WO2019138865A1

WO2019138865A1 - 検出装置および検出方法

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Publication number: WO2019138865A1
Application number: PCT/JP2018/047599
Authority: WO
Inventors: 健一森脇; 宇佐美　由久; 西川　尚之
Original assignee: Fujifilm Corp
Current assignee: Fujifilm Corp
Priority date: 2018-01-15
Filing date: 2018-12-25
Publication date: 2019-07-18
Anticipated expiration: 2020-07-15

Abstract

磁気粒子と蛍光粒子と目的物質との組み合わせ等の被検体の検出において、ウイルス等の目的物質を高感度に検出できる、検出装置および検出方法の提供を課題とする。被検体を含む液体を収容するセルと、被検体に蛍光を発生させる励起光を照射する励起光照射部と、セル内に焦点を有する撮像部と、被検体を撮像部の光軸に対して角度を有する方向に移動させる磁場発生部と、を有し、励起光照射部の光軸と撮像部の光軸との交点が、セルの内壁面以外に位置することにより、課題を解決する。

Description

検出装置および検出方法

　本発明は、細菌等を目的物質として検出する検出装置および検出方法に関する。

　蛋白質、ウイルスおよび細菌等の微小生物の検出では、目的物質が少量であっても、高い感度で検出ができるのが好ましい。特に、インフルエンザウイルスおよびノロウイルスなど感染症の拡大が懸念されるウイルスは、検体中の量が微量であっても、確実に検出できることが重要である。

　少量のウイルス等の検出が可能である高感度な検出方法として、ポリメラーゼ連鎖反応法（ＰＣＲ（Polymerase Chain Reaction））が知られている。
　ポリメラーゼ連鎖反応法では、ポリメラーゼ連鎖反応によって、検査対象となる塩基配列だけを増幅することにより、検査対象となるウイルス等を２０サイクルで約１００万倍に増幅できる。そのため、高感度なウイルス等の検出が可能である。
　その反面、ポリメラーゼ連鎖反応法は、夾雑物の影響が大きい、前処理が複雑である、冷凍保存が必要である等の問題がある。

　これに対して、少量のウイルス等を簡便に検出できる方法として、特許文献１に記載される、検出板に近接場を形成して、検出板表面上の目的物質（標的物質）を含む結合体を被検体として、光信号として検出する光学的検出方法が知られている。
　特許文献１に記載される光学的検出方法は、具体的には、例えば抗原－抗体反応を用いて目的物質に蛍光粒子（蛍光体）および磁気粒子を結合させた結合体を、被検体として生成する。一方で、検出板の表面に、裏面側から全反射条件で照射される光によって近接場を生成する。この状態で、磁力によって、生成した被検体を近接場（検出板）に近接および離間させ、あるいは、生成した被検体を検出板に平行に移動させる。特許文献１に記載される光学的検出方法では、この被検体の移動によって生じる光量変動および光（輝点）の移動等を測定することにより、目的物質を検出する。

国際公開第２０１７／１８７７４４号

　蛍光粒子を目的物質に結合させる光学的な検出方法では、非特異的な吸着によって目的物質以外に吸着した蛍光粒子がノイズになって、検出感度が低下し、高感度な目的物質の検出ができない、という問題がある。
　これに対して、特許文献１に記載される方法では、目的物質以外に非特異的に吸着した蛍光粒子は磁力によって移動せず、被検体すなわち磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体のみが、蛍光を発生しつつ磁力によって移動する。そのため、特許文献１に記載される方法によれば、光（輝点）の移動を検出することで、非特異的に吸着した蛍光粒子によるノイズを除去して、目的物質を高い感度で検出できる。

　しかしながら、特許文献１に記載される方法は、近接場を利用する。近接場は、検出面の極近傍に形成される。
　検出面のような壁面には、タンパク質などの異物が多く付着しており、さらには、蛍光粒子および磁気粒子等も非特異的に吸着する。これらの付着物は、被検体の円滑な移動を阻害する。そのため、磁力による被検体の移動が不十分になってしまい、移動による被検体の検出感度が低下する。
　加えて、近接場すなわち検出面には、被検体も付着する。検出面に付着した被検体は、磁力によって移動できなくなるので、検出面に実際に存在する被検体に対して、移動によって検出される被検体の数が減少する。その結果、ノイズに対する検出信号の数が低下してしまい、Ｓ／Ｎ比（signal-to-noise ratio）が低くなってしまう。

　また、検出面には、非特異的に吸着した蛍光粒子が、非常に多く存在する。
　そのため、被検体が発する蛍光の移動を検出することで、検出面等に非特異的に吸着した蛍光粒子の蛍光によるノイズを除去できるとはいえ、近接場を利用する特許文献１に記載される方法では、やはり、検出面等に非特異的に吸着した蛍光粒子の蛍光も測定してしまい、この蛍光がノイズになって、検出感度を低下させてしまう。

　本発明の目的は、このような従来技術の問題点を解決することにあり、蛍光および磁力を利用する目的物質の検出において、Ｓ／Ｎ比の高い、高感度な目的物質の検出を可能にする検出装置および検出方法を提供することにある。

