WO2019163452A1 - Treatment device - Google Patents
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- WO2019163452A1 WO2019163452A1 PCT/JP2019/003208 JP2019003208W WO2019163452A1 WO 2019163452 A1 WO2019163452 A1 WO 2019163452A1 JP 2019003208 W JP2019003208 W JP 2019003208W WO 2019163452 A1 WO2019163452 A1 WO 2019163452A1
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
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- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
- C12M1/26—Inoculator or sampler
Definitions
- the disclosed technology relates to a processing apparatus.
- JP 2010-524498 A discloses a medium reservoir, a cell treatment device having at least one inlet, at least one outlet, a first lobe and a second lobe, at least one pump, and a fluid flow direction.
- a cell separation device is described, comprising at least one valve that changes or stops the fluid, which are in communication with each other.
- JP-T-2009-540868 discloses at least one intake port for taking in fluid, at least one exhaust port for discharging fluid, and at least two for binding a target substance such as nucleic acid.
- a device for purifying a material of interest that creates a circuit to a port is described. The device also describes flowing air through the conduit to remove fluid remaining in the conduit.
- the living tissue is composed of cells and an extracellular matrix existing around the cells.
- the separation process for separating (or isolating) cells from a biological tissue is a process for extracting a cell by decomposing an extracellular matrix using a treatment liquid such as an enzyme agent.
- a treatment liquid such as an enzyme agent.
- the processing apparatus includes a first container for housing a biological tissue to be processed, a second container for enclosing a processing liquid used for processing the biological tissue, a first container, and a second container. And a processing liquid transfer means for transferring the processing liquid from the plurality of second containers to the first container.
- the processing apparatus having the above-described configuration, if the processing liquid remains in the flow path, the amount of the processing liquid added to the living tissue is insufficient, and processing failure may occur.
- Patent Document 2 Japanese Patent Publication No. 2009-540868
- a contamination source such as bacteria and viruses
- living tissue and cells separated from the living tissue are exposed to the contamination source.
- the disclosed technology aims to suppress the remaining of the treatment liquid in the flow path while suppressing the risk of the living tissue and the cells separated from the living tissue being exposed to the contamination source.
- a processing apparatus includes a first container for containing a biological tissue to be processed, a plurality of second containers for sealing a processing liquid used for processing the biological tissue, and a first container At least one of the flow paths, a flow path that connects each of the plurality of second containers, a treatment liquid transfer means that sequentially transfers the treatment liquid from each of the plurality of second containers to the first container, and Gas transfer means for transferring aseptic gas to the first container via the section.
- the gas transfer means transfers the sterile gas to the first container via the flow path, so that the living tissue and the cells separated from the living tissue are exposed to the contamination source. It is possible to suppress the remaining of the processing liquid in the flow path while suppressing the risk of occurrence.
- the flow path includes a plurality of individual flow paths individually connected to each of the plurality of second containers, and a common flow path that connects each of the plurality of individual flow paths and the first container. Also good. According to this aspect, the total length of the flow path can be shortened as compared with the case where all the flow paths are set as individual flow paths.
- the sterilized gas may be sealed together with the treatment liquid in each of the plurality of second containers.
- the gas transfer means converts the sterilized gas sealed in the second container into the second container. You may transfer to a 1st container via the separate flow path connected to this container, and a common flow path.
- the processing liquid remaining in the flow path can be transferred to the first container by the aseptic gas sealed in each of the second containers. Furthermore, not only the processing liquid remaining in the common flow path but also the processing liquid remaining in the individual flow path can be transferred to the first container.
- the volume of the sterile gas sealed in each of the plurality of second containers is the volume of the common flow path section in the flow path from the individual second container to the first container of the plurality of second containers. It is preferably larger than the sum. Thereby, the processing liquid remaining in the individual flow path and the common flow path can be more reliably transferred to the processing container.
- the processing apparatus may further include an airtight container in which aseptic gas is sealed and connected to a connection portion between the common flow path and the individual flow path.
- the aseptic gas sealed in the sealed container may be transferred to the first container via the common channel.
- the processing liquid remaining in the flow path can be transferred to the first container by the aseptic gas sealed in the sealed container.
- the volume of the sterile gas sealed in the sealed container is preferably larger than the volume of the flow path section through which the sterile gas passes in transferring the sterile gas to the first container. Thereby, the processing liquid remaining in the common flow path can be more reliably transferred to the processing container.
- the processing apparatus may further include a valve provided in each individual flow path. According to this aspect, the transfer timing of the processing liquid sealed in each of the plurality of second containers to the first container can be controlled.
- the gas transfer means may transfer aseptic gas to the first container every time the processing liquid is transferred from at least one of the plurality of second containers to the first container. According to this aspect, each time the processing liquid is transferred, the processing liquid remaining in the flow path can be transferred to the first container.
- the processing apparatus may further include a vibration mechanism that applies vibration to the first container.
- the treatment liquid stored in the first container can be agitated, and the treatment of the biological tissue with the treatment liquid can be promoted.
- the processing apparatus may further include temperature control means for controlling the ambient temperature of the first container.
- temperature control means for controlling the ambient temperature of the first container.
- FIG. 1 is a front view illustrating an example of a configuration of a processing apparatus 1 according to the first embodiment of the disclosed technique.
- the processing apparatus 1 includes a processing container 20 for storing a biological tissue to be processed and a plurality of processing liquid enclosures 10 for enclosing a processing liquid used for a biological tissue separation process. Further, the processing apparatus 1 includes an individual flow path 31 and a common flow path 32 as flow paths that connect the processing container 20 and each of the plurality of processing liquid enclosures 10. Further, the processing apparatus 1 includes a liquid feed pump 51 as a processing liquid transfer unit that transfers the processing liquid from the processing liquid enclosure 10 to the processing container 20. The processing apparatus 1 decomposes the extracellular matrix constituting the biological tissue by adding the processing liquid enclosed in the processing liquid enclosure 10 to the biological tissue accommodated in the processing container 20, and removes cells from the biological tissue. The separation process to separate is performed automatically.
- a disinfecting solution for disinfecting a living tissue for example, a disinfecting solution for disinfecting a living tissue, a washing solution for washing off the disinfecting solution, at least one enzyme solution for decomposing the living tissue, and an enzyme washing solution for washing off the enzyme solution are used as the treating solution.
- a culture solution is used as the enzyme cleaning solution.
- the disinfecting liquid, the cleaning liquid, the enzyme liquid, and the enzyme cleaning liquid are sealed in different processing liquid sealing containers 10.
- different types of treatment liquids are enclosed in the plurality of treatment liquid enclosures 10. Different types of treatment liquids enclosed in the plurality of treatment liquid enclosures 10 are transferred to the treatment container 20 in a predetermined order. It is preferable that different types of processing liquids are not mixed in the processing liquid enclosure 10, the processing container 20, and the flow path.
- Each of the treatment liquid enclosures 10 is preferably a disposable sealed container in order to suppress the risk of contamination by external contamination sources such as bacteria and viruses. Further, a syringe or bag having a variable volume can be suitably used as the processing liquid enclosure 10.
- FIG. 1 illustrates a case where a syringe is used as the treatment liquid enclosure 10.
- Each of the plurality of individual flow paths 31 is provided corresponding to each of the plurality of treatment liquid enclosures 10.
- Each of the individual channels 31 has one end connected to the corresponding processing liquid enclosure 10 and the other end connected to the common channel 32.
- a joint 35 is provided at each connection portion between each individual flow path 31 and the common flow path 32.
- the individual flow path 31 means a flow path section from the processing liquid enclosure 10 to the joint 35.
- the common flow path 32 means a flow path section from each joint 35 to the processing container 20. Accordingly, the flow path section between the joints 35 adjacent to each other belongs to the common flow path 32.
- the processing container 20 is connected to one end of the common flow path 32.
- a liquid feed valve 41 is provided in the middle of each individual flow path 31. That is, each of the plurality of liquid supply valves 41 is provided corresponding to each of the plurality of processing liquid enclosures 10.
- Each of the liquid supply valves 41 is used for selectively transferring the processing liquid from the processing liquid enclosure 10 to the processing container 20. That is, when the selected liquid feeding valve 41 is opened and the liquid feeding pump 51 is operated, the processing liquid sealed in the processing liquid enclosure 10 corresponding to the liquid feeding valve 41 is transferred to the corresponding individual flow. It is transferred to the processing container 20 via the channel 31 and the common channel 32.
- a pinch valve can be suitably used as the liquid feeding valve 41. By using a pinch valve as the liquid feed valve 41, it is possible to open and close the flow channel without contacting the fluid passing through the individual flow channel 31.
- the individual flow path 31 and the common flow path 32 are configured by tubular members. It is preferable that the tubular members constituting the individual flow path 31 and the common flow path 32 can be sterilized, have less eluate, and have corrosion resistance to the processing liquid. Moreover, it is preferable that the tubular member which comprises the individual flow path 31 and the common flow path 32 has thermoplasticity. Since the tubular member has thermoplasticity, the tubular member can be sealed by heat welding after use, so that, for example, when a biological tissue or cell is infected with a contamination source such as a cell and a virus, the contamination source is external. The risk of leaking out can be suppressed. As a tubular member constituting the individual flow path 31 and the common flow path 32, for example, a silicon tube can be used.
