisant des techniques connues, comme celles décrites dans Progress in Cancer Research and Therapy, vol. 23 : Maturation Factors and Cancer, Ed. M.A.S. Moore, Raven Press, N.Y. 1982 ; Nature 270 (1977) 347-9 et Blood 54 (1979) 429-39. Les résultats obtenus sont indiqués sur le tableau suivant :

^ I ^

Concentration Prolifération Différentiation'

-9

(x 10 molaire)

Cellules HL-60 % réduction Réduction du NBT

Composé

par ml x 10~4

du nombre des cellules cellules formazan "+"/ totàl cellules comptées

%" + "

Aucun (témoin du milieu)

84,7

+

4.3

—

3/368

Cl

Véhicule (0,1% d'

' éthanol)

78,9

+

4.9

0

4/356

1

Composé 25R

1

59,1

+

1.9

30

81/353

23

II

10

27,2

+

0.3

68

299/318

94

II

100

22,9

+

1.0

73

360/367

98

II

1000

22,0

+

0.7

74

340/344

99

Composé 25S

1

60,2

+

3.9

29

84/334

25

II

10

27,0

+

1.4

68

338/354

96

tl

100

22,3

+

2.6

74

323/330

98

II

1000

20,2

+

0.5

76

353/358

99

a La concentration du véhicule dans toutes les cultures expérimentales est de 0,1%, v/v d'éthanol.

b La viabilité des cellules dans toutes les cultures est supérieure à 91%. Toutes les cultures sont initiées avec 2xl04 cellules HL-60 par ml.

D

8

Les résultats du tableau indiquent que le 26,26,26-trifluoro-1d,25-dihydroxycholécalciférol, en particulier sous la forme 25R ou 25S, restreint .la prolifération des cellules tumorales promyélocytiques humaines in vitro,

tout en n'étant pas toxique vis-à-vis des cellules. En outre, les cellules cultivées dans de faibles concentra-

_Q Q

tions de ces composés (10 à 10 molaire) ont été induites à se différencier vers un type de cellule plus mûre comme le prouve l'acquisition d'une activité enzyma-tique et d'une fonction cellulaire. On peut prévoir que les composés ci-dessus sont utiles dans le traitement des maladies comme les maladies néoplasiques qui sont dues en partie à la prolifération et/ou la différentiation aberrante des cellules.

Les composés ci-dessus peuvent être administrés en doses d'environ 0,10-3,0, de préférence 0,25-2,0, jjg par jour pour le traitement des maladies telles que l'ostéo-porose, 1'ostéodystrophie, l'ostéopénie induite par les stéroîdes, l'hypoparathyroïdie, le rachitisme hypophospha-témique et l'ostéomalacie hypophosphatémique, qui sont caractérisées par des niveaux sub-normaux de 1ot,25-dihydroxy-cholécalciférol produit de manière endogène. Les composés ci-dessus peuvent être administrés en doses analogues pour le traitement des maladies .. prol ifératives comme la leucémie. Ils peuvent être administrés par voie orale, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, intrapéritonéale ou topique. Ils peuvent être formulés en compositions, comme en comprimés, capsules ou élixirs pour l'administration orale ou en solutions ou en suspensions stériles pour l'administration parentérale. Environ 0,10-3,0, de préférence 0,25-2,0, fjg des composés ci-dessus peuvent être mélangés sous forme de dose unitaire avec un véhicule, un support, un conservateur, un stabilisant, un liant, par exemple la gomme adragante, un excipient, par exemple le phosphate de calcium, un agent de désintégration, par exemple l'amidon

9

de maïs, un lubrifiant, par exemple le stéarate de magnésium, un tampon, un anti-oxygène, un agent édulcorant, par exemple le saccharose, un agent aromatisant, par exemple la menthe poivrée, pharmaceutiquement acceptable. Diverses 5 autres substances peuvent être présentes comme enrobages, par exemple le Shellac, ou pour modifier de toute autre manière la forme physique de la dose unitaire.

