WO2026004963A1 - 分離材、分離材の製造方法、標的分子の分離方法、混合物、及びクロマトグラフィー用カラム - Google Patents

Abstract

本発明の課題は、核酸のような大きい分子においても分離精製能が向上した分離材及びその応用技術を提供することにある。 【解決手段】陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材であって、陰イオン交換基が式（Ａ１）で表される構造単位（ただし、ｎ１は１以上１０以下、Ｒ^ａ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ１はＯ又はＮＨ、Ｒ^ａ２～Ｒ^ａ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ａ２は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって置換基として有していてもよい。）を含む分離材。

Description

分離材、分離材の製造方法、標的分子の分離方法、混合物、及びクロマトグラフィー用カラム

　本発明は、分離材、分離材の製造方法、標的分子の分離方法、混合物、及びクロマトグラフィー用カラムに関する。
　本願は、２０２４年６月２６日に日本に出願された特願２０２４－１０３０８５号、２０２４年７月２日に日本に出願された特願２０２４－１０６９８５号、及び２０２４年７月２３日に日本に出願された特願２０２４－１１７５６５号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。

　核酸等の生体高分子の研究、開発において、それらの吸着、分離、精製にはクロマトグラフィーが多く用いられている。液体クロマトグラフィー用分離材に用いられる担体としては、シリカゲル、ヒドロキシアパタイト等の無機系担体、アガロース、デキストラン、セルロース、キトサン等の天然高分子系担体、及び、ポリスチレン、ポリ（メタ）アクリル酸エステル等の合成高分子系担体が知られている。
　これらの担体はそのままで、又は多様な分離モードでの使用を可能とするため、必要に応じて各種官能基を付与して用いられる。また、近年では核酸の分離精製において、分離精製能の更なる向上が望まれている。

　例えば、特許文献１には、アニオン交換基がグラフト鎖を介して多孔膜に固定化した分離材が開示されており、本技術に拠ればグリシジルメタクリレートを多孔膜にグラフト重合し、その後陰イオン交換基を導入することで、優れた核酸分離性能を有する分離材が得られる。

特開２０１０－１８７６１５号公報

　しかしながら、特許文献１で開示されている分離材による核酸の精製方法は、一度モジュール内に核酸を吸着させ、その後分離を行なっている。この吸着過程は分離材のイオン交換容量に依存しているが、特許文献１で開示されている分離材は単量体由来の構造に対して陰イオン交換基が１つであり、近年求められる分離性能を有するにはイオン交換容量が不十分であった。

　また、特許文献１で開示されている分離材による核酸の精製方法は、核酸の不純物として宿主細胞破片、エンドトキシン、ＢＳＡ（Ａｌｂｕｍｉｎ　ｆｒｏｍ　ｂｏｖｉｎｅ　ｓｅｒｕｍ）を添加して実施している。一方で近年の核酸医薬用途で用いられる核酸の合成方法は、化学合成が主流とされており、その不純物は目的物である核酸の１量体差であることから分離材の分離性能もさらなる向上が求められる。

　本発明は、このような課題を鑑みてなされたものであり、核酸のような大きい分子においても分離精製能が向上した分離材、分離材の製造方法、混合物、及びその応用技術に関するものである。

　第一の発明に関し、本発明者らは鋭意研究を行なった結果、１つの単量体由来の構造単位に対して２以上のイオン交換基を持つ（共）重合体を担体に固定化することで分離材の分離精製能が向上することを見出した。

　即ち、第一の発明の要旨は以下のとおりである。
［１］　陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材であって、陰イオン交換基が式（Ａ１）で表される構造単位を含む分離材。
（式（Ａ１）中、ｎ１は１以上１０以下である。Ｒ^ａ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ａ２及びＲ^ａ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ａ５、Ｒ^ａ６及びＲ^ａ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
［２］　前記陰イオン交換基が、更に式（Ａ２）で表される構造単位を含む、［１］に記載の分離材。
（式（Ａ２）中、ｍ１は１以上１０以下である。Ｒ^ａ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ９はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ａ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ａ１１、Ｒ^ａ１２及びＲ^ａ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
［３］　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ａ１）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、［１］又は［２］の分離材。
［４］　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ａ１）で表される構造単位を２０ｍｏｌ％以上５０ｍｏｌ％以下の範囲で含む、［１］～［３］のいずれかの分離材。
［５］　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ａ１）で表される構造単位を４０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、［１］～［３］のいずれかの分離材。
［６］　交換容量が０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下である、［１］～［５］のいずれかの分離材。

［７］　以下の工程（１－ａ）及び（１－ｂ）を含むことを特徴とする、標的分子の分離方法；
（１－ａ）：標的分子を含む溶液を［１］～［６］のいずれかの分離材に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
（１－ｂ）：工程（１－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。
［８］　前記標的分子が生体高分子、生体高分子の部分構造物、又は生体高分子の化学変性物のいずれかである、［７］の標的分子の分離方法。
［９］　前記標的分子がオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物、又はオリゴ核酸の化学変性物のいずれかである、［８］の標的分子の分離方法。
［１０］　［１］～［６］のいずれかの分離材を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備える、クロマトグラフィー用カラム。

　第二の発明に関し、本発明者らは鋭意研究を行なった結果、下記構造を持つ（共）重合体を担体に固定化することで分離材の分離精製能が向上することを見出した。

　即ち、第二の発明の要旨は以下のとおりである。
［１１］　陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材であって、陰イオン交換基が式（Ｂ１）で表される構造単位を含む分離材。
（式（Ｂ１）中、ｎ２は１以上１０以下である。Ｒ^ｂ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｂ２は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｂ３、Ｒ^ｂ４及びＲ^ｂ５は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
［１２］　前記担体が、球状粒子からなる、［１１］の分離材。
［１３］　前記式（Ｂ１）中、Ｒ^ｂ１がＮＨである、［１１］又は［１２］の分離材。
［１４］　前記式（Ｂ１）中、ｎ２は２以上３以下である、［１１］～［１３］のいずれかの分離材。
［１５］　前記陰イオン交換基が、更に式（Ｂ２）で表される構造単位を含む、［１１］～［１４］のいずれかの分離材。
（式（Ｂ２）中、ｍ２は１以上１０以下である。Ｒ^ｂ６は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ７はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｂ８及びＲ^ｂ９は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｂ１１、Ｒ^ｂ１２及びＲ^ｂ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
［１６］　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、［１１］～［１５］のいずれかの分離材。
［１７］　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を６０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、［１１］～［１５］のいずれかの分離材。
［１８］　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を２０ｍｏｌ％以上６０ｍｏｌ％以下の範囲で含む、［１１］～［１５］のいずれかの分離材。
［１９］　交換容量が０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下である、［１１］～［１８］のいずれかの分離材。

［２０］　以下の工程（２－ａ）及び（２－ｂ）を含むことを特徴とする、標的分子の分離方法；
（２－ａ）：標的分子を含む溶液を［１］～［１９］のいずれかの分離材に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
（２－ｂ）：工程（２－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。
［２１］　前記標的分子が生体高分子、生体高分子の部分構造物、又は生体高分子の化学変性物のいずれかである、［２０］の標的分子の分離方法。
［２２］　前記標的分子がオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物、又はオリゴ核酸の化学変性物のいずれかである、［２０］又は［２１］の標的分子の分離方法。
［２３］　［１１］～［１９］のいずれかの分離材を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備える、クロマトグラフィー用カラム。

　第三の発明に関し、本発明者らは鋭意研究を行なった結果、１つの単量体由来の構造単位に対して２以上のイオン交換基を持つ（共）重合体を担体に結合させることで分離材の分離精製能が向上することを見出した。

　即ち、第三の発明の要旨は以下のとおりである。
［２４］　陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材の製造方法であって、
　陰イオン交換基として、式（Ｃ１）で表される構造単位を含み、数平均分子量が１０００００以下である重合体を得た後、後反応を経て式（Ｃ２）で表される構造単位を含む重合体を得る、分離材の製造方法。
（式（Ｃ１）中、ｎ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
（式（Ｃ２）中、ｎ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｃ５、Ｒ^ｃ６及びＲ^ｃ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
［２５］　前記陰イオン交換基として、式（Ｃ３）で表される構造単位を更に含み、数平均分子量が１０００００以下である重合体を得た後、後反応を経て式（Ｃ２）及び式（Ｃ４）で表される構造単位を含む重合体を得る、［２４］の分離材の製造方法。
（式（Ｃ３）中、ｍ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ９はＯ又はＮＨを表す。）
（式（Ｃ４）中、ｍ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ９はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｃ１１、Ｒ^ｃ１２及びＲ^ｃ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
［２６］　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｃ２）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲に配合する、［２４］又は［２５］の分離材の製造方法。
［２７］　［２４］～［２６］のいずれかの分離材の製造方法で製造された分離材。
［２８］　交換容量が０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下である、［２７］に記載の分離材。
［２９］　［２７］の分離材と、式（Ｃ２）で表される構造単位を含み、数平均分子量が２０００００以下である重合体と、の混合物。

［３０］　以下の工程（３－ａ）及び（３－ｂ）を含むことを特徴とする、標的分子の分離方法；
（３－ａ）：標的分子を含む溶液を［２７］に記載の分離材又は［２９］に記載の混合物に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
（３－ｂ）：工程（３－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。
［３１］　前記標的分子が生体高分子、生体高分子の部分構造物、又は生体高分子の化学変性物のいずれかである、［３０］に記載の標的分子の分離方法。
［３２］　前記標的分子がオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物、又はオリゴ核酸の化学変性物のいずれかである、［３１］に記載の標的分子の分離方法。
［３３］　［２７］に記載の分離材又は［２９］に記載の混合物を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備える、クロマトグラフィー用カラム。

　本発明の分離材及び混合物は、標的分子、特に生体高分子、核酸の分離精製に好適であり、クロマトグラフィー用充填剤としても有用である。
　本発明の分離材の製造方法は、標的分子、特に生体高分子及びその部分構造ないしその化学変性物、核酸及びその部分構造物ないしその化学変性物の分離精製に好適である分離材を製造することができ、更に、クロマトグラフィー用充填材としても有用である。
　本発明の標的分子の分離方法は、不純物を含む標的分子の溶液から標的分子を分離する際の分離性能が良好であり、標的分子、特に生体高分子及びその部分構造ないしその化学変性物、核酸及びその部分構造物ないしその化学変性物の分離精製に有用である。

　以下に本発明について詳述するが、以下に記載する例示は、本発明の実施態様の一例（代表例）であり、本発明はその要旨を逸脱しない限り、これらの内容に限定されるものではない。

　なお、本明細書において、「（メタ）アクリル」とは、「アクリル」と「メタクリル」の一方又は双方を指し、「（メタ）アクリレート」についても同様である。また、「（共）重合」とは「単独重合」と「共重合」の一方又は双方を意味する。

１．第一の発明
１．１．分離材
　第一の発明の一実施形態は、分離材に関する。
　第一の発明の分離材は、陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材あって、陰イオン交換基が下記式（Ａ１）で表される構造単位を含む分離材である。第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、更に下記式（Ａ２）で表される構造単位を含んでもよい。
　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、下記式（Ａ１）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが好ましい。

　式（Ａ１）中、ｎ１は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｎ１は炭素数１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ａ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ａ２及びＲ^ａ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ａ５、Ｒ^ａ６及びＲ^ａ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。

　式（Ａ２）中、ｍ１は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｍ１は炭素数１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ａ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ９はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ａ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ａ１１、Ｒ^ａ１２及びＲ^ａ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。

