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WO2018052082A1 - Ｌｉｎ２８ａ活性化剤及びその使用 - Google Patents

Ｌｉｎ２８ａ活性化剤及びその使用 Download PDF

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WO2018052082A1
WO2018052082A1 PCT/JP2017/033257 JP2017033257W WO2018052082A1 WO 2018052082 A1 WO2018052082 A1 WO 2018052082A1 JP 2017033257 W JP2017033257 W JP 2017033257W WO 2018052082 A1 WO2018052082 A1 WO 2018052082A1
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WO
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polysaccharide
examples
lin28a
cells
disease
Prior art date
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PCT/JP2017/033257
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English (en)
French (fr)
Inventor
明男 林
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TES Holdings Co Ltd
Original Assignee
TES Holdings Co Ltd
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Publication date
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Priority to EP17850983.2A priority patent/EP3524254A4/en
Priority to US16/332,422 priority patent/US20210283204A1/en
Priority to CN201780056090.8A priority patent/CN109952107A/zh
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    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine

Definitions

  • the present invention relates to Lin28a activator and uses thereof. Specifically, this invention relates to the Lin28a activator which contains a polysaccharide as an active ingredient, the dedifferentiation inducer of a monocyte, a therapeutic agent, food-drinks, and cosmetics.
  • This application claims priority based on Japanese Patent Application No. 2016-179598 filed in Japan on September 14, 2016, the contents of which are incorporated herein by reference.
  • a fundamental treatment method for a disease there is a method of recovering its function by repairing a cell, tissue or organ by using a stem cell or the like, that is, regenerative medicine.
  • regenerative medicine not only a method of transplanting after forming a target tissue or organ from stem cells, but also a method of injecting stem cells or progenitor cells of tissue cells into a diseased site, and performing regeneration and repair at the diseased site That is, the utilization of cell medicine is being studied.
  • stem cells or tissue cell progenitor cells are required.
  • a method for producing stem cells used in cell therapy for example, peripheral blood-derived monocytes are removed into stem cells by culturing in the presence of specific cytokines such as macrophage colony-stimulating factor (M-CSF). Examples thereof include a method of differentiation (see Non-Patent Documents 1 and 2, for example).
  • M-CSF macrophage colony-stimulating factor
  • peripheral blood-derived monocytes are cultured in the presence of M-CSF, at least one selected from the group consisting of gangliosides (glycolipids) and water-soluble plant extracts. And a method of dedifferentiation (see, for example, Patent Document 1).
  • Lin28a is an RNA-binding protein that is transiently expressed in the fetal period, and its expression is also observed in ES cells, but it is known that its expression decreases as its differentiation progresses.
  • Yamanaka et al. Announced that iPS cells can be established by introducing four genes (Oct3 / 4, SOX2, C-myc, Klf4) into human cells (see, for example, Non-Patent Document 3).
  • ES cells-like multipotent cells could be established by introducing four genes (Oct3 / 4, SOX2, Nanog, Lin28a) into human cells ( For example, refer nonpatent literature 4). This indicates that Lin28a is necessary for maintaining or inducing the undifferentiated state.
  • Ruhnke M, et al. “Differentiation of in vitro-modified-human peripheral blood monocytes into hepatocyte-like and pancreatic islet-like cells”, Gastroenterology, vol.128, no.7, p1774-1786, 2005.
  • Zhao Y, et al. “A human peripheral blood monocyte-derived-subset acts as pluripotent stem cells”, PNAS, vol.100, no.5, p2426-2431, 2003.
  • Yamanaka S, et al. “Induction of Puriuripotent Stem Cells from Adult Human Fibroblasts by Defined Factors”, Cell, vol.131, issue 5, p861-872, 2007.
  • monocytes are efficiently dedifferentiated into stem cells by including at least one selected from the group consisting of gangliosides and water-soluble plant extracts together with M-CSF. Can do. However, a substance capable of inducing dedifferentiation more efficiently has been demanded.
  • Lin28a an RNA-binding protein, behaves like a growth factor has not been clarified, including elucidation of its entire function, and to date it has been elucidated to accelerate cell metabolism. It wasn't too much. Moreover, a substance that induces the expression of Lin28a and activates Lin28a has not been known.
  • the present invention has been made in view of the above circumstances, and provides a novel Lin28a activator and an efficient dedifferentiation inducer.
  • the Lin28a activator according to the first aspect of the present invention contains, as an active ingredient, a polysaccharide containing one or more selected from the group consisting of ribose, xylose, and derivatives thereof.
  • the polysaccharide is further one or more selected from the group consisting of galactose, mannose, glucose, N-acetylglucosamine, rhamnose, N-acetylgalactosamine and derivatives thereof. May be included.
  • the molecular weight of the polysaccharide may be 3500 or more.
  • the polysaccharide may be derived from a microorganism.
  • the microorganism may be a yeast, a microalgae, a lactic acid bacterium, or a koji mold.
  • the yeast may be Saccharomyces blaudi.
  • the monocyte dedifferentiation inducer according to the second aspect of the present invention comprises, as an active ingredient, a macrophage colony stimulating factor and a polysaccharide comprising one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof. contains.
  • the polysaccharide is further selected from the group consisting of galactose, mannose, glucose, N-acetylglucosamine, rhamnose, N-acetylgalactosamine and derivatives thereof. One or more kinds may be included.
  • the polysaccharide may have a molecular weight of 3500 or more.
  • the therapeutic agent for diseases related to cell, tissue or organ damage contains, as an active ingredient, a polysaccharide containing one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof. To do.
  • the therapeutic agent for a disease related to cell, tissue or organ damage wherein the disease is trauma, pancreatitis, radiation damage, dermatomyositis, polymyositis, necrotizing fasciitis, chronic bronchitis, fracture Osteoporosis, osteochondral fracture, osteochondritis, dilated cardiomyopathy, myocardial infarction, ischemic cardiomyopathy, heart failure, myocardial hypertrophy, congestive heart failure, restenosis, arrhythmia, atherosclerosis, vasculitis, peripheral neuropathy, Neuropathic pain, stroke, encephalitis, meningitis, diabetic neuropathy, attention deficit disorder, autism, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, brain trauma, spinal cord injury, cerebral ischemia, cirrhosis, chronic hepatitis, It may be chronic renal failure, glomerulonephritis, renal ischemia, diabetes, atopic dermatitis
  • the food or drink for prevention or alleviation of diseases related to cell, tissue or organ damage comprises a polysaccharide comprising one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof. contains.
  • the disease is trauma, pancreatitis, radiation damage, dermatomyositis, polymyositis, necrotizing fasciitis, chronic Bronchitis, fracture, osteoporosis, osteochondral fracture, osteochondritis, dilated cardiomyopathy, myocardial infarction, ischemic cardiomyopathy, heart failure, myocardial hypertrophy, congestive heart failure, restenosis, arrhythmia, atherosclerosis, vasculitis , Peripheral neuropathy, neuropathic pain, stroke, encephalitis, meningitis, diabetic neuropathy, attention deficit disorder, autism, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, brain trauma, spinal cord injury, cerebral ischemia, cirrhosis Chronic hepatitis, chronic renal failure, glomerulonephritis, renal ischemia, diabetes, atopic
  • the cosmetic according to the fifth aspect of the present invention contains a polysaccharide containing one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof.
  • Lin28a can be activated effectively.
  • dedifferentiation inducer of the above aspect dedifferentiation of efficiently differentiated cells can be induced.
  • Lin28a activator comprising as an active ingredient a polysaccharide comprising one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof.
  • Lin28a activator of the present embodiment it is possible to effectively induce the expression of Lin28a and activate Lin28a.
  • Lin28a is an RNA-binding protein that is transiently expressed in the fetal period, and its expression is also observed in ES cells, but its expression decreases as its differentiation progresses.
  • hair growth is promoted by maintaining the expression of Lin28a even when it is adult, and in ear tissue, even if a hole opened for individual identification is opened, it is repaired and blocked, and when it is a pup mouse, It has been reported that a fingertip cut for identification is regenerated. Therefore, Lin28a is recognized as a tissue repair factor. Therefore, damage to cells, tissues, or organs can be repaired by inducing the expression of Lin28a and activating Lin28a.
  • the present inventors have found a polysaccharide contained in a culture of Saccharomyces boulardi as a substance that induces the expression of Lin28a and activates Lin28a, as shown in Examples below.
  • the polysaccharide contained in the Lin28a activator of the present embodiment includes one or more selected from the group consisting of ribose, xylose, and derivatives thereof.
  • ribose and xylose derivatives include amino sugars in which the hydroxy group (—OH) of these monosaccharides is substituted with an amino group (—NH 2 ), and hydroxymethyl groups (—CH 2 at the end of the main chain). And uronic acid in which OH) is substituted with a carboxy group (—COOH).
  • the polysaccharide preferably contains ribose and xylose. As shown in the Examples described later, polysaccharides including ribose and xylose have a significant Lin28a activation effect.
  • the ratio (R / X) of the molar amount of ribose to the molar amount of xylose contained in the polysaccharide is preferably from 1/1 to 10/1, more preferably from 3/1 to 9/1. Preferably, it is 5/1 or more and 8/1 or less.
  • the polysaccharide may further contain one or more selected from the group consisting of galactose, mannose, glucose, N-acetylglucosamine, rhamnose, N-acetylgalactosamine and derivatives thereof.
  • examples of the above-mentioned six types of monosaccharide derivatives include those exemplified as the above-mentioned ribose and xylose derivatives.
  • the ratio (A / B) of the total molar amount (A) of ribose, xylose and their derivatives to the total molar amount (B) of the seed monosaccharides and their derivatives is, for example, 1/2 or more and 100/1 or less. For example, it can be set to 1/1 or more and 50/1 or less.
  • the molecular weight of the polysaccharide is preferably 3500 or more, and more preferably 3500 or more and 15000 or less, as shown in Examples described later. When the molecular weight of the polysaccharide is not less than the above lower limit, more effective Lin28a activity can be exhibited.
  • the polysaccharides included in the present embodiment may be chemically synthesized or may be obtained from microorganisms.
  • microorganism from which the above-mentioned polysaccharide is derived examples include, but are not limited to, yeast, microalgae, lactic acid bacteria, and koji molds. Among these, yeast is preferable as the microorganism.
  • yeast examples include Saccharomyces blaudi.
  • Saccharomyces boulardi is a French microbiologist, Dr. Boulard, who discovered that cholera diarrhea is alleviated by drinking local drinks made by lychees in Vietnam. Fruit yeast isolated from this drink.
  • the Saccharomyces broudis is not particularly limited, and specific examples include ATCC MYA-796 strain and ATCC MYA-797 strain.
  • the microalgae can be divided into prokaryotes and eukaryotes.
  • the prokaryote include cyanobacteria and primordial green algae.
  • the eukaryotes include eukaryotes such as gold algae, hapto algae, yellow green algae, true eyed algae, diatoms, dinoflagellates, rafido algae, crypto algae, green algae, and plasino alga. .
  • cyanobacteria are preferable as the microalgae.
  • cyanobacteria examples include, for example, Halothes, Dactyrococcus, Cyanothe, Orthospira, Spirulina, Halopirulina, Getralinema, Prochlorococcus, Synecococcus, Ringbia, Moolea, Trichodesmium And algae belonging to Oshiratoria and the like.
  • lactic acid bacteria examples include Lactobacillus genus, Leuconostoc genus, Lactococcus genus, Enterococcus genus, Pediococcus genus, Weissella genus and the like.
  • Lactobacillus genus examples include Lactobacillus plantarum, Lactobacillus caseei, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus rhhamnosus, and the like.
  • Leuconostoc examples include Leuconostoceciterum, Leuconostoc mesenteroides, and the like.
  • Lactococcus examples include Lactococcus lactis, Lactococcus rhamnosus, and the like.
  • Enterococcus examples include Enterococcus facialis, Enterococcus facium, and the like.
  • Examples of the genus Pediococcus include Pediococcus acidilactici.
  • Weissella examples include Weissella confuse, Weissella orgize, and the like.
  • Aspergillus examples include Aspergillus oryzae, Aspergillus o sojae, Aspergillus tamarii, Aspergillus kawachii, Aspergillus awamori, Aspergillus A brasilis, Aspergillus brasilis brasilis.
  • a microbial culture may be used as the composition containing the polysaccharide.
  • the microorganism culture includes a microorganism disruption solution (for example, yeast extract), a suspension, and a culture supernatant.
  • the culture of the microorganism may be a liquid, or may be a dried body (for example, a dried bacterial body, a dried culture supernatant, etc.).
  • a composition containing microorganism cells may be used as the composition containing the polysaccharide.
  • the structure of the polysaccharide contained in the culture of the microorganism has not been identified, but the molecular weight is preferably about 3500 or more and about 15000 or less. Moreover, the pH in the liquid state of a culture should just be 4-9, for example.
  • the culture of microorganisms in this embodiment can be obtained by culturing the microorganisms using a general medium used for culturing microorganisms.
  • examples of the medium include YPD medium (containing 2% peptone, 1% yeast extract, and 2% glucose), YPD medium in which a part of glucose is replaced with rhamnose, and one of glucose.
  • examples include, but are not limited to, YPD medium in which parts are replaced with ribose.
  • the medium is preferably a YPD medium in which a part of glucose is replaced with rhamnose, or a YPD medium in which a part of glucose is replaced with ribose, and is a YPD medium in which a part of glucose is replaced with ribose. It is more preferable.
  • No. examples include, but are not limited to, 804 medium.
  • “No. 804 medium” is a medium in which 5 g of high polypeptone, 5 g of yeast extract, 5 g of glucose, and 1 g of MgSO 4 .7H 2 O are dissolved in 1 L of water and sterilized.
  • a culture of microorganisms grown in culture may be used as it is.
  • the extract may be prepared from a culture of microorganisms.
  • preparation method of the extract include, for example, a self-digestion method that solubilizes cells using proteolytic enzymes that are inherent in the cells, and an enzyme that solubilizes cells by adding microorganism or plant-derived enzyme preparations.
  • Decomposition method hot water extraction method to solubilize cells by soaking in hot water for a certain period of time, acid or alkali decomposition method to solubilize cells by adding various acids or alkalis, freezing and thawing 1
  • stimulation, etc. are mentioned.
  • the physical stimulation used in the physical crushing method include ultrasonic treatment, homogenization under high pressure, and grinding by mixing with a solid material such as glass beads.
  • a dried microbial cell may be prepared by drying a culture of a microorganism.
  • the drying method include a freeze drying method, a spray drying method, and a drum drying method. Furthermore, by processing the obtained dried microbial cells into a powder form, it is possible to obtain a dried microbial powder having excellent handleability.
  • a fraction containing a polysaccharide may be prepared from a culture of microorganisms.
  • Examples of the method for fractionating a polysaccharide-containing fraction from the culture were obtained by hot water extraction, extraction by cell disruption (for example, the same method as the above-described extract preparation method, etc.), etc.
  • By fractionating the extract using centrifugation, dialysis, an affinity column carrying a substance with high affinity for polysaccharides, etc. it becomes possible to concentrate and purify the extract to a fraction containing polysaccharides at a high concentration. .
  • the present invention relates to the induction of dedifferentiation of monocytes containing, as active ingredients, a macrophage colony stimulating factor and a polysaccharide comprising one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof. Provide the agent.
  • monocytes can be dedifferentiated, and since proliferation efficiency is high, a large amount of stem cells can be obtained from a small amount of monocytes.
  • M-CSF macrophage colony-stimulating factor
  • M-CSF has a membrane-bound type having a molecular weight of about 22000 and a secreted type having a molecular weight of about 42000. These are further disulfide bonded to a membrane-bound type having a molecular weight of about 45000 (22000 dimer), a secreted type having a molecular weight of about 85000 (42000 dimer), and a secreted type having a molecular weight of about 85000 (42000 dimer).
  • proteoglycan There is a high molecular weight form to which proteoglycan is bound. Any of these may be used in the dedifferentiation inducer of this embodiment.
  • the M-CSF used for the dedifferentiation inducer of the present embodiment includes a secreted form having a molecular weight of about 42000, a secreted form having a molecular weight of about 85000 (42000 dimer), or a secreted form having a molecular weight of about 85000 (42000). It is preferable that it is a high molecular weight type in which a proteoglycan is further bound to the dimer).
  • M-CSF may be derived from the same animal as the monocytes used, and is preferably a mammal.
  • the mammal include, but are not limited to, humans, horses, cows, monkeys, chimpanzees, pigs, sheep, rabbits, mice, rats, dogs, cats, and the like.
  • primates such as humans, monkeys and chimpanzees are preferred as mammals, and humans are particularly preferred.
  • M-CSF a natural product may be used after purification, or a product produced by gene recombination may be used.
  • a product produced by genetic recombination for example, M-CSF has been found to have a specific activity comparable to that of the natural type if it has at least the amino acid from the N-terminal to around the 153rd. Examples include E. coli-expressed recombinants having no chain.
  • polysaccharides examples include the same as those exemplified in the above “Lin28a activator”.
  • monocyte means a monocytic cell (including monocytes, monocytes, and monocytes) having an M-CSF receptor (Colony-stimulating factor-1 receptor; c-fms) Means.
  • M-CSF receptor Coldy-stimulating factor-1 receptor
  • the monocytes in this embodiment are preferably derived from mammals.
  • Examples of the mammal include, but are not limited to, humans, horses, cows, monkeys, chimpanzees, pigs, sheep, rabbits, mice, rats, dogs, cats, and the like.
  • primates such as humans, monkeys and chimpanzees are preferred as mammals, and humans are particularly preferred.
  • monocytes can be obtained from, for example, bone marrow, blood and the like, and since they are obtained with minimal invasiveness, monocytes obtained from blood, particularly preferably peripheral blood, can be preferably used.
  • a known method may be used.
  • monocytes are isolated from blood using a blood cell separation solution Lymphoprep (registered trademark) (Linphoprep, manufactured by Cosmo Bio).
  • Lymphoprep registered trademark
  • commercially available products may be used. Examples of commercially available products include PT038 (manufactured by LONZA).
  • monocyte dedifferentiation method By culturing monocytes using a medium containing the dedifferentiation inducer of the present embodiment, monocytes can be dedifferentiated and stem cells can be proliferated with high proliferation efficiency.
  • the concentration of M-CSF contained in the medium is preferably 5 ng / mL or more and 100 ng or less, and more preferably 25 ng / mL.
  • the concentration of the polysaccharide contained in the medium is preferably 1 ⁇ g / mL or more and 300 ⁇ g / mL or less.
  • the medium used for monocyte culture may be a basic medium containing components necessary for the survival and growth of monocytes (inorganic salts, carbohydrates, hormones, essential amino acids, non-essential amino acids, vitamins), etc. It can select suitably by origin.
  • Examples of the medium include Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM), Minimum Essential Medium (MEM), RPMI-1640, Basal Medium-Effect Medium (BME), Dulbecco's Modified Medium. 12 (DMEM / F-12), Glasgow Minimum Essential Medium (Glasgow MEM), and the like.
  • a serum component for example, about 1 to 20% of FBS / FCS (Fetal Bovine / Calf Serum), NCS (Newborn Calf Serum), CS (Calf Serum), HS (Horse Serum), etc. may be added.
  • FBS / FCS Fetal Bovine / Calf Serum
  • NCS Newborn Calf Serum
  • CS Calf Serum
  • HS Heorse Serum
  • the culture condition of monocytes for example, it may be cultured at 37 ° C. for 7 days or more and 14 days or less in the presence of 5% carbon dioxide. Whether the obtained cells are dedifferentiated stem cells may be confirmed by using RT-PCR or the like for the expression level of the undifferentiated marker shown in “Stem cells” described later.
  • stem cells are those that express an undifferentiated marker and have a self-replicating ability.
  • Stem cells obtained by the dedifferentiation inducer of this embodiment can be prepared in large quantities from monocytes. Stem cells can be induced to differentiate, and preferably have pluripotent differentiation ability. Stem cells obtained by the dedifferentiation inducer of this embodiment are positive for CD14 and CD45.
  • the characteristics of the stem cells obtained by the dedifferentiation inducer of the present embodiment include significantly strong expression of the CXCR4 gene. Further, at least one of Nanog, Nestin, c-Kit, CD9 and Oct3 / 4, preferably at least 2, more preferably at least 3, more preferably at least 4, particularly preferably Nanog, Nestin, c-Kit. , CD9 and Oct3 / 4 genes are all expressed.
  • the major difference between the stem cells obtained by the dedifferentiation inducer of this embodiment and other dedifferentiated stem cells is the strong expression of the CXCR4 gene related to the homing action of the cells.
  • the CXCR4 gene is significantly strongly expressed when compared with the stem cells obtained by culturing monocytes in the presence of M-CSF alone.
  • the expression level of CXCR4 gene is as follows: monocytes are M-CSF alone, M-CSF + IL- 3.
  • the expression level in stem cells obtained by culturing in the presence of M-CSF + IL-6 + LIF or the like is 3 times or more, particularly 4 times or more.