- the joint 35 preferably has corrosion resistance to the processing liquid.
- Teflon registered trademark
- polypropylene or polyvinylidene fluoride
- the joint 35 is preferably capable of heat sterilization treatment and gamma ray sterilization treatment, and polyvinylidene fluoride is suitable as a material for the joint 35.
- the liquid feed pump 51 is provided in the middle of the common flow path 32.
- a tube pump can be suitably used as the liquid feed pump 51.
- the fluid can be transferred without contacting the fluid passing through the common flow path 32.
- FIG. 2 is a diagram illustrating an example of the configuration of the processing container 20.
- the processing container 20 includes a first air chamber 21 and a second air chamber 22 that are separated from each other by a filter 23.
- the processing container 20 has a first circulation port 24 and a second circulation port 25 that respectively communicate with the first air chamber 21, and a third air chamber 22 that communicates with the second air chamber 22 via a conduit 27.
- a circulation port 26 One end of the pipe line 27 is connected to the third flow port 26, passes through the first air chamber 21 and the filter 23, and the other end reaches the second air chamber 22.
- the first circulation port 24 is connected to one end of the common flow path 32. That is, the processing liquid sealed in each of the processing liquid sealing containers 10 flows into the first air chamber 21 of the processing container 20 from the first circulation port 24.
- the first air chamber 21 is a space in which a biological tissue to be processed and cells separated from the biological tissue by separation processing are accommodated.
- the second air chamber 22 is a space for storing used processing liquid.
- the filter 23 has, for example, a filter hole having a size smaller than the size of the cell separated from the living tissue.
- An exhaust valve 42 is provided in the middle of the exhaust passage 33.
- the exhaust valve 42 is opened when the processing liquid is transferred to the processing container 20.
- the gas in the processing container 20 is discharged via the exhaust passage 33, and the atmospheric pressure of the first air chamber 21 is maintained at atmospheric pressure.
- the atmospheric pressure in the second air chamber 22 becomes higher than the atmospheric pressure. Therefore, the pressure in the first air chamber 21 is maintained lower than the pressure in the second air chamber 22.
- the other end of the exhaust channel 33 can be opened to the atmosphere, but the living tissue stored in the processing container 20 and the cells separated from the living tissue are suppressed from being exposed to a contamination source. It is preferable to take the following measures.
- a sterile filter may be attached to the other end of the exhaust passage 33.
- a closed container such as a bag for allowing the gas discharged from the processing container 20 to flow in may be connected to the other end of the exhaust passage 33.
- One end of the drainage flow path 34 is connected to the third circulation port 26.
- a waste liquid tank 60 is connected to the other end of the drainage flow path 34.
- a drainage pump 52 and a drainage valve 43 are provided in the middle of the drainage flow path 34.
- the drainage valve 43 is opened and the drainage pump 52 is operated, the first air chamber 21 and the second air chamber 22 are air-treated by the processing liquid staying in the first air chamber 21. Since the pressure in the second air chamber is lower than the pressure in the first air chamber, the processing liquid staying in the first air chamber 21 is While falling (moving) to the second air chamber 22 side, it is transferred to the waste liquid tank 60 via the third circulation port 26 and the drainage flow path 34.
- a gas-liquid discrimination sensor 50 ⁇ / b> A is provided in a portion of the common flow path 32 between the liquid feed pump 51 and the processing container 20. Further, a gas-liquid discrimination sensor 50 ⁇ / b> B is provided in a portion of the drainage flow path 34 between the processing container 20 and the drainage pump 52.
- Each of the gas-liquid discrimination sensors 50A and 50B discriminates whether the fluid flowing through the flow path is liquid or gas, and supplies a discrimination signal indicating the discrimination result to the control unit 80 (see FIG. 3) described later. To do.
- the gas-liquid discrimination sensors 50A and 50B determine whether the fluid flowing through the flow path is liquid or gas based on, for example, the refraction angle of the laser light irradiated in the flow path. Also good.
- the closed container 11 is connected to the end of the common flow path 32 opposite to the end on the processing container 20 side via an air supply flow path 36. That is, the sealed container 11 is connected to a connection portion between the individual flow path 31 and the common flow path 32.
- the sealed container 11 is filled with aseptic gas.
- FIG. 1 illustrates the case where a syringe is used as the sealed container 11.
- the gas sealed in the sealed container 11 is preferably a gas having no cytotoxicity, and may be, for example, a mixed gas containing oxygen or air.
- An air supply valve 44 is provided in the middle of the air supply flow path 36.
- the aseptic gas sealed in the sealed container 11 is transferred to the processing container 20 via the air supply flow path 36 and the common flow path 32. Is done.
- the gas flowing through the common flow path 32 passes through each connection portion between the common flow path 32 and the individual flow path 31. In this manner, by transferring the sterile gas sealed in the sealed container 11 to the processing container 20, the processing liquid remaining in the common flow path 32 is transferred to the processing container 20 together with the sterile gas.
- the volume of the gas sealed in the sealed container 11 is preferably larger than the sum of the volumes of the common flow path sections in the flow paths from the individual processing liquid sealed containers 10 to the processing containers 20.
- the volume of the gas sealed in the sealed container 11 is preferably larger than the sum of the volumes of the flow paths from the individual joints 35 to the processing container 20 in each of the processing liquid sealing containers 10. Thereby, the processing liquid remaining in the common flow channel 32 can be more reliably transferred to the processing container 20.
- FIG. 3 is a side view showing an example of the configuration of the processing apparatus 1.
- the processing apparatus 1 includes a vibration mechanism 70 that applies vibration to the processing container 20.
- the vibration mechanism 70 is connected to the motor 71, the cam 73 connected to the rotation shaft 72 of the motor 71, the cam follower 74 disposed so as to contact the cam 73, and the cam follower 74.
- a vibration stage 75 that performs a linear reciprocating motion is included.
- the drive control of the motor 71 is performed by the control unit 80.
- a holding unit 76 that holds the processing container 20 is mounted on the vibration stage 75.
- the vibration stage 75 performs a linear reciprocating motion, whereby vibration is applied to the processing container 20 held by the holding unit 76.
- the control unit 80, the motor 71, the cam 73, and the cam follower 74 are accommodated in the housing 81.
- a heater 77 and a temperature sensor 78 are embedded in the holding unit 76.
- the holding unit 76 is made of a material having a relatively high thermal conductivity such as metal, and also functions as a heat block that transfers heat generated from the heater 77 to the processing container 20.
- the temperature sensor 78 includes, for example, a thermocouple, detects the temperature of the holding unit 76, and supplies a temperature detection signal indicating the detected temperature to the control unit 80.
- the controller 80 controls the output of the heater 77 based on the temperature detection signal from the temperature sensor 78.
- the control unit 80 controls the heater 77 so that the temperature of the holding unit 76 is maintained at a predetermined temperature (for example, 37 ° C.). By holding the processing container 20 in the temperature-controlled holding unit 76, the ambient temperature of the processing container 20 is kept constant (for example, 37 ° C.).
- the control unit 80 controls the opening and closing of the liquid supply valve 41, the air supply valve 44, the exhaust valve 42 and the drainage valve 43, and the drive control of the liquid supply pump 51 and the drainage pump 52 in addition to the control of the motor 71 and the heater 77. Also do.
- FIG. 4A shows an example of the configuration of the distribution system 2 of the processing apparatus 1, which is configured by connecting a plurality of processing liquid enclosures 10, a sealed container 11, a processing container 20, and a waste liquid tank 60 through a flow path.
- FIG. 4B is a perspective view illustrating an example of the configuration of the main body 3 of the processing apparatus 1.
- the distribution system 2 can be attached to and detached from the main body 3 while the plurality of processing liquid enclosures 10, the sealed container 11, the processing container 20, and the waste liquid tank 60 are connected via the flow path. is there.
- the distribution system 2 can be attached to the main body 3 as it is.
- the risk that each component of the distribution system 2 is exposed to the contamination source can be suppressed.
- FIG. 5 is a flowchart illustrating an example of a flow of processing executed by the control unit 80 when the processing device 1 performs separation processing for separating cells from biological tissue.
- different types of treatment liquids are enclosed in each of the plurality of treatment liquid enclosures 10. It is assumed that biological cells to be processed are accommodated in the first air chamber 21 of the processing container 20.
- the sealed container 11 is assumed to be filled with aseptic gas.
- Each of the plurality of liquid supply valves 41 is identified by an identification number N (N is a natural number) in the control unit 80. In the initial state, it is assumed that the liquid supply valve 41, the exhaust valve 42, the drainage valve 43, and the air supply valve 44 are closed, and the liquid supply pump 51 and the drainage pump 52 are respectively stopped.
- step S1 the control unit 80 sets the set value of the identification number N of the liquid delivery valve 41 to 1. Thereby, the liquid feeding valve 41 corresponding to the identification number 1 is selected.
- step S2 the control unit 80 controls the exhaust valve 42 to an open state.
- step S3 the control unit 80 controls the liquid supply valve 41 corresponding to the identification number 1 to be in an open state.