　この課題を解決するために、本発明は、以下の構成を有する。
　［１］　磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との組み合わせ、または、目的物質と磁性を帯びて蛍光を発する粒子とを被検体として検出する検出装置であって、
　被検体を含む液体を収容するセルと、被検体に蛍光を発生させる励起光をセルの内部に照射する励起光照射部と、セルの内部を撮像するセル内に焦点を有する撮像部と、被検体を撮像部の光軸に対して角度を有する方向に移動させる磁場発生部と、を有し、
　励起光照射部の光軸と撮像部の光軸との交点が、セルの内壁面以外に位置することを特徴とする検出装置。
　［２］　磁場発生部は、被検体を、撮像部の検出面と平行または撮像部の検出面に対して９０°未満の角度を有するように移動させる［１］に記載の検出装置。
　［３］　磁場発生部は、セルの内壁面に接触させることなく、被検体を移動させる、［１］または［２］に記載の検出装置。
　［４］　電磁石を有する磁場発生部を３以上有する、［１］～［３］のいずれかに記載の検出装置。
　［５］　磁場発生部が、磁石と磁石の移動機構とを有する、［１］～［３］のいずれかに記載の検出装置。
　［６］　撮像部が、励起光照射部が照射する励起光の光路から外れた位置に配置される、［１］～［５］のいずれかに記載の検出装置。
　［７］　撮像部の光軸が、セルの鉛直方向に平行な面または鉛直方向に対して４５°以下の角度を有する面に交差する、［１］～［６］のいずれかに記載の検出装置。
　［８］　磁場発生部が発生する磁場の強度が、１～４００ｍＴである、［１］～［７］のいずれかに記載の検出装置。
　［９］　セルおよびセルに連通する空間の少なくとも一方に、磁気粒子および蛍光粒子、または、磁性を帯びて蛍光を発する粒子を有する、［１］～［８］のいずれか１項に記載の検出装置。
　［１０］　磁気粒子および磁性を帯びて蛍光を発する粒子の飽和磁化量が、０．０１～２００Ａ・ｍ²／ｋｇである、［９］に記載の検出装置。
　［１１］　磁気粒子と蛍光粒子との組み合わせ、または、磁性を帯びて蛍光を発する粒子を被検体として検出するに際し、
　被検体を含む液体をセルに収容した状態で、セルの内部に被検体に蛍光を発生させる励起光を照射すると共に、セルの内部に焦点を合わせて、かつ、セルの内壁面以外で励起光の光軸と光軸が交差するようにして、セルの内部を撮像し、さらに、
　セル内において、撮像の光軸に対して角度を有する方向に、被検体を、磁力によって移動させることを特徴とする検出方法。

　本発明によれば、目的物質の検出を行うためのセル等に非特異的に吸着した蛍光粒子等によるノイズを除去して、高いＳ／Ｎ比で、高感度な目的物質の検出が可能である。

図1は、本発明の検出装置の一例を概念的に示す斜視図である。図２は、図１に示す検出装置の作用を説明するための概念図である。図３は、図１に示す検出装置を説明するための概念図である。図４は、本発明の検出装置を構成するシステムの一例を概念的に示す図である。図５は、本発明の検出装置の別の例を概念的に示す図である。図６は、本発明の検出装置の別の例を概念的に示す図である。

　以下、本発明の検出装置および検出方法について、添付の図面に示される好適実施例を基に詳細に説明する。

　本明細書において「～」を用いて表される数値範囲は、「～」の前後に記載される数値を下限値および上限値として含む範囲を意味する。

　図１は、本発明の検出方法の一例を実施する、本発明の検出装置の一例を概念的に示す斜視図である。
　図１に示すように、検出装置１０は、セル１２と、励起光照射部１４と、撮像部１６と、第１磁場発生部１８、第２磁場発生部２０、第３磁場発生部２４および第４磁場発生部２６と、を有する。
　図示例において、セル１２は、被検体を含む液体を収容する容器で、被検体を含む液体の導入するための開口（図示省略）を有する立方体状の容器である。

　本発明の検出装置１０（検出方法）は、ウイルス等の目的物質に、磁気粒子および蛍光粒子を結合した結合体、または、磁性を帯びて蛍光を発する粒子を結合した結合体を、被検体として検出するものである。
　本発明の検出装置１０では、被検体を含む液体をセル１２に収容する。その上で、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６による磁場の印加によって、セル１２の内部で被検体を移動させると共に、励起光照射部１４によってセル１２の内部に励起光を照射して、撮像部１６によってセル１２の内部を撮像する。検出装置１０を用いる目的物質の検出では、検出装置１０の撮像部１６が撮像した画像（動画）中に、移動する輝点が存在するか否かによって、液体中における被検体（目的物質）の有無を検出し、または、液体中における被検体の有無および量を測定する。
　以下の説明では、一例として、目的物質に、磁気粒子および蛍光粒子を結合した結合体を被検体とする。

　本発明において、検出対象となる目的物質（標的物質）には制限はない。一例として、ウイルス、細菌、ＤＮＡ、ＲＮＡ、蛋白質、および、汚染物質等が例示される。
　また、目的物質を採取する試料にも制限はなく、目的物質を含むと考えられる各種のものが利用可能である。一例として、血液およびリンパ等の体液、唾液、汗、鼻水、涙、嘔吐物、尿、糞、薬品、環境水、上水、下水、および、拭き取り液等が例示される。
　これらの試料は、試料に応じた公知の方法で採取すればよい。例えば、食中毒等が発生した現場のドアノブおよびテーブル等を、スワブ（綿棒）等によって拭き取って試料を採取する方法が例示される。別の方法として、嘔吐物および尿等にスワブを接触させて、試料を採取する方法が例示される。

　磁気粒子（磁性体、磁性物質）には、制限はなく、磁気を利用する目的物質の検出に用いられる公知のものが、各種、利用可能である。一例として、磁気ビーズ、および、磁性粉体等が例示される。これらは、市販品も利用可能である。
　なお、磁気粒子の飽和磁化量には、制限はない。磁気粒子の飽和磁化量は、０．０１～２００Ａ・ｍ²／ｋｇであるのが好ましく、０．１～１００Ａ・ｍ²／ｋｇであるのがより好ましく、０．３～５０Ａ・ｍ²／ｋｇであるのがさらに好ましい。
　磁気粒子の飽和磁化量を０．０１Ａ・ｍ²／ｋｇ以上とすることにより、後述する磁場の印加によって、被検体を好適に移動させることができる。本例において、被検体とは、磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体である。
　また、磁気粒子の飽和磁化量を１００Ａ・ｍ²／ｋｇ以下とすることにより、後述する磁場の印加による被検体の移動で、被検体がセル１２の内壁に到達してしまうことを防止し、被検体を含む液体の中で、好適に被検体を動かすことができる。

　また、蛍光粒子（蛍光体、蛍光物質）にも制限はなく、蛍光を利用する目的物質の検出に用いられる公知のものが、各種、利用可能である。一例として、蛍光色素、量子ドット、希土類、蛍光顔料、および、生物学的蛍光分子等が例示される。これらは、市販品も利用可能である。また、蛍光粒子は、蓄光粒子であってもよい。この場合には、励起光を一時的に遮断または消灯した状態で、後述する撮像部１６（撮像素子３４）によって、連続的にセル１２内の撮像を行う。蓄光粒子は、市販品も利用可能である。
　なお、目的物質の種類によっては、励起光の照射によって、目的物質が蛍光を発生する場合も有る。この際には、目的物質が蛍光粒子を兼ねる。