  • the CXCR4 gene is significantly strongly expressed even when compared with bone marrow-derived mesenchymal stem cells.
  • the expression level of the CXCR4 gene is 2 times or more, preferably 3 times or more the expression level in bone marrow-derived mesenchymal stem cells.
  • the ligand SDF1 for the CXCR4 receptor is expressed in damaged tissues at the time of fracture, diseases of the circulatory system, or damaged sites of nerve tissues. Therefore, stronger expression of SDF1 is effective in giving a stronger homing effect to the damaged site of the stem cell obtained by the dedifferentiation inducer of the present embodiment from the viewpoint of cell medicine.
  • the stem cells obtained by the dedifferentiation inducer of this embodiment can be used for treatment of diseases by directly administering or injecting into the affected area. Prior to direct administration or injection into the affected area, it is preferred that the stem cells are cultured in an appropriate medium and allowed to grow before being directly administered or injected into the affected area.
  • a culture medium for stem cells a general cell culture medium may be used, or a dedifferentiation induction medium may be used.
  • the medium examples include the same media as those exemplified in the above-mentioned “Monocyte dedifferentiation method”.
  • the dedifferentiation induction medium may be any medium that does not contain extracellular matrix, growth factors, cytokines, etc. necessary for maintaining differentiation, that is, a serum-free medium that does not contain serum containing unknown components. Is preferred.
  • the serum-free medium include, but are not limited to, UltraCULTURE (registered trademark) serum-free medium (manufactured by LONZA).
  • Examples of the disease that can be treated using the stem cells obtained by the dedifferentiation inducer of the present embodiment include trauma, inflammatory disease, bone or cartilage damage, cardiovascular disease, neurological disease, liver disease, and renal disease. , Diabetes, atopic dermatitis, graft versus host disease (GVHD), and the like.
  • inflammatory disease examples include pancreatitis, radiation damage, dermatomyositis, polymyositis, necrotizing fasciitis, chronic bronchitis and the like.
  • bone or cartilage damage examples include fractures, osteoporosis, osteochondral fractures, osteochondritis and the like.
  • cardiovascular disease examples include dilated cardiomyopathy, myocardial infarction, ischemic cardiomyopathy, heart failure, myocardial hypertrophy, congestive heart failure, restenosis, arrhythmia, atherosclerosis, vasculitis and the like.
  • neurological diseases include peripheral neuropathy, neuropathic pain, stroke, encephalitis, meningitis, diabetic neuropathy, attention deficit disorder, autism, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Creutzfeldt-Jakob disease, brain trauma, spinal cord Examples include trauma and cerebral ischemia.
  • liver disease examples include cirrhosis and chronic hepatitis.
  • renal disease examples include chronic renal failure, glomerulonephritis, renal ischemia and the like.
  • a therapeutic agent for a disease associated with cell, tissue, or organ damage comprising a polysaccharide containing one or more selected from the group consisting of ribose, xylose, and derivatives thereof as an active ingredient is provided.
  • the therapeutic agent of the present embodiment it is possible to treat a disease related to cell, tissue or organ damage more effectively and less invasively than surgery including transplantation or cell medicine.
  • the polysaccharide contained in the therapeutic agent reaches the diseased part, thereby inducing the expression of Lin28a in the diseased part and activating Lin28a. Thereby, damage of a cell, a tissue, or an organ can be repaired.
  • the polysaccharide can treat various diseases by dedifferentiating monocytes into stem cells in cooperation with M-CSF existing in the living body, and the stem cells reach the diseased part.
  • the polysaccharide contained in the therapeutic agent induces the expression of Lin28a in the damaged cells, and Lin28a To activate. This can repair cell, tissue or organ damage in an in vitro system.
  • the “cell” refers to, for example, a germ cell (sperm, ovum, etc.), a somatic cell, a stem cell, a progenitor cell, or a living body that is separated from the living body and has acquired immortalizing ability and is stable outside the body. Examples include, but are not limited to, cells that are maintained (cell lines), cells that have been isolated from a living body and have been artificially genetically modified, and cells that have been isolated from a living body and have been artificially replaced with a nucleus.
  • somatic cells constituting the living body include skin, kidney, spleen, adrenal gland, liver, lung, ovary, pancreas, uterus, stomach, colon, small intestine, large intestine, bladder, prostate, testis, thymus, muscle, connective tissue, Examples include, but are not limited to, cells collected from any tissue such as bone, cartilage, vascular tissue, blood, heart, eye, brain, and nerve tissue.
  • somatic cells for example, fibroblasts, bone marrow cells, immune cells, erythrocytes, platelets, bone cells, bone marrow cells, pericytes, dendritic cells, keratinocytes, keratinocytes, adipocytes , Mesenchymal cells, epithelial cells, epidermal cells, endothelial cells, vascular endothelial cells, lymphatic endothelial cells, hepatocytes, pancreatic islet cells, chondrocytes, cumulus cells, glial cells, neurons (neurons), oligodendrocytes, micro Examples include, but are not limited to, glia, astrocytes, cardiomyocytes, esophageal cells, muscle cells, melanocytes, and mononuclear cells.
  • immune cells examples include B lymphocytes, T lymphocytes, neutrophils, macrophages, monocytes and the like.
  • Examples of the islet cells include ⁇ cells, ⁇ cells, ⁇ cells, ⁇ cells, PP cells, and the like.
  • muscle cells examples include smooth muscle cells and skeletal muscle cells.
  • Stem cells include, for example, embryonic stem cells (ES cells), embryonic tumor cells, embryonic germ stem cells, induced pluripotent stem cells (iPS cells), neural stem cells, hematopoietic stem cells, mesenchymal stem cells, hepatic stem cells, pancreatic stem cells , Muscle stem cells, germ stem cells, intestinal stem cells, cancer stem cells, hair follicle stem cells, and the like.
  • ES cells embryonic stem cells
  • iPS cells induced pluripotent stem cells
  • neural stem cells hematopoietic stem cells
  • mesenchymal stem cells mesenchymal stem cells
  • hepatic stem cells pancreatic stem cells
  • Muscle stem cells germ stem cells
  • intestinal stem cells intestinal stem cells
  • cancer stem cells hair follicle stem cells, and the like.
  • Progenitor cells are cells that are in the process of being differentiated from the stem cells into specific somatic cells or germ cells.
  • a cell line is a cell that has acquired infinite proliferative capacity through artificial manipulation in vitro.
  • Examples of cell lines include HCT116, Huh7, HEK293 (human embryonic kidney cells), HeLa (human cervical cancer cell line), HepG2 (human hepatoma cell line), UT7 / TPO (human leukemia cell line), CHO (Chinese hamster ovary cell line), MDCK, MDBK, BHK, C-33A, HT-29, AE-1, 3D9, Ns0 / 1, Jurkat, NIH3T3, PC12, S2, Sf9, Sf21, High Five, Vero, etc. However, it is not limited to these.
  • tissue refers to a unit of structure assembled in a pattern based on a certain lineage in which one type of stem cell differentiates, and has a single role as a whole.
  • epidermal keratinocytes differentiate from the stem cells in the basal layer of the epidermis to cells that form the granule layer via the spinous layer, and form the stratum corneum by terminal differentiation to form a barrier function as the epidermis. Is demonstrating. Therefore, by using the therapeutic agent of this embodiment, a multicellular structure including one type of cell derived from one cell lineage is constructed, and for example, epithelial tissue, connective tissue, muscle tissue, nerve tissue, etc. are regenerated. can do.
  • an “organ” is composed of two or more types of tissues and has a single function as a whole. Therefore, by using the therapeutic agent of this embodiment, a multicellular structure including at least two types of cells having different cell lineages can be constructed, and for example, the stomach, intestine, liver, kidney and the like can be regenerated.
  • Examples of diseases related to cell, tissue or organ damage to which the therapeutic agent of this embodiment can be applied include the same as those exemplified in the above-mentioned “dedifferentiation inducer”.
  • the dosage of the therapeutic agent of this embodiment is appropriately determined in consideration of the age, sex, weight, symptom, administration method, treatment time, etc. of the test animal (preferably a mammal, more preferably a primate, particularly preferably a human). Adjusted.
  • the effective amount of the polysaccharide contained in the therapeutic agent of this embodiment is considered to be 100 ng to 100 mg, preferably 1 ⁇ g to 10 mg, more preferably 10 ⁇ g to 5 mg, per kg of human adult body weight.
  • the therapeutic agent of this embodiment can be administered in 1 to 4 divided doses per day.
  • Examples of the dosage form include intraarterial injection, intravenous injection, subcutaneous injection, intranasal, transbronchial, intramuscular, transdermal, or oral methods known to those skilled in the art.
  • the therapeutic agent of this embodiment may contain a pharmaceutically acceptable carrier or diluent in addition to the therapeutically effective amount of the above-mentioned polysaccharide.
  • Pharmaceutically acceptable carriers or diluents include excipients, diluents, extenders, disintegrants, stabilizers, preservatives, buffers, emulsifiers, fragrances, colorants, sweeteners, thickeners, flavoring agents. Agents, solubilizers, additives and the like.
  • a form of therapeutic agent can be prepared.
  • a colloidal dispersion system can be used as the carrier.
  • the colloidal dispersion system is expected to have the effect of increasing the in vivo stability of the above-mentioned polysaccharide and the effect of increasing the migration of the above-mentioned polysaccharide to a specific organ, tissue, or cell.
  • colloidal dispersion systems include lipids including polyethylene glycol, polymer composites, polymer aggregates, nanocapsules, microspheres, beads, oil-in-water emulsifiers, micelles, mixed micelles, and liposomes. Liposomes and artificial membrane vesicles that are effective in efficiently transporting the above-mentioned polysaccharides to specific organs, tissues, or cells are preferred.
  • Examples of formulation in the therapeutic agent of this embodiment include those used orally as tablets, capsules, elixirs, and microcapsules with sugar coating as necessary.
  • the therapeutic agent of the present embodiment it is used parenterally in the form of a sterile solution with water or other pharmaceutically acceptable liquid, or an injection of suspension.
  • a pharmacologically acceptable carrier or diluent specifically, sterilized water or physiological saline, vegetable oil, emulsifier, suspension agent, surfactant, stabilizer, flavoring agent, excipient, vehicle, Examples thereof include those formulated by mixing with a preservative, a binder and the like, and mixing in a unit dosage form generally required for pharmaceutical practice.
  • additives that can be mixed include a binder, an excipient, a swelling agent, a lubricant, a sweetener, and a flavoring agent.
  • binder examples include gelatin, corn starch, tragacanth gum, gum arabic and the like.
  • excipient examples include crystalline cellulose.
  • swelling agent examples include corn starch, gelatin, and alginic acid.
  • wetting agent examples include magnesium stearate.
  • sweetening agent examples include sucrose, lactose, saccharin and the like.
  • flavoring agent examples include peppermint oil and red pepper.
  • the dispensing unit form is a capsule
  • the above-mentioned material can further contain a liquid carrier such as fats and oils.
  • the dispensing unit form When the dispensing unit form is an injection, it can be formulated according to normal pharmaceutical practice using, for example, a vehicle such as distilled water for injection.
  • a vehicle such as distilled water for injection.
  • an aqueous solution for injection for example, an isotonic solution and a suitable solubilizing agent or nonionic surfactant may be used in combination.
  • the isotonic solution can contain saline, glucose and other adjuvants.
  • the adjuvant include D-sorbitol, D-mannose, D-mannitol, sodium chloride and the like.
  • solubilizer examples include alcohol and polyalcohol.
  • specific examples of the alcohol include ethanol.
  • Specific examples of the polyalcohol include propylene glycol and polyethylene glycol.
  • nonionic surfactant examples include polysorbate 80 (TM) and HCO-50.
  • an oily liquid can be further contained in the above material.
  • oily liquid examples include vegetable oils such as sesame oil, soybean oil and olive oil.
  • solubilizing agent examples include benzyl benzoate and benzyl alcohol.
  • blend a buffer, a soothing agent, a stabilizer, or antioxidant.
  • buffer examples include phosphate buffer and sodium acetate buffer.
  • Examples of the soothing agent include procaine hydrochloride.
  • Examples of the stabilizer include benzyl alcohol and phenol.
  • the dispensing unit form when it is an injection, it can be prepared as a suspension or emulsion.
  • the injection prepared as described above is usually filled in a suitable ampoule.
  • Such sterilization of injections can be performed by blending filter sterilization with a filter, bactericides, and the like.
  • an injection can be manufactured as a form of preparation for business. That is, a polysaccharide can be made into a sterile solid composition by freeze drying or the like, and dissolved in distilled water for injection or other solvent before use.
  • One aspect of the present invention provides a therapeutic agent comprising the above-mentioned polysaccharide for the treatment of diseases associated with cell, tissue or organ damage.
  • One aspect of the present invention also provides a therapeutic agent comprising a therapeutically effective amount of the above-mentioned polysaccharide and a pharmaceutically acceptable carrier or diluent.
  • one aspect of the present invention provides the use of the above-described polysaccharide for producing a therapeutic agent for diseases related to cell, tissue or organ damage.
  • Another aspect of the present invention provides a method for treating a disease associated with cell, tissue or organ damage, comprising administering an effective amount of the above-mentioned polysaccharide to a patient in need of treatment.
  • the present invention provides a food or drink for the prevention or alleviation of diseases associated with cell, tissue or organ damage containing a polysaccharide comprising one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof.
  • a polysaccharide comprising one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof.
  • the food and drink of this embodiment it is possible to effectively prevent or reduce diseases related to cell, tissue or organ damage.
  • ingesting the above polysaccharides has a past dietary experience from the viewpoint of safety, and it is considered that there are few problems in daily intake. Therefore, safe and effective food and drink can be provided.
  • food and beverage is a combination of food and beverage, and mainly means processed food.
  • the food / beverage products of this embodiment contain a health food (a food for specific health is included), a functional food, a health drink, and a functional drink.
  • diseases related to cell, tissue or organ damage that can be prevented or reduced by the food or drink of the present embodiment include the same as those exemplified in the above-mentioned “dedifferentiation inducer”.
  • the form of the food / beverage product of this embodiment may be solid or liquid, and the above-mentioned polysaccharides can be widely used as food additives in general foods.
  • Specific types of food and drink include, for example, beverages (including beverage concentrates and adjustment powders), noodles, confectionery, processed fishery or livestock products, dairy products, fats and oils and fats processed foods, seasonings , Soup, stew, curry, bread, jam, salad, side dish, pickles, etc., but are not limited thereto.
  • examples of the beverage include soft drinks and alcoholic beverages.
  • soft drink examples include mineral water, carbonated drink, nutrition drink, sports drink, cocoa drink, fruit drink, milk drink, coffee drink, tea drink, soy milk drink, vegetable drink, alcohol taste drink, and the like.
  • Examples of the alcohol-taste beverage include non-alcoholic beer and non-alcoholic wine.
  • Examples of the alcohol include beer, sparkling liquor, cocktail, Chuhai, shochu, sake, whiskey, brandy, wine, and the like.
  • noodles examples include buckwheat, udon, spaghetti, harsame, gyoza peel, cucumber peel, Chinese noodles, and instant noodles.
  • confectionery examples include candy, chewing gum, candy, gummi, gum, caramel, chocolate, tablet confectionery, snack confectionery, baked confectionery, jelly, pudding, and frozen confectionery.
  • baked confectionery examples include biscuits, cookies, madeleine and the like.
  • frozen dessert examples include ice cream, ice sherbet, shaved ice, and the like.
  • Examples of the fishery or livestock processed food include kamaboko, hamburger, ham, sausage and the like.
  • dairy products examples include processed milk, fermented milk, yogurt, butter, cheese, and fresh cream.
  • oil or fat processed food examples include salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, shortening, whipped cream, dressing and the like.
  • seasoning examples include sauce and sauce.
  • the above-mentioned polysaccharides can be consumed as supplements and the like by processing them into soft capsules, hard capsules, tableted tablets, powders and the like.
  • the food and drink of the present embodiment may be appropriately mixed with additives that are usually used depending on the type.
  • additives include sweeteners, acidulants, excipients, binders, diluents, fragrances, buffers, thickeners, gelling agents, colorants, stabilizers, emulsifiers, dispersants, and suspensions. Agents, preservatives and the like.
  • sweetener examples include sugar, fructose, isomerized liquid sugar, glucose, aspartame, stevia and the like.
  • Examples of the acidulant include citric acid, malic acid, and tartaric acid.
  • excipient examples include dextrin and starch.
  • the blending amount of the polysaccharide in the food and drink of the present embodiment only needs to be an amount that can exhibit its physiological action and pharmacological action, and considers the dose in the above-mentioned “therapeutic agent” and the general intake of the target food and drink.
  • the amount is 100 ng to 100 mg, preferably 1 ⁇ g to 10 mg, more preferably 10 ⁇ g to 5 mg per kg of adult human body weight.
  • it may be 10 to 50% by weight in the case of a solid food, and 0.1 to 10% by weight in the case of a liquid food such as a beverage.
  • the present invention provides a cosmetic product comprising a polysaccharide comprising one or more selected from the group consisting of ribose, xylose and derivatives thereof.
  • the cosmetic product of this embodiment has an excellent anti-inflammatory effect, whitening effect, and anti-aging effect. Moreover, since the said polysaccharide is harmless, it is thought that there are few problems also ingesting dermally every day. Therefore, a safe and effective cosmetic product can be provided.
  • inflammation means a local defense reaction caused by the immune system triggered by entry of a foreign substance into a living body or tissue damage. Inflammatory reactions can help the body eliminate the non-self, but can also cause certain damage to the living organism itself.
  • the polysaccharide contained in the cosmetic product activates Lin28a, so that damage to cells and the like caused by inflammation can be repaired and inflammation can be sedated.
  • whitening means prevention or improvement of skin pigmentation, spots, freckles, melasma and the like.
  • the polysaccharide contained in the cosmetic activates Lin28a and accelerates the metabolism of cells in the skin, thereby preventing or improving skin pigmentation, blotches, freckles, melasma, etc. be able to.
  • aging is skin change accompanying aging, and specifically “skin wrinkles increase”, “sagging skin”, “skin sag reduction”, etc. It means various changes that are unfavorable for cosmetic purposes.
  • wrinkle is a change in the form of the skin that appears clearly as a muscular pattern, compared to a texture composed of a cuticle and a skin groove, and means one of the most prominent changes in the appearance of skin aging. Wrinkles appear on the face, neck, and other parts of the body, increase, and appear deep as they age. These are essentially distinguished from the morphological point that they are accompanied by rough skin, acne surface wrinkles and the like accompanied by partial peeling on the stratum corneum due to drying or the like and partial disappearance of the skin groove.
  • wrinkle prevention that is, the formation of wrinkles on the skin exposed to an environment where wrinkles are easily formed, such as a dry environment
  • the cosmetic product of the present embodiment the length and depth of wrinkles on the skin formed by exposure to an environment where wrinkles are easily formed, such as a dry environment, that is, improvement of wrinkles formed. The number and the like can be significantly reduced.
  • the presence / absence of such “wrinkle prevention” and “improvement of formed wrinkles” can be determined quantitatively or qualitatively, and in order to improve accuracy, for example, a double shielding pair comparison method (ICH guidelines It is possible to determine by E9).
  • the blending amount of the polysaccharide in the cosmetic product of the present embodiment may be an amount that can exert its physiological action and pharmacological action, and usually takes into account the dose in the above-mentioned “therapeutic agent”, and is usually per kg of human adult body weight.
  • the amount may be 100 ng to 100 mg, preferably 1 ⁇ g to 10 mg, more preferably 10 ⁇ g to 5 mg.
  • the cosmetic product of this embodiment is preferably used by being applied to the outer skin.
  • the application method is not particularly limited. For example, it may be applied to the epidermis once or more a day, for example, once or more and 3 or less times a day, in an appropriate amount according to the skin area to be applied, for example 1 to 5 mL per application.
  • the form of the cosmetic product of the present embodiment is not particularly limited, and can take any form such as a solution, a paste, a gel, a solid, and a powder.
  • Specific examples of cosmetics include skin care cosmetics, makeup cosmetics, body cosmetics, aromatic cosmetics, toothpastes, soaps, aerosols, bath preparations, hair nourishing agents, sunscreen agents, and the like.
  • Examples of the skin care cosmetics include cleansing foam, cleansing oil, cleansing gel, lotion, lotion, cream, milky lotion, beauty liquid, gel, pack and the like.
  • makeup cosmetics examples include foundations, eyeliners, eyebrow pencils, mascaras, lipsticks, funniers, and powders.
  • Examples of the body cosmetic include shampoo, hair rinse, hair conditioner, enamel and the like.
  • aromatic cosmetics examples include perfume and eau de cologne.
  • various components that are usually used in cosmetics in addition to polysaccharides may be blended within a range that does not impair the effects of the present embodiment.
  • Examples of the various components that are usually used in cosmetics include, for example, oily components, surfactants, amino acids, amino acid derivatives, lower alcohols, polyhydric alcohols, sugar alcohols and their alkylene oxide adducts, water-soluble polymers, and bactericides.
