WO2019018905A1

WO2019018905A1 - Processo de obtenção de membranas de nanofibras de alginato/peo mucoadesivas duplamente reticuladas, membranas de nanofibras e uso

Info

Publication number: WO2019018905A1
Application number: PCT/BR2017/000083
Authority: WO
Inventors: Lucia Helena Innocentini MEI; Silvia Vaz Guerra NISTA
Original assignee: Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
Current assignee: Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
Priority date: 2017-07-28
Filing date: 2017-07-28
Publication date: 2019-01-31
Anticipated expiration: 2020-01-28

Abstract

A presente invenção propõe um processo de obtenção de membranas de nanofibras de alginato e PEO mucoadesivas duplamente reticuladas. Adicionalmente a presente invenção refere-se a membranas de nanofibras de alginato e PEO mucoadesivas duplamente reticuladas obtidas pelo processo. Tais membranas são membranas de alginato e poli (óxido de etileno) (PEO) de alta adesão, obtidas por meio do processo de eletrofiação e reticuladas por atomização com CaCl₂ e quitosana. Adicionalmente, tais membranas apresentam aplicação na liberação de princípios ativos via transmucosa e in situ.

Description

PROCESSO DE OBTENÇÃO DE MEMBRANAS DE NANOFIBRAS DE ALGINATO/PEO MUCOADESIVAS DUPLAMENTE RETICULADAS, MEMBRANAS

DE NANOFIBRAS E USO

Campo da. Invenção :

[1] Esta invenção se insere no campo das ciências médicas e engenharia química, mais especificamente na área das preparações polímericãs para finalidades médicas, e descreve o processo de obtenção de membranas de nanofibras de alginato/ΡΕΌ mucoadesivas duplamente reticuladas - Adicionalmente, a invenção refere-se as membranas de nanofibras para a. liberação transmucosa ou in situ de princípios ativos obtidas pelo processo.

[2] Tais membranas são membranas de alginato e poli (óxido de etileno) (PEO) de alta adesão, obtidas pelo processo de eletrofíaçao e reticuladas por atomização com. CaCla e quitosana. Ainda, as referidas membranas apresentam aplicação na liberação de princípios ativos via transmucosa ou in situ .

Fundamentos da Invenção :

[3] Os sistemas políméricos para liberação controlada de princípios ativos apresentam inúmeras vantagens quando comparados às formas normais de dosagem. Nestes sistemas, os níveis de princípios ativos no plasma são continuamente mantidos em uma faixa terapêutica desejável e os efeitos colaterais observados: na administração convencional podem ser reduzidos ou até mesmo eliminados. Princípios ativos com um tempo de vida curto in vivo podem ser protegidos da degradação e a administração continua de pequenas quantidades de princípios ativos pode eliminar o desconforto da administração parenteral de várias doses do agente bioativo no paciente.

14] Entretanto, existem muitos problemas a serem resolvidos: na área de desenvolvimento e pesquisa, como por exemplo, a baixa eficácia do sistema de liberação controlada de princípios ativos e o efeito de disparo inicial de grande quantidade da droga no organismo (em inglês, burst relesse) -

[5] Ά administração de princípios ativos de maneira mais fisiologicamente aceitável pelos pacientes tem sido sempre uma preocupação da área médica. Dentre as várias vias de administração de princípios ativos, a via oral é a preferida do paciente e do médico. No entanto, a administração oral tem desvantagens, tais como o metabolismo de primeira passagem hepático e degradação enzimática no trato gastrointestinal.

[6] Em vista disso, os revestimentos mucosos (nasal, retal, ocular, vaginal e a cavidade bucal) são considerados sítios potenciais para a administração de drogas, cominúmeras vantagens em relação à administração oral.

[7 ] Sistemas de liberação de princípios ativos via transmucosa geralmente são projetados para liberação rápida da droga e açâo imediata, para a liberação pulsátil com rápido aparecimento da droga na circulação sistémica e posterior manutenção da concentração da droga dentro cio perfil terapêutico ou para liberação controlada por um período prolongado de tempo.

[8] Ao longo das últimas décadas, o conceito de utilização de polímeros bioadesivos para prolongar o tempo de contato com a mucosa ganhou notável atenção na liberação da droga via transmucosa. Logo, muitos sistemas políméricos mucoadesivos têm sido testados com. o objetivo de aumentar a interação e a duração do contato entre o polímero que compreende o princípio atívo e a superfície da mucosa.

