WO2026008004A1 - 用TACI-Fc融合蛋白治疗抗磷脂综合征的方法 - Google Patents

Abstract

涉及利用有效量的靶向Blys和/或APRIL的药物治疗或缓解抗磷脂综合征的药物、剂量方案、给药间隔及施用方式。结果显示，提供的有效量的靶向Blys和/或APRIL的药物在治疗或缓解抗磷脂综合征患者过程中表现出良好的安全性和较佳的治疗效果。

Description

用TACI-Fc融合蛋白治疗抗磷脂综合征的方法 技术领域

本发明涉及一种治疗抗磷脂综合征的TACI-Fc融合蛋白药物、剂量方案、给药间隔及施用方式。

背景技术

抗磷脂综合征(anti-phospholipid syndrome，APS)是一种由抗磷脂抗体介导的以血栓形成和/或产科并发症为临床表现的系统性自身免疫性疾病，伴有抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies，aPLs)持续中度或高度阳性(文献1：Knight J S,Branch D W,Ortel T L.Antiphospholipid syndrome:advances in diagnosis,pathogenesis,andmanagementBMJ 2023；380:e069717doi:10.1136/bmj-2021-069717)。抗磷脂抗体是一组抗体，它是指以磷脂和/或磷脂结合蛋白为靶抗原的自身抗体的总称。临床上最常见的抗磷脂抗体包括抗心磷脂抗体(anti cardiolipin antibody，aCL)、狼疮抗凝物(lupus anticoagulant，LAC)和抗β2糖蛋白I抗体(anti-β2glycoprotein I，aβ2GPI)，这三种目前被广泛检测，被称为诊断标准抗体。另外还有非诊断标准抗体：抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体、抗凝血酶原抗体、抗β2-糖蛋白I结构域1抗体、抗磷脂酰乙醇胺抗体、抗蛋白S和蛋白C抗体、抗磷脂酰肌醇抗体、抗波形蛋白/心磷脂复合物抗体、抗膜联蛋白A2和A5抗体、抗磷脂酸抗体，这些是诊断标准抗体的有益补充，可协助抗磷脂综合征的诊断。

根据是否伴随其他的自身免疫病，临床上将APS分为原发性抗磷脂综合征(primaryAPS，PAPS)及继发性抗磷脂综合征(secondaryAPS，SAPS)。原发性APS是指在没有相关自身免疫性疾病的情况下发生的系统性自身免疫性疾病，当APS与另一种疾病相关时，APS被称为继发性APS，包括系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)和其他自身免疫性疾病、淋巴增生性疾病、肿瘤、感染(细菌、病毒、原虫)、炎症等。在抗磷脂综合征中，血栓几乎可以发生在身体的任何血管中，但最常见的发生在下肢血管。如果脑血管中形成血块，血液流动就会受损，并可能导致中风。APS的临床表现多是由血栓形成，栓塞及栓塞后缺血导致器官功能的损害引起的。

APS通常在女性中多见，男女患者比例为1:9，女性患病中位年龄为30岁，好发于中青年。据估计，每2000人中就有1人患有抗磷脂综合征。APS通常在相对年轻的个体中被诊断出来，在一项针对1000名患者的研究中，50岁之后被诊断出APS的患者只有12.7％。据估计，50岁以下的中风患者中有20％患有抗磷脂综合征，10％到15％的系统性红斑狼疮患者患有抗磷脂综合征。抗磷脂综合征的流行病学研究仍然不足，需要对不同年龄和种族背景的患者进行研究。健康个体中抗磷脂抗体持续阳性的人群患病率尚未得到确切数据，儿童抗磷脂综合征较为罕见，但可能由于各种原因被诊断不足。一项针对121名儿童的研究报告了抗磷脂综合征的平均发病年龄为10.7岁。抗磷脂综合征的非血栓性表现，如血小板减少和自身免疫性溶血性贫血，可能在儿童中更常见(文献2：Knight J S,Branch D W,Ortel T L.Antiphospholipid syndrome:advances in diagnosis,pathogenesis,and management BMJ 2023；380:e069717doi:10.1136/bmj-2021-069717；National Library of Medicine https://medlineplus.gov/genetics/condition/antiphospholipid-syndrome/#resources)。