  • Agent antibacterial agent, anti-inflammatory agent, analgesic agent, antifungal agent, keratin softening release agent, skin colorant, hormone agent, UV absorber, hair restorer, whitening agent, antiperspirant, astringent active ingredient, sweat deodorant Vitamins, vasodilators, crude drugs, pH adjusters, viscosity adjusters, pearlizing agents, natural fragrances, synthetic fragrances, pigments, antioxidants, preservatives, emulsifiers, fats, waxes, silicone compounds, perfume oils, etc. It is done.
  • oil component examples include saturated or unsaturated fatty acids and higher alcohols obtained therefrom.
  • specific examples of the oil component include esters of linear or branched fatty alcohols, squalane, squalene, castor oil, hydrogenated castor oil and derivatives thereof, glycerides, beeswax, lanolins (including liquid lanolin and purified lanolin). ) And derivatives thereof, oily raw materials derived from animals and plants, oily raw materials derived from petroleum and minerals, silicones, resin acids, fatty acid esters, ketones and the like.
  • ester of the linear or branched fatty alcohol examples include, for example, myristyl myristate, myristyl palmitate, myristyl stearate, myristyl isostearate, myristyl oleate, myristyl behenate, myristyl erucate, cetyl myristate, palmitic acid Cetyl, cetyl stearate, cetyl isostearate, cetyl oleate, cetyl behenate, cetyl elcaate, stearyl myristate, stearyl palmitate, stearyl stearate, stearyl isostearate, stearyl oleate, stearyl behenate, stearyl erucate, Isostearyl myristate, Isostearyl palmitate, Isostearyl stearate, Isostearyl isostearate, Isostearyl oleate,
  • glycerides examples include hydroxystearic acid monoglyceride, hydroxystearic acid diglyceride, isostearic acid monoglyceride, isostearic acid diglyceride, oleic acid monoglyceride, oleic acid diglyceride, ricinoleic acid diglyceride, linoleic acid diglyceride, linoleic acid diglyceride, linolenic acid Examples thereof include monoglyceride, linolenic acid diglyceride, tartaric acid monoglyceride, tartaric acid diglyceride, citric acid monoglyceride, citric acid diglyceride, malic acid monoglyceride, malic acid diglyceride, and ethylene oxide 1-30 mol adducts of these glycerides.
  • oily material derived from animals and plants examples include almond oil, avocado oil, olive oil, rapeseed oil, coconut oil, macadamia nut oil, jojoba oil, carnauba wax, sesame oil, cacao oil, palm oil, mink oil, tree wax, candelilla wax, For example, whale wax.
  • oily raw material derived from petroleum and mineral oil examples include paraffin, microcrystalline wax, liquid paraffin, petrolatum, ceresin and the like.
  • Examples of the silicon include methyl polysiloxane, polyoxyethylene-methyl polysiloxane, polyoxypropylene-methyl polyoxysiloxane, poly (oxyethylene, oxypropylene) -methyl polysiloxane, methylphenyl polysiloxane, fatty acid-modified poly Examples include siloxane, aliphatic alcohol-modified polysiloxane, and amino acid-modified polysiloxane.
  • surfactant examples include an anionic surfactant, a nonionic surfactant, a cationic surfactant, and an amphoteric surfactant.
  • anionic surfactant examples include N-long chain acyl amino acid salts, N-long chain fatty acid acyl-N-methyl taurate salts, alkyl sulfates and their alkylene oxide adducts, fatty acid amide ether sulfates, fatty acid metal salts and Examples include weak base salts, sulfosuccinic acid surfactants, alkyl phosphates and their alkylene oxide adducts, and alkyl ether carboxylic acids.
  • N-long chain acyl amino acid salts examples include N-long chain acyl acidic amino acid salts and N-long chain acyl neutral amino acid salts.
  • N-long chain acyl acidic amino acid salt examples include N-long chain acyl glutamate and N-long chain acyl aspartate.
  • N-long chain acyl neutral amino acid salt examples include N-long chain acyl glycine salt, N-long chain acyl alanine salt, N-long chain acyl threonine salt and the like.
  • nonionic surfactant examples include ether type surfactants, ester type surfactants, ether ester type surfactants, alkyl glucosides, hydrogenated castor oil pyroglutamic acid diester and ethylene oxide adducts thereof, and the like.
  • examples thereof include nitrogen type nonionic surfactants.
  • ether type surfactant examples include glycerin ether and its alkylene oxide adduct.
  • ester type surfactant examples include glycerin ester and its alkylene oxide adduct, polyoxyalkylene fatty acid ester, glycerin ester, fatty acid polyglycerin ester, acylamino acid polyglycerin ester, sorbitan ester, and sucrose fatty acid ester. Is mentioned.
  • ether ester type surfactants examples include sorbitan esters and alkylene oxide adducts thereof.
  • nitrogen-containing nonionic surfactant examples include fatty acid alkanolamides.
  • cationic surfactant examples include aliphatic amine salts and their quaternary ammonium salts, aromatic quaternary ammonium salts, fatty acid acyl arginine esters, and alkyloxyhydroxypropyl arginine salts.
  • Examples of the aliphatic amine salt include alkyl ammonium chloride and dialkyl ammonium chloride.
  • aromatic quaternary ammonium salt examples include a benzalkonium salt.
  • amphoteric surfactant examples include betaine type surfactants, aminocarboxylic acid type surfactants, imidazoline type surfactants, and the like.
  • betaine surfactants examples include alkyl betaines, alkylamide betaines, aminopropionates, and carboxybetaines.
  • amino acids examples include glycine, alanine, serine, threonine, arginine, glutamic acid, aspartic acid, leucine, and valine.
  • amino acid derivatives include pyrrolidone carboxylic acid and its salt, trimethylglycine, lauroyllysine and the like.
  • lower alcohols examples include ethanol, propanol, isopropanol, butanol and the like.
  • polyhydric alcohol examples include glycerin, diglycerin, ethylene glycol, 1,3-butylene glycol, propylene glycol, and isoprene glycol.
  • sugar alcohols and alkylene oxide adducts thereof include mannitol and erythritol.
  • water-soluble polymer examples include polyamino acids and salts thereof, polyethylene glycol, gum arabic, alginate, xanthan gum, hyaluronic acid, hyaluronate, chitin, chitosan, water-soluble chitin, carboxyvinyl polymer, carboxymethylcellulose, hydroxy Ethyl cellulose, polyacrylamide, polyvinyl alcohol, polyvinyl pyrrolidone, hydroxypropyltrimethylammonium chloride, polydimethylmethylenepiperidinium chloride, polyvinylpyrrolidone derivative quaternary ammonium, cationized protein, collagen degradation product and derivatives thereof, acylated protein, and polyglycerin Etc.
  • polyamino acids and salts thereof examples include polyethylene glycol, gum arabic, alginate, xanthan gum, hyaluronic acid, hyaluronate, chitin, chitosan, water-soluble chitin,
  • polyamino acid examples include polyglutamic acid and polyaspartic acid.
  • disinfectant and antibacterial agent examples include 4-hydroxybenzoic acid and salts and esters thereof, triclosan, chlorhexidine, phenoxyethanol, menthol, mint oil, glyceryl caprate, glyceryl caprylate, salicylic acid-N-alkylamide, and the like. Can be mentioned.
  • anti-inflammatory agent examples include hinokitiol, hydrocortisone (V), ⁇ -aminocarboxylic acid, azulene, allantoin, glycyrrhizic acid derivative, ⁇ - Examples include glycyrrhetinic acid.
  • the ultraviolet absorber is, for example, an organic substance (photoprotective filter) that is liquid or crystalline at room temperature, absorbs ultraviolet rays, and can release the absorbed energy as longer wavelength radiation (for example, heat). And UV-B filters and UV-A filters.
  • the UV-B filter may be either oil-soluble or water-soluble.
  • oil-soluble substances in the UV-B filter include those shown in the following 1) to 9).
  • Cinnamic acid ester preferably 4-methoxycinnamic acid-2-ethylhexyl ester, 4-methoxycinnamic acid propyl ester, 4-methoxycinnamic acid isopentyl ester, or 2-cyano-3,3-phenylcinnamic acid -2-Ethylhexyl ester [Octocrylene]
  • Salicylic acid ester preferably, salicylic acid-2-ethylhexyl ester, salicylic acid-4-isopropylbenzyl ester, or salicylic acid homomenthyl ester
  • Benzophenone derivatives preferably 2-hydroxy-4-methoxybenzophenone, 2-hydroxy-4-methoxy-4'-methylbenzophenone or 2,2'-dihydroxy-4-methoxybenzophenone
  • Benzalmalonic acid ester (preferably 4-methoxybenzalmalonic acid di-2-ethylhexyl ester)
  • Triazine derivatives for example, 2,4,6-trianilino- (p-carbo-2′-ethyl-1′-hexyloxy) -1,3,5-triazine, octyl-triazone or dioctyl-butamide
  • Triazone [Uvasorb® HEB]
  • water-soluble substances in the UV-B filter include those shown in the following 10) to 12).
  • a sulfonic acid derivative of benzophenone and a salt thereof (preferably 2-hydroxy-4-methoxybenzophenone-5-sulfonic acid and a salt thereof)
  • a sulfonic acid derivative of 3-benzylidene camphor and a salt thereof for example, 4- (2-oxo-3-bornylidenemethyl) -benzenesulfonic acid and 2-methyl-5- (2-oxo-3-bornylidene) -Sulfonic acid)
  • a benzoylmethane derivative is used as the UV-A filter.
  • the benzoylmethane derivative include 1- (4′-t-butylphenyl) -3- (4′-methoxyphenyl) -propane-1,3-dione, 4-t-butyl-4′-methoxydi
  • benzoylmethane Parsol (registered trademark) 1789
  • 1-phenyl-3- (4′-isopropylphenyl) -propane-1,3-dione and enamine compounds.
  • hair restorer examples include pantothenic acid and its derivatives, placenta extract, allantoin and the like.
  • whitening agents include antioxidants, tyrosinase activity inhibitors, ⁇ -MSH ( ⁇ -melanocyte stimulating hormone) antagonists, and the like.
  • antioxidant ascorbic acid etc. are mentioned, for example.
  • tyrosinase activity inhibitor examples include kojic acid, arbutin, ellagic acid, and lucinol.
  • Examples of the ⁇ -MSH antagonist include d-2-Nal-Arg-Leu-NH2.
  • Examples of the antiperspirant, the astringent active ingredient and the sweat deodorant include aluminum, zirconium or zinc salts.
  • Examples of the aluminum, zirconium, or zinc salt include aluminum chloride, aluminum chlorohydrate, aluminum zirconium trichlorohydrate, aluminum zirconium tetrachlorohydrate, and zinc pyrrolidone carboxylate.
  • vitamin agent examples include vitamin A, B 1 , B 2 , B 6 , E, and derivatives thereof.
  • vasodilator examples include assembly extract and cephalanthin.
  • Herbal medicines include, for example, apricot extract, avocado extract, aloe extract, turmeric extract, orange extract, chamomile extract, kiwi extract, ginkgo extract, tea extract, sage extract, assembly extract, tonin extract, rose extract, sunflower extract, grape extract, loofah Extract, peach leaf extract, eucalyptus extract, lavender extract, green tea extract, apple extract, lemon extract, rosemary extract and the like.
  • pH adjuster examples include citric acid, adipic acid, ascorbic acid, phosphoric acid, glutamic acid, lactic acid, sulfuric acid, hydrochloric acid, ammonium, sodium hydroxide, potassium hydroxide, arginine, hydroquinone and derivatives thereof, and ⁇ -oryzanol. Can be mentioned.
  • viscosity modifier examples include agar and organically modified clay mineral.
  • the pearlizing agent examples include alkylene glycol esters, fatty acid alkanolamides, fatty acid monoglycerides, fatty ethers and the like.
  • fragrances examples include plant materials such as flowers, stems and leaves, fruits, fruit skins, roots, trees, needles and branches, resins and balsams, and animal materials such as civets and beavers.
  • Examples of the flower include lily, lavender, rose, jasmine, neroli, and Iran-Iran.
  • stem and leaf examples include geranium, patchouli, petit glen, tarragon, lemongrass, sage, thyme and the like.
  • Examples of the fruit include anise, coriander, caraway, juniper and the like.
  • pericarp examples include bergamot, lemon, orange and the like.
  • root examples include nutmeg, angelica, celery, cardamom, costas, iris, and shobu.
  • Examples of the tree include pine, sandalwood, guaiac, cedar and rosewood.
  • needles and branches examples include spruce, fir, pine, and shrub pine.
  • Examples of the resin and balsam include galvanum, elemi, benzoin, myrrh, frankincense, and opopanax.
  • a relatively low volatile essential oil often used as an aromatic component for example, sage oil, chamomile oil, clove oil, Melissa oil, mint oil, cinnamon leaf oil, lime flower oil, juniper berry oil, vetiver oil , Balm oil, galvanum oil, labdanum oil, lavandin oil, bergamot oil, dihydromyrsenol, lyial, ryal, citronellol, phenylethyl alcohol, ⁇ -hexylcinnamaldehyde, geraniol, benzylacetone, cyclamenaldehyde, linalool, Boisambrene Forte, Ambroxan, Indole, Hedione, Sandelice, Citrus oil, Mandarin oil, Orange oil, Allylpentyl glycolate, Cyclov (Cyclov) rtal), Labandin oil, Clary oil, ⁇ -damascone, geranium oil bourbon, cyclo
  • Examples of synthetic fragrances include esters, ethers, aldehydes, ketones, alcohols, and hydrocarbon-type fragrances.
  • Examples of the dye include Cochineal Red A (C.I. 16255), Patent Blue (C.I. 42051), and Chlorophyrin (C.I.75810).
  • antioxidant examples include tocopherol and sodium sulfite.
  • preservative examples include phenoxyethanol, paraben, pentanediol and the like.
  • emulsifier examples include nonionic surfactants.
  • fats and waxes examples include 12-hydroxystearic acid, lanolin, beeswax, candelilla wax, carnauba wax and the like.
  • silicone compound examples include dimethylpolysiloxane, methylphenylpolysiloxane, cyclic silicone, a modified silicone compound (which can be liquid or resin-like at room temperature), dimethicone having an average chain length of 200 to 300 dimethylsiloxane units, and Examples include simethicone which is a mixture with hydrogenated silicate.
  • types of modification in the modified silicone compound include one or more selected from the group consisting of amino-, fatty acid-, alcohol-, polyether-, epoxy-, fluorine-, glycoside-, and alkyl-. .
  • Perfume oils include mixtures of natural and synthetic fragrances. Natural and synthetic fragrances include those similar to those described above.
  • Example 1 (1) Preparation of Saccharomyces broudus culture (exocrine product) First, Saccharomyces broudi was treated overnight at room temperature using 100 mL of YPD medium (containing 2% peptone, 1% yeast extract, 2% glucose). Cultured with shaking. Next, in the logarithmic growth phase, centrifugation (1000 g at room temperature, 15 minutes) was performed, and the culture supernatant was collected. Next, powdered ammonium sulfate was added to the culture supernatant to 75% saturated ammonium sulfate (516 g for 1 L of sample), cooled in ice water for 1 hour or more, and the precipitate was centrifuged (1000 g at 4 ° C., 15 minutes).
  • the collected precipitate was dissolved in a small amount of distilled water, and dialyzed against a sufficient amount of water using a dialysis membrane having a limit molecular weight of 3500 to remove the remaining ammonium sulfate.
  • the exocrine secretion of Saccharomyces broudi was recovered by freeze-drying and weighed. As a result, about 20 mg of exocrine product was obtained.
  • mouse vascular endothelial cell line TKD2 Cells (National Institute for Healthcare and Nutrition, JCRB Cell Bank, cell number: IFO50374) in a 6-well plate The cells were seeded at 4 ⁇ 10 4 cells / well and cultured overnight at 33 ° C. in a 5% CO 2 environment.
  • ganglioside manufactured by Techno Chemical Co., Ltd., 1060
  • a sweet potato-derived polysaccharide was added to the medium so as to have a final concentration of 100 ⁇ g / mL instead of the exocrine product.
  • Lin28a was induced in TKD2 cells to which 6CiPSs of positive control in lane 2 was added and TKD2 cells to which exocrine product of Saccharomyces broudii in lane 5 was added.
  • expression of Lin28a was not induced in TKD2 cells to which ganglioside and sweet potato-derived polysaccharides were added.
  • Example 2 (1) Preparation of culture (exocrine product) of Saccharomyces broudis
  • Saccharomyces broudy is sometimes referred to as YPD medium (containing 2% peptone, 1% yeast extract, 2% glucose) (hereinafter referred to as “normal culture”).
  • YPD medium containing 2% peptone, 1% yeast extract, 0.2% glucose, 1.8% rhamnose
  • culture method-I YPD medium
  • culture method-II containing 2% peptone, 1% yeast extract, 0.2% glucose, 1.8% ribose
  • FIG. 2 reveals that the expression of Lin28a increases from normal culture to culture method-I and culture method-II. Thus, it was found that the expression inducing effect of Lin28a is remarkably increased by substituting a part of glucose with rhamnose or ribose.
  • Example 3 (1) Preparation of Saccharomyces broudi culture (exocrine product) First, using the same method as in Example 2 (1), exocrine product of Saccharomyces broudi (normal culture) and exocrine secretion of Saccharomyces broudi A product (culture method-I) was prepared.
  • human CD14 positive monocytes (LONZA, 2W-400C) were seeded in a 10 cm dish at 1.5 ⁇ 10 6 cells / dish at 37 ° C. Incubated overnight in a 5% CO2 environment.
  • human recombinant M-CSF had a final concentration of 25 ng / mL, and an exocrine product of Saccharomyces blaudius (usually Culture) or exocrine secretion of Saccharomyces broudii (culture method-I) was added to the medium to a final concentration of 100 ⁇ g / mL and cultured for 2 weeks after the addition.
  • FIG. 3 shows the growth of human mononuclear cells two weeks after the addition of various substances to the medium.
  • FIG. 3 shows that exogenous secretions of rM-CSF and Saccharomyces blaudi (usually more than those added with rM-CSF alone and those added with polysaccharides derived from sweet potato at a final concentration of 100 ⁇ g / mL). Culturing) or Saccharomyces blaudie exocrine secretion (Cultivation method-I) was higher in monocyte proliferation activity.
  • rM-CSF and Saccharomyces blaudi exocrine secretion added to the medium rather than rM-CSF and Saccharomyces blaudi exocrine secretion (normal culture) added to the medium.
  • monocyte proliferative activity was higher.
  • Example 4 It was examined whether cultures of microorganisms other than Saccharomyces broudii have the same Lin28a activation effect. Specifically, Spirulina algae, two kinds of lactic acid bacteria (Enterococcus saccharolyticus ATCC43076 and Lactobacillus rhamnosus ATCC7469) and Aspergillus brasiliensis ATCC16404 were used as microalgae.
  • Example 1 (1) After dialysis, the exocrine products of lactic acid bacteria and Neisseria gonorrhoeae were obtained by freeze-drying. As a control, a culture (exocrine product) of Saccharomyces blaudi was also prepared using the same method as in Example 1 (1).
  • aqueous phase fraction was dialyzed against a sufficient amount of water using a dialysis membrane having a molecular weight limit of 3500. After dialysis, a spirulina algae culture (extract) was obtained by freeze-drying.
  • lane 1 is loaded with fibroblasts supplemented with a culture of Spirulina algae.
  • Lane 2 is loaded with fibroblasts supplemented with the exocrine product of Saccharomyces blaudi.
  • Lane 3 is loaded with fibroblasts to which exocrine products of lactic acid bacteria (Enterococcus saccharolyticus ATCC 43076) are added.
  • Lane 4 is loaded with fibroblasts supplemented with exocrine products of Aspergillus brasiliensis ATCC 16404.
  • lane 5 is loaded with only the YPD medium used for culturing Saccharomyces broudi as a negative control. Also in lane 6, No. 1 used for culturing lactic acid bacteria and koji molds as a negative control. Only 804 medium is loaded.
  • Lin28a was induced in lanes 1 to 4 loaded with fibroblasts supplemented with each microorganism culture. Although not shown, the expression of Lin28a was similarly induced in fibroblasts added with lactic acid bacteria (Lactobacillus rhamnosus ATCC7469). On the other hand, the expression of Lin28a was not induced in lanes 5 and 6 loaded with only the medium.
  • Example 5 (1) Preparation of culture (exocrine product) of Saccharomyces blaudi Using the same method as in (1) of Example 1, an exocrine product of Saccharomyces blaudi (substance in dialysate internal fluid) was obtained. In addition, the dialysis solution was also collected and lyophilized to obtain a substance in the dialysis solution.
  • FIG. 5 shows that no Lin28a expression-inducing activity was observed in the substance in the dialysis external solution.