　目的物質と磁気粒子との結合方法、および、目的物質と蛍光粒子との結合方法にも、制限はなく、目的物質および磁気粒子の種類に応じた公知の方法が利用可能である。一例として、物理吸着、抗原－抗体反応、ＤＮＡハイブリダイゼーション、ビオチン－アビジン結合、キレート結合、および、アミノ結合等が例示される。

　物理吸着は、水素結合などの静電的な結合力を利用して、目的物質と磁気粒子とを結合する方法である。物理吸着は、磁気粒子の処理等が不要であることから、実施が容易である。その反面、物理吸着では、磁気粒子および蛍光粒子が目的物質と特異的に吸着するわけでは無いので、選択性が低い。すなわち、物理吸着では、磁気粒子および／または蛍光粒子が、試料に含まれる目的物質以外の物質と結合する可能性も有る。
　これに対して、抗原－抗体反応は、目的物質との特異的な結合を利用するので、磁気粒子および蛍光粒子と、目的物質とを、選択的に結合できるという利点がある。なお、抗原－抗体反応を利用する際に、目的物質がウイルス等の抗原である場合には、事前に、目的物質となるウイルスに対する抗体を、磁気粒子および／または蛍光粒子に結合させておく必要がある。

　目的物質に、磁気粒子および蛍光粒子の両方を結合させる場合には、少なくとも一方の結合は、抗原－抗体反応のように、目的物質との特異的な結合であるのが好ましい。
　目的物質に、磁気粒子および蛍光粒子の両方を結合させる場合に、結合が、いずれも非特異的な結合である場合には、目的物質以外の異物に、磁気粒子および蛍光粒子の両方が結合してしまう場合があり、この際には、目的物質と異物との区別ができなくなるという不都合が生じる。

　なお、本発明においては、励起光の照射によって蛍光を発する磁気粒子、および、磁気を帯びている蛍光粒子も利用可能である。
　この場合には、励起光の照射によって蛍光を発する磁気粒子と、目的物質と粒子との結合は、抗原－抗体反応のように、目的物質との特異的な結合であるのが好ましい。励起光の照射によって蛍光を発する磁気粒子と、目的物質との結合が非選択的な結合である場合には、目的物質以外の異物に、励起光の照射によって蛍光を発する磁気粒子が結合してしまう場合があり、この際には、目的物質と異物との区別ができなくなるという不都合が生じる。

　セル１２は、ガラスおよび樹脂等で形成される光透過性の容器で、被検体を含む液体を収容する。以下の説明では、被検体を含む液体を『被検査液』ともいう。
　前述のように、本例では、一例として、磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体を、被検体とする。従って、セル１２に収容される被検査液の中には、被検体である磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体に加え、磁気粒子と目的物質との結合体、目的物質と蛍光粒子との結合体、目的物質、磁気粒子、および、蛍光粒子等が存在する可能性がある。

　なお、以下の説明は、磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体を被検体とする場合を代表例として行うが、本発明は、これに制限されないのは、前述のとおりである。
　例えば、目的物質が励起光の照射で蛍光を発生する場合には、セル１２に収容される被検査液の中には、被検体である磁気粒子と目的物質との結合体に加え、目的物質、および、磁気粒子が存在する可能性がある。
　また、励起光の照射によって蛍光を発する磁気粒子を利用する場合には、セル１２に収容される被検査液の中には、被検体である励起光の照射によって蛍光を発する磁気粒子と目的物質との結合体に加え、目的物質、および、励起光の照射によって蛍光を発する磁気粒子が存在する可能性がある。

　前述のように、検出装置１０において、セル１２は、被検査液を収容する容器である。
　本発明において、被検査液（被検体を含む液体）とは、具体的には、目的物質が存在する可能性がある試料と、磁気粒子および蛍光粒子とを含む液体において、被検体である磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体が形成された液体である。すなわち、本発明において、被検査液とは、言い換えれば、被検体（目的物質）が存在する可能性がある液体、である。
　前述のように、試料は、例えばスワブで採取されて、セル１２に収納される液体に供給される。

　本発明において、セル１２には制限はなく、医療および生物学等において、光による目的物質の検出に利用可能される光透過性の容器が、各種、利用可能である。なお、セル１２は、励起光の透過率が５０％以上であるのが好ましい。さらに、セル１２の内壁は、目的物質、磁気粒子、蛍光粒子、および、その他の各種粒子が付着しにくい設計であるのが好ましい。例えば、公知の市販ブロッキング材などを処理することが例示される。
　前述のように、図示例の検出装置１０において、セル１２は、一例として、被検査液を導入するための開口（図示省略）を有する透明な立方体状の容器で、開口を上方に向けて配置される。

　励起光照射部１４は、セル１２の内部、すなわち、セル１２に収容された被検査液に励起光を照射して、蛍光粒子に蛍光を発生させるためのものである。
　図示例の検出装置１０において、励起光照射部１４は、光源３０と、集光光学系３２とを有する。

　光源３０は、蛍光粒子に蛍光を発生させるための励起光を照射するものである。光源３０には、制限はなく、蛍光粒子を励起させて蛍光を発生させる成分を含む光を照射可能な光源が、各種、利用可能である。
　光源３０としては、一例として、水銀灯などの電球、蛍光灯、ＬＥＤ（Light Emitting Diode）、および、半導体レーザなどのレーザ等が例示される。中でも、ＬＥＤおよび半導体レーザが好適に利用される。
　なお、光源３０は、励起光として、蛍光粒子が発生する蛍光とは異なる波長域の光を出射するのが好ましい。これにより、励起光がノイズとなって、被検体の検出感度および精度が低下することを防止できる。