患有抗磷脂综合征的妇女在怀孕期间发生并发症的风险增加。这些并发症包括妊娠高血压(子痫前期)、胎盘发育不全(胎盘功能不全)、早产或流产。此外，患有抗磷脂综合征的妇女在怀孕期间发生血栓的风险比在她们生命中的其他时期更高。出生时，患有抗磷脂综合征的母亲的婴儿可能身材矮小，体重不足。血栓形成或妊娠并发症通常是抗磷脂综合征的第一个症状。这种情况通常出现在成年早期到中期，但可以在任何年龄开始。影响血细胞和血管的抗磷脂综合征的其他体征和症状包括参与凝血的细胞数量减少，称为血小板减少(血小板减少症)，红细胞因过早分解(溶血)而缺乏(贫血)，以及由皮肤微血管异常引起的紫色皮肤变色。此外，受影响的人可能有皮肤上的开放性溃疡、偏头痛、心脏病或智障。许多抗磷脂综合征患者也有其他自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮。抗磷脂综合征患者很少会在全身多个血管发生血栓。这些血栓阻塞了受影响器官的血流，损害了它们的功能，最终导致器官衰竭。这些人据说有灾难性的抗磷脂综合征(catastrophic antiphospholipid syndrome,CAPS)。CAPS通常影响肾脏、肺、大脑、心脏和肝脏，对半数以上的受感染者是致命的。只有不到1％的抗磷脂综合征患者发生CAPS。

APS的治疗目的主要是预防血栓形成和避免妊娠失败，治疗方法包括抗凝、糖皮质激素和免疫抑制剂及对症支持治疗。2019年发表的“EULAR成年人抗磷脂综合症治疗指南”中明确定义了高风险及低风险抗磷脂抗体谱(表1)，并发布了成人抗磷脂综合征的管理建议(表2)，共提出了3条总体原则和12条管理意见(文献3：Tektonidou M G,Andreoli L,Limper M,et al.EULAR recommendations for the management of antiphospholipid syndrome in adults[J].Annals of the rheumatic diseases,2019,78(10):1296-1304.)。
表1中-高滴度抗磷脂抗体(aPL)、低风险及高风险抗磷脂抗体谱的定义

表2欧洲抗风湿病联盟(EULAR)发布的成人抗磷脂综合征管理建议


注：INR：international normalized ratio，国际标准化比值，是患者凝血酶原时间与正常对照凝血酶原时间
之比的ISI次方(ISI：国际敏感度指数，试剂出厂时由厂家标定)，是可以校正凝血活酶试剂差异对凝血酶原时间测值进行标准化报告的方法。INR正常值范围0.8～1.2。世界卫生组织规定应用口服抗凝药治疗深静脉血栓时，INR的允许范围为2.0～3.0。
表3具有应用前景的治疗抗磷脂综合征的生物类药物

截止到2024年5月22日，全球有5款针对抗磷脂综合征推进至临床阶段(参见表3)。在这些药物中，尽管利妥昔单抗被纳入EULAR发布的成人抗磷脂综合征管理建议中，抗CD20+B细胞耗竭疗法会增加机体对感染的敏感性，可能会导致部分患者中血清抗体滴度长期降低，从而进一步增加感染的风险。贝利尤单抗已被证明可显著改善对糖皮质激素和利妥昔单抗无应答APS患者的血小板减少症，部分APS患者可能会从Blys靶向治疗中获益。达雷妥尤单抗能够发挥免疫介导活性，通过调节免疫微环境，可能适用于对抗凝治疗和标准免疫抑制无应答的APS患者。目前有一项赛妥珠单抗应用于妊娠APS患者的临床试验正在开展(ClinicalTrials.NCT03152058)，暂无研究结果公示。另外一项研究使用补体C5抑制剂olendalizumab治疗APS非标准表现的开放标签II期试验因患者入组率低而终止(clinicaltrials.NCT02128269)。(文献4：YunZ,Duan L,Liu X,Cai Q,Li C.An update on thebiologics for the treatment of antiphospholipid syndrome.Front Immunol.2023 May 19；14:1145145.doi:10.3389/fimmu.2023.1145145.PMID:37275894；PMCID:PMC10237350.)。对于标准治疗后仍有难治性APS症状的患者，免疫抑制剂可能是最佳选择。但同时免疫抑制治疗也暴露出众多不良反应以及疗程长短等方面的问题，这些问题也促使我们对新型免疫抑制剂及新的应用方法做出更多的研究和探索。因此，无论是在中国还是全球，抗磷脂综合征治疗领域都存在巨大的未满足的临床需求。

泰它西普(telitacicept)是一款同类首创的针对B细胞相关自身免疫疾病的重组TACI-Fc融合蛋白，其能够靶向并中和B细胞通路的两个关键细胞信号分子BLyS和APRIL。它是一种由截断的TACI与经序列优化后降低了ADCC和CDC效应的免疫球蛋白Fc组成的抗体类似结构融合蛋白，具有极佳的生物学活性和安全性，目前已经在中国获批上市用于治疗系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和重症肌无力。

阿塞西普(atacicept)是一种重组融合蛋白，包含TACI受体的细胞外配体结合部分和人IgG的Fc部分，可以与BLyS及APRIL结合。该药探索治疗IgA肾病(III期)、狼疮性肾炎(III期)、系统性红斑狼疮(III期)、类风湿关节炎(II期)等适应症，现处于不同临床阶段。