〔陰イオン交換基〕
　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、上記式（Ａ１）で表される構造単位を含み、更に上記式（Ａ２）で表される構造単位を含んでもよい。すなわち、第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、上記式（Ａ１）で表される構造単位を少なくとも含み、更に上記式（Ａ２）で表される構造単位を含んでもよい（共）重合体からなる。以下、式（Ａ１）で表される構造単位を「構造単位（Ａ１）」とも称し、他の式で表される構造単位も同様に称することがある。
　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、単量体の重合反応性が良好であること、後処理、後反応が容易であること、種類が豊富であること、工業的に入手、合成が容易であることから、構造単位（Ａ１）を含む。

　上記式（Ａ１）中、ｎ１は１以上１０以下であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下が好ましい。すなわち、（ＣＨ_２）_ｎ１は１以上１０以下のアルキレン基であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下のアルキレン基が好ましい。
　Ｒ^ａ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。水溶性と高い分離性を有する観点から、Ｒ^ａ０は水素原子、又は、炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、水素原子又はメチル基がより好ましい。
　Ｒ^ａ１はＯ又はＮＨを表す。分離材の安定性が良好となる点から、Ｒ^ａ１はＮＨが好ましい。
　Ｒ^ａ２及びＲ^ａ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、炭素数１のアルキル基、即ち、メチル基がより好ましい。

　Ｒ^ａ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。水溶性と高い分離性能を有する観点から、Ｒ^ａ４は炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基が好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有していることがより好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有していることが更に好ましい。
　Ｒ^ａ４のアルキレン基が有する置換基の数は、１つでもよく、２つ以上でもよく、例えば１～４であってよい。

　Ｒ^ａ５、Ｒ^ａ６及びＲ^ａ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましい。

　構造単位（Ａ１）としては、以下の構造単位（Ａ１－１）～構造単位（Ａ１－３）が好ましく、構造単位（Ａ１－２）、構造単位（Ａ１－３）がより好ましく、構造単位（Ａ１－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ａ１－１）：上記式（Ａ１）中のｎ１が１以上４以下、Ｒ^ａ０が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ａ１がＮＨ、Ｒ^ａ２及びＲ^ａ３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基、Ｒ^ａ４が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基、Ｒ^ａ５～Ｒ^ａ７が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ａ１－２）：上記式（Ａ１）中のｎ１が１以上４以下、Ｒ^ａ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ａ１がＮＨ、Ｒ^ａ２及びＲ^ａ３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基、Ｒ^ａ４が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有し、Ｒ^ａ５～Ｒ^ａ７が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ａ１－３）：上記式（Ａ１）中のｎ１が１以上４以下、Ｒ^ａ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ａ１がＮＨ、Ｒ^ａ２及びＲ^ａ３がメチル基、Ｒ^ａ４が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有し、Ｒ^ａ５～Ｒ^ａ７が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位

　上記式（Ａ２）中、ｍ１は１以上１０以下であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下が好ましい。すなわち、（ＣＨ_２）_ｍ１は１以上１０以下のアルキレン基であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下のアルキレン基が好ましい。
　Ｒ^ａ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。水溶性と高い分離性を有する観点から、Ｒ^ａ８は水素原子又は炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、水素原子又はメチル基がより好ましい。
　Ｒ^ａ９はＯ又はＮＨを表す。分離材の安定性が良好となる点から、Ｒ^ａ９はＮＨが好ましい。

　Ｒ^ａ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。水溶性と高い分離性能を有する観点から、Ｒ^ａ１０は炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基が好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有していることがより好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有していることが更に好ましい。
　Ｒ^ａ１０のアルキレン基が有する置換基の数は、１つでもよく、２つ以上でもよく、例えば１～４であってよい。

　Ｒ^ａ１１、Ｒ^ａ１２及びＲ^ａ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましい。

　構造単位（Ａ２）としては、以下の構造単位（Ａ２－１）～構造単位（Ａ２－３）が好ましく、構造単位（Ａ２－２）、構造単位（Ａ２－３）がより好ましく、構造単位（Ａ２－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ａ２－１）：上記式（Ａ２）中、ｍ１が１以上４以下、Ｒ^ａ８が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ａ９がＮＨ、Ｒ^ａ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基、Ｒ^ａ１１～Ｒ^ａ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ａ２－２）：上記式（Ａ２）中、ｍ１が１以上４以下、Ｒ^ａ８が水素原子又はメチル基、Ｒ^ａ９がＮＨ、Ｒ^ａ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有し、Ｒ^ａ１１～Ｒ^ａ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ａ２－３）：上記式（Ａ２）中、ｍ１が１以上４以下、Ｒ^ａ８が水素原子又はメチル基、Ｒ^ａ９がＮＨ、Ｒ^ａ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有し、Ｒ^ａ１１～Ｒ^ａ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位

　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基が構造単位（Ａ１）及び構造単位（Ａ２）の両方を含む場合、上記構造単位（Ａ１－１）～（Ａ１－３）のいずれかと、上記構造単位（Ａ２－１）～（Ａ２－３）のいずれかとの組み合わせが好ましく、上記構造単位（Ａ１－２）～（Ａ１－３）のいずれかと、上記構造単位（Ａ２－２）～（Ａ２－３）のいずれかとの組み合わせがより好ましく、上記構造単位（Ａ１－３）と上記構造単位（Ａ２－３）の組み合わせが特に好ましい。

　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ａ１）を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが好ましく、２０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含むことがより好ましく、２０ｍｏｌ％以上５０ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが更に好ましい。また、第一の発明の分離材における前記構造単位（Ａ１）の含有率は４０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下とすることも好ましい。

　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ａ２）を含んでもよく、構造単位（Ａ２）を０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが好ましく、０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下の範囲で含むことがより好ましく、５０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが更に好ましい。また、第一の発明の分離材における前記構造単位（Ａ２）の含有率は０ｍｏｌ％以上６０ｍｏｌ％以下とすることも好ましい。

　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、構造単位（Ａ１）、及び、構造単位（Ａ２）以外に、その他の構造単位（Ａ３）を含んでもよい。

　その他の構造単位（Ａ３）としては、例えば、スチレン等の芳香族ビニル単量体に由来する構造単位、（メタ）アクリルアミドに由来する構造単位、（メタ）アクリル酸に由来する構造単位が挙げられる。
　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基におけるその他の構造単位（Ａ３）の含有率は、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して５ｍｏｌ％以下が好ましい。

　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基としては、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ａ１）の含有率が１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ａ２）の含有率が０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ａ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基が好ましく、構造単位（Ａ１）の含有率が２０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ａ２）の含有率が０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ａ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基がより好ましく、構造単位（Ａ１）の含有率が２０ｍｏｌ％以上５０ｍｏｌ％以下、構造単位（Ａ２）の含有率が５０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ａ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基が更に好ましい。また、第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基としては、構造単位（Ａ１）の含有率が４０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ａ２）の含有率が０ｍｏｌ％以上６０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ａ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基も好ましい。ただし、構造単位（Ａ１）～（Ａ３）の含有率の合計は１００ｍｏｌ％を超えない。

　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基を構成する重合体の数平均分子量は、１０００００以下が好ましく、５２０００以下がより好ましい。上記重合体の数平均分子量が上記上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が増加する。また、上記重合体の数平均分子量は２００００以上が好ましく、３００００以上がより好ましい。上記重合体の数平均分子量の下限と上限は任意に組み合わせることができ、例えば２００００以上１０００００以下、又は３００００以上５２０００以下とすることができる。
　重合体の数平均分子量は、実施例に記載の方法で測定される。

〔担体〕
　第一の発明で用いる担体は、球状粒子、不定形粒子、繊維、中空糸膜、多孔質平膜、モノリス状担体等が挙げられ、工業的スケールアップや工業的操作方法に優れる球状粒子が好ましく、オリゴ核酸の負荷量特性に優れる球状多孔性粒子が特に好ましい。材質は、特に限定されるものではないが、物理強度的な観点からシリカゲル、ヒドロキシアパタイト等の無機系担体；アガロース、デキストラン、セルロース、キトサン等の天然高分子系担体；ポリスチレン、ポリ（メタ）アクリル酸エステル等の合成高分子が好ましく、ポリスチレン及びポリ（メタ）アクリル酸エステルがより好ましい。

〔分離材〕
　第一の発明の分離材は、陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材である。
　陰イオン交換基と担体の結合方法としては、例えば、予め陰イオン交換基を持つ（共）重合体を作成して担体と結合させる方法、陰イオン交換基を持つ単量体と担体を反応溶液に加えて重合する方法、担体と反応性官能基を持つ単量体を重合し、その後、官能基を修飾させる方法が挙げられる。
　第一の発明の分離材は、例えば、後述の第三の発明の分離材の製造方法と同様の方法によって得ることができる。

　第一の発明の分離材の交換容量は、０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下が好ましく、０．１０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下がより好ましく、０．１２ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．１７ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下が更に好ましい。
　分離材の交換容量が上記下限以上であれば核酸のピーク形状が潰れにくく、上記上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が増加する。

　第一の発明の分離材は、核酸医薬製造過程で生産される核酸とその不純物との分離性能が優れているため、バイオ医薬品などの精製工程において好適に使用することができる。具体的には第一の発明の分離材をカラムに充填し、標的分子と不純物が混合された液を通液する。この通液工程で標的分子又は不純物のみを吸着させて分離をする、又は、標的分子と不純物を共に吸着させ、溶出時の塩濃度を増加させることで分離材への吸着性の違いを利用して標的分子と不純物の分離をする用途がある。

１．２．標的分子の分離方法
　第一の発明の別の実施形態は、標的分子の分離方法に関する。
　第一の発明の標的分子の分離方法は、以下の工程（１－ａ）及び（１－ｂ）を含むことを特徴とする。
工程（１－ａ）：標的分子を含む溶液を第一の発明の分離材に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
工程（１－ｂ）：工程（１－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。

　標的分子としては、例えば、無機イオン、アミノ酸や核酸等の低分子化合物、生体高分子が挙げられ、近年求められる分離ターゲットの点から生体高分子及びその部分構造物ないし化学変性物が好ましい。
　生体高分子及びその部分構造物ないし化学変性物としては、例えば、抗体やペプチド等に代表されるタンパク質及びその部分構造物ないし化学的変性物、オリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物が挙げられ、近年、世界中で臨床開発ならびに実用化が大きく進んでいるという観点からオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物が好ましい。

　オリゴ核酸とは数個から数百個の核酸が連なったものであり、具体的にはアンチセンスオリゴ、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、ヘテロ２本鎖核酸に代表される核酸医薬モダリティが挙げられる。オリゴ核酸の残基数は、例えば、３～２００、又は４～１５０とすることができる。
　オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物とは、オリゴ核酸に対して、本来持っている特異な塩基対形成能を化学修飾により強化させたものであり、具体的にはオリゴ核酸にリン酸化、アミノ化、ビオチン化、チオール化、Ｓ化（硫黄化）、蛍光修飾等を施したものが挙げられる。

　例えば、第一の発明の分離材を充填したカラムを用いたクロマトグラフィー法、より具体的にはＨＰＬＣ等の液体クロマトグラフィーによって工程（１－ａ）、工程（１－ｂ）を実施することができる。第一の発明の分離材を充填したカラムを用いる以外は、公知のクロマトグラフィー法を利用することができる。公知のクロマトグラフィー法としてはアニオン交換クロマトグラフィー等が挙げられる。

　標的分子を含む溶液としては、例えば、標的分子であるオリゴ核酸及び不純物が混合された溶液が挙げられる。不純物としては、オリゴ核酸及びオリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物に対して、１残基以上短いもの又は１残基以上長いもの、又はオリゴ核酸にリン酸化、アミノ化、ビオチン化、チオール化、Ｓ化（硫黄化）、蛍光修飾等が施されなかったもの、保護基が残存しているもの等が挙げられる。