　集光光学系３２は、好ましい態様として設けられるもので、光源３０が照射した励起光を集光してセル１２の内部に照射するためのものである。
　集光光学系３２は、セル１２の内部に焦点を有するのが好ましい。集光光学系３２は、セル１２の内壁から１００ｎｍ以上、離れた位置に焦点を有するのがより好ましく、セル１２の内壁から３００ｎｍ以上、離れた位置に焦点を有するのがさらに好ましい。また、焦点のスポット径は撮像部１６に応じて適宜選択できるが、１０μｍΦ～１０ｍｍΦが好ましく、１００μｍΦ～５ｍｍΦがより好ましい。これにより、セル１２の内壁に非特異的に吸着した蛍光粒子に起因するノイズを低減して、よりＳ／Ｎ比の高い高感度な被検体の検出が可能になる。

　集光光学系３２には、制限はなく、１枚あるいは複数のレンズを用いる集光光学系等、公知の集光光学系が、各種、利用可能である。
　集光光学系３２としては、例えば、４倍から６００倍までの範囲で固定倍率の単焦点レンズが例示される。

　なお、本発明においては、集光光学系３２は、光源３０の光を焦点を結ぶように集光する集光光学系に制限はされない。
　例えば、集光光学系３２は、光源３０からの光を平行光に成形する、コリメート光学系でもよい。この場合には、図１において、集光光学系３２から出射される励起光が、集光されずに平行光（略平行光）となる。

　励起光照射部１４は、光源３０とセル１２との間に、光源３０が照射する光から、励起光の波長領域以外の光を除去する、波長制限フィルタを有するのが好ましい。波長制限フィルタは、励起光の波長領域に応じて、公知の光学フィルタが利用可能である。
　このような波長制限フィルタを設けることにより、ノイズとなる可能性がある余分な波長領域の光がセル１２内に入射することを抑制して、よりＳ／Ｎ比の高い高感度な被検体の検出が可能になる。

　撮像部１６は、セル１２内を撮像するものである。
　図示例の検出装置１０において、撮像部１６は、撮像素子３４と、集光光学系３６とを有する。

　撮像素子３４は、公知の撮像素子である。従って、撮像素子３４には、制限はなく、蛍光粒子が発生する蛍光の波長領域に応じて、この波長領域の光に感度を有する撮像素子が、各種、利用可能である。
　撮像素子３４としては、一例として、ＣＭＯＳ（Complementary Metal Oxide Semiconductor）イメージセンサ（ＣＭＯＳカメラ）、および、ＣＣＤ（Charge-Coupled Device）イメージセンサ（ＣＣＤカメラ）等が例示される。中でも、ＣＭＯＳイメージセンサおよびＣＣＤイメージセンサは、好適に利用される。

　集光光学系３６は、撮像素子３４側から見た際に、撮像素子３４による測光の光路をセル１２の内部に集光する光学系である。すなわち、集光光学系３６は、セル１２の内部に焦点を有する集光光学系である。
　集光光学系３６すなわち撮像部１６は、セル１２の内部に焦点を有する。集光光学系３６は、セル１２の内壁から１００ｎｍ以上、離れた位置に焦点を有するのがより好ましく、セル１２の内壁から３００ｎｍ以上、離れた位置に焦点を有するのがさらに好ましい。また、撮像部１６の焦点のスポットサイズは撮像部に応じて適宜選択できるが、１０μｍ角（μｍ square）～１０ｍｍ角（ｍｍ square）が好ましく、１００μｍ角～５ｍｍ角がさらに好ましい。これにより、セル１２の内壁に非特異的に吸着した蛍光粒子に起因するノイズを低減して、よりＳ／Ｎ比の高い高感度な被検体の検出が可能になる。

　集光光学系３６には、制限はなく、１枚あるいは複数のレンズを用いる集光光学系等、公知の集光光学系が、各種、利用可能である。
　集光光学系３６としては、例えば、４倍から６００倍までの範囲で固定倍率の単焦点レンズが例示される。

　なお、励起光照射部１４（集光光学系３２）の焦点と、撮像部１６（集光光学系３６）の焦点とは、一致しても、一致していなくてもよい。
　ここで、撮像部１６は、一例として、焦点位置において、ある程度の大きさの二次元平面（焦点面）を撮像する。この場合には、この二次元平面に励起光を好適に照射するために、励起光照射部１４の焦点と、撮像部１６との焦点とは、一致せずに、若干、ズレているのが好ましい。

　撮像部１６は、撮像素子３４とセル１２との間に、励起光の波長領域の光を除去する、励起光カットフィルタを有するのが好ましい。励起光カットフィルタは、公知の光学フィルタが利用可能である。このような励起光カットフィルタを設けることにより、励起光が撮像素子３４に入射してノイズになることを抑制して、より高感度な被検体の検出が可能になる。
　また、撮像部１６（撮像素子３４）は、励起光照射部１４が照射する励起光の光路から外れた位置に配置されるのが好ましい。この構成を有することにより、同様に、励起光が撮像素子３４に入射してノイズになることを抑制して、よりＳ／Ｎ比が高い高感度な被検体の検出が可能になる。

　なお、本発明の検出装置１０においては、撮像部１６として、デジタルカメラ、スマートフォンおよび携帯電話等など、撮像機能を有する各種の装置を利用してもよい。
　また、検出装置１０は、撮像部１６を、複数、有してもよい。

　ここで、本発明の検出装置１０においては、励起光照射部１４の光軸（光路）と、撮像部１６の光軸（測定する光の光路）との交点が、セル１２の内壁面以外に位置する（図３参照）。すなわち、本発明においては、励起光照射部１４の光軸と、撮像部１６の光軸との交点が、セル１２の内部に位置する。
　本発明の検出装置１０は、このような構成を有することにより、セル１２の内壁面に非特異的に吸着した蛍光粒子等に起因するノイズを除去して、Ｓ／Ｎ比の高い高感度な被検体（目的物質）を可能にしている。この点に関しては、後に詳述する。

　励起光照射部１４の光軸と、撮像部１６の光軸との交点は、セル１２の内部で、セル１２の内壁面から１００ｎｍ以上、離れた場所に位置するのが好ましく、セル１２の内壁面から２００ｎｍ以上、離れた場所に位置するのがより好ましく、セル１２の内壁面から３００ｎｍ以上、離れた場所に位置するのがさらに好ましい。これにより、セル１２の内壁に非特異的に吸着した蛍光粒子に起因するノイズを低減して、よりＳ／Ｎ比の高い高感度な被検体の検出が可能になる。

