WO2023008561A1

WO2023008561A1 - 血液成分吸着材料

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Publication number: WO2023008561A1
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Inventors: 神田峻吾; 山下恭平; 小町駿介; 高橋博
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Priority date: 2021-07-30
Filing date: 2022-07-29
Publication date: 2023-02-02
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Abstract

単球及び顆粒球の種類を限定することなく、各種の白血球等の血液成分の吸着をすることが可能な血液成分吸着材料として、繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体のみからなる多孔粒子と、上記多孔粒子表面に固定化された、繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体と、を有し、血液成分吸着材料の表面における上記第２の重合体の含有率が、３～３０ｍｇ／ｇである、血液成分吸着材料を提供する。

Description

血液成分吸着材料

　本発明は、血液成分吸着材料に関する。

　近年、炎症性疾患の治療又は移植前後の免疫抑制、及び血液製剤の発熱・感染症等の副作用抑制の目的でサイトカインや白血球を除去する血液処理の技術、特に血液中から白血球を除去する材料が開発されてきている。なかでも、表面に白血球との親和性を有するリガンドや樹脂を含む材料や白血球が吸着しやすい一定の表面粗さを持った材料を備えるカラムに血液を通液することで、血液中の白血球を吸着除去する技術が開発されている。

　特に、粒子状の血液成分吸着材料は比表面積が小さく、ろ過による目詰まりが起こりづらいため血液処理に適しており、様々な粒子状の吸着材料が開発されている。

　例えば、特許文献１には、水不溶性担体の表面の官能基にスクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース及びセロビオースからなる群から選択される糖鎖が共有結合し、該糖鎖は上記官能基が有するアミノ基と還元末端側で共有結合している、サイトカイン及び白血球の双方を吸着除去するための血液成分吸着用担体が開示されている。

　また、特許文献２には、酢酸セルロースの成形体からなる外層と、上記外層よりも内側に形成されたポリカーボネートからなる内層を少なくとも備えることを特徴とする血液成分吸着用担体が開示されている。

　特許文献３には、少なくとも１種類のポリマーを含むポリマー系であって、ポリマーが１種類以上の芳香族単量体の残基及び１種類以上の架橋剤を含み、ポリマーが外部表面及び複数の細孔を有し、ポリマーが外部表面上及び細孔内の表面上で異なる官能基により官能基化されたポリマー系が開示されている。

　特許文献４には、疎水性多孔質ポリマー粒子と、該疎水性多孔質ポリマー粒子の表面の少なくとも一部を被覆する架橋した水酸基含有高分子からなる被覆層とを備える被覆粒子が開示されている。

　特許文献５には、少なくとも１種類のポリマーを含む生体適合性ポリマー系であって、前記ポリマーがポリオール又は双性イオン性官能基のいずれかを含み、前記ポリマーが、水酸基を繰り返し単位に含む生体適合性ヒドロゲルコーティングを有する固体支持体を含み、前記ポリマー系が、グラム陽性細菌、グラム陽性細菌フラグメント、及びグラム陽性細菌成分のうち１以上をも吸着することができる、生体適合性ポリマー系が開示されている。

　また、非特許文献１には、白血球の一種である肺胞マクロファージが特定の糖鎖を特異的に認識し、接着することが報告されている。

特許第５６４４１４９号特許第３５１３１５５号特許第５９１３３６８号特開２０２１－７９１５号特許第７０３３０８３号

Ｌａｒｇｅｎｔら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．，１９８４年、第２５９巻、ｐ．１７６４－１７６９

　しかしながら、従来の粒子状の白血球等の血液成分吸着材料は、糖由来の分子構造に起因する水素結合に基づいた特異的除去であることから、非特許文献１に開示されているように白血球の中でも糖鎖と特異的に相互作用する肺胞マクロファージのような一部の血球しか吸着できないといった課題があった。

　白血球には単球、顆粒球、リンパ球の分類があり、血液成分吸着においては単球、顆粒球が炎症を惹起する成分として関与することから、特に単球、顆粒球の区別なく吸着することが好ましいと考えられる。

　特許文献１及び特許文献２では、糖由来の分子構造による結合に基づいて血液成分を吸着する材料が開示されている。特許文献１の材料では顆粒球の一種である好中球と単球が吸着できることが開示されているものの、単球と顆粒球全てが吸着できているかどうかについて記載や示唆はされていない。さらに、特許文献１では白血球の特異的結合のための糖鎖が導入されているものの、材料表面の物理的構造によるファンデルワールス力に基づいた吸着除去について、記載や示唆はされていない。また、特許文献２においては具体的に吸着できる血液成分について示されていない。

　特許文献３は、タンパク質、毒素及び病原体の吸着除去を可能とする材料について記載されているが、具体的な効果は一切開示されておらず、白血球等の細胞成分の吸着除去に関しては開示も示唆も無い。

　特許文献４はクロマトグラフィー用の分離材であり、タンパク質の可逆的な吸着用途目的で使用することが想定され、患者を治療する目的での血液成分の不可逆的な吸着除去にそのまま適用することはできない。また、白血球等の細胞成分の吸着除去に関しては一切記載がない。

　特許文献５は、細菌由来成分の１種を除去するために例えばジオール基のようなポリオール官能基又は双性イオン性官能基を固体支持体に付与し、さらに固体支持体表面への血液成分の吸着を防ぐためにヒドロゲルコーティングを付与した生体適合性ポリマー系が開示されている。しかしながら、物理構造によるファンデルワールス力に基づく血液成分の吸着除去について、記載や示唆はされていない。また、白血球等の細胞成分の吸着除去に関しては一切記載がない。

　上記の通り、これまで材料表面の物理的構造によるファンデルワールス力を活かして、単球及び顆粒球の種類を限定せず、広く白血球等の血液成分を吸着できる材料は開発されてきていない。

　そこで、本発明は、芳香族炭化水素基を有する重合体のみからなる多孔粒子の表面に対して、水酸基を有する重合体を特定の含有率で固定することで、血液成分吸着材料表面のファンデルワールス力を制御して、単球及び顆粒球の種類を限定することなく、各種の白血球等の血液成分の吸着をすることが可能な血液成分吸着材料を提供することを目的とする。

　本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意検討を進めた結果、以下の（１）～（６）に係る発明を見いだした。
（１）　繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体のみからなる多孔粒子と、上記多孔粒子表面に固定化された、繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体と、を有し、血液成分吸着材料の表面における上記第２の重合体の含有率が３～３０ｍｇ／ｇである、血液成分吸着材料。
（２）　上記血液成分吸着材料の全体平均における上記第２の重合体の含有率は、０．３ｍｇ／ｇ以下であり、１ｇあたりの細孔体積は、０．５～１．８ｃｍ^３である、（１）記載の血液成分吸着材料。
（３）　上記第１の重合体は、ポリスチレン、ポリエチルビニルベンゼン、ポリジビニルベンゼン、ポリ（エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン）又はポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）である、（１）又は（２）記載の血液成分吸着材料。
（４）　上記第２の重合体は、ポリヒドロキシアルキルアクリレート、ポリヒドロキシアルキルメタクリレート及びポリビニルアルコールからなる群から選択される重合体である、（１）～（３）のいずれか記載の血液成分吸着材料。
（５）　白血球吸着除去用である、（１）～（４）のいずれか記載の血液成分吸着材料。
（６）　（１）～（５）のいずれか記載の血液成分吸着材料を備える、血液浄化カラム。

　本発明の血液成分吸着材料は、表面の物理的構造によるファンデルワールス力に基づいた吸着により、単球及び顆粒球の種類を限定することなく、各種の白血球等の血液成分を高い効率で吸着することができる。

　以下、本発明について詳細に説明する。

　本発明の血液成分吸着材料は、繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体のみからなる多孔粒子と、上記多孔粒子表面に固定化された、繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体と、を有し、血液成分吸着材料の表面における上記第２の重合体の含有率が３～３０ｍｇ／ｇであることを特徴とする。

　「繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体」とは、繰り返し単位中に芳香族構造を含む炭化水素基を有する重合体を意味する。繰り返し単位に芳香族炭化水素基が含まれていれば特に限定は無く、複数の繰り返し単位が含まれていてもよい。芳香族炭化水素基は、例えば、ベンゼン環、ナフタレン環及びアセチレン環のいずれかに炭化水素構造が置換された官能基であることが好ましく、ベンゼン環を含むことがより好ましい。

　繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体は単独の繰り返し単位からなる単独重合体でも、複数種類の繰り返し単位を含む共重合体でもよいが、粒子の溶解を防止し、強度を担保する観点からいずれの場合においてもジビニルベンゼンが含まれていることが好ましい。

　繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体が単独重合体の場合、例えば、取り扱い及び入手性の容易性からポリスチレン、ポリエチルビニルベンゼン、ポリメチルビニルベンゼン及びポリジビニルベンゼンが好ましく、特に粒子の強度を担保する観点からポリジビニルベンゼンが好ましい。なお、各芳香環に対する置換基の置換位置は問わない。

　繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体の組成は、芳香族炭化水素基からなる繰り返し単位に含む以外に限定は無く、複数種類の繰り返し単位を含む共重合体でもよく、例えば、強度を担保する観点からジビニルベンゼンを含むポリ（エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン）、ポリ（メチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン）又はポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）等が好ましく、ポリ（エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン）がより好ましい。

　繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体の化学構造の繰り返し数や分子量に特に限定は無いが、重合体としての物性や強度安定性の観点から繰り返し単位として１００個以上が共有結合で連結された重合体であることが好ましい。

　芳香族炭化水素基を有する第１の重合体が繰り返し単位として１００個以上が共有結合された重合体であることは、イソプロピルアルコール中に含浸したときに溶解しないことから確認できる。

　繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体は、強度保持のために架橋構造や重合開始、停止のための開始剤由来の末端構造を有していてもよい。

　芳香族炭化水素基を有する第１の重合体が架橋構造を有していることは、第１の重合体をアセトンに含浸し、ソックスレー抽出器で還流操作を行って溶解しないことから確認できる。

　「繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体」とは、繰り返し単位中に水酸基を化学構造として含む重合体を意味する。繰り返し単位の分子構造及び分子量に限定は無いが、繰り返し単位の分子量が水酸基あたり２００ｇ／ｍｏｌ以下であることが好ましい。

　繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリヒドロキシアルキルアクリレート及びポリヒドロキシアクリレート等の合成高分子や、デキストラン、デキストラン硫酸、アルギン酸、ヒアルロン酸、ペクチン、キシログルカン、キシラン及びヘパリン等の多糖類が好ましく、滅菌性や安定性の観点からは合成高分子がより好ましく、ポリビニルアルコール、ポリヒドロキシアルキルアクリレート及びポリヒドロキシアクリレートがさらに好ましい。

　多孔粒子への固定の容易性の観点から、繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体は炭化水素のみから構成される繰り返し単位として含む共重合体であってもよい。炭化水素のみから構成される繰り返し単位としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリエチルビニルベンゼン、ポリメチルビニルベンゼン及びポリジビニルベンゼンの繰り返し単位等が好ましい。第２の重合体としては、例えば、ポリ（ビニルアルコール／エチレン）、ポリ（ビニルアルコール／スチレン）、ポリ（ビニルアルコール／メチルビニルベンゼン）、ポリ（ビニルアルコール／ジビニルベンゼン）、ポリ（ヒドロキシアルキルアクリレート／エチレン）、ポリ（ヒドロキシアルキルアクリレート／スチレン）、ポリ（ヒドロキシアルキルアクリレート／メチルビニルベンゼン）、ポリ（ヒドロキシアルキルアクリレート／ジビニルベンゼン）、ポリ（ヒドロキシアクリレート／エチレン）、ポリ（ヒドロキシアクリレート／スチレン）及びポリ（ヒドロキシアクリレート／メチルビニルベンゼン）、ポリ（ヒドロキシアクリレート／ジビニルベンゼン）が好ましい。

　第２の重合体の繰り返し単位における水酸基を含む繰り返し単位の存在比率に規定は無いが、少なすぎると疎水性の増大により血小板の付着率が増加してカラムの目詰まりにつながることから、１０％以上１００％以下であることが好ましく、４０％以上１００％以下であることがより好ましく、９５％以上１００％以下が特に好ましい。

　繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体の化学構造の繰り返し数（以下、重合度）や分子量に特に限定は無いが、表面の相互作用や修飾性の観点から繰り返し単位として１０以上１００００以下の繰り返し単位が共有結合で連結された、重合度が１０～１００００の重合体であることが好ましく、重合度が３０～１００００の重合体がより好ましい。

　第２の重合体の重合度は、市販品として重合度が規定されたものをそのまま用いる場合はその重合度を採用し、重合度が規定されていない場合は重量平均分子量を繰り返し単位の分子量で割り、一の位を四捨五入することで得られる。例えば、重量平均分子量が１００００で、繰り返し単位の分子量が２５０の場合、重合度は４０となる。第２の重合体が二種類以上のモノマーからなる共重合体の場合は、それぞれの繰り返し単位の存在比率をそれぞれの繰り返し単位の分子量にかけて、得られた値をすべて足し合わせて全成分数で割ることで得た加重平均を繰り返し単位の分子量とみなす。

　繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体は、強度保持のために架橋構造や重合開始、停止のための開始剤由来の末端構造を有していてもよい。

　「多孔粒子」とは複数の孔を有する粒子を意味し、本発明における多孔粒子は第１の重合体のみから構成される。

　血液成分吸着材料に含まれる孔の細孔体積に限定は無いが、血液成分吸着材料の強度を向上させて吸着処理をより安定するには、血液成分吸着材料１ｇあたりの細孔体積は０．５ｃｍ^３以上１．８ｃｍ^３以下であることが好ましい。

　血液成分吸着材料における表面とは、全反射測定（ＡＴＲ）法にて赤外吸収スペクトル（波数４５００ｃｍ^－１～５００ｃｍ^－１）で測定された一定の深度までの血液成分吸着材料の物性を意味する。上記血液成分吸着材料の表面の赤外吸収スペクトルは、下記方法により測定できる。Ｎｉｃｏｌｅｔ　ｉＳ５　ＦＴ－ＩＲ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製；ｉＤ５　ダイヤモンドＡＴＲアクセサリ付属、検出器：ＤＴＧＳ　ＫＢｒ、ビームスプリッタ：ＫＢｒ）のＡｄｖａｎｃｅｄ　ＡＴＲモードを選択し、パラメーターを設定する（スキャン回数：１６、データ間隔：０．２４１ｃｍ^－１、自動大気補正：なし）。設定後、バックグラウンド測定実施する。バックグラウンド測定が終了したら、あらかじめ６０℃の温風乾燥機で４時間乾燥させた血液成分吸着材料１ｇをプリズム上に敷き詰め、プレッシャーデバイスがロックするまでプリズムに押しつけ、バックグラウンド測定から２０分以内に測定を開始し、血液成分吸着材料の表面の赤外吸収スペクトルを得ることができる。なお、測定範囲は波数４５００ｃｍ^－１～５００ｃｍ^－１とする。

　血液成分吸着材料における全体平均とは、血液成分吸着材料の構造を均一化した後に全反射測定（ＡＴＲ）法にて赤外吸収スペクトル（波数４５００ｃｍ^－１～５００ｃｍ^－１）で測定された血液成分吸着材料の物性を意味する。上記血液成分吸着材料の全体平均の赤外吸収スペクトルは、下記方法により分析できる。あらかじめ６０℃の温風乾燥機で４時間乾燥させた血液成分吸着材料１ｇを乳鉢（アズワン製メノー乳鉢　深型、φ７０×φ９０×３０ｍｍ）に入れ、乳棒で少なくとも血液成分吸着材料が割れる力をかけて１００回磨り潰し、全ての血液成分吸着材料が１回以上磨り潰されて、血液成分吸着材料の構造が均一化されていることを目視で確認し、血液成分吸着材料の全体平均の粉体を得る。得られた粉体を血液成分吸着材料の代わりに用いる以外は、血液成分吸着材料の表面の赤外吸収スペクトルの測定と同じ方法で測定を行い、血液成分吸着材料の全体平均の赤外吸収スペクトルを得ることができる。

　第２の重合体が多孔粒子の表面に固定化されているとは、第１の重合体からなる多孔粒子の表面に第２の重合体が物理的又は化学的に固定されていることを意味する。物理的な固定の様式に限定はないが、多孔粒子の表面への凝集による固定や重合体の絡み合いによる固定が好ましい。また、化学的な固定の様式にも限定はないが、共有結合又はイオン結合の形成による固定が好ましい。

　第２の重合体の多孔粒子の表面への固定化方法は物理的な固定化でも化学的でもよいが、溶出物が出にくく長期間保管する際の安定性の観点から化学的な固定化がより好ましい。

　第２の重合体を化学的に固定化する場合の方法に特に限定は無いが、安定性の観点から共有結合による固定が好ましく、リンカーを介して固定化されていることが好ましい。

　「リンカー」とは、第１の重合体と第２の重合体を共有結合で固定化するための化学構造であり、第１の重合体の繰り返し単位と第２の重合体の繰り返し単位までの共有結合によって形成された化学構造を意味する。例えば、第１の重合体の芳香環に置換基を導入して第２の重合体の水酸基と反応させて結合する場合は、芳香環炭素から反応後の水酸基の酸素原子までの間の構造を意味する。リンカーとして含まれる化学構造に限定は無いが、例えば電気的に中性の第１の重合体に付与する観点から、アミド結合、アルキレン基、尿素結合、エーテル結合又はエステル結合等の電気的に中性の化学結合が好ましい。この中でも、血小板が吸着することによる目詰まりを抑制する観点から電気的に中性、かつ、親水性を付与できる結合として、アミド結合、尿素結合、エーテル結合又はエステル結合がリンカーに含まれていることがより好ましく、結合の安定性の観点から、アミド結合又はエステル結合が含まれていることがさらにより好ましく、アミド結合が特に好ましい。

　リンカーに含まれるアミド結合は、１級アミド、２級アミド及び３級アミドのいずれかのアミド結合でもよいが、２級アミドが好ましい。また、リンカーに含まれるアミド結合の結合位置についても特に限定は無いが、血小板が吸着しやすい芳香族炭化水素基の疎水性を適切に抑制付与する観点から、アルキレン基を介して第１の重合体の芳香環に共有結合していることが好ましい。アルキレン基としては、メチレン、エチレン又はプロピレン等が好ましく、メチレン基がより好ましい。

また、リンカーには第２の重合体の結合をより制御しやすくするため、イオン性の官能基が含まれていてもよく、例えば、アミノ基又はカルボン酸基が好ましく、血液適合性の観点からアミノ基がより好ましい。

　第１の重合体への固定と、第２の重合体への固定を両立するため、リンカー中の化学構造として、電気的に中性の化学結合と、イオン性の官能基は同時に含まれていてもよい。その場合、化学構造としては第１の重合体側に電気的に中性の化学結合が含まれ、表面側にイオン性の官能基が含まれることが好ましい。例えば第１の重合体の芳香環にアルキレン基を介してアミド結合が共有結合しており、さらにその先端側にアミノ基が結合していることが好ましい。

　第１の重合体とリンカーの共有結合による固定化方法に限定はないが、例えば第１の重合体の繰り返し単位に含まれる芳香環とリンカーが炭素－炭素結合によって結合した状態が好ましい。

　リンカーの炭素数に限定は無いが、第１の重合体と第２の重合体の距離を適切にしつつ、リンカーの運動性を好ましい範囲にして第２の重合体を固定化しやすくするためには、例えば、炭素数は２以上３０以下であることが好ましく、４以上２０以下であることがより好ましく、６以上１５以下がさらに好ましい。

　第２の重合体を物理的に固定化する場合の方法に特に限定は無いが、第２の重合体として疎水性を有する繰り返し単位を含む共重合体を用い、その構造の疎水性相互作用によって第１の重合体に凝集させる又は第１の重合体の形成中に第２の重合体を混入して絡み合いによって固定化する方法等が好ましく、血液成分吸着材料の性能発現の観点から、疎水性相互作用によって第１の重合体に凝集させる方法が好ましい。

　血液成分吸着材料の表面における第２の重合体の含有率は、少なすぎると血液成分吸着材料と血球の相互作用が起こらずに血液成分吸着性能が発現せず、多すぎると親水性が高くなりすぎることで血液成分吸着性能が下がる。このため、血液成分吸着材料の表面における第２の重合体の含有率は、３ｍｇ／ｇ以上３０ｍｇ／ｇ以下であり、３ｍｇ／ｇ以上２０ｍｇ／ｇ以下であることがより好ましい。