　標的分子を分離材に吸着させる工程及び分離材から標的分子を溶離する工程としては、例えば、標的分子を含む溶液を分離材に負荷し、所定塩濃度の塩基性溶離液を前記分離材に流通させ、塩濃度を低塩濃度から高塩濃度に変化させることにより、前記標的分子を不純物から分離する方法である。

　塩基性溶離液としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、アンモニウム水等の無機塩基；モルホリン、４－メチルモルホリン、ピペラジン、ピリジン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリス（ヒドロキシエチル）アミノメタン等の有機塩基からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を含む溶液が挙げられる。
　また、溶離液のｐＨを調整する目的で塩酸、硫酸、リン酸などの無機酸やギ酸、酢酸、クエン酸等の有機酸を添加してもよい。

　塩基性溶離液のｐＨとしては、８以上１４以下が好ましい。ｐＨが８以上であると標的分子と不純物の分離性が向上する。また、ｐＨが１４以下であると分離材の耐久性が向上する。

　塩基性溶離液に添加する塩としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、臭化カリウム、臭化ナトリウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム、硫酸ナトリウム、過塩素酸ナトリウム等が挙げられる。

〔クロマトグラフィー用カラム〕
　第一の発明の更に別の実施形態は、クロマトグラフィー用カラムに関する。
　第一の発明のクロマトグラフィー用カラムは、第一の発明の分離材を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備えるものであればよく、特に限定されるものではない。すなわち、第一の発明のクロマトグラフィー用カラムは、第一の発明の分離材を充填材として用いる以外は、公知の形態を特に制限なく採用することができる。

２．第二の発明
２．１．分離材
　第二の発明の一実施形態は、分離材に関する。
　第二の発明の分離材は、陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材あって、陰イオン交換基が下記式（Ｂ１）で表される構造単位を含む分離材である。第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、更に下記式（Ｂ２）で表される構造単位を含んでもよい。
　第一の発明の分離材が有する陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、下記式（Ｂ１）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが好ましい。

　式（Ｂ１）中、ｎ２は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｎ２は１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ｂ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｂ２は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｂ３、Ｒ^ｂ４及びＲ^ｂ５は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。

　式（Ｂ２）中、ｍ２は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｍ２は１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ｂ６は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ７はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｂ８及びＲ^ｂ９は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｂ１１、Ｒ^ｂ１２及びＲ^ｂ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。

〔陰イオン交換基〕
　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を含み、更に上記式（Ｂ２）で表される構造単位を含んでもよい。すなわち、第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を少なくとも含み、更に上記式（Ｂ２）で表される構造単位を含んでもよい（共）重合体からなる。
　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、単量体の重合反応性が良好であること、後処理、後反応が容易であること、種類が豊富であること、工業的に入手、合成が容易であることから、構造単位（Ｂ１）を含む。

　上記式（Ｂ１）中、ｎ２は１以上１０以下であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下が好ましい。すなわち、（ＣＨ_２）_ｎ２は１以上１０以下のアルキレン基であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下のアルキレン基が好ましい。
　Ｒ^ｂ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。水溶性と高い分離性を有する観点から、Ｒ^ｂ０は水素原子又は炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、水素原子又はメチル基がより好ましい。
　Ｒ^ｂ１はＯ又はＮＨを表す。分離材の安定性が良好となる点から、Ｒ^ｂ１はＮＨが好ましい。

　Ｒ^ｂ２は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。水溶性と高い分離性能を有する観点から、Ｒ^ｂ２は炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基が好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有していることがより好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有していることが更に好ましい。
　Ｒ^ｂ２のアルキレン基が有する置換基の数は、１つでもよく、２つ以上でもよく、例えば１～４であってよい。

　Ｒ^ｂ３、Ｒ^ｂ４及びＲ^ｂ５は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましい。

　構造単位（Ｂ１）としては、以下の構造単位（Ｂ１－１）～構造単位（Ｂ１－３）が好ましく、構造単位（Ｂ１－２）、構造単位（Ｂ１－３）がより好ましく、構造単位（Ｂ１－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ｂ１－１）：上記式（Ｂ１）中、ｎ２が１以上４以下、Ｒ^ｂ０が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ｂ１がＮＨ、Ｒ^ｂ２が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基、Ｒ^ｂ３～Ｒ^ｂ５が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｂ１－２）：上記式（Ｂ１）中、ｎ２が１以上４以下、Ｒ^ｂ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｂ１がＮＨ、Ｒ^ｂ２が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有し、Ｒ^ｂ３～Ｒ^ｂ５が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｂ１－３）：上記式（Ｂ１）中、ｎ２が１以上４以下、Ｒ^ｂ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｂ１がＮＨ、Ｒ^ｂ２が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有し、Ｒ^ｂ３～Ｒ^ｂ５が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位

　上記式（Ｂ２）中、ｍ２は１以上１０以下であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下が好ましい。すなわち、（ＣＨ_２）_ｍ２は１以上１０以下のアルキレン基であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下のアルキレン基が好ましい。
　Ｒ^ｂ６は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。水溶性と高い分離性を有する観点から、水素原子又は炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、水素原子又はメチル基がより好ましい。
　Ｒ^ｂ７はＯ又はＮＨを表す。分離材の安定性が良好となる点から、Ｒ^ｂ７はＮＨが好ましい。

　Ｒ^ｂ８及びＲ^ｂ９は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、炭素数１のアルキル基、即ち、メチル基がより好ましい。

　Ｒ^ｂ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。水溶性と高い分離性能を有する観点から、Ｒ^ｂ１０は炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基が好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有していることがより好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有していることが更に好ましい。
　Ｒ^ｂ１０のアルキレン基が有する置換基の数は、１つでもよく、２つ以上でもよく、例えば１～４であってよい。

　Ｒ^ｂ１１、Ｒ^ｂ１２及びＲ^ｂ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましい。

　構造単位（Ｂ２）としては、以下の構造単位（Ｂ２－１）～構造単位（Ｂ２－３）が好ましく、構造単位（Ｂ２－２）、構造単位（Ｂ２－３）がより好ましく、構造単位（Ｂ２－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ｂ２－１）：上記式（Ｂ２）中のｍ２が１以上４以下、Ｒ^ｂ６が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ｂ７がＮＨ、Ｒ^ｂ８及びＲ^ｂ９が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基、Ｒ^ｂ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基、Ｒ^ｂ１１～Ｒ^ｂ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｂ２－２）：上記式（Ｂ２）中のｍ２が１以上４以下、Ｒ^ｂ６が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｂ７がＮＨ、Ｒ^ｂ８及びＲ^ｂ９が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基、Ｒ^ｂ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有し、Ｒ^ｂ１１～Ｒ^ｂ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｂ２－３）：上記式（Ｂ２）中のｍ２が１以上４以下、Ｒ^ｂ６が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｂ７がＮＨ、Ｒ^ｂ８及びＲ^ｂ９がメチル基、Ｒ^ｂ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有し、Ｒ^ｂ１１～Ｒ^ｂ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位

　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基が構造単位（Ｂ１）及び構造単位（Ｂ２）の両方を含む場合、上記構造単位（Ｂ１－１）～（Ｂ１－３）のいずれかと、上記構造単位（Ｂ２－１）～（Ｂ２－３）のいずれかとの組み合わせが好ましく、上記構造単位（Ｂ１－２）～（Ｂ１－３）のいずれかと、上記構造単位（Ｂ２－２）～（Ｂ２－３）のいずれかとの組み合わせがより好ましく、上記構造単位（Ｂ１－３）と上記構造単位（Ｂ２－３）の組み合わせが特に好ましい。

　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ｂ１）を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが好ましく、３０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含むことがより好ましく、６０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが更に好ましい。また、第二の発明の分離材における前記構造単位（Ｂ１）の含有率は２０ｍｏｌ％以上６０ｍｏｌ％以下とすることも好ましい。
　構造単位（Ｂ１）の含有率が上記下限以上、上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が向上する。

　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ｂ２）を含んでもよく、構造単位（Ｂ２）を０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが好ましく、０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下の範囲で含むことがより好ましく、０ｍｏｌ％以上４０ｍｏｌ％以下の範囲で含むことが更に好ましい。また、第二の発明の分離材における前記構造単位（Ｂ２）の含有率は４０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下とすることも好ましい。

　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基は、構造単位（Ｂ１）、及び、構造単位（Ｂ２）以外に、その他の構造単位（Ｂ３）を含んでもよい。

　その他の構造単位（Ｂ３）としては、例えば、スチレン等の芳香族ビニル単量体に由来する構造単位、（メタ）アクリルアミドに由来する構造単位、（メタ）アクリル酸に由来する構造単位が挙げられる。
　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基におけるその他の構造単位（Ｂ３）の含有率は、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して５ｍｏｌ％以下が好ましい。

　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基としては、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ｂ１）の含有率が１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｂ２）の含有率が０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｂ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基が好ましく、構造単位（Ｂ１）の含有率が３０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｂ２）の含有率が０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｂ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基がより好ましく、構造単位（Ｂ１）の含有率が６０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｂ２）の含有率が０ｍｏｌ％以上４０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｂ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基が更に好ましい。第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基としては、構造単位（Ｂ１）の含有率が２０ｍｏｌ％以上６０ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｂ２）の含有率が４０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｂ３）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基も好ましい。ただし、構造単位（Ｂ１）～（Ｂ３）の含有率の合計は１００ｍｏｌ％を超えない。

　第二の発明の分離材が有する陰イオン交換基を構成する重合体の数平均分子量は、１０００００以下が好ましく、５２０００以下がより好ましい。上記重合体の数平均分子量が上記上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が増加する。また、上記重合体の数平均分子量は２００００以上が好ましく、３００００以上がより好ましい。上記重合体の数平均分子量の下限と上限は任意に組み合わせることができ、例えば２００００以上１０００００以下、又は３００００以上５２０００以下とすることができる。
　重合体の数平均分子量は、実施例に記載の方法で測定される。

〔担体〕
　第二の発明で用いる担体は、球状粒子、不定形粒子、繊維、中空糸膜、多孔質平膜、モノリス状担体等が挙げられ、工業的スケールアップや工業的操作方法に優れる球状粒子が好ましく、オリゴ核酸の負荷量特性に優れる球状多孔性粒子が特に好ましい。材質は、特に限定されるものではないが、物理強度的な観点からシリカゲル、ヒドロキシアパタイト等の無機系担体；アガロース、デキストラン、セルロース、キトサン等の天然高分子系担体；ポリスチレン、ポリ（メタ）アクリル酸エステル等の合成高分子が好ましく、ポリスチレン及びポリ（メタ）アクリル酸エステルがより好ましい。

〔分離材〕
　第二の発明の分離材は、陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材である。
　陰イオン交換基と担体の結合方法としては、例えば、予め陰イオン交換基を持つ（共）重合体を作成して担体と結合させる方法、陰イオン交換基を持つ単量体と担体を反応溶液に加えて重合する方法、担体と反応性官能基を持つ単量体を重合し、その後、官能基を修飾させる方法が挙げられる。
　第二の発明の分離材は、例えば、後述の第三の発明の分離材の製造方法と同様の方法によって得ることができる。より具体的には、構造単位（Ｂ１）は後述の構造単位（Ｃ４）と同様の方法で形成でき、構造単位（Ｂ２）は後述の構造単位（Ｃ２）と同様の方法で形成することができる。

　第二の発明の分離材の交換容量は、０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下が好ましく、０．１０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．１５ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下がより好ましく、０．１０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．１３ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下が更に好ましい。
　分離材の交換容量が上記下限以上であれば核酸のピーク形状が潰れにくく、上記上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が増加する。