　なお、本発明において、励起光照射部１４の光軸とは、集光光学系３２を有さない場合には光源３０の光軸であり、集光光学系３２を有する場合には、集光光学系３２の光軸である。なお、光源３０の光軸と、集光光学系３２の光軸とは、通常、一致させる。
　また、本発明において、撮像部１６の光軸とは、集光光学系３２を有さない場合には撮像素子３４の光軸であり、集光光学系３２を有する場合には、集光光学系３２の光軸である。なお、撮像素子３４の光軸と、集光光学系３２の光軸とは、通常、一致させる。

　粒子が大きい場合などは、セル１２の底面（鉛直方向の下面）に、磁気粒子、目的物質、蛍光粒子および異物等が沈んで、堆積している場合が有る。そのため、セル１２の底面から撮像を行うと、これらの粒子を検出してしまい、誤検出となる場合がある。
　これを防止するために、撮像部１６は、セル１２の底面からではなく、図１に示すように、セル１２の側面から、撮像を行うのが好ましい。具体的には、撮像部１６は、光軸を、セル１２の鉛直方向に平行な面に交差させて、撮像を行うのが好ましい。または、撮像部１６は、光軸を、セル１２の、鉛直方向に対して４５°以下、特に３０°以下の角度を有する面に交差させて、撮像を行うのが好ましい。

　第１磁場発生部１８、第２磁場発生部２０、第３磁場発生部２４および第４磁場発生部２６は、セル１２内に磁場を印加（発生）することによって、磁力で磁気粒子を移動させるものである。図示例において、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、立方体状であるセル１２の１面に１個が対応して、セル１２を囲むように配置される。
　検出装置１０において、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、電磁石を用いる公知の磁場発生部であって、一例として、電磁石と、電源と、スイッチと、を有して構成される。

　第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、撮像部１６の光軸に対して、角度を有する方向に、被検体を移動させるように配置される。
　具体的には、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、被検体を、撮像部１６の検出面に対して９０°未満の角度を有するように移動させるのが好ましい。
　また、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、被検体を、撮像部１６の検出面と平行に移動させるのが、より好ましい。言い換えれば、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、移動する被検体が形成する面（および、その延長面）が、撮像素子３４の光軸と直交するように、被検体を移動させるのが、より好ましい。なお、移動する被検体が形成する面とは、言い換えれば、移動する被検体が描く画像である。

　これに対応して、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６の中心をつなぐことで形成される面が、撮像部１６の光軸と交差するように配置されるのが好ましい。
　また、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６の中心をつなぐことで形成される面が、撮像部１６の光軸と直交するように配置されるのが、より好ましい。言い換えれば、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６の中心をつなぐことで形成される面が、撮像素子３４の検出面と平行になるように配置されるのが、より好ましい。
　なお、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６の中心とは、磁場発生部が有する磁石（電磁石または永久磁石）のセル１２側の表面の、撮像部１６の光軸方向および撮像部１６の光軸方向と直交する方向の中心である。

　すなわち、本発明においては、撮像部から見た際に、移動する被検体（磁気粒子）が二次元的な画像を描くように、磁場発生部を配置するのが好ましい。

　具体的には、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、移動する被検体が形成する面と、撮像部１６の検出面とが成す角度が、４５°以下となるように被検体を移動するのが好ましく、３０°以下となるように被検体を移動するのがより好ましく、０°（すなわち平行）となるように被検体を移動するのがさらに好ましい。
　すなわち、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６は、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６の中心をつなぐことで形成される面と、撮像部１６の光軸とが成す角度が、１３５°以下となるように配置されるのが好ましく、１２０°以下となるように配置されるのがより好ましく、９０°（すなわち直交）となるように配置されるのがさらに好ましい。

　このような構成を有することにより、撮像部１６が、磁場の印加によって移動する被検体の動きを、二次元的に撮像することが可能になり、被検体（目的物質）をより高感度に検出することが可能になる。

　なお、本発明において、磁場発生部は、電磁石を用いるものに制限はされない。
　例えば、磁場発生部は、永久磁石と、永久磁石からセル１２に到る磁力を遮蔽／通過する磁力の遮蔽手段とで構成してもよい。

　本発明の検出装置１０において、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が印加する磁場の磁場強度には、制限はない。
　第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が印加する磁場の磁場強度は、ぞれぞれ、１～４００ｍＴであるのが好ましく、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が印加する磁場の磁場強度は、１０～３００ｍＴであるのがより好ましく、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が印加する磁場の磁場強度は２０～２００ｍＴであるのがさらに好ましい。
　第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が印加する磁場の磁場強度を１ｍＴ以上とすることにより、磁場の印加によって、被検体を好適に移動することができる。本例においては、被検体は、磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体である。また、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が印加する磁場の磁場強度を４００ｍＴ以下とすることにより、磁場の印加によって移動する被検体がセル１２の内壁に到達してしまうことを防止し、被検査液の中で、好適に被検体を動かすことができる。

　検出装置１０においては、一例として、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６によって、順次、磁場を印加することによって、被検体である磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体を移動させると共に、励起光照射部１４によってセル１２の内部に励起光を照射して、かつ、セル１２の内部を撮像部１６で撮像することにより、被検査液中の被検体（目的物質）を検出する。

　以下、図２の概念図を参照して、検出装置１０の作用を説明する。図２は、検出装置１０を、励起光照射部１４および撮像部１６側から見た図である。
　前述のように、本発明は、被検査液（被検体を含む液体）から、被検体Ｔを検出する。
　本例では、目的物質を含む可能性がある試料と、磁気粒子および蛍光粒子とを含む液体をセル１２に収容して、被検体Ｔである目的物質と磁気粒子と蛍光粒子との結合体が形成された液体を被検査液とし、被検体Ｔを検出することで、試料の中に目的物質が存在するか否か、あるいはさらに、目的物質の量を検出する。
　従って、セル１２に収容される被検査液には、被検体Ｔである磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体に加え、磁気粒子と目的物質との結合体、および、目的物質と蛍光粒子との結合体、目的物質、磁気粒子、および、蛍光粒子等が存在する可能性がある。
　なお、図面を簡略化して、被検体Ｔの動きを分かりやすくするために、図２では、励起光照射部１４および撮像部１６は省略し、かつ、セル１２の内部には、被検体Ｔのみを示している。