　血液成分吸着材料の全体平均における第２の重合体の含有率に制限はないが、血液成分の液性因子の吸着性能を向上させるには、血液成分吸着材料の全体平均における第２の重合体の含有率は、０．３ｍｇ／ｇ以下であることが好ましい。

　血液成分吸着材料の粒子径に限定は無いが、血液成分の吸着の際に血液がより流れやすくするためには、１０μｍ以上１０ｍｍ以下であることが好ましく、５０μｍ以上３ｍｍ以下であることがより好ましく、１００μｍ以上１ｍｍ以下であることがさらに好ましい。

　血液成分吸着材料１ｇあたりの細孔体積とは、示差走査熱量計（以下、ＤＳＣ）を用いた示差走査熱量測定により、細孔内の水の毛管凝集による氷点降下度を測ることで求められる直径２００ｎｍ以下の微小な孔の体積を意味する。

　１ｇあたりの細孔体積は、下記ＤＳＣ測定方法により対象となる材料の含水状態における熱示差（ＤＳＣ）曲線を得たのち、得られたＤＳＣ曲線から水の融点と存在量を算出、さらに細孔体積を算出する。水に含浸された純水１０ｍＬに材料を１ｇ含浸し、溶液が入った容器を超音波洗浄機にかけながらアスピレーターで１０分間脱気する。得られた含水状態の材料を約６ｍｇ、ＤＳＣ測定直前に取り出し、過剰な目視で水滴が見えなくなる程度に表面付着水を除去する。次に、事前に純水で温度、熱量校正（融点０．０℃、融解熱量７９．７ｃａｌ／ｇ）を行ったＤＳＣ　Ｑ１００（ＴＡ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）にアルミニウム製密封型試料容器をセットし、ブランク重量を測定する。続けて材料を約６ｍｇ程度サンプリングしてアルミニウム製密封型試料容器に封入して測定試料とする。測定試料をＤＳＣ　Ｑ１００に入れ、重量を測定する。得られた重量からブランク重量を差し引いた値をサンプル重量とする。測定試料を－５５℃に急冷し、５℃まで０．３℃／分で昇温させて示差走査熱量を測定し、ピークトップ温度を融点として、ＤＳＣ曲線を得る。その後、サンプル試料を取り出して１１０℃で２時間真空乾燥し、再度、ＤＳＣ　Ｑ１００に入れて重量を測定し、真空乾燥前後の減少量を全水分量とする。得られたＤＳＣ曲線、全水分量、サンプル重量から、Ｉｓｈｉｋｉｒｉｙａｍａらの方法（ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＣＯＬＬＯＩＤ　ＡＮＤ　ＩＮＴＥＲＦＡＣＥ　ＳＣＩＥＮＣＥ、１９９５年、１７１巻、ｐ．１０３－１１１）に従い、材料の１ｇあたりの細孔体積を算出する。

　多孔粒子が第１の重合体のみからなることは、多孔粒子を乳鉢でＮＭＲチューブに挿入できるよう粉砕して固体^１３ＣＮＭＲを測定し、芳香環由来領域（δ：１１０～１７０ｐｐｍ）にピークがあることから確認できる。

　血液成分吸着材料の表面に第２の重合体が含まれていることは血液成分吸着材料の表面の赤外吸収スペクトルにおいて、ＯＨ伸縮の吸収波長（３３４０ｃｍ^－１）が存在することから確認できる。

　血液成分吸着材料の全体平均における第２の重合体の含有率は、血液成分吸着材料の乾燥重量をあらかじめ測定後、９０℃以上のテトラヒドロフラン、塩酸、水酸化ナトリウム水溶液にそれぞれ一晩含浸した後にイオン交換水で中性になるまで繰り返し洗浄し、再度乾燥させて血液成分吸着材料の重量を測定して血液成分吸着材料の溶出後重量として下記式１から得られた値の小数点第２位を四捨五入し、算出できる。

　　血液成分吸着材料の全体平均における第２の重合体の含有率（ｍｇ／ｇ）＝｛乾燥重量（１０００ｍｇ）－溶出後重量（ｍｇ）｝／１ｇ　・・・式１

　血液成分吸着材料の全体平均の赤外吸収スペクトルと血液成分吸着材料の表面の赤外吸収スペクトルのそれぞれのＣＨ伸縮由来のピーク（２９２０ｃｍ^－１）の吸収強度と、血液成分吸着材料の全体平均の赤外吸収スペクトルと血液成分吸着材料の表面の赤外吸収スペクトルのそれぞれのＯＨ基由来のピーク（３３４０ｃｍ^－１）の吸収強度に基づき、下記式２から、得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料の表面における第２の重合体の含有率を算出する。なお、式２に使用する「血液成分吸着材料の１の全体平均における第２の重合体の含有率」の数値は式１を用いて算出した、小数点第２を四捨五入する前の値を用いて計算した。

　　血液成分吸着材料の表面における第２の重合体の含有率（ｍｇ／ｇ）＝血液成分吸着材料の全体平均における第２の重合体の含有率（ｍｇ／ｇ）×｛血液成分吸着材料の表面のＯＨ基由来のピーク吸収強度／血液成分吸着材料の表面のＣＨ伸縮由来のピーク吸収強度｝／｛血液成分吸着材料の全体平均のＯＨ基由来のピーク吸収強度／血液成分吸着材料の全体平均のＣＨ伸縮由来のピーク吸収強度｝　・・・式２

　血液成分吸着材料の粒子径とは、粒子サンプル１０個をランダムに採取して、走査型電子顕微鏡を用いて１０００倍～３０００倍の写真をそれぞれ撮影し、各写真辺り１０カ所（計１００箇所）の直径を測定した値の平均値を意味する。

　「血液成分吸着材料」とは、血液成分を吸着する性能を有する材料を意味する。

　「血液成分」とは、血液を構成する成分を表し、血液中の液性因子と血液中の細胞に分類される。本実施形態の血液成分吸着材料が吸着対象とする血液成分に特に制限はないが、血液成分の中でも血液中の細胞が好ましく、血液中の細胞と血液中の液性因子が同時に吸着できることがより好ましい。

　「血液中の細胞」とは、血液中に含まれる細胞を意味し、例えば、顆粒球、単球並びにリンパ球等の白血球成分、赤血球及び血小板等が挙げられる。炎症性疾患の治療を目的とする場合は、吸着対象として白血球成分が好ましく、白血球成分の中でも単球と顆粒球の除去が好ましく、活性化顆粒球、活性化単球又は活性化顆粒球－活性化血小板複合体、活性化単球－活性化血小板複合体がより好ましい。

　「活性化顆粒球」及び「活性化単球」とは、サイトカインやＬＰＳ等によりサイトカイン又は活性酸素等を放出する顆粒球及び単球を意味する。活性化の程度は、活性化白血球が放出する活性化酸素量の測定又は表面抗原の発現をフローサイトメトリー等で測定することで判別できる。

　「活性化血小板」とは、サイトカインやＬＰＳ等によりサイトカイン又は活性酸素等を放出する血小板を意味する。

　「活性化顆粒球－活性化血小板複合体」及び「活性化単球－活性化血小板複合体」とは、活性化顆粒球又は活性化単球と活性化血小板とが結合し、自己組織への貪食作用を有するものを意味する。特に、炎症性疾患の患者の治療においては、病態に直接関与していると考えられる活性化顆粒球－活性化血小板複合体を除去することが必要と考えられる。

　上記顆粒球はさらに好中球、好塩基球及び好酸球に分類されるが、それらの選択性はなく単球と顆粒球に由来する成分が一括で除去されていることが好ましい。

　「血液中の液性因子」とは、血液中に溶解している有機物を指す。具体的には、尿素、β２－ミクログロブリン、サイトカイン、ＩｇＥ並びにＩｇＧ等のタンパク質及びｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＬＰＳ）等の多糖類が挙げられる。中でも、尿素並びにサイトカイン等のタンパク質及びＬＰＳ等の多糖類が吸着対象として好ましく、さらに炎症性疾患の治療を目的とする場合はサイトカインが吸着対象としてより好ましい。

　「サイトカイン」とは、感染や外傷等の刺激により、免疫担当細胞を始めとする各種の細胞から産生され細胞外に放出されて作用する一群のタンパク質を意味し、例えば、インターフェロンα、インターフェロンβ、インターフェロンγ、インターロイキン１～インターロイキン１５、腫瘍壊死因子－α、腫瘍壊死因子－β、ハイモビリティーグループボックス－１、エリスロポエチン又は単球走化因子が挙げられ、特に炎症性疾患の治療においてはインターロイキン８（ＩＬ－８）が吸着対象として好ましい。

　「炎症性疾患」とは、体内で炎症反応が惹起される疾患全体を表し、例えば、全身性エリテマトーデス、悪性関節リウマチ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎、クローン病、薬剤性肝炎、アルコール性肝炎、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、敗血症（例えば、グラム陰性菌由来の敗血症、グラム陽性菌由来の敗血症、培養陰性敗血症及び真菌性敗血症）、インフルエンザ、急性呼吸窮迫症候群（ａｃｕｔｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｄｉｓｔｒｅｓｓ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ；ＡＲＤＳ、急性呼吸促迫症候群、急性呼吸促進症候群とも表記される。）、急性肺傷害（ａｃｕｔｅ　ｌｕｎｇ　ｉｎｊｕｒｙ；ＡＬＩ）、膵炎、特発性間質性肺炎（Ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ　Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　Ｆｉｂｒｏｓｉｓ；ＩＰＦ）、炎症性腸炎（例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病）、血液製剤の輸血、臓器移植、臓器移植後の再灌流障害、胆嚢炎、胆管炎又は新生児血液型不適合等が挙げられる。