  • purification was performed using a dialysis membrane having a molecular weight of 3500, which is the exclusion limit, suggesting that a molecule having a molecular weight greater than 3500 contained in Saccharomyces broud exocrine is the active substance. It was done.
  • Example 6 A molecule having Lin28a-inducing activity was purified from a culture of microorganisms, and its composition was analyzed.
  • FIG. 6 revealed that the elution substance with 300 mM NaCl had the highest expression inducing activity of Lin28a in fibroblasts.
  • Table 3 and FIG. 7A show the analysis results of the exocrine product (sample No. 1) of Saccharomyces blaudi obtained in (1). Moreover, the analysis result of the elution substance (sample No. 2) by 300 mM NaCl obtained in (2) is shown in Table 4 and FIG. 7B.
  • FIG. 7A and FIG. 7B it was revealed that the polysaccharide contained in the eluted substance with 300 mM NaCl having high Lin28a expression-inducing activity contains ribose and xylose.
  • the polysaccharide contained in the exocrine product of Saccharomyces broudis contains galactose, mannose, glucose, N-acetylglucosamine, rhamnose and N-acetylgalactosamine in addition to ribose and xylose.
  • the polysaccharide having the Lin28a expression inducing activity contains at least ribose and xylose.
  • the polysaccharide contained in the Lin28a activator of the present embodiment has an activity of inducing expression of Lin28a in cells and further has a prominent monocyte proliferation activity.
  • RNA was recovered from cells cultured under each condition to prepare cDNA. Then, using the same method as described in Example 4 (4) except that the primers shown in Table 2 and the primers shown in Table 5 below were used, the expression of the Sirt1 gene and the TERT gene was subjected to PCR. And monitored.
  • the Sirt1 gene is a sirtuin 1 gene known as a rejuvenation gene.
  • the TERT gene is a telomerase subunit gene.
  • lane 1 is loaded with fibroblasts not added with the exocrine product of Saccharomyces blaudi.
  • Lane 2 is loaded with fibroblasts supplemented with Saccharomyces broud exocrine (10 ⁇ g / mL).
  • Lane 3 is loaded with fibroblasts supplemented with Saccharomyces braud exocrine (30 ⁇ g / mL).
  • FIG. 8 reveals that the expression induction of the Sirt1 gene known as a rejuvenation gene increases depending on the amount of exocrine secretion of Saccharomyces blaudi. This suggests that the polysaccharide contained in the exocrine product of Saccharomyces blaudi can be expected to have a rejuvenating effect.
  • TERT gene which is a subunit of telomerase. From this, it was speculated that the concern about carcinogenesis due to the addition of Saccharomyces braud exocrine was greatly reduced.
  • Example 8 Although data are not shown, the addition of microorganism-derived polysaccharides to the culture had no effect on the growth of human fibroblasts. In contrast, the effect of polysaccharides derived from microorganisms on the proliferation of undifferentiated cells was examined.
  • Bone marrow cells were obtained from transgenic rats prepared so that Luciferase was expressed throughout the body and cultured. Next, the adherent cells were removed by trypsin (manufactured by Thermo Fisher Scientific, Trypsin-EDTA, 25200056), and further cultured. For culture, FBS-containing DMEM (Thermo Fisher Scientific, 21063) having a final concentration of 20% was used.
  • FIG. 9 reveals that the number of bone marrow cells increases depending on the concentration of the exocrine secretion of Saccharomyces blaudi. This suggests that the use of the above-mentioned polysaccharides derived from microorganisms can minimize the invasion when collecting undifferentiated cells such as bone marrow, which are attracting attention as a source of cell therapy, from the human body. It was. In addition, by using the above-mentioned polysaccharides derived from microorganisms, it is effective in realizing regenerative medicine in which undifferentiated cells effective for treatment are propagated in the body, that is, cell culture outside the body is not required. It was suggested.
  • an effective Lin28a activator and an efficient dedifferentiation inducer can be provided.
  • the therapeutic agent of this embodiment contains the polysaccharide containing 1 or more types selected from the group which consists of ribose, xylose, and derivatives thereof, and can activate Lin28a. This makes it possible to treat a disease related to cell, tissue, or organ damage with less invasiveness and more effectively than surgery including transplantation or cell therapy.
  • the food / beverage products of this embodiment contain the polysaccharide containing 1 or more types selected from the group which consists of ribose, xylose, and those derivatives, and can activate Lin28a.
  • the cosmetic product of the present embodiment includes a polysaccharide containing one or more selected from the group consisting of ribose, xylose, and derivatives thereof, and can activate Lin28a.
  • the polysaccharides are harmless, it is considered that there are few problems with daily ingestion. Therefore, a safe and effective cosmetic product can be provided.

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Abstract

Ｌｉｎ２８ａ活性化剤は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有する。単球の脱分化誘導剤は、マクロファージコロニー刺激因子と、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類と、を有効成分として含有する。細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療剤は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有する。細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の予防又は軽減用飲食品は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する。化粧品は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する。

Description

Ｌｉｎ２８ａ活性化剤及びその使用
　本発明は、Ｌｉｎ２８ａ活性化剤及びその使用に関する。具体的には、本発明は、多糖類を有効成分として含有するＬｉｎ２８ａ活性化剤、単球の脱分化誘導剤、治療剤、飲食品及び化粧品に関する。
　本願は、２０１６年９月１４日に、日本に出願された特願２０１６－１７９５９８号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
　疾患に対する根本的な治療方法として、細胞、組織又は器官が欠損した場合に幹細胞等を用いて修復することによりその機能を回復させる方法、すなわち再生医療が挙げられる。近年、再生医療では、幹細胞から目的とする組織や器官を形成させてから移植する方法だけでなく、幹細胞又は組織細胞の前駆細胞を疾患部位に注入し、疾患部位にて再生及び修復を行う方法、すなわち細胞医薬の活用が検討されている。
　しかしながら、幹細胞又は組織細胞の前駆細胞を疾患患部に注入するためには、大量の細胞を要する。
　細胞医療に使用される幹細胞の生産方法として、例えば、末梢血由来単球をマクロファージコロニー刺激因子（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ　ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ；Ｍ－ＣＳＦ）等の特定のサイトカイン存在下で培養することで幹細胞に脱分化させる方法等が挙げられる（例えば、非特許文献１、２参照）。
さらに効率的な幹細胞の生産方法としては、例えば、末梢血由来単球をＭ－ＣＳＦ、並びにガングリオシド（糖脂質）及び水溶性植物抽出物からなる群から選ばれる少なくとも１種の存在下で培養し、脱分化させる方法等が挙げられる（例えば、特許文献１参照）。
一方、Ｌｉｎ２８ａは、胎児期に一過的に発現するＲＮＡ結合タンパク質であり、ＥＳ細胞にも発現が認められるが、その分化の進展に伴い発現は低下することが知られている。２００７年に山中らによってヒトの細胞に４つの遺伝子（Ｏｃｔ３／４，ＳＯＸ２，Ｃ－ｍｙｃ，Ｋｌｆ４）を導入することでｉＰＳ細胞が樹立できることが発表された（例えば、非特許文献３参照）。また、同日にジャームズ・トムソンらによってもヒト細胞に４つの遺伝子（Ｏｃｔ３／４，ＳＯＸ２，Ｎａｎｏｇ，Ｌｉｎ２８ａ）を導入することでＥＳ細胞様の多分化能を有する細胞が樹立できることが示された（例えば、非特許文献４参照）。このことから、Ｌｉｎ２８ａが未分化状態の維持又は誘導に必要であることが判る。
山中４因子によるｉＰＳ細胞の樹立は、高齢者由来の体細胞では困難であるとされてきた。しかしながら、山中４因子に加え、Ｎａｎｏｇ、Ｌｉｎ２８ａを導入することで１０１歳という高齢者由来の体細胞からでもｉＰＳ細胞が誘導されることが発表された（例えば、非特許文献５参照。）。これにより、老化した細胞の初期化に寄与するＬｉｎ２８ａの持つ潜在的なポテンシャルに強い関心が注がれた。さらに２０１３年には、Ｌｉｎ２８ａの発現を、胎児期に止まらず、成体になってからも維持した場合における影響について興味深い論文が発表された（例えば、非特許文献６参照。）。これにより、Ｌｉｎ２８ａは組織修復因子として決定的に認知されるに至った。すなわち、Ｌｉｎ２８ａの発現を成体になっても維持することで、発毛が促進され、耳組織では、個体識別のために開けられた穴を開けても修復されて塞がり、仔マウスのときに個体識別のために切断した指先は再生されることが報告された。
再公表ＷＯ２０１０／０６１７８１号公報
Ruhnke M, et al., "Differentiation of in vitro-modified human peripheral blood monocytes into hepatocyte-like and pancreatic islet-like cells", Gastroenterology, vol.128, no.7, p1774-1786, 2005. Zhao Y, et al., "A human peripheral blood monocyte-derived subset acts as pluripotent stem cells", PNAS, vol.100, no.5, p2426-2431, 2003. Yamanaka S, et al., "Induction of Pluripotent Stem Cells from Adult Human Fibroblasts by Defined Factors", Cell, vol.131, issue 5, p861-872, 2007. Thomson J A, et al., "Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells", Science, vol.318, issue 5858, p1917-1920, 2007. Lapasset L, et al., "Rejuvenating senescent and centenarian human cells by reprogramming through the pluripotent state", Genes Dev., vol.25, p2248-2253, 2011. Ng Shyh-Chang, et al., "Lin28 Enhances Tissue Repair by Reprogramming Cellular Metabolism", Cell, vol.155, issue 4, p778-792, 2013.
　特許文献１に記載の幹細胞の生産方法では、Ｍ－ＣＳＦとともに、ガングリオシド及び水溶性植物抽出物からなる群から選ばれる少なくとも１種を含むことにより、効率的に単球を幹細胞に脱分化させることができる。しかしながら、より効率的に脱分化を誘導できる物質が求められていた。
　また、ＲＮＡ結合タンパク質であるＬｉｎ２８ａが、成長因子のように振る舞う理由については、その機能の全容解明も含めて判明しておらず、現在までに、細胞の代謝を早めることが解明されているに過ぎなかった。また、Ｌｉｎ２８ａの発現を誘導し、Ｌｉｎ２８ａを活性化する物質は知られていなかった。
　従って、本発明は上記事情を鑑みてなされたものであり、新規のＬｉｎ２８ａ活性化剤及び効率的な脱分化誘導剤を提供する。
　本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、特定の酵母の培養物に含まれる多糖類がＬｉｎ２８ａを活性化し、さらに単球を効率的に幹細胞に脱分化させることを見出し、本発明を完成するに至った。
　すなわち、本発明は、以下の態様を含む。
本発明の第１態様に係るＬｉｎ２８ａ活性化剤は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有する。
　上記第１態様に係るＬｉｎ２８ａ活性化剤において、前記多糖類は、更に、ガラクトース、マンノース、グルコース、Ｎ－アセチルグルコサミン、ラムノース、Ｎ－アセチルガラクトサミン及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含んでもよい。
　上記第１態様に係るＬｉｎ２８ａ活性化剤において、前記多糖類の分子量が３５００以上であってもよい。
　上記第１態様に係るＬｉｎ２８ａ活性化剤において、前記多糖類は、微生物に由来してもよい。
　上記第１態様に係るＬｉｎ２８ａ活性化剤において、前記微生物が、酵母、微細藻類、乳酸菌又は麹菌であってもよい。
　上記第１態様に係るＬｉｎ２８ａ活性化剤において、前記酵母がサッカロミセス・ブラウディであってもよい。
　本発明の第２態様に係る単球の脱分化誘導剤は、マクロファージコロニー刺激因子と、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類と、を有効成分として含有する。
　上記第２態様に係る単球の脱分化誘導剤において、前記多糖類は、更に、ガラクトース、マンノース、グルコース、Ｎ－アセチルグルコサミン、ラムノース、Ｎ－アセチルガラクトサミン及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含んでもよい。
　上記第２態様に係る単球の脱分化誘導剤において、前記多糖類の分子量が３５００以上であってもよい。
　本発明の第３態様に係る細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療剤は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有する。
　上記第３態様に係る細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療剤において、前記疾患が外傷、膵炎、放射線損傷、皮膚筋炎、多発性筋炎、壊死性筋膜炎、慢性気管支炎、骨折、骨粗鬆症、骨軟骨骨折、骨軟骨炎、拡張型心筋症、心筋梗塞、虚血性心筋症、心不全、心筋肥大、うっ血性心不全、再狭窄、不整脈、アテローム性動脈硬化症、血管炎、末梢ニューロパシー、ニューロパシー痛、脳卒中、脳炎、髄膜炎、糖尿病性ニューロパシー、注意欠陥障害、自閉症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト－ヤコブ病、脳外傷、脊髄外傷、脳虚血、肝硬変、慢性肝炎、慢性腎不全、糸球体腎炎、腎虚血、糖尿病、アトピー性皮膚炎、又は、移植片対宿主病であってもよい。
　本発明の第４態様に係る細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の予防又は軽減用飲食品は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する。
　上記第４態様に係る細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の予防又は軽減用飲食品において、前記疾患が外傷、膵炎、放射線損傷、皮膚筋炎、多発性筋炎、壊死性筋膜炎、慢性気管支炎、骨折、骨粗鬆症、骨軟骨骨折、骨軟骨炎、拡張型心筋症、心筋梗塞、虚血性心筋症、心不全、心筋肥大、うっ血性心不全、再狭窄、不整脈、アテローム性動脈硬化症、血管炎、末梢ニューロパシー、ニューロパシー痛、脳卒中、脳炎、髄膜炎、糖尿病性ニューロパシー、注意欠陥障害、自閉症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト－ヤコブ病、脳外傷、脊髄外傷、脳虚血、肝硬変、慢性肝炎、慢性腎不全、糸球体腎炎、腎虚血、糖尿病、アトピー性皮膚炎、又は、移植片対宿主病であってもよい。
本発明の第５態様に係る化粧品は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する。
上記態様のＬｉｎ２８ａ活性化剤によれば、効果的にＬｉｎ２８ａを活性化できる。上記態様の脱分化誘導剤によれば、効率的に分化した細胞の脱分化を誘導できる。