[9] O uso de membranas de nanofibras eletrofiadas como agentes carreadores- para princípios ativos tem mostrado um futuro amplo em aplicações biomédicas, pois os princípios ativos podem ser convenientemente incorporados aos polímeros, e o perfil de liberação da droga pode ser projetado por uma modulação da morfologia, da porosidade e da composição da membrana de nanofibras.

[10] Sendo assim, a presente invenção descreve membranas de nanofibras mucoadesivas de alta adesão para liberação bucal de princípios ativos, as quais são produzidas através da técnica de eletrofíação. Mais especificamente, as membranas são membranas de algínato/PEO de alta adesão, obtidas pelo processo de eletrofiação e reticuladas por atomização com CaClz e quitosana.

[11] A eletrofiação consiste na produção de nanofibras através de um jat-o induzido por uma carga elétrica, de uma solução de polímero ou polímero fundido. Embora o fundamento da eletrofíação seja simples* o processo é complexo devido ao grande número dé parâmetros que influenciam o formato, o diâmetro e as dimensões da fibra resultante,

[12] A quitosana e o algínato são poiíssacarideos bem conhecidos, biocompatíveis, biodegradáveis e mucc-adesivos , e podem ser usados em conjunto para formar um complexo polieletrolitieo, muito utilizado para encapsular proteínas, células e enzimas.

[13] Uma grande vantagem do complexo polieletrôlito quitosana-alginato é sua preparação que ocorre em água, dispensando o uso de solventes orgânicos tóxicos no preparo de membranas de revestimento para sistemas de liberação controlada. As membranas assim obtidas são biodegradáveis e insolúveis em água, com grande potencial para aplicações biomédicas .

Estado da. técnica:

[14] Alguns documentos do estado da técnica descrevera nanofibras- compreendendo alginato e quitosana.

[15] O documento de anterioridade US 20090087469 A1 A descreve uma tecnologia que se refere a. nanofibras de alginato, contendo um polímero hidrofílico (como o PEO) , além de quitosana e CaCl₂. A nanofibra pode ser empregada como um dispositivo para liberação de princípio ativo,. transplante -celular, ou, ainda, corno dispositivo implantado cirurgicamente para reparo de cartilagem. São incorporados muitos aditivos para a preparação das membranas, não há reticulação dupla por atomização com CaCla e policomplexação com quitosana .

[16] Em IN 2014DE00204 A, faz-se referência a um nanoadesivo de alginato, PEO, quitosana e CaCl₂, em que este é um mucoadesivo composto de nanofibras e tem como aplicação a liberação oftálmica controlada de princípio ativo. São incorporados muitos aditivos para a preparação .das membranas, e não há reticulação dupla, por atomização com CaClj e policomplexação com quitosana.

[17] Em CN 10-3990175 e IN 2012DE02574 A, rnenciona-se nanofibras cora dupla camada , empregadas na liberação controlada de drogas, e que contém em sua composição alginato, PEO e quitosana, no entanto não há reticulação dupla por atomização com CaCl₂ e policomplexação com [18] O artigo cie Ferioli, et ai DD/MM/04 descreve uma formulação mucoadesiva que contem metronidazol . A formulação é uma mistura de celulose e ura polímero acrílico. Ocorre perda de fragmentos da formulação com o intumescimento do dispositivo durante o processo de liberação do principio ativo .

[19] Diferentemente, a presente invenção descreve membranas de nanofibras. mucoadesivas de camada única para liberação de princípios ativos in situ ou por via transmucosa, em que o agente ativo (tal como um antibiótico) é incorporado na solução polimérica antes da eletrofíação para posterior reticulação dupla por atomização com CaCl₂ e policomplexação com. quitosana. Não há a incorporação de aditivos para a preparação das membranas. A invenção trata- se de uma membrana de nanofibras de biopolimeros mucoadesivo de alginato/PEO para liberação de princípios ativos por via transmucosa ou in situ, durante a qual não ocorre perda de fragmentos porque o material não é compactado e sim construído em uma estrutura única de nanofibras .

Breve descrição da invenção:

[20] A presente invenção faz referência ao processo de obtenção de membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas duplamente reticuladas, e as membranas de nanofibras. Tais membranas são membranas de alginato/PEO de alta adesão, obtidas pelo processo de eletrofíação e reticuladas por atomização com CaCls e quitosana.