Les composés ci-dessus peuvent aussi être administrés pour traiter la fièvre lactée des animaux ruminants 10 gravides avant la parturition en doses de 200-1000, de préférence de 25-200, jjg/jour au moyen de formulations classiques.. Par exemple, les compositions stériles pour injection et/ou administration topique peuvent être formulées en dissolvant ou en mettant en suspension les composés ci-dessus 15 dans un véhicule, par exemple un mélange à 10-20% d'éthanol (ou de propylène-glycol) dans l'eau, une huile végétale naturelle, par exemple'l'huile de sésame, ou un véhicule gras synthétique, par exemple l'oléate d'éthyle. Elles peuvent aussi être formulées pour l'injection intramusculaire en 20 mettant en suspension 100-1500 pg de ces composés dans un véhicule, par exemple une huile végétale ou une solution à 80-95% d'éthanol (ou de propylène-glycol ) dans l'eau. Elles peuvent aussi être formulées pour l'administration orale en en incorporant 25-200 pg dans des pastilles d'acide gras. 25 Exemple 1

a) On refroidit à 0°C une solution de 2,9 g (8,22 mmo-les) de [ 1 R-[ 1 (!>, OS* ,|^S*] ,3ao*,4a/?>, 7a^] ]-octahydro-^, 7a-d i -méthy 1 -4-[ ( 1 ,1 - d iméthylêthyl ) d iméthy 1 s i ly 1 oxy ] -ot-éthény 1 -1H-indène-1-éthanol dans 100 ml d'éther anhydre et on trai-30 te goutte à goutte et sous argon avec 2,76 ml (37,84 mmo-les) de chlorure de thionyle, suivi de 0,276 ml de pyridine. On agite le mélange à 0°C pendant 2 heures, puis on le trempe en ajoutant 50 ml d-'une solution 2N de tartrate de potassium et de sodium. On sépare la phase éthérée et on 35 extrait la phase aqueuse avec de l'acétate d'éthyle. Les

<

10

phases organiques mises en commun sont lavées avec de l'acide chlorhydrique 1N, de l'eau, du bicarbonate de potassium 2N et de la saumure, séchées et évaporées. On évapore le solvant sous vide et on purifie le résidu par chromato-5 graphie sur silice avec de 1'hexane-acétate d'éthyle pour obtenir 2,9 g (rendement 95%) de [1R-[1£(R*) , 3aoi, 4/b, 7a/*>] ] -1-(4-chloro-1-méthy1-2-butény1)octahydro-4-[(1, 1-d iméthy 1 -éthy1)diméthy1 silyloxy]-7a-méthy1 -1 H-indène pur sous forme d'un solide à bas point de fusion.

10 b) On traite une solution de 2,9 g (7,81 mmoles) du chlorure allylique de 1a) dans 130 ml d1hexaméthylphospho-ramide avec 10,1 g (61,52 mmoles) de sel sodique de l'acide benzène-suif inique et on agite à la température ambiante sous argon pendant 24 heures. On ajoute ensuite 130 ml 15 d'eau glacée et, après avoir agité pendant 30 minutes, le mélange est extrait avec de l'acétate d'éthyle, les extraits mis en communsont lavés à l'eau, séchés et évaporés à siccité et le résidu purifié par chromatographie à travers de la silice avec de 1'hexane-acétate d'éthyle pour 20 donner 3,5 g (rendement 94%) de [ 1 R-[ 1/MR*) ,3a«*,4£,7a/£]]-1-[4-phénylsulfonyl)-1-méthy1-2-buténylJoctahydro-4-[(1 , 1 -diméthyléthyl)diméthylsilyloxy]-7a-méthyl-1H-indène pur, sous forme d'un solide à bas point de fusion.