実施例１における各種物質を培地に添加したマウス血管内皮細胞株ＴＫＤ２細胞でのＬｉｎ２８ａの発現誘導能を比較した結果を示す画像である。 実施例２におけるサッカロミセス・ブラウディの培養方法が異なる培養物を培地に添加したマウス血管内皮細胞株ＴＫＤ２細胞でのＬｉｎ２８ａの発現誘導能を比較した結果を示す画像である。 実施例３における各種物質を培地に添加したヒト単核球の増殖の様子を示す画像である。 実施例４における各微生物の培養物を培地に添加したヒト線維芽細胞でのＬｉｎ２８ａの発現誘導能を比較した結果を示す画像である。 実施例５における透析外液中の物質及びサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（透析内液中の物質）を培地に添加したヒト線維芽細胞でのＬｉｎ２８ａの発現誘導能を比較した結果を示す画像である。 実施例６における各溶出物質を培地に添加したヒト線維芽細胞でのＬｉｎ２８ａの発現誘導能を比較した結果を示す画像である。 実施例６におけるサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（陰イオン交換クロマトグラフィーによる精製前）の単糖組成分析結果を示すグラフである。 実施例６におけるサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を用いた陰イオン交換クロマトグラフィーで３００ｍＭのＮａＣｌで溶出された物質（陰イオン交換クロマトグラフィーによる精製後）の単糖組成分析結果を示すグラフである。 実施例７におけるサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を培地に添加したヒト線維芽細胞でのＬｉｎ２８ａ、Ｓｉｒｔ１及びＴＥＲＴの発現誘導能を比較した結果を示す画像である。 実施例８における異なる濃度のサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を培地に添加して培養したラット骨髄細胞の細胞数を比較したグラフである。
≪Ｌｉｎ２８ａ活性化剤≫
　一実施形態において、本発明は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有するＬｉｎ２８ａ活性化剤を提供する。
　本実施形態のＬｉｎ２８ａ活性化剤によれば、効果的にＬｉｎ２８ａの発現を誘導し、Ｌｉｎ２８ａを活性化させることができる。
＜Ｌｉｎ２８ａ＞
　一般に、Ｌｉｎ２８ａとは、胎児期に一過的に発現するＲＮＡ結合タンパク質であり、ＥＳ細胞においても発現が認められるが、その分化の進展に伴い発現が低下するものである。また、Ｌｉｎ２８ａの発現を成体になっても維持することで、発毛が促進され、耳組織では、個体識別のために開けられた穴を開けても修復されて塞がり、仔マウスのときに個体識別のために切断した指先は再生されることが報告されている。そのため、Ｌｉｎ２８ａは組織修復因子として認知されている。よって、Ｌｉｎ２８ａの発現を誘導し、Ｌｉｎ２８ａを活性化させることにより、細胞、組織又は器官の損傷を修復することができる。
　本発明者らは、Ｌｉｎ２８ａの発現を誘導し、Ｌｉｎ２８ａを活性化させる物質として、後述の実施例に示すように、サッカロミセス・ブラウディ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｂｏｕｌａｒｄｉｉ）の培養物に含まれる多糖類を見出した。
＜多糖類＞
　本実施形態のＬｉｎ２８ａ活性化剤に含まれる多糖類は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む。
　また、前記リボース及びキシロースの誘導体としては、これら単糖が有するヒドロキシ基（－ＯＨ）がアミノ基（－ＮＨ２）に置換されたアミノ糖や、主鎖の末端のヒドロキシメチル基 （－ＣＨ２ＯＨ） がカルボキシ基（－ＣＯＯＨ）に置換されたウロン酸等が挙げられる。
　中でも、前記多糖類は、リボース及びキシロースを含むことが好ましい。後述の実施例に示すように、リボース及びキシロースを含む多糖類は、顕著なＬｉｎ２８ａの活性化効果を有する。
　前記多糖類に含まれるキシロースのモル量に対するリボースのモル量の比率（Ｒ／Ｘ）は、１／１以上１０／１以下であることが好ましく、３／１以上９／１以下であることより好ましく、５／１以上８／１以下であることがさらに好ましい。
　また、前記多糖類は、更に、ガラクトース、マンノース、グルコース、Ｎ－アセチルグルコサミン、ラムノース、Ｎ－アセチルガラクトサミン及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含んでもよい。
　また、上述の６種の単糖の誘導体としては、上述のリボース及びキシロースの誘導体として例示されたものと同様のものが挙げられる。
　前記多糖類が、更に、ガラクトース、マンノース、グルコース、Ｎ－アセチルグルコサミン、ラムノース、Ｎ－アセチルガラクトサミン及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む場合、前記多糖類に含まれるこれら６種の単糖及びそれらの誘導体の合計モル量（Ｂ）に対するリボース、キシロース及びそれらの誘導体の合計モル量（Ａ）の比率（Ａ／Ｂ）は、例えば１／２以上１００／１以下とすることができ、例えば１／１以上５０／１以下とすることができる。前記多糖類に含まれる、上述の６種の単糖及びそれらの誘導体の合計モル量（Ｂ）に対するリボース、キシロース及びそれらの誘導体の合計モル量（Ａ）の比率が高いほど、より効果的にＬｉｎ２８ａを活性化することができる。
　前記多糖類の分子量は、後述の実施例に示すように、３５００以上であることが好ましく、３５００以上１５０００以下であることがより好ましい。前記多糖類の分子量が上記下限値以上であることにより、より効果的なＬｉｎ２８ａ活性を発揮することができる。
［微生物］
　本実施形態に含まれる上述の多糖類は、化学的に合成されたものであってもよく、微生物から得られたものであってもよい。
　上述の多糖類の由来となる微生物としては、例えば、酵母、微細藻類、乳酸菌、麹菌等が挙げられ、これらに限定されない。中でも、微生物としては酵母であることが好ましい。
　前記酵母としては、例えば、サッカロミセス・ブラウディ等が挙げられる。
　一般に、サッカロミセス・ブラウディ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｂｏｕｌａｒｄｉｉ）とは、フランス人微生物学者であるＢｏｕｌａｒｄ博士がベトナムにて現地の人々がライチから作られた飲み物を飲むことでコレラの下痢が緩和されることを発見し、この飲み物から単離されたフルーツ酵母である。
前記サッカロミセス・ブラウディとしては、特別な限定はなく、具体的には、例えば、ＡＴＣＣ　ＭＹＡ－７９６株又はＡＴＣＣ　ＭＹＡ－７９７株等が挙げられる。
　前記微細藻類としては、原核生物と真核生物とに分けられる。前記原核生物としては、例えば、藍藻、原緑藻等が挙げられる。前記真核生物としては、例えば、金藻、ハプト藻、黄緑藻、真眼点藻、珪藻、渦鞭毛藻、ラフィド藻、クリプト藻、緑虫藻、プラシノ藻等の真核生物等が挙げられる。中でも、微細藻類としては、藍藻が好ましい。
　前記藍藻としては、例えば、ハロテース属、ダクチロコッコプシス属、シアノテース属、オルソスピラ属、スピルリナ属、ハロスピルリナ属、ゲイトラリネマ属、プロクロロコッカス属、シネココッカス属、リングビア属、モオレア属、トリコデスミウム属、オシラトリア等に属する藻類が挙げられる。
　前記乳酸菌としては、例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属菌、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属菌、Ｌａｃｔｏｏｃｃｕｓ属菌、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属菌、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ属菌、Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ属菌等が挙げられる。
前記Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属菌としては、例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｕｃｈｎｅｒｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ等が挙げられる。
　前記Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属菌としては、例えば、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｃｉｔｒｅｕｍ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ等が挙げられる。
　前記Ｌａｃｔｏｏｃｃｕｓ属菌としては、例えば、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ等が挙げられる。
　前記Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属菌としては、例えば、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｃｉａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ等が挙げられる。
　前記Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ属菌としては、例えば、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ等が挙げられる。
　前記Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ属菌としては、例えば、Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ  ｃｏｎｆｕｓｅ、Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ  ｏｒｙｚｅ等が挙げられる。
　前記麹菌としては、例えば、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓｏｊａｅ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｔａｍａｒｉｉ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｋａｗａｃｈｉｉ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ａｗａｍｏｒｉ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓａｉｔｏｉ等が挙げられる。
　本実施形態のＬｉｎ２８ａ活性化剤において、前記多糖類を含有する組成物として、微生物の培養物を用いてもよい。又は、微生物の培養物から前記多糖類のみを分離及び精製して用いてもよい。前記微生物の培養物には、微生物の破砕液（例えば、酵母エキス）、懸濁液及び培養上清が含まれる。また、微生物の培養物は液体であってもよく、乾燥体（例えば、乾燥菌体、培養上清を乾燥させたもの等）であってもよい。また、本実施形態のＬｉｎ２８ａ活性化剤において、前記多糖類を含有する組成物として、微生物の菌体を含んだ状態のものを用いてもよい。
　用途によって異なるが、医療又は外用化粧品等の用途で用いる場合においては、被検体の体内に直接投与又は注入（例えば、経口的、経皮的、静脈内、腹腔内等）するため少量で高い効果が得られ、高純度で安全性が高いことが求められる。このことから、医療又は外用化粧品等の用途で用いる場合においては、微生物の培養物に含まれる多糖類のみを分離及び精製したものを用いることが好ましい。
　一方、健康食品等の飲食品、内服用化粧品又は単球の脱分化のための培養等の用途で用いる場合においては、微生物の菌体にはミネラル及びアミノ酸類等の栄養が豊富に含まれている。このことから、健康食品等の飲食品、内服用化粧品又は単球の脱分化のための培養等の用途で用いる場合においては、微生物の菌体を含んだ状態のものを用いることが好ましい。
　本実施形態において、微生物の培養物に含まれる多糖類の構造は同定されていないが、分子量が約３５００以上約１５０００以下であることが好ましい。また、培養物の液体状態におけるｐＨは例えば、４以上９以下であればよい。
　本実施形態における微生物の培養物は、微生物の培養に用いられる一般的な培地を用いて、当該微生物を培養することで得ることができる。
　前記培地としては、微生物が酵母及び微細藻類である場合、例えば、ＹＰＤ培地（２％ペプトン、１％酵母エキス、２％グルコース含有）、グルコースの一部をラムノースに代替したＹＰＤ培地、グルコースの一部をリボースに代替したＹＰＤ培地等が挙げられ、これに限定されない。中でも、培地としては、グルコースの一部をラムノースに代替したＹＰＤ培地、又は、グルコースの一部をリボースに代替したＹＰＤ培地であることが好ましく、グルコースの一部をリボースに代替したＹＰＤ培地であることがより好ましい。
　前記培地としては、微生物が乳酸菌及び麹菌である場合、例えば、Ｎｏ．８０４培地等が挙げられ、これらに限定されない。なお、ここでいう「Ｎｏ．８０４培地」とは、ハイポリペプトン５g、酵母エキス５g、グルコース５g、及び、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ１ｇを１Ｌの水に溶解し滅菌した培地である。
　培養して増殖した微生物の培養物をそのまま用いてもよい。
　又は、微生物の培養物からそのエキスを調製してもよい。エキスの調製方法としては、例えば、菌体内に本来あるタンパク質分解酵素等を利用して菌体を可溶化する自己消化法、微生物や植物由来の酵素製剤を添加して菌体を可溶化する酵素分解法、熱水中に一定時間浸漬することにより菌体を可溶化する熱水抽出法、種々の酸あるいはアルカリを添加して菌体を可溶化する酸又はアルカリ分解法、凍結及び融解を１回以上行うことにより菌体を破砕する凍結融解法、物理的な刺激により菌体を破砕する物理的破砕法等が挙げられる。前記物理的破砕法において用いられる物理的刺激としては、例えば、超音波処理、高圧下におけるホモジェナイズ、グラスビーズ等の固形物との混合による磨砕等が挙げられる。
　又は、微生物の培養物を乾燥処理して、乾燥菌体を調製してもよい。乾燥処理方法としては、例えば、凍結乾燥法、スプレードライ法、ドラムドライ法等が挙げられる。さらに、得られた乾燥菌体を粉末状に加工することにより、取り扱い性に優れた乾燥菌末を得ることができる。
　又は、微生物の培養物から多糖類を含有する分画物を調製してもよい。培養物から多糖類を含有する分画物を分画する方法としては、例えば、熱水抽出、菌体破砕（例えば、上述のエキスの調整方法と同様の方法等）による抽出等により得られた抽出物を、遠心分離、透析、多糖類と親和性の高い物質を担持したアフィニティカラム等を用いて分画することにより、多糖類を高濃度に含む画分に濃縮精製することが可能となる。
≪単球の脱分化誘導剤≫
　一実施形態において、本発明は、マクロファージコロニー刺激因子と、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類と、を有効成分として含有する単球の脱分化誘導剤を提供する。
　本実施形態の脱分化誘導剤によれば、単球を脱分化させることができ、増殖効率が高いことから、少量の単球から大量の幹細胞を得ることができる。
＜Ｍ－ＣＳＦ＞
　一般に、マクロファージコロニー刺激因子（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ　ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ；Ｍ－ＣＳＦ）は、分子量約２２０００の膜結合型及び分子量約４２０００の分泌型が存在する。これらはジスルフィド結合により、分子量約４５０００（２２０００の二量体）の膜結合型、分子量約８５０００（４２０００の二量体）の分泌型及び分子量約８５０００の分泌型（４２０００の二量体）にさらにプロテオグリカンが結合した高分子量型が存在する。本実施形態の脱分化誘導剤においては、これらのいずれを使用してもよい。中でも、本実施形態の脱分化誘導剤に用いられるＭ－ＣＳＦとしては、分子量約４２０００の分泌型、分子量約８５０００（４２０００の二量体) の分泌型、又は、分子量約８５０００の分泌型（４２０００の二量体）にさらにプロテオグリカンが結合した高分子量型であることが好ましい。
また、Ｍ－ＣＳＦの由来は、使用する単球と同じ動物由来のものであればよく、哺乳動物であることが好ましい。前記哺乳動物としては、例えば、ヒト、ウマ、ウシ、サル、チンパンジー、ブタ、ヒツジ、ウサギ、マウス、ラット、イヌ、ネコ等が挙げられ、これらに限定されない。中でも、哺乳動物としては、ヒト、サル、チンパンジー等の霊長類が好ましく、ヒトが特に好ましい。
Ｍ－ＣＳＦは、天然物を精製して使用してもよく、遺伝子組換えにより製造したものを使用してもよい。遺伝子組換えにより製造したものとしては、例えばＭ－ＣＳＦは少なくともＮ末端から１５３番目辺りまでのアミノ酸があれば、天然型と同程度の比活性を有することが判明しており、このような糖鎖を持たない大腸菌発現の組換え体等が挙げられる。
＜多糖類＞
　本実施形態の脱分化誘導剤に用いられる多糖類としては、上述の「Ｌｉｎ２８ａ活性化剤」において例示されたものと同様のものが挙げられる。
＜単球＞
　本明細書において、「単球」とは、Ｍ－ＣＳＦ受容体（Ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ－１　ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ｃ－ｆｍｓ）を有する単球系細胞（単球、単核球及び単芽球を含む）を意味する。単核球を用いた場合、その中に含まれる単球のみが増殖するため、単核球を脱分化の対象細胞として用いてもよい。
本実施形態における単球は、哺乳動物由来のものであることが好ましい。前記哺乳動物としては、例えば、ヒト、ウマ、ウシ、サル、チンパンジー、ブタ、ヒツジ、ウサギ、マウス、ラット、イヌ、ネコ等が挙げられ、これらに限定されない。中でも、哺乳動物としては、ヒト、サル、チンパンジー等の霊長類が好ましく、ヒトが特に好ましい。
また、単球は、例えば、骨髄、血液等から得ることができ、低侵襲で得ることから、好ましくは血液、特に好ましくは末梢血から得られた単球を用いることができる。
　血液等の生体試料から単球を分離及び精製する方法としては公知の方法を用いればよく、例えば血球分離溶液Ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ（登録商標）（リンホプレップ、コスモ・バイオ社製）を用いて血液から単核球を分離する方法、さらにＣＤ１４の表面抗原を認識する抗体磁気ビーズ（ミルテニー・バイオテク社製）を用いて、前記分離された単核球から単球を分離及び精製する方法等が挙げられる。
　また、ヒト単球である場合、市販品を用いてもよく、市販品としては、例えばＰＴ０３８（ＬＯＮＺＡ社製）等が挙げられる。
＜単球の脱分化方法＞
　本実施形態の脱分化誘導剤を含む培地を用いて、単球を培養することにより、単球を脱分化し、幹細胞を高い増殖効率にて増殖させて、得ることができる。
　培地に含まれるＭ－ＣＳＦの濃度としては、５ｎｇ／ｍＬ以上１００ｎｇ以下であることが好ましく、２５ｎｇ／ｍＬであることがより好ましい。
　また、培地に含まれる多糖類の濃度としては、１μｇ／ｍＬ以上３００μｇ／ｍＬ以下であることが好ましい。
　単球の培養に用いられる培地としては、単球の生存増殖に必要な成分（無機塩、炭水化物、ホルモン、必須アミノ酸、非必須アミノ酸、ビタミン）等を含む基本培地であればよく、単球の由来により適宜選択することができる。前記培地としては、例えば、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ’ｓ　Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）、Ｍｉｎｉｍｕｍ　Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　Ｍｅｄｉｕｍ（ＭＥＭ）、ＲＰＭＩ－１６４０、Ｂａｓａｌ　Ｍｅｄｉｕｍ　Ｅａｇｌｅ（ＢＭＥ）、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ’ｓ　Ｍｅｄｉｕｍ：Ｎｕｔｒｉｅｎｔ　Ｍｉｘｔｕｒｅ　Ｆ－１２（ＤＭＥＭ／Ｆ－１２）、Ｇｌａｓｇｏｗ　Ｍｉｎｉｍｕｍ　Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　Ｍｅｄｉｕｍ（Ｇｌａｓｇｏｗ ＭＥＭ）等が挙げられる。さらに、血清成分として、例えば、ＦＢＳ／ＦＣＳ（Ｆｅｔａｌ　Ｂｏｖｉｎｅ／Ｃａｌｆ　Ｓｅｒｕｍ）、ＮＣＳ（Ｎｅｗｂｏｒｎ　Ｃａｌｆ　ｓｅｒｕｍ）、ＣＳ（Ｃａｌｆ　Ｓｅｒｕｍ）、ＨＳ（Ｈｏｒｓｅ　Ｓｅｒｕｍ）等を１～２０％程度加えてもよい。
　単球の培養条件としては、例えば、５％二酸化炭素存在下で、３７℃にて７日以上１４日以下培養すればよい。得られた細胞が脱分化された幹細胞であるかについては、後述の「幹細胞」に示す未分化マーカーの発現量をＲＴ－ＰＣＲ等を用いて確認すればよい。
＜幹細胞＞
　また、本明細書において、「幹細胞」とは、未分化マーカーを発現し自己複製能を有するものである。本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞は、単球から大量に調製することができる。また、幹細胞は、分化誘導することができ、好ましくは多能性分化能を有する。本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞は、ＣＤ１４及びＣＤ４５が陽性である。
　本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞の特徴としては、ＣＸＣＲ４遺伝子の有意に強い発現等が挙げられる。また、Ｎａｎｏｇ、Ｎｅｓｔｉｎ、ｃ－Ｋｉｔ、ＣＤ９及びＯｃｔ３／４の少なくとも１種、好ましくは少なくとも２種、より好ましくは少なくとも３種、さらに好ましくは少なくとも４種、特に好ましくはＮａｎｏｇ、Ｎｅｓｔｉｎ、ｃ－Ｋｉｔ、ＣＤ９及びＯｃｔ３／４遺伝子全てが発現されていること等が挙げられる。
　本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞と、他の脱分化幹細胞との大きな違いは、細胞のホーミング作用に関係するＣＸＣＲ４遺伝子の強い発現である。本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞は、単球をＭ－ＣＳＦ単独存在下で培養して得られた幹細胞と比較した場合、ＣＸＣＲ４遺伝子が有意に強く発現している。
より具体的には、例えば、本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞では、ＲＴ－ＰＣＲで解析した場合に、ＣＸＣＲ４遺伝子の発現量は、単球をＭ－ＣＳＦ単独、Ｍ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３、Ｍ－ＣＳＦ＋ＩＬ－６＋ＬＩＦ等存在下で培養して得られた幹細胞での発現量に対して３倍以上、特に４倍以上である。
また、本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞では、骨髄由来の間葉系幹細胞と比較してもＣＸＣＲ４遺伝子が有意に強く発現している。具体的にはＲＴ－ＰＣＲで解析した場合に、ＣＸＣＲ４遺伝子の発現量は、骨髄由来の間葉系幹細胞での発現量に対して２倍以上、好ましくは３倍以上である。
　ＣＸＣＲ４受容体に対するリガンドＳＤＦ１は、骨折時の損傷組織、循環系統の疾患、又は、神経組織の損傷部位等に発現していることが判明している。そのため、ＳＤＦ１のより強い発現は、細胞医薬の観点から、本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞の損傷部位へのホーミング効果をより強く持たせる上で、効果的である。
　本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞は、患部に直接投与又は注入することにより、疾患の治療に用いることができる。患部に直接投与又は注入する前に、幹細胞を適切な培地で培養し、増殖させてから患部に直接投与又は注入することが好ましい。幹細胞の培養培地としては、一般的な細胞培養用の培地を使用してもよく、脱分化誘導培地を使用してもよい。
　前記培地としては、上述の「単球の脱分化方法」において例示されたものと同様のものが挙げられる。また、脱分化誘導培地としては、分化の維持に必要な細胞外マトリックス、増殖因子、サイトカイン等を含まない培地であればよく、すなわち未知の成分を含有する血清を含まない無血清培地であることが好ましい。無血清培地としては、例えば、ＵｌｔｒａＣＵＬＴＵＲＥ（登録商標）無血清培地（ＬＯＮＺＡ社製）等が挙げられ、これに限定されない。