　第二の発明の分離材は、核酸医薬製造過程で生産される核酸とその不純物との分離性能が優れているため、バイオ医薬品などの精製工程において好適に使用することができる。具体的には第二の発明の分離材をカラムに充填し、標的分子と不純物が混合された液を通液する。この通液工程で標的分子又は不純物のみを吸着させて分離をする、又は、標的分子と不純物を共に吸着させ、溶出時の塩濃度を増加させることで分離材への吸着性の違いを利用して標的分子と不純物の分離をする用途がある。

２．２．標的分子の分離方法
　第二の発明の別の実施形態は、標的分子の分離方法に関する。
　第二の発明の標的分子の分離方法は、以下の工程（２－ａ）及び（２－ｂ）を含むことを特徴とする。
工程（２－ａ）：標的分子を含む溶液を第二の発明の分離材に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
工程（２－ｂ）：工程（２－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。

　標的分子としては、例えば、無機イオン、アミノ酸や核酸等の低分子化合物、生体高分子が挙げられ、近年求められる分離ターゲットの点から生体高分子及びその部分構造物ないし化学変性物が好ましい。
　生体高分子及びその部分構造物ないし化学変性物としては、例えば、抗体やペプチド等に代表されるタンパク質及びその部分構造物ないし化学的変性物、オリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物が挙げられ、近年、世界中で臨床開発ならびに実用化が大きく進んでいるという観点からオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物が好ましい。

　オリゴ核酸とは数個から数百個の核酸が連なったものであり、具体的にはアンチセンスオリゴ、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、ヘテロ２本鎖核酸に代表される核酸医薬モダリティが挙げられる。オリゴ核酸の残基数は、例えば、３～２００、又は４～１５０とすることができる。
　オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物とは、オリゴ核酸に対して、本来持っている特異な塩基対形成能を化学修飾により強化させたものであり、具体的にはオリゴ核酸にリン酸化、アミノ化、ビオチン化、チオール化、Ｓ化（硫黄化）、蛍光修飾等を施したものが挙げられる。

　例えば、第二の発明の分離材を充填したカラムを用いたクロマトグラフィー法、より具体的にはＨＰＬＣ等の液体クロマトグラフィーによって工程（２－ａ）、工程（２－ｂ）を実施することができる。第二の発明の分離材を充填したカラムを用いる以外は、公知のクロマトグラフィー法を利用することができる。

　標的分子を含む溶液としては、例えば、標的分子であるオリゴ核酸及び不純物が混合された溶液が挙げられる。不純物としては、オリゴ核酸及びオリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物に対して、１残基以上短いもの又は１残基以上長いもの、又はオリゴ核酸にリン酸化、アミノ化、ビオチン化、チオール化、Ｓ化（硫黄化）、蛍光修飾等を施されなかったもの、保護基が残存しているもの等が挙げられる。

　標的分子を分離材に吸着させる工程及び分離材から標的分子を溶離する工程としては、例えば、標的分子を含む溶液を分離材に負荷し、所定塩濃度の塩基性溶離液を前記分離材に流通させ、塩濃度を低塩濃度から高塩濃度に変化させることにより、前記標的分子を不純物から分離する方法である。

　塩基性溶離液としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、アンモニウム水等の無機塩基；モルホリン、４－メチルモルホリン、ピペラジン、ピリジン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリス（ヒドロキシエチル）アミノメタン等の有機塩基からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を含む溶液が挙げられる。
　また、溶離液のｐＨを調整する目的で塩酸、硫酸、リン酸などの無機酸やギ酸、酢酸、クエン酸等の有機酸を添加してもよい。

　塩基性溶離液のｐＨとしては、８以上１４以下が好ましい。ｐＨが８以上であると標的分子と不純物の分離性が向上する。また、ｐＨが１４以下であると分離材の耐久性が向上する。

　塩基性溶離液に添加する塩としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、臭化カリウム、臭化ナトリウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム、硫酸ナトリウム、過塩素酸ナトリウム等が挙げられる。

〔クロマトグラフィー用カラム〕
　第二の発明の更に別の実施形態は、クロマトグラフィー用カラムに関する。
　第二の発明のクロマトグラフィー用カラムは、第二の発明の分離材を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備えるものであればよく、特に限定されるものではない。すなわち、第二の発明のクロマトグラフィー用カラムは、第二の発明の分離材を充填材として用いる以外は、公知の形態を特に制限なく採用することができる。

３．第三の発明
３．１．分離材の製造方法
　第三の発明の一実施形態は、分離材の製造方法に関する。
　第三の発明の分離材の製造方法は、陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材の製造方法であって、陰イオン交換基として、下記式（Ｃ１）で表される構造単位を含み、数平均分子量が１０００００以下である重合体を得た後、後反応を経て下記式（Ｃ２）で表される構造単位を含む重合体を得る。

　第三の発明の分離材の製造方法で用いる担体は、球状粒子、不定形粒子、繊維、中空糸膜、多孔質平膜、モノリス状担体等が挙げられ、工業的スケールアップや工業的操作方法に優れる球状粒子が好ましく、オリゴ核酸の負荷量特性に優れる球状多孔性粒子が特に好ましい。材質は、特に限定されるものではないが、物理強度的な観点からシリカゲル、ヒドロキシアパタイト等の無機系担体；アガロース、デキストラン、セルロース、キトサン等の天然高分子系担体；ポリスチレン、ポリ（メタ）アクリル酸エステル等の合成高分子が好ましく、ポリスチレン及びポリ（メタ）アクリル酸エステルがより好ましい。

　第三の発明の分離材の製造方法においては、前記陰イオン交換基として、下記式（Ｃ３）で表される構造単位を更に含み、数平均分子量が１０００００以下である重合体を得た後、後反応を経て下記式（Ｃ２）及び下記式（Ｃ４）で表される構造単位を含む重合体を得てもよい。
　第三の発明の分離材の製造方法においては、前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、下記式（Ｃ２）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲に配合することが好ましい。
　以下、式（Ｃ１）で表される構造単位を含み、数平均分子量が１０００００以下である重合体を「重合体（Ｘ）」とも称し、重合体（Ｘ）から後反応を経て得られる、構造単位（Ｃ２）を含む重合体を「重合体（Ｙ）」とも称する。

　式（Ｃ１）中、ｎ３は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｎ３は１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。

　式（Ｃ２）中、ｎ３は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｎ３は１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｃ５、Ｒ^ｃ６及びＲ^ｃ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。

　式（Ｃ３）中、ｍ３は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｍ３は１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ９はＯ又はＮＨを表す。

　式（Ｃ４）中、ｍ３は１以上１０以下である。すなわち、（ＣＨ_２）_ｍ３は１以上１０以下のアルキレン基を表す。Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ９はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｃ１１、Ｒ^ｃ１２及びＲ^ｃ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。

〔陰イオン交換基〕
　第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基は、構造単位（Ｃ１）から後反応を経て形成される構造単位（Ｃ２）を含む。また、第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基は、構造単位（Ｃ３）から後反応を経て形成される構造単位（Ｃ４）を更に含んでもよい。すなわち、第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基は、上記式（Ｃ２）で表される構造単位を少なくとも含み、更に上記式（４）で表される構造単位を含んでもよい（共）重合体からなる。
　陰イオン交換基は、単量体の重合反応性が良好であること、後処理、後反応が容易であること、種類が豊富であること、工業的に入手、合成が容易であることから、構造単位（Ｃ２）を含む。

　上記式（Ｃ１）及び式（Ｃ２）中、ｎ３は１以上１０以下であり、分離材の水への親和性の観点から、ｎ３は１以上４以下が好ましい。すなわち、（ＣＨ_２）_ｎ３は１以上１０以下のアルキレン基であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下のアルキレン基が好ましい。
　Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。水溶性と高い分離性を有する観点から、Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、水素原子又はメチル基がより好ましい。
　Ｒ^ｃ１はＯ又はＮＨを表す。分離材の安定性が良好となる点から、Ｒ^ｃ１はＮＨが好ましい。
　Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、炭素数１のアルキル基、即ち、メチル基がより好ましい。

　Ｒ^ｃ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。水溶性と高い分離性能を有する観点から、Ｒ^ｃ４は炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基が好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有していることがより好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有していることが更に好ましい。
　Ｒ^ｃ４のアルキレン基が有する置換基の数は、１つでもよく、２つ以上でもよく、例えば１～４であってよい。

　Ｒ^ｃ５、Ｒ^ｃ６及びＲ^ｃ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましい。

　構造単位（Ｃ１）としては、以下の構造単位（Ｃ１－１）～構造単位（Ｃ１－３）が好ましく、構造単位（Ｃ１－２）、構造単位（Ｃ１－３）がより好ましく、構造単位（Ｃ１－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ｃ１－１）：上記式（Ｃ１）中のｎ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ０が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ｃ１がＮＨ、Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｃ１－２）：上記式（Ｃ１）中のｎ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ１がＮＨ、Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｃ１－３）：上記式（Ｃ１）中のｎ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ１がＮＨ、Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３がメチル基である構造単位

　構造単位（Ｃ２）としては、以下の構造単位（Ｃ２－１）～構造単位（Ｃ２－３）が好ましく、構造単位（Ｃ２－２）、構造単位（Ｃ２－３）がより好ましく、構造単位（Ｃ２－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ｃ２－１）：上記式（Ｃ２）中のｎ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ０が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ｃ１がＮＨ、Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基、Ｒ^ｃ４が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基、Ｒ^ｃ５～Ｒ^ｃ７が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｃ２－２）：上記式（Ｃ２）中のｎ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ１がＮＨ、Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基、Ｒ^ｃ４が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有し、Ｒ^ｃ５～Ｒ^ｃ７が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｃ２－３）：上記式（Ｃ２）中のｎ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ０が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ１がＮＨ、Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３がメチル基、Ｒ^ｃ４が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有し、Ｒ^ｃ５～Ｒ^ｃ７が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位

　上記式（Ｃ３）及び式（Ｃ４）中、ｍ３は１以上１０以下であり、分離材の水への親和性の観点から、ｍ３は１以上４以下が好ましい。すなわち、（ＣＨ_２）_ｍ３は１以上１０以下のアルキレン基であり、分離材の水への親和性の観点から、１以上４以下のアルキレン基が好ましい。
　Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。水溶性と高い分離性を有する観点から、Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１又は２のアルキル基が好ましく、水素原子又はメチル基がより好ましい。
　Ｒ^ｃ９はＯ又はＮＨを表す。分離材の安定性が良好となる点から、Ｒ^ｃ９はＮＨが好ましい。

　Ｒ^ｃ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。水溶性と高い分離性能を有する観点から、Ｒ^ｃ１０は炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基が好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有していることがより好ましく、炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有していることが更に好ましい。
　Ｒ^ｃ１０のアルキレン基が有する置換基の数は、１つでもよく、２つ以上でもよく、例えば１～４であってよい。

　Ｒ^ｃ１１、Ｒ^ｃ１２及びＲ^ｃ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表し、水溶性と高い分離性能を有する観点から、炭素数１又は２のアルキル基が好ましい。

　構造単位（Ｃ３）としては、以下の構造単位（Ｃ３－１）～構造単位（Ｃ３－３）が好ましく、構造単位（Ｃ３－２）、構造単位（Ｃ３－３）がより好ましく、構造単位（Ｃ３－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ｃ３－１）：上記式（Ｃ３）中、ｍ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ８が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ｃ９がＮＨである構造単位
　構造単位（Ｃ３－２）：上記式（Ｃ３）中、ｍ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ８が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ９がＮＨである構造単位
　構造単位（Ｃ３－３）：上記式（Ｃ３）中、ｍ３が１以上２以下、Ｒ^ｃ８が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ９がＮＨである構造単位