[21] Adicionalmente, as referidas membranas apresentam aplicação na liberação de princípios ativos via transmucosa ou in. situ.

Breva descrição das figuras: [22] Para obter uma total e completa visualização do objeto desta invenção, são apresentadas as figuras as quais se faz referências, conforme se segue.

[23] A Figura 1 é imagem de MEV com aumento de 10.000 da membrana de nanofibras de SA/PEO eletrofiada nas condições de processo de Voltagem-25 kV, Distância agulha-coletor^:::15 cm e Vazâo=lral/h coro adição de 10% de Metronidazol.

[24] As Figuras 2A, 2B e 2C são iraagens MEV com aumento de 5000 vezes para membrana eletrofiada de alginato/PEO 60:40 m/m em solução 5% etanol (A) antes réticulaçao, (B) após atomização com solução saturada de CaCl₂ e (C) após 24 horas em solução aquosa.

[25] As Figuras 3A e 3B são imagens das membranas de alginato/PEO após reticulação por atomização com (A) quitosana e (B) CaCla e quitosana .

[26] A Figura 4 são imagens das membranas de alginato/PEO após incubação por 4 h em: (A) solução tampão fosfato e (B) solução de saliva artificial, reticuladas por atomização com Quitosana (1) e com CaCls e quitosana (2) .

Descrição detalhada da Invenção:

[27] Esta invenção se refere ao processo de obtenção de membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas duplamente reticuladas, e as membranas de nanofibras com a incorporação de princípios ativos para a liberação via transmucosa ou ín situ de princípios ativos.

[28 ] Mais especificamente, as membranas são membranas de alginato/PEO de alta adesão, obtidas pelo processo de eletrofiaçâo e reticuladas por atomização com CaCl₂ e quitosana. Em modalidades preferidas da invenção, o princípio ativo é o metronidazol. [29] O processo de obtenção cie membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas compreende as seguintes etapas:

Preparação de uma solução de alginato e PEO na concentração de 3% a 4% de políraero total, em água com adição de 5% a 7% de etanol;

- Sendo que a proporção de alginato: PEO pode ser 50:50, 60:40, 70:30, 80:20 ou 90:10, preferencialmente 60:40;

- A solução obtida na etapa anterior é adicionada o principio ativo;

- A solução obtida na etapa anterior deve ser mantida sob agitação por no mínimo 2 horas para homogeneização;

- A solução obtida na etapa anterior é eletrofiada;

- Obtenção das membranas de nanofibras de alginato/PEO rnucoadesivas ;

- Submissão das membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas à reticulação iôníca por atomização com uma solução de cátion divalente na concentração cie 10 a 20%, era etanol na faixa de pressão de atomização de 5 a 20 psi;:

- Submissão das membranas de nanofibras de alginato/PEO à reticulação por complexação através da atomização de solução de quítosana na concentração de 1,5% a 4,5%, na faixa de pressão de atomização de 5 a 20 psi;

- Obtenção das membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas com dupla reticulação.

Sendo que:

A solução de alginato e PEO deve conter preferencialmente 4% de polímeros totais.

A solução de qui tosaria está preferencialmente na concentração de 3,5%.

- O etanol está preferencialmente na concentração de 5%; - A solução de cátion divalente é preferencialmente de CaCl₂ na faixa de concentração de 10% a 20%;

- A solução de cátion divalente ser preferenciaimente na concentração de 10%;

[30] O processo da eletrof iação ocorre em temperaturas de 25 a 31 °C, umidade relativa (UR) variável abaixo de 60%, tensão na faixa de: 2 a 32 kV7, distância da agulha ao coletor entre 10 é 20 em.

[31] O processo da eletrofiação ocorre peio fato da tensão ser preferencialmente de 10 a 2:5 kV e pelo fato da distância da agulha ao coletor ser preferencialmente 15 cm.

[32] A vazão da eletrofiação deve estar entre 0,5 e 1 mL/h, e a velocidade de rotação estar entre 1500 a 4000 rpm. Sendo que a vazão da eletrofiação é preferencialmente 1 mL/h, e a velocidade de rotação é preferencialmente 2500 rpm.

[33] O processo de reticulação deve ocorrer com pressão de atomização entre 5 e 20 psi, e a altura do bico atomizador entre 4 e 8 cm, e com velocidade da bomba na faixa de 3 a 5: rpm. A pressão de atomização na reticulação é preferencialmente de 10 psi, e a altura do bico atomizador é preferencialmente 8 cm.