　本実施形態の脱分化誘導剤により得られる幹細胞を用いて治療することができる疾患としては、例えば、外傷、炎症性疾患、骨又は軟骨の損傷、循環器疾患、神経疾患、肝疾患、腎疾患、糖尿病、アトピー性皮膚炎、移植片対宿主病（ｇｒａｆｔ　ｖｅｒｓｕｓ　ｈｏｓｔ　ｄｉｓｅａｓｅ；ＧＶＨＤ）等が挙げられる。
前記炎症性疾患としては、例えば、膵炎、放射線損傷、皮膚筋炎、多発性筋炎、壊死性筋膜炎、慢性気管支炎等が挙げられる。
前記骨又は軟骨の損傷としては、例えば、骨折、骨粗鬆症、骨軟骨骨折、骨軟骨炎等が挙げられる。
前記循環器疾患としては、例えば、拡張型心筋症、心筋梗塞、虚血性心筋症、心不全、心筋肥大、うっ血性心不全、再狭窄、不整脈、アテローム性動脈硬化症、血管炎等が挙げられる。
前記神経疾患としては、例えば、末梢ニューロパシー、ニューロパシー痛、脳卒中、脳炎、髄膜炎、糖尿病性ニューロパシー、注意欠陥障害、自閉症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト－ヤコブ病、脳外傷、脊髄外傷、脳虚血等が挙げられる。
前記肝疾患としては、例えば、肝硬変、慢性肝炎等が挙げられる。
前記腎疾患としては、例えば、慢性腎不全、糸球体腎炎、腎虚血等が挙げられる。
≪治療剤≫
　一実施形態において、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有する細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療剤を提供する。
　本実施形態の治療剤によれば、移植又は細胞医療を含む外科手術よりも低侵襲で効果的に細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患を治療することができる。
　本実施形態の治療剤を生体内に投与することにより、治療剤に含まれる多糖類が疾患部に到達することで、疾患部でのＬｉｎ２８ａの発現を誘導し、Ｌｉｎ２８ａを活性化させる。これにより、細胞、組織又は器官の損傷を修復することができる。また、前記多糖類は、生体内に既存するＭ－ＣＳＦと協同して単球を幹細胞に脱分化させて、この幹細胞が疾患部に到達することで、各種の疾患を治療することができる。
　また、本実施形態の治療剤をインビトロ系において損傷を受けた細胞、組織又は器官に投与することにより、治療剤に含まれる多糖類が損傷を受けた細胞でのＬｉｎ２８ａの発現を誘導し、Ｌｉｎ２８ａを活性化させる。これにより、インビトロ系において細胞、組織又は器官の損傷を修復することができる。
　本明細書において、「細胞」としては、例えば、生殖細胞（精子、卵子等）、生体を構成する体細胞、幹細胞、前駆細胞、生体から分離され不死化能を獲得して体外で安定して維持される細胞（細胞株）、生体から分離され人為的に遺伝子改変された細胞、生体から分離され人為的に核が交換された細胞等が挙げられ、これらに限定されない。
　生体を構成する体細胞としては、例えば、皮膚、腎臓、脾臓、副腎、肝臓、肺、卵巣、膵臓、子宮、胃、結腸、小腸、大腸、膀胱、前立腺、精巣、胸腺、筋肉、結合組織、骨、軟骨、血管組織、血液、心臓、眼、脳、神経組織等の任意の組織から採取される細胞等が挙げられ、これらに限定されない。体細胞として、より具体的には、例えば、線維芽細胞、骨髄細胞、免疫細胞、赤血球、血小板、骨細胞、骨髄細胞、周皮細胞、樹状細胞、表皮角化細胞（ケラチノサイト）、脂肪細胞、間葉細胞、上皮細胞、表皮細胞、内皮細胞、血管内皮細胞、リンパ管内皮細胞、肝細胞、膵島細胞、軟骨細胞、卵丘細胞、グリア細胞、神経細胞（ニューロン）、オリゴデンドロサイト、マイクログリア、星状膠細胞、心筋細胞、食道細胞、筋肉細胞、メラニン細胞、単核細胞等が挙げられ、これらに限定されない。
前記免疫細胞としては、例えば、Ｂリンパ球、Ｔリンパ球、好中球、マクロファージ、単球等が挙げられる。
前記膵島細胞としては、例えば、α細胞、β細胞、δ細胞、ε細胞、ＰＰ細胞等が挙げられる。
前記筋肉細胞としては、例えば、例えば、平滑筋細胞、骨格筋細胞等が挙げられる。
　幹細胞としては、例えば、胚性幹細胞（ＥＳ細胞）、胚性腫瘍細胞、胚性生殖幹細胞、人工多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）、神経幹細胞、造血幹細胞、間葉系幹細胞、肝幹細胞、膵幹細胞、筋幹細胞、生殖幹細胞、腸幹細胞、がん幹細胞、毛包幹細胞等が挙げられ、これらに限定されない。
　前駆細胞とは、前記幹細胞から特定の体細胞又は生殖細胞に分化する途中の段階にある細胞である。
　細胞株とは、生体外での人為的な操作により無限の増殖能を獲得した細胞である。細胞株としては、例えば、ＨＣＴ１１６、Ｈｕｈ７、ＨＥＫ２９３（ヒト胎児腎細胞）、ＨｅＬａ（ヒト子宮頸がん細胞株）、ＨｅｐＧ２（ヒト肝がん細胞株）、ＵＴ７／ＴＰＯ（ヒト白血病細胞株）、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣細胞株）、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、ＢＨＫ、Ｃ－３３Ａ、ＨＴ－２９、ＡＥ－１、３Ｄ９、Ｎｓ０／１、Ｊｕｒｋａｔ、ＮＩＨ３Ｔ３、ＰＣ１２、Ｓ２、Ｓｆ９、Ｓｆ２１、Ｈｉｇｈ Ｆｉｖｅ、Ｖｅｒｏ等が挙げられ、これらに限定されない。
　本明細書において、「組織」とは、１種類の幹細胞が分化していく一定の系譜に基づいたパターンで集合した構造の単位を示し、全体として一つの役割を有する。例えば、表皮角化細胞は、表皮の基底層に存在する幹細胞が有棘層を経て顆粒層を構成する細胞へと分化し、終末分化して角質層を形成することで、表皮としてのバリア機能を発揮している。よって、本実施形態の治療剤を用いることで、１つの細胞系譜に由来する１種類の細胞を含み多細胞構造体を構築し、例えば、上皮組織、結合組織、筋組織、神経組織等を再生することができる。
　本明細書において、「器官」とは、２種類以上の組織から構成され、全体として一つの機能を担う。よって、本実施形態の治療剤を用いることで、細胞系譜の異なる少なくとも２種類の細胞を含み多細胞構造体を構築し、例えば、胃、腸、肝臓、腎臓等を再生することができる。
　本実施形態の治療剤が適用可能な細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患としては、上述の「脱分化誘導剤」において例示されたものと同様のものが挙げられる。
＜投与量及び投与経路＞
　本実施形態の治療剤の投与量は、被験動物（好ましくは哺乳動物、より好ましくは霊長類、特に好ましくはヒト）の年齢、性別、体重、症状、投与方法、処理時間等を勘案して適宜調節される。
　本実施形態の治療剤に含まれる多糖類の有効量は、ヒト成人の体重１ｋｇあたり１００ｎｇ以上１００ｍｇ以下、好ましくは１μｇ以上１０ｍｇ以下、より好ましくは１０μｇ以上５ｍｇ以下であると考えられる。
　本実施形態の治療剤は１日に１～４回に分けて投与することができる。
　投与形態としては、例えば、動脈内注射、静脈内注射、皮下注射、鼻腔内的、経気管支的、筋内的、経皮的、又は経口的に当業者に公知の方法が挙げられる。
＜組成成分＞
　本実施形態の治療剤は、治療的に有効量の上述の多糖類の他に、薬学的に許容されうる担体又は希釈剤を含んでいてもよい。薬学的に許容されうる担体又は希釈剤は、賦形剤、稀釈剤、増量剤、崩壊剤、安定剤、保存剤、緩衝剤、乳化剤、芳香剤、着色剤、甘味料、粘稠剤、矯味剤、溶解補助剤、添加剤等が挙げられる。これら担体の１種以上を用いることにより、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、軟膏剤等の形態の治療剤を調製することができる。
　また、担体としてコロイド分散系を用いることもできる。コロイド分散系は、上述の多糖類の生体内安定性を高める効果や、特定の臓器、組織、又は細胞へ、上述の多糖類の移行性を高める効果が期待される。コロイド分散系としては、例えば、ポリエチレングリコール、高分子複合体、高分子凝集体、ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズ、水中油系の乳化剤、ミセル、混合ミセル、リポソームを包含する脂質を挙げることができ、特定の臓器、組織、又は細胞へ、上述の多糖類を効率的に輸送する効果のある、リポソームや人工膜の小胞が好ましい。
　本実施形態の治療剤における製剤化の例としては、必要に応じて糖衣を施した錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、マイクロカプセル剤として経口的に使用されるものが挙げられる。
又は、本実施形態の治療剤における製剤化の例としては、水若しくはそれ以外の薬学的に許容し得る液との無菌性溶液、又は懸濁液剤の注射剤の形で非経口的に使用されるものが挙げられる。更には、薬理学上許容される担体又は希釈剤、具体的には、滅菌水や生理食塩水、植物油、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、香味剤、賦形剤、ベヒクル、防腐剤、結合剤等と適宜組み合わせて、一般に認められた製薬実施に要求される単位用量形態で混和することによって製剤化されたものが挙げられる。
　調剤単位形態が錠剤、カプセル剤である場合に、混和することができる添加剤としては、例えば、結合剤、賦形剤、膨化剤、潤滑剤、甘味剤、香味剤等が挙げられる。
前記結合剤としては、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガントガム、アラビアゴム等が挙げられる。
前記賦形剤としては、例えば、結晶性セルロース等が挙げられる。
前記膨化剤としては、例えば、コーンスターチ、ゼラチン、アルギン酸等が挙げられる。
前記湿潤剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム等が挙げられる。
前記甘味剤としては、例えば、ショ糖、乳糖、サッカリン等が挙げられる。
前記香味剤としては、例えば、ペパーミント油、アカモノ等が挙げられる。
また、調剤単位形態がカプセル剤である場合に、上記の材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。
　調剤単位形態が注射剤である場合に、例えば、注射用蒸留水のようなベヒクルを用いて通常の製剤実施に従って処方することができる。また、注射用の水溶液としては、例えば、等張液と、適当な溶解補助剤又は非イオン性界面活性剤とを併用してもよい。
　前記等張液は、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含むことができる。前記補助薬としては、例えばＤ－ソルビトール、Ｄ－マンノース、Ｄ－マンニトール、塩化ナトリウム等が挙げられる。
　前記溶解補助剤としては、例えば、アルコール、ポリアルコール等が挙げられる。前記アルコールとして具体的には、例えば、エタノール等が挙げられる。前記ポリアルコールとして具体的には、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等が挙げられる。
　前記非イオン界面活性剤としては、例えば、ポリソルベート８０（ＴＭ）、ＨＣＯ－５０等が挙げられる。
　また、調剤単位形態が注射剤である場合に、上記の材料にさらに油性液を含有することができる。
前記油性液としては、例えば、ゴマ油、大豆油、オリーブ油等の植物油が挙げられる。
また、さらに、溶解補助剤を併用してもよい。前記溶解補助剤としては、例えば、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等が挙げられる。
また、さらに、緩衝剤、無痛化剤、安定剤、又は、酸化防止剤を配合してもよい。
前記緩衝剤としては、例えば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液等が挙げられる。
前記無痛化剤としては、例えば、塩酸プロカイン等が挙げられる。
前記安定剤としては、例えば、ベンジルアルコール、フェノール等が挙げられる。
　また、調剤単位形態が注射剤である場合に、懸濁剤、又は、乳濁剤として調製することもできる。
このように調製された注射剤は通常、適当なアンプルに充填させる。
また、このような注射剤の無菌化は、フィルターによる濾過滅菌、殺菌剤等の配合により行うことができる。又は、注射剤は、用事調製の形態として製造することができる。即ち、多糖類を凍結乾燥法等によって、無菌の固体組成物とし、使用前に注射用蒸留水又は他の溶媒に溶解して使用することができる。
＜治療方法＞
本発明の一側面は、細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療のための上述の多糖類を含む治療剤を提供する。
また、本発明の一側面は、治療的に有効量の上述の多糖類、並びに、薬学的に許容されうる担体又は希釈剤を含む治療剤を提供する。
また、本発明の一側面は、細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療剤を製造するための上述の多糖類の使用を提供する。
また、本発明の一側面は、上述の多糖類の有効量を、治療を必要とする患者に投与することを含む、細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療方法を提供する。
≪飲食品≫
　一実施形態において、本発明は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の予防又は軽減用飲食品を提供する。
　本実施形態の飲食品によれば、効果的に細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患を予防又は軽減することができる。また、上記多糖類を摂取することは安全性の面からもこれまでの食経験があり、毎日摂取することにも問題が少ないと考えられる。よって、安全でかつ有効な飲食品を提供することができる。
　本明細書において、「飲食品」とは、食品と飲料とを合わせたものであり、主に加工食品を意味する。また、本実施形態の飲食品は、健康食品（特定保健用食品を含む）、機能性食品、健康飲料、機能性飲料を含む。
　本実施形態の飲食品により予防又は軽減可能な細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患としては、上述の「脱分化誘導剤」において例示されたものと同様のものが挙げられる。
　本実施形態の飲食品の形態は、固形状であっても液状であってもよく、上述の多糖類は広く食品一般に食品添加物として添加して用いることができる。飲食品の種類としては、具体的には、例えば、飲料（飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）、麺類、菓子類、水産又は畜産加工食品、乳製品、油脂及び油脂加工食品、調味料、スープ、シチュー、カレー、パン、ジャム、サラダ、惣菜、漬物等が挙げられ、これらに限定はされない。
　前記飲料としてより具体的には、清涼飲料、アルコール飲料等が挙げられる。
　前記清涼飲料としては、例えば、ミネラルウォーター、炭酸飲料、栄養飲料、スポーツドリンク、ココア飲料、果実飲料、乳飲料、コーヒー飲料、茶系飲料、豆乳飲料、野菜飲料、アルコールテイスト飲料等が挙げられる。
　前記アルコールテイスト飲料としては、例えば、ノンアルコールビール、ノンアルコールワイン等が挙げられる。
　前記アルコールとしては、例えば、ビール、発泡酒、カクテル、チューハイ、焼酎、日本酒、ウィスキー、ブランデー、ワイン等が挙げられる。
　前記麺類としては、例えば、そば、うどん、スパゲッティ、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等が挙げられる。
　前記菓子類としては、例えば、飴、チューインガム、キャンディー、グミ、ガム、キャラメル、チョコレート、錠菓、スナック菓子、焼き菓子、ゼリー、プリン、冷菓等が挙げられる。
　前記焼き菓子としては、例えば、ビスケット、クッキー、マドレーヌ等が挙げられる。
　前記冷菓としては、例えば、アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等が挙げられる。
　前記水産又は畜産加工食品としては、例えば、かまぼこ、ハンバーグ、ハム、ソーセージ等が挙げられる。
　前記乳製品としては、例えば、加工乳、発酵乳、ヨーグルト、バター、チーズ、生クリーム等が挙げられる。
　前記油脂又は油脂加工食品としては、例えば、サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等が挙げられる。
　前記調味料としては、例えば、ソース、たれ等が挙げられる。
　また、本実施形態の飲食品において、上述の多糖類をソフトカプセル剤、ハードカプセル剤、打錠剤、粉末等に加工することにより、サプリメント等として摂食することができる。
　本実施形態の飲食品は、その種類に応じて通常使用される添加剤を適宜配合してもよい。添加剤としては、例えば、甘味料、酸味料、賦形剤、結合剤、希釈剤、香料、緩衝剤、増粘剤、ゲル化剤、着色剤、安定剤、乳化剤、分散剤、懸濁化剤、防腐剤等が挙げられる。
　前記甘味料としては、例えば、砂糖、果糖、異性化液糖、ブドウ糖、アスパルテーム、ステビア等が挙げられる。
　前記酸味料としては、例えば、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸等が挙げられる。
　前記賦形剤としては、例えば、デキストリン、澱粉等が挙げられる。
　本実施形態の飲食品における多糖類の配合量は、その生理作用や薬理作用が発揮できる量であればよく、上述の「治療剤」における投与量及び対象飲食品の一般的な摂取量を考慮して、通常、ヒト成人の体重１ｋｇあたり１００ｎｇ以上１００ｍｇ以下、好ましくは１μｇ以上１０ｍｇ以下、より好ましくは１０μｇ以上５ｍｇ以下となる量とすればよい。例えば、固形状食品の場合には１０～５０重量％、飲料等の液状食品の場合には０．１～１０重量％であればよい。
≪化粧品≫
　一実施形態において、本発明は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する化粧品を提供する。
　本実施形態の化粧品は、優れた抗炎症効果、美白効果、抗老化効果を有する。また、上記多糖類は無害であることから、毎日経皮的に摂取することにも問題が少ないと考えられる。よって、安全でかつ有効な化粧品を提供することができる。
　本明細書において、「炎症」とは、異物の生体内への侵入、又は、組織障害等を引き金として免疫系により引き起こされる局所的な防御反応を意味する。炎症反応では、生体によっての非自己の排除を助ける一方で、自己である生体そのものにも一定の損傷を引き起こす場合がある。本実施形態の化粧品を適用することで、化粧品に含まれる多糖類がＬｉｎ２８ａを活性化することで、炎症により引き起こされた細胞等の損傷を修復し、炎症を鎮静化することができる。
　本明細書において、「美白」とは、皮膚の色素沈着、しみ、そばかす、肝斑等の予防又は改善することを意味する。本実施形態の化粧品を適用することで、化粧品に含まれる多糖類がＬｉｎ２８ａを活性化し、皮膚における細胞の代謝を早めることで、皮膚の色素沈着、しみ、そばかす、肝斑等を予防又は改善することができる。
　本明細書において、「老化」とは、加齢に伴う皮膚変化であり、具体的には「皮膚のしわが増える」、「皮膚がたるむ」、「皮膚のはりが低下する」等のような美容上好ましくない様々な変化のことを意味する。
また、「しわ」とは、皮丘及び皮溝で構成されるきめに比べ、はっきり筋目として現れる皮膚の形態変化であり、皮膚老化が外観に現れるもっとも顕著な変化の一つを意味する。しわは、顔面や首、その他の身体各部に現れ、増加し、深くなると加齢したように見える。これらは乾燥等による角質層上の一部剥離や皮溝の部分的消失を伴う肌荒れやニキビ面皰等を伴うとは形態的な点で本質的に区別される。
　本実施形態の化粧品を適用することで、「しわの防止」、すなわち乾燥環境等、しわの形成されやすい環境に曝される肌のしわ形成を未然に抑制することができる。また、本実施形態の化粧品を適用することで、「形成したしわの改善」、すなわち、乾燥環境等、しわの形成されやすい環境に曝されことで形成された肌上のしわの長さ、深さ、数等を有意に減少させることができる。
　このような「しわの防止」、「形成したしわの改善」の有無は、定量的又は定性的手段により判定することが可能であり、精度を高めるために例えば二重遮蔽対比較法（ＩＣＨガイドラインＥ９）により判定することが可能である。
　本実施形態の化粧品における多糖類の配合量は、その生理作用や薬理作用が発揮できる量であればよく、上述の「治療剤」における投与量を考慮して、通常、ヒト成人の体重１ｋｇあたり１００ｎｇ以上１００ｍｇ以下、好ましくは１μｇ以上１０ｍｇ以下、より好ましくは１０μｇ以上５ｍｇ以下となる量とすればよい。
　本実施形態の化粧品は、外皮に塗布して使用するのが好ましい。塗布方法は特に限定されず、例えば表皮に１日１回以上、例えば、１日１回以上３回以下、塗布する皮膚面積に応じて適量、１回あたり例えば１ｍＬ以上５ｍＬ以下塗布すればよい。
　本実施形態の化粧品としては、形態には特に制限はなく、溶液状、ペースト状、ゲル状、固体状、粉末状等の任意の形態をとることができる。化粧品として具体的には、例えば、スキンケア化粧品、メーキャップ化粧品、ボディ化粧品、芳香化粧品、歯磨、石鹸、エアゾル、浴用剤、養毛剤、日焼け防止剤等が挙げられる。
　前記スキンケア化粧品としては、例えば、クレンジングフォーム、クレンジングオイル、クレンジングジェル、化粧水、ローション、クリーム、乳液、美容液、ジェル、パック等が挙げられる。
　前記メーキャップ化粧品としては、例えば、ファンデーション、アイライナー、アイブロウペンシル、マスカラ、リップスティック、おしろい、パウダー等が挙げられる。
　前記ボディ化粧品としては、例えば、シャンプー、ヘアリンス、ヘアコンディショナー、エナメル等が挙げられる。
　前記芳香化粧品としては、例えば、香水、オーデコロン等が挙げられる。
　本実施形態の化粧品は、多糖類の他に通常化粧品に使用している各種成分を本実施形態の効果を阻害しない範囲で配合してもよい。
　通常化粧品に使用している各種成分としては、例えば、油性成分、界面活性剤、アミノ酸類、アミノ酸誘導体類、低級アルコール、多価アルコール、糖アルコール及びそのアルキレンオキシド付加物、水溶性高分子、殺菌剤、抗菌剤、抗炎症剤、鎮痛剤、抗真菌剤、角質軟化剥離剤、皮膚着色剤、ホルモン剤、紫外線吸収剤、育毛剤、美白用薬剤、発汗防止剤、収斂活性成分、汗防臭剤、ビタミン剤、血管拡張剤、生薬、ｐＨ調整剤、粘度調整剤、パール化剤、天然香料、合成香料、色素、酸化防止剤、防腐剤、乳化剤、脂肪、ワックス、シリコーン化合物、香油等が挙げられる。
　油性成分としては、飽和又は不飽和脂肪酸、及び、これらから得られる高級アルコール類が挙げられる。油性成分として具体的には、例えば、直鎖又は分岐鎖の脂肪アルコールのエステル、スクワラン、スクワレン、ヒマシ油、水添ひまし油及びその誘導体、グリセリド類、ミツロウ、ラノリン類（液状ラノリン、精製ラノリンを含む）及びその誘導体、動植物由来の油性原料、石油及び鉱物由来の油性原料、シリコン類、樹脂酸、脂肪酸エステル、ケトン類等を挙げることができる。
前記直鎖又は分岐鎖の脂肪アルコールのエステルとしては、例えば、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸ミリスチル、ステアリン酸ミリスチル、イソステアリン酸ミリスチル、オレイン酸ミリスチル、ベヘン酸ミリスチル、エルカ酸ミリスチル、ミリスチン酸セチル、パルミチン酸セチル、ステアリン酸セチル、イソステアリン酸セチル、オレイン酸セチル、ベヘン酸セチル、エルカ酸セチル、ミリスチン酸ステアリル、パルミチン酸ステアリル、ステアリン酸ステアリル、イソステアリン酸ステアリル、オレイン酸ステアリル、ベヘン酸ステアリル、エルカ酸ステアリル、ミリスチン酸イソステアリル、パルミチン酸イソステアリル、ステアリン酸イソステアリル、イソステアリン酸イソステアリル、オレイン酸イソステアリル、ベヘン酸イソステアリル、エルカ酸イソステアリル、ミリスチン酸ベヘニル、パルミチン酸ベヘニル、ステアリン酸ベヘニル、イソステアリン酸ベヘニル、オレイン酸ベヘニル、ベヘン酸ベヘニル、エルカ酸ベヘニル、ミリスチン酸エルシル、パルミチン酸エルシル、ステアリン酸エルシル、イソステアリン酸エルシル、オレイン酸エルシル、ベヘン酸エルシル、エルカ酸エルシル等が挙げられる。