　炎症性疾患の中でも、血液中に原因物質が放出され、血液浄化による治療効果が特に期待できることから、薬剤性肝炎、アルコール性肝炎、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎若しくはＥ型肝炎、敗血症（例えば、グラム陰性菌由来の敗血症、グラム陽性菌由来の敗血症、培養陰性敗血症、真菌性敗血症）、インフルエンザ、急性呼吸窮迫症候群、急性肺傷害、膵炎又は特発性間質性肺炎が治療対象として好ましい。本実施形態の吸着用カラムの用途としては、例えば、上記の炎症性疾患の治療用途が好ましく、中でも薬剤のみでは治療が困難であり、サイトカインと活性化白血球－活性化血小板の両方が関与している疾患と考えられる、敗血症（例えば、グラム陰性菌由来の敗血症、グラム陽性菌由来の敗血症、培養陰性敗血症、真菌性敗血症）、インフルエンザ、急性呼吸窮迫症候群、急性肺傷害又は特発性間質性肺炎の治療用途がより好ましい。

　「吸着」とは特定の物質が材料に付着し、容易に剥離しない状態を意味する。吸着の原理に特に制限はないが、例えば、静電相互作用のようなイオン性相互作用、疎水性相互作用、水素結合といったファンデルワールス力によって付着した状態や、細胞の接着や白血球の貪食等の生物学的に付着している状態を意味する。本実施形態の血液成分吸着材料はファンデルワールス力によって吸着できることが好ましい。

　本実施形態の血液成分吸着用材料は、例えば、以下の方法により製造することができるが、この方法に限られるものではない。

　第１の重合体のみからなる多孔粒子の製造は、懸濁重合において芳香族炭化水素基を有するモノマーと架橋剤、分散剤及び開始剤を添加することにより達成することができる。例えば、モノマーは芳香環を有するビニルモノマーであるスチレン、エチルビニルベンゼン又はジビニルベンゼンが挙げられ、少なくともジビニルベンゼンが含まれていることが好ましい。架橋剤はジビニルベンゼンが挙げられ、分散剤はポリビニルアルコールが挙げられ、開始剤は過酸化ベンゾイルが挙げられる。

　ビニルモノマーは市販のものをそのまま用いる事ができる。市販のジビニルベンゼンモノマーは一般的にエチルビニルベンゼンとの混合物であることから、ジビニルベンゼンの重合によって得られる第１の重合体は共重合体であるポリ（エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン）となる。

　多孔粒子の粒径は分散剤の濃度を上げることで小さくすることができる。

　多孔粒子の細孔体積はモノマー濃度を下げる、開始剤濃度を上げる、架橋剤濃度（例えば、ジビニルベンゼン濃度）を下げることで上げることができる。

　多孔粒子への第２の重合体の固定化方法は、例えば第２の重合体を有機溶剤に溶解し、その溶液中に多孔粒子を添加若しくはコートする方法、又は、多孔粒子の表面にアミン化合物を固定化し、それをリンカーとして第２の重合体の末端構造と反応させる方法で固定化することができる。

　第２の重合体を有機溶剤に溶解し、その溶液中に多孔粒子を添加若しくはコートする場合、有機溶剤としてはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、トルエン、キシレン、ヘキサン又は酢酸エチルが好ましく、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、トルエン又は酢酸エチルが特に好ましい。

　有機溶剤中の第２の重合体の濃度は１～１０％が好ましく、５％がより好ましい。

　第２の重合体は市販されているものを用いることができる。

　多孔粒子の表面にアミン化合物を固定化し、それをリンカーとして第２の重合体の末端構造と反応させることで固定化する場合、例えば第２の重合体の末端構造として水酸基、カルボン酸やエポキシ基、ウレア基及び無水カルボン酸基等を固定化し、アミン化合物のアミン又はカルボン酸と縮合反応を行うことで達成できる。

　多孔粒子へのアミン化合物の固定化は第１の重合体に含まれる芳香環に対してさらにリンカーとなる官能基を固定化することで達成できる。リンカーとなる官能基に限定はないが、例えばハロゲン化アルキル基、カルボン酸基及びエポキシ基等が挙げられる。

　固定化するアミン化合物は、例えばエチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミンやポリエチレンイミン、グリシンなどが好ましく、エチレンジアミン又はグリシンが好ましい。これらは市販されているものを用いることができる。

　反応溶媒としては、例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジエチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン又はジメチルスルホキシドが好ましく、ジメチルスルホキシドがより好ましい。

　塩基としては、例えば、トリエチルアミン若しくは１，４－ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン等の有機塩基又は水酸化ナトリウム等の無機塩基が挙げられるが、トリエチルアミン等の有機塩基が好ましい。

　反応液中のアミン化合物の濃度は、５０ｍＭ～１０００ｍＭが好ましく、５０ｍＭ～１００ｍＭがより好ましい。

　ハロゲン化アルキル基の固定化は例えば、触媒存在下、多孔粒子へのハロゲン化ヒドロキシアルキル化合物の導入によって製造することができる。

　ハロゲン化ヒドロキシアルキル化合物は、例えば、Ｎ－ヒドロキシメチル－２－クロロアセトアミドなどが好ましく、市販されているものを用いることができる。

　反応溶媒としては、例えば、ニトロベンゼン、ニトロプロパン、クロロベンゼン、トルエン又はキシレンが挙げられるが、ニトロベンゼン又はニトロプロパンが好ましい。

　触媒としては、例えば、硫酸、塩酸、硝酸又はハロゲン化アルミニウム（ＩＩＩ）（例えば、塩化アルミニウム（ＩＩＩ））若しくはハロゲン化鉄（ＩＩＩ）（例えば、塩化鉄（ＩＩＩ））等のルイス酸が挙げられ、硫酸が好ましい。

　反応液中の触媒の濃度は、５ｗｔ％～８０ｗｔ％が好ましく、３０ｗｔ％～７０ｗｔ％がより好ましい。

　反応温度は、０℃～９０℃が好ましく、５℃～４０℃がより好ましい。

　反応時間は、１分～１２０時間が好ましく、５分～２４時間がより好ましい。

　血液成分吸着材料の表面における第２の重合体の固定化量及び血液成分吸着材料の全体平均における第２の重合体の固定化量の制御は、第２の重合体をコートする場合は、有機溶剤中の第２の重合体濃度を増大させること、コート温度を増大させること、又は、第２の重合体の分子量を低下させることでそれぞれ増大させることができる。

　血液成分吸着材料の表面における第２の重合体の固定化量及び血液成分吸着材料の全体平均における第２の重合体の固定化量は、第２の重合体を化学反応により固定化する場合は、固定化時の第２の重合体濃度を増大させること、温度を増大させること、又は、長期間反応させることで制御することができる。

　上記血液成分吸着材料は、吸着カラムの外形を形成する容器に充填する材料として好ましく用いられる。

　吸着カラムの外形を形成する容器の形状としては、血液成分吸着材料を充填でき、かつ、血液の入口と出口を有する容器であればよいが、例えば、円柱状容器又は三角柱状、四角柱状、六角柱状若しくは八角柱状等の角柱状容器が挙げられる。

　さらに、上記血液成分吸着材料を備える吸着カラムは、細菌由来の感染症治療に用いる体外循環用として、細菌由来の感染症の治療に好適に用いることができる。細菌由来の感染症治療用として使用する場合、上記血液成分吸着材料を備える吸着カラムと患者とを血液回路で接続し、当該患者から取り出した体液を上記吸着カラムに通過させ、これを患者に戻すという体外循環方法が好ましい。体液等の処理時間としては、血液成分によるさらなる炎症誘発を抑制する観点から、持続的な処理が好ましく、４時間以上がより好ましく、２４時間以上がさらに好ましい。

　上記吸着材料を備える吸着カラムは、他の体液処理方法や医療機器と併用しても構わない。他の体液処理方法や医療機器としては、例えば、血漿交換、腹膜透析、血漿分離器、ヘモフィルター、人工心肺又はＥＣＭＯが挙げられる。

　血液成分吸着材料の吸着性能の評価方法としては、白血球の吸着率を評価する方法が挙げられる。白血球の吸着率の算出方法としては、例えば、入口及び出口を有する容器に血液成分吸着材料を充填し、白血球を含む液体を通液させて、入口及び出口でのそれらの濃度の変化から白血球の吸着率をそれぞれ算出する方法が挙げられる。白血球濃度の測定は市販の多項目血球分析装置により測定することができ、具体的には以下の方法で測定出来る。

　上下に血液の出入り口のある円筒状カラム（内径１ｃｍ×高さ５．１４ｃｍ）に、３．１ｍＬの血液成分吸着材料を充填したカラムを作製する。このカラムに、３７℃（外温）で保温したヒト血液を、流量１．９ｍＬ／ｍｉｎで５分間通液し、５分後のカラム入口の血液とカラム出口の血液成分を分析し、血液成分吸着材料の白血球吸着率を算出する。なお、各血液成分数の測定は、多項目自動血球分析装置ＸＴ－１８００ｉ（シスメックス株式会社製）を用いて行う。白血球吸着率は、以下の式３により算出できる。

　血液成分吸着材料の白血球吸着率（％）＝｛（カラム入口血液中の顆粒球、単球の総数）－（カラム出口血液中の顆粒球、単球の総数）｝／（カラム入口血液中の顆粒球、単球の総数）×１００　・・・式３

　白血球は細胞であり吸着率の測定ばらつきを含むという観点から、吸着率が２０％以上であれば、有意に除去されていると判定できる。

　上記理由より、白血球吸着性能は、吸着率２０％以上であれば十分に発現していると見なすことができ、吸着率５０％以上がさらに好ましい。

　また、本発明の血液成分吸着材料はファンデルワールス力による白血球吸着であることから白血球の成分に由来する除去率の違いは小さいと考えられる。よって、白血球吸着率が２０％以上超えていれば、それぞれ個別の白血球成分の単球、好中球及び顆粒球がすべて２０％以上除去されており、測定ばらつきを考慮しても有意に除去されていると考えられる。

　血液成分吸着材料の吸着性能の中でも、単球、好中球、好塩基球及び好酸球のそれぞれの吸着率の評価方法は、以下の１）～４）の手順により評価できる。
　１）上下に血液の出入り口のある円筒状カラム（内径１ｃｍ×高さ５．１４ｃｍ）に、３．１ｍＬの血液成分吸着材料４を充填したカラムを作製する。
　２）カラムに、３７℃（外温）で保温したヒト血液を、流量１．９ｍＬ／ｍｉｎで５分間通液する。
　３）５分後にカラム入口血液とカラム出口血液をサンプリングし、多項目自動血球分析装置ＸＴ－１８００ｉ（シスメックス株式会社製）を用いて、単球数、好中球数及び好塩基球数、好酸球数のそれぞれの値を得る。
　４）下記式４～７を用いて、それぞれ得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料の単球除去率、好中球除去率、好塩基球除去率及び好酸球除去率を算出する。