[34] As membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas obtidas pelo processo são duplamente reticuladas e compreenderem, preferencialmente a incorporação do mer.ronid.azol como principio ativo. 0 metronidazol incorporado deve estar na concentração de 10 a 20% com base na massa total de polímeros na solução ( alginato e PEO) .

[35] A concentração de polímeros totais na solução cie alginato/PEO é de 3 a 4 %, em que a solução de alginato pode estar na proporção entre 50 e 90 e a solução de PEO pode estar entre 50 e 10, e preferencialmente estão em uma proporção de 60:40. 0 metronidazol é adicionado em uma proporção que varia de 10 a 20% com base na massa total de polímeros na solução (alginato e PEO) .

[36] As membranas são eletrofiadas e, em seguida, reticuladas ionicamente por atomização com uma solução cátion. divalente em etanol e, posteriormente, reticuladas por completação através da atomização de solução de quitosana. 3, 5% .

[37] As membranas desta invenção apresentara aplicação na liberação de fármacos via mucosa.

[38] Â obtenção das referidas membranas de nanofibras está mais bem descritas abaixo.

Processo de obtenção das membranas de nanofibras:

[39] Para obtenção das membranas de aiginato/PEO, são preparadas composições poliméricas pela mistura de ambos os componentes era água deionizada.

[40] Na referida solução de algínato/PEO, o principio ativo de interesse é incorporado.

[41] Após, as referidas: soluções são eletrofiadas em temperaturas de 25 a 31 °C e umidade relativa (UR) variando de 31 a 53 %. A fonte de alta tensão foi projetada para trabalhar na faixa de 2 a 32 kV, preferencialmente 10 a 25 kV e a distância da agulha ao coletor varia de 10 e 20 cm, preferencialmente 15 cm.

[42] A vazão para eletrofiação varia entre 0,5 e 1 mL/h, preferencialmente 1 mL/h, e a velocidade de rotação de 1500 a 4000 rpm , preferencia1mente 2500 rpm .

[43] Os melhores resultados foram obtidos para a eletrofiação realizada cora vazão de 1 mL/h, potencial de 25 kV e distância da agulha ao coletor de 15 cm, como pode ser observado nas Figuras 1.

[44] Após a eletrofiação, as membranas de nanofibras são submetidas à reticulaçâo, que se faz necessária devido à solubilidade deste polímero em meio aquoso. Como o objetivo da invenção é obter uma forma farmacêutica de liberação controlada, faz-se necessário que as membranas permaneçam sem dissolver na mucosa por determinado tempo, de modo a garantir a liberação gradativa do princípio ativo.

[45] Para isso, as membranas de nanofibras foram submetidas a testes de reticulaçâo iônica por atomização com solução de CaCls em etanol e reticulaçâo por cornplexação através da atomização de solução de quitosana em diversas concentrações (1,5%; 2,5%; 3,5% e 4,5%; preferencialmente 3,5%) .

[46] Primeiramente, a reticulaçâo iônica das membranas foi realizada conforme técnica comumente utilizada na literatura, a saber, atomização com soluções de CaCl₂ em etanol, utilizando atomizador de um leito fluidizado e parâmetros pré-defínidos por meio de um planejamento de experimentos (do inglês "design of experiments" - DOE) , a fim de se obter as melhores condições de reticulaçâo.

[47] O primeiro DOE; realizado foi composto de 3 faiares e 2 níveis, com um total de 8 testes. Os 3 fatores utilizados foram:

- Concentração da solução de CaCla de 10 e 20%,

- Altura do bico atomizador de 4 e 8 cm, e

- Pressão de atomização de 10 e 15 psi, com velocidade da bomba fixada em 3 rpm.

[48] Os. parâmetros utilizados em cada teste podem ser verificados na Tabela 1 abaixo.

Tabela 1 - Condições experimentais utilizadas no DOE para reticulação das membranas de a Igiria to/PEO.

[49] As melhores condições obtidas e utilizadas para reticulação foram com concentração da solução CaClz a 10%, altura do bico atomizador de 8 cm e pressão de atomização de 10 psi. As figuras 3A, 3B e 3C mostram as imagens de MEV para a membrana de alginato/PEO reticulada obtida nessas condições, antes e após a reticulação e após 24 horas de dissolução em água a 37°C.