- step S ⁇ b> 4 the control unit 80 starts the operation of the liquid feed pump 51. Thereby, the processing liquid sealed in the processing liquid sealing container 10 corresponding to the identification number 1 is transferred to the processing container 20 via the corresponding individual flow path 31 and the common flow path 32.
- the exhaust valve 42 is opened and the drain valve 43 is closed, so that the first air chamber 21 is brought along with the inflow of the processing liquid into the processing container 20.
- the gas inside is discharged to the outside of the processing container 20 via the exhaust passage 33. Accordingly, a state in which the pressure of the first air chamber 21 is lower than the pressure of the second air chamber 22 can be formed, and the processing liquid that has flowed into the processing container 20 is retained in the first air chamber 21. be able to. That is, the living tissue can be immersed in the treatment liquid in the first air chamber 21.
- step S4A the control unit 80 detects the liquid feeding state of the processing liquid by monitoring the discrimination signal supplied from the gas-liquid discrimination sensor 50A.
- step S ⁇ b> 5 the control unit 80 determines whether or not the processing liquid has been fed.
- the control unit 80 determines that the fluid flowing through the common flow path 32 has changed from liquid to gas based on the determination signal supplied from the gas-liquid determination sensor 50A. To do. If the controller 80 determines that the processing liquid has been supplied, the process proceeds to step S6.
- step S6 the control unit 80 controls the liquid feeding valve 41 corresponding to the identification number 1 to be closed.
- step S7 the control unit 80 controls the air supply valve 44 to an open state.
- the liquid feed pump 51 maintains the operating state.
- the aseptic gas enclosed in the sealed container 11 is transferred to the processing container 20 via the common flow path 32.
- the aseptic gas sealed in the hermetic container 11 passes through each connection part of the common flow path 32 and the individual flow path 31 and reaches the processing container 20.
- the aseptic gas sealed in the sealed container 11 is transferred to the processing container 20, so that the processing liquid remaining in the common flow path 32 in step S ⁇ b> 7 ⁇ / b> A. Is swept away by the aseptic gas discharged from the sealed container 11 and flows into the processing container 20 together with the aseptic gas.
- the control unit 80 controls the air supply valve 44 to be closed in step S8 when a predetermined time has elapsed since the control of the air supply valve 44 to the open state. Thereby, the transfer of the aseptic gas enclosed in the sealed container 11 to the processing container 20 is stopped.
- the predetermined time is set to a time required for the aseptic gas discharged from the sealed container 11 to reach the processing container 20.
- the control unit 80 stops the operation of the liquid feed pump 51.
- the control unit 80 controls the exhaust valve 42 to be closed. At this time, the state in which the biological tissue and the processing liquid are accommodated in the first air chamber 21 is maintained.
- step S ⁇ b> 11 the control unit 80 starts the operation of the vibration mechanism 70 by starting the driving of the motor 71. Thereby, the processing liquid accommodated in the processing container 20 is stirred, and the process with respect to the biological tissue by the said processing liquid is accelerated
- step S12 the control unit 80 determines whether or not a predetermined time has elapsed since the operation of the vibration mechanism 70 was started. If it is determined that the predetermined time has elapsed, the process proceeds to step S13. In step S ⁇ b> 13, the control unit 80 stops the operation of the vibration mechanism 70 by stopping the driving of the motor 71. Thereby, the stirring process of the process liquid accommodated in the process container 20 is complete
- step S14 the control unit 80 controls the exhaust valve 42 to be in an open state.
- step S15 the control unit 80 controls the drain valve 43 to be in an open state.
- step S ⁇ b> 16 the control unit 80 starts the operation of the drainage pump 52.
- the atmospheric pressure of the second air chamber 22 becomes lower than the atmospheric pressure of the first air chamber 21, and the processing liquid staying in the first air chamber 21 passes through the filter. Then, it is transferred to the second air chamber 22. Thereafter, the processing liquid is transferred to the waste liquid tank 60 via the drainage flow path 34.
- step S16A the control unit 80 detects the liquid feeding state of the processing liquid by monitoring the discrimination signal supplied from the gas-liquid discrimination sensor 50B.
- step S ⁇ b> 17 the control unit 80 determines whether or not the liquid supply of the processing liquid from the processing container 20 to the waste liquid tank 60 has been completed.
- the control unit 80 determines that the fluid flowing through the drainage flow path 34 has changed from liquid to gas based on the determination signal supplied from the gas-liquid determination sensor 50B, the processing liquid has been supplied. Is determined. If the controller 80 determines that the processing liquid has been supplied, the process proceeds to step S18.
- step S18 the control unit 80 controls the drain valve 43 to be closed.
- step S19 the control unit 80 stops the operation of the drainage pump 52.
- step S20 the control unit 80 determines whether or not the processing from step S2 to step S19 has been completed for all the processing liquids sealed in each of the processing liquid enclosures 10. For example, the control unit 80 performs the above determination by determining whether or not the set value of the current identification number N of the liquid supply valve 41 is the maximum value corresponding to the number of processing liquid enclosures 10. Also good. When it is determined that the processing from step S2 to step S19 has been completed for all the processing liquids, the control unit 80 ends this routine. On the other hand, if it is determined that the processing from step S2 to step S19 is not completed for all the processing liquids, the control unit 80 shifts the processing to step S21.
- step S21 the control unit 80 increases the set value of the identification number N of the liquid feeding valve 41 by one, and returns the process to step S2.
- the liquid supply valve 41 corresponding to the identification number 2 is selected, and the processing from step S2 to step S19 is performed on the processing liquid sealed in the processing liquid enclosure 10 corresponding to the identification number 2.
- the processing from step S2 to step S19 is repeatedly performed until the processing is completed for all the processing liquids sealed in each of the processing liquid sealing containers 10.
- the processing liquids of different types are sequentially transferred from the processing liquid sealing container 10 to the processing container 20 and used.
- This processing liquid can be automatically transferred from the processing container 20 to the waste liquid tank 60.
- the flow path through which the treatment liquid passes forms a closed system, so that the risk of exposure of biological tissues and cells separated from biological tissues to sources of contamination such as bacteria and viruses is suppressed. Can do.
- the sealed container 11 connected to the connection portion between the individual flow path 31 and the common flow path 32 is filled with aseptic gas, and the processing liquid is transferred from the processing liquid sealing container 10 to the processing container 20.
- the aseptic gas sealed in the sealed container 11 is transferred to the processing container 20.
- the processing liquid remaining in the common channel 32 is pushed away by the aseptic gas discharged from the sealed container 11 and flows into the processing container 20 together with the aseptic gas.
- the processing liquid remaining in the flow path to the processing container 20
- the risk of occurrence of defects can be suppressed.
- the processing liquid remaining in the flow path is transferred by a sterile gas sealed in the hermetic container 11, the living tissue and the cells separated from the living tissue are contaminated by contamination sources such as bacteria and viruses. Risk can be suppressed.
- processing liquids are sequentially transferred from the processing liquid enclosure 10 to the processing container 20, and further, the processing liquid remaining in the common flow path 32 is also transferred to the processing container 20, thereby The risk that a plurality of different types of treatment liquids sealed in each of the treatment liquid enclosures 10 are mixed can be suppressed.
- the treatment liquid remains in the flow path while suppressing the risk of the living tissue and the cells separated from the living tissue being exposed to the contamination source. It becomes possible to suppress.
- each of the processing liquid enclosures 10 is filled with an extra amount of processing liquid corresponding to the amount of the processing liquid remaining in the corresponding individual flow path 31.
- FIG. 6 is a front view illustrating an example of a configuration of a processing apparatus 1A according to the second embodiment of the disclosed technique.
- the processing apparatus 1 ⁇ / b> A has a sterile filter 90 connected to the air supply channel 36. That is, the aseptic filter 90 is used as an alternative to the sealed container 11 (see FIG. 1) in the processing apparatus 1 according to the first embodiment.
- the processing apparatus 1A when the liquid supply pump 51 is operated while the air supply valve 44 is opened, gas is introduced from the outside into the common flow path 32 through the aseptic filter 90 and transferred to the processing container 20. As a result, the processing liquid remaining in the common flow path 32 is pushed away by the sterilized gas introduced through the sterilizing filter 90 and flows into the processing container 20 together with the sterilized gas.
- the same effect as that of the processing apparatus 1 according to the first embodiment can be obtained.
- FIG. 7 is a front view illustrating an example of a configuration of a processing apparatus 1B according to the third embodiment of the disclosed technique.
- the processing apparatus 1B does not include the air supply flow path 36, the air supply valve 44, and the sealed container 11 included in the processing apparatus 1 (see FIG. 1) according to the first embodiment. 1 (see FIG. 1).
- a sterile gas 101 is sealed together with the processing liquid 100 in each of the processing liquid sealing containers 10 as shown in FIG.
- the aseptic gas 101 sealed in the processing liquid sealing container 10 corresponds to the corresponding individual. It is transferred to the processing container 20 via the flow path 31 and the common flow path 32. As a result, the treatment liquid remaining in the individual flow path 31 and the common flow path 32 corresponding to the treatment liquid enclosure 10 is pushed away by the aseptic gas discharged from the treatment liquid enclosure 10, and the aseptic condition is obtained. It flows into the processing container 20 together with the gas.