　　血液成分吸着材料の単球吸着率（％）＝｛（カラム入口血液中の単球数）－（カラム出口血液中の単球数）｝／（カラム入口中の単球数）×１００　・・・式４

　　血液成分吸着材料の好中球吸着率（％）＝｛（カラム入口血液中の好中球数）－（カラム出口血液中の好中球数）｝／（カラム入口中の好中球数）×１００　・・・式５

　　血液成分吸着材料の好塩基球吸着率（％）＝｛（カラム入口血液中の好塩基球数）－（カラム出口中の好塩基球数）｝／（カラム入口血液中の好塩基球数）×１００　・・・式６
　
　　血液成分吸着材料の好酸球吸着率（％）＝｛（カラム入口血液中の好酸球数）－（カラム出口中の好酸球数）｝／（カラム入口血液中の好酸数）×１００　・・・式７

　また、サイトカインを溶解したウシ胎児血清（以下、ＦＢＳ）に血液成分吸着材料を含浸し、含浸後ＦＢＳ中のサイトカイン濃度減少量を評価し、サイトカインの吸着率を算出する方法が挙げられる。サイトカインは炎症性疾患の病態改善のために血中から除去が好ましい物質であるため、含浸することによる濃度減少量が大きいほど、血液成分吸着性能が高いと判断できる。サイトカインとしては、インターロイキン１β、インターロイキン６、インターロイキン８、ハイモビリティーグループタンパク－１及び腫瘍壊死因子－β等が挙げられるが、インターロイキン６及びインターロイキン８が炎症性疾患の治療現場で代表的なバイオマーカーであるという点でより好ましい。

　上記血液成分吸着材料へのサイトカインの吸着はファンデルワールス力等の分子間力に由来する平衡反応であると考えられることから、サイトカインの濃度に依存せず、４時間程度吸着処理を実施すれば吸着平衡に達すると考えられる。

　上記理由より、サイトカインの吸着率は、４時間で全て１００％であることが好ましく、時間依存性があるため２時間で５０％以上であれば十分に吸着性能が発現していると見なすことができる。

　血液成分吸着材料の滅菌による性能低下は、以下の１）～５）の手順により評価することができる。
　１）あらかじめ血液成分吸着材料の白血球吸着率を測定する。
　２）血液成分吸着材料５ｍＬと２５ｍＬの蒸留水を５０ｍＬ遠沈管に入れ、吸収線量を４０ｋＧｙとしてガンマ線照射を行うことで滅菌後の血液成分吸着材料を得る。
　３）得られた滅菌後の血液成分吸着材料を充填したカラムと、滅菌前の血液成分吸着材料を充填したカラムを作製する。
　４）それぞれのカラムに、３７℃（外温）で保温したヒト血液を、流量１．９ｍＬ／ｍｉｎで５分間通液する。
　５）５分後にカラム入口血液とカラム出口血液をサンプリングし、多項目自動血球分析装置ＸＴ－１８００ｉ（シスメックス株式会社製）を用いて白血球吸着率を測定し、下記式８を用いて得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料の滅菌前後の性能低下率を算出する。

　　血液成分吸着材料の滅菌前後の性能低下率（％）＝１００×｛（血液成分吸着材料の白血球吸着率）－（血液成分吸着材料の滅菌後の白血球吸着率）｝／（血液成分吸着材料の白血球吸着率）・・・式８

　血液成分吸着材料の滅菌前後の性能低下率の好ましい範囲に限定は無いが、血液成分吸着材料からの分解物溶出を低減させることができることから、性能低下率は５０％未満であることが好ましい。

　血液成分吸着材料の血小板吸着率は以下の１）～４）の手順により評価することができる。
　１）上下に血液の出入り口のある円筒状カラム（内径１ｃｍ×高さ５．１４ｃｍ）に、３．１ｍＬの血液成分吸着材料を充填したカラムを作製する。
　２）カラムに、３７℃（外温）で保温したヒト血液に、抗凝固剤のメシル酸ナファモスタットを２００μｇ／ｍＬになるように添加し、すみやかに流量０．７ｍＬ／ｍｉｎで５分間通液する。
　３）５分後にカラム入口血液とカラム出口血液をサンプリングし、多項目自動血球分析装置ＸＴ－１８００ｉ（シスメックス株式会社製）を用いて血小板数を得る。
　４）下記式９を用いて、得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料の血小板吸着率を算出する。

　血液成分吸着材料の血小板吸着率（％）＝１００×｛（カラム入口血液中の血小板数）－（カラム出口血液中の血小板数）｝／（カラム入口血液中の血小板数）　・・・式９

　血小板吸着率の好ましい範囲に限定は無いが、血液循環中の凝集体の生成を防止し、より目詰まりを起こしづらくするためには、血小板吸着率は５０％以下であることが好ましく、２０％以下であることがより好ましい。

　以下、本発明の血液成分吸着材料について、実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらの例によって限定されるものではない。

　なお、実施例中、ｗｔ％は、重量％の意味である。Ｍは、ｍｏｌ／Ｌ、ｍＭは、ｍｍｏｌ／Ｌを表す。なお、特に指定がない場合、血液成分吸着材料、多孔粒子、第１の重合体、第２の重合体の重量は乾燥重量を表す。吸光度は、紫外可視分光光度計（ＵＶ－１２８０；株式会社島津製作所製）を用いて、室温下で測定した。吸光度測定の前に事前にブランク測定を行い、バックグラウンドのピークは差し引いた。赤外吸収スペクトルの測定は特記しない限り下記の手法により測定した。

　Ｎｉｃｏｌｅｔ　ｉＳ５　ＦＴ－ＩＲ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製；ｉＤ５　ダイヤモンドＡＴＲアクセサリ付属、検出器：ＤＴＧＳ　ＫＢｒ、ビームスプリッタ：ＫＢｒ）のＡｄｖａｎｃｅｄ　ＡＴＲモードを選択し、パラメーターを設定（スキャン回数：１６、データ間隔：０．２４１ｃｍ^－１、自動大気補正：なし）し、設定後、バックグラウンド測定実施した。バックグラウンド測定が終了したら、あらかじめ６０℃の温風乾燥機で４時間乾燥させた血液成分吸着材料をプリズム上に敷き詰め、プレッシャーデバイスがロックするまでプリズムに押しつけ、バックグラウンド測定から２０分以内に測定を開始した。なお、測定範囲は波数４５００ｃｍ^－１～５００ｃｍ^－１とした。

　実施例中、ポリビニルアルコールのけん化率とは繰り返し単位中の水酸基の存在率と同義であり、けん化されていない残りの繰り返し単位はポリ酢酸ビニルである。例えばけん化率１０％のポリビニルアルコールは、繰り返しのうち９０ｍｏｌ％がポリ酢酸ビニルであり、１０ｍｏｌ％はポリビニルアルコールである。

　（反応器の設定）
　５００ｍＬの三ツ口フラスコに攪拌機、ジムロート冷却器、熱電対及び泡立て器を取り付けて反応器とし、熱電対で温度を測定しながらマントルヒーターで温度制御を行った。

　（血液成分吸着材料１の作製）
　多孔粒子の製造：
　ポリビニルアルコール（以下、ＰＶＡ）０．６８ｇを溶かしたＰＶＡ水溶液１１５ｍＬと、リン酸１ナトリウム（以下、ＭＳＰ）０．７１ｇ、リン酸２ナトリウム（以下、ＤＳＰ）２．３６ｇ、リン酸３ナトリウム（以下、ＴＳＰ）０．０１ｇ、及び亜硝酸ナトリウム０．０１ｇを溶かしたリン酸水溶液１１５ｍＬをそれぞれ作製した。ＰＶＡ水溶液を全量反応器に添加し、７０℃まで加熱した後にリン酸水溶液を全量添加し、水相とした。さらに、ジビニルベンゼン（以下、ＤＶＢ）１０６ｇ、シクロヘキサノール１１６ｇ、ポリプロピレングリコール（以下、ＰＰＧ）１１ｇ、過酸化ベンゾイル（以下、ＢＰＯ）１．１ｇを混合し、有機相とした。有機相を反応器の水相の上に注ぎ、攪拌機を起動して攪拌し、液滴が分散していることを確認した。温度が８０℃に達したところで反応開始として、１６時間反応を継続した。

　反応器から溶媒のみをデカンデーションし、除いた溶媒と等量の水を添加した。その後３０分間攪拌し、溶媒をデカンデーションした。水添加以降の操作を計５回繰り返して生成物を洗浄した。次に溶媒をデカンデーションし、等量のメタノールを添加した後に１０分間攪拌し、溶媒をデカンデーションした。メタノール添加以降の操作を計３回繰り返した。続けて生成物をアセトン中、ソックスレー抽出器に一晩かけることでオリゴマーを抽出した後に８時間真空乾燥し、イソプロピルアルコールに含浸した後精製水に添加した。最後に篩にかけて粒径をそろえ、１００℃の温風乾燥機で乾燥させた。得られた多孔粒子を第１の重合体がポリ（エチルベンゼン/ジビニルベンゼン）であり、リンカーを含まない血液成分吸着材料１とした。

　血液成分吸着材料１が第１の重合体を含んでいる事は、血液成分吸着材料１の表面の赤外吸収スペクトル測定を行い、２置換芳香族化合物由来のＣ－Ｈ面外変角振動ピーク（８００ｃｍ^－１）が存在することから確認した。

　（血液成分吸着材料２の作製）
　Ｎ－メチロール－α－クロロアセトアミド（以下、ＮＭＣＡ）２．４ｇをニトロベンゼン３１ｇと濃硫酸３１ｇの混合溶液に添加、ＮＭＣＡが溶解するまで１０℃で攪拌して、ＮＭＣＡ溶液とした。次に、ニトロベンゼン２．０ｇ、濃硫酸２．０ｇにパラホルムアルデヒド（以下、ＰＦＡ）０．２ｇを添加し、ＰＦＡが溶解するまで２０℃で攪拌し、ＰＦＡ溶液とした。ＰＦＡ溶液４．２ｇを５℃に冷却し、ＮＭＣＡ溶液に混合、５分間攪拌し、血液成分吸着材料１を１ｇ添加して２時間含浸した。含浸後の血液成分吸着材料１を０℃のニトロベンゼン２００ｍＬ中に浸して反応を停止させた後、当該多孔粒子に付着しているニトロベンゼンをメタノールで洗浄し、クロロ化粒子を得た。