前記グリセリド類としては、ヒドロキシステアリン酸モノグリセリド、ヒドロキシステアリン酸ジグリセリド、イソステアリン酸モノグリセリド、イソステアリン酸ジグリセリド、オレイン酸モノグリセリド、オレイン酸ジグリセリド、リシノール酸モノグリセリド、リシノール酸ジグリセリド、リノール酸モノグリセリド、リノール酸ジグリセリド、リノレン酸モノグリセリド、リノレン酸ジグリセリド、酒石酸モノグリセリド、酒石酸ジグリセリド、クエン酸モノグリセリド、クエン酸ジグリセリド、リンゴ酸モノグリセリド、リンゴ酸ジグリセリド、及び、これらのグリセリドのエチレンオキシド１～３０モル付加物等が挙げられる。
前記動植物由来の油性原料としては、例えば、アーモンド油、アボカド油、オリーブ油、菜種油、ココナッツ油、マカデミアナッツ油、ホホバ油、カルナバロウ、ゴマ油、カカオ油、パーム油、ミンク油、木ロウ、キャンデリラロウ、鯨ロウ等が挙げられる。
前記石油及び鉱油由来の油性原料としては、例えば、パラフィン、マイクロクリスタリンワックス、流動パラフィン、ワセリン、セレシン等が挙げられる。
前記シリコン類としては、例えば、メチルポリシロキサン、ポリオキシエチレン－メチルポリシロキサン、ポリオキシプロピレン－メチルポリオキシシロキサン、ポリ（オキシエチレン、オキシプロピレン）－メチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、脂肪酸変性ポリシロキサン、脂肪族アルコール変性ポリシロキサン、アミノ酸変性ポリシロキサン等が挙げられる。
　界面活性剤としては、例えば、アニオン界面活性剤、非イオン性界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤等が挙げられる。
　前記アニオン界面活性剤としては、例えば、Ｎ－長鎖アシルアミノ酸塩、Ｎ－長鎖脂肪酸アシル－Ｎ－メチルタウリン塩、アルキルサルフェート及びそのアルキレンオキシド付加物、脂肪酸アミドエーテルサルフェート、脂肪酸の金属塩及び弱塩基塩、スルホコハク酸系界面活性剤、アルキルフォスフェート及びそのアルキレンオキシド付加物、並びに、アルキルエーテルカルボン酸等が挙げられる。
　前記Ｎ－長鎖アシルアミノ酸塩としては、例えば、Ｎ－長鎖アシル酸性アミノ酸塩、Ｎ－長鎖アシル中性アミノ酸塩等が挙げられる。
前記Ｎ－長鎖アシル酸性アミノ酸塩としては、例えば、Ｎ－長鎖アシルグルタミン酸塩、Ｎ－長鎖アシルアスパラギン酸塩等が挙げられる。
前記Ｎ－長鎖アシル中性アミノ酸塩としては、例えば、Ｎ－長鎖アシルグリシン塩、Ｎ－長鎖アシルアラニン塩、Ｎ－長鎖アシルスレオニン塩等が挙げられる。
　前記非イオン性界面活性剤としては、例えば、エーテル型界面活性剤、エステル型界面活性剤、エーテルエステル型界面活性剤、アルキルグルコシド類、硬化ヒマシ油ピログルタミン酸ジエステル及びそのエチレンオキシド付加物、並びに、含窒素型非イオン性界面活性剤等が挙げられる。
前記エーテル型界面活性剤としては、例えば、グリセリンエーテル及びそのアルキレンオキシド付加物等が挙げられる。
前記エステル型界面活性剤としては、例えば、グリセリンエステル及びそのアルキレンオキシド付加物、ポリオキシアルキレン脂肪酸エステル、グリセリンエステル、脂肪酸ポリグリセリンエステル、アシルアミノ酸ポリグリセリンエステル、ソルビタンエステル、並びに、ショ糖脂肪酸エステル等が挙げられる。
前記エーテルエステル型界面活性剤としては、例えば、ソルビタンエステル及びそのアルキレンオキシド付加物等が挙げられる。
前記含窒素型非イオン性界面活性剤としては、例えば、脂肪酸アルカノールアミド等が挙げられる。
　前記カチオン界面活性剤としては、例えば、脂肪族アミン塩及びそれらの４級アンモニウム塩、芳香族４級アンモニウム塩、脂肪酸アシルアルギニンエステル、並びに、アルキルオキシヒドロキシプロピルアルギニン塩等が挙げられる。
前記脂肪族アミン塩としては、例えば、アルキルアンモニウムクロライド、ジアルキルアンモニウムクロライド等が挙げられる。
前記芳香族４級アンモニウム塩としては、例えば、ベンザルコニウム塩等が挙げられる。
　前記両性界面活性剤としては、例えば、ベタイン型界面活性剤、アミノカルボン酸型界面活性剤、イミダゾリン型界面活性剤等が挙げられる。
前記ベタイン型界面活性剤としては、アルキルベタイン、アルキルアミドベタイン、アミノプロピオネート、カルボキシベタイン等が挙げられる。
　アミノ酸類としては、例えば、グリシン、アラニン、セリン、スレオニン、アルギニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、ロイシン、バリン等が挙げられる。
　アミノ酸誘導体類としては、例えば、ピロリドンカルボン酸及びその塩、トリメチルグリシン、ラウロイルリジン等が挙げられる。
　低級アルコールとしては、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール等が挙げられる。
　多価アルコールとしては、例えば、グリセリン、ジグリセリン、エチレングリコール、１，３－ブチレングリコール、プロピレングリコール、イソプレングリコール等が挙げられる。
　糖アルコール及びそのアルキレンオキシド付加物としては、例えば、マンニトール、エリスリトール等が挙げられる。
　水溶性高分子としては、例えば、ポリアミノ酸及びその塩、ポリエチレングリコール、アラビアゴム類、アルギン酸塩、キサンタンガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸塩、キチン、キトサン、水溶性キチン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウムクロライド、ポリ塩化ジメチルメチレンピペリジウム、ポリビニルピロリドン誘導体四級アンモニウム、カチオン化プロテイン、コラーゲン分解物及びその誘導体、アシル化タンパク、並びに、ポリグリセリン等が挙げられる。
　前記ポリアミノ酸としては、例えば、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸等が挙げられる。
　殺菌剤及び抗菌剤としては、例えば、４－ヒドロキシ安息香酸、並びに、その塩及びエステル、トリクロサン、クロルヘキシジン、フェノキシエタノール、メントール、ミント油、カプリン酸グリセリル、カプリル酸グリセリル、サリチル酸－Ｎ－アルキルアミド等が挙げられる。
　抗炎症剤、鎮痛剤、抗真菌剤、角質軟化剥離剤、皮膚着色剤、ホルモン剤としては、例えば、ヒノキチオール、ヒドロコルチゾン（Ｖ）、ε－アミノカルボン酸、アズレン、アラントイン、グリチルリチン酸誘導体、β－グリチルレチン酸等が挙げられる。
　紫外線吸収剤は、例えば、室温で液状又は結晶であり、紫外線を吸収して、その吸収したエネルギーをより長波長の放射線（例えば熱）として放出することのできる有機物質（光保護フィルター）であって、ＵＶ－ＢフィルターとＵＶ－Ａフィルターとが挙げられる。
ＵＶ－Ｂフィルターは、油溶性及び水溶性のいずれであってもよい。
ＵＶ－Ｂフィルターのうち油溶性物質としては、例えば、以下の１）～９）に示すものが挙げられる。
１）３－ベンジリデンカンファー又は３－ベンジリデンノルカンファー及びそれらの誘導体（例えば、３－（４－メチルベンジリデン）－カンファー）
２）４－アミノ安息香酸誘導体（好ましくは、４－（ジメチルアミノ）－安息香酸－２－エチルヘキシルエステル、４－（ジメチルアミノ）－安息香酸－２－オクチルエステル、又は、４－（ジメチルアミノ）－安息香酸ペンチルエステル）
３）桂皮酸エステル（好ましくは、４－メトキシ桂皮酸－２－エチルヘキシルエステル、４－メトキシ桂皮酸プロピルエステル、４－メトキシ桂皮酸イソペンチルエステル、又は、２－シアノ－３，３－フェニル桂皮酸－２－エチルヘキシルエステル［オクトクリレン（Ｏｃｔｏｃｒｙｌｅｎｅ）］）
４）サリチル酸エステル（好ましくは、サリチル酸－２－エチルヘキシルエステル、サリチル酸－４－イソプロピルベンジルエステル、又は、サリチル酸ホモメンチルエステル）
５）ベンゾフェノン誘導体（好ましくは、２－ヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノン、２－ヒドロキシ－４－メトキシ－４’－メチルベンゾフェノン、又は、２，２’－ジヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノン）
６）ベンザルマロン酸エステル（好ましくは、４－メトキシベンザルマロン酸ジ－２－エチルヘキシルエステル）
７）トリアジン誘導体（例えば、２，４，６－トリアニリノ－（ｐ－カルボ－２’－エチル－１’－ヘキシルオキシ）－１，３，５－トリアジン、オクチル－トリアゾン、又は、ジオクチル－ブタミド－トリアゾン［Ｕｖａｓｏｒｂ（登録商標）ＨＥＢ］）
８）プロパン－１，３－ジオン（例えば、１－（４－ｔ－ブチルフェニル）－３－（４’－メトキシフェニル）－プロパン－１，３－ジオン）
９）ケトトリシクロ（５．２．１．０）デカン誘導体
ＵＶ－Ｂフィルターのうち水溶性物質としては、例えば、以下の１０）～１２）に示すものが挙げられる。
１０）２－フェニルベンズイミダゾール－５－スルホン酸、並びに、そのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、アルキルアンモニウム塩、アルカノールアンモニウム塩及びグルカンモニウム塩
１１）ベンゾフェノンのスルホン酸誘導体及びその塩（好ましくは、２－ヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノン－５－スルホン酸及びその塩）
１２）３－ベンジリデンカンファーのスルホン酸誘導体及びその塩（例えば、４－（２－オキソ－３－ボルニリデンメチル）－ベンゼンスルホン酸及び２－メチル－５－（２－オキソ－３－ボルニリデン）－スルホン酸）
ＵＶ－Ａフィルターとしては、とりわけ、ベンゾイルメタン誘導体が用いられる。前記ベンゾイルメタン誘導体としては、例えば、１－（４’－ｔ－ブチルフェニル）－３－（４’－メトキシフェニル）－プロパン－１，３－ジオン、４－ｔ－ブチル－４’－メトキシジベンゾイルメタン（Ｐａｒｓｏｌ（登録商標）１７８９）、１－フェニル－３－（４’－イソプロピルフェニル）－プロパン－１，３－ジオン、エナミン化合物等が挙げられる。
　育毛剤としては、例えば、パントテン酸及びその誘導体、プラセンタエキス、アラントイン等が挙げられる。
　美白用薬剤としては、例えば、抗酸化剤、チロシナーゼ活性阻害剤、α－ＭＳＨ（α－メラノサイト刺激ホルモン）アンタゴニスト等が挙げられる。
前記抗酸化剤としては、例えば、アスコルビン酸等が挙げられる。
前記チロシナーゼ活性阻害剤としては、例えば、コウジ酸、アルブチン、エラグ酸、ルシノール等が挙げられる。
前記α－ＭＳＨアンタゴニストとしては、例えば、ｄ－２－Ｎａｌ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ－ＮＨ２等が挙げられる。
　発汗防止剤、収斂活性成分及び汗防臭剤としては、例えば、アルミニウム、ジルコニウム又は亜鉛の塩が挙げられる。前記アルミニウム、ジルコニウム又は亜鉛の塩としては、例えば、アルミニウムクロリド、アルミニウムクロロヒドレート、アルミニウムジルコニウムトリクロロヒドレート、アルミニウムジルコニウムテトラクロロヒドレート、ピロリドンカルボン酸亜鉛等が挙げられる。
　ビタミン剤としては、例えば、ビタミンＡ、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ６、Ｅ及びそれらの誘導体等が挙げられる。
　血管拡張剤としては、例えば、センブリエキス、セファランチン等が挙げられる。
　生薬としては、例えば、アプリコットエキス、アボカドエキス、アロエエキス、ウコンエキス、オレンジエキス、カモミラエキス、キウイエキス、ギンコエキス、紅茶エキス、セージエキス、センブリエキス、トウニンエキス、バラエキス、ヒマワリエキス、ブドウエキス、ヘチマエキス、モモ葉エキス、ユーカリエキス、ラベンダーエキス、緑茶エキス、リンゴエキス、レモンエキス、ローズマリーエキス等が挙げられる。
　ｐＨ調整剤としては、例えば、クエン酸、アジピン酸、アスコルビン酸、リン酸、グルタミン酸、乳酸、硫酸、塩酸、アンモニウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アルギニン、ハイドロキノン及びその誘導体、γ－オリザノール等が挙げられる。
　粘度調整剤としては、例えば、寒天、有機変性粘土鉱物等が挙げられる。
　パール化剤としては、例えば、アルキレングリコールエステル、脂肪酸アルカノールアミド、脂肪酸モノグリセリド、脂肪エーテル等が挙げられる。
　天然香料としては、例えば、花、茎及び葉、果実、果皮、根、木、針葉及び枝、樹脂及びバルサム等の植物性原料、並びに、シベット、ビーバー等の動物性原料が挙げられる。
前記花としては、例えば、例えば、ユリ、ラベンダー、バラ、ジャスミン、ネロリ、イラン－イラン等が挙げられる。
前記茎及び葉としては、例えば、ゼラニウム、パチョリ、プチグレン、タラゴン、レモングラス、セージ、タイム等が挙げられる。
前記果実としては、例えば、アニス、コリアンダー、キャラウェー、ビャクシン等が挙げられる。
前記果皮としては、例えば、ベルガモット、レモン、オレンジ等が挙げられる。
前記根としては、例えば、ナツメグ、アンゼリカ、セロリ、カルダモン、コスタス、アヤメ、ショウブ等が挙げられる。
前記木としては、例えば、マツ、ビャクダン、グアヤク、シーダー、シタン等が挙げられる。
前記針葉及び枝としては、例えば、トウヒ、モミ、マツ、低木マツ等が挙げられる。
　前記樹脂及びバルサムとしては、例えば、ガルバヌム、エレミ、ベンゾイン、ミルラ、乳香、オポパナクス等が挙げられる。
さらに、芳香成分として用いられることの多い比較的揮発性の低い精油として、例えば、セージ油、カモミール油、丁子油、メリッサ油、ミント油、シナモン葉油、ライム花油、ジュニパーベリー油、ベチベル油、乳香油、ガルバヌム油、ラブダヌム油、ラバンジン油、ベルガモット油、ジヒドロミルセノール、リリアール、ライラール、シトロネロール、フェニルエチルアルコール、α－ヘキシルシンナムアルデヒド、ゲラニオール、ベンジルアセトン、シクラメンアルデヒド、リナロール、Ｂｏｉｓａｍｂｒｅｎｅ　Ｆｏｒｔｅ、Ａｍｂｒｏｘａｎ、インドール、ヘジオン（Ｈｅｄｉｏｎｅ）、サンデリス（Ｓａｎｄｅｌｉｃｅ）、シトラス油、マンダリン油、オレンジ油、アリルペンチルグリコレート、シクロバータル（Ｃｙｃｌｏｖｅｒｔａｌ）、ラバンジン油、クラリー油、β－ダマスコン、ゼラニウム油バーボン、シクロヘキシルサリチレート、Ｖｅｒｔｏｆｉｘ　Ｃｏｅｕｒ、Ｉｓｏ－Ｅ－Ｓｕｐｅｒ、Ｆｉｘｏｌｉｄｅ　ＮＰ、エバニル、イラルデイン（Ｉｒａｌｄｅｉｎ）ガンマ、フェニル酢酸、ゲラニルアセテート、ベンジルアセテート、ローズオキシド、ロミラート（Ｒｏｍｉｌａｔ）、イロチル（Ｉｒｏｔｙｌ）及びフロラマート（Ｆｌｏｒａｍａｔ）、ペパーミント油、スペアミント油、アニス油、ダイウイキョウ油、キャラウェー油、ユーカリ油、ウイキョウ油、シトラス油、ウィンターグリーン油、丁子油、メントール等が挙げられる。
　合成香料としては、例えば、エステル、エーテル、アルデヒド、ケトン、アルコール及び炭化水素型の香料等が挙げられる。
　色素としては、例えば、コチニールレッドＡ（Ｃ．Ｉ．１６２５５）、パテントブルー（Ｃ．Ｉ．４２０５１）、クロロフィリン（Ｃ．Ｉ．７５８１０）等が挙げられる。
　酸化防止剤としては、例えば、トコフェロール、亜硫酸ナトリウム等が挙げられる。
　防腐剤としては、例えば、フェノキシエタノール、パラベン、ペンタンジオール等が挙げられる。
　乳化剤としては、例えば、ノニオン性界面活性剤が挙げられる。
　脂肪及びワックスとしては、例えば、１２－ヒドロキシステアリン酸、ラノリン、蜜蝋、キャンデリラロウ、カルナウバロウ等が挙げられる。
　シリコーン化合物としては、例えば、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、環状シリコーン、修飾シリコーン化合物（室温で液状又は樹脂様であり得るもの）、ジメチルシロキサン単位数２００～３００の平均鎖長を有するジメチコンと水素化シリケートとの混合物であるシメチコン等が挙げられる。前記修飾シリコーン化合物における修飾の種類としては、例えば、アミノ－、脂肪酸－、アルコール－、ポリエーテル－、エポキシ－、フッ素－、グリコシド－及びアルキル－からなる群から選択される１種以上が挙げられる。
　香油としては、天然及び合成香料の混合物が挙げられる。天然及び合成香料としては、上述したものと同様のものが挙げられる。
　上記の各種成分はそれぞれ単独で配合しても、２種以上を混合して配合してもよい。
　以下、実施例により本発明を説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
［実施例１］
（１）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）の調製
　まず、サッカロミセス・ブラウディを、１００ｍＬのＹＰＤ培地（２％ペプトン、１％酵母エキス、２％グルコース含有）を用いて、一晩、室温で振盪培養した。次いで、対数増殖期に、遠心分離（室温で１０００ｇ、１５分）を行い、培養上清を回収した。次いで、培養上清に、７５％飽和硫安（試料１Ｌ対して５１６ｇ）になるように粉末の硫酸アンモニウムを添加し、氷水中にて一時間以上冷却し、沈殿物を遠心分離（４℃で１０００ｇ、１５分）にて回収した。次いで、回収した沈殿物を少量の蒸留水に溶解し、限界分子量３５００の透析膜を用い、十分量の水に対して透析を行い、残存する硫酸アンモニウムを除去した。透析後、凍結乾燥によりサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を回収し、重量測定を行った。これにより、約２０ｍｇの外分泌物が得られた。
（２）マウス血管内皮細胞株ＴＫＤ２細胞の準備
　予め、マウス血管内皮細胞株ＴＫＤ２細胞（国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所、ＪＣＲＢ細胞バンクより分譲、細胞番号：ＩＦＯ５０３７４）を６ウェルプレートに４×１０４細胞／ウェルとなるように播種し、３３℃、５％ＣＯ２環境下で一晩培養しておいた。
（３）Ｌｉｎ２８ａの発現誘導
　次いで、マウス血管内皮細胞株ＴＫＤ２細胞の播種した翌日に、（１）で調製したサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を最終濃度１００μｇ／ｍＬとなるように培地に添加し、添加から５日間培養した。添加後、一度も培地は交換しなかった。また、コントロールとして、外分泌物を添加していないもの、ポジティブコントロールとして外分泌物の代わりに、ｉＰＳ細胞誘導可能な低分子６化合物の混合物である６ＣｉＰＳｓ（参考文献：Hou P., et al, “Pluripotent stem cells induced from mouse somatic cells by small-molecule compounds”, Science, vol.341, Issue 6146, p651-654, 2013.）を添加したものを準備した。また、対照群として、外分泌物の代わりに、ガングリオシド（テクノケミカル株式会社製、１０６０）、又はサツマイモ由来の多糖類を最終濃度１００μｇ／ｍＬとなるように培地に添加したものも準備した。
　培養後、細胞は、０．２５％　Ｔｒｙｐｓｉｎ－ＥＤＴＡ溶液（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社製、２５２０００５６）を用いて剥離し回収した。次いで、回収した細胞から、ＲＮｅａｓｙ　Ｍｉｃｒｏ　Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ　７４００４）を用い、トータルＲＮＡを回収した。トータルＲＮＡから、ＩｍＰｒｏｍ－ＩＩ（登録商標）　ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ　Ａ３８０１）を用いてｃＤＮＡを作製し、下記表１に示すプライマーを用いてＬｉｎ２８ａの発現をＰＣＲにてモニターした。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　また、ＰＣＲ後の反応液をアガロースゲル電気泳動し、結果を図１に示した。
　図１から、レーン２であるポジティブコントロールの６ＣｉＰＳｓを添加したＴＫＤ２細胞、及びレーン５であるサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を添加したＴＫＤ２細胞において、Ｌｉｎ２８ａの発現が誘導されたことが確かめられた。
　一方、ガングリオシド及びサツマイモ由来の多糖類を添加したＴＫＤ２細胞では、Ｌｉｎ２８ａの発現は誘導されなかった。
［実施例２］
（１）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）の調製
　まず、サッカロミセス・ブラウディを、ＹＰＤ培地（２％ペプトン、１％酵母エキス、２％グルコース含有）（以下、「通常培養」と称する場合がある。）、グルコースの一部をラムノースに代替したＹＰＤ培地（２％ペプトン、１％酵母エキス、０．２％グルコース、１．８％ラムノース含有）（以下、「培養方法－Ｉ」と称する場合がある。）、又はグルコースの一部をリボースに代替したＹＰＤ培地（２％ペプトン、１％酵母エキス、０．２％グルコース、１．８％リボース含有）（以下、「培養方法－ＩＩ」と称する場合がある。）を用いて、一晩、室温で振盪培養した。次いで、実施例１の（１）と同様の方法を用いて、それぞれの培養方法におけるサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を回収した。
（２）マウス血管内皮細胞株ＴＫＤ２細胞の準備
　次いで、実施例１の（２）と同様の方法を用いて、ＴＫＤ２細胞を播種し、一晩培養した。
（３）Ｌｉｎ２８ａの発現誘導
　次いで、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（通常培養）、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（培養方法－Ｉ）、又は、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（培養方法－ＩＩ）をそれぞれ最終濃度１００μｇ／ｍＬとなるように培地に添加したこと以外は実施例１の（３）と同様の方法を用いて、ＴＫＤ２細胞を培養した。次いで、各ＴＫＤ２細胞を回収し、実施例１の（３）と同様の方法を用いて、Ｌｉｎ２８ａの発現を比較した。結果を図２に示す。
　図２から、通常培養から、培養方法－Ｉ、培養方法－ＩＩになるにつれて、Ｌｉｎ２８ａの発現が上昇することが明らかになった。これにより、グルコースの一部をラムノース、又は、リボースに代替することで、Ｌｉｎ２８ａの発現誘導効果が著しく上昇することがわかった。
［実施例３］
（１）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）の調製
　まず、実施例２の（１）と同様の方法を用いて、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（通常培養）、及び、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（培養方法－Ｉ）を調製した。
（２）ヒトＣＤ１４陽性単球の準備
　次いで、予め、ヒトＣＤ１４陽性単球（ＬＯＮＺＡ社、２Ｗ－４００Ｃ）を１０ｃｍディッシュに１．５×１０６細胞／ディッシュとなるように播種し、３７℃、５％ＣＯ２環境下で一晩培養しておいた。
（３）ヒトＣＤ１４陽性単球に対する増殖活性
　次いで、ヒトＣＤ１４陽性単球を播種した翌日に、ヒト組換えＭ－ＣＳＦ（ｒＭ－ＣＳＦ）が最終濃度２５ｎｇ／ｍＬ、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（通常培養）、又は、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（培養方法－Ｉ）が最終濃度１００μｇ／ｍＬとなるように培地に添加し、添加から２週間培養した。また、コントロールとして、ｒＭ－ＣＳＦのみを添加したもの、対照群として、サツマイモ由来の多糖類を最終濃度１００μｇ／ｍＬとなるように培地に添加したものを準備し、添加から２週間培養した。図３に、各種物質の培地への添加から２週間後のヒト単核球の増殖の様子を示す。