- the volume of the aseptic gas 101 enclosed in each of the plurality of treatment liquid enclosures 10 is larger than the volume of the flow path section through which the gas 101 passes in transferring the gas 101 to the treatment container 20. That is, the volume of the gas 101 enclosed in each processing liquid enclosure 10 is in the section from the connecting portion of the corresponding individual channel 31 and the common channel 32 to the processing vessel 20. The volume is preferably larger than the total volume of the common flow path 32.
- the aseptic gas 101 having the above volume is enclosed in each of the plurality of treatment liquid enclosures 10. Thereby, the processing liquid remaining in the individual flow path 31 and the common flow path 32 can be reliably transferred to the processing container 20.
- the aseptic gas sealed in each of the processing liquid sealing containers 10 passes not only through the common channel 32 but also through the corresponding individual channel 31. Not only the processing liquid remaining in the common flow path 32 but also the processing liquid remaining in the individual flow path 31 can be transferred to the processing container 20.
- the processing apparatus 1B according to the third embodiment since the aseptic gas 101 is sealed in each of the processing liquid enclosures 10, the processing apparatus 1 according to the first embodiment (see FIG. 1). ), The air supply flow path 36 and the air supply valve 44 are not required, and the apparatus configuration can be simplified.
- aseptic gas may be sealed in the sealed container 11 and may be sealed in each of the plurality of processing liquid sealing containers 10.
- the process liquid is transferred from each of the process liquid enclosures 10 to the process container 20 by the liquid feed pump 51 provided in the middle of the common flow path 32.
- the liquid feed pump 51 provided in the middle of the common flow path 32.
- the treatment liquid is transferred from each of the treatment liquid enclosures 10 to the treatment container 20 to each of the plurality of treatment liquid enclosures 10. You may carry out by the syringe pump provided accompanying.
- connection part of the several separate flow path 31 and the common flow path 32 existed for every separate flow path 31 was illustrated, it is limited to this aspect. It is not something.
- the number of connection portions between the plurality of individual flow paths 31 and the common flow path 32 may be one.
- processing container 20 is an example of a first container in the disclosed technology.
- the treatment liquid enclosure 10 is an example of a second container in the disclosed technology.
- the liquid feed pump 51 is an example of a processing liquid transfer unit in the disclosed technology, and is an example of a gas transfer unit in the disclosed technology.
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Abstract
Description
開示の技術は、処理装置に関する。 The disclosed technology relates to a processing apparatus.
生体組織から細胞を分離(または単離)するための処理装置に関する技術として以下の技術が知られている。例えば、特表2010-524498号公報には、媒質リザーバと、少なくとも1つの入口、少なくとも1つの出口、第1ローブ及び第2ローブを備える細胞処理デバイスと、少なくとも1つのポンプと、流体流の向きを変えるかまたは止める少なくとも1つの弁とを備え、それらが互いに連通している細胞分離装置が記載されている。 The following techniques are known as techniques relating to a processing apparatus for separating (or isolating) cells from a living tissue. For example, JP 2010-524498 A discloses a medium reservoir, a cell treatment device having at least one inlet, at least one outlet, a first lobe and a second lobe, at least one pump, and a fluid flow direction. A cell separation device is described, comprising at least one valve that changes or stops the fluid, which are in communication with each other.
特表2009-540868号公報には、流体を取入れるための少なくとも1つの取入れポートと、流体を排出するための少なくとも1つの排出ポートと、核酸等の目的の物質を結合するための少なくとも2つの固体担体と、3つ以上の導管の間で流体の移動を制御するための少なくとも1つの回転バルブとを含み、取入れポート、排出ポート、固体担体、及び回転バルブが互いに接続して取入れポートから排出ポートへの回路を作り出す、目的の物質を精製するデバイスが記載されている。また、このデバイスにおいて、導管に残留する流体を除去するために、空気を導管に流すことが記載されている。 JP-T-2009-540868 discloses at least one intake port for taking in fluid, at least one exhaust port for discharging fluid, and at least two for binding a target substance such as nucleic acid. A solid support and at least one rotary valve for controlling fluid movement between three or more conduits, wherein the intake port, the discharge port, the solid support, and the rotary valve are connected to each other and discharged from the intake port A device for purifying a material of interest that creates a circuit to a port is described. The device also describes flowing air through the conduit to remove fluid remaining in the conduit.
生体組織は、細胞と、細胞の周囲に存在する細胞外マトリックスを含んで構成されている。生体組織から細胞を分離(または単離)する分離処理は、生体組織を酵素剤等の処理液を用いて細胞外マトリックスを分解し、細胞を抽出する処理である。分離処理においては、細胞の生存率を高めるために、生体組織及び生体組織から分離した細胞の周囲環境を無菌状態に保つことが重要である。また、細胞への過度な負荷または処理不良による細胞回収率の低下を回避するために、生体組織に添加する処理液の量を精度よく一定量にすることは重要である。 The living tissue is composed of cells and an extracellular matrix existing around the cells. The separation process for separating (or isolating) cells from a biological tissue is a process for extracting a cell by decomposing an extracellular matrix using a treatment liquid such as an enzyme agent. In the separation process, it is important to maintain the surrounding environment of the living tissue and the cells separated from the living tissue in a sterile state in order to increase the survival rate of the cells. In addition, in order to avoid a decrease in cell recovery rate due to an excessive load on the cells or poor processing, it is important to make the amount of the treatment liquid added to the living tissue a certain amount with high accuracy.
上記の分離処理に用いる処理装置の構成として例えば以下のものが想定される。すなわち、処理装置は、処理対象の生体組織を収容するための第1の容器と、生体組織の処理に用いる処理液を封入するための第2の容器と、第1の容器と第2の容器とを接続する流路と、複数の第2の容器から第1の容器への処理液の移送を行う処理液移送手段と、を含んで構成され得る。上記の構成を有する処理装置において、流路内に処理液が残留すると、生体組織に添加される処理液の量が不足し、処理不良が発生するおそれがある。 For example, the following is assumed as the configuration of the processing apparatus used for the above separation processing. That is, the processing apparatus includes a first container for housing a biological tissue to be processed, a second container for enclosing a processing liquid used for processing the biological tissue, a first container, and a second container. And a processing liquid transfer means for transferring the processing liquid from the plurality of second containers to the first container. In the processing apparatus having the above-described configuration, if the processing liquid remains in the flow path, the amount of the processing liquid added to the living tissue is insufficient, and processing failure may occur.
上記の特許文献2(特表2009-540868号公報)には、導管に残留する流体を除去するために、空気を導管に流すことが記載されている。しかしながら、導管に流した空気には、細菌及びウイルス等の汚染源を含んでいるおそれがあり、生体組織及び生体組織から分離した細胞が汚染源に暴露されるおそれがある。 In the above-mentioned Patent Document 2 (Japanese Patent Publication No. 2009-540868), it is described that air is allowed to flow through the conduit in order to remove the fluid remaining in the conduit. However, there is a possibility that the air that has flowed through the conduits contains a contamination source such as bacteria and viruses, and there is a risk that living tissue and cells separated from the living tissue are exposed to the contamination source.
開示の技術は、生体組織及び生体組織から分離した細胞が汚染源に暴露されるリスクを抑制しつつ、流路内における処理液の残留を抑制することを目的とする。 The disclosed technology aims to suppress the remaining of the treatment liquid in the flow path while suppressing the risk of the living tissue and the cells separated from the living tissue being exposed to the contamination source.
開示の技術に係る処理装置は、処理対象の生体組織を収容するための第1の容器と、生体組織の処理に用いる処理液を封入するための複数の第2の容器と、第1の容器と複数の第2の容器の各々とを接続する流路と、複数の第2の容器の各々から第1の容器への処理液の移送を順次行う処理液移送手段と、流路の少なくとも一部を経由して第1の容器に無菌状態の気体を移送する気体移送手段と、を含む。 A processing apparatus according to the disclosed technology includes a first container for containing a biological tissue to be processed, a plurality of second containers for sealing a processing liquid used for processing the biological tissue, and a first container At least one of the flow paths, a flow path that connects each of the plurality of second containers, a treatment liquid transfer means that sequentially transfers the treatment liquid from each of the plurality of second containers to the first container, and Gas transfer means for transferring aseptic gas to the first container via the section.
開示の技術に係る処理装置によれば、気体移送手段が、流路を経由して第1の容器に無菌状態の気体を移送するので、生体組織及び生体組織から分離した細胞が汚染源に暴露されるリスクを抑制しつつ、流路内における処理液の残留を抑制することが可能となる。 According to the processing apparatus according to the disclosed technique, the gas transfer means transfers the sterile gas to the first container via the flow path, so that the living tissue and the cells separated from the living tissue are exposed to the contamination source. It is possible to suppress the remaining of the processing liquid in the flow path while suppressing the risk of occurrence.
流路は、複数の第2の容器の各々に個別に接続された複数の個別流路と、複数の個別流路の各々と第1の容器とを接続する共通流路と、を含んでいてもよい。この態様によれば、全ての流路を個別流路とする場合と比較して、流路の全長を短くすることができる。 The flow path includes a plurality of individual flow paths individually connected to each of the plurality of second containers, and a common flow path that connects each of the plurality of individual flow paths and the first container. Also good. According to this aspect, the total length of the flow path can be shortened as compared with the case where all the flow paths are set as individual flow paths.