[50] Mos testes realizados, avalíou-se o percentual de perda de massa, a razão de iritumescimento e a estrutura da membrana em cada condição. Para isso, realizou—se teste de dissolução em solução tampão fosfato 0, 1M (pH 7,4) e solução de saliva artificial, os quais representam meios de simulação de fluido corporal. As amostras foram deixadas por 4 e 10 h em incubação e os .resultados foram tratados estatisticamente .

[51] Para a membrana alginato/PEO obtida conforme melhores condições, a perda de massa foi de apenas 4%, no entanto, a razão de intumescimento apreserrtou-ss 10% menor, muito significativa para a aplicação final do material. Era todas as condições testadas, a % de perda de massa foi total no período de 1 hora, logo, as membranas não foram consideradas aptas para um dispositivo de liberação de princípios ativos onde é necessário um tempo de contato. suficiente para que o princípio ativo tenha tempo de atravessar a mucosa e ser liberado na corrente sanguínea.

[52] Sendo assim, uma reticulação complementar faz-se necessária para garantir que as membranas apresentem a estrutura desejada. Com essa finalidade, a reticulação complementar foi realizada por meio da eomplexação de poiieletróiitos em temperatura ambiente.

[53] O aiginato é ura poliânion e pode se complexar com um poiicátíon, como a quitosana. O complexo polieietrólito formado apresenta melhora no percentual de perda de massa, como desejado. Dessa forma, foi realizada a atomização de uma solução de quitosana, com. concentrações- variadas (1,5%; 2,5%; 3,5%, 4,5%), nas membranas de algínato/PEO, com. e sem reticulação iõníca. com CaCl₂.

[54] As figuras 3A e 33 mostrara as membranas obtidas em cada. tipo de reticulação. As que foram submetidas apenas a atomização com quitosana apre_:sentarara~se transparentes, em relação as que foram atomizadas com CaCl₂ e Quitosana, mostrando, claramente, que a reticulação inicial com CaCl₂ ajuda a manter a estrutura da membrana.

[55] Os resultados obtidos para. % de perda de massa e % intumescimento podem ser verificados nas tabelas 2 e 3 abaíxo . Tabela 2 - Resultados obtidos nos testes de perda de massa e íntumescimento das amostras de alqinato/PEG reticuladas , após 4 h de incubação em solução tampão fosfato e em

solução de saliva artificial .

SA= alçinato/quitosana e SACA = alginato/CaCl₂/quitosana

[ 5-6] Pode-se notar que os melhores resultados foram, obtidos com as amostras do grupo B duplamente reticuladas por atomização com CaCl₂ e com quit.osa.na. Nas imagens das Figuras 4 A e 4B, para 4 e 10 horas de incubação, respectivamente, pode- se observar as amostras em cada teste após secagem e verificar que: as membranas com a dupla reticulação (identificadas com CA inicial nas imagens) apresentaram-se integras e planas em relação as demais, e visualmente pode-se verificar a menor perda de massa. As amostras apenas reticuladas com atomização de quitosana se enrola rara e perderam a estrutura. Tabela 3 - Resultados dos testes de perda de massa das amostras alginato/PEG reticuladas , após 10 h de incubação em solução tampão fosfato e saliva artificiai .

[57] Assim, o teste de reticulação realizado mostrou que as membranas de alginato/ΡΕΌ com reticulação dupla, por atomização de CaCl₂ e de quitosana, apresentaram melhores resultados .

[58] Quando a reticulação dupla é realizada, pode-se obter uma perda de massa de apenas 41% em 24 horas, dentro dos resultados esperados. Este resultado contribui para que as membranas aqui propostas atuem de forma adequada, mantendo-se integras até a liberação do principio ativo no sitio ativo.

[59] Os resultados obtidos no teste de tempo de mucoadesão corroboram com os resultados obtidos nos testes de perda de massa. O teste de tempo de mucoadesão simula a força de cisalhamento aplicada à membrana aderida na mucosa oral suína, simulando os movimentos da saliva na cavidade oral e verificou-se que as membranas de alginato/PEO apresentaram o maior tempo de mucoadesão, mantendo-se fixas à mucosa durante as 24 horas de acompanhamento do teste.