　図３から、ｒＭ－ＣＳＦのみを添加したもの、及び、サツマイモ由来の多糖類を最終濃度１００μｇ／ｍＬとなるように培地に添加したものよりも、ｒＭ－ＣＳＦとサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（通常培養）、又は、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（培養方法－Ｉ）とを培地に添加したものの方が、単球の増殖活性が高かった。
　また、ｒＭ－ＣＳＦとサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（通常培養）とを培地に添加したものよりも、ｒＭ－ＣＳＦとサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（培養方法－Ｉ）とを培地に添加したものの方が、単球の増殖活性がより高かった。
　これにより、Ｌｉｎ２８ａの発現誘導効果に比例して、単球の増殖活性効果が高くなることがわかった。
［実施例４］
　サッカロミセス・ブラウディ以外の微生物の培養物についても、同様にＬｉｎ２８ａ活性化効果を有するかについて検討を行った。具体的には、微細藻類としてスピルリナ属藻類、２種の乳酸菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ　ＡＴＣＣ４３０７６、及び、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌａｌｅｓ　ｒｈａｍｎｏｓｕｓ　ＡＴＣＣ７４６９）及び麹菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ　ＡＴＣＣ１６４０４）を用いた。
（１）微生物の培養物の調製
（１－１）乳酸菌及び麹菌の培養物（外分泌物）の調製
　乳酸菌及び麹菌の培養は、独立行政法人　製品評価技術基盤機構のホームページ（http://www.nite.go.jp/nbrc/cultures/cultures/culture-list.html）を参考にＮｏ．８０４培地を用いて、一晩、室温で振盪培養した。なお、Ｎｏ．８０４培地は、ハイポリペプトン５ｇ、酵母エキス５ｇ、グルコース５ｇ、及び、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ　１　ｇを１Ｌの水に溶解し滅菌することで調製した。次いで、対数増殖期に、遠心分離（室温で１０００ｇ、１５分）を行い、培養上清を回収した。次いで、各培養上清に、７５％飽和硫安（試料１Ｌ対して５１６ｇ）になるように粉末の硫酸アンモニウムを添加し、氷水中にて一時間以上冷却し、沈殿物を遠心分離（４℃で１０００ｇ、１５分）にて回収した。次いで、回収した沈殿物を少量の蒸留水に溶解し、限界分子量３５００の透析膜を用い、十分量の水に対して透析を行い、残存する硫酸アンモニウムを除去した。透析後、凍結乾燥により、乳酸菌及び麹菌の外分泌物をそれぞれ得た。
　また、対照としてサッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）も実施例１の（１）と同様の方法を用いて、準備した。
（１－２）スピルリナ属藻類の培養物の調製
　スピルリナ属藻類は、Ｚａｒｒｏｕｋ培地を用いて、一晩、室温で振盪培養した。次いで、対数増殖期に、遠心分離（室温で１０００ｇ、１５分）を行い、菌体を回収し、凍結乾燥した。次いで、得られた凍結乾燥体（粉末）に蒸留水（粉末１ｇあたり２５ｍＬ）を添加し、よく懸濁した。次いで、懸濁液を１０分間超音波処理して、細胞破砕液を調製した。次いで、細胞破砕液に等量のクロロホルム及びメタノールの混合有機溶媒（クロロホルム：メタノール＝２：１）を添加し、２分間激しく振盪した。次いで、遠心分離（室温で２０００ｒｐｍ、１５分）を行い、分離し、水相画分を得た。次いで、得られた水相画分を限界分子量３５００の透析膜を用い、十分量の水に対して透析を行った。透析後、凍結乾燥により、スピルリナ属藻類の培養物（エキス）を得た。
（２）ヒト線維芽細胞の準備
　予め、ヒト歯肉由来線維芽細胞を６ウェルプレートに４×１０４細胞／ウェルとなるように播種し、ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、３７℃、５％ＣＯ２環境下で一晩培養しておいた。
（３）Ｌｉｎ２８ａの発現誘導
　次いで、ヒト線維芽細胞の播種した翌日に、（１）で調製した各微生物の培養物を最終濃度３０μｇ／ｍＬとなるように培地に添加し、添加から１～２週間培養した。添加後、一度も培地は交換しなかった。
　培養後、細胞は、０．２５％　Ｔｒｙｐｓｉｎ－ＥＤＴＡ溶液（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社製、２５２０００５６）を用いて剥離し回収した。次いで、回収した細胞から、ＲＮｅａｓｙ　Ｍｉｃｒｏ　Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ　７４００４）を用い、トータルＲＮＡを回収した。トータルＲＮＡから、ＩｍＰｒｏｍ－ＩＩ（登録商標）　ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ　Ａ３８０１）を用いてｃＤＮＡを作製し、下記表２に示すプライマーを用いてＬｉｎ２８ａの発現をＰＣＲにてモニターした。また、ＰＣＲの条件は、以下に示すとおりである。
１）　９５℃　３分間
２）　９５℃　３０秒間
３）　５５℃　３０秒間
４）　７２℃　４５秒間
５）　７２℃　５分間
※　２）～４）を３０サイクル
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　また、ＰＣＲ後の反応液をアガロースゲル電気泳動し、結果を図４に示した。図４において、レーン１はスピルリナ属藻類の培養物を添加した線維芽細胞をロードしている。レーン２はサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を添加した線維芽細胞をロードしている。レーン３は乳酸菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ　ＡＴＣＣ４３０７６）の外分泌物を添加した繊維芽細胞をロードしている。レーン４は麹菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ　ＡＴＣＣ１６４０４）の外分泌物を添加した線維芽細胞をロードしている。一方、レーン５はネガティブコントロールとしてサッカロミセス・ブラウディの培養に用いたＹＰＤ培地のみをロードしている。レーン６についても、ネガティブコントロールとして乳酸菌及び麹菌の培養に用いたＮｏ．８０４培地のみをロードしている。
　図４から、各微生物の培養物を添加した線維芽細胞をロードしたレーン１～４において、Ｌｉｎ２８ａの発現が誘導されたことが確かめられた。また、図示していないが、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌａｌｅｓ　ｒｈａｍｎｏｓｕｓ　ＡＴＣＣ７４６９）をを添加した線維芽細胞においても同様に、Ｌｉｎ２８ａの発現が誘導されていた。
　一方、培地のみをロードしたレーン５及び６では、Ｌｉｎ２８ａの発現は誘導されなかった。
［実施例５］
（１）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）の調製
　実施例１の（１）と同様の方法を用いて、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物（透析内液中の物質）を得た。また、透析外液も回収し、凍結乾燥して、透析外液中の物質を得た。
（２）ヒト線維芽細胞の準備
　実施例４の（２）と同様の方法を用いて、ヒト線維芽細胞を予め培養した。
（３）Ｌｉｎ２８ａの発現誘導
　（１）で得られたサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（透析内液中の物質）及び透析外液中の物質をそれぞれ３０μｇ／ｍＬずつヒト線維芽細胞に添加した以外は、実施例４の（３）と同様の方法を用いて、各物質によるＬｉｎ２８ａの発現誘導活性を評価した。結果を図５に示す。
　図５から、透析外液中の物質には、Ｌｉｎ２８ａ発現誘導活性は見られなかった。一方、（１）において、分子量３５００が排除限界である透析膜を用いて精製していることから、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物に含まれる分子量が３５００よりも大きな分子が活性本体であることが示唆された。
［実施例６］
　微生物の培養物からＬｉｎ２８ａ誘導活性を有する分子を精製し、その組成を解析した。
（１）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）の調製
　実施例１の（１）と同様の方法を用いて、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物を得た。
（２）陰イオン交換クロマトグラフィーを用いた精製
　次いで、得られたサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を、ＤＥＡＥ－６５０M（ＴＯＳＯＨ　ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥ社製、０００７４７３）を用いた陰イオン交換クロマグラフィーによって、分画した。溶出は、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、３００ｍＭ、５００ｍＭ、及び、２０００ｍＭのＮａＣｌによってステップワイズ法により行った。得られた各溶出画分は、限界分子量３５００の透析膜を用い、十分量の水に対して透析を行った。透析後、凍結乾燥により、各溶出物質を得た。また、得られた各溶出物質の重量を測定した。
（３）ヒト線維芽細胞の準備
　実施例４の（２）と同様の方法を用いて、ヒト線維芽細胞を予め培養した。
（４）Ｌｉｎ２８ａの発現誘導
　（１）で得られた各溶出物質を３０μｇ／ｍＬずつヒト線維芽細胞に添加した以外は、実施例４の（３）と同様の方法を用いて、各溶出物質によるＬｉｎ２８ａの発現誘導活性を評価した。結果を図６に示す。なお、図６において、レーン１～６はそれぞれ５０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、３００ｍＭ、５００ｍＭ、及び、２０００ｍＭのＮａＣｌによる溶出物質を添加した線維芽細胞をロードしている。
　図６から、３００ｍＭのＮａＣｌによる溶出物質が線維芽細胞でのＬｉｎ２８ａの発現誘導活性が最も高いことが明らかとなった。
　また、これらの溶出物質は、アルシャンブルー、トルイジンブルーで染色され、さららにフェノール硫酸によって赤褐色を呈した。このことから、溶出物質が多糖類であることが示唆された。
（５）単糖組成分析
　次いで、（１）で得られたサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（サンプルＮｏ．１）の透析後、凍結乾燥前の溶液２０μＬ（糖含有量として、１ｍｇ／ｍＬ）に超純水３０μＬを加えて、５０μＬの試料を調製した。また、（２）で得られた３００ｍＭのＮａＣｌによる溶出物質（サンプルＮｏ．２）の透析後、凍結乾燥前の溶液５μＬ（糖含有量として、４ｍｇ／ｍＬ）に超純水４５μＬを加えて、５０μＬの試料を調製した。各５０μＬの試料に８Ｍ　Ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄを添加し、１００℃で３時間加熱して加水分解した。次いで、得られた各加水分解物を乾固させて、超純水１００μＬに溶解した。溶液を遠心分離（４℃で１０，０００×ｇ、１０分間）し、上清を回収した。得られた上清のうち５０μＬを、無水酢酸を用いて、Ｎ－アセチル化した。次いで、ＡＢＥＥ化試薬を用いて蛍光標識した。次いで、蛍光標識後の溶液について、水／クロロホルム抽出を行い、水相から蛍光標識化単糖を回収し、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分析した。ＨＰＬＣの条件は以下に示すとおりである。
　装置：ＢｉｏＡｓｓｉｓｔ　ｅＺ（Ｔｏｓｏｈ社製）
　カラム：ＰＮ－ＰＡＫ　Ｃ１８（３．０×７５ｍｍ）
　溶媒：ホウ酸バッファー／アセトニトリル
　流速：０．５ｍＬ／分
　検出：蛍光（Ｅｘ：３０５ｎｍ、Ｅｍ：３６０ｎｍ）
　（１）で得られたサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（サンプルＮｏ．１）の分析結果を表３及び図７Ａに示す。また、（２）で得られた３００ｍＭのＮａＣｌによる溶出物質（サンプルＮｏ．２）の分析結果を表４及び図７Ｂに示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　表３、表４、図７Ａ及び図７Ｂから、Ｌｉｎ２８ａ発現誘導活性の高い３００ｍＭのＮａＣｌによる溶出物質に含まれる多糖類は、リボース及びキシロースを含むことが明らかとなった。また、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物に含まれる多糖類は、リボース及びキシロースに加えて、ガラクトース、マンノース、グルコース、Ｎ－アセチルグルコサミン、ラムノース及びＮ－アセチルガラクトサミンを含むことが明らかとなった。
　これらのことから、Ｌｉｎ２８ａ発現誘導活性を有する多糖類は、少なくともリボース及びキシロースを含むことが明らかとなった。
　以上のことから、本実施形態のＬｉｎ２８ａ活性化剤に含まれる多糖類は、細胞におけるＬｉｎ２８ａの発現誘導活性を有し、さらに顕著な単球の増殖活性を有することが確かめられた。
［実施例７］
　サッカロミセス・ブラウディの外分泌物を添加して培養したヒト線維芽細胞において、Ｌｉｎ２８ａ以外の遺伝子の発現を解析した。
（１）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）の調製
　実施例１の（１）と同様の方法を用いて、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物を得た。
（２）ヒト線維芽細胞の準備
　実施例４の（２）と同様の方法を用いて、ヒト線維芽細胞を予め培養した。
（３）Ｓｉｒｔ１遺伝子及びＴＥＲＴ遺伝子の発現解析
　次いで、ヒト線維芽細胞の播種した翌日に、（１）で調製したサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を最終濃度１０μｇ／ｍＬ又は３０μｇ／ｍＬとなるように培地に添加し、添加から１週間培養した。添加後、一度も培地は交換しなかった。
　次いで、実施例４の（４）に記載の方法と同様の方法を用いて、各条件で培養した細胞からトータルＲＮＡを回収し、ｃＤＮＡを作製した。次いで、上記表２に示すプライマー及び下記表５に示すプライマーを用いた以外は、実施例４の（４）に記載の方法と同様の方法を用いて、Ｓｉｒｔ１遺伝子及びＴＥＲＴ遺伝子の発現をＰＣＲにてモニターした。なお、Ｓｉｒｔ１遺伝子は、若返り遺伝子として知られているサーチュイン１の遺伝子である。また、ＴＥＲＴ遺伝子は、テロメレースのサブユニットの遺伝子である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　また、ＰＣＲ後の反応液をアガロースゲル電気泳動し、結果を図８に示した。図８において、レーン１はサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を添加していない線維芽細胞をロードしている。レーン２はサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（１０μｇ／ｍＬ）を添加した線維芽細胞をロードしている。レーン３はサッカロミセス・ブラウディの外分泌物（３０μｇ／ｍＬ）を添加した繊維芽細胞をロードしている。
　図８から、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物の添加量に依存して、若返り遺伝子として知られるＳｉｒｔ１遺伝子の発現誘導が増加することが明らかとなった。このことから、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物に含まれる多糖類に若返りの効果が期待できることが示唆された。
一方、テロメレースのサブユニットであるＴＥＲＴ遺伝子の発現には影響が見られなった。このことから、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物の添加による発癌の懸念は大きく減少したと推察された。
［実施例８］
　データは示さないが、微生物由来の多糖類を培養液中に添加してもヒトファイブロブラストの増殖には全く影響がなかった。これに対し、微生物由来の多糖類の未分化細胞の増殖への影響について検証した。
（１）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）の調製
　実施例１の（１）と同様の方法を用いて、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物を得た。
（２）ラット骨髄細胞の準備
　Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅが全身に発現するように作られたトランスジェニックラットから骨髄細胞を得て、培養した。次いで、接着してきた細胞をトリプシン（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製、Ｔｒｙｐｓｉｎ－ＥＤＴＡ、２５２０００５６）ではがして回収し、さらに培養を続けた。培養は、終濃度２０％のＦＢＳ含有ＤＭＥＭ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製、２１０６３）を用いた。
（３）サッカロミセス・ブラウディの培養物（外分泌物）を用いた培養
　次いで、（２）で予め培養した骨髄細胞に、（１）で得られたサッカロミセス・ブラウディの外分泌物を最終濃度０、３、１０、３０及び１００μｇ／ｍＬとなるように培地に添加し、添加から４日間培養した。添加後、一度も培地は交換しなかった。次いで、培養後の細胞数を定量した。なお、細胞数の定量は、ルシフェリンの発光を指標にした。結果を図９に示す。図９において、縦軸は、ルシフェリンの発光のｃｐｓ（ｃｏｕｎｔ　ｐｅｒ　ｓｅｃｏｎｄ）である。横軸は、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物の添加濃度である。
　図９から、サッカロミセス・ブラウディの外分泌物の添加濃度依存的に、骨髄細胞の細胞数が増加することが明らかとなった。このことから、上述の微生物由来の多糖類を用いることで、細胞治療のソースとして注目される骨髄等の未分化な細胞をヒト体内から採取する際に最低限の侵襲にとどめられることが示唆された。また、上述の微生物由来の多糖類を用いることで、治療に有効な未分化な細胞を体内で増殖させる、言わば、体外での細胞培養を必要としない再生医療の実現にも有効であることが示唆された。
　本実施形態によれば、効果的なＬｉｎ２８ａ活性化剤及び効率的な脱分化誘導剤を提供することができる。
また、本実施形態の治療剤は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含み、Ｌｉｎ２８ａを活性化することができる。これにより、移植又は細胞医療を含む外科手術よりも低侵襲で効果的に細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患を治療することができる。
また、本実施形態の飲食品は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含み、Ｌｉｎ２８ａを活性化することができる。これにより、効果的に細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患を予防又は軽減することができる。さらに、上記多糖類を摂取することは安全性の面からもこれまでの食経験があり、毎日摂取することにも問題が少ないと考えられる。よって、安全でかつ有効な飲食品を提供することができる。
また、本実施形態の化粧品は、リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含み、Ｌｉｎ２８ａを活性化することができる。これにより、優れた抗炎症効果、美白効果、抗老化効果を有する。さらに、上記多糖類は無害であることから、毎日経皮的に摂取することにも問題が少ないと考えられる。よって、安全でかつ有効な化粧品を提供することができる。

Claims (14)

  1. 　リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有するＬｉｎ２８ａ活性化剤。
  2. 　前記多糖類は、更に、ガラクトース、マンノース、グルコース、Ｎ－アセチルグルコサミン、ラムノース、Ｎ－アセチルガラクトサミン及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む請求項１に記載のＬｉｎ２８ａ活性化剤。
  3. 　前記多糖類の分子量が３５００以上である請求項１又は２に記載のＬｉｎ２８ａ活性化剤。
  4. 　前記多糖類は、微生物に由来する請求項１～３のいずれか一項に記載のＬｉｎ２８ａ活性化剤。
  5. 　前記微生物が、酵母、微細藻類、乳酸菌又は麹菌である請求項４に記載のＬｉｎ２８ａ活性化剤。
  6. 　前記酵母がサッカロミセス・ブラウディである請求項５に記載のＬｉｎ２８ａ活性化剤。
  7. 　マクロファージコロニー刺激因子と、
    リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類と、を有効成分として含有する単球の脱分化誘導剤。
  8. 　前記多糖類は、更に、ガラクトース、マンノース、グルコース、Ｎ－アセチルグルコサミン、ラムノース、Ｎ－アセチルガラクトサミン及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む請求項７に記載の単球の脱分化誘導剤。
  9. 　前記多糖類の分子量が３５００以上である請求項７又は８に記載の単球の脱分化誘導剤。
  10. 　リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を有効成分として含有する細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の治療剤。
  11. 　前記疾患が外傷、膵炎、放射線損傷、皮膚筋炎、多発性筋炎、壊死性筋膜炎、慢性気管支炎、骨折、骨粗鬆症、骨軟骨骨折、骨軟骨炎、拡張型心筋症、心筋梗塞、虚血性心筋症、心不全、心筋肥大、うっ血性心不全、再狭窄、不整脈、アテローム性動脈硬化症、血管炎、末梢ニューロパシー、ニューロパシー痛、脳卒中、脳炎、髄膜炎、糖尿病性ニューロパシー、注意欠陥障害、自閉症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト－ヤコブ病、脳外傷、脊髄外傷、脳虚血、肝硬変、慢性肝炎、慢性腎不全、糸球体腎炎、腎虚血、糖尿病、アトピー性皮膚炎、又は、移植片対宿主病である請求項１０に記載の治療剤。
  12. 　リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する細胞、組織又は器官の損傷に関係する疾患の予防又は軽減用飲食品。
  13. 　前記疾患が外傷、膵炎、放射線損傷、皮膚筋炎、多発性筋炎、壊死性筋膜炎、慢性気管支炎、骨折、骨粗鬆症、骨軟骨骨折、骨軟骨炎、拡張型心筋症、心筋梗塞、虚血性心筋症、心不全、心筋肥大、うっ血性心不全、再狭窄、不整脈、アテローム性動脈硬化症、血管炎、末梢ニューロパシー、ニューロパシー痛、脳卒中、脳炎、髄膜炎、糖尿病性ニューロパシー、注意欠陥障害、自閉症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト－ヤコブ病、脳外傷、脊髄外傷、脳虚血、肝硬変、慢性肝炎、慢性腎不全、糸球体腎炎、腎虚血、糖尿病、アトピー性皮膚炎、又は、移植片対宿主病である請求項１２に記載の飲食品。
  14. リボース、キシロース及びそれらの誘導体からなる群から選択される１種以上を含む多糖類を含有する化粧品。
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