　セル１２の中に被検査液を収容し、かつ、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が全てｏｆｆすなわち電磁石が駆動していない状態では、被検体Ｔ、磁気粒子と目的物質との結合体、および、目的物質と蛍光体の結合体等が、セル１２（液体）の中で、不規則に浮遊した状態になっている。
　この状態で、例えば、第１磁場発生部１８をｏｎにすると、被検体Ｔ、磁気粒子と目的物質との結合体、および、磁気粒子が、磁力によって第１磁場発生部１８に向かって移動する。本例において、被検体Ｔは、磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体である。
　また、目的物質と蛍光粒子との結合体、目的物質、および、蛍光物質は、ブラウン運動等によって移動するが、磁気粒子を有さないので、磁力によって移動することはない。
　なお、第１磁場発生部１８をｏｎにするとは、第１磁場発生部１８の電磁石を駆動する、という意味である。この点に関しては、他の磁場発生部も、同様である。

　次いで、例えば、第１磁場発生部１８をｏｆｆにして、第２磁場発生部２０をｏｎにする。これにより、同様に、被検体Ｔ、磁気粒子と目的物質との結合体、および、磁気粒子が、磁力によって第２磁場発生部２０に向かって移動し、目的物質と蛍光粒子との結合体、目的物質、および、蛍光物質は、移動しない。
　次いで、例えば、第２磁場発生部２０をｏｆｆにして、第３磁場発生部２４をｏｎにする。これにより、同様に、被検体Ｔ、磁気粒子と目的物質との結合体、および、磁気粒子が、磁力によって第３磁場発生部２４に向かって移動し、目的物質と蛍光粒子との結合体、目的物質、および、蛍光物質は、移動しない。
　さらに、例えば、第３磁場発生部２４をｏｆｆにして、第４磁場発生部２６をｏｎにする。これにより、同様に、被検体Ｔ、磁気粒子と目的物質との結合体、および、磁気粒子が、磁力によって第４磁場発生部２６に向かって移動し、目的物質と蛍光粒子との結合体、目的物質、および、蛍光物質は、移動しない。

　このように、第１磁場発生部１８、第２磁場発生部２０、第３磁場発生部２４および第４磁場発生部２６を、順次、ｏｎ／ｏｆｆすることで、図２に概念的に示すように、被検体Ｔ、磁気粒子と目的物質との結合体、および、磁気粒子が略四角形状に移動する。言い換えれば、被検体Ｔ等が、略四角形を描くように移動する。上述のように、本例において、被検体Ｔは、磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との結合体である。
　このような磁場発生部のｏｎ／ｏｆｆを行っている状態で、励起光照射部１４によってセル１２の内部に励起光を照射すると、蛍光粒子が発光する。すなわち、励起光照射部１４によってセル１２の内部に励起光を照射すると、被検体Ｔ、目的物質と蛍光粒子との結合体、および、蛍光粒子が、蛍光を発光する。磁気粒子と目的物質との結合体、磁気粒子、および、目的物質は、励起光の照射では、何の変化も生じない。

　前述のように、被検体Ｔは、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６を、順次、ｏｎ／ｏｆｆすることで、略四角形状に移動するが、目的物質と蛍光粒子との結合体、および、蛍光粒子は、磁気粒子を有さないので、磁力による移動はしない。
　他方、励起光の照射によって、被検体Ｔは蛍光を発光するが、被検体Ｔと同様に略四角形状に移動する磁気粒子と目的物質との結合体、および、磁気粒子は、蛍光粒子を有さないので、発光しない。
　すなわち、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６を、順次、ｏｎ／ｏｆｆし、かつ、励起光を照射した状態で、蛍光を発光しつつ略四角形状に移動するのは、被検体Ｔのみである。

　従って、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６を、順次、ｏｎ／ｏｆｆしつつ、励起光をセル１２の内部に照射して、セル１２の内部を撮像部１６によって撮像することにより、撮像した画像中（動画中）に第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６のｏｎ／ｏｆｆに応じて略四角形状の一定の動きをする光（輝点）が有れば、被検査液の中に被検体Ｔが存在すること、すなわち、試料の中に目的物質が存在することが検出できる。
　また、本発明によれば、セル１２内の被検査液に含まれる被検体（目的物質）が微量であっても、被検体Ｔが１つでも存在すれば、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６のｏｎ／ｏｆｆに応じて、光が一定の動きを繰り返す。従って、本発明によれば、試料中の目的物質が微量であっても、目的物質の検出が可能で、試料中の目的物質の有無を検出できる。

　ここで、本発明においては、図３に概念的に示すように、励起光照射部１４の光軸と、撮像部１６の光軸との交点が、セル１２の内壁面以外に位置する。すなわち、本発明においては、励起光照射部１４の光軸と、撮像部１６の光軸との交点が、セル１２の内部に位置する。
　また、本発明においては、撮像部１６の焦点がセル１２の内部に位置する。
　さらに、本発明においては、セル１２の内部に磁場を印加することにより、セル１２の内部において、磁力によって被検体Ｔを移動させる。
　本発明は、このような構成を有することにより、被検査液中で、被検体を磁力によって適正に移動させると共に、セル１２の内部で被検体を検出することで、セル１２の内壁面に非特異的に吸着した蛍光粒子によるノイズ等を除去して、Ｓ／Ｎ比の高い高感度な被検体の検出ができる。

　前述のように、セル１２の内壁面には、検出面のような壁面には、タンパク質などの異物が多く付着しており、さらには、蛍光粒子および磁気粒子等も非特異的に吸着する。これらの付着物は、被検体の円滑な移動を阻害する。そのため、近接場のように、セルの内壁面（内壁面の近傍）では、磁力による被検体の移動が不十分になってしまい、移動する被検体の検出が難しくなる。すなわち、被検体の検出感度が低下する。
　加えて、近接場のようなセルの内壁面には、被検体も付着してしまう。検出面に付着した被検体は、磁力によって移動できなくなるので、検出面に実際に存在する被検体に対して、移動によって検出される被検体の数が減少する。この点でも、被検体の検出感度が低下してしまう。すなわち、ノイズに対する検出信号の数が低下してしまい、Ｓ／Ｎ比が低く、検出感度が低下してしまう。