普维他西普(povetacicept)是一种工程化TACI结构域的Fc融合蛋白，作为一种Blys/APRIL双重拮抗剂，其探索治疗IgA肾病(III期)、免疫性血小板减少症(II期)、冷凝集素病(II期)、狼疮性肾炎(II期)、自身免疫性血细胞减少症(II期)、系统性红斑狼疮(I期)等适应症，现处于不同研究阶段。

发明内容

本发明惊奇的发现了TACI-Fc融合蛋白在治疗抗磷脂综合征的患者时，产生了显著的治疗效果。

具体的，本发明提供了一种治疗抗磷脂综合征的方法，所述方法包括对具有所述抗磷脂综合征的患者施用治疗有效量的靶向Blys和/或APRIL的药物。

具体的，本发明还提供了一种靶向Blys和/或APRIL的药物在制备治疗或缓解抗磷脂综合征患者药物中的用途。

具体的，本发明还提供了一种TACI-Fc融合蛋白在制备治疗或缓解抗磷脂综合征患者药物中的用途。

具体的，本发明还提供了泰它西普在制备治疗或缓解抗磷脂综合征患者药物中的用途。

进一步的，所述抗磷脂综合征选自原发性抗磷脂综合征或继发性抗磷脂综合征；更进一步的，所述抗磷脂综合征为原发性抗磷脂综合征。

进一步的，所述的靶向Blys和/或APRIL的药物为TACI-Fc融合蛋白。

进一步的，上述任一项所述的TACI-Fc融合蛋白包含：
(i)TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段；和
(ii)人免疫球蛋白恒定区片段。

进一步的，所述的TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段包含SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
SEQ ID NO:1

SEQ ID NO:2

SEQ ID NO:3

进一步的，所述的TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

进一步的，所述的人免疫球蛋白为IgG1。

进一步的，所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含与SEQ ID NO:4至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％一致性的氨基酸序列。
SEQ ID NO:4

进一步的，所述的人免疫球蛋白恒定区片段的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。

进一步的，所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含与SEQ ID NO:4相比具有1、2、3、4、5、6、7、8或更多个位点的氨基酸修饰。

进一步的，所述的修饰是氨基酸的取代、删除或插入。

进一步的，所述的取代包含P3T、L8P、L14A、L15E、G17A、A110S、P111S和/或A173T中的一个或多个。

进一步的，所述的插入是在人免疫球蛋白恒定区片段的N端插入1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸。

更进一步的，所述的插入是在人免疫球蛋白恒定区片段的N端插入5个氨基酸。

更进一步的，所述的插入是在人免疫球蛋白恒定区片段的N端插入EPKSS这5个氨基酸。

进一步的，所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列。
SEQ ID NO:5

进一步的，所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列。
SEQ ID NO:6

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白具有与SEQ ID NO:7至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％一致性的氨基酸序列。
SEQ ID NO:7

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白具有SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列。

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白具有SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。
SEQ ID NO:8

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白具有SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列。
SEQ ID NO:9

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白为泰它西普(telitacicept)，阿塞西普(atacicept)或普维他西普(povetacicept)。

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白的单次给药剂量为约0.1至10mg/kg，进一步包括0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8，0.9，1.0，1.1，1.2，1.3，1.4，1.5，1.6，1.7，1.8，1.9，2.0，2.1，2.2，2.3，2.4，2.5，2.6，2.7，2.8，2.9，3.0，3.1，3.2，3.3，3.4，3.5，3.6，3.7，3.8，3.9，4.0，4.1，4.2，4.3，4.4，4.5，4.6，4.7，4.8，4.9，5.0，5.1，5.2，5.3，5.4，5.5，5.6，5.7，5.8，5.9，6.0，6.1，6.2，6.3，6.4，6.5，6.6，6.7，6.8，6.9，7.0，7.1，7.2，7.3，7.4，7.5，7.6，7.7，7.8，7.9，8.0，8.1，8.2，8.3，8.4，8.5，8.6，8.7，8.8，8.9，9.0，9.1，9.2，9.3，9.4，9.5，9.6，9.7，9.8，9.9，10mg/kg。

进一步的，所述TACI-Fc融合蛋白的单次给药剂量为40-300mg，优选80-240mg，更优选为80mg，90mg，100mg，110mg，120mg，130mg，140mg，150mg，160mg，170mg，180mg，190mg，200mg，210mg，220mg，230mg，或240mg。

进一步的，上述药物蛋白含量的检测方法为：紫外-可见分光光度法，根据蛋白质在280nm下有最大紫外吸收，测定该波长下泰它西普样品的吸光度值。对320nm处的吸光度进行校正后，得到280nm处的吸光度值与蛋白质浓度呈正比，根据朗伯-比尔定律计算蛋白浓度，确定蛋白质含量。蛋白质含量计算公式如下：