無菌状態の気体は、複数の第2の容器の各々に処理液と共に封入されていてもよく、この場合、気体移送手段は、第2の容器に封入された無菌状態の気体を、当該第2の容器に接続された個別流路及び共通流路を経由して第1の容器に移送してもよい。この態様によれば、第2の容器の各々に封入された無菌状態の気体によって、流路内に残留する処理液を第1の容器に移送することができる。更に、共通流路に残留する処理液のみならず、個別流路に残留する処理液をも第1の容器に移送することが可能となる。 The sterilized gas may be sealed together with the treatment liquid in each of the plurality of second containers. In this case, the gas transfer means converts the sterilized gas sealed in the second container into the second container. You may transfer to a 1st container via the separate flow path connected to this container, and a common flow path. According to this aspect, the processing liquid remaining in the flow path can be transferred to the first container by the aseptic gas sealed in each of the second containers. Furthermore, not only the processing liquid remaining in the common flow path but also the processing liquid remaining in the individual flow path can be transferred to the first container.
複数の第2の容器の各々に封入されている無菌状態の気体の体積は、複数の第2の容器の個々の第2容器から第1の容器までの流路における共通流路区間の体積の総和よりも大きいことが好ましい。これにより、個別流路及び共通流路内に残留する処理液の処理容器への移送を、より確実に行うことができる。 The volume of the sterile gas sealed in each of the plurality of second containers is the volume of the common flow path section in the flow path from the individual second container to the first container of the plurality of second containers. It is preferably larger than the sum. Thereby, the processing liquid remaining in the individual flow path and the common flow path can be more reliably transferred to the processing container.
開示の技術に係る処理装置は、無菌状態の気体が封入され、且つ共通流路と個別流路との接続部に接続された密閉容器を更に含んでいてもよく、この場合、気体移送手段は、密閉容器に封入された無菌状態の気体を、共通流路を経由して第1の容器に移送してもよい。この態様によれば、密閉容器に封入された無菌状態の気体によって、流路内に残留する処理液を第1の容器に移送することができる。 The processing apparatus according to the disclosed technique may further include an airtight container in which aseptic gas is sealed and connected to a connection portion between the common flow path and the individual flow path. The aseptic gas sealed in the sealed container may be transferred to the first container via the common channel. According to this aspect, the processing liquid remaining in the flow path can be transferred to the first container by the aseptic gas sealed in the sealed container.
密閉容器に封入されている無菌状態の気体の体積は、無菌状態の気体の第1の容器への移送において無菌状態の気体が通過する流路区間の体積よりも大きいことが好ましい。これにより、共通流路内に残留する処理液の処理容器への移送を、より確実に行うことができる。 The volume of the sterile gas sealed in the sealed container is preferably larger than the volume of the flow path section through which the sterile gas passes in transferring the sterile gas to the first container. Thereby, the processing liquid remaining in the common flow path can be more reliably transferred to the processing container.
開示の技術に係る処理装置は、個別流路の各々に設けられたバルブを更に含み得る。この態様によれば、複数の第2の容器の各々に封入された処理液の第1の容器への移送タイミングが制御可能となる。 The processing apparatus according to the disclosed technique may further include a valve provided in each individual flow path. According to this aspect, the transfer timing of the processing liquid sealed in each of the plurality of second containers to the first container can be controlled.
気体移送手段は、複数の第2の容器のうちの少なくとも1つから第1の容器への処理液の移送が行われる度に、第1の容器に無菌状態の気体を移送してもよい。この態様によれば、処理液の移送が行われる度に、流路に残留する当該処理液を第1の容器に移送することができる。 The gas transfer means may transfer aseptic gas to the first container every time the processing liquid is transferred from at least one of the plurality of second containers to the first container. According to this aspect, each time the processing liquid is transferred, the processing liquid remaining in the flow path can be transferred to the first container.
開示の技術に係る処理装置は、第1の容器に振動を加える加振機構を更に含み得る。この態様によれば、第1の容器に収容されている処理液を撹拌することができ、当該処理液による生体組織に対する処理を促進させることができる。 The processing apparatus according to the disclosed technique may further include a vibration mechanism that applies vibration to the first container. According to this aspect, the treatment liquid stored in the first container can be agitated, and the treatment of the biological tissue with the treatment liquid can be promoted.
開示の技術に係る処理装置は、第1の容器の周囲温度を制御する温度制御手段を更に含み得る。この態様によれば、第1の容器に収容されている生体組織及び生体組織から分離した細胞の温度環境を最適化することができる。 The processing apparatus according to the disclosed technique may further include temperature control means for controlling the ambient temperature of the first container. According to this aspect, the temperature environment of the living tissue stored in the first container and the cells separated from the living tissue can be optimized.
開示の技術によれば、生体組織及び生体組織から分離した細胞が汚染源に暴露されるリスクを抑制しつつ、流路内における処理液の残留を抑制することが可能となる。 According to the disclosed technology, it is possible to suppress the remaining of the treatment liquid in the flow path while suppressing the risk that the biological tissue and the cells separated from the biological tissue are exposed to the contamination source.
以下、本発明の実施形態について図面を参照しつつ説明する。尚、各図面において、実質的に同一又は等価な構成要素又は部分には同一の参照符号を付している。 Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings. In the drawings, substantially the same or equivalent components or parts are denoted by the same reference numerals.
[第1の実施形態]
図1は、開示の技術の第1の実施形態に係る処理装置1の構成の一例を示す正面図である。処理装置1は、処理対象の生体組織を収容するための処理容器20と、生体組織の分離処理に用いる処理液を封入するための複数の処理液封入容器10と、を有する。また、処理装置1は、処理容器20と複数の処理液封入容器10の各々とを接続する流路として、個別流路31及び共通流路32を有する。また、処理装置1は、処理液封入容器10から処理容器20への処理液の移送を行う処理液移送手段として送液ポンプ51を有する。処理装置1は、処理液封入容器10に封入された処理液を、処理容器20に収容された生体組織に添加することで、生体組織を構成する細胞外マトリックスを分解し、生体組織から細胞を分離する分離処理を自動で行う。
[First Embodiment]
FIG. 1 is a front view illustrating an example of a configuration of a processing apparatus 1 according to the first embodiment of the disclosed technique. The processing apparatus 1 includes a
分離処理においては、例えば、生体組織を消毒する消毒液、消毒液を洗い流す洗浄液、生体組織を分解する少なくとも1種類の酵素液、及び酵素液を洗い流す酵素洗浄液が、処理液として使用される。なお、本実施形態においては酵素洗浄液として培養液を用いた。消毒液、洗浄液、酵素液、酵素洗浄液は、互いに異なる処理液封入容器10に封入される。換言すれば、複数の処理液封入容器10には、互いに異なる種類の処理液が封入される。複数の処理液封入容器10に封入された、互いに異なる種類の処理液は、所定の順序で処理容器20に移送される。互いに異なる種類の処理液は、処理液封入容器10、処理容器20及び流路内において、混合されないことが好ましい。
In the separation treatment, for example, a disinfecting solution for disinfecting a living tissue, a washing solution for washing off the disinfecting solution, at least one enzyme solution for decomposing the living tissue, and an enzyme washing solution for washing off the enzyme solution are used as the treating solution. In this embodiment, a culture solution is used as the enzyme cleaning solution. The disinfecting liquid, the cleaning liquid, the enzyme liquid, and the enzyme cleaning liquid are sealed in different processing
処理液封入容器10の各々は、外部からの細菌及びウイルス等の汚染源による汚染のリスクを抑制するために、使い捨ての密閉容器であることが好ましい。また、容積が可変であるシリンジまたはバッグを処理液封入容器10として好適に用いることができる。図1には、処理液封入容器10としてシリンジを使用する場合が例示されている。
Each of the
複数の個別流路31の各々は、複数の処理液封入容器10の各々に対応して設けられている。個別流路31の各々は、一端が対応する処理液封入容器10に接続され、他端が共通流路32に接続されている。
Each of the plurality of
個別流路31の各々と共通流路32との各接続部には、それぞれ、継手35が設けられている。なお、本明細書において、個別流路31とは、処理液封入容器10から継手35までの流路区間を意味する。また、本明細書において、共通流路32とは、各継手35から処理容器20までの流路区間を意味する。従って、互いに隣接する継手35と継手35との間の流路区間は、共通流路32に属する。処理容器20は、共通流路32の一端に接続されている。
A joint 35 is provided at each connection portion between each
個別流路31の各々の途中には、送液バルブ41が設けられている。すなわち、複数の送液バルブ41の各々は、複数の処理液封入容器10の各々に対応して設けられている。送液バルブ41の各々は、処理液封入容器10から処理容器20への処理液の移送を選択的に行うために使用される。すなわち、選択された送液バルブ41が開状態となり、且つ送液ポンプ51が動作することで、当該送液バルブ41に対応する処理液封入容器10に封入された処理液が、対応する個別流路31及び共通流路32を経由して処理容器20に移送される。送液バルブ41としてピンチバルブを好適に用いることができる。送液バルブ41としてピンチバルブを用いることで、個別流路31を通過する流体に接触することなく流路の開閉を行うことが可能となる。
A
個別流路31及び共通流路32は、管状部材によって構成されている。個別流路31及び共通流路32を構成する管状部材は、滅菌処理が可能であり、溶出物が少なく、且つ処理液に対する耐食性を有していることが好ましい。また、個別流路31及び共通流路32を構成する管状部材は、熱可塑性を有していることが好ましい。管状部材が熱可塑性を有することで、使用後に管状部材を熱溶着により密閉することができ、これにより、例えば生体組織または細胞が細胞及びウイルス等の汚染源に感染している場合に、汚染源が外部に流出するリスクを抑制することができる。個別流路31及び共通流路32を構成する管状部材として、例えば、シリコン製のチューブを用いることが可能である。
The
継手35は、処理液に対する耐食性を有することが好ましい。継手35の材料として、例えば、テフロン(登録商標)、ポリプロピレン、またはポリフッ化ビニリデンを用いることが可能である。また、継手35は、加熱滅菌処理及びガンマ線滅菌処理が可能であることが好ましく、継手35の材料としてポリフッ化ビニリデンが好適である。 The joint 35 preferably has corrosion resistance to the processing liquid. As a material of the joint 35, for example, Teflon (registered trademark), polypropylene, or polyvinylidene fluoride can be used. The joint 35 is preferably capable of heat sterilization treatment and gamma ray sterilization treatment, and polyvinylidene fluoride is suitable as a material for the joint 35.