　構造単位（Ｃ４）としては、以下の構造単位（Ｃ４－１）～構造単位（Ｃ４－３）が好ましく、構造単位（Ｃ４－２）、構造単位（Ｃ４－３）がより好ましく、構造単位（Ｃ４－３）が特に好ましい。
　構造単位（Ｃ４－１）：上記式（Ｃ４）中、ｍ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ８が水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基、Ｒ^ｃ９がＮＨ、Ｒ^ｃ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基、Ｒ^ｃ１１～Ｒ^ｃ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｃ４－２）：上記式（Ｃ４）中、ｍ３が１以上４以下、Ｒ^ｃ８が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ９がＮＨ、Ｒ^ｃ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基で置換基を有し、Ｒ^ｃ１１～Ｒ^ｃ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位
　構造単位（Ｃ４－３）：上記式（Ｃ４）中、ｍ３が１以上２以下、Ｒ^ｃ８が水素原子又はメチル基、Ｒ^ｃ９がＮＨ、Ｒ^ｃ１０が炭素数１以上４以下の直鎖のアルキレン基でヒドロキシ基又はアルコキシ基を置換基として有し、Ｒ^ｃ１１～Ｒ^ｃ１３が互いに独立して炭素数１又は２のアルキル基である構造単位

　重合体（Ｘ）が構造単位（Ｃ１）及び構造単位（Ｃ３）の両方を含む場合、上記構造単位（Ｃ１－１）～（Ｃ１－３）のいずれかと、上記構造単位（Ｃ３－１）～（Ｃ３－３）のいずれかとの組み合わせが好ましく、上記構造単位（Ｃ１－２）～（Ｃ１－３）のいずれかと、上記構造単位（Ｃ３－２）～（Ｃ３－３）のいずれかとの組み合わせがより好ましく、上記構造単位（Ｃ１－３）と上記構造単位（Ｃ３－３）の組み合わせが特に好ましい。
　重合体（Ｙ）が構造単位（Ｃ２）及び構造単位（Ｃ４）の両方を含む場合の好ましい組み合わせは、重合体（Ｘ）が構造単位（Ｃ１）及び構造単位（Ｃ３）の両方を含む場合と同様である。

　第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基では、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ｃ２）を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲に配合することが好ましく、２０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲に配合することがより好ましく、３０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下の範囲に配合することが更に好ましい。

　第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基は、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ｃ４）を含んでもよく、構造単位（Ｃ４）を０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下の範囲に配合することが好ましく、０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下の範囲に配合することがより好ましく、２０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下の範囲に配合することが更に好ましい。

　第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基は、構造単位（Ｃ２）及び構造単位（Ｃ４）以外に、その他の構造単位（Ｃ５）を含んでもよい。

　その他の構造単位（Ｃ５）としては、例えば、スチレン等の芳香族ビニル単量体に由来する構造単位、（メタ）アクリルアミドに由来する構造単位、（メタ）アクリル酸に由来する構造単位が挙げられる。構造単位（Ｃ１）、構造単位（Ｃ３）が後反応で未反応で残ったものは、その他の構造単位（Ｃ５）に含まれる。
　第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基におけるその他の構造単位（Ｃ５）の含有率は、陰イオン交換基を含む構造単位の全体に対して５ｍｏｌ％以下である。

　第三の発明で製造される分離材が有する陰イオン交換基としては、陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、構造単位（Ｃ２）の含有率が１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｃ４）の含有率が０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｃ５）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基が好ましく、構造単位（Ｃ２）の含有率が２０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｃ４）の含有率が０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｃ５）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基がより好ましく、構造単位（Ｃ２）の含有率が３０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｃ４）の含有率が２０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｃ５）の含有率が５ｍｏｌ％以下の陰イオン交換基が更に好ましい。ただし、構造単位（Ｃ２）、（Ｃ４）、（Ｃ５）の含有率の合計は１００ｍｏｌ％を超えない。

　重合体（Ｘ）の数平均分子量は１０００００以下であり、５２０００以下であることが好ましい。上記上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が増加する。また、重合体（Ｘ）の数平均分子量は２００００以上が好ましく、３００００以上がより好ましい。上記重合体（Ｘ）の数平均分子量の下限と上限は任意に組み合わせることができ、例えば２００００以上１０００００以下、又は３００００以上５２０００以下とすることができる。

　重合体（Ｙ）の数平均分子量は１０００００以下であることが好ましく、５２０００以下であることがより好ましい。重合体（Ｙ）の数平均分子量の上記上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が増加する。また、重合体（Ｙ）の数平均分子量は２００００以上が好ましく、３００００以上がより好ましい。上記重合体（Ｙ）の数平均分子量の下限と上限は任意に組み合わせることができ、例えば２００００以上１０００００以下、又は３００００以上５２０００以下とすることができる。
　重合体の数平均分子量は、実施例に記載の方法で測定される。

〔重合体（Ｘ）の製造〕
　重合体（Ｘ）は、公知の重合開始剤を用いて、下記式（ｃ－１）で表される単量体を少なくとも含み、好ましくは下記式（ｃ－２）で表される単量体を更に含み、必要に応じてスチレン等の芳香族ビニル単量体、（メタ）アクリルアミド等の他の単量体を含む単量体成分を公知の方法で重合することによって製造できる。以下、式（ｃ－１）で表される単量体を「単量体（ｃ－１）」とも称し、他の式で表される単量体も同様に称する。

　上記式（ｃ－１）、（ｃ－２）におけるｎ３、ｍ３、Ｒ^ｃ０、Ｒ^ｃ１～Ｒ^ｃ３、Ｒ^ｃ８、Ｒ^ｃ９は、上記式（Ｃ１）、（Ｃ３）と同義であり、好ましい態様及び組み合わせも同様である。

　重合体（Ｘ）の製造に用いる単量体成分の全体に対する各単量体の割合としては、単量体（ｃ－１）の割合が１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、単量体（ｃ－２）の割合が０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下であることが好ましく、単量体（ｃ－１）の割合が２０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、単量体（ｃ－２）の割合が０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下であることがより好ましく、単量体（ｃ－１）の割合が３０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、単量体（ｃ－２）の割合が２０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下であることが更に好ましい。ただし、単量体（ｃ－１）と単量体（ｃ－２）の割合の合計は１００ｍｏｌ％を超えない。

　重合方法としては、例えば、溶液重合法、懸濁重合法、塊状重合法、乳化重合法等の公知の重合方法が適用できる。

　重合開始剤としては、ラジカル重合開始剤が好ましい。
　ラジカル重合開始剤としては、例えば、２，２’－アゾビスイソブチロニトリル、２，２’－アゾビス（２－メチルブチロニトリル）、２，２’－アゾビス（２，４－ジメチルバレロニトリル）及び２，２’－アゾビス（２，４－ジメチル－４－メトキシバレロニトリル）、２，２’－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩、２，２’－アゾビス［Ｎ－（２－カルボキシエチル）－２－メチルプロピオンアミジン］等のアゾ系のラジカル重合開始剤；１，１，３，３－テトラメチルブチルパーオキシ２－エチルヘキサノエート、ｔ－ヘキシルパーオキシピバレート、２，４－ジクロロベンゾイルパーオキサイド、ｔ－ブチルパーオキシピバレート、ｏ－メチルベンゾイルパーオキサイド、ビス－３，５，５－トリメチルヘキサノイルパーオキサイド、オクタノイルパーオキサイド、ｔ－ブチルパーオキシ－２－エチルヘキサノエート、シクロヘキサノンパーオキサイド、ベンゾイルパーオキサイド、メチルエチルケトンパーオキサイド、ジクミルパーオキサイド、ラウロイルパーオキサイド、ジイソプロピルベンゼンハイドロパーオキサイド、ｔ－ブチルハイドロパーオキサイド及びジ－ｔ－ブチルパーオキサイド等の過酸化物系のラジカル重合開始剤が挙げられる。これらのラジカル重合開始剤は、１種を単独で、又は２種以上を組み合わせて用いることができる。

　ラジカル重合の際には、連鎖移動剤を用いることができる。
　連鎖移動剤としては、例えば、ブタンチオール、オクタンチオール、デカンチオール、ドデカンチオール、ヘキサデカンチオール、オクタデカンチオール、シクロヘキシルメルカプタン、チオフェノール、チオグリコール酸オクチル、２－メルカプトプロピオン酸オクチル、３－メルカプトプロピオン酸オクチル、メルカプトプロピオン酸２－エチルヘキシルエステル、チオグリコール酸２－エチルへキシル、ブチル－３－メルカプトプロピオネート、メルカプトプロピルトリメトキシシラン、メチル－３－メルカプトプロピオネート、２，２－（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、エタンチオール、４－メチルベンゼンチオール、オクタン酸２－メルカプトエチルエステル、１，８－ジメルカプト－３，６－ジオキサオクタン、デカントリチオール、ドデシルメルカプタン、ジフェニルスルホキシド、ジベンジルスルフィド、２，３－ジメチルカプト－１－プロパノ－ル、メルカプトエタノール、チオサリチル酸、α－チオグリセロール、チオグリコール酸、３－メルカプトプロピオン酸、チオリンゴ酸、メルカプト酢酸、メルカプト琥珀酸、２－メルカプトエタンスルホン酸等のチオール系化合物等が挙げられる。これらの連鎖移動剤は、１種を単独で、又は２種以上を組み合わせて用いることができる。

　重合においては、酸性条件下で反応させる目的で、硫酸、塩酸、硝酸等の酸を用いてもよい。これらの酸は、１種を単独で、又は２種以上を組み合わせて用いることができる。なかでも、２価の強酸の点から、硫酸が好ましい。

〔重合体（Ｙ）の製造〕
　重合体（Ｘ）に対し、例えばグリシジルトリメチルアンモニウムクロリド等のグリシジル基含有四級アンモニウム化合物を反応させることにより、重合体（Ｙ）を得ることができる。この反応は、例えば水中で行うことができる。
　重合体（Ｘ）から重合体（Ｙ）を得る後反応の反応温度は、５～７０℃が好ましく、２５～５０℃がより好ましい。

〔担体〕
　第三の発明で用いる担体は、特に限定されるものではないが、物理強度的な観点からシリカゲル、ヒドロキシアパタイト等の無機系担体；アガロース、デキストラン、セルロース、キトサン等の天然高分子系担体；ポリスチレン、ポリ（メタ）アクリル酸エステル等の合成高分子が好ましく、ポリスチレン及びポリ（メタ）アクリル酸エステルがより好ましい。

３．２．分離材
　第三の発明の別の実施形態は、分離材に関する。
　第三の発明の分離材は、上述した第三の発明の分離材の製造方法で製造された分離材であり、陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材である。
　陰イオン交換基と担体の結合方法としては、例えば、予め重合体（Ｘ）を作成し、後反応を行なった重合体（Ｙ）を担体と結合させる方法、予め重合体（Ｘ）を作成し、担体と結合後に後反応を行なって重合体（Ｙ）とする方法、担体と反応性官能基を持つ単量体を重合し、その後、官能基を修飾させる方法が挙げられる。

　第三の発明で製造される分離材の交換容量は、０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下が好ましく、０．１０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．１６ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下がより好ましく、０．１０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．１４ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下が更に好ましい。
　分離材の交換容量が上記下限以上であれば核酸のピーク形状が潰れにくく、上記上限以下であれば核酸とその不純物の選択性が増加する。

　第三の発明の分離材と、構成単位（Ｃ２）を含み、数平均分子量が２０００００以下である重合体（以下、「重合体（Ｚ）」ともいう。）と、の混合物とすることもできる。すなわち、第三の発明の分離材と、担体に結合されていない重合体（Ｚ）と、を含む混合物とすることもできる。
　重合体（Ｚ）は、構成単位（Ｃ４）、その他の構造単位（Ｃ５）をさらに含んでもよい。