式中：ε为泰它西普消光系数值，单位为(mg/ml)^-1·cm^-1；
A₂₈₀为样品溶液在280nm下吸光度的平均值；
A₂₈₀(校正)为样品溶液在280nm下经过校正后吸光度的平均值。

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白在一个月的间隔期间使用1-4次，进一步包括1次、2次、3次、4次，即所述的TACI-Fc融合蛋白的给药频次为每月1次或每月2次或每月3次或每月4次。

进一步的，所述的TACI-Fc融合蛋白的给药频次为每周一次或者每两周1次或者每3周1次或者每4周1次。

进一步优选的，所述的治疗持续约2-50周。进一步优选的，所述的治疗持续2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、13周、14周、15周、16周、17周、18周、19周、20周、21周、22周、23周、24周、25周、26周、27周、28周、29周、30周、31周、32周、33周、34周、35周、36周、37周、38周、39周、40周、41周、42周、43周、44周、45周、46周、47周、48周、49周、50周。

进一步优选的，所述的TACI-Fc融合蛋白的施用方式为皮下、肌肉或静脉施用，施用位置优选为大腿、腹部或者上臂。在一些具体的实施例中，所述的TACI-Fc融合蛋白的施用方式为皮下注射、肌肉注射或静脉注射。

进一步优选的，所述的TACI-Fc融合蛋白每次注射的位点相同或者不同。在一些具体的实施例中，所述的TACI-Fc融合蛋白每次注射的位点相同；在另一些具体的实施例中，所述的TACI-Fc融合蛋白每次注射的位点不同。

进一步的，所述的原发性抗磷脂综合征表现为抗磷脂抗体持续中度或高度阳性。

进一步的，所述的抗磷脂抗体包括但不限于抗心磷脂抗体、抗β2-糖蛋白I抗体、狼疮抗凝物、抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体、抗凝血酶原抗体、抗β2-糖蛋白I结构域1抗体、抗磷脂酰乙醇胺抗体、抗蛋白S和蛋白C抗体、抗磷脂酰肌醇抗体、抗波形蛋白/心磷脂复合物抗体、抗膜联蛋白A2和A5抗体、抗磷脂酸抗体。

进一步的，所述的患者为成人患者或儿童患者。

进一步的，所述的患者既往接受过原发性抗磷脂综合征治疗方案或既往未接受过原发性抗磷脂综合征治疗方案。

进一步的，所述的患者合并患有一种或多种其他疾病。

本发明还提供了一种治疗原发性抗磷脂综合征的方法，所述方法包括对具有所述原发性抗磷脂综合征患者联合施用治疗有效量的TACI-Fc融合蛋白和其他治疗药物，其中，所述的TACI-Fc融合蛋白包含：
(i)TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段；和
(ii)人免疫球蛋白-恒定区片段。

进一步的，所述的其他治疗药物包括但不限于抗凝药物、贝利尤单抗、利妥昔单抗、依库珠单抗。

进一步的，所述的抗凝药物包括但不限于抗血小板药物、维生素K拮抗剂、肝素或低分子肝素、羟氯喹、他汀类药物。

进一步的，所述的抗血小板药物包括但不限于阿司匹林、双嘧达莫、噻氯匹定、氯吡格雷。

本发明提供的TACI-Fc融合蛋白在治疗抗磷脂综合征患者过程中表现出意料不到的临床疗效和良好的安全性。

附图说明

图1为实施例2中SOC(Standard ofCare，标准治疗)+泰它西普组治疗过程中抗心磷脂抗体滴度变化；

图2为实施例2中SOC组治疗过程中抗心磷脂抗体滴度变化；

图3为实施例2中SOC+泰它西普组治疗过程中抗β2-糖蛋白I抗体滴度变化；

图4为实施例2中SOC组治疗过程中抗β2-糖蛋白I抗体滴度变化；

图5为实施例2中SOC+泰它西普组治疗过程中狼疮抗凝物滴度变化；

图6为实施例2中SOC组治疗过程中狼疮抗凝物滴度变化。

具体实施方式

除非另有定义，本文使用的所有科技术语具有本领域普通技术人员所理解的相同含义。关于本领域的定义及术语，专业人员具体可参考CurrentProtocols in Molecular Biology(Ausubel)。

本发明所用氨基酸三字母代码和单字母代码如J.biol.chem，243，p3558(1968)中所述。

本发明中的术语“TACI”即transmembrane activator and CAML interactor，是一种肿瘤坏死因子受体超家族中的成员之一。本发明中的术语“BLys”是指B淋巴细胞刺激物(B lymphocyte stimulator)，它是一种以膜结合型和可溶型2种形式存在的TNF配体超家族成员之一,它特异性表达于骨髓细胞表面，并选择性刺激B淋巴细胞增殖和免疫球蛋白的产生；本发明中的术语“APRIL”(aproliferation-inducing ligand)是一种肿瘤坏死因子(TNF)类似物，它能激发体内的原始B细胞和T细胞增殖，促进B细胞累积并增加脾含量。APRIL能和TACI、BCMA特异性结合，结合后能阻止APRIL与B细胞结合，并抑制APRIL激发的原始B细胞增殖反应。而且APRIL能和BLys竞争性结合受体(BCMA、TACI)。