送液ポンプ51は、共通流路32の途中に設けられている。送液ポンプ51としてチューブポンプを好適に用いることができる。送液ポンプ51としてチューブポンプを用いることで、共通流路32を通過する流体に接触することなく流体の移送を行うことが可能となる。
The
図2は、処理容器20の構成の一例を示す図である。処理容器20は、フィルタ23によって互いに隔てられた第1の気室21及び第2の気室22を有する。また、処理容器20は、第1の気室21にそれぞれ連通する第1の流通口24及び第2の流通口25と、第2の気室22に管路27を介して連通する第3の流通口26とを有する。管路27は、一端が第3の流通口26に接続され、第1の気室21及びフィルタ23を貫通し、他端が第2の気室22に達している。
FIG. 2 is a diagram illustrating an example of the configuration of the
第1の流通口24は、共通流路32の一端に接続されている。すなわち、処理液封入容器10の各々に封入された処理液は、第1の流通口24から処理容器20の第1の気室21内に流入する。第1の気室21は、処理対象の生体組織及び分離処理によって生体組織から分離された細胞が収容される空間である。第2の気室22は、使用済みの処理液が収容される空間である。
The
フィルタ23は、例えば、生体組織から分離される細胞のサイズよりも小さいサイズのフィルタ孔を有する。第1の気室21の気圧が、第2の気室22の気圧よりも低い状態を維持することで、処理容器20に流入した処理液を、第1の気室21に留めることが可能である。一方、第2の気室22の気圧を、第1の気室21の気圧よりも低くすることで、第1の気室21から第2の気室22に処理液を移送することが可能である。
The
第2の流通口25には、排気流路33の一端が接続されている。排気流路33の途中には排気バルブ42が設けられている。排気バルブ42は、処理容器20に処理液を移送する場合に開状態とされる。これにより、処理容器20に処理液を移送している間、処理容器20内の気体が排気流路33を経由して排出され、第1の気室21の気圧が大気圧に維持される。一方、フィルタ23を介して第1の気室21から第2の気室22へとわずかに漏出する処理液により、第2の気室22の気圧は大気圧よりも高い状態となる。そのため、第1の気室21の気圧は第2の気室22の気圧よりも低い状態が維持される。なお、排気流路33の他端は、大気開放とすることが可能であるが、処理容器20内に収容された生体組織及び生体組織から分離した細胞が汚染源に暴露されるリスクを抑制するための措置をとることが好ましい。例えば、排気流路33の他端に無菌フィルタを取り付けてもよい。また、排気流路33の他端に、処理容器20から排出された気体を流入させるバッグ等の密閉容器を接続してもよい。
One end of an
第3の流通口26には、排液流路34の一端が接続されている。排液流路34の他端には、廃液タンク60が接続されている。排液流路34の途中には、排液ポンプ52及び排液バルブ43が設けられている。排液バルブ43が開状態となり、且つ排液ポンプ52が動作することで、第1の気室21と第2の気室22とは第1の気室21に滞留している処理液により空気に対して非連通状態とされているので、第2の気室の気圧が第1の気室の気圧に対して低くなることにより、第1の気室21に滞留している処理液は、第2の気室22側に落下(移動)するとともに、第3の流通口26及び排液流路34を経由して廃液タンク60に移送される。
One end of the
共通流路32の、送液ポンプ51と処理容器20との間の部位には、気液判別センサ50Aが設けられている。また、排液流路34の、処理容器20と排液ポンプ52との間の部位には、気液判別センサ50Bが設けられている。気液判別センサ50A及び50Bは、それぞれ、流路を流れる流体が、液体であるか気体であるかを判別し、判別結果を示す判別信号を、後述する制御部80(図3参照)に供給する。気液判別センサ50A及び50Bは、流路を流れる流体が、液体であるか気体であるかの判別を、例えば、流路内に照射されたレーザ光の屈折角に基づいて行うものであってもよい。
A gas-liquid discrimination sensor 50 </ b> A is provided in a portion of the
共通流路32の、処理容器20側の端部とは反対側の端部には、送気流路36を介して密閉容器11が接続されている。すなわち、密閉容器11は、個別流路31と共通流路32との接続部に接続されている。密閉容器11には、無菌状態の気体が封入される。密閉容器11として、処理液封入容器10と同じ形態の容器を用いることが可能である。図1には、密閉容器11としてシリンジを使用する場合が例示されている。密閉容器11に封入される気体は、細胞毒性を有さない気体であることが好ましく、例えば、酸素を含有した混合気体または空気であってもよい。送気流路36の途中には送気バルブ44が設けられている。
The
送気バルブ44が開状態となり、且つ送液ポンプ51が動作することで、密閉容器11に封入された無菌状態の気体が送気流路36及び共通流路32を経由して処理容器20に移送される。共通流路32を流通する気体は、共通流路32と個別流路31との各接続部を通過する。このように、密閉容器11に封入された無菌状態の気体を処理容器20に移送することで、共通流路32内に残留する処理液が、無菌状態の気体と共に処理容器20に移送される。密閉容器11に封入される気体の体積は、個々の処理液封入容器10から処理容器20までの流路における共通流路区間の体積の総和よりも大きいことが好ましい。すなわち、密閉容器11に封入される気体の体積は、処理液封入容器10の各々につらなる個々の継手35から処理容器20までの流路の体積を合計したものよりも大きいことが好ましい。これにより、共通流路32内に残留する処理液の処理容器20への移送を、より確実に行うことができる。
When the
図3は、処理装置1の構成の一例を示す側面図である。処理装置1は、処理容器20に振動を加える加振機構70を有する。加振機構70は、モータ71と、モータ71の回転軸72に接続されたカム73と、カム73に接触するように配置されたカムフォロア74と、カムフォロア74に接続され、カム73の回転動作に伴って、直線往復動作を行う振動ステージ75と、を含んで構成されている。モータ71の駆動制御は、制御部80によって行われる。振動ステージ75には、処理容器20を保持する保持部76が搭載されている。振動ステージ75が、直線往復動作を行うことで、保持部76に保持された処理容器20に振動が加えられる。制御部80、モータ71、カム73及びカムフォロア74は、筐体81の内部に収容されている。
FIG. 3 is a side view showing an example of the configuration of the processing apparatus 1. The processing apparatus 1 includes a
保持部76には、ヒータ77及び温度センサ78が埋設されている。保持部76は、金属等の熱伝導率の比較的高い材料で構成されており、ヒータ77から発せられた熱を処理容器20に伝えるヒートブロックとしても機能する。温度センサ78は、例えば、熱電対を含んで構成され、保持部76の温度を検出し、検出した温度を示す温度検出信号を制御部80に供給する。制御部80は、温度センサ78からの温度検出信号に基づいてヒータ77の出力を制御する。制御部80は、保持部76の温度が所定の温度(例えば37℃)を維持するようにヒータ77を制御する。処理容器20が温度制御された保持部76に保持されることで、処理容器20の周囲温度が、一定(例えば37℃)に保たれる。
A
制御部80は、モータ71及びヒータ77の制御に加え、送液バルブ41、送気バルブ44、排気バルブ42及び排液バルブ43の開閉制御、並びに送液ポンプ51及び排液ポンプ52の駆動制御も行う。
The
図4Aは、複数の処理液封入容器10、密閉容器11、処理容器20及び廃液タンク60を、流路を介して接続して構成される、処理装置1の流通系統2の構成の一例を示す図である。図4Bは、処理装置1の本体3の構成の一例を示す斜視図である。流通系統2は、図4Aに示すように、複数の処理液封入容器10、密閉容器11、処理容器20及び廃液タンク60を、流路を介して接続した状態のまま、本体3に着脱可能である。これにより、流路を構成する管状部材と継手35を外すことなく、流通系統2の各構成要素に対して加熱滅菌処理及びγ線照射滅菌処理を行うことが可能となる。また、滅菌処理後に、流通系統2を本体3にそのまま取り付けることができる。このように、処理装置1の使用時及びメンテナンス時を通して、流通系統2の各構成要素の接続を維持することで、流通系統2の各構成要素が汚染源に暴露されるリスクを抑制することができる。
FIG. 4A shows an example of the configuration of the
図5は、生体組織から細胞を分離する分離処理を処理装置1において実施する場合に、制御部80が実行する処理の流れの一例を示すフローチャートである。なお、複数の処理液封入容器10の各々には、互いに異なる種類の処理液が封入されているものとする。処理容器20の第1の気室21には、処理対象の生体細胞が収容されているものとする。密閉容器11には、無菌状態の気体が封入されているものとする。複数の送液バルブ41の各々は、制御部80において、識別番号N(Nは自然数)により識別されるものとする。初期状態において、送液バルブ41、排気バルブ42、排液バルブ43及び送気バルブ44がそれぞれ閉状態であり、送液ポンプ51及び排液ポンプ52がそれぞれ停止状態であるものとする。
FIG. 5 is a flowchart illustrating an example of a flow of processing executed by the