　重合体（Ｚ）における構造単位（Ｃ２）の含有率は、重合体（Ｚ）が含む構造単位の全体に対して、１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下が好ましく、２０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下がより好ましく、３０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下が更に好ましい。
　重合体（Ｚ）における構造単位（Ｃ４）の含有率は、重合体（Ｚ）が含む構造単位の全体に対して、０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下が好ましく、０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下がより好ましく、２０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下が更に好ましい。
　重合体（Ｚ）におけるその他の構造単位（Ｃ５）の含有率は、重合体（Ｚ）が含む構造単位の全体に対して、陰イオン交換基を含む構造単位の全体に対して５ｍｏｌ％以下である。

　重合体（Ｚ）としては、構造単位の全体に対して、構造単位（Ｃ２）の含有率が１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｃ４）の含有率が０ｍｏｌ％以上９０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｃ５）の含有率が５ｍｏｌ％以下の重合体が好ましく、構造単位（Ｃ２）の含有率が２０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｃ４）の含有率が０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｃ５）の含有率が５ｍｏｌ％以下の重合体がより好ましく、構造単位（Ｃ２）の含有率が３０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下、構造単位（Ｃ４）の含有率が２０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下、その他の構造単位（Ｃ５）の含有率が５ｍｏｌ％以下の重合体が更に好ましい。ただし、構造単位（Ｃ２）、（Ｃ４）、（Ｃ５）の含有率の合計は１００ｍｏｌ％を超えない。

　重合体（Ｚ）の数平均分子量は、２００００以上２０００００以下が好ましく、４００００以上１２００００以下がより好ましい。重合体（Ｚ）の数平均分子量が上記下限値以上であれば、核酸のピーク形状が潰れにくく、重合体（Ｚ）の数平均分子量が上記上限値以下であれば、核酸とその不純物の選択性が増加する。
　重合体の数平均分子量は、実施例に記載の方法で測定される。
　重合体（Ｚ）は、担体に結合させない以外は、重合体（Ｙ）と同様の方法で製造することができる。

　混合物中の重合体（Ｚ）の割合は、第三の発明の分離材１００質量部に対し、５質量部以上５０質量部以下が好ましく、５質量部以上２０質量部以下がより好ましい。重合体（Ｚ）の割合が上記下限値以上であれば、核酸のピーク形状が潰れにくく、重合体（Ｚ）の割合が上記上限値以下であれば、核酸とその不純物の選択性が増加する。

３．３．標的分子の分離方法
　第三の発明の更に別の実施形態は、標的分子の分離方法に関する。
　第三の発明の標的分子の分離方法は、以下の工程（３－ａ）及び（３－ｂ）を含むことを特徴とする。
工程（３－ａ）：標的分子を含む溶液を第三の発明の分離材又は混合物に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
工程（３－ｂ）：工程（３－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。

　標的分子としては、例えば、無機イオン、アミノ酸や核酸等の低分子化合物、生体高分子が挙げられ、近年求められる分離ターゲットの点から生体高分子及びその部分構造物ないし化学変性物が好ましい。
　生体高分子及びその部分構造物ないし化学変生物としては、例えば、抗体やペプチド等に代表されるタンパク質及びその部分構造物ないし化学的変性物、オリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物が挙げられ、近年、世界中で臨床開発ならびに実用化が大きく進んでいるという観点からオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物が好ましい。

　オリゴ核酸とは数個から数百個の核酸が連なったものであり、具体的にはアンチセンスオリゴ、ｓｉＲＮＡ、アプタマー、ヘテロ２本鎖核酸に代表される核酸医薬モダリティが挙げられる。オリゴ核酸の残基数は、例えば、３～２００、又は４～１５０とすることができる。
　オリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物とは、オリゴ核酸に対して、本来持っている特異な塩基対形成能を化学修飾により強化させたものであり、具体的にはオリゴ核酸にリン酸化、アミノ化、ビオチン化、チオール化、Ｓ化（硫黄化）、蛍光修飾等を施したものが挙げられる。

　例えば、第三の発明の分離材を充填したカラムを用いたクロマトグラフィー法、より具体的にはＨＰＬＣ等の液体クロマトグラフィーによって工程（３－ａ）、工程（３－ｂ）を実施することができる。第三の発明の分離材を充填したカラムを用いる以外は、公知のクロマトグラフィー法を利用することができる。

　標的分子を含む溶液としては、例えば、標的分子であるオリゴ核酸及び不純物が混合された溶液が挙げられる。不純物としては、オリゴ核酸及びオリゴ核酸の部分構造物ないし化学変性物に対して、１残基以上短いもの又は１残基以上長いもの、又はオリゴ核酸にリン酸化、アミノ化、ビオチン化、チオール化、Ｓ化（硫黄化）、蛍光修飾等を施されなかったもの、保護基が残存しているもの等が挙げられる。

　標的分子を分離材に吸着させる工程及び分離材から標的分子を溶離する工程としては、例えば、標的分子を含む溶液を分離材に負荷し、所定塩濃度の塩基性溶離液を前記分離材に流通させ、塩濃度を低塩濃度から高塩濃度に変化させることにより、前記標的分子を不純物から分離する方法である。

　塩基性溶離液としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、アンモニウム水等の無機塩基；モルホリン、４－メチルモルホリン、ピペラジン、ピリジン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリス（ヒドロキシエチル）アミノメタン等の有機塩基からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物を含む溶液が挙げられる。
　また、溶離液のｐＨを調整する目的で塩酸、硫酸、リン酸などの無機酸やギ酸、酢酸、クエン酸等の有機酸を添加してもよい。

　塩基性溶離液のｐＨとしては、８以上１４以下が好ましい。ｐＨが８以上であると標的分子と不純物の分離性が向上する。また、ｐＨが１４以下であると分離材の耐久性が向上する。

　塩基性溶離液に添加する塩としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、臭化カリウム、臭化ナトリウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム、硫酸ナトリウム、過塩素酸ナトリウム等が挙げられる。

３．４．クロマトグラフィー用カラム
　第三の発明の更に別の実施形態は、クロマトグラフィー用カラムに関する。
　第三の発明のクロマトグラフィー用カラムは、第三の発明の分離材を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備えるものであればよく、特に限定されるものではない。すなわち、第三の発明のクロマトグラフィー用カラムは、第三の発明の分離材を充填材として用いる以外は、公知の形態を特に制限なく採用することができる。

４．実験結果
　以下、実施例を用いて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はその要旨を逸脱しない限り、以下の実施例の記載に限定されるものではない。
　なお、以下の記載において、「部」及び「％」は、特記あるものを除き、それぞれ「質量部」及び「質量％」を示す。

４．１．第一の発明について
［評価・評価方法］
＜交換容量の測定＞
　分離材を含むスラリー水溶液を１０ｍＬメスシリンダーに入れ、タップしながら分離材を沈降させ、分離材５．０ｍＬを量り取った。この分離材を濾別し、カラムに入れて２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍＬを流して再生し、水で十分水洗し、流出水のｐＨが中性になったことを確認した。
　得られた分離材を濾別し、それを５％塩化ナトリウム水溶液６０ｍＬと混合し、遊離した酸を滴定し、滴定値を分離材体積で割って、分離材１ｍＬあたりの交換容量とした。

＜不純物を含むＳ化核酸の分取＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：２Ｍ　ＮａＣｌ＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：直径４．６ｍｍ、長さ５０ｍｍ
　サンプル：２１量体Ｓ化核酸（不純物として２０量体Ｓ化核酸を２６％含む）

（２）測定方法
　分離材を充填したカラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー２５容量％まで増加させ平衡化した。不純物として２０量体Ｓ化核酸を２６％含む２１量体Ｓ化核酸溶液を１０ｍｇ／ｍＬ－Ｒになるようにカラムへアプライした。アプライ終了後、Ｂバッファーを２５容量％から１００容量％まで増加させ、吸着した２１量体Ｓ化核酸を溶出させた。０．４ｍＬ間隔で分取し純度９５％での２１量体Ｓ化核酸の回収率の算出を行なった。流速は全て１．０ｍＬ／ｍｉｎで行なった。

＜不純物を含むＳ化核酸の回収率の算出方法＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：１Ｍ　ＮａＣｌＯ_４＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：ＣＱＡ３５Ｓ（三菱ケミカル社製）

（２）Ｓ化核酸溶液の分析
　カラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー３８容量％まで増加させ平衡化した。分取した２１量体Ｓ化核酸溶液を１０μＬアプライし、Ｂバッファーを５８容量％まで増加させ流速０．８ｍＬ／ｍｉｎで分析を行なった。これを分取したサンプル数の分、繰り返し行なった。

（３）２１量体Ｓ化核酸回収率の計算方法
　（２）の分析によって、２１量体Ｓ化核酸のピーク、及び、不純物のピークが得られた。
　各ピークの吸光度が２９５ｎｍにおける面積値を分取時間でプロットし、クロマトグラムを描画した。ある範囲の分取サンプルにおける２１量体Ｓ化核酸の面積値総和をＡ_Ｓ、全分取サンプルの２１量体Ｓ化核酸及び不純物の面積値総和をＡ_{ｔｏｔａｌ}として式（Ｉ）より純度Ｐを算出した。
　次に純度９５％時の２１量体Ｓ化核酸の面積値総和をＡ_９５、２１量体Ｓ化核酸の面積値総和をＡ_Ｓ２１として式（ＩＩ）より純度９５％時の２１量体Ｓ化核酸回収率Ｒを算出した。
　　　Ｐ＝Ａ_Ｓ／Ａ_{ｔｏｔａｌ}×１００　　　式（Ｉ）
　　　Ｒ＝Ａ_９５／Ａ_Ｓ２１×１００　　　式（ＩＩ）

＜１９及び２０量体オリゴ核酸の分離度の算出＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：２Ｍ　ＮａＣｌ＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：直径４．６ｍｍ、長さ５０ｍｍ
　サンプル：１９量体オリゴ核酸、２０量体オリゴ核酸混合物（５０：５０ｗｔ％）
　１９量体オリゴ核酸：下記式で表される配列のオリゴ核酸（配列番号１）

　２０量体オリゴ核酸：下記式で表される配列のオリゴ核酸（配列番号２）

　上記の１９量体オリゴ核酸及び２０量体オリゴ核酸の式は、いずれも便宜上、２列で示しているが、点線で示されている部分を含むリボース間の結合も通常のリン酸ジエステル結合である。

（２）測定方法
　分離材を充填したカラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー１５容量％まで増加させ平衡化した。１９及び２０量体オリゴ核酸混合物を１．０ｍｇ／ｍＬ－Ｒアプライした。アプライ終了後、Ｂバッファーを１５容量％から５０容量％まで増加させ、１９及び２０量体オリゴ核酸混合物を溶出させた。

（３）分離度（Ｒｓ）の計算方法
　（２）の分析によって１９量体オリゴ核酸及び２０量体オリゴ核酸のそれぞれのピークが得られた。１９量体オリゴ核酸のピークトップとなる時間をｔ_１（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ１}、２０量体オリゴ核酸のピークトップとなる時間をｔ_２（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ２}として以下の式よりＲｓを算出した。
　Ｒｓ＝１．１８×（ｔ_２－ｔ_１）／（Ｗ_{０．５ｈ１}＋Ｗ_{０．５ｈ２}）