本发明涉及的术语“TACI-Fc融合蛋白”是指跨膜激活剂、钙调节剂和亲环蛋白配体相互作用剂(TACI)-免疫球蛋白融合蛋白(即TACI-Fc融合蛋白)，本发明提供的TACI-免疫球蛋白融合蛋白包括：(i)TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段；和(ii)人免疫球蛋白恒定区片段。

术语“TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段”具体可参见美国专利NO.5,969,102、6,316,222和6,500,428和美国专利申请09/569,245和09/627,206(其内容纳入本文作参考)公开的TACI的胞外结构域以及能与TACI配体相互作用的TACI胞外结构域特定片段，或者公开号为CN101323643A的中国专利公开的TACI胞外结构域第13-118位氨基酸片段。

本发明涉及的术语“TACI-Fc融合蛋白”的示例包括泰它西普(氨基酸序列：SEQ ID NO：7)、阿塞西普(氨基酸序列：SEQ ID NO：8)、普维他西普(氨基酸序列：SEQ ID NO:9)。

本发明涉及的术语“人免疫球蛋白恒定区片段”中，免疫球蛋白部分优选为IgG1，其可以包含重链恒定区，如人的重链恒定区。本发明优选的“人免疫球蛋白恒定区片段”是含有部分铰链区结构域、CH2结构域和CH3结构域的氨基酸片段。在一些更优选的实施例中，本发明所述的“人免疫球蛋白恒定区片段”的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，或者包含与SEQ ID NO:4至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％一致性的氨基酸序列。在一些更优选的实施例中，所述的“人免疫球蛋白恒定区片段”的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。

本发明涉及的术语“治疗”是指被设计用于改变临床病理学过程中治疗的个体或细胞的自然进程的临床干预。期望的治疗效果包括减小疾病进展速度、改善或缓解疾病状态、以及缓解或改善预后。例如，如果减轻或消除与治疗的疾病或病症(诸如癌症、炎症或自身免疫疾病)相关联的一种或多种症状。在一些实施方案中，术语“治疗”是指以统计学显著程度或以本领域技术人员可以检测的程度有效减小疾病进展速度、改善或缓解疾病状态、以及缓解或改善预后。

本发明涉及的术语“缓解”是指在治疗开始或结束时，无抗磷脂综合征相关的临床症状或体征。

本发明涉及的术语“氨基酸”以最广义定义理解，是一类含有氨基和羧基的有机化合物的通称，优选的，本发明中涉及的氨基酸是组成生命体中的蛋白质的主要单元，其包括但不限于：甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸(蛋氨酸)、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸。

本发明所用氨基酸三字母代码和单字母代码如J.biol.chem，243，p3558(1968)中所述。氨基酸位点的编号方式有多种，如Kabat编号系统、EU编号系统、顺序编号等，在本发明中，氨基酸位点的编号方式采用“顺序编号”的方式进行，如本发明所述的“SEQ ID NO:4的位点3、8、14、15、17、110、111或173”是指SEQ ID NO:4的第3位氨基酸、第8位氨基酸，并依此类推；如本发明所述的“P3T”是指将SEQ ID NO:4的第3位氨基酸序列由之前的“P”突变为“T”，再如“L8P”是指将SEQ ID NO:4的第8位氨基酸序列由之前的“L”突变为“P”，并以此例类推。

作为一种可选择的实施方案，本发明提供的免疫球蛋白的恒定区可以引入一个或多个氨基酸的改变，如取代(即突变)、增加(即插入)或缺失(即删除)。

本发明中的术语“泰它西普”(或称“泰爱”，其在本发明中可以互换使用)是一种TACI-Fc融合蛋白，其INN名为telitacicept，其氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，或参见https://extranet.who.int/soinn/mod/page/view.php？id＝137&inn_n＝10932所示。

本发明中的术语“阿塞西普”，是一种TACI-Fc融合蛋白，其INN名为atacicept，其氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示，或参见https://extranet.who.int/soinn/mod/page/view.php？id＝137&inn_n＝8669所示。

本发明中的术语“普维他西普”，是一种TACI-Fc融合蛋白，其INN名为povetacicept，其氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示，或参见https://extranet.who.int/soinn/mod/page/view.php？id＝137&inn_n＝12264所示。

本发明的TACI-Fc融合蛋白可以通过任意多种途径给药，其包括但不局限于：口服、静脉注射、肌肉内注射、动脉内注射、髓内注射、腹腔内注射、鞘内注射、心脑内、透皮、经皮肤、外用、皮下、鼻内、肠内、舌下、阴道内或直肠途经等多种途径。