c) Une solution de 1,00 g (2,10 mmoles) du produit de 25 1b) dans 40 ml d'éthanol est hydrogénée à la température ambiante et sous la pression normale sur 350 mg de Pd à 10%/C. Après 2 heures, on filtre le catalyseur et on évapore le filtrat à siccité pour obtenir 1,00 g de [1R-[1/?>(R*)93ao<,4£, 7a/5j]-1-[4-(phénylsulfonyl)-1-méthyl-30 butyl]-octahydro-4-[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyloxy]-7a-méthy1-1 H-indène.

d) On refroidit à 0°C une solution de 0,440 ml (3,14 mmoles) de diisopropylamine dans 10 ml de THF anhydre et on la traite goutte à goutte sous argon avec 1,87 ml (2,99

35 mmoles) d'une solution 1,6M de n-butyl-1ithium dans l'hexa-

ne. Après une agitation de 15 minutes à 0°C, on refroidit la solution obtenue à -78°C et on la dilue avec 10 ml de THF anhydre. On la traite ensuite goutte à goutte avec une solution de 1,00 g (2,09 mmoles) de la sulfone de 1c) dans 15 ml de THF et on l'agite à -78°C pendant 5 minutes, puis à 0°C pendant 30 minutes. Après un nouveau refroidissement à -78°C, le mélange est traité avec 0,50 ml (5,59 mmoles) de 1 ,1 ,1-trif 1uoroacétone et agité à la même température pendant 1,5 h. On le trempe ensuite par addition de 30 ml d'un mélange 1 : 1 de tartrate de potassium et de sodium 2N et de bicarbonate de potassium 2N, on le laisse revenir à la température ambiante et on l'extrait au chlorure de méthylène. Les extraits organiques sont lavés avec de la saumure, séchés et évaporés à siccité. On purifie le résidu par chromatographie à travers de la silice avec de l'hexane-acétate d'éthyle, ce qui donne 0,71 g (rendement 72%) de [ 1 R-[ 1/?>( R*), 3aot,4^>, 7a^>] ] - octahydro-1 - (6,6,6-trifluoro-5-hydroxy-1,5-diméthyl-4-phény1 sulfonylhexy1)-4[(1,1-d iméthy1 éthy1)diméthy1 sily1oxyj-7a-méthy1 -1 H-indène sous forme d 1 une huile incolore.

e) On traite une solution de 0,56 g (0,95 mmole) de la sulfone de 1d) sous forme de mélange épimère, dans 18 ml de THF et 18 ml de méthanol, avec 10 g d'hydrogénophosphate dipotassique et, après refroidissement à -20°C, avec 11 g d'amalgame de sodium à 6%. Après une agitation à -20°C pendant 10 minutes, on ajoute 30 ml de saumure. On laisse le mélange revenir à la température ambiante et on l'extrait avec de l'acétate d'éthyle. Les extraits organiques sont lavés avec de la saumure, séchés et évaporés à siccité. On purifie le résidu par chromatographie à travers du gel de silice avec de 11hexane-acétate d'éthyle pour obtenir 0,40 g de [ 1R-C\[i{ R*) ,3a^,4/?, 7a/?>] ]-octahydro-1 -[6 ,6 ,6-tr if 1 uoro-1,5-diméthyl-4-hexényl]-4[(1,1-diméthyléthyl)diméthylsilyl-oxy]-7a-méthyl-1H-indène sous forme d'un mélange huileux incolore d'isomères géométriques.

12

f) On refroidit à 0°C une solution de 0,260 ml (1,84 mmoles) d'anhydride trifluoroperacétique dans 5 ml de chlorure de méthylène anhydre, on la traite avec 0,052 ml (1,89 mmoles) de peroxyde d'hydrogène à 90% et on l'agite pen-

5 dant 30 minutes. On ajoute la solution obtenue à 400 mg de l'oléfine de 1e) (0,92 mmole) et 1,5 g d'hydrogénophosphate dipotassique dans 5 ml de chlorure de méthylène à 0°C.