　トリエチルアミン０．２ｇとジメチルスルホキシド（以下、ＤＭＳＯ）５１ｇの混合溶液にエチレンジアミン（以下、ＥＤＡ）の添加濃度が０．８Ｍになるように溶解し、クロロ化粒子を添加し、４０℃で３時間含浸させた。ガラスフィルター上に当該粒子をろ別し、５００ｍＬのＤＭＳＯで洗浄した。６０ｍＬの蒸留水でさらに洗浄し、加えてそれぞれ３Ｌの蒸留水及び生理食塩水で洗浄して、ＥＤＡ化粒子を得た。

　得られたＥＤＡ化粒子０．５ｇと４－（４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン－２－イル）－４－メチルモルホリニウム＝クロリドｎ水和物を１０ｍｇ、固定化用ＰＶＡ（けん化率１０％）を１０ｍｇ、水１０ｍＬを混和し、２４時間反応させた。得られた多孔粒子をろ紙のうえに取り出し、吸引ろ過しながらメタノール２００ｍＬを粒子にかけて洗浄した。ろ紙から多孔粒子のみをスパチュラで剥がしとり、５０℃の温風乾燥機で２４時間乾燥させた。温風乾燥機から取り出した生成物をリンカーとして芳香環にメチレン基を介してアミド結合が付与され、さらに表面側にアミノ基が付与され、さらに表面側にエチレン基を介してアミド結合が付与された構造を有する血液成分吸着材料２として得た。

　血液成分吸着材料２が第２の重合体を含んでいる事は、血液成分吸着材料２の赤外吸収スペクトル測定を行い、水酸基由来のピーク（３３４０ｃｍ^－１）が存在することから確認した。

　（血液成分吸着材料３の作製）
　固定化用ＰＶＡ（けん化率１０％、重合度５００）のけん化率を１０％から３５％に変更した以外は全て血液成分吸着材料２と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料３を得た。

　（血液成分吸着材料４の作製）
　固定化用ＰＶＡ（けん化率１０％、重合度５００）のけん化率を１０％から９５％に変更した以外は全て血液成分吸着材料２と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料４を得た。

　（血液成分吸着材料５の作製）
　固定化用ＰＶＡの添加量を１０ｍｇから３ｍｇに変更した以外は全て血液成分４と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料５を得た。

　（血液成分吸着材料６の作製）
　固定化用ＰＶＡの添加量を１０ｍｇから２０ｍｇに変更した以外は全て血液成分４と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料６を得た。

　（血液成分吸着材料７の作製）
　固定化用ＰＶＡの添加量を１０ｍｇから２５ｍｇに変更した以外は全て血液成分４と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料７を得た。

　（血液成分吸着材料８の作製）
　固定化用ＰＶＡの添加量を１０ｍｇから５ｍｇに変更した以外は全て血液成分４と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料５を得た。

　（血液成分吸着材料９の作製）
　血液成分吸着材料１と同じ方法で得た多孔粒子１ｇと、ポリ（エチレン－ビニルアルコール）（ポリエチレン繰り返し単位含有率４０％、重合度２５０）１ｇをトルエン２０ｍＬ中に添加し、２時間攪拌した。得られた多孔粒子をろ紙のうえに取り出し、吸引ろ過しながらメタノール２００ｍＬを粒子に注いで洗浄した。ろ紙から多孔粒子のみをスパチュラではがしとり、５０℃の温風乾燥機で２４時間乾燥させた。リンカーを含まずに物理的固定化によりポリ（エチレン－ビニルアルコール）（ポリエチレン繰り返し単位含有率４０％）が固定化された血液成分吸着材料９を得た。

　（血液成分吸着材料１０の作製）
　ＰＶＡ０．６ｇを溶かしたＰＶＡ水溶液１１５ｍＬと、ＭＳＰ０．７１ｇ、ＤＳＰ２．４ｇ、ＴＳＰ０．０１ｇ、及び亜硝酸ナトリウム０．０１ｇを溶かしたリン酸水溶液１１５ｍＬをそれぞれ作製した。ＰＶＡ水溶液を全量反応器に添加し、７０℃まで加熱した後にリン酸水溶液を全量添加し、水相とした。さらに、ＤＶＢ１０６ｇ、シクロヘキサノール１１６ｇ、ＰＰＧ６．０ｇ、ＢＰＯ１．１ｇ、ＰＶＡ（けん化率９５％、重合度５００）３．０ｇを混合し、有機相とした。有機相を反応器の水相の上に注ぎ、攪拌機を起動して攪拌し、液滴が分散していることを確認した。温度が８０℃に達したところで反応開始として、１６時間反応を継続した。

　反応器から溶媒のみをデカンデーションし、除いた溶媒と等量の水を添加した。その後３０分間攪拌し、溶媒をデカンデーションした。水添加以降の操作を計５回繰り返して生成物を洗浄した。次に溶媒をデカンデーションし、等量のメタノールを添加した後に１０分間攪拌し、溶媒をデカンデーションした。メタノール添加以降の操作を計３回繰り返した。続けて生成物をアセトン中、ソックスレー抽出器に一晩かけることでオリゴマーを抽出した後に８時間真空乾燥し、リンカーを含まずに物理的固定化によりＰＶＡが固定化された血液成分吸着材料１０を得た。

　（血液成分吸着材料１１の作製）
　血液成分吸着材料２と同じ手順でクロロ化粒子を作製した。さらに、トリエチルアミン０．２ｇとＤＭＳＯ５１ｇの混合溶液にグリシン（以下、ＧＬ）の添加濃度が０．８Ｍになるように溶解し、クロロ化粒子を添加し、４０℃で３時間含浸させた。ガラスフィルター上に該粒子をろ別し、５００ｍＬのＤＭＳＯで洗浄した。ＤＭＳＯ洗浄後の該粒子を６０ｍＬの蒸留水でさらに洗浄し、をそれぞれ３Ｌの蒸留水及び生理食塩水で洗浄して、ＧＬ化粒子を得た。

　得られたＧＬ化粒子０．５ｇと塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドを１０ｍｇ、ポリ（２－ヒドロキシエチルメタクリレート）（以下、ＰＨＥＭＡ、重合度２００）を１０ｍｇ、水１０ｍＬを混和し、２４時間反応させた。得られた多孔粒子をろ紙のうえに取り出し、吸引ろ過しながらメタノール２００ｍＬを粒子にかけて洗浄した。ろ紙から多孔粒子のみをスパチュラで集め、５０℃の温風乾燥機で２４時間乾燥させ、リンカーとして芳香環にメチレン基を介してアミド結合が付与され、さらに表面側にアミノ基が付与され、さらに表面側にエチレン基を介してエステル基が付与された構造を有する、ＰＨＥＭＡが固定化された血液成分吸着材料１１を得た。

　（血液成分吸着材料１２の作製）
　血液成分吸着材料１１と同じ手順でＧＬ化粒子を作製した。さらに、ＧＬ化粒子０．５ｇと塩酸１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドを１０ｍｇ、デキストラン硫酸（重合度３０）を１０ｍｇ、水１０ｍＬを混和し、２４時間反応させた。得られた多孔粒子をろ紙のうえに取り出し、吸引ろ過しながらメタノール２００ｍＬを粒子にかけて洗浄した。ろ紙から多孔粒子のみをスパチュラではがしとり、５０℃の温風乾燥機で２４時間乾燥させた。温風乾燥機から取り出し、リンカーとして芳香環にメチレン基を介してアミド結合が付与され、さらに表面側にアミノ基が付与され、さらに表面側にエチレン基を介してエステル基が付与された構造を有する、デキストラン硫酸が固定化された血液成分吸着材料１２を得た。

　（血液成分吸着材料１３の作製）
　多孔粒子の製造において、有機相をＤＶＢ１２０ｇ、トルエン８０ｇ、イソオクタン９０ｇ、ＢＰＯ１．１ｇを混合して調整した以外は血液成分吸着材料４と同じ手順で製造を行い、ＰＶＡが固定化された血液成分吸着材料１３を得た。

　（血液成分吸着材料１４の作製）
　多孔粒子の製造において、有機相をＤＶＢ１３０ｇ、シクロヘキサノール１１６ｇ、ＰＰＧ）１１ｇ、過酸化ベンゾイル（ＢＰＯ）１．３ｇを混合して調整した以外は血液成分吸着材料４と同じ手順で製造を行い、ＰＶＡが固定化された血液成分吸着材料１４を得た。

　（血液成分吸着材料１５の作製）
　多孔粒子の製造において、有機相をＤＶＢ８３ｇ、シクロヘキサノール１１６ｇ、ＰＰＧ３８ｇ、ＢＰＯ０．８ｇを混合して調整した以外は血液成分吸着材料４と同じ手順で製造を行い、ＰＶＡが固定化された血液成分吸着材料１５を得た。

　（血液成分吸着材料１６の作製）
　固定化用ＰＶＡ（けん化率１０％）を固定用ＰＶＡ（けん化率１００％、重合度１００００）に変更し、ＥＤＡ化粒子を添加する溶媒を水からイソプロパノールに変更する以外は全て血液成分吸着材料２と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料１６を得た。

（血液成分吸着材料１７の作製）
　ポリ（２－ヒドロキシエチルメタクリレート）をポリ（４－ヒドロキシブチルアクリレート）（重合度８０）に変更する以外は血液成分吸着材料１１と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料１７を得た。

（血液成分吸着材料１８の作製）
　デキストラン硫酸をラクトースに変更する以外は血液成分吸着材料１２と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料１８を得た。

（血液成分吸着材料１９の作製）
　デキストラン硫酸をデキストラン（重合度２５０）に変更する以外は血液成分吸着材料１２と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料１９を得た。