本发明中的术语“抗磷脂综合征”是一种非炎症性自身免疫性疾病，临床上以动脉、静脉血栓形成，病态妊娠(妊娠早期流产和中晚期死胎)和血小板减少，肾脏系统损害等症状为表现，血清中存在抗心磷脂抗体、狼疮抗凝物、抗β2糖蛋白I抗体、抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体、抗凝血酶原抗体、抗β2-糖蛋白I结构域1抗体、抗磷脂酰乙醇胺抗体、抗蛋白S和蛋白C抗体、抗磷脂酰肌醇抗体、抗波形蛋白/心磷脂复合物抗体、抗膜联蛋白A2和A5抗体、抗磷脂酸抗体等一种或多种抗磷脂抗体，上述症状可以单独或多个共同存在。

本发明中的术语“原发性抗磷脂综合征”是指不伴有其他自身免疫病而单独发生的抗磷脂综合征。

本发明中的术语“继发性抗磷脂综合征”是指继发于其他自身免疫性疾病的抗磷脂综合征，其他自身免疫性疾病包括但不限于红斑狼疮(如系统性红斑狼疮)、类风湿性关节炎、干燥综合征等。

本发明中的术语“aPL谱”是指抗心磷脂抗体(IgG或IgM)和抗β2-糖蛋白1抗体(IgG或IgM)以及狼疮抗凝物的水平。

本发明中的术语“aPL”是指患者体内存在的抗磷脂抗体。

本发明中的术语“标准治疗方案”包括阿司匹林和/或维生素K拮抗剂(VKA)和/或低分子量肝素。

本发明中的术语“肝素”又名普通肝素，是从猪肠粘膜或牛肺中提取精制的一种硫酸氨基葡聚糖，能够与抗凝血酶Ⅲ结合，抑制凝血酶的活性，从而延长血液凝固时间，临床上主要用于抗凝血和抗血栓。

本发明中的术语“低分子量肝素”包括低分子量肝素钠/钙、依诺肝素、那屈肝素、达肝素等，是由普通肝素经过化学方法或酶解而成的一类分子量较低的葡胺糖。

本发明中的术语“维生素K拮抗剂”是抑制维生素K依赖性凝血因子合成的药物，包括华法林、双香豆素、苯丙香豆素、醋硝香豆素等。

本发明中的术语“约”用于表示数值包括设备或用于确定数值的方法的固有误差变化，或被测样品之间存在的变化。除非另有说明或从上下文中明显可见，否则术语“约”是指高于或低于报告数值的10％以内(除非该数字将超过可能值的100％或低于0％)。当与数值范围或系列结合使用时，除非另有说明，术语“约”适用于范围的端点或系列中列举的每个数值。

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下面实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。

实施例1亲和力研究

比较泰它西普、普维他西普与APRIL、Blys的亲和力。

利用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别测试泰它西普、普维他西普与APRIL同源三聚体、Blys同源三聚体的亲和力，其中使用null-IgG1作为为空白对照。实验结果详见表4。
表4.APRIL或Blys同源三聚体ELISA结合试验

备注：“N.B”表示不结合。

结论

在APRIL或Blys同源三聚体ELISA结合试验中，泰它西普和普维他西普与APRIL及Blys均能达到良好的结合。

实施例2泰它西普治疗原发性抗磷脂综合征的临床试验

1.研究方法

本研究是一项单中心、随机对照、开放的临床研究。主要目的是评估泰它西普对携带高风险抗磷脂抗体谱的原发性APS患者中抗磷脂抗体(aPL)谱的影响。次要目的是评估泰它西普对原发性APS患者血栓复发的影响，利用B细胞的单细胞RNA测序(single-cell RNA-sequencing,scRNAseq)来揭示使用泰它西普治疗前后细胞基因特征及功能的异质性变化。

2.研究对象

2.1患者入组标准
●≥18周岁。
●根据悉尼标准临床诊断原发性抗磷脂综合征。
●纳入前12个月内持续抗磷脂抗体阳性(至少间隔12周检测)，根据抗体水平的风险分层为高风
险抗磷脂抗体谱，为符合以下情况中至少一种：1、狼疮抗凝物(LAC)阳性(根据ISTH指南规范检测)；2、两种或三种aPL阳性(狼疮抗凝物、抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白I抗体中任意两种或者三种全部)；3、或持续存在的高滴度aPL；
●没有其他自身免疫性疾病的同时发生。
●根据EULAR关于抗磷脂综合征的建议，采用稳定的APS治疗方案。
●未妊娠、未哺乳、无生育潜力或未进行避孕的女性患者。