Après l'addition, on laisse le mélange revenir à la température ambiante pendant 30 minutes, on le trempe avec 5 mi 10 d'une solution aqueuse à 10% de sulfite de sodium, on dilue avec une solution aqueuse à 10% de bicarbonate de sodium et on extrait au chlorure de méthylène. Les extraits organiques sont lavés avec de la saumure, séchés et évaporés pour donner 190 mg de produit protégé pur, le [ 1 R-[ 1 ,£(R*),3ao/,-15 4/^,7a/ô]]-octahydro-1-(6 ,6 ,6-trif luoro-1 ,5-diméthy 1 -4 ,5-époxyhexy1)-4-[(1,1-diméthy1éthy1)d iméthylsilyloxy]-7a-méthyl-1H-indène sous forme d'un mélange d'épimères et 140 mg de produit désilylé. Après une purification par chromatographie éclair, les deux produits peuvent être utilisés 20 dans l'étape suivante.

g) A une suspension de 100 mg (2,63 mmoles) d'hydrure de lithium-aluminium dans 3 ml d'éther anhydre, on ajoute une solution de 190 mg (0,42 mmole) du produit protégé de 1f) dans 2 ml d'éther, à la température ambiante, sous at-

25 mosphère d'argon. Le mélange obtenu est agité pendant 24 heures, puis trempé par addition de tartrate de potassium et de sodium aqueux 2N et extrait à l'éther. Les extraits sont lavés avec de la saumure, séchés et évaporés pour donner, après purification sur gel de silice avec de l'hexane-30 acétate d'éthyle, 175 mg de [1R-[1jb(R*) ,3ao<,4jÉ»,7a^]]-

octahydro-1-(6,6,6-trifluoro-5-hydroxy-1,5-diméthylhexyl)-4-[(1 ,1-d iméthy1éthy1)d iméthy1 s ily1oxy]-7 a-méthy1-1H-indène pur huileux épais sous forme d'un mélange d'épimères.

h) On traite une solution de 175 mg (0,39 mmole) du 35 mélange d'épimères de 1g) dans 9 ml de méthanol avec 2,8 g

1

13

d'une résine échangeuse de cations (AG 50W-X4, mesh 200-400, Bio-Rad Laboratory, Richmond, CA) et on l'agite à la température ambiante pendant 12 jours. La résine est éliminée par filtration et lavée avec du méthanol. Les f i 1 -5 trats sont évaporés à siccité. Le résidu est purifié par filtration à travers du gel de silice avec de 1'hexane-acétate d'éthyle. Les deux épimères sont séparés par chromatographie liquide sur gel de silice (colonne de gel de silice Magnum 9 Partisil-10, Whatman Inc., Clifton, NJ) 10 avec du chloroforme/acétate d'éthyle pour donner 65 mg de 'produit 5R* [1R-[1^(1R*,5R*) ,3aoi,4^,7a/b]]-octahydro-1-(6,6 ,6-trif 1uoro-5-hydroxy-1,5-diméthy1 hexyl)-7a-méthyl-

1H-indène-4-ol cristallin, point de fusion 110-111°C,

Cot]p^ = +40,3° (c 0,2 dans le chloroforme) et 55 mg de 15 produit 5S* [ 1 R-[ 1 ^>( 1 R* ,5S* ) , 3a oi, 4/S, 7a/*>] ]-octahydro-1 -(6,6,6-trifluoro-5-hydroxy-1,5-diméthylhexyl)-7a-méthyl-1H-indène-4-ol, = +31,6° (c 0,2 dans le chlorofor me) .