（血液成分吸着材料２０の作製）
ポリスチレン多孔粒子の製造：
　添加するＤＶＢ１０６ｇをスチレン１０５ｇとＤＶＢ１ｇの混合物、ＰＰＧの添加量を１１ｇから１４ｇ、ＢＰＯの添加量を１．１ｇから０．７ｇに変更する以外は血液成分吸着材料１と同じ手順で製造を行い、第１の重合体がポリ（スチレン／エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン）である、ポリスチレン多孔粒子を得た。

　用いる多孔粒子をポリスチレン多孔粒子に変更する以外は血液成分吸着材料４と同じ手順で製造を行い、血液成分吸着材料２０を得た。

（血液成分吸着材料２１の作製）
水酸基含有多孔粒子の製造：
　添加するＤＶＢ１０６ｇをＤＶＢ９０ｇと芳香族炭化水素基を含まないグリシジルエーテル１６ｇの混合物、に変更する以外は血液成分吸着材料１と同じ手順で製造を行い、エポキシ基含有多孔粒子を得た。エポキシ基含有多孔粒子１ｇを６規定の水酸化ナトリウム水溶液５０ｍＬに添加し、６０℃で２４時間加温することでエポキシ基を開環し、水酸基２つからなるジオール基含有多孔粒子に変換した。溶液から粒子のみ取り出し、洗浄液がフェノールフタレインで着色しなくなるまで水で繰り返し洗浄した。洗浄後のリンカー及び第２の重合体を含まず、第１の重合体がポリ（エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン／グリシジルエーテル開環物）であり、第１の重合体中に芳香族炭化水素基を含まない繰り返し単位が存在するジオール基含有多孔粒子を血液成分吸着材料２１とした。

（血液成分吸着材２２の作製）
クロロメチル基含有多孔粒子の製造：
　添加するＤＶＢ１０６ｇをクロロメチルスチレン３６ｇとＤＢＶ７０ｇとの混合物に変更する以外は血液成分吸着材料１と同じ手順で製造を行い、第１の重合体がポリ（エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン／クロロメチルスチレン）であるクロロメチル基含有多孔粒子を得た。

　クロロ化粒子をクロロメチル化粒子、ポリ（２－ヒドロキシエチルメタクリレート）をポリビニルアルコール（けん化率９５％、重合度５００）に変更する以外は血液成分吸着材料１１と同じ手順で製造を行い、リンカーとしてメチレン基を介してアミノ基が付与され、さらに表面側にメチレン基を介してエステル基が付与された血液成分吸着材料２２を得た。

　血液成分吸着材料１の細孔体積測定：
　純水１０ｍＬに血液成分吸着材料１を１ｇ含浸し、溶液が入った容器を超音波洗浄機にかけながらアスピレーターで１０分間脱気した。得られた含水状態の血液成分吸着材料１をＤＳＣ測定直前に取り出し、目視で水滴が見えなくなる程度に表面付着水を除去した。次に、事前に純水で温度、熱量校正（融点０．０℃、融解熱量７９．７ｃａｌ／ｇ）を行ったＤＳＣ　Ｑ１００（ＴＡ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）にアルミニウム製密封型試料容器をセットし、ブランク重量を測定した。続けて、血液成分吸着材料１を約６ｍｇ程度サンプリングしてアルミニウム製密封型試料容器に封入して測定試料とした。測定試料をＤＳＣ　Ｑ１００に入れ、重量を測定した。得られた重量からブランク重量を差し引いた値をサンプル重量とした。続けて測定試料を－５５℃に急冷し、５℃まで０．３℃／分で昇温させて示差走査熱量を測定し、ＤＳＣ曲線を得た。その後、サンプル試料を取り出して１１０℃で２時間真空乾燥し、再度ＤＳＣ　Ｑ１００に入れて重量を測定し、真空乾燥前後の減少量を全水分量とした。得られたＤＳＣ曲線、全水分量、サンプル重量から、Ｉｓｈｉｋｉｒｉｙａｍａらの方法（ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＣＯＬＬＯＩＤ　ＡＮＤ　ＩＮＴＥＲＦＡＣＥ　ＳＣＩＥＮＣＥ、１９９５年、１７１巻、ｐ．１０３－１１１）に従い、血液成分吸着材料１の１ｇあたりの細孔体積を算出した。結果を表１に示す。

　（血液成分吸着材料２～１５の細孔体積測定）
　血液成分吸着材料１の１ｇあたりの細孔体積の測定と同様の方法で、血液成分吸着材料２～１５の１ｇあたりの細孔体積測定を行った。結果を表１に示す。

　（血液成分吸着材料１６～２２の細孔体積測定）
　血液成分吸着材料１の１ｇあたりの細孔体積の測定と同様の方法で、血液成分吸着材料１６～２２の１ｇあたりの細孔体積測定を行った。結果を表２に示す。

　（血液成分吸着材料１の全体平均における第２の重合体の含有率の測定）
　血液成分吸着材料１を６０℃の温風乾燥機で４時間乾燥させた。得られた乾燥後の血液成分吸着材料１の重量を血液成分吸着材料１の乾燥重量として、１ｇを秤量、取り分けた。さらにその後９０℃以上のテトラヒドロフラン、６規定の塩酸、６規定の水酸化ナトリウム水溶液にそれぞれ一晩含浸した後、イオン交換水で５回洗浄し、真空乾燥機に１２時間かけ、再度重量測定を行い、得た値を血液成分吸着材料１の溶出後重量とし、式１０から得られた値の小数点第２位を四捨五入し、血液成分吸着材料１の全体平均における第２の重合体の含有率を算出した。結果を表１に示す。

　血液成分吸着材料１の全体平均における第２の重合体の含有率（ｍｇ／ｇ）＝｛乾燥重量（１０００ｍｇ）－溶出後重量（ｍｇ）｝／１ｇ　・・・式１０

　（血液成分吸着材料１の表面における第２の重合体の含有率の測定）：
　Ｎｉｃｏｌｅｔ　ｉＳ５　ＦＴ－ＩＲ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製；ｉＤ５　ダイヤモンドＡＴＲアクセサリ付属、検出器：ＤＴＧＳ　ＫＢｒ、ビームスプリッタ：ＫＢｒ）のＡｄｖａｎｃｅｄ　ＡＴＲモードを選択し、パラメーターを設定した（スキャン回数：１６、データ間隔：０．２４１ｃｍ－１、自動大気補正：なし）。設定後、バックグラウンド測定実施した。バックグラウンド測定が終了後、あらかじめ６０℃の温風乾燥機で４時間乾燥させた血液成分吸着材料１をプリズム上に敷き詰め、プレッシャーデバイスがロックするまでプリズムに押しつけ、バックグラウンド測定から２０分以内に測定を開始し、血液成分吸着材料１の表面の赤外吸収スペクトルを得た。

　さらに、あらかじめ６０℃の温風乾燥機で４時間乾燥させた血液成分吸着材料１を１ｇ取り分け、それを乳鉢（アズワン製メノー乳鉢　深型、φ７０×φ９０×３０ｍｍ）に入れ、乳棒で少なくとも多孔粒子が割れる力をかけて１００回すりつぶし、全ての多孔粒子が１回以上すりつぶされていることを目視で確認した。得られた粉体を多孔粒子の代わりに用いる以外は多孔粒子の表面の赤外吸収スペクトルの測定と同じ方法で測定を行い、血液成分吸着材料１の全体平均の赤外吸収スペクトルを得た。それぞれのＣＨ伸縮由来のピーク（２９２０ｃｍ^－１）の吸収強度と、ＯＨ基由来のピーク（３３４０ｃｍ^－１）の吸収強度に基づき、下記式１１から、得られた値の小数点第２位を四捨五入し、血液成分吸着材料１の表面における第２の重合体の含有率を算出した。なお、式１１に使用する「血液成分吸着材料の１の全体平均における第２の重合体の含有率」の数値は式１０を用いて算出した、小数点第２を四捨五入する前の値を用いて計算した。結果を表１に示す。

　血液成分吸着材料１の表面における第２の重合体の含有率（ｍｇ／ｇ）＝血液成分吸着材料１の全体平均における第２の重合体の含有率（ｍｇ／ｇ）×｛血液成分吸着材料１の表面のＯＨ基由来のピーク吸収強度／血液成分吸着材料１の表面のＣＨ伸縮由来のピーク吸収強度｝／｛血液成分吸着材料１の全体平均のＯＨ基由来のピーク吸収強度／血液成分吸着材料１の全体平均のＣＨ伸縮由来のピーク吸収強度｝　・・・式１１

　（血液成分吸着材料２～１５の全体平均における第２の重合体の含有率の測定）
　血液成分吸着材料１の全体平均における第２の重合体の含有率の測定と同様の方法で、血液成分吸着材料２～１５の全体平均における第２の重合体の含有率を測定した。結果を表１に示す。

　（血液成分吸着材料２～１５の表面における第２の重合体の含有率の測定）
　血液成分吸着材料１の表面における第２の重合体の含有率の測定と同様の方法で、血液成分吸着材料２～１５の表面における第２の重合体の含有率を測定した。結果を表１に示す。

　（血液成分吸着材料の１６～２２の全体平均における第２の重合体の含有率の測定）
　血液成分吸着材料１の全体平均における第２の重合体の含有率の測定と同様の方法で、血液成分吸着材料１６～２２の全体平均における第２の重合体の含有率を測定した。結果を表２に示す。

　（血液成分吸着材料１６～２２の表面における第２の重合体の含有率の測定）
　血液成分吸着材料１の表面における第２の重合体の含有率の測定と同様の方法で、血液成分吸着材料１６～２２の表面における第２の重合体の含有率を測定した。結果を表２に示す。

　表１及び表２中、「第１の重合体」は、血液成分吸着材料に含まれる第１の重合体の名称を意味し、「第２の重合体」は血液成分吸着材料に含まれる第２の重合体の名称を意味する。

　（実施例１）
　血液成分吸着材料２の吸着性能を確認するため、血液成分吸着材料２を充填したカラムに血液に所定時間通液し、通液前後の溶液中の白血球減少量を測定、白血球吸着率を算出した。以下に白血球吸着率の測定方法及び算出方法を示す。