［実施例Ａ１］
　グリシジルメタクリレート７０部、エチレングリコールジメタクリレート３０部から成り、平均粒径３０μｍ、比表面積３０～５６ｍ^２／ｇ、細孔容積０．９０～１．２０ｍＬ／ｇ、細孔直径５００～１２５０Åである（メタ）アクリル系高分子担体１００部に、水８８３部、Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミド（東京化成製）１８４部、Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミド（東京化成製）６２部、４７％硫酸（富士フイルム和光純薬）８３部、α－チオグリセロール（東京化成製）１部、２，２’－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩（富士フイルム和光純薬製）２部を混合し、溶解させた。この反応液を５０℃で反応させ、反応後粒子を濾過、洗浄した。
　この担体にグリシジルトリメチルアンモニウムクロリド６００部、水２６０部、２Ｍ水酸化ナトリウム２６０部を加え３０℃で反応させた。反応後粒子を濾過し、洗浄した。
　ここで、Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミドとＮ－ヒドロキシエチルアクリルアミドとの比率（モル比）は２０：８０であった。
　Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミドに由来する構造単位は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリドとの反応により、式（Ａ１）で表される構造単位となる。
　Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミドに由来する構造単位は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリドとの反応により、式（Ａ２）で表される構造単位となる。
　実施例Ａ１の分離材について、分離性能を評価した。純度９５％時の２１量体Ｓ化核酸回収率は９２．０％であった。結果を表１に示す。

［実施例Ａ２～Ａ７］
　Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミド、Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミド、４７％硫酸の量を表２に記載の通り変更したこと以外は、実施例Ａ１と同様にして分離材を得て、分離性能を評価した。結果を表１に示す。

［比較例Ａ１］
　グリシジルメタクリレート７０部、エチレングリコールジメタクリレート３０部から成り、平均粒径３０μｍ、比表面積３０～５６ｍ^２／ｇ、細孔容積０．９０～１．２０ｍＬ／ｇ、細孔直径５００～１２５０Åである（メタ）アクリル系高分子担体１００部に、水８８３部、Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミド（東京化成製）６９部、（３－アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリド（東京化成製）７５％水溶液３８６部、α－チオグリセロール（東京化成製）１部、２，２’－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩（富士フイルム和光純薬製）２部を混合し、溶解させた。この反応液を５０℃で反応させ、反応後粒子を濾過、洗浄した。
　ここで、（３－アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリドとＮ－ヒドロキシエチルアクリルアミドとの比率（モル比）は７０：３０であった。
　比較例Ａ１の分離材について、実施例Ａ１と同様に分離性能を評価した。結果を表１に示す。

　表１に示すように、比較例Ａ１は、交換容量、回収率、分離度Ｒｓのいずれも実施例Ａ１～Ａ７に及ばないことが分かる。さらに、実施例Ａ１～Ａ４は、回収率が著しく優れ、実施例Ａ３～Ａ６は、分離度Ｒｓに優れることが分かる。

４．２．第二の発明について
［評価・評価方法］
＜交換容量の測定＞
　分離材を含むスラリー水溶液を１０ｍＬメスシリンダーに入れ、タップしながら分離材を沈降させ、分離材５．０ｍＬを量り取った。この分離材を濾別し、カラムに入れて２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍＬを流して再生し、水で十分水洗し、流出水のｐＨが中性になったことを確認した。
　得られた分離材を濾別し、それを５％塩化ナトリウム水溶液６０ｍＬと混合し、遊離した酸を滴定し、滴定値を分離材体積で割って、分離材１ｍＬあたりの交換容量とした。

＜２０量体及び２１量体Ｓ化核酸の分離度の算出＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：２Ｍ　ＮａＣｌ＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：直径４．６ｍｍ、長さ５０ｍｍ
　サンプル：２０量体Ｓ化核酸及び２１量体Ｓ化核酸

（２）測定方法
　分離材を充填したカラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー２５容量％まで増加させ平衡化した。２０量体Ｓ化核酸を０．２４ｍｇ／ｍＬ－Ｒアプライした。アプライ終了後、Ｂバッファーを２５容量％から１００容量％まで増加させ、２０量体Ｓ化核酸を溶出させた。２１量体Ｓ化核酸についても同様に実施した。

（３）分離度（Ｒｓ）の計算方法
　（２）の分析によって２０量体Ｓ化核酸及び２１量体Ｓ化核酸のそれぞれのピークが得られた。２０量体Ｓ化核酸のピークトップとなる時間をｔ_１（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ１}、２１量体Ｓ化核酸のピークトップとなる時間をｔ_２（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ２}として以下の式よりＲｓを算出した。
　　　Ｒｓ＝１．１８×（ｔ_２－ｔ_１）／（Ｗ_{０．５ｈ１}＋Ｗ_{０．５ｈ２}）

＜１９及び２０量体オリゴ核酸の分離度の算出＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：２Ｍ　ＮａＣｌ＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：直径４．６ｍｍ、長さ５０ｍｍ
　サンプル：１９量体オリゴ核酸、２０量体オリゴ核酸混合物（５０：５０ｗｔ％）

（２）測定方法
　分離材を充填したカラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー１５容量％まで増加させ平衡化した。１９及び２０量体オリゴ核酸混合物を１．０ｍｇ／ｍＬ－Ｒアプライした。アプライ終了後、Ｂバッファーを１５容量％から５０容量％まで増加させ、１９及び２０量体オリゴ核酸混合物を溶出させた。

（３）分離度（Ｒｓ）の計算方法
　（２）の分析によって１９量体オリゴ核酸及び２０量体オリゴ核酸のそれぞれのピークが得られた。１９量体オリゴ核酸のピークトップとなる時間をｔ_１（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ１}、２０量体オリゴ核酸のピークトップとなる時間をｔ_２（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ２}として以下の式よりＲｓを算出した。
　　　Ｒｓ＝１．１８×（ｔ_２－ｔ_１）／（Ｗ_{０．５ｈ１}＋Ｗ_{０．５ｈ２}）

［実施例Ｂ１］
　グリシジルメタクリレート７０部、エチレングリコールジメタクリレート３０部から成り、平均粒径３０μｍ、比表面積３０～５６ｍ^２／ｇ、細孔容積０．９０～１．２０ｍＬ／ｇ、細孔直径５００～１２５０Åである（メタ）アクリル系高分子担体１００部に、水８８３部、Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミド（東京化成製）４６部、Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミド（東京化成製）２５０部、４７％硫酸（富士フイルム和光純薬）３３４部、α－チオグリセロール（東京化成製）１部、２，２’－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩（富士フイルム和光純薬製）２部を混合し、溶解させた。この反応液を５０℃で反応させ、反応後粒子を濾過、洗浄した。
　この担体にグリシジルトリメチルアンモニウムクロリド６００部、水２６０部、２Ｍ水酸化ナトリウム２６０部を加え３０℃で反応させた。反応後粒子を濾過し、洗浄した。
　ここで、Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミドとＮ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミドとの比率（モル比）は２０：８０であった。
　Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミドに由来する構造単位は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリドとの反応により、式（Ｂ１）で表される構造単位となる。
　Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミドに由来する構造単位は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリドとの反応により、式（Ｂ２）で表される構造単位となる。
　実施例Ｂ１の分離材について、分離性能を評価した。

［実施例Ｂ２～Ｂ７］
　Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミド、Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミド、４７％硫酸の量を表４に記載の通り変更したこと以外は、実施例Ｂ１と同様にして分離材を得て、分離性能を評価した。結果を表３に示す。

［比較例Ｂ１］
　グリシジルメタクリレート７０部、エチレングリコールジメタクリレート３０部から成り、平均粒径３０μｍ、比表面積３０～５６ｍ^２／ｇ、細孔容積０．９０～１．２０ｍＬ／ｇ、細孔直径５００～１２５０Åである（メタ）アクリル系高分子担体１００部に、水８８３部、Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミド（東京化成製）６９部、（３－アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリド（東京化成製）７５％水溶液３８６部、α－チオグリセロール（東京化成製）１部、２，２’－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩（富士フイルム和光純薬製）２部を混合し、溶解させた。この反応液を５０℃で反応させ、反応後粒子を濾過、洗浄した。
　ここで、（３－アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリドとＮ－ヒドロキシエチルアクリルアミドとの比率（モル比）は７０：３０であった。
　比較例Ｂ１の分離材について、実施例Ｂ１と同様に分離性能を評価した。結果を表３に示す。

　表３に示すように、比較例Ｂ１は、交換容量、回収率、分離度Ｒｓのいずれも実施例Ｂ１～Ｂ７に及ばないことが分かる。さらに、実施例Ｂ３～Ｂ７は、回収率が著しく優れ、実施例Ｂ１～Ｂ４は、分離度Ｒｓに優れることが分かる。

４．３．第三の発明について
［評価・評価方法］
＜共重合体の数平均分子量＞
（１）使用機器及び試薬
　ポリエチレンオキシド：ＧＬサイエンス
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　移動相：０．１Ｍ硝酸ナトリウム水溶液
　カラム：ＴＳＫｇｅｌ　Ｇ５０００ＰＷ_ＸＬ－ＣＰ

（２）数平均分子量の測定方法
　カラムをシステムに接続し移動相で平衡化した。実施例の重合反応液を濾過して粒子を取り除いた後、反応溶液を１０倍希釈してサンプルを調製した。このサンプルをカラムへアプライし、ゲルろ過クロマトグラフィーを行なった。その後、異なる分子量をもつポリエチレンオキシドから作成した検量線を用いて数平均分子量を算出した。

＜交換容量の測定＞
　分離材を含むスラリー水溶液を１０ｍＬメスシリンダーに入れ、タップしながら分離材を沈降させ、分離材５．０ｍＬを量り取った。この分離材を濾別し、カラムに入れて２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍＬを流して再生し、水で十分水洗し、流出水のｐＨが中性になったことを確認した。
　得られた分離材を濾別し、それを５％塩化ナトリウム水溶液６０ｍＬと混合し、遊離した酸を滴定し、滴定値を分離材体積で割って、分離材１ｍＬあたりの交換容量とした。

＜不純物を含むＳ化核酸の分取＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：２Ｍ　ＮａＣｌ＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：直径４．６ｍｍ、長さ５０ｍｍ
　サンプル：２１量体Ｓ化核酸（不純物として２０量体Ｓ化核酸を２６％含む）

（２）測定方法
　分離材を充填したカラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー２５容量％まで増加させ平衡化した。不純物として２０量体Ｓ化核酸を２６％含む２１量体Ｓ化核酸溶液を１０ｍｇ／ｍＬ－Ｒになるようにカラムへアプライした。アプライ終了後、Ｂバッファーを２５容量％から１００容量％まで増加させ、吸着した２１量体Ｓ化核酸を溶出させた。０．４ｍＬ間隔で分取し純度９５％での２１量体Ｓ化核酸の回収率の算出を行なった。流速は全て１．０ｍＬ／ｍｉｎで行なった。

＜オリゴ核酸回収率の算出方法＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：１Ｍ　ＮａＣｌＯ_４＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：ＣＱＡ３５Ｓ（三菱ケミカル社製）

（２）オリゴ核酸溶液の分析
　カラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー３８容量％まで増加させ平衡化した。分取した２１量体Ｓ化核酸溶液を１０μＬアプライし、Ｂバッファーを５８容量％まで増加させ流速０．８ｍＬ／ｍｉｎで分析を行なった。これを分取したサンプル数の分、繰り返し行なった。

（３）２１量体Ｓ化核酸回収率の計算方法
　（２）の分析によって、２１量体Ｓ化核酸のピーク、及び、不純物のピークが得られた。
　各ピークの吸光度が２９５ｎｍにおける面積値を分取時間でプロットし、クロマトグラムを描画した。ある範囲の分取サンプルにおける２１量体Ｓ化核酸の面積値総和をＡ_Ｓ、全分取サンプルの２１量体Ｓ化核酸及び不純物の面積値総和をＡ_{ｔｏｔａｌ}として式（Ｉ）より純度Ｐを算出した。
　次に純度９５％時の２１量体Ｓ化核酸の面積値総和をＡ_９５、２１量体Ｓ化核酸の面積値総和をＡ_Ｓ２１として式（ＩＩ）より純度９５％時の２１量体Ｓ化核酸回収率Ｒを算出した。
　　　Ｐ＝Ａ_Ｓ／Ａ_{ｔｏｔａｌ}×１００　　　式（Ｉ）
　　　Ｒ＝Ａ_９５／Ａ_Ｓ２１×１００　　　式（ＩＩ）