i) On ajoute une solution de 50 mg (0,15 mmole) du 20 diol 5R* de 1h) dans 2 ml de chlorure de méthylène a une suspension de 97 mg (0,45 mmole) de ch1orochromate de pyridinium dans 4 ml de chlorure de méthylène. Le mélange obtenu est agité à la température ambiante pendant 1,5 h,

puis dilué avec 10 ml d'éther, agité pendant 15 minutes et 25 filtré à travers du Kieselguhr. Le résidu de la filtration est trituré avec de l'éther. Les extraits de trituration sont mis en commun, filtrés et évaporés à siccité. Le résidu est purifié par chromatographie avec de 1'hexane-acétate d'éthyle. Les 49 mg de produit sont dissoutes dans 30 4 ml de chlorure de méthylène anhydre, traitées avec 0,13 ml (0,89 mmole) de triméthylsilylimidazole et agitées à la température ambiante sous argon pendant 22 heures. Après addition de 0,5 ml d'eau, le mélange est agité pendant 20 minutes puis dilué à l'eau et extrait avec de l'acétate 35 d'éthyle. Les extraits sont lavés avec de l'eau et de la

4

14

saumure, séchés et évaporés à siccité. Le résidu est purifié par chromatographie avec de 11hexane-acétate d'éthyle pour donner 51 mg de C1 R-[ ip»( 1 R* , 5R*) ,3aoi, 4/b, 7a/?>] ]-octa-hydro-1-(6,6,6-trifluoro-5-triméthylsilyloxy-1,5-diméthyl-5 hexyl)-7a-méthyl-1 H-indène-4-one sous forme d'une huile épaisse.

j) On refroidit une solution de 141 mg (0,23 mmole) d'oxyde de [3S-(3</,5/ï>,Z) j-2-[2-méthy 1 ène-3 ,5-b i s[ ( 1 ,1 -d i -mêthyléthyl)diméthylsilyloxylcyclohexylidèneHéthyldiphényl-10 phosphine dans 6 ml de THF anhydre à -78°C et on la traite goutte â goutte sous argon avec 0,137 ml (0,22 mmole) d'une solution 1,6M de n-butyl-1ithium dans l'hexane. Après une agitation de 5 minutes, on ajoute goutte à goutte une solution de 51 mg (0,13 mmole) de la cétone de 1i) dans 1,5 mi 15 de THF à la solution orangée de carbanion phosphinoxy. Le mélange obtenu est agité à -78°C pendant 1,5 heures, puis traité avec 3 ml d'un mélange 1 : 1 d'une solution de tartrate de potassium et de sodium 2N et d'une solution de bicarbonate de sodium 2N, réchauffé à la température am-20 biante, dilué avec de l'eau et extrait avec de l'eau et de l'acétate d'éthyle. Les extraits organiques mis en commun sont lavés avec de la saumure, séchés et évaporés à siccité. Le résidu est purifié par filtration à travers du gel de silice, élué avec de 1'hexane-acétate d'éthyle, puis 25 dissous dans 0,5 ml de chlorure de méthylène et 5 ml de mé-thanol et agité à la température ambiante pendant une nuit avec 2 g d'une résine échangeuse de cations (AG 50W-X4). Après filtration et évaporation du solvant, le résidu est purifié par chromatographie avec de 1'hexane-acétate d'é-30 thyle pour donner 23 mg de 26 ,26 ,26-trif Iuoro-1o/,25R-di-hydroxycholécalciférol. RMN de 1H (400 MHz, CD30D) : 0,60 (s, 3H), 0,99 (d, J=6,4, 3H), 1,30 (s, 3H), 4,15 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), d 4,90 (s large, 1H), 5,31 (s large, 1H), 6,10 (d m, J = 11 ,2Hz, 1H), 6,34 (d, J = 11 , 2Hz, 1H).