　また、蛍光物質は、常に特異的に目的物質に吸着するわけではなく、多くの蛍光粒子が、非特異的な吸着によってセル１２の内壁面に付着する。従って、セル１２の内壁面に励起光が照射されると、この部分に非特異的に吸着した蛍光粒子が蛍光を発生する。
　非特異的に吸着した蛍光粒子は、磁力が掛けられても移動することはない。特許文献１に記載される検出方法では、これを利用して、磁場によって被検体を移動し、光量の変化および移動した光（輝点）の検出等で、非特異的に近接場に吸着した蛍光粒子と被検体との差別化を行い、非特異的に近接場に吸着した蛍光粒子によるノイズを除去している。
　しかしながら、この方法でも、非特異的に近接場に吸着した蛍光粒子による不要な蛍光は、撮像素子によって検出され、やはり、ノイズになってしまい、Ｓ／Ｎ比は低下する。

　これに対し、本発明では、励起光照射部１４の光軸と、撮像部１６の光軸との交点が、セル１２の内壁面以外に位置する。また、本発明では、撮像部１６の焦点がセル１２の内部に位置する。
　従って、本発明の検出装置１０において、主たる検出エリアは、セル１２の内壁面ではないので、検出エリアにおいて、被検体の移動を妨害する障害物は少なく、被検体は印加された磁力に応じて適正に移動する。また、被検体は、何らかの部位に付着しているわけではないので、件須臾エリアに存在する被検体が、全て、磁力によって移動できる。さらに、複数の磁石による磁場を、順次、印加することで、二次元的な画像を描くように被検体を移動させるので、被検体がセル１２の内壁に接触することも防止できる。
　そのため、本発明によれば、検出エリアに存在する全ての被検体が、印加した磁力に応じて適正に移動するので、存在する被検体を全て検出できるので、近接場のようにセル１２の内壁面で検出する場合に比して被検体が存在する場合には確実に検出できると共に、被検体の検出数を向上して、すなわちＳ／Ｎ比を向上して、高感度な被検体（目的物）の検出を行うことができる。
　さらに、励起光照射部１４の光軸と撮像部１６の光軸との交点が、セル１２の内壁面以外に位置する本発明によれば、撮像部１６が、セル１２の内壁面に非特異的に吸着した蛍光粒子の蛍光を測定することを防止できる。すなわち、本発明によれば、セル１２の内壁面に非特異的に吸着した蛍光粒子が発生する蛍光に起因するノイズを除去して、Ｓ／Ｎ比の高い高感度な目的物質の検出が可能になる。

　図４に、本発明の検出方法を実施する、本発明の検出装置を構成する検出システムの一例を概念的に示す。
　図４に示す検出システムは、セル１２を含む検出管４０を用いる。検出管４０は、セル１２に連通した濾過室４２を有し、さらに、濾過室４２に連通した混合室４６を有する。検出管４０において、濾過室４２と混合室４６とは隔壁４８によって隔離され、濾過室４２とセル１２との間には、フィルタ５０が設けられている。濾過室４２と混合室４６とを隔離する隔壁４８は、スワブ５２等によって破断可能なアルミ箔等の材料で形成される。

　図４に示す検出システムにおいて、目的物質を含む可能性が有る試料は、スワブ５２によって採取される。
　検出管４０の混合室４６には、試料を溶解または分散可能な溶剤が収容されている。この溶剤としては、リン酸緩衝液、トリス緩衝液、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、酒石酸緩衝液、水、水系の溶剤、および、アルコール系の溶剤等が例示される。水は、純水、イオン交換水、および、蒸留水のいずれかを用いるのが好ましい。また、これらの溶液に微量のブロッキング材を含んだ溶液も用いられる。
　この検出システムにおいては、図４の左側に示すように、試料を採取したスワブ５２を混合室４６の溶剤に浸漬して、攪拌することにより、試料を溶剤に混合する。

　次いで、図４の左から２番目に示すように、スワブ５２によって隔壁４８を破断して、試料を混合した溶剤を濾過室４２に供給する。
　濾過室４２には、磁気粒子および蛍光粒子が収容されている。図示例の検出管４０では、濾過室４２で、試料を含む溶剤に、磁気粒子および蛍光粒子が混合され、磁性材料と目的物質と蛍光材料とが結合した被検体が生成され、セル１２に収容する被検査液となる。なお、磁気粒子および蛍光粒子が収容されるのは、濾過室４２に制限はされず、混合室４６でもセル１２でもよい。また、磁気粒子と蛍光粒子とは、互いに異なる室（セル）に収容されてもよい。

　被検査液は、濾過室４２から落下してフィルタ５０によって濾過されて、大きな異物を除かれて、セル１２に収容される。

　図４の左から３番目に示すように、全ての液体が濾過されてセル１２に収容されたら、図４の右側に示すように、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６、ならびに、図示を省略する励起光照射部１４および撮像部１６を有する検出ユニットに検出管４０を装填して、前述のように、被検体（目的物質）の検出を行う。
　なお、図４に示す検出システムを構成する検出ユニットにおいては、励起光照射部１４および撮像部１６は、例えば、図中、検出管４０の下方に配置される。

　図１に示す検出装置１０は、電磁石を用いる磁場発生部を４個有するが、本発明は、これに制限はされない。
　すなわち、電磁石を用いる磁場発生部は、３個でもよい。この際には、磁力による被検体等の動きは、略三角形状になる。あるいは、５個以上の磁場発生部を有してもよい。
　前述のように、本発明においては、撮像部１６から見た際に、移動する被検体（磁気粒子）が二次元的な画像を描くように、磁場発生部を配置するのが好ましい。なお、本発明において、磁力で移動する被検体の動き、すなわち、被検体が描く図形は、四角形および三角形に制限はされず、円形（略円形）、楕円形（略楕円形）、五角形以上の多角形（略多角形）および不定形等、各種の形状が利用可能である。