ステップS1において、制御部80は送液バルブ41の識別番号Nの設定値を1にセットする。これにより、識別番号1に対応する送液バルブ41が選択される。ステップS2において、制御部80は排気バルブ42を開状態に制御する。ステップS3において、制御部80は識別番号1に対応する送液バルブ41を開状態に制御する。ステップS4において、制御部80は送液ポンプ51の動作を開始させる。これにより、識別番号1に対応する処理液封入容器10に封入されている処理液が、対応する個別流路31及び共通流路32を経由して処理容器20に移送される。処理液を処理容器20に移送する際に、排気バルブ42を開状態とし且つ排液バルブ43を閉状態としておくことで、処理容器20への処理液の流入に伴って第1の気室21内の気体が排気流路33を経由して処理容器20の外部に排出される。これにより、第1の気室21の気圧が第2の気室22の気圧よりも低い状態を形成することができ、処理容器20に流入した処理液を、第1の気室21に滞留させることができる。すなわち、第1の気室21において、生体組織を処理液に浸漬することができる。
In step S1, the
ステップS4Aにおいて、制御部80は気液判別センサ50Aから供給される判別信号をモニタすることにより処理液の送液状態を検出する。ステップS5において、制御部80は、処理液の送液が完了したか否かを判定する。制御部80は、気液判別センサ50Aから供給される判別信号により、共通流路32を流れる流体が液体から気体に変化したものと判定した場合に、処理液の送液が完了したものと判定する。制御部80は、処理液の送液が完了したと判定すると処理をステップS6に移行する。
In step S4A, the
ステップS6において、制御部80は識別番号1に対応する送液バルブ41を閉状態に制御する。ステップS7において、制御部80は送気バルブ44を開状態に制御する。このとき送液ポンプ51は稼働状態を維持している。これにより、密閉容器11に封入されている無菌状態の気体が、共通流路32を経由して処理容器20に移送される。密閉容器11に封入されている無菌状態の気体は、共通流路32と個別流路31の各接続部を通過して処理容器20に達する。このように、処理液の送液を行った後に、密閉容器11に封入されている無菌状態の気体を処理容器20に移送することで、ステップS7Aにおいて共通流路32に残留している処理液は、密閉容器11から排出された無菌状態の気体によって押し流され、無菌状態の気体と共に処理容器20に流入する。
In step S6, the
制御部80は、送気バルブ44を開状態に制御してから所定時間が経過すると、ステップS8において、制御部80は送気バルブ44を閉状態に制御する。これにより、密閉容器11に封入されている無菌状態の気体の処理容器20への移送が停止する。なお、上記の所定時間は、密閉容器11から排出された無菌状態の気体が処理容器20に到達するのに必要な時間に設定される。ステップS9において、制御部80は送液ポンプ51の動作を停止させる。ステップS10において、制御部80は排気バルブ42を閉状態に制御する。この時、生体組織及び処理液が第1の気室21に収容されている状態が維持されている。
The
ステップS11において、制御部80はモータ71の駆動を開始させることで、加振機構70の動作を開始させる。これにより、処理容器20に収容されている処理液が撹拌され、当該処理液による生体組織に対する処理が促進される。
In step S <b> 11, the
ステップS12において、制御部80は加振機構70の動作を開始してから所定時間が経過したか否かを判定し、所定時間が経過したと判定すると、処理をステップS13に移行する。ステップS13において、制御部80はモータ71の駆動を停止させることで、加振機構70の動作を停止させる。これにより、処理容器20に収容された処理液の撹拌処理が終了する。
In step S12, the
ステップS14において、制御部80は排気バルブ42を開状態に制御する。ステップS15において、制御部80は排液バルブ43を開状態に制御する。ステップS16において、制御部80は排液ポンプ52の動作を開始させる。ステップS14からステップS16までの処理により、第2の気室22の気圧が第1の気室21の気圧よりも低くなり、第1の気室21に滞留していた処理液は、フィルタを透過して第2の気室22に移送される。その後、処理液は、排液流路34を経由して廃液タンク60に移送される。
In step S14, the
ステップS16Aにおいて、制御部80は気液判別センサ50Bから供給される判別信号をモニタすることにより処理液の送液状態を検出する。ステップS17において、制御部80は、処理容器20から廃液タンク60への処理液の送液が完了したか否かを判定する。制御部80は、気液判別センサ50Bから供給される判別信号により、排液流路34を流れる流体が、液体から気体に変化したものと判定した場合に、処理液の送液が完了したものと判定する。制御部80は、処理液の送液が完了したと判定すると処理をステップS18に移行する。ステップS18において、制御部80は排液バルブ43を閉状態に制御する。ステップS19において、制御部80は排液ポンプ52の動作を停止させる。
In step S16A, the
ステップS20において、制御部80は、処理液封入容器10の各々に封入されている全ての処理液について、上記のステップS2からステップS19までの処理が完了したか否かを判定する。制御部80は、例えば、送液バルブ41の現在の識別番号Nの設定値が、処理液封入容器10の数に相当する最大値であるか否かを判定することにより上記の判定を行ってもよい。制御部80は、全ての処理液について、上記のステップS2からステップS19までの処理が完了したと判定した場合には、本ルーチンを終了させる。一方、制御部80は、全ての処理液について、上記のステップS2からステップS19までの処理が完了していないと判定した場合には、処理をステップS21に移行させる。
In step S20, the
ステップS21において、制御部80は、送液バルブ41の識別番号Nの設定値を、1つ増加させ、処理をステップS2に戻す。これにより、識別番号2に対応する送液バルブ41が選択され、識別番号2に対応する処理液封入容器10に封入された処理液について上記のステップS2からステップS19までの処理が実施される。上記のステップS2からステップS19までの処理は、処理液封入容器10の各々に封入されている全ての処理液について処理が完了するまで繰り返し実施される。
In step S21, the
以上の説明から明らかなように、開示の技術の実施形態に係る処理装置1によれば、互いに異なる種類の処理液を、処理液封入容器10から処理容器20に順次移送する処理、及び使用済みの処理液を処理容器20から廃液タンク60に移送する処理を自動で行うことができる。これらの送液において、処理液が通過する流路は、閉鎖系を形成しているので、生体組織及び生体組織から分離した細胞が、細菌及びウイルス等の汚染源に暴露されるリスクを抑制することができる。
As is clear from the above description, according to the processing apparatus 1 according to the embodiment of the disclosed technique, the processing liquids of different types are sequentially transferred from the processing
また、個別流路31と共通流路32との接続部に接続された密閉容器11には、無菌状態の気体が封入されており、処理液封入容器10から処理容器20に処理液が移送された後、密閉容器11に封入された無菌状態の気体が処理容器20に移送される。これにより、共通流路32に残留している処理液は、密閉容器11から排出された無菌状態の気体によって押し流され、無菌状態の気体と共に処理容器20に流入する。このように、流路内に残留する処理液を処理容器20に移送することで、生体組織に添加される処理液の量が不足するリスクを抑制することができるので、処理液の不足による処理不良が発生するリスクを抑制することができる。また、流路内に残留する処理液は、密閉容器11に封入された無菌状態の気体によって移送されるので、生体組織及び生体組織から分離した細胞が、細菌及びウイルス等の汚染源によって汚染されるリスクを抑制することができる。
Further, the sealed
また、互いに異なる種類の処理液を、処理液封入容器10から処理容器20に順次移送し、さらに、共通流路32に残留している処理液をも処理容器20に移送することで、複数の処理液封入容器10の各々に封入された互いに異なる種類の複数の処理液が混合されるリスクを抑制することできる。
Further, different types of processing liquids are sequentially transferred from the processing
以上のように、開示の技術の実施形態に係る処理装置1によれば、生体組織及び生体組織から分離した細胞が汚染源に暴露されるリスクを抑制しつつ、流路内における処理液の残留を抑制することが可能となる。 As described above, according to the processing apparatus 1 according to the embodiment of the disclosed technology, the treatment liquid remains in the flow path while suppressing the risk of the living tissue and the cells separated from the living tissue being exposed to the contamination source. It becomes possible to suppress.