35

<

15

10

15

25

30

Exemple 2

a) En suivant le mode opératoire de l'exemple 1i) , on transforme 56 mg du diol 5S* de l'exemple 1 h) en 59 mg de

[i R-[1£(1R*,5S*) ,3ad,47a/o]]-octahydro-1-(6,6,6-trifluoro-5-triméthylsilyloxy-1,5-diméthylhexyl)-7a-méthyl-1H-indène-4-one.

b) En suivant le mode opératoire de l'exemple 1j), on transforme 58 mg de la cétone de l'exemple 2a) en 59 mg de 26 ,26,26-trifluoro-1 c*,25S-dihydrocholécalciférol, RMN de

1H (400 MHz, CD30D) 0,58 (s, 3H), 0,97 (d, J=6,8Hz,

3H), 1,28 (s, 3H), d 4,13 (m, 1H), d 4,36 (m, 1H), 4,90 (s large, 1H), 5,29 (s large, 1H), 6,09 (d, J=11,2Hz, 1H),

6,32 (d, J = 11 ,2Hz , 1H) .

Exemple A

N°_

1

2.

20 3.

Substances Composé de 1'invention • Folyéthylène glycol 400 Hydroxyanisole butylée Palmitate d'ascorbyle mg/capsu 1 e

0 ,00010

200,00

0 ,100

1 ,00

0,00025

200,00

0,00050

200,00

0,100

1 ,00

0 ,100

1 ,00

On dissout les substances 1, 3 et 4 dans la substance 2 sous une couverture d'azote et on encapsule. Exemple B

N° Substances

1. Composé de l'invention 0,10 mg

2. 95% d'éthanol-5% d'eau 2,00 mg

0,50 mg 3,00 ml 2 sous

On dissout la substance 1 dans la substance une couverture d'azote et on injecte par voie intramuscu laire.

16

Claims (6)

1. REVENDICATIONS 1. Procédé de production du 26 ,26 ,26-trif luoro-1o<,25-

   dihydroxycholécalciférol, caractérisé en ce qu'il comprend la réaction d'un composé de formule dans laquelle Y est un Si trialkylé, avec le carbanion de l'oxyde de [3S-(3c^,5|S,Z)]-2-[2-méthylène-3 ,5-b i s [ ( 1 ,1 -di-méthyléthyl)diméthy1 silyloxylcyclohexy1idèneléthyldiphényl-phosphine et 1 '.élimination des groupes protecteurs si 1 y 1 e.
2. 2. Procédé selon la revendication 1, pour fabriquer le 26 ,26 ,26-trif luoro-1oi,25R-d ihydroxycholéca le if érol es s en-tiellement exempt d'épimère 25S et le 2b ,26 ,2b-trif1uoro-W,25S-dihydroxychoiécaiciférol essentiellement exempt d'épimère 25R, caractérisé en ce qu'on utilise un composé de formule IV, dans laquelle l'atome de C hydroxylé a la configuration R ou S.
3. 3. Procédé de fabrication d'une composition pharmaceutique contenant le 26 ,26 ,26-trif luoro-W, 25-d ihydroxy-cholécalciférol, en particulier le 26 ,26 ,26-trifluoro-io/,25R-dihydroxycholécalciférol essentiellement exempt d'épimère 25S et le 26 ,26 ,2b-trif luoro-1oi,25S-dihydroxy-cholécalciféroi essentiellement exempt d'épimère 25R, caractérisé en ce que 'l'on amène ce composé sous une forme galénique convenable.
4. 4. Composé et procédé tels que décrits ci-dessus, en particulier par référence aux exemples.
5. 5. Composé de formule

   17

   û

   dans laquelle Y est H ou Si trialkylé, en particulier où l'atome de C hydroxylé a la configuration R ou S.
6. 6. Composé de formule

   1 2 3

   dans laquelle X est un groupe aryle et R , R et R sont des groupes alkyle inférieur, aryle ou arylalkyle.

   if 1e 1c p&Q&S

   Renvois

   . roat —-mot rayé

   CURAU

   Conseil en Propriété Industrielle 2 6 bis, Boul. Princesse Charlotte MONTS-CARLO

   M procuration jdé

   I ect