[60] Sendo assim, as membranas da presente invenção são inovadoras e propõe a administração local de princípios ativos, em um sistema de liberação controlada posicionado diretamente no sitio de açâo, garantindo uma adequada concentração no local da açào por um período de tempo adequado .

[61] Os versados na arte valorizarão os conhecimentos aqui apresentados e poderão reproduzir a invenção nas modalidades apresentadas e em outras variantes, abrangidas no escopo das reivindicações anexas.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Processo de obtenção de membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas caractérizado por compreender as seguintes etapas:

a. Preparação de uma solução de alginato/PEO com concentração de 3% a 4% de polímero total, era água com adição de 5% a. 7% de etanol;

b. Adição de princípio ativo na solução obtida em (a) ; c. Manter a solução obtida em (b): sob agitação para hornogeneização;

d. Eletrofíaçâo da solução obtida na etapa (c) ;

e. Obtenção de membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas ;

f . Submissão das membranas obtidas em (e) á reticulação iônica por atomização com solução de cátion divalente na concentração de 10 a 20%, em etanol;

g. Submissão de membranas obtidas em (f) à reticulação por complexação por meio da atomização de solução de quitosana na concentração de 1,51 a 4,5%; e

h. Obtenção das membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas com dupla reticulação.

2. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado peio fato da proporção de alginato:FEO poder ser 50:50, 60:40, 70:30, 80:20 ou 90:10.

3. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado peio fato da solução poliraérica compreender preferencialmente 60% de aiginâto.

4. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato da solução polimérica compreender preferencialmente 40% de ΡΈO.

5. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pela fato da solução de quitosana estar preferencialmente na concentração de 3,5·%.

6. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato do etanol na etapa (a) estar preferencialmente na concentração de 51.

7. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato da solução de cátion divalente estar preferencialmente ser CaCl₂ e na concentração de 10%.

8. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato do principio ativo ser preferencialmente metronidazol, na concentração de 10 a 20%.

9. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato da agitação da etapa (c) ser mantida por pelo menos 2 horas.

10. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato da eletrofiação ocorrer em temperaturas de 25 a 31 °C, umidade relativa (UR) variável abaixo de 601, tensão na faixa de 2 a 32 kV, preferencialmente de 10 a 25 kV, e a distância da agulha ao coletor entre 10 e 20 cm, preferencialmente 15 cm.

11. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato da vazão da eletrofiação estar entre 0,5 e 1 mL/h, preferencialmente 1 mL/h, e a velocidade de rotação estar entre 1500 a 4000 rpm, preferencialmente 2500 rpm .

12. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato da pressão de atomização na reticulação estar entre 10 e 15 psi, preferencialmente em 10 psi, pela altura do bico atomizador estar entre 4 e 8 cm, preferencialmente 8 cm e pela velocidade da bomba estar fixada eia 3 rpm.

13. Membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas caracterizadas pelo fato de ser obtida pelo processo descrito nas reivindicações de 1 a 15

14. Membranas de acordo com a reivindicação 13 caracterizadas por serem duplamente: reticuladas e compreenderem preferencialmente a incorporação do metronidazol como princípio ativo.

15. Membranas de acordo com a reivindicação 14 caracterizadas pelo fato do metronidazol estar na concentração de 10 a 20% com base na massa total de polímeros .

16. Uso das membranas nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas, conforme definidas nas reivindicações 1 a 15, caracterizado por ser na liberação de princípios ativos para a liberação in si tu ou via tzansmucosa.

17. Membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas caracterisadas por ser duplamente reticulada e compreender a incorporação de um. principio ativo.

18. Membranas de acordo com a reivindicação 17 caracterizadas pelo fato da dupla reticulação ser com câtion diva lente. e^: quitosana .

19. Membranas de acordo com a reivindicação 17 e 18 caracterizadas pelo fato do cátíon divalente ser preferencialmente CaCl? .

20. Membranas de acordo com a reivindicação 19, caracterizadas pelo fato do princípio ativo ser pre ferencla1mente o metronidazoí .

21. Membranas de acordo com a reivindicação 20 caracterizadas pelo fato do metronidazol estar na concentração de 10 a 20% com base na massa total de polímeros .

22. Uso das membranas de nanofibras de alginato/PEO mucoadesivas, conforme definidas nas reivindicações 17 a 21, caracterizado por ser na liberação de princípios ativos para a liberação in situ ou via transmucosa .