2.2健康志愿者入组标准
●年龄18～75岁，健康，无高血压、糖尿病等慢性病史，无结核、乙肝等传染性疾病史，无外伤、
手术、输血史，无家族性遗传病史。
●生命体征正常：包括体温、呼吸、血压和心率；
●体格检查正常：包括身高(仅筛选期进行)、体重、头、眼、耳、鼻、喉、颈、心脏、胸部(包
括肺)、腹部、四肢、皮肤、淋巴结、神经系统；
●实验室检查正常：包括三大常规、生化、肝肾功能、凝血功能等；
●心电图、心脏超声等其他检查均正常。

3.治疗与给药方法

患者入组后随机分为SOC(Standard ofCare，标准治疗)组和SOC+泰它西普组。SOC组和SOC+泰它西普组各纳入10例患者。本研究涉及的泰它西普用法：每次皮下注射160mg，每周一次，共进行48周治疗。

入组的患者将同时接受为期48周的SOC治疗。患者将在第0天进行评估，然后每12周重新评估一次，持续48周。本研究的SOC治疗根据患者临床表现及抗磷脂抗体谱应用阿司匹林、维生素K拮抗剂(VKA)和低分子量肝素(SOC治疗见EULAR recommendations for the management ofantiphospholipid syndrome in adults.Tektonidou,M.G.,et al.,Ann Rheum Dis,2019年第78卷第10期，第1296-1304页)。

包括安全评估在内的主要检查将在第0天进行，然后每12周进行一次，持续48周。共计5次随访检查。

4.疗效结果

4.1主要终点

本研究的主要疗效终点是治疗第48周抗磷脂抗体滴度下降的患者比例。

SOC+泰它西普组入组患者在施用泰它西普48周后，抗心磷脂抗体滴度变化如图1所示，抗β2-糖蛋白I抗体滴度变化如图3所示，狼疮抗凝物滴度变化如图5所示，因该组有一例患者(TA-9)用药未结束，暂不列入结果分析，图中“TA-1”～“TA-8”及“TA-10”表示其他接受SOC+泰它西普治疗的患者。SOC组入组患者抗心磷脂抗体滴度变化如图2所示，抗β2-糖蛋白I抗体滴度变化如图4所示，狼疮抗凝物滴度变化如图6所示，图中“CON-1”～“CON-10”表示接受SOC治疗的患者。

实验结果显示：

1)施用泰它西普的患者体内aCL IgG、aCL IgM和aCL IgA滴度均有不同程度的下降，整体来看抗心磷脂抗体滴度下降的患者占组内所有用药结束患者的比例为88.9％，仅有1例患者(TA-10)aCL IgG滴度较基线水平略有升高，但其aCL IgM和aCL IgA滴度较基线水平均呈现降低趋势(如图1)，而SOC组仅有50％患者体内aCL IgG、aCL IgM和aCL IgA滴度表现为同时降低(如图2)。

2)施用泰它西普的患者有66.7％(6名)体内抗β2糖蛋白I抗体(aβ2GPI IgG、aβ2GPI IgM和aβ2GPI IgA)滴度同时降低(如图3)，有3名患者体内aβ2GPI IgM和aβ2GPI IgA滴度明显降低，仅aβ2GPI IgG滴度略有升高(TA-2、TA-4、TA-10)，而SOC组只有2例患者体内aβ2GPI IgG、aβ2GPI IgM和aβ2GPI IgA滴度均降低(Con-2、Con-5)，占入组人数的20％(如图4)。

3)在施用泰它西普过程中，部分患者体内狼疮抗凝物滴度变化起伏较大，但在整体变化水平上依然呈下降趋势(如图5)，约为55.6％(5名)，高于SOC组的20％(如图6)。

综上所述，泰它西普的使用将显著降低抗磷脂抗体水平，可有效治疗或缓解原发性抗磷脂综合征。

以上描述地仅是优选实施方案，其只作为示例而不限制实施本发明所必需特征的组合。所提供的标题并不意指限制本发明的多种实施方案。术语例如“包含”、“含”和“包括”不意在限制。此外，除非另有说明，没有数词修饰时包括复数形式，以及“或”、“或者”意指“和/或”。除非本文另有定义，本文使用的所有技术和科学术语的意思与本领域技术人员通常理解的相同。

本申请中提及的所有公开物和专利通过引用方式并入本文。不脱离本发明的范围和精神，本发明的所描述的方法和组合物的多种修饰和变体对于本领域技术人员是显而易见的。虽然通过具体的优选实施方式描述了本发明，但是应该理解所要求保护的本发明不应该被不适当地局限于这些具体实施方式。事实上，那些对于相关领域技术人员而言显而易见的用于实施本发明的所描述的模式的多种变体意在包括在随附的权利要求的范围内。

Claims (23)

1. 一种治疗或缓解抗磷脂综合征的方法，所述方法包括对具有所述抗磷脂综合征患者施用治疗有效量的靶向Blys和/或APRIL的药物；优选的，所述抗磷脂综合征选自原发性抗磷脂综合征或继发性抗磷脂综合征；更优选的，所述抗磷脂综合征为原发性抗磷脂综合征。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述靶向Blys和/或APRIL的药物为TACI-Fc融合蛋白。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的TACI-Fc融合蛋白包含：