　また、図１に示す検出装置１０は、４つの第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６が固定されていたが、本発明は、これには制限されない。
　例えば、図５に概念的に示すように、第１磁場発生部１８と第２磁場発生部２０との２つの磁場発生部を、セル１２を挟むように配置して、第１磁場発生部１８および第２磁場発生部２０をセル１２の回りを回転するように移動すると共に、第１磁場発生部１８と第２磁場発生部２０とを、交互にｏｎ／ｏｆｆすることで、セル１２内の被検査液に存在する被検体を移動させてもよい。
　この場合には、被検体は、円を描くように移動する。

　あるいは、図６に概念的に示すように、第１磁場発生部１８を１個のみ設け、第１磁場発生部をｏｎした状態で、セル１２の回りを回転するように移動させることにより、セル１２内の被検査液に存在する被検体を移動させてもよい。この際においては、磁場発生部は、第１磁場発生部１８のように電磁石を用いるものであってもよく、あるいは、永久磁石を用いるものでもよい。
　この場合にも、同様に、被検体は、円を描くように移動する。

　なお、磁場発生部を移動させる構成において、磁場発生部の移動機構には、制限はなく、各種の部材を移動させる公知の方法が、全て、利用可能である。

　磁場発生部を移動する場合には、磁場発生部の好ましい動き等は、前述の磁場発生部を順次、ｏｎ／ｏｆｆする構成に準ずる。
　すなわち、磁場発生部は、移動する被検体が形成する面が、撮像部１６の光軸と交差するように被検体を移動させるのが好ましく、撮像部１６の光軸と直交するように被検体を移動させるのがより好ましい。
　また、磁場発生部の移動機構は、移動する磁石の中心が形成する面が、撮像部１６の光軸と交差するように磁場発生部を移動するのが好ましく、撮像部１６の光軸と直交するように磁場発生部を移動するのが、より好ましい。

　本発明において、１回の被検体の検出において、磁場の印加による被検体等の移動の回数には、制限はない。
　例えば、図１および図２に示す、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６を有する場合であれば、第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６を、順次、ｏｎ／ｏｆｆすることを、複数回、繰り返し行って、被検体によって略四角形を描くことを複数回（複数周）行って、被検体の検出を行ってもよい。あるいは第１磁場発生部１８～第４磁場発生部２６を、順次、ｏｎ／ｏｆｆすることを、１回のみ行って、被検体による略四角形を、１回、描くことで、被検体の検出を行ってもよい。

　以上、本発明の検出装置および検出方法について詳細に説明したが、本発明は上述の例に限定はされず、本発明の要旨を逸脱しない範囲において、各種の改良や変更を行ってもよいのは、もちろんである。

　医療および研究等におけるウイルス等の検出に好適に利用可能である。

　１０　検出装置
　１２　セル
　１２ａ　領域
　１４　励起光照射部
　１６　撮像部
　１８　第１磁場発生部
　２０　第２磁場発生部
　２４　第３磁場発生部
　２６　第４磁場発生部
　３０　光源
　３２，３６　集光光学系
　３４　撮像素子
　４０　検出管
　４２　濾過室
　４６　混合室
　４８　隔壁
　５０　フィルタ
　５２　スワブ
　５６　コイル
　５８　交流電源
　Ｔ　被検体

Claims

　磁気粒子と目的物質と蛍光粒子との組み合わせ、または、目的物質と磁性を帯びて蛍光を発する粒子とを被検体として検出する検出装置であって、
　前記被検体を含む液体を収容するセルと、前記被検体に蛍光を発生させる励起光を前記セルの内部に照射する励起光照射部と、前記セルの内部を撮像する前記セル内に焦点を有する撮像部と、前記被検体を前記撮像部の光軸に対して角度を有する方向に移動させる磁場発生部と、を有し、
　前記励起光照射部の光軸と前記撮像部の光軸との交点が、前記セルの内壁面以外に位置することを特徴とする検出装置。
　前記磁場発生部は、前記被検体を、前記撮像部の検出面と平行または前記撮像部の検出面に対して９０°未満の角度を有するように移動させる請求項１に記載の検出装置。
　前記磁場発生部は、前記セルの内壁面に接触させることなく、前記被検体を移動させる、請求項１または２に記載の検出装置。
　電磁石を有する前記磁場発生部を３以上有する、請求項１～３のいずれか１項に記載の検出装置。
　前記磁場発生部が、磁石と前記磁石の移動機構とを有する、請求項１～３のいずれか１項に記載の検出装置。
　前記撮像部が、前記励起光照射部が照射する励起光の光路から外れた位置に配置される、請求項１～５のいずれか１項に記載の検出装置。
　前記撮像部の光軸が、前記セルの鉛直方向に平行な面または鉛直方向に対して４５°以下の角度を有する面に交差する、請求項１～６のいずれか１項に記載の検出装置。
　前記磁場発生部が発生する磁場の強度が、１～４００ｍＴである、請求項１～７のいずれか１項に記載の検出装置。
　前記セルおよび前記セルに連通する空間の少なくとも一方に、前記磁気粒子および前記蛍光粒子、または、前記磁性を帯びて蛍光を発する粒子を有する、請求項１～８のいずれか１項に記載の検出装置。
　前記磁気粒子および前記磁性を帯びて蛍光を発する粒子の飽和磁化量が、０．０１～２００Ａ・ｍ²／ｋｇである、請求項９に記載の検出装置。
　磁気粒子と蛍光粒子との組み合わせ、または、磁性を帯びて蛍光を発する粒子を被検体として検出するに際し、
　前記被検体を含む液体をセルに収容した状態で、前記セルの内部に前記被検体に蛍光を発生させる励起光を照射すると共に、前記セルの内部に焦点を合わせて、かつ、前記セルの内壁面以外で前記励起光の光軸と光軸が交差するようにして、前記セルの内部を撮像し、さらに、
　前記セル内において、前記撮像の光軸に対して角度を有する方向に、前記被検体を、磁力によって移動させることを特徴とする検出方法。