　上下に血液の出入り口のある円筒状カラム（内径１ｃｍ×高さ５．１４ｃｍ）に、３．１ｍＬの血液成分吸着材料２を充填したカラムを作製した。このカラムに、３７℃（外温）で保温したヒト血液を、流量１．９ｍＬ／ｍｉｎで５分間通液し、５分後のカラム入口の血液とカラム出口の血液成分を分析し、血液成分吸着材料２の白血球吸着率を算出した。結果を表１に示す。なお、各血液成分数の測定は、多項目自動血球分析装置ＸＴ－１８００ｉ（シスメックス株式会社製）を用いて行った。各血液成分の吸着率は、以下の式１２により算出した。結果を表３に示す。

　血液成分吸着材料２の白血球吸着率（％）＝｛（カラム入口血液中の顆粒球、単球の総数）－（カラム出口血液中の顆粒球、単球の総数）｝／（カラム入口血液中の顆粒球、単球の総数）×１００　・・・式１２

　（血液成分吸着材料２のＩＬ－８吸着率測定）
　血液成分吸着材料２のＩＬ－８吸着性能を確認するため、ＩＬ－８を含む液体に血液成分吸着材料２を所定時間含浸後に取り出し、含浸前後の液体中のＩＬ－８量の差分からＩＬ－８吸着率を測定した。以下に測定方法を示す。

　血液成分吸着材料２を０．１ｍＬポリプロピレン製の容器に入れた。この容器に、ＩＬ－８の濃度が２０００ｐｇ／ｍＬなるように調製した牛胎児血清（Ｆｅｔａｌ　Ｂｏｖｉｎｅ　Ｓｅｒｕｍ、以下、ＦＢＳ）を、１ｃｍ^３の血液成分吸着材料２に対して３０ｍＬとなるように添加し、３７℃のインキュベータ内で２時間転倒混和した後、酵素結合免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）法にてＦＢＳ中のＩＬ－８濃度を測定した。転倒混和前のＩＬ－８濃度から以下の式１３によりＩＬ－８吸着率を算出した。結果を表３に示す。
　血液成分吸着材料２のＩＬ－８吸着率（％）＝｛転倒混和前のＩＬ－８濃度（ｐｇ／ｍＬ）―転倒混和後のＩＬ－８濃度（ｐｇ／ｍＬ）｝／転倒混和前のＩＬ－８濃度（ｐｇ／ｍＬ）×１００　　・・・式１３

　（実施例２）
　血液成分吸着材料３～６及び８～１５を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表３に示す。

　（比較例１）
　血液成分吸着材料１及び７を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表３に示す。

　表３中、「白血球吸着率」は血液成分吸着材料の白血球吸着率を意味し、「ＩＬ－８吸着率」は血液成分吸着材料のＩＬ－８吸着率を意味する。

　表３の結果から、本実施形態の血液成分吸着材料は、白血球等の血液成分を高い効率で吸着することが示された。

　（実施例３）
　血液成分吸着材料１６を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表５に示す。

　（実施例４）
　血液成分吸着材料１７を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表５に示す。

　（実施例５）
　血液成分吸着材料１９を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表５に示す。

　（実施例６）
　血液成分吸着材料２０を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表５に示す。

　（実施例７）
　血液成分吸着材料２２を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表５に示す。

　（実施例８）
　上下に血液の出入り口のある円筒状カラム（内径１ｃｍ×高さ５．１４ｃｍ）に、３．１ｍＬの血液成分吸着材料４を充填したカラムを作製した。このカラムに、３７℃（外温）で保温したヒト血液を、流量１．９ｍＬ／ｍｉｎで５分間通液した。５分後にカラム入口血液とカラム出口血液をサンプリングし、多項目自動血球分析装置ＸＴ－１８００ｉ（シスメックス株式会社製）を用いてそれぞれ単球数、好中球数、好塩基球数、好酸球数を得た。式４～７を用いて得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料４の単球除去率、好中球除去率、好塩基球除去率、好酸球除去率を算出した。結果を表６に示す。

　（実施例９）
　血液成分吸着材料４を５ｍＬと２５ｍＬの蒸留水を５０ｍＬ遠沈管に入れた。吸収線量を４０ｋＧｙとして、ガンマ線照射を行うことで滅菌後の血液成分吸着材料４を得た。
血液成分吸着材料２を滅菌後の血液成分吸着材料４に変更する以外は実施例１と同じ手順で測定を行い、得られた白血球吸着率を滅菌後の白血球吸着率とした。実施例２で得た血液成分吸着材料４の白血球吸着率と滅菌後の白血球吸着率から、式８を用いて得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料４の滅菌前後の性能低下率を算出した。結果を表４に示す。

　（実施例１０）
　血液成分吸着材料４を血液成分吸着材料１２に変更する以外は実施例９と同じ手順で測定を行い、滅菌後の白血球吸着率を得た。さらに、実施例２の血液成分吸着材料１２の白血球吸着率と滅菌後の白血球吸着率を用いて、式８から得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料１２の滅菌前後の性能低下率を算出した。結果を表４に示す。

　（実施例１１）
　血液成分吸着材料４を血液成分吸着材料１７に変更する以外は実施例９と同じ手順で測定を行い、滅菌後の白血球吸着率を得た。さらに、実施例４の血液成分吸着材料１７の白血球吸着率と滅菌後の白血球吸着率を用いて、式８から得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材１７の滅菌前後の性能低下率を算出した。結果を表４に示す。

　（実施例１２）
　血液成分吸着材料４を血液成分吸着材料１９に変更する以外は実施例９と同じ手順で測定を行い、滅菌後の白血球吸着率を得た。さらに、実施例５の血液成分吸着材料１９の白血球吸着率と滅菌後の白血球吸着率を用いて、式８から得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料１９の滅菌前後の性能低下率を算出した。結果を表４に示す。

　表４中、「滅菌後の白血球吸着率」は血液成分吸着材料の滅菌後の白血球吸着率を意味し、滅菌前後の性能低下率は、血液成分吸着材料の滅菌前後の性能低下率を意味する。

　表４の結果から、合成高分子であるポリビニルアルコール、ポリ（４－ヒドロキシブチルアクリレート）を第２の重合体として含む本実施形態の血液成分吸着材料は、天然高分子であるデキストラン硫酸、デキストランを第２の重合体として含む本実施形態の血液成分吸着材料よりも滅菌前後の性能低下率が小さいことが示された。

　（実施例１３）
　上下に血液の出入り口のある円筒状カラム（内径１ｃｍ×高さ５．１４ｃｍ）に、３．１ｍＬの血液成分吸着材料４を充填したカラムを作製した。このカラムに、３７℃（外温）で保温したヒト血液に、抗凝固剤のメシル酸ナファモスタットを２００μｇ／ｍＬになるように添加し、すみやかに流量０．７ｍＬ／ｍｉｎで５分間通液した。５分後にカラム入口血液とカラム出口血液をサンプリングし、多項目自動血球分析装置ＸＴ－１８００ｉ（シスメックス株式会社製）を用いて血小板数を得た。式９を用いて得られた値の小数点第１位を四捨五入し、血液成分吸着材料４の血小板吸着率を算出した。結果を表７に示す。

　（実施例１４）
　血液成分吸着材料４を血液成分吸着材料２５に変更する以外は実施例１３と同じ手順で測定を行い、血液成分吸着材料２５の血小板吸着率を算出した。結果を表７に示す。

　（比較例２）
　血液成分吸着材料１８を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表５に示す。

　（比較例３）
　血液成分吸着材料２１を用いて、実施例１と同様の測定を行うことで、白血球吸着率、ＩＬ－８吸着率を測定した。結果を表５に示す。

　（比較例４）
　血液成分吸着材料４を血液成分吸着材料１８に変更する以外は実施例８と同じ手順で測定、計算を行い、血液成分吸着材料１８の単球除去率、好中球除去率、好塩基球除去率、好酸球数除去率を算出した。結果を表６に示す。

　表６中、「単球吸着率」は血液成分吸着材料の単球吸着率を意味し、「好中球吸着率」は血液成分吸着材料の好中球吸着率を意味し、「好塩基球吸着率」は血液成分吸着材料の好塩基球吸着率を意味し、「好酸球吸着率」は血液成分吸着材料の好酸球吸着率を意味する。

　表６の結果から、本実施形態のファンデルワールス力に基づく血液成分吸着材料は糖鎖との特異的認識による血液成分吸着材料に比べて白血球の成分によらず高い効率で吸着することが示された。

　（比較例５）
　血液成分吸着材料４を血液成分吸着材料１に変更する以外は実施例１３と同じ手順で測定を行い、血液成分吸着材料１の血小板吸着率を算出した。結果を表７に示す。

　表７中、血小板付着率は血液成分吸着材料の血小板付着率を意味する。

　表７の結果から、本実施形態の血液成分吸着材料は血小板吸着率を抑制することができ、特にアミド結合をリンカーに含む血液成分吸着材料は血小板吸着率が特に抑制されることが示された。

　本発明の血液成分吸着材料は、白血球等を高い効率で吸着できるため、炎症性疾患の治療又は移植前の免疫抑制及び血液製剤の発熱・感染症等の副作用抑制の目的に用いるカラムの吸着担体として利用することができる。

Claims

　繰り返し単位に芳香族炭化水素基を有する第１の重合体のみからなる多孔粒子と、前記多孔粒子表面に固定化された、繰り返し単位に水酸基を有する第２の重合体と、を有し、
　血液成分吸着材料の表面における前記第２の重合体の含有率が、３～３０ｍｇ／ｇである、血液成分吸着材料。
　前記血液成分吸着材料の全体平均における前記第２の重合体の含有率は、０．３ｍｇ／ｇ以下であり、
　１ｇあたりの細孔体積は、０．５～１．８ｃｍ^３である、請求項１記載の血液成分吸着材料。
　前記第１の重合体は、ポリスチレン、ポリエチルビニルベンゼン、ポリジビニルベンゼン、ポリ（エチルビニルベンゼン／ジビニルベンゼン）又はポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）である、請求項１又は２記載の血液成分吸着材料。
　前記第２の重合体は、ポリヒドロキシアルキルアクリレート、ポリヒドロキシアルキルメタクリレート及びポリビニルアルコールからなる群から選択される重合体である、請求項１～３のいずれか一項記載の血液成分吸着材料。
　白血球吸着除去用である、請求項１～４のいずれか一項記載の血液成分吸着材料。
　請求項１～５のいずれか一項記載の血液成分吸着材料を備える、血液浄化カラム。