   (i)TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段；和

   (ii)人免疫球蛋白恒定区片段。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段包含SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
5. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的人免疫球蛋白为IgG1或所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列或者包含与SEQ ID NO:4至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％一致性的氨基酸序列。
6. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含对应于SEQ ID NO:4的位点3、8、14、15、17、110、111或173的一个或多个位点上的氨基酸的修饰；优选的，所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含与SEQ ID NO:4相比具有1、2、3、4、5、6、7、8或更多个位点的氨基酸修饰。
7. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的修饰是氨基酸的取代、删除或插入；优选的，所述的取代包含P3T、L8P、L14A、L15E、G17A、A110S、P111S和/或A173T中的1个或多个；优选的，所述的插入是在人免疫球蛋白恒定区片段的N端插入1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸。
8. 根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的人免疫球蛋白恒定区片段包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸序列。
9. 根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的TACI-Fc融合蛋白具有与SEQ ID NO:7至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％一致性的氨基酸序列，优选的，所述的TACI-Fc融合蛋白具有SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列，优选的，所述的TACI-Fc融合蛋白为泰它西普(telitacicept)，阿塞西普(atacicept)或普维他西普(povetacicept)。
10. 根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括给所述患者施用标准治疗方案。
11. 根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述的标准治疗方案包括阿司匹林和/或维生素K拮抗剂(VKA)和/或低分子量肝素。
12. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述的标准治疗方案根据患者临床表现及抗磷脂抗体谱应用阿司匹林和/或维生素K拮抗剂(VKA)和/或低分子量肝素。
13. 根据权利要求1-12任一项所述的方法，其特征在于，所述的原发性抗磷脂综合征表现为抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies，aPLs)持续中度或高度阳性，其中所述的抗磷脂抗体包括但不限于抗心磷脂抗体、抗β2-糖蛋白I抗体、狼疮抗凝物、抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体、抗凝血酶原抗体、抗β2-糖蛋白I结构域1抗体、抗磷脂酰乙醇胺抗体、抗蛋白S和蛋白C抗体、抗磷脂酰肌醇抗体、抗波形蛋白/心磷脂复合物抗体、抗膜联蛋白A2和A5抗体、抗磷脂酸抗体。
14. 根据权利要求1-13任一项所述的方法，其特征在于，所述的患者为成人患者或儿童患者。
15. 根据权利要求1-14任一项所述的方法，其特征在于，所述的患者既往接受过原发性抗磷脂综合征治疗方案或既往未接受过原发性抗磷脂综合征治疗方案。
16. 根据权利要求1-15任一项所述的方法，其特征在于，所述的患者合并患有一种或多种其他疾病。
17. 根据权利要求1-16任一项所述的方法，其特征在于，所述的TACI-Fc融合蛋白的单次给药剂量为约0.1至10mg/kg；优选为40-300mg；优选为80-240mg，进一步优选为80mg或160mg或240mg。
18. 根据权利要求1-17任一项所述的方法，其特征在于，所述的TACI-Fc融合蛋白的施用方式为皮下、肌肉或静脉施用或者施用部位为大腿、腹部或者上臂。
19. 根据权利要求1-18任一项所述的方法，其特征在于，所述的TACI-Fc融合蛋白在一个月的间隔期间使用1-4次和/或治疗持续约2-50周；优选的，所述的TACI-Fc融合蛋白的给药频次为每周一次或者每两周1次或者每3周1次或者每4周1次。
20. 根据权利要求1-19任一项所述的方法，其特征在于，所述的TACI-Fc融合蛋白的施用量为40-300mg/周；优选为80-240mg/周，进一步优选为80mg/周或160mg/周或240mg/周，进一步优选为160mg/周。
21. 一种治疗原发性抗磷脂综合征的方法，所述方法包括对具有所述原发性抗磷脂综合征患者联合施用治疗有效量的TACI-Fc融合蛋白和其他治疗药物，其中，所述的TACI-Fc融合蛋白包含：

    (i)TACI胞外区或其结合Blys和/或APRIL的片段；和

    (ii)人免疫球蛋白-恒定区片段。
22. 根据权利要求21所述的方法，其特征在于，所述的其他治疗药物包括但不限于抗凝药物、贝利尤单抗、利妥昔单抗、依库珠单抗，其中所述的抗凝药物包括但不限于抗血小板药物、维生素K拮抗剂、肝素或低分子肝素、羟氯喹、他汀类药物，其中所述的抗血小板药物包括但不限于阿司匹林、双嘧达莫、噻氯匹定、氯吡格雷。
23. 根据权利要求1-22中任一项所述的方法，其特征在于，所述的治疗使得患者体内抗磷脂抗体(aPL)滴度下降。