＜１９及び２０量体オリゴ核酸の分離度の算出＞
（１）使用機器及び試薬
　ＬＣシステム：Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＣＢＭ－２０Ａ
　Ａバッファー：１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　Ｂバッファー：２Ｍ　ＮａＣｌ＋１０ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液
　カラム：直径４．６ｍｍ、長さ５０ｍｍ
　サンプル：１９量体オリゴ核酸、２０量体オリゴ核酸混合物（５０：５０ｗｔ％）

（２）測定方法
　分離材を充填したカラムをＬＣシステムに接続し、Ａバッファーで平衡化した。次にＢバッファー１５容量％まで増加させ平衡化した。１９及び２０量体オリゴ核酸混合物を１．０ｍｇ／ｍＬ－Ｒアプライした。アプライ終了後、Ｂバッファーを１５容量％から５０容量％まで増加させ、１９及び２０量体オリゴ核酸混合物を溶出させた。

（３）分離度（Ｒｓ）の計算方法
　（２）の分析によって１９量体オリゴ核酸及び２０量体オリゴ核酸のそれぞれのピークが得られた。１９量体オリゴ核酸のピークトップとなる時間をｔ_１（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ１}、２０量体オリゴ核酸のピークトップとなる時間をｔ_２（ｍｉｎ）、ピークの半値幅をＷ_{０．５ｈ２}として以下の式よりＲｓを算出した。
　　　Ｒｓ＝１．１８×（ｔ_２－ｔ_１）／（Ｗ_{０．５ｈ１}＋Ｗ_{０．５ｈ２}）

［実施例Ｃ１］
　グリシジルメタクリレート７０部、エチレングリコールジメタクリレート３０部から成り、平均粒径３０μｍ、比表面積３０～５６ｍ^２／ｇ、細孔容積０．９０～１．２０ｍＬ／ｇ、細孔直径５００～１２５０Åである（メタ）アクリル系高分子担体１００部に、水８８３部、Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミド（東京化成製）３１２部、４７％硫酸（富士フイルム和光純薬）４１７部、α－チオグリセロール（東京化成製）４部、２，２’－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩（富士フイルム和光純薬製）２部を混合し、溶解させた。この反応溶液を５０℃で重合反応させ、重合反応液を得た。その後、粒子を濾過し、重合反応液を回収、粒子は洗浄した。
　この担体にグリシジルトリメチルアンモニウムクロリド６００部、水２６０部、２Ｍ水酸化ナトリウム２６０部を加え３０℃で反応させた。反応後、粒子を濾過し、洗浄した。
　式（Ｃ１）で表される、Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミドに由来する構造単位は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリドとの反応により、式（Ｃ２）で表される構造単位となる。
　実施例Ｃ１の分離材について、分離性能を評価した。純度９５％時の２１量体Ｓ化核酸回収率は９３．０％であった。結果を表５に示す。

［実施例Ｃ２～Ｃ７］
　Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］アクリルアミド、Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミド、４７％硫酸、α－チオグリセロールの量を表６に記載の通り変更したこと以外は、実施例Ｃ１と同様にして分離材を得て、分離性能を評価した。
　式（Ｃ３）で表される、Ｎ－ヒドロキシエチルアクリルアミドに由来する構造単位は、グリシジルトリメチルアンモニウムクロリドとの反応により、式（Ｃ４）で表される構造単位となる。結果を表５に示す。

［比較例Ｃ１］
　グリシジルメタクリレート７０部、エチレングリコールジメタクリレート３０部から成り、平均粒径３０μｍ、比表面積３０～５６ｍ^２／ｇ、細孔容積０．９０～１．２０ｍＬ／ｇ、細孔直径５００～１２５０Åである（メタ）アクリル系高分子担体１００部に、水８８３部、（３－アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリド７５％水溶液（東京化成製）５５１部、α－チオグリセロール（東京化成製）１部、２，２’－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）二塩酸塩（富士フイルム和光純薬製）２部を混合し、溶解させた。この反応溶液を５０℃で重合反応させ、重合反応液を得た。その後、粒子を濾過、洗浄した。
　比較例Ｃ１の分離材について、実施例Ｃ１と同様に分離性能を評価した。結果を表５に示す。

　表５に示すように、比較例Ｃ１は、回収率、分離度Ｒｓのいずれも実施例Ｃ１～Ｃ７に及ばないことが分かる。さらに、実施例Ｃ１、Ｃ２、Ｃ５～Ｃ７は、回収率が著しく優れ、実施例Ｃ１～Ｃ３、Ｃ７は、分離度Ｒｓに優れることが分かる。

　本発明の分離材、及び本発明の製造方法で製造される分離材は、特にオリゴ核酸に対する高い選択率で分離・吸着性能を示しており、医薬・診断分野おける実用上の価値は高い。

Claims (33)

1. 　陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材であって、陰イオン交換基が式（Ａ１）で表される構造単位を含む分離材。
   （式（Ａ１）中、ｎ１は１以上１０以下である。Ｒ^ａ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ａ２及びＲ^ａ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ａ５、Ｒ^ａ６及びＲ^ａ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
2. 　前記陰イオン交換基が、更に式（Ａ２）で表される構造単位を含む、請求項１に記載の分離材。
   （式（Ａ２）中、ｍ１は１以上１０以下である。Ｒ^ａ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ａ９はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ａ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ａ１１、Ｒ^ａ１２及びＲ^ａ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
3. 　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ａ１）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、請求項１又は２に記載の分離材。
4. 　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ａ１）で表される構造単位を２０ｍｏｌ％以上５０ｍｏｌ％以下の範囲で含む、請求項３に記載の分離材。
5. 　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ａ１）で表される構造単位を４０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、請求項３に記載の分離材。
6. 　交換容量が０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下である、請求項１又は２に記載の分離材。
7. 　以下の工程（１－ａ）及び（１－ｂ）を含むことを特徴とする、標的分子の分離方法；
   （１－ａ）：標的分子を含む溶液を請求項１又は２に記載の分離材に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
   （１－ｂ）：工程（１－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。
8. 　前記標的分子が生体高分子、生体高分子の部分構造物、又は生体高分子の化学変性物のいずれかである、請求項７に記載の標的分子の分離方法。
9. 　前記標的分子がオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物、又はオリゴ核酸の化学変性物のいずれかである、請求項８に記載の標的分子の分離方法。
10. 　請求項１又は２に記載の分離材を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備える、クロマトグラフィー用カラム。
11. 　陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材であって、陰イオン交換基が式（Ｂ１）で表される構造単位を含む分離材。
    （式（Ｂ１）中、ｎ２は１以上１０以下である。Ｒ^ｂ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｂ２は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｂ３、Ｒ^ｂ４及びＲ^ｂ５は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
12. 　前記担体が、球状粒子からなる、請求項１１に記載の分離材。
13. 　前記式（Ｂ１）中、Ｒ^ｂ１がＮＨである、請求項１１に記載の分離材。
14. 　前記式（Ｂ１）中、ｎ２は２以上３以下である、請求項１１に記載の分離材。
15. 　前記陰イオン交換基が、更に式（Ｂ２）で表される構造単位を含む、請求項１１に記載の分離材。
    （式（Ｂ２）中、ｍ２は１以上１０以下である。Ｒ^ｂ６は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ７はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｂ８及びＲ^ｂ９は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｂ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｂ１１、Ｒ^ｂ１２及びＲ^ｂ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
16. 　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、請求項１１又は１５に記載の分離材。
17. 　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を６０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲で含む、請求項１６に記載の分離材。
18. 　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｂ１）で表される構造単位を２０ｍｏｌ％以上６０ｍｏｌ％以下の範囲で含む、請求項１６に記載の分離材。
19. 　交換容量が０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下である、請求項１１又は１５に記載の分離材。
20. 　以下の工程（２－ａ）及び（２－ｂ）を含むことを特徴とする、標的分子の分離方法；
    （２－ａ）：標的分子を含む溶液を請求項１１又は１５に記載の分離材に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
    （２－ｂ）：工程（２－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。
21. 　前記標的分子が生体高分子、生体高分子の部分構造物、又は生体高分子の化学変性物のいずれかである、請求項２０に記載の標的分子の分離方法。
22. 　前記標的分子がオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物、又はオリゴ核酸の化学変性物のいずれかである、請求項２１に記載の標的分子の分離方法。
23. 　請求項１１又は１５に記載の分離材を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備える、クロマトグラフィー用カラム。
24. 　陰イオン交換基が担体に結合してなる分離材の製造方法であって、
    　陰イオン交換基として、式（Ｃ１）で表される構造単位を含み、数平均分子量が１０００００以下である重合体を得た後、後反応を経て式（Ｃ２）で表される構造単位を含む重合体を得る、分離材の製造方法。
    （式（Ｃ１）中、ｎ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
    （式（Ｃ２）中、ｎ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ０は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ１はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ２及びＲ^ｃ３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ４は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｃ５、Ｒ^ｃ６及びＲ^ｃ７は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
25. 　前記陰イオン交換基として、式（Ｃ３）で表される構造単位を更に含み、数平均分子量が１０００００以下である重合体を得た後、後反応を経て式（Ｃ２）及び式（Ｃ４）で表される構造単位を含む重合体を得る、請求項２４に記載の分離材の製造方法。
    （式（Ｃ３）中、ｍ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ９はＯ又はＮＨを表す。）
    （式（Ｃ４）中、ｍ３は１以上１０以下である。Ｒ^ｃ８は水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。Ｒ^ｃ９はＯ又はＮＨを表す。Ｒ^ｃ１０は炭素数１以上６以下の直鎖又は分岐のアルキレン基であって、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アミノ基、カルボキシ基、スルホ基、ハロゲンから選ばれる１つ以上を置換基として有していてもよい。Ｒ^ｃ１１、Ｒ^ｃ１２及びＲ^ｃ１３は互いに独立して水素原子又は炭素数１以上４以下のアルキル基を表す。）
26. 　前記陰イオン交換基が含む構造単位の全体に対して、上記式（Ｃ２）で表される構造単位を１０ｍｏｌ％以上１００ｍｏｌ％以下の範囲に配合する、請求項２４又は２５に記載の分離材の製造方法。
27. 　請求項２４又は２５に記載の分離材の製造方法で製造された分離材。
28. 　交換容量が０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以上０．２０ｍｍｏｌ／ｍＬ－Ｒ以下である、請求項２７に記載の分離材。
29. 　請求項２７に記載の分離材と、式（Ｃ２）で表される構造単位を含み、数平均分子量が２０００００以下である重合体と、の混合物。
30. 　以下の工程（３－ａ）及び（３－ｂ）を含むことを特徴とする、標的分子の分離方法；
    （３－ａ）：標的分子を含む溶液を請求項２７に記載の分離材又は請求項２９に記載の混合物に接触させ、標的分子を分離材に吸着させる工程、
    （３－ｂ）：工程（３－ａ）で処理した分離材から標的分子を溶離する工程。
31. 　前記標的分子が生体高分子、生体高分子の部分構造物、又は生体高分子の化学変性物のいずれかである、請求項３０に記載の標的分子の分離方法。
32. 　前記生体高分子がオリゴ核酸、オリゴ核酸の部分構造物、又はオリゴ核酸の化学変性物のいずれかである、請求項３１に記載の標的分子の分離方法。
33. 　請求項２７に記載の分離材又は請求項２９に記載の混合物を充填材として含み、少なくとも１つの容器を備える、クロマトグラフィー用カラム。