なお、本実施形態に係る処理装置1によれば、密閉容器11に封入された気体は、個別流路31の各々を通過しないので、個別流路31の各々に残留する処理液については、処理容器20に移送することが困難である。従って、処理液封入容器10の各々には、対応する個別流路31に残留する処理液の量に相当する分量だけ余分に処理液を封入しておくことが好ましい。
In addition, according to the processing apparatus 1 which concerns on this embodiment, since the gas enclosed with the
[第2の実施形態]
図6は、開示の技術の第2の実施形態に係る処理装置1Aの構成の一例を示す正面図である。処理装置1Aは、送気流路36に接続された無菌フィルタ90を有する。すなわち、無菌フィルタ90は、第1の実施形態に係る処理装置1における密閉容器11(図1参照)の代替として用いられる。
[Second Embodiment]
FIG. 6 is a front view illustrating an example of a configuration of a
処理装置1Aにおいて、送気バルブ44を開状態としつつ送液ポンプ51を稼働させると、外部から無菌フィルタ90を介して共通流路32に気体が導入され、処理容器20に移送される。これにより、共通流路32に残留している処理液は、無菌フィルタ90介して導入された無菌状態の気体によって押し流され、無菌状態の気体と共に処理容器20に流入する。
In the
第2の実施形態に係る処理装置1Aによれば、第1の実施形態に係る処理装置1と同様の効果を得ることができる。
According to the
[第3の実施形態]
図7は、開示の技術の第3の実施形態に係る処理装置1Bの構成の一例を示す正面図である。処理装置1Bは、第1の実施形態に係る処理装置1(図1参照)が備える送気流路36、送気バルブ44及び密閉容器11を含まない点が、第1の実施形態に係る処理装置1(図1参照)と異なる。
[Third Embodiment]
FIG. 7 is a front view illustrating an example of a configuration of a
第3の実施形態に係る処理装置1Bにおいては、複数の処理液封入容器10の各々には、図8に示すように、無菌状態の気体101が処理液100と共に封入されている。
In the
処理装置1Bによれば、処理液封入容器10に封入された処理液100が、処理容器20に移送された後、当該処理液封入容器10に封入された無菌状態の気体101が、対応する個別流路31及び共通流路32を経由して処理容器20に移送される。これにより、当該処理液封入容器10に対応する個別流路31及び共通流路32に残留している処理液は、処理液封入容器10から排出された無菌状態の気体によって押し流され、無菌状態の気体と共に処理容器20に流入する。
According to the
複数の処理液封入容器10のそれぞれに封入される無菌状態の気体101の体積は、気体101の処理容器20への移送において気体101が通過する流路区間の体積よりも大きいことが好ましい。すなわち、各処理液封入容器10に封入される気体101の体積は、対応する個別流路31の体積と、当該個別流路31と共通流路32との接続部から処理容器20に至る区間における共通流路32の体積とを合わせた体積よりも大きいことが好ましい。上記の体積を有する無菌状態の気体101は、複数の処理液封入容器10のそれぞれに封入される。これにより、個別流路31及び共通流路32内に残留する処理液の処理容器20への移送を、確実に行うことができる。
It is preferable that the volume of the
第3の実施形態に係る処理装置1Bによれば、処理液封入容器10の各々に封入された無菌状態の気体は、共通流路32のみならず、対応する個別流路31をも通過するので、共通流路32に残留する処理液のみならず、当該個別流路31に残留する処理液をも処理容器20に移送することができる。
According to the
また、第3の実施形態に係る処理装置1Bによれば、無菌状態の気体101が、処理液封入容器10の各々に封入されるので、第1の実施形態に係る処理装置1(図1参照)が備える密閉容器11、送気流路36及び送気バルブ44が不要であり、装置構成を簡略化することができる。
In addition, according to the
なお、第1の実施形態に係る処理装置1において、無菌状態の気体が、密閉容器11に封入されると共に、複数の処理液封入容器10の各々に封入されていてもよい。
In the processing apparatus 1 according to the first embodiment, aseptic gas may be sealed in the sealed
また、上記第1乃至第3の実施形態において、処理液封入容器10の各々から処理容器20への処理液の移送を、共通流路32の途中に設けられた送液ポンプ51により行う態様を例示したが、この態様に限定されるものではない。例えば、複数の処理液封入容器10の各々が、シリンジによって構成されている場合、処理液封入容器10の各々から処理容器20への処理液の移送を、複数の処理液封入容器10の各々に付随して設けられたシリンジポンプによって行ってもよい。
In the first to third embodiments, the process liquid is transferred from each of the
また、上記第1乃至第3の実施形態において、複数の個別流路31と共通流路32との接続部が、個別流路31毎に複数存在する態様を例示したが、この態様に限定されるものではない。例えば、図9に簡略化して示すように、複数の個別流路31と共通流路32との接続部は、1つであってもよい。
Moreover, in the said 1st thru | or 3rd embodiment, although the aspect in which the connection part of the several
なお、処理容器20は、開示の技術における第1の容器の一例である。処理液封入容器10は、開示の技術における第2の容器の一例である。送液ポンプ51は、開示の技術における処理液移送手段の一例であり、開示の技術における気体移送手段の一例である。
Note that the
なお、2018年2月20日に出願された日本国特許出願2018-027882の開示は、その全体が参照により本明細書に取り込まれる。また、本明細書に記載された全ての文献、特許出願および技術規格は、個々の文献、特許出願、および技術規格が参照により取り込まれることが具体的かつ個々に記された場合と同程度に、本明細書中に参照により取り込まれる。 Note that the disclosure of Japanese Patent Application No. 2018-027882 filed on February 20, 2018 is incorporated herein by reference in its entirety. In addition, all documents, patent applications, and technical standards described in this specification are as much as if each document, patent application, and technical standard were specifically and individually described to be incorporated by reference. , Incorporated herein by reference.
Claims (10)
前記生体組織の処理に用いる処理液を封入するための複数の第2の容器と、
前記第1の容器と前記複数の第2の容器の各々とを接続する流路と、
前記複数の第2の容器の各々から前記第1の容器への前記処理液の移送を順次行う処理液移送手段と、
前記流路の少なくとも一部を経由して前記第1の容器に無菌状態の気体を移送する気体移送手段と、
を含む処理装置。 A first container for containing a biological tissue to be processed;
A plurality of second containers for enclosing a treatment liquid used for treatment of the biological tissue;
A flow path connecting the first container and each of the plurality of second containers;
Processing liquid transfer means for sequentially transferring the processing liquid from each of the plurality of second containers to the first container;
A gas transfer means for transferring aseptic gas to the first container via at least a part of the flow path;
Processing equipment.
前記複数の第2の容器の各々に個別に接続された複数の個別流路と、
前記複数の個別流路の各々と前記第1の容器とを接続する共通流路と、
を含む
請求項1に記載の処理装置。 The flow path is
A plurality of individual flow paths individually connected to each of the plurality of second containers;
A common channel connecting each of the plurality of individual channels and the first container;
The processing apparatus according to claim 1.
前記気体移送手段は、前記第2の容器に封入された前記無菌状態の気体を、当該第2の容器に接続された個別流路及び前記共通流路を経由して前記第1の容器に移送する
請求項2に記載の処理装置。 The aseptic gas is sealed together with the treatment liquid in each of the plurality of second containers,
The gas transfer means transfers the aseptic gas sealed in the second container to the first container via the individual flow path connected to the second container and the common flow path. The processing apparatus according to claim 2.
請求項3に記載の処理装置。 The volume of the sterilized gas sealed in each of the plurality of second containers is a flow path section through which the sterilized gas passes during transfer of the sterilized gas to the first container. The processing apparatus according to claim 3, wherein the processing apparatus is larger than the volume.
前記気体移送手段は、前記密閉容器に封入された前記無菌状態の気体を、前記共通流路を経由して前記第1の容器に移送する
請求項2に記載の処理装置。 A sealed container that is filled with the sterilized gas and connected to a connection between the common channel and the individual channel;
The processing apparatus according to claim 2, wherein the gas transfer unit transfers the aseptic gas sealed in the sealed container to the first container via the common channel.
請求項5に記載の処理装置。 The volume of the aseptic gas sealed in the closed container is the sum of the volumes of the common flow path sections in the flow paths from the individual second containers to the first containers of the plurality of second containers. The processing apparatus according to claim 5.
請求項2から請求項6のいずれか1項に記載の処理装置。 The processing apparatus according to claim 2, further comprising a valve provided in each of the individual flow paths.
請求項1から請求項7のいずれか1項に記載の処理装置。 The gas transfer means supplies the sterilized gas to the first container every time the processing liquid is transferred from at least one of the plurality of second containers to the first container. The processing apparatus according to claim 1, wherein the processing apparatus is transferred.
請求項1から請求項8のいずれか1項に記載の処理装置。 The processing apparatus according to claim 1, further comprising an excitation mechanism that applies vibration to the first container.
請求項1から請求項9のいずれか1項に記載の処理装置。 The processing apparatus according to claim 1, further comprising temperature control means for controlling an ambient temperature of the first container.
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 19756655 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |
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| ENP | Entry into the national phase |
Ref document number: 2020501623 Country of ref document: JP Kind code of ref document: A |
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| NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |
|
| 122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 19756655 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |